PL248049B1

PL248049B1 - Sposoby otrzymywania związku stanowiącego pochodną C20-aminosalinomycyny

Info

Publication number: PL248049B1
Application number: PL448768A
Authority: PL
Inventors: Dominika CZERWONKA; Dominika Czerwonka; Julia Krzywik; Tomasz Sobierajski; Greta Klejborska; Małgorzata Ullrich; Witold MOZGA; Witold Mozga; Adam Huczyński; Przemysław Pilaszek
Original assignee: Fileclo Spolka Z Ograniczona Odpowiedzialnoscia
Priority date: 2021-08-05
Filing date: 2021-08-05
Publication date: 2025-10-06
Also published as: PL448768A1

Abstract

Przedmiotem zgłoszenia jest związek stanowiący pochodną C20-aminosalinomycyny oraz sposób jego otrzymywania. Jest to związek pośredni w sposobie otrzymywania modyfikowanych w pozycji C20 pochodnych salinomycyny do zastosowania jako lek.

Description

Przedmiotem wynalazku są sposoby otrzymywania związku stanowiącego pochodną C20-aminosalinomycyny będącego związkiem pośrednim do syntezy pojedynczo modyfikowanych pochodnych salinomycyny w pozycji C20, mających zastosowanie jako lek, zwłaszcza jako środek przeciwnowotworowy.

Jednym z najbardziej eksploatowanych sposobów poszukiwania nowych leków onkologicznych jest chemiczna modyfikacja związków pochodzenia naturalnego o udowodnionej, wysokiej aktywności biologicznej. Salinomycyna jest powszechnie stosowanym w weterynarii naturalnym polieterowym antybiotykiem jonoforowym izolowanym ze Streptomycesalbus o wzorze (FLC-00001):

Salinomycyna znana jest z wysokiej aktywności przeciwdrobnoustrojowej, ale także przeciwnowotworowej. W testach in vitroorazin i/ń/o salinomycyna wykazuje skuteczność w walce z różnorodnymi komórkami nowotworowymi, w tym komórkami lekoopornymi oraz macierzystymi komórkami nowotworowymi. Mechanizm biologicznego działania salinomycyny związany jest ze zdolnością tego związku do selektywnego kompleksowania kationów metali, głównie kationów sodu oraz potasu, a następnie do przenoszenia ich poprzez błony biologiczne. Prowadzi to do zaburzenia równowagi kationowej w komórce, zmian wewnątrzkomórkowego pH, a finalnie skutkuje śmiercią komórki. Wysoka aktywność przeciwnowotworowa salinomycyny związana jest również z oddziaływaniem tego związku na różnorodne cele molekularne oraz szlaki sygnalizacyjne, w tym AMPK, MAPK, VEGF czy też Wnt/p-katenina. Salinomycyna została z powodzeniem zastosowana na niewielkiej grupie pacjentów z zaawansowanym nowotworem głowy, szyi, piersi orazjajników. Terapia z użyciem salinomycyny skutkowała zahamowaniem postępu choroby nowotworowej z jednoczesnym brakiem ostrych skutków ubocznych jej stosowania, co udowadnia wysoki potencjał terapeutyczny tego związku.

W zgłoszeniu patentowym EP3191493 oraz publikacji naukowej [Mai etal., Naturę Chemistry, 9, 2017, 1025-1033] ujawniono aminowe pochodne salinomycyny otrzymane w pozycji C-20. W testach in vitro niektóre związki charakteryzowały się wyższą aktywnością przeciwnowotworowa oraz selektywnością działania wobec macierzystych komórek nowotworowych CD24, a także zdolnością do hamowania tworzenia mammosfer w porównaniu do wyjściowej salinomycyny. Użycie aminowych pochodnych salinomycyny w pozycji C20 skutkowało również zmniejszeniem objętości oraz masy guzów u myszy ze wszczepionym ludzkim nowotworem piersi MCF-7. Wysoka aktywność przeciwnowotworowa tych pochodnych związana jest z ich zdolnością do wywoływania ferroptozy - programowanej śmierci komórki zależnej od zawartości kationów żelaza. Wyniki badań zamieszczone w zgłoszeniu patentowym EP3191493 oraz publikacji naukowej [Mai et al., Naturę Chemistry, 9, 2017, 1025-1033] odnoszą się wyłącznie do badań in vivo przeprowadzonych na myszach. Organizm myszy istotnie różni się od organizmu człowieka, a więc niemożliwe jest proste przełożenie rezultatów tych badań na rzeczywisty potencjał terapeutyczny otrzymanych pochodnych salinomycyny.

Z kolei w publikacji naukowej [Li etal., European Journalof Medicinal Chemistry, 148, 2018, 279290] autorzy ujawnili A/-amidowe oraz AZ-karbaminianowe (uretanowe) pochodne C20-ep/-salinomycyny o odwróconej konfiguracji absolutnej (konfiguracji absolutnej S zamiast R) na asymetrycznym atomie węgla w pozycji C-20. Aktywność przeciwnowotworowa in vitro tych związków sprawdzona została wobec serii nowotworowych linii komórkowych: 4T1 (mysi nowotwór sutka), A549 (ludzki gruczolakorak płuc), HL-60 (ludzka białaczka promielocytowa), HeLa (ludzki nowotwór szyjki macicy), MCF-7 (ludzki nowotwór piersi), SMMC-7721 (ludzki nowotwór wątroby) oraz SW480 (ludzki gruczolakorak okrężnicy). Z danych ujawnionych w publikacji naukowej [Li et al., European Journal of Medicinal Chemistry, 148, 2018, 279-290] wynika, że większość otrzymanych pochodnych C20-epi-salinomycyny charakteryzuje się wyższą aktywnością przeciwnowotworową w porównaniu ze związkiem wyjściowym. Badania przeprowadzone na prawidłowej linii komórkowej BEAS-2B (ludzkie komórki nabłonkowe oskrzeli) ujawniły ponadto, że najaktywniejsze przeciwnowotworowo pochodne C20-epi-salinomycyny cechują się również wysoką selektywnością działania, która w niektórych przypadkach jest kilkakrotnie wyższa od tej wykazywanej przez niemodyfikowaną chemicznie salinomycynę. Informacje zawarte w publikacji naukowej [Li et al., European Journal of Medicinal Chemistry, 148, 2018, 279-290] ograniczają się jedynie do badań in vitro, zatem nieznane jest działanie tych związków „w żywym organizmie” (badania in vivo). Niewiadomą jest również zdolność otrzymanych pochodnych C20-epi-salinomycyny do przełamywania lekooporności komórek nowotworowych.

W publikacji naukowej [Versini et al., Chemistry A European Journal, 26 (33), 2020, 7416-7424] autorzy ujawnili aminowe pochodne salinomycyny otrzymane w pozycji C-20 z zachowaniem konfiguracji absolutnej R na asymetrycznym atomie węgla C20 (jak w wyjściowej salinomycynie). Badania przeprowadzone na linii komórkowej HMLER CSC (ludzkie nowotworowe komórki macierzyste nabłonka sutka) wykazały, że nowe pochodne charakteryzują się wyższą stabilnością, selektywnością działania, a także bardzo wysoką aktywnością wobec modelowych komórek macierzystych raka piersi.

Aktywność przeciwnowotworowa związków biologicznie czynnych, w tym salinomycyny oraz jej pochodnych, ściśle zależy od rodzaju użytych w badaniach linii komórkowych. Niemniej, żadna ze zsyntetyzowanych dotychczas pochodnych salinomycyny nie znalazła praktycznego zastosowania medycznego, co związane było między innymi z niską bioaktywnością, niską selektywnością działania, brakiem szczegółowych badań dotyczących mechanizmów biologicznego działania czy też właściwości farmakokinetycznych oraz farmakodynamicznych. Z tego powodu prowadzone są wciąż intensywne prace zmierzające do otrzymania pochodnych salinomycyny o wysokim indeksie terapeutycznym, które znalazłyby zastosowanie w terapii onkologicznej.

Otrzymywanie nowych pochodnych salinomycyny związane jest z szeregiem problemów syntetycznych, które należy rozwiązać. Salinomycyna oraz produkty pośrednie do otrzymania jej pochodnych mogą być niestabilne w medium reakcyjnym, zwłaszcza w obecności środków kwasowych i/lub zasadowych. Salinomycyna jak i jej pochodne są wrażliwe na wysokie temperatury, przez co mogą ulegać nieodwracalnemu rozpadowi. Obecność wielu grup funkcyjnych stanowi dodatkowe wyzwanie dla selektywnej modyfikacji cząsteczki salinomycyny, w tym dla wszelkich chemo- oraz regioselektywnych modyfikacji jednej z trzech grup hydroksylowych obecnych w obrębie jej struktury. Problem stanowi także niezwykle wysoka cena handlowo dostępnej salinomycyny, co znacząco utrudnia opracowywanie nowych i wydajnych metod chemicznej modyfikacji tego związku.

Wobec powyższego wynalazek wychodzi naprzeciw problemom ze stanu techniki w zakresie otrzymywania pochodnych salinomycyny modyfikowanych w pozycji C20 z zachowaniem konfiguracji absolutnej R na asymetrycznym atomie węgla C20 (jak w wyjściowej salinomycynie). Celem wynalazku było zatem otrzymywanie produktu pośredniego w procesie, który został znacząco zmodyfikowany i uproszczony w porównaniu do metod uprzednio opisanych w literaturze, w szczególnych przemianach obejmujących dobrane reakcje, reagenty oraz środki, jak i warunki reakcji, które umożliwiają otrzymanie wspomnianych pochodnych z zachowaniem konfiguracji absolutnej R na asymetrycznym atomie węgla w pozycji C20 w relatywnie łatwym i wydajnym procesie.

Nieoczekiwanie okazało się, że ujawnione pochodne salinomycyny wykazują wyjątkową aktywność i selektywność wobec schorzeń nowotworowych, w szczególności wobec nowotworów wybranych z grupy, takich jak: rak jajnika, czerniak, rak trzustki, rak płuca, rak wątroby, rak żołądka, złośliwy niedojrzały nowotwór neuroektodermalny, białaczka bifenotypowa czy białaczka szpikowa.

Istota wynalazku

Przedmiotem wynalazku jest sposób otrzymywania związku stanowiącego pochodną C20-aminosalinomycyny o wzorze FLC-00105 lub jej soli:

PL 248049 Β1

polegający na stereoselektywnym aminowaniu redukcyjnym C20-ketosalinomycyny o wzorze FLC-00099 lub jej soli:

gdzie jako środek aminujący stosuje się alkoholowy roztwór amoniaku i octan amonu, co prowadzi do utworzenia in situ iminowej pochodnej, która redukowana jest borowodorkiem metali alkalicznych sodu, potasu, litu lub ich pochodnymi, takimi jak cyjanoborowodorkiem, triacetoksyborowodorkiem, korzystnie cyjanoborowodorkiem sodu.

Przedmiotem wynalazku jest także sposób otrzymywania C20-aminosalinomycyny o wzorze FLC-00105 lub jej soli:

obejmujący następujące etapy:

a. selektywne utlenianie grupy C20-hydroksylowej salinomycyny o wzorze FLC-00001:

PL 248049 Β1

gdzie jako środek utleniający stosuje się środki wybrane z grupy: sól pirydyniowa lub pirymidyniowa lub ich pochodne, kwasu chlorochromowego (VI) lub dichromowego (VI), chlorochromian pirydyniowy, dichromian pirydyniowy, trójtlenek chromu (VI) CrOs, korzystnie dichromianpirydyniowy,

b. stereoselektywne aminowanie redukcyjne otrzymanej C20-ketosalinomycyny o wzorze FLC-00099:

przeprowadzone jak określono powyżej.

Tak otrzymany związek pośredni posłużył do otrzymania szeregu C20-A/-modyfikowanych pochodnych salinomycyny o wzorze ogólnym (2):

PL 248049 Β1

, gdzie:

- X oznacza odpowiednio:

R;

S-R, 'V R“ θ , S lub

O

Ujawnione są związki stanowiące C20-A/-modyfikowane pochodne salinomycyny o wzorze ogólnym (2):

gdzie X jest wybrany z:

R₂

X = θ , wtedy związkami są C 20-A/-mocznikowe pochodne salinomycyny o wzorze ogólnym (3):

PL 248049 Β1

gdzie, Ri może być różne od R2 lub równe R2 i oznacza:

- gdy R1 = H, R2 oznacza:

• atom wodoru;

• grupę alkilową prostą lub rozgałęzioną zawierającą od 1 do 10 atomów węgla z wykluczeniem n-propylu i n-butylu;

• grupę alkilową prostą lub rozgałęzioną zawierającą od 1 do 5 atomów węgla podstawioną w dowolnej pozycji łańcucha węglowego od 1 do 3 atomów halogenu, które mogą znajdować się zarówno przy tym samym atomie węgla, jak również przy różnych atomach węgla, z wykluczeniem 3-chloropropylu, • grupę alkilową prostą zawierającą od 3 do 5 atomów węgla, zawierającą w dowolnej pozycji łańcucha węglowego wiązania wielokrotne;

• grupę alkilową prostą lub rozgałęzioną zawierającą od 2 do 5 atomów węgla, zawierającą w dowolnej pozycji łańcucha węglowego wiązania eterowe, estrowe lub grupę aminową;

• monocykliczną grupę alkilową zawierającą od 3 do 6 atomów węgla;

• monocykliczną grupę alkilową zawierającą od 3 do 6 atomów węgla, w której 1 lub więcej atomów węgla zostało zastąpionych przez 1 lub więcej heteroatomów z grupy zawierającej atomy azotu lub siarki, lub grupę sulfonylową;

• monocykliczną grupę alkilową zawierającą od 3 do 6 atomów węgla, podstawioną od 1 do 3 atomów halogenów;

• aromatyczną grupę arylową, przy czym preferowane są te zawierające sześcioczłonowy pierścień aromatyczny, • aromatyczną grupę arylową podstawioną przez 1 do 5 podstawników wybranych niezależnie spośród grup alkilowych, haloalkilowych, alkoksylowych, a także atomów halogenów, • aromatyczną grupę heteroarylową, w której 1 lub więcej atomów węgla zostało zastąpionych przez 1 lub więcej atomów azotu, • grupę monocykliczną lub arylową zdefiniowaną powyżej, połączoną z resztą salinomycyny przy pomocy łańcucha węglowego zawierającego od 1 do 4 atomów węgla lub poprzez wiązanie sulfonylowe;

lub ich sole.

- gdy R1 i R2 * H, a R1 może być równe R2 lub różne od R2,

R1 i R2 oznaczają:

• grupę alkilową prostą lub rozgałęzioną zawierającą od 1 do 5 atomów węgla;

• grupę alkilową prostą zawierającą od 3 do 5 atomów węgla zawierającą w dowolnej pozycji łańcucha węglowego wiązania wielokrotne;

• grupę alkilową prostą lub rozgałęzioną zawierającą od 2 do 5 atomów węgla zawierającą w dowolnej pozycji łańcucha węglowego wiązania grupę aminową;

• monocykliczną grupę alkilową zawierającą od 3 do 6 atomów węgla;

• monocykliczną grupę alkilową zawierającą od 3 do 6 atomów węgla, w której 1 lub więcej atomów węgla zostało zastąpionych przez 1 lub więcej heteroatomów z grupy zawierającej atomy azotu, tlenu lub siarki, lub grupę sulfonylową;

• monocykliczną grupę alkilową zawierającą od 3 do 6 atomów węgla podstawioną przez 1 do 3 podstawników wybranych niezależnie spośród grup alkilowych, haloalkilowych,

PL 248049 Β1 lub taką gdzie co najmniej jeden z węgli w pierścieniu jest zastąpiony sulfonylem lub karbonylem;

lub ich sole;

. H

X = ® , wtedy związkami są C20-A/-tiomocznikowe pochodne salinomycyny o wzorze ogólnym (4):

gdzie, R3 oznacza:

• grupę alkilową prostą lub rozgałęzioną zawierającą od 1 do 10 atomów węgla;

• grupę alkilową prostą lub rozgałęzioną zawierającą od 2 do 5 atomów węgla zawierającą w dowolnej pozycji łańcucha węglowego wiązania tioeterowe lub estrowe;

• monocykliczną grupę alkilową zawierającą od 3 do 6 atomów węgla;

• aromatyczną grupę arylową, przy czym preferowane są te zawierające sześcioczłonowy pierścień aromatyczny, • aromatyczną grupę arylową podstawioną przez 1 do 5 podstawników wybranych niezależnie spośród grup alkilowych, haloalkilowych, a także atomów halogenów, • grupę monocykliczną lub arylową, zdefiniowaną powyżej, połączoną z resztą salinomycyny przy pomocy łańcucha węglowego zawierającego od 1 do 4 atomów węgla;

lub ich sole;

X = θ , wtedy związkami są C20-A/-amidowe pochodne salinomycyny o wzorze ogólnym (5):

gdzie, R4 oznacza:

• grupę alkilową prostą lub rozgałęzioną zawierającą od 2 do 10 atomów węgla z wykluczeniem izopropylu;

PL 248049 Β1 • grupę alkilową prostą lub rozgałęzioną zawierającą od 1 do 5 atomów węgla podstawioną w dowolnej pozycji łańcucha węglowego od 1 do 3 atomów halogenu, które mogą znajdować się zarówno przy tym samym atomie węgla, jak również przy różnych atomach węgla, z wykluczeniem chlorometylu i 3-chloropropylu, • grupę alkilową prostą lub rozgałęzioną zawierającą od 2 do 5 atomów węgla, zawierającą terminalną grupę karboksylową;

• monocykliczną grupę alkilową zawierającą od 3 do 6 atomów węgla;

• aromatyczną grupę arylową, przy czym preferowane są te zawierające sześcioczłonowy pierścień aromatyczny, podstawioną przez 1 do 5 podstawników wybranych niezależnie spośród grup alkilowych, haloalkilowych, alkoksylowych, haloalkoksylowych, a także atomów halogenów, z wyłączeniem 4-(chlorometylo)fenylu, • aromatyczną grupę heteroarylową, w której 1 lub więcej atomów węgla zostało zastąpionych przez 1 lub więcej atomów azotu;

lub ich sole;

O

X = θ , wtedy związkami są C20-A/-modyfikowane pochodne salinomycyny o wzorze ogólnym (6):

gdzie, Rs oznacza:

• -O-Re lub -NH-R₇;

gdzie Re oznacza:

• grupę alkilową prostą zawierającą od 1 do 5 atomów węgla;

gdzie R₇ oznacza:

• atom wodoru;

• grupę alkilową prostą lub rozgałęzioną zawierającą od 1 do 5 atomów węgla, zawierającą w dowolnej pozycji łańcucha węglowego wiązanie amidowe;

• grupę alkilową prostą lub rozgałęzioną zawierającą od 1 do 5 atomów węgla podstawioną w dowolnej pozycji łańcucha węglowego grupą hydroksylową lub aminową;

• monocykliczną grupę alkilową zawierającą od 3 do 6 atomów węgla;

• aromatyczną grupę arylową, przy czym preferowane są te zawierające sześcioczłonowy pierścień aromatyczny;

• aromatyczną grupę arylową podstawioną przez 1 do 3 podstawników wybranych niezależnie spośród grup alkoksylowych a także atomów halogenów;

• monocykliczną grupę alkilową zawierającą od 3 do 6 atomów węgla lub aromatyczną grupę heteroarylową, w której 1 lub więcej atomów węgla zostało zastąpionych przez 1 lub więcej atomów z grupy zawierającej atomy azotu lub tlenu;

• grupę monocykliczną lub arylową, zdefiniowaną powyżej, połączoną z resztą salinomycyny przy pomocy łańcucha węglowego zawierającego od 1 do 4 atomów węgla;

lub ich sole;

PL 248049 Β1

X = O , wtedy związkami są C20-A/-uretanowe pochodne salinomycyny o wzorze ogólnym (7):

gdzie, Rs oznacza:

• grupę alkilową prostą lub rozgałęzioną zawierającą od 3 do 20 atomów węgla, z wyłączeniem grupy neopentylowej, • grupę alkilową prostą lub rozgałęzioną zawierającą od 3 do 10 atomów węgla, zawierającą w dowolnej pozycji łańcucha węglowego wiązania wielokrotne, zarówno podwójne jak i potrójne, z wyłączeniem grupy propargilowej;

• grupę alkilową prostą lub rozgałęzioną zawierającą od 1 do 10 atomów węgla podstawioną w dowolnej pozycji łańcucha węglowego od 1 do 6 atomów halogenu, które mogą znajdować się zarówno przy tym samym atomie węgla, jak również przy różnych atomach węgla, z wyłączeniem grupy trichloroetylowej;

• grupę alkilową prostą lub rozgałęzioną zawierającą od 1 do 10 atomów węgla podstawioną w dowolnej pozycji łańcucha węglowego od 1 do 5 podstawników wybranych niezależnie spośród grup hydroksylowych, aminowych, nitrylowych, sulfonylowych lub ich dowolną kombinacją;

• grupę alkilową prostą lub rozgałęzioną zawierającą od 2 do 10 atomów węgla, w tym podstawioną atomami halogenów, zawierającą w dowolnej pozycji łańcucha węglowego jedno lub więcej wiązań eterowych;

• monocykliczną alkilową zawierającą od 3 do 6 atomów węgla, • monocykliczną grupę alkilową zawierającą od 3 do 6 atomów węgla, w której 1 lub więcej atomów węgla zostało zastąpionych przez 1 lub więcej heteroatomów z grupy zawierającej atomy tlenu lub azotu, • monocykliczną grupę alkilową zawierającą od 3 do 6 atomów węgla podstawioną grupą alkilową w dowolnej pozycji, • aromatyczną grupę arylową, przy czym preferowane są te zawierające sześcioczłonowy pierścień aromatyczny, • aromatyczną grupę arylową podstawioną 1 do 5 podstawników wybranych niezależnie spośród grup alkilowych lub atomów halogenów, • aromatyczną grupę heteroarylową, w której 1 lub więcej atomów węgla zostało zastąpionych przez 1 lub więcej heteroatomów z grupy zawierającej atomy azotu lub siarki, • grupę monocykliczną lub arylową, zdefiniowaną powyżej, połączoną z resztą salinomycyny przy pomocy łańcucha węglowego zawierającego od 1 do 4 atomów węgla i/lub wiązanie eterowe;

lub ich sole;

O u

S-Rg

II

X = θ , wtedy związkami są C20-A/-sulfonamidowe pochodne salinomycyny o wzorze ogólnym (8):

PL 248049 Β1

gdzie, Rg oznacza:

• aromatyczną grupę arylową pięcioczłonową lub sześcioczłonową, • aromatyczną grupę arylową pięcioczłonową lub sześcioczłonową podstawioną 1 do 5 podstawników wybranych niezależnie spośród grup alkilowych, alkoksylowych, haloalkilowych lub atomów halogenów, • aromatyczną grupę heteroarylową, w której 1 lub więcej atomów węgla zostało zastąpionych przez 1 lub więcej heteroatomów z grupy zawierającej atomy tlenu, azotu lub siarki;

lub ich sole;

Ą^r

]] ^K10

X = S , wtedy związkami są C20-A/-ditiokarbaminianowe pochodne salinomycyny o wzorze ogólnym (9):

gdzie, Rio oznacza:

• grupę alkilową prostą zawierającą od 1 do 10 atomów węgla;

• grupę benzylową gdzie atomami w pierścieniu aromatycznym będą wodory lub od 1 do 3 wodorów będzie zastąpionych halogenem lub alkilem lub alkoksylem lub haloalkilem;

lub ich sole;

X — θ , wtedy związkami są S-podstawione tiokarbaminianowe pochodne C20-aminosalinomycyny o wzorze ogólnym (10):

PL 248049 Β1

gdzie, Rn oznacza:

• grupę fenylową lub benzylową;

• grupę fenylową lub benzylową podstawioną w dowolnej pozycji od 1 do 3 atomów halogenów;

lub ich sole.

Korzystnie związkami tymi są pochodne o wzorach:

dlaX =

FLC 00341 1

FLC-00344-1

PL 248049 Β1

FLC-00359-1

FLC-OO351-1

FLC-00363-1

FLC-00364-1

PL 248049 Β1

FLC-00371-1

FLC-00374-1

PL 248049 Β1

FLC-OO381-1

FLC-OO383-1

FLC-00390-1

FLC-00391-1

PL 248049 Β1

FLC-00541-1

FLC-00545-1

PL 248049 Β1

FLC-00566-1

FLC-00519-1

FLC-00537-1

PL 248049 Β1

FLC-00544-1

FLC-00557-1

PL 248049 Β1

FLC-00560-1

FLC-00565-1

FLC-00564-1

FLC-00593-1

FLC-00606-1

PL 248049 Β1 dla X =

FLC-00346-1

FLC-00348-1

PL 248049 Β1

FLC-00379-1

FLC-00380-1

PL 248049 Β1

FLC-00771-1

PL 248049 Β1 dla X =

FLC-00463-1

FLC-00464-1

PL 248049 Β1

FLC-00487-1

FLC-00493-1

FLC-00494-1

PL 248049 Β1

FLC-00569-1

FLC-00573-1

PL 248049 Β1

FLC-00579-1

FLC-005 78-1 dla X - O

FLC-00392-1

FLC-00423-1

PL 248049 Β1

FLC-00456-1

FLC-00457-1

PL 248049 Β1

FLC-00489-l

FLC-0049I-1

PL 248049 Β1 dla X =

O

FLC-00429-1

FLC-00431-1

PL 248049 Β1

FLC-00439-l

FLC-00447-1

FLC-00450-1

PL 248049 Β1

FLC-00461-1

FLC-00466-1

PL 248049 Β1

FLC-00480-l

FLC-00483-1

FLC-00498-1

PL 248049 Β1

FLC-00570-1

FLC-00571-1

PL 248049 Β1

__^ΌΗ 1 j \ ''όΧ J'o ^s ° % y₀ HO S _H ⁰ M„ OH O O FLC-00577-1 dla X = O γΌΗ 1 Χθ^Γ>Ά J \ Jo '' ⁰ % /.O. ^ho; t'h ⁰ Q li a ^CF3 FLC-00468-1 γ-\ΌΗ i j \ ^Ho;Th °' ΪΤ Li A ^Cl

γ-γ>0 Η 1 Χθ^ΓΧΧχ j \ ^ΤόΑ J'ci'' ⁰ X ° ι Τ-ο^θ ^ηο'Τη ⁰ 'Ι^Ο ο FLC-00580-1 ^-γ.ΟΗ 1 LoA>rA J \ L > ^Η0'“Τη °' 'θ ^^Υ^θΗ FLC-00502-1 __^ΟΗ Τ ΧθΧΧτΧ j \ ^^'ΝΗ^ ^Η0' Τη °' Ο L Λ Α ^^ΒΓ

FLC-00503-1

FLC-00504-1

PL 248049 Β1

FLC-00548-1

FLC-00536-1

R10 dlaX = S

PL 248049 Β1

FLC-00476-1

FLC-00475-1 dlaX =

FLC-00553-1 lub sole powyższych związków.

Korzystniejsze są związki:

FLC-00554-1

PL 248049 Β1

FLC-0337-1

FLC-00341-1

FLC-00350-1

FLC-00351-1

FLC-00353-1

FLC-00358-1

PL 248049 Β1

FLC-00385-1

FLC-00427-1

PL 248049 Β1

FLC-00541-1

FLC-00565-1

FŁC-00561-1

FLC-00593-1

FLC-00606-1 dlaX =

S

PL 248049 Β1

FLC-00345-1

FLC-00340-1

FLC-00347-1

FLC-00369-1

PL 248049 Β1

FLC-00377-1

FLC-00378-1

FLC-00382-1

FLC-00386-1

PL 248049 Β1

FLC-00463-1

FLC-00464-1

PL 248049 Β1

FLC-00486-1

FLC-00493-1

PL 248049 Β1

FLC-00423-1

FLC-00441-1

PL 248049 Β1

FLC-00442-1

FLC-00452-1

FLC-00478-1

FLC-00491-1

dlaX =

PL 248049 Β1

FLC-00431-1

FLC-00436-1

PL 248049 Β1

FLC-00437-1

FLC-00440-1

FLC-00446-1

FLC-00447-1

PL 248049 Β1

FLC-0045 0-1

FLC-00461-1

FLC-00451-1

FLC-00466-1

PL 248049 Β1

FLC-00547-1

FLC-00552-1

PL 248049 Β1

FLC-00571-1

FLC-00580-1

FLC-00468-1

FLC-00503-1

FLC-00504-1

PL 248049 Β1

FLC-00506-1 dlaX =

FLC-00475-1

FLC-00476-1

PL 248049 Β1 dlaX =

FLC-00554-1

FLC-00553-1 lub sole powyższych związków.

Najkorzystniejsze wśród powyższych związków są:

FLC-00374-1

PL 248049 Β1

FLC-00593-1

FLC-00606-1

PL 248049 Β1

FLC-00467-1

PL 248049 Β1

FLC-00771-1

FLC-00463-1

PL 248049 Β1

FLC-00475-1

lub sole powyższych związków.

PL 248049 Β1

Sposób otrzymywania C20-A/-modyfikowanych pochodnych salinomycyny o wzorze ogólnym (2) o strukturach określonych powyżej przeprowadza się z wykorzystaniem związku otrzymanego sposobami według wynalazku, i przedstawia się następująco:

w reakcji pomiędzy C20-aminosalinomycyną o wzorze FLC-00105, otrzymanej zgodnie ze sposobami opisanymi powyżej i zdefiniowanymi zastrzeżeniami:

lub jej soli, a: izocyjanianem o wzorze ogólnym (11), dającej moczniki C20-aminosalinomycyny

O=C=N r_{2 (11)} albo izotiocyjanianem o wzorze ogólnym (12), dającej tiomoczniki C20-aminosalinomycyny

S=C=N ^r3 (12) albo chlorkiem kwasowym o wzorze ogólnym (13), dającej amidy C20-aminosalinomycyny ^{Cl r}4 (13) albo kwasem karboksylowym o wzorze ogólnym (14), dającej amidy C20-aminosalinomycyny

PL 248049 Β1 albo chloromrówczanem o wzorze ogólnym (15), dającej karbaminiany C20-aminosalinomycyny ^Cl (15) albo węglanem p-nitrofenylowym o wzorze ogólnym (16), dającej karbaminiany C20-aminosalinomycyny

O ⁸ O

λ o

Θ (16) albo

1-karboksylanem imidazolu o wzorze ogólnym (17), dającej karbaminiany C20-aminosalinomycyny ° pN (17) albo chlorkiem sulfonowym o wzorze ogólnym (18), dającej sulfonamidy C20-aminosalinomycyny

O

II Cl—S—Rg a (18) albo dwusiarczkiem węgla CS21 halogenkiem o wzorze ogólnym R10-Y (19), gdzie Y = Br lub I, dającej ditiokarbaminiany C20-aminosalinomycyny, albo chlorkiem 4-etylo-2,3-diokso-1-piperazynokarbonylowym, albo chlorkiem 3-(metylosulfonylo)-2-oksoimidazolidyno-1-karbonylowym, albo bezwodnikiem glutarowym dającej monoglutaramid C20-aminosalinomycyny, albo pirowęglanem di-tert-butylu dającej ferf-butylowy karbaminian C20-aminosalinomycyny, albo bromkiem 2-bromoacetylu dającej 2-bromoacetamid C20-aminosalinomycyny.

W niektórych syntezach stosuje się związek stanowiący uretan p-nitrofenylowy C20-aminosalinomycyny o strukturze (FLC-00604):

PL 248049 Β1

Uretan p-nitrofenylowy C20-aminosalinomycyny o strukturze (FLC-00604) to związek pośredni do otrzymywania C20-A/-modyfikowanych pochodnych salinomycyny o wzorze ogólnym (2):

gdzie:

R₂

X — θ , wtedy związkami są A/-podstawione oraz Ν’,Λ/’-dipodstawione moczniki C20- aminosalinomycyny o wzorze ogólnym (3),

albo

PL 248049 Β1

X = θ , wtedy związkami są uretany (karbaminiany) C20-aminosalinomycyny o wzorze ogólnym (7),

albo ^K11

X = θ , wtedy związkami są S-podstawione tiokarbaminiany C20-aminosalinomycny o wzorze ogólnym (10).

W niektórych syntezach stosuje się związek stanowiący szczawianową pochodną C20-aminosalinomycyny o strukturze (FLC-00373):

lub jej sól.

PL 248049 Β1

Szczawianowa pochodna C20-aminosalinomycyny o strukturze (FLC-00373) jest związkiem pośrednim do otrzymywania C20-A/-modyfikowanych pochodnych salinomycyny o wzorze ogólnym (2):

gdzie:

O ν''*

X = θ , wtedy związkami są C20-A/-modyfikowane pochodne salinomycyny o wzorze ogólnym (6),

w którym Rs oznacza -NH2 lub -NH-R7;

Związki określone powyżej są do zastosowania jako lek. Zastosowanie to uzasadnia przemysłową stosowalność związku C-20-aminosalinomycyny otrzymywanego według wynalazczych sposobów stanowiących przedmiot niniejszego zgłoszenia.

Korzystnie zastosowaniem tym jest zastosowanie jako środek przeciwnowotworowy.

Związki określone powyżej są do zastosowania w schorzeniach wybranych z grupy: białaczka, w tym nieograniczająco ostra białaczka szpikowa, przewlekła białaczka szpikowa, ostra białaczka limfoblastyczna, szpiczak mnogi; niedrobnokomórkowy rak płuc, w tym nieograniczająco rak komórek nabłonkowych płuc, gruczolakorak płuc, rak płaskonabłonkowy ludzkiego płuca; rak jelita grubego (okrężnicy), w tym nieograniczająco gruczolakorak jelita grubego, rak nabłonka okrężnicy; nowotwór ośrodkowego układu nerwowego, w tym nieograniczająco rak mózgu, taki jak glejak; czerniak, w tym nieograniczająco czerniak złośliwy, czerniak nabłonka, czerniak nienabłonkowy; nowotwór jajnika, w tym nieograniczająco nabłonkowy rak jajnika, torbielakogruczolakorak jajnika; nowotwór nerki, w tym nieograniczająco rak nerkowokomórkowy; nowotwór prostaty, w tym nieograniczająco gruczolakorak prostaty; nowotwór piersi, w tym nieograniczająco gruczolakorak piersi, zapalny rak piersi, gruczolakorak z przerzutami; rak żołądka; rak trzustki; mięsak i rak trzonu macicy, jak i jego lekooporny wariant; rak szyjki macicy; rak pęcherza.

PL 248049 Β1

Zwłaszcza schorzenia wybrane są z grupy: rak jajnika, czerniak, rak trzustki, rak płuca, rak wątroby, rak żołądka, złośliwy niedojrzały nowotwór neuroektodermalny, białaczka bifenotypowa czy białaczka szpikowa.

Szczegółowy opis wynalazku

Wykonanie wynalazku zostało opisane w poniższym szczegółowym opisie oraz w załączonych zastrzeżeniach. Zdefiniowano tu bardziej szczegółowo różne przykłady zastosowania związku otrzymanego sposobem według wynalazku.

Ujawniono związki stanowiące C20-A/-modyfikowane pochodne salinomycyny o wzorze ogólnym (2):

, gdzie:

- X oznacza odpowiednio:

związki te mają konfigurację absolutną R na asymetrycznym atomie węgla C20. Konfiguracja absolutna nowych pochodnych na asymetrycznym atomie węgla C20 jest tożsama z konfiguracją absolutną na asymetrycznym atomie węgla C20 wyjściowej salinomycyny. Otrzymywanie nowych pochodnych salinomycyny zapewnia zatem retencję konfiguracji na asymetrycznym atomie węgla C20 salinomycyny.

Ugrupowaniem X w związkach może być:

PL 248049 Β1

Dla wszystkich tutaj wymienionych typów nowych pochodnych salinomycyny podstawnik X oraz dalej podstawniki Ri - Rn zdefiniowano nieograniczająco szczegółowo powyżej oraz w zastrzeżeniach. Znawca będzie wiedział, iż inne podstawniki Ri - Rn podobne do wymienionych poniżej, nawet do wymienionych jako konkretne grupy, znajdują się również w zakresie ujawnienia.

Dla X jak wymieniono wyżej zastrzega się niniejszym zgłoszeniem nowe typy pochodnych salinomycyny wykazujących działanie biologiczne. Na potrzeby opisu stosuje się następujące, skrótowe nazwy pochodnych:

X	Skrócona ogólna nazwa pochodnych
r₂ V'* o	moczniki C20-amino SAL, mocznikowe pochodne C20-amino SAL, C20-jV-mocznikowe pochodne salinomycyny
, ^H V'^r> s	tiomoczniki C20-amino SAL, tiomocznikowe pochodne C20-amino SAL, C20-jV-tiomocznikowe pochodne salinomycyny
0	amidy C20-amino SAL, amidowe pochodne C20-amino SAL, C20-ŻV-amidowe pochodne salinomycyny
A o	szczawiany C20-amino SAL, szczawianowe pochodne C20-amino SAL, C20-iV-szczawianowe pochodne salinomycyny
Π ^Keo	uretany C20-amino SAL, uretanowe (karbaminianowe) pochodne C20-amino SAL, C20-W-uretanowe (karbaminianowe) pochodne salinomycyny
u ^?s-r₉II O	sulfonamidy C20-amino SAL sulfonamidowe pochodne C20-amino SAL, C20-A-sulfonamidowe pochodne salinomycyny
A^s'r [] ^K10 S	ditiokarbaminiany C20-amino SAL, ditiokarbaminianowe pochodne C20-amino SAL, C20-jV-ditiokarbaminianowe pochodne salinomycyny
A^s'r [] ^K11 O	S-podstawione tiokarbaminiany C20-amino SAL, S-podstawione C20-W-tiokarbaminianowe pochodne salinomycyny

Związki korzystnie mogą występować również w postaci soli. Wzór ogólny soli pochodnych salinomycyny według ujawnienia przedstawia wzór ogólny (2a):

PL 248049 Β1

Korzystnymi solami związków według ujawnienia są: sól sodowa, potasowa, litowa, cezowa. Wówczas Z we wzorze ogólnym (2a) jest odpowiednio: Na, K, Li, Cs. Korzystnie Z oznacza Na. W zakresie ujawnienia są również sole z metalami dwuwartościowymi, takimi jak np. magnez.

W zakresie wiedzy znawcy w dziedzinie będzie wybór i dostosowanie warunków do otrzymania pochodnej kwasowej lub jej żądanej soli. Ekstrakcja salinomycyny oraz jej pochodnych z wodnym roztworem kwasu, np. kwasu siarkowego (VI), kwasu solnego, octowego, cytrynowego powoduje otrzymanie formy kwasowej (Z=H). Z drugiej strony, ekstrakcja salinomycyny oraz jej pochodnych z wodnym roztworem odpowiedniej soli nieorganicznej skutkuje otrzymaniem związków w postaci soli (Z=Na, K, Li, Cs). Korzystnie dla otrzymania sodowej, potasowej lub litowej soli związku według ujawnienia stosuje się ekstrakcję z węglanem lub wodorowęglanem sodu, potasu, litu lub cezu.

Związki mogą występować w kompozycjach z co najmniej jedną farmaceutycznie akceptowalną substancję pomocniczą. Farmaceutycznie akceptowalne substancje pomocnicze są znane w dziedzinie i przedstawione przykładowo w Remington: The Science and Practice of Pharmacy 1995, edycja E. W. Martin, Mack Publishing Company, wydanie 19, Easton, Pa. Korzystnie kompozycja zawiera jeden związek oraz co najmniej jedną farmaceutycznie akceptowalną substancję pomocniczą.

Wykaz stosowanych skrótów:

AcOH - kwas octowy

AcOEt - octan etylu

B0C20 - pirowęglan di-ferf-butylu

C20-amino SAL - C20-aminosalinomycyna

C20-keto SAL - C20-ketosalinomycyna

CDI - 1,1’-karbonylodiimidazol

CS2 - dwusiarczek węgla

DBU - 1,8-Diazabicyklo(5.4.0)undek-7-en

DCC - Λ/,Λ/’-dicykloheksylokarbodiimid

DCE - dichloroetan

DCM - dichlorometan

DIC - Λ/,Λ/’-diizopropylokarbodiimid

DIPEA - A/,A/-diizopropyloetyloamina

DMA - dimetyloacetamid

DMAP - 4-dimetyloaminopirydyna

DMF - A/,A/-dimetyloformamid

EDCI - 1-etyl-3-(3-dimetyloaminopropyl)karbodiimid

ELS - detektor rozpraszający światło przez odparowanie

ESI-MS - spektrometria masowa z jonizacją elektrosprejem eq. - ekwiwalent (równoważnik) molowy

HATU - heksafluorofosforan 2-(7-aza-1H-benzotriazol-1-ilo)-1,1,3,3-tetrametylouroniowy i-PrOH - izopropanol

LC-MS - chromatograf cieczowy sprzężony ze spektrometrem mas

MeCN - acetonitryl

MeOH - metanol

PL 248049 Β1

NaBHsCN - cyjanoborowodorek sodu

NMP - AZ-metylopirolidon

NMR - magnetyczny rezonans jądrowy

PCC - chlorochromian pirydyniowy

PDC - dichromian pirydyniowy p-TsOH - kwas para-toluenosulfonowy

Py - pirydyna

RT-temperatura pokojowa

SAL - oznacza resztę / fragment salinomycyny

TBTU - tetrafluoroboran O-(benzotńazol-1-ilo)-A/,A/,A/’,/\/-tetrametylouroniowy

TEA - trietyloamina

THF - tetrahydrofuran

TLC - chromatografia cienkowarstwowa

Sposób otrzymywania ujawnionych związków polega na reakcjach według schematów przedstawionych poniżej.

Zaobserwowano, iż związki pośrednie do syntezy C20-A/-modyfikowanych pochodnych salinomycyny są innowacyjne bowiem synteza z ich udziałem niesie wiele korzyści.

Jednym ze związków pośrednich jest C20-amino SAL o wzorze FLC-00105, który otrzymuje się sposobem według wynalazku. Innym ujawnionym tutaj związkiem pośrednim jest C20-keto SAL o wzorze FLC-00099, który jest związkiem pośrednim do syntezy C20-amino SAL.

Sposób otrzymywania C20-ketosalinomvcynv o wzorze FLC-00099

Ujawniono związek pośredni C20-keto SAL o wzorze FLC-00099 lub jego sól. Związek ten otrzymuje się według Schematu 1.

Schemat 1.

Sposób ten opcjonalnie obejmuje etap przekształcania otrzymanego związku w formie kwasowej w jego sól. W zakresie wiedzy znawcy będzie wybór warunków reakcji dla konwersji pochodnej salinomycyny w formie kwasowej w jej sól.

Sposób otrzymywania FLC-00099 obejmuje selektywne utlenienie grupy C20-hydroksylowej salinomycyny o wzorze FLC-00001 zachodzące w rozpuszczalniku chloroalifatycznym, takich jak DCM, DCE, chloroformie, korzystnie w DCM, lub w rozpuszczalniku polarnym aprotycznym - prostym nitrylu (MeCN), THF, prostym amidzie (NMP, DMA), sulfolanie, lub w rozpuszczalniku aromatycznym (benzen, toluen, ksylen, pirydyna) lub w mieszaninie rozpuszczalników, korzystnie w temperaturze pokojowej. Jako środek utleniający stosuje się sól pirydyniową lub pirymidyniową (lub ich pochodne) kwasu chlorochromowego (VI) oraz dwuchromowego (VI), chlorochromian pirydyniowy (PCC) lub dichromian pirydyniowy (PDC) lub trójtlenek chromu (VI) CrOs, korzystnie dichromian pirydyniowy (PDC). Metoda ta znacząco różni się od literaturowej z wykorzystaniem aktywowanego tlenku manganu(IV) [według: EP3191493 lub Mai etal., Naturę Chemistry, 9, 2017, 1025-1033], została ona opracowana na potrzeby ujawnienia. Opracowana metoda pozwoliła znacząco skrócić czas otrzymywania C20-keto SAL, z kilku dni do nawet kilku godzin. Dodatkowo pozwala ona wyeliminować użycie tlenku manganu(IV) stosowanego w metodzie według stanu techniki, którego skuteczność zależy od jego formy krystalicznej oraz od dostawcy odczynnika. Wiązało się to z wieloma problemami syntetycznymi, zdarzało się, że reakcja w ogóle nie zachodziła bądź zachodziła z niską wydajnością.

PL 248049 Β1

Stopień przereagowania kontroluje się za pomocą TLC oraz / lub LC-MS. Mieszaninę poreakcyjną oczyszcza się przy użyciu chromatografii kolumnowej, korzystnie przy pomocy chromatografu z detektorem ELS, stosując kolumnę wypełnioną krzemionką oraz mieszaninę rozpuszczalników organicznych. Frakcje zawierające właściwy produkt łączy się i odparowuje pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość rozpuszcza się w rozpuszczalniku chloroalifatycznym, korzystnie w DCM lub w chloroformie lub w AcOEt, po czym przemywa się wodnym roztworem odpowiedniej soli (węglanu lub wodorowęglanu, np. sodu lub potasu lub litu), bądź wodnym roztworem kwasu, np. siarkowego (VI) (H2SO4) lub solnego (HCI). Warstwę organiczną odparowuje się do sucha pod zmniejszonym ciśnieniem, a następnie kilkakrotnie odparowuje z n-pentanem lub MeCN lub poddaje liofilizacji, np. z dioksanu. Uzyskanie właściwego związku zostało potwierdzone metodami analitycznymi TLC, LC-MS, ¹H NMR oraz ¹³C NMR.

Sposób otrzymywania C20-aminosalinomvcynv o wzorze FLC-00105 według wynalazku

Przedmiotem wynalazku jest sposób otrzymywania związku C20-amino SAL o wzorze FLC-00105 lub jego soli. Otrzymuje się go według Schematu 2 z C20-keto SAL o wzorze FLC-00099:

Schemat 2.

Sposób otrzymywania związku pośredniego obejmuje stereoselektywne aminowanie redukcyjne C20-keto SAL o wzorze FLC-00099, lub jego soli, gdzie jako środek aminujący stosuje się alkoholowy roztwór amoniaku i octanu amonu, co prowadzi do utworzenia in situ iminowej pochodnej, która redukowana jest borowodorkiem metali alkalicznych (sodu, potasu, litu) lub ich pochodnymi, cyjanoborowodorkiem, triacetoksyborowodorkiem, korzystnie cyjanoborowodorkiem sodu. C20-ketosalinomvcyne o wzorze FLC-00099 otrzymuje się jak powyżej zgodnie ze Schematem 1.

Doniesienia literaturowe dotyczące otrzymywania C20-aminosalinomvcynv o wzorze FLC-00105 [EP3191493 lub Mai etal., Naturę Chemistry, 9, 2017, 1025-1033] bazują na typowym podejściu, gdzie do zachowania konfiguracji na węglu stanowiącym centrum reakcji stosuje się redukcję z zastosowaniem soli ceru. Przy opracowywaniu niniejszego wynalazku zaskakująco ustalono, że stosowanie soli ceru nie jest konieczne do zachowania stereochemii na węglu C20 i pozwala uzyskać C20-amino SAL z zachowaniem stereochemii wyjściowej salinomycyny. Reakcję prowadzi się w polarnym rozpuszczalniku, takim jak metanol, etanol, propanol, formamid, DMA, NMP, DMF, AcOH lub w ich mieszaninie, korzystnie w metanolu, w temperaturze pokojowej lub temperaturze wrzenia rozpuszczalnika, korzystnie w temperaturze wrzenia rozpuszczalnika.

Stopień przereagowania kontroluje się za pomocą TLC oraz / lub LC-MS. Mieszaninę poreakcyjną oczyszcza się przy użyciu chromatografii kolumnowej, korzystnie przy pomocy chromatografu z detektorem ELS, stosując kolumnę wypełnioną krzemionką oraz mieszaninę rozpuszczalników organicznych. Frakcje zawierające właściwy produkt łączy się i odparowuje pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość rozpuszcza się w rozpuszczalniku chloroalifatycznym, korzystnie w DCM lub w chloroformie lub w AcOEt, po czym przemywa się wodnym roztworem odpowiedniej soli (węglanu lub wodorowęglanu, np. sodu lub potasu lub litu), bądź wodnym roztworem kwasu, np. siarkowego (VI) (H2SO4) lub solnego (HCI). Warstwę organiczną odparowuje się do sucha pod zmniejszonym ciśnieniem, a następnie kilkakrotnie odparowuje z n-pentanem lub MeCN lub poddaje liofilizacji, np. z dioksanu.

Ogólnie przedstawiona w stanie techniki konwersja związku o wzorze FLC-00099 w związek o wzorze FLC-00105 została na potrzeby wynalazku dopracowana i zmodyfikowana. Zmodyfikowana procedura otrzymywania związku o wzorze FLC-00105 obejmuje użycie alkoholowego roztworu amoniaku

PL 248049 Β1 oraz octanu amonu, gdzie octan amonu pełni dwojaką rolę, dostarcza amoniak do reakcji oraz jednocześnie forma octanu pełni rolę buforu, nie jest zatem konieczne generowanie buforu poprzez mieszanie kwasu octowego z komponentem aminowym (roztworem amoniaku w tym przypadku), jak ma to miejsce według literaturowej procedury: EP3191493 lub Mai etal., Naturę Chemistry, 9, 2017, 1025-1033. Dodatkowo reakcję prowadzono w temperaturze wrzenia rozpuszczalnika a nie w temperaturze pokojowej (co znacznie przyspiesza szybkość reakcji, do kilku godzin), oraz wyeliminowano sól ceru CeCl3*7H2O, która miała zapewniać zachowanie odpowiedniej stereochemii [według ogólnej procedury opisanej w: EP3191493 lub Mai etal., Naturę Chemistry, 9, 2017, 1025-1033]. Ilość soli ceru konieczna do przeprowadzenia reakcji według procedury literaturowej wynosi aż 1 eq, zatem nie wykorzystywanie jej w tej przemianie daje korzyść nie tylko ekonomiczną ale i środowiskową. Poza tym wydajność opracowanej nowej procedury redukcyjnego aminowania mieści się zakresie 65-75%, natomiast dane literaturowe procedury według stanu techniki wskazują na wydajności w zakresie 18-48% w zależności od użytej aminy. Uzyskanie właściwego związku zostało potwierdzone metodami analitycznymi TLC, LC-MS, ¹H NMR, ¹³C NMR oraz analizą rentgenograficzną kryształu. Analiza rentgenograficzna (informacja w części przykładów) potwierdza dodatkowo konfigurację przy atomie węgla C-20 aminosalinomycyny.

Przedmiotem wynalazku jest sposób otrzymywania C20-amino SAL o wzorze FLC-00105 lub jej soli, obejmujący dwa etapy:

a) selektywne utlenianie grupy C20-hydroksylowej SAL o wzorze FLC-00001 lub jej soli (metodą opisaną powyżej według Schematu 1),

b) oraz stereoselektywne aminowanie redukcyjne otrzymanej C20-keto SAL o wzorze FLC-00099 lub jej soli (metodą opisaną powyżej według Schematu 2), według Schematu 3:

NH₃ / MeOH, octan amonu ---------►

NaBH₃CN etap b

Schemat 3.

W sposobie tym wykorzystuje się przemiany opisane wyżej według Schematu 1 i Schematu 2.

Poprzez opracowanie nowych sposobów otrzymywania C20-ketosalinomycyny o wzorze FLC00099 oraz C20-amino SAL o wzorze FLC-00105, lub ich soli, rozwiązano problem techniczny związany z zapewnieniem skutecznej, łagodnej i wykluczającej problematyczne reagenty używane w znanych sposobach ze stanu techniki. Ponadto zalety otrzymywania sposobu według wynalazku C20-amino SAL

PL 248049 Β1 o wzorze FLC-00105, lub jej soli przenoszą się w oczywisty sposób bezpośrednio na ułatwienie procesów otrzymywania związków przebadanych pod kątem zastosowania do leczenia.

Poniżej opisano poszczególne sposoby syntezy kolejnych typów C20-A/-modyfi kowanych pochodnych salinomycyny o wzorze ogólnym (2), gdzie wykorzystano związek otrzymany sposobem według wynalazku:

Sposób otrzymywania moczników C20-amino SAL o wzorze ogólnym (3):

Pochodne salionomycyny o wzorze ogólnym (3) można otrzymać na dwa sposoby. Pierwszy sposób polega na reakcji według Schematu 4 i obejmuje reakcję pomiędzy C20-amino SAL o wzorze FLC00105 a izocyjanianem o wzorze ogólnym (11):

O=C=N ^r2 (11)

Schemat 4.

PL 248049 Β1

Reakcję C20-amino SAL z izocyjanianem o wzorze ogólnym (11) prowadzi się w rozpuszczalniku chloroalifatycznym, np. w DCM, DCE, chloroformie, korzystnie w DCM, lub w rozpuszczalniku polarnym aprotycznym - prostym nitrylu (MeCN), THF, prostym amidzie (NMP, DMA), DMF lub w rozpuszczalniku aromatycznym (benzen, toluen, ksylen) lub w mieszaninie rozpuszczalników, w temperaturze pokojowej. Korzystne jest również prowadzenie reakcji w warunkach bezwodnych.

W trakcie prowadzenia powyższej syntezy, poprzez przekształcenie C20-amino SAL o wzorze FLC-00105 w związki stanowiące przedmiot ujawnienia o wzorze ogólnym (3), z wykorzystaniem izocyjanianów oznaczonych wzorem ogólnym (11), zaobserwowano, iż w celu otrzymania części pochodnych metoda ta okazała się niemożliwa do wykorzystania ze względu na komercyjną niedostępność odpowiednich izocyjanianów koniecznych do uzyskania korzystnych, zaplanowanych pochodnych. Poza tym powyżej opisana metoda nie pozwala uzyskać pochodnych o wzorze ogólnym (3), gdzie R1 H i R2 * H, czyli A/’,A/-dipodstawionych moczników C20-amino SAL. Standardowo, Λ/’,Λ/’-dipodstawione moczniki otrzymuje się w reakcji grupy aminowej z odpowiednim chlorkiem karbamoilowym, jednak w przypadku C20-amino SAL konwersja taka okazała się niskowydajna lub niemożliwa do przeprowadzenia ze względu na niestabilność pochodnej salinomycyny w warunkach tej przemiany. W tych przypadkach ustalono, iż aby dokonać konwersji do właściwej pochodnej końcowej, najpierw należy przekształcić C20-amino SAL w związek pośredni:

- uretan p-nitrofenylowy C20-amino SAL o wzorze (FLC-00604):

Ό NH (FLC-00604) a następnie w łagodnych warunkach dokonać jego konwersji w pożądane C20-A/-mocznikowe pochodne SAL o wzorze ogólnym (3).

W związku z tym, innym korzystnym przykładem otrzymywania C20-A/-mocznikowych pochodnych SAL jest reakcja pomiędzy wspomnianym uretanem p-nitrofenylowym C20-amino SAL o wzorze FLC-00604 (otrzymywanym z C20-amino SAL o wzorze FLC-00105 w sposób opisany poniżej), a:

aminą pierwszorzędową o wzorze ogólnym (20):

R₂-NH₂ (20) w której R2 ma wyżej podane znaczenie;

albo aminą drugorzędową o wzorze ogólnym (21):

PL 248049 Β1

Η r₂'ⁿ'r, <²” w której Ri i R₂ mają wyżej podane znaczenie.

C20-amino SAL otrzymana w sposób opisany powyżej jest przekształcana w uretan FLC-00604, który jest wykorzystywany do syntezy pochodnych salinomycyny o wzorze ogólnym (3).

Pochodne o wzorze ogólnym (3) otrzymuje się według Schematu 5.

R₂-NH₂ (20) ^lub Rr^N'Rl <²¹>

Schemat 5.

W pierwszym etapie otrzymuje się z C20-amino SAL uretan p-nitrofenylowy C20-amino SAL o wzorze (FLC-00604), a następnie otrzymuje się związek (3) w reakcji uretanu z podstawioną aminą o wzorze ogólnym (20) lub (21).

Uretan p-nitrofenylowy C20-amino SAL o wzorze (FLC-00604) jest nową pochodną salinomycyny, która jest przedmiotem ujawnienia jako związek pośredni do otrzymywania finalnych związków według ujawnienia. Znane były analogiczne pochodne (uretan fenylowy czy uretan p-nitrobenzylowy C20-ep/-aminosalinomycyny - analogi o odwróconej konfiguracji przy asymetrycznym atomie węgla C20 [Li et al., European Journal of Medicinal Chemistry, 148, 2018, 279-290]), ale do tej pory nie otrzymano takiej pochodnej dla C20-amino SAL. Pochodna ta rozwiązuje problem techniczny związany z utrudnionym lub niemożliwym otrzymaniem związków według ujawnienia o właściwościach biologicznych. Konwersja do finalnych pochodnych z wykorzystaniem tego związku pośredniego jest wygodna i zachodzi w łagodnych warunkach niepowodujących rozpadu pochodnych C20-amino SAL.

Otrzymywanie uretanu p-nitrofenyloweoo C20-amino SAL·

Uretan p-nitrofenylowy C20-amino SAL o wzorze (FLC-00604) otrzymywany jest z C20-amino SAL w reakcji z chloromrówczanem p-nitrofenylowym w obecności zasady. Reakcję prowadzi się w rozpuszczalniku chloroalifatycznym, w DCM, DCE, chloroformie, korzystnie w DCM, lub w rozpuszczalniku

PL 248049 Β1 polarnym - prostym nitrylu (MeCN), THF, prostym amidzie (NMP, DMA), DMF lub w rozpuszczalniku aromatycznym (benzen, toluen, ksylen) lub w mieszaninie rozpuszczalników, w obniżonej temperaturze lub temperaturze pokojowej, korzystnie w obniżonej temperaturze. Jako zasadę stosuje się aminę alifatyczną lub sól nieorganiczną, taką jak węglany, wodorowęglany (sodu, potasu, cezu) czy TEA, tripropyloaminę, tributyloaminę, diizopropyloaminę, triizopropyloaminę, triizobutyloaminę, tert-butyloaminę, Py, pochodne pirydyny (pikolina, kolidyna), DIPEA, DBU, korzystnie TEA lub DIPEA.

Stopień przereagowania kontroluje się za pomocą TLC oraz / lub LC-MS. Mieszaninę poreakcyjną rozcieńcza się rozpuszczalnikiem chloroalifatycznym, DCM, DCE, chloroformie, korzystnie DCM i przemywa kilkakrotnie wodą. Warstwę organiczną odparowuje się do sucha pod zmniejszonym ciśnieniem, a następnie kilkakrotnie odparowuje z n-pentanem lub MeCN lub poddaje liofilizacji, np. z dioksanu i wykorzystuje się w kolejnym etapie prowadzącym do pożądanych pochodnych.

Przekształcenie C20-amino SAL z wykorzystaniem etapu otrzymywania uretanu p-nitrofenylowego C20-amino SAL o wzorze (FLC-00604) stosuje się do wytwarzania szeregu innych pochodnych, mocznikowych pochodnych C20-amino SAL, których nie można było otrzymać metodą bezpośredniego przekształcenia z C20-amino SAL, jak również innych pochodnych według ujawnienia, o czym będzie szerzej poniżej.

Zatem drugi sposób otrzymywania mocznikowych pochodnych C20-amino SAL polega na zmieszaniu uretanu o wzorze FLC-00604 z aminą pierwszorzędową o wzorze ogólnym (20) lub aminą drugorzędową o wzorze ogólnym (21) w obecności zasady (Schemat 5). Reakcję prowadzi się w rozpuszczalniku chloroalifatycznym, w DCM, DCE, chloroformie lub w rozpuszczalniku polarnym aprotycznym - prostym nitrylu (MeCN), THF, prostym amidzie (NMP, DMA), DMF lub w rozpuszczalniku aromatycznym (benzen, toluen, ksylen), korzystnie w THF lub w mieszaninie rozpuszczalników, w temperaturze pokojowej. Jako zasadę stosuje się aminę alifatyczną lub sól nieorganiczną, taką jak węglany, wodorowęglany (sodu, potasu, cezu) czy TEA, tripropyloaminę, tributyloaminę, diizopropyloaminę, triizopropyloaminę, triizobutyloaminę, tert-butyloaminę, Py, pochodne pirydyny (pikolina, kolidyna), DIPEA, DBU, korzystnie DIPEA lub TEA.

Po zakończeniu reakcji postępuje się analogicznie jak w przykładzie powyżej, w którym opisano syntezę pochodnych C20-A/-mocznikowych w reakcji C20-amino SAL z izocyjanianem o wzorze ogólnym (11).

Inną korzystną metodą otrzymywania C 20-A/-mocznikowych pochodnych salinomycyny jest reakcja C20-amino SAL (FLC-00105) z chlorkiem 4-etylo-2,3-diokso-1-piperazynokarbonylowym, dająca pochodną FLC-00518 albo chlorkiem 3-(metylosulfonylo)-2-oksoimidazolidyno-1-karbonylowym, dającą pochodną FLC-00519 - w warunkach analogicznych do reakcji C20-amino SAL (FLC-00105) z chlorkami kwasowymi o wzorze ogólnym (13), którą opisano poniżej.

Sposób otrzymywania tiomoczników C20-amino SAL o wzorze ogólnym (4):

NH i

Pochodne salinomycyny o wzorze ogólnym (4) otrzymuje się według przemiany przedstawionej na Schemacie 6 i obejmuje reakcję pomiędzy C20-amino SAL o wzorze FLC-00105, a izotiocyjanianem o wzorze ogólnym (12):

S=C=N ^R3 (12) w którym R3 ma wyżej podane znaczenie.

PL 248049 Β1

Schemat 6.

Reakcję C20-amino SAL z izotiocyjanianem o wzorze ogólnym (12) prowadzi się analogicznie do opisanej powyżej reakcji C20-amino SAL o wzorze FLC-00105 z izocyjanianem o wzorze ogólnym (11). Jako rozpuszczalnik korzystnie stosuje się THF.

Sposób otrzymywania amidów C20-amino SAL o wzorze ogólnym (5):

Pochodne salinomycyny o wzorze ogólnym (5) można otrzymać różnymi sposobami.

Pierwszy sposób otrzymywania amidowych pochodnych C20-amino SAL polega na reakcji według Schematu 7 i obejmuje reakcję pomiędzy C20-amino SAL o wzorze FLC-00105 a chlorkiem kwasowym o wzorze ogólnym (13):

o

CI^Rł ₍₁₃) w którym R4 ma wyżej podane znaczenie.

Schemat 7.

PL 248049 Β1

Reakcję C20-amino SAL z chlorkiem kwasowym o wzorze ogólnym (13) prowadzi się w rozpuszczalniku chloroalifatycznym, w DCM, DCE, chloroformie, korzystnie w DCM, lub w rozpuszczalniku polarnym aprotycznym - prostym nitrylu (MeCN), THF, prostym amidzie (NMP, DMA), DMF lub w rozpuszczalniku aromatycznym (benzen, toluen, ksylen) lub w mieszaninie rozpuszczalników, w temperaturze pokojowej, w obecności zasady. Korzystne jest również prowadzenie reakcji w warunkach bezwodnych. Jako zasadę stosuje się aminę alifatyczną lub sól nieorganiczną, taką jak węglany, wodorowęglany (sodu, potasu, cezu) czy TEA, tripropyloaminę, tributyloaminę, diizopropyloaminę, triizopropyloaminę, triizobutyloaminę, tert-butyloamina, Py, pochodne pirydyny (pikolina, kolidyna), DIPEA, DBU, korzystnie DIPEA lub TEA.

Stopień przereagowania kontroluje się za pomocą TLC oraz / lub LC-MS. Jeżeli w mieszaninie reakcyjnej obecny jest produkt uboczny z dodatkowym fragmentem pochodzącym od użytego chlorku kwasowego o wzorze ogólnym (13), warstwę organiczną zatęża się pod zmniejszonym ciśnieniem, a pozostałość zad aj e się MeCN z dodatkiem 1M NaOH i miesza w temperaturze pokojowej. Po zakończeniu hydrolizy, korzystnie stopień hydrolizy kontroluje się za pomocą LC-MS, mieszaninę poreakcyjną rozcieńcza się wodą i ekstrahuje dwukrotnie DCM. Mieszaninę poreakcyjną oczyszcza się przy użyciu chromatografii kolumnowej, korzystnie przy pomocy chromatografu z detektorem ELS, stosując kolumnę wypełnioną krzemionką oraz mieszaninę rozpuszczalników organicznych. Frakcje zawierające właściwy produkt łączy się i odparowuje pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość rozpuszcza się w rozpuszczalniku chloroalifatycznym, korzystnie w DCM lub w chloroformie lub w AcOEt, po czym przemywa się wodnym roztworem odpowiedniej soli (węglanu lub wodorowęglanu, np. sodu lub potasu lub litu), bądź wodnym roztworem kwasu, np. siarkowego (VI) (H2SO4) lub solnego (HCI). Warstwę organiczną odparowuje się do sucha pod zmniejszonym ciśnieniem, a następnie kilkakrotnie odparowuje z n-pentanem lub MeCN lub poddaje liofilizacji, np. z dioksanu.

Kolejny sposób syntezy C20-A/-amidowych pochodnych SAL polega na reakcji według Schematu 8 i obejmuje reakcję pomiędzy C20-amino SAL o wzorze FLC-00105 z kwasem karboksylowym o wzorze ogólnym (14):

O

HO^Rł (₁₄) w którym R4 ma wyżej podane znaczenie.

Schemat 8.

W przypadku reakcji przedstawionej na Schemacie 8 dla przeprowadzenia reakcji konieczne jest zaktywowanie kwasu karboksylowego o wzorze ogólnym (14) przy pomocy odpowiednich odczynników aktywujących według procedury opisanej szczegółowo poniżej.

PL 248049 Β1

Reakcję prowadzi się w rozpuszczalniku chloroalifatycznym, w DCM, DCE, chloroformie, korzystnie w DCM, lub w rozpuszczalniku polarnym aprotycznym - prostym nitrylu (MeCN), THF, prostym amidzie (NMP, DMA), DMF lub w rozpuszczalniku aromatycznym (benzen, toluen, ksylen) lub w mieszaninie rozpuszczalników, w temperaturze pokojowej. Korzystne jest także prowadzenie reakcji w warunkach bezwodnych. Jako odczynnik aktywujący kwas karboksylowy stosuje się DCC, DIC, CDI, EDCI, HATU, TBTU, korzystnie EDCI w obecności aminy alifatycznej, takiej jak: TEA, tripropyloamina, tributyloamina, diizopropyloamina, triizopropyloamina, triizobutyloamina, ferf-butyloamina, Py, pochodne pirydyny (pikolina, kolidyna), DIPEA, DBU, korzystnie DIPEA lub TEA. Korzystne jest stosowanie dodatkowo p-TsOH, DMAP lub 4-pirolidynopirydyny, najkorzystniej DMAP.

Stopień przereagowania kontroluje się za pomocą TLC oraz / lub LC-MS. Mieszaninę poreakcyjną oczyszcza przy użyciu chromatografii kolumnowej i postępuje analogicznie jak w przykładzie powyżej, w którym opisano syntezę pochodnych C20-A/-mocznikowych w reakcji C20-amino SAL z izocyjanianem o wzorze ogólnym (11).

Innym korzystnym sposobem otrzymywania amidów C20-amino SAL o wzorze ogólnym (5) są reakcje C20-amino SAL o wzorze FLC-00105: z bezwodnikiem glutarowym (FLC-00436), przedstawiona na Schemacie 9 lub z bromkiem 2-bromoacetylu (FLC-00501), przedstawiona na Schemacie 10. Dla każdego z reagentów zastosowano unikatowe warunki reakcji, które opisano szczegółowo w przykładach.

Schemat 10.

Sposób otrzymywania uretanów (karbaminianów) C20-amino SAL o wzorze ogólnym (7):

PL 248049 Β1

Pochodne salinomycyny o wzorze ogólnym (7) można otrzymać różnymi sposobami. Pierwszy sposób polega na reakcji według Schematu 11 i obejmuje reakcję pomiędzy C20-amino SAL o wzorze FLC-00105 z chloromrówczanem o wzorze ogólnym (15):

O

A ,R_a ^Cl ° (15) w którym Rs ma wyżej podane znaczenie.

Schemat 11.

Sposób ten opcjonalnie obejmuje etap przekształcania otrzymanego związku wformie kwasowej w jego sól. W zakresie wiedzy znawcy będzie wybór warunków reakcji dla konwersji pochodnej salinomycyny wformie kwasowej w jej sól.

Reakcję C20-amino SAL z chloromrówczanem o wzorze ogólnym (15) prowadzi się analogicznie do opisanej powyżej reakcji C20-amino SAL o wzorze FLC-00105 z chlorkiem kwasowym o wzorze ogólnym (13).

Innym korzystnym sposobem otrzymywania karbaminianów C20-amino SAL jest reakcja przedstawiona na Schemacie 12 zachodząca pomiędzy C20-amino SAL a:

węglanem p-nitrofenylowym o wzorze ogólnym (16):

albo

1-karboksylanem imidazolu o wzorze ogólnym (17):

(17) w których Rs ma wyżej podane znaczenie.

PL 248049 Β1

(FLC-00105)

Schemat 12.

Jest to kolejny innowacyjny sposób syntezy do otrzymywania ujawnionych związków. Wykorzystuje on aktywację alkoholu w sposób inny niż zastosowanie fosgenu lub jego ekwiwalentu (difosgenu, trifosgenu etc.), prowadzące do uzyskania chloromrówczanów stanowiących substraty do syntezy karbaminianów C20-amino SAL metodą opisaną powyżej. Metoda wykorzystująca związki o strukturach (16) oraz (17), według Schematu 12 rozwiązuje problem techniczny związany z utrudnionym lub niemożliwym otrzymaniem związków według ujawnienia o właściwościach biologicznych. Pozwala ona otrzymać pochodne, których synteza jest niemożliwa ze względu na niedostępność komercyjną części chloromrówczanów lub niemożliwość syntezy tych chloromrówczanów. Tworzenie „aktywnej” formy alkoholu zachodzi w łagodnych warunkach, co jest niezbędne ze względu na występowanie w strukturach aktywowanych alkoholi grup wrażliwych na kwasowe warunki jakimi jest użycie fosgenu, difosgenu czy trifosgenu.

Reakcję C20-amino SAL o wzorze FLC-00105 z węglanem p-nitrofenylowym o wzorze ogólnym (16) lub z 1-karboksylanem imidazolu o wzorze ogólnym (17) prowadzi się w rozpuszczalniku chloroalifatycznym DCM, DCE, chloroformie lub w THF, korzystnie w THF w obecności zasady. Jako zasadę stosuje się aminę alifatyczną lub sól nieorganiczną, taką jak węglany, wodorowęglany (sodu, potasu, cezu) czy TEA, tripropyloaminę, Py, pochodne pirydyny (pikolina, kolidyna), DIPEA, korzystnie TEA lub DIPEA.

Innym korzystnym sposobem otrzymywania związku według ujawnienia, karbaminianu C20- amino SAL o wzorze FLC-00461 jest reakcja C20-amino SAL o wzorze FLC-00105 z pirowęglanem di-ferf-butylu BOC2O, przedstawiona na Schemacie 13.

Schemat 13.

PL 248049 Β1

Reakcję C20-amino SAL z BOC2O prowadzi się w rozpuszczalniku chloroalifatycznym, w DCM, DCE, chloroformie, korzystnie w DCM, lub w rozpuszczalniku polarnym aprotycznym - prostym nitrylu (MeCN), THF, prostym amidzie (NMP, DMA), DMF lub w rozpuszczalniku aromatycznym (benzen, toluen, ksylen) lub w mieszaninie rozpuszczalników, w temperaturze pokojowej, w obecności zasady. Jako zasadę stosuje się aminę alifatyczną lub sól nieorganiczną, taką jak węglany, wodorowęglany (sodu, potasu, cezu) czy TEA, tripropyloaminę, tributyloaminę, diizopropyloaminę, triizopropyloaminę, triizobutyloaminę, ferf-butyloamina, Py, pochodne pirydyny (pikolina, kolidyna), DIPEA, DBU, korzystnie DIPEA lub TEA?

Innym korzystnym sposobem otrzymywania karbaminianów C20-amino SAL jest reakcja przedstawiona na Schemacie 14 zachodząca pomiędzy wspomnianym wcześniej uretanem /;-nitrofenylowym C20-amino SAL (otrzymanym metoda opisaną powyżej z C20- amino SAL), a alkoholem o wzorze:

HO—R_e (23) w którym w Rs ma wyżej podane znaczenie

Schemat 14.

Jest to kolejne innowacyjne wykorzystanie związku FLC-00604 do otrzymywania ujawnionych tu związków o właściwościach biologicznych.

PL 248049 Β1

Reakcję prowadzi się analogicznie do reakcji otrzymywania C20-A/-mocznikowych pochodnych salinomycyny z uretanu p-nitrofenylowego C20-amino SAL o wzorze (FLC-00604), opisanej powyżej, z tym że zamiast aminy o wzorze ogólnym (20) lub (21) do mieszaniny reakcyjnej dodaje się alkohol o wzorze HO-Rs.

Sposób otrzymywania sulfonamidów C20-amino SAL o wzorze ogólnym (8):

Pochodne salinomycyny o wzorze ogólnym (8) można otrzymać stosując różne warunki reakcji. Pierwszy sposób polega na reakcji według Schematu 15 i obejmuje reakcję pomiędzy C20-amino SAL o wzorze FLC-00105 a chlorkiem sulfonowym o wzorze ogólnym (18):

O

Cl—S—Rg ii O (18)

Schemat 15.

Sposób ten opcjonalnie obejmuje etap przekształcania otrzymanego związku w formie kwasowej w jego sól. W zakresie wiedzy znawcy będzie wybór warunków reakcji dla konwersji w którym Rg ma wyżej podane znaczenie pochodnej salinomycyny w formie kwasowej wjej sól.

Reakcję prowadzi się w mieszaninie rozpuszczalnika organicznego, MeCN, dioksanu, THF, korzystnie MeCN i wodnego roztworu zasady, węglanu lub wodorowęglanu sodu, potasu, litu, korzystnie węglanu sodu. Do C20-amino SAL FLC-00105 we wspomnianej mieszaninie rozpuszczalników, w temperaturze pokojowej lub w obniżonej temperaturze, korzystnie w obniżonej temperaturze wkrapla się chlorek sulfonowy o wzorze ogólnym (18) w rozpuszczalniku organicznym, w MeCN, dioksanie, THF, korzystnie w MeCN.

PL 248049 Β1

Stopień przereagowania kontroluje się za pomocą TLC oraz / lub LC-MS. Mieszaninę poreakcyjną rozcieńcza się wodą i ekstrahuje dwukrotnie DCM. Pozostałość oczyszcza przy użyciu chromatografii kolumnowej i postępuje analogicznie jak w przykładzie powyżej, w którym opisano syntezę pochodnych C20-A/-mocznikowych w reakcji C20-amino SAL z izocyjanianem o wzorze ogólnym (11).

Innym korzystnym sposobem otrzymywania sulfonamidów C20-amino SAL jest reakcja przedstawiona na Schemacie 16 zachodząca pomiędzy C20-amino SAL a chlorkiem sulfonowym o wzorze ogólnym (18):

Schemat 16.

Reakcję prowadzi się w rozpuszczalniku chloroalifatycznym, w DCM, DCE, chloroformie, korzystnie w DCM, w temperaturze pokojowej lub obniżonej temperaturze, korzystnie w obniżonej temperaturze w obecności zasady. Do C20-amino SAL we wspomnianym rozpuszczalniku lub ich mieszaninie wkrapla się chlorek sulfonowy o wzorze ogólnym (18) w rozpuszczalniku chloroalifatycznym, w DCM, DCE, chloroformie, korzystnie w DCM. Jako zasadę stosuje się aminę alifatyczną, TEA, tripropyloaminę, tributyloaminę, triizopropyloaminę, DIPEA, korzystnie DIPEA lub TEA.

Stopień przereagowania kontroluje się za pomocą TLC oraz / lub LC-MS. Po zakończeniu reakcji postępuje się analogicznie jak w przykładzie powyżej, w którym opisano syntezę pochodnych C20-N- mocznikowych w reakcji C20-amino SAL z izocyjanianem o wzorze ogólnym (11).

Sposób otrzymywania ditiokarbaminianów C20-amino SAL o wzorze ogólnym (9):

Pochodne salinomycyny o wzorze ogólnym (9) otrzymuje się według Schematu 17, obejmuje on reakcję pomiędzy C20-amino SAL o wzorze FLC-00105 a disiarczkiem węgla CS2 i halogenkiem o wzorze ogólnym (19):

Y-R10 (19) w którym R10 ma wyżej podane znaczenie, a Y = Br lub I.

PL 248049 Β1

Schemat 17.

Reakcję prowadzącą do pochodnych salinomycyny o wzorze ogólnym (9) prowadzi się w rozpuszczalniku chloroalifatycznym, w DCM, DCE, chloroformie, lub w rozpuszczalniku polarnym aprotycznym, prostym nitrylu MeCN lub THF, korzystnie w MeCN lub w mieszaninie rozpuszczalników, w obniżonej temperaturze lub w temperaturze pokojowej, korzystnie w obniżonej temperaturze, w obecności aminy alifatycznej. Jako zasadę stosuje się aminę alifatyczną taką jak TEA, tripropyloaminę, tributyloaminę, diizopropyloaminę, triizopropyloaminę, triizobutyloaminę, DIPEA, korzystnie DIPEA lub TEA.

Stopień przereagowania kontroluje się za pomocą TLC oraz / lub LC-MS. Mieszaninę poreakcyjną oczyszcza przy użyciu chromatografii kolumnowej i postępuje analogicznie jak w przykładzie powyżej, w którym opisano syntezę pochodnych C20-N-mocznikowych w reakcji C20-amino SAL z izocyjanianem o wzorze ogólnym (11).

Sposób otrzymywania S-podstawionych tiokarbaminianów C20-amino SAL o wzorze ogólnym (10):

S-podstawione tiokarbaminiany C20-amino SAL otrzymuje się w reakcji uretanu p-nitrofenylowego C20-amino SAL o strukturze FLC-00604:

PL 248049 Β1 z tiolem o wzorze ogólnym (22):

HS-Rn (22) w którym Rn ma wyżej podane znaczenie.

Jest to kolejny innowacyjny przykład wykorzystania związku pośredniego FLC-00604 do otrzymywania ujawnionych tu związków. Pochodne o wzorze ogólnym 10 otrzymuje się według Schematu 18:

HS-Rh (22)

Schemat 18.

Reakcję prowadzi się analogicznie do reakcji otrzymywania C20-A/-mocznikowych pochodnych salinomycyny z uretanu p-nitrofenylowego C20-amino SAL o wzorze (FLC-00604), opisanej powyżej, z tym że zamiast aminy o wzorze ogólnym (20) lub (21) do mieszaniny reakcyjnej dodaje się tiol o wzorze ogólnym (22).

Sposób otrzymywania szczawianowych pochodnych C20-amino SAL o wzorze ogólnym (6):

(6)

PL 248049 Β1 w którym Re ma wyżej podane znaczenie.

Pochodne salinomycyny o wzorze ogólnym (6) otrzymuje się według Schematu 19, obejmuje on reakcję pomiędzy C20-amino SAL o wzorze FLC-00105 z chlorooksooctanem alkilu:

Schemat 19.

Sposób ten opcjonalnie obejmuje etap przekształcania otrzymanego związku w formie kwasowej w jego sól. W zakresie wiedzy znawcy będzie wybór warunków reakcji dla konwersji pochodnej salinomycyny wformie kwasowej wjej sól.

Reakcję C20-amino SAL z chlorooksooctanem alkilu prowadzi się w rozpuszczalniku chloroalifatycznym, w DCM, DCE, chloroformie, korzystnie w DCM, lub w rozpuszczalniku polarnym aprotycznym - prostym nitrylu (MeCN), THF, prostym amidzie (NMP, DMA), DMF lub w rozpuszczalniku aromatycznym (benzen, toluen, ksylen) lub w mieszaninie rozpuszczalników, w obniżonej temperaturze lub temperaturze pokojowej, korzystnie w obniżonej temperaturze, w obecności zasady. Jako zasadę stosuje się aminę alifatyczną lub sól nieorganiczną, taką jak węglany, wodorowęglany (sodu, potasu, cezu) czy TEA, tripropyloaminę, tributyloaminę, diizopropyloaminę, triizopropyloaminę, triizobutyloaminę, ferf-butyloamina, Py, pochodne pirydyny (pikolina, kolidyna), DIPEA, DBU, korzystnie DIPEA lub TEA.

Sposób otrzymywania C20-A/-modyfi kowanych związków o wzorze ogólnym (6):

w którym R? ma wyżej podane znaczenie.

Zaobserwowano, iż otrzymywanie pochodnych o wzorze (6), gdzie Rs = -NH-R? skutecznie przebiega poprzez związek pośredni o strukturze FLC-00373:

PL 248049 Β1

Pochodne C20-amino SAL o wzorze ogólnym (6), gdzie Rs = -NH-R? otrzymuje się według Schematu 20:

amoniak lub R₇-NH₂ (24)

Schemat 20.

C20-amino SAL otrzymana w sposób opisany powyżej jest przekształcana w związek o strukturze FLC-00373, który jest wykorzystywany do syntezy pochodnych salinomycyny o powyższym wzorze ogólnym (6).

W pierwszym etapie otrzymuje się z C20-amino SAL pochodną FLC-00373, a następnie otrzymuje się związek (6) w reakcji z aminą o wzorze ogólnym:

R₇-NH₂ (24)

Związek o wzorze FLC-00373 jest nową pochodną salinomycyny (szczawianowa pochodna C20- aminosalinomycyny), jako związek pośredni do otrzymywania finalnych związków według ujawnienia.

Konwersja do finalnych pochodnych z wykorzystaniem tego związku pośredniego jest wydajna i wygodna i zachodzi w łagodnych warunkach. Problemem technicznym rozwiązywanym przez ten związek jest możliwość uzyskania pochodnych salinomycyny wykazujących własności biologiczne, których nie można było otrzymać w inny sposób. Raz zsyntezowany związek pośredni pozwala na dokonywanie prostych przemian z komercyjnie dostępnymi aminami w kierunku uzyskiwania różnych pochodnych końcowych salinomycyny.

Reakcję związku pośredniego o wzorze FLC-00373 z metanolowym roztworem amoniaku lub z aminą o wzorze ogólnym (24) prowadzi się w rozpuszczalniku chloroalifatycznym, w DCM, DCE, chloroformie, korzystnie w DCM, lub w rozpuszczalniku polarnym aprotycznym - prostym nitrylu (MeCN), THF, prostym amidzie (NMP, DMA), DMF lub w rozpuszczalniku aromatycznym (benzen, toluen, ksylen) lub w mieszaninie rozpuszczalników, w temperaturze pokojowej. Korzystne jest również prowadzenie reakcji w warunkach bezwodnych.

Po zakończeniu reakcji postępuje się analogicznie jak w przykładzie powyżej, w którym opisano syntezę pochodnych C20-N-mocznikowych w reakcji C20-amino SAL z izocyjanianem o wzorze ogólnym (11).

Nowe pochodne salinomycyny otrzymane z wykorzystaniem związku C20- aminosalinomycyny otrzymanego sposobem według wynalazku stosuje się jako lek. W korzystnym przykładzie wykonania związki te są przeznaczone do zastosowania jako środki przeciwnowotworowe.

Związki te nadają się do zastosowania w schorzeniach wybranych nieograniczająco z grupy: białaczka, w tym nieograniczająco ostra białaczka szpikowa, przewlekła białaczka szpikowa, ostra białaczka limfoblastyczna, białaczka bifenotypowa, szpiczak mnogi; niedrobnokomórkowy rak płuc, w tym nieograniczająco rak komórek nabłonkowych płuc, gruczolakorak płuc, rak płaskonabłonkowy ludzkiego płuca; rak jelita grubego (okrężnicy), w tym nieograniczająco gruczolakorak jelita grubego, rak nabłonka okrężnicy; nowotwór ośrodkowego układu nerwowego, w tym nieograniczająco rak mózgu, taki jak glejak; czerniak, w tym nieograniczająco czerniak złośliwy, czerniak nabłonka, czerniak nienabłonkowy; nowotwór jajnika, w tym nieograniczająco nabłonkowy rak jajnika, torbielakogruczolakorak jajnika; nowotwór nerki, w tym nieograniczająco rak nerkowokomórkowy; nowotwór prostaty, w tym nieograniczająco gruczolakorak prostaty; nowotwór piersi, w tym nieograniczająco gruczolakorak piersi, zapalny rak piersi, gruczolakorak z przerzutami; rak żołądka; rak trzustki; mięsak i rak trzonu macicy, jak i jego lekooporny wariant; rak szyjki macicy; rak pęcherza.

W niniejszym opisie termin nowotwór i rak stosowane są zamiennie.

Wstępne badania wskazują, iż aktywność przeciwnowotworową ujawnione związki wykazują względem linii komórkowych wymienionych poniżej:

‘ HL-60(TB), K-562, MOLT-4, RPMI-8226, SR, A549/ATCC, EKVX, HOP-62, HOP-92, NCI-H226, NCI-H23, NCI-H460, NCI-H522, COLO 205, HCC-2998, HCT-116, HCT-15, HT29, KM12, SW-620, SF268, SF-295, SF-539, SNB-19, SNB-75, U251, LOXIMVI, MALME-3M, M14, MDA-MB-435, SK-MEL-2, SK-MEL-28, SK-MEL-5, UACC-257, UACC-62, IGROVI, OVCAR-3, OVCAR-4, OVCAR-5, OVCAR-8, NCI/ADR-RES, SK-OV-3, 786-0, A498, ACHN, CAKI-1, RXF 393, SN12C, TK-10, UO-31, PC-3, DU145, MCF7, MDA-MB-231/ATCC, HS 578T, BT-549, T-47D, MDA-MB-468, KATOIII, NCI-N87, SNU-16, SNU-5, AGS, SNU-1, Capan-2, ATCC HTB-80, Panc 10.05, CFPAC-1, HPAF-II, SW 1990, BxPC-3, AsPC-1, MES-SA, MES-SA/DX5, KLE, HEC-1-A, AN3 CA, Ca-Ski, DoTc2 4510, SiHa, C-33-A, 5637, KU-19-19, MBT-2, HCV29T, Hu1703He. Dla niektórych z tych linii komórkowych konkretne schorzenia im odpowiadające wymieniono już w powyższej liście.

Działanie przeciwnowotworowe rozumie się jako:

- przeciwdziałanie występowania nowotworu,

- hamowanie rozrostu komórek nowotworowych (hamowanie proliferacji),

- indukowanie śmierci komórek nowotworowych (działanie proapoptyczne),

- zapobieganie lub hamowanie przerzutowania komórek nowotworowych,

- hamowanie zjawiska wielolekowej oporności,

- hamowanie procesu angiogenezy,

- eliminowanie lub minimalizowanie skutków choroby nowotworowej.

Badania in vitro przeprowadzone wobec szeregu nowotworowych linii komórkowych potwierdziły wysokie działanie cytotoksyczne otrzymanych po raz pierwszy związków, które znacznie przewyższało bioaktywność niemodyfikowanej chemicznie salinomycyny. Uzyskane pochodne salinomycyny cechują

PL 248049 Β1 się nie tylko wysoką aktywnością przeciwnowotworową, ale także wysoką selektywnością działania wobec komórek nowotworowych. Ponadto, porównanie aktywności przeciwnowotworowej oraz toksyczności nowo zsyntetyzowanych związków z tą wykazywaną przez znane literaturowo pochodne salinomycyny, w tym przez zbliżone strukturalnie C20-A/-amidowe oraz C20-A/-karbaminianowe (uretanowe) pochodne C20-ep/-salinomycyny z odwróconą konfiguracją absolutną (konfiguracją absolutną S zamiast R) na asymetrycznym atomie węgla w pozycji C-20 [Li et al., European Journal ofMedicinal Chemistry, 148, 2018, 279-290], jednoznacznie udowadnia przewagę związków będących przedmiotem niniejszego ujawnienia w kontekście ich możliwego zastosowania terapeutycznego.

W badaniach in vitro wykorzystano następujące nowotworowe linie komórkowe:

- A2780 (ludzki rak jajnika) i A2780Cis (ludzki rak jajnika oporny na cisplatynę),

- A375 (ludzki czerniak),

- Hs294T (ludzki czerniak),

- KG-1 (ludzka ostra białaczka szpikowa),

- MIA PaCa-2 (ludzki rak trzustki),

- MV-4-11 (ludzka białaczka bifenotypowa),

- NCI-H23 (ludzki rak płuca),

- NCI-H1581 (ludzki rak płuca),

- NCI-H358 (ludzki rak płuca),

- PFSK-1 (złośliwy niedojrzały nowotwór neuroektodermalny),

- PLC/PRF/5 (ludzki rak wątroby),

- SNU-16 (ludzki rak żołądka).

W badaniach wykorzystano także normalne mysie fibroblasty BALB/3T3 celem wyznaczenia wartości współczynników selektywności związków użytych w testach. Wartości te pozwalają przewidzieć kierunek działania pochodnych salinomycyny odpowiadając na pytanie - czy związki te będą w pierwszej kolejności niszczyć komórki nowotworowe, czy też atakować prawidłowe komórki organizmu.

W tabeli 1 zestawiono dane dotyczące wszystkich stosowanych w badaniach in vitro linii komórkowych (zarówno nowotworowych, jak i prawidłowych).

Tabela 1

Symbol linii komórkowej	Nazwa linii komórkowej	Źródło pochodzenia linii komórkowej	Liczba komórek na dołek w teście
A2780	ludzki rak jajnika	ECACC	2xl0³
A2780Cis	ludzki rak jajnika oporny na cisplatynę	ECACC	2xl0³
A375	ludzki czerniak	ATCC	2xl0³
Hs294T	ludzki czerniak	ATCC	2xl0³
KG-1	ludzka ostra białaczka szpikowa	ATCC	2xl0³
MIA PaCa-2	ludzki rak trzustki	ATCC	2xl0³
MV-4-ll	ludzka białaczka bifenotypowa	ATCC	2xl0³
NCI-H23	ludzki rak płuca	ATCC	2xl0³
NCI-H358	ludzki rak płuca	ATCC	2xl0³
NCI-H1581	ludzki rak płuca	ATCC	2,5xl0³

PL 248049 Β1

Symbol linii komórkowej	Nazwa linii komórkowej	Źródło pochodzenia linii komórkowej	Liczba komórek na dołek w teście
PFSK-1	złośliwy niedojrzały nowotwór neuroektodermalny	ATCC	2,5x1ο³
PLC/PRF/5	ludzki rak wątroby	ATCC	2xl0³
SNU-16	ludzki rak żołądka	ATCC	2xl0³
BALB/3T3	normalne mysie fibroblasty	ATCC	2xl0³

W trakcie badań cytotoksyczności w testach in vitro stosowano media hodowlane oraz odczynniki zestawione w tabeli 2.

Tabela 2

Nazwa	Odczynnik (Producent)
Medium hodowlane dla linii BALB/3T3, Hs294T	• Dulbecco medium (Gibco) . 10 % FBS HyClone (GE Healthcare, USA) • 2 mM L-Glutamina (Sigma-Aldrich, Niemcy) • 0,1 mg/ml streptomycyna, 100 U/ml penicylina (Sigma-Aldrich, Niemcy i Polfa Tarchcmin, Polska)
Medium hodowlane dla linii A2780, A2780Cis	. RPMI1640 + GlutaMax (Gibco) . 10% FBS HyClone, (GE Healthcare, USA) • 0,1 mg/ml streptomycyna, 100 U/ml penicylina (Sigma-Aldrich, Niemcy i Polfa Tarchomin, Polska) Medium dla A2780Cis dodatkowo z 1 μΜ cisplatyny
Medium hodowlane dla linii A-375	. DMEM (ATCC) . 10% FBS (ATCC) • 0,1 mg/ml streptomycyna, 100 U/ml penicylina (Sigma-Aldrich, Niemcy i Polfa Tarchomin, Polska)
Medium hodowlane dla linii KG-1	. IMDM (ATCC) . 20% FBS (ATCC) • 0,1 mg/ml streptomycyna, 100 U/ml penicylina (Sigma-Aldrich, Niemcy i Polfa Tarchomin, Polska)
Medium hodowlane dla linii MIAPaCa-2	. DMEM (ATCC) . 10% FBS(ATCC) • 2,5% surowica końska (Gibco) • 0,1 mg/ml streptomycyna, 100 U/ml penicylina (Sigma-Aldrich, Niemcy, Niemcy i Polfa Tarchomin, Polska, Polska)

Medium hodowlane dla linii MV4-11	. RPMI1640 + GlutaMax (Gibco) • 10% FBS (Sigma-Aldrich, Niemcy) • 1 mMpirogronian (Sigma-Aldrich, Niemcy) • 0,1 mg/ml streptomycyna, 100 U/ml penicylina (Sigma-Aldrich, Niemcy i Polfa Tarchomin, Polska)
Medium hodowlane dla linii NCI-H23, NCI- H358	. RPMI1640 +GlutaMax (Gibco) • 10% FBS HyClone, (GE Healthcare, USA) • ImM pirogronian (Sigma-Aldrich, Niemcy) • 4,5 g/l glukozy (Sigma-Aldrich, Niemcy) • 0,1 mg/ml streptomycyna, 100 U/ml penicylina (Sigma-Aldrich, Niemcy i Polfa Tarchomin, Polska)

PL 248049 Β1

Nazwa	Odczynnik (Producent)
Medium hodowlane dla linii NCI-1581	. RPMI1640 + GlutaMax (Gibco) • 5% FBS HyClone, (GE Healthcare, USA) • 0,1 mg/ml streptomycyna, 100 U/ml penicylina (Sigma-Aldrich, Niemcy i Polfa Tarchomin, Polska)
Medium hodowlane dla linii PLC/PRF/5	. EMEM(ATCC) . 10% FBS(ATCC) • 0,1 mg/ml streptomycyna, 100 U/ml penicylina (Sigma-Aldrich, Niemcy i Polfa Tarchomin, Polska)
Medium hodowlane dla linii PFSK-1, SNU16	. RPMI-1640 (ATCC) . 10% FBS(ATCC) • 0,1 mg/ml streptomycyna, 100 U/ml penicylina (Sigma-Aldrich, Niemcy i Polfa Tarchomin, Polska)
Medium testowe do rozcieńczeń	. RPMI1640+HE^SfPChO, IITD) . 10% FBS HyClone (GE Healthcare) • 2mM L-Glutamina (Sigma-Aldrich, Niemcy) • 0,lmg/ml streptomycyna, 100 U/ml penicylina (Sigma-Aldrich, Niemcy i Polfa Tarchomin, Polska)
10 mM TRIS	1. Woda dejonizowana ogólnolaboratoryjna niejatowa 2. TRIZMA BASE (Sigma-Aldrich, Niemcy)
1% kwas octowy	1. Woda dejonizowana ogólnolaboratoryjna niejałowa 2. Kwas octowy 80% C7DA (POCh, Polska)
0,1 % roztwór sulforodaminy B (SRB)	1. Sulforhodamine B sodium salt (Sigma-Aldrich, Niemcy) 2. 1% kwasoctowy
50% kwas trójchlorooctowy (TCA)	1. Woda dejonizowana ogólnolaboratoryjna niejałowa 2. Kwas trichlorooctowy CZDA (POCh, Polska)
5 mg/ml MTT	1. MTT (Sigma-Aldrich, Niemcy) 2. PBS(PChO, ITD)
DMSO	1. DMSO (POCh, Polska)
cisplatyna	• koncentrat do sporządzania roztworu do infuzji, 1 mg/mL (10 mg/10 mL), 1 fiolka 10 mL(Accord Healthcare)

Badania in vitro cytotoksyczności zostały przeprowadzone zgodnie z opisaną poniżej procedurą. Roztwory wyjściowe badanych związków o stężeniu 7 mM przygotowano do każdego doświadczenia ex tempore, poprzez rozpuszczenie naważki preparatu w odpowiedniej objętości dimetylosulfotlenku (DMSO). Rozpuszczalnikiem dla dalszych rozcieńczeń było medium hodowlane. Związki przetestowano w stężeniach od 10 μΜ w dziesięciokrotnym szeregu rozcieńczeń. Naważki preparatów do sporządzenia roztworów wyjściowych przygotowywano na wadze analitycznej firmy Mettler Toledo ΧΡ26 o dokładności 0,001 mg.

Oznaczenie działania cytotoksycznego badanych związków oraz związku referencyjnego cisplatyny (powszechnie stosowanego leku przeciwnowotworowego) wykonano w 96-godzinnych hodowlach in vitro. Dla komórek rosnących w zawiesinie, takich jak MV-4-11 (ludzka białaczka bifenotypowa), KG-1 (ludzka ostra białaczka szpikowa), SNU-16 (ludzki rak żołądka) wykonano test redukcji soli tetrazolowej MTT [według: Wietrzyk et al., Anti-cancerdrugs, 2007, 18, 447-457] jako ocenę aktywności metabolicznej komórek nowotworowych. Z kolei dla oznaczenia aktywności przeciwproliferacyjnej wszystkich badanych związków wobec linii komórkowych adherentnych: A2780, A2780Cis (ludzki rakjajnika wrażliwy i oporny na cisplatynę), A375, Hs294T (ludzki czerniak), MIA

PL 248049 Β1

PaCa-2 (ludzki rak trzustki), NCI-H23, NCI-H358, NCI-H1581, (ludzki rak płuca), PFSK-1 (złośliwy niedojrzały nowotwór neuroektodermalny), PLC/PRF/5 (ludzki rak wątroby) oraz BALB/3T3 (normalne mysie fibroblasty) zastosowano test kolorymetryczny SRB [według: Skehan et al., Journal of the National Cancer Institute, 1990, 82, 1107-1112] mierzący zahamowanie proliferacji docelowych komórek na podstawie pomiaru ilości białka komórkowego. W każdym doświadczeniu próbki zawierające określone stężenia badanego związku nanoszono na 384-dołkowe płytki w 3 powtórzeniach. Doświadczenia powtarzano minimum 3 razy. Testy in vitro cytotoksyczności wykonano według następującej procedury:

(a) Komórki (pochodzące z hodowli in vitro) naniesiono do dołków płytki w liczbie 2,5x10³ lub 2x10³ komórek w 50 pL medium hodowlanego, a następnie inkubowano w 37°C w wilgotnej atmosferze (wilgotność 85-95%) nasyconej 5% dwutlenkiem węgla (CO2), (b) po upływie 24 godzin do dołków dodano 20 pL medium (kontrola wzrostu komórek) lub medium zawierającego badane związki w określonych stężeniach, (c) płytki inkubowano przez kolejne 72 godziny w inkubatorze (37°C, wilgotna atmosfera (wilgotność 85-95%) nasycona 5% CO2), (d) po upływie 72 godzin inkubacji komórek z badanymi związkami wykonano test MTT lub SRB, (e) w każdym doświadczeniu próbki zawierające określone stężenia badanego związku nanoszono w 3 powtórzeniach, zaś doświadczenia powtarzano minimum 3 razy.

Odczyt MTT: Do każdego dołka płytki 384-dołkowej dodano 20 pL roztworu MTT. Po 4 godzinach inkubacji w temperaturze 37°C z każdego dołka odessano medium wraz z MTT i do powstałego formazanu na dnie dołków dodano po 80 pi DMSO. Po 15 min. inkubacji w temp, pokojowej odczytywano gęstość optyczną poszczególnych próbek przy długości fali 570 nm przy użyciu czytnika płytkowego (uniwersalnego) Synergy H4 (BioTek Instruments, USA).

Odczyt SRB: Do każdego dołka płytki 384-dołkowej dodano 30 pL zimnego 50% kwasu trichlorooctowego. Po 60 minutach inkubacji w temperaturze pokojowej płytki 4-krotnie przepłukano wodą, a następnie osuszono na ręcznikach papierowych. Następnie, do każdego dołka dodano 25 pL 0,1% roztworu sulforodaminy B (SRB) w 1% kwasie octowym w celu wybarwienia strąconego w dołku białka komórkowego. Po 30-minutowej inkubacji z SRB w temperaturze pokojowej płytki 4- krotnie płukano 1% kwasem octowym i ponownie osuszono na ręcznikach papierowych. W kolejnym etapie do każdego dołka dodano 70 pL 10 mM buforu TRIS powodującego rozpuszczenie związanego z białkiem komórek barwnika. Gęstość optyczną poszczególnych próbek odczytano przy długości fali 540 nm przy użyciu czytnika płytkowego (uniwersalnego) Synergy H4 (BioTek Instruments, USA).

Na podstawie pomiaru absorbancji poszczególnych dołków wyliczono procent zahamowania proliferacji dla każdego badanego związku przy danym stężeniu według wzoru:

procent zahamowania proliferacji = ^— A_m\ \

--7^X100 - 100

Aft A_m/ / , gdzie:

A_m - średnia wartość absorbancji medium kontrolnego,

Ak - średnia wartość absorbancji kontroli komórek, tj. komórek nietraktowanych,

At - średnia wartość absorbancji komórek potraktowanych badanymi związkami przy danym stężeniu.

Przy obliczaniu średniej wartości absorbancji dla danego zestawu dołków (komórki nietraktowane, komórki traktowane danym związkiem przy danym stężeniu, kontrola samego medium) odrzucono wartości „odstające” na podstawie współczynnika zmienności CV 10%. Z danych procentowego zahamowania proliferacji wyznaczono wartości współczynnika IC50, czyli stężenie badanego związku potrzebne do zahamowania wzrostu komórek o 50% [według: Nevozhay, PLoS One, 2014, 9, e

PL 248049 Β1

106186]. Następnie, na podstawie kolejnych 3 do 5 (lub więcej) powtórzeń testu wyliczono średnie wartości współczynników ICso wraz z wartościami odchyleń standardowych.

W celach porównawczych analogiczne badania przeprowadzono z użyciem powszechnie stosowanego leku przeciwnowotworowego - cisplatyny. Wyniki badań in vitro aktywności cytotoksycznej badanych związków przedstawiono w postaci wartości współczynników ICso wyrażonych w stężeniach nanomolowych (nM), które zestawiono sumarycznie w Tabelach 3.1., 3.2., 4 i 5. Wszystkie nowo otrzymane pochodne salinomycyny wykazują bardzo wysoką aktywność przeciwnowotworową, która w większości przypadków znacznie przewyższa tę wykazywaną przez niemodyfikowaną chemicznie salinomycynę FLC-00001 (SAL), jak również referencyjny lek onkologiczny - cisplatynę. Ponadto większość z nowo zsyntetyzowanych pochodnych salinomycyny zidentyfikowana została jako środki przeciwnowotworowe zdolne do skutecznego przełamywania lekooporności linii komórkowej A2780Cis z wartościami współczynników lekooporności Rl <1,0. Większość nowo otrzymanych pochodnych salinomycyny charakteryzują się wysoką selektywnością działania wobec komórek nowotworowych, co przejawia się przez wartości współczynników selektywności SI >3,0, zaś niektóre z nich zidentyfikowane zostały jako związki wybitnie selektywne (SI >1000,0). Wskazuje to jednoznacznie na dużo wyższą skuteczność oddziaływania nowo zsyntetyzowanych pochodnych salinomycyny na komórki nowotworowe w porównaniu z ich toksycznością wobec prawidłowych komórek organizmu.

Wartość współczynnika selektywności SI obliczono według wzoru:

IC^dlaprawidAowe jliniikomórkowe jBALB/3T3

IC_5Odlaposzczególnychnowotworowychlimikomórkowych

Wartość współczynnika lekooporności Rl obliczono według wzoru:

IC_5odlalekoopornejnowotworowe jliniikomórkowe j

ICsodlalekowrażliwe jnowotworowe jliniikomórkowe j

Tabela 3.1. Przykłady zastosowania ujawnionych związków.

FLC-OO362-1 3,94 39,0 62,41 2,5 38,39 4,0 11,29 13,6 11,91 12,9 1,1 281,19

PL 248049 Β1

cytotoksycznc wobec komórek nowotworowych niż wobec komórek prawidłowych; RI < 2, komórki wrażliwe na badany związek. RI w zakresie 2-10 komórki wykazują umiarkowana wrażliwość na badany związek, RI > 10 wskazuje na silną oporność na testowany związek;

Tabela 3.2. Przykłady zastosowania ujawnionych związków

PL 248049 Β1

λ

Ε

wartość współczynnika ICso - stężenie związku, które odpowiada 50% hamowaniu wzrostu komórek użytych w testach; SI > 1,0 związek wykazuje silniejsze działanie cytotoksyczne wobec komórek nowotworowych niż w obec komórek prawidłowych;

Tabela 4. Przykłady zastosowania ujawnionych związków.

LiT CO m

O Ó oo m

O ó co ϋΊ ΟΊ ro o ó

FLC-00425-1 · Na 6,41 30,7 362,21 0,5 26,46 7,4 419,77 0,5 0,71 276,1 268,70 0,7 233,96 0,84 196,97

PL 248049 Β1

OJ 04 oj

ŚD LD $

OJ m σ?

o OJ

m

CT-^OCD^^IO-OJ

O· u? O 1—I O rfi O m rc oj ^3 0' lc σ.

oo

ΟΊ od

c?

m

LH cn

GO

F-C-00457-1 Na 9,66 76,0 2532,60 0,3 122,11 6,0 551,27 1,3 18,04 40,7 53,66 13,7 446,00 1,65 734,06

PL 248049 Β1

χ—I Ln νΊ σ? o' σι θ'

ΓΜ ΓΟ ΟΊ L0 ΓΜ i

I kS I ΕΛ e ΐ4 σ> ο οι θ'

S ο Η ω '3

Β Ό Ε ο μ

•a ο

Ε

100

PL 248049 Β1

	Tabela 5	Przykłady zastosowania ujawnionych związków.
Komórki nowotworowe	Komórki normalne
Badany związek
		A2780CIS	MV4-11	NCI-H1581	BALB3T3
		ICso(nM)	SI	ΙΟ_ω(ηΜ)	SI	IC^ofnM)	SI	IC_bo(nM)
FLC-00001 (SAL)	67,12	10,0	69,10	9,7	68,93	9,7	671,01
FLC-00366-1		0,21	550,8	nb.	*	0,33	347,1	114,56
FLC-00524-1	Na	38,9	20,6	34,0	23,5	55,0	14,5	800,0
FLC-00374-1		0,11	671,0	nb.	*	0,0022	31454,6	70,46
FLC-00521-1	Na	600,0	6,2	300,0	12,3	500,0	7,4	3700,0
FLC-00463-1	Na	0,72	266,3	1,98	96,5	0,11	1694,6	190,64
FLC-00464-1	Na	<0,28	= 305,7	0,46	187,9	<0,03	= 2853,1	85,59
FLC-00465-1	Na	3071,09	*	3168,02	*	4832,61	*	n/a
FLC-00466-1	Na	<1,84	= 58,2	<3,10	= 34,6	<0,08	= 1338,9	107,11
FLC-00467-1	Na	<0,0001	- 853700	<0,0001	=853700	<0,0001	»853700	85,37
FLC-00468-1	Na	1,01	48,1	2,60	18,6	0,33	145,4	48,34
FLC-00469-1-	Na	0,0027	14630,8	0,012	3330,5	<0,01	= 3896,7	38,97
FLC-00470-1-	Na	0,03	982,4	0,27	115,3	0,31	97,3	30,55
FLC-00471-1 ·	Na	4292,63	*	4729,32	*	5035,05	*	n/a
FLC-00472-1	Na	0,40	158,4	2,47	25,3	0,05	1360,6	62,59
FLC-00473-1	Na	0,72	179,1	2,05	62,7	0,11	1169,4	128,64
FLC-00474-1	Na	0,46	80,3	0,73	50,6	0,03	1227,4	36,82
FLC-00475-1	Na	<0,29	= 216,3	<0,47	= 133,5	<0,03	= 2090,9	62,73
FLC-00476-1	Na	0,48	44,8	0,44	48,7	0,11	197,6	21,38
FLC-00477-1	Na	3,54	40,4	3,11	46,1	4,49	31,9	143,21
FLC-00478-1	Na	63,65	25,9	180,43	9,2	50,95	32,4	1651,03
FLC-00479-1	Na	272,34	15,8	342,83	12,6	337,00	12,8	4303,62
FLC-00480-1	Na	4,25	43,6	19,05	9,7	3,37	55,1	185,41
FLC-00481-1	Na	219,64	17,4	319,70	12,0	275,39	13,9	3825,86
FLC-00483-1·	Na	250,27	21,2	338,62	15,7	341,24	15,6	5308,10
FLC-00484-1 -	Na	0,25	95,4	0,59	40,7	0,12	195,5	23,86
FI C-00485-1 ·	Na	4,62	23,0	20,04	5,3	3,90	27,3	106,41
FLC-00486-1	Na	0,05	873,6	1,27	36,8	0,06	832,0	46,59
FLC-00487-1	Na	45,91	79,6	132,73	27,5	46,01	79,4	3652,57
FLC-00489-1 ·	Na	175,46	28,0	337,98	14,6	323,25	15,2	4919,19
FLC-00491-1	Na	5,19	79,2	6,30	65,3	4,75	86,5	411,12
FLC-00493-1	Na	2,14	26,9	5,43	10,6	4,68	12,3	57,71
FLC-00494-1	Na	4,45	29,2	3,40	38,3	3,98	32,7	130,12

PL 248049 Β1

101

FLC-00497-1 Na	277,55	8,2	278,48	8,2	450,16	5,1	2281,33
FLC-00498-1 Na	757,57	6,6	1562,39	3,2	687,53	7,3	5008,36
FLC-00501-1 Na	2231,47	1,3	1743,87	1,6	1174,58	2,4	2828,27
-LCCOEO2-1 Na	1,76	52,7	3,30	28,1	1,43	64,8	92,72
FLC-00503-1 Na	2,49	31,7	3,65	21,6	1,40	56,3	78,77
FLC-00504-1 Na	2,99	30,5	4,40	20,7	2,69	34,0	91,28
FLC-0O5O5-1 Na	7,61	15,2	14,04	8,3	4,63	25,1	116,05
FLC-00506-1 Na	0,92	100,3	2,62	35,3	1,32	70,0	92,48
FLC-00509-1 Na	16,71	14,7	22,64	10,9	19,69	12,5	246,29
FLC-00514-1 Na	8,51	15,7	11,43	11,7	6,17	21,7	133,83
FLC-00515-1 Na	356,87	10,6	399,57	9,5	1028,93	3,7	3789,14
FLC-OO518-1 Na	3217,97	*	3493,56	*	7640,22	*	n/a
FLC-00519-1 Na	1191,08	5,3	1589,19	4,0	1406,26	4,5	6365,28
FLC-00528-1 Na	0,30	220,3	0,65	102,4	<0,25	= 266,8	66,69
FLC-00530-1 Na	2,60	24,0	6,42	9,7	2,12	29,5	62,52
FLC-00531-1 Na	11,01	13,2	23,31	6,2	7,84	18,5	144,95
FLC-00534-1 Na	1,28	50,7	1,53	42,4	5,05	12,8	64,89
FLC-00536-1 Na	5,04	50,0	28,04	9,0	5,24	48,1	252,15
FLC-00537-1 Na	19,90	23,9	26,04	18,3	63,90	7,4	475,39
FLC-00538-1 Na	42,16	22,4	102,98	9,2	165,83	5,7	942,88
FLC-00539-1 Na	7,06	46,1	27,26	11,9	1,53	212,7	325,73
FLCO0540-1 Na	36,98	24,1	53,86	16,5	202,97	4,4	890,82
FLC-00541-1 Na	<0,22	* 393,3	<0,28	® 309,0	0,001	86528,3	86,53
FLC-00542-1 Na	18,22	46,1	24,76	33,9	0,96	875,7	839,26
FLC-00543-1 Na	67,02	15,2	173,97	5,9	29,54	34,5	1017,78
FLC-00544-1 - Na	3,98	60,1	13,68	17,5	10,18	23,5	239,33
FLC-00545-1 Na	0,57	186,6	1,68	62,8	0,11	983,4	105,72
FLC-OO546-1 Na	111,85	19,5	257,76	8,5	56,99	38,3	2180,46
FLC-OO547-1 Na	<1,38	= 56,2	2,21	35,2	<0,15	517,2	77,59
FLC-00548-1 Na	42,47	17,0	64,50	11,2	35,18	20,5	722,61
FLC-00550-1 Na	10,63	42,1	16,86	26,6	3,87	115,8	447,78
FLC-00551-1 Na	63,64	12,5	80,96	9,8	34,85	22,7	792,37
FLC-00552-1 Na	4,02	46,7	5,84	32,1	2,44	76,7	187,48
FLC-00553-1 Na	5,16	52,6	13,54	20,1	1,87	145,0	271,44
FLC-00554-1 Na	417,94	13,9	380,11	15,3	262,89	22,1	5818,56
FLC-00557-1 Na	21,02	64,2	82,66	16,3	33,54	40,2	1349,45
FLC-00559-1 Na	329,78	16,2	299,93	17,8	335,69	15,9	5342,08
FLC-00560-1 Na	282,84	18,8	338,59	15,7	251,89	21,2	5329,82

102

PL 248049 Β1

FLC-00561-1 · Na	3,23	119,2	6,09	63,2	0,58	659,8	384,87
rLC-00562-1 Na	3006,61	*	3067,17	*	2714,96	*	n/a
FLC-00563-1 · Na	3118,68	*	3245,04	*	2227,57	*	n/a
FLC-00564-1 - Na	38,39	56,0	76,52	28,1	25,59	84,1	2151,74
FLC-00565-1 Na	1,70	185,7	5,44	58,2	0,17	1861,1	316,39
FLC-00566-1 Na	122,38	47,6	254,82	22,8	38,25	152,2	5821,03
FLC-00567-1 Na	15,66	54,2	33,96	25,0	6,32	134,1	848,21
FLC-00569-1 Na	19,45	41,3	28,85	27,8	4,25	189,1	802,95
FLC-00570-1 Na	30,04	21,2	43,68	14,6	23,24	27,4	636,30
FLC-00571-1 Na	6,28	84,3	22,12	23,9	2,57	206,0	529,34
FLC-00573-1 Na	48,66	38,7	158,20	11,9	29,82	63,2	1883,30
FLC-00577-1 Na	29,12	30,0	42,76	20,4	24,19	36,1	873,82
FLC-00578-1 Na	1,94	184,9	5,99	59,8	0,72	497,0	357,87
FLC-00579-1 Na	71,42	22,3	187,98	8,5	27,90	57,1	1594,11
FLC-00580-1 Na	2,24	94,4	6,51	32,5	1,36	156,0	211,36
FLC-00593-1 Na	<0,01	= 7220	<0,01	= 7220	<0,01	= 7220	72,2
FLC-00606-1 Na	<0,01	= 5240	<0,01	= 5240	<0,01	= 5240	52,4
FLC-00771-1 Na	<0,01	= 8000	<0,01	= 8000	<0,01	= 8000	80,0
Cisplatyna	2865,41	0,5	165,55	8,4	2865,41	0,5	1393,73

A2780Cis (ludzki rak jajnika oporny na cisplatynę). MV4-11 (ludzka białaczka bifenotypowa), NCI-H158L (ludzki rak płuca), B ALB/3T3 (normalne mysie fibroblasty), n/a - związek nieaktywny, nb. - związek nie badany / nie testowany na danej linii komórkowej, * nie można obliczy ć;

wartość współczynnika IC50 - stężenie związku, które odpowiada 50% hamowaniu wzrostu komórek użytych w⁷testach; SI > 1,0 związek wykazuje silniejsze działanie cytotoksycznc wobec komórek nowotworowych niż wobec komórek prawidłowych;

Z tabel 3.1., 3.2., 4 i 5 jednoznacznie wynika, że ujawnione związki otrzymane z wykorzystaniem związku pośredniego stanowiącego C20-aminosalinomycynę uzyskaną wynalazczymi sposobami wykazują aktywność przeciwnowotworową wobec komórek nowotworowych wywodzących się z różnych tkanek oraz narządów. Ponadto, uzyskane pochodne wykazują nawet kilkudziesięciokrotne silniejsze działanie przeciwproliferacyjne w porównaniu do związku macierzystego, np. związki o wzorach FLC00341, FLC-00374, FLC-00427, FLC-00345, FLC-00346, FLC-00347, FLC-00467, FLC-00463, FLC00464, FLC-00469, FLC-00470, FLC-00472, FLC-00473, FLC-00486, FLC-00457, FLC-00491, FLC00424, FLC-00436, FLC-00439, FLC-00446, FLC-00466, FLC-00468, FLC-00506, FLC-00475, FLC00553, FLC-00593, FLC-00606, FLC-00771. Wyniki badań aktywności wykonane wobec komórek lekowrażliwego oraz lekoopornego ludzkiego raka jajnika wskazują, że związki te posiadają zdolność do przełamywania lekooporności komórek nowotworowych. Ponadto, związki te charakteryzują się doskonałą selektywnością działania, co udowadnia ich wysoki potencjał terapeutyczny. Znawca będzie wiedział, jak dobrać konkretną pochodną do leczenia odpowiedniego typu nowotworu.

Ujawnione związki, tj. pochodne o zachowanej konfiguracji na węglu C20 względem wyjściowej salinomycny wykazują lepsze właściwości biologiczne niż ich odpowiedniki wykazujące konwersję konfiguracji czyli tzw. pochodne ep/-salinomycyny, o których wspomina stan techniki. Dla przykładu w tabeli 5 pokazano przykłady porównawcze:

PL 248049 Β1

103

- związek FLC-00366-1 oraz odpowiadająca mu pochodna epi oznaczona FLC-00524-1 Na

- związek FLC-00374-1 oraz odpowiadająca mu pochodna epi oznaczona FLC-00521-1 Na

Związki charakteryzują się niższymi wartościami IC50 oraz wyższymi wartościami SI względem odpowiadającym im związkom epi. Związki te mają zatem korzystniejszy profil działania względem znanych pochodnych salinomycyny.

Przykład FLC-00099-2 - według wynalazku, związek zastosowany do otrzymywania C20-aminosalinomycny sposobem według wynalazku

104

PL 248049 Β1

100 mg salinomycyny (1 eq) rozpuszczono w DCM i dodano PDC (1 eq). Reakcje prowadzono w RT przez 4 godziny (kontrola TLC i LC-MS). Mieszaninę poreakcyjną zawieszono na silikażelu i oczyszczono przy użyciu chromatografu z detektorem ELS, stosując kolumnę wypełnioną krzemionką. Odpowiednie frakcje połączono i zatężono, pozostałość rozpuszczono w DCM i przemyto dwukrotnie 0,06 M H2SO4. Wydajność -70%.

ESI-MS dla C42H68O11 (m/z): [M+Na]⁺ 771,9; [M-H]’ 747,9.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 7,15 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 6,11 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 4,10 (d, J= 6,6 Hz, 1H), 3,95 (d, J = 10,3 Hz, 1H), 3,89 (dd, J = 10,9, 5,8 Hz, 1H), 3,75 (d, J = 10,2 Hz, 1H), 3,54 (dd, J = 9,9, 1,9 Hz, 1H), 3,44 (t, J = 5,0 Hz, 1H), 3,28 - 3,08 (m, 1H), 2,84 (d, J = 3,9 Hz, 1H), 2,71 (dd, J = 10,3, 7,2 Hz, 1H), 2,60 (dd, J= 10,7, 2,1 Hz, 1H), 2,51 -2,41 (m, 1H), 2,11 -0,51 (m, 55H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 213,7, 190,5, 177,5, 144,1, 126,1, 105,9, 97,6, 91,1, 75,8, 75,0, 74,7, 72,5, 71,5, 68,1, 54,8, 49,3, 48,5, 40,0, 38,7, 36,3, 35,1, 34,4, 32,7, 30,4, 28,0, 26,2, 24,2, 22,7, 21,5, 19,7, 17,6, 15,7, 13,7, 12,9, 12,7, 11,8, 10,5, 6,6, 6,5 ppm.

Przykład FLC-00105-2 - według wynalazku

Do mieszaniny 100 mg ketonu FLC-00099-2 (1 eq), octanu amonu (6 eq), 7-10 M roztworu amoniaku w MeOH (4 eq) i MeOH wkroplono roztwór NaBHsCN (2 eq) w MeOH. Mieszano w temperaturze wrzenia do zaniku ketonu (kontrola TLC i LC-MS). Mieszaninę poreakcyjną zawieszono na silikażelu i oczyszczono przy użyciu chromatografu z detektorem ELS, stosując kolumnę wypełnioną krzemionką. Odpowiednie frakcje połączono i zatężono, pozostałość rozpuszczono w DCM i przemyto dwukrotnie 0,25 M Na2CO3. Wydajność -70%.

ESI-MS dla C42H71NO10 (m/z): [M+H]⁺ 751, [M-H]' 749.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 6,43 (t, J= 9,1 Hz, 2H), 4,32 (d, J= 9,8 Hz, 1H), 4,05 (m, 1H), 3,79 (dd, J = 10,9, 4,5 Hz, 1H), 3,64 (dd, J = 10,1, 2,0 Hz, 2H), 3,63- 3,48 (m, 2H), 2,72 (td, J= 11,0, 3,1 Hz, 1H), 2,63 (d, J = 10,7 Hz, 1H), 2,55 (dd, J = 16,5, 7,5 Hz, 1H), 2,22 - 2,09 (m, 1H), 2,05 - 0,85 (m, 46H), 0,76 (dt, J = 10,1, 5,6 Hz, 9H), 0,63 (d, J= 6,9 Hz, 3H) ppm.

¹³C NMR (176 MHz, CD2CI2) δ 216,1, 181,7, 132,1, 128,2, 107,0, 99,5, 86,8, 76,9, 76,2, 75,5,

72,5, 71,4, 70,7, 67,5, 65,6, 54,8, 50,8, 50,1, 47,9, 38,5, 37,2, 37,1, 36,1, 32,1, 31,0, 29,2, 27,9, 26,6,

24,4, 23,7, 21,9, 20,1, 16,9, 16,1, 15,1, 14,5, 12,5, 12,1, 10,6, 6,7, 6,0 ppm.

Strukturę krystalograficzną opublikowano w bazie CSD: DOI: 10.5517/ccdc.csd.cc28d584 CCDC Number: 2097065.

Poniższe przykłady prezentują wykorzystanie C20-aminosalinomycyny (C20-amino SAL) otrzymanej sposobami według wynalazku, do uzyskiwania szeregu związków leczniczych, które nie są tutaj zastrzegane.

PL 248049 Β1

105

Przykład FLC-0337-1

100 mg C20-amino SAL (1 eq) zmieszano z izocyjanianem benzylu (1,2 eq) w DCM. Reakcję prowadzono w RT (kontrola TLC i LC-MS). Mieszaninę poreakcyjną zawieszono na silikażelu i oczyszczono przy użyciu chromatografu z detektorem ELS, stosując kolumnę wypełnioną krzemionką. Odpowiednie frakcje połączono i zatężono, pozostałość rozpuszczono w DCM i przemyto dwukrotnie 0,06 M H2SO4. Produkt uzyskano z wydajnością 32%.

ESI-MS dla C50H78N2O11 (m/z): [M+H]⁺ 883,9, [M+Na]⁺ 909,9.

Ή NMR (700 MHz, CD2CI2) δ 7,39 (dd, J = 7,9, 0,8 Hz, 2H), 7,32 - 7,29 (m, 2H), 7,21 (t, J = 7,4 Hz, 1H), 6,77 (s, 1H), 6,35 (dd, J= 9,8, 6,6 Hz, 1H), 6,14 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 5,80 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 4,48 (ddd, J= 20,9, 12,4, 6,3 Hz, 2H), 4,34 (dd, J = 15,0, 5,0 Hz, 1H), 4,14 (dd, J= 10,1, 1,7 Hz, 1H), 3,94 (dd, J= 11,0, 5,5 Hz, 1H), 3,73 (q, J= 6,8 Hz, 1H), 3,69-3,65 (m, 2H), 3,45 (dd, J= 11,1,2,5 Hz, 1H), 2,97 (td, J = 11,1, 4,1 Hz, 1H), 2,66 (dq, J = 10,0, 7,1 Hz, 1H), 2,62 - 2,59 (m, 1H), 1,97 - 0,53 (m, 57H) ppm.

¹³C NMR (176 MHz, CD2CI2) δ 217,6, 178,3, 160,8, 140,2, 133,3, 129,0, 128,8, 128,3, 127,3, 109,4, 100,4, 86,8, 77,7, 75,9, 75,5, 74,0, 71,7, 71,4, 68,6, 56,3, 51,0, 49,5, 48,1,44,8, 39,8, 38,5, 38,2, 36,9, 34,2, 32,9, 30,9, 29,9, 28,7, 26,3, 23,9, 22,5, 21,6, 20,3, 17,7, 16,7, 16,0, 14,8, 13,3, 13,2, 12,4, 12,0, 7,5, 6,8 ppm.

Przykład FLC-00338-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-0337-1 przy czym zamiast izocyjanianu benzylu do mieszaniny reakcyjnej dodano izocyjanian 2-chloroetylu (1,2 eq). Po oczyszczaniu związek przemyto 0,25 M Na2COs zamiast 0,06 M H2SO4. Produkt uzyskano z wydajnością 64%.

ESI-MS dla C45H75CIN2O11 (m/z): [M+H]⁺ 855,7, [M+Na]⁺ 877,8.

Ή NMR (700 MHz, CD2CI2) δ 6,25 (t, J= 5,8 Hz, 1H), 6,08 (dd, J= 10,9, 3,0 Hz, 1H), 5,85 (d, J = 9,9 Hz, 1H), 5,68 (dd, J = 10,8, 1,9 Hz, 1H), 4,60 (ddd, J = 9,9, 2,9, 2,0 Hz, 1H), 4,30 (q, J = 6,7 Hz, 1H), 4,08 (dd, J = 10,5, 1,4 Hz, 1H), 3,82 (dd, J = 11,0, 4,9 Hz, 1H), 3,64 (dd, J= 10,2,2,2 Hz, 1H), 3,61 - 3,58 (m, 2H), 3,52 - 3,45 (m, 4H), 3,39 - 3,36 (m, 2H), 2,83 (td, J = 11,1, 3,3 Hz, 1H), 2,74 - 2,68 (m, 2H), 2,14 - 0,67 (m, 55H) ppm.

106

PL 248049 Β1 ¹³C NMR (176 MHz, CD2CI2) δ 219,6, 185,0, 157,9, 129,8, 123,0, 106,9, 99,2, 88,9, 76,3, 76,2, 75,9, 74,2, 71,6, 71,4, 68,4, 56,5, 50,8, 50,0, 47,2, 45,1, 44,2, 42,6, 41,0, 39,0, 37,5, 36,2, 32,9, 32,9, 32,5, 28,4, 28,1, 28,1, 27,1,23,9, 20,1, 17,6, 16,2, 15,9, 14,7, 13,3, 12,7, 12,4, 11,0, 6,8, 6,6 ppm.

Przykład FLC-00341-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-0337-1 przy czym zamiast izocyjanianu benzylu do mieszaniny reakcyjnej dodano izocyjanian cyklobutylu (1,2 eq). Po oczyszczaniu związek przemyto 0,25 M Na2COs zamiast 0,06 M H2SO4. Produkt uzyskano z wydajnością 47%.

ESI-MS dla C47H78N2O11 (m/z): [M+H]⁺ 848,1, [M+Na]⁺ 870,9.

Ή NMR (500 MHz, CD₂CI₂)5 6,06 (dd, J= 10,8, 2,9 Hz, 2H), 5,67 (dd, J= 10,8, 1,8 Hz, 1H), 5,58 (d, J= 9,9 Hz, 1H), 4,84 (s, 1H), 4,62-4,56 (m, 1H), 4,32 (q, J= 6,7 Hz, 1H), 4,18-4,05 (m, 2H), 3,83 (dd, J = 11,0, 4,5 Hz, 1H), 3,64 (dd, J= 10,1, 1,9 Hz, 1H), 3,59 (d, J= 10,1 Hz, 1H), 3,47 (dd, J= 12,4, 2,8 Hz, 1H), 2,83 (td, J= 11,1, 3,2 Hz, 1H), 2,75-2,66 (m, 2H), 2,25-0,65 (m, 62H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 219,5, 185,0, 156,9, 130,0, 122,8, 107,0, 99,1,88,7, 76,2, 76,1,75,8, 74,3, 71,5, 71,4, 68,3, 56,5, 50,9, 50,0, 46,8, 45,8, 40,9, 39,0, 37,3, 36,2, 32,9, 32,8, 32,7, 32,2, 31,8, 28,4, 28,1,28,0, 27,1, 24,0, 20,3, 20,0, 17,6, 16,1, 15,9, 15,1, 14,7, 13,2, 13,2, 12,3, 10,9, 6,8 ppm.

Przykład FLC-00344-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-0337-1 przy czym zamiast izocyjanianu benzylu do mieszaniny reakcyjnej dodano izocyjanian 3,5-bis(trifluorometylo)fenylu (1,2 eq). Po oczyszczaniu związek przemyto 0,25 M Na2COs zamiast 0,06 M H2SO4. Produkt uzyskano z wydajnością 22%.

ESI-MŚ dla C51H74F6N2O11 (m/z): [M+H]⁺ 1005,8, [M+Na]⁺ 1027,8.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 9,02 (s, 1H), 8,04 (s, 2H), 7,38 (s, 1H), 6,53 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 6,22 (s, 1H), 6,15 (dd, J= 10,8, 2,9 Hz, 1H), 5,73 (dd, J= 10,8, 1,8 Hz, 1H), 4,77-4,70 (m, 1H), 4,57 (s, 1H), 4,41 (q, J = 6,7 Hz, 1H), 4,11 (d, J = 10,3 Hz, 1H), 3,86 (dd, J= 11,0, 5,0 Hz, 1H), 3,62 (dd, J = 16,9, 6,3 Hz, 2H), 3,49 (dd, J= 12,3, 2,6 Hz, 1H), 2,84 (td, J= 11,0, 3,1 Hz, 1H), 2,79-2,70 (m, 2H), 2,18-0,61 (m, 55H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 219,6, 185,7, 154,9, 142,8, 131,85 (q) 128,4, 125,1, 123,9, 122,9, 117,7, 114,3, 106,7, 99,1, 89,0, 76,2, 76,1, 75,8, 74,2, 72,2, 71,5, 68,5, 56,5, 50,6, 49,8, 46,9, 40,9, 38,9, 37,8, 36,2, 32,9, 32,8, 32,8, 28,6, 28,4, 28,1, 26,9, 23,9, 20,4, 20,2, 17,6, 16,1, 15,8, 14,7, 13,2, 12,4, 11,0, 6,8, 6,6 ppm.

PL 248049 Β1

107

Przykład FLC-00350-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-0337-1 przy czym zamiast izocyjanianu benzylu do mieszaniny reakcyjnej dodano izocyjanian heptylu (1,2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 37%.

ESI-MŚ dla C50H86N2O11 (m/z): [M+H]⁺ 891,9, [M+Na]⁺ 913,9.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 6,42 (s, 1H), 6,27 (dd, J = 9,8, 6,4 Hz, 1H), 6,10 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 5,61 (d, J= 9,9 Hz, 1H), 4,42 (dd, J = 9,9, 6,4 Hz, 1H), 4,07 (dd, J = 10,1, 9,1 Hz, 1H), 3,91 (dd, J = 10,9, 5,2 Hz, 1H), 3,74 (q, J = 6,8Hz, 1H), 3,66 (d, J = 10,2 Hz, 1H), 3,61 (dd, J= 10,0, 1,7 Hz, 1H), 3,48-3,41 (m, 1H), 3,21 (td, J= 12,9, 6,6 Hz, 1H), 3,10(td, J= 11,9, 6,5 Hz, 1H), 2,94 (td, J = 10,8, 3,7 Hz, 1H), 2,73 - 2,61 (m, 2H), 2,03 - 0,60 (m, 60H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 217,4, 178,2, 160,5, 133,1, 126,4, 109,1, 100,2, 86,6, 77,5, 75,7, 75,5, 73,8, 71,3, 71,2, 68,3, 56,0, 50,7, 49,1, 47,9, 40,6, 39,7, 38,3, 37,9, 36,8, 33,8, 32,8, 32,2, 30,6, 30,5, 29,7, 29,6, 28,4, 27,5, 26,1, 23,9, 23,1, 22,3, 21,3, 20,2, 17,6, 16,5, 15,8, 14,6, 14,3, 13,1, 13,1, 12,2, 11,8, 7,3, 6,7 ppm.

Przykład FLC-00351-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-0337-1 przy czym zamiast izocyjanianu benzylu do mieszaniny reakcyjnej dodano izocyjanian cyklopentylu (1,2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 44%.

ESI-MS dla C48H80N2O11 (m/z): [M+H]⁺ 862,2, [M+Na]⁺ 885,1.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 6,31 (s, 1H), 6,24 (dd, J = 9,9, 6,1 Hz, 1H), 6,10 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 5,59 (d, J= 9,9 Hz, 1H), 4,40 (dd, J= 9,9, 6,1 Hz, 1H), 4,05 (h, J=6,4 Hz, 2H), 3,91 (dd, J = 10,9, 5,2 Hz, 1H), 3,76 (q, J= 6,8 Hz, 1H), 3,69 (d, J= 10,2 Hz, 1H), 3,62 (dd, J= 10,0, 1,7 Hz, 1H), 3,52 - 3,45 (m, 1H), 2,95 (td, J= 11,0, 4,0 Hz, 1H), 2,72-2,61 (m, 2H), 1,96-0,62 (m, 65H) ppm.

¹³CNMR(126 MHz, CD2CI2) δ 217,3, 178,2, 159,8, 133,0, 126,1, 109,0, 100,2, 86,7, 77,4, 75,7, 75,5, 74,0, 71,3, 71,2, 68,4, 56,1, 52,1, 50,6, 49,0, 48,0, 39,9, 38,3, 37,8, 36,8, 34,1, 33,8, 33,2, 32,8, 30,5, 29,7, 28,4, 26,1, 24,0, 23,9, 22,4, 21,3, 20,2, 17,6, 16,5, 15,8, 14,7, 13,2, 13,1, 12,3, 11,8, 7,3, 6,7 ppm.

108

PL 248049 Β1

Przykład FLC-00353-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-0337-1 przy czym zamiast izocyjanianu benzylu do mieszaniny reakcyjnej dodano izocyjanian allilu (1,2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 92%.

ESI-MŚ dla C46H76N2O11 (m/z): [M+H]⁺ 834,2, [M+Na]⁺ 857,0.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 6,39 (s, 1H), 6,23 (dd, J= 9,9, 6,0 Hz, 1H), 6,11 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 5,90 (ddd, J = 22,6, 10,7, 5,5 Hz, 1H), 5,74 (d, J = 9,9Hz, 1H), 5,23 (dd, J = 17,2, 1,6 Hz, 1H), 5,06 (dd, J = 10,3, 1,4 Hz, 1H), 4,43 (dd, J = 9,8, 6,0 Hz, 1H), 4,09-4,04 (m, 1H), 3,92 (dd,J= 10,9, 5,3 Hz, 1H), 3,80 (t, J = 5,5 Hz, 2H), 3,75 (q, J = 6,8 Hz, 1H), 3,68 (d, J = 10,2 Hz, 1H), 3,62 (dd, J = 10,0, 1,7 Hz, 1H), 3,50-3,44 (m, 1H), 2,95 (td, J= 11,0, 4,0 Hz, 1H), 2,73-2,66 (m, 1H), 2,63 (d, J = 10,2 Hz, 1H), 2,02-0,66 (m, 57H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 217,5, 178,3, 160,2, 136,3, 132,7, 126,2, 115,4, 108,8, 100,1, 86,8, 77,5, 75,7, 75,5, 73,8, 71,4, 71,3, 68,4, 56,1, 50,6, 49,2, 48,0, 43,1, 39,9, 38,3, 37,9, 36,8, 33,6, 32,8, 30,8, 29,6, 28,4, 26,1, 24,1, 22,4, 21,3, 20,2, 17,6, 16,6, 15,8, 14,6, 13,2, 13,1, 12,2, 11,7, 7,3, 6,6 ppm.

Przykład FLC-00358-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-0337-1 przy czym zamiast izocyjanianu benzylu do mieszaniny reakcyjnej dodano izocyjanian etylu (1,2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 72%.

ESI-MŚ dla C45H76N2O11 (m/z): [M+H]⁺ 821,9, [M+Na]⁺ 843,9.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 6,22 (dd, J = 10,0, 5,9 Hz, 2H), 6,10 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 5,63 (d, J= 9,9 Hz, 1H), 4,41 (dd, J=9,9, 5,9 Hz, 1H), 4,05 (dd, J= 10,1, 1,2 Hz, 1H), 3,91 (dd, J= 11,0, 5,2 Hz, 1H), 3,75 (q, J = 6,8 Hz, 1H), 3,69 (d, J = 10,2 Hz, 1H), 3,63 - 3,60 (m, 1H), 3,49 - 3,44 (m, 1H), 3,24-3,15 (m, 2H), 2,95 (td, J = 11,1, 4,0 Hz, 1H), 2,72 - 2,66 (m, 1H), 2,63 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 2,02-0,65 (m, 50H) ppm.

¹³C NMR (151 MHz, CD2CI2) δ 217,4, 178,3, 160,2, 132,9, 126,0, 108,9, 100,1, 86,8, 77,5, 75,7, 75,6, 73,8, 71,4, 71,2, 68,4, 67,4, 56,1, 50,6, 49,1, 48,0, 39,9, 38,3, 37,9, 36,8, 35,3, 33,6, 32,8, 30,7, 29,6, 28,4, 26,1, 24,2, 22,4, 21,3, 20,2, 17,7, 16,6, 15,8, 15,5, 14,6, 13,2, 12,2, 11,8, 7,3, 6,6 ppm.

PL 248049 Β1

109

Przykład FLC-00359-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-0337-1 przy czym zamiast izocyjanianu benzylu do mieszaniny reakcyjnej dodano izocyjanian 2,4-difluorofenylu (1,2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 37%.

ESI-MS dla C49H74F2N2O11 (m/z): [M+Na]⁺ 927,9.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 8,44 (s, 1H), 7,89 (td, J = 8,8, 6,2 Hz, 1H), 6,90 - 6,78 (m, 2H), 6,25 (d, J=9,6Hz, 1H), 6,22 - 6,16 (m, 2H), 4,51 (dd, J = 9,6, 4,7 Hz, 1H), 4,19 (dd, J = 10,1, 1,1 Hz, 1H), 3,80 (q, J = 6,7 Hz, 1H), 3,70 (p, J = 6,2 Hz, 2H), 3,63 - 3,59 (m, 1H), 3,52 (dd, J = 10,1, 7,7 Hz, 1H), 2,91 (td, J = 10,9, 4,3 Hz, 1H), 2,76-2,66 (m, 2H), 2,06 - 0,64 (m, 57H) ppm.

¹³C NMR (151 MHz, CD2CI2) δ 217,8, 178,3, 158,95 (d) 157,4, 157,34 (d) 154,53 (d) 152,89 (d) 131,8, 124,58 (dd) 123,52 (d) 126,5, 110,81 (dd) 108,3, 103,62 (dd) 100,1, 87,2, 77,4, 75,8, 75,4, 73,6, 67,4, 56,0, 50,6, 49,3, 47,9, 40,0, 38,4, 38,0, 36,7, 33,2, 32,8, 31,0, 29,6, 28,4, 26,1, 24,4, 22,3, 21,4, 20,1, 17,6, 16,6, 15,8, 14,7, 13,1, 13,0, 12,1, 11,7, 7,2, 6,5 ppm.

Przykład FLC-00362-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-0337-1 przy czym zamiast izocyjanianu benzylu do mieszaniny reakcyjnej dodano izocyjanian 2-fenyloetylu (1,2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 25%.

ESI-MS dla C51H80N2O11 (m/z): [M+Na]⁺ 920,1.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 7,30 - 7,24 (m, 4H), 7,22 - 7,14 (m, 1H), 6,44 (s, 1H), 6,25 (dd, J = 9,9, 6,1 Hz, 1H), 6,12 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 5,70 (d, J= 9,9 Hz, 1H), 4,45 (dd, J= 9,8, 6,1 Hz, 1H), 4,05 (dd, J = 10,0, 1,3 Hz, 1H), 3,94 (dd, J = 11,0, 5,2 Hz, 1H), 3,72 (p, J = 6,9 Hz, 1H), 3,68-3,61 (m, 1H), 3,44 (ddd, J = 18,0, 11,7, 4,9 Hz, 3H), 2,97 (td, J = 11,1, 4,0 Hz, 1H), 2,83 (td, J = 7,9, 2,6 Hz, 2H), 2,68 - 2,60 (m, 1H), 2,00 - 0,64 (m, 59H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 217,2, 178,3, 160,3, 140,3, 132,8, 129,2, 128,7, 126,4, 126,3, 108,9, 100,1,86,8, 77,5, 75,7, 75,6, 73,8, 71,5, 71,2, 68,2, 55,9, 50,6, 49,2, 48,0, 42,0, 39,8, 38,3, 37,9, 36,8, 36,8, 33,6, 32,8, 30,7, 29,7, 28,4, 26,1, 24,2, 22,4, 21,4, 20,2, 17,6, 16,5, 15,8, 14,6, 13,1, 13,0, 12,3, 11,8, 7,3, 6,7 ppm.

110

PL 248049 Β1

Przykład FLC-00363-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-0337-1 przy czym zamiast izocyjanianu benzylu do mieszaniny reakcyjnej dodano izocyjanian 4-fluorofenylu (1,2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 48%.

ESI-MS dla C49H75FN2O11 (m/z): [M-H]’ 886,1, [M+Na]⁺ 910,2.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 8,50 (s, 1H), 7,39 - 7,31 (m, 2H), 7,00 - 6,90 (m, 2H), 6,22 - 6,13 (m, 2H), 6,03 (d, J = 9,9 Hz, 1H), 4,52 (dd, J = 9,8, 4,0 Hz, 1H), 4,19 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 3,83 (q, J = 6,8 Hz, 1H), 3,73- 3,66 (m, 2H), 3,62 (dd, J = 10,0,2,2 Hz, 1H), 3,51 (dd, J = 11,6, 2,4 Hz, 1Η), 2,90 (td, J = 10,9, 4,4 Hz, 1H), 2,79-2,72 (m, 1H), 2,69 (d, J = 9,9 Hz, 1H), 2,06-0,67 (m, 57H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 218,1, 178,5, 159,8, 157,9, 157,8, 136,2, 132,0, 126,3, 122,14 (d) 115,4, 115,2, 108,4, 100,1, 87,0, 77,3, 75,9, 75,4, 73,7, 71,5, 71,5, 68,5, 56,0, 50,4, 48,9, 47,8, 40,0, 38,4, 38,0, 36,7, 33,5, 32,9, 31,1, 29,5, 28,4, 26,1, 24,6, 22,2, 21,3, 20,2, 17,7, 16,5, 15,8, 14,6, 13,2, 13,1, 12,2, 11,8, 7,3, 6,6 ppm.

Przykład FLC-00364-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-0337-1 przy czym zamiast izocyjanianu benzylu do mieszaniny reakcyjnej dodano izocyjanian p-toluenosulfonylu (1,2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 77%.

ESI-MS dla C50H78N2O13S (m/z): [M-H]' 946,2, [M+Na]⁺ 970,0.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 7,87 (d, J= 8,3 Hz, 2H), 7,31 (d, J= 8,1 Hz, 2H), 6,45 (d, J= 9,7 Hz, 1H), 6,12 (dd, J = 10,4, 1,5 Hz, 1H), 5,85 (dd, J= 10,3, 3,3 Hz, 1H), 4,31 (dd, J = 9,7, 2,1 Hz, 1H), 4,09 (d, J = 10,2 Hz, 1H), 3,93 (dd, J= 10,8, 5,6 Hz, 1H), 3,84 (q, J= 6,7 Hz, 1H), 3,72 (d, J= 9,5 Hz, 1H), 3,61 (d, J= 9,6 Hz, 1H), 3,45 (d, J = 11,2 Hz, 1H), 2,94 (td, J= 10,8, 4,0 Hz, 1H), 2,81 -2,73 (m, 1H), 2,64 (d, J = 10,2 Hz, 1H), 2,43 (s, 3H), 2,01 -0,68 (m, 58H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 217,2, 178,6, 152,4, 144,4, 137,6, 130,2, 129,7, 128,3, 125,2, 107,0, 99,6, 87,6, 77,1, 76,4, 75,3, 73,6, 72,1, 71,9, 68,9, 55,8, 49,7, 49,1,48,5, 40,6, 38,5, 37,7, 36,6, 33,0, 31,3, 28,8, 28,6, 26,4, 25,3, 22,8, 21,7, 20,8, 20,3, 17,7, 16,3, 15,8, 14,6, 13,3, 13,3, 12,2, 11,5, 7,4, 6,5 ppm.

PL 248049 Β1

111

Przykład FLC-00365-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-0337-1 przy czym zamiast izocyjanianu benzylu do mieszaniny reakcyjnej dodano izocyjanian benzenosulfonylu (1,2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 62%.

ESI-MS dla C49H76N2O13S (m/z): [M-H]’ 932,1, [M+Na]⁺ 956,0.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 8,05 - 7,98 (m, 1H), 7,61 (t, J = 7,4 Hz, 1H), 7,52 (t, J = 7,7 Hz, 2H), 6,46 (d, J= 9,7 Hz, 1H), 6,13 (dd, J= 10,4, 1,2 Hz, 1H), 5,87 (dd, J= 10,3, 3,7 Hz, 1H), 4,32 (dd, J = 9,7, 2,8 Hz, 1H), 4,09 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 3,93 (dd, J= 10,7, 5,6 Hz, 1H), 3,84 (q, J= 6,7 Hz, 1H), 3,71 (d, J = 11,0 Hz, 1H), 3,63-3,60 (m, 1H), 3,45-3,40 (m, 1H), 2,95 (td, J= 10,8, 4,1 Hz, 1H), 2,77 (dq, J = 14,4, 7,2 Hz, 1H), 2,64 (d, J = 10,4 Hz, 1H), 2,03-0,67 (m, 59H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 217,4, 178,5, 152,4, 140,6, 133,4, 130,3, 129,0, 128,3, 125,4, 107,0, 99,6, 87,6, 77,1, 76,5, 75,3, 73,5, 72,1, 71,9, 68,9, 55,8, 49,7, 49,2, 48,4, 40,5, 38,5, 37,8, 36,6, 32,9, 32,9, 31,3, 28,9, 28,6, 26,4, 25,2, 22,7, 20,8, 20,3, 17,7, 16,3, 15,8, 14,5, 13,3, 12,2, 11,5, 7,5, 6,5 ppm.

Przykład FLC-00366-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-0337-1 przy czym zamiast izocyjanianu benzylu do mieszaniny reakcyjnej dodano izocyjanian oktylu (1,2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 75%.

ESI-MS dla C51H88N2O11 (m/z): [M+H]⁺ 906,1, [M+Na]⁺ 928,2.

Ή NMR (500 MHz, CDCI3) δ 6,29 - 6,22 (m, 1H), 6,14 (s, 1H), 6,09 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 5,67 (d, J = 9,7 Hz, 1H), 4,44 (dd, J=9,8, 5,7 Hz, 1H), 4,09 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 3,94 (dd, J= 10,9, 5,3 Hz, 1H), 3,82-3,75 (m, 1H), 3,72-3,64 (m, 1H), 3,52 (d, J = 10,6 Hz, 1H), 3,22 (td, J= 12,8, 6,6 Hz, 1H), 3,13 (td, J= 12,5, 6,9 Hz, 1H), 2,93 (td, J = 11,0, 3,9 Hz, 1H), 2,65 (dq, J = 14,4, 7,1 Hz, 1H), 2,56 (d, J = 10,2 Hz, 1H), 2,13 - 0,63 (m, 75H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CDCI3) δ 216,3, 178,0, 159,9, 132,6, 125,3, 108,3, 99,6, 86,0, 75,2, 75,2, 73,9, 71,3, 71,1, 68,1, 56,0, 50,3, 48,6, 47,8, 40,4, 39,5, 38,2, 37,4, 36,5, 33,9, 32,5, 32,0, 30,3, 29,6, 29,4, 29,3, 28,1, 27,2, 26,0, 23,8, 22,8, 22,2, 21,2, 20,0, 17,8, 16,4, 15,8, 14,6, 14,2, 13,2, 13,0, 12,2, 11,7, 7,2, 6,6 ppm.

112

PL 248049 Β1

Przykład FLC-00367-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-0337-1 przy czym zamiast izocyjanianu benzylu do mieszaniny reakcyjnej dodano izocyjanian 3,3,3-trichlorpropionylu (1,2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 21%.

ESI-MS dla C45H71CI3N2O12 (m/z): [M-H]’ 936,0, [M+Na]⁺ 962,1.

Ή NMR (500 MHz, CDCI3) δ 9,24 (s, 1H), 7,71 (s, 1H), 6,21 (dd, J = 10,5, 1,9 Hz, 1H), 5,96 (d, J = 10,4 Hz, 1H), 4,57 (dt, J = 9,3, 2,4 Hz, 1H), 4,17 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 3,97 (dd, J = 10,9, 5,7 Hz, 1H), 3,79 - 3,74 (m, 2H), 3,73 - 3,66 (m, 1H), 3,63 (d, J = 9,9 Hz, 1H), 2,90 (td, J = 10,9, 3,7 Hz, 1H), 2,77 (dq, J= 14,5, 7,1 Hz, 1H), 2,63 (d, J= 9,3 Hz, 1H), 2,19-0,67 (m, 57H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CDCI3) δ 216,1, 178,0, 160,5, 152,2, 128,8, 125,1, 106,0, 99,7, 92,0, 88,3, 76,2, 74,8, 72,9, 72,5, 71,6, 71,3, 68,4, 56,1, 50,0, 49,2, 48,6, 40,7, 38,7, 36,6, 36,5, 32,7, 30,5, 29,8, 29,3, 28,1,26,3, 24,4, 22,6, 21,9, 20,0, 17,9, 17,0, 15,8, 14,4, 13,3, 13,0, 42,1, 11,2, 7,0, 6,6 ppm.

Przykład FLC-00370-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-0337-1 przy czym zamiast izocyjanianu benzylu do mieszaniny reakcyjnej dodano izocyjanian 3,4-dichlorofenylu (1,2 eq). Po oczyszczaniu związek przemyto 0,25 M Na2CO3 zamiast 0,06 M H2SO4. Produkt uzyskano z wydajnością 76%.

ESI-MS dla C49H74CI2N2O11 (m/z): [M-H]' 936,1, [M+Na]⁺ 960,0.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 8,57 (s, 1H), 7,74 (dd, J= 9,3, 2,4 Hz, 1H), 7,32 (dd, J= 8,8, 2,4 Hz, 1H), 7,24 (dd, J= 8,8, 5,2 Hz, 1H), 6,34 (d, J = 9,7 Hz, 1H), 6,13 (dd, J = 10,8, 2,9 Hz, 1H), 5,72 (dd, J = 10,8, 1,6 Hz, 1H), 4,70 (d, J= 9,6 Hz, 1H), 4,36 (q, J= 6,7 Hz, 1H), 4,09 (d, J = 10,4 Hz, 1H), 3,86 (dd, J = 11,0, 5,1 Hz, 1H), 3,63 -3,59 (m„ 2H), 3,48 (dd, J = 12,3, 2,6 Hz, 1H), 2,83 (td, J= 11,0, 3,1 Hz, 1H), 2,79 - 2,68 (m, 2H), 2,26 - 0,58 (m, 57H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 219,7, 185,5, 154,9, 142,2, 141,0, 132,2, 130,3, 128,7, 123,9, 123,6, 120,9, 119,6, 117,7, 106,8, 99,1, 88,9, 76,2, 76,0, 75,8, 74,1, 72,0, 71,5, 68,5, 56,5, 50,6, 49,9, 46,9, 40,9, 38,9, 37,7, 36,1, 32,9, 32,8, 28,4, 28,0, 27,0, 23,7, 20,2, 17,6, 16,1, 15,8, 14,7, 13,2, 12,5, 12,4, 11,0, 6,9, 6,8 ppm.

PL 248049 Β1

113

Przykład FLC-00371-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-0337-1 przy czym zamiast izocyjanianu benzylu do mieszaniny reakcyjnej dodano izocyjanian 4-metoksyfenylu (1,2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 43%.

ESI-MS dla C50H78N2O12 (m/z): [M+H]⁺ 902,2, [M+Na]⁺ 922,2.

Ή NMR (500 MHz, CDCI3) δ 8,14 (s, 1H), 7,28 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 6,79 (d, J = 8,5 Hz, 2H), 6,22-6,10 (m, 2H), 5,97 (d, J= 9,5 Hz, 1H), 4,57-4,49 (m, 1H), 4,23 (d, J= 9,6 Hz, 1H), 3,85 (d, J = 6,3 Hz, 1H), 3,79-3,72 (m, 5H), 3,55 (d, J = 10,6 Hz, 1H), 2,87 (t, J=8,5Hz, 1H), 2,75-2,67 (m, 1H), 2,60 (d, J = 10,5 Hz, 1H), 2,13 - 0,59 (m, 58H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CDCI3) δ 216,6, 178,2, 157,6, 155,3, 132,9, 131,8, 125,2, 122,1, 113,9, 107,8, 99,5, 86,3, 75,5, 75,0, 73,7, 71,5, 71,2, 68,3, 55,9, 55,6, 50,1, 48,5, 47,6, 39,7, 38,3, 37,5, 36,3, 33,6, 32,5, 30,8, 29,1, 28,2, 26,0, 24,2, 22,0, 21,1, 20,1, 17,8, 16,3, 15,8, 14,6, 13,2, 13,1, 12,2, 11,8, 7,2, 6,6 ppm.

Przykład FLC-00374-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-0337-1 przy czym zamiast izocyjanianu benzylu do mieszaniny reakcyjnej dodano izocyjanian fenylu (1,2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 80%.

ESI-MŚ dla C49H76N2O12 (m/z): [M-H]’ 868,0, [M+Na]⁺ 891,9.

Ή NMR (500 MHz, CDCI3) δ 8,27 (s, 1H), 7,40 (d, J = 7,7 Hz, 2H), 7,23 (t, J = 7,9 Hz, 2H), 6,95 (t, J= 7,4 Hz, 1H), 6,18-6,12 (m, 2H), 6,04 (d, J= 9,9 Hz, 1H), 4,55 (dd, J= 9,9, 3,1 Hz, 1H), 4,21 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 3,88 (q, J=6,7Hz, 1H), 3,77 - 3,72 (m, 2H), 3,65 (dd, J= 10,0,2,2 Hz, 1H), 3,57 (dd, J= 11,8, 1,9 Hz, 1H), 2,87 (td, J = 10,9, 3,9 Hz, 1H), 2,72 (dq, J= 14,4,7,1 Hz, 1H), 2,61 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 2,10-0,64 (m, 57H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CDCI3) δ 216,5, 178,2, 157,1, 139,9, 131,6, 128,7, 125,2, 122,2, 119,6, 107,6, 99,4, 86,3, 75,5, 75,0, 73,8, 71,6, 71,2, 68,3, 55,9, 50,0, 48,4, 47,7, 39,8, 38,3, 37,6, 36,3, 33,5, 32,5, 30,9, 29,1,28,2, 26,1,24,4, 22,1,21,1, 20,2, 17,8, 16,2, 15,8, 14,6, 13,3, 13,2, 12,1, 11,8, 7,3, 6,6 ppm.

114

PL 248049 Β1

Przykład FLC-00381-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-0337-1 przy czym zamiast izocyjanianu benzylu do mieszaniny reakcyjnej dodano izocyjanian 2-trifluorometylofenylu (1,2 eq) i dodatkowo TEA (2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 69%.

ESI-MS dla C50H75F3N2O11 (m/z): [M-H]’ 936,3, ‘[M+Na]⁺ 959,9.

Ή NMR (500 MHz, CDCI₃)5 8,01 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,59 (s, J = 18,1 Hz, 1H), 7,54 (d, J=7,4 Hz, 1H), 7,46 (t, J= 7,4 Hz, 1H), 7,10 (t, J= 7,1 Hz, 1H), 6,36 (d, J= 8,1 Hz, 1H), 6,16 (s, 2H), 4,49 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 4,20 (d, J = 9,7 Hz, 1H), 3,95 (d, J = 4,3 Hz, 1H), 3,76 (t, J = 9,6 Hz, 2H), 3,70 - 3,63 (m, 2H), 2,92 (t, J= 8,7 Hz, 1H), 2,72-2,64 (m, 1H), 2,60 (d, J = 10,6 Hz, 1H), 2,11 -0,59 (m, 57H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CDCI3) δ 215,4, 177,7, 156,5, 137,2, 132,4, 131,0, 126,0, 125,3, 124,7, 123,2, 122,9, 121,9, 107,1, 99,6, 87,1, 75,5, 74,9, 73,7, 71,5, 71,2, 68,2, 55,7, 50,2, 49,6, 48,1, 40,2, 38,5, 37,1, 36,4, 32,6, 30,6, 29,8, 29,0, 28,2, 26,1, 24,3, 22,4, 21,5, 20,1, 17,8, 16,5, 15,8, 14,7, 13,1, 12,8, 12,0, 11,6, 7,2, 6,4 ppm.

Przykład FLC-00383-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-0337-1 przy czym zamiast izocyjanianu benzylu do mieszaniny reakcyjnej dodano izocyjanian 4-fluorobenzylu (1,2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 36%.

ESI-MS dla C50H77FN2O11 (m/z): [M-H]' 900,0, [M+Na]⁺ 923,9.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 7,37 (dd, J = 8,5, 5,6 Hz, 2H), 7,02 - 6,97 (m, 2H), 6,72 (s, 1H), 6,14 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 5,83 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 4,51-4,45 (m, 2H), 4,27 (dd, J = 14,9, 4,5 Hz, 1H), 4,10 (dd, J = 10,0, 1,3 Hz, 1H), 3,92 (dd, J= 11,0, 5,4 Hz, 1H), 3,76-3,71 (m, 1H), 3,69-3,66 (m, 2H), 3,44 (dd, J = 10,9, 2,4 Hz, 1Η), 2,97 (td, J = 11,0, 4,1 Hz, 1H), 2,69-2,59 (m, 2H), 2,01 - 0,56 (m, 58H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 217,5, 178,2, 162,31 (d) 160,4, 135,9, 132,9, 129,9, 129,8, 126,7, 115,3, 115,2, 109,2, 100,2, 86,7, 77,5, 75,7, 75,3, 73,8, 71,5, 71,2, 68,4, 56,0, 50,7, 49,3, 48,0, 43,8, 39,7, 38,3, 37,9, 36,8, 33,9, 32,7, 30,7, 29,6, 28,4, 26,1, 24,0, 22,4, 21,3, 20,1, 17,6, 16,5, 15,8, 14,6, 13,1, 13,0, 12,2, 11,8, 7,3, 6,6 ppm.

PL 248049 Β1

115

Przykład FLC-00384-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-0337-1 przy czym zamiast izocyjanianu benzylu do mieszaniny reakcyjnej dodano izocyjanian cykloheksylu (1,2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 21%.

ESI-MS dla C49H82N2O11 (m/z): [M+H]⁺ 876,2, [M+Na]⁺ 898,0.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 6,24 (dd, J=9,6, 6,2 Hz, 2H), 6,10 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 5,59 (d, J = 9,9 Hz, 1H), 4,41 (dd, J= 9,8, 6,2 Hz, 1H), 4,09 (d, J= 9,9 Hz, 1H), 3,88 (dd, J = 10,8, 5,0 Hz, 1H), 3,75 (q, J = 6,6 Hz, 1H), 3,68 (d, J = 10,2 Hz, 1H), 3,62 (d, J = 9,7 Hz, 1H), 3,56 (dd, J = 13,3, 9,3 Hz, 1H), 3,47 (d, J=7,1 Hz, 1H), 2,95 (td, J= 10,9,3,6 Hz, 1H), 2,70 - 2,61 (m, 2H), 2,03-0,64 (m, 67H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 217,2, 178,2, 159,6, 133,0, 126,1, 109,0, 100,2,86,7,77,5, 75,7, 75,5, 73,9, 71,3, 71,2, 68,4, 56,1, 50,7, 49,0, 47,9, 39,8, 38,3, 37,8, 36,8, 34,5, 33,9, 33,4, 32,8, 30,6, 29,7, 28,4, 26,1, 26,1, 25,4, 25,2, 23,8, 22,4, 21,3, 20,2, 17,6, 16,5, 15,8, 14,7, 13,2, 12,3, 11,8, 7,3, 6,6 ppm.

Przykład FLC-00385-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-0337-1 przy czym zamiast izocyjanianu benzylu do mieszaniny reakcyjnej dodano izocyjanian 3-trifluorometylofenylu (1,2 eq) i dodatkowo TEA (2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 14%.

ESI-MS dla C50H75F3N2O11 (m/z): [M-H]’ 936,l/[M+H]⁺ 938,2, [M+Na]⁺ 959,9.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 8,85 (s, 1H), 7,70 (s, 1H), 7,59 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,38 (t, J = 7,9 Hz, 1H), 7,23 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 6,22 - 6,16 (m, 2H), 6,11 (d, J= 9,9 Hz, 1H), 4,54 (dd, J = 9,9, 4,4 Hz, 1Η), 4,20 (dd, J = 10,1, 1,3 Hz, 1H), 3,83 (q, J=6,8Hz, 1H), 3,70 (d, J = 10,2 Hz, 1H), 3,59 (dd, J = 10,0, 2,2 Hz, 1H), 3,52 (dd, J = 11,6, 2,7 Hz, 2H), 2,87 (td, J = 10,7, 4,7 Hz, 1H), 2,79-2,73 (m, 1H), 2,70 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 2,07 - 0,64 (m, 57H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 218,6, 178,5, 157,6, 140,7, 131,8, 130,94 (d) 129,4, 126,5, 125,8, 123,4, 119,0, 116,7, 108,4, 100,1, 86,9, 77,4, 76,0, 75,3, 73,8, 71,6, 71,4, 68,5, 56,0, 50,5, 48,9, 47,6, 39,9, 38,3, 38,1, 36,6, 33,6, 32,8, 31,1, 29,4, 28,4, 26,1, 24,3, 22,1, 21,3, 20,1, 17,6, 16,5, 15,8, 14,6, 13,2, 13,1, 12,1, 11,7, 7,4, 6,6 ppm.

116

PL 248049 Β1

Przykład FLC-00388-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-0337-1 przy czym zamiast izocyjanianu benzylu do mieszaniny reakcyjnej dodano izocyjanian 4-chlorofenylu (1,1 eq). Po oczyszczaniu związek przemyto 0,25 M NazCOs zamiast 0,06 M H2SO4. Produkt uzyskano z wydajnością 22%.

ESI-MS dla C49H75CIN2O11 (m/z): [M+H]⁺ 904,0, [M+Na]⁺ 926,0, [M-H]’ 902,0.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 8,41 (s, 1H), 7,43 (d, J= 8,9 Hz, 2H), 7,14 (d, J= 8,9 Hz, 2H), 6,22 (d, J= 9,7 Hz, 1H), 6,12 (dd, J = 10,8, 2,9 Hz, 1H), 5,72 (dd, J = 10,8, 1,6 Hz, 1H), 4,70 (d, J= 9,6 Hz, 1H), 4,35 (q, J= 6,5 Hz, 1H), 4,08 (d, J = 10,4 Hz, 1H), 3,85 (dd, J = 10,9, 5,0 Hz, 1H), 3,63-3,57 (m, 2H), 3,47 (dd, J = 12,3, 2,7 Hz, 1H), 2,83 (td, J = 11,1,3,2 Hz, 1H), 2,75-2,66 (m, 2H), 2,12-0,69 (m, 56H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 219,2, 185,0, 154,7, 139,5, 128,6, 128,3, 125,6, 123,0, 119,1, 106,4, 98,7, 88,5, 75,8, 75,5, 75,4, 73,7, 71,6, 71,1, 68,1, 56,1, 50,2, 49,5, 46,5, 40,5, 38,5, 37,2, 35,7, 32,5, 32,4, 29,7, 28,0, 27,6, 26,6, 23,3, 19,8, 17,2, 15,7, 15,4, 14,3, 12,8, 12,1, 12,0, 10,6, 6,4 ppm.

Przykład FLC-00389-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-0337-1 przy czym zamiast izocyjanianu benzylu do mieszaniny reakcyjnej dodano izocyjanian etoksykarbonylu (1,2 eq). Po oczyszczaniu związek przemyto 0,25 M Na2CO3, zamiast 0,06 M H2SO4. Produkt uzyskano z wydajnością 30%.

ESI-MS dla C46H76N2O13 (m/z): [M+Na]⁺ 888,0, [M-H]' 864,2.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 9,21 (s, 1H), 6,35 (d, J = 9,7 Hz, 1H), 6,11 (dd, J = 10,9, 3,0 Hz, 1H), 5,70 (dd, J = 10,8, 1,8 Hz, 1H), 4,74 (s, 1H), 4,72 - 4,66 (m, 1H), 4,29 (q, J = 6,6 Hz, 1H), 4,10-4,04 (m, 3H), 3,83 (dd, J = 11,0, 4,7 Hz, 1H), 3,63 - 3,59 (m, 2H), 3,50 (dd, J = 12,3, 3,1 Hz, 1H), 2,82 (td, J= 11,0, 3,4 Hz, 1H), 2,77-2,67 (m, 2H), 2,08-0,66 (m, 50H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 219,8, 185,4, 152,6, 152,4, 128,5, 123,6, 106,4, 99,2, 89,1, 76,3, 76,2, 75,9, 73,8, 71,9, 71,5, 68,5, 61,1, 56,5, 50,7, 50,0, 46,9, 40,9, 38,9, 37,6, 36,1, 32,8, 32,8, 32,2, 28,4, 28,0, 27,0, 26,8, 23,8, 20,2, 20,2, 17,6, 16,1, 15,8, 14,6, 14,5, 13,2, 12,3, 12,3, 10,9, 6,8, 6,7 ppm.

PL 248049 Β1

117

Przykład FLC-00390-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-0337-1 przy czym zamiast izocyjanianu benzylu do mieszaniny reakcyjnej dodano izocyjanian 4-trifluorometylofenylu (1,2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 33%.

ESI-MS dla C50H75F3N2O11 (m/z): [M-H]’ 935,9, [M+Na]⁺ 960,3.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 8,78 (s, 1H), 7,55 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 7,50 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 6,20-6,11 (m, J = 21,0, 10,1, 5,2 Hz, 3H), 4,54 (dd, J = 9,8, 4,8 Hz, 1H), 4,17-4,12 (m, 1H), 3,85 (q, J= 6,8 Hz, 1H), 3,73 (d, J = 10,2 Hz, 1H), 3,67-3,63 (m, 1H), 3,60 (dd, J= 10,0,2,2 Hz, 1H), 3,51 (dd, 7=11,8,2,4 Hz, 1H), 2,89 (td, 7 = 10,9, 4,3 Hz, 1H), 2,76 (dq, 7 = 14,4,7,2 Hz, 1H), 2,69 (d, 7= 9,9 Hz, 1H), 2,04-0,64 (m, 57H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 218,2, 178,6, 156,9, 143,8, 131,5, 126,2, 126,2, 123,73 (m)118,9, 108,1, 100,0, 87,1,77,2, 76,1,75,4, 73,8, 73,1,71,7, 71,5, 68,5, 56,0, 50,3, 48,8, 47,9, 40,1,38,4, 38,0, 36,6, 33,4, 32,9, 31,3, 29,4, 28,5, 26,1, 24,9, 22,3, 21,2, 20,2, 17,7, 16,4, 15,9, 14,6, 13,3, 13,2, 12,1, 11,7, 7,3, 6,7 ppm.

Przykład FLC-00391-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-0337-1 przy czym zamiast izocyjanianu benzylu do mieszaniny reakcyjnej dodano izocyjanian trimetylosililu (1,2 eq). Po oczyszczaniu związek przemyto 0,25 M Na2COs zamiast 0,06 M H2SO4. Produkt uzyskano z wydajnością 81%.

ESI-MS dla C43H72N2O11 (m/z): [M-H]' 792,0, [M+H]⁺ 794,0, [M+Na]⁺ 816,8.

Ή NMR (500 MHz, CDCI3) δ 6,06 (dd, 7 = 10,9, 2,9 Hz, 1H), 5,97 (d, 7 = 10,0 Hz, 1H), 5,78 (dd, J = 10,8, 1,7 Hz, 1H), 5,42 (s, 1H), 5,03 (s, 1H), 4,85 (d, 7= 3,8 Hz, 1H), 4,64-4,60 (m, 1H), 4,33 (q, 7= 6,7 Hz, 1H), 4,13 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 3,91 (dd, J = 11,0, 5,1 Hz, 1H), 3,66 (dd, 7 = 10,1, 1,7 Hz, 1H), 3,56 (d,7 = 10,1 Hz, 1H), 3,43 (dd, J = 12,3, 2,8 Hz, 1H),2,85 (td, 7= 11,0, 3,2 Hz, 1H), 2,70 - 2,60 (m, 2H), 2,33 (s, 1H), 2,23 - 0,63 (m, 55H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CDCI3) δ 218,6, 185,0, 158,8, 129,5, 122,4, 106,6, 98,8, 88,5, 76,0, 75,5, 75,4, 74,0, 71,4, 71,1, 68,0, 56,1, 50,8, 50,0, 47,0, 40,6, 38,7, 37,1, 35,9, 32,7, 32,5, 32,2, 28,1, 28,0, 26,9, 23,6, 20,0, 19,9, 17,6, 16,0, 15,7, 14,6, 13,2, 12,4, 12,1, 10,8, 6,8, 6,5 ppm.

118

PL 248049 Β1

Przykład FLC-00396-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-0337-1 przy czym zamiast izocyjanianu benzylu do mieszaniny reakcyjnej dodano izocyjanian izopropylu (1,2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 38%.

ESI-MS dla C46H78N2O11 (m/z): [M-H]' 834,0, [M+H]⁺ 836,2, [M+Na]⁺ 858,9.

Ή NMR (500 MHz, CDCI3) δ 6,19 (dd, J = 9,6, 4,9 Hz, 1H), 6,08 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 5,83 (s, 1H), 5,63 (d, J = 9,8 Hz, 1H), 4,43 (dd, J = 9,7, 5,2 Hz, 1H), 4,10 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 3,98 - 3,86 (m, 2H), 3,81 (q, J= 6,8 Hz, 1H), 3,73 (d, J = 10,2 Hz, 1H), 3,66 (dd, J= 10,1, 1,5 Hz, 1H), 3,59-3,54 (m, 1H), 2,93 (td, J= 11,0, 3,8 Hz, 1H), 2,66 (dq, J= 14,1,7,0 Hz, 1H), 2,56 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 2,08-0,64 (m, 63H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CDCI3) δ 216,0, 177,9, 158,8, 132,3, 124,8, 108,0, 99,5, 86,1, 77,0, 75,2, 75,1, 73,8, 71,2, 71,1, 68,2, 56,0, 50,1, 48,5, 47,8, 41,8, 39,7, 38,2, 37,1, 36,3, 33,5, 32,4, 30,2, 29,7, 29,1,28,1,26,0,23,9, 23,0,22,2,21,1,20,0, 17,7, 16,3, 15,7, 14,5, 13,2, 13,0, 12,1, 11,7, 7,1, 6,5 ppm.

Przykład FLC-00427-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-0337-1 przy czym zamiast izocyjanianu benzylu do mieszaniny reakcyjnej dodano izocyjanian 2-fluoro-5-trifluorometylofenylu (1,2 eq). Po oczyszczaniu związek przemyto 0,25 M Na2CO3 zamiast 0,06 M H2SO4. Produkt uzyskano z wydajnością 50%.

ESI-MŚ dla C50H74F4N2O11 (m/z): [M-H]' 954,2, [M+Na]⁺ 978,0.

Ή NMR (500 MHz, CDCI3) δ 8,76 (s, 1H), 7,63 (d, J= 11,3 Hz, 1H), 7,44 (s, J= 11,4 Hz, 1H), 6,83 (d, J= 8,2 Hz, 1H), 6,38 (d, J = 9,7 Hz, 1H), 6,13 (dd, J= 10,9, 2,9 Hz, 1H), 5,96 (s, 1H), 5,82 (dd, J = 10,8, 1,8 Hz, 1H), 4,78-4,72 (m, 1H), 4,51 (d, J = 4,1 Hz, 1H), 4,44 (q, J= 6,7 Hz, 1H), 4,16 (dd, J = 10,3, 2,2 Hz, 1H), 3,95 (dd, J = 11,1, 5,4 Hz, 1H), 3,64 (dd, J = 10,1, 1,7 Hz, 1H), 3,57 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 3,46 (dd, J = 12,3, 2,6 Hz, 1H), 2,87 (td, J = 11,0, 3,1 Hz, 1H), 2,72 - 2,64 (m, 2H), 2,20-0,64 (m, 55H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CDCI3) δ 218,7, 185,6, 163,9, 162,0, 154,9, 143,1, 143,0, 128,5, 123,2, 110,5, 108,2, 106,4, 105,0, 98,8, 88,6, 75,9, 75,7, 75,4, 74,0, 72,0, 71,5, 68,3, 56,2, 50,8, 49,7, 46,6, 40,6, 38,7, 37,5, 35,9, 32,7, 32,6, 32,5, 28,4, 28,1, 28,0, 26,9, 23,8, 20,2, 19,9, 17,6, 16,0, 15,6, 14,6, 13,2, 12,2, 12,2, 10,8, 6,8, 6,7 ppm.

PL 248049 Β1

119

Przykład FLC-00428-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-0337-1 przy czym zamiast izocyjanianu benzylu do mieszaniny reakcyjnej dodano izocyjanian pentafluorofenylu (1,2 eq). Po oczyszczaniu związek przemyto 0,25 M Na2COs zamiast 0,06 M H2SO4. Produkt uzyskano z wydajnością 70%.

ESI-MS dla C49H71F5N2O11 (m/z): [M-H]’ 958,3, [M+Na]⁺ 982,1.

Ή NMR (500 MHz, CDCI3) δ 8,19 (s, 1H), 6,55 (d, J= 9,8 Hz, 1H), 6,12 (dd, J= 10,8, 2,6 Hz, 1H), 5,83 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 4,92 (s, 1H), 4,71 (d, J = 9,8 Hz, 1H), 4,36 (q, J = 6,6 Hz, 1H), 4,13 (d, J = 10,4 Hz, 1H), 3,93 (dd, J = 10,9, 5,1 Hz, 1H), 3,72-3,67 (m, 1H), 3,60 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 3,49 (dd, J = 12,3, 2,4 Hz, 1H), 2,87 (td, J = 11,1,2,9 Hz, 1H), 2,69 (dt, J= 18,5, 7,9 Hz, 2H), 2,29-0,63 (m, 56H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CDCI3) δ 218,9, 185,2, 154,8, 144,2, 140,3, 138,8, 136,8, 129,0, 122,7, 114,4, 106,3, 98,9, 88,7, 76,2, 75,5, 75,5, 74,0, 71,7, 71,4, 68,2, 56,2, 50,5, 50,0, 47,5, 40,6, 38,7, 37,3, 35,8, 32,7, 32,5, 32,1, 28,1, 28,0, 27,4, 26,8, 23,3, 20,1, 20,0, 17,6, 16,0, 15,7, 14,5, 13,3, 12,1, 12,0, 10,9, 6,8, 6,4 ppm.

Przykład FLC-00539-1

100 mg FLC-00604-1 zmieszano z 3-metoksypropyloaminą (2 eq) i DIPEA (2 eq) wTHF. Reakcję prowadzono w RT (kontrola TLC i LC-MS). Mieszaninę poreakcyjną zawieszono na silikażelu i oczyszczono przy użyciu chromatografu z detektorem ELS, stosując kolumnę wypełnioną krzemionką. Odpowiednie frakcje połączono i zatężono, pozostałość rozpuszczono w DCM i przemyto dwukrotnie 0,25 M Na2CO3. Produkt uzyskano z wydajnością 64%.

ESI-MS dla C47H80N2O12 (m/z): [M+H]⁺ 866,0, [M+Na]⁺ 888,1, [M-H]' 864,2.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 6,05 (dd, J= 10,9, 3,0 Hz, 1H), 5,82 (t, J = 5,6 Hz, 1H), 5,69-5,62 (m, 2H), 4,84 (s, 1H), 4,63 - 4,56 (m, 1H), 4,30 (q, J=6,7Hz, 1H), 4,06 (d, J= 10,4 Hz, 1H), 3,80 (dd, J = 11,0, 4,5 Hz, 1H), 3,60 (dd, J= 15,8, 6,0 Hz, 2H), 3,45 (dd, J= 12,3, 2,8 Hz, 1H), 3,33 (t, J=6,5Hz, 2H), 3,25 (s, 3H), 3,09 (dt, J = 13,3, 6,8 Hz, 2H), 2,81 (td, J= 11,1, 3,2 Hz, 1H), 2,73-2,65 (m, 2H), 2,14-0,66 (m, 57H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ219,1, 184,5, 157,7, 129,6, 122,4, 106,6, 98,7, 88,3, 75,8, 75,6,75,4, 73,8, 71,1,70,9, 70,4, 67,9, 58,2, 56,0, 50,4, 49,6, 46,6, 40,5, 38,6, 37,1,36,9, 35,8, 32,5, 32,4, 32,2, 30,5, 28,0, 27,8, 27,7, 26,7, 23,5, 19,9, 19,6, 17,2, 15,8, 15,5, 14,3, 12,9, 12,4, 11,9, 10,5, 6,4, 6,2 ppm.

120

PL 248049 Β1

Przykład FLC-00541-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00539-1, przy czym zamiast 3-metoksypropyloaminy do mieszaniny reakcyjnej dodano 3-pentylaminę (2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 53%.

ESI-MŚ dla C48H82N2O11 (m/z): [M+H]⁺ 864,2, [M+Na]⁺ 886,2, [M-H]’ 862,1.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 6,05 (dd, J = 10,9, 3,0 Hz, 1H), 5,70 (dd, J= 10,8, 1,7 Hz, 1H), 5,43 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 5,27 (d, J=9,1 Hz, 1H), 4,67 - 4,62 (m, 1H), 4,33 (q, J=6,6Hz, 1H), 4,07 (d, J = 10,4 Hz, 1H), 3,80 (dd, J = 11,0, 4,5 Hz, 1H), 3,65 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 3,59 (d, J = 10,2 Hz, 1H), 3,46 (ddd, J = 13,2, 9,8, 3,0 Hz, 2H), 2,81 (td, J = 11,0, 3,3 Hz, 1H), 2,74 -2,65 (m, 2H), 2,20 - 0,66 (m, 66H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 219,1, 184,2, 157,3, 130,3, 122,1, 106,6, 98,9, 88,3, 75,8, 75,6, 75,3, 73,8, 71,2, 70,9, 67,8, 56,0, 52,7, 50,4, 49,8, 46,6, 40,6, 38,6, 36,5, 35,8, 32,5, 32,4, 32,1, 28,5, 28,1, 28,0, 27,8, 27,3, 26,7, 23,5, 19,9, 19,8, 17,2, 15,7, 15,6, 14,3, 12,9, 12,8, 11,9, 10,6, 10,5, 10,4, 6,4, 6,3 ppm.

Przykład FLC-00545-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00539-1, przy czym zamiast 3-metoksypropyloaminy do mieszaniny reakcyjnej dodano (4,4-difluorocykloheksyl)metylaminę*HCI (1 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 51%.

ESI-MS dla C50H82F2N2O11 (m/z):‘[M+H]⁺ 926,0, [M+Na]⁺ 948,2, [M-H]' 924,1.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 6,06 (dd, J= 10,9, 3,0 Hz, 1H), 5,86 (t, J= 5,8 Hz, 1H), 5,68-5,63 (m, 2H), 4,84 (s, 1H), 4,63 - 4,56 (m, 1H), 4,31 (q, J=6,6Hz, 1H), 4,07 (d, J= 10,4 Hz, 1H), 3,81 (dd, J = 11,0, 4,5 Hz, 1H), 3,62 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 3,58 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 3,46 (dd, J= 12,3, 2,8 Hz, 1H), 3,01 (dt, J= 12,9, 6,3 Hz, 1H), 2,96 -2,89 (m, 1H), 2,81 (td, J= 11,0,3,2 Hz, 1H), 2,74 -2,67 (m, 2H), 2,16-0,67 (m, 64H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 219,1, 184,5, 157,8, 129,6, 122,4, 106,6, 98,8, 88,3, 75,8, 75,6, 75,4, 73,8, 71,1, 70,9, 67,9, 56,0, 50,4, 49,6, 46,7, 44,9, 40,5, 38,6, 36,9, 36,8, 35,8, 33,3, 33,1, 32,9, 32,5, 32,4, 32,2, 29,7, 28,0, 27,8, 27,7, 26,8, 26,8, 26,7, 26,6, 23,4, 19,9, 19,6, 17,2, 15,7, 15,5, 14,3, 12,8, 12,4, 11,9, 10,5, 6,4, 6,2 ppm.

PL 248049 Β1

121

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00539-1, przy czym zamiast 3-metoksypropyloaminy do mieszaniny reakcyjnej dodano 1,1 -ditlenek (4-(3-aminopropylo)tiomorfoliny) (1 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 14%.

ESI-MS dla C50H85N3O13S (m/z): [M+H]⁺ 969,2, [M+Na]⁺ 991,0, [M-H]’ 967,1.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 6,06 (dd, J = 10,9, 3,0 Hz, 1H), 5,86 (t, J = 5,6 Hz, 1H), 5,73-5,63 (m, 2H), 4,62 - 4,56 (m, 1H), 4,29 (q, J = 6,6 Hz, 1H), 4,07 (d, J = 10,3 Hz, 1H), 3,81 (dd, J = 11,0, 4,6 Hz, 1H), 3,60 (dd, J = 16,7, 6,0 Hz, 2H), 3,46 (dd, J = 12,3, 2,7 Hz, 1H), 3,16 - 3,02 (m, 2H), 3,02-2,96 (m, 4H), 2,91 (dd, J = 6,5, 3,4 Hz, 4H), 2,82 (td, J= 11,1, 3,3 Hz, 1H), 2,74-2,67 (m, 2H), 2,48 (dd, J = 12,6, 7,0 Hz, 2H), 2,11 - 0,67 (m, 58H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 219,6, 185,0, 158,2, 129,9, 123,0, 107,1, 99,2, 88,8, 76,3, 76,2, 75,9, 74,3, 71,6, 71,3, 68,4, 56,5, 54,7, 51,9, 51,2, 50,9, 50,0, 47,1, 41,0, 39,0, 38,3, 37,4, 36,2, 32,9, 32,9, 32,7, 30,2, 28,6, 28,4, 28,3, 28,1, 27,1, 23,9, 20,3, 20,1, 17,7, 16,2, 16,0, 14,8, 13,3, 12,9, 12,4, 11,0, 6,9, 6,7 ppm.

Przykład FLC-00562-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00539-1, przy czym zamiast 3-metoksypropyloaminy do mieszaniny reakcyjnej dodano 3-dimetyloaminopropyloaminę (2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 70%.

ESI-MS dla C48H83N3Ó11 (m/z): [M+H]⁺ 878,9, [M+Na]⁺ 901,0, [M-H]' 877,1.

Ή NMR (500 MHz, CDCI3) δ 6,05 (dd, J = 10,8, 2,9 Hz, 1H), 5,92 (t, J = 5,6 Hz, 1H), 5,78 (dd, J = 10,8, 1,7 Hz, 1H), 5,63 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 4,81 (d, J = 4,4 Hz, 1H), 4,71 - 4,62 (m, 1H), 4,34 (t, J = 6,6 Hz, 1H), 4,13 (dd, J = 10,1, 3,0 Hz, 1H), 3,91 (dd, J = 11,0, 5,1 Hz, 1H), 3,66 (dd, J = 10,1, 1,6 Hz, 1H), 3,54 (t, J=8,8Hz, 1H), 3,48-3,40 (m, 2H), 3,21-3,13 (m, 1H), 3,06 (td, J= 13,0, 7,2 Hz, 1H), 2,85 (td, J = 11,1, 3,2 Hz, 1H), 2,66 (dd, J= 10,4, 7,8 Hz, 2H), 2,26 (dd, J= 8,3, 5,8 Hz, 2H), 2,19 (s, 6H), 2,18 - 0,67 (m, 56H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CDCI3) δ 218,4, 184,8, 158,1, 129,9, 122,1, 106,6, 98,7, 88,3, 75,9, 75,5, 75,3, 73,9, 71,3, 71,0, 67,9, 57,5, 56,0, 50,8, 49,9, 46,6, 45,5, 40,5, 38,6, 38,5, 36,9, 35,8, 32,6, 32,4, 32,3, 29,7, 28,6, 28,0, 27,9, 26,8, 23,6, 19,9, 19,7, 17,5, 16,0, 15,6, 14,5, 13,2, 12,5, 12,0, 10,7, 6,7, 6,5 ppm.

122

PL 248049 Β1

Przykład FLC-00566-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00539-1, przy czym zamiast 3-metoksypropyloaminy do mieszaniny reakcyjnej dodano 3-(aminometylo)pirydynę (1,5 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 52%.

ESI-MS dla C49H77N3O11 (m/z): [M+H]⁺ 885,1, [M+Na]⁺ 907,0, [M-H]’ 883,1.

Ή NMR (500 MHz, CDCI3) δ 8,46 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 8,40 (dd, J = 4,8, 1,5 Hz, 1H), 7,60 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,13 (dd, J = 7,7, 4,8 Hz, 1H), 6,42 (t, J = 5,8 Hz, 1H), 6,02 (dd, J = 10,9, 2,9 Hz, 1H), 5,82 - 5,71 (m, 2H), 5,32 (s, 1H), 4,67 (dd, J = 7,5, 3,6 Hz, 2H), 4,34 - 4,23 (m, 2H), 4,19 (dd, J = 15,0, 5,1 Hz, 1H), 4,08 (dd, J = 10,3, 3,3 Hz, 1H), 3,84 (dd, J = 11,0, 4,9 Hz, 1H), 3,59 (dd, J = 10,1, 1,6 Hz, 1H), 3,51 (d, J = 10,2 Hz, 1H), 3,36 (dd, J = 12,3,2,7Hz, 1H),2,78 (td, J= 11,1,3,1 Hz, 1H), 2,65-2,58 (m, 2H), 2,02 - 0,62 (m, 54H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CDCI3) δ 218,5, 184,9, 158,0, 149,5, 148,3, 136,0, 135,8, 129,5, 123,2, 122,4, 106,5, 98,7, 88,4, 75,8, 75,6, 75,4, 73,9, 71,3, 71,0, 68,0, 56,0, 50,8, 49,8, 46,8, 41,6, 40,5, 38,6, 37,1, 35,8, 32,6, 32,4, 32,1, 28,0, 27,4, 26,8, 23,6, 19,9, 19,8, 17,6, 16,0, 15,6, 14,4, 13,2, 12,2, 12,0, 10,7, 6,7, 6,4 ppm.

Przykład FLC-00567-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00539-1, przy czym zamiast 3-metoksypropyloaminy do mieszaniny reakcyjnej dodano 3-(2-aminoetylo)pirydynę (1,5 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 61%.

ESI-MS dla C50H79N3O11 (m/z): [M+H]⁺ 899,1, [M-H]' 896,9.

Ή NMR (500 MHz, CDCI3) δ 8,38 (dd, J=4,6, 1,5 Hz, 2H), 7,49 (d, J= 7,8 Hz, 1H), 7,14 (dd, J = 7,7, 4,9 Hz, 1H), 6,10 (t, J = 5,6 Hz, 1H), 6,02 (dd, J = 10,9, 2,9 Hz, 1H), 5,76 - 5,69 (m, 2H), 5,39 (s, 1H), 4,73 (d, J = 4,5 Hz, 1H), 4,66 - 4,59 (m, 1H), 4,30 (q, J = 6,6 Hz, 1H), 4,10 (dd, J = 10,3, 3,5 Hz, 1H), 3,87 (dd, J = 11,0, 5,0 Hz, 1H), 3,63 -3,59 (m, 1H), 3,52 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 3,39 (dd, J = 12,3, 2,7 Hz, 1H), 3,32 - 3,25 (m, 2H), 2,84 - 2,58 (m, 6H), 2,08 - 0,63 (m, 53H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CDCI3) δ 218,4, 184,8, 158,0, 150,2, 147,6, 136,1, 135,1, 129,6, 123,3, 122,2, 106,5, 98,7, 88,3, 75,8, 75,6, 75,3, 73,8, 71,3, 71,0, 67,9, 55,9, 50,8, 49,8, 46,6, 41,3, 40,5, 38,6, 37,0, 35,8, 34,0, 32,6, 32,4, 32,2, 27,9, 27,9, 27,7, 26,8, 23,6, 19,8, 19,6, 17,5, 15,9, 15,6, 14,4, 13,1, 12,3, 12,0, 10,7, 6,6, 6,5 ppm.

PL 248049 Β1

123

Przykład FLC-00593-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00539-1, przy czym zamiast 3-metoksypropyloaminy do mieszaniny reakcyjnej dodano ferf-butyloaminę (2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 48%.

ESI-MŚ dla C47H80N2O11 (m/z): [M+H]⁺ 850,0, [M+Na]⁺ 872,0, [M-H]’ 848,0.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 6,04 (dd, J = 10,9, 3,0 Hz, 1H), 5,67 (dd, J = 10,8, 1,5 Hz, 1H), 5,58 (s, 1H), 5,49 (s, 1H), 5,41 (d, J= 9,9 Hz, 1H), 4,91 (d, J= 3,5 Hz, 1H), 4,66-4,57 (m, 1H), 4,31 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 4,06 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 3,81 (dd, J= 11,0, 4,4 Hz, 1H), 3,62 (s, 1H), 3,59 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 3,46 (dd, J = 12,3, 2,6 Hz, 1H), 2,81 (td, J = 11,1, 3,2 Hz, 1H), 2,70 (dd, J = 10,1, 7,7 Hz, 2H), 2,19-0,67 (m, 63H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 219,1, 184,4, 156,5, 130,0, 122,1, 106,7, 98,8, 88,2, 75,8, 75,4, 75,3, 73,9, 71,1, 70,9, 67,8, 56,1, 50,4, 49,8, 49,8, 46,0, 40,5, 38,6, 36,7, 35,8, 32,4, 29,1, 28,1, 28,0, 27,7, 26,7, 23,5, 19,9, 19,6, 17,2, 15,7, 15,5, 14,3, 12,9, 12,9, 11,9, 10,5, 6,4, 6,4 ppm.

Przykład FLC-00606-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00539-1, przy czym zamiast 3-metoksypropyloaminy do mieszaniny reakcyjnej dodano S-3,3-dimetylo-2-butyloaminę (3 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 38%.

ESI-MS dla C49H84N2O11 (m/z): [M+H]⁺ 878,0, [M+Na]⁺ 900,0, [M-H]' 876,1.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 6,04 (dd, J = 10,8, 3,0 Hz, 1H), 5,68 (dd, J = 10,8, 1,7 Hz, 1H), 5,54 (d, J= 9,9 Hz, 1H), 5,09 (s, 1H), 5,00 (d, J= 9,8 Hz, 1H), 4,66-4,61 (m, 1H), 4,30 (q, J= 6,7 Hz, 1H), 4,07 (d, J = 10,4 Hz, 1H), 3,81 (dd, J = 10,9, 4,6 Hz, 1H), 3,67 (dd, J = 12,0, 4,6 Hz, 2H), 3,60 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 3,47 (dd, J = 12,3, 2,8 Hz, 1H), 2,80 (td, J = 11,0, 3,3 Hz, 1H), 2,74 - 2,65 (m, 2H), 2,26-0,67 (m, 67H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ219,1, 184,1, 156,9, 130,3, 121,9, 106,5, 99,0, 88,3, 75,9, 75,5, 75,4, 73,9, 71,1,70,8, 67,9, 56,0, 53,3, 50,2, 49,8, 47,0, 40,6, 38,6, 36,4, 35,8, 34,4, 32,5, 32,4, 32,4, 28,0, 27,8, 27, 26,7, 26,1, 23,4, 20,0, 19,7, 17,3, 16,3, 15,7, 15,6, 14,2, 13,3, 12,9, 11,9, 10,6, 6,5, 6,3 ppm.

124

PL 248049 Β1

Przykład FLC-00515-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00539-1, przy czym zamiast 3-metoksypropyloaminy do mieszaniny reakcyjnej dodano N-metylopiperazynę (2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 73%.

ESI-MS dla C48H81N3O11 (m/z): [M+H]⁺ 877,0, [M+Na]⁺ 899,0, [M-H]’ 875,1.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 6,08 (dd, J = 10,8, 3,1 Hz, 1H), 5,69 (dd, J = 10,8, 1,4 Hz, 1H), 5,33 - 5,31 (m, 1H), 4,73 (d, J = 9,4 Hz, 1H), 4,21 (q, J = 6,7 Hz, 1H), 4,13 (d, J = 10,4 Hz, 1H), 3,85 (dd, J = 11,0, 4,4 Hz, 1H), 3,58 (dd, J= 14,1,5,9 Hz, 2H), 3,45-3,31 (m, 5H), 2,79 (td, J= 10,9, 3,5 Hz, 1H), 2,75-2,66 (m, 2H), 2,26 (t, J= 5,0 Hz, 4H), 2,20 (s, 3H), 2,11 -0,67 (m, 56H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 218,3, 184,3, 157,2, 129,6, 122,8, 106,8, 99,4, 88,2, 76,4, 75,7, 75,6, 74,0, 71,1, 69,8, 68,0, 55,8, 55,1, 50,2, 49,2, 48,3, 45,9, 43,6, 40,8, 38,7, 35,8, 32,4, 32,3, 32,1, 29,7, 28,2, 28,1,27,4, 26,7, 23,5, 19,9, 19,7, 17,3, 15,5, 15,5, 14,3, 12,9, 12,4, 12,0, 10,6, 6,4, 6,3 ppm.

Przykład FLC-00518-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00445-1, przy czym zamiast chlorku 5-chloropentanoilu do mieszaniny reakcyjnej dodano chlorek 4-etylo-2,3-diokso-1-piperazynokarbonylowy (1 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 87%.

ESI-MS dla C49H79N3O13 (m/z): [M+Na]⁺ = 94l‘ [M-H]' = 917.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 8,90 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 6,14 (dd, J = 10,8, 3,0 Hz, 1H), 5,92 (dd, J = 10,8, 1,2 Hz, 1H),4,37-4,31 (m, 1H), 4,31 -4,24 (m, 1H), 4,23 - 4,15 (m, 1H), 4,11 (dd, J= 10,4, 1,0 Hz, 1H), 3,84 (dd, J= 10,8, 4,3 Hz, 1H), 3,81 -3,74 (m, 1H), 3,71 (dd, J= 10,1, 1,4 Hz, 1H), 3,62 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 3,59-3,35 (m, 5H), 2,76 - 2,65 (m, 3H), 2,20-2,06 (m, 2H), 2,00 - 0,70 (m, 53H), 0,68 (d, J= 6,9 Hz, 3H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 217,3, 182,1, 158,9, 155,7, 153,6, 128,5, 121,8, 106,2,99,8, 88,7, 77,0, 76,4, 75,8, 73,3, 70,9, 69,9, 67,3, 54,9, 51,3, 50,5, 49,5, 43,7, 42,4, 41,1, 40,8, 38,6, 36,2, 35,7, 32,5, 32,3, 31,8, 29,7, 28,2, 27,9, 26,8, 22,8, 20,3, 19,7, 17,4, 16,0, 15,4, 14,0, 13,0, 12,2, 12,1, 11,9, 10,9, 6,7, 6,4 ppm.

PL 248049 Β1

125

Przykład FLC-00519-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00445-1, przy czym zamiast chlorku 5-chloropentanoilu do mieszaniny reakcyjnej dodano chlorek 3-(metylosulfonylo)-2-oksoimidazolidyno-1-karbonylowy (2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 82%.

ESI-MS dla C47H78N3O14S (m/z): [M+Na]⁺ = 963, [M-H]' = 939.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 7,83 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 6,16 (dd, J = 10,8, 3,1 Hz, 1H), 5,84 (dd, J = 10,7, 1,3 Hz, 1H),4,56-4,44 (m, 1H),4,17(m, 1H),4,08 (dd, J = 10,5, 1,4 Hz, 1H), 3,95 - 3,73 (m, 5H), 3,68 (dd, J = 13,3, 5,5 Hz, 2H), 3,45 (dd, J = 12,2, 2,0 Hz, 1H), 3,32 (s, 3H), 2,76 - 2,64 (m, 3H), 2,12 (t, J= 7,4 Hz, 2H), 2,05-0,71 (m, 51H), 0,68 (d, J=6,9 Hz, 3H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 218,2, 182,6, 152,2, 128,7, 122,8, 106,1, 100,0,88,6,76,8, 76,2, 75,7, 73,2, 70,9, 69,8, 67,7, 55,5, 50,4, 50,0, 49,6, 40,9, 40,4, 40,3, 39,9, 38,7, 36,1, 35,6, 32,5, 32,4, 32,0, 29,7, 28,5, 28,2, 26,9, 26,0, 22,6, 20,3, 20,0, 17,4, 15,8, 15,4, 14,0, 12,9, 12,2, 12,0, 10,9, 6,7, 6,4 ppm.

Przykład FLC-00537-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00539-1, przy czym zamiast 3-metoksypropyloaminy do mieszaniny reakcyjnej dodano pirolidynę (2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 55%.

ESI-MS dla C47H78N2O11 (m/z): [M+H]⁺ 848,0, [M+Na]⁺ 870,0, [M-H]' 846,0.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 6,09 (dd, J = 10,8, 3,1 Hz, 1H), 5,68 (dd, J= 10,8, 1,6 Hz, 1H), 4,99 (d, J=9,7Hz, 1H), 4,68-4,61 (m, 1H), 4,20 (q, J=6,7Hz, 1H), 4,14 (d, J= 10,4 Hz, 1H), 3,83 (dd, J = 11,0, 4,6 Hz, 1H), 3,62 - 3,54 (m, 2H), 3,47 (d, J = 5,9 Hz, 2H), 3,41 (dd, J = 12,1, 2,1 Hz, 1H), 3,27-3,20 (m, 2H), 2,78 (td, J= 11,1, 3,5 Hz, 1H), 2,74-2,65 (m, 2H), 2,18-0,66 (m, 60H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 218,1, 184,2, 156,2, 129,7, 122,8, 106,9, 99,3, 88,2, 76,5, 75,7, 75,6, 74,2, 71,1, 69,7, 67,8, 55,7, 50,3, 49,2, 48,0, 45,6, 40,8, 38,8, 35,9, 35,8, 32,5, 32,4, 32,1, 28,6, 27,9, 27,5, 26,7, 25,5, 23,6, 19,9, 19,8, 17,3, 15,6, 15,5, 14,4, 12,9, 12,2, 12,1, 10,5, 6,4, 6,2 ppm.

126

PL 248049 Β1

Przykład FLC-00538-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00539-1, przy czym zamiast 3-metoksypropyloaminy do mieszaniny reakcyjnej dodano N,N-dimetyloaminę (2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 46%.

ESI-MŚ dla C45H76N2O11 (m/z): [M+Na]⁺ 844,1, [M-H]' 819,9.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 6,08 (dd, J = 10,8, 3,1 Hz, 1H), 5,67 (dd, J = 10,8, 1,6 Hz, 1H), 5,21 (d, J=9,6Hz, 1H), 4,67-4,60 (m, 1H),4,22 (q, J=6,7Hz, 1H), 4,13 (d, J= 10,4 Hz, 1H),3,82 (dd, J = 11,0, 4,6 Hz, 1H), 3,59 (dd, J= 15,2, 6,0 Hz, 2H), 3,41 (dd, J= 12,1, 2,1 Hz, 1H), 2,86 (s, 6H), 2,80 2,74 (m, 1H), 2,72 - 2,64 (m, 2H), 2,14 - 0,67 (m, 56H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 218,2, 184,2, 157,9, 129,7, 122,7, 106,8, 99,3, 88,2, 76,3, 75,8, 75,7, 74,2, 71,1, 69,8, 67,9, 55,7, 50,4, 49,1, 48,5, 40,7, 38,7, 36,2, 35,9, 35,8, 32,5, 32,3, 32,1, 29,7, 28,8, 27,9, 27,4, 26,7, 23,5, 19,9, 19,9, 17,3, 15,6, 15,5, 14,4, 12,9, 12,2, 12,1, 10,6, 6,4, 6,2 ppm.

Przykład FLC-00540-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00539-1, przy czym zamiast 3-metoksypropyloaminy do mieszaniny reakcyjnej dodano morfolinę (2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 48%.

ESI-MS dla C47H78N2O12 (m/z): [M+H]⁺ 864,0, [M+Na]⁺ 886,1, [M-H]' 862,0.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 6,09 (dd, J = 10,8, 3,2 Hz, 1H), 5,68 (dd, J= 10,8, 1,6 Hz, 1H), 5,36 (d, J=9,5Hz, 1H), 4,80-4,70 (m, 1H), 4,21 (q, J=6,7Hz, 1H), 4,14 (d, J= 10,5 Hz, 1H),3,85 (dd, J = 11,1, 4,5 Hz, 1H), 3,62-3,52 (m, 6H), 3,45-3,28 (m, 5H), 2,87-2,75 (m, 1H), 2,69 (q, J = 7,1 Hz, 2H), 2,05-0,66 (m, 56H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 218,2, 184,4, 157,3, 129,2, 123,0, 106,7, 99,3, 88,3, 76,4, 75,8, 75,4, 74,2, 71,1, 69,9, 66,9, 55,7, 50,1, 49,1, 48,1, 43,9, 40,7, 38,7, 35,8, 35,7, 32,4, 32,3, 32,2, 29,7, 28,4, 28,0, 27,6, 26,6, 23,5, 19,9, 19,7, 17,2, 15,5, 15,5, 14,3, 12,9, 12,2, 12,0, 10,5, 6,4, 6,3 ppm.

PL 248049 Β1

127

Przykład FLC-00542-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00539-1, przy czym zamiast 3-metoksypropyloaminy do mieszaniny reakcyjnej dodano N,N-dipropyloaminę (2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 51%.

ESI-MS dla C49H84N2O11 (m/z): [M+H]⁺ 878,2, [M+Na]⁺ 900,0, [M-H]' 876,0.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 6,07 (dd, J = 10,8, 3,1 Hz, 1H), 5,72 (dd, J= 10,7, 1,6 Hz, 1H), 5,25 (d, J = 9,1 Hz, 1H), 4,68 - 4,60 (m, 1H), 4,25 (q, J = 6,7 Hz, 1H), 4,14 (dd, J = 10,5, 0,9 Hz, 1H), 3,83 (dd, J = 11,0, 4,5 Hz, 1H), 3,65 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 3,56 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 3,43 (dd, J= 12,1, 2,3 Hz, 1H), 3,29 (dt, J= 14,4, 7,2 Hz, 2H), 3,04 (dt, J= 14,3, 7,1 Hz, 2H), 2,77 (td, J= 10,4, 3,6 Hz, 1H), 2,68 (ddd, J = 14,9, 9,3, 5,4 Hz, 2H), 2,23 - 0,67 (m, 66H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 218,1, 183,8, 157,4, 130,4, 122,5, 107,1,99,6, 88,1,76,2, 75,8, 75,8, 73,8, 71,1, 69,9, 67,7, 55,6, 50,4, 49,4, 49,1, 47,9, 40,9, 38,7, 35,8, 35,5, 32,5, 32,4, 32,1,29,7, 28,4, 28,0, 27,3, 26,7, 23,6, 21,4, 20,1, 19,8, 17,3, 15,7, 15,5, 14,3, 12,9, 12,5, 12,0, 11,1, 10,6, 6,4, 6,2 ppm.

Przykład FLC-00543-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00539-1, przy czym zamiast 3-metoksypropyloaminy do mieszaniny reakcyjnej dodano azetydynę (2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 48%.

ESI-MS dla C46H76N2O11 (m/z): [M+Na]⁺ 856,1, [M-H]' 832,1.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 6,08 (dd, J = 10,8, 3,1 Hz, 1H), 5,66 (dd, J= 10,8, 1,5 Hz, 1H), 4,96 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 4,57-4,49 (m, 1H), 4,20 (q, J=6,7Hz, 1H), 4,11 (dd, J= 10,5, 1,0 Hz, 1H), 3,99 (q, J = 7,7 Hz, 2H), 3,88 (q, J= 7,7 Hz, 2H), 3,83 (dd, J= 11,0, 4,4 Hz, 1H), 3,62 (d, J= 2,0 Hz, 1H), 3,58 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 3,44 (dd, J= 12,1,2,2 Hz, 1H), 2,77 (td, J= 10,6, 3,5 Hz, 1H), 2,73 - 2,62 (m, 2H), 2,14-0,67 (m, 58H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 218,4, 184,0, 158,9, 129,6, 122,7, 106,6, 99,4, 88,3, 76,4, 75,9, 75,7, 73,9, 71,0, 69,9, 68,0, 55,8, 50,4, 49,2, 49,1, 48,2, 40,7, 38,7, 36,1, 35,7, 32,4, 32,4, 32,0, 29,7, 28,5, 28,0, 27,1,26,7, 23,4, 20,0, 19,9, 17,3, 15,6, 15,5, 15,3, 14,3, 12,9, 12,2, 12,1, 10,6, 6,4, 6,2 ppm.

128

PL 248049 Β1

Przykład FLC-00544-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00539-1, przy czym zamiast 3-metoksypropyloaminy do mieszaniny reakcyjnej dodano N,N-dialliloaminę (2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 57%.

ESI-MŚ dla C49H80N2O11 (m/z): [M+H]⁺ 874,0, [M+Na]⁺ 896,1, [M-H]’ 872,0,

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 6,08 (dd, J = 10,8, 3,1 Hz, 1H), 5,78 - 5,65 (m, 3H), 5,26 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 5,12-5,08 (m, 2H), 5,07 (s, 2H), 4,68-4,59 (m, 1H), 4,23 (q, J= 6,7 Hz, 1H), 4,15-4,11 (m, 1H), 3,90 (dd, J = 16,7, 5,4 Hz, 2H), 3,85-3,77 (m, 3H), 3,61 (d, J= 2,0 Hz, 1H), 3,57 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 3,42 (dd, J= 12,1,2,3 Hz, 1H), 2,77 (td, J= 10,8, 3,7 Hz, 1H), 2,72-2,65 (m, 2H), 2,20-0,67 (m, 56H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 218,2, 184,1, 157,3, 134,2, 129,8, 122,6, 115,7, 106,8, 99,5, 88,3, 76,2, 75,7, 73,9, 71,1, 69,9, 67,8, 55,7, 50,2, 49,3, 49,1, 48,1, 40,8, 38,7, 35,8, 35,8, 32,5, 32,3, 32,1, 29,7, 28,1,28,0, 27,4, 26,7, 23,6, 20,0, 19,8, 17,3, 15,6, 15,5, 14,3, 12,9, 12,5, 12,0, 10,6, 6,4, 6,2 ppm.

Przykład FLC-00557-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00539-1, przy czym zamiast 3-metoksypropyloaminy do mieszaniny reakcyjnej dodano 4-metylopiperydynę (2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 60%.

ESI-MS dla C49H82N2O11 (m/z): [M+H]⁺ 875,9, [M+Na]⁺ 898,1, [M-H]' 874,0.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 6,07 (dd, J = 10,8, 2,9 Hz, 1H), 5,68 (d, J = 10,7 Hz, 1H), 5,23 (d, J=9,5Hz, 1H), 4,71 (d, J=9,3Hz, 1H), 4,21 (q, J=6,6 Hz, 1H), 4,12 (d, J= 10,4 Hz, 1H), 4,05 (d, J = 13,0 Hz, 1H), 3,95 (d, J= 12,8 Hz, 1H), 3,84 (dd, J = 10,8, 3,7 Hz, 1H), 3,60 (dd, J = 12,5, 5,6 Hz, 2H), 3,46 - 3,40 (m, 1H), 2,82 - 2,56 (m, 6H), 2,11 - 0,67 (m, 63H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 218,3, 184,2, 157,2, 129,9, 122,5, 106,8, 99,4, 88,2, 76,4, 75,7, 73,9, 71,0, 69,7, 67,9, 55,8, 50,3, 49,3, 48,5, 44,4, 44,1, 40,8, 38,8, 35,8, 34,3, 34,0, 32,5, 32,3, 32,1, 30,9, 29,7, 28,2, 28,0, 27,4, 26,7, 23,5, 21,7, 20,0, 19,7, 17,3, 15,5, 14,3, 12,9, 12,4, 12,0, 10,6, 6,4, 6,3 ppm.

PL 248049 Β1

129

Przykład FLC-00560-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00539-1, przy czym zamiast 3-metoksypropyloaminy do mieszaniny reakcyjnej dodano 1,1 -ditlenek tiomorfoliny (2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 62%.

ESI-MS dla C47H78N2O13S (m/z): [M+Na]⁺ 934,0, [M-H]' 910,0.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 6,09 (dd, J = 10,8, 3,1 Hz, 1H), 5,70 (d, J= 9,6 Hz, 1H), 5,64 (dd, J = 10,8, 1,6 Hz, 1H), 4,73-4,65 (m, 1H), 4,26-4,22 (m, 1H), 4,14 (d, J = 10,2 Hz, 1H), 3,97-3,91 (m, 2H), 3,88-3,79 (m, 3H), 3,57 (dd, J= 10,7, 2,1 Hz, 2H), 3,43 (dd, J= 12,0, 2,1 Hz, 1H), 3,00-2,94 (m, 2H), 2,93-2,86 (m, 2H), 2,84-2,76 (m, 1H), 2,74-2,65 (m, 2H), 2,03-0,66 (m, 56H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 218,3, 184,7, 156,7, 128,7, 123,0, 106,2, 99,3, 88,4, 76,2, 76,1, 75,3, 74,3, 71,1, 70,1, 68,2, 55,7, 52,0, 50,0, 48,8, 48,7, 43,2, 40,7, 38,6, 36,1, 35,7, 32,4, 32,2, 32,1, 29,7, 28,9, 27,9, 27,7, 26,6, 23,6, 19,9, 17,2, 15,6, 15,4, 14,3, 12,8, 12,2, 12,1, 10,6, 6,4, 6,2 ppm.

Przykład FLC-00561-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00539-1, przy czym zamiast 3-metoksypropyloaminy do mieszaniny reakcyjnej dodano 4-(trifluorometylo)piperdydynę*HCI (1,5 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 59%.

ESI-MS dla C49H79F3N2O11 (m/z): [M+H]⁺ 929,9, [M+Na]⁺ 952,1, [M-H]' 928,1.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 6,09 (dd, J = 10,8, 3,1 Hz, 1H), 5,68 (dd, J= 10,8, 1,6 Hz, 1H), 5,37 (d, J = 9,5 Hz, 1H), 4,75 - 4,70 (m, 1H), 4,65 (s, 1H), 4,24 (dt, J = 13,6, 10,2 Hz, 2H), 4,13 (t, J = 9,3 Hz, 2H), 3,85 (dd,J= 11,0,4,4 Hz, 1H), 3,62-3,54 (m, 2H), 3,43 (dd, J = 12,1,2,2 Hz, 1H), 2,84-2,76 (m, 1H), 2,72 - 2,57 (m, 4H), 2,14 - 0,67 (m, 60H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 218,3, 184,5, 157,0, 129,5, 122,7, 106,6, 99,4, 88,3, 76,4, 75,8, 75,5, 74,1, 71,0, 69,8, 68,0, 55,8, 50,2, 49,2, 48,4, 43,1, 42,7, 40,7, 40,5, 40,3, 38,7, 35,8, 35,7, 32,4, 32,3, 32,1, 28,3, 28,0, 27,5, 26,7, 24,8, 24,4, 23,5, 19,9, 19,7, 17,2, 15,5, 15,5, 14,3, 12,9, 12,3, 12,0, 10,5, 6,4, 6,2 ppm.

130

PL 248049 Β1

Przykład FLC-00563-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00539-1, przy czym zamiast 3-metoksypropyloaminy do mieszaniny reakcyjnej dodano N,N,N’-trimetylo-1,3-propanodiaminę (2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 56%.

ESI-MS dla C49H85N3O11 (m/z): [M+H]⁺ 892,9, [M+Na]⁺ 915,1, [M-H]' 891,1.

Ή NMR (500 MHz, CDCI3) δ 6,09 (dd, J= 10,9,3,1 Hz, 1H), 5,80 (dd, J = 10,8, 1,6 Hz, 1H), 5,28 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 4,78 - 4,70 (m, 1H), 4,49 (s, 1H), 4,36 - 4,29 (m, 1H), 4,25 (d, J = 10,3 Hz, 1H), 3,91 (dd, J= 11,0, 4,6 Hz, 1H), 3,65 (dd, J= 10,2, 1,7Hz, 1H),3,48 (dd, J= 20,2, 6,7 Hz, 2H), 3,40 - 3,33 (m, 2H), 3,27 (dt, J = 14,0, 7,1 Hz, 1H), 2,96 (s, 3H), 2,85 (td, J= 10,8, 3,2 Hz, 1H), 2,65 (dd, J = 10,3, 7,3 Hz, 2H), 2,29-2,18 (m, 8H), 1,96-0,67 (m, 56H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CDCI3) δ 217,0, 184,8, 157,7, 129,6, 122,8, 106,9, 99,3, 88,2, 76,1, 75,7, 75,4, 74,6, 4, 69,9, 57,0, 55,5, 50,8, 49,3, 48,2, 47,0, 45,5, 40,8, 38,8, 35,9, 34,4, 32,5, 32,4, 32,3, 29,7, 29,7, 29,5, 28,1, 27,9, 26,7, 26,3, 23,9, 20,0, 19,9, 17,5, 15,7, 15,6, 14,7, 13,2, 12,2, 12,1, 10,7, 6,6, 6,5 ppm.

Przykład FLC-00564-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00539-1, przy czym zamiast 3-metoksypropyloaminy do mieszaniny reakcyjnej dodano N,N-dietyloaminę (2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 62%.

ESI-MŚ dla C47H80N2O11 (m/z): [M+H]⁺ 850,2, [M+Na]⁺ 872,1, [M-H]' 848,0.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 6,08 (dd, J = 10,8, 3,1 Hz, 1H), 5,71 (dd, J = 10,7, 1,6 Hz, 1H), 5,04 (d, J=9,6Hz, 1H), 4,93 (s, 1H), 4,65-4,59 (m, 1H), 4,24 (q, J=6,7 Hz, 1H), 4,13 (d, J = 10,4 Hz, 1H), 3,83 (dd, J = 11,0, 4,5 Hz, 1H), 3,59 (dd, J = 18,9, 6,0 Hz, 2H), 3,43 (dd, J = 12,1, 2,3 Hz, 1H), 3,32 - 3,17 (m, 4H), 2,77 (td, J= 10,6, 3,6 Hz, 1H), 2,71 -2,66 (m, 2H), 2,23-2,13 (m, 1H), 2,01 - 0,67 (m, 60H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 218,2, 184,0, 156,9, 130,1, 122,5, 106,9, 99,5, 88,3, 76,2, 75,7, 75,7, 74,0, 71,0, 69,7, 67,8, 55,7, 50,3, 49,3, 48,8, 40,8, 40,4, 38,8, 35,8, 32,5, 32,4, 32,1, 29,7, 28,5, 28,0, 27,4, 26,7, 23,6, 20,0, 19,7, 17,3, 15,6, 15,5, 14,3, 13,4, 12,9, 12,4, 12,0, 10,6, 6,4, 6,2 ppm.

PL 248049 Β1

131

Przykład FLC-00565-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00539-1, przy czym zamiast 3-metoksypropyloaminy do mieszaniny reakcyjnej dodano 4,4-dimetylopiperydynę*HCI (1,5 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 49%.

ESI-MS dla C50H84N2Ó11 (m/z): [M+H]⁺ 889,9, [M+Na]⁺ 911,9, [M-H]' 887,9.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 6,08 (dd, J = 10,8, 3,1 Hz, 1H), 5,68 (dd, J= 10,8, 1,6 Hz, 1H), 5,23 (d, J=9,6Hz, 1H), 4,80 (s, 1H), 4,75 -4,70 (m, 1H), 4,21 (q, J=6,8Hz, 1H), 4,13 (d, J= 10,5 Hz, 1H), 3,84 (dd, J= 11,0, 4,5 Hz, 1H),3,59 (dd, J= 13,4, 6,0 Hz, 2H), 3,43 (dd,J= 12,1,2,3 Hz, 1H), 3,37 - 3,26 (m, 4H), 2,78 (td, J= 10,8, 3,5 Hz, 1H), 2,73-2,65 (m, 2H), 1,98-0,67 (m, 65H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 218,2, 184,2, 157,3, 129,8, 122,6, 106,8, 99,4, 88,2, 76,4, 75,7, 74,0, 71,0, 69,7, 67,9, 55,8, 50,4, 49,3, 48,4, 40,8, 40,4, 38,8, 38,4, 35,8, 32,5, 32,3, 32,2, 29,7, 28,5, 28,2, 28,0, 27,4, 26,7, 23,5, 20,0, 19,7, 17,3, 15,5, 15,5, 14,3, 12,9, 12,4, 12,0, 10,6, 6,4, 6,3 ppm.

Przykład FLC-00347-1

100 mg C20-amino SAL (1 eq) zmieszano z izotiocyjanianem 4-trifluorometylofenylu (1,2 eq) wTHF. Reakcję prowadzono w RT (kontrola TLC i LC-MS). Mieszaninę poreakcyjną zawieszono na silikażelu i oczyszczono przy użyciu chromatografu z detektorem ELS, stosując kolumnę wypełnioną krzemionką. Odpowiednie frakcje połączono i zatężono, pozostałość rozpuszczono w DCM i przemyto dwukrotnie 0,06 M H2SO4. Produkt uzyskano z wydajnością 30%.

ESI-MS dla C50H75F3N2O10S (m/z): [M+H]⁺ 954,0, [M+Na]⁺ 976,0, [M-H]' 952,0.

Ή NMR (500 MHz, CDCI3) δ 9,31 (s, 1H), 7,72 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,54 (d, J= 8,5 Hz, 2H), 7,43 (d, J= 9,4 Hz, 1H), 6,21 (dd, J= 10,4, 1,2 Hz, 1H), 6,04 (dd, J= 10,3, 3,8 Hz, 1H), 5,45 (d, J= 6,5 Hz, 1H), 4,19 (d, J= 9,2 Hz, 1H), 3,95-3,90 (m, 1Η), 3,82 (q, J= 6,7 Hz, 1H), 3,74 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 3,63 (ddd, J = 14,0, 10,9, 2,1 Hz, 2H), 2,86 (td, J = 10,7, 3,8 Hz, 1H), 2,74 (dq, J = 14,5, 7,2 Hz, 1H), 2,61 (d, J = 10,2 Hz, 1H), 2,05-0,72 (m, 56H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CDCI3) δ 216,1, 180,8, 178,1, 142,9, 129,1, 125,6, 125,6, 124,9, 123,2, 106,5, 99,1, 87,0, 76,6, 75,9, 74,8, 73,6, 71,9, 71,7, 68,5, 55,3, 52,8, 49,3, 48,2, 40,1, 38,3, 37,7, 36,0, 33,1, 32,5, 31,1, 29,7, 28,7, 28,3, 26,0, 25,1, 22,3, 20,7, 20,3, 17,7, 15,9, 15,9, 14,6, 13,3, 13,1, 11,9, 11,6, 7,3, 6,5 ppm.

132

PL 248049 Β1

Przykład FLC-00339-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00347-1, przy czym zamiast izotiocyjanianu 4-trifluorometylofenylu do mieszaniny reakcyjnej dodano izotiocyjanian etylu (3 eq) i dodatkowo TEA (3 eq). Po oczyszczaniu związek przemyto 0,25 M Na2CO3 zamiast 0,06 M H2SO4. Produkt uzyskano z wydajnością 36%.

ESI-MS dla C45H76N2Ó10S (m/z): [M+H]⁺ 837,8, [M+Na]⁺ 859,8, [M-H]' 835,8.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 7,46 (s, 1H), 6,69 (d, J = 9,8 Hz, 1H), 6,08 (dd, J = 10,8, 3,0 Hz, 1H), 5,69 (dd, J = 10,8, 1,6 Hz, 1H), 5,58-5,48 (m, 1H), 4,86-4,69 (m, 1H), 4,31 (q, J= 6,8 Hz, 1H), 4,07 (d, J = 10,3 Hz, 1H), 3,82 (dd, J= 11,0, 4,5 Hz, 1H), 3,61 (ddd, J= 10,9, 8,1,2,7 Hz, 2H), 3,52 (dd, J= 7,2, 5,6 Hz, 1H), 3,49-3,38 (m, 2H), 2,82 (dd, J= 11,0, 7,8 Hz, 1H), 2,77-2,67 (m, 2H), 2,20 (t, J = 10,8 Hz, 1H), 2,00 - 0,67 (m, 57H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 219,4, 184,7, 182,5, 128,6, 122,5, 106,5, 98,9, 88,4, 75,8, 75,5, 73,5, 71,2, 71,0, 68,1, 56,1, 50,8, 50,3, 49,6, 40,6, 39,6, 38,5, 36,8, 35,7, 32,4, 32,2, 29,7, 28,0, 27,6, 27,5, 26,6, 23,4, 19,9, 19,5, 17,3, 15,8, 15,5, 14,2, 14,2, 13,9, 12,8, 12,4, 12,0, 10,5, 6,4, 6,3 ppm.

Przykład FLC-00340-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00347-1, przy czym zamiast izotiocyjanianu 4-trifluorometylofenylu do mieszaniny reakcyjnej dodano izotiocyjanian 4-fluorofenylu (1,2 eq) i dodatkowo TEA (1 eq). Po oczyszczaniu związek przemyto 0,25 M Na2COs zamiast 0,06 M H2SO4. Produkt uzyskano z wydajnością 36%.

ESI-MS dla C49H75FN2O10S (m/z):‘[M+H]⁺ 903,8, [M+Na]⁺ 925,7, [M-H]' 901,8.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 9,32 (s, 1H), 7,49 (dt, J= 7,0, 4,2 Hz, 2H), 7,40 (d, J= 9,6 Hz, 1H), 6,99-6,90 (m,2H), 6,15(dd, J= 10,8, 2,9 Hz, 1H), 5,76 (dd, J = 10,8, 1,7 Hz, 1H), 5,67-5,58 (m, 1H), 4,65 (s, 1H), 4,34 (q, J = 6,8 Hz, 1H), 4,09 (d, J = 10,3 Hz, 1H), 3,82 (dd, J = 10,9, 4,9 Hz, 1H), 3,67 - 3,59 (m, 2H), 3,51 (dd, J = 12,3, 2,8 Hz, 1H), 2,85-2,77 (m, 1H), 2,77-2,68 (m, 2H), 2,33 - 2,22 (m, 1H), 2,04 - 0,67 (m, 54H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 219,5, 185,1, 181,9, 160,5, 158,6, 136,3, 127,9, 125,9, 125,8, 123,0, 114,6, 114,4, 106,4, 98,9, 88,5, 75,8, 75,7, 75,6, 73,7, 71,6, 71,0, 68,2, 56,2, 50,9, 50,2, 49,4, 40,5, 38,5, 37,1, 35,7, 32,4, 32,2, 28,0, 27,8, 27,6, 26,6, 23,3, 19,8, 19,7, 17,3, 15,8, 15,4, 14,2, 12,8, 12,1, 12,0, 10,6, 6,4, 6,3 ppm.

PL 248049 Β1

133

Przykład FLC-00345-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00347-1, przy czym zamiast izotiocyjanianu 4-trifluorometylofenylu do mieszaniny reakcyjnej dodano izotiocyjanian 3-(metylotio)propylu (3 eq) i dodatkowo TEA (3 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 34%.

ESI-MS dla C47H80N2O10S2 (m/z): [M+H]⁺ 897,8, [M+Na]⁺ 918,8, [M-H]' 895,8.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 7,31 (s, 1H), 6,82 (s, 1H), 6,19 - 6,10 (m, 1H), 6,01 (dd, J = 10,2, 4,1 Hz, 1H), 5,25 (s, 1H), 4,06 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 3,93 (dd, J= 10,8, 5,4 Hz, 1H), 3,82 (d, J= 6,6 Hz, 1H), 3,75-3,66 (m, 2H), 3,63 - 3,55 (m, 3H), 2,91 (td,J= 10,9, 4,1 Hz, 1H),2,72 (dd, J= 10,0,7,2 Hz, 1H), 2,63 (d, J=9,8 Hz, 1H), 2,54 (td, J = 7,3, 2,3 Hz, 2H), 2,07 (s, 3H), 1,96-0,69 (m, 58H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 216,5, 182,3, 177,6, 130,2, 125,0, 107,2, 99,4, 86,9, 77,0, 75,7, 74,9, 73,4, 71,4, 71,3, 68,3, 55,4, 49,5, 47,9, 43,8, 40,1, 38,1, 37,4, 36,1, 32,8, 32,6, 31,4, 30,9, 29,7, 28,9, 28,6, 28,2, 25,9, 24,4, 22,3, 20,8, 20,0, 17,4, 16,0, 15,5, 15,0, 14,4, 12,9, 12,8, 11,8, 11,2, 6,9, 6,2 ppm.

Przykład FLC-00346-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00347-1, przy czym zamiast izotiocyjanianu 4-trifluorometylofenylu do mieszaniny reakcyjnej dodano izotiocyjanian benzylu (3 eq) i dodatkowo TEA (2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 29%.

ESI-MS dla C50H78N2O10S (m/z): [M+H]⁺ 899,8, [M+Na]⁺ 921,8, [M-H]' 897,8.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 7,58 (s, 1H), 7,34 (d, J = 7,4 Hz, 2H), 7,30 (t, J = 7,5 Hz, 2H), 7,23 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 6,96 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,17 - 6,13 (m, 1H), 6,05 (dd, J = 10,2, 4,0 Hz, 1H), 5,33 (s, 1H), 4,88 (dd, J = 14,7, 5,6 Hz, 1H), 4,69 (dd, J = 14,7, 4,5 Hz, 1H), 4,06 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 3,95 (dd, J = 10,8, 5,6 Hz, 1H), 3,78 - 3,73 (m, 1H), 3,72 - 3,68 (m, 1H), 3,61 (dd, J = 14,4, 6,5 Hz, 2H), 2,90 (td, J = 10,8, 4,1 Hz, 1H), 2,69 (dq, J = 14,4, 7,2 Hz, 1H), 2,60 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 2,03 - 0,69 (m, 56H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 216,2, 182,4, 177,6, 138,5, 130,1, 128,4, 127,9, 127,1, 124,9, 107,1, 99,3, 87,0, 76,8, 75,8, 74,8, 73,4, 71,5, 71,3, 68,3, 55,3, 49,5, 48,8, 47,9, 40,1, 38,2, 37,5, 36,1, 32,8, 32,5, 30,8, 29,7, 28,6, 28,2, 26,0, 24,5, 22,3, 20,7, 20,0, 17,3, 16,0, 15,5, 14,4, 12,9, 12,7, 11,7, 11,2, 7,0, 6,1 ppm.

134

PL 248049 Β1

Przykład FLC-00348-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00347-1, przy czym zamiast izotiocyjanianu 4-trifluorometylofenylu do mieszaniny reakcyjnej dodano izotiocyjanian 3,5-bis(trifluorometylojfenylu (1,2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 66%.

ESI-MS dla C51H74F6N2O10S (m/z): [M+H]⁺ 1021,9, [M+Na]⁺ 1044,0, [M-H]’ 1019,9.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 9,83 (s, 1H), 8,21 (s, 2H), 7,60 (s, 1H), 7,49 (d, J = 9,4 Hz, 1H), 6,25 (d, J = 10,3 Hz, 1H), 6,05 (dd, J = 10,2, 4,4 Hz, 1H), 5,40 (dd, J = 9,2, 4,3 Hz, 1H), 4,19 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 3,92 (q, J= 6,7 Hz, 1H), 3,82 (dd, J = 10,5, 5,3 Hz, 1H), 3,70 (d, J = 10,2 Hz, 1H), 3,61 (dd, J = 6,1, 3,5 Hz, 2H), 2,85 (td, J = 10,5, 4,8 Hz, 1H), 2,78 (dq, J = 14,6, 7,3 Hz, 1H), 2,68 (d, J = 10,5 Hz, 1H), 2,03 - 0,72 (m, 56H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 217,2, 180,8, 177,8, 141,6, 131,2, 131,0, 128,9, 125,7, 124,5, 123,6, 122,3, 117,3, 117,3, 106,6, 99,1, 86,9, 76,6, 76,3, 74,8, 73,6, 72,0, 71,7, 68,6, 55,0, 52,6, 49,1, 47,8, 39,8, 38,1, 37,9, 35,8, 33,4, 32,5, 31,1, 28,7, 28,4, 25,9, 24,4, 22,0, 20,6, 20,1, 17,2, 15,9, 15,6, 14,4, 13,0, 12,9, 11,5, 11,4, 7,2, 6,1 ppm.

Przykład FLC-00349-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00347-1, przy czym zamiast izotiocyjanianu 4-trifluorometylofenylu do mieszaniny reakcyjnej dodano izotiocyjanian propylu (5 eq) i dodatkowo TEA (5 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 74%.

ESI-MS dla C46H78N2O10S (m/z): [M+H]⁺ 851,8, [M+Na]⁺ 873,8, [M-H]' 849,9.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 7,05 (s, 1H), 6,78 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 6,12 (dd, J = 10,4, 1,5 Hz, 1H), 5,96 (dd, J = 10,3, 3,7 Hz, 1H), 5,26 (s, 1H), 4,10 - 4,02 (m, 1H), 3,91 (dd, J = 10,7, 5,5 Hz, 1H), 3,83 (q, J = 6,6 Hz, 1H), 3,72 (d, J = 10,7 Hz, 1H), 3,60 (dd, J = 7,4, 2,3 Hz, 2H), 3,51 - 3,41 (m, 2H), 2,90 (td, J = 10,8, 4,1 Hz, 1H), 2,73 (dq, J = 9,9, 7,2 Hz, 1H), 2,62 (d, J = 9,7 Hz, 1H), 2,02 - 0,69 (m, 61H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 216,5, 182,6, 178,1, 130,4, 124,7, 107,2, 99,7, 87,5, 77,3, 76,2, 75,3, 73,8, 71,8, 71,7, 68,7, 55,8, 49,7, 48,4, 47,0, 40,6, 38,6, 37,6, 36,5, 33,0, 31,3, 30,1, 30,1, 29,2, 28,6,26,4,25,2,22,9, 22,8,21,1,20,4, 17,8, 16,4, 15,9, 14,8, 13,3, 13,2, 12,1, 11,7, 11,6, 7,3, 6,6 ppm.

PL 248049 Β1

135

Przykład FLC-00352-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00347-1, przy czym zamiast izotiocyjanianu 4-trifluorometylofenylu do mieszaniny reakcyjnej dodano izotiocyjanianooctan etylu (3 eq) i dodatkowo TEA (3 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 77%.

ESI-MS dla C47H78N2O12S (m/z): [M+H]⁺ 895,9, [M+Na]⁺ 917,9, [M-H]' 893,9.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 7,41 (d, J = 7,1 Hz, 1H), 6,89 (s, 1H), 6,10 (dd, J = 10,6, 2,2 Hz, 1H), 5,86 (dd, J = 10,5, 2,5 Hz, 1H), 5,14 (s, 1H), 4,47 (dd, J = 18,3, 5,4 Hz, 1H), 4,31 (d, J = 5,0 Hz, 1H), 4,22-4,15 (m, 4H), 4,08 (d, J= 10,1 Hz, 1H), 3,99-3,89 (m, 2H), 3,76 (t, J = 12,3 Hz, 2H), 3,59 (dd, J = 10,0, 1,3 Hz, 1H), 2,89 (td, J= 10,8, 4,0 Hz, 1H), 2,79-2,70 (m, 1H), 2,63 (d, J= 9,4 Hz, 1H), 2,03-0,70 (m, 56H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 216,2, 183,1, 177,7, 170,4, 129,4, 123,8, 106,1,99,2,87,6,76,9, 75,8, 74,9, 73,5, 71,6, 71,3, 68,5, 61,4, 55,5, 49,3, 48,3, 46,3, 40,7, 38,4, 37,2, 36,2, 32,8, 31,4, 31,2, 29,7, 28,6, 28,1, 26,1, 25,2, 22,6, 21,2, 19,9, 17,5, 16,2, 15,5, 14,6, 13,9, 12,9, 12,8, 11,7, 10,9, 6,8, 6,1 ppm.

Przykład FLC-00368-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00347-1, przy czym zamiast izotiocyjanianu 4-trifluorometylofenylu do mieszaniny reakcyjnej dodano izotiocyjanian propylu (3 eq) i dodatkowo TEA (3 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 27%.

ESI-MS dla C47H80N2O10S (m/z): [M+H]⁺ 865,9, [M+Na]⁺ 888,0, [M-H]' 864,0.

Ή NMR (500 MHz, CDCI3) δ 6,86 (d, J= 8,1 Hz, 2H), 6,10 (dd, J = 10,5, 1,9 Hz, 1H), 5,94 (dd, J = 10,4, 3,0 Hz, 1H), 5,28 (s, 1H), 4,11 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 3,96 (dd, J= 10,5, 5,5 Hz, 1H), 3,87 (d, J= 6,6 Hz, 1H), 3,74 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 3,65-3,59 (m, 2H), 3,57-3,46 (m, 2H), 2,88 (td, J= 10,8, 3,8 Hz, 1H), 2,70 (dt, J= 14,4, 7,2 Hz, 1H), 2,57 (d, J=9,8 Hz, 1H), 2,8-0,69 (m, 63H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CDCI3) δ 215,5, 182,0, 178,2, 129,8, 123,6, 106,5, 99,1, 87,0, 76,8, 75,7, 74,9, 73,7, 71,6, 71,4, 68,3, 55,5, 53,0, 49,4, 48,3, 44,6, 40,6, 38,4, 37,1, 36,2, 32,7, 32,6, 31,4, 31,0, 29,7, 28,8, 28,2, 26,2, 25,6, 22,5, 20,7, 20,1, 17,8, 16,0, 15,9, 14,6, 13,9, 13,3, 13,0, 11,9, 11,4, 7,2, 6,4 ppm.

136

PL 248049 Β1

Przykład FLC-00369-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00347-1, przy czym zamiast izotiocyjanianu 4-trifluorometylofenylu do mieszaniny reakcyjnej dodano izotiocyjanian izobutylu (3 eq) i dodatkowo TEA (3 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 45%.

ESI-MS dla C47H80N2O10S (m/z): [M+H]⁺ 866,0, [M+Na]⁺ 888,0, [M-H]' 864,0.

Ή NMR (500 MHz, CDCI3) δ 6,90 (s, 2H), 6,10 (dd, J = 10,5, 1,8 Hz, 1H), 5,94 (dd, J = 10,4, 2,7 Hz, 1H), 5,30 (s, 1H), 4,11 (d, 7 = 10,1 Hz, 1H), 3,95 (dd, 7= 10,6, 5,5 Hz, 1H), 3,86 (d, 7= 6,5 Hz, 1H), 3,73 (d, 7 = 10,2 Hz, 1H), 3,63 (d, 7 = 10,5 Hz, 2H), 3,36 (d, 7 = 4,4 Hz, 2H), 2,88 (td, 7 = 10,8, 3,8 Hz, 1H),2,70 (dq, 7 = 14,4, 7,1 Hz, 1H),2,57 (d,7=9,8 Hz, 1H), 2,09 - 0,69 (m, 63H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CDCI3) δ 215,4, 182,3, 178,2, 129,8, 123,7, 106,6, 99,2, 87,0, 75,7, 74,9, 73,7, 71,6, 71,4, 68,3, 55,5, 53,1, 52,3, 49,4, 48,3, 40,5, 38,4, 37,0, 36,2, 32,6, 31,0, 29,7, 28,8, 28,3, 28,2,26,1,25,5,22,5,20,7,20,3,20,3,20,1, 17,8, 16,1, 15,8, 14,6, 13,3, 13,0, 11,9, 11,4, 7,1,6,4 ppm.

Przykład FLC-00377-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00347-1, przy czym zamiast izotiocyjanianu 4-trifluorometylofenylu do mieszaniny reakcyjnej dodano izotiocyjaniancykloheksylu (5 eq) i dodatkowo TEA (5 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 81%.

ESI-MS dla C49H82N2O10S (m/z): [M+H]⁺ 892,0, [M+Na]⁺ 914,0, [M-H]' 890,0.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 6,90 (s, 1H), 6,76 (d, 7 = 6,4 Hz, 1H), 6,12 (dd, 7 = 10,4, 1,5 Hz, 1H), 5,95 (dd, 7= 10,3, 3,6 Hz, 1H), 5,28 (s, 1H), 4,20-4,08 (m, 1H), 4,07 (dd, 7= 10,1, 1,0 Hz, 1H), 3,91 (dd, 7= 10,6, 5,3 Hz, 1H), 3,84 (dd, 7= 13,3, 6,5 Hz, 1H), 3,75-3,69 (m, 1H), 3,61 (dd, 7= 10,3, 1,6 Hz, 2H), 2,91 (td, 7 = 10,8, 4,1 Hz, 1H), 2,72 (dq, 7 = 9,9, 7,2 Hz, 1H), 2,62 (d, 7 = 9,9 Hz, 1H), 2,01 -0,69 (m, 66H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 215,9, 180,8, 177,7, 130,1, 124,3, 106,9, 99,3, 86,9, 77,0, 75,8, 74,9, 73,6, 71,5, 71,3, 68,4, 55,3, 52,8, 49,3, 48,0, 40,2, 38,2, 37,2, 36,1, 33,0, 32,8, 32,6, 32,6, 31,0, 29,7, 28,8, 28,2, 26,0, 25,7, 25,0, 24,9, 24,7, 22,4, 20,7, 20,1, 17,4, 16,0, 15,5, 14,5, 13,0, 12,9, 11,8, 11,3, 7,0, 6,3 ppm.

PL 248049 Β1

137

Przykład FLC-00378-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00347-1, przy czym zamiast izotiocyjanianu 4-trifluorometylofenylu do mieszaniny reakcyjnej dodano izotiocyjanian 4-chlorofenylu (2 eq) i dodatkowo TEA (2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 67%.

ESI-MS dla C49H75CIN2O10S (m/z): [M+H]⁺ 920,0, [M+Na]^: 942,0, [M-H]' 918,0.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 9,28 (s, 1H), 7,47 (d, J= 8,7 Hz, 2H), 7,30 - 7,22 (m, 3H), 6,21 (d, J = 10,2 Hz, 1H), 6,07 (dd, J = 10,2, 4,5 Hz, 1H), 5,40 (dd, J = 8,8, 4,0 Hz, 1H), 4,18 - 4,13 (m, 1H), 3,89 (dd, J = 10,6, 5,4 Hz, 1H), 3,78 (q, J= 6,7 Hz, 1H), 3,71 (d, J = 10,2 Hz, 1H), 3,63-3,56 (m, 2H), 2,89(td, J = 10,8, 4,2 Hz, 1H), 2,76 (dq, J= 14,5,7,2 Hz, 1H), 2,66 (d, J = 10,2 Hz, 1H), 2,01 -0,72 (m, 56H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 217,0, 181,3, 177,7, 138,4, 129,8, 129,5, 128,3, 126,0, 125,6, 107,0, 99,3, 86,9, 76,9, 76,0, 74,9, 73,3, 71,5, 71,5, 68,4, 55,2, 49,3, 47,8, 39,9, 38,1, 37,7, 36,0, 33,1, 32,5, 30,9, 29,7, 28,7, 28,2, 25,9, 24,2, 22,1, 20,7, 20,1, 17,3, 16,0, 15,5, 14,4, 12,9, 12,8, 11,7, 11,3, 7,1, 6,3 ppm.

Przykład FLC-00379-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00347-1, przy czym zamiast izotiocyjanianu 4-trifluorometylofenylu do mieszaniny reakcyjnej dodano izotiocyjanian 3,4-dichlorofenylu (1,2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 70%.

ESI-MS dla C49H74CI2N2O10S (m/z): [M+Na]⁺ 976,0, [M-H]' 952,0.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 9,58 (s, 1H), 7,75 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 7,46 (dd, J = 8,7, 2,3 Hz, 1H), 7,37 (d, J= 8,7 Hz, 1H), 7,28 (d, J= 9,5 Hz, 1H), 6,24 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 6,12 (dd, J= 10,0, 5,2 Hz, 1H), 5,39 (dd, J = 9,3, 5,3 Hz, 1H), 4,18 (dd, J = 10,0, 1,0 Hz, 1H), 3,90 (dd, J= 10,6, 5,2 Hz, 1H), 3,84 (q, J= 6,7 Hz, 1H), 3,67 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 3,59 (dd, J= 11,2, 1,7 Hz, 2H), 2,89 (td, J= 10,6, 4,4 Hz, 1H), 2,76 (dq, J = 14,6, 7,2 Hz, 1H), 2,68 (d, J = 10,5 Hz, 1H), 2,00-0,72 (m, 56H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 217,4, 181,1, 177,4, 139,6, 131,6, 129,6, 127,8, 126,4, 126,3, 124,3, 107,3, 99,3, 86,7, 76,9, 76,2, 74,8, 73,3, 71,6, 71,5, 68,5, 55,0, 49,3, 47,6, 39,5, 38,0, 37,9, 35,9, 33,5, 32,4, 30,9, 28,8, 28,3, 25,8, 23,7, 21,9, 20,7, 20,2, 17,2, 16,0, 15,5, 14,4, 12,9, 12,8, 11,7, 11,6, 7,2, 6,3 ppm.

138

PL 248049 Β1

Przykład FLC-00380-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00347-1, przy czym zamiast izotiocyjanianu 4-trifluorometylofenylu do mieszaniny reakcyjnej dodano izotiocyjanian 3,5-dichlorofenylu (1,2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 59%.

ESI-MS dla C49H74CI2N2O10S (m/z): [M+Na]⁺ 976,0, [M-H]' 952,0.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 9,55 (s, 1H), 7,60 (d, J = 1,6 Hz, 2H), 7,35 (d, J = 9,4 Hz, 1H), 7,11 (t, J = 1,8 Hz, 1H), 6,24 (d, J = 10,2 Hz, 1H), 6,08 (dd, J = 10,1, 4,9 Hz, 1H), 5,39 (dd, J = 9,3, 4,9 Hz, 1H), 4,18 (dd, J= 10,0, 1,2 Hz, 1H), 3,95-3,83 (m, 2H), 3,67 (d, J = 10,3 Hz, 1H), 3,63-3,57 (m, 2H), 2,88 (td, J = 10,5, 4,5 Hz, 1H), 2,76 (dq, J = 14,6, 7,3 Hz, 1H), 2,67 (d, J = 10,5 Hz, 1H), 2,02-0,71 (m, 56H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 217,1, 180,9, 177,4, 142,0, 134,0, 129,4, 126,1, 124,2, 122,7, 107,0, 99,1, 86,8, 76,8, 76,3, 74,7, 73,4, 71,8, 71,6, 68,6, 54,9, 52,8, 49,1,47,7, 39,6, 38,1, 37,9, 35,8, 33,5, 32,4, 30,9, 29,7, 28,7, 28,4, 25,9, 24,0, 22,0, 20,7, 20,2, 17,2, 15,9, 15,5, 14,4, 13,0, 12,9, 11,6, 11,6, 7,3, 6,4 ppm.

Przykład FLC-00382-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00347-1, przy czym zamiast izotiocyjanianu 4-trifluorometylofenylu do mieszaniny reakcyjnej dodano izotiocyjanian 4-metylofenylu (3 eq) i dodatkowo TEA (3 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 80%.

ESI-MS dla C50H78N2O10S (m/z): [M+H]⁺ 900,0, [M+Na]⁺ 922,0, [M-H]' 898,0.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 9,07 (s, 1H), 7,28 (d, J= 8,3 Hz, 2H), 7,13 (d, J= 8,2 Hz, 2H), 7,08 (d, J= 9,4 Hz, 1H), 6,20 (d, J = 10,3 Hz, 1H), 6,10 (dd, J= 10,2, 4,5 Hz, 1H), 5,41 (d, J= 4,7 Hz, 1H), 4,23-4,10 (m, 1H), 3,93 (dd, J= 10,7, 5,4 Hz, 1H), 3,75-3,65 (m, 3H), 3,59 (d, J= 10,0 Hz, 1H), 2,92 (td, J = 10,8, 4,1 Hz, 1H), 2,76 (dq, J= 9,9, 7,2 Hz, 1H), 2,66 (d, J = 9,8 Hz, 1H), 2,32 (s, 3H), 2,04 - 0,72 (m, 56H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 216,9, 181,5, 177,6, 136,8, 135,0, 129,8, 129,1, 125,6, 125,0, 107,1, 99,5, 86,9, 76,9, 75,8, 74,9, 73,1, 71,4, 71,3, 68,4, 55,4, 49,6, 47,8, 39,9, 38,1, 37,4, 36,1, 33,1, 32,6, 30,7, 29,7, 28,8, 28,2, 25,9, 23,8, 22,2, 20,9, 20,7, 20,0, 17,4, 16,1, 15,5, 14,4, 12,9, 12,8, 11,8, 11,3, 7,0, 6,2 ppm.

PL 248049 Β1

139

Przykład FLC-00386-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00347-1, przy czym zamiast izotiocyjanianu 4-trifluorometylofenylu do mieszaniny reakcyjnej dodano izotiocyjanian 3-trifluorometylofenylu (3 eq) i dodatkowo TEA (3 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 38%.

ESI-MS dla C50H75F3N2O10S (m/z): [M+H]⁺ 953,8, [M+Na]⁺ 975,8, [M-H]’ 951,8.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 9,47 (s, 1H), 7,91 - 7,80 (m, 2H), 7,43 (t, J= 7,9 Hz, 1H), 7,37 (d, J= 8,0 Hz, 2H), 6,22 (dd, J = 10,3, 1,0 Hz, 1H), 6,04 (dd, J = 10,3, 4,2 Hz, 1H), 5,40 (dd, J= 9,0, 3,7 Hz, 1H), 4,17 (dd, J = 10,1, 0,9 Hz, 1H), 3,91 -3,83 (m, 2H), 3,74-3,69 (m, 1H), 3,64-3,60 (m, 2H), 2,87 (td, J= 10,7, 4,4 Hz, 1H), 2,77 (tt, J = 14,5, 7,2 Hz, 1Η), 2,67 (d, J = 10,2 Hz, 1H), 2,02-0,68 (m, 58H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 217,0, 181,2, 177,9, 140,5, 131,7, 130,2, 129,2, 128,7, 127,6, 125,3, 123,1, 121,0, 120,9, 106,7, 99,2, 86,9, 76,8, 76,0, 74,9, 73,6, 71,8, 71,5, 68,5, 55,2, 52,7, 49,2, 47,9, 38,1, 37,8, 36,0, 33,2, 32,5, 31,0, 28,7, 28,3, 25,9, 24,6, 22,1, 20,6, 20,0, 17,3, 15,9, 15,6, 14,4, 12,9, 12,9, 11,6, 11,3, 7,1, 6,1 ppm.

Przykład FLC-00387-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00347-1, przy czym zamiast izotiocyjanianu 4-trifluorometylofenylu do mieszaniny reakcyjnej dodano izotiocyjanian izopropylu (5 eq) i dodatkowo TEA (5 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 61%.

ESI-MS dla C46H78N2O10S (m/z): [M+H]⁺ 851,8, [M+Na]⁺ 873,8, [M-H]' 849,9.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 6,88 (s, 1H), 6,71 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 6,11 (dd, J = 10,4, 1,5 Hz, 1H), 5,95 (dd, J = 10,3, 3,7 Hz, 1H), 5,27 (s, 1H), 4,53 - 4,37 (m, 1H), 4,10 - 4,02 (m, 1H), 3,91 (dd, J = 10,7, 5,4 Hz, 1H), 3,83 (q, J = 6,6 Hz, 1H), 3,76 - 3,70 (m, 1H), 3,63 - 3,58 (m, 2H), 2,91 (td, J = 10,8, 4,1 Hz, 1H), 2,72 (dq, J= 10,0, 7,2 Hz, 1H), 2,62 (d, J=9,8 Hz, 1H), 2,00-0,69 (m, 62H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 216,1, 180,9, 177,7, 130,1, 124,2, 106,8, 99,3, 87,0, 76,8, 75,8, 74,9, 73,5, 71,5, 71,3, 68,4, 55,4, 52,8, 49,3, 48,0, 46,1, 40,2, 38,2, 37,2, 36,1, 32,6, 31,0, 29,7, 28,8, 28,2,26,0,24,7,22,5, 22,4,22,1,20,7,20,1, 17,4, 16,0, 15,5, 14,4, 13,0, 12,9, 11,8, 11,2, 6,9, 6,3 ppm.

140

PL 248049 Β1

Przykład FLC-00393-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00347-1, przy czym zamiast izotiocyjanianu 4-trifluorometylofenylu do mieszaniny reakcyjnej dodano izotiocyjanianetoksykarbonylowy (1,5 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 28%.

ESI-MS dla C46H76N2O12S (m/z): [M+H]⁺881,8, [M+Na]⁺ 903,9, [M-H]’ 879,9.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 9,69 (d, J= 9,0 Hz, 1H), 8,20 (s, 1H), 6,18 (dd, J= 10,7, 2,8 Hz, 1H), 5,81 (dd, J = 10,7, 1,4 Hz, 1H), 5,19 (d, J= 8,9 Hz, 1H), 4,27-4,14 (m, 2H), 4,06 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 3,93 (dd, J = 10,7, 5,7 Hz, 1H), 3,79 (d, J = 10,4 Hz, 1H), 3,76-3,71 (m, 1H), 3,59 (dd, J= 9,9, 1,5 Hz, 1H), 3,53 (d, J = 9,8 Hz, 1H), 2,94 - 2,79 (m, 2H), 2,68 - 2,60 (m, 1H), 2,05 - 0,71 (m, 59H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 215,8, 180,1, 177,8, 152,7, 127,7, 124,1, 105,6, 99,9, 88,5, 77,6, 77,3, 75,2, 72,8, 72,1, 71,4, 69,1, 63,2, 56,6, 54,5, 49,7, 49,2, 41,6, 39,2, 36,8, 36,3, 33,2, 33,0, 31,0, 29,7, 28,6, 26,7, 24,6, 23,1,21,7, 20,4, 18,0, 17,7, 15,9, 14,6, 14,4, 13,5, 13,5, 12,1, 11,3, 7,2, 6,7 ppm.

Przykład FLC-00394-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00347-1, przy czym zamiast izotiocyjanianu 4-trifluorometylofenylu do mieszaniny reakcyjnej dodano izotiocyjanian metylu (5 eq) i dodatkowo TEA (5 eq). Po oczyszczaniu związek przemyto 0,25 M Na2COs zamiast 0,06 M H2SO4. Produkt uzyskano z wydajnością 38%.

ESI-MS dla C44H74N2O10S (m/z): [M+H]⁺ 823,9, [M+Na]⁺ 845,9, [M-H]' 822,0.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 7,63 (d, J= 3,5 Hz, 1H), 6,79 (d, J= 9,9 Hz, 1H), 6,09 (dd, J = 10,8, 2,9 Hz, 1H), 5,69 (dd, J=10,8, 1,7 Hz, 1H), 5,53-5,42 (m, 1H), 4,28 (q, J=6,7 Hz, 1H), 4,07 (d, J = 10,5 Hz, 1H), 3,81 (dd, J= 11,0, 4,7 Hz, 1H), 3,63-3,57 (m, 3H), 3,47 (dd, J= 12,4, 3,0 Hz, 1H), 2,92 (d, J = 4,4 Hz, 3H), 2,81 (td, J= 11,1, 3,3 Hz, 1H), 2,75-2,66 (m, 2H), 2,25-2,14 (m, 1H), 1,97-0,68 (m, 54H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 219,4, 184,8, 183,6, 128,4, 122,7, 106,5, 98,8, 88,4, 75,8, 75,6, 73,5, 71,2, 71,1, 68,1, 56,1, 50,9, 50,4, 49,5, 40,5, 38,5, 37,0, 35,8, 32,4, 32,0, 30,8, 29,7, 28,0, 27,6, 27,2, 26,6, 23,4, 19,8, 19,5, 17,2, 15,8, 15,4, 14,2, 12,8, 12,0, 11,8, 10,5, 6,4, 6,1 ppm.

PL 248049 Β1

141

Przykład FLC-00467-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00347-1, przy czym zamiast izotiocyjanianu 4-trifluorometylofenylu do mieszaniny reakcyjnej dodano izotiocyjanian terf-butylu (5 eq) i dodatkowo TEA (5 eq). Po oczyszczaniu związek przemyto 0,25 M N2CO3 zamiast 0,06 M H2SO4. Produkt uzyskano z wydajnością 70%.

ESI-MS dla C47H80N2O10Ś (m/z): [M+H]⁺ 866,0, [M+Na]⁺ 888,0, [M-H]' 864,0.

Ή NMR (700 MHz, CD2CI2) δ 7,21 (s, 1H), 6,64 (d, J = 9,7 Hz, 1H), 6,11 (dd, J = 10,9, 3,1 Hz, 1H), 5,72 (dd, J=10,8, 1,8 Hz, 1H), 5,68 (ddd, J= 9,7, 2,9, 1,9 Hz, 1H), 5,17 (s, 1H), 4,33 (q, J=6,8Hz, 1H), 4,09 (dd, J = 10,4, 1,5 Hz, 1H), 3,89 (dd, J= 11,0, 5,5 Hz, 1H), 3,72-3,69 (m, 2H), 3,53 (dd, J = 12,3, 3,1 Hz, 1H), 2,85 (td, J = 11,0, 3,4 Hz, 1H), 2,81 - 2,72 (m, 2H), 2,41 - 2,32 (m, 1H), 2,03 - 0,73 (m, 63H) ppm.

¹³C NMR (176 MHz, CD2CI2) δ 219,6, 184,4, 181,0, 129,3, 122,0, 106,7, 99,0, 88,3, 76,0, 75,4, 75,2, 73,3, 71,2, 71,1, 68,1, 56,3, 53,3, 50,1, 50,0, 49,9, 40,6, 38,6, 36,7, 35,7, 32,5, 32,3, 32,3, 29,0, 28,2, 28,0, 27,4, 26,7, 23,0, 20,0, 19,4, 17,3, 15,8, 15,6, 14,1, 13,1, 12,9, 11,9, 10,7, 6,5, 6,3 ppm.

Przykład FLC-00771-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00347-1, przy czym zamiast izotiocyjanianu 4-trifluorometylofenylu do mieszaniny reakcyjnej dodano izotiocyjanian 3-pentylu (3 eq) i dodatkowo TEA (3 eq). Po oczyszczaniu związek przemyto 0,25 M N2CO3 zamiast 0,06 M H2SO4. Produkt uzyskano z wydajnością 36%.

ESI-MS dla C48H82N2O10Ś (m/z): [M+H]⁺ 879,9, [M+Na]⁺ 901,9, [M-H]' 878,2.

Ή NMR (400 MHz, CD2CI2) δ 6,97 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 6,62 (d, J = 9,8 Hz, 1H), 6,12 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 5,74 (dd, J= 25,0, 10,3 Hz, 3H), 5,12 (s, 1H), 4,38 (d, J= 6,3 Hz, 2H), 4,12 (d, J = 10,4 Hz, 1H), 3,88 (d, J= 7,7 Hz, 1H), 3,71 (s, 1H), 3,66 (s, 1H), 3,54 (d, J = 11,7 Hz, 1H), 2,85 (t, J = 10,1 Hz, 1H), 2,75 (d, J = 10,3 Hz, 2H), 2,28-0,72 (m, 64H) ppm.

¹³C NMR (101 MHz, CD2CI2) δ 219,5, 184,2, 182,8, 129,3, 122,2, 106,4, 99,1, 88,4, 75,9, 75,4, 73,4, 71,3, 71,1, 68,0, 57,5, 56,1, 51,3, 50,0, 49,8, 40,6, 38,6, 36,3, 35,7, 32,4, 32,4, 32,0, 29,7, 28,0, 27,8, 27,7, 27,6, 27,1, 26,6, 23,3, 20,0, 19,6, 17,3, 15,7, 15,6, 14,2, 12,9, 12,9, 11,9, 10,7, 10,6, 10,5, 6,5, 6,4 ppm.

142

PL 248049 Β1

Przykład FLC-00361-1

100 mg C20-amino-SAL (1 eq) rozpuszczono w DCM, dodano TEA (1 eq) i bezwodnik glutarowy (1 eq). Reakcję prowadzono w RT (kontrola TLC i LC-MS). Następnie mieszaninę poreakcyjną zawieszono na silikażelu i oczyszczono przy użyciu chromatografu z detektorem ELS, stosując kolumnę wypełnioną krzemionką. Odpowiednie frakcje połączono i zatężono, pozostałość rozpuszczono w DCM i przemyto dwukrotnie 0,06 M H2SO4. Produkt uzyskano z wydajnością 9%.

ESI-MS dla C47H77NO13 (m/z): [M+Na]⁺ 887,1, [M-H]' 862,9.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 7,59 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 5,81 - 5,70 (m, 2H), 4,49 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 4,15 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 3,87 (dd, J = 17,9, 5,9 Hz, 2H), 3,70 (d, J = 10,4 Hz, 1H), 3,64 - 3,54 (m, 2H), 2,90 (d, J= 3,6 Hz, 1H), 2,68 (dd, J = 10,1, 7,8 Hz, 2H), 2,37-0,61 (m, 64H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 213,4, 178,3, 176,0, 173,2, 132,9, 131,0, 108,6, 96,4, 86,3, 77,0, 74,7, 73,4, 73,1, 71,7, 71,5, 67,0, 50,6, 49,5, 48,8, 39,1,36,7, 36,5, 36,0, 35,0, 32,7, 32,5, 31,0, 29,7, 29,6, 29,0, 27,9, 26,1, 24,9, 23,0, 22,3, 20,8, 19,8, 17,9, 16,9, 15,7, 15,0, 12,9, 12,9, 11,9, 10,7, 6,8, 6,1 ppm.

Przykład FLC-00445-1

100 mg C20-amino SAL (1 eq) zmieszano z chlorkiem 5-chloropentanoilu (2,2 eq) i TEA (8 eq) w DCM. Reakcję prowadzono w RT (kontrola TLC i LC-MS). Następnie DCM zatężono, pozostałość zalano MeCN z dodatkiem 1 M NaOH i mieszano w RT (kontrola LC-MS). Mieszaninę poreakcyjną rozcieńczono H2O i ekstrahowano dwukrotnie DCM. Warstwy organiczne połączono, zawieszono na silikażelu i oczyszczono przy użyciu chromatografu z detektorem ELS, stosując kolumnę wypełnioną krzemionką. Odpowiednie frakcje połączono i zatężono, pozostałość rozpuszczono w DCM i przemyto dwukrotnie 0,25 M Na2CO3. Produkt uzyskano z wydajnością 51%.

ESI-MS dla C47H78CINO11 (m/z): [M+Na]⁺ 890,9, [M-H]’867,0.

Ή NMR (700 MHz, CDCI3) δ 7,08 (d, J= 9,6 Hz, 1H), 6,11 (dd, J = 10,9, 3,1 Hz, 1H), 5,69 (dd, J = 10,8, 1,8 Hz, 1H), 4,85 (ddd, J= 9,6, 2,9, 2,0 Hz, 1H), 4,29 (q, J= 6,7 Hz, 1H), 4,22 (dd, J = 10,4, 1,3 Hz, 1H), 3,90 (dd, J = 11,0, 4,8 Hz, 1H), 3,62 (dd, J = 10,2, 2,0 Hz, 1H), 3,54 - 3,50 (m, 3H), 3,37 (dd, J = 12,1, 2,3 Hz, 1H), 2,86 (td, J = 10,7, 3,3 Hz, 1H), 2,66 (ddd, J= 18,6, 10,8, 5,6 Hz, 2H), 2,49 (ddd, J= 15,1, 9,0, 6,0 Hz, 1H), 2,23 (ddd, J= 15,3, 9,4, 5,8 Hz, 1H), 2,09-0,65 (m, 61H) ppm.

¹³C NMR (176 MHz, CDCI3) δ 217,7, 185,1, 173,4, 128,0, 123,4, 106,3, 98,9, 88,5, 76,5, 76,0, 75,6, 74,8, 71,5, 70,0, 68,3, 55,9, 51,2, 49,2, 46,2, 44,9, 40,6, 38,8, 37,2, 36,0, 35,1, 32,6, 32,5, 32,4, 32,3, 29,2, 28,0, 28,0, 26,9, 24,3, 22,6, 20,1, 20,0, 17,6, 16,0, 15,5, 14,7, 13,2, 12,7, 12,2, 10,8, 6,7, 6,58 ppm.

PL 248049 Β1

143

Przykład FLC-00455-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00445-1, przy czym zamiast chlorku 5-chloropentanoilu do mieszaniny reakcyjnej dodano chlorek cyklopentanokarbonylu (2,2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 80%.

ESI-MS dla C48H79NO11 (m/z): [M+Na]⁺ 869,0.

Ή NMR (700 MHz, CDCI3) δ 7,00 (d, J = 9,4 Hz, 1H), 6,13 (dd, J = 10,9, 3,1 Hz, 1H), 5,75 (dd, J = 10,8, 1,8 Hz, 1H), 4,88 (ddd, J= 9,7, 2,9, 1,9 Hz, 1H), 4,31 (q, J= 6,6 Hz, 1H), 4,24 (dd, J= 10,4, 1,3 Hz, 1H), 3,93 (dd, J = 11,0, 4,9 Hz, 1H), 3,67 (dd, J = 10,2, 2,1 Hz, 1H), 3,56 (d, J = 9,9 Hz, 1H), 3,40 (dd, J = 12,2, 2,4 Hz, 1H), 2,88 (td, J= 10,7, 3,4 Hz, 1H), 2,77 (p, J= 8,0 Hz, 1H), 2,71 -2,64 (m, 2H), 2,12-0,68 (m, 65H) ppm.

¹³C NMR (176 MHz, CDCI3) δ 217,6, 184,9, 177,8, 128,4, 123,0, 106,3, 99,0, 88,4, 76,4, 75,7, 75,6, 74,6, 71,4, 69,8, 68,1, 67,1, 55,8, 51,2, 49,3, 46,3, 45,3, 40,6, 38,7, 36,8, 35,9, 32,4, 32,2, 31,5, 30,3, 28,7, 27,9, 27,9, 26,8, 26,2, 26,2, 24,1, 20,0, 17,5, 15,8, 15,5, 14,6, 13,1, 12,2, 12,1, 10,7, 6,6, 6,4 ppm.

Przykład FLC-00462-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00445-1, przy czym zamiast chlorku 5-chloropentanoilu do mieszaniny reakcyjnej dodano chlorek 2-chlorobenzoilu (2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 74%.

ESI-MS dla C49H74CINO11 (m/z): [M+Na]⁺ 911,0, [M-H]' 886,0.

Ή NMR (700 MHz, CD2CI2) δ 7,54 (dd, J = 7,5, 1,7 Hz, 1H), 7,39 (dd, J = 8,0, 1,1 Hz, 1H), 7,35-7,28 (m, 3H), 6,23 (dd, J= 10,8, 3,2 Hz, 1H), 5,87 (dd, J= 10,8, 1,8 Hz, 1H), 5,07 (ddd, J= 9,6, 2,9, 1,9 Hz, 1H), 4,20 - 4,11 (m, 2H), 3,87 - 3,77 (m, 1H), 3,67 - 3,62 (m, 2H), 3,49 (dd, J = 12,2, 2,6 Hz, 1H), 2,76-2,72 (m, 3H), 2,37-2,27 (m, 1H), 2,12-0,62 (m, 55H) ppm.

¹³C NMR (176 MHz, CD2CI2) δ 218,6, 184,2, 167,5, 135,8, 130,9, 130,5, 129,8, 128,9, 128,2, 127,1, 123,5, 106,2, 99,5, 88,7, 76,5, 75,8, 75,6, 73,9, 71,1, 69,7, 68,0, 55,9, 50,2, 49,5, 47,7, 40,8, 38,7, 36,4, 35,8, 32,5, 32,3, 31,9, 28,0, 27,7, 27,5, 26,7, 23,3, 20,1, 19,9, 17,3, 15,6, 15,6, 14,3, 12,9, 12,2, 12,0, 10,5, 6,4, 6,2 ppm.

144

PL 248049 Β1

Przykład FLC-00463-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00445-1, przy czym zamiast chlorku 5-chloropentanoilu do mieszaniny reakcyjnej dodano chlorek cyklobutanokarbonylu (2,2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 78%.

ESI-MS dla C47H77NO11 (m/z): [M+Na]⁺ 855,0, [M-H]' 831,0,

Ή NMR (700 MHz, CDCI3) δ 6,96 (d, J= 9,6 Hz, 1H), 6,11 (dd, J = 10,9, 3,1 Hz, 1H), 5,70 (dd, J = 10,8, 1,8 Hz, 1H), 4,86 (ddd, J= 9,6, 2,9, 2,0 Hz, 1H), 4,30 (q, J= 6,7 Hz, 1H), 4,24 (dd, J = 10,4, 1,2 Hz, 1H), 3,94 (dd, J = 11,0, 4,8 Hz, 1H), 3,66 (dd, J = 10,2, 2,1 Hz, 1H), 3,55 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 3,37 (dd, J = 12,2, 2,3 Hz, 1H), 3,24 (p, J= 8,3 Hz, 1H), 2,88 (td, J = 10,8, 3,3 Hz, 1H), 2,72-2,62 (m, 2H), 2,32-0,67 (m, 63H) ppm.

¹³C NMR (176 MHz, CDCI3) δ 217,6, 184,9, 175,8, 128,2, 123,1, 106,3, 98,9, 88,3, 76,5, 75,8, 75,7, 74,7, 71,4, 69,8, 68,2, 67,1, 55,7, 51,3, 49,2, 46,3, 40,6, 39,8, 38,7, 37,0, 35,9, 32,4, 32,2, 29,0, 27,9, 27,8, 26,7, 25,3, 25,0, 24,1, 20,0, 19,8, 18,4, 17,5, 15,9, 15,4, 14,6, 13,1, 12,2, 12,1, 10,7, 6,6, 6,5 ppm.

Przykład FLC-00464-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00445-1, przy czym zamiast chlorku 5-chloropentanoilu do mieszaniny reakcyjnej dodano chlorek cykloheksanokarbonylu (2,2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 79%.

ESI-MS dla C49H81NO11 (m/z): [M+Na]⁺ 883,1, [M-H]' 859,1.

Ή NMR (700 MHz, CDCI3) δ 6,65 (d, J = 9,9 Hz, 1H), 6,13 (dd, J = 10,9, 3,1 Hz, 1H), 5,78 (dd, J = 10,8, 1,8 Hz, 1H), 4,88 (ddd, J = 9,9, 3,0, 1,9 Hz, 1H), 4,33 (t, J = 6,7 Hz, 1H), 4,23 (dd, J = 10,4, 1,0 Hz, 1H), 3,96 (dd, J= 11,0, 4,8 Hz, 1H), 3,69-3,67 (m, 1H), 3,57 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 3,43 (dd, J = 12,2, 2,7 Hz, 1H), 2,91 -2,86 (m, 1H), 2,71 -2,64 (m, 2H), 2,41 (tt, J = 11,5, 3,3 Hz, 1H), 2,12-0,67 (m, 67H) ppm.

¹³C NMR (176 MHz, CDCI3) δ 217,8, 184,8, 177,3, 128,8, 122,8, 106,2, 99,2, 88,5, 76,3, 75,6, 75,5, 74,2, 71,4, 69,8, 68,0, 67,1, 55,8, 50,9, 49,8, 46,1, 44,6, 40,7, 38,8, 36,4, 35,9, 32,4, 32,2, 29,8, 29,1, 28,0, 27,9, 27,8, 26,8, 25,8, 25,4, 25,3, 23,9, 20,0, 19,9, 17,5, 15,8, 15,6, 14,5, 13,2, 12,7, 12,0, 10,7, 6,6 ppm.

PL 248049 Β1

145

Przykład FLC-00469-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00445-1, przy czym zamiast chlorku 5-chloropentanoilu do mieszaniny reakcyjnej dodano chlorek 4-chlorobenzoilu (2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 85%.

ESI-MS dla C49H74CINO11 (m/z): [M+Na]⁺ 910,9, [M-H]' 887,0.

Ή NMR (700 MHz, CD2CI2) δ 8,16 - 8,04 (m, 2H), 7,46 (d, J = 9,4 Hz, 1H), 7,43 - 7,38 (m, 2H), 6,22 (dd, J = 10,8, 3,2 Hz, 1H), 5,81 (dd, J= 10,8, 1,8 Hz, 1H), 5,14-5,10 (m, 1H), 4,25 (q, J= 6,7 Hz, 1H), 4,18 (dd, J = 10,5, 1,7 Hz, 1H), 3,98 (dd, J= 11,0, 5,9 Hz, 1H), 3,71 -3,69 (m, 1H), 3,67 - 3,64 (m, 1H), 3,49 (dd, J= 12,2, 2,6 Hz, 1H), 2,82 - 2,73 (m, 3H), 2,23 - 0,72 (m, 56H) ppm.

¹³C NMR (176 MHz, CD2CI2) δ 219,3, 185,2, 166,4, 138,0, 132,3, 130,3, 129,2, 128,8, 123,8, 107,0, 100,1,89,3, 77,3, 76,6, 76,4, 74,0, 71,6, 70,6, 69,0, 56,6, 50,6, 49,6, 48,5, 41,3, 39,3, 37,1,36,2, 33,1, 32,7, 32,6, 28,7, 28,3, 27,4, 27,3, 23,6, 20,6, 20,4, 17,9, 16,2, 16,0, 14,7, 13,5, 12,8, 12,7, 11,3, 7,1, 7,0 ppm.

Przykład FLC-00470-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00445-1, przy czym zamiast chlorku 5-chloropentanoilu do mieszaniny reakcyjnej dodano chlorek 4-fluorobenzoilu (2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 72%.

ESI-MS dla C49H74FNO11 (m/z): [M+Na]⁺ 895,0, [M-H]' 871,0.

Ή NMR (700 MHz, CD2CI2) δ 8,23 - 8,12 (m, 2H), 7,37 (d, J = 9,5 Hz, 1H), 7,15 - 7,08 (m, 2H), 6,23 - 6,20 (m, 1H), 5,81 (dd, J = 10,8, 1,8 Hz, 1H), 5,13 (ddd, J = 9,5, 3,1, 1,8 Hz, 1H), 4,25 (q, J = 6,7 Hz, 1H), 4,18 (dd, J = 10,5, 1,7 Hz, 1H), 3,98 (dd, J= 11,0, 5,9 Hz, 1H), 3,72-3,63 (m, 2H), 3,49 (dd, J = 12,2, 2,6 Hz, 1H), 2,80 - 2,73 (m, 3H), 2,25 - 0,73 (m, 56H) ppm.

¹³C NMR (176 MHz, CD2CI2) δ 218,7, 184,6, 165,7, 165,5, 164,1, 130,7, 130,7, 129,4, 129,4, 128,2, 123,2, 115,3, 115,2, 106,5, 99,5, 88,7, 76,8, 76,0, 75,8, 73,5, 71,0, 70,0, 68,4, 56,0, 50,1, 49,1, 47,8, 40,7, 38,7, 36,5, 35,7, 32,5, 32,1, 32,1, 28,1, 27,7, 26,8, 26,7, 23,1, 20,0, 19,8, 17,4, 15,6, 15,4, 14,2, 12,9, 12,2, 12,1, 10,7, 6,5, 6,4 ppm.

146

PL 248049 Β1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00445-1, przy czym zamiast chlorku 5-chloropentanoilu do mieszaniny reakcyjnej dodano chlorek cyklopropanokarbonylu (2,2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 68%.

ESI-MS dla C46H75NO11 (m/z): [M+Na]⁺ 841,2, [M-H]' 817,0,

Ή NMR (700 MHz, CDCI3) δ 6,13 (dd, J = 10,9,3,1 Hz, 1H), 5,78 (dd, J= 10,8, 1,9 Hz, 1H), 4,88 (ddd, J= 9,8, 2,9, 2,0 Hz, 1H), 4,29 (q, J= 6,7 Hz, 1H), 4,23 (dd, 10,4, 1,4 Hz, 1H), 3,94 (dd, J= 11,0, 4,8 Hz, 1H), 3,70-3,67 (m, 1H), 3,60 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 3,42 (dd, J= 12,2, 2,4 Hz, 1H), 2,88 (td, J = 10,9, 3,3 Hz, 1H), 2,73 - 2,64 (m, 2H), 2,24 - 0,60 (m, 63H) ppm.

¹³C NMR (176 MHz, CDCI3) δ 217,9, 184,8, 174,4, 128,3, 122,9, 106,4, 98,9, 88,5, 76,4, 75,8, 75,7, 74,4, 71,3, 69,9, 68,2, 67,1, 55,9, 51,0, 49,3, 46,5, 40,5, 38,7, 37,1, 35,8, 32,4, 32,4, 32,2, 28,9, 28,0, 27,5, 26,8, 23,8, 19,9, 19,9, 17,5, 15,9, 15,4, 14,6, 14,5, 13,1, 12,1, 12,1, 10,8, 7,2, 7,1, 6,7, 6,4 ppm.

Przykład FLC-00473-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00445-1, przy czym zamiast chlorku 5-chloropentanoilu do mieszaniny reakcyjnej dodano chlorek 3-chloropiwaloilu (2,2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 66%.

ESI-MS dla C47H78CINO11 (m/z): [M+Na]⁺ 891,2, [M-H]' 867,0.

Ή NMR (700 MHz, CD2CI2) δ 6,69 (d, J = 9,5 Hz, 1H), 6,18 (dd, J = 10,8, 3,2 Hz, 1H), 5,70 (dd, J = 10,8, 1,7 Hz, 1H), 4,88 (ddd, J = 9,5, 3,0, 1,8 Hz, 1H), 4,29 (q, J= 6,6 Hz, 1H), 4,21 -4,19 (m, 1H), 3,89 (dd, J= 11,0, 4,8 Hz, 1H), 3,67-3,64 (m, 2H), 3,61 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 3,47 (dd, J = 12,1, 2,3 Hz, 1H), 2,87 - 2,83 (m, 1H), 2,75 (ddd, J= 12,1, 7,6, 4,5 Hz, 2H), 2,17 - 0,69 (m, 64H) ppm.

¹³C NMR (176 MHz, CD2CI2) δ 218,2, 184,3, 175,3, 128,5, 123,4, 106,3, 99,6, 88,5, 76,4, 76,0, 75,7, 74,1, 71,1, 70,0, 68,1, 67,1, 55,7, 50,3, 49,1, 47,6, 44,4, 40,8, 38,7, 35,9, 35,8, 32,5, 32,2, 32,1, 29,7, 28,7, 28,0, 27,5, 26,7, 23,6, 23,4, 23,1, 20,4, 20,0, 17,2, 15,5, 15,5, 14,4, 12,9, 12,5, 12,1, 10,6, 6,4, 6,2 ppm.

PL 248049 Β1

147

Przykład FLC-00486-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00445-1, przy czym zamiast chlorku 5-chloropentanoilu do mieszaniny reakcyjnej dodano chlorek 4-trifluorometoksybenzoilu (2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 81%.

ESI-MS dla C50H74F3NO12 (m/z): [M+Na]⁺ 960,9, [M-H]' 937,0.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 8,19 (d, J= 8,8 Hz, 2H), 7,42 (d, J= 9,5 Hz, 1H), 7,24 (d, J= 8,1 Hz, 2H), 6,18 (dd, J = 10,8, 3,1 Hz, 1H), 5,75 (dd, J = 10,8, 1,6 Hz, 1H), 5,13 - 5,03 (m, 1H), 4,21 (q, J 6,8 Hz, 1H), 4,14 (dd, J = 10,5, 1,1 Hz, 1H), 3,93 (dd, J= 11,0, 5,5 Hz, 1H), 3,65 (s, 1H), 3,60 (d, J 10,2 Hz, 1H), 3,44 (dd, J= 12,2, 2,3 Hz, 1H), 2,78-2,67 (m, 3H), 2,17-0,69 (m, 56H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 218,7, 184,7, 165,5, 151,4, 131,7, 130,3, 128,0, 123,3, 121,4, 120,5, 106,4, 99,4, 88,7, 76,8, 76,0, 75,6, 73,5, 70,9, 69,9, 68,5, 56,0, 49,9, 49,0, 47,7, 40,7, 38,7, 36,57, 35,7, 32,4, 32,1, 32,1, 28,0, 27,6, 26,9, 26,6, 23,0, 20,0, 19,7, 17,3, 15,6, 15,3, 14,2, 12,9, 12,1, 12,0, 10,6, 6,5, 6,3 ppm.

Przykład FLC-00487-1

II II

100 mg C20-amino SAL (1 eq) zmieszano z kwasem izonikotynowym (1,2 eq), EDCI (1,2 eq), TEA (3 eq) i DMAP (0,1 eq) w DCM. Reakcję prowadzono w RT (kontrola TLC i LC-MS). Mieszaninę poreakcyjną zawieszono na silikażelu i oczyszczono przy użyciu chromatografu z detektorem ELS, stosując kolumnę wypełnioną krzemionką. Odpowiednie frakcje połączono i zatężono, pozostałość rozpuszczono w DCM i przemyto dwukrotnie 0,25 M Na2CO3. Produkt uzyskano z wydajnością 24%.

ESI-MS dla C48H74N2O11 (m/z): [M+Na]⁺ 878,0, [M-H]' 854,0.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 8,66 (s, 2H), 7,96 (d, J= 3,7 Hz, 2H), 7,65 (d, J= 8,7 Hz, 1H), 6,19 (dd, J = 10,8, 2,9 Hz, 1H), 5,76 (d, J = 10,7 Hz, 1H), 5,09 (d, J= 9,1 Hz, 1H), 4,24-4,07 (m, 2H), 3,93 (dd, J = 10,5, 5,4 Hz, 1H), 3,69 - 3,53 (m, 2H), 3,44 (d, J = 10,5 Hz, 1H), 2,73 (ddd, J = 26,1, 15,0, 8,7 Hz, 3H), 2,16 - 0,67 (m, 56H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 218,7, 184,7, 165,3, 150,5, 140,0, 127,6, 123,5, 121,7, 106,3, 99,4, 88,8, 76,8, 76,1, 75,6, 73,5, 71,0, 70,1, 68,5, 56,0, 49,9, 49,0, 47,9, 40,7, 38,6, 36,6, 35,6, 32,4, 32,1, 32,0, 29,7, 28,1, 27,7, 26,8, 26,6, 23,1, 20,0, 19,8, 17,3, 15,6, 15,3, 14,2, 12,9, 12,2, 12,1, 10,7, 6,5, 6,4 ppm.

148

PL 248049 Β1

Przykład FLC-00493-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00487-1, przy czym zamiast kwasu izonikotynowego do mieszaniny reakcyjnej dodano kwas 2,2-dichlorooctowy (1,2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 64%.

ESI-MS dla C44H71CI2NO11 (m/z): [M+Na]⁺ 882,8, [M-H]' 858,9.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 7,83 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 6,36 (s, 1H), 6,16 (dd, J = 10,8, 2,9 Hz, 1H), 5,64 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 4,78 (d, J= 9,2 Hz, 1H), 4,25-4,20 (m, 1H), 4,13 (d, J = 10,4 Hz, 1H), 3,83 (dd, J = 10,5, 3,7 Hz, 1H), 3,61 -3,55 (m, 2H), 3,44 (dd, J= 12,1, 2,1 Hz, 1H), 2,84 (td, J= 10,6, 3,0 Hz, 1H), 2,75-2,64 (m, 2H), 2,04-0,68 (m, 56H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 218,6, 185,1, 164,6, 126,3, 124,1, 105,7, 98,9, 88,8, 76,3, 76,1, 75,7, 74,1, 71,1, 70,3, 68,4, 67,1, 55,9, 50,3, 48,8, 47,5, 40,5, 38,5, 37,3, 35,7, 32,4, 32,2, 32,0, 27,9, 27,7, 27,4, 26,5, 23,8, 20,1, 19,9, 17,2, 15,6, 15,2, 14,3, 12,8, 12,3, 12,1, 10,6, 6,3, 6,1 ppm.

Przykład FLC-00494-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00487-1, przy czym zamiast kwasu izonikotynowego do mieszaniny reakcyjnej dodano kwas 4,4,4-trifluorobutanowy (1,2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 49%.

ESI-MS dla C46H74F3NO11 (m/z): [M+Na]⁺ 897,1, [M-H]' 873,0.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 7,21 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 6,13 (dd, J = 10,8, 2,9 Hz, 1H), 5,62 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 4,81 (d, J = 9,4 Hz, 1H), 4,22 (d, J=6,8Hz, 1H), 4,13 (d, J = 10,4 Hz, 1H), 3,82 (dd, J = 10,8, 4,0 Hz, 1H), 3,58 (dd, J = 15,3, 5,7 Hz, 2H), 3,42 (dd, J = 12,0, 2,0 Hz, 1H), 2,80 (d, J = 10,0 Hz, 2H), 2,75 - 2,66 (m, 2H), 2,45 - 2,37 (m, 3H), 2,03 - 0,67 (m, 56H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 218,5, 184,8, 170,2, 128,3, 127,5, 123,6, 106,1, 98,8, 88,5, 76,5, 75,9, 75,6, 74,4, 71,2, 69,9, 68,1, 55,8, 50,7, 49,0, 46,4, 40,5, 38,5, 37,1, 35,8, 32,4, 32,3, 32,1, 29,1, 28,9, 28,3, 28,0, 27,9, 27,6, 26,6, 23,9, 19,8, 17,2, 15,6, 15,3, 14,4, 12,8, 12,3, 12,1, 10,5, 6,3, 6,1 ppm.

PL 248049 Β1

149

Przykład FLC-00501-1

100 mg C20-amino SAL (1 eq) w MeCN z 0,5 M Na2CO3, (5 eq) schłodzono w łaźni lód/woda i wkroplono bromek 2-bromoacetylu (5 eq) rozcieńczony MeCN. Po zakończeniu wkraplania reakcję prowadzono w RT (kontrola TLC i LC-MS). Mieszaninę poreakcyjną rozcieńczono H2O i ekstrahowano dwukrotnie DCM. Warstwy organiczne połączono, zawieszono na silikażelu i oczyszczono przy użyciu chromatografu z detektorem ELS, stosując kolumnę wypełnioną krzemionką. Odpowiednie frakcje połączono i zatężono, pozostałość rozpuszczono w DCM i przemyto dwukrotnie 0,25 M Na2CO3. Produkt uzyskano z wydajnością 78%.

ESI-MS dla C₄₄H72BrNOn (m/z): [M+Na]⁺ 892,8, [M-H]' 868,7.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 7,57 (d, J = 9,4 Hz, 1H), 6,13 (dd, J = 10,8, 3,0 Hz, 1H), 5,62 (dd, 7 = 10,8, 1,7 Hz, 1H), 4,83-4,74 (m, 1H), 4,38 (s, 1H), 4,23 (q, 7= 6,6 Hz, 1H), 4,11 (d, 7= 10,4 Hz, 1H), 4,02 (d, 7= 11,7 Hz, 1H), 3,87-3,79 (m, 2H), 3,64-3,55 (m, 2H), 3,42 (dd, 7= 12,1,2,2 Hz, 1H), 2,82 (td, 7= 10,6, 3,4 Hz, 1H), 2,74-2,65 (m, 2H), 2,09-0,67 (m, 55H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 218,6, 184,8, 166,6, 126,9, 123,7, 105,9, 98,8, 88,6, 76,2, 76,0, 75,7, 74,2, 71,1, 70,1, 68,2, 55,8, 50,5, 48,9, 47,1, 40,5, 38,5, 37,4, 35,8, 32,4, 32,3, 32,1, 30,0, 28,4, 27,9, 27,4, 26,6, 23,8, 20,0, 19,9, 17,2, 15,7, 15,3, 14,4, 12,8, 12,4, 12,1, 10,6, 6,4, 6,1 ppm.

Przykład FLC-00528-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00445-1, przy czym zamiast chlorku 5-chloropentanoilu do mieszaniny reakcyjnej dodano chlorek dekanoilu (3 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 57%.

ESI-MS dla C52H89NO11 (m/z): [M+Na]⁺ 927.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 6,90 (d, 7= 9,7 Hz, 1H), 6,11 (dd, 7= 10,8, 3,1 Hz, 1H), 5,60 (dd, 7 = 10,8, 1,8 Hz, 1H), 4,79 (ddd, 7 = 9,7, 2,9, 2,0 Hz, 1H), 4,53 (d, 7 = 3,6 Hz, 1H), 4,22 (dd, 7 = 13,6, 6,8 Hz, 1H), 4,12 (d, 7= 10,0 Hz, 1H), 3,81 (dd, 7= 11,0, 4,6 Hz, 1H), 3,59 (dd, 7= 14,6, 6,3 Hz, 2H), 3,41 (dd,7 = 12,1,2,3 Hz, 1H), 2,84-2,75 (m, 1H), 2,73-2,64 (m,2H), 2,32 (ddd, 7= 15,3, 9,4, 6,0 Hz, 1H), 2,20-0,62 (m, 74H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 218,9, 184,9, 173,7, 128,4, 123,5, 106,6, 99,3, 88,7, 76,8, 76,2, 76,1, 74,7, 71,5, 70,1, 68,4, 56,2, 51,1, 49,4, 46,5, 40,9, 38,9, 37,2, 36,3, 36,2, 32,8, 32,7, 32,5, 32,3, 29,9, 29,9, 29,7, 29,6, 29,0, 28,3, 27,8, 27,0, 25,7, 24,2, 23,0, 20,3, 20,2, 17,6, 16,0, 15,7, 14,8, 14,2, 13,2, 13,0, 12,4, 10,8, 6,7, 6,6 ppm.

150

PL 248049 Β1

Przykład FLC-00534-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00445-1, przy czym zamiast chlorku 5-chloropentanoilu do mieszaniny reakcyjnej dodano chlorek kwasu 3,3-dimetylobutanowego (1,5 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 82%.

ESI-MS dla C₄₈H₈iNOn (m/z): [M+H]⁺ 848,9, [M+Na]⁺ 870,9, [M-H]' 847,0.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 6,65 (d, J = 9,7 Hz, 1H), 6,10 (dd, J = 10,8, 3,1 Hz, 1H), 5,62 (dd, J = 10,8, 1,6 Hz, 1H), 4,96 (s, 1H), 4,86-4,75 (m, 1H),4,62 (d, J=4,3Hz, 1H), 4,25 (d, J=6,8Hz, 1H), 4,13 (dd, J = 10,4, 3,3 Hz, 1H), 3,81 (dd, J= 11,0, 4,7 Hz, 1H), 3,67-3,51 (m, 2H), 3,42 (dd, J= 12,2, 2,3 Hz, 1H), 2,80 (td, J= 10,6, 3,5 Hz, 1H), 2,70 (dd, J= 10,1, 7,6 Hz, 2H), 2,29-0,46 (m, 65H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 218,4, 184,5, 172,1, 128,4, 123,1, 106,2, 99,1, 88,4, 76,3, 75,7, 75,7, 74,3, 71,1, 69,9, 67,9, 55,8, 50,7, 49,3, 48,2, 46,0, 40,6, 38,6, 36,6, 35,9, 32,4, 32,3, 32,2, 30,4, 29,4, 29,3, 28,4, 27,9, 27,9, 27,7, 26,7, 24,0, 19,9, 19,9, 17,2, 15,6, 15,4, 14,4, 13,1, 12,8, 12,0, 10,4, 6,3, 6,2 ppm.

Przykład FLC-00550-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00445-1, przy czym zamiast chlorku 5-chloropentanoilu do mieszaniny reakcyjnej dodano chlorek piwaloilu (1,5 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 50%.

ESI-MS dla C47H79NO11 (m/z): [M+H]⁺ 834,9, [M+Na]⁺ 856,8, [M-H]' 832,9.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 6,48 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 6,13 (dd, J = 10,7, 2,9 Hz, 1H), 5,65 (d, J = 10,7 Hz, 1H), 4,79 (d, J= 9,3 Hz, 2H), 4,30-4,20 (m, 1H), 4,15 (d, J = 10,4 Hz, 1H), 3,83 (dd, J = 10,9,4,2 Hz, 1H), 3,59 (dd, J = 25,5, 10,1 Hz, 2H), 3,41 (d, J = 11,1 Hz, 1H), 2,85 - 2,74 (m, 1H), 2,68 (dd, J = 12,3, 6,1 Hz, 2H), 2,10 - 0,61 (m, 64H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 218,1, 184,3, 178,8, 128,7, 123,3, 106,5, 99,6, 88,3, 76,3, 75,8, 75,7, 74,2, 71,1, 69,8, 67,8, 55,6, 50,4, 49,2, 47,2, 40,8, 38,7, 38,6, 35,8, 32,4, 32,2, 32,1, 28,9, 27,9, 27,5, 27,4, 26,7, 23,6, 20,2, 19,9, 17,2, 15,5, 15,4, 14,4, 12,9, 12,6, 12,0, 10,5, 6,4, 6,2 ppm.

PL 248049 Β1

151

Przykład FLC-00569-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00445-1, przy czym zamiast chlorku 5-chloropentanoilu do mieszaniny reakcyjnej dodano chlorek 3-metoksybenzoilu (1,5 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 72%.

ESI-MS dla C50H77NO12 (m/z): [M+Na]⁺ 906,8, [M-H]' 882,8.

Ή NMR (500 MHz, CDCI3) δ 7,82 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 7,59 - 7,47 (m, 1H), 7,27 (dt, J = 9,6, 7,4 Hz, 2H), 6,98 (dd, J = 8,2, 2,5 Hz, 1H), 6,17 (dd, J = 10,8, 3,1 Hz, 1H), 5,86 (dd, J= 10,8, 1,5 Hz, 1H), 5,14 (dd, J = 7,1, 1,8 Hz, 2H), 4,72 (s, 1H), 4,24 (dd, J = 13,5, 8,5 Hz, 2H), 3,99 (dd, J = 11,0, 5,5 Hz, 1H), 3,82 (s, 3H), 3,68-3,55 (m, 2H), 3,39 (dd, J= 12,1, 2,2 Hz, 1H), 2,78 (td, J= 10,8, 3,2 Hz, 1H), 2,74 - 2,60 (m, 2H), 2,23 - 0,58 (m, 54H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CDCI3) δ 217,7, 184,8, 167,3, 159,5, 134,2, 129,9, 128,4, 123,2, 120,4, 118,4, 112,3, 106,5, 99,5, 88,7, 75,7, 75,5, 73,8, 71,2, 69,8, 68,2, 55,8, 55,4, 50,4, 49,5, 47,6, 40,8, 38,8, 36,2, 35,8, 32,4, 32,3, 32,2, 28,0, 27,9, 27,5, 26,8, 23,4, 19,9, 19,8, 17,6, 15,8, 15,6, 14,4, 13,2, 12,2, 12,1, 10,8, 6,7 ppm.

Przykład FLC-00573-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00445-1, przy czym zamiast chlorku 5-chloropentanoilu do mieszaniny reakcyjnej dodano chlorek 3,4,5-trimetoksybenzoilu (1,5 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 72%.

ESI-MS dla C52H81NO14 (m/z): [M+H]⁺ 944,8, [M+Na]⁺ 966,8, [M-H]' 942,9.

Ή NMR (500 MHz, CDCI3) δ 7,69 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 7,19 (s, 2H), 6,14 (dd, J = 10,8, 3,1 Hz,

1H), 5,86 (dd, J = 10,7, 1,4 Hz, 1H), 5,09 (d, J= 9,0 Hz, 1H), 4,24 (dd, J= 22,7, 8,6 Hz, 2H), 3,94 (dd,

J= 11,0, 5,2 Hz, 1H), 3,91 (s, 6H), 3,84 (s, 3H), 3,72-3,67 (m, 1H), 3,60 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 3,42 (dd,

J = 12,1, 2,2 Hz, 1H), 2,81 -2,61 (m, 3H), 2,31 -0,61 (m, 56H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CDCI3) δ 218,0, 183,9, 167,7, 153,1, 141,0, 129,5, 129,2, 122,7, 106,7, 105,2, 99,8, 88,3, 76,4, 76,0, 75,8, 73,5, 71,2, 70,4, 68,1, 60,8, 56,7, 55,6, 50,9, 49,5, 49,0, 40,9, 38,7, 35,8, 35,8, 32,4, 32,3, 31,9, 28,3, 28,1, 26,9, 26,7, 23,3, 19,8, 17,8, 15,8, 15,7, 14,3, 13,3, 12,4, 12,2, 10,9, 6,8, 6,5 ppm.

152

PL 248049 Β1

Przykład FLC-00578-1

NH CF₃

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00445-1, przy czym zamiast chlorku 5-chloropentanoilu do mieszaniny reakcyjnej dodano chlorek 2-trifluorometylobenzoilu (1,5 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 75%.

ESI-MS dla C5oH74F₃NOii‘(m/z): [M+Na]⁺ 944,7, [M-H]' 920,8.

Ή NMR (500 MHz, CDCI₃) δ 7,78 (d, J= 7,5 Hz, 1H), 7,64 (d, J= 7,7 Hz, 1H), 7,45 (ddd, J= 25,6, 16,4, 8,4 Hz, 3H), 6,16 (dd, J = 10,8, 3,1 Hz, 1H), 5,85 (dd, J = 10,8, 1,1 Hz, 1H), 5,08 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 4,65 (s, 2H), 4,18 (dd, J = 12,1, 8,9 Hz, 2H), 3,88 (dd, J = 11,0, 4,8 Hz, 1H), 3,65-3,52 (m, 2H), 3,42 (dd, J = 12,0, 2,0 Hz, 1H), 2,69 (ddd, J = 28,0, 15,0, 5,2 Hz, 3H), 2,29-0,35 (m, 55H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CDCI3) δ 217,8, 184,7, 168,7, 134,9, 132,3, 129,6, 129,1, 128,2, 126,5, 123,4, 106,2, 99,4, 88,8, 76,4, 75,6, 75,3, 73,9, 71,2, 69,8, 68,0, 55,8, 50,2, 49,7, 47,8, 40,8, 38,8, 36,4, 35,8, 32,4, 32,3, 32,0, 27,9, 27,7, 26,8, 23,3, 20,0, 19,8, 17,5, 15,8, 15,7, 14,5, 13,2, 12,0, 10,7, 6,6, 6,5 ppm.

Przykład FLC-00579-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00445-1, przy czym zamiast chlorku 5-chloropentanoilu do mieszaniny reakcyjnej dodano chlorek 3-trifluorometylobenzoilu (1,5 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 70%.

ESI-MS dla C5oH74F₃NOn‘(m/z): [M+Na]⁺ 944,8, [M-H]' 920,8.

Ή NMR (500 MHz, CDCI3) δ 8,46 (d, J= 7,8 Hz, 1H), 8,28 (s, 1H), 7,67 (d, J= 7,6 Hz, 1H), 7,52 (dd, J = 15,9, 8,6 Hz, 2H), 6,18 (dd, J = 10,8, 3,0 Hz, 1H), 5,84 (dd, J = 10,8, 1,5 Hz, 1H), 5,16 (d, J = 9,1 Hz, 1H), 4,25 (dd, J=18,3, 8,8 Hz, 2H), 4,01 (dd, J= 11,0, 5,7 Hz, 1H), 3,64-3,55 (m, 2Η), 3,40 (dd, J = 12,1, 2,0 Hz, 1H), 2,79 (t, J = 8,6 Hz, 1H), 2,72-2,64 (m, 2H), 2,21 -0,62 (m, 56H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CDCI3) δ 217,8, 185,0, 166,2, 133,8, 131,2, 129,5, 127,9, 127,8, 125,7, 123,4, 106,3, 99,5, 88,7, 76,6, 75,9, 75,3, 73,8, 71,2, 70,0, 68,4, 55,8, 50,1,49,3, 47,6, 40,7, 38,8, 36,4, 35,7, 32,4, 32,2, 32,2, 28,0, 27,6, 26,7, 23,3, 19,9, 19,8, 17,6, 15,8, 15,5, 14,4, 13,2, 12,2, 12,1, 10,8, 6,7 ppm.

PL 248049 Β1

153

Przykład FLC-00373-1

100 mg C20-amino SAL (1 eq) rozpuszczono w DCM, dodano DIPEA (1 eq) i chlorooksooctanu etylu (1 eq). Reakcje prowadzono w temperaturze 0°C przez 30 minut (kontrola TLC i LC-MS). Następnie mieszaninę poreakcyjną zawieszono na silikażelu i oczyszczono przy użyciu chromatografu z detektorem ELS, stosując kolumnę wypełnioną krzemionką. Odpowiednie frakcje połączono i zatężono, pozostałość rozpuszczono w DCM i przemyto dwukrotnie 0,06 M H2SO4. Produkt uzyskano z wydajnością 40%.

ESI-MS dla C46H75NO13 (m/z): [M+Na]⁺ 873, [M-H]' 849.

Ή NMR (500 MHz, CDCI3) δ 8,09 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 6,17 (d, J = 10,3 Hz, 1H), 5,81 (d, J = 10,6 Hz, 1H), 4,52 (d, J= 7,4 Hz, 1H), 4,31 (dd, J = 13,9, 6,8 Hz, 2H), 4,16 (d, J= 9,7 Hz, 1H), 4,04 - 3,96 (m, 1H), 3,90 (t, J = 13,4 Hz, 2H), 3,63 (d, J = 9,4 Hz, 1H), 2,88 (d, J= 3,5 Hz, 1H), 2,76 (s, 1H), 2,61 (d, J = 10,3 Hz, 1H), 2,27-0,62 (m, 60H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CDCI3) δ 215,6, 177,6, 160,5, 157,5, 128,0, 123,6, 104,9, 99,6, 89,2, 75,8, 74,8, 72,8, 71,8, 71,1, 68,6, 62,9, 56,2, 49,8, 48,8, 41,1, 38,6, 36,7, 36,4, 32,7, 30,5, 30,2, 29,1, 28,0, 26,3, 25,9, 22,7, 22,3, 20,0, 17,9, 16,6, 15,8, 14,4, 14,0, 13,3, 13,0, 11,9, 11,1, 6,8, 6,4 ppm.

Przykład FLC-00376-1

100 mg FLC-00373-1 (1 eq) zmieszano z NHs/MeOH (nadmiar) w DCM. Reakcję prowadzono w RT (kontrola TLC i LC-MS). Następnie mieszaninę poreakcyjną zawieszono na silikażelu i oczyszczono przy użyciu chromatografu z detektorem ELS, stosując kolumnę wypełnioną krzemionką. Odpowiednie frakcje połączono i zatężono, pozostałość rozpuszczono w DCM i przemyto dwukrotnie 0,5 M Na2CO3. Produkt uzyskano z wydajnością 55%.

ESI-MS dla C44H72N2O12 (m/z): [M+Na]⁺ 843,8, [M-H]' 819,8.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 8,27 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 7,40 (s, 1H), 6,86 - 6,68 (m, 1H), 6,18 (dd, J = 10,8, 3,0 Hz, 1H), 5,73 (dd, J= 10,8, 1,3 Hz, 1H), 5,46-5,32 (m, 1H),4,64 (d, J=9,9Hz, 1H), 4,14 (d, J = 6,9 Hz, 1H), 4,08 (d, J = 10,2 Hz, 1H), 3,90 (dd, J = 10,7, 4,8 Hz, 1H), 3,68 (t, J = 9,2 Hz, 2H), 3,46 (dd, J = 12,2, 1,8 Hz, 1H), 2,86-2,63 (m, 6H), 2,26-0,50 (m, 52H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 219,0, 183,7, 161,3, 160,2, 127,5, 123,3, 106,0, 99,7, 88,6, 76,9, 76,4, 75,9, 73,2, 71,0, 70,3, 68,3, 55,9, 50,8, 49,2, 49,1, 40,7, 38,6, 36,7, 35,6, 32,5, 32,3, 31,8, 28,2, 26,8, 25,6, 22,8, 20,2, 19,9, 17,5, 15,6, 15,5, 14,0, 12,9, 12,2, 12,1, 10,9, 6,7, 6,4 ppm.

154

PL 248049 Β1

Przykład FLC-00392-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00376-1, przy czym zamiast NHs/MeOH do mieszaniny reakcyjnej dodano 1-(3-aminopropylo)imidazol (nadmiar). Produkt otrzymano z wydajnością 66%.

ESI-MS dla C50H80N4O12 (m/z): [M+H]⁺ 930,1, [M-H]' 928,1.

Ή NMR (500 MHz, CDCI3) δ 8,38 (d, J= 9,3 Hz, 1H), 7,74 (t, J = 6,2 Hz, 1H), 7,46 (s, 1H), 7,01 (s, 1H), 6,94 (s, 1H), 6,16 (dd, J = 10,8, 3,0 Hz, 1H), 5,84(dd, J= 10,8, 1,5 Hz, 1H), 5,25 (d, J= 23,0 Hz, 1H), 4,56-4,48 (m, 1H), 4,28 (d, J= 6,8 Hz, 1H), 4,22 (d, J = 10,2 Hz, 1H), 3,99-3,90 (m, 3H), 3,70 (dd, J = 10,1, 1,6 Hz, 1H), 3,56 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 3,40 - 3,33 (m, 1H), 3,26 (ddt, J = 20,2, 13,7, 6,8 Hz, 3H), 2,87 - 2,78 (m, 1H), 2,65 (dd, J = 10,2, 7,6 Hz, 2H), 2,14 - 0,58 (m, 56H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CDCI3) δ 217,3, 184,0, 161,0, 159,8, 137,1, 129,5, 127,2, 123,2, 119,0, 116,5, 106,1,99,5, 88,7, 76,3, 75,9, 75,8, 74,0, 71,2, 70,1, 67,7, 55,4, 50,5, 49,6, 49,1,44,4, 40,7, 38,6, 36,7, 36,6, 35,8, 32,4, 32,3, 32,2, 31,2, 29,5, 28,1, 27,1, 26,8, 23,2, 20,1, 19,9, 17,6, 15,7, 14,5, 13,2, 12,3, 12,1, 10,9, 6,9, 6,6 ppm.

Przykład FLC-00423-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00376-1, przy czym zamiast NHs/MeOH do mieszaniny reakcyjnej dodano propyloaminę (nadmiar). Produkt otrzymano z wydajnością 85%.

ESI-MS dla C47H78N2O12 (m/z): [M+Na]⁺ 886, [M-H]' 862.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 8,15 (d, J = 9,9 Hz, 1H), 7,40 (s, 1H), 6,18 (dd, J = 10,8, 3,1 Hz, 1H), 5,74 (dd, J = 10,8, 1,6 Hz, 1H), 4,61 (ddd, J= 9,9, 2,8, 1,8 Hz, 1H), 4,18-3,98 (m, 2H), 3,91 (dd, J = 10,5, 4,9 Hz, 1H), 3,75 - 3,63 (m, 2H), 3,47 (dd, J = 12,4, 2,3 Hz, 1H), 3,22 (dt, J = 13,6, 7,0 Hz, 2H), 2,76 (dd, J = 10,5, 7,2 Hz, 1H), 2,67 (dt, J= 10,7, 5,3 Hz, 2H), 2,26-0,60 (m, 61H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 218,9, 183,2, 160,6, 159,0, 127,7, 123,1, 106,0,99,8, 88,6,77,0, 76,7, 75,9, 72,9, 70,9, 70,1, 68,3, 55,9, 50,9, 49,6, 49,2, 41,2, 40,7, 38,7, 36,7, 35,6, 32,5, 32,3, 31,9, 28,3, 28,0, 26,9, 25,2, 22,8, 22,6, 20,2, 19,9, 17,5, 15,5, 15,4, 13,9, 12,9, 12,2, 12,1, 11,1, 10,9, 6,7, 6,4 ppm.

PL 248049 Β1

155

Przykład FLC-00430-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00376-1, przy czym zamiast NHs/MeOH do mieszaniny reakcyjnej dodano N-acetyloetylenodiaminę (nadmiar). Produkt otrzymano z wydajnością 69%.

ESI-MŚ dla C48H79N3O13 (m/z): [M+Na]⁺ 929,0, [M-H]' 905,1.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 8,20 (d, J= 9,7 Hz, 1H), 8,07 (t, J = 5,3 Hz, 1H), 7,14 (s, 1H), 6,18 (dd, J = 10,8, 3,0 Hz, 1H), 5,73 (dd, J = 10,8, 1,4 Hz, 1H), 5,49-5,31 (m, 1H), 4,60 (d, J=9,4 Hz, 1H), 4,23 - 4,02 (m, 2H), 3,90 (dd, J = 10,4, 4,7 Hz, 1H), 3,69 (t, J = 9,7 Hz, 2H), 3,49 - 3,41 (m, 2H), 3,41 -3,34 (m, 2H), 3,27 (dd, J=7,9, 5,3 Hz, 1H), 2,81-2,64 (m, 4H), 2,28-0,48 (m, 57H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 218,8, 183,4, 171,1, 160,3, 159,9, 127,5, 123,1, 106,0,99,7,88,6, 76,8, 76,6, 76,0, 73,1, 71,2, 70,3, 68,3, 55,8, 51,0, 49,5, 49,1, 40,8, 40,7, 39,3, 38,6, 36,8, 35,5, 32,5, 32,3, 31,8, 28,4, 28,3, 26,8, 25,4, 22,8, 22,7, 20,4, 19,9, 17,5, 15,5, 15,4, 14,0, 12,9, 12,4, 12,1, 11,1, 6,8, 6,4 ppm.

Przykład FLC-00438-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00376-1, przy czym zamiast NHs/MeOH do mieszaniny reakcyjnej dodano etanoloaminę (nadmiar). Produkt otrzymano z wydajnością 81%.

ESI-MS dla C46H76N2O13 (m/z): [M+Na]⁺ 887,9, [M-H]' 863,9.

Ή NMR (500 MHz, CDCI3) δ 8,44 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,77 (s, 1H), 6,12 (dd, J = 10,8, 2,9 Hz, 1H), 5,83 (d, J = 10,9 Hz, 1H), 5,14 - 4,83 (m, 1H), 4,38 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 4,31 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 4,22 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 3,91 (dd, J = 10,7, 4,0 Hz, 1H), 3,72 (dd, J= 10,6, 5,8 Hz, 1H), 3,71 - 3,64 (m, 1H), 3,57 (dd, J= 11,3, 5,8 Hz, 1H), 3,49 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 3,38-3,27 (m, 3H), 3,03-2,92 (m, 1H), 2,79 (s, 1H), 2,66 - 2,54 (m, 2H), 2,19 - 0,45 (m, 55H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CDCI3) δ 215,0, 182,2, 159,2, 158,1, 125,2, 121,0, 104,2, 97,4, 86,6, 73,8, 73,8, 72,4, 68,8, 65,6, 58,8, 53,2, 47,8, 47,2, 41,1, 38,8, 36,6, 34,8, 33,6, 30,5, 30,4, 30,1, 28,1, 27,8, 26,5, 25,5, 24,9, 21,0, 18,1, 15,6, 14,0, 13,8, 12,7, 11,3, 10,3, 10,2, 5,2, 4,5 ppm.

156

PL 248049 Β1

Przykład FLC-00441-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00376-1, przy czym zamiast NHs/MeOH do mieszaniny reakcyjnej dodano cyklopropyloaminę (nadmiar). Produkt otrzymano z wydajnością 38%.

ESI-MS dla C47H76N2O12 (m/z): [M+Na]⁺ 884,0.

Ή NMR (500 MHz, CDCI3) δ 8,19 (d, J = 9,1 Hz, 1H), 7,76 (d, J=3,6Hz, 1H), 6,16 (dd, J= 10,8, 3,0 Hz, 1H), 5,90 (dd, J=10,8, 1,1 Hz, 1H), 5,87-5,73 (m, 1H), 5,52 (s, 1H), 4,40 (d,J = 9,0Hz, 1H), 4,30 (d, J= 6,8 Hz, 1H), 4,24 (d, J = 10,2 Hz, 1H), 3,96 (dd, J= 10,9, 4,7 Hz, 1H), 3,73 (dd, J= 10,1, 1,2 Hz, 1H), 3,58 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 3,37 (d, J = 10,6 Hz, 1H), 2,81 (td, J= 10,6, 3,2 Hz, 1H), 2,73 (dt, J= 11,1, 3,7 Hz, 1H), 2,69-2,59 (m, 2H), 2,05 (dd, J= 11,6, 4,9 Hz, 2H), 2,00-0,44 (m, 56H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CDCI3) δ 216,9, 183,5, 161,2, 160,8, 127,6, 122,8, 106,2, 99,7, 88,7, 76,2, 76,1, 75,7, 73,8, 71,2, 70,2, 67,5, 55,2, 50,7, 49,9, 49,6, 40,8, 38,7, 36,4, 35,9, 32,4, 32,3, 32,2, 29,3, 28,1, 27,0, 26,9, 23,3, 22,6, 20,1, 19,9, 17,6, 15,9, 15,7, 14,4, 13,3, 12,4, 12,1, 10,9, 6,9, 6,7, 6,2, 6,1 ppm.

Przykład FLC-00442-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00376-1, przy czym zamiast NHs/MeOH do mieszaniny reakcyjnej dodano cyklopropylometyloaminę (nadmiar). Produkt otrzymano z wydajnością 76%.

ESI-MŚ dla C48H78N2O12 (m/z): [M+Na]⁺ 898,1, [M-H]' 874,0.

Ή NMR (500 MHz, CDCI3) δ 8,29 (d, J=9,6 Hz, 1H), 7,51 (t, J = 5,7 Hz, 1H), 6,17 (dd, J= 10,8, 3,0 Hz, 1H), 5,84 (dd, J = 10,8, 1,3 Hz, 1H), 5,70 -5,37 (m, 1H), 4,57 (d, = 9,1 Hz, 1H), 4,23 (dd, J = 16,8, 8,8 Hz, 2H), 3,99 (dd, J= 10,8, 4,9 Hz, 1H), 3,73 (dd, J= 10,1, 1,4 Hz, 1H), 3,63 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 3,45 - 3,34 (m, 1H), 3,20 - 3,02 (m, 2H), 2,79 (td, J = 10,6, 3,4 Hz, 1H), 2,73 - 2,56 (m, 2H), 2,08 (dd, J = 11,4, 5,3 Hz, 2H), 2,03 - 0,11 (m, 58H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CDCI3) δ 217,6, 183,7, 161,2, 158,9, 127,7, 123,0, 106,1, 99,7, 88,6, 76,4, 76,2, 75,7, 73,7, 71,2, 70,0, 67,8, 55,5, 50,7, 49,7, 49,3, 44,4, 40,8, 38,7, 36,5, 35,8, 32,4, 32,3, 32,1, 29,1,28,1,26,9, 26,6, 23,2, 20,1, 19,9, 17,7, 15,8, 15,7, 14,4, 13,3, 12,3, 12,1, 11,0, 10,6, 6,9, 6,7, 3,6, 3,5 ppm.

PL 248049 Β1

157

Przykład FLC-00443-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00376-1, przy czym zamiast NHs/MeOH do mieszaniny reakcyjnej dodano metyloaminę (nadmiar). Produkt otrzymano z wydajnością 38%.

ESI-MS dla C45H74N2O12 (m/z): [M+Na]⁺ 858,0, [M-H]' 834,1.

Ή NMR (500 MHz, CDCI3) δ 8,07 (d, J=9,1 Hz, 1H), 7,75 (d, J = 4,9Hz, 1H), 6,15 (dd, J= 10,8, 3,0 Hz, 1H), 5,86 (dd, J = 10,8, 1,2 Hz, 1H), 5,52-5,19 (m, 1H), 4,51 (d, J= 8,9 Hz, 1H), 4,28 (q, J = 6,7 Hz, 1H), 4,22 (d, J = 10,2 Hz, 1H), 3,98 (dd, J= 10,9, 4,9 Hz, 1H), 3,71 (dd, J= 10,1, 1,3 Hz, 1H), 3,38 (d, J = 10,5 Hz, 1H), 2,83 - 2,76 (m, 4H), 2,71 - 2,61 (m, 2H), 2,11 - 0,57 (m, 56H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CDCI3) δ 217,3, 183,8, 161,4, 160,3, 127,6, 122,8, 106,2, 99,6, 88,7, 76,3, 76,0, 75,7, 73,8, 71,2, 70,1, 67,7, 55,4, 50,5, 49,8, 49,3, 40,8, 38,7, 36,5, 35,8, 32,4, 32,3, 32,1, 28,9, 28,1, 27,0, 26,9, 26,2, 23,2, 20,1, 19,9, 17,6, 15,8, 15,8, 14,4, 13,3, 12,1, 10,9, 6,9, 6,7 ppm.

Przykład FLC-00452-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00376-1, przy czym zamiast NHs/MeOH do mieszaniny reakcyjnej dodano benzyloaminę (nadmiar). Produkt otrzymano z wydajnością 51%.

ESI-MS dla C51H78N2O12 (m/z): [M+Na]⁺934,1, [M-H]'910,1.

Ή NMR (700 MHz, CD2CI2) δ 8,26 - 8,21 (m, 1H), 7,76-7,71 (m, 1H), 7,36 (s, 2H), 7,32 (d, J = 7,2 Hz, 2H), 6,25 - 6,21 (m, 1H), 5,82 - 5,78 (m, 1H), 5,75 - 5,49 (m, 1H), 4,73 - 4,65 (m, 1H), 4,58-4,41 (m, 2H), 4,24-4,16 (m, 1H), 4,16-4,10 (m, 1H), 3,99-3,93 (m, 1H), 3,81-3,70 (m, 2H), 3,57-3,46 (m, 1H), 2,85-2,78 (m, 1H), 2,78-2,67 (m, 2H), 2,25-0,69 (m, 56H) ppm.

¹³C NMR (176 MHz, CD2CI2) δ 220,8, 185,2, 162,4, 160,9, 139,6, 130,5, 129,7, 129,5, 129,4, 125,1, 107,9, 101,7, 90,6, 78,9, 78,6, 77,8, 75,0, 72,9, 72,0, 70,2, 57,8, 52,7, 51,5, 51,1, 45,3, 42,6, 40,6, 38,7, 37,5, 34,4, 34,2, 33,8, 30,2, 30,0, 28,8, 27,3, 24,8, 22,1, 21,8, 19,4, 17,5, 17,3, 15,8, 14,8, 14,2, 14,0, 12,8, 8,6, 8,3 ppm.

158

PL 248049 Β1

Przykład FLC-00456-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00376-1, przy czym zamiast NHs/MeOH do mieszaniny reakcyjnej dodano etylenodiaminę (nadmiar). Produkt otrzymano z wydajnością 7%.

ESI-MS dla C46H77N3O12 (m/z): [M+H]⁺ 865,1, [M-H]' 863,0.

Ή NMR (700 MHz, CDCI3) δ 8,45 - 8,36 (m, 1H), 7,80 - 7,71 (m, 1H), 6,18 (dd, J= 10,8,3,1 Hz, 1H), 5,86 (dd, J = 10,8, 1,6 Hz, 1H), 4,62-4,55 (m, 1H), 4,29 (d, J= 6,8 Hz, 1H), 4,24 (d, J = 10,2 Hz, 1H), 4,04 - 3,95 (m, 1H), 3,74 (dd, J = 10,2, 2,1 Hz, 1H), 3,63 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 3,40 (dd, J = 12,2, 2,2 Hz, 1H), 3,34 (dd, J = 5,9, 3,1 Hz, 2H), 2,83 (ddd, J= 13,7, 11,0, 6,6 Hz, 3H), 2,72-2,63 (m, 2H), 2,21 -0,54 (m, 58H) ppm.

¹³C NMR (176 MHz, CDCI3) δ 217,5, 183,8, 161,1, 159,7, 127,5, 123,1, 106,1, 99,6, 88,6, 76,4, 76,1, 75,7, 73,8, 71,2, 70,2, 67,8, 55,5, 50,6, 49,7, 49,2, 42,6, 41,4, 40,7, 38,7, 36,6, 35,8, 32,4, 32,3, 32,1,29,3,28,1,26,9, 26,8, 23,1,20,2, 19,9, 17,6, 15,8, 15,7, 14,4, 13,2, 12,3, 12,1, 11,0, 6,9, 6,6 ppm.

Przykład FLC-00457-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00376-1, przy czym zamiast NHs/MeOH do mieszaniny reakcyjnej dodano 2-fenyloetyloaminę (nadmiar). Produkt otrzymano z wydajnością 29%.

ESI-MS dla C52H80N2O12 (m/z): [M+Na]⁺ 948,0, [M-H]' 924,1.

Ή NMR (700 MHz, CDCI3) δ 8,39-8,33 (m, 1H), 7,53 (s, 1H), 7,30 (dd, J= 12,1, 4,5 Hz, 2H), 7,23 - 7,18 (m,3H), 6,20 (dd, J= 10,8,3,1 Hz, 1H), 5,87 (dd, J= 10,8, 1,7 Hz, 1H), 4,64 - 4,52 (m, 1H), 4,31-4,27 (m, 1H), 4,27-4,23 (m, 1H), 4,05-4,00 (m, 1H), 3,78-3,74 (m, 1H), 3,66 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 3,56 (s, 1H), 3,50 (s, 1H), 3,42 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 2,83 (dd, J=9,1, 5,5 Hz, 3H), 2,74-2,65 (m, 2H), 2,22-0,61 (m, 56H) ppm.

¹³C NMR (176 MHz, CDCI3) δ 217,7, 183,8, 161,1, 159,1, 138,7, 128,7, 128,6, 127,6, 126,5, 123,1, 106,1,99,6, 88,6, 76,5, 76,2, 75,7, 73,7, 71,2, 70,1, 67,9, 55,6, 50,7, 49,7, 49,2, 40,9, 40,8, 38,7, 36,6, 35,8, 35,6, 32,4, 32,3, 32,1, 29,1, 28,1, 26,9, 26,6, 23,2, 20,2, 19,9, 17,7, 15,7, 14,4, 13,2, 12,4, 12,1, 11,0, 6,9, 6,7 ppm.

PL 248049 Β1

159

Przykład FLC-00458-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00376-1, przy czym zamiast NHs/MeOH do mieszaniny reakcyjnej dodano 3-fenylopropyloaminę (nadmiar). Produkt otrzymano z wydajnością 15%.

ESI-MŚ dla C53H82N2O12 (m/z): [M+Na]⁺ 962,1.

Ή NMR (700 MHz, CDCI3) δ 8,35 - 8,28 (m, 1H), 7,55 - 7,49 (m, 1H), 7,28 (t, J = 3,6 Hz, 2H), 7,19 (dd, J= 6,2, 5,1 Hz, 3H), 6,23-6,17 (m, 1H), 5,89 (dd, J=10,8, 1,7 Hz, 1H), 5,70-5,35 (m, 1H), 4,66 - 4,53 (m, 1H), 4,32 - 4,23 (m, 2H), 4,07 - 3,99 (m, 1H), 3,79 - 3,75 (m, 1H), 3,69 - 3,63 (m, 1H), 3,45 - 3,40 (m, 1H), 3,35 - 3,29 (m, 2H), 2,87 - 2,80 (m, 1H), 2,73 - 2,67 (m, 2H), 2,64 (t, J = 7,8 Hz, 2H), 2,17-0,62 (m, 57H) ppm.

¹³C NMR (176 MHz, CDCI3) δ 217,6, 183,8, 161,2, 159,2, 141,3, 128,4, 128,4, 127,6, 126,0, 123,1, 106,2, 99,7, 88,7, 76,9, 76,5, 76,2, 75,7, 73,7, 71,2, 70,0, 67,9, 55,5, 50,7, 49,7, 49,3, 40,8, 39,2, 38,7, 36,6, 35,8, 33,1, 32,4, 32,3, 32,1, 30,9, 29,1, 28,1, 26,9, 26,7, 23,2, 20,2, 19,9, 17,7, 15,8, 14,4, 13,2, 12,4, 12,1, 11,0, 6,9, 6,7 ppm.

Przykład FLC-00465-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00376-1, przy czym zamiast NHs/MeOH do mieszaniny reakcyjnej dodano 4-(2-aminoetylo)morfolinę (nadmiar). Produkt otrzymano z wydajnością 38%.

ESI-MŚ dla C50H83N3O11 (m/z): [M+H]⁺ 934,9, [M-H]' 933,0.

Ή NMR (700 MHz, CDCI3) δ 8,57 - 8,51 (m, 1Η), 7,73 - 7,68 (m, 1H), 6,21 - 6,17 (m, 1H), 5,86-5,81 (m, 1H), 4,68-4,63 (m, 1H), 4,30-4,20 (m, 2H), 4,03-3,98 (m, 1H), 3,76-3,63 (m, 8H), 3,42 (s, 4H), 2,84-2,77 (m, 1H), 2,72-2,64 (m, 2H), 2,51 -2,42 (m, 7H), 2,19-0,63 (m, 52H) ppm.

¹³C NMR (176 MHz, CDCI3) δ 217,9, 183,9, 160,9, 159,1, 127,8, 123,2, 106,1, 99,7, 88,6, 76,6, 76,2, 75,7, 73,7, 71,2, 70,3, 68,0, 66,9, 56,8, 55,6, 53,4, 50,9, 49,6, 49,2, 40,8, 38,7, 36,4, 36,0, 35,8, 32,4, 32,4, 32,0, 31,6, 29,0, 28,1, 26,8, 26,5, 23,1, 20,2, 17,7, 15,7, 14,3, 14,1, 13,2, 12,4, 12,1, 11,0, 6,8, 6,6 ppm.

160

PL 248049 Β1

Przykład FLC-00471-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00376-1, przy czym zamiast NHs/MeOH do mieszaniny reakcyjnej dodano A/,A/-dimetyloaminoetyloaminę (nadmiar). Produkt otrzymano z wydajnością 94%.

ESI-MS dla C48H81N3O12 (m/z): [M+H]⁺ 893,0, [M+Na]⁺ 914,9, [M-H]' 891,0.

Ή NMR (700 MHz, CDCI3) δ 8,48 - 8,41 (m, 1H), 7,71 - 7,64 (m, 1H), 6,22 - 6,17 (m, 1H), 5,86-5,83 (m, 1H), 5,64-5,42 (m, 1H), 4,69-4,63 (m, 1H), 4,28-4,22 (m, 2H), 4,05-3,99 (m, 1H), 3,77- 3,74 (m, 1H), 3,68 - 3,65 (m, 1H), 3,45 - 3,42 (m, 1H), 3,40 - 3,31 (m, 2H), 2,83 - 2,79 (m, 1H), 2,72 - 2,66 (m, 2H), 2,43 (s, 2H), 2,23 (s, 6H), 2,16 - 0,62 (m, 55H) ppm.

¹³C NMR (176 MHz, CDCI3) δ 217,9, 183,8, 161,0, 159,1, 127,8, 123,1, 106,1, 99,7, 88,6, 76,6, 76,3, 75,7, 73,7, 71,2, 70,2, 68,0, 57,6, 55,6, 50,8, 49,7, 49,2, 45,2, 40,8, 38,7, 37,1, 36,5, 35,8, 32,4, 32,0, 31,6, 29,0, 28,1, 26,9, 26,4, 23,1, 22,6, 20,2, 19,9, 17,7, 15,7, 14,3, 14,1, 13,2, 12,4, 12,1, 11,0, 6,8, 6,6 ppm.

Przykład FLC-00477-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00376-1, przy czym zamiast NHs/MeOH do mieszaniny reakcyjnej dodano 2-chlorobenzyloaminę (nadmiar). Produkt otrzymano z wydajnością 43%.

ESI-MŚ dla C51H77CIN2O12 (m/z): [M+Na]⁺ 967,9, [M-H]' 943,9.

Ή NMR (500 MHz, CDCI3) δ 8,50 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 7,83 (t, J = 6,3 Hz, 1H), 7,35 - 7,30 (m, 2H), 7,21 - 7,16 (m, 2H), 6,17 (dd, J = 10,8, 3,0 Hz, 1H), 5,84 (dd, J = 10,8, 1,5 Hz, 1H), 5,59 - 5,30 (m, 1H), 4,60 (dd, J = 7,1, 4,5 Hz, 1H), 4,55 (dd, J = 6,3, 2,5 Hz, 2H), 4,24 (dd, J = 16,3, 8,9 Hz, 2H), 3,99 (dd, J = 10,7, 4,8 Hz, 1H), 3,73 (dd, J= 10,1, 1,7 Hz, 1H), 3,62 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 3,39 (dd, J = 12,1, 1,7 Hz, 1H), 2,79 (d, J = 3,3Hz, 1H), 2,73 - 2,61 (m, 2H), 2,18 - 0,61 (m, 55H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CDCI3) δ 217,7, 183,9, 160,8, 159,1, 134,9, 133,6, 130,2, 129,5, 129,0, 127,6, 127,1, 123,2, 106,2, 99,6, 88,6, 76,5, 76,2, 75,7, 73,7, 71,2, 70,2, 67,9, 55,5, 50,8, 49,7, 49,2, 41,4, 40,8, 38,7, 36,5, 35,8, 32,4, 32,3, 32,0, 29,0, 28,1, 26,9, 26,7, 23,2, 20,1, 19,9, 17,7, 15,8, 14,4, 13,2, 12,4, 12,1, 11,0, 6,9, 6,6 ppm.

PL 248049 Β1

161

Przykład FLC-00478-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00376-1, przy czym zamiast NHs/MeOH do mieszaniny reakcyjnej dodano 2-(aminometylo)pirydynę (nadmiar). Produkt otrzymano z wydajnością 7%.

ESI-MŚ dla C50H77N3O12 (m/z): [M+Na]⁺ 934,9; [M-H]' 910,9.

Ή NMR (500 MHz, CDCI3) δ 8,54 (d, J = 3,9 Hz, 1H), 8,44 - 8,37 (m, 1H), 8,32 (s, 1H), 7,64 (s, 1H), 7,26 (s, 1H), 7,19 (s, 1H), 6,15 (s, 1H), 5,85 - 5,75 (m, 1H), 4,59 (d, J = 5,6 Hz, 2H), 4,22 - 4,14 (m, 1H), 3,98 (s, 1H), 2,97 - 2,56 (m, 3H), 2,16 - 0,59 (m, 61H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 219,0, 183,3, 160,4, 159,1, 155,9, 149,1, 136,7, 127,6, 123,2, 122,4, 121,9, 106,0, 99,7, 88,6, 77,0, 76,6, 75,9, 73,0, 70,9, 70,1, 68,3, 55,9, 50,8, 49,5, 49,2, 44,4, 40,7, 38,6, 36,8, 35,6, 32,5, 32,3, 31,9, 28,2, 26,8, 25,3, 22,8, 20,2, 19,9, 17,5, 15,6, 15,4, 14,0, 13,9, 12,9, 12,2, 12,1, 10,9, 6,7, 6,4 ppm.

Przykład FLC-00479-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00376-1, przy czym zamiast NHs/MeOH do mieszaniny reakcyjnej dodano 3-(aminometylo)pirydynę (nadmiar). Produkt otrzymano z wydajnością 57%.

ESI-MŚ dla C50H77N3O12 (m/z): [M+Na]⁺ 934,9, [M-H]' 911,0.

Ή NMR (500 MHz, CDCI3) δ 8,51 (s, 3H), 8,04 - 7,79 (m, 1H), 7,63 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,23 (dd, J= 7,4, 5,0 Hz, 1H), 6,21 -6,11 (m, 1H), 5,91 -5,75 (m, 1H), 4,63-4,51 (m, 1H), 4,46 (d, J= 6,3 Hz, 2H), 4,34 - 4,15 (m, 2H), 3,98 (dd, J = 10,6, 4,7 Hz, 1H), 3,76 - 3,57 (m, 2H), 3,45 - 3,29 (m, 1H), 2,90-2,78 (m, 4H), 2,65 (d, J = 10,2 Hz, 1H), 2,28-0,50 (m, 57H) ppm.

162

PL 248049 Β1

Przykład FLC-00489-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00376-1, przy czym zamiast NHs/MeOH do mieszaniny reakcyjnej dodano 4-(aminometylo)pirydynę (nadmiar). Produkt otrzymano z wydajnością 57%.

ESI-MŚ dla C50H77N3O12 (m/z): [M+Na]⁺ 934,9, [M-H]' 911,0.

Ή NMR (500 MHz, CDCI3) δ 8,54 (d, J = 5,0 Hz, 2H), 8,05 - 7,92 (m, 1H), 7,19 (d, J = 5,7 Hz, 2H), 6,16 (dd, J = 10,7, 2,5 Hz, 1H), 5,80 (d, J = 10,4 Hz, 1H), 4,58-4,40 (m, 3H), 4,16 (d, J= 6,8 Hz, 1H), 3,96 (dd, J = 10,8, 5,5 Hz, 1H), 3,90-3,77 (m, 1H), 3,69-3,59 (m, 1H), 2,85 (s, 1H), 2,80-2,68 (m, 1H), 2,64 (d, J=10,2 Hz, 1H), 2,23 - 0,51 (m, 59H) ppm.

Przykład FLC-00491-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00376-1, przy czym zamiast NHs/MeOH do mieszaniny reakcyjnej dodano 2-metoksyfenetyloaminę (nadmiar). Produkt otrzymano z wydajnością 35%.

ESI-MŚ dla C53H82N2O13 (m/z): [M+Na]⁺ 978, [M-H]' 954.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 8,25-8,13 (m, 1H), 7,60 (s, 1H), 7,20 (td, J=8,1, 1,6 Hz, 1H), 7,12 (dd, J = 7,6, 1,5 Hz, 1H), 6,90-6,85 (m, 2H), 6,17 (dd, J = 10,7, 2,3 Hz, 1H), 5,73 (d, J = 10,6 Hz, 1H), 4,61 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 4,10 (dd, J = 26,0, 8,6 Hz, 2H), 3,95 - 3,87 (m, 1H), 3,83 (s, 3H), 3,70 (t, J = 9,9 Hz, 2H), 3,52 - 3,43 (m, 3H), 2,84 (t, J = 6,8 Hz, 2H), 2,80 - 2,63 (m, 4H), 2,27 - 0,54 (m, 55H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 218,9, 217,7, 215,0, 183,3, 160,5, 159,0, 157,6, 130,5, 127,9, 127,1, 123,1, 120,5, 110,2, 106,0, 99,8, 88,5, 77,0, 76,7, 75,9, 72,9, 71,0, 70,2, 68,2, 55,8, 55,2, 50,9, 49,5, 49,3, 40,7, 40,0, 38,6, 36,6, 35,6, 32,5, 32,3, 31,8, 29,9, 28,2, 27,9, 26,8, 25,3, 22,8, 20,2, 19,8, 17,5, 15,5, 13,9, 12,9, 12,3, 12,1, 10,9, 6,7, 6,4 ppm.

PL 248049 Β1

163

Przykład FLC-00395-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00445-1, przy czym zamiast chlorku 5-chloropentanoilu do mieszaniny reakcyjnej dodano chloromrówczan 2,2,2-trifluoroetylu (2,2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 53%.

ESI-MS dla C45H72F3NO12 (m/z): [M+Na]⁺ 899,0, [M-H]' 875,1.

Ή NMR (500 MHz, CDCI3) δ 7,00 (d, J = 9,5 Hz, 1H), 6,12 (dd, J = 10,9, 3,0 Hz, 1H), 5,77 (dd, J= 10,8, 1,2 Hz, 1H), 4,58 (dq, J= 12,8, 8,6 Hz, 1H), 4,47 (t, J = 14,1 Hz, 1H), 4,30-4,11 (m, 4H), 3,92 (dd, J = 10,9, 4,3 Hz, 1H), 3,64 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 3,56 (dd, J= 15,0, 7,2 Hz, 1H), 3,37 (d, J = 10,7 Hz, 1H), 2,82 (td, J= 10,9, 3,0 Hz, 1H), 2,74-2,57 (m, 2H), 2,21 -2,08 (m, 1H), 2,03-0,60 (m, 55H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CDCI3) δ 218,0, 184,9, 155,6, 127,4, 123,4, 106,1, 98,8, 88,7, 75,8, 74,6, 71,4, 69,5, 68,3, 67,1, 60,6, 60,3, 55,9, 51,3, 49,4, 49,3, 40,5, 38,6, 37,3, 35,8, 32,4, 32,3, 32,2, 29,3, 28,0, 27,4, 26,8, 23,9, 19,9, 19,8, 17,6, 15,9, 15,4, 14,6, 13,1, 12,1, 11,9, 10,8, 6,7, 6,5 ppm.

Przykład FLC-00410-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00445-1, przy czym zamiast chlorku 5-chloropentanoilu do mieszaniny reakcyjnej dodano chloromrówczan heksadecylu (2,2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 33%.

ESI-MS dla C59H103NO12 (m/z): [M+Na]⁺ 1041,2, [M-H]' 1017,2.

Ή NMR (500 MHz, CDCI₃)6 6,41 (d, J=9,7Hz, 1H), 6,09 (dd, J= 10,9, 2,9 Hz, 1H), 5,77 (d, J = 10,9 Hz, 1H), 4,48 (d, J=9,5Hz, 1H), 4,28 - 4,15 (m, 3H), 4,05 (dt, J = 10,5, 7,1 Hz, 1H), 3,95-3,83 (m, 3H), 3,66 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 3,58 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 3,36 (d, J = 11,0 Hz, 1H), 2,82 (td, J = 10,9, 2,9 Hz, 1H), 2,71 - 2,58 (m, 2H), 2,22 - 0,60 (m, 86H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CDCI3) δ 218,0, 184,7, 157,6, 128,4, 122,8, 106,5, 98,9, 88,4, 75,9, 75,7, 74,7, 71,4, 69,5, 68,1, 65,0, 55,9, 51,3, 49,4, 48,9, 40,6, 38,7, 37,1, 35,9, 32,4, 32,3, 32,0, 30,9, 29,7, 29,7, 29,6, 29,5, 29,4, 29,1, 28,0, 27,5, 26,9, 25,7, 24,0, 22,7, 20,0, 19,8, 17,6, 15,9, 15,4, 14,6, 14,1, 13,1, 12,4, 12,1, 10,8, 6,7, 6,6 ppm.

164

PL 248049 Β1

Przykład FLC-00424-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00445-1, przy czym zamiast chlorku 5-chloropentanoilu do mieszaniny reakcyjnej dodano chloromrówczan propylu (2,2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 55%.

ESI-MS dla C46H77NO12 (m/z): [M+Na]⁺ 859,1, [M-H]' 835,1.

Ή NMR (500 MHz, CDCI3) δ 6,41 (d, J = 9,7 Hz, 1H), 6,10 (dd, J = 10,9, 3,1 Hz, 1H), 5,77 (dd, J = 10,8, 1,7Hz, 1H), 4,50-4,46 (m, 1H), 4,26 - 4,15 (m, 2H), 4,07 - 3,99 (m, 1H), 3,93 (dd, J = 11,0, 4,6 Hz, 1H), 3,85 (dt, J = 10,5, 6,6 Hz, 1H), 3,66 (dd, J = 10,1, 1,8 Hz, 1H), 3,59 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 3,37 (dd, J = 12,0, 1,7 Hz, 1H), 2,83 (td, J = 11,0, 3,2 Hz, 1H), 2,71 - 2,59 (m, 2H), 2,23 - 0,60 (m, 62H)ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CDCI3) δ 218,0, 184,8, 157,6, 128,3, 122,9, 106,5, 98,9, 88,4, 75,9, 75,7, 74,7, 71,4, 69,5, 68,1, 67,1, 66,5, 55,8, 51,3, 49,4, 48,8, 40,6, 38,7, 37,1, 35,89, 32,4, 32,3, 29,7, 28,0, 27,5, 26,8, 24,0, 22,4, 19,9, 19,8, 17,6, 15,9, 15,4, 14,7, 13,1, 12,4, 12,1, 10,7, 10,4, 6,7, 6,6 ppm.

Przykład FLC-00425-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00445-1 / JK-B30-f1, przy czym zamiast chlorku 5-chloropentanoilu do mieszaniny reakcyjnej dodano chloromrówczan allilu (2,2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 56%.

ESI-MS dla C46H75NO12 (m/z): [M+Ńa]⁺ 857,0, [M-H]' 833,0.

Ή NMR (500 MHz, CDCI3) δ 6,60 (d, J = 9,7 Hz, 1H), 6,10 (dd, J = 10,9, 3,0 Hz, 1H), 5,88 (ddd, J = 22,7, 10,7, 5,4 Hz, 1H), 5,77 (dd, J = 10,8, 1,7 Hz, 1H), 5,37 - 5,26 (m, 1H), 5,13 - 5,03 (m, 1H), 4,70 (s, 1H), 4,60 (dd, J = 13,5, 5,5 Hz, 1H), 4,51 - 4,46 (m, 1H), 4,39 (dd, J = 13,5, 5,4 Hz, 1H), 4,27 - 4,15 (m,2H), 3,93 (dd, J = 10,9, 4,6 Hz, 1H), 3,66 (dd, J = 10,1, 1,7 Hz, 1H), 3,58 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 3,36 (dd, J = 12,0, 1,7 Hz, 1H), 2,82 (td, J = 11,0, 3,2 Hz, 1H), 2,71-2,60 (m, 2H), 2,23-0,61 (m, 56H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CDCI3) δ 218,0, 184,9, 157,2, 133,4, 128,2, 123,0, 116,9, 106,4, 98,8, 88,4, 75,9, 75,7, 74,7, 71,4, 69,6, 68,1, 67,1, 65,3, 55,8, 51,3, 49,4, 48,9, 40,5, 38,6, 37,2, 35,9, 32,4, 32,3, 29,7, 28,0, 27,5, 26,8, 24,0, 19,9, 19,8, 17,6, 15,9, 15,4, 14,7, 13,1, 12,5, 12,1, 10,7, 6,7, 6,6, 1,1 ppm.

PL 248049 Β1

165

Przykład FLC-00429-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00445-1, przy czym zamiast chlorku 5-chloropentanoilu do mieszaniny reakcyjnej dodano chloromrówczan fenylu (2,2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 93%.

ESI-MS dla C49H75NO12 (m/z): [M+Na]⁺ = 893, [M-H]' 869.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 7,31 (t, J= 7,9 Hz, 2H), 7,20 (d, J = 9,4 Hz, 1H), 7,15 (dd, J= 12,4, 7,5 Hz, 3H), 6,18 (dd, J = 10,8, 3,0 Hz, 1H), 5,76 (dd, J = 10,8, 1,6 Hz, 1H), 4,53 - 4,46 (m, 1H), 4,22 (q, J= 6,7 Hz, 1H), 4,13 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 3,83 (dd, J= 11,0, 4,5 Hz, 1H), 3,68-3,60 (m, 2H), 3,44 (m, 1H), 2,84-2,71 (m, 2H), 2,68 (d, J= 10,2 Hz, 1H), 2,30-2,12 (m, 2H), 2,05-1,10 (m, 42H), 0,83 (d, J = 7,2 Hz, 3H), 0,80 - 0,72 (m, 6H), 0,70 (d, J = 6,9 Hz, 3H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 218,9, 184,8, 155,2, 151,4, 128,8, 127,2, 124,8, 123,6, 122,1, 106,4, 98,8, 88,5, 77,0, 75,9, 74,8, 71,2, 69,7, 68,2, 56,0, 51,0, 49,1, 49,0, 40,5, 38,5, 37,5, 35,9, 32,4, 32,3, 32,2, 29,7, 28,0, 27,1,26,7, 23,8, 19,9, 19,8, 17,2, 15,7, 15,2, 14,5, 12,8, 12,2, 12,1, 10,5, 6,4, 6,3 ppm.

Przykład FLC-00431-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00445-1, przy czym zamiast chlorku 5-chloropentanoilu do mieszaniny reakcyjnej dodano chloromrówczan benzylu (2,2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 60%.

ESI-MS dla C50H77NO12 (m/z): [M+Na]⁺ 908,0, [M-H]' 883,0.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 7,30 (ddd, J= 26,8, 23,6, 7,3 Hz, 5H), 6,61 (d, J= 9,6 Hz, 1H), 6,11 (dd, J = 10,8, 3,0 Hz, 1H), 5,69 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 5,15 (d, J = 12,8 Hz, 1H), 4,90 (d, J = 12,8 Hz, 1H), 4,46 (d, J=9,6 Hz, 1H), 4,16 (q, J = 6,7 Hz, 1H), 4,08 (d, J = 10,5 Hz, 1H), 3,83 (dd, J= 10,9, 4,5 Hz, 1H), 3,63-3,58 (m, 2H), 3,41-3,36 (m, 1H), 2,79-2,68 (m, 2H), 2,66 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 2,24 - 0,60 (m, 57H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 219,0, 184,4, 156,8, 137,5, 128,1, 128,0, 127,7, 127,4, 123,1, 106,4, 99,0, 88,4, 76,9, 76,0, 75,9, 74,3, 71,1, 69,7, 68,3, 67,0, 66,0, 56,0, 50,9, 49,4, 49,1,40,5, 38,5, 37,2, 35,8, 32,4, 32,2, 29,7, 29,1, 28,1,26,8, 26,7, 23,6, 19,9, 19,7, 17,3, 15,7, 15,3, 14,4, 12,8, 12,2, 12,1, 10,6, 6,5, 6,4 ppm.

166

PL 248049 Β1

Przykład FLC-00436-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00445-1, przy czym zamiast chlorku 5-chloropentanoilu do mieszaniny reakcyjnej dodano chloromrówczan 2-chloroetylu (2,2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 43%.

ESI-MS dla C₄₅H74CINOi2^Ł(m/z): [M+Na]⁺ 879,0, [M-H]' 855,2.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 6,72 (d, J = 9,5 Hz, 1H), 6,12 (dd, J = 10,8, 3,0 Hz, 1H), 5,67 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 4,43 (d, J = 9,5 Hz, 1H), 4,30 (dt, J = 11,8, 6,6 Hz, 1H), 4,17 (q, J = 6,6 Hz, 1H), 4,12-4,03 (m, 2H), 3,84 (dd, J = 10,9, 4,3 Hz, 1H), 3,63 - 3,58 (m, 4H), 3,41 (d, J= 11,3 Hz, 1H), 2,82-2,69 (m, 2H), 2,66 (d, J= 10,2 Hz, 1H), 2,26-0,64 (m, 57H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 219,3, 184,8, 156,7, 128,0, 123,7, 106,8, 99,2, 88,8, 77,3, 76,4, 76,3, 74,8, 71,6, 70,1, 68,6, 64,3, 56,4, 51,3, 49,6, 49,4, 42,0, 40,9, 38,9, 37,7, 36,2, 32,8, 32,6, 32,5, 29,8, 28,4, 27,2, 27,1, 24,1,20,3, 20,1, 17,7, 16,1, 15,7, 14,8, 13,2, 12,7, 12,5, 11,0, 6,9, 6,68 ppm.

Przykład FLC-00437-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00445-1, przy czym zamiast chlorku 5-chloropentanoilu do mieszaniny reakcyjnej dodano chloromrówczan 2-fluoroetylu (2,2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 63%.

ESI-MS dla C45H74FNO12 (m/z): [M+Na]⁺ 862,9, [M-H]' 839,0.

Ή NMR (500 MHz, CDCI3) δ 6,74 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 6,10 (dd, J = 10,9, 3,0 Hz, 1H), 5,75 (dd, J = 10,8, 1,5 Hz, 1H), 4,61 -4,53 (m, 1H), 4,50 -4,43 (m, 2H), 4,43 -4,35 (m, 1H), 4,23 (q, J=6,6Hz, 1H), 4,18 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 4,07 (dddd, J = 28,3, 12,6, 5,0, 3,3 Hz, 1H), 3,91 (dd, J= 11,0, 4,5 Hz, 1H), 3,64 (dd, J = 10,1, 1,5 Hz, 1H), 3,56 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 3,35 (d, J = 10,6 Hz, 1H), 2,83 (td, J = 11,0, 3,1 Hz, 1H), 2,70-2,60 (m, 2H), 2,21 - 0,63 (m, 57H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CDCI3) δ 218,1, 185,0, 157,0, 127,9, 123,2, 106,4, 98,8, 88,5, 82,5, 81,1, 75,9, 75,8, 74,9, 71,5, 69,7, 68,2, 63,44 (d) 55,9, 51,3, 49,5, 48,9, 40,6, 38,7, 37,4, 36,0, 32,5, 32,4, 29,8, 28,1,27,6, 26,9, 24,1,20,0, 19,9, 17,6, 16,0, 15,5, 14,8, 13,2, 12,2, 12,2, 10,8, 6,8, 6,64 ppm.

¹⁹F (471 MHz, CDCI3) δ -77,0 ppm.

PL 248049 Β1

167

Przykład FLC-00439-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00445-1, przy czym zamiast chlorku 5-chloropentanoilu do mieszaniny reakcyjnej dodano chloromrówczan izopropylu (2,2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 16%.

ESI-MS dla C46H77NO12 (m/z): [M+Na]⁺ 859,0, [M-H]' 835,1.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 6,25 (d, J = 9,4 Hz, 1H), 6,10 (dd, J = 10,8, 2,9 Hz, 1H), 5,67 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 4,89 - 4,76 (m, 1H), 4,44 (d, J = 9,4 Hz, 1H), 4,16 (q, J = 6,6 Hz, 1H), 4,09 (d, J 10,3 Hz, 1H), 3,83 (dd, J = 10,7, 3,9 Hz, 1H), 3,41 (d, J= 11,4 Hz, 1H), 2,83-2,69 (m, 2H), 2,66 (d, J 10,3 Hz, 1H), 2,28 - 0,66 (m, 65H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 219,4, 184,6, 156,9, 128,5, 123,4, 107,0, 99,3, 88,7, 77,4, 76,4, 76,2, 74,8, 71,6, 70,0, 68,7, 68,0, 56,4, 51,4, 49,5, 49,4, 40,9, 39,0, 37,5, 36,2, 32,9, 32,6, 32,5, 29,7, 28,5, 27,2, 27,1,24,2, 22,3, 22,2, 20,3, 20,1, 17,7, 16,1, 15,7, 14,8, 13,4, 13,2, 12,5, 11,0, 6,9, 6,70 ppm.

Przykład FLC-00440-1

II II

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00445-1, przy czym zamiast chlorku 5-chloropentanoilu do mieszaniny reakcyjnej dodano chloromrówczan 1,3-dichloroizopropylu (2,2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 61%.

ESI-MS dla C46H75CI2NO12 (m/z): [M+Na]⁺ 927,0, [M-H]' 903,1.

Ή NMR (500 MHz, CDCI3) δ 6,68 (d, J= 9,4 Hz, 1H), 6,11 (dd, J= 10,9, 3,0 Hz, 1H), 5,77 (dd, J = 10,8, 1,3 Hz, 1H), 5,00 (dq, J= 10,4, 5,2 Hz, 1H), 4,47 (d, J=9,4 Hz, 1H), 4,24 (q, J= 6,6 Hz, 1H), 4,17 (d, J = 10,4 Hz, 1H), 3,92 (dd, J = 11,0, 4,4 Hz, 1H), 3,77-3,70 (m, 3H), 3,68-3,60 (m, 3H), 3,55 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 3,37 (d, J = 10,9 Hz, 1H), 2,83 (td, J = 10,9, 3,1 Hz, 1H), 2,69 - 2,60 (m, 2H), 2,19-0,62 (m, 56H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CDCI3) δ 218,0, 185,1, 156,0, 127,6, 123,4, 106,3, 98,9, 88,6, 76,8, 75,8, 74,9, 73,4, 71,5, 69,8, 68,3, 55,9, 51,2, 49,4, 49,1, 43,1, 42,5, 40,6, 38,7, 37,2, 35,9, 32,5, 32,4, 32,4, 29,8, 29,6, 28,1, 27,7, 26,9, 24,1,20,0, 17,6, 16,0, 15,5, 14,7, 13,2, 13,0, 12,2, 10,8, 6,8, 6,67 ppm.

168

PL 248049 Β1

Przykład FLC-00444-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00445-1, przy czym zamiast chlorku 5-chloropentanoilu do mieszaniny reakcyjnej dodano chloromrówczan 6-chloroheksylu (2,2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 61%.

ESI-MS dla C49H82CINOi₂ ^Ł(m/z): [M+Na]⁺ 935,1, [M-H]'911,1.

Ή NMR (700 MHz, CDCI₃) δ 6,44 (d, J = 9,7 Hz, 1H), 6,10 (dd, J = 10,9, 3,1 Hz, 1H), 5,76 (dd, 7 = 10,8, 1,8 Hz, 1H), 4,48 (ddd, 7= 9,7, 2,9, 2,0 Hz, 1H), 4,24 (q, 7= 6,6 Hz, 1H), 4,19 (dd, 7= 10,4, 1,5 Hz, 1H), 4,06 (dt, 7= 10,6, 6,9 Hz, 1H), 3,95-3,87 (m, 2H), 3,65 (dd, 7= 10,1, 2,0 Hz, 1H), 3,58 (d, 7= 10,1 Hz, 1H), 3,50 (t, 7 = 6,8 Hz, 2H), 3,36 (dd, 7= 12,1, 2,0 Hz, 1H), 2,83 (td, 7= 11,0, 3,3 Hz, 1H), 2,68 - 2,60 (m, 2H), 2,21 - 0,63 (m, 65H) ppm.

¹³C NMR (176 MHz, CDCI3) δ 218,1, 184,8, 157,7, 128,4, 123,0, 106,6, 99,0, 88,5, 76,8, 76,0, 75,8, 74,8, 71,5, 69,7, 68,2, 64,8, 56,0, 51,4, 49,5, 49,0, 45,2, 40,7, 38,8, 37,2, 36,0, 32,7, 32,5, 32,5, 32,5, 29,1, 28,1, 27,6, 26,9, 26,8, 25,2, 24,1, 20,0, 19,9, 17,6, 16,0, 15,5, 14,8, 13,2, 12,5, 12,2, 10,8, 6,8, 6,69 ppm.

Przykład FLC-00446-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00445-1, przy czym zamiast chlorku 5-chloropentanoilu do mieszaniny reakcyjnej dodano chloromrówczan 2,2-difluoroetylu (2,2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 34%.

ESI-MS dla C45H73F2NO12 (m/z): [M+Na]⁺ 880,9, [M-H]' 857,1.

Ή NMR (700 MHz, CDCI3) δ 6,96 (d, 7 =9,6 Hz, 1H), 6,12 (dd, 7 = 10,9, 3,1 Hz, 1H), 5,96 (tdd, 7 = 8,7, 6,7, 3,9 Hz, 1H), 5,75 (dd, 7= 10,8, 1,9 Hz, 1H), 4,47 (ddd, 7 = 9,6, 2,9, 2,1 Hz, 1H), 4,42 - 4,35 (m, 1H), 4,25 (q, 7= 6,7 Hz, 1H), 4,19 (dd, 7= 10,4, 1,4 Hz, 1H), 3,98 (dtd, 7= 16,1, 12,3, 3,7 Hz, 1H), 3,92 (dd, 7= 11,0, 4,8 Hz, 1H), 3,64 (dd, 7= 10,2, 2,0 Hz, 1H), 3,56 (d, 7= 9,8 Hz, 1H), 3,36 (dd, 7 = 12,1, 2,0 Hz, 1H), 2,87 - 2,81 (m, 1H), 2,70 - 2,60 (m, 2H), 2,18 - 0,63 (m, 57H) ppm.

¹³C NMR (176 MHz, CDCI3) δ 218,1, 185,2, 156,2, 127,5, 123,6, 113,9, 106,3, 98,8, 88,6, 76,9, 75,9, 75,9, 75,0, 71,5, 69,8, 68,2, 63,2, 56,0, 51,3, 49,4, 49,0, 40,6, 38,7, 37,5, 36,0, 32,5, 32,4, 29,8, 29,8, 28,1,27,7, 26,9, 24,1,20,0, 20,0, 17,6, 16,0, 15,5, 14,8, 13,2, 12,2, 12,1, 10,8, 6,8, 6,61 ppm.

PL 248049 Β1

169

Przykład FLC-00447-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00445-1, przy czym zamiast chlorku 5-chloropentanoilu do mieszaniny reakcyjnej dodano chloromrówczan decylu (2,2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 52%.

ESI-MS dla C53H91NO12 (m/z): [M+Na]⁺ 957,0.

Ή NMR (700 MHz, CDCI3) δ 6,41 (d, J = 9,7 Hz, 1H), 6,09 (dd, J = 10,9, 3,1 Hz, 1H), 5,77 (dd, J = 10,8, 1,7 Hz, 1H), 4,50-4,46 (rn, 1Η), 4,24 (q, J=6,6 Hz, 1H), 4,19 (d, J = 10,4 Hz, 1H), 4,05 (dt, J = 10,6,7,1 Hz, 1H), 3,93 (dd, J= 10,9, 4,6 Hz, 1H), 3,88 (dt, J= 10,6, 6,8 Hz, 1H), 3,66 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 3,58 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 3,38-3,35 (m, 1H), 2,82 (td, J= 11,1, 3,3 Hz, 1H), 2,71 -2,65 (m, 1H), 2,62 (d, J = 11,0 Hz, 1H), 2,23-0,63 (m, 76H) ppm.

¹³C NMR (176 MHz, CDCI3) δ 218,1, 184,8, 157,7, 128,5, 123,0, 106,6, 99,0, 88,5, 76,9, 76,0, 75,8, 74,8, 71,5, 69,6, 68,2, 65,2, 56,0, 51,4, 49,5, 49,0, 40,7, 38,8, 37,2, 36,0, 32,5, 32,5, 32,4, 32,0, 29,9, 29,8, 29,8, 29,7, 29,6, 29,4, 29,2, 28,1, 27,6, 27,0, 25,9, 24,1, 22,8, 20,1, 19,9, 17,7, 16,0, 15,5, 14,8, 14,2, 13,2, 12,5, 12,2, 10,8, 6,8, 6,70 ppm.

Przykład FLC-00450-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00445-1, przy czym zamiast chlorku 5-chloropentanoilu do mieszaniny reakcyjnej dodano chloromrówczan 4-chlorofenylu (2,2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 83%.

ESI-MS dla C₄9H7₄CINOi2^Ł(m/z): [M+Na]⁺ 927, [M-H]' 903.

Ή NMR (700 MHz, CDCI3) δ 7,42 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 7,30 - 7,22 (m, 4H), 6,18 (dd, J = 10,9, 2,9 Hz, 1H), 5,85 (dd, J= 10,8, 1,5 Hz, 1H), 4,54 (m, 1H), 4,30 (q, J=6,5Hz, 1H), 4,24 (d, J = 10,3 Hz, 1H), 3,93 (dd, J= 10,9, 4,4 Hz, 1H), 3,68-3,64 (m, 1H), 3,59 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 3,39 (d, J= 10,9 Hz, 1H), 2,87 (td, J = 11,0, 2,9 Hz, 1H), 2,70 (dd, J= 10,2, 7,3 Hz, 1H), 2,66 (d, J = 10,4 Hz, 1H), 2,23 (dd, J = 21,2, 11,5 Hz, 1H), 2,12 (qd, J = 12,6, 3,9 Hz, 1H), 2,05-0,87 (m, 41H), 0,85 (d, J= 7,2 Hz, 3H), 0,77 (t, J = 7,4 Hz, 3H), 0,74 (d, J = 6,6 Hz, 3H), 0,71 (d, J = 6,9 Hz, 3H) ppm.

¹³C NMR (176 MHz, CDCI3) δ 217,9, 185,3, 155,2, 149,9, 130,0, 128,8, 127,2, 123,7, 123,5, 106,3, 98,6, 88,5, 75,9, 75,7, 75,2, 71,5, 69,7, 68,2, 55,8, 51,4, 49,2, 48,8, 40,4, 38,6, 37,6, 35,9, 32,4, 32,4, 31,9, 29,9, 29,7, 29,7, 29,4, 27,9, 27,7, 26,8, 24,1, 22,7, 20,0, 19,8, 17,5, 15,9, 15,3, 14,7, 14,1, 13,1, 12,2, 12,1, 10,7, 6,6, 6,6 ppm.

170

PL 248049 Β1

Przykład FLC-00451-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00445-1, przy czym zamiast chlorku 5-chloropentanoilu do mieszaniny reakcyjnej dodano chloromrówczan 2-benzyloksyetylowy (2,2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 75%.

ESI-MS dla C52H81NO13 (m/z): [M+Ńa]⁺ 951, [M-H]' 927.

Ή NMR (700 MHz, CDCI3) δ 7,36 - 7,31 (m, 4H), 7,29 - 7,25 (m, 1H), 6,57 (d, J = 9,5 Hz, 1H), 6,12(dd, J= 10,8, 2,8 Hz, 1H), 5,79 (d, J = 10,6 Hz, 1H), 4,59-4,49 (m, 3H), 4,35 (ddd, J= 17,0, 12,4, 6,2 Hz, 1H), 4,28-4,22 (m, 1H), 4,21 (d, J = 10,2 Hz, 1H), 4,10 (dt, J = 11,0, 3,9 Hz, 1H), 3,96 (dd, J = 10,6, 4,3 Hz, 1H), 3,72 - 3,57 (m, 4H), 3,35 (d, J = 11,9 Hz, 1H), 2,85 (dd, J = 10,4, 9,2 Hz, 1H), 2,73-2,67 (m, 1H), 2,65 (d, J = 10,2 Hz, 1H), 2,23 - 2,17 (m, 1H), 2,10 - 1,10 (m, 32H), 1,01 (dt, J = 7,4, 5,5 Hz, 3H), 0,95 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 0,92 - 0,88 (m, 6H), 0,84 (d, J = 7,2 Hz, 3H), 0,77 (t, J = 7,4 Hz, 3H), 0,74 (d, J= 6,6 Hz, 3H), 0,71 (d, J= 6,8 Hz, 3H) ppm.

¹³C NMR (176 MHz, CDCI3) δ 218,0, 184,7, 157,2, 138,4, 128,3, 128,2, 127,7, 127,5, 122,9, 106,4, 98,9, 88,4, 76,7, 75,9, 75,7, 74,6, 73,0, 71,4, 68,4, 68,2, 63,2, 55,9, 51,1, 49,4, 49,1,40,5, 38,6, 37,1, 35,9, 32,4, 32,4, 32,2, 29,8, 29,7, 29,7, 28,0, 27,4, 26,8, 23,9, 19,9, 19,8, 17,6, 15,9, 14,6, 13,1, 12,4, 12,1, 10,8, 6,7, 6,6 ppm.

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00445-1, przy czym zamiast chlorku 5-chloropentanoilu do mieszaniny reakcyjnej dodano chloromrówczan 2-(2-chloroetoksy)etylu (2,2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 70%.

ESI-MS dla C47H78CINO13 (m/z): [M+Na]⁺ 923,0.

Ή NMR (700 MHz, CDCI3) δ 6,55 (d, J = 9,7 Hz, 1H), 6,10 (dd, J = 10,9, 3,1 Hz, 1H), 5,76 (dd, J = 10,8, 1,8 Hz, 1H), 4,49-4,45 (m, 1H), 4,25 (qd, J= 11,5, 6,2 Hz, 2H), 4,18 (dd, J= 10,4, 1,4 Hz, 1H), 4,06 - 4,01 (m, 1H), 3,93 (dd, J = 11,0, 4,9 Hz, 1H), 3,74 - 3,67 (m, 2H), 3,66 - 3,63 (m, 3H), 3,60-3,56 (m,3H),3,36 (dd, J = 12,1,2,0 Hz, 1H), 2,82 (td, J= 11,0, 3,3 Hz, 1H), 2,69-2,64 (m, 1H), 2,62 (d, J = 9,7 Hz, 1H), 2,20 - 0,64 (m, 57H) ppm.

¹³C NMR (176 MHz, CDCI3) δ 218,1, 184,8, 157,2, 128,2, 123,1, 106,5, 99,0, 88,5, 76,8, 76,0, 75,8, 74,8, 71,5, 71,2, 69,7, 69,4, 68,2, 63,4, 56,0, 51,3, 49,5, 49,1, 43,0, 40,6, 38,8, 37,2, 36,0, 32,5, 32,5, 32,5, 30,0, 29,8, 28,1, 27,5, 26,9, 24,0, 20,0, 19,9, 17,6, 16,0, 15,5, 14,8, 13,2, 12,5, 12,2, 10,8, 6,8, 6,69 ppm.

PL 248049 Β1

171

Przykład FLC-00459-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00445-1, przy czym zamiast chlorku 5-chloropentanoilu do mieszaniny reakcyjnej dodano chloromrówczan 2-metoksyetylu (2,2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 45%.

ESI-MS dla C46H77NO13 (m/z): [M+Na]⁺ 874,9.

Ή NMR (700 MHz, CDCI3) δ 6,53 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 6,10 (dd, J = 10,8, 2,9 Hz, 1H), 5,76 (dd, J = 10,7, 1,2 Hz, 1H), 4,47 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 4,26 - 4,20 (m, 2H), 4,18 (d, J = 10,3 Hz, 1H), 4,06 (dt, J = 11,3, 5,5 Hz, 1H), 3,93 (dd, J = 10,9, 4,6 Hz, 1H), 3,65 (dd, J = 10,2, 1,5 Hz, 1H), 3,58 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 3,56-3,49 (m, 2H), 3,37 (dd, J= 12,1, 1,7 Hz, 1H), 3,33 (d, J= 0,7 Hz, 3H), 2,83 (td, J = 11,0, 3,0 Hz, 1H), 2,67 (dq, J= 14,6, 7,2 Hz, 1H), 2,62 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 2,23-0,63 (m, 57H) ppm.

¹³C NMR (176 MHz, CDCI3) δ 218,2, 184,8, 157,3, 128,3, 123,1, 106,5, 99,0, 88,5, 76,8, 76,0, 75,8, 74,8, 71,5, 70,7, 69,7, 68,3, 63,4, 58,9, 56,0, 51,3, 49,5, 49,2, 40,7, 38,8, 37,2, 36,0, 32,5, 32,5, 32,4, 29,8, 28,1,27,5, 26,9, 24,0, 20,0, 19,9, 17,7, 16,0, 15,5, 14,7, 13,2, 12,5, 12,2, 10,9, 6,8, 6,70 ppm.

Przykład FLC-00460-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00445-1, przy czym zamiast chlorku 5-chloropentanoilu do mieszaniny reakcyjnej dodano chloromrówczan 2-fenoksyetylu (2,2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 57%.

ESI-MS dla C51H79NO13 (m/z): [M+Na]⁺ 936,9.

Ή NMR (700 MHz, CDCI3) δ 7,26 - 7,23 (m, 2H), 6,93 - 6,90 (m, 1H), 6,88 (dt, J = 9,2, 1,7 Hz, 2H), 6,70 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 6,11 (dd, J= 10,9, 3,1 Hz, 1H), 5,77 (dd, J = 10,8, 1,9 Hz, 1H), 4,52-4,49 (m, 1H), 4,47 (dt, J = 11,8, 6,0 Hz, 1H), 4,24 (q, J = 6,9 Hz, 1H), 4,22-4,17 (m, 2H), 4,14-4,09 (m, 2H), 3,92 (dd, J= 11,0, 4,8 Hz, 1H), 3,65 (dd, J= 10,1, 1,9 Hz, 1H), 3,58 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 3,33 (dd, J = 12,1, 2,0 Hz, 1H), 2,83 (td, J= 11,0, 3,3 Hz, 1H), 2,67 (dq, J= 10,3,7,2 Hz, 1H), 2,63 (d, J=9,8Hz, 1H), 2,23 - 2,17 (m, 1H), 2,10 - 0,64 (m, 56H) ppm.

¹³C NMR (176 MHz, CDCI3) δ 218,1, 184,9, 158,8, 157,2, 129,5, 128,1, 123,2, 120,8, 114,7, 106,5, 98,9, 88,5, 76,8, 76,0, 75,8, 74,9, 71,5, 69,7, 68,2, 65,9, 62,5, 56,0, 51,3, 49,5, 49,0, 40,6, 38,8, 37,4, 36,0, 32,5, 32,5, 32,4, 29,9, 28,1, 27,6, 26,9, 24,1, 20,0, 19,9, 17,6, 16,0, 15,5, 14,8, 13,2, 12,4, 12,2, 10,8, 6,8, 6,7 ppm.

172

PL 248049 Β1

Przykład FLC-00461-1

100 mg C20-amino SAL (1 eq) zmieszano z ΒοοςΟ (1,5 eq) i TEA (2 eq) w DCM. Reakcję prowadzono w RT (kontrola TLC i LC-MS). Mieszaninę poreakcyjną zawieszono na silikażelu i oczyszczono przy użyciu chromatografu z detektorem ELS, stosując kolumnę wypełnioną krzemionką. Odpowiednie frakcje połączono i zatężono, pozostałość rozpuszczono w DCM i przemyto dwukrotnie 0,25 M Na2CO3. Produkt uzyskano z wydajnością 65%.

ESI-MS dla C47H79NO12 (m/z): [M+Na]⁺ 873,0, [M-H]' 849,0,

Ή NMR (700 MHz, CD2CI2) δ 6,14 (dd, J= 10,9, 3,2 Hz, 1H), 5,98 (d, J= 9,8 Hz, 1H), 5,72 (dd, J = 10,8, 1,8 Hz, 1H), 4,45 (ddd, J= 9,8, 3,0, 1,9 Hz, 1H), 4,20 (q, J= 6,8 Hz, 1H), 4,12 (dd, J= 10,5, 1,7 Hz, 1H), 3,89 (dd, J = 11,0, 4,8 Hz, 1H), 3,71 -3,68 (m, 1H), 3,67-3,66 (m, 1H), 3,47 (dd, J= 12,2, 2,4 Hz, 1H), 2,82-2,75 (m, 2H), 2,70 (dd, J= 10,9, 1,4 Hz, 1H), 2,28-2,22 (m, 1H), 2,21 -2,14 (m, 1H), 2,02-0,73 (m, 63H) ppm.

¹³C NMR (176 MHz, CD2CI2) δ 219,0, 184,1, 156,0, 129,4, 128,5, 122,8, 106,7, 99,0, 88,4, 78,7, 76,9, 76,1, 75,7, 74,2, 71,1, 69,6, 68,3, 56,1, 50,9, 49,2, 48,8, 40,6, 38,7, 37,0, 35,8, 32,5, 32,3, 32,2, 29,0, 28,1,26,8, 26,7, 23,6, 19,9, 19,8, 17,3, 15,6, 15,3, 14,3, 12,9, 12,8, 12,1, 10,6, 6,5, 6,3 ppm.

Przykład FLC-00466-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00445-1, przy czym zamiast chlorku 5-chloropentanoilu do mieszaniny reakcyjnej dodano chloromrówczan izobutylu (2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 59%.

ESI-MS dla C47H79NO12 (m/z): [M+Na]⁺ 872,9, [M-H]' 848,9.

Ή NMR (700 MHz, CD2CI2) δ 6,35 (d, J = 9,7 Hz, 1H), 6,15 (dd, J = 10,9, 3,1 Hz, 1H), 5,73 (dd, J = 10,8, 1,6 Hz, 1H), 4,48 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 4,21 - 4,15 (m, 1H), 4,13 (dd, J = 10,5, 1,7 Hz, 1H), 3,93 - 3,87 (m, 2H), 3,72 - 3,69 (m, 1H), 3,66 - 3,64 (m, 1H), 3,49 - 3,44 (m, 1H), 2,83 - 2,75 (m, 2H), 2,72 - 2,67 (m, 1H), 2,26 - 0,72 (m, 64H) ppm.

¹³C NMR (176 MHz, CD2CI2) δ219,1, 184,2, 157,1, 128,3, 122,9, 106,5, 99,1,88,5, 77,0, 76,1,75,8, 74,2, 71,2, 71,0, 69,7, 68,3, 56,1,50,9, 49,4, 49,1,40,6, 38,6, 37,0, 35,8, 32,5, 32,2, 32,1,28,8, 28,1,28,1, 26,8, 26,7, 23,6, 19,9, 19,7, 19,0, 18,9, 17,3, 15,7, 15,3, 14,3, 12,8, 12,5, 12,1, 10,6, 6,5, 6,3 ppm.

PL 248049 Β1

173

Przykład FLC-00480-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00445-1, przy czym zamiast chlorku 5-chloropentanoilu do mieszaniny reakcyjnej dodano chloromrówczan 2-(tert-butoksy)etylu (2,2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 53%.

ESI-MS dla C49H82NO13 (m/z): [M+Ńa]⁺ 917,3, [M-H]' 893,0.

Ή NMR (500 MHz, CDCI3) δ 6,52 (d, J = 9,7 Hz, 1H), 6,09 (dd, J = 10,9, 3,0 Hz, 1H), 5,75 (dd, J = 10,8, 1,4 Hz, 1H), 4,46 (d, J= 9,6 Hz, 1H), 4,23 (q, J= 6,6 Hz, 1H), 4,17 (d, J = 10,2 Hz, 1H), 4,12 (ddd, J = 10,5, 7,9, 6,5 Hz, 1H), 4,00-3,89 (m, 2H), 3,64 (d, J=9,0 Hz, 1H), 3,56 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 3,50 - 3,42 (m, 2H), 3,35 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 2,81 (td, J = 11,0, 3,1 Hz, 1H), 2,69 - 2,59 (m, 2H), 2,21 - 2,12 (m, 1H), 2,07 - 0,61 (m, 64H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CDCI3) δ 218,1, 184,8, 157,3, 128,2, 123,1, 106,5, 98,9, 88,5, 76,8, 75,9, 75,8, 74,8, 73,2, 71,5, 69,6, 68,2, 64,0, 59,8, 55,9, 51,3, 49,5, 49,0, 40,6, 38,7, 37,2, 36,0, 32,5, 32,4, 29,9, 28,1, 27,6, 27,5, 26,9, 24,1,20,0, 19,9, 17,6, 16,0, 15,5, 14,8, 13,2, 12,4, 12,2, 10,8, 6,8, 6,69 ppm.

Przykład FLC-00481-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00445-1, przy czym zamiast chlorku 5-chloropentanoilu do mieszaniny reakcyjnej dodano chloromrówczan 2,5,8,11-tetraoksytridekan-13-ylu (2,2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 61%.

ESI-MS dla C52H89NO16 (m/z): [M+Na]⁺ 1007,3, [M-H]' 983,1.

Ή NMR (500 MHz, CDCI3) δ 6,53 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 6,09 (dd, J = 10,9, 3,0 Hz, 1H), 5,74 (dd, J = 10,8, 1,4 Hz, 1H), 4,45 (d, J= 9,5 Hz, 1H), 4,20 (ddd, J= 21,3, 14,2, 8,6 Hz, 3H), 4,04 (dt, J= 11,5, 5,9 Hz, 1H), 3,91 (dd, J= 10,9, 4,5 Hz, 1H), 3,66 - 3,51 (m, 18H), 3,35 (d, J = 9,0 Hz, 4H), 2,81 (td, J = 11,0, 3,0 Hz, 1H), 2,69-2,58 (m, 2H), 2,21 -0,61 (m, 55H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CDCI3) δ 218,1, 184,9, 157,2, 128,2, 123,1, 106,4, 98,9, 88,5, 76,7, 75,9, 75,8, 74,8, 72,0, 71,4, 70,7, 70,7, 70,6, 70,5, 69,6, 69,2, 68,2, 63,3, 59,1, 55,9, 51,3, 49,5, 49,0, 40,6, 38,7, 37,2, 35,9, 32,5, 29,9, 28,1, 27,5, 26,9, 24,0, 20,0, 19,8, 17,6, 16,0, 15,5, 14,7, 13,2, 12,5, 12,2, 10,8, 6,8, 6,7 ppm.

174

PL 248049 Β1

Przykład FLC-00483-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00445-1, przy czym zamiast chlorku 5-chloropentanoilu do mieszaniny reakcyjnej dodano chloromrówczan 2-(metylosulfonylo)etylu (2,2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 36%.

ESI-MS dla C46H77NO14S (m/z) [M+Na]⁺ 922,8, [M-H]' 899,1.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 6,75 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 6,13 (dd, J = 10,8, 2,9 Hz, 1H), 5,66 (dd, J = 10,8, 1,3 Hz, 1H), 4,54 - 4,47 (m, 1H), 4,44 (d, J = 9,5 Hz, 1H), 4,25 (dt, J = 14,0, 3,9 Hz, 1H), 4,22-4,17 (m, 1H), 4,09 (d, J = 10,4 Hz, 1H), 3,84 (dd, J = 10,9, 4,6 Hz, 1H), 3,61 (d, J = 10,1 Hz, 2H), 3,43 (d, J = 10,5 Hz, 1H), 3,35 - 3,23 (m, 2H), 2,94 (s, 3H), 2,82 - 2,64 (m, 3H), 2,23 - 0,63 (m, 56H)ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 219,2, 184,8, 156,5, 128,0, 123,8, 106,5, 99,3, 88,9, 77,0, 76,3, 76,3, 74,7, 71,5, 70,3, 68,6, 58,7, 56,3, 54,5, 51,2, 49,8, 49,4, 42,5, 40,9, 38,9, 37,6, 36,1, 32,8, 32,6, 29,6, 28,4, 27,3, 27,0, 23,9, 20,2, 20,1, 17,6, 16,0, 15,7, 14,7, 13,2, 13,0, 12,4, 10,9, 6,8, 6,70 ppm.

Przykład FLC-00484-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00445-1, przy czym zamiast chlorku 5-chloropentanoilu do mieszaniny reakcyjnej dodano chloromrówczan 2-chlorobenzylu (2,2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 18%.

ESI-MS dla C5oH76CINOi₂ ^Ł(m/z): [M+Na]⁺ 941,1, [M-H]'916,9.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 7,64 (d, J= 7,5 Hz, 1H), 7,32 (d, J= 7,8 Hz, 1H), 7,24 (dt, J= 26,5, 7,2 Hz, 2H), 6,67 (d, J=9,6Hz, 1H), 6,14 (dd, J = 10,8, 2,9 Hz, 1H), 5,73 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 5,32 (d, J = 14,2 Hz, 1H), 4,98 (d, J = 14,2 Hz, 1Η), 4,50 (d, J= 9,6 Hz, 1H), 4,19 (q, J= 6,7 Hz, 1Η), 4,09 (d, J = 10,4 Hz, 1H), 3,84 (dd, J = 10,9, 4,3 Hz, 1H), 3,64 (d, J = 19,6 Hz, 1Η), 3,43 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 2,79-2,70 (m, 2H), 2,67 (d, J= 10,5 Hz, 1H), 2,25-0,64 (m, 58H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 219,4, 184,8, 156,9, 135,3, 129,7, 129,3, 129,2, 128,8, 128,3, 127,3, 123,5, 106,7, 99,4, 88,9, 77,2, 76,4, 76,3, 74,6, 71,5, 70,1, 68,7, 63,6, 56,4, 51,2, 49,9, 49,5, 40,9, 39,0, 37,6, 36,2, 32,8, 32,6, 32,6, 30,1, 29,5, 28,5, 27,2, 27,1, 23,9, 20,1, 17,7, 16,1, 15,7, 14,7, 13,2, 12,6, 12,5, 11,0, 6,9, 6,8 ppm.

PL 248049 Β1

175

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00445-1, przy czym zamiast chlorku 5-chloropentanoilu do mieszaniny reakcyjnej dodano chloromrówczan 3,5-dichlorobenzylu (2,2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 68%.

ESI-MS dla C50H75CI2NO12 (m/z): [M+Na]⁺ 977,2.

Ή NMR (500 MHz, CDCI3) δ 7,29 (d, J = 1,6 Hz, 2H), 7,24 (d, J = 1,7 Hz, 1H), 6,73 (d, J = 9,7 Hz, 1H), 6,11 (dd, J = 10,9, 3,0 Hz, 1H), 5,77 (dd, J= 10,8, 1,6 Hz, 1H), 5,04 (d, J = 13,0 Hz, 1H), 4,87 (d, J = 13,0 Hz, 1H), 4,60 (s, 1H), 4,52-4,45 (m, 1H), 4,27 (q, J= 6,7 Hz, 1H), 4,18 (d, J = 10,3 Hz, 1H), 3,91 (dd, J = 11,0, 4,7 Hz, 1H), 3,64 (dd, J= 10,1, 1,6 Hz, 1H), 3,56 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 3,35 (dd, J = 12,0, 1,6 Hz, 1H), 2,80 (td, J= 11,0, 3,1 Hz, 1H), 2,71-2,59 (m, 2H), 2,17-0,60 (m, 56H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CDCI3) δ 218,1, 185,1, 157,0, 140,6, 134,9, 127,9, 126,5, 123,2, 106,3, 98,9, 88,6, 76,5, 75,9, 75,8, 74,8, 71,5, 69,7, 68,2, 65,2, 55,9, 51,3, 49,5, 49,1, 40,6, 38,7, 37,3, 36,0, 32,5, 32,5, 32,4, 30,1,28,1,27,7, 26,9, 24,1, 19,9, 17,6, 16,0, 15,5, 14,8, 13,2, 12,4, 12,2, 10,8, 6,8, 6,7 ppm.

Przykład FLC-00497-1

100 mg C20-amino SAL (1 eq) zmieszano z imidazolo-1-karboksylanem 2-(dimetyloamino)etylu (3,5 eq) w THF. Reakcję prowadzono w RT (kontrola TLC i LC-MS). Mieszaninę poreakcyjną rozcieńczono DCM i przemyto dwukrotnie H2O. Warstwę organiczną zawieszono na silikażelu i oczyszczono przy użyciu chromatografu z detektorem ELS, stosując kolumnę wypełnioną krzemionką. Odpowiednie frakcje połączono i zatężono, pozostałość rozpuszczono w DCM i przemyto dwukrotnie 0,25 M Na2CO3. Produkt uzyskano z wydajnością 38%.

ESI-MS dla C47H80N2O12 (m/z): [M+H]⁺ 865,9, [M-H]' 864,0.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 6,45 (d, J = 9,4 Hz, 1H), 6,10 (dd, J = 10,8, 2,4 Hz, 1H), 5,66 (d, J= 10,6 Hz, 1H), 4,42 (d, J=9,0Hz, 1H), 4,23 - 4,12 (m, 2H), 4,11 - 3,99 (m, 2H), 3,87 - 3,79 (m, 1H), 3,61 (d, J = 9,6 Hz, 2H), 3,40 (d, J = 11,2 Hz, 1H), 2,82 - 2,68 (m, 2H), 2,60 (ddd, J = 20,6, 16,3, 9,1 Hz, 3H), 2,31 (s, 6H), 2,24 - 2,14 (m, 1H), 2,04 - 0,63 (m, 56H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 219,3, 184,6, 174,9, 157,0, 128,3, 123,5, 106,7,99,3,88,8, 77,3, 76,3, 74,7, 71,5, 70,1, 68,7, 62,0, 57,5, 56,4, 51,2, 49,7, 49,4, 45,1,40,9, 38,9, 37,5, 36,1, 32,8, 32,6, 32,5, 30,1, 29,6, 28,5, 27,2, 24,0, 22,1, 20,3, 20,1, 17,7, 16,1, 15,7, 14,8, 13,2, 13,0, 12,5, 11,0, 6,9, 6,7 ppm.

176

PL 248049 Β1

Przykład FLC-00498-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00497-1, przy czym zamiast imidazolo-1-karboksylanu 2-(dimetyloamino)etylu do mieszaniny reakcyjnej dodano imidazolo-1-karboksylan 2-(dimetyloamino)propylu (3,5 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 34%.

ESI-MS dla C48H82N2O12 (m/z): [M+H]⁺ 880,0, [M-H]' 878,0.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 6,40 (d, J= 9,6 Hz, 1H), 6,11 (dd, J= 10,8, 3,1 Hz, 1H), 5,67 (dd, J = 10,8, 1,3 Hz, 1H), 4,91 - 4,73 (m, 1H), 4,43 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 4,16 (dd, J = 14,2, 7,0 Hz, 1H), 4,11 -4,02 (m, 3H), 3,90 (dt, J= 10,7, 6,6 Hz, 1H), 3,84 (dd, J= 10,9, 4,4 Hz, 1H), 3,66-3,60 (m, 2H), 3,47 - 3,39 (m, 2H), 2,80 - 2,71 (m, 2H), 2,65 (d, J = 10,6 Hz, 1H), 2,36 - 2,29 (m, 1H), 2,27 - 2,20 (m, 2H), 2,17 (s, 6H), 2,10 - 0,64 (m, 55H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 219,4, 184,7, 157,4, 128,5, 123,4, 106,9, 99,3, 88,8, 77,2, 76,5, 76,2, 74,6, 71,5, 70,0, 68,6, 63,5, 56,4, 51,3, 49,6, 49,5, 45,5, 40,9, 38,9, 37,6, 36,2, 32,8, 32,6, 32,5, 30,1,29,7, 28,4, 27,6, 27,1, 27,1, 24,0, 20,3, 20,0, 17,7, 16,1, 15,6, 14,8, 13,2, 12,9, 12,5, 11,0, 6,9, 6,7 ppm.

Przykład FLC-00509-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00497-1, przy czym zamiast imidazolo-1-karboksylanu 2-(dimetyloamino)etylu do mieszaniny reakcyjnej dodano imidazolo-1-karboksylan 2-cyjanoetylu (3,5 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 55%.

ESI-MS dla C46H74N2O12 (m/z): [M+Na]⁺ 869,8, [M-H]' 846,2.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 6,85 (d, J = 9,5 Hz, 1H), 6,13 (dd, J = 10,8, 3,0 Hz, 1H), 5,66 (dd, J = 10,8, 1,5 Hz, 1H), 4,44 (d, J= 9,4 Hz, 1H), 4,30 (dt, J= 10,9, 7,1 Hz, 1H), 4,19 (q, J= 6,7 Hz, 1H), 4,09 (d, J = 10,5 Hz, 1H), 4,04 (dt, J = 10,9, 6,8 Hz, 1H), 3,83 (dd, J = 10,9, 4,3 Hz, 1H), 3,61 (d, J = 10,0 Hz, 2H), 3,41 (d, J = 10,5 Hz, 1H), 2,83-2,70 (m, 2H), 2,68 (t, J = 7,0 Hz, 3H), 2,19 (dt, J= 12,8, 9,9 Hz, 1H), 2,02 - 0,64 (m, 56H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 219,3, 184,9, 156,4, 127,7, 123,9, 117,5, 106,7, 99,2, 88,8, 77,2, 76,3, 76,3, 75,0, 71,6, 70,1, 68,6, 59,4, 56,3, 51,2, 49,4, 40,9, 38,9, 37,8, 36,2, 32,8, 32,6, 32,6, 30,1, 29,9, 28,4, 27,4, 27,1,24,1,20,3, 20,2, 18,4, 17,6, 16,1, 15,7, 14,8, 13,2, 12,7, 12,5, 11,0, 6,8, 6,7 ppm.

PL 248049 Β1

177

Przykład FLC-00530-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00445-1, przy czym zamiast chlorku 5-chloropentanoilu do mieszaniny reakcyjnej dodano chloromrówczan 3-chloropropylu (2,2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 63%.

ESI-MS dla C^sCINOi^m/z): [M+Na]⁺ 892,9, [M-H]' 868,9.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 6,45 (d, J= 9,6 Hz, 1Η), 6,11 (dd, J = 10,9, 3,1 Hz, 1H), 5,66 (dd, J= 10,8, 1,7 Hz, 1H), 4,49-4,42 (m, 1H), 4,25 (ddd, J= 11,2, 8,3, 4,2 Hz, 1H), 4,19 (q, J= 6,7 Hz, 1H), 4,12-4,07 (m, 1H), 3,92 (dt, J = 10,7, 5,2 Hz, 1H), 3,83 (dd, J = 11,0, 4,5 Hz, 1H), 3,78 (ddd, J= 11,0, 7,9, 6,0 Hz, 1H), 3,73 - 3,66 (m, 1H), 3,63 - 3,53 (m, 3H), 3,41 (dd, J = 12,0, 1,8 Hz, 1H), 2,81 - 2,70 (m, 2H), 2,67 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 2,20 - 0,65 (m, 58H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 219,2, 184,9, 157,1, 128,2, 123,6, 106,7, 99,2, 88,8, 77,2, 76,2, 75,0, 71,5, 70,0, 68,6, 61,6, 56,4, 51,3, 49,5, 49,3, 42,4, 40,9, 39,0, 37,5, 36,2, 32,8, 32,6, 32,5, 30,1, 29,6, 28,4, 27,5, 27,1, 24,2, 20,2, 20,0, 17,6, 16,1, 15,7, 14,8, 13,2, 12,8, 12,4, 10,9, 6,8, 6,7 ppm.

Przykład FLC-00531-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00445-1, przy czym zamiast chlorku 5-chloropentanoilu do mieszaniny reakcyjnej dodano chloromrówczan 1,1,1,3,3,3-heksafluoroizopropylu (2,2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 19%.

ESI-MS dla C₄₆H7iF₆NOi₂ (m/z): [M+Na]⁺ 967,2, [M-H]' 943,1.

Ή NMR (500 MHz, CD₂CI₂) δ 7,11 (d, J=8,9Hz, 1H), 6,16 (dd, J = 10,9, 3,1 Hz, 1H), 5,82-5,76 (m, 1H), 5,74 (dd, J = 10,9, 1,5 Hz, 1H), 4,52 (dd, J = 7,0, 2,1 Hz, 1H), 4,14 (q, J = 6,7 Hz, 1H), 4,10 (dd, J = 10,5, 1,2 Hz, 1H), 3,86 (dd, J = 10,8, 4,4 Hz, 1H), 3,61 (dd, J = 10,2, 1,9 Hz, 1H), 3,44 (dd, J = 12,1,2,1 Hz, 1H), 2,79-2,72 (m, 2H), 2,66 (d, J=9,9Hz, 1H), 2,21 -0,66 (m, 58H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 219,5, 184,9, 153,9, 127,0, 124,1, 106,3, 99,5, 89,3, 77,5, 76,5, 74,4, 71,5, 70,0, 69,0, 56,5, 51,3, 51,1, 49,2, 40,9, 39,0, 37,6, 36,1, 32,8, 32,4, 30,1, 28,8, 28,5, 27,1, 26,9, 23,9, 20,3, 19,9, 17,7, 16,0, 15,6, 14,7, 13,2, 12,5, 11,1, 6,9, 6,7 ppm.

178

PL 248049 Β1

Przykład FLC-00547-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00497-1, przy czym zamiast imidazolo-1-karboksylanu 2-(dimetyloamino)etylu do mieszaniny reakcyjnej dodano węglan 2-(4-metylotiazolojetylu 4-nitrofenylu (3,5 eq) i dodatkowo TEA (8 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 37%.

ESI-MS dla C49H78N2O12S (m/z): [M+H]⁺ 920,1, [M-H]' 917,9.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 8,53 (s, 1H), 6,61 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 6,12 (dd, J = 10,8, 3,0 Hz, 1H), 5,67 (dd, J = 10,8, 1,5 Hz, 1H), 4,44 (d, J= 9,5 Hz, 1H), 4,17 (dt, J= 9,1, 5,9 Hz, 2H), 4,09 (d, J = 10,4 Hz, 1H), 4,02 - 3,95 (m, 1H), 3,84 (dd, J = 10,9, 4,4 Hz, 1H), 3,41 (dd, J = 12,0, 1,6 Hz, 1H), 3,11 -2,98 (m, 2H), 2,75 (tdd, J = 14,4, 10,7, 5,2 Hz, 2H), 2,66 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 2,36 (s, 3H), 2,27-0,64 (m, 59H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 219,3, 184,8, 157,0, 150,3, 149,7, 128,2, 127,0, 123,7, 106,8, 99,3, 88,8, 77,3, 76,4, 76,3, 74,8, 71,5, 70,0, 68,6, 64,5, 56,4, 51,3, 49,6, 49,4, 40,9, 38,9, 37,7, 36,2, 32,8, 32,6, 32,6, 29,9, 28,4, 27,2, 27,1, 26,5, 24,1, 20,3, 20,1, 17,7, 16,1, 15,6, 15,0, 14,8, 13,2, 12,8, 12,5, 10,9, 6,8, 6,7 ppm.

Przykład FLC-00551-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00497-1, przy czym zamiast imidazolo-1-karboksylanu 2-(dimetyloamino)etylu do mieszaniny reakcyjnej dodano imidazolo-1-karboksylan 2-cyjanopropan-2-ylu (3,5 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 34%.

ESI-MS dla C47H76N2O12 (m/z): [M+Na]⁺ 884,3, [M-H]' 860,2.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 6,69 (d, J = 9,5 Hz, 1H), 6,13 (dd, J = 10,9, 3,1 Hz, 1H), 5,67 (dd, J = 10,8, 1,7 Hz, 1H), 4,50 - 4,44 (m, 1H), 4,17 (q, J = 6,7 Hz, 1H), 4,09 (d, J = 9,7 Hz, 1H), 3,85 (dd, J = 11,0, 4,6 Hz, 1H), 3,64-3,59 (m, 2H), 3,43 (dd, J= 12,1, 1,8 Hz, 1H), 2,82-2,70 (m, 2H), 2,67 (d, J = 9,9Hz, 1H), 2,23 (dt, J = 13,0, 9,8 Hz, 1H), 2,07 - 0,65 (m, 62H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 219,3, 184,9, 154,8, 127,5, 123,9, 120,7, 106,7, 99,2, 88,9, 77,3, 76,3, 76,2, 74,8, 71,5, 70,0, 68,8, 68,7, 56,4, 51,1, 49,4, 49,4, 40,9, 38,9, 37,8, 36,2, 32,8, 32,6, 32,6, 30,1, 29,6, 28,4, 27,6, 27,4, 27,4, 27,1, 24,0, 20,4, 20,2, 17,7, 16,0, 15,6, 14,8, 13,4, 13,2, 12,5, 10,9, 6,8, 6,7 ppm.

PL 248049 Β1

179

Przykład FLC-00552-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00497-1, przy czym zamiast imidazolo-1-karboksylanu 2-(dimetyloamino)etylu do mieszaniny reakcyjnej dodano imidazolo-1-karboksylan 2-metylobut-3yn-2-ylu (3,5 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 23%.

ESI-MS dla C48H77NO12 (m/z): [M+Na]⁺ 883,1, [M-H]' 858,9.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 6,24 (d, J= 9,6 Hz, 1H), 6,11 (dd, J= 10,9, 3,1 Hz, 1H), 5,68 (dd, J = 10,8, 1,6 Hz, 1H), 4,48-4,40 (m, 1H), 4,14 (q, J = 6,8 Hz, 1H), 4,08 (dd, J= 10,4, 1,1 Hz, 1H), 3,86 (dd, J = 10,9, 4,5 Hz, 1H), 3,66-3,61 (m, 2H), 3,43 (dd, J= 12,2, 2,0 Hz, 1H), 2,81 -2,69 (m, 2H), 2,65 (d, J=9,7 Hz, 1H), 2,45 (s, 1H), 2,26 (dt, J= 13,1, 9,4 Hz, 1H), 2,16-0,64 (m, 62H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CDCI3) δ 221,4, 186,7, 157,3, 130,3, 125,5, 108,9, 101,3, 90,9, 79,3, 78,5, 78,2, 76,6, 73,5, 73,5, 73,2, 72,0, 70,7, 69,4, 58,5, 53,2, 51,5, 51,4, 42,9, 41,0, 39,6, 38,1, 34,8, 34,6, 34,6, 32,1, 31,7, 31,5, 31,3, 30,5, 29,2, 29,0, 26,0, 22,4, 22,3, 19,7, 18,1, 17,6, 16,7, 15,3, 15,2, 14,5, 13,0, 8,9, 8,7 ppm.

Przykład FLC-00559-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00497-1, przy czym zamiast imidazolo-1-karboksylanu 2-(dimetyloamino)etylu do mieszaniny reakcyjnej dodano węglan 1-metylopiperidyn-4-ylu 4-nitrofenylu (3,5 eq) i dodatkowo TEA (8 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 70%.

ESI-MS dla C49H82N2O13 (m/z): [M+H]⁺ 892,1, [M-H]' 890,0.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 6,24 (d, J= 9,6 Hz, 1H), 6,11 (dd, J= 10,8, 3,1 Hz, 1H), 5,68 (dd, J = 10,8, 1,5 Hz, 1H), 4,80 (d, J = 3,4 Hz, 1H), 4,56 (s, 1H), 4,47 - 4,43 (m, 1H), 4,17 (q, J = 6,7 Hz, 1H), 4,08 (d,J = 10,2 Hz, 1H), 3,85 (dd, J= 10,9, 4,4 Hz, 1H), 3,42 (dd,J=12,1, 1,8 Hz, 1H), 2,79 - 2,68 (m, 4H), 2,66 (d, J = 9,9 Hz, 1H), 2,24 (s, 3H), 2,23 - 0,64 (m, 64H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 219,3, 184,7, 156,7, 128,4, 123,4, 106,9, 99,4, 88,8, 77,2, 76,4, 76,2, 74,6, 71,5, 70,0, 68,7, 56,4, 51,2, 49,6, 49,5, 46,0, 40,9, 39,0, 37,5, 36,2, 32,8, 32,6, 32,6, 31,4, 31,2, 29,7, 28,4, 27,1, 24,0, 20,3, 20,1, 17,7, 16,1, 15,6, 14,7, 13,5, 13,2, 12,4, 11,0, 6,8, 6,73 ppm.

180

PL 248049 Β1

Przykład FLC-00570-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00497-1, przy czym zamiast imidazolo-1-karboksylanu 2-(dimetyloamino)etylu do mieszaniny reakcyjnej dodano węglan 2-morfolinoetylu 4-nitrofenylu (3,5 eq) i dodatkowo TEA (8 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 38%.

ESI-MS dla C49H82N2O13 (m/z): [M+H]⁺ 908,6, [M-H]' 905,9.

Ή NMR (500 MHz, CDCI3) δ 6,54 - 6,47 (m, J= 9,7 Hz, 1H), 6,10 (dd, J= 10,9, 3,0 Hz, 1H), 5,75 (dd, J= 10,8, 1,5 Hz, 1H), 4,62 (s, 1H), 4,47 (d, J= 9,6 Hz, 1H), 4,24 (dd, J= 17,4, 6,8 Hz, 2H), 4,18 (d, J = 10,3 Hz, 1H), 4,00 (dt, J= 11,1, 6,6 Hz, 1H), 3,91 (dd, J= 10,9, 4,5 Hz, 1H), 3,67 (t, J=4,6Hz, 4H), 3,64 (dd, J=9,4, 1,2 Hz, 1H), 3,36 (d, J = 10,6 Hz, 1H), 2,82 (td, J = 11,0, 3,1 Hz, 1H), 2,70-2,60 (m, 2H), 2,56 (t, J = 6,7 Hz, 2H), 2,46 (d, J = 4,7 Hz, 4H), 2,23 - 0,60 (m, 57H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CDCI3) δ 218,1, 184,9, 157,3, 128,1, 123,1, 106,4, 98,9, 88,5, 76,8, 75,9, 75,8, 74,8, 71,5, 69,6, 68,2, 67,2, 61,9, 57,5, 55,9, 54,0, 51,3, 49,5, 49,0, 40,6, 38,7, 37,2, 36,0, 32,5, 30,0, 28,1,27,6, 26,9, 24,1,20,0, 19,9, 17,6, 16,0, 15,5, 14,8, 13,2, 12,6, 12,2, 10,8, 6,8, 6,8 ppm.

Przykład FLC-00571-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00539-1, przy czym zamiast 3-metoksypropyloaminy do mieszaniny reakcyjnej dodano 2-hydroksymetylopirydynę (10 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 27%.

ESI-MS dla C49H76N2O12 (m/z): [M+H]⁺ 885,8, [M+Na]’ 908,0, [M-H]' 883,9.

Ή NMR (500 MHz, CDCI3) δ 8,47 (d, J = 4,4 Hz, 1H), 7,72 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,63 (td, J = 7,7, 1,4 Hz, 1H), 7,12 (dd, J = 6,8, 5,4 Hz, 1H), 6,69 (d, J=9,7 Hz, 1H), 6,11 (dd, J= 10,9, 2,9 Hz, 1H), 5,81 (dd, J = 10,8, 1,3 Hz, 1H), 5,42 (d, J = 14,6 Hz, 1H), 4,98 (d, J = 14,6 Hz, 1H), 4,62 (d, J= 36,6 Hz, 2H), 4,54 (d, J= 9,7 Hz, 1H), 4,28 (q, J= 6,5 Hz, 1H), 4,18 (d, J= 10,3 Hz, 1H), 3,91 (dd, J= 10,9, 4,4 Hz, 1H), 3,64 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 3,57 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 3,35 (dd, J = 19,0, 9,0 Hz, 1H), 3,10 (dd, J = 13,2, 6,6 Hz, 3H), 2,81 (td, J= 11,0, 2,9 Hz, 1H), 2,72-2,57 (m, 2H), 2,20-0,62 (m, 52H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CDCI3) δ 218,1, 185,1, 157,4, 157,0, 148,7, 136,8, 128,1, 123,2, 122,2, 121,4, 106,3, 99,0, 88,5, 76,6, 75,8, 74,9, 71,5, 69,7, 68,2, 66,9, 55,9, 51,3, 49,5, 49,1,42,4, 40,6, 38,7, 37,1, 36,0, 32,6, 32,5, 32,4, 29,9, 28,0, 27,8, 26,9, 24,0, 23,6, 20,0, 19,9, 17,6, 16,0, 15,5, 14,8, 13,2, 12,3, 12,1, 11,5, 10,8, 6,8 ppm.

PL 248049 Β1

181

Przykład FLC-00577-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00445-1, przy czym zamiast chlorku 5-chloropentanoilu do mieszaniny reakcyjnej dodano chloromrówczan 3-hydroksy-3-metylobutylu (2,2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 49%.

ESI-MS dla C₄₈H8iNOi3 (m/z): [M+Na]⁺ 903,0, [M-H]' 879,2.

Ή NMR (500 MHz, CDCI₃) δ 6,48 (d, J = 9,7 Hz, 1H), 6,09 (dd, J = 10,8, 2,7 Hz, 1H), 5,75 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 4,68 (s, 1H), 4,47 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 4,36 - 4,24 (m, 2H), 4,17 (d, J = 10,2 Hz, 1H), 4,05-3,96 (m, 1H), 3,92 (dd, J= 10,8, 4,2 Hz, 1H), 3,65 (d, J= 9,9 Hz, 1H), 3,55 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 3,35 (d, J = 11,3 Hz, 1H),2,84 (td, J= 10,8,2,7Hz, 1H), 2,65 (dt, J = 20,1, 8,5 Hz, 2H), 2,33 - 0,61 (m, 65H)ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CDCI3) δ 218,0, 184,9, 157,7, 128,4, 123,0, 106,3, 98,9, 88,4, 76,4, 75,9, 75,7, 74,9, 71,4, 70,0, 69,5, 68,1, 61,7, 55,9, 51,1, 49,6, 48,8, 42,2, 40,6, 38,7, 37,2, 35,9, 32,5, 32,4, 30,0, 29,8, 29,6, 28,1,27,8, 26,9, 24,0, 20,0, 17,6, 16,0, 15,5, 14,8, 13,2, 12,8, 12,2, 10,8, 6,8, 6,7 ppm.

Przykład FLC-00580-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00445-1, przy czym zamiast chlorku 5-chloropentanoilu do mieszaniny reakcyjnej dodano chloromrówczan tetrahydro-2H-piran-4-ylu (2,2 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 50%.

ESI-MS dla C48H79NO13 (m/z): [M+Na]⁺ 901,1, [M-H]' 877,1.

Ή NMR (500 MHz, CDCI3) δ 6,33 (d, J= 9,7 Hz, 1H), 6,10 (dd, J= 10,9, 2,9 Hz, 1H), 5,77 (d, J = 10,9 Hz, 1H), 4,76 (ddd, J = 13,2, 8,8, 4,0 Hz, 1H), 4,69 (s, 1H), 4,57 (s, 1H), 4,49 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 4,24 (q, J = 6,5 Hz, 1H), 4,19 (d, J = 10,2 Hz, 1H), 3,97 - 3,86 (m, 3H), 3,63 (d, J = 9,9 Hz, 1H), 3,56 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 3,43 (t, J = 10,5 Hz, 2H), 3,36 (d, J = 10,9 Hz, 1H), 2,83 (td, J = 10,9, 2,9 Hz, 1H), 2,65 (dt, J = 20,6, 9,8 Hz, 2H), 2,18 - 0,61 (m, 59H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CDCI3) δ 217,8, 184,9, 156,7, 128,0, 123,0, 106,4, 98,9, 88,4, 76,7, 75,7, 75,7, 74,7, 71,4, 69,8, 69,4, 68,1, 65,7, 55,8, 51,3, 49,4, 48,7, 40,5, 38,7, 36,9, 35,9, 32,4, 32,4, 32,2, 32,2, 29,6, 28,0, 27,6, 26,8, 24,1, 19,9, 19,8, 17,5, 15,9, 15,4, 14,6, 13,1, 13,0, 12,1, 10,7, 6,7, 6,6 ppm.

182

PL 248049 Β1

Przykład FLC-00604-1

100 mg C20-amino-SAL (1 eq) zmieszano z TEA (10 eq) w DCM, schłodzono w łaźni lód/woda i dodano chloromrówczan p-nitrofenylowy (1,5 eq) w DCM. Następnie łaźnię usunięto i kontynuowano reakcję w RT (kontrola TLC i LC-MS). Mieszaninę poreakcyjną rozcieńczono DCM, przemyto dwukrotnie H2O i po usunięciu rozpuszczalnika wykorzystano w kolejnym etapie. Wydajność -70%.

ESI-MS dla C49H74N2O14 (m/z): [M+Na]⁺ 938,0, [M-H]' 914,0.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 8,19 - 8,13 (m, 2H), 7,52 (d, J = 9,4 Hz, 1H), 7,48 - 7,42 (m, 2H), 6,19(dd, J= 10,8,3,0 Hz, 1H), 5,75 (dd, J= 10,8, 1,8 Hz, 1,H), 4,54-4,49 (m, 1H), 4,44 (d, J=3,8Hz, 1H), 4,23 (q, J = 6,7 Hz, 1H), 4,13 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 3,82 (dd, J = 11,0, 4,6 Hz, 1H), 3,60 (d, J = 6,8 Hz, 2H), 3,44 - 3,39 (m, 1H), 2,83 - 2,65 (m, 3H), 2,19 - 0,69 (m, 55H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 218,9, 185,0, 156,4, 153,8, 144,5, 126,6, 124,6, 124,1, 122,6, 106,2, 98,7, 88,5, 77,1, 76,0, 75,7, 74,9, 71,2, 69,8, 68,2, 56,0, 51,0, 49,0, 49,0, 40,4, 38,4, 37,7, 35,9, 32,4, 32,3, 29,6, 28,0, 27,3, 26,7, 23,9, 19,9, 19,8, 17,2, 15,7, 15,2, 14,6, 12,8, 12,3, 12,1, 10,5, 6,4, 6,3 ppm.

Przykład FLC-00468-1

100 mg C20-amino SAL (1 eq) w MeCN z 0,5 M Na2CO3 (5 eq) schłodzono w łaźni lód/woda i wkroplono chlorek 4-trifluorometylobenzenosulfonowy (1,5 eq) w THF. Po zakończeniu wkraplania reakcję prowadzono w RT (kontrola TLC i LC-MS). Mieszaninę poreakcyjną rozcieńczono H2O i ekstrahowano dwukrotnie DCM. Warstwy organiczne połączono, zawieszono na silikażelu i oczyszczono przy użyciu chromatografu z detektorem ELS, stosując kolumnę wypełnioną krzemionką. Odpowiednie frakcje połączono i zatężono, pozostałość rozpuszczono w DCM i przemyto dwukrotnie 0,25 M N2CO3. Produkt uzyskano z wydajnością 66%.

ESI-MS dla C49H74F3NO12S (m/z): [M+Na]⁺ 981,0, [M-H]' 957,0.

Ή NMR (700 MHz, CD₂Cl2)6 8,13 (d, J= 8,2 Hz, 2H), 7,83 (d, J= 8,3 Hz, 2H), 7,43 (s, 1H), 6,03 (dd, J = 10,9, 3,0 Hz, 1H), 5,30 (dd, J= 10,9, 1,7 Hz, 1H), 4,27 (q, J= 6,5 Hz, 1H), 4,17 (dd, J= 10,4, 1,3 Hz, 1H), 4,03 (s, 1H), 3,89 (dd, J = 10,9, 5,2 Hz, 1H), 3,64 (dd, J= 10,2, 2,1 Hz, 1H), 3,55 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 3,46 (dd, J = 12,1, 1,7 Hz, 1H), 2,89 (td, J = 10,7, 3,3 Hz, 1H), 2,77 - 2,68 (m, 2H), 2,36-2,29 (m, 1H), 2,28-2,21 (m, 1H), 1,99-0,69 (m, 54H) ppm.

¹³C NMR (176 MHz, CD2CI2) δ 218,6, 184,9, 145,7, 133,5, 127,6, 126,3, 126,1, 126,0, 124,3, 122,8, 105,7, 98,9, 88,9, 77,0, 76,1,75,7, 75,0, 71,3, 70,0, 68,3, 55,8, 51,6, 51,1,48,9, 40,5, 38,4, 36,2, 35,8, 32,4, 32,2, 32,1, 29,7, 28,0, 27,4, 26,7, 24,0, 20,0, 19,9, 17,2, 15,5, 45,3, 14,6, 12,7, 12,7, 12,0, 10,5, 6,3, 6,2 ppm.

PL 248049 Β1

183

Przykład FLC-00502-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00468-1, przy czym zamiast chlorku 4-trifluorometylobenzenosulfonowego do mieszaniny reakcyjnej dodano chlorek 4-metylobenzenosulfonowy (1,5 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 70%.

ESI-MS dla C49H77NO12S (m/z): [M+Na]⁺ 926,8, [M-H]’ 903,0.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 7,78 (d, J= 8,2 Hz, 2H), 7,31 (d, J= 8,1 Hz, 2H), 6,76 (d, J= 9,9 Hz, 1H), 5,94 (dd, J = 10,9, 2,9 Hz, 1H), 5,21 (dd, J = 10,8, 1,4 Hz, 1H), 4,22 (d, J= 6,8 Hz, 1H), 4,10 (d, J = 10,4 Hz, 1H), 3,92 (d, J = 9,8 Hz, 1H), 3,84 (dd, J = 11,0, 4,8 Hz, 1H), 3,58 (dd, J = 10,1, 1,7 Hz, 1H), 3,50 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 3,44-3,37 (m, 1H), 2,83 (td, J= 10,7, 3,3 Hz, 1H), 2,69-2,62 (m, 2H), 2,42 (s, 3H), 2,31 - 2,22 (m, 2H), 1,92 - 0,63 (m, 55H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 218,6, 184,8, 143,0, 139,0, 129,5, 127,0, 126,6, 123,8, 105,7, 98,8, 88,7, 76,9, 75,9, 75,7, 75,0, 71,2, 69,8, 68,2, 55,8, 51,4, 51,0, 49,0, 40,4, 38,5, 36,2, 35,8, 32,4, 32,2, 32,2, 29,8, 29,7, 28,0, 27,4, 26,7, 24,0, 21,3, 20,0, 19,8, 17,2, 15,5, 15,3, 14,6, 12,8, 12,0, 10,5, 6,3, 6,3 ppm.

Przykład FLC-00503-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00468-1, przy czym zamiast chlorku 4-trifluorometylobenzenosulfonowego do mieszaniny reakcyjnej dodano chlorek 4-chlorobenzenosulfonowy (1,5 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 81%.

ESI-MS dla C48H74CINO12S (m/z): [M+Na]⁺ 946,9, [M-H]' 922,8.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 7,88 (d, J= 8,6 Hz, 2H), 7,49 (d, J= 8,6 Hz, 2H), 7,04 (d, J= 9,8 Hz, 1H), 5,97 (dd, J = 10,9, 2,9 Hz, 1H), 5,23 (dd, J = 10,8, 1,6 Hz, 1H), 4,22 (q, J = 6,7 Hz, 1H), 4,10 (d, J = 10,4 Hz, 1H), 3,94 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 3,83 (dd, J = 11,0, 4,9 Hz, 1H), 3,57 (dd, J = 10,2, 1,8 Hz, 1H), 3,50 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 3,42-3,37 (m, 1H), 2,82 (td, J = 10,7, 3,2 Hz, 1H), 2,72-2,59 (m, 2H), 2,28-2,16 (m, 2H), 1,63-0,94 (m, 54H) ppm.

¹³C NMR(126 MHz, CD2CI2) δ 218,6, 184,8, 140,6, 138,4, 129,1, 128,6, 126,2, 124,1, 105,6, 98,8, 88,8, 76,9, 76,1, 75,7, 75,0, 71,2, 69,8, 68,3, 55,8, 51,4, 51,0, 48,9, 40,4, 38,4, 36,3, 35,8, 32,4, 32,2, 32,1,29,8, 29,7, 28,0, 27,4, 26,7, 24,1, 20,0, 19,8, 17,2, 15,6, 15,2, 14,6, 12,8, 12,0, 10,5, 6,3, 6,3 ppm.

184

PL 248049 Β1

Przykład FLC-00504-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00468-1, przy czym zamiast chlorku 4-trifluorometylobenzenosulfonowego do mieszaniny reakcyjnej dodano chlorek 4-bromobenzenosulfonowy (1,5 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 60%.

ESI-MS dla C48H₇₄BrNOi2S (m/z): [M+Na]⁺ 990,8, [M-H]’ 967,0.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 7,81 (d, J= 8,6 Hz, 2H), 7,65 (d, J= 8,6 Hz, 2H), 7,07 (d, J= 9,6 Hz, 1H), 5,97 (dd, J = 10,9, 2,9 Hz, 1H), 5,23 (dd, J = 10,8, 1,6 Hz, 1H), 4,22 (q, J = 6,7 Hz, 1H), 4,10 (d, J = 10,5 Hz, 1H), 3,94 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 3,83 (dd, J = 11,0, 4,9 Hz, 1H), 3,57 (dd, J= 10,2, 1,8 Hz, 1H), 3,50 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 3,43-3,38 (m, 1H), 2,82 (td, J= 10.7, 3,2 Hz, 1H), 2,70-2,62 (m, 2H), 2,27 - 2,18 (m, 2H), 1,93 - 0,63 (m, 54H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 218,6, 184,8, 141,1, 132,1, 128,7, 126,9, 126,2, 124,1, 105,6, 98,8, 88,8, 76,9, 76,1, 75,7, 75,1, 71,2, 69,8, 68,3, 55,8, 51,4, 51,0, 48,9, 40,4, 38,4, 36,3, 35,8, 32,4, 32,2, 32,1, 29,82 29,7, 28,0, 27,4, 26,7, 24,1, 20,0, 19,8, 17,2, 15,6, 15,3, 14,6, 12,8, 12,0, 10,5, 6,3, 6,3 ppm.

Przykład FLC-00505-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00468-1, przy czym zamiast chlorku 4-trifluorometylobenzenosulfonowego do mieszaniny reakcyjnej dodano chlorek tiofenosulfonowy (3 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 53%.

ESI-MS dla C46H73NO12S2 (m/z): [M+Na]⁺919,1, [M-H]' 894,8.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 7,63 - 7,57 (m, 2H), 7,12 - 7,08 (m, 2H), 5,98 (dd, J= 10,9, 3,0 Hz, 1H), 5,25 (dd, J = 10,8, 1,6 Hz, 1H), 4,21 (q, J = 6,7 Hz, 1H), 4,09 (d, J = 10,4 Hz, 1H), 4,00 (d, J = 3,9 Hz, 1H), 3,83 (dd, J= 11,0, 4,6 Hz, 1H), 3,57 (dd, J = 10,2, 1,8 Hz, 1H), 3,51 (d, J = 10,2 Hz, 1H), 3,44 - 3,39 (m, 1H), 2,82 (td, J= 10,7, 3,3 Hz, 1H), 2,70-2,62 (m, 2H), 2,34-2,22 (m, 2H), 1,93 - 0,65 (m, 54H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 218,6, 184,9, 142,9, 131,6, 131,3, 127,4, 126,3, 123,0, 105,7, 98,8, 88,8, 76,9, 76,0, 75,7, 75,0, 71,1, 69,9, 68,2, 55,8, 51,8, 50,9, 49,0, 40,4, 38,5, 36,3, 35,8, 32,4, 32,1, 29,8, 29,7, 28,0, 27,3, 26,7, 24,0, 19,9, 19,8, 17,2, 15,5, 15,3, 14,6, 12,8, 12,8, 12,0, 10,5, 6,4, 6,3 ppm.

PL 248049 Β1

185

Przykład FLC-00506-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00468-1, przy czym zamiast chlorku 4-trifluorometylobenzenosulfonowego do mieszaniny reakcyjnej dodano chlorek 4-(3,5-dimetyloizoksazolojsulfonowy (5 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 40%.

ESI-MS dla C47H76N2O13S (m/z): [M+Na]⁺ 932,2, [M-H]' 908,0.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 7,23 (d, J = 9,8 Hz, 1H), 6,05 (dd, J = 10,8, 3,0 Hz, 1H), 5,28 (dd, J = 10,8, 1,5 Hz, 1H), 4,24 (q, J=6,7Hz, 1H), 4,11 (d, J = 10,4 Hz, 1H), 3,77 (dd, J= 18,1,7,0 Hz, 2H), 3,52 (dd, J = 16,6, 6,2 Hz, 2H), 3,41 -3,37 (m, 1H), 2,75 (t, J = 10,6 Hz, 1H), 2,67 (t, J = 11,0 Hz, 2H), 2,60 (s, 3H), 2,51 (s, 3H), 2,51 - 0,65 (m, 57H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 218,5, 185,0, 172,6, 157,9, 126,1, 125,0, 117,3, 105,5, 98,9, 88,9, 76,9, 76,2, 75,4, 75,2, 71,3, 69,9, 68,3, 55,8, 51,0, 50,9, 48,8, 40,4, 38,4, 36,1, 35,9, 32,4, 32,2, 32,1, 30,0, 29,7, 27,9, 27,7, 26,7, 24,3, 20,1, 19,9, 17,1, 15,4, 15,3, 14,7, 12,8, 12,6, 12,4, 12,1, 11,1, 10,4, 6,2 ppm.

Przykład FLC-00514-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00468-1, przy czym zamiast chlorku 4-trifluorometylobenzenosulfonowego do mieszaniny reakcyjnej dodano chlorek benzenosulfonowy (1,5 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 73%.

ESI-MS dla C48H75NO12S (m/z): [M+Na]⁺ 912,9, [M-H]' 889,0.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 7,91 (d, J = 7,4 Hz, 2H), 7,59 - 7,49 (m, 3H), 6,97 (d, J = 9,9 Hz, 1H), 5,94 (dd, J = 10,9, 2,9 Hz, 1H), 5,21 (dd, J = 10,8, 1,3 Hz, 1H), 4,22 (q, J= 6,6 Hz, 1H), 4,10 (d, J = 10,3 Hz, 1H), 3,94 (d, J = 9,5 Hz, 1H), 3,84 (dd, J = 11,0, 4,7 Hz, 1H), 3,58 (dd, J = 10,1, 1,6 Hz, 1H), 3,49 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 3,41 (d, J = 10,7 Hz, 1H), 2,84 (td, J= 10,7, 3,2 Hz, 1H), 2,70-2,62 (m, 2H), 2,28 - 2,21 (m, 2H), 1,93 - 0,63 (m, 54H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 218,6, 184,8, 141,9, 132,2, 128,9, 127,0, 126,6, 123,9, 105,7, 98,8, 88,7, 76,9, 76,0, 75,7, 75,0, 71,2, 69,9, 68,2, 55,8, 51,5, 51,0, 49,0, 40,4, 38,4, 36,2, 35,8, 32,4, 32,1,29,7, 28,0, 27,4, 26,7, 24,0, 19,9, 19,8, 17,2, 15,5, 15,3, 14,6, 12,8, 12,7, 12,0, 10,5, 6,3, 6,3 ppm.

186

PL 248049 Β1

Przykład FLC-00536-1

100 mg C20-amino SAL (1 eq) w DCM z TEA (10 eq) schłodzono w łaźni lód/woda i wkroplono chlorek etanosulfonowy (3 eq) w DCM. Po zakończeniu wkraplania reakcję prowadzono w RT (kontrola TLC i LC-MS). Mieszaninę poreakcyjną rozcieńczono H2O i ekstrahowano dwukrotnie DCM. Warstwy organiczne połączono, zawieszono na silikażelu i oczyszczono przy użyciu chromatografu z detektorem ELS, stosując kolumnę wypełnioną krzemionką. Odpowiednie frakcje połączono i zatężono, pozostałość rozpuszczono w DCM i przemyto dwukrotnie 0,25 M Na2CO3. Produkt uzyskano z wydajnością 22%.

ESI-MS dla C44H75NO12S (m/z): [M+Na]⁺ 865,0, [M-H]' 840,9.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 6,33 (d, J = 9,8 Hz, 1H), 6,13 (dd, J = 10,8, 3,0 Hz, 1H), 5,79 (dd, 7 = 10,8, 1,3 Hz, 1H), 4,19 (q, 7= 6,7 Hz, 1H), 4,13-4,04 (m, 2H), 3,82 (dd, 7= 11,0, 4,3 Hz, 1H), 3,63-3,56 (m, 2H), 3,43 (dd, 7= 12,2, 1,9 Hz, 1H), 3,00 (dq, 7= 14,0, 7,0 Hz, 2H), 2,82-2,63 (m, 3H), 2,36 - 2,21 (m, 2H), 2,00 - 0,68 (m, 57H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 218,8, 184,6, 127,7, 124,0, 105,9, 98,9, 88,8, 76,7, 76,0, 75,8, 74,6, 71,2, 69,9, 68,3, 55,9, 51,0, 50,8, 49,0, 48,1, 40,5, 38,5, 36,3, 35,8, 32,4, 32,2, 32,1, 29,7, 29,3, 28,0, 27,2, 26,6, 23,7, 19,9, 19,9, 17,2, 15,6, 15,3, 14,5, 12,8, 12,5, 12,1, 10,6, 7,9, 6,5, 6,2 ppm.

Przykład FLC-00548-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00468-1, przy czym zamiast chlorku 4-trifluorometylobenzenosulfonowego do mieszaniny reakcyjnej dodano chlorek metanosulfonowy (3 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 10%.

ESI-MS dla C43H73NO12S (m/z): [M+Na]⁺ 850,9, [M-H]' 826,9.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 6,47 (d, 7 = 9,8 Hz, 1H), 6,14 (dd, 7 = 10,8, 3,0 Hz, 1H), 5,80 (dd, 7= 10,8, 1,4 Hz, 1H), 4,19 (q, 7= 6,7 Hz, 1H), 4,14 -4,06 (m, 2H), 3,83 (dd,7= 11,1,4,6 Hz, 1H), 3,60 (dd, 7= 10,2, 6,2 Hz, 2H), 3,43 (dd, 7= 12,1, 1,9 Hz, 1H), 2,94 (s, 3H), 2,81 (td, 7= 10,9, 3,3 Hz, 1H), 2,76 - 2,64 (m, 2H), 2,27 (dt, 7 = 12,5, 8,5 Hz, 2H), 1,98 - 0,68 (m, 54H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 219,2, 185,1, 127,9, 124,5, 106,2, 99,4, 89,2, 77,2, 76,5, 76,3, 75,0, 71,6, 70,4, 68,8, 56,4, 51,5, 51,3, 49,4, 42,1, 40,9, 39,0, 37,0, 36,2, 32,9, 32,6, 32,5, 30,2, 29,7, 28,5, 27,5, 27,1, 24,1, 20,3, 17,7, 16,1, 15,7, 14,9, 13,2, 13,1, 12,5, 11,1, 6,9, 6,7 ppm.

PL 248049 Β1

187

Przykład FLC-00474-1

100 mg C20-amino SAL (1 eq) zmieszano z TEA (6 eq), CS2 (6 eq) i bromkiem benzylu (5 eq) w MeCN. Reakcję prowadzono początkowo w temperaturze 0°C, a następnie w RT (kontrola TLC i LC-MS). Mieszaninę poreakcyjną zawieszono na silikażelu i oczyszczono przy użyciu chromatografu z detektorem ELS, stosując kolumnę wypełnioną krzemionką. Odpowiednie frakcje połączono i zatężono, pozostałość rozpuszczono w DCM i przemyto dwukrotnie 0,25 M Na2CO3. Produkt uzyskano z wydajnością 72%.

ESI-MŚ dla C50H77NO10S2 (m/z): [M+Na]⁺ 938,9.

Ή NMR (700 MHz, CD2CI2) δ 8,95 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 7,41 - 7,20 (m, 5H), 6,21 (dd, J = 10,9, 3,1 Hz, 1H), 5,85-5,82 (m, 1H), 5,77 (dd, J= 10,8, 1,7 Hz, 1H), 4,57 (q, J = 13,8 Hz, 2H), 4,22-4,18 (m, 1H), 4,14 (dd, J = 10,5, 1,7 Hz, 1H), 3,91 (dd, J= 10,9, 4,9 Hz, 1H), 3,68-3,66 (m, 1H), 3,46 (dd, J = 12,2, 2,3 Hz, 1H), 2,83-2,75 (m, 3H), 2,71 (d, J = 9,6Hz, 1H), 2,51 (dt, J= 13,4, 9,6 Hz, 1H), 2,08 (ddd, J= 13,4, 8,5, 5,0 Hz, 1H), 2,01 -0,66 (m, 55H) ppm.

¹³C NMR (176 MHz, CD2CI2) δ 218,9, 199,8, 184,4, 137,3, 129,1, 128,3, 127,0, 126,6, 123,5, 106,4, 99,3, 88,7, 77,0, 76,3, 76,2, 73,7, 71,1, 70,1, 68,6, 67,1, 56,0, 54,4, 50,3, 48,8, 40,6, 39,8, 38,6, 37,3, 35,6, 32,4, 32,1, 31,9, 29,7, 28,7, 28,1, 26,7, 26,5, 23,4, 20,0, 17,4, 15,7, 15,3, 14,2, 12,8, 12,2, 10,8, 6,6, 6,3 ppm.

Przykład FLC-00475-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00474-1, przy czym zamiast bromku benzylu do mieszaniny reakcyjnej dodano jodek metylu (5 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 93%.

ESI-MS dla C44H73NO10S2 (m/z): [M+H]⁺ 840,9, [M-H]' 839,0.

Ή NMR (700 MHz, CDCI3) δ 8,83 (d, J= 8,6 Hz, 1H), 6,17 (dd, J= 10,8, 3,0 Hz, 1H), 5,86 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 5,81 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 4,29 (q, J = 6,5 Hz, 1H), 4,23 (d, J = 9,9 Hz, 1H), 4,01 (dd, J = 10,5, 4,3 Hz, 1H), 3,70 (d, J = 14,1 Hz, 4H), 3,62 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 3,41 (d, J = 10,5 Hz, 1H), 2,90-2,84 (m, 1H), 2,72 (dq, J= 14,5, 7,1 Hz, 1H), 2,67 (d, J= 9,9 Hz, 1H), 2,62 (s, 3H), 2,34 (dd, J = 23,1, 9,9 Hz, 1H), 2,07-0,68 (m, 53H) ppm.

¹³C NMR (176 MHz, CDCI3) δ 218,1, 202,2, 184,8, 127,0, 123,2, 106,3, 99,3, 88,6, 76,6, 76,0, 75,8, 74,2, 71,3, 70,1, 68,4, 67,1, 55,9, 54,0, 50,5, 49,2, 40,7, 38,7, 37,0, 35,7, 32,4, 32,3, 32,0, 29,7, 29,6, 28,0, 27,3, 26,7, 23,6, 22,7, 20,0, 18,6, 17,6, 15,9, 15,4, 14,6, 13,1, 12,7, 12,2, 6,8, 6,6 ppm.

188

PL 248049 Β1

Przykład FLC-00476-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00474-1, przy czym zamiast bromku benzylu do mieszaniny reakcyjnej dodano bromek butylu (5 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 38%.

ESI-MS dla C47H79NO10S2 (m/z): [M+Na]⁺ 905,0.

Ή NMR (700 MHz, CDCI3) δ 8,69 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 6,17 (dd, J = 10,9, 3,1 Hz, 1H), 5,87 (ddd, J = 9,4, 2,9, 1,9 Hz, 1H), 5,81 (dd, J = 10,8, 1,8 Hz, 1H), 4,26 (q, J = 6,8 Hz, 1H), 4,23 (dd, J = 10,4, 1,6 Hz, 1H), 4,01 (dd, J = 10,9, 5,0 Hz, 1H), 3,70 (dd, J= 10,2, 2,2 Hz, 1H), 3,63 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 3,41 (dd, J = 12,2, 2,3 Hz, 1H), 3,31 -3,20 (m, 2H), 2,88 - 2,84 (m, 1H), 2,72 (dq, J= 10,4, 7,2 Hz, 1H), 2,67-2,64 (m, 1H), 2,42 - 2,35 (m, 1H), 2,18 (s, 1H), 2,07 - 0,68 (m, 62H) ppm.

¹³C NMR (176 MHz, CDCI3) δ 218,1, 201,6, 184,8, 127,0, 123,2, 106,4, 99,2, 88,6, 76,8, 76,0, 74,1, 71,2, 69,9, 68,4, 55,9, 53,7, 50,6, 49,2, 40,6, 38,7, 37,1, 35,8, 35,3, 32,4, 32,3, 32,1, 31,2, 29,7, 29,3, 28,0, 27,2, 26,8, 23,7, 22,0, 20,0, 17,6, 15,9, 15,4, 14,6, 14,1, 13,7, 13,1, 12,9, 12,1, 10,9, 6,7, 6,6 ppm.

Przykład FLC-00553-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00539-1, przy czym zamiast 3-metoksypropyloaminy do mieszaniny reakcyjnej dodano merkaptan 4-chlorobenzylowy (3 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 10%.

ESI-MS dla C50H76CINO11S (m/z): [M+Na]⁺ 957,1, [M-H]' 933,1.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 7,29 - 7,21 (m, J= 6,5, 5,3 Hz, 5H), 6,12 (dd, J= 10,9, 3,0 Hz, 1H), 5,65 (dd, J = 10,8, 1,4 Hz, 1H), 4,77 (d, J = 9,1 Hz, 1H), 4,14 (q, J = 6,7 Hz, 1H), 4,09 - 3,99 (m, 3H), 3,86 (dd, J = 10,8, 4,4 Hz, 2H), 3,41 (dd, J= 12,2, 2,2 Hz, 1H), 2,79-2,70 (m, 2H), 2,65 (d, J= 9,8 Hz, 1H), 2,17 (dt, J = 13,2, 9,5 Hz, 1H), 2,08-0,62 (m, 57H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 219,3, 184,6, 167,4, 138,7, 132,7, 130,6, 128,7, 127,8, 123,8, 106,5, 99,5, 89,1, 77,1, 76,5, 74,1, 71,4, 70,4, 68,8, 56,4, 50,8, 49,7, 49,2, 40,9, 38,9, 37,5, 36,0, 33,6, 32,8, 32,5, 32,3, 30,1, 29,0, 28,5, 27,0, 26,8, 23,8, 20,4, 17,7, 16,0, 15,6, 14,6, 13,4, 13,2, 12,5, 7,0, 6,7 ppm.

PL 248049 Β1

189

Przykład FLC-00554-1

Związek otrzymano według procedury opisanej w przykładzie FLC-00539-1, przy czym zamiast 3-metoksypropyloaminy do mieszaniny reakcyjnej dodano tiofenol (1,5 eq). Produkt uzyskano z wydajnością 15%.

ESI-MS dla C49H75NO11S (m/z): [M+Na]⁺ 908,9, [M-H]' 886,1.

Ή NMR (500 MHz, CD2CI2) δ 7,51 - 7,41 (m, 3H), 7,40-7,29 (m, 3H), 6,16 (dd, J= 10,8, 3,0 Hz, 1H), 5,72 (dd, J = 10,8, 1,3 Hz, 1H), 4,74 (d, J = 9,1 Hz, 1H), 4,20 (q, J = 6,7 Hz, 1H), 4,13 (d, J = 10,5 Hz, 1H), 3,90 (dd, J= 10,8, 3,9 Hz, 1H), 3,70-3,62 (m, 2H), 3,48 (dd, J= 12,1, 2,1 Hz, 1H), 2,84 (td, J = 10,6, 3,5 Hz, 1H), 2,79-2,73 (m, 2H), 2,68 (d, J = 9,9 Hz, 1H), 2,27-0,65 (m, 56H) ppm.

¹³C NMR (126 MHz, CD2CI2) δ 219,3, 184,7, 166,6, 135,7, 129,7, 129,1, 129,0, 127,8, 123,9, 106,6, 99,5, 89,1, 77,3, 76,5, 74,3, 71,5, 70,5, 68,9, 56,4, 51,0, 49,8, 49,2, 40,9, 38,9, 37,6, 36,0, 32,8, 32,6, 32,4, 30,1, 29,3, 28,5, 27,1, 26,9, 23,9, 23,1, 20,5, 17,7, 16,0, 15,6, 14,7, 13,4, 13,2, 12,6, 11,2, 7,0, 6,7 ppm.

Claims

1. Sposób otrzymywania związku stanowiącego pochodną C20-aminosalinomycyny o wzorze

190

PL 248049 Β1

2. Sposób otrzymywania związku stanowiącego pochodną C20-aminosalinomycyny o wzorze FLC-00105 lub jej soli:

obejmujący następujące etapy:

(FLC-00001)

PL 248049 Β1

191

gdzie jako środek utleniający stosuje się środki wybrane z grupy: sól pirydyniowa lub pirymidyniowa lub ich pochodne, kwasu chlorochromowego (VI) lub dichromowego (VI), chlorochromianpirydyniowy, dichromianpirydyniowy, trójtlenek chromu (VI) CrO3, korzystnie dichromianpirydyniowy.

przeprowadzone według zastrz. 1.