PL211530B1 - Szczep bakterii Lactobacillus fermentum N - Google Patents

Szczep bakterii Lactobacillus fermentum N

Info

Publication number
PL211530B1
PL211530B1 PL388220A PL38822009A PL211530B1 PL 211530 B1 PL211530 B1 PL 211530B1 PL 388220 A PL388220 A PL 388220A PL 38822009 A PL38822009 A PL 38822009A PL 211530 B1 PL211530 B1 PL 211530B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
lactobacillus fermentum
strain
new
bacteria
aflatoxin
Prior art date
Application number
PL388220A
Other languages
English (en)
Other versions
PL388220A1 (pl
Inventor
Krystyna Zielińska
Alina Suterska
Antoni Miecznikowski
Krystyna Stecka
Marta Kupryś
Original Assignee
Inst Biotechnologii Przemysłu Rolno Spożywczego
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Inst Biotechnologii Przemysłu Rolno Spożywczego filed Critical Inst Biotechnologii Przemysłu Rolno Spożywczego
Priority to PL388220A priority Critical patent/PL211530B1/pl
Publication of PL388220A1 publication Critical patent/PL388220A1/pl
Publication of PL211530B1 publication Critical patent/PL211530B1/pl

Links

Landscapes

  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Fodder In General (AREA)

Description

Rzeczypospolitej Polskiej (54) (12) OPIS PATENTOWY (19) PL (11) 211530 (13) B1 (21) Numer zgłoszenia: 388220 (22) Data zgłoszenia: 08.06.2009
Szczep bakterii Lactobacillus fermentum N (43) Zgłoszenie ogłoszono:
20.12.2010 BUP 26/10 (45) O udzieleniu patentu ogłoszono:
31.05.2012 WUP 05/12 (51) Int.Cl.
C12N 1/20 (2006.01) C12R 1/225 (2006.01) (73) Uprawniony z patentu:
INSTYTUT BIOTECHNOLOGII PRZEMYSŁU ROLNO-SPOŻYWCZEGO, Warszawa, PL (72) Twórca(y) wynalazku:
KRYSTYNA ZIELIŃSKA, Warszawa, PL ALINA SUTERSKA, Warszawa, PL ANTONI MIECZNIKOWSKI, Warszawa, PL KRYSTYNA STECKA, Warszawa, PL MARTA KUPRYŚ, Biała Podlaska, PL (74) Pełnomocnik:
rzecz. pat. Karyna Kuciak-Próchniak
PL 211 530 B1
Opis wynalazku
Przedmiotem wynalazku jest nowy szczep bakterii Lactobacillus fermentum N.
Poszukiwanie przyjaznych dla zdrowia zwierząt i ludzi szczepów bakterii fermentacji mlekowej, zdolnych do rozwoju i jednocześnie usuwających ze środowiska hodowlanego obecnych w nim mikotoksyn, jest przedmiotem rozwijających się intensywnie badań na świecie. Obecnie istnieje zapotrzebowanie na wzbogacanie kultur starterowych bakterii fermentacji mlekowej w nowe heterofermentatywne, nie modyfikowane genetycznie szczepy pochodzące ze środowiska naturalnego, danego regionu geograficznego świata. Udział tych szczepów w procesach kiszenia przyczynia się do wzrostu jakości, obniżania skażenia toksynami, wzrostu stabilności tlenowej i walorów smakowo-zapachowych kiszonek.
Celem wynalazku było wyizolowanie ze środowiska naturalnego szczepu z rodzaju Lactobacillus, który charakteryzuje się następującymi cechami jak hamowanie rozwoju pleśni toksynotwórczych i syntezy aflatoksyn oraz obni ż ania ich poziomu w ś rodowisku do wartości bezpiecznej dla zdrowia i ludzi.
Nowy szczep będący przedmiotem wynalazku został określony jako Lactobacillus fermentum N i zdeponowany w Mię dzynarodowej Kolekcji Kultur Drobnoustrojów Przemysł owych Instytutu Biotechnologii Przemysłu Rolno-Spożywczego w Warszawie pod numerem KKP 2020 p.
Szczep według wynalazku izolowano z niestrawionych resztek pokarmowych przez trzodę chlewną, którą żywiono wyłącznie surowymi ziemniakami. W celu wyeliminowania szczepów bakterii wrażliwych na obecność mikotoksyn, bakterie wielokrotnie selekcjonowano, wybierano do kolejnych hodowli pojedyncze kolonie rosnące na podłożach MRS zawierających aflatoksynę B1 o wzrastającym stężeniu w środowisku: 13,5, 30,0 i 50,0 ppb. Wyizolowano nowy szczep bakterii o zdolności do wzrostu i syntezy kwasu mlekowego w obecności aflatoksyny B1, oraz efektywnego usuwania jej ze środowiska hodowlanego, który charakteryzował się następującymi cechami:
- morfologiczne - kolonie bakterii mają kształ t owalny o wielkoś ci 0,4-0,7 mm. Komórki bakterii mają postać krótkich pałeczek występujących pojedynczo, parami lub w łańcuszkach o wielkości
0,5-0,9 μm, nie wytwarzają przetrwalników, są Gram dodatnie.
- fizjologiczne i biochemiczne - optymalna temperatura wzrostu szczepu wynosi 37°C. Nowy szczep podobnie jak wszystkie z tego gatunku jest heterofermentatywny, mikro-aerofilny, nie tworzy katalazy, nie redukuje azotanów do azotynów, jest zdolny do fermentacji następujących cukrów: galaktoza, glukoza, maltoza, melibioza, rafinoza, ryboza, sacharoza, fruktoza, nie fermentuje inozytolu, D-arabinozy, L-ksylozy, glikogenu, ksylitolu i adonitolu.
Na podstawie wyników analizy genetycznej, sekwencji zasad odcinka 16S rDNA i porównania z sekwencjami bakteryjnych odcinków 16S rDNA, zdeponowanych w bazie GenBank potwierdzono w 98%, określoną cechami biochemicznymi, afiliację taksonomiczną szczepu do gatunku Lactobacillus fermentum.
Wyniki analizy odcinka 16S rDNA
CTACCCCACCGACTTTGGGTGTTACAAACTCTCATGGTGTGACGGGCGGT
GTGTACAAGGCCCGGGAACGTATTCACCGCGGCATGCTGATCCGCGATTA
CTAGCGATTCCGACTTCGTGCAGGCGAGTTGCAGCCTGCAGTCCGAACTG
AGAACGGTTTTAAGAGATTTGCTTACTCTCGCGAGTTCGCGACTCGTTGTA
CCGTCCATTGTAGCACGTGTGTAGCCCAGGTCATAAGGGGCATGATGATT
TGACGTCGTCCCCACCTTCCTCCGGTTTGTCACCGGCAGTCTCACCAGAG
TGCCCAACTTAATGCTGGCAACTGATAACAAGGGTTGCGCTCGTTGCGGG
ACTTAACCCAACATCTCACGACACGAGCTGACGACGACCATGCACCACCT
GTCATTGCGTTCCCGAAGGAAACGCCCTATCTCTAAGATTGGCGCAAGAT
GTCAAGACCTGGTAAGGTTCTTCGCGTAGCTTCGAATTAAACCACATGCTC
CACCGCTTGTGCGGGCCCCCGTCAATTCCTTTGAGTTTCAGCCTTGCGGT
CGTACTCCCCAGGCGGAGTGCTTAATGCGTTAGCTGCGGCACTGAAGGG
CGGAAACCCTCCAACACCTTAGCACTCATCGTTTACGGCATGGACTACCA
GGGTATCTAATCCTGTTTCGCTACCCATACTTTCGAGTCTCAGCGTCAGTT
GCAGACCAGGTAGCCGCCTTCGCCACTGGTGTTCTTCCATATATCTACGC
ATTTCCACCGCTAC >16S rDNA Lactobacillus fermentum (98% GenBank)
PL 211 530 B1
Nowy szczep Lactobacillus fermentum N KKP 2020 p charakteryzuje się szczególną zdolnością do usuwania ze środowiska hodowlanego aflatoksyn, w tym rakotwórczej aflatoksyny B1, nawet przy jej wysokim stężeniu 50 ppb (rys. 1) oraz odznacza się zdolnością do hamowania rozwoju zarodników Aspergillus flavus, pleśni wytwarzającej aflatoksyny (tabela 1). Szczep według wynalazku zastosowany jako kultura starterowa zapewnia wytwarzanie bezpiecznych dla zdrowia zwierząt i ludzi kiszonek paszowych i warzywnych.
W czasie hodowli bakterii w warunkach modelowych: podłoże MRS, temperatura 30°C, przez 72 h, obniżenie zawartości aflatoksyny B1 wynosiło około 50%.
T a b e l a 1
Wpływ nowego szczepu Lactobacillus fermentum N na hamowanie rozwoju zarodników Aspergillus flavus
Liczba bakterii fermentacji mlekowej, j.t.k./ml
Szczep bakterii 3 x 101 3 x 102 3 x 103 3 x 104 3 x 105 3 x 106 3 x 107
Stopień hamowania rozwoju zarodników Aspergillus flavus,°/o
L. fermentum N KKP 2020 p 20 30 56 85 95 100 100
Na podłożach MRS na płytkach o średnicy 10 cm w wyniku łącznej 72 h hodowli bakterii i pleśni, wprowadzona liczba bakterii nowego szczepu L. fermentum N wynosząca 3 x 104 j.t.k./ml hamowała rozwój zarodników pleśni 2 x 102 j.t.k./ml) w 85%, a liczba bakterii wynosząca 3 x 107 j.t.k./ml hamowała rozwój zarodników pleśni w 100%. Oznaczenie liczby jednostek tworzących kolonie (j.t.k.) bakterii i pleśni wykonano zgodnie z normą PN-R 64791: 1994.
Hodowle biomasy bakterii Lactobacillus fermentum N prowadzono w fermentorach o pojemności 150 I, w temperaturze 35°C, w pH 5,8 regulowanym wodą amoniakalną. Zawartość składników
PL 211 530 B1 podłoża hodowlanego w g/l wody wynosiła: glukoza - 20, ekstrakt drożdżowy - 10, namok kukurydziany - 5, fosforan dwuamonowy - 0,2, siarczan amonowy - 0,35, siarczan manganowy - 0,01. Czas hodowli bakterii wynosił do 24 h, następnie po odwirowaniu, przy szybkości obrotów wirówki 16000/min otrzymywano biomasę bakterii o zawartości suchej masy około 30%, którą po wymieszaniu z nośnikami suszono w suszarni fluidalnej, w temperaturze do 40°C, wysuszone bakterie zawierały 94% suchej masy, a liczba bakterii wynosiła 2 x 109 j.t.k./g. Preparat nowego szczepu zastosowano w ilości 5 g/t, do kiszenia runi łąkowej skażonej pleśniami i aflatoksyną B1. Po upływie 6 tygodni kiszenia, w warunkach produkcyjnych, określono działanie nowego szczepu na hamowanie rozwoju pleśni i obniżenie skaż enia aflatoksynami. Wyniki przedstawiono w tabeli 2.
T a b e l a 2
Wpływ nowego szczepu Lactobacillus fermentum N na hamowanie rozwoju pleśni i obniżenie zawartości aflatoksyn w czasie kiszenia runi łąkowej
Nr doświadczenia produkcyjnego Sucha masa,% Liczba pleśni j.t.k./g Zawartość mikotoksyn w suchej masie, PPb (μg/kg)
aflatoksyny B1 Σ aflatoksyn B1, B2, G1, G2
Ruń łąkowa
1 48,8 2 x 104 12,2 25,2
2 45,0 2 x 105 9,6 18,2
3 49,8 1 x 105 9,0 17,8
Kiszonka z runi łąkowej z dodatkiem Lactobacillus fermentum N KKP 2020 p
1 48,2 8 x 101 2,9 7,7
2 44,5 4 x 102 2,7 7,2
3 49,0 3 x 102 2,1 8,3
W warunkach sporzą dzania kiszonek w gospodarstwach rolnych w ofoliowanych 500 kg balotach, pod wpływem działania szczepu Lactobacillus fermentum N KKP 2020 p średnio zawartość pleśni obniżyła się około tysiąc -krotnie, zawartość aflatoksyny B1 obniżyła się średnio o 75%, a suma aflatoksyn obniżyła się średnio o 62%, w stosunku do ich zawartości w runi łąkowej, a zatem uzyskano kiszonki wysokiej jakości i czystości mikrobiologicznej, bezpieczne dla zdrowia zwierząt.

Claims (1)

  1. Zastrzeżenie patentowe
    Szczep bakterii Lactobacillus fermentum N KKP 2020 p zdeponowany w Międzynarodowej Kolekcji Kultur Drobnoustrojów Przemysłowych Instytutu Biotechnologii Przemysłu Rolno-Spożywczego w Warszawie.
    Departament Wydawnictw UP RP
PL388220A 2009-06-08 2009-06-08 Szczep bakterii Lactobacillus fermentum N PL211530B1 (pl)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PL388220A PL211530B1 (pl) 2009-06-08 2009-06-08 Szczep bakterii Lactobacillus fermentum N

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PL388220A PL211530B1 (pl) 2009-06-08 2009-06-08 Szczep bakterii Lactobacillus fermentum N

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL388220A1 PL388220A1 (pl) 2010-12-20
PL211530B1 true PL211530B1 (pl) 2012-05-31

Family

ID=43503407

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL388220A PL211530B1 (pl) 2009-06-08 2009-06-08 Szczep bakterii Lactobacillus fermentum N

Country Status (1)

Country Link
PL (1) PL211530B1 (pl)

Also Published As

Publication number Publication date
PL388220A1 (pl) 2010-12-20

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Perczak et al. The efficiency of lactic acid bacteria against pathogenic fungi and mycotoxins
KR100433300B1 (ko) 사료 생산물
CN109749957B (zh) 一种具有水产病原菌拮抗特性的格氏乳杆菌制剂的制备及应用
US8697423B2 (en) Strain of Lactobacillus plantarum S, the use of the strain of Lactobacillus plantarum S and the preparation for roughages ensiling
KR102092851B1 (ko) 신규 바실러스 아밀로리퀴페시언스 균주 및 이를 이용한 대두 발효물의 제조 방법
KR100908928B1 (ko) 양식어류용 사료첨가제, 사료조성물 및 이를 이용한양식어류의 사육방법
CN107312732B (zh) 一种益生菌饲料添加剂
RU2645471C2 (ru) Изолированный штамм микроорганизма lactobacillus plantarum tak 59 ncimb42150 и его применение
US20100196341A1 (en) Novel Lactobacillus paracasei subsp. paracasei SG96, a Bacteriostatic Composition Containing the same and Use Thereof
LT6270B (lt) Probiotiniai fermentuoti pašarų priedai
CN114507622B (zh) 解淀粉芽孢杆菌wf2020菌株产品及其应用
EP2166083B1 (en) Novel Lactobacillus paracasei subsp. paracasei SG96, a bacteriostatic composition containing the same and use thereof
KR100908927B1 (ko) 가축가금용 사료첨가제, 사료조성물 및 이를 이용한가축가금의 사육방법
KR20180134128A (ko) 항산화 활성 및 면역 활성을 가지는 꽃송이버섯 발효물 및 그 제조방법
KR102003822B1 (ko) 반려동물의 모질을 개선하는 효능을 갖는 유산균과 이를 포함하는 생균제 조성물을 유효성분으로 함유하는 모질 개선을 위한 동물 사료용 첨가제 및 동물 사료 조성물
PL211530B1 (pl) Szczep bakterii Lactobacillus fermentum N
KR20210063994A (ko) 신규한 락토바실러스 파라카제이 nsmj15 균주 및 이를 함유하는 동물용 사료첨가제
Kravchenko Growth dynamics, antagonistic activity and acid production of Lactiplantibacillus (= Lactobacillus) plantarum KT-L18/1 and Bacillus subtilis BPT-B1 inoculants in alfalfa silage
KR102607676B1 (ko) 내산소성 비피도박테리움 균주를 유효성분으로 포함하는 반려동물용 생균제 조성물 및 이의 제조방법
EP2785826B1 (en) A new strain of lactobacillus buchneri a, composition, a multi-component preparation for starch-rich plant preservation, their use and a method for plant preservation
Guo et al. Characterization of two lactic acid bacteria and their influence on silage fermentation of Napier grass
KR100500397B1 (ko) 가금 티푸스 원인균 살모넬라 갈리나륨에 대한 항균활성이있는 균주 및 이를 유효성분으로 함유하는 가금용복합미생물제제
KR101871904B1 (ko) 류코노스톡 메센테로이데스 ysm1219 균주 및 이의 용도
CN115720970B (zh) 一种富有机硒饲料添加剂及其制备方法和应用
KR102831153B1 (ko) 신규한 라틸락토바실러스 사케이 아종 사케이 sc83-3 균주 및 이의 배양방법