PL206641B1 - Method for the modification of graphite - Google Patents

Method for the modification of graphite

Info

Publication number
PL206641B1
PL206641B1 PL375124A PL37512405A PL206641B1 PL 206641 B1 PL206641 B1 PL 206641B1 PL 375124 A PL375124 A PL 375124A PL 37512405 A PL37512405 A PL 37512405A PL 206641 B1 PL206641 B1 PL 206641B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
days
distilled water
mgso
glucose
graphite
Prior art date
Application number
PL375124A
Other languages
Polish (pl)
Other versions
PL375124A1 (en
Inventor
Mirosława Szczęsna-Antczak
Tadeusz Antczak
Stanisław Bielecki
Agata Kaczorowska
Original Assignee
Politechnika Lodzka
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Politechnika Lodzka filed Critical Politechnika Lodzka
Priority to PL375124A priority Critical patent/PL206641B1/en
Publication of PL375124A1 publication Critical patent/PL375124A1/en
Publication of PL206641B1 publication Critical patent/PL206641B1/en

Links

Landscapes

  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Description

(12) OPIS PATENTOWY (19) PL (11) 206641 (13) B1 (21) Numer zgłoszenia: 375124 (51) Int.Cl. (12) PATENT DESCRIPTION (19) PL (11) 206641 (13) B1 (21) Application number: 375124 (51) Int.Cl.

C01B 31/04 (2006.01) C12R 1/39 (2006.01) C12R 1/645 (2006.01) (22) Data zgłoszenia: 16.05.2005 (54)C01B 31/04 (2006.01) C12R 1/39 (2006.01) C12R 1/645 (2006.01) (22) Date of notification: 16.05.2005 (54)

Sposób modyfikacji grafitu (73) Uprawniony z patentu:Method of graphite modification (73) The right holder of the patent:

POLITECHNIKA ŁÓDZKA, Łódź, PL (43) Zgłoszenie ogłoszono:University of Lodz, Łódź, PL (43) Application was announced:

27.11.2006 BUP 24/06 (45) O udzieleniu patentu ogłoszono:27.11.2006 BUP 24/06 (45) The following was announced about the grant of the patent:

30.09.2010 WUP 09/10 (72) Twórca(y) wynalazku:30.09.2010 WUP 09/10 (72) Inventor (s):

MIROSŁAWA SZCZĘSNA-ANTCZAK, Łódź, PL TADEUSZ ANTCZAK, Łódź, PL STANISŁAW BIELECKI, Łódź, PL AGATA KACZOROWSKA, Łódź, PL (74) Pełnomocnik:MIROSŁAWA SZCZĘSNA-ANTCZAK, Łódź, PL TADEUSZ ANTCZAK, Łódź, PL STANISŁAW BIELECKI, Łódź, PL AGATA KACZOROWSKA, Łódź, PL (74) Plenipotentiary:

rzecz. pat. Bałczewski Zbigniew Wojciech Ośrodek Wynalazczości Politechniki Łódzkiejitem. stalemate. Bałczewski Zbigniew Wojciech Center for Invention of the Lodz University of Technology

PL 206 641 B1PL 206 641 B1

Opis wynalazkuDescription of the invention

Przedmiotem wynalazku jest sposób modyfikacji grafitu.The present invention relates to a method of modifying graphite.

Dotychczas grafit modyfikuje się metodami chemicznymi i fizyko-chemicznymi w podwyższonej temperaturze i ciśnieniu.So far, graphite has been modified by chemical and physico-chemical methods at elevated temperature and pressure.

Sposób modyfikacji grafitu według wynalazku polega na tym, że grafit, uprzednio wysterylizowany, umieszcza się w preparacie enzymatycznym stanowiącym mieszaninę biomasy pochodzącej z hodowli wyizolowanego ze ś rodowiska naturalnego szczepu pleś ni Trichoderma viride, Aspergillus niger, Phanerochaete chrysosporium, Chaetomium globosum lub Fusarium oxysporum względnie szczepu bakterii Pseudomonas fluorescens, oddzielonej w warunkach sterylnych na przegrodzie filtracyjnej oraz zdezintegrowanej w warunkach sterylnych, z płynem pohodowlanym pochodzącym z tej hodowli, zmieszanych w stosunku objętościowym 1:1, umieszczonym w wysterylizowanym naczyniu i pozostawia w tym preparacie na czas 8-48 dni w temperaturze 10-50°C. Nastę pnie przemywa się grafit kilkakrotnie wodą destylowaną, oczyszcza z materiału biologicznego w łaźni ultradźwiękowej lub sonifikatorze w 0,05-2% roztworze wodnym detergentu w czasie 5-120 minut, po czym znów przemywa wodą destylowaną i suszy w temperaturze pokojowej. Szczep pleśni Trichoderma viride inkubuje się na podłożu stałym zawierającym 15-40 części wagowych agaru i 1000 części wagowych brzeczki piwowarskiej o stężeniu 5-12°Blg, w temperaturze 20-45°C w czasie 2-7 dni i hoduje na wysterylizowanym podłożu hodowlanym o składzie: 1 kg wody destylowanej, 1-4 g NaNO3, 0,5-2 g K2HPO4,The method of graphite modification according to the invention consists in placing the graphite, previously sterilized, in an enzyme preparation consisting of a mixture of biomass derived from the cultivation of a mold strain isolated from the natural environment: Trichoderma viride, Aspergillus niger, Phanerochaete chrysosporium, Chaetomium globosum or Fusarium oxysporum or strain Pseudomonas fluorescens bacteria, separated in sterile conditions on the filtering wall and disintegrated in sterile conditions, with the post-culture fluid from this culture, mixed in a 1: 1 volume ratio, placed in a sterilized vessel and left in this preparation for 8-48 days at the temperature 10-50 ° C. Then the graphite is washed several times with distilled water, purified from biological material in an ultrasonic bath or sonicator in 0.05-2% detergent aqueous solution for 5-120 minutes, then washed again with distilled water and dried at room temperature. The mold strain Trichoderma viride is incubated on a solid medium containing 15-40 parts by weight of agar and 1000 parts by weight of brewing broth at a concentration of 5-12 ° Blg, at a temperature of 20-45 ° C for 2-7 days, and cultivated in a sterilized culture medium with composition: 1 kg of distilled water, 1-4 g of NaNO3, 0.5-2 g of K2HPO4,

0,005-0,1 g Fe2(SO4)3, 0,1-1 g MgSO4-7H2O, 10-50 g glukozy, w temperaturze 20-45°C na wytrząsarce przy szybkości obrotów 100-350 rpm w czasie 2-7 dni. Szczep pleśni Aspergillus niger inkubuje się na podłożu stałym zawierającym: 1 kg wody destylowanej, 1-4 g NaNO3, 0,5-2 g K2HPO4, 0,005-0,1 g Fe2(SO4)3, 0,2-1 g MgSO4-7H2O, 10-50 g glukozy i 15-40 g agaru, w temperaturze 20-45°C w czasie0.005-0.1 g Fe 2 (SO 4 ) 3 , 0.1-1 g MgSO 4 -7H 2 O, 10-50 g glucose, at 20-45 ° C on a shaker at 100-350 rpm in time of 2-7 days. The Aspergillus niger mold strain is incubated on a solid medium containing: 1 kg of distilled water, 1-4 g of NaNO3, 0.5-2 g of K2HPO4, 0.005-0.1 g of Fe 2 (SO 4 ) 3 , 0.2-1 g MgSO 4 -7H 2 O, 10-50 g glucose and 15-40 g agar at 20-45 ° C during

2- 8 dni i hoduje na wysterylizowanym podłożu hodowlanym o składzie: 1 kg wody destylowanej, 1-4 g NaNO3, 0,5-2 g K2HPO4, 0,005-0,1 g Fe2(SO4)3, 0,2-1 g MgSO4-7H2O, 10-50 g glukozy, w temperaturze 20-45°C na wytrząsarce przy szybkości obrotów 100-340 rpm w czasie 2-8 dni. Szczep pleśni Phamerochaete chrysosporium inkubuje się na podłożu stałym zawierającym: 1 kg wody destylowanej, 10-50 g bacto malt ekstraktu, 0,01-0,2 g płatków owsianych, 10-40 g bacto agaru, o pH 5-7, w temperaturze 20-45°C w czasie 2-8 dni i hoduje na wysterylizowanym podłożu hodowlanym o składzie: 1 kg wody destylowanej, 1-4 g K2HPO4, 0,2-2 g MgSO4-7H2O, 0,05-0,5 g CaCl2-2H2O, 0,05-0,5 g winianu amonu, 5-20 g glukozy, 1-10 g malt ekstraktu, 0,1-3 mg tiaminy dodawanej po sterylizacji podłoża, w temperaturze 20-45°C na wytrząsarce przy szybkości obrotów 100-340 rpm w czasie 2-8 dni. Szczep pleśni Chaetomium globosum inkubuje się na podłożu stałym zawierającym: 1 kg wody destylowanej, 1-3 g NaNO3, 0,5-2 g K2HPO4, 0,005-0,1 g Fe2(SO4)3, 0,1-1 g MgSO4-7H2O, 20-40 g glukozy i 10-30 g agaru, w temperaturze 20-45°C w czasie 3-8 dni i hoduje na wysterylizowanym podłożu hodowlanym o składzie: 1 kg wody destylowanej, 1-3 g NaNO3, 0,5-2 g K2HPO4, 0,005-0,1 g Fe2(SO4)3, 0,1-1 g MgSO4-7H2O, 20-40 g glukozy, w temperaturze 20-45°C na wytrząsarce przy szybkości obrotów 100-340 rpm w czasie 3-8 dni. Szczep pleśni Fusarium oxysporum inkubuje się na podłożu stałym zawierającym: 1 kg wody destylowanej, 1-3 g NaNO3, 0,5-2 g K2HPO4, 0,005-0,1 g Fe2(SO4)3, 0,1-1 g MgSO4-7H2O, 20-40 g glukozy i 10-30 g agaru, w temperaturze 20-45°C w czasie2-8 days and grown on a sterilized culture medium composed of: 1 kg of distilled water, 1-4 g of NaNO 3 , 0.5-2 g of K 2 HPO 4 , 0.005-0.1 g of Fe 2 (SO 4 ) 3 , 0.2-1 g MgSO 4 -7H 2 O, 10-50 g glucose, at 20-45 ° C on a shaker at 100-340 rpm for 2-8 days. The mold strain Phamerochaete chrysosporium is incubated on a solid medium containing: 1 kg of distilled water, 10-50 g of bacto malt extract, 0.01-0.2 g of oat flakes, 10-40 g of bacto agar, pH 5-7, at a temperature of 20-45 ° C during 2-8 days and grown on a sterilized culture medium with the following composition: 1 kg of distilled water, 1-4 g K 2 HPO 4 , 0.2-2 g MgSO 4 -7H 2 O, 0.05 -0.5 g CaCl 2 -2H 2 O, 0.05-0.5 g ammonium tartrate, 5-20 g glucose, 1-10 g malt extract, 0.1-3 mg thiamine added after sterilization of the medium at the temperature 20-45 ° C on a shaker at 100-340 rpm for 2-8 days. The Chaetomium globosum mold strain is incubated on a solid medium containing: 1 kg of distilled water, 1-3 g of NaNO 3 , 0.5-2 g of K 2 HPO 4 , 0.005-0.1 g of Fe 2 (SO 4 ) 3 , 0, 1-1 g MgSO 4 -7H 2 O, 20-40 g glucose and 10-30 g agar at 20-45 ° C for 3-8 days and grown on sterilized culture medium with the following composition: 1 kg of distilled water, 1-3 g of NaNO3, 0.5-2 g of K2HPO4, 0.005-0.1 g of Fe 2 (SO 4 ) 3 , 0.1-1 g of MgSO 4 -7H 2 O, 20-40 g of glucose at a temperature of 20 -45 ° C on a shaker at 100-340 rpm for 3-8 days. The Fusarium oxysporum mold strain is incubated on a solid medium containing: 1 kg of distilled water, 1-3 g of NaNO3, 0.5-2 g of K2HPO4, 0.005-0.1 g of Fe 2 (SO 4 ) 3 , 0.1-1 g MgSO 4 -7H 2 O, 20-40 g glucose and 10-30 g agar at 20-45 ° C during

3- 8 dni i hoduje na wysterylizowanym podłożu hodowlanym o składzie: 1 kg wody destylowanej, 1-3 g NaNO3, 0,5-2 g K2HPO4, 0,005-0,1 g Fe2(SO4)3, 0,1-1 g MgSO4-7H2O, 20-40 g glukozy, w temperaturze 20-45°C na wytrząsarce przy szybkości obrotów 100-340 rpm w czasie 3-8 dni. Szczep bakterii Pseudomonas fluorescens inkubuje się na podłożu stałym zawierającym 1 kg wody destylowanej i 15 -30 g nutrient agaru, o pH=6-7, w temperaturze 20-45°C w czasie 1-3 dnia i hoduje na wysterylizowanym podłożu hodowlanym o składzie: 1 kg wody destylowanej, 2-6 g ekstraktu wołowego, 3-8 g peptonu, w temperaturze 20-45°C na wytrząsarce przy szybkości obrotów 100-340 rpm w czasie 2-5 dni. Biomasę poddaje się dezintegracji w temperaturze nieprzekraczającej 0-4°C, korzystnie przy użyciu kulek szklanych nie zawierających ołowiu, stosując korzystnie 1-3 g kulek na 100 g odciśniętej biomasy i 50 ml wody destylowanej, w homogenizatorze przy szybkości obrotów 5000-18000 min-1, w czasie nie dłuższym niż 5 minut. Jako detergenty korzystnie stosuje się Triton X-100, Brij 35, gumę arabską, Tween 80, SEKUMATIC®FC lub ich mieszaniny.3-8 days and grown on a sterilized culture medium composed of: 1 kg of distilled water, 1-3 g of NaNO 3 , 0.5-2 g of K 2 HPO 4 , 0.005-0.1 g of Fe 2 (SO 4 ) 3 , 0.1-1 g MgSO 4 -7H 2 O, 20-40 g glucose, at 20-45 ° C on a shaker at 100-340 rpm for 3-8 days. The Pseudomonas fluorescens bacterial strain is incubated on a solid medium containing 1 kg of distilled water and 15-30 g nutrient agar, pH = 6-7, at a temperature of 20-45 ° C for 1-3 days and grown on a sterilized culture medium with the composition : 1 kg of distilled water, 2-6 g of beef extract, 3-8 g of peptone, at 20-45 ° C on a shaker at 100-340 rpm for 2-5 days. The biomass is disintegrated at a temperature not exceeding 0-4 ° C, preferably using lead-free glass beads, preferably using 1-3 g of beads per 100 g of pressed biomass and 50 ml of distilled water, in a homogenizer at a rotation speed of 5000-18000 min - 1 , in no more than 5 minutes. The detergents used are preferably Triton X-100, Brij 35, gum arabic, Tween 80, SEKUMATIC®FC or mixtures thereof.

W sposobie według wynalazku, w którym modyfikacja grafitu zachodzi pod działaniem preparatów enzymatycznych, otrzymuje się zmodyfikowany grafit zawierający na powierzchni polarne połączenia węgla i tlenu czyli grafit o poprawionych właściwościach aplikacyjnych powierzchni.In the method according to the invention, in which the modification of graphite takes place under the action of enzymatic preparations, a modified graphite is obtained containing polar combinations of carbon and oxygen on the surface, i.e. graphite with improved surface application properties.

Sposób według wynalazku ilustrują bliżej podane niżej przykłady nie ograniczając jego zakresu.The process according to the invention is illustrated by the following non-limiting examples.

PL 206 641 B1PL 206 641 B1

P r z y k ł a d I.P r z x l a d I.

Wyodrębniony ze środowiska naturalnego szczep pleśni Trichoderma viride poddano inkubacji na podłożu stałym zawierającym 20 części wagowych agaru i 1000 części wagowych brzeczki piwowarskiej o stężeniu 8,5°Blg, w temperaturze 30°C w czasie 7 dni. Otrzymane w wyniku inkubacji zarodki pleśni przeszczepiono na podłoże hodowlane o składzie: 1 kg wody destylowanej, 2 g NaNO3, g K2HPO4, 0,01 g Fe2(SO4)3, 0,5 g MgSO4-7H2O, 30 g glukozy, uprzednio wysterylizowane w czasie 30 minut w temperaturze 121°C. Następnie prowadzono hodowlę w temperaturze 30°C na wytrząsarce przy szybkości obrotów 240 rpm w czasie 3 dni. Wytworzoną w ten sposób biomasę oddzielono na przegrodzie filtracyjnej w warunkach sterylnych, po czym prowadzono jej dezintegrację w warunkach sterylnych, za pomocą kulek szklanych nie zawierających ołowiu, w homogenizatorze przy szybkości obrotów 12000 min-1, w czasie 5 minut w temperaturze nieprzekraczającej 4°C, stosując 1 g kulek na 100 g odciśniętej biomasy i 50 ml wody destylowanej. Do tak otrzymanego preparatu enzymatycznego, zawierającego fragmenty komórkowe, dodano płyn pohodowlany w ilości 1 część objętościowa na 1 część objętościową preparatu i całość przeniesiono do sterylnego naczynia, w którym znajdowały się próbki grafitu, uprzednio wysterylizowane w czasie 15 minut w temperaturze 121°C. Proces modyfikacji enzymatycznej grafitu prowadzono w czasie 14 dni w temperaturze 30°C. Po tym czasie wyjęto próbki z naczynia, przemyto trzykrotnie wodą destylowaną i przeniesiono do innego naczynia, zawierającego 0,1% roztwór Tritonu X-100 w wodzie, w którym poddano je działaniu ultradźwięków w czasie 45 minut. Następnie zmodyfikowane próbki grafitu przemyto wodą destylowaną i suszono w temperaturze pokojowej.The Trichoderma viride mold strain isolated from the natural environment was incubated on a solid medium containing 20 parts by weight of agar and 1000 parts by weight of brewing broth at a concentration of 8.5 ° Blg at the temperature of 30 ° C for 7 days. The mold embryos obtained as a result of incubation were transplanted onto a culture medium with the following composition: 1 kg of distilled water, 2 g of NaNO3, g of K 2 HPO 4 , 0.01 g of Fe 2 (SO 4 ) 3 , 0.5 g of MgSO 4 -7H 2 O , 30 g of glucose, previously sterilized for 30 minutes at 121 ° C. Thereafter, it was cultivated at 30 ° C on a shaker at 240 rpm for 3 days. The biomass produced in this way was separated on a filtering wall under sterile conditions, and then disintegrated under sterile conditions, using lead-free glass beads, in a homogenizer at a speed of 12000 min -1 , for 5 minutes at a temperature not exceeding 4 ° C , using 1 g of beads per 100 g of pressed biomass and 50 ml of distilled water. To the enzyme preparation obtained in this way, containing cell fragments, the post-culture fluid was added in the amount of 1 part by volume to 1 part by volume of the preparation, and the whole was transferred to a sterile vessel with graphite samples previously sterilized for 15 minutes at 121 ° C. The process of enzymatic modification of graphite was carried out for 14 days at the temperature of 30 ° C. After this time, the samples were removed from the vessel, washed three times with distilled water, and transferred to another vessel containing a 0.1% solution of Triton X-100 in water, where they were sonicated for 45 minutes. The modified graphite samples were then washed with distilled water and dried at room temperature.

Wykonano widma FT-IR grafitu po obróbce preparatem enzymów pleśni Trichoderma viride, z analizy których wynikało, iż na powierzchni grafitu występują polarne połączenia węgla i tlenu.The graphite FT-IR spectra were made after treatment with the Trichoderma viride mold enzyme preparation, the analysis of which showed that there are polar combinations of carbon and oxygen on the graphite surface.

P r z y k ł a d II.P r z x l a d II.

Wyodrębniony ze środowiska naturalnego szczep pleśni Aspergillus niger poddano inkubacji na podłożu stałym zawierającym: 1 kg wody destylowanej, 2 g NaNO3, 1 g K2HPO4, 0,01 g Fe2(SO4)3, 0,5 g MgSO4-7H2O, 30 g glukozy i 20 g agaru, w temperaturze 30°C w czasie 7 dni. Otrzymane w wyniku inkubacji zarodki pleśni przeszczepiono na podłoże hodowlane o składzie: 1 kg wody destylowanej, 2 g NaNO3, 1 g K2HPO4, 0,01 g Fe2(SO4)3, 0,5 g MgSO4-7H2O, 30 g glukozy, uprzednio wysterylizowane w czasie 30 minut w temperaturze 121°C i prowadzono hodowlę w temperaturze 30°C na wytrząsarce o szybkości obrotów 240 rpm w czasie 3 dni. Wytworzoną w ten sposób biomasę oddzielono w warunkach sterylnych na przegrodzie filtracyjnej i przeprowadzono jej dezintegrację w warunkach sterylnych, w obecności kulek szklanych nie zawierających ołowiu, w homogenizatorze przy szybkości obrotów 12000 min-1, w czasie 5 minut w temperaturze nieprzekraczającej 4°C, stosując 1 g kulek na 100 g odciśniętej biomasy i 50 ml wody destylowanej. Do tak otrzymanego preparatu enzymatycznego, zawierającego fragmenty komórkowe, dodano płyn pohodowlany w ilości 1 część objętościowa na 1 część objętościową preparatu i całość przeniesiono do sterylnego naczynia, w którym znajdowały się próbki grafitu uprzednio wysterylizowane w czasie 15 minut w temperaturze 121°C i prowadzono proces modyfikacji enzymatycznej grafitu w czasie 8 dni w temperaturze 30°C. Po tym czasie wyjęto próbki grafitu z naczynia, przemyto je trzykrotnie wodą destylowaną i przeniesiono do innego naczynia, zawierającego 0,1% roztwór Tritonu X-100 w wodzie, w którym poddano grafit działaniu ultradźwięków w czasie 45 minut. W końcu zmodyfikowane próbki grafitu przemyto wodą destylowaną i suszono w temperaturze pokojowej.The Aspergillus niger mold strain isolated from the natural environment was incubated on a solid medium containing: 1 kg of distilled water, 2 g of NaNO3, 1 g of K2HPO4, 0.01 g of Fe2 (SO4) 3, 0.5 g of MgSO 4 -7H 2 O, 30 g glucose and 20 g agar at 30 ° C for 7 days. The mold embryos obtained as a result of incubation were transplanted onto a culture medium composed of: 1 kg of distilled water, 2 g of NaNO 3 , 1 g of K 2 HPO 4 , 0.01 g of Fe 2 (SO 4 ) 3 , 0.5 g of MgSO 4 -7H 2 O, 30 g glucose, previously sterilized for 30 minutes at 121 ° C, and cultivated at 30 ° C on a shaker at 240 rpm for 3 days. The biomass produced in this way was separated under sterile conditions on a filtering wall and disintegrated under sterile conditions, in the presence of lead-free glass beads, in a homogenizer at a rotation speed of 12000 min -1 , for 5 minutes at a temperature not exceeding 4 ° C, using 1 g of beads per 100 g of pressed biomass and 50 ml of distilled water. To the enzyme preparation obtained in this way, containing cell fragments, post-culture fluid was added in the amount of 1 part by volume to 1 part by volume of the preparation, and the whole was transferred to a sterile vessel with graphite samples previously sterilized for 15 minutes at 121 ° C, and the process was carried out enzymatic modification of graphite for 8 days at 30 ° C. After this time, the graphite samples were removed from the vessel, washed three times with distilled water, and transferred to another vessel containing a 0.1% solution of Triton X-100 in water, in which the graphite was sonicated for 45 minutes. Finally, the modified graphite samples were washed with distilled water and dried at room temperature.

Wykonano widma FT-IR. grafitu po obróbce preparatem enzymów pleśni Aspergillus niger, z analizy których wynikało, iż na powierzchni grafitu występują polarne połączenia węgla i tlenu.FT-IR spectra were made. graphite after treatment with the Aspergillus niger mold enzyme preparation, the analysis of which showed that there are polar combinations of carbon and oxygen on the graphite surface.

P r z y k ł a d III.P r x l a d III.

Wyodrębniony ze środowiska naturalnego szczep pleśni Phanerochaete chrysosporium poddano inkubacji na podłożu stałym zawierającym. 1 kg wody destylowanej, 30 g bacto malt ekstraktu, 0,05 g płatków owsianych, 15 g bacto agaru, o pH 5,5, w temperaturze 30°C w czasie 7 dni. Otrzymane w wyniku inkubacji zarodki pleśni przeszczepiono na, uprzednio wysterylizowane w czasie 30 minut w temperaturze 121°C, podłoże hodowlane o składzie. 1 kg wody destylowanej, 2 g Fe2(SO4)3, 0,5 g MgSO4-7H2O, 0,1 g CaCl2-2H2O, 0,2 g winianu amonu, 10 g glukozy, 5 g malt ekstraktu, 1 mg tiaminy (dodawana po sterylizacji podłoża) i prowadzono hodowlę w temperaturze 30°C na wytrząsarce przy szybkości obrotów 240 rpm w czasie 3 dni. Wytworzoną w ten sposób biomasę oddzielono w warunkach sterylnych na przegrodzie filtracyjnej, po czym przeprowadzono jej dezintegrację w warunkach sterylnych, w obecności kulek szklanych nie zawierających ołowiu, w homogenizatorze przy szybkości obrotów 12000 min-1, w czasie 5 minut w temperaturze nieprzekraczającej 4°C, stosując 1 g kulek naThe Phanerochaete chrysosporium mold strain isolated from the natural environment was incubated on a solid medium containing. 1 kg of distilled water, 30 g of bacto malt extract, 0.05 g of oat flakes, 15 g of bacto agar, pH 5.5, at 30 ° C for 7 days. The mold spores obtained as a result of incubation were transplanted onto the previously sterilized for 30 minutes at 121 ° C, the culture medium with the following composition. 1 kg of distilled water, 2 g of Fe2 (SO4) 3, 0.5 g of MgSO 4 -7H 2 O, 0.1 g of CaCl 2 -2H 2 O, 0.2 g of ammonium tartrate, 10 g of glucose, 5 g of malt extract , 1 mg of thiamine (added after the medium was sterilized) and grown at 30 ° C on a shaker at 240 rpm for 3 days. The biomass produced in this way was separated under sterile conditions on a filtering wall, and then disintegrated under sterile conditions, in the presence of lead-free glass beads, in a homogenizer at a speed of 12000 min -1 , for 5 minutes at a temperature not exceeding 4 ° C by applying 1 g of beads on

PL 206 641 B1PL 206 641 B1

100 g odciśniętej biomasy i 50 ml wody destylowanej. Do tak otrzymanego preparatu enzymatycznego, zawierającego fragmenty komórkowe, dodano płyn pohodowlany w ilości 1 część objętościowa na 1 część objętościową preparatu i cało ść przeniesiono do sterylnego naczynia, w którym znajdowały się próbki grafitu, uprzednio wysterylizowane w czasie 15 minut w temperaturze 121°C i prowadzono proces modyfikacji enzymatycznej grafitu w czasie 14 dni w temperaturze 30°C. Następnie wyjęto próbki grafitu z naczynia, przemyto trzykrotnie wodą destylowaną i przeniesiono do innego naczynia, zawierającego 0,1% roztwór Tritonu X-100 w wodzie, w którym poddano je działaniu ultradźwięków w czasie 45 minut. W końcu zmodyfikowane próbki grafitu przemyto wodą destylowaną i suszono w temperaturze pokojowej.100 g of pressed biomass and 50 ml of distilled water. To the enzyme preparation obtained in this way, containing cell fragments, post-culture fluid was added in the amount of 1 part by volume to 1 part by volume of the preparation, and the whole was transferred to a sterile vessel with graphite samples previously sterilized for 15 minutes at 121 ° C and the process of enzymatic modification of graphite was carried out for 14 days at the temperature of 30 ° C. The graphite samples were then removed from the vessel, washed three times with distilled water, and transferred to another vessel containing a 0.1% solution of Triton X-100 in water, where they were sonicated for 45 minutes. Finally, the modified graphite samples were washed with distilled water and dried at room temperature.

Analizując widma FT-IR grafitu po obróbce preparatem enzymów pleśni Phanerochaete chrysosporium stwierdzono, iż na powierzchni grafitu występują polarne połączenia węgla i tlenu.Analyzing the graphite FT-IR spectra after treatment with the Phanerochaete chrysosporium mold enzyme preparation, it was found that on the graphite surface there are polar combinations of carbon and oxygen.

P r z y k ł a d IV.P r x l a d IV.

Wyodrębniony ze środowiska naturalnego szczep pleśni Chaetomium globosum poddano inkubacji na podłożu stałym zawierającym: 1 kg wody destylowanej, 2 g NaNO3, 1 g K2HPO4, 0,01 gThe Chaetomium globosum mold strain isolated from the natural environment was incubated on a solid medium containing: 1 kg of distilled water, 2 g of NaNO3, 1 g of K2HPO4, 0.01 g

Fe2(SO4)3, 0,5 g MgSO4-7H2O, 30 g glukozy i 20 g agaru, w temperaturze 30°C w czasie 7 dni. Otrzymane w wyniku inkubacji zarodki pleśni przeszczepiono na, uprzednio wysterylizowane w czasie 30 minut w temperaturze 121°C, podłoże hodowlane o składzie: 1 kg wody destylowanej, 2 g NaNO3, 1 g K2HPO4, 0,01 g Fe2(SO4)3, 0,5 g MgSO4-7H2O, 30 g glukozy i prowadzono hodowlę w temperaturze 30°C na wytrząsarce przy szybkości obrotów 240 rpm w czasie 3 dni. Wytworzoną w ten sposób biomasę oddzielono w warunkach sterylnych na przegrodzie filtracyjnej i prowadzono jej dezintegrację w warunkach sterylnych, w obecności kulek szklanych nie zawierających ołowiu, w homogenizatorze przy szybkości obrotów 12000 min-1 w czasie 5 minut w temperaturze nieprzekraczającej 4°C, stosując 1 g kulek na 100 g odciśniętej biomasy i 50 ml wody destylowanej. Do tak otrzymanego preparatu enzymatycznego, zawierającego fragmenty komórkowe, dodano płyn pohodowlany w ilości 1 część objętościowa na 1 część objętościową preparatu i całość przeniesiono do sterylnego naczynia, w którym znajdowały się, uprzednio wysterylizowane w czasie 15 minut w temperaturze 121°C, próbki grafitu i prowadzono proces modyfikacji enzymatycznej grafitu w czasie 8 dni w temperaturze 30°C. Następnie wyjęto próbki grafitu z naczynia, przemyto trzykrotnie wodą destylowaną i przeniesiono do innego naczynia, zawierającego 0,1% roztwór Tritonu X-100 w wodzie, w którym poddawano je działaniu ultradźwięków w czasie 45 minut. W końcu zmodyfikowane próbki grafitu przemyto wodą destylowaną i suszono w temperaturze pokojowej.Fe 2 (SO 4 ) 3 , 0.5 g MgSO 4 -7H 2 O, 30 g glucose and 20 g agar at 30 ° C for 7 days. The mold spores obtained as a result of incubation were transplanted onto a culture medium, previously sterilized for 30 minutes at 121 ° C, with the following composition: 1 kg of distilled water, 2 g of NaNO3, 1 g of K 2 HPO 4 , 0.01 g of Fe 2 (SO 4 ) 3.5 g MgSO 4 -7H 2 O, 30 g glucose and cultivated at 30 ° C on a shaker at 240 rpm for 3 days. The biomass produced in this way was separated under sterile conditions on a filtering wall and disintegrated under sterile conditions, in the presence of lead-free glass beads, in a homogenizer at a rotation speed of 12000 min -1 for 5 minutes at a temperature not exceeding 4 ° C, using 1 g of beads per 100 g of pressed biomass and 50 ml of distilled water. To the enzyme preparation obtained in this way, containing cell fragments, the post-culture fluid was added in the amount of 1 part by volume to 1 part by volume of the preparation, and the whole was transferred to a sterile vessel containing previously sterilized for 15 minutes at 121 ° C, graphite samples and the process of enzymatic modification of graphite was carried out for 8 days at the temperature of 30 ° C. The graphite samples were then removed from the vessel, washed three times with distilled water, and transferred to another vessel containing a 0.1% solution of Triton X-100 in water, where they were sonicated for 45 minutes. Finally, the modified graphite samples were washed with distilled water and dried at room temperature.

Analizując widma FT-IR grafitu po obróbce preparatem enzymów pleśni Chaetomium globosum stwierdzono, iż na powierzchni grafitu występują polarne połączenia węgla i tlenu.By analyzing the FT-IR spectra of graphite after treatment with the Chaetomium globosum mold enzyme preparation, it was found that on the graphite surface there are polar combinations of carbon and oxygen.

P r z y k ł a d V.P r z k ł a d V.

Wyodrębniony ze środowiska naturalnego szczep pleśni Fusarium oxysporum poddano inkubacji na podłożu stałym zawierającym: 1 kg wody destylowanej, 2 g NaNO3, 1 g K2HPO4, 0,01 g Fe2(SO4)3, 0,5 g MgSO4-7H2O, 30 g glukozy i 20 g agaru, w temperaturze 30°C w czasie 7 dni. Otrzymane w wyniku inkubacji zarodki pleśni przeszczepiono na, uprzednio wysterylizowane w czasie 30 minut w temperaturze 121°C, podłoże hodowlane o składzie: 1 kg wody destylowanej, 2 g NaNO3, 1 g K2HPO4, 0,01 g Fe2(SO4)3, 0,5 g MgSO4-7H2O, 30 g glukozy i prowadzono hodowlę w temperaturze 30°C na wytrząsarce przy szybkości obrotów 240 rpm w czasie 3 dni. Wytworzoną biomasę oddzielono w warunkach sterylnych na przegrodzie filtracyjnej i następnie poddano dezintegracji w warunkach sterylnych w obecności kulek szklanych nie zawierających ołowiu, w homogenizatorze przy szybkości obrotów 12000 min-1 w czasie 5 minut w temperaturze nieprzekraczającej 8°C, stosując 1 g kulek na 100 g odciśniętej biomasy i 50 ml wody destylowanej. Do tak otrzymanego preparatu enzymatycznego, zawierającego fragmenty komórkowe, dodano płyn pohodowlany w ilości 1 część objętościowa na 1 część objętościową preparatu i całość przeniesiono do sterylnego naczynia, w którym znajdowały się próbki grafitu wysterylizowane w czasie 15 minut w temperaturze 121°C i prowadzono proces modyfikacji enzymatycznej grafitu w czasie 8 dni w temperaturze 30°C. Następnie próbki grafitu wyjęto z naczynia, przemyto trzykrotnie wodą destylowaną i przeniesiono do naczynia zawierającego 0,1% roztwór Tritonu X-100 w wodzie, w którym poddano je działaniu ultradźwięków w czasie 45 minut. W końcu zmodyfikowane próbki grafitu przemyto wodą destylowaną i suszono w temperaturze pokojowej.The Fusarium oxysporum mold strain isolated from the natural environment was incubated on a solid medium containing: 1 kg of distilled water, 2 g of NaNO3, 1 g of K2HPO4, 0.01 g of Fe 2 (SO 4 ) 3 , 0.5 g of MgSO 4 -7H 2 O , 30 g glucose and 20 g agar at 30 ° C for 7 days. The mold spores obtained as a result of incubation were transplanted onto a culture medium, previously sterilized for 30 minutes at 121 ° C, with the following composition: 1 kg of distilled water, 2 g of NaNO3, 1 g of K 2 HPO 4 , 0.01 g of Fe 2 (SO 4 ) 3.5 g MgSO 4 -7H 2 O, 30 g glucose and cultivated at 30 ° C on a shaker at 240 rpm for 3 days. The biomass produced was separated under sterile conditions on a filtering wall and then disintegrated under sterile conditions in the presence of lead-free glass beads, in a homogenizer at a rotation speed of 12000 min -1 for 5 minutes at a temperature not exceeding 8 ° C, using 1 g of beads per 100 g of pressed biomass and 50 ml of distilled water. To the enzyme preparation obtained in this way, containing cell fragments, post-culture fluid was added in the amount of 1 part by volume to 1 part by volume of the preparation, and the whole was transferred to a sterile vessel with graphite samples sterilized for 15 minutes at 121 ° C, and the modification process was carried out. graphite enzyme during 8 days at 30 ° C. The graphite samples were then removed from the vessel, washed three times with distilled water, and transferred to a vessel containing a 0.1% solution of Triton X-100 in water, where they were sonicated for 45 minutes. Finally, the modified graphite samples were washed with distilled water and dried at room temperature.

Analizując widma FT-IR grafitu po obróbce preparatem enzymów pleśni Fusarium oxysporum stwierdzono, iż na powierzchni grafitu występują polarne połączenia węgla i tlenu.By analyzing the FT-IR spectra of graphite after treatment with the Fusarium oxysporum mold enzyme preparation, it was found that on the graphite surface there are polar combinations of carbon and oxygen.

PL 206 641 B1PL 206 641 B1

P r z y k ł a d VI.P r x l a d VI.

Wyodrębniony ze środowiska naturalnego szczep bakterii Pseudomonas fluorescens poddano inkubacji na podłożu stałym zawierającym 1 kg wody destylowanej i 23 g nutrient agaru (Difco), o pH=6,3, w temperaturze 30°C w czasie 1 dnia. Uaktywnione komórki bakterii przeszczepiono na, uprzednio wysterylizowane w czasie 30 minut w temperaturze 121°C, podłoże hodowlane o składzie: 1 kg wody destylowanej, 3 g ekstraktu woł owego, 5 g peptonu i prowadzono hodowlę w temperaturze 30°C na wytrząsarce przy szybkości obrotów 240 rpm w czasie 3 dni. Wytworzoną biomasę oddzielono w drodze wirowania (10000xg) w warunkach sterylnych, po czym poddano ją dezintegracji w warunkach sterylnych, w obecności kulek szklanych nie zawierających ołowiu, w homogenizatorze przy szybkości obrotów 12000 min-1, w temperaturze nieprzekraczającej 4°C w czasie 5 minut, stosując 1 g kulek na 20 g odciśniętej biomasy i 50 ml wody destylowanej. Do tak otrzymanego preparatu enzymatycznego, zawierającego fragmenty komórkowe, dodano płyn pohodowlany w ilości 1 część objętościowa na 1 część objętościową preparatu, całość przeniesiono do sterylnego naczynia, w którym znajdowały się, wysterylizowane w czasie 15 minut w temperaturze 121°C, próbki grafitu i prowadzono proces modyfikacji enzymatycznej tych próbek w czasie 8 dni w temperaturze 30°C. Próbki grafitu pokryte twardymi warstwami węglowymi wyjęto z naczynia, przemyto trzykrotnie wodą destylowaną i przeniesiono do innego naczynia zawierającego 0,1% roztwór detergentu SEKUMATIC®FC w wodzie, w którym poddawano je 50 minutowej sonifikacji przy amplitudzie 40 i pulsacji 4. Nast ę pnie zmodyfikowane próbki grafitu przemyto wodą destylowaną i suszono w temperaturze pokojowej.The Pseudomonas fluorescens bacterial strain isolated from the natural environment was incubated on a solid medium containing 1 kg of distilled water and 23 g of nutrient agar (Difco), pH = 6.3, at the temperature of 30 ° C for 1 day. The activated bacterial cells were transplanted onto the culture medium, previously sterilized for 30 minutes at 121 ° C, with the following composition: 1 kg of distilled water, 3 g of beef extract, 5 g of peptone, and cultivation was carried out at 30 ° C on a shaker at the speed of rotation 240 rpm for 3 days. The biomass produced was separated by centrifugation (10,000 x g) under sterile conditions, and then disintegrated under sterile conditions, in the presence of lead-free glass beads, in a homogenizer at the rotation speed of 12,000 min -1 , at a temperature not exceeding 4 ° C for 5 minutes. , using 1 g of beads per 20 g of pressed biomass and 50 ml of distilled water. To the enzyme preparation obtained in this way, containing cell fragments, post-culture fluid was added in the amount of 1 part by volume to 1 part by volume of the preparation, the whole was transferred to a sterile vessel in which there were graphite samples sterilized for 15 minutes at 121 ° C and conducted the process of enzymatic modification of these samples during 8 days at 30 ° C. The graphite samples covered with hard carbon layers were removed from the vessel, washed three times with distilled water and transferred to another vessel containing a 0.1% solution of SEKUMATIC®FC detergent in water, where they were sonicated for 50 minutes at amplitude 40 and pulsed 4. Then modified graphite samples were washed with distilled water and dried at room temperature.

Analizując widma FT-IR grafitu po obróbce preparatem enzymów bakterii Pseudomonas fluorescens stwierdzono, iż na powierzchni grafitu występują polarne połączenia węgla i tlenu.Analyzing the graphite FT-IR spectra after treatment with the enzyme preparation of Pseudomonas fluorescens bacteria, it was found that on the graphite surface there are polar combinations of carbon and oxygen.

Claims (8)

Zastrzeżenia patentowePatent claims 1. Sposób modyfikacji grafitu, znamienny tym, że grafit, uprzednio wysterylizowany, umieszcza się w preparacie enzymatycznym stanowiącym mieszaninę biomasy pochodzącej z hodowli wyizolowanego ze środowiska naturalnego szczepu pleśni Trichoderma viride, Aspergillus niger, Phanerochaete chrysosporium, Chaetomium globosum lub Fusarium orysporum względnie szczepu bakterii Pseudomonas fluorescens, oddzielonej w warunkach sterylnych na przegrodzie filtracyjnej oraz zdezintegrowanej w warunkach sterylnych, z płynem pohodowlanym pochodzącym z tej hodowli, zmieszanych w stosunku objętościowym 1:1, umieszczonym w wysterylizowanym naczyniu i pozostawia w tym preparacie na czas 8-48 dni w temperaturze 10-50°C, następnie grafit przemywa się kilkakrotnie wodą destylowaną, oczyszcza z materiału biologicznego w łaźni ultradźwiękowej lub sonifikatorze w 0,05 -2% roztworze wodnym detergentu w czasie 5-120 minut, po czym znów przemywa wodą destylowaną i suszy w temperaturze pokojowej.A method of graphite modification, characterized in that the graphite, previously sterilized, is placed in an enzyme preparation consisting of a mixture of biomass derived from the cultivation of a mold strain of Trichoderma viride, Aspergillus niger, Phanerochaete chrysosporium, Chaetomium globosum or Fusarium orysporum or a strain of Pseudomonas bacteria isolated from the natural environment fluorescens, separated in sterile conditions on the filtering wall and disintegrated under sterile conditions, with the culture fluid from this culture, mixed in a 1: 1 volume ratio, placed in a sterilized vessel and left in this preparation for 8-48 days at a temperature of 10- 50 ° C, then the graphite is washed several times with distilled water, purified from biological material in an ultrasonic bath or sonicator in 0.05-2% detergent aqueous solution for 5-120 minutes, then washed again with distilled water and dried at room temperature. 2. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że szczep pleśni Trichoderma viride inkubuje się na podłożu stałym zawierającym 15-40 części wagowych agaru i 1000 części wagowych brzeczki piwowarskiej o stężeniu 5-12°Blg, w temperaturze 20-45°C w czasie 2-7 dni i hoduje na wysterylizowanym podłożu hodowlanym o składzie: 1 kg wody destylowanej, 1-4 g NaNO3, 0,5-2 g K2HPO4,2. The method according to p. The process of claim 1, wherein the mold strain Trichoderma viride is incubated on a solid medium containing 15-40 parts by weight of agar and 1000 parts by weight of brewing broth at a concentration of 5-12 ° Blg at 20-45 ° C for 2-7 days and grows on sterilized culture medium with the following composition: 1 kg of distilled water, 1-4 g of NaNO3, 0.5-2 g of K2HPO4, 0,005-0,1 g Fe2(SO4)3, 0,2-1 g MgSO4-7H2O, 10-50 g glukozy, w temperaturze 20-45°C na wytrząsarce przy szybkości obrotów 100-350 rpm w czasie 2-7 dni.0.005-0.1 g Fe 2 (SO 4 ) 3 , 0.2-1 g MgSO 4 -7H 2 O, 10-50 g glucose, at 20-45 ° C on a shaker at 100-350 rpm in time of 2-7 days. 3. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że szczep pleśni Aspergillus niger inkubuje się na podłożu stałym zawierającym: 1 kg wody destylowanej, 1-4 g NaNO3, 0,5-2 g K2HPO4, 0,005-0,1 g Fe2(SO4)3, 0,2-1 g MgSO4-7H2O, 10-50 g glukozy i 15-40 g agaru, w temperaturze 20-45°C w czasie 2-8 dni i hoduje na wysterylizowanym podłożu hodowlanym o składzie: 1 kg wody destylowanej, 1-4 g NaNO3, 0,5-2 g K2HPO4, 0,005-0,1 g Fe2(SO4)3, 0,2-1 g MgSO4-7H2O, 10-50 g glukozy, w temperaturze 20-45°C na wytrząsarce przy szybkości obrotów 100-340 rpm w czasie 2-8 dni.3. The method according to p. The method of claim 1, characterized in that the Aspergillus niger mold strain is incubated on a solid medium containing: 1 kg of distilled water, 1-4 g of NaNO3, 0.5-2 g of K2HPO4, 0.005-0.1 g of Fe 2 (SO 4 ) 3 , 0.2-1 g of MgSO 4 -7H 2 O, 10-50 g of glucose and 15-40 g of agar at the temperature of 20-45 ° C for 2-8 days and grown on sterilized culture medium with the following composition: 1 kg of water distilled, 1-4 g NaNO 3 , 0.5-2 g K 2 HPO 4 , 0.005-0.1 g Fe 2 (SO 4 ) 3 , 0.2-1 g MgSO 4 -7H 2 O, 10-50 g glucose at 20-45 ° C on a shaker at 100-340 rpm for 2-8 days. 4. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że szczep pleśni Phanerochaete chrysosporium inkubuje się na podłożu stałym zawierającym: 1 kg wody destylowanej, 10-50 g bacto malt ekstraktu, 0,01-0,2 g płatków owsianych, 10-40 g bacto agaru, o pH 5-7, w temperaturze 20-45°C w czasie 2-8 dni i hoduje na wysterylizowanym podłożu hodowlanym o składzie: 1 kg wody destylowanej, 1-4 g K2HPO4, 0,2-2 g MgSO4-7H2O, 0,05-0,5 g CaCl2-2H2O, 0,05-0,5 g winianu amonu, 5-20 g glukozy, 1-10 g malt ekstraktu, 0,1-3 mg tiaminy dodawanej po sterylizacji podłoża, w temperaturze 20-45°C na wytrząsarce przy szybkości obrotów 100-340 rpm w czasie 2-8 dni.4. The method according to p. The method of claim 1, characterized in that the mold strain Phanerochaete chrysosporium is incubated on a solid medium containing: 1 kg of distilled water, 10-50 g of bacto malt extract, 0.01-0.2 g of oat flakes, 10-40 g of bacto agar, pH 5-7, at a temperature of 20-45 ° C for 2-8 days and grown on a sterilized culture medium with the following composition: 1 kg of distilled water, 1-4 g of K 2 HPO 4 , 0.2-2 g of MgSO 4 -7H 2 O, 0.05-0.5 g CaCl 2 -2H 2 O, 0.05-0.5 g ammonium tartrate, 5-20 g glucose, 1-10 g malt extract, 0.1-3 mg added thiamine after sterilization of the medium at 20-45 ° C on a shaker at 100-340 rpm for 2-8 days. PL 206 641 B1PL 206 641 B1 5. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że szczep pleśni Chaetomium globosum inkubuje się na podłożu stałym zawierającym: 1 kg wody destylowanej, 1-3 g NaNO3, 0,5-2 g K2HPO4, 0,0055. The method according to p. The method of claim 1, characterized in that the Chaetomium globosum mold strain is incubated on a solid medium containing: 1 kg of distilled water, 1-3 g of NaNO3, 0.5-2 g of K2HPO4, 0.005 -0,1 g Fe2(SO4)3, 0,1-1 g MgSO4-7H2O, 20-40 g glukozy i 10-30 g agaru, w temperaturze 20-45°C w czasie 3-8 dni i hoduje na wysterylizowanym podłożu hodowlanym o składzie: 1 kg wody destylowanej, 1-3 g NaNO3, 0,5-2 g K2HPO4, 0,005-0,1 g Fe2(SO4)3, 0,1-1 g MgSO4-7H2O, 20-40 g glukozy, w temperaturze 20-45°C na wytrząsarce przy szybkości obrotów 100-340 rpm w czasie 3-8 dni.-0.1 g Fe 2 (SO 4 ) 3 , 0.1-1 g MgSO 4 -7H 2 O, 20-40 g glucose and 10-30 g agar, at a temperature of 20-45 ° C during 3-8 days and grown on a sterilized culture medium composed of: 1 kg of distilled water, 1-3 g of NaNO 3 , 0.5-2 g of K 2 HPO 4 , 0.005-0.1 g of Fe 2 (SO 4 ) 3 , 0.1 -1 g MgSO 4 -7H 2 O, 20-40 g glucose, at 20-45 ° C on a shaker at 100-340 rpm for 3-8 days. 6. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że szczep pleśni Fusarium oxysporum inkubuje się na podłożu stałym zawierającym: 1 kg wody destylowanej, 1-3 g NaNO3, 0,5-2 g K2HPO4, 0,005 -0,1 g Fe2(SO4)3, 0,1-1 g MgSO4-7H2O, 20-40 g glukozy i 10-30 g agaru, w temperaturze 20-45°C w czasie 3-8 dni i hoduje na wysterylizowanym podłożu hodowlanym o składzie: 1 kg wody destylowanej, 1-3 g NaNO3, 0,5-2 g K2HPO4, 0,005-0,1 g Fe2(SO4)3, 0,1-1 g MgSO4-7H2O, 20-40 g glukozy, w temperaturze 20-45°C na wytrząsarce przy szybkości obrotów 100-340 rpm w czasie 3-8 dni.6. The method according to p. The method of claim 1, characterized in that the Fusarium oxysporum mold strain is incubated on a solid medium containing: 1 kg of distilled water, 1-3 g of NaNO3, 0.5-2 g of K2HPO4, 0.005-0.1 g of Fe 2 (SO 4 ) 3 , 0.1-1 g MgSO 4 -7H 2 O, 20-40 g glucose and 10-30 g agar at 20-45 ° C for 3-8 days and grown on sterilized culture medium with the following composition: 1 kg of water distilled, 1-3 g NaNO 3 , 0.5-2 g K 2 HPO 4 , 0.005-0.1 g Fe 2 (SO 4 ) 3 , 0.1-1 g MgSO 4 -7H 2 O, 20-40 g glucose at 20-45 ° C on a shaker at 100-340 rpm for 3-8 days. 7. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że szczep bakterii Pseudomonas fluorescens inkubuje się na podłożu stałym zawierającym 1 kg wody destylowanej i 15-30 g nutrient agaru, o pH=6-7, w temperaturze 20-45°C w czasie 1-3 dnia i hoduje na wysterylizowanym podłożu hodowlanym o składzie: 1 kg wody destylowanej, 2-6 g ekstraktu wołowego, 3-8 g peptonu, w temperaturze 20-45°C na wytrząsarce przy szybkości obrotów 100-340 rpm w czasie 2-5 dni.7. The method according to p. The method of claim 1, characterized in that the bacterial strain Pseudomonas fluorescens is incubated on a solid medium containing 1 kg of distilled water and 15-30 g nutrient agar, pH = 6-7, at 20-45 ° C for 1-3 days and cultivated on a sterilized culture medium with the following composition: 1 kg of distilled water, 2-6 g of beef extract, 3-8 g of peptone, at the temperature of 20-45 ° C, on a shaker at the rotation speed of 100-340 rpm for 2-5 days. 8. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że biomasę poddaje się dezintegracji w temperaturze nie przekraczającej 0-4°C, korzystnie przy użyciu kulek szklanych nie zawierających ołowiu stosując korzystnie 1-3 g kulek na 100 g odciśniętej biomasy i 50 ml wody destylowanej, w homogenizatorze przy szybkości obrotów 5000-18000 min-1, w czasie nie dłuższym niż 5 minut.8. The method according to p. A process according to claim 1, characterized in that the biomass is disintegrated at a temperature not exceeding 0-4 ° C, preferably using lead-free glass beads, preferably using 1-3 g of the beads per 100 g of pressed biomass and 50 ml of distilled water, in a homogenizer at a speed of revolutions 5000-18000 min -1 , in no more than 5 minutes. Departament Wydawnictw UP RPPublishing Department of the Polish Patent Office
PL375124A 2005-05-16 2005-05-16 Method for the modification of graphite PL206641B1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PL375124A PL206641B1 (en) 2005-05-16 2005-05-16 Method for the modification of graphite

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PL375124A PL206641B1 (en) 2005-05-16 2005-05-16 Method for the modification of graphite

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL375124A1 PL375124A1 (en) 2006-11-27
PL206641B1 true PL206641B1 (en) 2010-09-30

Family

ID=40561348

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL375124A PL206641B1 (en) 2005-05-16 2005-05-16 Method for the modification of graphite

Country Status (1)

Country Link
PL (1) PL206641B1 (en)

Also Published As

Publication number Publication date
PL375124A1 (en) 2006-11-27

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Abdel-Nasser et al. Evaluation of the efficiency of nanoparticles for increasing α-amylase enzyme activity for removing starch stain from paper artifacts
CN104508118A (en) Microbial fermentation methods and compositions
US4476881A (en) Microbial digestion of tobacco materials using mixed cultures
Abd El-Rahim et al. Highly efficient fungal pectinase and laccase producers among isolates from flax retting liquor
CN107475154A (en) The bacterial strains of SMXP 03 and its application for protein in tobacco leaf of degrading
CN104388351A (en) Preparation method of natural colorless biological mildew-proof anticorrosive bactericide
CN104080732B (en) Thermophilic enzyme and generation thereof and using method
CN106690395A (en) Bacterium enzyme mixed preparation containing bacillus subtilis bacterial strain SMXP-58
Bera et al. Optimization of the conditions for immobilization of crude pectinase on chitin using ultrasound and glutaraldehyde and its application in grape juice clarification
PL206641B1 (en) Method for the modification of graphite
CN102146348A (en) Homoserinelactone-producing acinetobacter calcoaceticus and application thereof
CN106399184B (en) A kind of alkalophilic bacillus NTT33C6 producing constitutive mannanase and its application
AU2917602A (en) Gel
PL206643B1 (en) Method for the modification of hard coal coatings
JP6108331B2 (en) Hydrocarbon high-yield alga bodies and method for producing the same
Mojsov Experimental investigations of submerged fermentation and synthesis of pectinolytic enzymes by Aspergillus niger: effect of inoculums size and age of spores
Dabai et al. Cassava starch as an alternative to agar-agar in microbiological media
Singh et al. Chitinase production by Serratia marcescens GG5
CN101580825A (en) New application of producing high-activity cellulase by taking sclerotium rolfsii as strain
Guleria et al. Optimization of cultural conditions for cellulase-free xylanase production by mutant strain of alkalophilic Cellulosimicrobium sp
CN106434476A (en) High-yield strain for alkaline pectinase and application of high-yield strain
PL206642B1 (en) Method for the modification of graphite
PL206644B1 (en) Method for the modification of hard coal coatings
CN104585011A (en) Method for promoting porphyra haitanensis conchospore adhesion and germination
JP2014088548A (en) Clarifier of oil contaminated soil

Legal Events

Date Code Title Description
LAPS Decisions on the lapse of the protection rights

Effective date: 20080516