PL239791B1 - Test paskowy do wykrywania enzootycznej białaczki bydła i sposób wykrywania enzootycznej białaczki bydła z wykorzystaniem tego testu paskowego - Google Patents

Test paskowy do wykrywania enzootycznej białaczki bydła i sposób wykrywania enzootycznej białaczki bydła z wykorzystaniem tego testu paskowego Download PDF

Info

Publication number
PL239791B1
PL239791B1 PL430863A PL43086319A PL239791B1 PL 239791 B1 PL239791 B1 PL 239791B1 PL 430863 A PL430863 A PL 430863A PL 43086319 A PL43086319 A PL 43086319A PL 239791 B1 PL239791 B1 PL 239791B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
test
sample
solution
casein
protein
Prior art date
Application number
PL430863A
Other languages
English (en)
Other versions
PL430863A1 (pl
Inventor
Mirosława SKUPIŃSKA
Mirosława Skupińska
Agnieszka BELTER
Agnieszka Belter
Andrzej Rapak
Justyna Kutkowska
Małgorzata GRUDZIEŃ
Małgorzata Grudzień
Marcin CZERWIŃSKI
Marcin Czerwiński
Ewa JAŚKIEWICZ
Ewa Jaśkiewicz
Radosław KACZMAREK
Radosław Kaczmarek
Agata ZERKA
Agata Zerka
Katarzyna SZYMCZAK-KULUS
Katarzyna Szymczak-Kulus
Original Assignee
Bioscientia Spolka Z Ograniczona Odpowiedzialnoscia
Inst Immunologii I Terapii Doswiadczalnej Im Ludwika Hirszfelda Polskiej Akademii Nauk
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Bioscientia Spolka Z Ograniczona Odpowiedzialnoscia, Inst Immunologii I Terapii Doswiadczalnej Im Ludwika Hirszfelda Polskiej Akademii Nauk filed Critical Bioscientia Spolka Z Ograniczona Odpowiedzialnoscia
Priority to PL430863A priority Critical patent/PL239791B1/pl
Priority to PCT/IB2020/057467 priority patent/WO2021028802A1/en
Priority to EP20775931.7A priority patent/EP4014044A1/en
Publication of PL430863A1 publication Critical patent/PL430863A1/pl
Publication of PL239791B1 publication Critical patent/PL239791B1/pl

Links

Classifications

    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/569Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for microorganisms, e.g. protozoa, bacteria, viruses
    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/569Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for microorganisms, e.g. protozoa, bacteria, viruses
    • G01N33/56983Viruses
    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/558Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor using diffusion or migration of antigen or antibody
    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/005Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from viruses
    • G01N2333/08RNA viruses
    • G01N2333/15Retroviridae, e.g. bovine leukaemia virus, feline leukaemia virus, feline leukaemia virus, human T-cell leukaemia-lymphoma virus
    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2469/00Immunoassays for the detection of microorganisms
    • G01N2469/20Detection of antibodies in sample from host which are directed against antigens from microorganisms

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Description

PL 239 791 B1
Opis wynalazku
Przedmiotem wynalazku jest test paskowy do wykrywania enzootycznej białaczki bydła poprzez oznaczenie przeciwciał anty-BLV w próbce mleka krowiego. Wynalazek dotyczy także sposobu wykrywania enzootycznej białaczki bydła z wykorzystaniem tego testu paskowego.
Testy paskowe są od wielu lat z powodzeniem wykorzystywane zarówno w diagnostyce medycznej jak i weterynaryjnej, a także w rolnictwie, przemyśle spożywczym i ochronie środowiska. Charakteryzują się one prostotą wykonania, dużą czułością i niską ceną. W medycynie weterynaryjnej stosuje się testy zarówno do badań zwierząt gospodarskich (krów, drobiu, owiec, świń) jak i zwierząt domowych, głównie psów i kotów. Stosowane są testy wykrywające bakterie, wirusy, choroby alergiczne, ale także badające np. zdolność do rozrodu.
Enzootyczna białaczka bydła (EBL) jest chorobą zakaźną bydła wywołaną przez retrowirusa typu C, BLV (ang. Bovine Leukemia Virus), i polegającą na rozroście komórek układu limfatycznego. Choroba charakteryzuje się długim okresem inkubacji (do 7 lat) i w większości przypadków (ok. 60%) przebiega bezobjawowo, ale nie jest to związane z latencją wirusa, ponieważ jak wykazano, niektóre komórki eksprymowały wirusa (Powers i wsp., 1992). U części dorosłego bydła (10-30%) dochodzi do tworzenia się torbieli limfatycznych, u 1-10% powstają mięsaki limfatyczne na różnych narządach wewnętrznych z wyraźnym wzrostem liczby limfocytów B w okolicach mięsaka. Najczęściej występującymi objawami jest utrata wagi, obniżenie mleczności, zaburzenia trawienia, powiększenie węzłów chłonnych, porażenie tylnych części ciała (Polat i wsp., 2017).
Enzootyczna białaczka bydła jest jedną z przyczyn znaczących strat finansowych w stadach mlecznych. Badania mówią o spadku mleczności krów zainfekowanych BLV od 2,5 do 2,7% i spadku o 7% liczby poczęć (Ott i wsp., 2003).
Ponieważ choroba przez początkowy, długi okres przebiega bezobjawowo, jedynym skutecznym sposobem zapobiegania rozprzestrzeniania się infekcji jest częsta diagnostyka serologiczna i eliminowanie zakażonych zwierząt. Badania serologiczne przeprowadza się u zwierząt powyżej 6. miesiąca, gdy zanikają już przeciwciała matczyne. Sam wirus może być wykryty przy użyciu mikroskopu elektronowego w izolowanych limfocytach obwodowych, a wirusowe DNA można oznaczyć sposobem PCR. Najczęściej w diagnostyce białaczki bydła stosowane są sposoby immunologiczne: test immunodyfuzji w żelu (AGID), test immunoenzymatyczny (ELISA) oraz oznaczenia radioimmunologiczne. W sposobach tych wykrywa się przeciwciała przeciwko antygenowym białkom gp51 i p24. W literaturze można znaleźć wiele sprzecznych informacji dotyczących przydatności obu antygenów w diagnostyce. Wydaje się jednak, że przeciwciała przeciwko gp51 pojawiają się szybciej w surowicy, ich miano jest wyższe i występują w pozytywnych próbkach w zdecydowanie większej ilości (Choi i wsp., 2002, Bicka i wsp., 2001).
Patent PL214884 opisuje test ELISA do wykrywania białaczki enzootycznej u bydła, charakteryzujący się tym, że zawiera wysokooczyszczony antygen gp51 BLV uzyskany z medium hodowlanego znad komórek FLK-BLV pozbawionego całkowicie surowicy bydlęcej. Taki sposób otrzymywania antygenu gp51 zapewnia jego pełną glikozylację, co wpływa na jego reaktywność i zapewnia wysoką czułość testu.
Natomiast patent PL217257 ujawnia sposób wykrywania enzootycznej białaczki bydła i zestaw do wykrywania metodą ELISA, charakteryzujący się tym, że w próbce pobranej od badanego zwierzęcia, zwłaszcza surowicy lub mleku, wykrywa się obecność przeciwciał przeciwko antygenowym białkom wirusa BLV, zwłaszcza antygenom gp51 lub p24.
W literaturze nie-patentowej opisano paskowy test immunochromatograficzny z wykorzystaniem antygenu gp51 znakowanego koloidalnym złotem oraz monoklonalnego przeciwciała immobilizowanego na membranie testowej. Test oparty jest na konkurencyjnym wiązaniu się antygenu gp51 z przeciwciałami bydlęcymi obecnymi w surowicy bydlęcej i przeciwciałami monoklonalnymi na membranie. Czułość tego testu jest niska 1 : 10 w porównaniu z surowicą referencyjną E05 (Kim i współpr., 2016).
Zgłoszenie chińskie CN101303351 opisuje test paskowy do wykrywania enzootycznej białaczki bydła w surowicy krwi z wykorzystaniem białka gp51 i immunochromatografii opartej na koloidalnym złocie, przy czym antygen p51 eksprymowany jest w systemie bakteryjnym, nie jest więc glikoproteiną.
Celem wynalazku było zatem opracowanie prostego i szybkiego testu, który mógłby być wykonywany w warunkach terenowych nawet przez niewykwalifikowane osoby, np. hodowców.
Przedmiotem wynalazku jest test paskowy do wykrywania enzootycznej białaczki bydła poprzez oznaczenie przeciwciał anty-BLV w próbce charakteryzujący się tym, że zawiera glikozylowany antygen gp51 immobilizowany na membranie nitrocelulozowej oraz białka A, G, A/G znakowane barwnymi
PL 239 791 Β1 nanocząsteczkami, a także bibułę szklaną umieszczoną na początku paska testowego, do filtrowania próbki, przy czym analizowaną próbką jest mleko krowie.
Korzystnie bibułę szklaną stanowi Whatman GF, MF1, AH934 lub Fusion 5 nasycone roztworem 20 mM Tris pH 7,5 z dodatkiem 0,2 % kazeiny i 0,1% Tween 20.
Test paskowy według wynalazku, charakteryzuje się tym, że zawiera antygen gp51 otrzymywany w systemie bakulowirusowym.
Test paskowy według wynalazku, charakteryzuje się tym, że antygen gp51 otrzymywany jest w komórkach FLK-BLV.
Korzystnie barwne nanocząsteczki stanowi koloidalne złoto o średnicy 20-50 nm, nanocząsteczki węgla o średnicy 10-20 nm lub barwne nanocząsteczki polistyrenowe o średnicy 50-200 nm.
Kolejnym przedmiotem wynalazku jest sposób wykrywania enzootycznej białaczki bydła z wykorzystaniem testu paskowego według wynalazku, obejmujący następujące etapy:
a. próbkę mleka rozcieńcza się trzykrotnie 20 mm buforem Tris-HCI pH 7,5 zawierającym 0,3 % kazeinę i 0,15% Tween 20;
b. próbkę mleka wkrapla się do okienka na kasetce testowej i inkubuje przez 10 minut;
c. odczytuje się wynik testu w okienku testowym, przy czym jedna kreska lub plamka oznacza wynik negatywny, a dwie kreski lub plamki oznaczają wynik pozytywny.
Do zalet opracowanego testu według wynalazku należą:
a) użycie do oznaczeń próbki mleka (eliminacja etapu pobierania krwi i oddzielania surowicy);
b) zapobieganie rozprzestrzeniania się zakażeń;
c) minimalizacja strat ekonomicznych;
d) monitorowanie czystości mleka w odniesieniu do zakażenia wirusem BLV.
Użycie mleka do testu paskowego utrudnia wykonanie testu paskowego z powodu obecności dużej ilości tłuszczu. Problem ten rozwiązano przez rozcieńczenie mleka roztworem zawierającym detergenty oraz dzięki użyciu na pasku testowym bibuł szklanych filtrujących tłuszcz.
Ponadto, istotne jest, że nawet po 12 miesiącach test zachowuje około 83% swojej pierwotnej aktywności, co tylko nieznacznie wpływa na jego czułość. Początkowa czułość wynosi 1 :1000, końcowa 1 :800, przy czym wymagana czułość dla takiego testu wynosi 1 :250.
Test charakteryzuje się wysoką czułością i swoistością i daje dobrą zgodność wyników z komercyjnymi testami ELISA.
Test EUSA
pożyrywne negatywne N-5B
pozytywne 28 2
negatywne Test paskowy 3 56
Czułość 90,3% Spetyf<czncś:96,5%
Test daje negatywny wynik z surowicami pozytywnymi pod kątem innych wirusów bydlęcych: BIV, BVD i BVH.
Przedmiot wynalazku pokazano na rysunku, który przedstawia zdjęcie opracowanego testu paskowego i jego wyniki z surowicą standardową anty BLV E05 rozcieńczoną w normalnym mleku.
Rozwiązanie według wynalazku przedstawiono w przykładach wykonania, które jednak nie mają ograniczać zakresu tego wynalazku, a raczej go zilustrować w celu łatwiejszego zrozumienia.
Przykłady Przykład 1. Otrzymywanie antygenu gp51 w systemie bakulowirusowym
Komórki Sf9 Mimie (Life Technologies, USA) zakażono bakulowirusem z wklonowanym genem kodującym białko gp51. Miano wirusa określono sposobem seryjnych rozcieńczeń. Ekspresję konstruktu baku łowi rusowego prowadzono w objętości 1000 ml w medium bez surowicy (CCM3, Becton-Dickinson

Claims (3)

  1. PL 239 791 B1 lub ESF921, Expression Systems). Po 48 godzinach od zakażenia bakulowirusem komórki odwirowywano, a medium po hodowli dializowano przez kilkadziesiąt godzin wobec buforu fosforanowego. Preparat nanoszono na złoże NiNTA-agaroza i eluowano związane białko skokowym gradientem imidazolu. Analizę zebranych frakcji wykonano sposobami dot-blottingu z przeciwciałem 9E10. Frakcje o największym stężeniu gp51 łączono (frakcje po elucji 50, 100 i 200 mM imidazolem) i dializowano wobec buforu TBS. Otrzymane preparaty następnie zagęszczono za pomocą kartridży Amicon (Merck Millipore, Niemcy). Stopień oczyszczenia preparatów zbadano za pomocą elektroforezy SDS-PAGE i barwienia CBB. Preparaty po elucji 100 i 200 mM imidazolem charakteryzowały się największym stopniem oczyszczenia.
    P r z y k ł a d 2. Otrzymywanie białka A/G znakowanego koloidalnym złotem
    Do 10 ml 0,1% roztworu koloidalnego złota o średnicy cząstek około 40 nm, zawierającego 10 mM bufor boranowy pH 8,0 dodano 100 μg białka A/G i mieszano przez 1 godz. w temperaturze pokojowej. Następnie dodano 1 ml roztworu zawierającego 1% kazeinę i 0,1 % Tween 20 w 20 mM buforze boranowym o pH 8,0. Roztwór odwirowano przy 20 000 x g przez 15 min, p rzemyto i zawieszono w 2 ml 0,2% kazeiny z 0,05% Tween 20 w 20 mm buforze boranowym o pH 8,0.
    Przykład 3. Otrzymywanie białka A znakowanego nanocząsteczkami węgla
    Do 10 ml 0,2% roztworu nanocząsteczek węgla (nanocząsteczki węgla Special Black 4 i Printex30 firmy Orion lub Carbon black 510 i 610 firmy Dimacolor o średnicy około 20 nm) w 5 mM buforze boranowym o pH 8,0 dodano 50 μg białka A i mieszano przez 18 godz. w temperaturze 4°C. Następnie dodano 1 ml roztworu zawierającego 1% kazeinę i 0,1% Tween 20 w 20 mM buforze boranowym o pH 8,0. Roztwór odwirowano przy 20 000 x g przez 15 min, przemyto i zawieszono w 2 ml 0,2% kazeiny z 0,05% Tween20 w 20 mm buforze boranowym o pH 8,0.
    P r z y k ł a d 4. Otrzymywanie paska testowego
    Znakowane białko A/G naniesiono na bibułę z włókien szklanych GFDX Glass Fiber Conjugate Pads firmy Millipore. Na membranę nitrocelulozową HF120 lub HF13 5 firmy Millipore naniesiono, w postaci linii lub plamki, roztwór antygenu gp51 (linia testowa) i immunoglobuliny bydlęce (linia kontrolna). Bibułę z barwnym koniugatem naklejono na początku bibuły nitrocelulozowej, z kolei bibułę szklaną do nanoszenia próbki naklejono na koniugat. Na końcu bibuły nitrocelulozowej umieszczono zwykłą bibułę celulozową. Pasek testowy umieszczono w specjalnej plastikowej kasetce.
    P r z y k ł a d 5. Wykonanie testu paskowego
    Próbkę mleka rozcieńczono trzykrotnie 20 mM buforem Tris-HCl pH 7,5 zawierającym 0,3% kazeinę i 0,15% Tween 20. 200 μl próbki wkroplono do okienka na kasetce testowej i odczekano 10 minut. Pojawienie się w okienku testowym jednej kreski lub plamki wskazuje na wynik negatywny, natomiast pojawienie się dwóch kresek lub plamek wskazuje na wynik dodatni.
    Opracowane testy powinny stać się cennym narzędziem diagnostycznym do monitorowania stanu zdrowia bydła bezpośrednio w terenie i mogą się one przyczynić do polepszenia efektywności gospodarki reprodukcyjnej krów. Test może zostać wykorzystany również do monitorowania czystości mleka i mięsa.
    Zastrzeżenia patentowe
    1. Test paskowy do wykrywania enzootycznej białaczki bydła poprzez oznaczenie przeciwciał anty-BLV w próbce znamienny tym, że zawiera glikozylowany antygen gp51 immobilizowany na membranie nitrocelulozowej oraz białka A, G, A/G znakowane barwnymi nanocząsteczkami, a także bibułę szklaną, umieszczoną na początku paska testowego, do filtrowania próbki, przy czym analizowaną próbką jest mleko krowie.
  2. 2. Test paskowy według zastrz. 1, znamienny tym, że bibułę szklaną stanowi Whatman GF, MF1, AH934 lub Fusion 5 nasycone roztworem 20 mM Tris pH 7,5 z dodatkiem 0,2 % kazeiny i 0,1% Tween 20.
  3. 3. Test paskowy według zastrz. 1, znamienny tym, że zawiera antygen gp51 otrzymywany w systemie bakulowirusowym.
PL430863A 2019-08-12 2019-08-12 Test paskowy do wykrywania enzootycznej białaczki bydła i sposób wykrywania enzootycznej białaczki bydła z wykorzystaniem tego testu paskowego PL239791B1 (pl)

Priority Applications (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PL430863A PL239791B1 (pl) 2019-08-12 2019-08-12 Test paskowy do wykrywania enzootycznej białaczki bydła i sposób wykrywania enzootycznej białaczki bydła z wykorzystaniem tego testu paskowego
PCT/IB2020/057467 WO2021028802A1 (en) 2019-08-12 2020-08-07 A strip test for detecting enzootic bovine leukosis and a method for detecting enzootic bovine leukosis with the use of the strip test
EP20775931.7A EP4014044A1 (en) 2019-08-12 2020-08-07 A strip test for detecting enzootic bovine leukosis and a method for detecting enzootic bovine leukosis with the use of the strip test

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PL430863A PL239791B1 (pl) 2019-08-12 2019-08-12 Test paskowy do wykrywania enzootycznej białaczki bydła i sposób wykrywania enzootycznej białaczki bydła z wykorzystaniem tego testu paskowego

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL430863A1 PL430863A1 (pl) 2021-02-22
PL239791B1 true PL239791B1 (pl) 2022-01-10

Family

ID=72613942

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL430863A PL239791B1 (pl) 2019-08-12 2019-08-12 Test paskowy do wykrywania enzootycznej białaczki bydła i sposób wykrywania enzootycznej białaczki bydła z wykorzystaniem tego testu paskowego

Country Status (3)

Country Link
EP (1) EP4014044A1 (pl)
PL (1) PL239791B1 (pl)
WO (1) WO2021028802A1 (pl)

Family Cites Families (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DD212389A3 (de) * 1982-05-14 1984-08-08 Univ Berlin Humboldt Verfahren der gp51-antigenherstellung zur diagnose der rinderleukose
BE896752A (fr) * 1983-05-17 1983-09-16 Region Wallone Representee Pat Procede et chaine reactionnelle pour la diagnostic de la leucose bovine enzootique.
JPH01123152A (ja) * 1987-11-07 1989-05-16 Mitsui Toatsu Chem Inc 牛白血病ウイルス由来の診断薬を用いた診断方法
EP1933146B1 (en) * 2006-12-11 2011-08-24 AraGen Biotechnology Co. Ltd. Rapid immunochromatographic detection by amplification of the colloidal gold signal
EP1933144B1 (en) * 2006-12-11 2011-09-28 AraGen Biotechnology Co. Ltd. Rapid immunochromatographic detection by amplification of the colloidal gold signal
PL217257B1 (pl) * 2011-04-29 2014-06-30 Inst Immunologii I Terapii Doświadczalnej Pan Sposób i zestaw do wykrywania enzootycznej białaczki bydła
CN108896765A (zh) * 2018-07-04 2018-11-27 山东农业大学 一种检测a亚群禽白血病病毒的胶体金试纸条及其制备方法

Also Published As

Publication number Publication date
EP4014044A1 (en) 2022-06-22
PL430863A1 (pl) 2021-02-22
WO2021028802A1 (en) 2021-02-18

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US5716794A (en) Celiac antigen
US20030073073A1 (en) Method for simultaneous detection of multiple microbial antigens in biological specimens from mastitic animals
DK174032B1 (da) Sæt samt fremgangsmåde til immunometrisk dosering, der kan anvendes på hele celler
Sequeira et al. Treponemal haemagglutination test.
Schinski et al. Enzyme-and 125I-labeled anti-immunoglobulin assays in the immunodiagnosis of schistosomiasis
WO1994024557A1 (en) Article and method for detecting the presence of pathogens in excreta
US4329331A (en) Diagnostic method for detection of systemic lupus erythematosus
Kumar et al. Improvement in the diagnosis of Brucella abortus infections in naturally infected water buffaloes (Bubalus bubalis) using an ELISA with a Protein-G-based indicator system
JP5746328B2 (ja) ヒト睾丸および副睾丸で発現される305種類の生殖関連精子局在タンパク質の検出方法
JP4268358B2 (ja) 抗体および免疫学的測定方法
PL239791B1 (pl) Test paskowy do wykrywania enzootycznej białaczki bydła i sposób wykrywania enzootycznej białaczki bydła z wykorzystaniem tego testu paskowego
Bercovich et al. Evaluation of the currently used diagnostic procedures for the detection of Brucella melitensis in sheep
US20030059951A1 (en) Maternal status testing in animals
JP2010502729A (ja) ヨーネ菌に対する抗体用アッセイ
EP0229767B1 (en) Improvements relating to the detection of viruses and antibodies
US7919256B2 (en) Method for detecting Borna disease virus infection
US6403301B1 (en) Process for detecting Borna disease virus (BDV) infections
JP3547729B2 (ja) アッセイ
JPH11346768A (ja) イヌジステンパーウイルスヌクレオカプシド蛋白質の抗原性を有する蛋白質及び抗イヌジステンパーウイルスヌクレオカプシド蛋白質抗体測定試薬
Grillner et al. Enzyme-linked immunosorbent assay for detection and typing of herpes simplex virus
WO1990010232A1 (en) Composition containing labeled streptococcal antibody, test kit and assay using same
Kirkland et al. Enzootic bovine leukosis
Shome et al. Diagnosis of brucellosis in the equines by serological tests and PCR: A clinical report
Schultz et al. Cytomegalovirus testing: antibody determinations and virus cultures with recommendations for use
Durigon et al. Comparison of Staphylococcal co-agglutination with other assays for rapid diagnosis of rotavirus infection in humans, calves and piglets