PL212609B1 - Zastosowanie kwasów i estrów 1-aminoalkanofosfonowych do wytwarzania leku przeznaczonego do zapobiegania i/lub leczenia choroby nowotworowej - Google Patents
Zastosowanie kwasów i estrów 1-aminoalkanofosfonowych do wytwarzania leku przeznaczonego do zapobiegania i/lub leczenia choroby nowotworowejInfo
- Publication number
- PL212609B1 PL212609B1 PL367652A PL36765204A PL212609B1 PL 212609 B1 PL212609 B1 PL 212609B1 PL 367652 A PL367652 A PL 367652A PL 36765204 A PL36765204 A PL 36765204A PL 212609 B1 PL212609 B1 PL 212609B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- cells
- apoptosis
- cell
- cancer
- cancer cells
- Prior art date
Links
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 title claims description 15
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 title claims description 14
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 title claims description 11
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 title description 8
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 title 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 19
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 claims description 11
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 claims description 10
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 8
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 7
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 7
- 230000001613 neoplastic effect Effects 0.000 claims description 7
- 239000013543 active substance Substances 0.000 claims description 4
- -1 cyclohexylethyl Chemical group 0.000 claims description 4
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 claims description 4
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical group CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims description 2
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Chemical group CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 claims description 2
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 2
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 claims description 2
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 claims description 2
- 125000001360 methionine group Chemical group N[C@@H](CCSC)C(=O)* 0.000 claims description 2
- BKIMMITUMNQMOS-UHFFFAOYSA-N nonane Chemical group CCCCCCCCC BKIMMITUMNQMOS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 claims description 2
- 125000000286 phenylethyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 claims description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims 1
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 43
- 238000000034 method Methods 0.000 description 12
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 11
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 10
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 8
- 230000006882 induction of apoptosis Effects 0.000 description 7
- 231100000263 cytotoxicity test Toxicity 0.000 description 6
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 6
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 5
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 5
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 5
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 5
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 5
- 230000004565 tumor cell growth Effects 0.000 description 5
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 4
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 4
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 4
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 4
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 3
- 235000010290 biphenyl Nutrition 0.000 description 3
- 239000004305 biphenyl Substances 0.000 description 3
- 125000006267 biphenyl group Chemical group 0.000 description 3
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 3
- ZUOUZKKEUPVFJK-UHFFFAOYSA-N phenylbenzene Natural products C1=CC=CC=C1C1=CC=CC=C1 ZUOUZKKEUPVFJK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 239000002356 single layer Substances 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 1-palmitoyl-2-arachidonoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCC IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 0.000 description 2
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- 229930182816 L-glutamine Natural products 0.000 description 2
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 2
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 2
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 2
- 229940041181 antineoplastic drug Drugs 0.000 description 2
- 230000000721 bacterilogical effect Effects 0.000 description 2
- 229940044683 chemotherapy drug Drugs 0.000 description 2
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 2
- 230000034994 death Effects 0.000 description 2
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 2
- 231100000405 induce cancer Toxicity 0.000 description 2
- 102000006495 integrins Human genes 0.000 description 2
- 108010044426 integrins Proteins 0.000 description 2
- 229940067606 lecithin Drugs 0.000 description 2
- 235000010445 lecithin Nutrition 0.000 description 2
- 239000000787 lecithin Substances 0.000 description 2
- 239000007758 minimum essential medium Substances 0.000 description 2
- 210000005170 neoplastic cell Anatomy 0.000 description 2
- 229910052697 platinum Inorganic materials 0.000 description 2
- BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N platinum Substances [Pt] BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 2
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 2
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 2
- UHDGCWIWMRVCDJ-UHFFFAOYSA-N 1-beta-D-Xylofuranosyl-NH-Cytosine Natural products O=C1N=C(N)C=CN1C1C(O)C(O)C(CO)O1 UHDGCWIWMRVCDJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000024893 Acute lymphoblastic leukemia Diseases 0.000 description 1
- 208000005623 Carcinogenesis Diseases 0.000 description 1
- 241001017738 Chelidonium <beetle> Species 0.000 description 1
- 206010010144 Completed suicide Diseases 0.000 description 1
- UHDGCWIWMRVCDJ-PSQAKQOGSA-N Cytidine Natural products O=C1N=C(N)C=CN1[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O1 UHDGCWIWMRVCDJ-PSQAKQOGSA-N 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 102000004856 Lectins Human genes 0.000 description 1
- 108090001090 Lectins Proteins 0.000 description 1
- 231100000002 MTT assay Toxicity 0.000 description 1
- 238000000134 MTT assay Methods 0.000 description 1
- 206010042971 T-cell lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 208000027585 T-cell non-Hodgkin lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 238000003782 apoptosis assay Methods 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000036952 cancer formation Effects 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 231100000504 carcinogenesis Toxicity 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 230000000973 chemotherapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 238000011970 concomitant therapy Methods 0.000 description 1
- UHDGCWIWMRVCDJ-ZAKLUEHWSA-N cytidine Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O1 UHDGCWIWMRVCDJ-ZAKLUEHWSA-N 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 description 1
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 1
- 244000052637 human pathogen Species 0.000 description 1
- 230000000899 immune system response Effects 0.000 description 1
- 210000003000 inclusion body Anatomy 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 239000003978 infusion fluid Substances 0.000 description 1
- 239000003999 initiator Substances 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000002523 lectin Substances 0.000 description 1
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 1
- 201000005296 lung carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000037353 metabolic pathway Effects 0.000 description 1
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 239000002077 nanosphere Substances 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 230000005522 programmed cell death Effects 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 208000016691 refractory malignant neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 1
- 230000009469 supplementation Effects 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 1
- 238000011287 therapeutic dose Methods 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 1
- 235000021122 unsaturated fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 150000004670 unsaturated fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Description
Opis wynalazku
Przedmiotem wynalazku jest zastosowanie kwasów i estrów 1-aminoalkanofosfonowych do wytwarzania leku przeznaczonego do zapobiegania i/lub leczenia choroby nowotworowej, w charakterze czynnika indukującego apoptozę komórek rakowych.
Choroby nowotworowe a szczególnie nowotworowe guzy lite są ciągle wiodącą przyczyną śmierci na świecie. Konwencjonalne metody leczenia chorób nowotworowych obejmują metody chirurgiczne, podawanie pacjentowi związków chemoterapeutycznych i ostatnio wprowadzone metody immunologiczne, które polegają na podawaniu przeciwciał lub ich fragmentów połączonych z molekułami leku np. radioizotopami. Wszystkie te metody dają jednak niepełne powodzenie w leczeniu.
Metody chirurgiczne są stosowane z powodzeniem, jeśli nowotwór jest wykryty we wczesnym stadium rozwoju, a na pewno przed etapem przerzutowania do innych organów organizmu. Chemoterapia ma również ograniczony zasięg stosowania, ponieważ leki chemoterapeutyczne są nieselektywne i są toksyczne dla większości zdrowych komórek organizmu. Co gorsze, wiele komórek nowotworowych staje się odporna na stosowane leki chemoterapeutyczne i terapia staje się nieskuteczna. Dla przykładu u pacjentów z nowotworem, leczonych cis-platyną często pojawiają się komórki nowotworowe odporne na cis-platynę.
Nowe, oparte na metodach immunologicznych terapie stwarzają szereg problemów, jak na przykład kłopoty z efektywnym dostarczeniem immunokompleksu do miejsca nowotworowego i poważne problemy z odpowiedzią układu odpornościowego i co za tym idzie neutralizacją kompleksu.
W organizmie ludzkim, każdej doby powstaje 1011 -1012 nowych komórek. Taka sama ilość musi umrzeć. W kodzie genetycznym każdej z takich komórek jest zaprogramowana „umiejętność” do popełnienia samobójstwa. Proces taki nazywany jest apoptozą, inaczej zaprogramowaną śmiercią komórki. Komórki nowotworowe na wskutek mutacji genetycznych (carcinogenesis) utraciły zdolność do apoptozy. Dlatego rosną bez ograniczeń prowadząc do śmierci organizmu. Z japońskiego opisu patentowego, zgłoszonego w trybie międzynarodowym nr PCT/JP98/04118, znane jest monoklonalne przeciwciało specyficznie rozpoznające ludzką proteinę związaną z integryną oraz antygeny, które wywołują apoptozę jądrzastych komórek krwi posiadających proteinę związaną z integryną. Większość leków przeciwnowotworowych w różny sposób i z różną skutecznością indukuje apoptozę komórek rakowych i tym samym eliminuje je z organizmu. Mechanizmy tych procesów w większości przypadków są słabo poznane albo wręcz nieznane. Z polskiego zgłoszenia patentowego PL344267 znany jest sposób indukcji apoptozy w komórkach nowotworowych, w którym inicjatorem indukcji apoptozy jest lektyna, otrzymywana z Chelidonium maius, którą dodaje się do komórek nowotworowych linii CHO lub R2C w iloś ci od 5 do 30 μ g/ml hodowli komórek nowotworowych zawierają cych 1 milion tych komórek, zawieszonych korzystnie w płynie infuzyjnym. W zgłoszeniu PCT/US99/00637, do leczniczej indukcji apoptozy aktywowanych komórek w miejscu stanu zapalnego, stosuje się chimerowe kwasy nukleinowe. Każdy związek zdolny do indukowania apoptozy jest potencjalnym i cennym lekiem przeciwnowotworowym.
Kwasy 1-aminoalkanofosfonowe i ich pochodne są związkami znanymi w literaturze naukowej i patentowej. Znane, biologiczne własności kwasów 1-aminoalkanofosfonowych i ich pochodnych dotyczą głównie ich aktywności antybakteryjnej (Hassall F.C. i inni w Actual Chim. Ther., 1985, 12, 193-200, Allen J.G. i inni w Nature, 1978, 272, 56-58). Brak jest w literaturze naukowej i patentowej jakichkolwiek wzmianek o ich zdolnościach do indukcji apoptozy komórek rakowych.
Zastosowanie według wynalazku, polega na tym, że do wytwarzania leku przeznaczonego do leczenia chorób nowotworowych lub zapobiegającego chorobom nowotworowym, w charakterze czynnika aktywnego, wywołującego apoptozę komórek rakowych, stosuje się kwasy i estry 1-aminoalkanofosfonowe o wzorze ogólnym 1, w którym W oznacza wodór albo leucynę, n wynosi 1 lub 2 lub 3, R oznacza podstawnik ł a ń cucha bocznego metioniny, leucyny lub podstawnik fenyloetylowy, cykloheksyloetylowy lub n-nonanowy, a X1 i X2 jest taki sam lub różny i oznacza H lub fenylowy pierścień.
Kwasy i estry 1-aminoalkanofosfonowe o wzorze ogólnym 1, będące przedmiotem wynalazku, jako czynniki aktywne w lekach zawierających farmaceutycznie dopuszczalne podłoże, mogą być używane w leczeniu białaczki oraz raka płuc. Zdolność do indukcji apoptozy czyni związki będące przedmiotem wynalazku szczególnie przydatnymi w lekach przeznaczonych do leczenia guzów litych i zaawansowanych form raka, które nie mogą być leczone na drodze konwencjonalnych metod.
W leczeniu chorób nowotworowych, czynnik aktywny w postaci kwasów i estrów 1-aminoalkilofosfonowych według wynalazku, może być podawany pacjentowi poprzez każdą farmaceutycznie
PL 212 609 B1 akceptowalną drogę np. doustnie lub dożylnie, podskórnie lub topikalnie. Dawki są uzależnione od stanu pacjenta, rodzaju związku a także od towarzyszącej terapii innymi lekami. Efektywną dawką terapeutyczną jest dawka wystarczająca do indukcji apoptozy komórek rakowych, która oscyluje w granicach od 0.01 mg/kg do 200 mg/kg masy ciał a pacjenta, a preferowana dawka wynosi od 1 mg do 100 mg dla pacjenta w trzech dawkach dziennie. Kompozycje zawierające kwasy i estry 1-aminoalkilofosfonowe o wzorze 1 w farmaceutycznie dopuszczalnym podłożu, mają postać tabletek, kapsuł, syropu, suspensji, proszku, granulek, emulsji, mikrosfer, nanosfer, lilidowych pęcherzyków, polimerycznych pęcherzyków i roztworu, zwłaszcza do zastrzyków.
Zdolność kwasów i estrów 1-aminoalkilofosfonowych o wzorze 1 do wywoływania apoptozy komórek rakowych przetestowano na komórkach nowotworowych ludzkich z linii limfoblastycznej (Limphoma) chłoniaka T komórkowego - Jurkat rosnących w toni medium i epitelialnej raka płuc (Lung carcinoma) - A549 przylegających w hodowli do podłoża, zdeponowanych w pracowni hodowli komórkowych Zakładu Biochemii Lekarskiej Akademii Medycznej we Wrocławiu.
Poszczególne linie w literaturze są scharakteryzowane następująco:
Linia komórkowa typu JURKAT:
Typ komórki - ludzka T komórka leukemiczna DSMZ numer ACC 282.
Pochodzenie: krew 14 letniego chłopca z ostrą leukemią limfoblastyczną (ALL) z pierwszym nawrotem w roku 1976; często ten typ komórek jest nazywany JM (JURKAT i JM pochodzą od tego samego pacjenta i są klonami siostrzanymi), czasami JM może być subklonem o rozbieżnych cechach. Literatura. Schneider et al., Int. J. Cancer 19: 621-626 (1977) Deponent komórek: Dr. Jun Minowada, Fujisaki Cell Center, Okayama, Japan.
Dane o typie komórek Morfologicznie okrągłe komórki rosnące pojedynczo lub w gromadach w Medium 90% RPMI 1640 + 10% FBS + 2 mM L-glutamine. Subkulturowe optymalne tempo podzia ł u wynosi 1:2 do 1:3 w ciągu każdych 2-3 dni; zawartość po rozmrożeniu około 1 x 106 komórek/ml; utrzymuje się na poziomie 0.5-1.5 x 106 komórek/ml. Inkubacja przy 37°C w atmosferze 5% CO2. Czas duplikacji (podwojenia ilości) 25-35 godzin. Maksymalna gęstość przy zbiorze 1.5 x 106 komórek/ml. Przechowywanie w zamrożeniu w 70% medium, 20% FBS, 10% DMSO przy ilości 5 x 106 komórek/ampułkę.
Ludzka linia komórkowa typu A549, Kaukaska, rak płuc, ECACC 86012804
Pochodzenie komórek - 58 letni mężczyzna z Kaukazu. Komórki mogą syntezować lecytynę używając cytydynową ditosfocholinową ścieżkę metaboliczną. Czasami komórki mogą zawierać ciała inkluzyjne, jednakże nie posiadające żadnych ludzkich patogenów.
Morfologia: Epiteliczny, ludzki, kaukaski rak płuc
Deponent: ATCC, USA
Szczególne właściwości i zawartość: Lecytyna, Duże stężenia nienasyconych kwasów tłuszczowych (ECACC, Salisbury, Wiltshire)
Subkulturowe optymalne tempo podziału wynosi 1:3 do 1:6 przy posiewie w ilości 2-4x10,000 komórek/cm2 używając 0,25% trypsyny lub trypsyny/EDTA; 5% CO2;
37°C. Kariotyp: Hypotryploidalny
Medium hodowlane: Dla linii Jurkat używano medium RPMI-1640 (R8758) firmy Sigma z dodatkiem 10% FBS (Fetal Bovine Serum) firmy Cambrax., dla linii A549 stosowano medium MEM (Minimum Essential Medium Eagle M2279) firmy Sigma z suplementacją 0,292 g/l L-glutaminą i 10% FBS firmy Cambrax.
Warunki hodowli: Hodowle komórkowe prowadzono w temp. 37°C w atmosferze 5% CO2. W celu odklejenia komórek linii A549 od podłoża stosowano trypsynizację używając 0,25% Trypsin-EDTA solution (T4049) firmy Sigma.
Poniższe przykłady mają na celu lepsze objaśnienie wynalazku, ale w żadnej mierze nie ograniczają jego zakresu.
P r z y k ł a d I
Aktywność czynnika aktywnego w postaci chlorowodorku estru difenylowego kwasu 1-amino-3-fenylo-propionofosfonowego przetestowano w hodowlach komórek Jurkat in vitro.
Przygotowano hodowle komórkowe linii Jurkat tej samej liczebności wyjściowej zawieszonych w toni, w objętości 0,9 ml, w dołkach (obraz w mikroskopie - pojedyncze, średnio liczne w polu widzenia). Hodowle pozostawiono do zrównoważenia w medium. Po 24 godzinach obraz w polu widzenia mikroskopu był taki sam we wszystkich dołkach hodowlanych - tylko komórki żywe, równomiernie rozmieszczone, niezbyt liczne (liczebność nie ogranicza proliferacji).
PL 212 609 B1
Preparaty, w postaci roztworów o stężeniach wyjściowych - 10 mM, rozcieńczono używając medium hodowlanego dla linii Jurkat do stężenia 0,5 mM i przefiltrowano przez filtry bakteriologiczne.
Dodano odpowiednio do hodowli uzyskując stężenia efektywne 50 μΜ i 250 μΜ. Efekty zarejestrowano po 48 godzinach i stwierdzono, że indukcja apoptozy, przy stężeniu 50 μM, wynosi 32,7% hamowania wzrostu komórek nowotworowych, a przy stężeniu 250 μΜ - 82,7% hamowania.
P r z y k ł a d II
Aktywność czynnika aktywnego w postaci kwasu 1-amino-3-fenylo-propionofosfonowego przetestowano sposobem opisanym w przykładzie I w hodowlach komórek Jurkat in vitro. Efekty zarejestrowano po 48 godzinach i stwierdzono, że indukcja apoptozy, przy stężeniu 50 μΜ, wynosi 83,2% hamowania wzrostu komórek nowotworowych, a przy stężeniu 250 μΜ - 79,2% hamowania.
P r z y k ł a d III
Aktywność czynnika aktywnego w postaci kwasu 1-amino-3-cykloheksylo-propionofosfonowego przetestowano sposobem opisanym w przykładzie I w hodowlach komórek Jurkat in vitro. Efekty zarejestrowano po 48 godzinach i stwierdzono, że indukcja apoptozy, przy stężeniu 50 μΜ, wynosi 56,6% hamowania wzrostu komórek nowotworowych, a przy stężeniu 250 μΜ - 88,7% hamowania.
P r z y k ł a d IV
Aktywność czynnika aktywnego w postaci chlorowodorku estru difenylowego kwasu 1-(aminoleucylo)amino-3-metylo-butylofosfonowego przetestowano sposobem opisanym w przykładzie I w hodowlach komórek Jurkat in vitro. Efekty zarejestrowano po 48 godzinach i stwierdzono, że indukcja apoptozy, przy stężeniu 50 μΜ, wynosi 58,2% hamowania wzrostu komórek nowotworowych, a przy stężeniu 250 μΜ - 75,2% hamowania.
P r z y k ł a d V
Aktywność czynnika aktywnego w postaci chlorowodorku estru difenylowego kwasu 1-amino-dekanofosfonowego przetestowano sposobem opisanym w przykładzie I w hodowlach komórek Jurkat in vitro. Efekty zarejestrowano po 48 godzinach i stwierdzono, że indukcja apoptozy, przy stężeniu 50 μΜ, wynosi 52,4% hamowania wzrostu komórek nowotworowych, a przy stężeniu 250 μΜ - 74,5% hamowania.
P r z y k ł a d VI
Test cytotoksyczności wykonano w obecności kwasu 1-amino-3-fenylo-propionofosfonowego, przy stężeniach 31,25 μΜ, 62,5 μΜ, 125 μΜ, 186 μΜ, 250 μΜ. Przygotowano gęste hodowle komórek linii Jurkat. Roztwory wyjściowe o stężeniu wyjściowym - 10 mM rozcieńczono używając mediów hodowlanych odpowiednio dla linii Jurkat do stężenia 0,5 mM. Przefiltrowano przez filtry bakteriologiczne i dodano do hodowli komórkowych uzyskując stężenia efektywne w hodowlach odpowiednio 31,25 μΜ, 62,5 pM, 125 pM, 186 μM i 250 gM.
Hodowle kontynuowano przez 72 godziny. Komórki zebrano ilościowo i testem z MTT oznaczono przeżywalność. Do obliczeń, za 100% przyjęto absorpcję prób kontrolnych gdzie, taka sama ilość komórek jak w próbach badanych, nie była poddawana działaniu wybranych czynników. Dane eksperymentalne przedstawiono na wykresie - Fig. 1, który obrazuje wpływ badanego związku przy określonych stężeniach na komórki Jurkat i jest charakterystyką przeżywalności komórek mierzonej w procentach w zależności od stężenia związku. Wartości na osi rzędnych ustalano poprzez zmianę absorbancji przy długości fali λ=595nm.
P r z y k ł a d VII
Test cytotoksyczności wykonano w obecności kwasu 1-amino-3-cykloheksylo-propionofosfonowego, metodą opisaną w przykładzie VI przy tych samych stężeniach dla komórek linii Jurkat. Dane eksperymentalne przedstawiono na Fig. 2.
P r z y k ł a d VIII
Test cytotoksyczności wykonano w obecności chlorowodorku estru difenylowego kwasu 1-amino-3-metylotio-propionofosfonowego, metodą opisaną w przykładzie VI przy tych samych stężeniach dla komórek linii Jurkat. Dane eksperymentalne przedstawiono na Fig. 3.
P r z y k ł a d IX
Test cytotoksyczności wykonano w obecności kwasu 1-amino-3-fenylo-propionofosfonowego, metodą opisaną w przykładzie VI przy tych samych stężeniach dla komórek monowarstwowych linii A549. Dane eksperymentalne przedstawiono na Fig. 4
P r z y k ł a d X
Test cytotoksyczności wykonano w obecności kwasu 1-amino-3-cykloheksylo-propionofosfonowego, metodą opisaną w przykładzie VI przy tych samych stężeniach dla komórek monowarstwowych linii A549. Dane eksperymentalne przedstawiono na Fig. 5.
PL 212 609 B1
P r z y k ł a d XI
Test cytotoksyczności wykonano w obecności chlorowodorku estru difenylowego kwasu 1-amino-3-metylotio-propionofosfonowego, metodą opisaną w przykładzie VI przy tych samych stężeniach dla komórek monowarstwowych linii A549. Dane eksperymentalne przedstawiono na Fig. 6.
Claims (2)
1. Zastosowanie kwasów i estrów 1-aminoalkanofosfonowych o wzorze ogólnym 1, w którym W oznacza wodór albo leucynę, n wynosi 1 lub 2 lub 3, R oznacza podstawnik łańcucha bocznego metioniny, leucyny lub podstawnik fenyloetylowy, cykloheksyloetylowy lub n-nonanowy, a X1 i X2 jest taki sam lub różny i oznacza H lub fenylowy pierścień do wytwarzania leku przeznaczonego do leczenia chorób nowotworowych lub zapobiegającego chorobom nowotworowym, w charakterze czynnika aktywnego, wywołującego apoptozę komórek rakowych.
2. Zastosowanie według zastrz. 1, znamienne tym, że ilość kwasów i estrów 1-aminoalkanofosfonowych o wzorze ogólnym 1, w leku, wystarczająca do apoptozy komórek rakowych, mieści się w przedziale od 0.01 mg do 200 mg na kilogram masy ciała pacjenta.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL367652A PL212609B1 (pl) | 2004-05-04 | 2004-05-04 | Zastosowanie kwasów i estrów 1-aminoalkanofosfonowych do wytwarzania leku przeznaczonego do zapobiegania i/lub leczenia choroby nowotworowej |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL367652A PL212609B1 (pl) | 2004-05-04 | 2004-05-04 | Zastosowanie kwasów i estrów 1-aminoalkanofosfonowych do wytwarzania leku przeznaczonego do zapobiegania i/lub leczenia choroby nowotworowej |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL367652A1 PL367652A1 (pl) | 2005-11-14 |
| PL212609B1 true PL212609B1 (pl) | 2012-10-31 |
Family
ID=37037926
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL367652A PL212609B1 (pl) | 2004-05-04 | 2004-05-04 | Zastosowanie kwasów i estrów 1-aminoalkanofosfonowych do wytwarzania leku przeznaczonego do zapobiegania i/lub leczenia choroby nowotworowej |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| PL (1) | PL212609B1 (pl) |
-
2004
- 2004-05-04 PL PL367652A patent/PL212609B1/pl not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| PL367652A1 (pl) | 2005-11-14 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP0196415B1 (en) | Trichostatins a and c as antitumour drugs | |
| EP3311841B1 (en) | Anticancer agent | |
| EP2234642B1 (en) | Method of increasing immunological effect | |
| RO115498B1 (ro) | Metoda de tratament a neoplasmului | |
| AU2009308511A1 (en) | Transition metal complexes of a bis[thiohydrazide amide] compound | |
| US10836735B2 (en) | Compositions and methods for treating cancers | |
| EP4005591A1 (en) | Anti-neoplastic combined pharmaceutical composition and application thereof | |
| JP2015229675A (ja) | 膵臓癌を治療するための医薬製剤 | |
| WO2025044424A1 (zh) | 一种基于免疫检查点阻断的抗肿瘤药物组合物及其应用 | |
| WO2025127968A2 (ru) | Ингибитор ras-гтфазы и его применение для лечения онкологических заболеваний | |
| Bleday et al. | Inhibition of rat colon tumor isograft growth with dequalinium chloride | |
| US20190160099A1 (en) | Pharmaceutical composition and use thereof | |
| CN112791106B (zh) | 药物组合物及其治疗疾病的用途 | |
| JP2002302447A (ja) | 局所投与用癌治療剤 | |
| PL212609B1 (pl) | Zastosowanie kwasów i estrów 1-aminoalkanofosfonowych do wytwarzania leku przeznaczonego do zapobiegania i/lub leczenia choroby nowotworowej | |
| JPS63316722A (ja) | インターフェロンの腫瘍成長抑制作用増強剤 | |
| JPH10511677A (ja) | イノシトール三燐酸の薬剤調製への使用 | |
| WO2020151727A1 (zh) | 药物复合物及其制备方法和用途 | |
| KR101471498B1 (ko) | 암의 치료를 위한 화합물 및 방법 | |
| CN106854223A (zh) | 氮芥槲皮素衍生物及其制备方法和用途 | |
| RU2612090C1 (ru) | Способ лечения местнораспространённого нерезектабельного рака пищевода | |
| RU2134589C1 (ru) | Способ лечения первичного рака печени и набор для лечения первичного рака печени | |
| WO2000043403A1 (en) | 2-methyl-3-butenyl-1-pyrophosphoric acid salts and agents for treating lymphocytes | |
| PL213132B1 (pl) | Zastosowanie związków 2-amino-1-hydroksyalkanofosfonowych | |
| CN115054610B (zh) | 一种甾体化合物Taccoside A在制备肿瘤免疫治疗药物中的应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| LAPS | Decisions on the lapse of the protection rights |
Effective date: 20070504 |