PL244508B1 - Panel biosensorów ginekologiczno-onkologicznych do równoczesnego specyficznego oznaczania stężenia biomarkerów w płynach ustrojowych i homogenatach tkankowych techniką powierzchniowego rezonansu plazmonów w wersji Imaging - Google Patents
Panel biosensorów ginekologiczno-onkologicznych do równoczesnego specyficznego oznaczania stężenia biomarkerów w płynach ustrojowych i homogenatach tkankowych techniką powierzchniowego rezonansu plazmonów w wersji Imaging Download PDFInfo
- Publication number
- PL244508B1 PL244508B1 PL439230A PL43923021A PL244508B1 PL 244508 B1 PL244508 B1 PL 244508B1 PL 439230 A PL439230 A PL 439230A PL 43923021 A PL43923021 A PL 43923021A PL 244508 B1 PL244508 B1 PL 244508B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- marker
- antibody specific
- measurement
- panel
- gynecological
- Prior art date
Links
- 239000000090 biomarker Substances 0.000 title claims abstract description 19
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 16
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 title claims abstract description 12
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 title claims abstract description 9
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 title claims abstract description 9
- 238000002198 surface plasmon resonance spectroscopy Methods 0.000 title claims abstract description 9
- 230000000771 oncological effect Effects 0.000 title claims abstract description 7
- 238000005259 measurement Methods 0.000 claims abstract description 28
- 239000003550 marker Substances 0.000 claims abstract description 20
- 102000004889 Interleukin-6 Human genes 0.000 claims abstract description 19
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 claims abstract description 19
- 229940100601 interleukin-6 Drugs 0.000 claims abstract description 17
- 108010078554 Aromatase Proteins 0.000 claims abstract description 14
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 claims abstract description 12
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 claims abstract description 12
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 12
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims abstract description 12
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims abstract description 12
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 claims abstract description 8
- 239000011521 glass Substances 0.000 claims abstract description 8
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 8
- 239000010931 gold Substances 0.000 claims abstract description 8
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 claims abstract description 8
- 229940126619 mouse monoclonal antibody Drugs 0.000 claims abstract description 8
- 229960003151 mercaptamine Drugs 0.000 claims abstract description 4
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 claims abstract description 4
- 102000014654 Aromatase Human genes 0.000 claims abstract 4
- 101000623901 Homo sapiens Mucin-16 Proteins 0.000 description 17
- 102100023123 Mucin-16 Human genes 0.000 description 17
- 102100029361 Aromatase Human genes 0.000 description 14
- 238000001847 surface plasmon resonance imaging Methods 0.000 description 14
- 102100025475 Carcinoembryonic antigen-related cell adhesion molecule 5 Human genes 0.000 description 13
- 101000914324 Homo sapiens Carcinoembryonic antigen-related cell adhesion molecule 5 Proteins 0.000 description 12
- 101000914321 Homo sapiens Carcinoembryonic antigen-related cell adhesion molecule 7 Proteins 0.000 description 12
- 101000617725 Homo sapiens Pregnancy-specific beta-1-glycoprotein 2 Proteins 0.000 description 12
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 12
- -1 HE 4 Proteins 0.000 description 7
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 7
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 5
- 206010003011 Appendicitis Diseases 0.000 description 4
- 102000004245 Proteasome Endopeptidase Complex Human genes 0.000 description 4
- 108090000708 Proteasome Endopeptidase Complex Proteins 0.000 description 4
- 239000000439 tumor marker Substances 0.000 description 4
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 208000007097 Urinary Bladder Neoplasms Diseases 0.000 description 3
- 230000002357 endometrial effect Effects 0.000 description 3
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 3
- 206010005003 Bladder cancer Diseases 0.000 description 2
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 102000004266 Collagen Type IV Human genes 0.000 description 2
- 108010042086 Collagen Type IV Proteins 0.000 description 2
- 206010011498 Cryptorchism Diseases 0.000 description 2
- 201000009273 Endometriosis Diseases 0.000 description 2
- 102000000424 Matrix Metalloproteinase 2 Human genes 0.000 description 2
- 108010016165 Matrix Metalloproteinase 2 Proteins 0.000 description 2
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 2
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 2
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 2
- 201000000160 cryptorchidism Diseases 0.000 description 2
- 208000031513 cyst Diseases 0.000 description 2
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 2
- 108010028309 kalinin Proteins 0.000 description 2
- 238000011528 liquid biopsy Methods 0.000 description 2
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 description 2
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 2
- 201000005112 urinary bladder cancer Diseases 0.000 description 2
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 2
- LKDMKWNDBAVNQZ-UHFFFAOYSA-N 4-[[1-[[1-[2-[[1-(4-nitroanilino)-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl]carbamoyl]pyrrolidin-1-yl]-1-oxopropan-2-yl]amino]-1-oxopropan-2-yl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC(=O)CCC(=O)NC(C)C(=O)NC(C)C(=O)N1CCCC1C(=O)NC(C(=O)NC=1C=CC(=CC=1)[N+]([O-])=O)CC1=CC=CC=C1 LKDMKWNDBAVNQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010022366 Carcinoembryonic Antigen Proteins 0.000 description 1
- 208000005623 Carcinogenesis Diseases 0.000 description 1
- 102000004225 Cathepsin B Human genes 0.000 description 1
- 108090000712 Cathepsin B Proteins 0.000 description 1
- 102000004173 Cathepsin G Human genes 0.000 description 1
- 108090000617 Cathepsin G Proteins 0.000 description 1
- 102000004172 Cathepsin L Human genes 0.000 description 1
- 108090000624 Cathepsin L Proteins 0.000 description 1
- 102000005600 Cathepsins Human genes 0.000 description 1
- 108010084457 Cathepsins Proteins 0.000 description 1
- 206010011732 Cyst Diseases 0.000 description 1
- 102000012192 Cystatin C Human genes 0.000 description 1
- 108010061642 Cystatin C Proteins 0.000 description 1
- 102000016359 Fibronectins Human genes 0.000 description 1
- 108010067306 Fibronectins Proteins 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 102000000380 Matrix Metalloproteinase 1 Human genes 0.000 description 1
- 108010016113 Matrix Metalloproteinase 1 Proteins 0.000 description 1
- 102000008880 Peptidase C12, ubiquitin carboxyl-terminal hydrolases Human genes 0.000 description 1
- 108050000823 Peptidase C12, ubiquitin carboxyl-terminal hydrolases Proteins 0.000 description 1
- 102100037265 Podoplanin Human genes 0.000 description 1
- 101710118150 Podoplanin Proteins 0.000 description 1
- 102000007584 Prealbumin Human genes 0.000 description 1
- 108010071690 Prealbumin Proteins 0.000 description 1
- 102100039865 Ubiquitin carboxyl-terminal hydrolase 1 Human genes 0.000 description 1
- 101710167636 Ubiquitin carboxyl-terminal hydrolase 1 Proteins 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 230000036952 cancer formation Effects 0.000 description 1
- 231100000504 carcinogenesis Toxicity 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000001175 cerebrospinal fluid Anatomy 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 210000004696 endometrium Anatomy 0.000 description 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 230000036210 malignancy Effects 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 230000002611 ovarian Effects 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 1
- 210000003296 saliva Anatomy 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 239000000107 tumor biomarker Substances 0.000 description 1
Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Magnetic Resonance Imaging Apparatus (AREA)
Abstract
Przedmiotem zgłoszenia jest panel biosensorów ginekologiczno-onkologicznych do równoczesnego specyficznego oznaczania stężenia biomarkerów w płynach ustrojowych i homogenatach tkankowych techniką powierzchniowego rezonansu plazmonów w wersji Imaging w celu diagnostyki raka jajnika i innych schorzeń natury ginekologicznej. Panel zawiera płytkę szklaną pokrytą warstwą złota oraz siatkę polimeru tworzącą pęk miejsc aktywnych zawierających pięć różnych warstw receptorowych z przeciwciałami specyficznymi na dany marker oraz jedną warstwę odniesienia, przy czym warstwy receptorowe znajdują się na pięciu polach pomiarowych równomiernie rozłożonych na okręgu a warstwa odniesienia stanowi szóste pole pomiarowe usytuowane w środku. Dodatkowo każde z sześciu pól pomiarowych zawiera dwanaście punktów pomiarowych Wszystkie przeciwciała są połączone kowalencyjnie z linkerem — cysteaminą łączącą receptory z warstwą złota pokrywającą płytkę szklaną, a warstwa odniesienia zawiera zimmobilizowane BSA (BSA). Przy czym warstwy receptorowe pięciu pól pomiarowych równomiernie rozłożonych na okręgu stanowią królicze poliklonalne przeciwciało specyficzne na marker CA-125 (CA-125), królicze poliklonalne przeciwciało specyficzne na marker HE 4 (HE4), mysie monoklonalne przeciwciało specyficzne na marker CEA (CEA), królicze poliklonalne przeciwciało specyficzne na aromatazę (ARO) oraz mysie monoklonalne przeciwciało specyficzne na interleukine 6 (IL6).
Description
Opis wynalazku
Przedmiotem wynalazku jest panel biosensorów ginekologiczno-onkologicznych do równoczesnego specyficznego oznaczania stężenia biomarkerów w płynach ustrojowych i homogenatach tkankowych techniką powierzchniowego rezonansu plazmonów w wersji Imaging w celu diagnostyki raka jajnika i innych schorzeń natury ginekologicznej.
Diagnostyka dokonywana na podstawie stężenia biomarkerów w płynach ustrojowych takich jak surowica lub osocze krwi, mocz, ślina, płyn mózgowo-rdzeniowy jest określana jako ciekła biopsja. Ma ona stanowić alternatywę do inwazyjnej biopsji polegającej na pobraniu wycinków tkanek. Oznaczanie stężenia biomarkerów w płynach ustrojowych w coraz większym stopniu stanowi podstawę skutecznej diagnostyki. Oczekuje się, że stężenie biomarkera będzie umożliwiało wykrycie choroby, a ponadto pozwoli na określenie stadium choroby oraz skuteczności terapii. Niestety, znane i stosowane obecnie biomarkery nie spełniają pokładanych oczekiwań w pełni. Oczekuje się, że skuteczność wykrycia choroby będzie 100-procentowa a jednocześnie - całkowity brak wyników fałszywie pozytywnych. Brak takich biomarkerów powoduje, że diagnostyka odwołuje się do wyników dwóch lub trzech biomarkerów. Przykładem takiego podejścia jest algorytm ROMA (risk of ovarian malignancy algorithm), obliczany na podstawie wyników dwóch biomarkerów CA-125 and HE 4.
Stosunkowo często ciekła biopsja jest instrumentem diagnostycznym w zakresie chorób ginekologiczno-onkologicznych. CA-125 and HE 4 są szeroko stosowane w diagnostyce raka jajnika. CA-125 jest także markerem raka piersi (Jie Wu, Zhifeng Fu, Feng Yan, Huangxian Ju, Biomedical and clinical applications of immunoassays and immunosensors for tumor markers, Trends in Analytical Chemistry, Vol. 26, No. 7, 2007, 679-688.). Innym markerem raka piersi jest CEA. Nowym markerem związanym z endometriozą jest aromataza (Gorodkiewicz E., Sankiewicz A., Laudański P. “Surface plasmon resonance imaging biosensors for aromatase based on a potent inhibitor and a specific antibody: Sensor development and application for biological material”, Central European Journal of Chemistry, 2014, 12(5), 557-567,). Interleukina IL-6 jest znanym markerem stanów zapalnych. Równoczesne oznaczanie tych 5 biomarkerów dostarczy znacznie więcej informacji niż wynik pojedynczego biomarkera.
Techniką pozwalającą na oznaczanie tych biomarkerów jest powierzchniowy rezonans plazmonów w wersji obrazowej (Imaging) (SPRi) realizowany w wersji pęku punktów pomiarowych i pomiarem SPRi bez obecności roztworu a różniącą się technicznie od wersji przepływowej SPR. Została ona przedstawiona m.in. w pracach: A. Sankiewicz, L. Romanowicz, P. Laudański, B. Zelazowska-Rutkowska, B. Puzan, B. Cylwik, E. Gorodkiewicz, SPR imaging biosensor for determination of laminin-5 as a potential cancer marker in biological material, Anal Bioanal Chem. 2016; 408: 5269-5276; A. Sankiewicz, Z. Łukaszewski, K. Trojanowska, E. Gorodkiewicz, Determination of collagen type IV by Surface Plasmon Resonance Imaging using a specific biosensor, Anal Biochem. 2016; 515: 40-46; A. Sankiewicz, A. Markowska, Z. Łukaszewski, B. Puzan, E. Gorodkiewicz, Methods for 20S Immunoproteasome and 20S Constitutive Proteasome Determination Based on SPRI Biosensors, Cell Molec Bioengin. 2017; 10: 174-185.40-46; A. Tokarzewicz, L. Romanowicz, I. Sveklo, E. Gorodkiewicz, The development of a matrix metalloproteinase-1 biosensor based on the surface plasmon resonance imaging technique, Anal Methods. 2016;8:6428-6435; A. Tokarzewicz, L. Romanowicz, I. Sveklo, E. Matuszczak, A. Hermanowicz, E. Gorodkiewicz. SPRI biosensors for quantitative determination of matrix metalloproteinase-2, Anal Methods. 9(2017) 2407-2414; A. Sankiewicz, L. Romanowicz, M. Pyc, A. Hermanowicz, E. Gorodkiewicz, SPR imaging biosensor for the quantitation of fibronectin concentration in blood samples, J Pharmac Biomed. Anal. 150(2018)1-8; A. Tokarzewicz, L. Romanowicz, A. Sankiewicz, A. Hermanowicz, K. Sobolewski, E. Gorodkiewicz, A New Analytical Method for Determination of Cathepsin L Based on the Surface Plasmon Resonance Imaging Biosensor, Int J Mol Sci.; 20(2019)2166.
Zastosowanie bioanalityczne SPRi przedstawiają m.in. publikacje: A. Sankiewicz, T. Guszcz, R. Mena-Hortelano, K. Żukowski, E. Gorodkiewicz, Podoplanin serum and urine concentration in transitional bladder cancer, Cancer Biomark. 2016; 16: 343-350; E. Matuszczak, M. Tylicka, A. Hermanowicz, W. Debek, A. Sankiewicz, E. Gorodkiewicz, Application of SPR imaging biosensor for the measurement of 20S proteasomes in blood plasma of children with thermal injury, Annal Clin Lab Sci. 2016; 46: 407-411; A. Tokarzewicz, T. Guszcz, A. Onopiuk, R. Kozlowski, E. Gorodkiewicz, Utility of cystatin C as a potential bladder tumour biomarker confirmed by surface plasmon resonance technique, Indian J A Med Res. 2018; 218: 46-50; E. Matuszczak, M. Tylicka, W. Debek, A. Sankiewicz, E. Gorodkiewicz, A. Hermanowicz, Overexpression of ubiquitin carboxyl-terminal hydrolase L1 (UCHL1) in serum of chil dren after thermal injury, Adv Med Sci. 2017; 62: 83-86; A. Weremijewicz, E. Matuszczak, A. Sankiewicz, M. Tylicka, M. Komarowska, A. Tokarzewicz et al., Matrix metalloproteinase-2 and its correlation with basal membrane components laminin-5 and collagen type IV in paediatric burn patients measured with Surface Plasmon Resonance Imaging (SPRI) biosensors, Burns, 2018; 44: 931-940; D. Toliczenko-Bematowicz, E. Matuszczak, M. Tylicka, B. Szymańska, M. Komarowska , E. Gorodkiewicz, et al. Overexpression of ubiquitin carboxyl-terminalhydrolase 1 (UCHL1) in boys with cryptorchidism, Plos One, 2018; 13 : e0191806; E. Matuszczak, M. Tylicka, W. Debek, A. Sankiewicz, E. Gorodkiewicz, A. Hermanowicz, Concentration of Proteasome in the Blood Plasma of Children with Acute Appendicitis, Before and After Surgery, and Its Correlation with CRP, World J Surg. 2018; 42: 2259-2264; E. Matuszczak, M. Tylicka, W. Debek, A. Tokarzewicz, E. Gorodkiewicz, A. Hermanowicz, Concentration of UHCL1 in the Serum of Children with Acute Appendicitis, Before and After Surgery, and Its Correlation with CRP and Prealbumin, J Investig Surg. 2018; 31: 136-141; D. Toliczenko-Bematowicz, E. Matuszczak, M. Tylicka, A. Sankiewicz, M. Komarowska, E. Gorodkiewicz, et al. 20S proteasome in the blood plasma of boys with cryptorchidism, J Endocrinol Investig. 2018; 41: 1103-1106; E. Matuszczak,
A. Sankiewicz, W. Debek, E. Gorodkiewicz, R. Milewski, A. Hermanowicz, Immunoproteasome in the blood plasma of children with acute appendicitis, and its correlation with proteasome and UCHL1 measured by SPR imaging biosensors, Clin Exper Immun. 2018; 191: 125-132; E. Matuszczak, M. Komarowska, M. Tylicka, W. Debek , E. Gorodkiewicz, A. Tokarzewicz, et al, Determination of the concentration of cathepsin B by SPRI biosensor in children with appendicitis, and its correlation with proteasomes, Adv Clin Exp Med. 2018; 27:1529-1534: R. Grzywa , E. Gorodkiewicz, E. Burchacka, A. Lesner, R Laudański, Z. Lukaszewski, M. Sienczyk, Determination of cathepsin G in endometrial tissue using a surface plasmon resonance imaging biosensor with tailoredphosphonic inhibitor, Eur J Obstetr Gynecol Reprod Biol. 2014; 182: 38-42; P. Laudański, E. Gorodkiewicz, B. Ramotowska, R. Charkiewicz, M. Kuźmicki, J. Szamatowicz, Determination of cathepsins B, D and G concentration in eutopic proliferative endometrium of women with endometriosis by the surface plasmon resonance imaging (SPRI) technique, Eur J Obstetr Gynecol Reprod Biol. 2013;169: 80-83.
Technika ta pozwala na oznaczanie w płynach ustrojowych biomarkerów CA-125 (Szymańska B., Łukaszewski Z., Hermanowicz-Szamatowicz K., Gorodkiewicz E., A biosensor for determination of the circulating biomarker CA125/MUC16 by Surface Plasmon Resonance Imaging, Talanta, 2020, 206, 120-187,) CEA (Szymańska, B., Lukaszewski, Z., Hermanowicz-Szamatowicz, K., Gorodkiewicz, E., An immunosensor for the determination of carcinoembryonic antigen by Surface Plasmon Resonance imaging, Analytical Biochemistry, 609(2020)113964), aromatazy (Guszcz T, Szymańska B., Kozłowski R., Lukaszewski Z., Laskowski R, Gorodkiewicz E., Plasma aromatase as a sensitive and selective potential biomarker of bladder cancer and its role in tumorigenesis, Oncology Letters, 2020, 19,
562-568.), HE 4 (Szymańska B., Lukaszewski Z., Gorodkiewicz E., An SPRi biosensor for determination of the ovarian cancer marker HE 4 in human plasma, Sensors, w druku) oraz IL-6 (Gorodkiewicz E., Szymańska B., Łukaszewski Z., Wyrwas B.” Biosensor do oznaczania interleukiny 6 (IL-6) techniką powierzchniowego rezonansu plazmonów w wersji Imaging” za opisem patentowym P.433106.
Koncepcja panelu ginekologiczno-onkologicznego polega na umieszczeniu pięciu biosensorów na wspólnym chipie oraz wykorzystaniu szóstego miejsca pomiarowego dla pomiaru porównawczego technicznie koniecznego w procesie pomiarowym.
Istotą wynalazku jest panel biosensorów ginekologiczno-onkologicznych do równoczesnego specyficznego oznaczania stężenia biomarkerów w płynach ustrojowych i homogenatach tkankowych techniką powierzchniowego rezonansu plazmonów w wersji Imaging, służący do diagnostyki raka jajnika i innych schorzeń natury ginekologicznej.
Panel zawiera płytkę szklaną pokrytą warstwą złota oraz siatkę polimeru tworzącą pęk miejsc aktywnych zawierających pięć różnych warstw receptorowych z przeciwciałami specyficznymi do identyfikacji danego markera oraz jedną warstwę odniesienia. Warstwy receptorowe znajdują się na pięciu polach pomiarowych równomiernie rozłożonych na okręgu w panelu, a warstwa odniesienia stanowi szóste pole pomiarowe usytuowane w środku panelu.
Każde z sześciu pól pomiarowych zawiera dwanaście punktów pomiarowych. Nadto wszystkie przeciwciała są połączone kowalencyjnie z linkerem - cysteaminą łączącą receptory z warstwą złota pokrywającą płytkę szklaną, a warstwa odniesienia zawiera zimmobilizowane BSA.
Przy czym warstwy receptorowe pięciu pól pomiarowych równomiernie rozłożonych na okręgu stanowią: królicze poliklonalne przeciwciało specyficzne wobec markera CA-125, królicze poliklonalne przeciwciało specyficzne wobec markera HE 4, mysie monoklonalne przeciwciało specyficzne wobec markera CEA, królicze poliklonalne przeciwciało specyficzne wobec aromatazy oraz mysie monoklonalne przeciwciało specyficzne wobec interleukiny 6.
W korzystnym wariancie dwanaście punktów pomiarowych, każdego z sześciu pól pomiarowych jest ułożone w układzie rzędowym 2-4-4-2.
Wynalazek w przykładzie realizacji przedstawiono, na rysunku na którym fig. 1 pokazuje architekturę panelu z warstwami receptorowymi z przeciwciałami specyficznymi do identyfikacji markerów CA-125, HE 4, CEA, IL-6 i aromatazy; fig. 2 przedstawia wyniki oznaczania stężenia markerów CA-125, HE 4, CEA, IL-6 i aromatazy w surowicy krwi pacjentek z rakiem jajnika; fig. 3 wyniki oznaczania stężenia markerów CA-125, HE 4, CEA, IL-6 i aromatazy w surowicy krwi zdrowych osób z grupy kontrolnej; a fig. 4. wyniki oznaczania stężenia markerów CA-125, HE 4, CEA, IL-6 i aromatazy w surowicy krwi pacjentek z torbielą endometrialną.
Panel biosensorów do równoczesnego specyficznego oznaczania stężenia biomarkerów w płynach ustrojowych i homogenatach tkankowych techniką powierzchniowego rezonansu plazmonów w wersji Imaging w celu diagnostyki raka jajnika i innych schorzeń natury ginekologicznej zawiera płytkę szklaną pokrytą warstwą złota oraz siatkę polimeru tworzącą pęk miejsc aktywnych zawierających pięć różnych warstw receptorowych oraz jedną warstwę odniesienia. Architektura panelu składa się z pięciu pól pomiarowych (o kształcie okręgu) równomiernie rozłożonych na okręgu wokół szóstego pola pomiarowego usytuowanego w środku, a każde z sześciu pól pomiarowych zawiera dwanaście punktów pomiarowych - ułożonych w układzie rzędowym 2-4-4-2 (co pokazano na fig. 1).
Warstwę receptorową dla markera CA-125 stanowi królicze poliklonalne przeciwciało specyficzne wobec markera CA-125, dla markera HE 4 - królicze poliklonalne przeciwciało specyficzne wobec markera HE 4, dla markera CEA, mysie monoklonalne przeciwciało specyficzne wobec markera CEA, dla aromatazy ARO - królicze poliklonalne przeciwciało specyficzne wobec aromatazy oraz dla interleukiny 6 - mysie monoklonalne przeciwciało i inhibitor specyficzny wobec interleukiny 6 IL-6, a wszystkie przeciwciała są połączone kowalencyjnie z linkerem - cysteaminą łączącą receptory z warstwą złota pokrywającą płytkę szklaną. Warstwa odniesienia zawiera zimmobilizowane BSA.
Warto dodać, że panel według wynalazku jest nowym narzędziem o dużym potencjale diagnostycznym, którego znaczenie oceni środowisko medyczne związane z diagnostyką raka jajnika i innych schorzeń natury ginekologicznej. Przykład realizacji stanowią próbkę możliwości panelu. Jednocześnie podobne rozwiązania nie były dotychczas stosowane. Dodatkową korzyścią zastosowania panelu jest możliwość wyznaczenia algorytmu ROMA z otrzymanych wyników.
Przykłady stosowania
Cztery różne próbki surowicy krwi pacjentek z rakiem jajnika poddano oznaczaniu za pomocą panelu według przykładu realizacji. Wyniki oznaczania stężenia markerów CA-125, HE 4, CEA, IL-6 i ARO w surowicy krwi pacjentek z rakiem jajnika przedstawiono na fig. 2.
Dla porównania przeprowadzono oznaczanie tych markerów w surowicy krwi czterech zdrowych osób z grupy kontrolnej. Wyniki oznaczania stężenia markerów CA-125, HE 4, CEA, IL-6 i ARO w surowicy krwi zdrowych osób z grupy kontrolnej - przedstawiono na fig. 3.
Widać wyraźnie wielokrotnie wyższe wyniki w próbkach pacjentek z rakiem jajnika niż w grupie kontrolnej, a także zróżnicowanie wyników w grupie pacjentek, mogące świadczyć o różnym zaawansowaniu choroby.
Warto zwrócić uwagę, że wyniki CA-125 kształtują się na poziomie μg/ml, IL-6 - na poziomie pg/ml a pozostałych markerów - na poziomie ng/ml.
Zastosowanie panelu może także dotyczyć innych schorzeń natury ginekologicznej. Przykładem mogą być znacznie podwyższone wyniki markerów CA-125, HE 4, CEA, IL-6 i ARO w surowicy krwi pacjentek z torbielą endometrialną, co pokazano na fig. 4 rysunku.
Claims (2)
1. Panel biosensorów do równoczesnego specyficznego oznaczania stężenia biomarkerów ginekologiczno-onkologicznych w płynach ustrojowych i homogenatach tkankowych techniką powierzchniowego rezonansu plazmonów w wersji Imaging w celu diagnostyki raka jajnika i innych schorzeń natury ginekologicznej znamienny tym, że zawiera płytkę szklaną pokrytą warstwą złota oraz siatkę polimeru tworzącą pęk miejsc aktywnych zawierających pięć różnych warstw receptorowych z przeciwciałami specyficznymi wobec danego markera oraz
PL 244508 Β1 jedną warstwę odniesienia, przy czym warstwy receptorowe znajdują się na pięciu polach pomiarowych równomiernie rozłożonych na okręgu a warstwa odniesienia stanowi szóste pole pomiarowe usytuowane w środku, przy czym każde z sześciu pól pomiarowych zawiera dwanaście punktów pomiarowych, nadto wszystkie przeciwciała są połączone kowalencyjnie z linkerem - cysteaminą łączącą receptory z warstwą złota pokrywającą płytkę szklaną, a warstwa odniesienia zawiera zimmobilizowane BSA (BSA), przy czym warstwy receptorowe pięciu pól pomiarowych równomiernie rozłożonych na okręgu stanowią: królicze poliklonalne przeciwciało specyficzne wobec markera CA-125 (CA-125), królicze poliklonalne przeciwciało specyficzne wobec markera HE 4 (HE4), mysie monoklonalne przeciwciało specyficzne wobec markera CEA (CEA), królicze poliklonalne przeciwciało specyficzne wobec aromatazy (ARO) oraz mysie monoklonalne przeciwciało specyficzne wobec interleukiny 6 (IL-6).
2. Panel biosensorów według zastrz. 1 znamienny tym, że dwanaście punktów pomiarowych, każdego z sześciu pól pomiarowych jest ułożone w układzie rzędowym 2-4-4-2.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL439230A PL244508B1 (pl) | 2021-10-15 | 2021-10-15 | Panel biosensorów ginekologiczno-onkologicznych do równoczesnego specyficznego oznaczania stężenia biomarkerów w płynach ustrojowych i homogenatach tkankowych techniką powierzchniowego rezonansu plazmonów w wersji Imaging |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL439230A PL244508B1 (pl) | 2021-10-15 | 2021-10-15 | Panel biosensorów ginekologiczno-onkologicznych do równoczesnego specyficznego oznaczania stężenia biomarkerów w płynach ustrojowych i homogenatach tkankowych techniką powierzchniowego rezonansu plazmonów w wersji Imaging |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL439230A1 PL439230A1 (pl) | 2023-04-17 |
| PL244508B1 true PL244508B1 (pl) | 2024-02-05 |
Family
ID=85983174
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL439230A PL244508B1 (pl) | 2021-10-15 | 2021-10-15 | Panel biosensorów ginekologiczno-onkologicznych do równoczesnego specyficznego oznaczania stężenia biomarkerów w płynach ustrojowych i homogenatach tkankowych techniką powierzchniowego rezonansu plazmonów w wersji Imaging |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| PL (1) | PL244508B1 (pl) |
-
2021
- 2021-10-15 PL PL439230A patent/PL244508B1/pl unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| PL439230A1 (pl) | 2023-04-17 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Zhu et al. | Using a glucose meter to quantitatively detect disease biomarkers through a universal nanozyme integrated lateral fluidic sensing platform | |
| CA2642051C (en) | Detection of cancer by elevated levels of bcl-2 | |
| CN112345755A (zh) | 乳腺癌的生物标志物及其应用 | |
| US20070122856A1 (en) | Tissue diagnostics for ovarian cancer | |
| Guszcz et al. | Plasma aromatase as a sensitive and selective potential biomarker of bladder cancer and its role in tumorigenesis | |
| Micu et al. | The added value of CA125, HE4, and CA72-4 as markers for ovarian endometriosis diagnosis | |
| US7662580B2 (en) | Tissue diagnostics for breast cancer | |
| KR20200070177A (ko) | 암의 진단용 조성물 | |
| CN114814224A (zh) | 乳头溢液中的Hsp90α在乳腺癌中的应用 | |
| CN118641775A (zh) | 一种用于诊断、鉴别诊断和预后评估脑卒中的标志物、试剂盒及药物 | |
| CN115372616B (zh) | 胃癌相关的生物标志物及其应用 | |
| RU2612021C1 (ru) | Способ прогнозирования риска развития аденокарциномы желудка при хронических процессах язвообразования органа | |
| CN112129954B (zh) | Mmp7、ctse或lamc2蛋白在制备肝内胆管细胞癌诊断试剂中的应用 | |
| CN116087522A (zh) | 胰腺癌肿瘤分子标志物tnk2及检测试剂盒及其应用 | |
| KR102216386B1 (ko) | 암의 진단용 조성물 | |
| Deliu et al. | Utility of tumor markers as a diagnostic tool | |
| JP6602481B2 (ja) | 予後診断方法及び該方法において有用なキット | |
| JP2010181403A (ja) | ガンの検出方法とそれに使用されるキット | |
| CN113552353B (zh) | 一种用于PCa及CRPC疾病诊断的磁微粒化学发光试剂盒 | |
| KR102433986B1 (ko) | 암의 진단용 조성물 | |
| KR20210109724A (ko) | 암의 진단용 조성물 | |
| RU2740382C1 (ru) | Способ выявления пациентов с повышенным риском развития рака простаты | |
| WO2002037105A1 (en) | Diagnostic kit for schizophrenia | |
| Mhaske et al. | Scope and applications of biosensors in early detection of oropharyngeal cancers | |
| PL241404B1 (pl) | Biosensor do specyficznego oznaczania stężenia ludzkiego białka z komórek nabłonkowych najądrza 4 (HE 4) |