PL31203B1 - Sposób otrzymywania hormonu thyreotropowego - Google Patents

Description

Stosowane dotad metody otrzymywania hormonu thyreotropowego, pobudzajacego czynnosci tarczycy, z przedniego platu wo¬ lowej lub cielecej przysadki mózgowej po¬ legaly przede wszystkim na uprzednim od¬ wadnianiu i odtluszczaniu materialu wyj¬ sciowego za pomoca acetonu. Przedni plat przysadki mózgowej przygotowany w spo¬ sób powyzszy, krajano nastepnie i suszono w aparacie prózniowym, po czym rozciera¬ no na proszek, z którego otrzymywano wy¬ ciagi oczyszczane za pomoca rozmaitych rozpuszczalników. Z wyciagów tych stra¬ cano w koncu substancje czynna i oczysz¬ czano ja odpowiednimi odczynnikami.Metody te posiadaja znaczne wady, albowiem odwadnianie i odtluszczanie pla¬ tów za pomoca acetonu wymaga dlugiej i kosztownej przeróbki.Sposób wedlug wynalazku niniejszego uisuwa wady dotychczas znanych i stosowa¬ nych sposobów otrzymywania hormonu thyreotropowego. Wedlug wynalazku miaz¬ ge z surowego przedniego platu przysadki mózgowej zalewa sie alkoholem etylowym, zawierajacym dodatek kwasu octowego; alkohol ten przy odpowiedhim stezeniu slu¬ zy jako rozpuszczalnik hormonu oraz sro¬ dek zapobiegajacy psuciu sie materialu przerabianego. Obecnosc w alkoholu kwasu octowego juz w pierwszym okresie prze¬ róbki miazgi z przedniego platu przysadki mózgowej straca wieksza czesc bialka *) Wlasciciel patentu oswiadczyl, ie wynalazca jest Tomasz Spasawicz, Warschau.i nic dopuszcza do rozopuszczania sie du¬ zych ilosci bialka obojetnego.Oczyszczania i stezanie roztworów hor¬ monu thyreotropowego przeprowadza sie przy uzyciu saczków wytwarzanych z kolo¬ dium. Otrzymywanie hormonu thyreoropo- wego sposobem wedlug wynalazku wykony¬ wa sie w uproszczonej aparaturze przy za¬ stosowaniu tanich odczynników, co obniza wydatnie koszty produkcji. Przez bezpo^ srednie przerabianie swiezej przysadki mózgowej unika sie stosowanego przy po¬ przednich metodach dlugotrwalego i nie¬ dogodnego suszenia, krajania oraz uciazli¬ wego mielenia suszonych gruczolów. Po¬ nadto caly proces przygotowania hormonu thyreotropowego sposobem wedlug wyna¬ lazku odbywa sie w temperaturze nie prze¬ kraczajacej +20°C, przy czym unika sie gotowania i odparowywania roztworów hor¬ monu, wrazliwego na wyzsze temperatury.Ponizej podaje sie szczególowy przy¬ klad otrzymywania hormonu thyreotropo¬ wego sposobem wedlug wynalazku, Przedni plat, wyluskany ze swiezej lub w stanie swiezym zamrozonej wolowej albo cielecej przysadki mózgowej, po usu¬ nieciu platu tylnego, miele sie dokladnie na miazge, która nastepnie zalewa sie 50%-ym alkoholem etylowym, zawierajacym 0,1%— 0,8% stezonego kwasu octowego na 1 litr alkoholu, w ilosci podwójnej w stosunku do wagi miazgi wzietej do przeróbki. Istot¬ ne znaczenie posiada koncowe stezenie wy¬ ciagu alkoholowego, w którym zawartosc alkoholu winna sie wahac w granicach 15% —30%, przy czym najlepsze wyniki uzy¬ skano przy stezeniu w granitach 20%— 22,5%. Mieszanine miazgi z alkoholem ety¬ lowym, uzyskana w ten sposób, miesza sie mechanicznie z przerwami w przeciagu 24 godzin a nastepnie wiruje na wirówce szyb¬ kobieznej. Ciecz zle*wa sie do odpowiednie¬ go naczynia i przechowuje w chlodni w temperaturze +3°—4°C, a pozostala miaz¬ ge rozrabia sie 22% -owym alkoholem w ilo¬ sci 1,5 objetosci na jednostke wagi, np. 1,5 1 alkoholu na 1 kg miazgi, w przeciagu 8— 12 godzin, nastepnie mieszanine poddaje odwirowywaniu, a otrzymany wtórny wy¬ ciag laczy z wyciagiem pierwszym.Przez zmieszanie polaczonych wyciagów o reakcji kwasnej z 10-ciokrotna iloscia al¬ koholu etylowego, zawierajacego 5%—10% alkoholu metylowego, straca sie substancje czynna wraz z bialkiem obojetnym. W wy¬ niku otrzymuje sie osad cielistego koloru, który po 12—18 godzinach opada na dno naczynia. Ciecz odlewa sie, osad przemy¬ wa kilkakrotnie na wirówce 96%-owym al¬ koholem etylowym z dodatkiem 5%—10% Aohdlu metylowego, a nastepnie eterem i suszy w temperaturze +15°—20°C pod cis¬ nieniem zmniejszonym. Proszek, otrzyma¬ ny w ten sposób, rozciera sie, po czym trak¬ tuje go rozcienczonym kwasem octoiwym o stezeniu jonów Wodorowych pH=3 i po¬ zostawia na kilkanascie godzin w chlodni, a w koncu poddaje odwirowywaniu. Ciecz zawierajaca hormon zlewa sie do naczynia, osad zas rozciera sie powtórnie z kwasem octowym o stezeniu jonów wodorowych pH=3 w ilosci okolo 54trotnej w stosunku do wagi osadu i poddaje odwirowywaniu.Oba wyciagi wodne z wirówki laczy sie ze soba i straca 10-krotna iloscia stezonego alkoholu etylowego z dodatkiem 5%—10% alkoholu metylowego. Caly zabieg opisany w niniejszym ustepie powtarza sie trzykrot¬ nie. W wyniku otrzymuje sie bialy proszek, rozpuszczajacy sie w kwasie octowym o stezeniu jonów wodorowych PH=3r lekko opalizujacy. Jeden miligram tego proszku zawiera 2—3 jednostki hormonu thyreotro¬ powego. Proszek ten przechowuje sie w ampulkach zatopionych, z których uprzed¬ nio usunieto powietrze.W celu otrzymania roztworu hormonu thyreotropowego, nadajacego sie do celów leczniczych, rozpuszcza sie otrzymany w powyzszy sposób proszek w kwasie octo¬ wym o stezeniu jonów wodorowych pH—3. — 2 —Ciecz pozostawia sie w chlodni na przeciag okolo 12 godzin, nastepnie poddaje odwi¬ rowywaniu w celu usuniecia nieznacznego osadu, po czym filtruje. Pfzefiltrowana ciecz, zawierajaca hormon thyreotropowy, oczyszcza sie przez przepuszczanie jej przez 2,5%-owy saczek z kolodium, przez który przechodzi hormon, natomiast obce substancje pozostaja na filtrze.Z przesaczu, otrzymanego w przedsta¬ wiony powyzej sposób i zawierajacego hor¬ mon thyreotropowy, mozna otrzymac hor¬ mon w roztworze o dowolnym stezeniu przez dalsze przepuszczanie przesaczu przez saczki z 10%-owego kolodium, które przy tym stezeniu przepuszcza wode i so¬ le, natomiast nie przepuszcza hormonu. PL

Claims (2)

1. Zastrzezenia patentowe. 1. Sposób otrzymywania hormonu thy- reotropowego z przedniego platu surowej wolowej lub cielecej przysadki mózgowej, znamienny tym, ze zmielona na miazge przysadke zalewa sie miniej wiecej 50%-ym roztworem wodnym alkoholu etylowego, za¬ wierajacym 0,1%—0,8% kwasu octowego, przy czym alkoholu bierze sie tyle, aby koncowe jego stezenie w wyciagu wynosilo 15%—30%, po czym wyciag traktuje sie 10-ciokrotna iloscia alkoholu etylowego* za¬ wierajacego 5%—10% alkoholu metylowe¬ go, a otrzymany osad odwirowuje i su¬ szy pod cisnieniem zmniejszonym.
2. 2. Sposób wedlug zastrz. 1, znamienny tym, ze w celu dalszego oczyszczania hor¬ monu thyreotropowego wysuszony i sprosz¬ kowany osad traktuje sie rozcienczonym kwasem octowym, a otrzymany roztwór przepuszcza sie najpierw przez 2,5%-owy, a nasleipnie przez 10%-owy saczek z ko¬ lodium. Panstwowy Zaklad Higieny Zastepca: dr A. Poniklo rzecznik patentowy 40248 PL