PL247852B1 - Kompozycja farmaceutyczna, stosowana w zapobieganiu lub leczeniu chorób nowotworowych i chorób wynikających z nadmiernej proliferacji komórek oraz liposom zawierający tę kompozycję - Google Patents

Kompozycja farmaceutyczna, stosowana w zapobieganiu lub leczeniu chorób nowotworowych i chorób wynikających z nadmiernej proliferacji komórek oraz liposom zawierający tę kompozycję

Info

Publication number
PL247852B1
PL247852B1 PL444723A PL44472323A PL247852B1 PL 247852 B1 PL247852 B1 PL 247852B1 PL 444723 A PL444723 A PL 444723A PL 44472323 A PL44472323 A PL 44472323A PL 247852 B1 PL247852 B1 PL 247852B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
concentration
mitoxantrone
emetine
zah
liposomes
Prior art date
Application number
PL444723A
Other languages
English (en)
Other versions
PL444723A1 (pl
Inventor
Olga Święch
Agata KRZAK
Agata Krzak
Joanna PIETRAS
Joanna Pietras
Weronika PIOTROWSKA
Weronika Piotrowska
Anna Boguszewska-Czubara
Mateusz Psurski
Joanna Wietrzyk
Ewa OLISZEWSKA
Ewa Oliszewska
Joanna JAROSZ
Joanna Jarosz
Wojciech Smoron
Renata Bilewicz
Original Assignee
Bs Biotechna Spolka Z Ograniczona Odpowiedzialnoscia
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Bs Biotechna Spolka Z Ograniczona Odpowiedzialnoscia filed Critical Bs Biotechna Spolka Z Ograniczona Odpowiedzialnoscia
Priority to PL444723A priority Critical patent/PL247852B1/pl
Priority to CN202480044869.8A priority patent/CN121443272A/zh
Priority to IL324421A priority patent/IL324421A/en
Priority to EP24741025.1A priority patent/EP4704812A1/en
Priority to PCT/PL2024/000022 priority patent/WO2024228631A1/en
Publication of PL444723A1 publication Critical patent/PL444723A1/pl
Publication of PL247852B1 publication Critical patent/PL247852B1/pl

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/13—Amines
    • A61K31/135—Amines having aromatic rings, e.g. ketamine, nortriptyline
    • A61K31/136—Amines having aromatic rings, e.g. ketamine, nortriptyline having the amino group directly attached to the aromatic ring, e.g. benzeneamine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/4738—Quinolines; Isoquinolines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/4745—Quinolines; Isoquinolines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems condensed with ring systems having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. phenantrolines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/24—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing atoms other than carbon, hydrogen, oxygen, halogen, nitrogen or sulfur, e.g. cyclomethicone or phospholipids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/10—Dispersions; Emulsions
    • A61K9/127—Synthetic bilayered vehicles, e.g. liposomes or liposomes with cholesterol as the only non-phosphatidyl surfactant
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/10—Dispersions; Emulsions
    • A61K9/127—Synthetic bilayered vehicles, e.g. liposomes or liposomes with cholesterol as the only non-phosphatidyl surfactant
    • A61K9/1271—Non-conventional liposomes, e.g. PEGylated liposomes or liposomes coated or grafted with polymers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2121/00—Preparations for use in therapy
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

Przedmiotem zgłoszenia jest kompozycja farmaceutyczna złożona z emetyny w stężeniu nie mniejszym niż 0,01 µM i mitoksantronu w stężeniu nie mniejszym niż 0,003 µM do zastosowania w leczeniu raka gruczołu sutkowego. Przedmiotem zgłoszenia jest również liposom, charakteryzujący się tym, ze złożony z co najmniej trzech lipidów, w tym DPPC w ilości od 48,6% do 70,7% wagowych, cholesterolu w ilości od 18,3% do 18,6% wagowych, DSPE-PEG(2000)aminy w ilości od 10,6% do 10,7% wagowych i zawiera emetynę w stężeniu nie mniejszym niż 0,01 µM i mitoksantronu w stężeniu nie mniejszym niż 0,003 µM.

Description

Opis wynalazku
Przedmiotem wynalazku jest kompozycja farmaceutyczna, stosowana w zapobieganiu lub leczeniu chorób nowotworowych i chorób wynikających z nadmiernej proliferacji komórek, w szczególności raka gruczołu sutkowego oraz liposom zawierający tę kompozycję.
Leczenie nowotworów może mieć charakter miejscowy lub systemowy. Leczenie miejscowe polega najczęściej na usunięciu guza lub zastosowaniu radioterapii. Leczenie systemowe, poza komórkami nowotworowymi oddziałuje również na pozostałe komórki organizmu. Do takich metod należą chemioterapia, hormonoterapia lub leczenie celowane, które polega na podaniu dożylnie lub doustnie leków, dopasowanych w zależności od zaawansowania choroby. Ze stanu techniki znane są również inne metody leczenia nowotworów.
Liposomy są powszechnie wykorzystywane jako nośniki w chemioterapii z użyciem leków cytostatycznych, ze względu na ich zdolność do transportowania tych leków do miejsc docelowych w organizmie. Są to sferyczne pęcherzyki zbudowane z jednej lub kilku dwuwarstw fosfolipidowyc h otaczających płynne wnętrze. Skład lipidowy liposomów ma kluczowe znaczenie dla ich stabilności i właściwości fizykochemicznych. Wybór odpowiednich lipidów oraz ich stosunek wpływa na rozmiar, kształt, stabilność i właściwości powierzchniowe liposomów. Wielkość i właściwości powierzchniowe liposomów są natomiast kluczowe dla ich biodostępności, stabilności oraz ich selektywności dostarczania leków do docelowych tkanek i komórek (https://doi.org//10.1016/- /j.addr.2012.09.037). Glikol polietylenowy (PEG) jest powszechnie stosowany w modyfikacji powierzchni liposomów w celu zwiększenia ich stabilności w osoczu krwi, poprawy biodostępności i wydłużenia czasu krążenia (Do'|: 10.1016/j.jconrel.2013.07.026). Ponadto długość łańcucha glikolu polietylenowego (PEG) może mieć wpływ na miejsce akumulacji leku w organizmie człowieka oraz na wydajność celowania terapii (10.1016/j.biomaterials.2011.04.082). Najczęściej stosowanym glikolem polietylenowym do modyfi kacji liposomów jest polimer zakończony terminalna grupą metoksylową (-O-CH3) tzw. mPEG. Inne modyfikacje takie jak terminalna grupa aminowa (-NH2), czy też grupa karboksylowa (-COOH) stosowane są zazwyczaj jako półprodukty do dalszej modyfikacji białkami lub innymi cząsteczkami naprowadzającymi liposomy na określoną komórkę (https://doi.org/10.1038/s41598-021-86860-5) a ich potencjał do generowania ładunku powierzchniowego w zmiennym środowisku nowotworu był do tej pory pomijany. Z drugiej strony wiadome jest, że ładunek powierzchniowy liposomów może wpływać na miejsce ich akumulacji w organizmie, a w szczególności na ich akumulację w tkankach nowotworowych. Badania pokazują, że liposomy obdarzone ładunkiem dodatnim charakteryzują się lepszą akumulacją i penetracją nośnika w tkankach guza oraz lepszym wychwytem komórkowy w porównaniu z nanocząstkami obojętnymi i obdarzonymi ładunkiem ujemnym (https://doi.org/10.1016/j.nantod.2016.04.008). Obecność ładunku dodatniego na powierzchni liposomów jest zatem kluczowa w zapewnieniu wydajnego i specyficznego transportu do tkanek nowotworowych.
Istotą rozwiązania według wynalazku w zakresie kompozycji farmaceutycznej jest kompozycja złożona z emetyny w stężeniu nie mniejszym niż 0,003 μM i mitoksantronu w stężeniu nie mniejszym niż 0,01 μM do zastosowania w leczeniu raka gruczołu sutkowego.
Korzystnie stosunek stężeń emetyny i mitoksantronu wynosi od 1:3 do 1:5.
Istota rozwiązania według wynalazku w zakresie modyfikowanego liposomu polega na tym, że liposom złożony jest z co najmniej trzech lipidów, w tym DPPC w ilości od 48,6 do 70,7% wagowych, cholesterolu w ilości od 18,3 do 18,6% wagowych, DSPE-PEG(2000)aminy w ilości od 10,6 do 10,7% wagowych i zawiera emetynę w stężeniu nie mniejszym niż 0,003 μM i mitoksantronu w stężeniu nie mniejszym niż 0,01 μM.
Korzystnie stosunek stężeń emetyny i mitoksantronu wynosi od 1:3 do 1:5.
Główną zaletą rozwiązań według wynalazków jest to, że zastosowana kompozycja działa dwutorowo, co prowadzi do zatrzymania wzrostu lub śmierci komórki przez synergiczne połączenie dwóch mechanizmów, które na ogół nie byłyby celem dla jednego inhibitora, co prowadzi do zatrzymania wzrostu lub śmierci komórki nowotworowej. Występujący w przypadku emetyny i mitoksantronu synergizm pozwala na zastosowanie dużo mniejszych dawek substancji i ograniczenie skutków ubocznych ich stosowania. Główną zaletą zmodyfikowanych liposomów będących nośnikami dla kompozycji stanowi fakt, iż dzięki dodatniemu ładunkowi generowanemu przez obecność terminalnej grupy aminowej następuje skuteczna akumulacja nośnika z lekiem w guzach litych, a tym samym terapia przeciwnowotworowa przy użyciu tychże leków jest dużo skuteczniejsza. Zostało to udowodnione w badaniach in vitro dla nanocząstek ładowanych emetyna i mitoksantronem. W przypadku tych badań uzyskano 3-4 razy wyższą skuteczność terapii, skutkującej zmniejszeniem guza przy zastosowaniu dwukrotnie niższej dawki w porównaniu z wolnymi lekami. Opracowane nośniki pozwalają na ładowanie emetyny na poziomie nawet powyżej 95% dla stosunku leku do lipidów na poziomie 0,1, co stanowi wartość dwukrotnie wyższą niż podawana w literaturze. Przy wyższym stężeniu początkowym leku liposomy pozwalają na uzyskanie nawet czterokrotnie wyższego stosunku leku do lipidów niż liposomy opisywane w publikacjach. Przyczyną tak dobrego załadunku jest specyficzna struktura lipidowa zawierająca terminalną grupę aminową w cząsteczce glikolu polietylenowego. Nośniki te zapewniają ładowanie emetyny do wnętrza liposomów, a nie osadzanie się jej na powierzchni na co wskazuje brak istotnych zmian potencjału Zeta liposomów po procesie ładowania leku. Dodatkowe badania liposomów załadowanych emetyną w obecności albumin ludzkiej i szczurzej potwierdzają brak nagłego wyrzutu leku w warunkach badań in vitro. Nośniki te pozwalają również na wiązanie emetyny w obecności innych leków, takich jak mitoksantron bez drastycznego spadku wartości współczynnika enkapsulacji %EE emetyny. Obecność 5 krotnego nadmiaru mitoksantronu (leku z grupy antracyklin) pozwala zach ować %EE emetyny na poziomie 95-99%, podczas gdy wartości literaturowych nośników liposomalnych zawierających mieszaninę antracykliny z emetyną w tych stężeniach wskazują na spadek %EE do wartości niższych od 30%. Nośniki te zapewniają także znaczne ograniczenie toksyczności emetyny zamkniętej w liposomach w stosunku do emetyny wolnej. Wskazują na dużo niższe wartości współczynnika LC50 dla leków zamkniętych w nośnikach. Wartość LC50 obliczana dla emetyny zamkniętej w liposomie jest po 24 h od dawkowania 12-krotnie wyższa od wartości obliczonej dla wolnego leku. Stwarza to możliwość znacznego ograniczenia toksyczności tego leku a tym samym umożliwienie stosowania tego leku w terapiach przeciwnowotworowych.
Rozwiązania według wynalazków zostały zilustrowane poniższymi przykładami wykonania oraz rysunkami, gdzie Fig. 1.1 przedstawia przykładowy rozkład wielkości promieni hyd rodynamicznych liposomów nanoCombo 6.2 po syntezie i oczyszczaniu (szczegóły w opisie wykonania), mierzony za pomocą dynamicznego rozproszenia światła. Próbka rozcieńczona 10 razy; Fig. 1.2 przykładowy rozkład wielkości promieni hydrodynamicznych liposomów nanoCombo 6.3 po syntezie i oczyszczaniu, mierzony za pomocą dynamicznego rozproszenia światła. Fig. 1.3 - przykładowy rozkład wielkości promieni hydrodynamicznych liposomów nanoCombo 6.4 po syntezie i oczyszczaniu, mierzony za pomocą dynamicznego rozproszenia światła; Fig. 1.4. Przykładowy rozkład wielkości promieni hydrodynamicznych liposomów nanoCombo 6.6 po syntezie i oczyszczaniu, mierzony za pomocą dynamicznego rozproszenia światła; Fig. 1.5 - przykładowy rozkład potencjałów Zeta liposomów nanoCombo 6.2 po syntezie i oczyszczaniu, mierzony za pomocą dynamicznego rozproszenia światła; Fig. 1.6 - Przykładowy rozkład potencjałów Zeta liposomów nanoCombo 6.3 po syntezie i oczyszczaniu, mierzony za pomocą dynamicznego rozproszenia światła; Fig. 1.7 - przykładowy rozkład potencjałów Zeta liposomów nanoCombo 6.4 po syntezie i oczyszczaniu, mierzony za pomocą dynamicznego rozproszenia światła; Fig. 1.8 - przykładowy rozkład potencjałów Zeta liposomów nanoCombo 6.6 po syntezie i oczyszczaniu, mierzony za pomocą dynamicznego rozproszenia światła; Fig. 2.1 - Kinetyka wzrostu guzów ludzkiego raka płuca CAL 148 u myszy traktowanych Emetyną, Mitoksantronem oraz ich kombinacjami w stosunku stężeń 1:5; Fig. 2.2 - Kinetyka wzrostu guzów ludzkiego raka płuca CAL-148 u myszy traktowanych Emetyną, Mitoksantronem oraz ich kombinacjami w stosunku stężeń 1:3; Fig. 3.1 - Kinetyka wzrostu guzów ludzkiego raka płuca CAL-51 u myszy traktowanych Emetyną, Mitoksantronem oraz ich kombinacjami w stosunku stężeń 1:5; Fig. 3.2 - Kinetyka wzrostu guzów ludzkiego raka płuca CAL-51 u myszy traktowanych Emetyną, Mitoksantronem oraz ich kombinacjami w stosunku stężeń 1:3; Fig. 4.1 - Kinetyka wzrostu guzów ludzkiego raka płuca Hs578T u myszy traktowanych Emetyną, Mitoksantronem oraz ich kombinacjami w stosunku stężeń 1:5; Fig. 4.2 - Kinetyka wzrostu guzów ludzkiego raka płuca Hs578T u myszy traktowanych Emetyną, Mitoksantronem oraz ich kombinacjami w stosunku stężeń 1:3; Fig. 5.1 - Kinetyka wzrostu guzów ludzkiego raka płuca MDAMB231 u myszy traktowanych Emetyną, Mitoksantronem oraz ich kombinacjami w stosunku stężeń 1:5; Fig. 5.2 - Kinetyka wzrostu guzów ludzkiego raka płuca MDAMB231 u myszy traktowanych Emetyną, Mitoksantronem oraz ich kombinacjami w stosunku stężeń 1:3; Fig. 6.1 - Kinetyka wzrostu guzów ludzkiego raka płuca MDAMB453 u myszy traktowanych Emetyną, Mitoksantronem oraz ich kombinacjami w stosunku stężeń 1:5; Fig. 6.2 - Kinetyka wzrostu guzów ludzkiego raka płuca
MDAMB453 u myszy traktowanych Emetyną, Mitoksantronem oraz ich kombinacjami w stosunku stężeń 1:3.
Przykład I
Synteza i parametry fizykochemiczne liposomów
Przygotowano roztwór lipidów w 99,8% etanolu o sumarycznym stężeniu lipidów 100 mg/ml o składzie: DPPC/Cholesterol/DSPE-PEG(2000)NH2 w ułamkach molowych 0,65/0,32/0,026 i ułamkach masowych 0,70650/0,18607/0,10743. Całość grzano 15 minut w łaźni wodnej w temperaturze 60°C. Kolejno w sterylnej moczówce przygotowano roztwór (NH 4)2804, o stężeniu 350 mM w wodzie dejonizowanej. Roztwór przefiltrowano za pomocą sterylnych filtrów strzykawkowych z hydrofilową membraną PTFE o średnicy porów 0,22 μm. pH roztworu miareczkowano 0,3M roztworem HCl, aż do uzyskania pH 5,3. Liposomy przygotowano z użyciem urządzenia mikroprzepływowego NanoAssemblr IGNITE™ z kartridżem NxGen. Ustawione parametry przepływu: stosunek objętościowy fazy wodnej do fazy organicznej 9:1; całkowita szybkość przepływu 5 ml/min, końcowa objętość mieszaniny reakcyjnej 9,05 ml; straty początkowe 0,9 ml; straty końcowe 0,05 ml. Przygotowano 6 serii liposomów. Liposomy dializowano z użyciem tubowych membran dializacyjnych o średnicy porów MWCO 100 kD i objętości 10 ml, które kondycjonowano każdorazowo przez 20 minut w roztworach, kolejno: 10% etanolu, wodzie dejonizowanej i buforze PB8 o pH 8,5. Przygotowano 5-krotny koncentrat buforu PB8 o pH 7,4 poprzez rozpuszczenie 20 g NaCI, 3,6 g Na2HPO4 (bezwodnego), 0,775 g NaH2PO4x2H2O (dihydrat), 0,5 g KCl w 0,5 L wody dejonizowanej (miliQ). Wymieszano na mieszadle magnetycznym przez 30 min. Następnie bufor rozcieńczono 5 krotnie i dodawano 0,1 M NaOH aż do momentu uzyskania pH 8,5. Liposomy dializowano w lodówce (temp. 4°C) przez 14 godzin wymieniając bufor zewnętrzny po 2 h i 6 h. Kolejno przygotowano roztwory wyjściowe chlorowodorku emetyny o stężeniu 50 mg/ml oraz dichlorowodorku mitoksantronu w DMSO. Następnie liposomów po dializie w PBS o pH 8,5 dodano roztworu wyjściowego chlorowodorku emetyny zgodnie z Tabelą 1 i wymieszano. Następnie dodano roztworu wyjściowego dichlorowodorku mitoksantronu zgodnie z Tabelą 1 i wymieszano. Butelkę szczelnie zamknięto i ogrzewano w łaźni wodnej o temperaturze 60°C przez 15 minut. Po wyjęciu z łaźni wodnej liposomy odstawiono na 30 minut do ostygnięcia. Naczynie z liposomami chroniono przed dostępem do światła. Następnie liposomy rozdzielono na kolumnie chromatograficznej z wypełnieniem 8ephadex G-25 i wyznaczono współczynnik enkapsulacji (stopień załadunku) leków do liposomów za pomocą spektroskopii UV-Vis względem krzywej kalibracyjnej korzystając z zasady addytywności absorbancji. Wyznaczono stężenia leków we frakcjach liposomalnych za pomocą spektroskopii UV-Vis względem krzywych kalibracyjnych poprzez roztworzenie 100 uL próbki liposomów w 850 uL etanolu i 50 uL 0,3M HCI (stężenia przedstawione w Tabeli 1). Zmierzono średnice hydr odynamiczne i współczynniki polidyspersji (PDI) oraz potencjały Zeta nanocząstek. Wszystkie dane zestawiono w Tabeli 1. Przykładowe rozkłady średnic hydrodynamicznych wraz ze współczynnikami PDI oraz przykładowe rozkłady potencjałów Zeta wytworzonych liposomów zestawiono na rysunkach Fig. 1.1 - Fig. 1.8.
PL 247852 BI
Tabela 1 Parametry fizykochemiczne liposomów ładowanych chlorowodorkiem emetyny (EM) i dichlorowodorkiem mitoksantronu (MX) po syntezie.
Kod, hposom ÓW - „ I .. ' dodatęldodate k tM k MX ul/ ml ul/ tnl łłposo Jiposo mów mow W ¢-¾ β c EM [Ml »Sb *· Lik? t | c MX Stosu nek ΜΧ/Ε M 1 Roz mian {nm] Sjlll gig SD PD OiPi SD Poten S· qał Zeta [mV] IggH S JA P gil ||||% % E E E M rr . % EE M X
5 20 7,6 5E05 3,7 9E- 04 5,0 84,0 1 0,1 73 0,0 11 0,0 1 7,3 0, 2 8 6 99
mbo6 3 25 20 1,2 0E- 04 3,5 0E- 04 2,9 83,8 0,4 5 0,0 14 0,0 14 6,9 0, 4 2 9 99
naitoGo (nba6 4 25 15 2,1 8E- 04 2,4 8E- 04 1,1 85,5 2 0,2 7 0,0 13 0,0 1 4,5 0, 5 5 6 99
TWw nanoCo mbo 6.5 3 22 4,8 2E- 05 3,9 2E- 04 8,1 89,8 5 1,3 8 0,0 8 0,0 26 6,3 0, 3 9 7 99
Przykład II
Badanie synergii
W przeprowadzonym badaniu zastosowano emetynę i mitoksantron, które rozpuszczono w wodzie i przechowywano jako 50 mM roztwory podstawowe w temperaturze -80°C. W badaniu wykorzystano linie komórkowe zgodnie z tabelą 2.1.
Tabela 2.1 Wykaz linii komórkowych z wyszczególnieniem ich pochodzenia
Symbol linii Nazwa linii Pochodzenie linii
Cal-51 rak gruczołu sutkowego German Collection of Microorganisms and Celi Cultures (DSMZ, Braunschweig Niemcy)
Cal-148 gruczolakorak gruczołu sutkowego DSMZ
MDA-MB- 231 gruczolakorak gruczołu sutkowego American Type Culture Collection (ATCC, Rockville, Maryland, USA)
MDA-MB- 453 rak gruczołu sutkowego DSMZ
HS578T rak gruczołu sutkowego DSMZ
PL 247852 BI
Komórki rozmrażano z ampułek przechowywanych w ciekłym azocie i hodowano na płytkach Petriego w odpowiednim podłożu hodowlanym zgodnie z tabelą 2.2, w wilgotnej, 5% atmosferze CO2 w temperaturze 37°C. Komórki pasażowano dwa razy w tygodniu przy użyciu roztworu EDTA-Trypsyny o pH 8. Zliczone komórki o żywotności co najmniej 90% ocenianej za pomocą roztworu Trypan-Blue wykorzystano w testach antyproliferacyjnych.
Tabela 2.2 Wykaz linii komórkowych i odpowiadających im medium hodowlanych
Symbol linii Medium hodowlane*
Cal-51 Dulbecco’s Modified Eagle Medium (Life Technologies, UK), 10% (v/v) FBS (Sigma-Aldrich, Poznań, Polska) i 2 mM L-glutamina (Sigma-Aldrich, Poznań, Polska)
Cal-148 Dulbecco’s Modified Eagle Medium (Life Technologies, UK), 20% (v/v) FBS (Sigma-Aldrich, Poznań, Polska) i 4 mM L-glutamina (Sigma-Aldrich, Poznań, Polska), 20 ng/ml Epidermal Growth Factor Humań (EGFh; SigmaAldrich, Schnelldorf, Niemcy)
MDA-MB-231 RPMI 1640 (HIIET, PAS, Wrocław, Polska), 10% (v/v) FBS (Sigma-Aldrich, Poznań, Polska) i 2 mM L-glutamina (Sigma-Aldrich, Poznań, Polska)
MDA-MB-453 Dulbecco’s Modified Eagle Medium (Life Technologies, UK), 10% (v/v) FBS (GE Healthcare HyClone, Logan USA) i 2 mM L-glutamina (Sigma-Aldrich, Poznań, Polska)
HS578T Dulbecco’s Modified Eagle Medium (Life Technologies, UK), 10% (v/v) FBS (Sigma-Aldrich, Poznań, Polska) i 2 mM L-glutamina (Sigma-Aldrich, Poznań, Polska)
* Wszystkie media hodowlane były uzupełnione 0 antybiotyki -100 U/mt penicyliny (Sigma-Aldrich, Poznań, Polska), 100 pg/m! streptomycyny (Polfa Tarchomin, Warszawa, Polska).
Dwadzieścia cztery godziny przed dodaniem badanych związków/kombinacji, komórki posiano na płytki 384-dołkowe w ilości 50 pL/dołek i gęstości 103 komórek/dołek, w odpowiednim medium hodowlanym. Po inkubacji przez noc, komórki traktowano różnymi stężeniami związków lub ich kombinacji zmieszanych w różnych stosunkach molowych (opisanych w tabelach zestawiających poszczególne wyniki, o współczynniku rozcieńczenia 3,16x. Roztwory związków rozcieńczano w medium badawczym - RPMI-1640 i Opti-MEM w stosunku 1:1, a medium uzupełniono 2 mM glutaminą i 5% płodową surowicą bydlęcą FBS. Po 72 h kolorymetryczną ocenę wzrostu komórek przeprowadzono metodą SRB. Komórki utrwalano przez 1 h zimnym 25% roztworem (w/v) kwasu trójchlorooctowego (TCA), przemywano pięciokrotnie wodą z kranu, barwiono 0,4% (v/v) sulforodaminą B (SRB, roztwór w 1% (v/v) kwasie octowym) przez 30 min. Niezwiązany barwnik usuwano, płucząc płytki (4x) w 1% (v/v) kwasie octowym, a barwnik związany z białkami ekstraho
PL 247852 BI wano 10 mM niebuforowaną zasadą Tris i oznaczano gęstość optyczną (λ = 540 μΜ) w komputerowym czytniku mikropłytek BioTek Synergy H4 Hybrid (BioTek Instruments USA). Całą procedurę mycia/barwienia przeprowadzono przy użyciu stacji myjącej BioTek EL406 (BioTek Instruments USA). Surowe wyniki absorbancji analizowano w oprogramowaniu Microsoft Excel, stosując wzór:
%ZahInh = x 100 - 100
Ak ~ / n, i 11 / gdzie:
%Zahlnh - zahamowanie proliferacji
Am - absorbancja dołków bez komórek (medium)
Ak - absorbancja dołków kontrolnych (komórki traktowane czystym medium hodowlanym)
AP - absorbancja dołków traktowanych związkami
Następnie dane dotyczące hamowania proliferacji posłużyły do obliczenia ICso - stężenia badanego środka, które hamuje proliferację 50% populacji komórek nowotworowych, obliczonego przy użyciu modelu nieliniowego GraphPadPrism 7.0 [Inhibitor] vs. response-Variable slope (cztery parametry). Każdy związek w podanych stężeniach badano w trzech egzemplarzach w jednym eksperymencie. Każdy eksperyment był powtarzany 3 razy. Uzyskane wyniki zostały przedstawione w tabelach 3.1 7.2 oraz na rysunkach Fig. 2.1 - 6.2.
Tabela 3.1 Zahamowanie profileracji komórek linii CAL148 dla poszczególnych stężeń Emetyny, Mitoksantronu i ich kombinacji w stosunku 1:5 w postaci wolnej i nanoczastce z uwzględnieniem odchylenia standardowego
Linia komórkowa: CAL148
E mety na Mitoksantron Mitoksantron + emetyna [Cząsteczkowa 5:1] Mitoksantron + emetyna [nano 5:1]
Stężenie [μΜ] Zah. SD Stężenie [μΜ] Zah. SD Stężenie* [μΜ] Zah. SD Stężenie* [μΜ] Zah. SD
1 82,9 1,8 5 85,6 2 5 94,2 7,4 5 89,3 4,5
0,3162 92 5 1,6 118,9 6,7 1,6 102,6 7,5 1,6 89,6 4,6
0,1 84,1 5,9 0,4954 108,7 3,9 0,4954 109,2 10,3 0,4954 99,3 3,1
0,0316 66,1 6,9 0,1567 94,7 9,1 0,1567 100,9 7,9 0,1567 96,6 2,5
0,01 0,7 8,5 0,0495 63,5 6,9 0,0495 65,4 3,5 0,0495 86,2 4,7
0,0032 3,4 20 0,0157 24,4 9 0,0157 38,6 3 0,0157 66,8 5,3
0,001 -7,5 8,8 0,005 6,1 12,9 0,005 15,4 7,2 0,005 46,4 11,9
3,16e- 004 26,8 9,6 0,0016 -0,5 7 0,0016 -4,7 7,8 0,0016 38,9 5,9
*- stężenie odnosi się do stężenia mitoksantronu w mieszaninie związków, stężenie emetyny wynika z zastosowanego stosunku molowego
PL 247852 BI
Tabela 3.2 Zahamowanie profileracji komórek linii CAL148 dla poszczególnych stężeń Emetyny, Mitoksantronu i ich kombinacji w stosunku 1:3 w postaci wolnej i nanoczastce z uwzględnieniem odchylenia standardowego
Linia komórkowa: CAL148
Emetyna Mitoksantron Mitoksantron + emetyna [Cząsteczkowa 3:1] Mitoksantron + emetyna [nano 3:1]
Stężenie [pM] Zah. SD Stężenie [μΜ] Zah. SD Stężenie* [μΜ] Zah. SD Stężenie* [μΜ] Zah. SD
1 82,9 1,8 2,9 103,1 2,3 2,9 97,3 10,6 2,9 95,2 1,8
0,3162 92 5 0,9 115,9 2,6 0,9 103,3 7,1 0,9 99,2 4,1
0,1 84,1 5,9 0,2917 105,7 9,1 0,2917 100,5 10,3 0,2917 100,2 6,9
0,0316 66,1 6,9 0,0923 83,8 11,2 0,0923 91,3 7,8 0,0923 94 6,5
0,01 0,7 8,5 0,0292 47,3 9,3 0,0292 44,7 6,5 0,0292 61,8 12,5
0,0032 3,4 20 0,0092 22 6,2 0,0092 8,1 8,2 0,0092 48 5,3
0,001 -7,5 8,8 0,0029 0,3 11,5 0,0029 -7,8 5,6 0,0029 32,1 5,5
3,16e- 004 26,8 9,6 0,0009 -4,8 12,6 0,0009 -14,6 2 0,0009 4,1 11,4
*- stężenie odnosi się do stężenia mitoksantronu w mieszaninie związków, stężenie emetyny wynika z zastosowanego stosunku molowego
Tabela 4.1 Zahamowanie profileracji komórek linii CAL51 dla poszczególnych stężeń Emetyny, Mitoksantronu i ich kombinacji w stosunku 1:5 w postaci wolnej i nanoczastce z uwzględnieniem odchylenia standardowego
Linia komórkowa: CAL51
Emetyna Mitoksantron + Mitoksantron emetyna [Cząsteczkowa 5/1] Mitoksantron + emetyna [nano 5/1]
Stężenie [μΜ] Zah. SD Stężenie [μΜ] Zah. Stężenie* SD [μΜ] Zah. SD Stężenie* [μΜ] Zah. SD
1 92,4 0,6 5 95,3 0,5 5 97,4 0,7 5 96,7 0,3
0,3162 91,9 0,8 1,6 94,2 1,2 1,6 95,7 0,4 1,6 96,6 0,4
0,1 88,2 1,5 0,4954 80,3 2 0,4954 89,7 5,4 0,4954 93,9 0,8
0,0316 81,1 2,4 0,1567 60 8,4 0,1567 79,4 6,1 0,1567 84,1 1,4
0,01 19,5 8,3 0,0495 19,8 7,3 0,0495 35,2 7,2 0,0495 66,5 2,9
0,0032 0.3 8 0,0157 -3,3 5,8 0,0157 5,1 7,2 0,0157 55,3 2,6
0,001 -9,4 11 0,005 -9,4 3,8 0,005 0 6,3 0,005 27,5 3,3
3,16e- 004 -5,9 10,4 0,0016 -2 0,0016 4,3 -1,7 8,2 0,0016 7,6 5,3
*- stężenie odnosi się do stężenia mitoksantronu w mieszaninie związków, stężenie emetyny wynika z zastosowanego stosunku molowego
PL 247852 BI
Tabela 4.2 Zahamowanie profileracji komórek linii CAL51 dla poszczególnych stężeń Emetyny, Mitoksantronu i ich kombinacji w stosunku 1:3 w postaci wolnej i nanoczastce z uwzględnieniem odchylenia standardowego
Linia komórkowa: CAL51
Emetyna Mitoksantron Mitoksantron + emetyna [Cząsteczkowa 3/1] Mitoksantron + emetyna [nano 3/1]
Stężenie [μΜ] Zah. SD Stężenie [μΜ] Zah. SD Stężenie* [μΜ] Zah. SD Stężenie* [μΜ] Zah. SD
1 92,4 0,6 2,9 95,5 0,9 2,9 97,1 0,8 2,9 95,5 0,2
0,3162 91,9 0,8 0,9 90,2 2,7 0,9 94,3 4 0,9 96,7 1
0,1 88,2 1,5 0,2917 75,3 3,2 0,2917 88,9 5,8 0,2917 91,5 1,9
0,0316 81,1 2,4 0,0923 39,8 10 0,0923 79,4 7,5 0,0923 82,6 3,4
0,01 19,5 8,3 0,0292 -0,2 2,3 0,0292 26,6 2 0,0292 55,2 4,4
0,0032 0,9 8 0,0092 -0,8 5,2 0,0092 -2,6 3,7 0,0092 25,3 8,1
0,001 -9,4 11 0,0029 -0,4 8,2 0,0029 -1 4,2 0,0029 2,7 4,1
3,16e-004 -5,9 10,4 0,0009 -1.2 6,2 0,0009 -4,3 6,5 0,0009 -1.3 1,4
*- stężenie odnosi się do stężenia mitoksantronu w mieszaninie związków, stężenie emetyny wynika z zastosowanego stosunku molowego
Tabela 5.1 Zahamowanie profileracji komórek linii Hs578T dla poszczególnych stężeń Emetyny, Mitoksantronu i ich kombinacji w stosunku 1:5 w postaci wolnej i nanoczastce z uwzględnieniem odchylenia standardowego
Linia komórkowa: Hs578T
Emetyna Mitoksantron Mitoksantron + emetyna [Cząsteczkowa 5/1] Mitoksantron + emetyna [nano 5/1]
Stężenie [μΜ] Zah. SD Stężenie [μΜ] Zah. SD Stężenie* [μΜ] Zah. SD Stężenie* [μΜ] Zah. SD
1 91,4 2 5 91,9 3,2 5 93 0,7 5 94 2,1
0,3162 90,7 2 1,6 89,6 2,3 1,6 91,5 1,1 1,6 90,8 3
o,1 87,7 2,1 0,4954 46,8 8 0,4954 87,4 1,9 0,4954 87,6 3,2
0,0316 63,5 10,3 0,1567 37,5 8,3 0,1567 62,3 7,6 0,1567 64,9 9,3
0,01 0,4 3,3 0,0495 4 2,6 0,0495 8,2 9,3 0,0495 29,9 5,8
0,0032 -0,3 1,6 0,0157 -1,1 1,1 0,0157 -4,3 5,3 0,0157 12,1 3,8
0,001 -0,9 2,1 0,005 -3,7 2,9 0,005 -4,8 0,6 0,005 -1,8 4,8
3,16e- 004 0,6 1,7 0,0016 -2,1 1,1 0,0016 -4,8 1,7 0,0016 -2,4 1,5
*- stężenie odnosi się do stężenia mitoksantronu w mieszaninie związków, stężenie emetyny wynika z zastosowanego stosunku molowego
PL 247852 Β1
Tabela 5.2 Zahamowanie profileracji komórek linii Hs578T dla poszczególnych stężeń Emetyny, Mitoksantronu i ich kombinacji w stosunku 1:3 w postaci wolnej i nanoczastce z uwzględnieniem odchylenia standardowego
Linia komórkowa: Hs578T
E mety na Mitoksantron Mitoksantron + emetyna [Cząsteczkowa 3/1] Mitoksantron + emetyna [nano 3/1]
Stężenie [μΜ] Zah. SD Stężenie [μΜ] Zah. SD Stężenie* [μΜ] Zah. SD Stężenie* [μΜ] Zah. SD
1 91,4 2 2,9 90,1 1,5 2,9 93,3 0,9 2,9 94,6 2,8
0,3162 90,7 2 0,9 80,4 5 0,9 90,5 0,8 0,9 90,8 2
0,1 87,7 2,1 0,2917 41,3 7,2 0,2917 87,7 1,6 0,2917 87,6 2,5
0,0316 63,5 10,3 0,0923 33,3 11,7 0,0923 65 8,1 0,0923 62,5 13,7
0,01 0,4 3,3 0,0292 0,7 3,5 0,0292 3 0,8 0,0292 14,3 4,8
0,0032 -0,3 1,6 0,0092 -1,4 3,8 0,0092 1,3 2,5 0,0092 -2,8 4,1
0,001 -0,9 2,1 0,0029 -2,3 2,1 0,0029 -0,9 2,2 0,0029 -3,6 2,8
3,16e- 004 0,6 1,7 0,0009 -0,2 1,8 0,0009 -1,9 2,1 0,0009 0 3,2
*- stężenie odnosi się do stężenia mitoksantronu w mieszaninie związków, stężenie emetyny wynika z zastosowanego stosunku molowego
Tabela 6.1 Zahamowanie profileracji komórek linii MDAMB231 dla poszczególnych stężeń Emetyny, Mitoksantronu i ich kombinacji w stosunku 1:5 w postaci wolnej i nanoczastce z uwzględnieniem odchylenia standardowego
Linia komórkowa: MDAMB231
Emetyna Mitoksantron Mitoksantron + emetyna [Cząsteczkowa 5/1] Mitoksantron + emetyna [nano 5/1]
Stężenie [μΜ] Zah. SD Stężenie [μΜ] Zah. SD Stężenie* [μΜ] Zah. SD Stężenie* [μΜ] Zah. SD
1 97,6 2,1 5 95,3 1,5 5 97,7 1 5 98,5 2,4
0,3162 96,7 1,8 1,6 77,4 3,7 1,6 97,2 1,9 1.6 90 14,6
0,1 85,3 10,4 0,4954 38,5 6,3 0,4954 88,3 2,3 0,4954 84,7 7,5
0,0316 37,3 6,2 0,1567 17,5 8,7 0,1567 40,5 2,7 0,1567 47 2,9
0,01 1,3 1,7 0,0495 -0,6 13,4 0,0495 3,8 4,9 0,0495 22,4 4,7
0,0032 0,2 6,6 0,0157 -12,9 9,5 0,0157 -3,7 6 0,0157 16,2 4,5
0,001 -6,2 1,9 0,005 -13,4 7,4 0,005 -3,1 5 0,005 4,9 3,9
3,16e004 -8,2 6,7 0,0016 -13,6 5,1 0,0016 -5,9 5,1 0,0016 4,4 3,5
*- stężenie odnosi się do stężenia mitoksantronu w mieszaninie związków, stężenie emetyny wynika z zastosowanego stosunku molowego
PL 247852 BI
Tabela 6.2 Zahamowanie profileracji komórek linii MDAMB231 dla poszczególnych stężeń Emetyny, Mitoksantronu i ich kombinacji w stosunku 1:3 w postaci wolnej i nanoczastce z uwzględnieniem odchylenia standardowego
Linia komórkowa: MDAMB231
Emetyna Mitoksantron Mitoksantron + emetyna [Cząsteczkowa 3/1] Mitoksantron + emetyna [nano 3/1]
Stężenie [pM] Zań. SD Stężenie [μΜ] Zah. SD Stężenie* [pM] Zah. SD Stężenie* [pM] Zah. SD
1 97,6 2,1 2,9 89,3 2,1 2,9 96,5 1,6 2,9 99 1
0,3162 96,7 1,8 0,9 70,1 5,3 0,9 95,1 2,4 0,9 94,7 6,6
0,1 85,3 10,4 0,2917 27,4 4,3 0,2917 88,3 3,1 0,2917 88,6 5,8
0,0316 37,3 6,2 0,0923 -10,5 4,9 0,0923 33,1 6,5 0,0923 34,7 3,1
0,01 1,3 1,7 0,0292 -4,1 7,9 0,0292 -0,7 4,3 0,0292 7,8 1,5
0,0032 0,2 6,6 0,0092 -5,1 4,7 0,0092 -3,6 3,2 0,0092 8,8 7,5
0,001 -6,2 1,9 0,0029 -6,5 6,4 0,0029 -8 9,3 0,0029 8,3 7,9
3,16e- 004 -8,2 6,7 0,0009 -7,3 8,1 0,0009 -5,3 12,9 0,0009 3,8 7,2
*- stężenie odnosi się do stężenia mitoksantronu w mieszaninie związków, stężenie emetyny wynika z zastosowanego stosunku molowego
Tabela 7.1 Zahamowanie profileracji komórek linii MDAMB453 dla poszczególnych stężeń Emetyny, Mitoksantronu i ich kombinacji w stosunku 1:5 w postaci wolnej i nanoczastce z uwzględnieniem odchylenia standardowego
Linia komórkowa: MDAMB453
Emetyna Mitoksantron Mitoksantron + emetyna [Cząsteczkowa 5/1] Mitoksantron + emetyna [nano 5/1]
Stężenie [pM] Zah. SD Stężenie [pM] Zah. SD Stężenie* [pM] Zah. SD Stężenie* [pM] Zah. SD
1 84.4 1.2 5 95.3 3.1 5 96.4 3.2 5 96.8 2
0,3162 86.6 0.6 1,6 87.8 8.1 1,6 100.6 3.4 1,6 95.9 1.6
0,1 80.8 1.3 0,4954 54.8 5.8 0,4954 79.5 1 0,4954 82.7 3.5
0,0316 50.8 8.5 0,1567 24.4 0.3 0,1567 59.5 4.1 0,1567 56.3 5.5
0,01 14.3 3.3 0,0495 11.3 4.8 0,0495 22.6 12.5 0,0495 38.1 2.2
0,0032 3.8 9.3 0,0157 6.3 5.1 0,0157 14.5 8.7 0,0157 20.3 3
0,001 -8 3.8 0,005 -2.4 4.9 0,005 10.2 17.7 0,005 5.9 8.9
3,16e- 004 -8.8 2.8 0,0016 -10.1 5.9 0,0016 -12.2 19.1 0,0016 4.1 12.6
*- stężenie odnosi się do stężenia mitoksantronu w mieszaninie związków, stężenie emetyny wynika z zastosowanego stosunku molowego
PL 247852 Β1
Tabela 7.2 Zahamowanie profileracji komórek linii MDAMB453 dla poszczególnych stężeń Emetyny, Mitoksantronu i ich kombinacji w stosunku 1:3 w postaci wolnej i nanoczastce z uwzględnieniem odchylenia standardowego
Linia komórkowa: MDAMB453
Emetyna Mitoksantron Mitoksantron + emetyna [Cząsteczkowa 3/1] Mitoksantron + emetyna [nano 3/1]
Stężenie [μΜ] Zah. SD Stężenie [μΜ] Zah. SD Stężenie* [μΜ] Zah. SD Stężenie* [μΜ] Zah. SD
1 84 4 1.2 2,9 95.3 3.1 2,9 96.8 3.8 2,9 96.8 2
0,3162 86.6 0.6 0,9 87.8 8.1 0,9 94.9 6.7 0,9 95.9 1.6
0,1 80.8 1.3 0,2917 54.8 5.8 0,2917 76.7 2.1 0,2917 82.7 3.5
0,0316 50.8 8.5 0,0923 24.4 0.3 0,0923 44.1 4.9 0,0923 56.3 5.5
0,01 14.3 3.3 0,0292 11.3 4.8 0,0292 7.6 6.9 0,0292 38.1 2.2
0,0032 3.8 9.3 0,0092 6.3 5.1 0,0092 13.8 1.2 0,0092 20.3 3
0,001 -8 3.8 0,0029 -2.4 4.9 0,0029 -3.2 20.2 0,0029 5.9 8.9
3,16e- 004 -8.8 2.8 0,0009 -10.1 5.9 0,0009 -11.9 7.8 0,0009 4.1 12.6
*- stężenie odnosi się do stężenia mitoksantronu w mieszaninie związków, stężenie emetyny wynika z zastosowanego stosunku molowego

Claims (4)

Zastrzeżenia patentowe
1. Kompozycja farmaceutyczna złożona z emetyny w stężeniu nie mniejszym niż 0,01 μΜ i mitoksantronu w stężeniu nie mniejszym niż 0,003 μΜ do zastosowania w leczeniu raka gruczołu sutkowego.
2. Kompozycja według zastrz. 1, znamienna tym, że stosunek stężeń emetyny i mitoksantronu wynosi od 1:3 do 1:5.
3. Liposom, znamienny tym, że złożony z co najmniej trzech lipidów, w tym DPPC w ilości od 48,6 do 70,7% wagowych, cholesterolu w ilości od 18,3 do 18,6% wagowych, DSPEPEG(2000)aminy w ilości od 10,6 do 10,7% wagowych i zawiera emetynę w stężeniu nie mniejszym niż 0,01 μΜ i mitoksantronu w stężeniu nie mniejszym niż 0,003 μΜ.
4. Liposom, znamienny tym, że stosunek stężeń emetyny i mitoksantronu wynosi od 1:3 do 1:5.
PL444723A 2023-05-03 2023-05-03 Kompozycja farmaceutyczna, stosowana w zapobieganiu lub leczeniu chorób nowotworowych i chorób wynikających z nadmiernej proliferacji komórek oraz liposom zawierający tę kompozycję PL247852B1 (pl)

Priority Applications (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PL444723A PL247852B1 (pl) 2023-05-03 2023-05-03 Kompozycja farmaceutyczna, stosowana w zapobieganiu lub leczeniu chorób nowotworowych i chorób wynikających z nadmiernej proliferacji komórek oraz liposom zawierający tę kompozycję
CN202480044869.8A CN121443272A (zh) 2023-05-03 2024-05-03 包含依米丁和米托蒽醌且用于预防或治疗乳腺癌的药物组合物以及包含该药物组合物的脂质体
IL324421A IL324421A (en) 2023-05-03 2024-05-03 A pharmaceutical preparation comprising emetine and mitoxantrone for the prevention or treatment of mammary gland cancer and a liposome containing this preparation
EP24741025.1A EP4704812A1 (en) 2023-05-03 2024-05-03 A pharmaceutical composition comprising emetine and mitoxantrone for the prevention or treatment of mammary gland cancer and a liposome containing this composition
PCT/PL2024/000022 WO2024228631A1 (en) 2023-05-03 2024-05-03 A pharmaceutical composition comprising emetine and mitoxantrone for the prevention or treatment of mammary gland cancer and a liposome containing this composition

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PL444723A PL247852B1 (pl) 2023-05-03 2023-05-03 Kompozycja farmaceutyczna, stosowana w zapobieganiu lub leczeniu chorób nowotworowych i chorób wynikających z nadmiernej proliferacji komórek oraz liposom zawierający tę kompozycję

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL444723A1 PL444723A1 (pl) 2024-11-04
PL247852B1 true PL247852B1 (pl) 2025-09-08

Family

ID=91898949

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL444723A PL247852B1 (pl) 2023-05-03 2023-05-03 Kompozycja farmaceutyczna, stosowana w zapobieganiu lub leczeniu chorób nowotworowych i chorób wynikających z nadmiernej proliferacji komórek oraz liposom zawierający tę kompozycję

Country Status (5)

Country Link
EP (1) EP4704812A1 (pl)
CN (1) CN121443272A (pl)
IL (1) IL324421A (pl)
PL (1) PL247852B1 (pl)
WO (1) WO2024228631A1 (pl)

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
PL436660A1 (pl) * 2021-01-13 2021-12-13 Bs Biotechna Spółka Z Ograniczoną Odpowiedzialnością Kompozycja farmaceutyczna stosowana w leczeniu nowotworów
WO2022021906A1 (zh) * 2020-07-29 2022-02-03 深圳华润九创医药有限公司 米托蒽醌制剂在制备诊治乳腺癌的药物中的应用
EP4098251A1 (en) * 2020-02-10 2022-12-07 CSPC Zhongqi Pharmaceutical Technology (Shijiazhuang) Co., Ltd. Use of mitoxantrone hydrochloride liposome for treating breast cancer
PL438742A1 (pl) * 2021-08-14 2023-02-20 Bs Biotechna Spółka Z Ograniczoną Odpowiedzialnością Liposom kationowy wiążący i stabilizujący RNA, jego zastosowanie i sposób ładowania liposomu emetyną

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104971044A (zh) * 2015-02-14 2015-10-14 吉林大学 一种米托蒽醌雌激素靶向peg修饰脂质体及其应用

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP4098251A1 (en) * 2020-02-10 2022-12-07 CSPC Zhongqi Pharmaceutical Technology (Shijiazhuang) Co., Ltd. Use of mitoxantrone hydrochloride liposome for treating breast cancer
WO2022021906A1 (zh) * 2020-07-29 2022-02-03 深圳华润九创医药有限公司 米托蒽醌制剂在制备诊治乳腺癌的药物中的应用
PL436660A1 (pl) * 2021-01-13 2021-12-13 Bs Biotechna Spółka Z Ograniczoną Odpowiedzialnością Kompozycja farmaceutyczna stosowana w leczeniu nowotworów
PL438742A1 (pl) * 2021-08-14 2023-02-20 Bs Biotechna Spółka Z Ograniczoną Odpowiedzialnością Liposom kationowy wiążący i stabilizujący RNA, jego zastosowanie i sposób ładowania liposomu emetyną

Also Published As

Publication number Publication date
CN121443272A (zh) 2026-01-30
EP4704812A1 (en) 2026-03-11
PL444723A1 (pl) 2024-11-04
IL324421A (en) 2026-01-01
WO2024228631A1 (en) 2024-11-07

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Wu et al. Synergistic therapeutic effects of Schiff's base cross-linked injectable hydrogels for local co-delivery of metformin and 5-fluorouracil in a mouse colon carcinoma model
CA2850955C (en) Pharmaceutical compositions of hydrophobic camptothecin derivatives
EP2480207B1 (en) Micelle encapsulation of therapeutic agents
Hyun et al. Engineered beta-cyclodextrin-based carrier for targeted doxorubicin delivery in breast cancer therapy in vivo
Chowdhury et al. Liposomes co-Loaded with 6-Phosphofructo-2-Kinase/Fructose-2, 6-Biphosphatase 3 (PFKFB3) shRNA Plasmid and Docetaxel for the Treatment of non-small Cell Lung Cancer: Chowdhury et al.
Cai et al. Toxicity-attenuated mesoporous silica Schiff-base bonded anticancer drug complexes for chemotherapy of drug resistant cancer
Zhang et al. Engineering a pH‐responsive polymeric micelle co‐loaded with paclitaxel and triptolide for breast cancer therapy
Kutkut et al. Formulation, development, and in vitro evaluation of a nanoliposomal delivery system for mebendazole and gefitinib
Zhou et al. De Novo Design of Structure‐Tunable Multivalent Targeting Chimeras for Tumor‐Targeted PD‐L1 Degradation and Potentiated Cancer Immunotherapy
CN109675048B (zh) 一种抗癌前药脂质体及青蒿素类脂质体纳米药物
PL247852B1 (pl) Kompozycja farmaceutyczna, stosowana w zapobieganiu lub leczeniu chorób nowotworowych i chorób wynikających z nadmiernej proliferacji komórek oraz liposom zawierający tę kompozycję
EP2632435A1 (en) Liposomal drug composition containing a polymeric guanidine derivative
Wu et al. In vivo evaluation of an anticancer drug delivery system based on heparinized mesoporous silica nanoparticles
CN109568599B (zh) 一种脂质体修饰的阿霉素及含阿霉素的纳米粒子
CN115671301A (zh) 一种IL-11Rα靶向纳米药物及其制备方法与应用
Wang et al. High Efficacy and Biocompatibility: Application and Biological Evaluation of LA67 Liposome in Colon Cancer Therapy
Lin et al. A sulfhydryl blocking reagent BT-4 sensitizes cisplatin-based micelle prodrugs for efficient treatment of breast cancer
US10980798B2 (en) Pharmaceutical compositions of hydrophobic camptothecin derivatives
WO2024228630A1 (en) A pharmaceutical composition comprising 17-aag and staurosporine for use in the prevention or treatment of cancer and diseases resulting from excessive cell proliferation and a polymer- lipid nanoparticle containing the composition
CN120437060A (zh) Peg纳米载药胶束及其制备方法和应用
Chen et al. Multi-functional F127-grafted vitamin E succinate-modified liposomes for enhancing glioma therapy
Burenkova et al. Design of BET Inhibitor Prodrugs with Superior Efficacy and Devoid of Systemic Toxicities
Folchman-Wagner Formulation and Characterization of Protein and Peptide Nanoparticles for Targeting the Acidic Tumor Microenvironment
WO2021202595A1 (en) Implant devices and methods for treatment of cervical cancer
HK1196556B (zh) 疏水性喜樹鹼衍生物的藥物組合物