PL248280B1 - Sposób stymulacji wzrostu in vitro pędów bocznych chryzantemy wielkokwiatowej z zastosowaniem pożywki z dodatkiem tlenku cynku, nanocząstek tlenku cynku, lub nanocząstek tlenku cynku i nanocząstek srebra - Google Patents

Sposób stymulacji wzrostu in vitro pędów bocznych chryzantemy wielkokwiatowej z zastosowaniem pożywki z dodatkiem tlenku cynku, nanocząstek tlenku cynku, lub nanocząstek tlenku cynku i nanocząstek srebra

Info

Publication number
PL248280B1
PL248280B1 PL445347A PL44534723A PL248280B1 PL 248280 B1 PL248280 B1 PL 248280B1 PL 445347 A PL445347 A PL 445347A PL 44534723 A PL44534723 A PL 44534723A PL 248280 B1 PL248280 B1 PL 248280B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
zinc oxide
nzno
nanoparticles
medium
hours
Prior art date
Application number
PL445347A
Other languages
English (en)
Other versions
PL445347A1 (pl
Inventor
Alicja Tymoszuk
Urszula Szałaj
Jacek WOJNAROWICZ
Jacek Wojnarowicz
Original Assignee
Politechnika Bydgoska Im. Jana I Jędrzeja Śniadeckich
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Politechnika Bydgoska Im. Jana I Jędrzeja Śniadeckich filed Critical Politechnika Bydgoska Im. Jana I Jędrzeja Śniadeckich
Priority to PL445347A priority Critical patent/PL248280B1/pl
Publication of PL445347A1 publication Critical patent/PL445347A1/pl
Publication of PL248280B1 publication Critical patent/PL248280B1/pl

Links

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A01AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01HNEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
    • A01H4/00Plant reproduction by tissue culture techniques ; Tissue culture techniques therefor
    • A01H4/002Culture media for tissue culture
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A01AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01GHORTICULTURE; CULTIVATION OF VEGETABLES, FLOWERS, RICE, FRUIT, VINES, HOPS OR SEAWEED; FORESTRY; WATERING
    • A01G22/00Cultivation of specific crops or plants not otherwise provided for
    • A01G22/60Flowers; Ornamental plants
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A01AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01HNEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
    • A01H4/00Plant reproduction by tissue culture techniques ; Tissue culture techniques therefor
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A01AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01PBIOCIDAL, PEST REPELLANT, PEST ATTRACTANT OR PLANT GROWTH REGULATORY ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR PREPARATIONS
    • A01P21/00Plant growth regulators
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N5/00Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
    • C12N5/0018Culture media for cell or tissue culture
    • C12N5/0025Culture media for plant cell or plant tissue culture
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N5/00Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
    • C12N5/04Plant cells or tissues

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Developmental Biology & Embryology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Pest Control & Pesticides (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

Przedmiotem zgłoszenia jest sposób stymulacji wzrostu in vitro pędów bocznych chryzantemy wielkokwiatowej z zastosowaniem pożywki z dodatkiem tlenku cynku, nanocząstek tlenku cynku lub nanocząstek tlenku cynku i nanocząstek srebra, mający zastosowanie w produkcji sadzonek oraz hodowli tego gatunku do polepszania wskaźników efektywności mikrorozmnażania. Sposób polega na tym, że wyizolowane eksplantaty w postaci jednowęzłowych fragmentów pędu wykłada się w sterylnych warunkach na standardową pożywkę MS, kolejno nanosi się z wykorzystaniem pipety automatycznej, w objętości 0,5 ml na każdy eksplantat, zawiesinę wodną tlenku cynku (ZnO-240nm), nanocząstek tlenku cynku (nZnO-25nm lub nZnO-65nm) lub nanocząstek tlenku cynku i nanocząstek srebra (nZnO+n0,1%Ag-29nm, nZnO+n0,1%Ag-79nm, nZnO+n1%Ag-27nm lub nZnO+n1%Ag-53nm) w stężeniu 100-400 mg•dm-3 i następnie założone kultury in vitro, w celu wzrostu pędów bocznych z eksplantatów, umieszcza się na okres 8 tygodni w pokoju wzrostowym w temperaturze 22°C - 24°C, w warunkach fotoperiodu z 16 godzinami dnia i 8 godzinami nocy, przy natężeniu napromienienia kwantowego światła w zakresie 35-40 µmol•m-2•s-1.

Description

Opis wynalazku
Sposób stymulacji wzrostu in vitro pędów bocznych chryzantemy wielkokwiatowej z zastosowaniem pożywki z dodatkiem tlenku cynku, nanocząstek tlenku cynku, lub nanocząstek tlenku cynku i nanocząstek srebra.
Przedmiotem rozwiązania według wynalazku jest sposób stymulacji wzrostu pędów bocznych rozwijających się z jednowęzłowych fragmentów pędu u chryzantemy wielkokwiatowej (Chrysanthemum χ morifolium (Ramat.) Hemsl.) w warunkach kultury in vitro z wykorzystaniem pożywki z dodatkiem zawiesiny wodnej tlenku cynku, nanocząstek tlenku cynku lub nanocząstek tlenku cynku i nanocząstek srebra, pozwalający na osiągnięcie wyższych współczynników mikrorozmnażania w produkcji sadzonek i hodowli tego gatunku, mający zastosowanie w produkcji sadzonek oraz hodowli tego gatunku do polepszania wskaźników efektywności mikrorozmnażania.
Chryzantema wielkokwiatowa to jedna z najbardziej popularnych i ważnych gospodarczo roślin ozdobnych na rynku ogrodniczym w Polsce i na świecie. Chryzantemy produkowane są pod osłonami z przeznaczeniem na kwiat cięty lub jako rośliny doniczkowe, ale mogą być uprawiane także w gruncie. Gatunek ten ma ponadto ważne znaczenie jako roślina zielarska, ze względu na zawartość cennych metabolitów o działaniu aseptycznym, przeciwutleniającym, przeciwzapalnym oraz antynowotworowym (Gu i in. 2022; https://doi.org/10.1016Zj.sajb.2022.04.009).
Kultury in vitro, jako ważne narzędzie biotechnologii, umożliwiają szybką i wydajną produkcję sadzonek. Rośliny są rozmnażane w sterylnych warunkach laboratoryjnych, na specjalnie przygotowanych pożywkach wzrostowych, przy pełnej kontroli warunków świetlnych i termicznych. Uzyskane na tej drodze rośliny cechują się wysoką jakością i zdrowotnością, i są następnie uprawiane w warunkach naturalnych. Ze względu na swoją popularność i wynikające z tego duże zapotrzebowanie na rynku ogrodniczym na sadzonki, chryzantema wielkokwiatowa jest reprodukowana głównie w kulturach in vitro. Tradycyjne metody produkcji sadzonek chryzantem mają obecnie mniejsze znaczenie (Keresa i in. 2012; https://doi:10.5897/AJ B10.1976).
Jedną ze stosowanych w laboratoryjnej produkcji sadzonek metod mikrorozmnażania jest metoda jednowęzłowych fragmentów pędu, polegająca na poprzecznym dzieleniu pędów na eksplantaty w postaci segmentów zawierających węzeł, czy miejsce, z którego na pędzie wyrasta liść. W kącie liścia znajduje się pąk boczny, który po wyizolowaniu eksplantatu i umieszczeniu na pożywce, uaktywnia się i rozwija się z niego pęd boczny. Wydajność mikrorozmnażania w tym przypadku jest umiarkowana i wynosi około pięciu sadzonek z jednej wyjściowej rośliny, ale rozmnożone w ten sposób rośliny potomne cechują się wysoką stabilnością genetyczną i fenotypową, co ma szczególne znaczenie w produkcji wyrównanego materiału roślinnego do dalszej uprawy ex vitro. Metoda jednowęzłowych fragmentów pędu wykorzystywana jest także w hodowli roślin, w celu namnożenia cennych pojedynków/mutantów oraz do utrzymywania roślinnych banków genów in vitro (Zalewska i in. 2012).
Cynk jest niezbędnym mikroelementem wpływającym na przebieg wielu procesów fizjologicznych oraz prawidłowy wzrost i rozwój roślin. Z tych względów jego sole są składnikiem pożywek do mikrorozmnażania, a także znajdują się w składzie stałych i płynnych nawozów wykorzystywanych w uprawie tradycyjnej (in vivo) roślin. Pierwiastek ten wpływa na aktywność wielu enzymów i hormonów roślinnych, regulując tym samym metabolizm komórkowy, ekspresję genów, aktywność fotosyntetyczną, akumulację biomasy, a tym samym rozwój pędów i korzeni (da Cruz i in. 2019; https://doi.org/10.1038/s41598019-46796-3).
Z opisu patentowego PL 236740 znany jest sposób wytwarzania preparatu nawozowego mikroelementowego, mającego formę płynną lub sypką rozpuszczalną w wodzie, który stanowi co najmniej jeden skompleksowany metal, wybrany z grupy obejmującej żelazo, miedź, cynk, mangan, preparat nawozowy mikroelementowy, mający formę płynną lub sypką rozpuszczalną w wodzie, który stanowi co najmniej jeden skompleksowany metal, wybrany z grupy obejmującej żelazo, miedź, cynk, mangan, oraz zastosowanie preparatu nawozowego mikroelementowego w formie płynnej lub sypkiej rozpuszczalnej w wodzie, który stanowi co najmniej jeden skompleksowany metal, wybrany z grupy obejmującej żelazo, miedź, cynk, mangan, w uprawie roślin w warunkach in vivo, w ogrodnictwie, sadownictwie, warzywnictwie i uprawach specjalistycznych.
Z opisu patentowego PL 216317 znany jest sposób wytwarzania nawozu cynkowego oraz nawóz cynkowy w formie zawiesiny zawierającej tlenek cynku, nieorganiczne i organiczne nawozowe składniki cynkowe oraz substancje pomocnicze. Organiczne nawozowe składniki cynkowe stanowią produkt reakcji współkompleksowania cynku z tlenku cynku przynajmniej jedną solą kwasu EDTA, kwasem EDTA i kwasem cytrynowym, prowadzonej w roztworze wodnym nieorganicznej soli cynku przy stechiometrycznym nadmiarze cynku. Nawóz ma pH 7,0-7,5 i zawiera od 740 do 760 g cynku całkowitego w 1 litrze zawiesiny, w tym 2,4-2,7% cynku całkowitego w postaci chelatów kwasu EDTA, 3-3,3% cynku całkowitego w postaci kompleksu kwasu cytrynowego i 1-1,4% cynku całkowitego w postaci soli nieorganicznej oraz substancje pomocnicze, które stanowią od 9 do 11% m/m zawiesiny, w tym 0,05-0,07% m/m organicznych emulgatorów i stabilizatorów, 5-5,5% m/m chlorku magnezu i 1,3-1,4% m/m mocznika. W opisie podano zastosowanie niniejszego nawozu cynkowego w uprawie in vivo roślin.
W opisie patentowym PL 228769 opisano nawóz dolistny zawierający mikroelementy i nanocząstki srebra, który składa się z: niejonowych nanocząstek srebra w postaci koloidalnej w ilości od 0,01 do 0,1% wag., niejonowych nanocząstek miedzi w postaci koloidalnej w ilości od 0,01 do 0,1% wag. oraz co najmniej jednego mikroelementu spośród: boru w ilości od 0,1 do 0,5% wag., miedzi w ilości od 0,05 do 0,2% wag., żelaza w ilości od 2 do 3% wag., manganu w ilości od 0,5 do 1,3% wag., molibdenu w ilości od 0,01 do 0,1% wag., cynku w ilości od 0,1 do 0,5% wag. oraz wody, przy czym udział mikroelementu jest podany w przeliczeniu na ten mikroelement.
Dokument CN105061079A ujawnia zastosowanie nawozu nanocynkowego do zwiększania akumulacji cynku w jadalnych częściach roślin uprawnych. Nawóz nanocynkowy powstaje przez zmieszanie następujących składników w procentach masowych: nanozawiesina 1-4 g-dm-3, nawóz cynkowy 0,1-3 g-dm-3 i woda, przy czym średnica cząstek miceli nawozu nanocynkowego wynosi 1-100nm. Wchłanianie i wykorzystanie składników odżywczych przez rośliny jest potęgowane przez efekt nanomałych rozmiarów, dzięki czemu poprawia się efektywność wykorzystania nawozu; opryskiwanie przeprowadza się w okresie kwitnienia upraw, dzięki czemu plony upraw i zawartość cynku w jadalnych częściach uprawianych roślin ulegają znacznemu zwiększeniu, a zatem można wytwarzać wysokiej jakości produkty rolne bogate w cynk.
Nie jest znany w dostępnym stanie techniki sposób stymulacji wzrostu n vitro pędów bocznych z jednowęzłowych fragmentów pędu chryzantemy wielkokwiatowej z wykorzystaniem dodatku do pożywki tlenku cynku, nanocząstek tlenku cynku lub nanocząstek tlenku cynku i nanocząstek srebra w zawiesinie wodnej, będący analogicznym do przedstawionego przedmiotu wynalazku.
Istotą rozwiązania według wynalazku jest sposób stymulacji wzrostu in vitro pędów bocznych chryzantemy wielkokwiatowej polegający na tym, że wyizolowane eksplantaty w postaci jednowęzłowych fragmentów pędu wykłada się w sterylnych warunkach na standardową pożywkę MS, kolejno na każdy eksplantat nanosi się z wykorzystaniem pipety automatycznej, w objętości 0,5 ml, zawiesinę wodną tlenku cynku ZnO o rozmiarze cząstek 240nm:ZnO-240nm, w stężeniu 100-400 mg-dm-3, kolejno założone kultury in vitro umieszcza się na okres 8 tygodni w pokoju wzrostowym w temperaturze 22-24°C, w warunkach fotoperiodu z 16 godzinami dnia i 8 godzinami nocy, przy natężeniu napromienienia kwantowego światła w zakresie 35-40 μmol- m-2-s-1.
Sposób stymulacji wzrostu in vitro pędów bocznych chryzantemy wielkokwiatowej z zastosowaniem pożywki z dodatkiem nanocząstek tlenku cynku, polega na tym, że wyizolowane eksplantaty w postaci jednowęzłowych fragmentów pędu wykłada się w sterylnych warunkach na standardową pożywkę MS, kolejno na każdy eksplantat nanosi się z wykorzystaniem pipety automatycznej, w objętości 0,5 ml, zawiesinę wodną nanocząstek tlenku cynku:nZnO o rozmiarze cząstek 25nm:nZnO-25nm lub 65nm:nZnO-65nm, w stężeniu 100-400 mg-dm-3, kolejno założone kultury in vitro umieszcza się na okres 8 tygodni w pokoju wzrostowym w temperaturze 22-24°C, w warunkach fotoperiodu z 16 godzinami dnia i 8 godzinami nocy, przy natężeniu napromienienia kwantowego światła w zakresie 35-40 μmol-m-2-s-1.
Sposób stymulacji wzrostu in vitro pędów bocznych chryzantemy wielkokwiatowej z zastosowaniem pożywki z dodatkiem nanocząstek tlenku cynku i 0,1 lub 1% zawiesiny nanocząstek srebra, polega na tym, że wyizolowane eksplantaty w postaci jednowęzłowych fragmentów pędu wykłada się w sterylnych warunkach na standardową pożywkę MS, kolejno na każdy eksplantat nanosi się z wykorzystaniem pipety automatycznej, w objętości 0,5 ml, zawiesinę wodną nanocząstek tlenku cynku i nanocząstek srebra: nZnO+nAg, o rozmiarze cząstek 29nm lub 79nm o stężeniu 0,1% nanocząstek srebra, albo o rozmiarze cząstek 27nm lub 53nm o stężeniu 1% nanocząstek srebra,w stężeniu 100-400 mg-dm-3, kolejno założone kultury in vitro umieszcza się na okres 8 tygodni w pokoju wzrostowym w temperaturze 22-24°C, w warunkach fotoperiodu z 16 godzinami dnia i 8 godzinami nocy, przy natężeniu napromienienia kwantowego światła w zakresie 35-40 μmol-m-2-s-1.
Charakterystykę użytych próbek proszków zamieszczono w tabeli nr 1.
PL 248280 Β1
Tabela 1. Charakterystyka użytych próbek.
Gęstość Powierzchnia Średni rozmiar
cząstek wyliczony z gęstości Zawartość wagowa
Nazwa próbki szkieletowa właściwa, szkieletowej i srebra (%)
ps±o (gcm-3) as (m2-g-1) powierzchni właściwiej d±o (nm)
ZnO-240nm 5,59 ±0,03 4,5 ±0,45 240 ± 30 -
nZnO-25nm 5,09 ±0,06 48,4 ±4,8 25 ±5 -
nZnO-65nm 5,38 ±0,05 17,2 ± 1,7 65 ±6 -
nZnO+n0,1 %Ag-29nm 5,16 ±0,07 40,0 ±4,0 29 ±5 0,119 ± 0,012
nZnO+n0,1 %Ag-79nm 5,37 ±0,06 14,2 ±1,4 79 ±5 0,199 ±0,020
nZnO+n1%Ag-27nm 5,05 ±0,05 44,4 ±4,4 27 ±5 1,255 ±0,126
nZnO+n1 %Ag-53nm 5,31±0,09 21,4 ±2,1 53 ±5 1,387 ±0,139
Zawiesiny wodne tlenku cynku, nanocząstek tlenku cynku lub nanocząstek tlenku cynku i nanocząstek srebra przygotowuje się bezpośrednio przed użyciem i umieszcza się je na okres 20 minut w myjce ultradźwiękowej o częstotliwości ultradźwięków 37 kHz i ultradźwiękowej wydajności skutecznej 150, w celu uzyskania wysokiej dyspersji cząsteczek. Następnie założone kultury in vitro umieszcza się na okres 8 tygodni w pokoju wzrostowym w temperaturze 22-24°C, w warunkach fotoperiodu z 16 godzinami dnia i 8 godzinami nocy, przy natężeniu napromienienia kwantowego światła w zakresie 35-40 pmol m‘21.
Zaletami rozwiązania wg wynalazku jest dwukrotnie intensywniejszy wzrost in vitro części pędowej oraz części korzeniowej roślin oraz dwukrotne zwiększenie współczynników mikrorozmnażania chryzantemy wielkokwiatowej in vitro metodą jednowęzłowych fragmentów pędu, co jest istotne z punktu widzenia produkcji sadzonek, jak i też hodowli, oraz brak objawów fitotoksyczności zastosowanych próbek materiałowych.
Sposób według wynalazku zobrazowano w przykładach realizacji.
Przykład 1
Sposób stymulacji wzrostu in vitro pędów bocznych chryzantemy wielkokwiatowej przebiega kolejno w etapach:
1. W komorze z laminarnym przepływem sterylnego powietrza izoluje się, z rozwiniętych wcześniej w kulturze in vitro mikrosadzonek, eksplantaty w postaci jednowęzłowej fragmentów pędu.
2. Przygotowane eksplantaty wykłada się na powierzchnię standardowej pożywki MS.
3. Na każdy eksplantat nanosi się, używając pipety automatycznej, po 0,5 ml zawiesiny wodnej tlenku cynku ZnO-240nm o stężeniu 100 mgdnr3.
4. Kultury in vitro umieszcza się na okres 8 tygodni w pokoju wzrostowym o temperaturze 22°C, w warunkach fotoperiodu z 16 godzinami dnia i 8 godzinami nocy, przy natężeniu napromienienia kwantowego światła równym 35 pmol m‘21.
Przykład 2
Sposób stymulacji wzrostu in vitro pędów bocznych chryzantemy wielkokwiatowej przebiega kolejno w etapach:
1. W komorze z laminarnym przepływem sterylnego powietrza izoluje się, z rozwiniętych wcześniej w kulturze in vitro mikrosadzonek, eksplantaty w postaci jednowęzłowej fragmentów pędu.
2. Przygotowane eksplantaty wykłada się na powierzchnię standardowej pożywki MS.
3. Na każdy eksplantat nanosi się, używając pipety automatycznej, po 0,5 ml zawiesiny wodnej nanocząstek tlenku cynku nZnO-25nm o stężeniu 200 mg-dm-3.
4. Kultury in vitro umieszcza się na okres 8 tygodni w pokoju wzrostowym o temperaturze 23°C, w warunkach fotoperiodu z 16 godzinami dnia i 8 godzinami nocy, przy natężeniu napromienienia kwantowego światła równym 35 μmol-m-2-s-1.
Przykład 3
Sposób stymulacji wzrostu in vitro pędów bocznych chryzantemy wielkokwiatowej przebiega kolejno w etapach:
1. W komorze z laminarnym przepływem sterylnego powietrza izoluje się, z rozwiniętych wcześniej w kulturze in vitro mikrosadzonek, eksplantaty w postaci jednowęzłowej fragmentów pędu.
2. Przygotowane eksplantaty wykłada się na powierzchnię standardowej pożywki MS.
3. Na każdy eksplantat nanosi się, używając pipety automatycznej, po 0,5 ml zawiesiny wodnej nanocząstek tlenku cynku i nanocząstek srebra nZnO+n0,1%Ag-79nm o stężeniu 300 mg-dm-3.
4. Kultury in vitro umieszcza się na okres 8 tygodni w pokoju wzrostowym o temperaturze 24°C, w warunkach fotoperiodu z 16 godzinami dnia i 8 godzinami nocy, przy natężeniu napromienienia kwantowego światła równym 40 μmol-m-2-s-1.
Przykład 4
Sposób stymulacji wzrostu in vitro pędów bocznych chryzantemy wielkokwiatowej przebiega kolejno w etapach:
1. W komorze z laminarnym przepływem sterylnego powietrza izoluje się, z rozwiniętych wcześniej w kulturze in vitro mikrosadzonek, eksplantaty w postaci jednowęzłowej fragmentów pędu.
2. Przygotowane eksplantaty wykłada się na powierzchnię standardowej pożywki MS.
3. Na każdy eksplantat nanosi się, używając pipety automatycznej, po 0,5 ml zawiesiny wodnej nanocząstek tlenku cynku i nanocząstek srebra nZnO+n1%Ag-27nm o stężeniu 400 mg-dm-3.
4. Kultury in vitro umieszcza się na okres 8 tygodni w pokoju wzrostowym o temperaturze 24°C, w warunkach fotoperiodu z 16 godzinami dnia i 8 godzinami nocy, przy natężeniu napromienienia kwantowego światła równym 40 μmol-m-2-s-1.

Claims (3)

1. Sposób stymulacji wzrostu in vitro pędów bocznych chryzantemy wielkokwiatowej z zastosowaniem pożywki z dodatkiem tlenku cynku, znamienny tym, że wyizolowane eksplantaty w postaci jednowęzłowych fragmentów pędu wykłada się w sterylnych warunkach na standardową pożywkę MS, kolejno na każdy eksplantat nanosi się z wykorzystaniem pipety automatycznej, w objętości 0,5 ml, zawiesinę wodną tlenku cynku ZnO o rozmiarze cząstek 240nm:ZnO-240nm, w stężeniu 100-400 mg-dm-3, kolejno założone kultury in vitro umieszcza się na okres 8 tygodni w pokoju wzrostowym w temperaturze 22-24°C, w warunkach fotoperiodu z 16 godzinami dnia i 8 godzinami nocy, przy natężeniu napromienienia kwantowego światła w zakresie 35-40 μmol-m-2-s-1.
2. Sposób stymulacji wzrostu in vitro pędów bocznych chryzantemy wielkokwiatowej z zastosowaniem pożywki z dodatkiem nanocząstek tlenku cynku, znamienny tym, że wyizolowane eksplantaty w postaci jednowęzłowych fragmentów pędu wykłada się w sterylnych warunkach na standardową pożywkę MS, kolejno na każdy eksplantat nanosi się z wykorzystaniem pipety automatycznej, w objętości 0,5 ml, zawiesinę wodną nanocząstek tlenku cynku nZnO o rozmiarze cząstek 25nm:nZnO-25nm lub 65nm:nZnO-65nm, w stężeniu 100-400 mg-dm-3, kolejno założone kultury in vitro umieszcza się na okres 8 tygodni w pokoju wzrostowym w temperaturze 22-24°C, w warunkach fotoperiodu z 16 godzinami dnia i 8 godzinami nocy, przy natężeniu napromienienia kwantowego światła w zakresie 35-40 μmol-m-2-s-1.
3. Sposób stymulacji wzrostu in vitro pędów bocznych chryzantemy wielkokwiatowej z zastosowaniem pożywki z dodatkiem nanocząstek tlenku cynku i 0,1 lub 1% zawiesiną nanocząstek srebra, znamienny tym, że wyizolowane eksplantaty w postaci jednowęzłowych fragmentów pędu wykłada się w sterylnych warunkach na standardową pożywkę MS, kolejno na każdy eksplantat nanosi się z wykorzystaniem pipety automatycznej, w objętości 0,5 ml, zawiesinę wodną nanocząstek tlenku cynku i nanocząstek srebra: nZnO+nAg, o rozmiarze cząstek 29nm
6 PL 248280 B1 lub 79nm o stężeniu 0,1% nanocząstek srebra, albo o rozmiarze cząstek 27nm lub 53nm o stężeniu 1% nanocząstek srebra w stężeniu 100-400 mg-dm-3, kolejno założone kultury in vitro umieszcza się na okres 8 tygodni w pokoju wzrostowym w temperaturze 22-24°C, w warunkach fotoperiodu z 16 godzinami dnia i 8 godzinami nocy, przy natężeniu napromienienia kwantowego światła w zakresie 35-40 μmol·m2s1.
PL445347A 2023-06-23 2023-06-23 Sposób stymulacji wzrostu in vitro pędów bocznych chryzantemy wielkokwiatowej z zastosowaniem pożywki z dodatkiem tlenku cynku, nanocząstek tlenku cynku, lub nanocząstek tlenku cynku i nanocząstek srebra PL248280B1 (pl)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PL445347A PL248280B1 (pl) 2023-06-23 2023-06-23 Sposób stymulacji wzrostu in vitro pędów bocznych chryzantemy wielkokwiatowej z zastosowaniem pożywki z dodatkiem tlenku cynku, nanocząstek tlenku cynku, lub nanocząstek tlenku cynku i nanocząstek srebra

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PL445347A PL248280B1 (pl) 2023-06-23 2023-06-23 Sposób stymulacji wzrostu in vitro pędów bocznych chryzantemy wielkokwiatowej z zastosowaniem pożywki z dodatkiem tlenku cynku, nanocząstek tlenku cynku, lub nanocząstek tlenku cynku i nanocząstek srebra

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL445347A1 PL445347A1 (pl) 2024-12-30
PL248280B1 true PL248280B1 (pl) 2025-11-17

Family

ID=97676625

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL445347A PL248280B1 (pl) 2023-06-23 2023-06-23 Sposób stymulacji wzrostu in vitro pędów bocznych chryzantemy wielkokwiatowej z zastosowaniem pożywki z dodatkiem tlenku cynku, nanocząstek tlenku cynku, lub nanocząstek tlenku cynku i nanocząstek srebra

Country Status (1)

Country Link
PL (1) PL248280B1 (pl)

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
PL197338B1 (pl) * 2000-02-25 2008-03-31 Szkola Glowna Gospod Wiejsk Ak Sposób klonalnego rozmnażania roślin
CN109548654A (zh) * 2018-12-27 2019-04-02 山水环境科技股份有限公司 一种利用AgNO3诱导菊花叶片不定芽再生的方法
CN111955349A (zh) * 2020-09-08 2020-11-20 广东生态工程职业学院 增城蜜菊的专用抗菌生根培养基及其配制和生根培养方法
PL433731A1 (pl) * 2020-04-28 2021-11-02 Uniwersytet Technologiczno-Przyrodniczy im. Jana i Jędrzeja Śniadeckich w Bydgoszczy Sposób dezynfekcji powierzchniowej eksplantatów wierzchołkowych i węzłowych roślin

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
PL197338B1 (pl) * 2000-02-25 2008-03-31 Szkola Glowna Gospod Wiejsk Ak Sposób klonalnego rozmnażania roślin
CN109548654A (zh) * 2018-12-27 2019-04-02 山水环境科技股份有限公司 一种利用AgNO3诱导菊花叶片不定芽再生的方法
PL433731A1 (pl) * 2020-04-28 2021-11-02 Uniwersytet Technologiczno-Przyrodniczy im. Jana i Jędrzeja Śniadeckich w Bydgoszczy Sposób dezynfekcji powierzchniowej eksplantatów wierzchołkowych i węzłowych roślin
CN111955349A (zh) * 2020-09-08 2020-11-20 广东生态工程职业学院 增城蜜菊的专用抗菌生根培养基及其配制和生根培养方法

Also Published As

Publication number Publication date
PL445347A1 (pl) 2024-12-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Sallaku et al. The influence of vermicompost on plant growth characteristics of cucumber (Cucumis sativus L.) seedlings under saline conditions
JP3298633B2 (ja) 植物にエネルギ、炭素骨格および栄養剤を与える方法
CN107896986A (zh) 一种高质量泥炭藓快速繁殖方法
Hakim et al. Season, basal media and plant growth regulators effect in wood plant in vitro propagation: a comprehensive review
US7932086B2 (en) Commercially viable process for in vitro mass culture of Jatropha curcas
KR100505936B1 (ko) 사탕수수 생산
JPH0322934A (ja) 植物苗の製造方法
Badrelden Establishment of in Direct Propagation of Mandarin (Citrus reticulata L) using tissue culture
PL248280B1 (pl) Sposób stymulacji wzrostu in vitro pędów bocznych chryzantemy wielkokwiatowej z zastosowaniem pożywki z dodatkiem tlenku cynku, nanocząstek tlenku cynku, lub nanocząstek tlenku cynku i nanocząstek srebra
AU2007200693A1 (en) Commercially viable process for in-vitro mass culture of Jatropha curcas
CN103688861B (zh) 一种东方百合组培苗壮苗的方法
Laily et al. Optimizing micropropagation of Indonesian conserved orchid Vanda celebica using organic compounds and a temporary immersion system
Rachmawati et al. Shoot tips derived-somatic embryogenesis in mass propagation of Dendrobium Indonesia Raya'Ina'.
CN1382014A (zh) Acacia mangium的体细胞胚发生再生
Gangani et al. Effect of different IBA concentration and rooting media on Zamioculcas zamiifolia L
Abbas et al. Effect of AgNps and different sources of Zinc on rooting and acclimation of strawberry (Fragaria ananassa Duch) cv. Rubygem in vitro.
Micheli et al. Synthetic seeds of two aquatic plants
CN108353789B (zh) 一种葡萄果实愈伤组织的诱导方法及其培养基
Rakhimzhanova et al. In vitro culture of foreign and local Panicum virgatum and Panicum miliaceum cultivars
Shah et al. Biotechnology approach to the production of phytochemicals: An introduction
JPH08308412A (ja) フタバガキ科樹木の組織培養による多芽体作出法
RU2834051C1 (ru) Способ размножения катальпы бигнониевидной (Catalpa bignonioides)
Marir PIMPINELLA ANISUM IN VITRO PROPAGATION AND ITS TRANS-ANETHOLE OIL YIELD IN CALLUS INDUCED IN GROWING TIP WITH BIOTIC ELICITORS.
Aliabad et al. The Influence of Growth Regulators on In-Vitro Culture of Rosa Hybrida
Marir Propagation of Pimpinella anisum L. in vitro and its trans-anethole oil yield in callus induced in growing tip under influence of biotic elicitors