PL157486B1

PL157486B1 - Method of obtaining mycose prevention and parasite killing preparations and mycose preventing and parasite killing preparation in particular for fighting against varrose jacobsoni oud

Info

Publication number: PL157486B1
Application number: PL26959387A
Authority: PL
Inventors: Tadeusz Wolski; Zdzislaw Glinski; Marek Chmielewski
Original assignee: Akad Medyczna
Priority date: 1987-12-18
Filing date: 1987-12-18
Publication date: 1992-06-30
Also published as: PL269593A1

Abstract

The method of producing a medical preparation preventing mycosis and destroying parasites, particularly Varroa jacobsoni Oud., characterized in that the waste product of the krill treatment - chitin is deacetylated up to at least 20% of the deacetylation degree, and further the obtained product is dissolved in an organic acid, preferably formic acid or acetic acid up to the concentration of 10-70 μg/ml, preferably 20-40 μg/ml, and the solution is mixed with liquid wax in the mount of 20-80 μg of an active substance/ml of wax, preferably 30-50 μg of active substance/ml of wax and the foundation is then squeezed out.

Description

Przedmiotem wynalazku jest sposób otrzymywania preparatu zapobiegającego powstawaniu grzybicy otorbielakowej czerwia pszczoły miodnej, wywołanej przez Ascosphaera apis oraz niszczącego pasożyty, zwłaszcza Varroa jacobsoni Oud.The subject of the invention is a method for the preparation of a preparation preventing the formation of Honeybee enemycosis caused by Ascosphaera apis and destroying parasites, especially Varroa jacobsoni Oud.

Obecnie w zwalczaniu grzybicy otorbielakowej czerwia są wykorzystywane zasadniczo dwa preparaty, a mianowicie amfoterycyna 8 i nystatyna. Antybiotyki te cechują się niską aktywnością terapeutyczną, względnie dużą toksycznością dla czerwia i pszczół. Istnieje przy tym możliwość zanieczyszczenia miodu przeznaczonego do konsumpcji /przy zalecanych dotychczas metodach aplikacji/ co może powodować zarówno bliskie jak i odległe skutki u konsumentów w postaci alergoz, pojawienia się szczepów grzybów i drożdży opornych na wyżej wymienione leki. Nie obojętna jest również wysoka cena tych preparatów. W zwalczaniu inwazji Varroa jacobsoni Oud stosuje się najczęściej preparaty zawierające amitrazę i związki fosforoorganiczne. Stosowanie tych preparatów stwarza niebezpieczeństwo zanieczyszczenia miodu konsumpcyjnego, a także wywiera działanie odległe na pszczoły, czerw i matkę.Currently, two preparations, namely amphotericin 8 and nystatin, are essentially used in the treatment of brood ringworm. These antibiotics are characterized by low therapeutic activity and relatively high toxicity to brood and bees. There is a possibility of contamination of honey intended for consumption (with the methods of application recommended so far), which can cause both near and long-term effects on consumers in the form of allergies, the emergence of fungal and yeast strains resistant to the above-mentioned drugs. The high price of these preparations is also not indifferent. Preparations containing amitrase and organophosphorus compounds are most often used to combat Varroa jacobsoni Oud infestation. The use of these preparations creates a risk of contamination of the consumption honey, and has a distant effect on bees, brood and queen.

Preparaty te ponadto, szczególnie apivarol i varrosekt nie wykazują zadowalających efektów terapeutycznych. Skuteczność ich działania leczniczego ograniczona jest także wpływem czynników środowiskowych na rodzinę pszczelą, poddawaną zabiegom terapeutycznym, takim jak odpowiednia temperatura zewnętrzna czy pora dnia. Nieobojętny jest również wpływ pozostałości środków leczniczych w miodzie konsumpcyjnym, co może powodować niekorzystne oddziaływanie na zdrowie ludzi.Moreover, these preparations, especially apivarol and varrosect, do not show satisfactory therapeutic effects. The effectiveness of their therapeutic effects is also limited by the influence of environmental factors on the bee colony undergoing therapeutic treatments, such as appropriate external temperature or time of day. The influence of remnants of medicinal substances in consumer honey is also not indifferent, which may have adverse effects on human health.

Wynalazek rozwiązuje zagadnienie otrzymywania preparatu o skutecznym działaniu przeć i wgrzybicznym, jak również o działaniu niszczącym Varroa jacobsoni Oud., zwłaszcza w fazie rozwojowej, nie wykazującego bezpośredniej szkodliwości na organizm ludzki oraz korzystnego ze względu na metodę aplikacji leku w rodzinie pszczelej. Opisany efekt osiągnięto dzięki stwierdzeniu, że odpadowe produkty przeróbki kryla, to jest chityna i jej odpowiednio odacetylowana pochodna - chitozan wykazują interesujące działanie biologiczne, które przejawia się niszczącym działaniem zwłaszcza na formy rozwojowe Varroa jacobsoni. Produkty te dająThe invention solves the problem of obtaining a preparation with an effective action and fungal activity, as well as with the destructive effect of Varroa jacobsoni Oud, especially in the development phase, showing no direct harmfulness to the human body and beneficial due to the method of drug application in a bee colony. The described effect was achieved thanks to the statement that the waste products of krill processing, i.e. chitin and its appropriately deacetylated derivative - chitosan, exhibit interesting biological activity, which manifests itself in a destructive effect, especially on the developmental forms of Varroa jacobsoni. These products give

157 406 również ciekawe efekty biologiczne, które przejawiają się działaniem hamującym i niszczącym zarodniki i formy wegetatywne Ascosphaera apis.157 406 also have interesting biological effects that are manifested by inhibiting and destroying the spores and vegetative forms of Ascosphaera apis.

Istota sposobu według wynalazku polega na tym, że chitynę odacetylowuje się do co najmniej 20¾ stopnia odacettlowania, po czym uzyskany produkt rozpuszcza się w kwasie organicznym, korzystnie mrówkowym lub octowym do stężenia 10 - 70 pg/ml, zwłaszcza 20 - 40 pg/ml i roztwór miesza się z woskiem płynnym w ilości 20 - Θ0 pg substancji czynnej/ml wosku, korzystnie 30 - 50 pg substancji czynnej/ml wosku i wyciska się węzę pszczelą.The essence of the method according to the invention is that the chitin is deacetylated to at least 20¾ deacetylation degree, and then the obtained product is dissolved in an organic acid, preferably formic or acetic acid, to a concentration of 10 - 70 pg / ml, especially 20 - 40 pg / ml and the solution is mixed with liquid wax in an amount of 20 - Θ0 µg active ingredient / ml of wax, preferably 30 - 50 µg active ingredient / ml of wax, and the bee node is extruded.

Alternatywnie, sposobem według wynalazku można otrzymać preparat o podobnym działaniu, stosując jako substancje wyjściowe mieszaninę chityny i jej odpowiednio odacetylowanej pochodnej - chitozanu.Alternatively, a preparation with a similar effect can be obtained by the method of the invention, starting from a mixture of chitin and its appropriately deacetylated derivative - chitosan.

Sposób według rozwiązania alternatywnego polega na tym, że sporządza się mieszaninę chityny o co najmniej 20¾ stopni odacetylowania oraz surowej chityny w stosunku wagowym 2:1, następnie mieszaninę rozpuszcza się w kwasie organicznym, zwłaszcza w mrówkowym lub octowym do uzyskania stężenia 20 - 80 pg/ml, korzystnie 30 - 50 pg/ml i miesza się w płynnym woskiem pszczelim w ilości 200 - 100 pg substancji czynnej/ml wosku, korzystnie 30 - 70 pg substancji czynnej/ml wosku, po czym wyciska się węzę pszczelą.The method according to an alternative solution consists in preparing a mixture of chitin of at least 20¾ degrees of deacetylation and raw chitin in a weight ratio of 2: 1, then the mixture is dissolved in an organic acid, especially in formic or acetic acid, to obtain a concentration of 20-80 pg / ml, preferably 30-50 µg / ml, are mixed with 200-100 µg of active ingredient / ml of wax, preferably 30-70 µg of active ingredient / ml of wax, in liquid beeswax, and the bee knot is extruded.

Oznaczenia minimalnego stężenia hamującego /MIC/ i minimalnego stężenia grzybobójczego /MFC/ przeprowadzono w stosunku do 8 szczepów Ascosphaera apis metodą rozcieńcesó preparatu w podłożu wzrostowym, wykazały, że średnie miano hamujące wzrost patogena wynosi 1,5 pg/ml, zaś średnie miano grzybobójcze 5 pg/ml.The determinations of the minimum inhibitory concentration (MIC) and the minimum fungicidal concentration (MFC) were performed on 8 Ascosphaera apis strains by the method of dilution of the preparation in the growth medium, showed that the average titer inhibiting the growth of the pathogen is 1.5 pg / ml, and the average fungicidal titer is 5 pg / ml.

Zastosowana metoda zwalczania inwazji Varroa jacobsoni, polegająca na wstawieniu do rodziny pszczelej węzy zawierającej chitozan lub mieszaninę chitozanu i chityny, przewyższa swoją skutecznością dotychczas stosowane w kraju leki akarycydne, powołując przy tym równocześnie likwidację grzybicy w rodzinach zakażonych Ascosphaera apis. Ponadto osiąga się niszczenie postaci rozwojowych pasożyta, niezależnie od wpływu warunków środowiskowych, stosuje się niższe jednorazowe dawki preparatu niż dotychczas stosowane oraz jak już podano, preparat nie jest toksyczny dla czerwia i pszczół i nie jest szkodliwy dla konsumentów miodu.The method of combating Varroa jacobsoni infestation, consisting in inserting a snake containing chitosan or a mixture of chitosan and chitin into the bee colony, is more effective than the acaricidal drugs used in the country, and at the same time eliminating mycosis in families infected with Ascosphaera apis. Moreover, the destruction of the developmental forms of the parasite is achieved, regardless of the influence of environmental conditions, lower single doses of the preparation are used than those used so far, and as already stated, the preparation is not toxic to brood and bees and is not harmful to honey consumers.

Przykład I. 5g chityny odacetylowano za pomocą 30¾ ługu potasowego, dodanego w ilości 50 g. Proces odacetllowanla prowadzono przez ogrzewanie w temperaturze 80 - 90°C w czasie 4 godzin. Po tym czasie całość mieszaniny przesączono i przemyto wodą demineralizowaną do uzyskania pH przesączu^ 7.Osad wysuszono i rozpuszczono w kwasie mrówkowym o stężeniu 95¾ do uzyskania stężenia 70 pg/ml. Uzyskany w ten sposób roztwór dodawano do płynnego wosku, do uzyskania stężenia 50 pg substancji czynnej na ml wosku, po czym wyciskano węzę pszczelą. Preparat zastosowany w leczeniu Varroa jacobsoni wykazał 90¾ skuteczności w zwalczaniu pasożytów dojrzałych i jego form rozwojowych.Example 1 5 g of chitin was deacetylated with 30 of potassium hydroxide solution added in the amount of 50 g. The deacetylation process was carried out by heating at 80-90 ° C for 4 hours. After this time, the mixture was filtered and washed with demineralized water until the filtrate had a pH of? 7. The precipitate was dried and dissolved in 95¾ formic acid to obtain a concentration of 70 µg / ml. The solution obtained in this way was added to the liquid wax to obtain a concentration of 50 µg of active ingredient per ml of wax, and the bee knot was squeezed out. The preparation used in the treatment of Varroa jacobsoni showed 90¾ effectiveness in combating mature parasites and its developmental forms.

Przykład II. 3 g chitozanu uzyskano jak w przykładzie I, zmieszano z 1,5 g odpadowej chityny, otrzymanej z przeróbki kryla, po czym tak otrzymaną mieszaninę rozpuszczono w kwasie octowym bezwodnym do uzyskania roztworu o stężeniu 60 pg/ml. Roztwór ten dodawano do płynnego wosku w ilości 40 pg substancji czynnej/ml płynnego wosku i wyciskano węzę pszczelą. Zastosowana węza pszczela do zwalczania inwazji Varroa jacobsoni dała ponad 90¾ efektywności w niszczeniu postaci dojrzałych i form rozwojowych pasożyta przy praktycznie całkowitym braku działania toksycznego i repelentnego dla czerwia i pszczół.Example II. 3 g of chitosan was obtained as in Example 1, mixed with 1.5 g of chitin waste obtained from the processing of krill, and then the mixture thus obtained was dissolved in anhydrous acetic acid to obtain a solution with a concentration of 60 pg / ml. This solution was added to the liquid wax at a rate of 40 µg active ingredient / ml of liquid wax and the bee knot was pressed out. The bee snake used to combat Varroa jacobsoni infestation gave over 90¾ effectiveness in destroying the mature forms and developmental forms of the parasite with practically no toxic and repellant activity for brood and bees.

Obydwie postaci preparatu w badanym okresie nie wpływały ujemnie na czerwienie matki i wychów czerwia.Both forms of the preparation in the studied period did not negatively influence the mother's reds and brood rearing.

157 486157 486

Zakład Wydawnictw UP RP. Nakład 90 egz . Cena 5000 zł.Department of Publishing of the UP RP. Circulation of 90 copies Price PLN 5,000.

Claims

Patent claims

1. The method of obtaining a preparation preventing the formation of mycoses and destroying parasites, especially Varroa jacobsoni Oud., Characterized in that the chitin, which is a waste product of krill processing, is deacetylated to at least 20¾ deacetylation degree, and then the obtained product is dissolved in organic acid, especially formic acid or acetic acid to a concentration of 10-70 µg / ml, preferably 20-40 µg / ml, and the solution is then mixed with the liquid wax in an amount of 20-80 µg of active ingredient per ml of wax, preferably 30-50 µg of active ingredient / ml of wax, and pressed bee knot.

2. The method of obtaining the preparation preventing the formation of mycoses and destroying parasites, especially Varroa jacobsoni Oud., Characterized in that the chitin, which is a waste product of krill processing, is deacetylated to at least 20¾ deacetylation degree, then the obtained product is mixed with raw chitin in a weight ratio 2: 1, then the mixture is dissolved in an organic acid, especially acetic or formic acid, to a concentration of 10 - 80 pg / ml, preferably 30 - 50 pg / ml, and mixed with liquid beeswax in an amount of 20 - 100 pg of active substance per ml of wax, preferably 30-70 µg of active ingredient / ml of wax, followed by extruding the honeycomb.

* * ♦