PL28676B1 - i jego pochodnych z adenozyny. - Google Patents

Description

Miesniowy kwas adenilowy jest estrem fosforowym adenozyny (furanorybozydu adeniny) i, jak wykazaly badania, reszta kwasu fosforowego znajduje sie przy 5- tym weglu d - rybozy. Miesniowy kwas a- denilowy wystepuje w narzadach zwierze¬ cych, cieczach ustrojowych i w drobno¬ ustrojach (np. w Bacterium coli, Bacte- rium Delbrucki, w drozdzach) glównie w postaci wyzszych polaczen fosforowych (kwasu adenozynodwufosforowego, kwasu adenozynotrój fosforowego, kozymazy). O- trzymywano go dotad wylacznie przez wy¬ dzielanie z wyzej wymienionych materia¬ lów badz w stanie wolnym, badz tez w postaci wspomnianych polaczen. Nie zna¬ no natomiast dotychczas sposobu otrzymy¬ wania miesniowego kwasu adenilowego i jego pochodnych na drodze syntetycznej.Przedmiot wynalazku niniejszego sta¬ nowi sposób wytwarzania miesniowego kwasu adenilowego z adenozyny. Adeno¬ zyna (nukleozyd adeniny) jest zwiazkiem latwo dostepnym. Uzyskuje sie ja z duzy¬ mi wydajnosciami przez hydrolize droz¬ dzowego kwasu nukleinowego, w którym znajduje sie w postaci kwasu adenozyno- - S - fosforowego (drozdzowego kwasu ade¬ nilowego), rózniacego sie od miesniowego kwasu adenilowego polozeniem reszty kwa¬ su fosforowego oraz wlasciwosciami biolo¬ gicznymi i farmakologicznymi.Synteze miesniowego kwasu adenilowe¬ go i jego pochodnych przeprowadza siewedlug wynalazku niniejszego na drodze enzymatycznej dzialaniem drozdzy, plesni i drobnoustrojów lub sporzadzonych z nich preparatów zaczynowych na mieszanine adenozyny i odpowiednich zwiazków fosfo¬ rowych. Odpowiednimi w tym sensie zwiaz¬ kami fosforowymi sa wszelkie rozpuszczal¬ ne w wodzie nieorganiczne sole kwasu fos¬ forowego oraz niektóre organiczne zwiaz¬ ki fosforowe, a mianowicie estry cukrowo- fosforowe i ich ufosforylowane produkty rozkladu, jak np. ester fosforowy kwasu glicerynowego. Jesli bedzie sie poddawalo np. mieszanine adenozyny i fosforanów nieorganicznych dzialaniu drozdzy albo plazmolizatów4 lub wyciagów drozdzowych, to nastepuje synteza miesniowego kwasu adenilowego. Jesli do mieszaniny reakcyj¬ nej oprócz fosforanów i adenozyny bedzie sie wprowadzalo cukry fermentujace, estry cukrowofosforowe albo ester fosforowy kwasu glicerynowego, to nastepuje synte¬ za pochodnych kwasu adenilowego, np. kofermentówfermentacji drozdzowej. Przy dodaniu estrów fosforowych nastepuje fos¬ forylacja adenozyny takze w nieobecnosci fosforanów nieorganicznych. Zamiast ade¬ nozyny mozna do syntezy miesniowego kwasu adenilowego uzyc takze tych sub¬ stancji, które rozkladaja sie na adenozyne (np. drozdzowego kwasu adenilowego lub roslinnego kwasu nukleinowego).Przyklad I. W 1 1 1/10 molarnego roz¬ tworu fosforanów nieorganicznych (fosfo¬ ranu sodu, potasu, amonu, magnezu) o Ph= 7 rozpuszcza sie 10g adenozyny, do¬ daje 300 g swiezych drozdzy i 20 cm3 to¬ luenu, miesza energicznie na trzesiarce i wstawia do termostatu o temperaturze 37°C. Co 15 minut oznacza sie na malych próbkach (1 cm3) ubytek fosforanu nieor¬ ganicznego. Z chwila, w której zwiazanie fosforanu nieorganicznego osiagnelo juz stopien maksymalny, przerywa sie reakcje przez zagotowanie lub odbialczenie miesza¬ niny reakcyjnej. Zagotowana lub odbial- czona ciecz przesacza sie; z przesac^j^B suwa sie niezwiazany nadmiar fosforafli nieorganicznych za pomoca wodorotlepl baru (przy stezeniu jonów wodorowycpB ph= 9) albo amoniaku i magnezu, pra sacza sie, a z przesaczu wydziela sie zjm nymi metodami miesniowy kwas adenilo^H Otrzymuje sie go z wydajnoscia wynosza¬ ca 7 — 10 g czystego kwasu adenilowego (adenozyno - 5 - fosforowego).Przyklad II. Wyzej opisana syntezy przeprowadza sie jak w przykladzie I, 2 ta jednak róznica, ze. zamiast swiezych drozdzy dodaje sie do mieszaniny adeno¬ zyny i fosforanów nieorganicznych (fosfo¬ ranu sodu, potasu, amonu, magnezu) lOfta drozdzy suszonych albo wyciag drozdzem wy, otrzymany badz ze 150 g drozdzy su¬ szonych, badz tez z 450 g drozdzy swie¬ zych splazmolizowanych za pomoca rofc puszczalników organicznych. Mieszanin! reakcyjna pozostawia sie w termostacie t« 37°C tak dlugo, az maksymalna ilosc fosfo ranów nieorganicznych ulegnie zwiazaniu, po czym przerywa sie reakcje zaczynowi przez zagotowanie lub odbialczenie. Otrzyi mana ciecz przesacza sie, a z przasaczi wydziela sie po usunieciu nadmiaru fosfcN ranu nieorganicznego miesniowy kwas ade- nilowy. Otrzymuje sie go z taka sama wy¬ dajnoscia, jak w przykladzie I.Przyklad III. W 1 1 1/5 molarnegi roztworu fosforanów nieorganicznych (fos¬ foranu sodu, potasu, amonu, magnezu) roz¬ puszcza sie 10 g adenozyny, 20 g cukn gronowego albo innego cukru fermentujace¬ go, dodaje 300 g drozdzy swiezych lub od¬ powiednia ilosc preparatów zaczynowydl (jak w przykladzie II) oraz 20 cm3 toluenu wstrzasa energicznie na trzesiarce i wsta¬ wia do termostatu o temperaturze 37°C. Ck 15 minut bada sie na próbkach stopien po¬ wstawania kwasów adenozynowielofosfd" rowych. Po osiagnieciu maksymalnego stoft nia syntezy przerywa sie reakcje i wydzfoh la znanymi metodami kwas a denozynodwtt- — 2 —fosforowy, adenozynotrójfosforowy i kozy- jnaze (polaczenia te sa kofermentami fer¬ mentacji drozdzowej). Otrzymuje sie okolo 20 g soli barowej kwaków adenozynowie- lofosforowych.Przyklad IV. Synteze wyzej opisana przeprowadza sie jak w przykladzie III, z ta jednak róznica, ze zamiast glukozy lub cukrów fermentujacych dodaje sie 20 g so¬ li sodowej kwasu fosfoglicerynowego albo tez 20 g soli sodowej jednego z estrów cu- krowofosforowych (estru fruktozo - 6 - fos¬ forowego Neuberga, glukozo - 6 - fosforo¬ wego Robisona, glukozo- lub fruktozo- - 1 - fosforowego, fruktozo-1-6- dwufos- forowego Hardena i Younga, lub tez estru Embdena, bedacego mieszanina estru glu¬ kozo - 6 - fosforowego i fruktozo - 6 - fos¬ forowego). Otrzymuje sie 20 — 25 g soli barowej kwasów adenozynowielofosforo- wych.Przyklad V." Wyzej opisana synteze przeprowadza sie jak w przykladzie I lub II, z ta jednak róznica, ze zamiast adeno¬ zyny uzywa sie* do syntezy drozdzowego kwasu adenilowego w ilosci 15 g. Podczas reakcji nastepuje pod dzialaniem uzytych preparatów zaczynowych stopniowy roz¬ klad drozdzowego kwasu adenilowego na adenozyne, która nastepnie przemienia sie na miesniowy kwas adenilowy. Otrzymuje sie okolo 5 g miesniowego kwasu adenilo¬ wego (adenozyno - 5 - fosforowego).Przyklad VI. 50 g roslinnego kwasu nukleinowego (drozdzowego) poddaje sie hydrolizie chemicznej lub zaczynowej, pro¬ wadzacej do otrzymania nukleozydów.Mieszanine nukleozydów przerabia sie w calosci (bez wyodrebnienia adenozyny) po zobojetnieniu jej odczynu na ph = 7 w sposób, podany w przykladzie I lub II.Obecnosc innych nukleozydów nie prze¬ szkadza syntezie, poniewaz w tych warun¬ kach reakcji tylko adenozyna ulega fosfo¬ rylacji. Otrzymuje sie miesniowy kwas adenilowy z wydajnoscia- taka sama, jak w przykladzie I. PL

Claims (1)

1. Zastrzezenie patentowe. Sposób wytwarzania miesniowego kwa¬ su adenilowego (adenozyno - 5 - fosforo¬ wego) i jego pochodnych z adenozyny, znamienny tym, ze wspomniana synteze przeprowadza sie na drodze enzymatycz¬ nej dzialaniem drozdzy, plesni i drobno¬ ustrojów lub sporzadzonych z nich prepa¬ ratów zaczynowych na. mieszanine adeno¬ zyny (wzglednie drozdzowego kwasu ade¬ nilowego lub roslinnego kwasu nukleinowe¬ go) i rozpuszczalnych w wodzie nieorga¬ nicznych soli kwasu fosforowego, ewentu¬ alnie z dodatkiem cukrów fermentujacych, albo organicznych zwiazków fosforowych, a mianowicie estrów cukrowofosforowych lub np. estru fosforowego kwasu glicery¬ nowego, w obecnosci lub nieobecnosci wy¬ mienionych fosforanów nieorganicznych. Pawel Ostern. PL