PL226221B1 - Sposob otrzymywania biomasy drozdzy o zwiekszonej zawartosci ?(1,3)/(1,6)-glukanow i zastosowanie biomasy - Google Patents
Sposob otrzymywania biomasy drozdzy o zwiekszonej zawartosci ?(1,3)/(1,6)-glukanow i zastosowanie biomasyInfo
- Publication number
- PL226221B1 PL226221B1 PL409264A PL40926414A PL226221B1 PL 226221 B1 PL226221 B1 PL 226221B1 PL 409264 A PL409264 A PL 409264A PL 40926414 A PL40926414 A PL 40926414A PL 226221 B1 PL226221 B1 PL 226221B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- biomass
- yeast
- multiplication
- carried out
- obtaining
- Prior art date
Links
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 title claims description 48
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 title claims description 42
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 34
- 229920001503 Glucan Polymers 0.000 title claims description 24
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 claims description 41
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 33
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 24
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 claims description 16
- 244000061456 Solanum tuberosum Species 0.000 claims description 14
- 235000002595 Solanum tuberosum Nutrition 0.000 claims description 14
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 235000011389 fruit/vegetable juice Nutrition 0.000 claims description 12
- 239000002699 waste material Substances 0.000 claims description 12
- 241000235646 Cyberlindnera jadinii Species 0.000 claims description 11
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims description 10
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 8
- 229920002498 Beta-glucan Polymers 0.000 claims description 7
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 claims description 7
- 210000005253 yeast cell Anatomy 0.000 claims description 7
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 6
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 6
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 6
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 claims description 6
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 claims description 6
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 5
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 claims description 5
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 5
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 claims description 4
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims description 4
- 238000000227 grinding Methods 0.000 claims description 4
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 claims description 4
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 239000011591 potassium Substances 0.000 claims description 4
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 4
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 claims description 4
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 claims description 4
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 3
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 claims description 3
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 claims description 3
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 claims description 3
- 239000003225 biodiesel Substances 0.000 claims description 3
- 239000011575 calcium Substances 0.000 claims description 3
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 claims description 3
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims description 3
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 claims description 3
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 claims description 3
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims description 3
- 239000011734 sodium Substances 0.000 claims description 3
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 3
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 claims description 3
- 235000001727 glucose Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 claims description 2
- 230000001902 propagating effect Effects 0.000 claims description 2
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 claims description 2
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 claims 2
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 claims 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 claims 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 10
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 6
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 5
- 208000035404 Autolysis Diseases 0.000 description 3
- 206010057248 Cell death Diseases 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 239000006041 probiotic Substances 0.000 description 3
- 230000000529 probiotic effect Effects 0.000 description 3
- 235000018291 probiotics Nutrition 0.000 description 3
- 230000028043 self proteolysis Effects 0.000 description 3
- 239000007221 ypg medium Substances 0.000 description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 2
- 230000001147 anti-toxic effect Effects 0.000 description 2
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 2
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 2
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 2
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 2
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 2
- 239000002440 industrial waste Substances 0.000 description 2
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 2
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 2
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 2
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 2
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 2
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 2
- FYGDTMLNYKFZSV-URKRLVJHSA-N (2s,3r,4s,5s,6r)-2-[(2r,4r,5r,6s)-4,5-dihydroxy-2-(hydroxymethyl)-6-[(2r,4r,5r,6s)-4,5,6-trihydroxy-2-(hydroxymethyl)oxan-3-yl]oxyoxan-3-yl]oxy-6-(hydroxymethyl)oxane-3,4,5-triol Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1[C@@H](CO)O[C@@H](OC2[C@H](O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]2O)CO)[C@H](O)[C@H]1O FYGDTMLNYKFZSV-URKRLVJHSA-N 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- QCWXUUIWCKQGHC-UHFFFAOYSA-N Zirconium Chemical compound [Zr] QCWXUUIWCKQGHC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 1
- 230000003698 anagen phase Effects 0.000 description 1
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 239000002551 biofuel Substances 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 1
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 1
- 230000001713 cholinergic effect Effects 0.000 description 1
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 1
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 230000036570 collagen biosynthesis Effects 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 235000012041 food component Nutrition 0.000 description 1
- 239000005417 food ingredient Substances 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 230000002101 lytic effect Effects 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 230000010355 oscillation Effects 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 235000013406 prebiotics Nutrition 0.000 description 1
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 1
- 230000000644 propagated effect Effects 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 230000008719 thickening Effects 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 239000002351 wastewater Substances 0.000 description 1
- 230000029663 wound healing Effects 0.000 description 1
- 229910052726 zirconium Inorganic materials 0.000 description 1
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
Description
Przedmiotem wynalazku jest sposób otrzymywania biomasy drożdży paszowych i probiotycznych o zwiększonej zawartości ^(1,3)/(1,6)-glukanów w ścianie komórkowej oraz zastosowanie biomasy do otrzymywania preparatów ścian komórkowych bogatych w ^-glukany drożdży lub oczyszczonych preparatów ^(1,3)/(1,6)-glukanów.
Beta-(1,3)/(1,6)-glukan ściany komórkowej drożdży wykazuje szereg pożytecznych właściwości w organizmie ludzi i zwierząt. Może być wykorzystywany jako stymulator układu immunologicznego ludzi i zwierząt, działa przeciwdrobnoustrojowo, przeciwtoksycznie, przeciwkancenogennie, przeciwutleniająco, prebiotycznie, obniża poziom cholesterolu we krwi, stymuluje biosyntezę kolagenu i przyspiesza gojenie ran. Beta-glukany drożdży wykazują również funkcjonalność technologiczną, ze względu na zdolność wiązania wody i tłuszczu, właściwości żelujące, stabilizację emulsji czy właściwości zagęszczające. Można z nich wytwarzać powłoki jadalne. Sefa-(1,3)/(1,6)-glukan pochodzenia drożdżowego został włączony do wykazu nowych składników żywności. Potencjał przemysłowego wykorzystania tych polisacharydów jest zatem bardzo duży, a wyniki badań naukowych z ostatnich lat potwierdzają nowe możliwości aplikacyjne omawianych polimerów, zarówno w medycynie, jak i wielu dziedzinach przemysłu, przez co zainteresowanie tymi polisacharydami rośnie.
Biotechnologiczne pozyskiwanie ^(1,3)/(1,6)-glukanów opiera się na ich izolacji z biomasy drożdży. Zawartość ^(1,3)/(1,6)-glukanów w ścianie komórkowej drożdży jest wypadkową wielu czynników, do których zaliczamy: gatunek i szczep drożdży oraz warunki wzrostu drożdży, takie jak rodzaj źródła węgla i azotu oraz ich stężenie i wzajemne proporcje w pożywce hodowlanej, pH podłoża, temperatura i czas hodowli, stopień aeracji, faza wzrostu i wiek komórek. Ważne jest, aby proces pozyskiwania ^(1,3)/(1,6)-glukanów pozwalał na otrzymanie tych związków w ich naturalnej, niezmienionej formie. Izolacja ^(1,3)/(1,6)-glukanów przy użyciu standardowych metod hydrolizy może prowadzić do denaturacji aktywnej struktury cząsteczki. Z tego powodu stosuje się metody łagodnej autolizy komórek drożdży przez lityczne enzymy wewnątrzkomórkowe, a następnie wielokrotnie powtarzane rozdzielanie rozpuszczalnego ekstraktu drożdży i nierozpuszczalnych ścian komórkowych, w wirówkach wysokiej wydajności. Przykład owe łagodne metody pozyskiwania ^-glukanów z biomasy drożdży są przedstawione w opisach zgłoszeń patentowych: JP2002209598, RU2216595.
Ważnym aspektem pozyskiwania ^(1,3)/(1,6)-glukanów jest także wydajność procesu. Biomasa drożdży o zwiększonej zawartości ^(1,3)/(1,6)-glukanów może stanowić wydajne źródło tych polimerów. Ponadto sama biomasa drożdży zawierająca więcej ^(1,3)/(1,6)-glukanów w ścianie komórkowej może wykazywać pożądane właściwości terapeutyczne.
Pozyskiwanie ^(1,3)/(1,6)-glukanów drożdży polega na hodowli biomasy w podłożach z przyswajalnymi źródłami węgla i azotu oraz innymi składnikami odżywczymi, jak związki mineralne i witaminy. Z drugiej strony istnieje potrzeba zagospodarowania odpadów przemysłowych . Uciążliwym odpadem przemysłu skrobiowego wymagającym zagospodarowania jest ziemniaczana odpadowa woda sokowa, będąca głównym obciążeniem ścieków przemysłu skrobiowego. Jest to odpad powstający po kwasowo-termicznej koagulacji białek z soku ziemniaczanego. Odbiałczona ziemniaczana woda sokowa zawiera ok. 3-5% suchej substancji, w tym ok. 1-2% białka, ok. 1-1,8% cukrów redukujących i składniki mineralne, z których w przeważającej ilości występują fosfor, magnez, potas i siarka. Umożliwia to wykorzystanie tego odpadu w hodowli drożdży.
Ponieważ stosunek pierwiastków węgiel: azot: fosfor w odbiałczonej ziemniaczanej wodzie sokowej przedstawia się mniej korzystnie w porównaniu z podłożami optymalnych dla wzrostu drożdży, wskazane jest uzupełnianie zawartości źródła węgla w podłożu. Autorzy obecnego wynalazku stwierdzili, że można w tym celu stosować glicerol po produkcji biodiesla, wykorzystywany przez niektóre drożdże jako przyswajalne źródło węgla.
Do tej pory nie było prób wykorzystania w/w odpadów w biosyntezie ^(1,3)/(1,6)-glukanów drożdży.
Istotą wynalazku jest sposób uzyskania biomasy drożdży paszowych i probiotycznych o zwiększonej zawartości ^-glukanów w ścianie komórkowej z zastosowaniem podłoży z odbiałczanej ziemniaczanej wody sokowej i glicerolu. Biomasa ta może być następnie wykorzystywana do otrzymywania preparatów ścian komórkowych bogatych w ^-glukany drożdży lub oczyszczonych preparatów ^(1,3)/(1,6)-glukanów.
PL 226 221 B1
Sposób otrzymywania biomasy drożdży według wynalazku obejmuje następujące etapy:
a) Etap przednamnażania komórek drożdży Candida utilis lub Saccharomyces cerevisiae var. boulardii w podłożu zawierającym glukozę, pepton i ekstrakt drożdżowy, w temperaturze 28-30°C, w czasie 18-24 godzin,
b) Etap przygotowania biomasy inokulacyjnej z biomasy uzyskanej w etapie a), korzystnie przez odwirowanie, a następnie przemywanie jałową solą fizjologiczną i zawieszenie w jałowej odbiałczonej ziemniaczanej wodzie sokowej, tak aby wsiew inokulacyjny wynosił 8-10% obj. podłoża hodowlanego,
c) Etap namnażania biomasy,
d) Etap pozyskania biomasy.
Sposób według wynalazku charakteryzuje się tym, że etap namnażania biomasy Candida utilis lub Saccharomyces cerevisiae var. boulardii prowadzi się w podłożu, które stanowi odpadowa ziemniaczana woda sokowa wzbogacona glicerolem użytym w stężeniu od 5 do 10% wag., w temperaturze od 28 do 30°C, w czasie od 22 do 24 godzin, korzystnie 24 godziny, przy czym stosunek C/N w podłożu zawiera się w przedziale od 14 do 22.
Korzystnie stosuje się glicerol odpadowy z produkcji biopaliwa do silników wysokoprężnych.
Korzystnie stosuje się drożdże Candida utilis ATTC 9950 i Saccharomyces cerevisiae var. boulardii PAN.
Korzystnie namnażanie biomasy prowadzi się w podłożu otrzymanym przez rozpuszczenie odpowiedniej masy glicerolu w odpadowej wodzie sokowej ziemniaczanej, ustalenie pH na poziomie od 4,8 do 5,2, a następnie sterylizację w temperaturze 121°C, w czasie od 15 do 20 minut.
Korzystnie podłoże zawiera 0,26-0,28% azotu ogółem i 1,6-1,75% białka, 0,72-0,82% cukrów 3 3 3 bezpośrednio redukujących, 400-440 mg/dm3 fosforu, 3,680-4,180 g/dm3 potasu, 520-640 mg/dm3 sodu, 520-600 mg/dm3 wapnia, 300-350 mg/dm3 magnezu i ok. 5,50-5,90 g/dm3 siarki.
Korzystnie etap przednamnażania komórek prowadzi się w podłożu YPG.
Korzystnie etap przednamnażania i namnażania komórek drożdży prowadzi się na wytrząsarce posuwisto-zwrotnej o amplitudzie drgań 200 cykli/min.
Korzystnie w etapie przygotowania biomasy inokulacyjnej stosuje się wirowanie przy 32004000 g przez 10 minut.
Korzystnie etap pozyskania biomasy prowadzi się przez wirowanie przy 3200-4000 g/10 minut.
Biomasę otrzymaną sposobem według wynalazku zgodnie z wynalazkiem stosuje się do otrzymywania preparatów ścian komórkowych bogatych w ^-glukany drożdży lub oczyszczonych preparatów ^(1,3)/(1,6)-glukanów. Korzystnie biomasę stosuje się do otrzymywania preparatów w procesie obejmującym dezintegrację mechaniczną biomasy i, opcjonalnie, oczyszczanie preparatów ścian komórkowych.
Korzystnie etap dezintegracji mechanicznej prowadzi się w młynie kulowym, z wykorzystaniem kulek cyrkonowo-szklanych.
Korzystnie etap oczyszczania biomasy po dezintegracji polega na przemywaniu jałową wodą, roztworem NaCl, ponownie wodą, a następnie wirowaniu i suszeniu w temperaturze 80-85°C, po czym rozdrabnianiu na drodze mielenia, lub suszeniu na drodze liofilizacji. Korzystnie stosuje się co najmniej dwukrotne przemywanie roztworami NaCl o rosnącym stężeniu. Korzystn ie stosuje się wirowanie przy 5000-5500 g/10 min.
Sposób według wynalazku, w którym etap hodowli namnażającej prowadzi się w podłożu o zdefiniowanym wyżej składzie, w przypadku namnażania w czasie 24 godzin pozwala uzyskać plon bio3 masy na poziomie około 12 g ss/dm hodowli w przypadku drożdży Candida utilis ATTC 9950 oraz 3 około 7 g s.s/dm w odniesieniu do szczepu Saccharomyces cerevisiae var. boulardii PAN. Komórki z podłoża z odbiałczanej ziemniaczanej wody sokowej z dodatkiem 5 i 10% glicerolu charakteryzują się grubszą warstwą ^(1,3)/(1,6)-glukanową w ścianie komórkowej w porównaniu z biomasą z podłoża syntetycznego YPG. Jest to grubość około 230 nm w odniesieniu do drożdży paszowych, przy około 180 nm po hodowli w podłożu YPG. W przypadku drożdży probiotycznych grubość warstwy glukanowej wynosi około 160-180 nm, przy grubości ok. 120 nm w komórkach z podłoża YPG. W preparatach ścian komórkowych drożdży C. utilis z podłoży hodowlanych stwierdzano około 44-45 g ^(1,3)/(1,6)-glukanów/ 100 g s.s. preparatu przy około 80% cukrów ogółem. W przypadku Saccharomyces cerevisiae var. boulardii było to około 23% ^(1,3)/(1,6)-glukanów przy około 53% cukrów ogółem. Stwierdzone zawartości były wyższe od odnotowanych po hodowli komórek w podłożu YPG o około 45 i około 67%, odpowiednio dla C. utilis i S. cerevisiae var. boulardii.
PL 226 221 B1
Zastosowanie biomasy otrzymanej sposobem według wynalazku, o zwiększonej zawartości ^(1,3)/(1,6)-glukanów, do otrzymywania preparatów ścian komórkowych lub oczyszczonych preparatów ^(1,3)/(1,6)-glukanów, wymaga jedynie dezintegracji mechanicznej biomasy, bez stosowania długotrwałej autolizy komórek drożdży. Autoliza przebiega w czasie co najmniej 24 godzin, podczas gdy mechaniczna dezintegracja wymaga jedynie około 20 minut.
Sposób według wynalazku umożliwia wspólne wykorzystanie dwóch rodzajów odpadów przemysłowych i jednocześnie prowadzi do uzyskania biomasy drożdży o zwiększonej zawartości ^(1,3)/(1,6)-glukanów.
Sposób według wynalazku został bliżej przedstawiony w przykładzie stosowania:
P r z y k ł a d.
Biomasę drożdży Candida utilis lub Saccharomyces cerevisiae var. boulardii namnaża się 3 w podłożu o składzie [g/dm3]: glukoza 20, pepton 20, ekstrakt drożdżowy 10, pH 5,0±0,2 przez godziny na wytrząsarce posuwisto-zwrotnej o amplitudzie drgań 200 cykli/min w temp. 28-30°C.
3
Następnie 10 cm3 hodowli odwirowuje się (3200 g/10 min.), dwukrotnie przepłukuje jałową solą fizjolo3 giczną, zawiesza w 10 cm3 jałowej odbiałczanej ziemniaczanej wody sokowej i tą objętością zaszczepia podłoże namnażającego. Hodowlę namnażającą prowadzi się w podłożu z odbiałczoną ziemniaczaną wodą sokową i glicerolem odpadowym z produkcji biopaliwa do silników wysokoprężnych. Glicerol dodaje się w ilości 5% wag., uzyskując stosunek C/N na poziomie około 14,3 oraz, w drugim przypadku, w ilości 10% wag. uzyskując stosunek C/N na poziomie około 21,8. Podłoże zawiera 3
0,26% azotu ogółem, 1,6% białka, 0,72% cukrów bezpośrednio redukujących, 420±0,021 mg/dm3 fosforu, 3,930±0,254 g/dm3 potasu, 0,584±0,058 mg/dm3 sodu, 0,563±0,043 mg/dm3 wapnia,
0,310±0,015 mg/dm3 magnezu i 5,883±0,930 g/dm3 siarki. Kwasowość czynną podłoża ustala się na poziomie pH=4,8-5,2. Tak przygotowane podłoże poddaje się sterylizacji w 121°C przez 15 min. Hodowlę namnażającą prowadzi się przez 24 h, na wytrząsarce posuwisto-zwrotnej o amplitudzie drgań 200 cykli/min., w temperaturze 28-30°C. Otrzymaną biomasę odwirowuje się przy 3200 g/10 min. Następnie biomasę poddaje się dezintegracji mechanicznej w młynie kulowym z wykorzystaniem kulek cyrkonowo-szklanych o średnicy 1 mm, w celu otrzymania preparatów ścian komórkowych. Pozostałość biomasy po dezintegracji przemywa się jałową wodą, następnie roztworami NaCl o stężeniu 17 mM, 34 mM i 85 mM i jeszcze raz wodą. Pozostałość zdezintegrowanej biomasy wiruje się (50005500 g/10 min), a uzyskany osad, którym są preparaty ścian komórkowych, suszy się w temperaturze 80-85°C, po czym rozdrabnia na drodze mielenia, lub suszy na drodze liofilizacji. W hodowlach otrzymuje się ok. 12,7±0,5 g s.s./dm plonu biomasy C. utilis lub ok. 7,4±0,4 g s.s./dm plonu biomasy Saccharomyces cerevisiae var. boulardii, z której uzyskuje się (nieoczyszczone z białek i lipidów) preparaty ścian komórkowych zawierające odpowiednio ok. 45 i 23 g ^(1,3)/(1,6)-glukanów/100 g s.s. preparatu.
Claims (11)
1. Sposób otrzymywania biomasy drożdży Candida utilis albo Saccharomyces cerevisiae var. boulardii obejmujący etapy: przednamnażania komórek drożdży, przygotowania biomasy inokulacyjnej, namnażania biomasy, pozyskania biomasy, znamienny tym, że etap namnażania prowadzi się w podłożu, które stanowi odpadowa ziemniaczana woda sokowa wzbogacona glicerolem użytym w stężeniu od 5 do 10% wag., w temperaturze od 28 do 30°C, w czasie od 22 do 24 godzin, przy czym stosunek C/N w podłożu zawiera się w przedziale od 14 do 22.
2. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że stosuje się glicerol odpadowy z produkcji biopaliwa do silników wysokoprężnych.
3. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że stosuje się drożdże Candida utilis ATTC 9950 i Saccharomyces cerevisiae var. boulardii PAN.
4. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że namnażanie biomasy prowadzi się w podłożu otrzymanym przez rozpuszczenie odpowiedniej masy glicerolu w odpadowej wodzie sokowej ziemniaczanej, ustalenie pH na poziomie od 4,8 do 5,2, a następnie sterylizację w temperaturze 121°C, w czasie od 15 do 20 minut.
5. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że namnażanie biomasy prowadzi się w podłożu zawierającym 0,26-0,28% azotu ogółem i ok. 1,6-1,75% białka, 0,72-0,82% cukrów bezpośrednio
PL 226 221 B1 redukujących, 400-440 mg/dm3 fosforu, 3,680-4,180 g/dm3 potasu, 520-640 mg/dm3 sodu, 520-600 mg/dm3 wapnia, 300-350 mg/dm3 magnezu i ok. 5,50-5,90 g/dm3 siarki.
6. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że etap przednamnażania komórek drożdży prowadzi się w podłożu zawierającym glukozę, pepton i ekstrakt drożdżowy, w temperaturze 28-30°C, w czasie 18-24 godzin.
7. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że etap przygotowania biomasy inokulacyjnej prowadzi się przez odwirowanie biomasy uzyskanej w etapie przednamnażania, a następnie przemywanie jałową solą fizjologiczną i zawieszenie w jałowej odbiałczonej ziemniaczanej wodzie sokowej, tak aby wsiew inokulacyjny wynosił 8-10% obj. podłoża hodowlanego.
8. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że etap pozyskania biomasy po namnażaniu prowadzi się przez wirowanie przy 3200-4000 g/10 min.
9. Zastosowanie biomasy drożdży Candida utilis albo Saccharomyces cerevisiae var. boulardii otrzymanej zgodnie ze sposobem określonym w zastrzeżeniach 1-8, do otrzymywania preparatów ścian komórkowych bogatych w ^-glukany drożdży lub oczyszczonych preparatów ^(1,3)/(1,6)-glukanów.
10. Zastosowanie według zastrz. 9, znamienne tym, że biomasę stosuje się do otrzymywania preparatów w procesie obejmującym dezintegrację mechaniczną biomasy i, opcjonalnie, oczyszczanie preparatów ścian komórkowych.
11. Zastosowanie według zastrz. 1, znamienne tym, że biomasę po dezintegracji mechanicznej oczyszcza się przez przemywanie jałową wodą, roztworem NaCl, ponownie wodą, a następnie wirowanie, suszenie w temperaturze 80-85°C, po czym rozdrabnianie na drodze mielenia, lub suszenie na drodze liofilizacji.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL409264A PL226221B1 (pl) | 2014-08-25 | 2014-08-25 | Sposob otrzymywania biomasy drozdzy o zwiekszonej zawartosci ?(1,3)/(1,6)-glukanow i zastosowanie biomasy |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL409264A PL226221B1 (pl) | 2014-08-25 | 2014-08-25 | Sposob otrzymywania biomasy drozdzy o zwiekszonej zawartosci ?(1,3)/(1,6)-glukanow i zastosowanie biomasy |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL409264A1 PL409264A1 (pl) | 2016-02-29 |
| PL226221B1 true PL226221B1 (pl) | 2017-06-30 |
Family
ID=55361176
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL409264A PL226221B1 (pl) | 2014-08-25 | 2014-08-25 | Sposob otrzymywania biomasy drozdzy o zwiekszonej zawartosci ?(1,3)/(1,6)-glukanow i zastosowanie biomasy |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| PL (1) | PL226221B1 (pl) |
-
2014
- 2014-08-25 PL PL409264A patent/PL226221B1/pl unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| PL409264A1 (pl) | 2016-02-29 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN101184780A (zh) | β-葡聚糖和甘露聚糖的制备 | |
| CN104086305B (zh) | 一种蛹虫草子实体培养基 | |
| CN118303634B (zh) | 具有增强免疫力功能的后生元及其制备方法和应用 | |
| Pirog et al. | Exopolysaccharides synthesis on industrial waste | |
| CN107868805B (zh) | 一种通过乳酸菌发酵降解的龙眼多糖及其制备方法 | |
| CN110916177A (zh) | 一种通过酶酵耦合技术制备的海带酵素方法 | |
| CN103725739A (zh) | 一种纳豆菌发酵法制备低分子海参肽的方法 | |
| CN102978190B (zh) | 一种扁座壳孢菌发酵生产壳聚糖酶的培养基及方法 | |
| Antontceva et al. | Influence of Pleurotus ostreatus preparations on fermentation products of lactic acid cultures. | |
| CN104263585A (zh) | 一种蛹虫草发酵酒的制作方法 | |
| CN118649117B (zh) | 一种抑菌去屑、平衡头皮微生态的金银花发酵产物 | |
| CN103849575B (zh) | 一种单细胞蛋白的生产方法 | |
| CZ288826B6 (cs) | Směs nízkomolekulárních účinných látek z kvasinek a způsob její výroby | |
| PL226221B1 (pl) | Sposob otrzymywania biomasy drozdzy o zwiekszonej zawartosci ?(1,3)/(1,6)-glukanow i zastosowanie biomasy | |
| CN118440220A (zh) | 一种磷酸化修饰黑木耳多糖及其绿色安全的制备方法 | |
| CN106906197B (zh) | 发酵工艺制备溶菌酶的方法 | |
| CN104130949B (zh) | 一种富铁蛹虫草的液体深层发酵培养基及培养方法 | |
| CN105586267A (zh) | 生产灵芝菌丝体的灵芝诱变菌株 | |
| CN108977368A (zh) | 一种生产虫草菌粉的固体培养基及生产虫草菌粉的方法 | |
| RU2849073C1 (ru) | Способ получения биологически активных лизатов дрожжей с комплексным иммуномодулирующим, детоксикационным действием и нутритивной поддержкой | |
| Yan et al. | Effects of different fermentation media on polysaccharides production and antitumor and antioxidant activity | |
| RU2630457C1 (ru) | Способ получения биологически активной субстанции с пребиотическим эффектом на основе Medusomyces gysevii | |
| CN103320417A (zh) | 一种深海弹性蛋白酶的低成本制备方法 | |
| Adebiyi et al. | Biological studies on albino rats fed with Sorghum bicolorstarch hydrolyzed with∝-amylase from Rhizopus sp. | |
| CN111620965A (zh) | 一种金针菇壳多糖的制备方法 |