PL219144B1 - Preparat o właściwościach immunoregulatorowych - Google Patents
Preparat o właściwościach immunoregulatorowychInfo
- Publication number
- PL219144B1 PL219144B1 PL396027A PL39602711A PL219144B1 PL 219144 B1 PL219144 B1 PL 219144B1 PL 396027 A PL396027 A PL 396027A PL 39602711 A PL39602711 A PL 39602711A PL 219144 B1 PL219144 B1 PL 219144B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- kda
- permeability
- preparation
- formulation according
- membranes
- Prior art date
Links
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 26
- 230000007365 immunoregulation Effects 0.000 title 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims abstract description 27
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 27
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 claims abstract description 10
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 10
- 230000028327 secretion Effects 0.000 claims abstract description 9
- 210000002969 egg yolk Anatomy 0.000 claims abstract description 6
- 239000000411 inducer Substances 0.000 claims abstract description 6
- 108010000912 Egg Proteins Proteins 0.000 claims abstract description 5
- 102000002322 Egg Proteins Human genes 0.000 claims abstract description 5
- 230000004957 immunoregulator effect Effects 0.000 claims abstract description 5
- 235000013345 egg yolk Nutrition 0.000 claims abstract description 4
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 claims abstract description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims description 8
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 8
- 230000035699 permeability Effects 0.000 claims description 8
- 108010001160 IgY Proteins 0.000 claims description 6
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 claims description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims description 4
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 claims description 4
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 claims description 3
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 claims description 2
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 claims description 2
- 239000012466 permeate Substances 0.000 claims description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 2
- 238000005057 refrigeration Methods 0.000 claims description 2
- 239000012465 retentate Substances 0.000 claims description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 claims 4
- 235000013305 food Nutrition 0.000 abstract description 2
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 abstract description 2
- 239000002417 nutraceutical Substances 0.000 abstract description 2
- 235000021436 nutraceutical agent Nutrition 0.000 abstract description 2
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 abstract description 2
- 108010002212 colostrinine Proteins 0.000 description 15
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 9
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 9
- 102000004889 Interleukin-6 Human genes 0.000 description 8
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 8
- 102000003777 Interleukin-1 beta Human genes 0.000 description 6
- 108090000193 Interleukin-1 beta Proteins 0.000 description 6
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 5
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 description 5
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 4
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 4
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 4
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 4
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 4
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 4
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 3
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 3
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 3
- 210000003022 colostrum Anatomy 0.000 description 3
- 235000021277 colostrum Nutrition 0.000 description 3
- 230000004770 neurodegeneration Effects 0.000 description 3
- 208000015122 neurodegenerative disease Diseases 0.000 description 3
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 3
- 208000024827 Alzheimer disease Diseases 0.000 description 2
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 2
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 2
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 2
- 230000000686 immunotropic effect Effects 0.000 description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 2
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 description 1
- 102000011767 Acute-Phase Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010062271 Acute-Phase Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000271566 Aves Species 0.000 description 1
- 208000014644 Brain disease Diseases 0.000 description 1
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 1
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 1
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 1
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 description 1
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 125000000570 L-alpha-aspartyl group Chemical group [H]OC(=O)C([H])([H])[C@]([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 125000000899 L-alpha-glutamyl group Chemical group [H]N([H])[C@]([H])(C(=O)[*])C([H])([H])C([H])([H])C(O[H])=O 0.000 description 1
- 229930182816 L-glutamine Natural products 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 108010025020 Nerve Growth Factor Proteins 0.000 description 1
- 102000007072 Nerve Growth Factors Human genes 0.000 description 1
- 208000012902 Nervous system disease Diseases 0.000 description 1
- 208000025966 Neurological disease Diseases 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 1
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 1
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 1
- 108010090932 Vitellogenins Proteins 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000036755 cellular response Effects 0.000 description 1
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 235000013351 cheese Nutrition 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 210000000750 endocrine system Anatomy 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 102000034356 gene-regulatory proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091006104 gene-regulatory proteins Proteins 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 1
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 230000008348 humoral response Effects 0.000 description 1
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 description 1
- 229940047122 interleukins Drugs 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 1
- 210000004498 neuroglial cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000014511 neuron projection development Effects 0.000 description 1
- 230000031787 nutrient reservoir activity Effects 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 230000000770 proinflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
Przedmiotem wynalazku jest preparat o właściwościach immunoregulatorowych zawierający mieszaninę białek, o masach cząsteczkowych od 5,5 do 34 kDa, wyizolowanych z frakcji plazmatycznej żółtka jaja, zwłaszcza kurzego, będących mocnym induktorem wydzielania cytokin IL-1ß i IL-6. Wynalazek może znaleźć zastosowanie w przemyśle spożywczym i farmaceutycznym, jako składnik nutraceutyków i produktów farmakologicznych.
Description
Przedmiotem wynalazku jest preparat o właściwościach immunoregulatorowych.
Wynalazek może znaleźć zastosowanie w przemyśle spożywczym i farmaceutycznym, jako składnik nutraceutyków i produktów farmakologicznych.
Poczyniony w ostatnich latach znaczący postęp w wyjaśnieniu molekularnych podstaw patogenezy chorób neurodegeneracyjnych, zwrócił uwagę badaczy na nową grupę substancji białkowych, charakteryzujących się właściwościami regulacyjnymi wobec komórek centralnego systemu nerwowego, a zatem mogących mieć znaczenie terapeutyczne. W komunikacji pomiędzy komórkami glejowymi a komórkami limfoidalnymi bierze udział wiele przekaźników, wśród których istotne znaczenie przypisuje się cytokinom, będącym ostatnio przedmiotem intensywnych badań (Aarli J. A., Role of cytokines in neurological disorders, 2003. Current Med. Chem. 10, 1931-1937, Steinman L., Nuanced roles of cytokines in three major human brain disorders. J. Clin. Invest 2008, 118, 3557-3563).
Szczególnie ważne z punktu widzenia terapeutycznego wydają się te peptydy, które wykazują właściwości immunomodulatorowe w odniesieniu do takich chorób neurodegeneracyjnych jak np. choroba Alzheimera (AD). Peptydy bioaktywne, mogą występować w stanie wolnym, skompleksowanym z innymi substancjami lub stanowić strukturalny element większych białek, z których wycinane są na drodze proteolizy.
Typowym przykładem tej grupy związków jest kompleks peptydów po raz pierwszy wyizolowany z siary owczej (Janusz M., Lisowski J., Franek F., 1974, Isolation and characterisation of a proline-rich polypeptide from ovine colostrum. FEB S. Letters 49, 276-279). Kompleks ten, nazwany później kolostryniną (Colostrinin®), występuje w siarze w formie związanej z frakcją immunoglobulin IgG2, wskazując na jego immunotropowe właściwości.
Kolostrynina (CLN) jest mocnym induktorem wydzielania kluczowych dla układu immunologicznego cytokin, mianowicie interferonu INF-γ, TNF-α, jak również interleukiny IL-6 i IL-10. Wpływa zarówno na odpowiedź humoralną, jak i komórkową, nie wykazując przy tym właściwości cytotoksycznych. Wykazano również działanie CLN na procesy proliferacji/różnicowania komórkowego poprzez indukcję szlaków sygnalnych, dopatrując się podobieństwa w działaniu CLN do hormonów i neurotrofin w procesach prowadzących do wzrostu neurytów (Basci A., Stanton J., Hughes T. K., Kruzel M., Boldogh I., 2005. Colostrinin-driven neunte outgrowth requires p53 activation in PC 12 cells. Cel. Mol. Neurobiol. 25, 1123-1138). W badaniach klinicznych potwierdzono terapeutyczne zdolności tego kompleksu wobec schorzeń o podłożu neurodegeneracyjnym.
Kolostrinina nie jest swoista gatunkowo, jej działanie może mieć znaczenie ogólne, bowiem działa na tak odległe gatunki zwierząt jak ssaki i ptaki. Postawiono zatem hipotezę, że w żółtku jaja powinny istnieć białka regulatorowe, które spełniają wobec rozwijającego się zarodka takie same funkcje jakie pełni kompleks kolostryninowy wobec noworodka ssaków.
Istotą wynalazku jest preparat zawierający mieszaninę białek, o masach cząsteczkowych od 5,5 do 34 kDa, wyizolowanych z frakcji plazmatycznej żółtka jaja, zwłaszcza kurzego, będących mocnym induktorem wydzielania cytokin IL-1 β i IL-6. Preparat białkowy, według wynalazku, otrzymuje się sposobem, który został opisany w równoległym zgłoszeniu patentowym nr P. 396 026, który to sposób polega na tym, że immunoglobulinę Y poddaje się dializie wobec buforu fosforanowego o stężeniu nie niższym niż 50 mM, o pH od 7,0 do 7,4. W trakcie dializy, trwającej co najmniej 48 godzin, kilkukrotnie zmienia się bufor. Następnie, dializat klaruje się i zagęszcza na membranie o przepuszczalności granicznej poniżej 3 kDa. Otrzymany retentat poddaje się chromatografii sitowo-molekularnej zbierając grupę niskocząsteczkowych białek oddzielonych od immunoglobuliny Y, które to białka są fragmentami C-końcowej domeny głównego białka żółtka - witellogeniny. Alternatywnie, dializat poddaje się ultrafiltracji przez membrany o przepuszczalności granicznej poniżej 50 kDa, po czym permeat zagęszcza się ultrafiltrując przez membrany o przepuszczalności granicznej poniżej 3 kDa. Kolejno, frakcje białek zwolnione z kompleksu z IgY, poddaje się dializie do wody, przez błony o przepuszcza lności granicznej poniżej 3 kDa, w warunkach chłodniczych, przez okres co najmniej 24 godzin. Wodę zmienia się kilkukrotnie. Alternatywnie, frakcje białek odsala się z użyciem modułów ultrafiltracyjnych o przepuszczalności granicznej 1 kDa i poddaje suszeniu.
Korzystnie jest, gdy wartość stężenia buforu fosforanowego wynosi 100 mM.
Korzystnie także jest, gdy pH buforu utrzymuje się na poziomie 7,2.
Korzystnie również jest, gdy dializę przeprowadza się przy temperaturze wody lub buforu fosforanowego od 273 do 277K.
PL 219 144 B1
Także korzystnie jest, gdy frakcje białek suszy się poprzez liofilizację.
Preparat białkowy, będący przedmiotem wynalazku, wykazuje właściwości immunoregulatorowe i jest mocnym induktorem wydzielania kluczowych dla układu immunologicznego cytokin (IL-1 β i IL-6), przewyższając pod tym względem preparat referencyjny. Zdolność ta, porównywalna jest z próbą LPS + PHA, która indukuje maksymalną ilość cytokin. Stężenie indukowanych cytokin IL-1 β i IL-6 jest maksymalne już przy najniższej dawce preparatu.
Do porównania immunotropowej aktywności preparatu białkowego, będącego przedmiotem wynalazku, wykorzystano model ex vivo, w którym na pełnej krwi obwodowej przebadano jego wpływ na poziom wydzielanych przez komórki IL-1 β oraz IL-6. Obie interleukiny należą do cytokin prozapalnych (tzw. typ Th1), odpowiedzialnych za aktywację odpowiedzi immunologicznej, syntezę białek ostrej fazy lub aktywację systemu endokrynnego.
Indukcję cytokin in vitro przez białka preparatu, będącego przedmiotem wynalazku, przeprowadzono na próbkach krwi pobranych od zdrowych ochotników. Pełną krew zawierającą 10 jednostek na 1 ml heparyny bez konserwantów rozcieńczono 10-krotnie pożywką hodowlaną RPMI 1640 wzbogaconą 100 μg/ml streptomycyny, 100 U/ml penicyliny oraz 3% L-glutaminą. Zdolności induktorowe preparatu z żółtka na wydzielanie cytokin odnoszono do kontroli negatywnej (krew bez dodatków), kontroli pozytywnej (komórki krwi stymulowane dodatkiem 2 μg/ml lipopolisacharydu i fitohemaglutyniny LPS + PHA) oraz do kolostryniny jako preparatu referencyjnego. W przypadku preparatów stosowano identyczne dawki, co miało pozwolić na ich lepsze porównanie.
W tabelach 1 i 2 przedstawiono wyniki badań wpływu preparatu białkowego według wynalazku, na wydzielanie cytokin IL-6 i IL-1 β przez komórki pełnej krwi obwodowej, w porównaniu z wpływem kolostryniny jako preparatu referencyjnego otrzymanego znanym sposobem wg. Janusz et. al.
T a b e l a 1
Wpływ preparatu białkowego, według wynalazku, na wydzielanie cytokin IL-1 β przez komórki pełnej krwi obwodowej, w porównaniu z wpływem kolostryniny jako preparatu referencyjnego
| Próba/Dawka | Stężenie 1-1β* [ng/ml] |
| Kontrola | 0 |
| LPS + PHA (2 pg + 2 pg) | > 3,5 |
| Kolostrynina | |
| 50 pg | 1,17 |
| 100 pg | > 2,57 |
| Preparat białkowy (Yolkina) według wynalazku | |
| 50 pg | > 3,26 |
| 100 pg | > 3,26 |
| Medium hodowlane | 0 |
* Wartość średnia z oznaczeń na 3 próbach krwi obwodowej
T a b e l a 2
Wpływ preparatu białkowego, według wynalazku, na wydzielanie cytokin IL-6 przez komórki pełnej krwi obwodowej w porównaniu z wpływem kolostryniny jako preparatu referencyjnego
| Próba/Dawka | Stężenie IL-6* [ng/ml] |
| Kontrola | 0 |
| LPS + PHA (2 pg + 2 pg) | 5,36 |
| Kolostrynina | |
| 50 pg | 2,72 |
| 100 pg | 3,49 |
| Preparat białkowy (Yolkina) według wynalazku | |
| 50 pg | 5,18 |
| 100 pg | 5,41 |
| Medium hodowlane | 0 |
* Wartość średnia z oznaczeń na 5 próbach krwi obwodowej
PL 219 144 B1
Przedmiot wynalazku przedstawiono poniżej w przykładzie realizacji, który ma na celu jego ilustrację.
P r z y k ł a d
Skład aminokwasowy preparatu o właściwościach immunoregulatorowych przedstawia tabela 3. Z przedstawionego składu wynika, że preparat białkowy Yolkina, według wynalazku, nie należy do białek wysokoprolinowych.
Zawiera jedynie 6,31% tego anminokwasu i cechuje się stosunkowo wysoką zawartością aminokwasów kwaśnych i nieznaczną zawartością metioniny.
T a b e l a 3
Skład aminokwasowy preparatu białkowego (Yolkina), będącego przedmiotem wynalazku, w porównaniu z kolostryniną owczą (produkt referencyjny)
| Reszty aminokwasowe | Preparat białkowy Yolkina według wynalazku [%] | Kolostrynina owcza wg. Janusz et. al. (1974) produkt referencyjny [%] |
| Asp/Asn | 9,76 | 2,56 |
| Ser | 8,69 | 5,27 |
| Glu/Gln | 11,13 | 14,90 |
| Gly | 8,04 | 2,32 |
| His | 1,95 | 1,94 |
| Arg | 5,38 | 1,80 |
| Thr | 7,42 | 6,55 |
| Ala | 7,69 | 1,38 |
| Pro | 6,31 | 22,90 |
| Tyr | 2,92 | 1,62 |
| Val | 7,97 | 12,85 |
| Met | 0,51 | 3,93 |
| Lys | 6,46 | 7, 16 |
| Ile | 4,22 | 2,48 |
| Leu | 8,01 | 9,60 |
| Phe | 3,50 | 4,72 |
| Trp | N.D. | N.D. |
| Cys | N.D. | 1,05 |
Zastrzeżenia patentowe
Claims (5)
- Zastrzeżenia patentowe1. Preparat o właściwościach immunoregulatorowych, znamienny tym, że zawiera mieszaninę białek, o masach cząsteczkowych od 5,5 do 34 kDa, wyizolowanych z frakcji plazmatycznej żółtka jaja, zwłaszcza kurzego, będących mocnym induktorem wydzielania cytokin IL-Ιβ i IL-6 oraz że otrzymany jest sposobem polegającym na tym, że immunoglobulinę Y poddaje się dializie wobec buforu fosforanowego o stężeniu nie niższym niż 50 mM, o pH od 7,0 do 7,4, z kilkukrotną zmianą buforu, przez co najmniej 48 godzin, po czym dializat klaruje się i zagęszcza na membranie o przepuszczalności granicznej poniżej 3 kDa, a otrzymany retentat poddaje się chromatografii sitowo-molekularnej zbierając grupę niskocząsteczkowych białek oddzielonych od immunoglobuliny Y, alternatywnie dializat poddaje się ultrafiltracji przez membrany o przepuszczalności granicznej poniżej 50 kDa, po czym permeat zagęszcza się ultrafiltrując przez membrany o przepuszczalności granicznej poniżej 3 kDa, a następnie frakcje białek zwolnione z kompleksu z IgY poddaje się dializie do wody przez błony o przepuszczalności granicznej poniżej 3 kDa w temperaturze w warunkach chłodniczych przezPL 219 144 B1 okres co najmniej 24 godzin z kilkukrotną zmianą wody, alternatywnie frakcje białek odsala się z użyciem modułów ultrafiltracyjnych o przepuszczalności granicznej 1 kDa i poddaje suszeniu.
- 2. Preparat według zastrz. 1, znamienny tym, że stężenie buforu fosforanowego wynosi 100 mM.
- 3. Preparat według zastrz. 1, znamienny tym, że pH buforu wynosi 7,2.
- 4. Preparat według zastrz. 1, znamienny tym, że dializę przeprowadza się przy temperaturze wody lub buforu fosforowanego od 273 do 277K.
- 5. Preparat według zastrz. 1, znamienny tym, że frakcje białek suszy się poprzez liofilizację.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL396027A PL219144B1 (pl) | 2011-08-19 | 2011-08-19 | Preparat o właściwościach immunoregulatorowych |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL396027A PL219144B1 (pl) | 2011-08-19 | 2011-08-19 | Preparat o właściwościach immunoregulatorowych |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL396027A1 PL396027A1 (pl) | 2012-01-16 |
| PL219144B1 true PL219144B1 (pl) | 2015-03-31 |
Family
ID=45510335
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL396027A PL219144B1 (pl) | 2011-08-19 | 2011-08-19 | Preparat o właściwościach immunoregulatorowych |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| PL (1) | PL219144B1 (pl) |
-
2011
- 2011-08-19 PL PL396027A patent/PL219144B1/pl unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| PL396027A1 (pl) | 2012-01-16 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Xie et al. | Identification of ovotransferrin as an acute phase protein in chickens | |
| Zambrowicz et al. | A simple and rapid method of isolation of active polypeptide complex, yolkin, from chicken egg yolk | |
| EP1201246A2 (en) | Use of thrombopoietin as a medicament for the therapy and prevention of thrombocytopenia | |
| AU5093200A (en) | Peptides | |
| US20100041606A1 (en) | Methods of Use of Eggshell Polypeptides | |
| US8168585B2 (en) | Purification of peptides from colostrum | |
| Sokołowska et al. | Colostrum from different mammalian species—A rich source of colostrinin | |
| Gharaee-Kermani et al. | Fibronectin is the major fibroblast chemoattractant in rabbit anti-glomerular basement membrane disease | |
| JP2016056116A (ja) | コラーゲン産生促進用組成物 | |
| Zabłocka et al. | Peptides accompanying chicken egg yolk IgY–alternative methods of isolation and immunoregulatory activity | |
| AU2019250651B2 (en) | Immunological extract and method of production | |
| RU2400106C1 (ru) | Способ получения бад "л-пфи" из вторичного молочного сырья и полученная этим способом бад "л-пфи" | |
| PL219144B1 (pl) | Preparat o właściwościach immunoregulatorowych | |
| WONG et al. | Influence of whey and purified whey proteins on neutrophil functions in sheep | |
| Inagaki et al. | Effects of heat treatment on conformation and cell growth activity of alpha-lactalbumin and beta-lactoglobulin from market milk | |
| MX2014003892A (es) | Secuencias de aminoacidos para el control de patogenos. | |
| JP3106191B1 (ja) | Ｆｇｆ−５の生理的機能制御ペプチド及び該ペプチドを含有する医薬組成物 | |
| Lujan et al. | Serum Cohn fraction IV-1 supports the growth of Giardia lamblia in vitro | |
| Narmuratova et al. | Isolation and purification of lactoferrin from Kazakhstan mare milk | |
| SE502670C2 (sv) | En ny 78-resters polypeptid (NK-lysin) och dess användning | |
| ES2771924T3 (es) | Proceso para la preparación de mezclas de alta pureza de factores proteínicos procedentes de calostro bovino | |
| Akindykova et al. | Isolation and characterization of camel milk proteins | |
| PL218708B1 (pl) | Sposób izolacji kompleksu peptydów i białek serwatkowych | |
| IE912396A1 (en) | Substance with interleukin-8 inhibiting activity and process¹for its preparation | |
| Fan et al. | Immunomodulating effects of the peptides derived from whey protein |