PL385481A1 - Nowe diestry arylowe kwasów 1-aminoalkanofosfonowych i ich peptydowe pochodne oraz sposób ich wytwarzania i zastosowanie jako inhibitorów chymotrypsyny - Google Patents
Nowe diestry arylowe kwasów 1-aminoalkanofosfonowych i ich peptydowe pochodne oraz sposób ich wytwarzania i zastosowanie jako inhibitorów chymotrypsynyInfo
- Publication number
- PL385481A1 PL385481A1 PL385481A PL38548108A PL385481A1 PL 385481 A1 PL385481 A1 PL 385481A1 PL 385481 A PL385481 A PL 385481A PL 38548108 A PL38548108 A PL 38548108A PL 385481 A1 PL385481 A1 PL 385481A1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- acid
- ester
- acids
- brine
- amino
- Prior art date
Links
- -1 aryl diesters Chemical class 0.000 title claims description 43
- 239000002253 acid Substances 0.000 title claims description 33
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 23
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 title claims description 14
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title claims description 14
- 239000003541 chymotrypsin inhibitor Substances 0.000 title description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title description 5
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 57
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 47
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 41
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 38
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 36
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 33
- 239000012267 brine Substances 0.000 claims description 27
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 27
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 22
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 22
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 claims description 22
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 claims description 22
- 108010016626 Dipeptides Proteins 0.000 claims description 19
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 19
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 18
- 108090000317 Chymotrypsin Proteins 0.000 claims description 17
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 17
- 229960002376 chymotrypsin Drugs 0.000 claims description 17
- 108090000787 Subtilisin Proteins 0.000 claims description 16
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 claims description 15
- DTUQWGWMVIHBKE-UHFFFAOYSA-N phenylacetaldehyde Chemical compound O=CCC1=CC=CC=C1 DTUQWGWMVIHBKE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N Benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- PUJDIJCNWFYVJX-UHFFFAOYSA-N benzyl carbamate Chemical compound NC(=O)OCC1=CC=CC=C1 PUJDIJCNWFYVJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- FAIAAWCVCHQXDN-UHFFFAOYSA-N phosphorus trichloride Chemical compound ClP(Cl)Cl FAIAAWCVCHQXDN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- 125000006267 biphenyl group Chemical group 0.000 claims description 10
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 9
- OTYBMLCTZGSZBG-UHFFFAOYSA-L potassium sulfate Chemical compound [K+].[K+].[O-]S([O-])(=O)=O OTYBMLCTZGSZBG-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 9
- 229910052939 potassium sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 9
- 235000011151 potassium sulphates Nutrition 0.000 claims description 9
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 claims description 9
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 claims description 9
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims description 8
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 claims description 8
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 claims description 8
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 claims description 7
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 claims description 6
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 claims description 6
- BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 3-azaniumyl-2-hydroxypropanoate Chemical compound NCC(O)C(O)=O BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N Hydrogen bromide Chemical class Br CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 5
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 claims description 5
- 101000856199 Homo sapiens Chymotrypsin-like protease CTRL-1 Proteins 0.000 claims description 4
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 claims description 4
- 125000001584 benzyloxycarbonyl group Chemical group C(=O)(OCC1=CC=CC=C1)* 0.000 claims description 4
- 235000010290 biphenyl Nutrition 0.000 claims description 4
- 239000004305 biphenyl Substances 0.000 claims description 4
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 claims description 4
- ZUOUZKKEUPVFJK-UHFFFAOYSA-N phenylbenzene Natural products C1=CC=CC=C1C1=CC=CC=C1 ZUOUZKKEUPVFJK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000000376 reactant Substances 0.000 claims description 4
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 claims description 4
- 125000000066 S-methyl group Chemical group [H]C([H])([H])S* 0.000 claims description 3
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 claims description 3
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 claims description 3
- 230000008878 coupling Effects 0.000 claims description 3
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 claims description 3
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 claims description 3
- GWYFCOCPABKNJV-UHFFFAOYSA-M 3-Methylbutanoic acid Natural products CC(C)CC([O-])=O GWYFCOCPABKNJV-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims description 2
- GWYFCOCPABKNJV-UHFFFAOYSA-N isovaleric acid Chemical compound CC(C)CC(O)=O GWYFCOCPABKNJV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- YCWSUKQGVSGXJO-NTUHNPAUSA-N nifuroxazide Chemical group C1=CC(O)=CC=C1C(=O)N\N=C\C1=CC=C([N+]([O-])=O)O1 YCWSUKQGVSGXJO-NTUHNPAUSA-N 0.000 claims description 2
- WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N tfa trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F.OC(=O)C(F)(F)F WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000004474 valine Substances 0.000 claims description 2
- ABLZXFCXXLZCGV-UHFFFAOYSA-N Phosphorous acid Chemical compound OP(O)=O ABLZXFCXXLZCGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 238000005830 amidoalkylation reaction Methods 0.000 claims 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 claims 1
- 125000005500 uronium group Chemical group 0.000 claims 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 55
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 48
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 38
- HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N Trichloro(2H)methane Chemical compound [2H]C(Cl)(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N 0.000 description 29
- 150000002148 esters Chemical group 0.000 description 28
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 24
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 20
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 16
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 16
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 description 15
- 238000000655 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 15
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 15
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 15
- 238000000425 proton nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 15
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 12
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 11
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 description 10
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 10
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 10
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- YGHRJJRRZDOVPD-UHFFFAOYSA-N 3-methylbutanal Chemical compound CC(C)CC=O YGHRJJRRZDOVPD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 8
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 8
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 7
- 239000010779 crude oil Substances 0.000 description 7
- 229960003136 leucine Drugs 0.000 description 7
- OJMIONKXNSYLSR-UHFFFAOYSA-N phosphorous acid Chemical compound OP(O)O OJMIONKXNSYLSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 7
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 6
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 6
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 5
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 5
- 229940100595 phenylacetaldehyde Drugs 0.000 description 5
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 4
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 4
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 4
- 239000006260 foam Substances 0.000 description 4
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 4
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 4
- NWVVVBRKAWDGAB-UHFFFAOYSA-N p-methoxyphenol Chemical compound COC1=CC=C(O)C=C1 NWVVVBRKAWDGAB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 150000002994 phenylalanines Chemical class 0.000 description 4
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 4
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 4
- ICPLIHZGJAFNBJ-UHFFFAOYSA-N C(C1=CC=CC=C1)OC(=O)NC1(P(O1)(O)=O)CC(C)C Chemical compound C(C1=CC=CC=C1)OC(=O)NC1(P(O1)(O)=O)CC(C)C ICPLIHZGJAFNBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 3
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 3
- 150000005690 diesters Chemical class 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- 150000003009 phosphonic acids Chemical class 0.000 description 3
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- NAPHUBPIUWHFCT-UHFFFAOYSA-N (1-amino-3-phenylpropyl)phosphonic acid Chemical compound OP(=O)(O)C(N)CCC1=CC=CC=C1 NAPHUBPIUWHFCT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZQEBQGAAWMOMAI-ZETCQYMHSA-N (2s)-1-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonyl]pyrrolidine-2-carboxylic acid Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O ZQEBQGAAWMOMAI-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 2
- SZXBQTSZISFIAO-ZETCQYMHSA-N (2s)-3-methyl-2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]butanoic acid Chemical compound CC(C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)OC(C)(C)C SZXBQTSZISFIAO-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 2
- SULKGYKWHKPPKO-RAJPIYRYSA-N (4s)-4-[[(2r)-2-[[(2s,3r)-2-[[(2s)-4-amino-4-oxo-2-[[(2s)-pyrrolidine-2-carbonyl]amino]butanoyl]amino]-3-hydroxybutanoyl]amino]-3-sulfanylpropanoyl]amino]-5-[[(2s,3s)-1-[[(2r)-1-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(2r)-1-[[(2s,3r)-1-[[2-[[(1r)-1-carboxy Chemical compound N([C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O)[C@@H](C)O)C(=O)[C@@H]1CCCN1 SULKGYKWHKPPKO-RAJPIYRYSA-N 0.000 description 2
- QWBBPBRQALCEIZ-UHFFFAOYSA-N 2,3-dimethylphenol Chemical compound CC1=CC=CC(O)=C1C QWBBPBRQALCEIZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JWAZRIHNYRIHIV-UHFFFAOYSA-N 2-naphthol Chemical compound C1=CC=CC2=CC(O)=CC=C21 JWAZRIHNYRIHIV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FDQQNNZKEJIHMS-UHFFFAOYSA-N 3,4,5-trimethylphenol Chemical compound CC1=CC(O)=CC(C)=C1C FDQQNNZKEJIHMS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ASHGTJPOSUFTGB-UHFFFAOYSA-N 3-methoxyphenol Chemical compound COC1=CC=CC(O)=C1 ASHGTJPOSUFTGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QASBCTGZKABPKX-UHFFFAOYSA-N 4-(methylsulfanyl)phenol Chemical compound CSC1=CC=C(O)C=C1 QASBCTGZKABPKX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HXDOZKJGKXYMEW-UHFFFAOYSA-N 4-ethylphenol Chemical compound CCC1=CC=C(O)C=C1 HXDOZKJGKXYMEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 244000063299 Bacillus subtilis Species 0.000 description 2
- 235000014469 Bacillus subtilis Nutrition 0.000 description 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 2
- 101800004305 Guanylin Proteins 0.000 description 2
- 239000007832 Na2SO4 Substances 0.000 description 2
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 2
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 2
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 2
- 230000000747 cardiac effect Effects 0.000 description 2
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 2
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 2
- 102000018009 guanylin Human genes 0.000 description 2
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 239000005457 ice water Substances 0.000 description 2
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 2
- IWDCLRJOBJJRNH-UHFFFAOYSA-N p-cresol Chemical compound CC1=CC=C(O)C=C1 IWDCLRJOBJJRNH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 2
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 2
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- XYHKNCXZYYTLRG-UHFFFAOYSA-N 1h-imidazole-2-carbaldehyde Chemical compound O=CC1=NC=CN1 XYHKNCXZYYTLRG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PJISLFCKHOHLLP-UHFFFAOYSA-N 2-diethoxyphosphorylsulfanyl-n,n-diethylethanamine Chemical compound CCOP(=O)(OCC)SCCN(CC)CC PJISLFCKHOHLLP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LKDMKWNDBAVNQZ-UHFFFAOYSA-N 4-[[1-[[1-[2-[[1-(4-nitroanilino)-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl]carbamoyl]pyrrolidin-1-yl]-1-oxopropan-2-yl]amino]-1-oxopropan-2-yl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC(=O)CCC(=O)NC(C)C(=O)NC(C)C(=O)N1CCCC1C(=O)NC(C(=O)NC=1C=CC(=CC=1)[N+]([O-])=O)CC1=CC=CC=C1 LKDMKWNDBAVNQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 8-[3-(1-cyclopropylpyrazol-4-yl)-1H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-5-yl]-3-methyl-3,8-diazabicyclo[3.2.1]octan-2-one Chemical class C1(CC1)N1N=CC(=C1)C1=NNC2=C1N=C(N=C2)N1C2C(N(CC1CC2)C)=O HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010003210 Arteriosclerosis Diseases 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 101150041968 CDC13 gene Proteins 0.000 description 1
- KXDHJXZQYSOELW-UHFFFAOYSA-N Carbamic acid Chemical class NC(O)=O KXDHJXZQYSOELW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108090000617 Cathepsin G Proteins 0.000 description 1
- 102000004173 Cathepsin G Human genes 0.000 description 1
- 102100024539 Chymase Human genes 0.000 description 1
- 108090000227 Chymases Proteins 0.000 description 1
- 229940122644 Chymotrypsin inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 101710137926 Chymotrypsin inhibitor Proteins 0.000 description 1
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010078321 Guanylate Cyclase Proteins 0.000 description 1
- 102000014469 Guanylate cyclase Human genes 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 150000008544 L-leucines Chemical class 0.000 description 1
- 241000187479 Mycobacterium tuberculosis Species 0.000 description 1
- 235000019502 Orange oil Nutrition 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010022999 Serine Proteases Proteins 0.000 description 1
- 102000012479 Serine Proteases Human genes 0.000 description 1
- 101710174704 Subtilisin-like serine protease Proteins 0.000 description 1
- XBICDWRYSQGCOT-UHFFFAOYSA-N [3-methyl-1-(phenylmethoxycarbonylamino)butyl]phosphonic acid Chemical compound CC(C)CC(P(O)(O)=O)NC(=O)OCC1=CC=CC=C1 XBICDWRYSQGCOT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 150000001299 aldehydes Chemical class 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 208000011775 arteriosclerosis disease Diseases 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000003385 bacteriostatic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003782 beta lactam antibiotic agent Substances 0.000 description 1
- 229950011260 betanaphthol Drugs 0.000 description 1
- 230000008033 biological extinction Effects 0.000 description 1
- 239000003601 chymase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 210000002249 digestive system Anatomy 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 229940072185 drug for treatment of tuberculosis Drugs 0.000 description 1
- 239000003792 electrolyte Substances 0.000 description 1
- 210000001842 enterocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 235000019256 formaldehyde Nutrition 0.000 description 1
- 125000002485 formyl group Chemical group [H]C(*)=O 0.000 description 1
- 150000002367 halogens Chemical group 0.000 description 1
- 208000019622 heart disease Diseases 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 208000028774 intestinal disease Diseases 0.000 description 1
- 230000003871 intestinal function Effects 0.000 description 1
- 150000002614 leucines Chemical class 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 238000012417 linear regression Methods 0.000 description 1
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- GSYSFVSGPABNNL-UHFFFAOYSA-N methyl 2-dimethoxyphosphoryl-2-(phenylmethoxycarbonylamino)acetate Chemical group COC(=O)C(P(=O)(OC)OC)NC(=O)OCC1=CC=CC=C1 GSYSFVSGPABNNL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YACKEPLHDIMKIO-UHFFFAOYSA-N methylphosphonic acid Chemical compound CP(O)(O)=O YACKEPLHDIMKIO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000010125 myocardial infarction Diseases 0.000 description 1
- 238000010606 normalization Methods 0.000 description 1
- 239000010502 orange oil Substances 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 150000002993 phenylalanine derivatives Chemical class 0.000 description 1
- UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N phenylmethyl ester of formic acid Natural products O=COCC1=CC=CC=C1 UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001476 phosphono group Chemical group [H]OP(*)(=O)O[H] 0.000 description 1
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 1
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000001394 phosphorus-31 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 1
- 229910001414 potassium ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 230000002797 proteolythic effect Effects 0.000 description 1
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 102000027257 transmembrane receptors Human genes 0.000 description 1
- 108091008578 transmembrane receptors Proteins 0.000 description 1
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 1
- 201000008827 tuberculosis Diseases 0.000 description 1
- 239000002132 β-lactam antibiotic Substances 0.000 description 1
- 229940124586 β-lactam antibiotics Drugs 0.000 description 1
- 150000003952 β-lactams Chemical class 0.000 description 1
Description
1 38 5 4 8 1 Ρ
Nowe diestry arylowe kwasów 1-aminoalkanofosfonowych i ich peptydowe pochodne oraz sposób ich wytwarzania i zastosowanie jako inhibitorów chymotrypsyny
Przedmiotem wynalazku są nowe podstawione diestry arylowe kwasów 1-aminoalkano-fosfonowych i ich peptydowe pochodne, które są analogami leucyny i fenyloalaniny, ich zastosowanie jako inhibitorów chymotrypsyny oraz sposób wytwarzania diestrów arylowych kwasów I -aminoalkano-fosfonowych. W literaturze patentowej i naukowej nie są opisane podstawione diestry kwasów 1-aminoalkanofosfonowych, poza kilkoma przykładami pochodnych fenyloalaniny podstawionych chlorowcem w estrowych pierścieniach fenylowych znanych z publikacji Boduszek B, Brown A.D, Powers J.C, J. Enz. Inhib. Med. Chem., 1994, 8, 147-158. Nie są też znane właściwości biologiczne i sposoby wytwarzania związków z innymi niż halogenowe podstawnikami w pierścieniu fenylowym diestrów. Znany jest z publikacji Oleksyszyn J, Powers JC, Biochemistry, 1991, 30, 485-493 oraz ze zgłoszenia w trybie PCT nr PCT/JP2004/006384 inhibitor chymotrypsyny z grupy pochodnych kwasów 1-aminoalkanofosonowych, Suc-Val-Pro-Phep(OPh)2, w którym symbol Phep oznacza fosfonowy analog fenyloalaniny, czyli kwas 1 -amino-2-benzylo-etanofosfonowy, a Phep(OPh)2 oznacza ester difenylowy kwasu l-amino-2-benzylo-etanofosfonowego.
Nowe diestry arylowe kwasów 1-aminoalkano-fosfonowych i ich peptydowe pochodne, o wzorze ogólnym 1, w którym W1 oznacza grupę benzyloksykarbonylową (Cbz), albo resztę peptydową składającą się z jednego, dwóch lub trzech aminokwasów, R1 oznacza podstawnik analogiczny do łańcucha bocznego naturalnych aminokwasów, w szczególności leucyny lub fenyloalaniny, zaś XI, X2, X3, X4 i X5 są takie same lub rożne i oznaczają metyl, etyl, benzyl, O-metyl i S-metyl.
Istotą wynalazku jest również zastosowanie nowych związków jako inhibitorów chymotrypsyny, enzymów chymotrypsyno-podobnych oraz subtylizyny. 2
Inhibitory subtylizyn mogą stanowić nową generację skutecznych leków przeciw gruźlicy. Subtylizyna jest bakteryjną serynową proteazą o specyficzności chymotrypsyny. Niektóre bakterie jak np. gram dodatnie Bacillus subtilis produkują subtilizynę i jej inhibitory posiadają silne właściwości bakteriostatyczne. Mutanty Bacillus subtilis wydzielające duże ilości proteaz mają zwiększoną tolerancję do antybiotyków β-laktamowych. Inhibitory tych proteaz, należących do rodziny subtilizyny zwiększają wrażliwość tych szczepów na β-laktamy. Bakterie z rodzaju Mycobacterium tuberculosis odpowiedzialne za gruźlicę produkują aż pięć subtylizyno-podobnych serynowych proteaz, mycosyny 1-5.
Sposób wytwarzania podstawionych diestrów arylowych kwasów 1-aminoalkano-fosfonowych i ich peptydowych pochodnych o wzorze ogólnym 1, w którym podstawniki mają wyżej podane znaczenie, polega na tym, że w pierwszym etapie otrzymuje się fosforyn triarlowy, który następnie poddaje się reakcji amidoalkilowania i w otrzymanym estrze N-benzyloksykarbonylowym kwasu 1-aminofosfonowego odblokowuje się grupę aminową, a następnie sprzęga się go z N-zablokowanymi aminokwasami karboksylowymi, lub dipeptydami otrzymując peptydowe pochodne estrów diarylowych kwasów 1-aminoalkanofosfonowych. Przy czym fosforyn triarylowy otrzymuje się na drodze syntezy fenolu z chlorkiem fosforu III w acetonitrylu bądź benzenie. Reakcje prowadzi się w temperaturze wrzenia rozpuszczalnika. W przypadku wytwarzania estrów difenylowych kwasów 1- aminoalkanofosfonowych z nowymi podstawnikami przy aromatycznych pierścieniach fenylowych, prowadzi się reakcję syntezy fosforynu triarylowego z karbaminianem benzylu, aldehydem fenylooctowym albo izowalerianowym w kwasie octowym. Reakcje prowadzi się w temperaturze 90°C. W przypadku wytwarzania dipeptydowych pochodnych diestrów arylowych kwasów 1-aminoalkanofosfonowych stosuje się bromowodorki estrów difenylowych pochodnych kwasów 1-aminoalkanofosfonowych jako substraty reakcji, które uzyskuje się uprzednio w reakcji syntezy estrów difenylowych pochodnych kwasów 3 1-aminoalkanofosfonowych z roztworem kwasu bromowodorowego (33%) w kwasie octowym w temperaturze pokojowej. Następnie przeprowadza się reakcję sprzęgania bromowodorków estrów difenylowych pochodnych kwasów 1-aminoalkanofosfonowych z proliną z zablokowaną 7V-końcową grupą aminową przez grupę terc-butylową (/-Boc), przy użyciu heksafluorofosforanu <9-benzotriazol-l-ylo-/V,M/V'.A"-tetrametylouroniowego (HBTU), trójetyloaminy i acetonitrylu jako rozpuszczalnika. Reakcje sprzęgania przeprowadza się w temperaturze pokojowej. Następnie mieszaninę poreakcyjną zalewa się solanką, ekstrahuje dwukrotnie octanem etylu i przemywa się kolejno dwukrotnie siarczanem potasu (5%), solanką, dwukrotnie wodorowęglanem sodu (5%) i solanką. Do warstwy octanowej dodaje się siarczanu magnezu i powstały produkt oczyszcza się metodą chromatografii kolumnowej. W efekcie otrzymuje się odpowiednie dipeptydy, zawierające w swej strukturze resztę estru difenylowego fosfonowego analogu leucyny lub fenyloalaniny, z zablokowaną grupą a-aminową. W przypadku wytwarzania pochodnych tripeptydowych estrów difenylowych kwasów 1-aminoalkanofosfonowych stosuje się dipeptydowe pochodne diestrów arylowych kwasów 1-aminoalkanofosfonowych jako substraty reakcji. Następnie usuwa się z pochodnych dipeptydowych grupę blokującą terc-butylową (i-Boc), przy użyciu roztworu kwasu trójfluorooctowego (TFA) i dichlorometanu (CH2CI2) w stosunku objętościowym 1:1 i prowadzi się reakcję addycji kolejnego aminokwasu -waliny z zablokowaną grupą α-aminową przy użyciu odczynnika sprzęgającego heksafluorofosforanu fż-benzotriazol-l-ylo-A.jY.W^A-tetrametylouroniowego (HBTU), trójetyloaminy i acetonitrylu jako rozpuszczalnika. Reakcje sprzęgania przeprowadza się w temperaturze pokojowej. Następnie mieszaninę poreakcyjną zalewa się solanką, ekstrahuje dwukrotnie octanem etylu i przemywa kolejno dwukrotnie siarczanem potasu (5%), solanką, dwukrotnie wodorowęglanem sodu (5%) i solanką. Do warstwy octanowej dodaje się siarczanu magnezu i powstały produkt oczyszcza się metodą chromatografii kolumnowej. 4
Nowe związki są mieszaninami racemicznymi w przypadku prostych analogów fosfonowych fenyloalaniny i leucyny oraz mieszaninami diastereoizomerów w przypadku pochodnych di- i tri-peptydowych.
Zasadnicze korzyści wynikające z wynalazku polegają na otrzymaniu związków, które wykazują silną aktywność biologiczną hamującą aktywność chymotrypsyny i enzymów chymotrypsyno-podobnych takich jak ludzka sercowa chymaza, katepsyna G i subtylizyna. Niekontrolowana aktywność tych enzymów jest związana z stanami patologicznymi prowadzącymi do chorób. Dla przykładu aktywność chymotrypsyny w przewodzie trawiennym ludzi prowadzi do szybkiej inaktywacji guanyliny. Guanylina jest jelitowym peptydem produkowanym jako 115 aminokwasów proproteina. Wiąże się ona z transmembranowym receptorem aktywującym cyklazę guanylową. Receptor ten obecny jest w membranie enterocytów jelitowych. Aktywacja receptora prowadzi do wzrostu stężenia c-GMP. Wzrost stężenia c-GMP powoduje zmniejszenie absorpcji wody i wzrost wydzielania jonów chlorkowych i potasowych prowadząc do zmian w transporcie płynów i elektrolitów jelitowych oraz skutkuje normalizacją pracy jelit.
Aktywna forma guanyliny składająca się tylko z 15 aminokwasów, stymuluje uwalnianie jonów chlorkowych i jest szybko hydrolizowana w przewodzie pokarmowym przez znajdującą się tam chymotrypsynę. Inhibitory chymotrypsyny zapobiegając hydrolizie aktywnej guanyliny wydłużają i poprawiają jej działanie, prowadząc do efektów terapeutycznych w szeregu schorzeń jelitowych.
Inhibitory chymazy z ludzkiego serca mają własności protekcyjne dla ludzkiego serca i mogą być używane jako leki przy całym szeregu komplikacji kardiologicznych np. przy arteriosklerozie, po ataku serca lub operacjach serca. Nowe związki będące przedmiotem wynalazku charakteryzują się znacznie lepszą efektywnością w inhibitowaniu chymotrypsyny i enzymów chymotrypsyno -podobnych, dlatego mogą znaleźć zastosowanie terapeutyczne w chorobach sercowych, komplikacjach układu trawiennego i jako nowe substancje antybakteryjne. Stwierdzono, że z enzymami reaguje tylko jedna forma optyczna - ta która opowiada izomerowi L - fenyloalaniny 5 czy L-leucyny. Nowe związki można z łatwością rozdzielić na enancjomery lub diastereoizomery jedną z dobrze znanych metod: na przykład przy zastosowaniu HPLC, wysokociśnieniowej chromatografii cieczowej i korzystnie stosować tylko jeden, reaktywny izomer optyczny.
Przedmiot wynalazku jest przedstawiony w przykładach realizacji sposobu otrzymywania estrów difenylowych kwasów 1-aminoalkanofosfonowych z nowymi podstawnikami przy aromatycznych pierścieniach fenolowych, w celu lepszego objaśnienie wynalazku, bez jednoczesnego ograniczania jego zakresu.
Przykład 1
Sposób wytwarzania estru di-4-metylomerkaptofenylowego kwasu jV-(benzy-loksykarbonylaminoj-izobutylo-metanofosfonowego przedstawionego wzorem 2, prowadzi się w dwóch etapach.
Etap 1. OtrzymyH>anie fosforynu trój-4-metylomerkaptofenylowego. W tym celu do kolby okrągłodennej dodaje się 4,20g (30mmola) 4-metylomerkaptofenolu i rozpuszcza w lOOml benzenu. Do powstałego, lekko różowego roztworu dodaje się 4,l5ml (30mmola) trójetyloaminy (Et^N) i mieszając wkrapla 0,87ml (lOmmola) chlorku fosforu (III). Początkowo reakcję prowadzi się w temperaturze pokojowej. Jednakże, gdy roztwór zaczyna się samoistnie ogrzewać chłodzi się go wodą z lodem. Powstałą galaretowatą zawiesinę miesza się przez 12 godzin w temperaturze pokojowej. Następnie całość ekstrahuje się czterokrotnie wodą i suszy z 3g siarczanu sodu (Na2S04). Lotne rozpuszczalniki odparowuje się na wyparce rotacyjnej i otrzymuje mleczny olej, który wykorzystuje się bezpośrednio (bez oczyszczania) do reakcji syntezy estru di-4-metylomerkaptofenylowego kwasu ,/V-(benzyloksy-karbonylamino)-izobutylo-metano-fosfonowego.
Etap 2. Otrzymywanie estru di-4-metylomerkaptofenylo\\>ego kwasu N-(benzyloksy- karbonylamino)-izobutylo-metanofosfonowego.
Do kolby okrągłodennej - wyposażonej w mieszadło magnetyczne, wprowadza się fosforyn trój-4-metylomerkapto-fenyIowy powstały bezpośrednio w etapie 1 i dodaje l,34g (8,8mmola) karbaminianu benzylu i lml (9,2mmola) aldehydu 6
izowalerianowego. Po rozpuszczeniu wszystkich składników w 20ml lodowatego kwasu octowego całość ogrzewa się pod chłodnicą zwrotną w temperaturze 90°C przez 4,5 godziny. Następnie pod zmniejszonym ciśnieniem z lekko zielonego roztworu usuwa się lotne składniki mieszaniny na wyparce rotacyjnej a pozostałość rozpuszcza się w 200ml metanolu i umieszcza w temperaturze -20°C na 12 godzin w celu krystalizacji produktu. Uzyskany produkt przesącza się pod zmniejszonym ciśnieniem, przemywa matanolem i suszy na powietrzu do stałej wagi. Uzyskuje się l,6g (38% wagowo) śnieżnobiałego produktu w postaci estru di-4-metylomerka-ptofenylowego kwasu iV-(benzyloksy-karbonylamino)-izobutylo-metano-fosfono-wego, przedstawionego wzorem 2. Wzór sumaryczny: C27H32O5S2NP. Masa cząsteczkowa: 545,645g/mol. Widmo 3IP NMR (roztwór w CDCI3, δ [ppm]): 20.37(s). Widmo ‘H NMR (roztwór w CDCI3, δ [ppm]): 0.98 (d, J=5.79 Hz, 6H, 2XCH3), 1.61-2.16 (m, 3H, CH2, CH), 2.47 (s, 6H, 2XCH3), 4.61 (m, 1H, CHP), 5.18 (s, 1H, NH), 5.06 (m, 2H, ArCHiO), 6.9-7.3 (m, 13H, aromat.). Temperatura topnienia: 126°C. Przykład II
Sposób wytwarzania estru di-3,4,5-trimetylofenylowego kwasu W(benzyloksy-karbonylamino)-izobutylo-metanofosfonowego przedstawionego wzorem 3.
Etap 1. Otrzymywanie fosforynu trój-3,4,5-trimetyłofenylowego. W tym celu do kolby okrągłodennej wyposażonej w mieszadło magnetyczne dodaje się 11,3g (76mmol) 3,4,5-trimetylofenolu i 20ml acetonitrylu. Po rozpuszczeniu całość ogrzewa się pod chłodnicą zwrotną w temperaturze 90°C przez 10 minut. Następnie do mieszaniny reakcyjnej dodaje się 2,36ml (25mmol) chlorku fosforu (III). Całość ogrzewa się przez dwie godziny w temperaturze wrzenia. Następnie pod zmniejszonym ciśnieniem usuwa się lotne składniki mieszaniny na wyparce obrotowej. Powstały surowy produkt w postaci oleju wykorzystuje się bezpośrednio, bez oczyszczania do reakcji syntezy estru di-3,4,5-trimetylofenylowego kwasu 7V-(benzyloksykarbonylamino)-izobutylo-metano-fosfonowego.
Etap 2. Otrzymywanie estru di-3,4,5-trimetylofenylowego kwasu Nfbenzyloksy-karbonylamino)-izobutylo-metanofosfonowego. 7
Do kolby okrągłodennej - zawierającej fosforyn trój-3,4,5-trimetylofenylowy powstały bezpośrednio w etapie 1 - wyposażonej w mieszadło magnetyczne wprowadza się 3,88g (25mmol) karbaminianu benzylu i 2,64ml (25mmol) aldehydu izowalerianowego. Po rozpuszczeniu wszystkich składników w 30 ml lodowatego kwasu octowego całość ogrzewa się pod chłodnicą zwrotną w temperaturze 90°C przez 2 godziny. Następnie pod zmniejszonym ciśnieniem usuwa się lotne składniki mieszaniny na wyparce rotacyjnej a pozostałość rozpuszcza w 250 ml metanolu i umieszcza w temperaturze -20°C na 15 godzin w celu krystalizacji produktu. Uzyskany produkt odsącza się pod zmniejszonym ciśnieniem i suszy na wolnym powietrzu. Uzyskuje się 5,72g (51% wagowo) surowego estru di-3,4,5-trimetylo-fenylowego kwasu 7V-(benzyloksy-karbonylamino)-izobutylo-metanofosfonowego, przedstawionego wzorem 3 w postaci białego osadu. Wzór sumaryczny: C31H38O5NP. Masa cząsteczkowa: 537,633g/mol. Widmo 3IP NMR (roztwór w CDCI3, δ [ppm]): 18.75 (s). Widmo 'h NMR (roztwór w CDCI3, δ [ppm]): 0.99 (d, .7=5.52 Hz, 6H, 2XCH3), 1.83 (m, 3H, CH2, CH), 2.41 (d, .7=13.92 Hz, 18H, 6XCH3), 4.58 (m, 1H, CHP), 5.11 (s, 1H, NH), 5.03 (m, 2H, ArCH20), 6.50-7.37 (m, 9H, aromat.). Temperatura topnienia: 111°C.
Przykład III
Sposób wytwarzania estru di-4-metylofenylowego kwasu 77-(benzyloksy-karbonylamino)-izobutylo-metanofosfonowego przedstawionego wzorem 4.
Etap 1. Otrzymywanie fosforynu trój-4-metylofenylowego. W tym celu do kolby okrągłodennej wyposażonej w mieszadło magnetyczne dodaje się 8,97g (83mmol) 4-metylofenolu i 20ml acetonitrylu. Po rozpuszczeniu całość ogrzewa się pod chłodnicą zwrotną w temperaturze 80°C przez 10 minut. Następnie do mieszaniny reakcyjnej dodaje się 2,55ml (28mmol) chlorku fosforu (III). Całość ogrzewa się przez dwie godziny w temperaturze wrzenia. Następnie pod zmniejszonym ciśnieniem usuwa się lotne składniki mieszaniny na wyparce obrotowej. Powstały surowy produkt w postaci oleju wykorzystuje się bezpośrednio, 8 bez oczyszczania do reakcji syntezy estru di-4-metylofenylowego kwasu N-(benzyloksykarbonylamino)-izobutylo-metanofosfonowego.
Etap 2. Otrzymywanie estru di-4-metylofenylowego kwasu N-(benzyloksy-karbonylamino)-izobutylo-metanofosfonowego.
Do kolby okrągłodennej - zawierającej fosforyn trój-4-metylofenylowy powstały bezpośrednio w etapie 1 - wyposażonej w mieszadło magnetyczne wprowadza się 4,23g (28mmol) karbaminianu benzylu i 2,92ml (28mmol) aldehydu izowalerianowego. Po rozpuszczeniu wszystkich składników w 30 ml lodowatego kwasu octowego całość ogrzewa się pod chłodnicą zwrotną w temperaturze 90°C przez 2,5 godziny. Następnie pod zmniejszonym ciśnieniem usuwa się lotne składniki mieszaniny na wyparce rotacyjnej a pozostałość rozpuszcza w 200ml metanolu i całość umieszcza w temperaturze -20°C na 12 godzin w celu krystalizacji produktu. Uzyskany produkt przesącza się i suszy na powietrzu do stałej wagi. Uzyskuje się 3,43g (38% wagowo) surowego estru di-4-metylofenylowego kwasu ./V-(benzyloksy-karbonylaminoj-izobutylo-metanofosfonowego przedstawionego wzorem 4 w postaci białego proszku. Wzór sumaryczny: C27H32O5NP. Masa cząsteczkowa: 467,50g/mol. Widmo 3IP NMR (roztwór w CDCI3, δ [ppm]): 18.82 (s). Widmo 'H NMR (roztwór w CDCI3, δ [ppm]): (d, .7=5.86 Hz, 6H, 2XCH3), 1.77 (m, 3H, CH2, CH), 2.31 (t, .7=19.79 Hz, 6H, 2XCH3), 4.61 (m, 1H, CHP), 5.11 (s, 1H, NH), 5.14 (m, 1H, 2H, ArCH20), 6.96-7.35 (m, 13H, aromat.). Temperatura topnienia: 118HC.
Przykład IV
Sposób wytwarzania estru di-3-metoksyfenylowego kwasu 7V-(benzyloksy-karbonylamino)-izobutylo-metanofosfonowego przedstawionego wzorem 5.
Etap 1. Otrzymywanie fosforynu trój- 3-metoksyfenylowego. W tym celu do kolby okrągłodennej wyposażonej w mieszadło magnetyczne dodaje się 7,5g (óOmmola) 3-metoksyfenolu i 20ml acetonitrylu. Po rozpuszczeniu całość ogrzewa się pod chłodnicą zwrotną w temperaturze 90°C przez 10 minut. Następnie do mieszaniny reakcyjnej dodaje się l,8ml (20mmola) chlorku fosforu (III). Całość ogrzewa się przez dwie godziny w temperaturze wrzenia. Następnie pod 9 zmniejszonym ciśnieniem usuwa się lotne składniki mieszaniny na wyparce obrotowej. Powstały surowy produkt w postaci oleju wykorzystuje się bezpośrednio, bez oczyszczania do reakcji syntezy estru di-3-metoksyfenylowego kwasu N-(benzyloksykarbonylamino)-izobutylo-metano-fosfonowego.
Etap 2. Otrzymywanie estru di-3-metoksyfenylowego kwasu N-(benzyloksy-karbonylamino)-izobutylo-metanofosfonowego.
Do kolby okrągłodennej - zawierającej fosforyn trój-3-metoksyfenylowy powstały bezpośrednio w etapie 1 - wyposażonej w mieszadło magnetyczne wprowadza się 3,05g (20mmola) karbaminianu benzylu i 2,3ml (21mmola) aldehydu izowalerianowego. Po rozpuszczeniu wszystkich składników w 30 ml lodowatego kwasu octowego całość ogrzewa się pod chłodnicą zwrotną w temperaturze 90°C przez 3 godziny. Następnie pod zmniejszonym ciśnieniem usuwa się lotne składniki mieszaniny na wyparce rotacyjnej a pozostałość rozpuszcza w 200ml metanolu i umieszcza w temperaturze -20°C na 24 godziny w celu krystalizacji produktu. Uzyskany produkt odsącza się pod zmniejszonym ciśnieniem i suszy na powietrzu. Uzyskuje się 2,31g (31% wagowo) surowego estru di-3-metoksyfenylowego kwasu N-(benzyloksy-karbonylamino)-izobutylo-metanofosfonowego przedstawionego wzorem 5, w postaci białego osadu. Wzór sumaryczny: C27H32O7NP. Masa cząsteczkowa: 513,525g/mol. Widmo 3IP NMR (roztwór w CDCI3, δ [ppm]): 18.76 (s). Widmo 'Η NMR (roztwór w CDCI3, δ [ppm]): 0.98 (d, J= 5.68 Hz, 6H, 2XCH3), 1.69-2.3 (m, 3H, CH2, CH), 3.80 (dd, 7=16.06/11.17 Hz, 6H, 2XCH3), 4.65 (m, 1H, CHP), 5.19 (s, 1H, NH), 5.13 (m, 2H, ArCH20), 6.4-7.33 (m, 13H, aromat.). Temperatura topnienia: 59HC.
Przykład V
Sposób wytwarzania estru di-4-etylofenylowego kwasu 7V-(benzyloksy-karbonylamino)-benzylo-etanofosfonowego przedstawionego wzorem 6.
Etap 1. Otrzymywanie fosforynu trój-4-etylofenylowego. W tym celu do kolby okrągłodennej wyposażonej w mieszadło magnetyczne dodaje się 10,2g (83mmola) 4-etylofenolu i 20ml acetonitrylu. Po rozpuszczeniu 10 całość ogrzewa się pod chłodnicą zwrotną w temperaturze 90°C przez 10 minut. Następnie do mieszaniny reakcyjnej dodaje się 2,55ml (28mmola) chlorku fosforu (III). Całość ogrzewa się przez dwie godziny w temperaturze wrzenia. Następnie pod zmniejszonym ciśnieniem usuwa się lotne składniki mieszaniny na wyparce obrotowej. Powstały surowy produkt w postaci oleju wykorzystuje się bezpośrednio, bez oczyszczania do reakcji syntezy estru di-4-etylofenylowego kwasu N-(benzyloksykarbonylamino)-benzylo-etanofosfonowego.
Etap 2. Otrzymywanie estru di-4-etylofenylowego kwasu Nfbenzyloksy-karbonylamino)-benzylo-etanofosfonowego.
Do kolby okrągłodennej - zawierającej fosforyn trój-4-etylofenylowy powstały bezpośrednio w etapie 1 - wyposażonej w mieszadło magnetyczne odważa się 4,23g (28mmola) karbaminianu benzylu i 3,12ml (28mmola) aldehydu fenylooctowego. Po rozpuszczeniu wszystkich składników w 20-30 ml lodowatego kwasu octowego całość ogrzewa się pod chłodnicą zwrotną w temperaturze 90°C przez 4 godziny. Następnie pod zmniejszonym ciśnieniem usuwa się lotne składniki mieszaniny na wyparce rotacyjnej a pozostałość rozpuszcza w około 200ml metanolu i umieszcza się w temperaturze -20°C na 12 godzin w celu krystalizacji produktu. Uzyskany produkt odsącza się pod zmniejszonym ciśnieniem i suszy na powietrzu do stałej wagi. Uzyskuje się 4,79g (47% wagowo) surowego estru di-4-etylofenylowego kwasu N-(benzyloksykarbonylamino)-benzylo-etanofosfonowego, przedstawionego wzorem 6 w postaci białego osadu. Wzór sumaryczny: C24H2i)OsNP. Masa cząsteczkowa: 543,596. Widmo 3IP NMR (roztwór w CDCI3, δ [ppm]): 17.58 (s). Widmo 'H NMR (roztwór w CDCI3, 5 [ppm]): 1.18 (m, 6H, 2XCH3), 1.32 (m, 4H, 2XCH2,), 2.8-3.3 (m, 2H, CH2), 4.7 (dd, J=4.44 Hz, J=4.53 Hz, 1H, CHP), 5.14 (d, J=10.2 Hz, 1H, NH), 4.92 (s, 2H, ArCH20), 6.91-7.23 (m, 18H, aromat.). Temperatura topnienia: 112°C.
Przykład VI
Sposób wytwarzania estru di-4-metoksyfenylowego kwasu V-(benzyloksy-karbonylamino)-benzylo-etanofosfonowego przedstawionego wzorem 7.
Etap L Otrzymywanie fosforynu trój-4-metoksyfenylowego. 11 W tym celu do kolby okrągłodennej wyposażonej w mieszadło magnetyczne dodaje się 10,3g (83mmola) 4-metoksyfenolu i 30ml acetonitrylu. Po rozpuszczeniu całość ogrzewa się pod chłodnicą zwrotną w temperaturze 80-90°C przez 2 minuty. Następnie do mieszaniny reakcyjnej dodaje się 2,55ml (28mmola) chlorku fosforu (111). Całość ogrzewa się przez dwie godziny w temperaturze wrzenia. Następnie pod zmniejszonym ciśnieniem usuwa się lotne rozpuszczalniki mieszaniny na wyparce obrotowej. Powstały surowy produkt w postaci oleju wykorzystuje się bezpośrednio, bez oczyszczania do reakcji syntezy estru di-4-etylofenylowego kwasu N-(benzyloksykarbonylamino)-benzylo-etanofosfonowego.
Etap 2. Otrzymywanie estru di-4-metoksyfenylowego kwasu N-(benzyloksy-karbonylamino)-benzylo-etanofosfonowego.
Do kolby okrągłodennej - zawierającej fosforyn trój-4-metoksyfenylowy powstały bezpośrednio w etapie 1 - wyposażonej w mieszadło magnetyczne wprowadza się 4,23g (28mmola) karbaminianu benzylu i 3,12ml (28mmola) aldehydu fenylooctowego. Po rozpuszczeniu wszystkich składników w 30ml lodowatego kwasu octowego całość ogrzewa się pod chłodnicą zwrotną w temperaturze 80-90°C przez 5 godzin. Następnie pod zmniejszonym ciśnieniem usuwa się lotne składniki mieszaniny na wyparce rotacyjnej a pozostałość rozpuszcza się w 150ml metanolu i całość umieszcza w temperaturze -20°C na 24 godziny w celu krystalizacji produktu. Uzyskany produkt odsącza się pod zmniejszonym ciśnieniem i suszy na powietrzu. Uzyskuje się 0,91g (8,8% wagowo) surowego estru di-4-metoksyfenylowego kwasu N-(benzyloksy-karbonylamino)-benzylo-etanofosfonowego przedstawionego wzorem 7 w postaci białego osadu. Wzór sumaryczny: C2iHi70ńNP· Masa cząsteczkowa: 547,541 .Widmo ,!P NMR (roztwór w CDCI3, δ [ppm]): 18.11 (s). Widmo 'H NMR (roztwór w CDCI3, δ [ppm]): 2.09 (s, 3H, CH3), 3.30 (m, 2H, CH2,), 3.69 (d, ./=8.24 Hz, 6H, 2XCH3), 4.70 (m, 1H, CHP), 5.12 (d, ./=10.57 Hz, 1H, NH), 4.92 (s, 2H, ArCHzO), 6.65-7.23 (m, 18H, aromat.). Temperatura topnienia: 99-102°C.
Przykład VII 12
Sposób wytwarzania estru di-2,3-dimetylofenylowego kwasu 7V-(benzyloksy-karbonylamino)-benzylo-etanofosfonowego przedstawionego wzorem 8.
Etap 1. Otrzymywanie fosforynu trój-2,3-dimetylofenylowego. W tym celu do kolby okrągłodennej wyposażonej w mieszadło magnetyczne dodaje się 10,26g (83mmola) 2,3-dimetylofenolu i 20ml acetonitrylu. Po rozpuszczeniu całość ogrzewa się pod chłodnicą zwrotną w temperaturze 80-90°C przez 2 minuty. Następnie do mieszaniny reakcyjnej dodaje się 2,55ml (28mmola) chlorku fosforu (III). Całość ogrzewa się przez dwie godziny w temperaturze wrzenia. Następnie pod zmniejszonym ciśnieniem usuwa się lotne składniki mieszaniny na wyparce obrotowej. Powstały surowy produkt w postaci oleju wykorzystuje się bezpośrednio, bez oczyszczania do reakcji syntezy estru di-2,3-dimetylofenylowego kwasu ./V-(benzyloksy-karbonylamino)-benzylo-etanofosfonowego.
Etap 2. Otrzymywanie estru di-2,3-dimetylofenylowego kwasu Nfbenzyloksy-karbonylamino)-benzylo-etanofosfonowego.
Do kolby okrągłodennej - zawierającej fosforyn trój-2,3-metylofenylowy powstały bezpośrednio w etapie 1 - wyposażonej w mieszadło magnetyczne wprowadza się 4,23g (28mmoIa) karbaminianu benzylu i 3,12ml (28mmola) aldehydu fenylooctowego. Po rozpuszczeniu wszystkich składników w 30 ml lodowatego kwasu octowego całość ogrzewa się pod chłodnicą zwrotną w temperaturze 80-90°C przez 5 godzin. Następnie pod zmniejszonym ciśnieniem usuwa się lotne składniki mieszaniny na wyparce rotacyjnej a pozostałość rozpuszcza się w 200ml metanolu i całość umieszcza się w temperaturze -20°C na 24 godziny w celu krystalizacji produktu. Uzyskany produkt odsącza się pod zmniejszonym ciśnieniem i suszy na powietrzu. Uzyskuje się 3,64g produktu. Z uzyskanego przesączu odparowuje się metanol na wyparce rotacyjnej. Powstały olej ponownie rozpuszcza się w metanolu i pozostawia do rekrystalizacji. Wówczas otrzymuje się osad o masie 0,44g. Po połączeniu produktów otrzymuje się 4,08g (40% wagowo) estru di-2,3-dimetylofenylowego kwasu jV-(benzyloksy-karbonylamino)-benzylo-etanofosfono-wego, przedstawionego wzorem 8, w postaci białego osadu. Wzór sumaryczny: 13
C24H2.;05NP. Masa cząsteczkowa: 549,982g/mol. Widmo 31P NMR (roztwór w CDCI3, δ [ppm]): 17.08(s). Widmo 'H NMR (roztwór w CDCI3, δ [ppm]): 2.17 (m, 12H, 4XCH3), 2.9-3.4 (m, 2H, CH2), 4.8 (m, 1H, CHP), 5.15 (d, .7=10.42 Hz, 1H, NH), 4.90 (m, 2H, ArCH20), 6.86-7.28 (m, 16H, aromat.). Temperatura topnienia: 103°C. Przykład VIII
Sposób wytwarzania estru di-2-naftalenowego kwasu N-(benzyloksykarbonylamino)-benzylo-etanofosfonowego przedstawionego wzorem 9.
Etap 1. Otrzymywanie fosforynu /ró/-2-naftalenowego. W tym celu do kolby okrągłodennej wyposażonej w mieszadło magnetyczne dodaje się 12g (83mmola) 2-naftolu i 20ml acetonitrylu. Po rozpuszczeniu całość ogrzewa się pod chłodnicą zwrotną w temperaturze 80-90°C przez 3 minuty. Następnie do mieszaniny reakcyjnej dodaje się 2,55ml (28mmola) chlorku fosforu (III). Całość ogrzewa się przez dwie godziny w temperaturze wrzenia. Następnie pod zmniejszonym ciśnieniem usuwa się lotne składniki mieszaniny na wyparce obrotowej. Powstały surowy produkt w postaci oleju wykorzystuje się bezpośrednio, bez oczyszczania do reakcji syntezy estru di-2-naftalenowego kwasu N-(benzyloksykarbonylamino)-benzylo-etanofosfonowego.
Etap 2. Otrzymywanie estru di-2-naftalenowego kwasu N-(benzyloksy-karbonylamino)-benzylo-etanofosfonowego.
Do kolby okrągłodennej - zawierającej fosforyn trój-2-naftalenowy powstały bezpośrednio w etapie 1 - wyposażonej w mieszadło magnetyczne wprowadza się 4,23g (28mmola) karbaminianu benzylu i 3,12ml (28mmola) aldehydu fenylooctowego. Po rozpuszczeniu wszystkich składników w 20-30 ml lodowatego kwasu octowego całość ogrzewa się pod chłodnicą zwrotną w temperaturze 80-90°C przez 4,5 godziny. Następnie pod zmniejszonym ciśnieniem usuwa się lotne składniki mieszaniny na wyparce rotacyjnej a pozostałość rozpuszcza się w 200-250 ml metanolu i prowadzi krystalizację produktu w temperaturze -20°C przez 24 godziny. Uzyskany produkt odsącza się pod zmniejszonym ciśnieniem i suszy na powietrzu. W celu rekrystalizacji produkt rozpuszcza się w minimalnej ilości chloroformu na gorąco 14 po czym zalewa metanolem (około 200 ml) i ponownie krystalizuje w temperaturze -20°C. Produkt sączy się i suszy na powietrzu do stałej wagi. Uzyskuje się 0,63g (5,2% wagowo) surowego estru di-2-naftalenowego kwasu 7V-(benzyloksykarbonylamino)-benzylo-etanofosfonowego przedstawionego wzorem 9, w postaci białego osadu. Wzór sumaryczny: C^H.wO.sNP. Masa cząsteczkowa: 587,608g/mol.Widmo 3IP NMR (roztwór w CDCI3, δ [ppm]): 17.77 (s). Widmo 'H NMR (roztwór w CDCI3, δ [ppm]): 2.98-3.82 (m, 2H, CH2), 4.79 (m, 1H, CHP), 5.18 (d, .7=10.16 Hz, 1H, NH), 4.94 (m, 2H, ArCH20), 6.91-7.73 (m, 24H, aromat). Temperatura topnienia: 122°C.
Przykład IX
Sposób wytwarzania estru di-4-metylomerkaptofenylowego kwasu jV-(benzyloksy-karbonylamino)-benzylo-etanofosfonowego przedstawionego wzorem 10.
Etap 1. Otrzymywanie fosforynu trój-4-metylomerkaptofenylowego. W tym celu do kolby okrągłodennej wprowadza się l,8g (13mmola) 4-metylo-merkaptofenolu i rozpuszcza w lOOml benzenu. Do powstałego roztworu dodaje się l,8ml (13mmola) trójetyloaminy (Et3N) i mieszając wkrapla 0,38ml (4,5mmola) chlorku fosforu (III). Początkowo reakcje prowadzi się w temperaturze pokojowej. Jednakże, gdy roztwór zaczyna się samoistnie ogrzewać chłodzi się go wodą z lodem. Powstałą galaretowatą zawiesinę miesza się przez 12 godzin w temperaturze pokojowej. Następnie całość ekstrahuje się czterokrotnie wodą i suszy z 3g siarczanu sodu (Na2S04). Lotne rozpuszczalniki odparowuje się na wyparce rotacyjnej i otrzymuje się olej, który wykorzystuje się bezpośrednio (bez oczyszczania) do reakcji syntezy estru di-4-metylomerkaptofenylowego kwasu JV-(benzyloksy-karbonyl-amino)-benzylo-etanofosfonowego.
Etap 2. Otrzymywanie estru di-4-metylomerkaptofenylowego kwasu N-(benzyloksy-karbonylamino)-benzylo-etanofosfonowego.
Do kolby okrągłodennej - zawierającej fosforyn trój-4-metylomerkaptofenylowy powstały bezpośrednio w etapie 1 - wyposażonej w mieszadło magnetyczne odważa się 0,67g (4,5mmola) karbaminianu benzylu i 0,58ml (4,5mmola) aldehydu fenylooctowego. Po rozpuszczeniu wszystkich składników w 30 ml lodowatego 15 kwasu octowego całość ogrzewa się pod chłodnicą zwrotną w temperaturze 80-90°C przez 4 godziny. Po przeprowadzeniu reakcji z jasnożółtego roztworu powstaje ciemnopomarańczowy olej. Następnie pod zmniejszonym ciśnieniem usuwa się lotne składniki mieszaniny na wyparce rotacyjnej a pozostałość rozpuszcza w około 200ml metanolu i umieszcza w temperaturze -20°C na 24 godziny w celu krystalizacji produktu. Produkt przesącza się i suszy na powietrzu do stałej wagi. Uzyskuje się 0,72g (40% wagowo) surowego estru di-4-metylomerkaptofenylowego kwasu jV-(benzyloksy-karbonylaminoj-benzylo-etanofosfonowego, przedstawionego wzorem 10, w postaci białego osadu. Wzór sumaryczny: C30H30O5S2NP. Masa cząsteczkowa: 564,623. Widmo 3IP NMR (roztwór w CDCI3, 5 [ppm]): 18.98 (s). Widmo 'H NMR (roztwór w CDCI3, δ [ppm]): 2.40 ( d, J= 6.52 Hz, 6H, 2XCH3), 2.9-3.36 (m, 2H, CH2), 4.7 (m, 1H, CHP), 4.93 (s, 2H, CH20), 5.07 (s, 1H, NH), 6.69-7.28 (m, 18H, aromat). Temperatura topnienia: 97-99°C.
Przykład X
Sposób wytwarzania dipeptydowej pochodnej estru di-4-metoksyfenylowego kwasu jV-(Boc-proliloamino)-izobutylo-metanofosfonowego: Boc-Pro-Leup(-0-Q,H4-4-0-CH3)2) przedstawionego wzorem 11.
Etap 1. Otrzymywanie fosforynu trój-4-metoksyfenylowego. W tym celu do kolby okrągłodennej wyposażonej w mieszadło magnetyczne dodaje się 10,3g (83mmola) 4-metoksyfenolu i 30ml acetonitrylu. Po rozpuszczeniu całość ogrzewa się pod chłodnicą zwrotną w temperaturze 90°C przez 2 minuty. Następnie do mieszaniny reakcyjnej dodaje się 2,55ml (28mmola) chlorku fosforu (III). Całość ogrzewa się przez trzy godziny w temperaturze wrzenia. Następnie pod zmniejszonym ciśnieniem usuwa się lotne składniki mieszaniny na wyparce obrotowej. Powstały surowy produkt w postaci zielonego oleju wykorzystuje się bezpośrednio, bez oczyszczania do reakcji syntezy estru di-4-metoksyfenylowego kwasu jV-(benzyloksykarbonylamino)-izobutylo-metanofosfonowego.
Etap 2. Otrzymywanie estru di-4-metoksyfenylówego kwasu N- (benzyloksy-karbonylamino)-izobutylo-metanofosfonowego. 16
Do kolby okrągłodennej - zawierającej fosforyn trój-4-metoksyfenylowy powstały bezpośrednio w etapie 1 - wyposażonej w mieszadło magnetyczne wprowadza się 4,3g (28mmola) karbaminianu benzylu i 2,9ml (28mmola) aldehydu izowalerianowego. Po rozpuszczeniu wszystkich składników w 30 ml lodowatego kwasu octowego całość ogrzewa się pod chłodnicą zwrotną w temperaturze 90°C przez 4 godziny. Następnie pod zmniejszonym ciśnieniem usuwa się lotne składniki mieszaniny na wyparce rotacyjnej a pozostałość rozpuszcza się w 200-250ml metanolu i umieszcza w temperaturze -20°C na 24 godziny w celu krystalizacji produktu. Uzyskany produkt odsącza się pod zmniejszonym ciśnieniem i suszy na powietrzu. Uzyskuje się 7,9g surowego produktu (77% wagowo) w postaci białego osadu. Wzór sumaryczny: C27H32O7NP. Masa cząsteczkowa: 513,525g/moi. Widmo 3IP NMR (roztwór w CDCI3, δ [ppm]): 19.52 (s). Widmo 'H NMR (roztwór w CDCI3, δ [ppm]): 0.88 (m, 6H, 2XCH3), 1.37 (s, 9H, 3XCH3), 1.65-1.90 (m, 6H, 3XCH2), 3.70 (m, 3H, CH2, CH), 4.40 (m, 1H, CHP), 4.9 (s, 1H, NH), 6.72-7.19 (m, 8H, aromat.). Temperatura topnienia: 116-118°C.
Etap 3. Otrzymywanie bromowodorku estru di-4-metoksyfenylowego kwasu N-ammo-izobutydo-melanofosfonowego.
Do kolby okrągłodennej odważa się 2,04g estru di-4-metoksyfenylowego kwasu 7V-(benzyloksykarbonylamino)-izobutylo-metanofosfonowego (4mmola) i dodaje się 5.08ml roztworu kwasu bromowodorowego (33%) w kwasie octowym. Reakcję prowadzi się w temperaturze pokojowej przez 2 godziny. Następnie lotne składniki mieszaniny poreakcyjnej usuwa się na wyparce obrotowej a uzyskany olej rozpuszcza w minimalnej ilości metanolu i dodaje eteru dietylowego do pierwszego zmętnienia. Kolbę umieszcza się w temperaturze -20°C na 24 godziny w celu krystalizacji produktu, który odsącza się pod zmniejszonym ciśnieniem i suszy na wolnym powietrzu do stałej wagi. Otrzymuje się 2.02g (99%wagowo) bromowodorku estru di-4-metoksyfenylowego kwasu A^-amino-izobutylo-metanofosfonowego. Wzór sumaryczny: CiyH2705NPBr. Masa cząsteczkowa: 460,302g/mol .Widmo 3IP NMR (roztwór w CDC13, δ [ppm]): 13.70 (s). Widmo !H NMR (roztwór w CDCI3, 17 δ [ppm]): 0.93 (m, 6H, 2XCH3), 1.9-2.2 (m, 3H, CH2,CH), 3.66 (d, .7=3.47 Hz, 6H, 2XCH3), 4.01 (m, 1H, CHP), 6.62-7.37 (m, 8H, aromat), 8.97 (s, 3H, NH3+Br). Temperatura topnienia: 159°C.
Etap 4. Reakcja syntezy pochodnej dipeptydowej estru di-4-metoksyfenylowego kwasu N-(Boc-proliloamino)-izobutylo-metanofosfonowego.
Do kolby okrągłodennej odważa się lg (2,2mmola) bromowodorku estru di-4-metoksyfenylowego kwasu N-amino-izobutylo-metanofosfonowego i dodaje się 0,51g Boc-Pro-OH (2,4mmola). Całość zalewa się acetonitrylem (5-10ml), i po 2 minutach dodaje się 0,75ml trójetyloaminy (5,4mmola). Po 10 minutach dodaje się 0,86g (2,3mmola) heksafluorofosforanu 0-benzotriazol-l-ylo-MA/.A^'A^'-tetrametylouroniowego. Reakcję prowadzi się w temperaturze pokojowej przez 24 godziny. Następnie mieszaninę poreakcyjną zalewa się solanką, przenosi do rozdzielacza i ekstrahuje się dwukrotnie octanem etylu. Warstwę octanową przemywa się kolejno: dwukrotnie siarczanem potasu (5%), solanką, dwukrotnie wodorowęglanem sodu (5%) i solanką. Frakcje octanowe suszy się w 3g bezwodnego siarczanu magnezu. Odparowuje się lotne rozpuszczalniki, a następnie produkt oczyszcza się metodą chromatografii kolumnowej stosując jako eluent chloroform/octan etylu w stosunku objętościowym 4:1. Po zebraniu frakcji zawierających oczekiwany produkt lotne rozpuszczalniki odparowuje się na wyparce rotacyjnej. Następnie powstały produkt rozpuszcza się w dichlorometanie i odparowuje się do spienienia na wyparce rotacyjnej. Otrzymuje się dipeptydową pochodną estru di-4-metoksyfenylowego kwasu jV-(Boc-proliloamino)-izobutylo-metanofosfonowego: Boc-Pro-Leup(-0-C6H4-4-0-CH3)2) przedstawioną wzorem 11, o masie 0,9g (90% wagowo). Wzór sumaryczny: C29H41O8N2P. Masa cząsteczkowa: 562,598g/mol. Widmo 3IP NMR (roztwór w CDC13, δ [ppm]): 19.57 (s). Widmo ]H NMR (roztwór w CDCI3, δ [ppm]): 0.88 (m, 6H, 2XCH3), 1.37 (s, 9H, 3XCH3), 1.65-1.90 (m, 6H, 3XCH2), 3.70 (m, 3H, CH2, CH), 4.40 (m, 1H, CHP), 4.9 (s, 1H, NH), 6.72-7.19 (m, 8H, aromat.). Temperatura topnienia: 96°C.
Przykład XI 18
Sposób wytwarzania dipeptydowej pochodnej estru di-4-metylomerkaptofenylowego kwasu 7V-(Boc-proliloamino)-benzylo-etanofosfonowego: Boc-Pro-Phep(OC6H4-4-SCH3)2 przedstawionego wzorem 12. Sposób wykonania syntezy fosforynu 4-metylomerkaptofenylowego i estru di-4-metylomerkaptofenylowego kwasu ^-(benzyloksykarbonylaminoj-benzylo-etanofosfonowego jest analogiczny do przykładu X (Etap I i etap II). Kolejnym etapem jest synteza bromowodorku estru 4-metylomerkaptofenylowego kwasu N-amino-benzylo-etanofosfonowego.
Etap 3. Otrzymywanie bromowodorku estru di-4-metylomerkaptofenylowego kwasu N-amino-benzylo-etanofosfonowego.
Do kolby okrągłodennej wprowadza się l,57g (2,7mmola) estru di-4-metylomerkaptofenylowego kwasu iV-(benzyloksykarbonylamino)-benzylo-etano-fosfonowego i dodaje się 8ml roztworu kwasu bromowodorowego (33%) w kwasie octowym. Reakcję prowadzi się w temperaturze pokojowej przez 3 godziny. Następnie lotne składniki mieszaniny poreakcyjnej usuwa się na wyparce obrotowej a uzyskany olej rozpuszcza się w eterze dietylowym do pierwszego zmętnienia. Kolbę umieszcza się w temperaturze -20°C na 24 godziny w celu krystalizacji produktu, który odsącza się pod zmniejszonym ciśnieniem i suszy na wolnym powietrzu do stałej wagi. Otrzymuje się 1,15g białego proszku (73% wagowo) - bromowodorku estru di-4-metylomerkaptofenylowego kwasu AA-amino-benzylo-etanofosfonowego. Wzór sumaryczny: C22H2503S2NPBr. Masa cząsteczkowa: 526,441 .Widmo 3IP NMR (roztwór w CDCI3, δ [ppm]): 15.55(s). Widmo 'H NMR (roztwór w CDCI3, δ [ppm]): 2.35 (d, .7=7,36 Hz, 6H, 2XCH3), 3,23 (m, 2H, CH2), 4.44 (m, 1H, CHP), 6.90-7.36 (m, 13H, aromat), 8.76 (s, 3H, NH3+Br).
Etap 4. Reakcja syntezy pochodnej dipeptydowej estru di-4-metylomerkaptofenylowego kwasu N-(Boc-proliloamino)-benzylo-etanofosfonowego.
Do kolby okrągłodennej odważa się 0,8g (l,5mmola) bromowodorku estru di-4-metylosulfidofenylowego kwasu 7V-amino-benzylo-etanofosfonowego i dodaje się 0,36g (l,65mmola) Boc-Pro-OH. Całość zalewa się acetonitrylem (5-1 Oml) i po 2 19 minutach dodaje się 0,53ml trójetyloaminy (3,75mmola). Po 10 minutach dodaje się 0,61g (l,57mmola) heksafluorofosforanu 0-benzotriazol-l-ylo-iV,jV,iV',iV'-tetramety[ouroriiowego. Reakcję prowadzi się w temperaturze pokojowej przez 24 godziny. Następnie mieszaninę poreakcyjną zalewa się solanką i po przeniesieniu do rozdzielacza, ekstrahuje się dwukrotnie octanem etylu. Warstwę octanową przemywa się kolejno: dwukrotnie siarczanem potasu (5%), solanką, dwukrotnie wodorowęglanem sodu (5%), solanką. Frakcje octanowe suszy się w 3g bezwodnego siarczanu magnezu. Odparowuje się lotne rozpuszczalniki, a następnie produkt oczyszcza się metodą chromatografii kolumnowej stosując jako eluent chloroform. Po zebraniu frakcji zawierających oczekiwany produkt lotne rozpuszczalniki odparowuje się na wyparce rotacyjnej otrzymując dipeptydową pochodną estru di-4-metylomerkaptofenylowego kwasu N-(Boc-proliloamino)-benzylo-etanofosfonowego: Boc-Pro-Phep(OC6H4-4-SCH3)2, przedstawioną wzorem 12 w postaci spienionego oleju o masie 0,75g (90% wagowo). Wzór sumaryczny: C.-^HwOf&NiP. Masa cząsteczkowa: 645,582g/mol. Widmo 11P NMR (roztwór w CDCI3, δ [ppm]): 18.24 (s), 18.16 (s). Widmo 'H NMR (roztwór w CDC13, δ [ppm]): 1.4 (s, 9H, 3XCH3), . 1.65-1.90 (m, 6H, 3XCH2), 2.35 (s, 6H, 2XCH3), 4.12 (m, 3H, CH2, CH), 5.00 (m, 1H, CHP), 5.19 (s, 1H, NH), 6.94-7.18 (m, 13H, aromat.). Temperatura topnienia: 49-52°C.
Przykład XII
Sposób wytwarzania trójpeptydowej pochodnej estru di-3,4,5-trimetylofenylowego kwasu iV-(Boc-walino-proliloamino)-izobutylo-metanofos-fonowego: Boc-VaI-Pro-Leup(-0-C6H3-3,4,5-(CH3)3)2 przedstawionego wzorem 13. Sposób wykonania syntezy fosforynu trój-3,4,5-trimetylofenylowego i estru di-3,4,5-trimetylofenylowego kwasu 7W(benzyloksykarbonylamino)-izobutylo-metano-fosfonowego jest analogiczny do przykładu III (Etap I i etap II). Kolejnym etapem jest synteza bromowodorku estru di-3,4,5-trimetylofenylowego kwasu A^-amino-izobutylo-metanofosfonowego. 20
Etap 3. Otrzymywanie bromowodorku estru di-3,4,5-trimetylofenylowego kwasu N-amino-izobutylo-metanofosfonowego.
Do kolby okrągłodennej zaopatrzonej w mieszadło magnetyczne odważa się 2,Olg (3,7mmola) esteru di-3,4,5-trimetylofenylowy kwasu jV-(benzyloksy-karbonylaminoj-izobutylo-metanofosfonowego i dodaje się 5ml (5,02mmola) roztworu kwasu bromowodorowego (33%) w kwasie octowym. Reakcję prowadzi się w temperaturze pokojowej przez 3 godziny. Następnie lotne składniki mieszaniny poreakcyjnej usuwa się na wyparce obrotowej a uzyskany olej rozpuszcza się w minimalnej ilości metanolu i dodaje się eteru dietylowego do pierwszego zmętnienia. Kolbę umieszcza się w temperaturze -20°C na 24 godziny w celu krystalizacji produktu, który odsącza się pod zmniejszonym ciśnieniem i suszy na wolnym powietrzu do stałej wagi. Uznaje się, że substrat w 100% został odblokowany, dlatego powstały produkt w postaci bromowodorku estru di-3,4,5-trimetylofenylowego kwasu iV-amino-izobutylo-metanofosfonowego używa się bezpośrednio do rekcji syntezy dipeptydowej pochodnej estru di-3,4,5-trimetylofenylowego kwasu jV-(Boc-proliloaminoj-izobutylo-metanofosfonowego.
Etap 4. Reakcja syntezy pochodnej dipeptydowej estru di-3,4,5-trimetylofenylowego kwasu N-(Boc-proliloamino)-izobut\’lo-metanofosfonowego.
Do kolby okrągłodennej zawierającej l,7g (3,76mmola) bromowodorku estru di-3,4,5-trimetylofenylowego kwasu N-amino-izobutylo-metanofosfonowego (powstałego w etapie 3) dodaje się 0,81g (3,76mmola) Boc-Pro-OH. Całość zalewa się acetonitrylem (5-10ml), a po 2 minutach dodaje się l,56ml (ll,3mmola) trójetyloaminy. Po 10 minutach dodaje się l,49g (3,95mmola) heksafluorofosforanu 0-benzotriazol-l-ylo-./V,A/,iV',Ar'-tetrarnetylouroniowego. Reakcję prowadzi się w temperaturze pokojowej przez 48 godzin. Następnie mieszaninę poreakcyjną zalewa się solanką, przenosi do rozdzielacza i ekstrahuje się dwukrotnie octanem etylu. Warstwę octanową przemywa się kolejno: dwukrotnie siarczanem potasu (5%), solanką, dwukrotnie wodorowęglanem sodu (5%), solanką. Frakcje octanowe suszy się w 3g bezwodnego siarczanu magnezu. Odparowuje się lotne rozpuszczalniki, a 21 następnie produkt oczyszcza się metodą chromatografii kolumnowej stosując jako eluent chloroform. Po zebraniu frakcji zawierających oczekiwany produkt lotne rozpuszczalniki odparowuje się na wyparce rotacyjnej. Następnie produkt rozpuszcza się w dichlorometanie i ponownie odparowuje się lotny rozpuszczalnik, aż do spienienia produktu. Otrzymuje się spieniony olej o masie l,18g (65% wagowo). Wzór sumaryczny: C^lCyO^P. Masa cząsteczkowa: 600,73g/mol .Widmo 3IP NMR (roztwór w CDCI3, δ [ppm]): 18.76 (s), 18.58 (s). Widmo 'H NMR (roztwór w CDCI3, δ [ppm]): 0.85 (dd, ./=8,56/3,29 Hz, 6H, 2XCH3), 1.33 (s, 9H, 3XCH3), 1.6-1.8 (m, 6H, 2 XCH2,), 2.21 (s,18H, 6XCH3), 3.3 (m, 3H, CH2, CH), 4.18 (s, 1H, NH), 4.8 (m, 1H, CHP), 5,2 (t, ./=5.47 Hz, 1H, CHO), 6.67-7.3 (m, 4H, aromat.). Temperatura topnienia: 48-52°C.
Etap V. Usunięcie grupy t-Boc z pochodnej dipeptydowej estru di-3,4,5-trime-lylofenylowego kwasu N-(Boc-proliloamino)-izobutylo-metanofosfonowego.
Do kolby okrągłodennej odważa się pochodną dipeptydową estru di-3,4,5-trimetylofenylowego kwasu //-(Boc-proliloamino)-izobutylo-metano-fosfonowego i rozpuszcza się ją w dichlorometanie (10 ml), a następnie dodaje się powoli 50% roztwór kwasu trójfluoroctowego w dichlorometanie (5ml). Reakcję prowadzi się w temperaturze pokojowej przez 2 godziny, a jej przebieg monitoruje się metodą chromatografii cienkowarstwowej. Następnie lotne składniki mieszaniny poreakcyjnej usuwa się na wyparce obrotowej, uzyskany olej rozpuszcza się w toluenie i ponownie odparowuje rozpuszczalnik, a czynność tą powtarza się dwukrotnie. Powstały olej o kolorze żółtym - o masie l,02g - wykorzystuje się jako substrat wyjściowy do otrzymania pochodnej tripeptydowej estru di-3,4,5-trimetylo-fenylowego kwasu /V-(Boc-walino-proliloamino)-izobutylo-metanofosfonowego.
Etap VI. Reakcja syntezy pochodnej trójpeptydowej estru di-3,4,5-trimetylo-fenylowego h\>asu N-(Boc-walino-proliloamino)-izobutylo-metanofosfonowego.
Do powstałego w etapie V produktu TFA*Pro-Leup(OC6H3-3,4,5-(0^3)3)2 (m=l,02g, n=l,66mmola) dodaje się 0,38g (l,82mmola) Boc-Val-OH. Całość zalewa się acetonitrylem (5-10ml), a po 2 minutach dodaje się 0,51ml (4,14mmola) 22 trójetyloaminy. Po 10 minutach dodaje się 0,66g (l,74mmola) heksafluorofosforanu <9-benzotriazol-l-ylo-/V. ν,/ν'./ν'-tetrametylouroniowego. Reakcję prowadzi się w temperaturze pokojowej przez 24 godziny. Następnie mieszaninę poreakcyjną zalewa się solanką, przenosi się do rozdzielacza i ekstrahuje się dwukrotnie octanem etylu. Warstwę octanową przemywa się kolejno: dwukrotnie siarczanem potasu (5%), solanką, dwukrotnie wodorowęglanem sodu (5%) i solanką. Warstwę octanową zlewa się do kolby stożkowej i dodaje 3g siarczanu magnezu. Następnie produkt oczyszcza się metodą chromatografii kolumnowej stosując eluent octan etylu/chloroform w stosunku objętościowym 1:4. Po zebraniu frakcji zawierających oczekiwany produkt lotne rozpuszczalniki odparowuje się na wyparce rotacyjnej. Powstały olej rozpuszcza się w dichlorometanie i odparowuje się na wyparce rotacyjnej, aż do spienienia produktu, otrzymuje się trójpeptydową pochodną estru di-3,4,5-trimetylofenylowego kwasu iV-(Boc-walino-proliloamino)-izobutylo-metanofosfonowego: Boc-Val-Pro-Leup(-0-C6H3-3,4,5-(CH3)3)2 przedstawionego wzorem 13 o masie 0,44g (43% wagowo). Wzór sumaryczny: C38H59O7N3P. Masa cząsteczkowa: 699,863g/mol. Widmo 3IP NMR (roztwór w CDCI3, δ [ppm]): 18.51 (s). Widmo 'H NMR (roztwór w CDCI3, δ [ppm]): 0.84 (m, 12H, 4XCH3), 1.34 (s, 9H, 3XCH3), 1.65-1.80 (m, 6H, 3XCH2), 2.13 (m, 18H, 6XCH3), 3.50 (m, 3H, CH2, CH), 4.20 (m, 1H, CHCO), 4.36 (m,lH, NH), 4.7 (m, 1H, CHP), 5.2 (t, .7=5,48 Hz, 1H, CHCO[Pro]), 6.70-7.0 (m, 4H, aromat.), 7.1 (d, «7=10,05 Hz, 1H, NH). Temperatura topnienia: 59°C.
Przykład XIII
Sposób wytwarzania tripeptydowej pochodnej estru di-4-metylomerkapto-fenylowego kwasu iV-(Boc-walino-proliloamino)-benzylo-etanofosfonowego: Boc-Pro-Phep(OCbH4-4-SCH3)2 przedstawionego wzorem 14. Etap I, II, 111, IV syntezy prowadzi się analogicznie do przykładu X. Kolejny etap polega na usunięciu grupy blokującej, tercbutylowej z aminowego końca dipeptydu.
Etap V. Usunięcie grupy t-Boc z pochodnej dipeptydowej estru di-4-metylomer-kaptofenylowego kwasu N-(Boc-proliloamino)-benzylo-etanofosfonowego. 23
Do kolby okrągłodennej odważa się pochodną dipeptydową estru di-4-metylomerkaptofenylowego kwasu yV-(Boc-proliloamino)-benzylo-etanofosfonowego i rozpuszcza się ją w dichlorometanie (10 ml), a następnie dodaje się powoli 50% roztwór kwasu trójfluoroctowego w dichlorometanie (5ml). Reakcję prowadzi się w temperaturze pokojowej przez 2 godziny, a jej przebieg monitoruje się metodą chromatografii cienkowarstwowej. Następnie lotne składniki mieszaniny poreakcyjnej usuwa się na wyparce obrotowej, uzyskany olej rozpuszcza się w toluenie i ponownie odparowuje, a czynność tą powtarza się dwukrotnie. Powstały olej (masa=0.80g) o kolorze szarym wykorzystuje się jako substrat wyjściowy do otrzymania pochodnej tripeptydowej estru di-4-metylomerkaptofenylowego kwasu Ar-(Boc-walino-proliloaminoj-benzylo-etanofosfonowego.
Etap VI. Reakcja syntezy pochodnej trójpeptydowej estru di-4-metylomer-kaptofenylowego kM>asu N-(Boc-walino-proliloamino)-henzylo-etanofosfonowego
Do 0,80g (1,3mmola) powstałego w etapie V produktu TFA*Pro-Phep(OQ,H4-4-S-CH-^ dodaje się 0,27g (l,43mmoal) Boc-Val-OH. Całość zalewa się acetonitrylem (5-10ml) po 2 minutach dodaje się 0,43ml (3,25mmola) trójetyloaminy. Po 10 minutach dodaje się 0,49g (l,36mmola) heksafluorofosforanu O-benzotriazol-l-ylo-MA, iV',A''-tet ram ety lou roni owego. Reakcję prowadzi się w temperaturze pokojowej przez 12 godzin. Następnie mieszaninę poreakcyjną zalewa się solanką, przenosi się do rozdzielacza i ekstrahuje się dwukrotnie octanem etylu. Warstwę octanową przemywano kolejno: dwukrotnie siarczanem potasu (5%), solanką, dwukrotnie wodorowęglanem sodu (5%) i solanką. Warstwę octanową zlewa się do kolby stożkowej i dodaje się 3g siarczanu magnezu. Następnie produkt oczyszcza się metodą chromatografii kolumnowej stosując jako eluent chloroform. Po zebraniu frakcji zawierających oczekiwany produkt lotne rozpuszczalniki odparowuje się na wyparce rotacyjnej. Powstały olej rozpuszcza się w dichlorometanie i odparowuje się na wyparce rotacyjnej, aż do spienienia produktu. Otrzymuje się 0,64g (80% wagowo) tripeptydowej pochodnej estru di-4-metylomerkaptofenylowego kwasu jV-(Boc-walino-proliloamino)-benzylo-etanofosfonowego: Boc-Pro-Phep(OC6H4-4-SCH;i)2 24 przedstawionego wzorem 14 Wzór sumaryczny: C37H4SO7N3S2P. Masa cząsteczkowa: 741,91 lg/mol.Widmo > NMR (roztwór w CDCI3, δ [ppm]): 18.30 (s), 18.26 (s). Widmo 'H NMR (roztwór w CDCI3, δ [ppm]): 0.88 (m, 12H, 4XCH3), 1.37 (s, 9H, 3XCH3), 1.65-1.80 (m, 6H, 3XCH2), 2.35 (s, 6h, 2XCH3), 3.5-3.6 (m, 3H, CH2, CH), 4.20 (m, 1H, CHCO), 4.36 (m,lH, NH), 4.73 (m, 1H, CHP), 5.2 (t, J=5,48 Hz, 1H, CHCO[Pro]), 6.79-7.01 (m, 8H, aromat.), 7.2 (d, ./=0,7 Hz, 1H, NH). Temperatura topnienia: 72-76°C.
Aktywność biologiczną estrów difenylowych fosfonowych analogów fenyloalaniny oraz leucyny, a także ich peptydowych pochodnych otrzymanych w przykładach II-XIV przebadano pod kątem zdolności do hamowania proteolitycznej aktywności chymotrypsyny z trzustki wołowej i subtylizyny pochodzącej z bakterii B. sitbtillis. Wszystkie badania sporządzono na czytniku mikropłytek Molecular Devices Spectramax Gemini XP. Badania rozpoczęto od wyznaczania Km dla substratu w warunkach prowadzonych testów (temperatura 37°C\ długość fali ekstynkcji 350nm i emisji 460nm). Pomiaru dokonano przy różnych stężeniach substratu w zakresie od 10μΜ do 500μΜ przy stałym stężeniu enzymu 25nM. Odpowiednio, wartości Km dla chymotrypsyny i subtylizyny wynosiły 70μΜ i 6ϋ μΜ w podanych warunkach. Pomiary aktywności inhibitorowej wykonano przy różnych stężeniach inhibitorów w zakresie od 50nM do 2000nM. W badaniach wykorzystano handlowo dostępny substrat WSuc-Ala-Ala-Pro-Phe-AMC, którego używano zarówno przy pomiarach względem chymotrypsyny jak i subtylizyny. Końcowe stężenie substratu wynosiło zarówno dla chymotrypsyny jak i subtylizyny 20μΜ. Do każdej studzienki odmierzono ΙΟΟμΙ enzymu, 50μ1 substratu i 50μΙ inhibitora. Przy obliczaniu wartości Kj i k2 wykorzystano dwa modele inhibicji: model regresji hiperbolicznej Salvessena i model klasycznej regresji liniowej według Dorita. Uzyskane wartości Kj i k2 wyliczone dwiema metodami różniły się nieznacznie, dlatego podano ich uśrednioną wartość. Uzyskane wyniki przedstawiono w tabelach, z których Tabela 1 przedstawia wyniki badania aktywności inhibitorowej otrzymanych estrów difenylowych analogów fenyloalaniny i leucyny wobec chymotrypsyny i subtylizyny, Tabela 2 - 25 wyniki badania aktywności inhibitorowej otrzymanych dipeptydowych pochodnych estrów difenylowych analogów fenyloalaniny i leucyny wobec chymotrypsyny i subtylizyny, a Tabela 3 - wyniki badania aktywności inhibitorowej otrzymanych tripeptydowych pochodnych estrów difenylowych analogów fenyloalaniny i leucyny wobec chymotrypsyny i subtylizyny. subtylizyna chymotrypsyna Ki [μΜ] k2/Ki [MV] Ki [μΜ] k2/Ki [MV] < h/-l eul'[o-'{ /V-s^l L ^ >20 <50 0.7 18 300 f'bz-I.L'111 >20 <50 0.25 5700 Cbz-I .cu1’ "-G- - >20 <50 3.3 880 Πν-Ι cu >20 <50 0.7 11700 >20 <50 0.11 38 600 ( h/ Phe1' °-Ch >20 <50 0.05 74 500 (hz-Phe >20 <50 0.16 11 200 Clw-Phi·1' >20 <50 0.027 280 000 rhz-Phc1' ( 'Os- 1.45 960 0.65 86 000
Tabela 1 26 subtylizyna chymotrypsyna Ki [μΜ] k2/Kj [MV] Ki [μΜ] k2/K; [mV] r „ ; IW-Um-lW’^^ ,)~p J 7.7 1 700 0.09 250 000 /=\ / Boc-Prn-Phe1’ ~"° ® 5.4 1 700 0.14 120 000 Tabela 2 subtylizyna chymotrypsyna Ki [μΜ] ks/Kj [MV] Ki [μΜ] k2/Kj [mV] BcK-Yal-Pru-U-u1'- °-C^- 2 >20 <50 0.3 9 000 Boc-V;.l-Pro-Phc'" -O-^S7 0.098 110 000 0.05 94 600 Tabela 3 RZECZNIK PATENTOWY mawmoarad mgrlj.Hiah :ni/c 1/3
WZÓR 1 3 8 5 4 8 11ο
a Cbz oznacza grupę w którym W oznacza benzyloksykarbonylową, Y oznacza Boc (grupa terc-butylowa), XI, X2, X3, X4, X5 oznaczają odpowiednio metyl, etyl, benzyl, O-metyl i S-metyl, R1 oznacza łańcuch boczny naturalnego aminokwasu: fenyloalaniny bądź Lucyny, zaś n = 0,1
WZÓR 2 WZÓR 3
RZEC
'ENTOWY mgr fiawinohradnil· 2/3 3 8 5 U 8 1Λή
WZÓR 6 WZÓR 7
WZÓR 8 WZÓR 9 i^PATjENTO1 '•Malina Winohradnik
ΚΖΕ£|Ν!Κγ PATENTOM 3 8 5 Λ 8 1 3/3
Claims (7)
- 385481 J 27 Zastrzeżenia patentowe 1. Nowe diestry arylowe kwasów 1-aminoalkano-fosfonowych i ich peptydowe pochodne, o wzorze ogólnym I. w którym W1 oznacza grupę benzyloksykarbonylową (Cbz), albo resztę peptydową składającą się z jednego, dwóch lub trzech aminokwasów, R1 oznacza podstawnik analogiczny do łańcucha bocznego naturalnych aminokwasów, w szczególności leucyny lub fenyloalaniny, zaś XI, X2, X3, X4 i X5 są takie same lub rożne i oznaczają metyl, etyl, benzyl, O-metyl i S-metyl.
- 2. Zastosowanie nowych diestrów arylowych kwasów 1-aminoalkanofosfonowych i ich peptydowych pochodnych, o wzorze ogólnym 1 jako inhibitorów chymotrypsyny, enzymów chymotrypsyno-podobnych i subtylizyny.
- 3. Sposób wytwarzania podstawionych diestrów arylowych kwasów 1-aminoalkano-fosfonowych i ich peptydowych pochodnych o wzorze ogólnym 1, znamienny tym, że w pierwszym etapie otrzymuje się fosforyn triarlowy, który następnie poddaje się reakcji amidoalkilowania i w otrzymanym estrze jV-benzyloksykarbonylowym kwasu 1 -aminofosfonowego odblokowuje się grupę aminową, a następnie sprzęga się go z jV-zablokowanymi aminokwasami karboksylowymi, lub dipeptydami otrzymując peptydowe pochodne estrów diarylowych kwasów I -aminoalkanofosfonowych.
- 4. Sposób według zastrz. 3, znamienny tym, że fosforyn triarylowy otrzymuje się na drodze syntezy fenolu z chlorkiem fosforu 111 w acetonitrylu bądź benzenie, a reakcje prowadzi się w temperaturze wrzenia rozpuszczalnika.
- 5. Sposób według zastrz. 3, znamienny tym, że estry difenylowe kwasów 1-aminoalkanofosfonowych z nowymi podstawnikami przy aromatycznych pierścieniach fenylowych, otrzymuje się na drodze reakcji syntezy fosforynu triarylowego z karbaminianem benzylu, aldehydem fenylooctowym bądź izowalerianowym w kwasie octowym, korzystnie w temperaturze 90°C.
- 6. Sposób wytwarzania dipeptydowych pochodnych diestrów arylowych kwasów I -aminoalkanofosfonowych o wzorze ogólnym 1, znamienny tym, że jako substraty 28 reakcji stosuje się bromowodorki estrów difenylowych pochodnych kwasów I-aminoalkanofosfonowych. które uzyskuje się uprzednio w reakcji syntezy estrów difenylowych pochodnych kwasów 1-aminoalkanofosfonowych z roztworem kwasu bromowodorowego (33%) w kwasie octowym w temperaturze pokojowej, następnie przeprowadza się reakcję sprzęgania bromowodorków estrów difenylowych pochodnych kwasów 1-aminoalkano-fosfonowych z próbną z zablokowaną /V-końcową grupą aminową przez grupę terc-butylową (/-Boc), przy użyciu heksafluorofosforanu 0-benzotriazol-l-ylo-7V,7V,Ar',./V'-tetrametylo-uroniowego (HBTU), trójetyloaminy i acetonitrylu jako rozpuszczalnika, a po reakcji sprzęgania w temperaturze pokojowej, mieszaninę poreakcyjną zalewa się solanką, ekstrahuje octanem etylu i przemywa się kolejno siarczanem potasu (5%), solanką, wodorowęglanem sodu (5%) i solanką.
- 7. Sposób wytwarzania pochodnych tripeptydowych estrów difenylowych kwasów 1-aminoalkanofosfonowych o wzorze ogólnym 1, znamienny tym, że jako substraty reakcji stosuje się dipeptydowe pochodne dicstrów arylowych kwasów 1-aminoalkanofosfonowych, następnie usuwa się z pochodnych dipeptydowych grupę blokującą terc-butylową (NBoc). przy użyciu roztworu kwasu trójfluorooctowego (TFA) i dichlorometanu (CH2CI2) w stosunku objętościowym 1:1 i prowadzi się reakcję addycji kolejnego aminokwasu - waliny z zablokowaną grupą α-aminową przy użyciu odczynnika sprzęgającego heksafluorofosforanu O-benzotriazol-l-ylo-.V,/V,7V',7V'-tetrametylouroniowego (HBTU), trójetyloaminy i acetonitrylu jako rozpuszczalnika, po prowadzonej w temperaturze pokojowej reakcji sprzęgania, mieszaninę poreakcyjną zalewa się solanką, ekstrahuje dwukrotnie octanem etylu i przemywa kolejno siarczanem potasu (5%). solanką, wodorowęglanem sodu (5%) i solanką.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL385481A PL215832B1 (pl) | 2008-06-20 | 2008-06-20 | Diestry arylowe kwasów 1-aminoalkanofosfonowych i ich peptydowe pochodne oraz sposób ich wytwarzania i zastosowanie |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL385481A PL215832B1 (pl) | 2008-06-20 | 2008-06-20 | Diestry arylowe kwasów 1-aminoalkanofosfonowych i ich peptydowe pochodne oraz sposób ich wytwarzania i zastosowanie |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL385481A1 true PL385481A1 (pl) | 2009-12-21 |
| PL215832B1 PL215832B1 (pl) | 2014-02-28 |
Family
ID=42988683
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL385481A PL215832B1 (pl) | 2008-06-20 | 2008-06-20 | Diestry arylowe kwasów 1-aminoalkanofosfonowych i ich peptydowe pochodne oraz sposób ich wytwarzania i zastosowanie |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| PL (1) | PL215832B1 (pl) |
-
2008
- 2008-06-20 PL PL385481A patent/PL215832B1/pl unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| PL215832B1 (pl) | 2014-02-28 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| De Lombaert et al. | N-Phosphonomethyl dipeptides and their phosphonate prodrugs, a new generation of neutral endopeptidase (NEP, EC 3.4. 24.11) inhibitors | |
| US4918105A (en) | Novel compounds with collagenase-inhibiting activity, a process for their preparation and pharmaceutical compositions in which these compounds are present | |
| AU655252B2 (en) | Phosphono/biaryl substituted dipeptide derivatives | |
| PL209670B1 (pl) | Nowy związek, będący acyloaminopiperydyno-1-karboksyamidyną, środek farmaceutyczny zawierający ten związek i zastosowanie tego związku do wytwarzania leku | |
| CZ118393A3 (en) | Hydroxamic acid derivatives, process of their preparation and medicaments based thereon | |
| EP0871454A4 (pl) | ||
| WO1995029691A1 (en) | Proline phosphonate derivatives | |
| AU733420B2 (en) | Peptidyl-2-amino-1-hydroxyalkanesulfonic acid cysteine protease inhibitors | |
| US20070281909A1 (en) | Creatine phosphate prodrugs, compositions and uses thereof | |
| FI112660B (fi) | Menetelmä matriksin metalloproteaasien inhibiittoreina käyttökelpoisten trisyklisten indolijohdannaisten valmistamiseksi | |
| JPH10501546A (ja) | メタロペプチダーゼ阻害作用を有するホスフィン酸誘導体 | |
| JP3249510B2 (ja) | アミノ酸誘導体と、その製造方法と、その治療への応用 | |
| NZ233288A (en) | Phosphono- di- and tri- peptide derivatives, medicaments, and intermediates | |
| EP1019434B1 (en) | Inhibitors of metalloproteinases, their therapeutic use, and process for the production of the starting compound in their synthesis | |
| PL385481A1 (pl) | Nowe diestry arylowe kwasów 1-aminoalkanofosfonowych i ich peptydowe pochodne oraz sposób ich wytwarzania i zastosowanie jako inhibitorów chymotrypsyny | |
| PL227742B1 (pl) | Pochodne estrów diarylowych kwasów 1-aminoalkanofosfonowych, sposób wytwarzania pochodnych estrów diarylowych kwasów 1-aminoalkanofosfonowych oraz ich zastosowanie | |
| JP2003517450A (ja) | マトリックス亜鉛メタロプロテアーゼ阻害剤として使用可能なホスフィン性擬ペプチド | |
| AU609942B2 (en) | Novel aspartate transcarbamylase inhibitors | |
| US6482797B1 (en) | N-terminal site selective inhibitors of human angiotensin conversion enzyme (ACE) | |
| US5639732A (en) | Phosphorous-containing cysteine and serine protease inhibitors | |
| US5446187A (en) | Aminoacyl derivatives of gem-diphosphonic acids, a process for the preparation thereof and pharmaceutical compositions containing them | |
| PL215209B1 (pl) | Nowe pochodne diestrów arylowych kwasów 1-aminoalkanofosfonowych, sposób wytwarzania pochodnych diestrów arylowych kwasów 1-aminoalkanofosfonowych oraz zastosowanie pochodnych diestrów arylowych kwasów 1-aminoalkanofosfonowych | |
| NZ255878A (en) | Phosphono-substituted tetrazoles and medicaments thereof | |
| PL218840B1 (pl) | Pochodne diestrów 4-metylotiofenylowych kwasów 1-amino-2-metylo-propanofosfonowych, sposób wytwarzania pochodnych diestrów 4-metylotiofenylowych kwasów 1-amino-2-metylo-propanofosfonowych oraz zastosowanie pochodnych diestrów 4-metylotiofenylowych kwasów 1-amino-2-metylo-propanofosfonowych | |
| Haremza et al. | Es Sbai |