PL235629B1 - Sposób wytwarzania termoodwracalnych żeli chitozanowych przeznaczonych na skafoldy iniekcyjne do hodowli osteoblastów - Google Patents
Sposób wytwarzania termoodwracalnych żeli chitozanowych przeznaczonych na skafoldy iniekcyjne do hodowli osteoblastówInfo
- Publication number
- PL235629B1 PL235629B1 PL423822A PL42382217A PL235629B1 PL 235629 B1 PL235629 B1 PL 235629B1 PL 423822 A PL423822 A PL 423822A PL 42382217 A PL42382217 A PL 42382217A PL 235629 B1 PL235629 B1 PL 235629B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- calcium
- chitosan
- solution
- glycerophosphate
- gel
- Prior art date
Links
- 229920001661 Chitosan Polymers 0.000 title claims description 47
- 239000000499 gel Substances 0.000 title claims description 29
- 210000000963 osteoblast Anatomy 0.000 title claims description 5
- 238000002347 injection Methods 0.000 title claims description 4
- 239000007924 injection Substances 0.000 title claims description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims description 3
- 238000009395 breeding Methods 0.000 title description 3
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 title description 3
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 title 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 31
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 22
- 239000011575 calcium Substances 0.000 claims description 22
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 claims description 22
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 20
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 16
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 claims description 14
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 claims description 14
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 13
- UHHRFSOMMCWGSO-UHFFFAOYSA-L calcium glycerophosphate Chemical compound [Ca+2].OCC(CO)OP([O-])([O-])=O UHHRFSOMMCWGSO-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 13
- AWUCVROLDVIAJX-UHFFFAOYSA-N alpha-glycerophosphate Natural products OCC(O)COP(O)(O)=O AWUCVROLDVIAJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 9
- AWUCVROLDVIAJX-GSVOUGTGSA-N sn-glycerol 3-phosphate Chemical compound OC[C@@H](O)COP(O)(O)=O AWUCVROLDVIAJX-GSVOUGTGSA-N 0.000 claims description 9
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 claims description 8
- 230000006196 deacetylation Effects 0.000 claims description 8
- 238000003381 deacetylation reaction Methods 0.000 claims description 8
- 159000000007 calcium salts Chemical class 0.000 claims description 5
- 239000001736 Calcium glycerylphosphate Substances 0.000 claims description 3
- 229940095618 calcium glycerophosphate Drugs 0.000 claims description 3
- 235000019299 calcium glycerylphosphate Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 claims description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 239000000463 material Substances 0.000 description 10
- 239000000017 hydrogel Substances 0.000 description 7
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 6
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 6
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 5
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 4
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 4
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 3
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 3
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 3
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 3
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 3
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 3
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 3
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 3
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 3
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical class [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 3
- DHCLVCXQIBBOPH-UHFFFAOYSA-N Glycerol 2-phosphate Chemical compound OCC(CO)OP(O)(O)=O DHCLVCXQIBBOPH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 2
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000000919 ceramic Substances 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 230000000278 osteoconductive effect Effects 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N (2S,3S,4S,5R,6R)-6-[(2S,3R,4R,5S,6R)-3-Acetamido-2-[(2S,3S,4R,5R,6R)-6-[(2R,3R,4R,5S,6R)-3-acetamido-2,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-2-carboxy-4,5-dihydroxyoxan-3-yl]oxy-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxane-2-carboxylic acid Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O3)C(O)=O)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](C(O)=O)O1 KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N 0.000 description 1
- 238000010146 3D printing Methods 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 102000009123 Fibrin Human genes 0.000 description 1
- 108010073385 Fibrin Proteins 0.000 description 1
- BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N Fibrin monomer Chemical compound CNC(=O)CNC(=O)CN BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 229910002651 NO3 Inorganic materials 0.000 description 1
- NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N Nitrate Chemical compound [O-][N+]([O-])=O NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000033558 biomineral tissue development Effects 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- -1 chitosan acetate Chemical class 0.000 description 1
- 239000003431 cross linking reagent Substances 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 229950003499 fibrin Drugs 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- ZZUFCTLCJUWOSV-UHFFFAOYSA-N furosemide Chemical compound C1=C(Cl)C(S(=O)(=O)N)=CC(C(O)=O)=C1NCC1=CC=CO1 ZZUFCTLCJUWOSV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 229920002674 hyaluronan Polymers 0.000 description 1
- 229960003160 hyaluronic acid Drugs 0.000 description 1
- 229910052588 hydroxylapatite Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 1
- 239000007943 implant Substances 0.000 description 1
- 238000002386 leaching Methods 0.000 description 1
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 1
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000002138 osteoinductive effect Effects 0.000 description 1
- XYJRXVWERLGGKC-UHFFFAOYSA-D pentacalcium;hydroxide;triphosphate Chemical compound [OH-].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O XYJRXVWERLGGKC-UHFFFAOYSA-D 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 150000003018 phosphorus compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- AVPCPPOOQICIRJ-UHFFFAOYSA-L sodium glycerol 2-phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OCC(CO)OP([O-])([O-])=O AVPCPPOOQICIRJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 159000000000 sodium salts Chemical group 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Fodder In General (AREA)
- Materials For Medical Uses (AREA)
Description
Opis wynalazku Przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania termoodwracalnych ?eli chitozanowych przeznaczonych na skafoldy iniekcyjne do hodowli osteoblastów. Wykorzystanie biomateria?ów jako skafoldów (rusztowa?) do hodowli komórkowej jest aktualnym trendem bada? w in?ynierii tkankowej. Skafoldy stanowi? tymczasowe, przestrzenne ?rodowisko do wzrostu komórek i tkanek. Skafoldy najcz??ciej wytwarza si? z polimerów, cz?sto w po??czeniuz materia?ami ceramicznymi. Jako materia?y do wytwarzania skafoldów stosuje si? g?ównie polimery pochodzenia naturalnego (kwas hialuronowy, chitozan) oraz bia?ka (kolagen, fibryna), ze wzgl?du na ich dobr? biokompatybilno?? oraz nisk? immunogenno??. Do skafolów wprowadza si? równie? zwi?zki o w?a?ciwo?ciach osteokondukcyjnych, najcz??ciej zwi?zki oparte na fosforanach wapnia (hydro- ksyapatyty), które s? naturalnym sk?adnikiem budulcowym ko?ci i uwa?ane s? za jeden z lepszych materia?ów implantacyjnych w chirurgii kostnej. Szczególnie korzystnym materia?em na skafoldy s? hydro?ele. Hydro?ele bowiem z uwagi na obecno?? wody i mi?kko?? s? strukturalnie zbli?one do naturalnej tkanki i zapewniaj? ?rodowisko wodne wspomagaj?ce hodowl?, ponadto mo?na w nich umieszcza? substancje wspomagaj?ce hodowl?, jak czynniki wzrostu, bia?ka, glukoz?. Iniekcyjne wprowadzanie skafoldów do chorej lub uszkodzonej tkanki zmniejsza inwazyjno??i umo?liwia wprowadzenie ich w trudnodost?pne, chorobowo zmienione miejsca. Skafoldy wszczepialne najcz??ciej wytwarza si? w drodze liofilizacji po??czonej z ?elowaniem, ?ugowania soli, elektroprz?dzenia oraz drukowanie 3D. Szczególnie korzystnym materia?em na iniekcyjne skafoldy s? termowra?liwe hydro?ele oraz porowate mikrosfery (Biomaterials, 35, 2014 s. 2730-2742, International Journal of Nanomedicine, 8, 2013 s. 47-59), z tym ?e zdecydowanie wi?kszym zainteresowaniem ciesz? si? termowra?liwe hydro?ele, które formuje si? z niskolepkich roztworów na skutek przemiany fazowej zol-?el indukowanej temperatur?. Formowanie hydro?elu chitozanowego indukowane temperatur? najcz??ciej polega na wprowadzeniu do soli chitozanu ?-glicerofosforanu sodu (Biomaterials, 21, 2000 s. 2155-2161), przy czym jako sól chitozanu stosuje si? sól sodow? chitozanu, za? glicerofosforan wapnia stosuje si? jako dodatek nie bior?cy udzia?u w syntezie hydro?elu, umo?liwiaj?cy uzyskanie w nim zwi?zków wapniai fosforu (Journal of Bioactive and Compatible Polymers, 32, 2017 s. 209-222) lub do mineralizowania ju? wytworzonych hydro?eli (International Journal of Biological Macromolecules, 56, 2013 s. 122-132). Wykorzystanie do hodowli osteoblastów ?eli chitozanowych formuj?cych si? pod wp?ywem temperatury, które wykazuj? nisk? wytrzyma?o?? mechaniczn? i niewystarczaj?c? osteokonduktywno??, cz?sto wymaga modyfikacji polegaj?cej na wprowadzeniu materia?ów ceramicznych, jak fosforan wapnia (Journal of Biomedical Materials Research Part A, 62, 2002 s. 378-386), ?-fosforan trójwapniowy (Journal of Materials Science: Materials in Medicine, 26, 2015 art. 143, Materials Science and Engineering: C, 56, 2015, s. 481-493, Journal of Biomedical Materials Research Part A, 62, 2002, s. 378-386) oraz hydroksyapatyt (Revista Facultad de Ingenieria Universidad de Antioquia, 75, 2015 s. 24-35, European Journal, 42, 2006 s. 3171-3179, Materials Science and Engineering: C, 56, 2015 s. 481-493, Marine Drugs, 8, 2010 s. 2252-2266, Journal of Biomaterials Science, Polymer Edition, 25, 2014 s. 61-74). W opisie patentowym PL 219576 ujawniono sposób wytwarzania termowra?liwego hydro?elu chitozanowego zawieraj?cego wap? i fosfor, przeznaczonego na materia? na rusztowania, tak?e wszczepialny, polegaj?cy na tym, ?e roztwór wodny soli chitozanu, mi?dzy innymi octanu chitozanu, otrzymany z chitozanu o stopniu deacetylacji powy?ej 70%, sch?odzony do temperatury poni?ej 10°C ??czy si? w trakcie intensywnego mieszania z roztworem wodnym soli wapnia (chlorku, azotanu lub fosforanu wapnia), tak?e sch?odzonym do temperatury poni?ej 10°C i nast?pnie z roztworem wodnym ?, ? lub ?, ?-glicerofosforanu, po czym odpowietrza si? w czasie do 24 godzin w temperaturze poni?ej 10°C i wytworzony w wyniku tego ?el odmywa si? w wodzie lub w buforze opH powy?ej 6, o temperaturze powy?ej 30°C b?d? te? sch?odzony roztwór wodny soli chitozanu ??czy si? ze sch?odzonym roztworem wodnym glicerofosforanu, odpowietrza i otrzymany ?el po odmyciu w wodzie lub buforze umieszcza si? w roztworze wodnym soli wapnia, po czym odmywa buforem o pH powy?ej 6. Stosuje si? takie ilo?ci roztworów soli wapnia i glicerofosforanu, aby stosunek ilo?ci wapnia do ilo?ci fosforuw nich zawartych by? wi?kszy od 1. ?el wytwarza si? w naczyniu umo?liwiaj?cym nadanie mu oczekiwanego kszta?tu. ?ele chitozanowe formuj?ce si? pod wp?ywem temperatury, otrzymane znanymi sposobami charakteryzuj? si? nieodwracalno?ci? czyli brakiem zdolno?ci powrotu do fazy zolu na skutek spadku temperatury. Sposób wytwarzania termoodwracalnych ?eli chitozanowych przeznaczonych na skafoldy iniekcyjne do hodowli osteoblastów, polegaj?cy na po??czeniu roztworu wodnego octanu chitozanu otrzymanego z chitozanu o stopniu deacetylacji powy?ej 70% oraz roztworu wodnego ?-glicerofosforanu, sch?odzonych do temperatury poni?ej 10°C, w drodze zmieszania i nast?pnie odpowietrzeniu w temperaturze poni?ej 10°C w czasie 24 godzin, przy zapewnieniu okre?lonego pH otrzymywanego ?elu lub stosunku ilo?ci wapnia do ilo?ci fosforu = 1,6 w otrzymanym ?elu z u?yciem soli wapnia, wed?ug wynalazku charakteryzuje si? tym, ?e stosuje si? roztwór wodny octanu chitozanu o st??eniu 1-2%, otrzymany z chitozanu o masie cz?steczkowej 500-700 kDa, sch?odzony do temperatury 4°C oraz sch?odzony do temperatury 4°C roztwór wodny ?-glicerofosforanu wapnia o st??eniu 15-30%, i roztwory ??czy si? przez wprowadzenie roztworu ?-glicerofosforanu wapnia kroplami do roztworu octanu chitozanu, po czym ca?o?? miesza si? i odpowietrza w temperaturze 4°C, pH ?elu = 5,5-7,7 uzyskuje si? przez dodanie roztworu ?-glicerofosforanu wapnia w ilo?ci zapewniaj?cej uzyskanie pH mieszaniny reakcyjnej = 5,5-7,7. Stosunek ilo?ci wapnia do ilo?ci fosforu w otrzymanym ?elu = 1,6 uzyskuje si? przez dodanie do roztworu octanu chitozanu, przed dodaniem roztworu ?-glicerofosforanu wapnia, sta?ego w?glanu wapnia w takiej ilo?ci, aby ??czna ilo?? w?glanu wapnia i roztworu ?-glicerofosforanu wapnia zapewni?a uzyskanie tego stosunku ilo?ci wapnia do ilo?ci fosforu w ?elu. Roztwór octanu chitozanu sporz?dza si? z chitozanu o stopniu deacetylacji 80-90%. Sposobem wed?ug wynalazku otrzymuje si? termoodwracalne ?ele chitozanowe, czyli przechodz?ce z zolu w ?el na skutek wzrostu temperatury (optymalnie w fizjologicznej temperaturze cia?a ludzkiego), natomiast wraz ze spadkiem temperatury ponownie przechodz?ce w zol. Efekt ten uzyskuje si? wskutek wykorzystania jako soli chitozanowej octanu chitozanu oraz ?-glicerofosforanu wapnia, ?-glicerofosforan wapnia pe?ni przy tym podwójn? rol? - jako ?rodek sieciuj?cy i wprowadzaj?cyw struktur? ?elu wap? i fosfor jako substancje wspomagaj?ce w?a?ciwo?ci osteokondukcyjne i osteoindukcyjne. Kwas octowy jako rozpuszczalnik w skafoldach kolagenowych zwi?ksza proliferacj? komórek i wp?ywa korzystnie na morfologi?, fizyczne i biologiczne w?a?ciwo?ci powsta?ych rusztowa? kolagenowych. W?glan wapnia wprowadza si? w celu osi?gni?cia stosunku ilo?ci wapnia do ilo?ci fosforu zbli?onego do stosunku ilo?ci wapnia do ilo?ci fosforu jak w hydroksynapatytach. Sposób wed?ug wynalazku ilustruj? poni?sze przyk?ady. P r z y k ? a d 1 200 mg chitozanu o stopniu deacetylacji DD=80% i masie cz?steczkowej MW=700 kDa rozpuszczono w 20 ml 0,1M kwasu octowego, nast?pnie pozostawiono na 24 godziny w temperaturze pokojowej w celu ca?kowitego rozpuszczenia polisacharydu. Uzyskany roztwór octanu chitozanu sch?adzano w ci?gu 2-óch godzin do temperatury 4°C. Nast?pnie 0,5 g ?-glicerofosforanu wapnia rozpuszczono w 1 ml wody destylowanej i uzyskan? zawiesin? sch?adzano w ci?gu 2 godzin do temperatury 4°C. Sch?odzon? zawiesin? ?-glicerofosforanu wapnia wprowadzano kropla po kropli do sch?odzonego roztworu octanu chitozanu. Po dok?adnym wymieszaniu ca?o?ci przygotowan? próbk? pH= 6,0 pozostawiono w warunkach ch?odniczych w temperaturze 4°C w czasie 24 godzin w celu ca?kowitego pozbycia si? p?cherzy powietrznych. Uzyskany roztwór posiada? zdolno?? ?elowaniaw temperaturze 37°C. Struktura uzyskana po z?elowaniu zawiera?a pory o wymiarach rz?du 100-200 ?m. Wytworzony ?el zawiera? oko?o 2% wapnia, natomiast stosunek ilo?ci wapnia do ilo?ci fosforu na jego powierzchni by? równy oko?o 1,0. P r z y k ? a d 2 400 mg chitozanu o stopniu deacetylacji DD=90% i masie cz?steczkowej MW=520 kDa rozpuszczono w 20 ml 0, 1M kwasu octowego, po czym pozostawiono na 24 godziny w temperaturze pokojowej w celu ca?kowitego rozpuszczenia polisacharydu. Uzyskany roztwór octanu chitozanu sch?adzano w ci?gu 2 godzin do temperatury 4°C. Nast?pnie 1 g ?-glicerofosforanu wapnia rozpuszczono w 3 ml wody destylowanej i uzyskan? zawiesin? sch?adzano w ci?gu 2 godzin do temperatury 4°C. Sch?odzon? zawiesin? ?-glicerofosforanu wapnia wprowadzano kropla po kropli do sch?odzonego roztworu octanu chitozanu. Po dok?adnym wymieszaniu ca?o?ci przygotowan? próbk? o pH= 6,9 pozostawiono w temperaturze 4°C w czasie 24 godzin w celu ca?kowitego pozbycia si? p?cherzy powietrznych. Uzyskany roztwór posiada? zdolno?? ?elowania w temperaturze 37°C. Wytworzona struktura ?elowa charakteryzowa?a si? porowato?ci? powy?ej 90% wystarczaj?c? do zastosowania jej w in?ynierii tkankowej. Wytworzony ?el zawiera? oko?o 4% wapnia, natomiast stosunek ilo?ci wapnia do ilo?ci fosforu na jego powierzchni by? równy oko?o, 1,0. P r z y k ? a d 3 200 mg chitozanu o stopniu deacetylacji DD=80% i masie cz?steczkowej MW= 700 kDa rozpuszczono w 20 ml 0,1M kwasu octowego, po czym pozostawiono w ci?gu 24 godzin w temperaturze pokojowej w celu ca?kowitego rozpuszczenia polisacharydu. Uzyskany roztwór octanu chitozanu sch?adzano w ci?gu 2 godzin do temperatury 4°C. Do roztworu octanu chitozanu, przed dodaniem roztworu ?-glicerofosforanu wapnia, wprowadzono 0,3 g proszku w?glanu wapnia, 0,2 g ?-glicerofosforanu wapnia rozpuszczono w 1 ml wody destylowanej i uzyskan? zawiesin? sch?adzano w ci?gu 2 godzin do temperatury 4°C. Sch?odzon? zawiesin? ?-glicerofosforanu wapnia wprowadzano kropla po kropli do sch?odzonego roztworu octanu chitozanu. Po dok?adnym wymieszaniu ca?o?ci przygotowan? próbk? pozostawiono w temperaturze 4°C w ci?gu 24 godzin w celu ca?kowitego pozbycia si? p?cherzy powietrznych. Uzyskany roztwór posiada? zdolno?? ?elowania w temperaturze 37°C. Wytworzony ?el zawiera? oko?o 6% wapnia, natomiast stosunek ilo?ci wapnia do ilo?ci fosforu na jego powierzchni by? równy oko?o 1,6. . . Don't show this again PL PL PL PL
Claims (1)
1. Sposób wytwarzania termoodwracalnych ?eli chitozanowych przeznaczonych na skafoldyiniekcyjne do hodowli osteoblastów, polegaj?cy na po??czeniu roztworu wodnego octanu chitozanu otrzymanego z chitozanu o stopniu deacetylacji powy?ej 70% oraz roztworu wodnego ?-glicerofosforanu, sch?odzonych do temperatury poni?ej 10°C, w drodze mieszaniai nast?pnie odpowietrzeniu w temperaturze poni?ej 10°C w czasie 24 godzin, przy zapewnieniu okre?lonego pH otrzymywanego ?elu lub stosunku ilo?ci wapnia do ilo?ci fosforu = 1,6w otrzymanym ?elu z u?yciem soli wapnia, znamienny tym, ?e stosuje si? roztwór wodny octanu chitozanu o st??eniu 1-2%, otrzymany z chitozanu o masie cz?steczkowej 500-700 kDa, sch?odzony do temperatury 4°C oraz sch?odzony do temperatury 4°C roztwór wodny?-glicerofosforanu wapnia o st??eniu 15-30%, i roztwory ??czy si? przez wprowadzenie roztworu ?-glicerofosforanu wapnia kroplami do roztworu octanu chitozanu, po czym ca?o?? miesza si? i odpowietrza w temperaturze 4°C, przy czym pH ?elu - 5,5-7,7 uzyskuje si? przez dodanie roztworu ?-glicerofosforanu wapnia w ilo?ci zapewniaj?cej uzyskanie pH mieszaniny reakcyjnej = 5,5-7,7, za? stosunek ilo?ci wapnia do ilo?ci fosforu w otrzymanym ?elu = 1,6 uzyskuje si? przez dodanie do roztworu octanu chitozanu, przed dodaniem roztworu?-glicerofosforanu wapnia, sta?ego w?glanu wapnia w takiej ilo?ci, aby ??czna ilo?? w?glanu wapnia i roztworu ß-glicerofosforanu wapnia zapewni?a uzyskanie tego stosunku ilo?ci wapnia do ilo?ci fosforu w ?elu. Sposób wed?ug zastrz. 1, znamienny tym, ?e roztwór octanu chitozanu sporz?dza si?z chitozanu o stopniu deacetylacji 80-90%. . . Don't show this again PL PL PL PL
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL423822A PL235629B1 (pl) | 2017-12-11 | 2017-12-11 | Sposób wytwarzania termoodwracalnych żeli chitozanowych przeznaczonych na skafoldy iniekcyjne do hodowli osteoblastów |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL423822A PL235629B1 (pl) | 2017-12-11 | 2017-12-11 | Sposób wytwarzania termoodwracalnych żeli chitozanowych przeznaczonych na skafoldy iniekcyjne do hodowli osteoblastów |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL423822A1 PL423822A1 (pl) | 2019-06-17 |
| PL235629B1 true PL235629B1 (pl) | 2020-09-21 |
Family
ID=66809723
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL423822A PL235629B1 (pl) | 2017-12-11 | 2017-12-11 | Sposób wytwarzania termoodwracalnych żeli chitozanowych przeznaczonych na skafoldy iniekcyjne do hodowli osteoblastów |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| PL (1) | PL235629B1 (pl) |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| PL219576B1 (pl) * | 2010-11-22 | 2015-05-29 | Politechnika Łódzka | Sposób wytwarzania termowrażliwego hydrożelu chitozanowego zawierającego wapń i fosfor |
| CN104983672B (zh) * | 2015-06-26 | 2017-11-14 | 青岛大学 | 一种温敏溶胶的制备方法 |
-
2017
- 2017-12-11 PL PL423822A patent/PL235629B1/pl unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| PL423822A1 (pl) | 2019-06-17 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| ES2809457T3 (es) | Matriz de soporte de injerto para reparación de cartílago y procedimiento de obtención de la misma | |
| Ruvinov et al. | Alginate biomaterial for the treatment of myocardial infarction: progress, translational strategies, and clinical outlook: from ocean algae to patient bedside | |
| ES2408554T3 (es) | Método para preparar armazón poroso para ingeniería de tejidos, cultivo celular y suministro de células | |
| Kuo et al. | Ionically crosslinked alginate hydrogels as scaffolds for tissue engineering: Part 1. Structure, gelation rate and mechanical properties | |
| ES2595252T3 (es) | Formulación acuosa estéril inyectable a base de ácido hialurónico reticulado y de hidroxiapatita para uso terapéutico | |
| KR100975381B1 (ko) | 반죽 및 형태화 가능한 뼈 대체 물질 | |
| ES2744547T3 (es) | Método para preparar microtransportadores, microtransportadores y aplicación de los mismos | |
| KR101158776B1 (ko) | 방사선 융합 기술을 이용한 생체조직공학용 베타-글루칸 기반 지지체 및 이의 제조방법 | |
| RU2376019C2 (ru) | Пористые композиционные материалы на основе хитозана для заполнения костных дефектов | |
| CN101564553A (zh) | 人源化活性煅烧骨及其制备方法 | |
| Tian et al. | Fabrication of nanocomposite bioelastomer porous scaffold based on chitin nanocrystal supported emulsion-freeze-casting | |
| ES2965656T3 (es) | Método de producción de injertos tridimensionales de grasa autólogos utilizando tejido adiposo humano derivado de lipoaspirado con células madre multipotentes y nanofibrillas de celulosa biocompatibles | |
| JP6885551B2 (ja) | コラーゲンビトリゲル及びその精製物の製造方法並びに当該方法により得られたコラーゲンビトリゲル及びその精製物 | |
| KR20200007747A (ko) | 골치료를 위한 fk506을 포함하는 키토산/템포 산화 셀룰로오스 나노 섬유 하이드로겔 및 이의 제조방법 | |
| Wibowo et al. | Development of salt leached silk fibroin scaffold using direct dissolution techniques for cartilage tissue engineering | |
| CN103819694A (zh) | 一种具有细胞相容性的丝素蛋白水凝胶及其制备方法 | |
| KR102014248B1 (ko) | 이상 인산 칼슘이 탑재된 탈세포화된 돼지 피부 유래 주입형 세포외 기질 기반 하이드로겔의 제조방법 | |
| Lalzawmliana et al. | Clinical application of biomimetic marine-derived materials for tissue engineering | |
| CN104587525A (zh) | 包含血小板及透明质酸的支架及其制备方法 | |
| Zhang et al. | Mesoporous bioglass/silk fibroin scaffolds as a drug delivery system: Fabrication, drug loading and release in vitro and repair calvarial defects in vivo | |
| PL235629B1 (pl) | Sposób wytwarzania termoodwracalnych żeli chitozanowych przeznaczonych na skafoldy iniekcyjne do hodowli osteoblastów | |
| Anil et al. | Applications of seaweed polysaccharides in dentistry | |
| ES2325313T3 (es) | Composicion gelificable, biocompatible e implantable. | |
| US12263273B2 (en) | Porous biomaterials for tissue regeneration | |
| Yuan et al. | Injectable calcium phosphate cement integrated with BMSCs-encapsulated microcapsules for bone tissue regeneration |