PL212521B1 - Sposób wytwarzania 7-hydroksyflawonu - Google Patents

Description

Przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania 7-hydroksyflawonu, o wzorze 2 przedstawionym na rysunku.

Związek ten może znaleźć zastosowanie jako składnik preparatów leczniczych hamujących procesy oksydacyjne zachodzące w organizmach żywych.

Poważne zagrożenia zdrowia spowodowane wysokim poziomem reaktywnych form tlenu (RFT) spowodowało szybki rozwój badań nad występowaniem i aktywnością naturalnych antyoksydantów, zdolnych do wymiatania rodników inicjujących procesy oksydacyjne. Zalicza się do nich wiele substancji naturalnych, pochodzenia roślinnego, których głównym reprezentantem w żywności są flawonoidy.

Dotychczas nie jest znane otrzymanie 7-hydroksyflawonu przy użyciu metod chemicznych.

Nie jest również dotąd znany sposób otrzymywania 7-hydroksyflawonu na drodze mikrobiologicznej dehydrogenacji 7-hydroksyflawanonu przy 2 i 3 atomie węgla.

Znane są sposoby otrzymywanie 7-hydroksyflawonu na drodze ekstrakcji z roślin zielonych.

Istota wynalazku polega na tym, że 7-hydroksyflawanon, o wzorze 1, poddaje się reakcji dehydrogenacji przy 2 i 3 atomie węgla za pomocą systemu enzymatycznego kultury szczepu grzyba z gatunku Aspergillus niger.

Korzystne jest, gdy reakcję prowadzi się wodną kulturą szczepu, przy ciągłym mieszaniu reagentów, w temperaturze 288-308 K.

Postępując zgodnie z wynalazkiem, w wyniku działania układu enzymatycznego zawartego w komórkach grzyba Aspergillus niger, nastę puje reakcja dehydrogenacji przy 2 i 3 atomie wę gla. Uzyskany w ten sposób produkt wydziela się z wodnej kultury mikroorganizmu, znanym sposobem przez ekstrakcję octanem etylu.

Będący przedmiotem wynalazku 7-hydroksyflawon może działać jako silny kompetencyjny inhibitor oksydazy ksantanowej, który w centrum aktywnym enzymu zastępuje hydroksyksantynę (N. Cotelle, J.L. Bernier, J.P. Catteau, J. Pommery, J.C. Wallet, E.M. Gaydou; Free Radic. Biol. Med., 1996, 20, ss. 35).

Zasadniczą zaletą wynalazku jest otrzymanie 7-hydroksyflawonu, o wzorze 2, jako jedynego produktu reakcji z wydajnością 98%, w temperaturze pokojowej i pH bliskim obojętnego.

Wynalazek jest bliżej objaśniony na przykładzie wykonania.

P r z y k ł a d

Do kolby Erlenmajera o pojemności 250 cm³, w której znajduje się 100 cm³ sterylnej pożywki zawierającej 3 g glukozy i 1 g aminobaku zaszczepia się Aspergillus niger. Po 24 godzinach wzrostu dodaje się 10 mg 7-hydroksyflawanonu, o wzorze 1, rozpuszczonego w 0,5 cm³ acetonu. Transformację prowadzi się przy ciągłym wstrząsaniu przez 9 dni. Następnie uzyskany roztwór transformacyjny ekstrahuje się trzykrotnie octanem etylu, osusza bezwodnym siarczanem magnezu i odparowuje rozpuszczalnik. Otrzymuje się 18 mg surowego produktu, który oczyszcza się chromatograficznie używając jako eluentu mieszaniny chlorek metylenu-octan etylu, w stosunku 1:1.

Na tej drodze otrzymuje się 9,8 mg 7-hydroksyflawonu (wydajność 98%), o wzorze 2.

Uzyskany produkt charakteryzuje się następującymi danymi spektralnymi:

¹H NMR (DMSOd6) δ (ppm) 10,8 (7-OH);

8,02 (d, 2H, J = 7,86 Hz, H-2', H-6'); 7,86 (d, 1H, J = 8,7 Hz, H-5); 7,53 (m, 3H, H-3', H-4', H-5');

6,97 (d, 1H, J = 2,19 Hz, H-8); 6,91 (dd, 1H, J = 8,69, 2,26 Hz, H-6); 6,86 (s, 1H, H-3).

Claims (3)

1. Sposób wytwarzania 7-hydroksyflawonu, znamienny tym, że 7-hydroksyflawanon poddaje się reakcji dehydrogenacji przy 2 i 3 atomie węgla za pomocą systemu enzymatycznego kultury szczepu grzyba z gatunku Aspergillus niger.

2. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że proces dehydrogenacji prowadzi się wodną kulturą szczepu, przy ciągłym mieszaniu.

3. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że proces dehydrogenacji prowadzi się w temperaturze 288 - 308 K.