PL210600B1 - Nowe, modyfikowane 2',3'-dideoksy-P1,P2-dinukleotydy (54) o aktywności przeciwko wirusowi ludzkiego niedoboru immunologicznego (HIV-1) oraz zawierające je środki farmaceutyczne - Google Patents
Nowe, modyfikowane 2',3'-dideoksy-P1,P2-dinukleotydy (54) o aktywności przeciwko wirusowi ludzkiego niedoboru immunologicznego (HIV-1) oraz zawierające je środki farmaceutyczneInfo
- Publication number
- PL210600B1 PL210600B1 PL381409A PL38140906A PL210600B1 PL 210600 B1 PL210600 B1 PL 210600B1 PL 381409 A PL381409 A PL 381409A PL 38140906 A PL38140906 A PL 38140906A PL 210600 B1 PL210600 B1 PL 210600B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- hiv
- dideoxy
- mmol
- added
- immunodeficiency virus
- Prior art date
Links
- 230000000694 effects Effects 0.000 title description 7
- 241000700605 Viruses Species 0.000 title description 5
- 206010061598 Immunodeficiency Diseases 0.000 title 1
- 208000029462 Immunodeficiency disease Diseases 0.000 title 1
- 230000007813 immunodeficiency Effects 0.000 title 1
- 239000008177 pharmaceutical agent Substances 0.000 title 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 18
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 125000001153 fluoro group Chemical group F* 0.000 claims description 5
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 claims description 5
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 claims description 4
- IVRMZWNICZWHMI-UHFFFAOYSA-N azide group Chemical group [N-]=[N+]=[N-] IVRMZWNICZWHMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 125000004430 oxygen atom Chemical group O* 0.000 claims description 3
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 3
- 241000713772 Human immunodeficiency virus 1 Species 0.000 claims description 2
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 2
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 2
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 claims description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 28
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 11
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 11
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical class CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 238000000034 method Methods 0.000 description 10
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical group C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- FVAUCKIRQBBSSJ-UHFFFAOYSA-M sodium iodide Chemical compound [Na+].[I-] FVAUCKIRQBBSSJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- 241000725303 Human immunodeficiency virus Species 0.000 description 8
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 8
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 6
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 6
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 6
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 6
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 5
- 231100001274 therapeutic index Toxicity 0.000 description 5
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- DKGAVHZHDRPRBM-UHFFFAOYSA-N Tert-Butanol Chemical compound CC(C)(C)O DKGAVHZHDRPRBM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- OIFWQOKDSPDILA-XLPZGREQSA-N [(2s,3s,5r)-3-azido-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl dihydrogen phosphate Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](N=[N+]=[N-])C1 OIFWQOKDSPDILA-XLPZGREQSA-N 0.000 description 4
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 4
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 4
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 4
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 4
- IMFACGCPASFAPR-UHFFFAOYSA-N tributylamine Chemical class CCCCN(CCCC)CCCC IMFACGCPASFAPR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 208000031886 HIV Infections Diseases 0.000 description 3
- 208000037357 HIV infectious disease Diseases 0.000 description 3
- 102100034343 Integrase Human genes 0.000 description 3
- 108010092799 RNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 description 3
- 230000036436 anti-hiv Effects 0.000 description 3
- XPPKVPWEQAFLFU-UHFFFAOYSA-J diphosphate(4-) Chemical compound [O-]P([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O XPPKVPWEQAFLFU-UHFFFAOYSA-J 0.000 description 3
- 235000011180 diphosphates Nutrition 0.000 description 3
- 208000033519 human immunodeficiency virus infectious disease Diseases 0.000 description 3
- RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N imidazole Natural products C1=CNC=N1 RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 235000009518 sodium iodide Nutrition 0.000 description 3
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 3
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 3
- 230000029812 viral genome replication Effects 0.000 description 3
- VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 4-Dimethylaminopyridine Chemical compound CN(C)C1=CC=NC=C1 VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YYROPELSRYBVMQ-UHFFFAOYSA-N 4-toluenesulfonyl chloride Chemical compound CC1=CC=C(S(Cl)(=O)=O)C=C1 YYROPELSRYBVMQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000030507 AIDS Diseases 0.000 description 2
- YNAVUWVOSKDBBP-UHFFFAOYSA-N Morpholine Chemical compound C1COCCN1 YNAVUWVOSKDBBP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012979 RPMI medium Substances 0.000 description 2
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- BHIIGRBMZRSDRI-UHFFFAOYSA-N [chloro(phenoxy)phosphoryl]oxybenzene Chemical compound C=1C=CC=CC=1OP(=O)(Cl)OC1=CC=CC=C1 BHIIGRBMZRSDRI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- PFKFTWBEEFSNDU-UHFFFAOYSA-N carbonyldiimidazole Chemical compound C1=CN=CN1C(=O)N1C=CN=C1 PFKFTWBEEFSNDU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 2
- 229940125782 compound 2 Drugs 0.000 description 2
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 2
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- RIOQSEWOXXDEQQ-UHFFFAOYSA-N triphenylphosphine Chemical compound C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 RIOQSEWOXXDEQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000001226 triphosphate Substances 0.000 description 2
- GBUAPZSAWOGWPG-UHFFFAOYSA-N 1-(2-hydroxyethoxymethyl)-6-phenylselanyl-5-propylpyrimidine-2,4-dione Chemical compound OCCOCN1C(=O)NC(=O)C(CCC)=C1[Se]C1=CC=CC=C1 GBUAPZSAWOGWPG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MCTWTZJPVLRJOU-UHFFFAOYSA-N 1-methyl-1H-imidazole Chemical compound CN1C=CN=C1 MCTWTZJPVLRJOU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- -1 2-hydroxyethoxy Chemical group 0.000 description 1
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 1
- 102000016903 DNA Polymerase gamma Human genes 0.000 description 1
- 108010014080 DNA Polymerase gamma Proteins 0.000 description 1
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 108010027044 HIV Core Protein p24 Proteins 0.000 description 1
- 239000007832 Na2SO4 Substances 0.000 description 1
- 108091000080 Phosphotransferase Proteins 0.000 description 1
- 229940124639 Selective inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 1
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 1
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- GLNADSQYFUSGOU-GPTZEZBUSA-J Trypan blue Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].C1=C(S([O-])(=O)=O)C=C2C=C(S([O-])(=O)=O)C(/N=N/C3=CC=C(C=C3C)C=3C=C(C(=CC=3)\N=N\C=3C(=CC4=CC(=CC(N)=C4C=3O)S([O-])(=O)=O)S([O-])(=O)=O)C)=C(O)C2=C1N GLNADSQYFUSGOU-GPTZEZBUSA-J 0.000 description 1
- HAXFWIACAGNFHA-UHFFFAOYSA-N aldrithiol Chemical compound C=1C=CC=NC=1SSC1=CC=CC=N1 HAXFWIACAGNFHA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002259 anti human immunodeficiency virus agent Substances 0.000 description 1
- 239000003443 antiviral agent Substances 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 125000000852 azido group Chemical group *N=[N+]=[N-] 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 1
- 229940125904 compound 1 Drugs 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 239000001177 diphosphate Substances 0.000 description 1
- 238000011549 displacement method Methods 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 230000008029 eradication Effects 0.000 description 1
- AFQIYTIJXGTIEY-UHFFFAOYSA-N hydrogen carbonate;triethylazanium Chemical compound OC(O)=O.CCN(CC)CC AFQIYTIJXGTIEY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000002460 imidazoles Chemical class 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 1
- 150000004712 monophosphates Chemical class 0.000 description 1
- 150000002780 morpholines Chemical class 0.000 description 1
- XTAZYLNFDRKIHJ-UHFFFAOYSA-N n,n-dioctyloctan-1-amine Chemical compound CCCCCCCCN(CCCCCCCC)CCCCCCCC XTAZYLNFDRKIHJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 1
- 239000002777 nucleoside Substances 0.000 description 1
- 229940127073 nucleoside analogue Drugs 0.000 description 1
- 125000003835 nucleoside group Chemical group 0.000 description 1
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 108010067588 nucleotide pyrophosphatase Proteins 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 102000020233 phosphotransferase Human genes 0.000 description 1
- 229920001467 poly(styrenesulfonates) Polymers 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- BAZAXWOYCMUHIX-UHFFFAOYSA-M sodium perchlorate Chemical compound [Na+].[O-]Cl(=O)(=O)=O BAZAXWOYCMUHIX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229910001488 sodium perchlorate Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 231100000402 unacceptable toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Description
Przedmiotem wynalazku są nowe 2- i 4-tio podstawione bis(2',3'-dideoksy-3'-fluorotymidyno)5',5'-P1,P2-homo i heteropirofosforany o wzorze ogólnym 1, w którym R1, R2, R4, R5 są takie same lub różne i oznaczają niezależnie atom siarki lub tlenu, R3 oznacza atom fluoru lub grupę azydową albo heteropirofosforan o wzorze 2, oraz zawierające je środki farmaceutyczne.
Nowe związki według wynalazku są selektywnymi inhibitorami wywołującego AIDS wirusa ludzkiego niedoboru immunologicznego HIV-1 oraz jego odwrotnej transkryptazy (RT). W celu wywarcia efektu terapeutycznego związki tego typu muszą ulec w zakażonej komórce rozszczepieniu przez komórkowy enzym dinukleotydową pirofosfatazę erytrocytów człowieka do ich 5'-monofosforanów, które są fosforylowane przez kinazy komórkowe do ich form aktywnych - 5'-trifosforanów, które są kompetytywnymi inhibitorami RT (Franchetti P et al., Antiviral Chem. Chemother., 2001, 12, 151-159; Magnani M et al., Proc. Natl. Acad. Soi. 1996, 93, 4403-4408) oraz terminatorami łańcucha DNA.
Farmakologicznie aktywne 5'-trifosforany analogów nukleozydowych - aktualnych leków przeciwko zakażeniom HIV - wywierają nieakceptowalną toksyczność w stosunku do mitochondrialnej DNA polimerazy komórek gospodarza i związki takie nie mogą być bezpiecznie zapakowane (enkapsulowane) do erytrocytów człowieka celem dostarczenia ich do zakażonych komórek, zwłaszcza do makrofagów węzłów chłonnych. Związki te charakteryzują się niższą aktywnością przeciwko wirusowi HIV w limfocytach niż w monocytach/makrofagach (EC50 = 200 i 10 nM) i niższym indeksem terapeutycznym (Tl odpowiednio 20 i >50) (Perno C.F. et al., Antiviral Res. 1992, 17, 289-304).
W dotychczasowym stanie wiedzy znane są tylko 2 przypadki zastosowania homodinukleotydu w terapii in vitro infekcji HIV: AZT-P1,P2-AZT (Magnani M et al.. Proc. Natl. Acad. Sci. 1996, 93, 4403 -4408) i bis-PMEA (Rossi L. Et al., J. Antimicrob. Chemother. 2001, 47, 819-827) oraz 2 przypadki zastosowania heterodinukleotydów: AZTpPMPA (Franchetti P. et al., Antiviral Cham. Chemothier., 2001,12, 151-159) i ACVpPMPA (Franchetti P. et al., Antiviral Res. 2000, 47, 149-158).
Ostatnio udowodniono, że po zakażeniu wirusem HIV makrofagi węzłów chłonnych produkują 95% ogólnej ilości wirusa, podczas gdy limfocyty T produkują tylko 2% ilości wirusa czyli dla uzyskania całkowitej eliminacji HIV niezbędne są środki przeciwwirusowe skierowane zarówno przeciwko zakażeniom limfocytów T jak i zakażeniom makrofagów (Perno C.F. et al., Antiviral Res. 1992, 17, 289-304).
Nieoczekiwanie okazało się, że możliwe jest wytworzenie nowej grupy 2- i 4-podstawionych bis(2',3'-dideoksy-3'-fluorotymidyno)-5',5'-P1,P2-pirofosforanów charakteryzujących się bardzo wysoką i selektywną aktywnością przeciwko wirusowi HIV (EC50= 5-230 nM) 9 bardzo dobrym indeksem selektywności (Tl > 286-14893).
Nowe modyfikowane 2',3'-dideoksy-P1,P2-dinukleotydy o ogólnym wzorze 1, w którym w którym R1, R2, R4, R5 są takie same lub różne i oznaczają niezależnie atom siarki lub tlenu, R3 oznacza atom fluoru lub grupę azynową albo heteropirofosforan o wzorze 2, korzystnie charakteryzujące się wysoką aktywnością przeciwko wirusowi HIV i indeksem EC50 = 5-230 nM oraz wysokim terapeutycznym indeksem selektywności Tl > 286-14893.
Środek farmaceutyczny o aktywności przeciwko wirusowi ludzkiego niedoboru immunologicznego (HIV-1) zawierający znane, dopuszczalne farmaceutycznie nośniki i substancje pomocnicze, według wynalazku charakteryzuje się tym, że jako składnik czynny zawiera związki o wzorze ogólnym 1, w którym R1 R2, R4, R5 są takie same lub różne i oznaczają niezależnie atom siarki lub tlenu, R3 oznacza atom fluoru lub grupę azydową albo heteropirofosforan o wzorze 2, korzystnie, charakteryzujący się wysoką aktywnością przeciwko wirusowi HIV i indeksem EC50 = 5-230 nM oraz bardzo wysokim indeksem terapeutycznym Tl > 286-14893.
Oznaczanie aktywności inhibitującej zakażenia wirusem HIV.
Badanie aktywności antywirusowej (ED50) przeprowadzano stosując indukujący powstawanie syncytiów laboratoryjny szczep HIV-1 (cat#3) oraz hodowle komórek MT-2 i MT-4. Komórki preinkubowano przez 16 h w 10% FCS-RPMI medium wzbogaconym o różne stężenia badanego związku. Inokulacje prowadzono przez 4 h w 37°C. Po inkubacji z wirusem komórki odwirowano (6 x 312 g/min), w celu usunięcia wolnego wirusa. Komórki ponownie zawieszono w medium zawierającym badane związki. Stosowano 3 rodzaje hodowli kontrolnych: a) hodowle oceniające replikację wirusa (zakażone komórki bez związku badanego), b) hodowle stanowiące kontrolę negatywną (niezakażone komórki), c) kontrole oceniające zahamowanie replikacji wirusa prowadzone w medium wzbogaconym znanymi inhibitorami AZT i ddC o identycznych stężeniach jak związki badane. Hodowle prowadzono w 96-cio studzienkowych płytkach hodowlanych. Każda studzienka zawierała 2x105 komórek zawieszonych
PL 210 600 B1 w 200 μ l medium. Hodowle dla każ dego stężenia wykonano w 3-ch powtórzeniach. Replikację wirusa badano, co 3 dni oznaczając zawartość wirusowego białka p24 w medium znad hodowli przy użyciu testu „Coulter HIV p24 Antigen Assay”. Powstawanie syncytiów obserwowano w mikroskopie odwróconym. W celu oznaczenia indeksu terapeutycznego badanych związków zbadano 50% stężenia cytotoksyczne (CC50). Komórki hodowano przez 5 dni w warunkach standartowych, w 10% FCS-RPMI medium wzbogaconym w różne stężenia badanych związków i związków kontrolnych. Po 5-ciu dniach oznaczono przeżywalność komórek przy użyciu metody wypierania błękitu trypanowego. Aktywności przeciwko HIV wykazywane przez związki według wynalazku były rzędu 5-230 nM przy bardzo dobrym indeksie terapeutycznym (Tl > 286-14893). Otrzymane wyniki wykazały, że związki te są selektywnymi inhibitorami HIV o bardzo dobrym indeksie terapeutycznym 1 potencjalnymi lekami przeciwko HIV/AIDS.
Poniżej przedstawiono przykłady wytwarzania związków o wzorze 1.
P r z y k ł a d 1.
bis(2',3'-dideoksy-3'-fluoro-2-tiotynfiidyno)-5',5'-P1,P2-pirofosforan (wzór 1, R1, R4 = S; R2, R5= O; R3 = F)
Metoda I (oparta na procedurze Kim K., Behrman E. Nucleosides & Nucleotides, 1999, 18, 51-54).
5'-Monofosforan 2',3'-dideoksy-3'-fluoro-2-tiotymidyny (2-SFLTMP) (51 mg, 0,14 mmoli) przekształcono w sól tri-n-butyloamoniową, rozpuszczono w 5 ml bezwodnego N,N-dimetyloformamidu i dodano 0,5 ml suchej pirydyny i katalityczną ilość 4-dimetyloaminopirydyny. Następnie dodano chlorek tosylu (78 mg, 0,4 mmoli) i całość mieszano w temperaturze pokojowej przez 24 h, po czym dodano 2 ml wody. Całość zatężono pod próżnią do sucha, rozpuszczono w niewielkiej ilości wody i nałożono na kolumnę z DEAE-Sephadex A-25. Kolumnę eluowano gradientem wodnego roztworu węglanu trietyloaminy (0,1- 0,4 M). Wodny eluat zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem do sucha. Produkt rozpuszczono w niewielkiej ilości wody i dodano roztwór 100 mg jodku sodu w 5 ml acetonu. Powstający biały osad odwirowano, przemyto acetonem i wysuszono nad P2O5. Otrzymano 34,6 mg (70%) związku 1 w postaci białego osadu; TLC (żel krzemionkowy) Rf (i-PrOH:NH3:H2O 11:7:2) 0.72;
1H NMR δ [ppm] (D2O) 7.87 (1H, d, H6), 7.06 (1H, dd, H1') 5.52-5.4 (1H, dd, H3', J3'-F = 53.06 Hz), 4.55-4.49 (1H, m, H4', J4'-F = 27.03 Hz), 4.22 (2H, d, H5', H5), 2.84-2.75 (1H, m, H2), 2.33-2.19 (1H, m, H2'), 1.97 (3H, s, CH3);
31P NMR δ [ppm] (D2O) - 11.18; MS m/z 661 (M-H)-.
Metoda II (oparta na procedurze Magnani M. et al, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1996, 93, 4403
-4408)
Sól sodową 2-SFLTMP (85 mg, 0,22 mmola) rozpuszczono w 3 ml wody i nałożono na kolumnę z Dowex 50 WX8 (H+). Kolumnę eluowano wodą, a eluat zliofilizowano. Pozostałość rozpuszczono w 3 ml metanolu i dodano 0,4 ml tri-n-oktyloaminy. Całość mieszano przez 30 min., po czym zatężono do sucha, rozpuszczono w mieszaninie 1,4-dioxanu (1 ml) i DMF (0,25 ml), dodano difenylochlorofosforan (0,057 ml, 0,27 mmoli) oraz tri-n-butyloaminę (0,13 ml, 0,54 mmoli) i całość mieszano w temperaturze pokojowej przez 2-3 h (w warunkach bezwodnych). Następnie rozpuszczalniki odparowano pod zmniejszonym ciśnieniem, dodano eter dietylowy (10 ml) i mieszaninę reakcyjną odstawiono na 1 h do lodówki, po czym eter zdekantowano. W celu usunięcia resztek eteru dodano 2 ml 1,4-dioksanu i całość zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem do syropu. Uzyskany w ten sposób P1-3'-fluoro-2-tiotymidyno-5'-P2-difenylopirofosforan rozpuszczono w 1 ml bezwodnej pirydyny, dodano do 2-SFLTMP w postaci soli trietyloamoniowej (97 mg, 0,22 mmola) i całość mieszano w temperaturze pokojowej przez 18 h. Mieszaninę reakcyjną zatężono pod próżnią do sucha i przemyto 2 razy eterem dietylowym. Pozostałość rozpuszczono w niewielkiej ilości wody, pH roztworu doprowadzono do 8 za pomocą 1 M roztworu NaOH, dodano aceton i odwirowano powstający biały osad. Osad rozpuszczono w niewielkiej ilości wody i nałożono na płytkę preparatywną PLC z żelem krzemionkowym. Uzyskano 62 mg (40%) P1,P2-difosforanu 1 o właściwościach identycznych jak dla związku otrzymanego metodą I.
P r z y k ł a d 2.
P1-(2',3'-dideoksy-3'-azydotymidyno)-P2-(2',3'-dideoksy-3'-fluoro-2-tiotymidyno)pirofosforan (wzór 1, R1, R4 = S; R2, R5 = O; R3 = -N3)
Metoda I.
2-SFLTMP (68 mg, 0,2 mmoli) przekształcono w sól trietyloamoniową (przygotowaną przez mieszanie przez 30 min monofosforanu w postaci wolnego kwasu w 3 ml metanolu z dodatkiem 0,4 ml trietyloaminy) i rozpuszczono w mieszaninie suchego 1,4-dioxanu (1 ml) i DMF (0,25 ml). Dodano
PL 210 600 B1 difenylochlorofosforan (0,024 ml, 0,11 mmoli) oraz tri-n-butyloaminę (55 pl, 0,23 mmoli) i całość mieszano w temperaturze pokojowej przez 3h (w warunkach bezwodnych). Następnie rozpuszczalniki odparowano pod zmniejszonym ciśnieniem, dodano eter dietylowy (10 ml) i mieszaninę reakcyjną odstawiono na 1 h do lodówki, po czym eter zdekantowano. W celu usunięcia resztek eteru dodano 2 ml dioksanu i całość zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem do syropu. Uzyskany w ten sposób P1-nukleozydo-5'-P2-difenylopirofosforan rozpuszczono w 1 ml bezwodnej pirydyny, dodano do 5'-monofosforanu 3'-azydo-2',3'-dideoksytymidyny (AZTMP; 69,4 mg, 0,2 mmola) przygotowanego w postaci soli trietyloamoniowej i cał ość mieszano w temperaturze pokojowej przez 18 h. Mieszaninę reakcyjną zatężono pod próżnią do sucha i przemyto 2 razy eterem dietylowym. Pozostałość rozpuszczono w niewielkiej ilości wody, pH roztworu doprowadzono do 8 za pomocą 1 M roztworu NaOH, dodano aceton i odwirowano powstający biały osad. Osad rozpuszczono w niewielkiej ilości wody i nałożono na płytkę preparatywną PLC z żelem krzemionkowym. Otrzymano 13,4 mg (9,3%); związku 2; TLC (żel krzemionkowy) Rf (i-PrOH:NH3:H2O 11:7:2) 0.67;
1H NMR δ [ppm] (D2O) 7.88 (1H, d, H6SFLT), 7.64 (1H, s, H6AZT), 7.05 (1H, dd, H1'SFLT) 6.18 (1H, t, H1AZT), 5.50-5.39 (1H, dd, H3', J3'-F = 52.73 Hz), 4.54-4.47 (3H, m, H4'SFLT, H3'AZT), 4.22-4.10 (5H, m, H5', H5, H4'AZT), 2.82-2.73 (1H, m, H2), 2.44 (2H, m, H2', H2AZT), 2.32-2.17 (1H, m. H2'), 1.95 i 1.89 (6H, 2 s, 2 CH3);
31P NMR δ [ppm] (D2O) -11.21, -11.07; MS m/z 668 (M-H)-.
Metoda II (oparta na procedurze Zatorski A. et al., J. Med. Chem. 1995, 38, 1098-1105)
AZTMP (47 mg, 0,13 mmoli) przekształcono w sól trietyloamoniową, rozpuszczono w 0,5 ml N,N-dimetyloformamidu i dodano 1,1'-karbonylodiimidazol (17 mg, 0.11 mmola). Całość mieszano przez 45 min w temperaturze pokojowej, po czym odparowano do sucha i otrzymany imidazolo AZTMP użyto do następnej reakcji. Imidazole AZTMP oraz 2-SFLTMP (52 mg, 0,15 mmola) rozpuszczono w 1 ml N,N-dimetyloformamidu i całość mieszano przez 14 dni w temperaturze pokojowej. Dodano roztwór 100 mg jodku sodu w 5 ml acetonu a powstający osad odwirowano. Otrzymano 11,5 mg (12%) związku 2 o właściwościach identycznych jak związek otrzymany metodą I.
P r z y k ł a d 3.
Bis(2',3'-dideoksy-3'-fluoro-4-tiotymidyno)-5',5'-P1,P2-pirofosforan (wzór 1, R1, R4 = O; R2, R5 = S; R3 = F) (oparta na procedurze Kanavarioti A. et al. Tetrahedron Lett 1991, 32, 6065-6068)
Do mieszaniny 5'-monofosforanu 3'-fluoro-4-tiotymidyny (4-SFLTMP: 40 mg, 0,12 mmoli) w postaci wolnego kwasu i 1-metyloimidazolu (150 μ|, 1.88 mmola) w 1 ml DMF dodano trietyloaminę (37 μ!), trifenylofosfinę (100 mg, 0,37 mmola) i disiarczek dipirydylu (81,65 mg, 0.37 mmola). Całość mieszano w temperaturze pokojowej przez 2.5 godz. po czym dodano roztwór 1 M NaCIO4 w mieszaninie eteru i acetonu i pozostawiono w 0°C przez 12 godz. Powstały osad odwirowano otrzymując 28 mg (67%) pirofosforanu P1,P2-bis(2',3'-dideoksy-3'-fluoro-4-tiotymidyny) w postaci soli sodowej; TLC (żel krzemionkowy) Rf (i-PrOH:NH3:H2O 11:7:2) 0.70.
P r z y k ł a d 4.
P1-(1-[(2-hydroksyetoksy)metylo]-6-fenyloselenenylo-5-propylouracylo)-P2-2',3'-dideoksy-3'-fluoro-2-tiotymidyno)pirofosforan (wzór 2)
2-SFLTMP (44.2 mg, 0,13 mmola) rozpuszczono w 2 ml wody, dodano 2 ml tert-butanolu i 45 μl (0,52 mmola) morfoliny i całość ogrzano do temperatury 90°C. Dodano 1,3-dicykloheksylokarbodiimid (107,5 mg, 0,52 mmola) w 3 ml tert-butanolu i całość mieszano w temperaturze 90°C przez 3 h. Następnie dodano 2 ml wody i przeekstrahowano eterem dietylowym (3x10 ml), a połączone frakcje organiczne wysuszono nad bezwodnym Na2SO4 i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem do syropu. Uzyskaną w ten sposób morfolinową pochodną o-P1-nukleozydofosforanu rozpuszczono w 1 ml bezwodnej pirydyny, dodano do 5'-monofosforanu 1-[(2-hydroksyetoksy)metylo]-6-fenyloselenenylo-5-propylouracylu (HP10MP; 50 mg, 0,11 mmola) przygotowanego w postaci soli tri-n-butyloamoniowej i całość mieszano w temperaturze pokojowej przez 18 h. Mieszaninę reakcyjną zatężono pod próżnią do sucha i przemyto 2 razy eterem dietylowym. Pozostałość rozpuszczono w niewielkiej ilości wody, dodano roztwór 100 mg jodku sodu w 5 ml acetonu a powstający osad odwirowano. Otrzymano 13,5 mg (15%); związku 4; TLC (żel krzemionkowy) Rf (i-PrOH: NH3: H2O 11:7:2) 0.7;
1H NMR δ [ppm] (D2O) 7.90 (1H, d, H6), 7.45-7.33 (5H, m, Ph), 7.04 (1H, dd, H1'), 5.60 (2H, s, OCH2N), 5.52-5.41 (1H, dd, H3'), 4.56-4.51 (1H, m, H4'), 4.27-4.2 (2H, m, H5', H5), 3.96-3.74 (4H, m,
PL 210 600 B1
CH2CH2), 2.83-2.74 (1H, m, H2), 2.52 (2H, m, CH2CH2CH3), 2.29-2.15 (1H, m, H2'), 1.95 (3H, s, CH3), 1.18 (2H, m, CH2CH2CH3) 0.79 (3H, t, CH2CH2CH3);
31P NMR δ [ppm] (D2O) -11.27, -10.57; MS m/z 784 (M-H)-.
Claims (2)
1. Nowe 2- i 4-tiopodstawione bis(2',3'-dideoksy-3'-fluorotymidyno)-5',5'-P ,P -homo i heteropirofosforany o ogólnym wzorze 1, w którym w którym R1, R2, R4, R5 są takie same lub różne i oznaczają niezależnie atom siarki lub tlenu, R3 oznacza atom fluoru lub grupę azydową, albo heteropirofosforan o wzorze 2, aktywne przeciwko wirusowi ludzkiego niedoboru immunologicznego HIV-1.
2. Środki farmaceutyczne zawierający znane, dopuszczalne farmaceutycznie nośniki i substancje pomocnicze, znamienne tym, że jako składniki czynne zawierają związki o wzorze ogólnym 1, w którym R1, R2, R4, R5 oznaczają atom siarki lub tlenu, R3 oznacza atom fluoru lub grupę azydową, albo heteropirofosforan o wzorze 2.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL381409A PL210600B1 (pl) | 2006-12-27 | 2006-12-27 | Nowe, modyfikowane 2',3'-dideoksy-P1,P2-dinukleotydy (54) o aktywności przeciwko wirusowi ludzkiego niedoboru immunologicznego (HIV-1) oraz zawierające je środki farmaceutyczne |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL381409A PL210600B1 (pl) | 2006-12-27 | 2006-12-27 | Nowe, modyfikowane 2',3'-dideoksy-P1,P2-dinukleotydy (54) o aktywności przeciwko wirusowi ludzkiego niedoboru immunologicznego (HIV-1) oraz zawierające je środki farmaceutyczne |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL381409A1 PL381409A1 (pl) | 2008-07-07 |
| PL210600B1 true PL210600B1 (pl) | 2012-02-29 |
Family
ID=43035647
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL381409A PL210600B1 (pl) | 2006-12-27 | 2006-12-27 | Nowe, modyfikowane 2',3'-dideoksy-P1,P2-dinukleotydy (54) o aktywności przeciwko wirusowi ludzkiego niedoboru immunologicznego (HIV-1) oraz zawierające je środki farmaceutyczne |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| PL (1) | PL210600B1 (pl) |
-
2006
- 2006-12-27 PL PL381409A patent/PL210600B1/pl unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| PL381409A1 (pl) | 2008-07-07 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4963662A (en) | Fluorinated nucleosides and method for treating retrovirus infections therewith | |
| AU2003217863B9 (en) | Nucleotide mimics and their prodrugs | |
| Agrofoglio et al. | Acyclic, Carbocyclic and L-nucleosides | |
| Shaver et al. | Structure–activity relationships of dinucleotides: potent and selective agonists of P2Y receptors | |
| FI110687B (fi) | Menetelmä valmistaa N-alkyyli-2-substituoituja ATP-analogeja | |
| Martin et al. | Synthesis and antiviral activity of monofluoro and difluoro analogs of pyrimidine deoxyribonucleosides against human immunodeficiency virus (HIV-1) | |
| Meier | cycloSal-pronucleotides-design of chemical Trojan horses | |
| KR20110115601A (ko) | 암 및 바이러스 감염 치료용 퓨린 뉴클레오시드 모노포스페이트 프로드럭 | |
| CA2561958A1 (en) | Composition and method for inhibiting platelet aggregation | |
| PT1290006E (pt) | Produção combinatória de análogos de nucleótidos e nucleósidos (xitp) | |
| CA3216679A1 (en) | Nucleotide and nucleoside therapeutic compositions, combinations and uses related thereto | |
| Schneider et al. | Role of nucleoside diphosphate kinase in the activation of anti-HIV nucleoside analogs | |
| Okruszek et al. | The synthesis of nucleoside 5'-O-(1, 1-dithiotriphosphates) | |
| US11858953B2 (en) | Compositions and methods for synthesis of phosphorylated molecules | |
| Nair et al. | Interpretation of the roles of adenylosuccinate lyase and of AMP deaminase in the anti-HIV activity of 2′, 3′-dideoxyadenosine and 2′, 3′-dideoxyinosine | |
| JP2005507944A (ja) | ウイルスの抑制における改善およびその関連 | |
| US5153180A (en) | Fluorinated nucleosides and process for treating retrovirus infections therewith | |
| PL210600B1 (pl) | Nowe, modyfikowane 2',3'-dideoksy-P1,P2-dinukleotydy (54) o aktywności przeciwko wirusowi ludzkiego niedoboru immunologicznego (HIV-1) oraz zawierające je środki farmaceutyczne | |
| Rosowsky et al. | Inhibition of human immunodeficiency virus type 1 replication by phosphonoformate esters of 3′-azido-3′-deoxythymidine | |
| Schmidt et al. | Synthesis of 5-[(methylthio) methyl]-2'-deoxyuridine, the corresponding sulfoxide and sulfone, and their 5'-phosphates: antiviral effects and thymidylate synthetase inhibition | |
| Li et al. | Synthesis, characterization, and inhibitory activities of nucleoside α, β-imido triphosphate analogues on human immunodeficiency virus-1 reverse transcriptase | |
| CA2042242A1 (en) | Complex of dideoxynucleoside and phosphonoformic acid | |
| Seneviratne et al. | Synthesis and biological evaluation of pyrrolidine-functionalized nucleoside analogs | |
| Barral et al. | Synthesis and antiviral activity of boranophosphonate isosteres of AZT and d4T monophosphates | |
| US4990499A (en) | Anti-herpes simplex virus activity of 5-alkoxymethyl-2'-deoxycytidimes and their 5-monophosphates |