PL237263B1 - Pochodna chinazoliny i jej zastosowanie - Google Patents
Pochodna chinazoliny i jej zastosowanie Download PDFInfo
- Publication number
- PL237263B1 PL237263B1 PL421716A PL42171617A PL237263B1 PL 237263 B1 PL237263 B1 PL 237263B1 PL 421716 A PL421716 A PL 421716A PL 42171617 A PL42171617 A PL 42171617A PL 237263 B1 PL237263 B1 PL 237263B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- activity
- quinazoline
- cells
- derivative
- kinase
- Prior art date
Links
- 125000002294 quinazolinyl group Chemical class N1=C(N=CC2=CC=CC=C12)* 0.000 title claims abstract description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 18
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 11
- 108090000412 Protein-Tyrosine Kinases Proteins 0.000 claims abstract description 8
- 102000004022 Protein-Tyrosine Kinases Human genes 0.000 claims abstract description 8
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 8
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 8
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 claims description 3
- 208000025113 myeloid leukemia Diseases 0.000 claims description 3
- 210000002307 prostate Anatomy 0.000 claims description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 abstract description 24
- 102000001253 Protein Kinase Human genes 0.000 abstract description 6
- 229940079593 drug Drugs 0.000 abstract description 6
- 108060006633 protein kinase Proteins 0.000 abstract description 6
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 abstract description 5
- 230000001028 anti-proliverative effect Effects 0.000 abstract description 3
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 abstract description 2
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 30
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 20
- 108091000080 Phosphotransferase Proteins 0.000 description 16
- 102000020233 phosphotransferase Human genes 0.000 description 16
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 13
- 150000003246 quinazolines Chemical class 0.000 description 12
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 8
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 7
- SMWDFEZZVXVKRB-UHFFFAOYSA-N Quinoline Chemical compound N1=CC=CC2=CC=CC=C21 SMWDFEZZVXVKRB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229940041181 antineoplastic drug Drugs 0.000 description 6
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 6
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 6
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 5
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 5
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 5
- 238000000034 method Methods 0.000 description 5
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 5
- IAZDPXIOMUYVGZ-WFGJKAKNSA-N Dimethyl sulfoxide Chemical compound [2H]C([2H])([2H])S(=O)C([2H])([2H])[2H] IAZDPXIOMUYVGZ-WFGJKAKNSA-N 0.000 description 4
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 4
- 238000011161 development Methods 0.000 description 4
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 4
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N Acetic anhydride Chemical compound CC(=O)OC(C)=O WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000001333 Colorectal Neoplasms Diseases 0.000 description 3
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 101000823316 Homo sapiens Tyrosine-protein kinase ABL1 Proteins 0.000 description 3
- 239000005517 L01XE01 - Imatinib Substances 0.000 description 3
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102100022596 Tyrosine-protein kinase ABL1 Human genes 0.000 description 3
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 3
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 3
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 3
- KTUFNOKKBVMGRW-UHFFFAOYSA-N imatinib Chemical compound C1CN(C)CCN1CC1=CC=C(C(=O)NC=2C=C(NC=3N=C(C=CN=3)C=3C=NC=CC=3)C(C)=CC=2)C=C1 KTUFNOKKBVMGRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229960002411 imatinib Drugs 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 3
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 3
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 3
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 2
- AVRPFRMDMNDIDH-UHFFFAOYSA-N 1h-quinazolin-2-one Chemical class C1=CC=CC2=NC(O)=NC=C21 AVRPFRMDMNDIDH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CWLKGDAVCFYWJK-UHFFFAOYSA-N 3-aminophenol Chemical compound NC1=CC=CC(O)=C1 CWLKGDAVCFYWJK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940018563 3-aminophenol Drugs 0.000 description 2
- YYROPELSRYBVMQ-UHFFFAOYSA-N 4-toluenesulfonyl chloride Chemical compound CC1=CC=C(S(Cl)(=O)=O)C=C1 YYROPELSRYBVMQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000003727 ADP Glo Kinase Assay Methods 0.000 description 2
- 102000007469 Actins Human genes 0.000 description 2
- 108010085238 Actins Proteins 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 201000003741 Gastrointestinal carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 125000005001 aminoaryl group Chemical group 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- HUMNYLRZRPPJDN-UHFFFAOYSA-N benzaldehyde Chemical class O=CC1=CC=CC=C1 HUMNYLRZRPPJDN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 2
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 2
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 2
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 2
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 2
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 2
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 2
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 239000011535 reaction buffer Substances 0.000 description 2
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 2
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 2
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 2
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YUXKOWPNKJSTPQ-AXWWPMSFSA-N (2s,3r)-2-amino-3-hydroxybutanoic acid;(2s)-2-amino-3-hydroxypropanoic acid Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O.C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O YUXKOWPNKJSTPQ-AXWWPMSFSA-N 0.000 description 1
- AIVRDUVZOFTAGC-UHFFFAOYSA-N 2-(2-phenylethenyl)quinazoline Chemical class N=1C=C2C=CC=CC2=NC=1C=CC1=CC=CC=C1 AIVRDUVZOFTAGC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AAIGLQCDIPHSSP-AATRIKPKSA-N 2-[(E)-2-(6-bromo-1,3-benzodioxol-5-yl)ethenyl]-3H-quinazolin-4-one Chemical compound BrC=1C(=CC2=C(OCO2)C=1)/C=C/C1=NC2=CC=CC=C2C(N1)=O AAIGLQCDIPHSSP-AATRIKPKSA-N 0.000 description 1
- AIVRDUVZOFTAGC-ZHACJKMWSA-N 2-[(e)-2-phenylethenyl]quinazoline Chemical compound N=1C=C2C=CC=CC2=NC=1\C=C\C1=CC=CC=C1 AIVRDUVZOFTAGC-ZHACJKMWSA-N 0.000 description 1
- FIEYHAAMDAPVCH-UHFFFAOYSA-N 2-methyl-1h-quinazolin-4-one Chemical compound C1=CC=C2NC(C)=NC(=O)C2=C1 FIEYHAAMDAPVCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UHMKDTNXMRGQEA-UHFFFAOYSA-N 4-(2-phenylethenyl)-1H-quinazolin-2-one Chemical compound O=c1nc(C=Cc2ccccc2)c2ccccc2[nH]1 UHMKDTNXMRGQEA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JVVRCYWZTJLJSG-UHFFFAOYSA-N 4-dimethylaminophenol Chemical compound CN(C)C1=CC=C(O)C=C1 JVVRCYWZTJLJSG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000549 4-dimethylaminophenol Drugs 0.000 description 1
- VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 4-dimethylaminopyridine Substances CN(C)C1=CC=NC=C1 VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 102100025064 Cellular tumor antigen p53 Human genes 0.000 description 1
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010052360 Colorectal adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 101100503636 Danio rerio fyna gene Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102100034343 Integrase Human genes 0.000 description 1
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005411 L01XE02 - Gefitinib Substances 0.000 description 1
- 239000005551 L01XE03 - Erlotinib Substances 0.000 description 1
- 239000002136 L01XE07 - Lapatinib Substances 0.000 description 1
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- -1 N- (3-hydroxyphenyl) -2 - [(E) -2- (6-bromo-3,4-methylenedioxyphenyl) ethenyl] -4-aminoquinazoline Chemical compound 0.000 description 1
- 108091008606 PDGF receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000011653 Platelet-Derived Growth Factor Receptors Human genes 0.000 description 1
- 102000009516 Protein Serine-Threonine Kinases Human genes 0.000 description 1
- 108010009341 Protein Serine-Threonine Kinases Proteins 0.000 description 1
- WTKZEGDFNFYCGP-UHFFFAOYSA-N Pyrazole Chemical compound C=1C=NNC=1 WTKZEGDFNFYCGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010092799 RNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 description 1
- 102000002490 Rad51 Recombinase Human genes 0.000 description 1
- 108010068097 Rad51 Recombinase Proteins 0.000 description 1
- 108700025695 Suppressor Genes Proteins 0.000 description 1
- 108010006785 Taq Polymerase Proteins 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 102000015098 Tumor Suppressor Protein p53 Human genes 0.000 description 1
- 108010078814 Tumor Suppressor Protein p53 Proteins 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 125000004103 aminoalkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 description 1
- 150000001448 anilines Chemical class 0.000 description 1
- 238000000137 annealing Methods 0.000 description 1
- 150000003934 aromatic aldehydes Chemical class 0.000 description 1
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 230000009702 cancer cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 1
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 1
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 1
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 1
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- AAKJLRGGTJKAMG-UHFFFAOYSA-N erlotinib Chemical compound C=12C=C(OCCOC)C(OCCOC)=CC2=NC=NC=1NC1=CC=CC(C#C)=C1 AAKJLRGGTJKAMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001433 erlotinib Drugs 0.000 description 1
- DQYBDCGIPTYXML-UHFFFAOYSA-N ethoxyethane;hydrate Chemical compound O.CCOCC DQYBDCGIPTYXML-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XGALLCVXEZPNRQ-UHFFFAOYSA-N gefitinib Chemical compound C=12C=C(OCCCN3CCOCC3)C(OC)=CC2=NC=NC=1NC1=CC=C(F)C(Cl)=C1 XGALLCVXEZPNRQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002584 gefitinib Drugs 0.000 description 1
- 238000012224 gene deletion Methods 0.000 description 1
- 238000007429 general method Methods 0.000 description 1
- 239000001046 green dye Substances 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 230000002427 irreversible effect Effects 0.000 description 1
- BCFGMOOMADDAQU-UHFFFAOYSA-N lapatinib Chemical compound O1C(CNCCS(=O)(=O)C)=CC=C1C1=CC=C(N=CN=C2NC=3C=C(Cl)C(OCC=4C=C(F)C=CC=4)=CC=3)C2=C1 BCFGMOOMADDAQU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004891 lapatinib Drugs 0.000 description 1
- 238000004020 luminiscence type Methods 0.000 description 1
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 1
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 1
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 1
- 230000037353 metabolic pathway Effects 0.000 description 1
- 238000007040 multi-step synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 210000005170 neoplastic cell Anatomy 0.000 description 1
- 102000037979 non-receptor tyrosine kinases Human genes 0.000 description 1
- 108091008046 non-receptor tyrosine kinases Proteins 0.000 description 1
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 description 1
- 108700025694 p53 Genes Proteins 0.000 description 1
- QNGNSVIICDLXHT-UHFFFAOYSA-N para-ethylbenzaldehyde Natural products CCC1=CC=C(C=O)C=C1 QNGNSVIICDLXHT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002467 phosphate group Chemical group [H]OP(=O)(O[H])O[*] 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 230000009822 protein phosphorylation Effects 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- JWVCLYRUEFBMGU-UHFFFAOYSA-N quinazoline Chemical compound N1=CN=CC2=CC=CC=C21 JWVCLYRUEFBMGU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002943 quinolinyl group Chemical group N1=C(C=CC2=CC=CC=C12)* 0.000 description 1
- 239000012429 reaction media Substances 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 102000009076 src-Family Kinases Human genes 0.000 description 1
- 108010087686 src-Family Kinases Proteins 0.000 description 1
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940121358 tyrosine kinase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 239000005483 tyrosine kinase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Przedmiotem zgłoszenia są niektóre pochodne chinazoliny przedstawione wzorem 1, oraz ich zastosowanie niektórych pochodnych chinazoliny do wytwarzania leków przeznaczonych do modulowania aktywności kinazy białkowych. Tego rodzaju leki mogą być wykorzystane w leczeniu nowotworów. Związki opisane w zgłoszeniu wykazują wysoką aktywność hamującą aktywność kinaz tyrozynowych oraz aktywność antyproliferacyjną.
Description
Opis wynalazku
Przedmiotem wynalazku jest pochodna chinazoliny i jej zastosowanie do modulowania aktywności kinaz tyrozynowych i do wytwarzania leków przeciwnowotworowych, zwłaszcza do leczenia nowotworów okrężnicy, prostaty, białaczki szpikowej.
Inhibitory kinaz tyrozynowych stały się pierwszymi celowanymi lekami przeciwnowotworowymi. Kinazy białkowe to duża grupa enzymów odpowiedzialnych za aktywację szeregu procesów i szlaków metabolicznych w komórkach. Ich działanie polega na przenoszeniu grupy fosforanowej na specyficzne białko, będące celem molekularnym kinazy. Z uwagi na rodzaj docelowego aminokwasu wyróżnia się kinazy serynowo-treoninowe oraz tyrozynowe. Fosforylacja białka prowadzi do zmian konformacyjnych, które z kolei warunkują właściwą aktywność. Okazuje się, że bazowa aktywność kinaz może ulegać istotnym modyfikacjom w przypadku wielu chorób, w szczególności nowotworowych. Nadekspresja niektórych kinaz prowadzi do nadmiernej proliferacji komórek oraz ułatwia powstawanie dalszych mutacji na drodze karcenogenezy. Związki blokujące aktywność kinaz stają się wartościowymi lekami przeciwnowotworowymi o potencjalnie wysokiej selektywności. Pierwsze leki o takim mechanizmie działania wprowadzono do leczenia już kilkanaście lat temu, a intensywny rozwój doprowadził do otrzymania szeregu dalszych inhibitorów. Wśród nich szczególne znaczenie mają leki oparte na strukturze chinoliny i chinazoliny, jak na przykład gefitynib, erlotynib czy lapatynib. Obecność kilku leków z grupy pochodnych chinazoliny owocuje znacznym zainteresowaniem w dalszym ich rozwoju oraz powstaniem szeregu prac opisujących aktywność, w tym zgłoszeń patentowych i patentów. Jak zaobserwowano wśród pochodnych chinazoliny dominują związki podstawione w pozycji C4 zwłaszcza grupą aminoarylową lub aminoalkilową (G. Marzaro, A. Guiotto, A. Chilin, Quinazoline derivatives as potential anticancer agents: a patent review (2007 - 2010)., Expert Opin. Ther. Pat. 22 (2012) 223-52). W opisie wynalazku WO2005115145 ujawniono pochodne chinoliny i chinazoliny będące inhibitorami kinaz proteinowo-tyrozynowych (PTK) związanych z angiogenezą komórek rakowych. Aktywność opisywanych związków polegała na hamowaniu czynników wzrostu receptorów kinaz, które regulują rozwój naczyń krwionośnych. Działanie opisanych układów jest nieodwracalne a więc polega na silnym i trwałym wiązaniu do odpowiednich receptorów. Opis wynalazku zezwala na obecność podstawników w pozycji 2 szkieletu chinoliny lecz nie obejmuje pochodnych 2-styrylochinazolinowych.
W opisie wynalazku WO2006040522 opisano układy chinoliny modyfikowane w położeniu 4- podstawionym pirazolem. Według opisu związki mogą stanowić środki ograniczające proliferację komórek rakowych poprzez mechanizm hamowania PDGF receptorów kinaz. Szeroka grupa pochodnych chinazolinonu oraz ich zastosowanie do wytwarzania leków przeciwnowotworowych znana jest także z opisu WO2006125555.
Pochodne modyfikowane w pozycji C2 szkieletu chinazoliny zawierają głównie podstawnik aminoarylowy lub aminoalkilowy jak w dokumentach: WO2008020203, WO2008068507, WO2008079988. Znane są również podstawniki arylowe, również o rozbudowanej strukturze jak w dokumentach: WO2010056758, WO2010026122, WO2009053694.
W dokumencie US9216177 przedstawiono 2-styrylochiazolinony jako inhibitory rekombinazy RAD51. Związki takie mogą być wartościowymi składnikami leków przeciwnowotworowych. Ujawnione w opisie zostały przed wszystkim pochodne modyfikowane w pozycji N3 pierścienia chinazolinonu.
Badania skoncentrowane na poszukiwaniu nowych związków zawierających układ styrylochinazoliny doprowadziły do opracowania pochodnych będących silnymi inhibitorami kinaz białkowych. Takie związki mogą stanowić aktywne składniki leków przeciwnowotworowych.
Istotę wynalazku stanowi pochodna chinazoliny według wzoru 1.
Istotę wynalazku stanowi także zastosowanie pochodnej chinazoliny według wzoru 1 do wytwarzania leków do modulowania aktywności kinaz tyrozynowych, do leczenia nowotworów, korzystnie nowotworów okrężnicy, prostaty, białaczki szpikowej.
Poniżej przedstawiono przykłady otrzymywania pochodnej oraz jej zastosowania. W przykładzie 1 przedstawiono sposób otrzymywania pochodnej objętej wynalazkiem w wieloetapowej syntezie z uwzględnieniem etapów pośrednich. W analogiczny sposób w przykładzie 2 przedstawiono aktywność pochodnej wobec izolowanych kinaz białkowych kluczowych dla leczenia nowotworów. W przykładach 3-5 przedstawiono aktywność wobec linii komórek nowotworowych oraz normalnych komórek ludzkich. W przykładzie 6 przedstawiono zastosowanie znanej procedury do oznaczania poziomu ekspresji kinaz w komórkach nowotworowych a więc podatność nowotworów na leczenie wykorzystujące pochodną będącą przedmiotem wynalazku.
PL 237 263 Β1
Przykład 1. Ogólna metoda syntezy pochodnej chinazoliny przebiega według poniższego schematu.
Półprodukt (styrylochinazolinon) otrzymano umieszczając w naczyniu reakcyjnym 20 mL 25% (v/v) roztworu bezwodnika octowego w 80% kwasie octowym, 2-metylo-4(3H)-chinazolon oraz odpowiedni aldehyd aromatyczny (pochodna benzaldehydu). Roztwór mieszano, ogrzewając w temperaturze 130°C do momentu pojawienia się obfitego osadu, a jeżeli osad nie wypadł, reakcję przerywano w momencie pojawienia się słomkowej barwy roztworu. Pozostałości medium reakcyjnego usuwano pod zmniejszonym ciśnieniem. Surowy produkt oczyszczano przez krystalizację z etanolu.
Otrzymywanie prekursora N-arylo 2-[(E)-2-fenyloetenylo]chinazoliny
OTs
4-[4-metylobenzeno-1-sulfonian]-2-[(E)-2-(6-bromo-3,4-metylenodioksyfenylo)-etenylo]chinazoliny. Związek otrzymano w reakcji 0,56 g 2-[(E)-2-(6-bromo-1,3-benzodioksol-5-yl)etenylo]chinazolin-4(3H)-onu z 0,56 g chlorku tosylu w obecności 0,36 g trietyloaminy oraz 0,32 g DMAP, uzyskując wydajność 0,24 g (16%) jasnożółtego osadu, t.top=184-186°C. Strukturę związku potwierdzono na podstawie spektroskopii 1H NMR (400 MHz; DMSO-d6): δ 8,12 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 8,10 (d, J = 16,3 Hz, 1H), 7,82 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,50 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,48 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,82 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,69 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,37 (d, J = 5,1 Hz, 2H), 7,12 (d, J = 7,9 Hz, 2H), 6,89 (d, J = 15,8 Hz, 1H), 6,17 (s, 2H), 2,29 (s, 3H); 13C NMR (126 MHz; DMSO): δ 161,5, 152,8, 150,7, 148,6, 146,0, 138,2, 135,5, 130,2, 128,5, 128,5, 128,1, 127,5, 127,2, 126,6, 126,0, 126,0, 121,1, 117,7, 113,4, 106,8, 103,2, 21,2.
Otrzymywanie właściwej pochodnej N-arylo-2-[(E)-2-fenyloetenylo]-4-aminochinazoliny
PL 237 263 Β1
Pochodną chinazoliny otrzymano z opisanego prekursora w reakcji z pochodną aniliny (3-aminofenolem), prowadząc reakcję w 100 mL mieszaniny propan-2-olu i chlorku metylenu (10:1), pozostawiając do mieszania w warunkach temperatury pokojowej przez 3 dni. Dodawano 30 mL 10% roztworu wodorowęglanu sodu i mieszano jeszcze przez 30 minut. Usuwano rozpuszczalnik pod zmniejszonym ciśnieniem, aż do pojawienia się osadu, który sączono na lejku, przemywając wodą i eterem dietylowym.
OH
N-(3-hydroksyfenylo)-2-[(E)-2-(6-bromo-3,4-metylenodioksyfenylo)etenylo]-4-aminochinazolina. Związek otrzymano w reakcji 0,16 g 2-[(E)-2-(6-bromo-1,3-benzodioksol-5-ylo)etenylo]chinazolin-4-ylo4-metylobenzenosulfonianu i 0,04 g 3-aminofenolu, uzyskując wydajność 0,12 g (84%) kremowego osadu, t.top=249-257°C. Strukturę związku potwierdzono na podstawie spektroskopii 1H NMR (400 MHz; DMSO-d6): δ 9,62 (s, 1H), 9,39 (s, 1H), 8,56 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 8,29 (d, J = 15,7 Hz, 1H), 7,84 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,77 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,65 (t, 8,92 Hz, 1H), 7,64 (s, 1H), 7,58 (t, J = 7,1 Hz, 1H), 7,40 (s, 1H), 7,31 (s, 1H), 7,21 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,16 (d, J = 15,4 Hz, 1H), 6,56 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 6,14 (s, 2H); 13C NMR (101 MHz; DMSO): δ 160,2, 158,0, 157,6, 150,9, 149,4, 148,4, 140,9, 135,3, 133,5, 130,2, 129,5, 129,1, 128,2, 126,2, 123,5, 116,5, 114,6, 113,3, 113,0, 111,1, 109,4, 106,8, 102,7.
Przykład 2. Oznaczanie hamowania kinazy białkowej.
Przykładowa procedura pomiaru inhibicji niereceptorowych kinaz tyrozynowych przy pomocy testów Kinase Selectivity Profiling Systems (Promega) oraz ADP-Glo Kinase Assay (Promega). Przed przystąpieniem do badania rozpuszczono pochodną chinazoliny w DMSO, a następnie przygotowano roztwory w stężeniu 0,5 μΜ w 1X Kinase Reaction Buffer (40 mM Tris - pH 7,5; 20 mM MgCb; 0,1 mg/mL BSA; 50 μΜ DTT), w którym końcowe stężenie DMSO wynosiło 5%. Następnie każdą kinazę (ABL1; BRK; BTK; CSK; FYN A; LCK; LYN B; SRC) z 8-dołkowego paska rozpuszczono w 95 μι 2,5X Kinase Reaction Buffer, a 8-dołkowe paski zawierające substraty w 15 μί 100 μΜ ATP. Test na inhibicję kinaz tyrozynowych przeprowadzono na białej 384-dołkowej, w tym celu przeniesiono roztwory związku w ilości 1 μί, a następnie dodano po 2 μί wcześniej przygotowanych roztworów kinaz oraz substratów i inkubowano przez 1 h w temperaturze pokojowej. Aktywność kinaz wykrywano przy pomocy testu ADP-Glo Kinase Assay. W metodzie tej dodano 5 μί odczynnika ADP-Glo™ Reagent do każdej studzienki, po czym płytkę wymieszano na wytrząsarce przez 2 minuty i inkubowano 40 minut w temperaturze pokojowej. Następnie, dodano 10 μί odczynnika Kinase Detection Reagent, ponownie mieszano i inkubowano 30 minut w temperaturze pokojowej. Wartość luminescencji odczytano przy użyciu wielodetekcyjnego czytnika płytek Synergy 4, Bio Tek. Wyniki, w postaci procentowej wartości zahamowania aktywności kinazy przedstawiono w tabeli 1, a dla porównania przedstawiono imatynib, to jest lek stosowany w leczeniu nowotworów, którego miejscem działania jest kinaza ABL.
Tabela 1. Hamowanie kinaz przez pochodne z przykładu 1.
| Kinazy białkowe z przykładu 3 | ||||||||
| ABL1 | BR K | BT K | CS K | FY N A | LC K | LY NB | SRC | |
| Pochodna wg wynalazku | 0 | 24,18 | 74,33 | 62,87 | 0 | 29,47 | 19,83 | 41,32 |
| imatynib | 77,17 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 |
Przykład 3. Aktywność przeciwnowotworowa pochodnej chinazoliny z przykładu 1 wobec nowotworów jelita grubego.
Aktywność antyproliferacyjną badanego związku oznaczono wobec komórek ludzkiego raka jelita HOT 116+/+ (linia komórek p53 pozytywnych). Komórki wysiano w ilości 9 tysięcy na dołek (wraz z 100 μι/
PL 237 263 Β1 /dołek medium DMEM) i pozostawiono na 24 godziny w temperaturze 37°C; 5% CO2. Związki rozpuszczone w minimalnej ilości DMSO podawano w stężeniach umożliwiających wyznaczenie krzywej aktywności. Przykładowa aplikacja związku - rozpuszczenie związku w DMSO w celu przygotowania roztworów o następujących stężeniach: 25 μΜ, 10 μΜ, 5 μΜ, 2,5 μΜ, 0,5 μΜ, 0,1 μΜ. Końcowa objętość w dołkach wynosiła 200 μί. Tak przygotowane komórki poddano inkubacji w czasie 72 h, po czym przeprowadzono ocenę żywotności komórek w teście MTS. Do każdej studzienki w płytce 96 dołkowej dodano 20 pL roztworu MTS (5 mg/mL) i inkubowano przez 1 h. Wartości absorbancji odczytano przy użyciu spektrofotometru przy długości fali 490 nm. Wyniki testów w postaci średniej wraz z odchyleniem zostały przedstawione w tabeli 2 w przeliczeniu na wartości IC50. Jako związek referencyjny zastosowano imatynib.
Przykład 4. Aktywność przeciwnowotworowa wobec nowotworów jelita grubego z delecją genu supresorowego TP53.
Aktywność antyproliferacyjną pochodnej oznaczono wobec komórek ludzkiego raka jelita HCT 116-/- (linia komórek z delecją genu p53). Komórki wysiano w ilości 9 tysięcy na dołek (wraz z 100 pL//dołek medium DMEM) i pozostawiono na 24 godziny w temperaturze 37°C; 5% CO2. Związki rozpuszczone w minimalnej ilości DMSO podawano w stężeniach umożliwiających wyznaczenie krzywej aktywności. Przykładowa aplikacja związku - rozpuszczenie związku w DMSO w celu przygotowania roztworów o następujących stężeniach: 25 μΜ, 10 μΜ, 5 μΜ, 2,5 μΜ, 0,5 μΜ, 0,1 μΜ. Końcowa objętość w dołkach wynosiła 200 pL. Tak przygotowane komórki poddano inkubacji w czasie 72 h, po czym przeprowadzono ocenę żywotności komórek w teście MTS. Do każdej studzienki w płytce 96 dołkowej dodano 20 pL roztworu MTS (5 mg/mL) i inkubowano przez 1 h. Wartości absorbancji odczytano przy użyciu spektrofotometru przy długości fali 490 nm. Wyniki testów w postaci średniej wraz z odchyleniem zostały przedstawione w tabeli 2 w przeliczeniu na wartości IC50.
W analogiczny sposób jak w przykładach 3 i 4 można oznaczyć aktywność przeciwnowotworową na dowolnych wyizolowanych komórkach nowotworów zwierzęcych w szczególności ludzkich.
Przykład 5. Cytotoksyczność pochodnej opisanej wynalazkiem względem normalnych komórek ludzkich.
Cytotoksyczność pochodnej oznaczono wobec ludzkich fibroblastów (linia komórek NHDF). Komórki wysiano w ilości 9 tysięcy na dołek (wraz z 100 μL/dołek medium DMEM) i pozostawiono na 24 godziny w temperaturze 37°C; 5% CO2. Związki rozpuszczone w minimalnej ilości DMSO podawano w stężeniach umożliwiających wyznaczenie krzywej aktywności. (Przykładowa aplikacja związku - rozpuszczenie związku w DMSO w celu przygotowania roztworów o następujących stężeniach: 25 μΜ, 10 μΜ, 5 μΜ, 2,5 μΜ, 0,5 μΜ, 0,1 μΜ). Końcowa objętość w dołkach wynosiła 200 pL. Tak przygotowane komórki poddano inkubacji w czasie 72 h, po czym przeprowadzono ocenę żywotności komórek w teście MTS. Do każdej studzienki w płytce 96 dołkowej dodano 20 pL roztworu MTS (5 mg/mL) i inkubowano przez 1 h. Wartości absorbancji odczytano przy użyciu spektrofotometru przy długości fali 490 nm. Wyniki testów w postaci średniej wraz z odchyleniem są przedstawione w Tabeli 2 (w przeliczeniu na wartości IC50).
Tabela 2. Aktywność przeciwnowotworowa pochodnej z przykładu 1.
| Aktywność przeciwnowotworowa pochodnej chinazoliny IC50 | ||||
| HCT116 +/+ [μΜ] | HCT116 -1- [μΜ] | MCF-7 [μΜ] | A549 [μΜ] | NHDF [μΜ] |
| 4,38 ±0,24 | 5,03 ±0,15 | 4,383± 0,544 | 7,410 ± 0,389 | 4,59 ± 0,69 |
Przykład 6. Oznaczanie podatności nowotworu na działanie pochodnej opisanej wynalazkiem. Oznaczane podatności wykonano jako wyznaczenie poziomu ekspresji genów kinaz z rodziny SRC (CSK; FYN A; LCK; LYN B; SRC) przy pomocy metody Real-Time PCR (RT-PCR). Oznaczenia przeprowadzono na ludzkich liniach komórkowych: raka jelita grubego (HCT 116), gruczolakoraka jelita grubego (Caco-2), raka piersi (MCF-7), raka płuc (A549) oraz prawidłowych fibroblastów (NHDF). Przed przystąpieniem do właściwej części oznaczenia, komórki wysiano na 3 cm szalkach Petriego w ilości 500 tys./1 mL medium DMEM i inkubowano przez 24 godziny w temperaturze 37°C; 5% CO2. Po tym czasie, z komórek wyizolowano RNA przy pomocy odczynnika TRIzol Reagent (Ambion), oczyszczono i zmierzono w spektrofotometrze typu NanoDrop. Następnie, 5 μg wyizolowanego RNA poddano procesowi odwrotnej transkrypcji do cDNA przy pomocy GoScript™ Reverse Transcriptase kit (Promega)
PL 237 263 Β1 oraz Oligo(dT)23 Primers (Sigma). Otrzymany produkt wykorzystano do reakcji Real-Time PCR, którą przeprowadzono w termocyklerze CTX96 Touch™ Real-Time PCR Detection System (Biorad). W tym celu, przygotowano mieszaninę reakcyjną w objętości 20 μί. Przykładowo mieszaninę reakcyjną sporządzono z master mixu - 2X PowerUp™ SYBR® Green Master Mix (Applied Biosystems), który zawierał dinukleotydy (dNTPs), polimerazę (Dual-Lock Taq DNA Polymerase) oraz barwnik SYBR Green, po czym dodano pary starterów w ilości 0,5 μΜ, 1 μί matrycy cDNA oraz uzupełniono sterylną wodą do końcowej objętości. Przykładowe pary starterów podano w tabeli 3. Gotową mieszaninę reakcyjną umieszczono w termocyklerze i przeprowadzono reakcję RT-PCR, składającą się z następujących etapów:
- początkowa denaturacja w 95°C przez 120 sekund
- denaturacja w 95°C przez 15 sekund, przyłączanie starterów przez 30 sekund (temperatura specyficzna dla zaprojektowanych par starterów), wydłużanie matrycy w temperaturze 72°C przez 60 sekund. Etap ten składa się z 40 cykli.
- pomiar krzywych topnienia w zakresie temperaturowym 65°C-95° (2-5 sekund na każde 0,5°C), celem weryfikacji otrzymanych produktów podczas reakcji RT-PCR.
Otrzymane dane analizowano porównując ekspresję badanych genów do referencyjnego genu podstawowego metabolizmu - β-aktyny przy pomocy standardowej metody 2 ΔΔσΓ wprowadzonej przez Livak i Schmittgen.
Tabela 3. Zaprojektowane pary starterów
| Gen | Forward primer (5>3') | Reverse primer (5' —»3') |
| CSK | GGCTCTACATCGTCACTGAG | CTCAGACACCAGCACATTG |
| FYN A | GTAGTCATGGCAACCCGCTA | ACAACCCCCACCCTCATTTC |
| LCK | AGCTTTTCTGTGGCTGGTGA | CATTTCGGATGAGCAGCGTG |
| LYNB | GCGAGCGGGAAATATGGGAT | AGATTCTGGAACTGGTTGAGTCT |
| SRC | CCTCGTGCGAGAAAGTGAG | TGGCGTTGTCGAAGTCAG |
| β-aktyna | CTCGCCTTTGCCGATCC | GCTGGGGTGTTGAAGGTCTC |
Tabela 4. Względna ekspresja kinaz w badanych komórkach nowotworowych
| Komórki | Ekspresja kinaz | ||||
| SRC | CSK | FYNA | LYNB | LCK | |
| HCT116p53 +/+ | 0,997561 | 3,597657 | 5,872974 | 5,536789 | 1,385958 |
| HCT116p53 -/- | 0,448602 | 2,745799 | 3,57869 | 3,213361 | 4,957144 |
| MCF-7 | 0,057369 | 1,222902 | 0,367766 | 0,477916 | 0,047678 |
| A549 | 1,024934 | 0,871319 | 0,259529 | 0,605141 | 0,014632 |
Zastrzeżenia patentowe
Claims (2)
1. Pochodna chinazoliny według wzoru 1.
2. Zastosowanie pochodnej chinazoliny według wzoru 1 do wytwarzania leków do modulowania aktywności kinaz tyrozynowych, do leczenia nowotworów, korzystnie nowotworów okrężnicy, prostaty, białaczki szpikowej.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL421716A PL237263B1 (pl) | 2017-05-26 | 2017-05-26 | Pochodna chinazoliny i jej zastosowanie |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL421716A PL237263B1 (pl) | 2017-05-26 | 2017-05-26 | Pochodna chinazoliny i jej zastosowanie |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL421716A1 PL421716A1 (pl) | 2018-12-03 |
| PL237263B1 true PL237263B1 (pl) | 2021-03-22 |
Family
ID=64460771
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL421716A PL237263B1 (pl) | 2017-05-26 | 2017-05-26 | Pochodna chinazoliny i jej zastosowanie |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| PL (1) | PL237263B1 (pl) |
-
2017
- 2017-05-26 PL PL421716A patent/PL237263B1/pl unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| PL421716A1 (pl) | 2018-12-03 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US9926304B2 (en) | 1-(arylmethyl)quinazoline-2,4(1H,3H)-diones as PARP inhibitors and the use thereof | |
| US11198677B2 (en) | Deoxyuridine triphosphatase inhibitors containing amino sulfonyl linkage | |
| KR100832593B1 (ko) | 신호전달 저해제로서의 퀴나졸린 유도체 및 이의 제조방법 | |
| US10544105B2 (en) | Deoxyuridine triphosphatase inhibitors containing cyclopropano linkage | |
| US9790214B2 (en) | Heteroatom containing deoxyuridine triphosphatase inhibitors | |
| CA2908638C (en) | Benzenesulfonamide derivatives useful as inhibitors of protein kinase | |
| WO2018098209A1 (en) | Amino sulfonyl compounds | |
| CN110483485A (zh) | 嘧啶类化合物、其制备方法和医药用途 | |
| El-Moghazy et al. | Novel pyrazolo [3, 4-d] pyrimidines as dual Src-Abl inhibitors active against mutant form of Abl and the leukemia K-562 cell line | |
| PL237263B1 (pl) | Pochodna chinazoliny i jej zastosowanie | |
| CN111072640A (zh) | 喹唑啉类衍生物及其制备方法和应用 | |
| Saravanakumar et al. | Novel Fused Pyrimidines as Potent Cyclin‐Dependent Kinases Inhibitor for Gastric Adenocarcinoma: Combined In Vitro, In Silico Anticancer Studies | |
| KR102691777B1 (ko) | 비-헤테로아릴 치환된 1,4-벤조디아제핀 및 암의 치료를 위한 이의 용도 | |
| CN111247137A (zh) | 一种嘧啶类化合物、其制备方法及其医药用途 | |
| PL242765B1 (pl) | 1,3-benzodioksolo-5-sulfonylowa pochodna chinazoliny do zastosowania w leczeniu nowotworów | |
| CN102731525A (zh) | 苯并吗啉衍生物 | |
| PL237886B1 (pl) | Zastosowanie pochodnej styrylochinazolinonu | |
| TW201738227A (zh) | 一種稠環化合物、其製備方法和應用及其中間體化合物 | |
| CN118373805B (zh) | 一种nsd2小分子抑制剂及其制备方法及应用 | |
| CN107501283B (zh) | 取代芳甲杂基取代苯胺基缩乙二醇醚环代喹唑啉的制备及肿瘤治疗药物应用 | |
| WO2017192228A1 (en) | Pak1 inhibitors and uses thereof | |
| Mohan et al. | Green diastereoselective synthesis of Spiropyrrolidines by the one-pot three component reaction of Isatins, THβC and 5-arylidene-thiazolidine-2, 4-diones and its anticancer evaluation | |
| CN106317040A (zh) | 含噻吩磺酰胺结构的苯并喹唑啉类酪氨酸激酶抑制剂、制备方法及用途 | |
| Arora et al. | SYNTHESIS, In-vitro CYTOTOXICITY AND IN SILICO INVESTIGATIONS OF QUINAZOLINONE INTEGRATED CHALCONES: AS NOVEL POTENTIAL DUAL-TARGETING ANTICANCER AGENTS TO TREAT LUNG CANCER AND COLORECTAL CANCER. | |
| CN106336405A (zh) | 一种含噻吩磺酰胺结构的苯并喹唑啉类酪氨酸激酶抑制剂、制备方法及用途 |