NO860752L - Pentapeptider med cellevekstregulerende virkning og fremgangsmaate for fremstilling derav. - Google Patents
Pentapeptider med cellevekstregulerende virkning og fremgangsmaate for fremstilling derav.Info
- Publication number
- NO860752L NO860752L NO860752A NO860752A NO860752L NO 860752 L NO860752 L NO 860752L NO 860752 A NO860752 A NO 860752A NO 860752 A NO860752 A NO 860752A NO 860752 L NO860752 L NO 860752L
- Authority
- NO
- Norway
- Prior art keywords
- pentapeptide
- formula
- pentapeptides
- amino acid
- cell growth
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 4
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 title description 7
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 title description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 11
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 5
- 125000001433 C-terminal amino-acid group Chemical group 0.000 claims description 4
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 claims description 4
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 claims description 4
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 4
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 claims description 3
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 claims description 3
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 claims description 3
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 claims description 3
- 229920001577 copolymer Chemical class 0.000 claims description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 17
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 11
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 210000000270 basal cell Anatomy 0.000 description 9
- 210000002615 epidermis Anatomy 0.000 description 8
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 8
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 6
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 5
- MYRTYDVEIRVNKP-UHFFFAOYSA-N 1,2-Divinylbenzene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1C=C MYRTYDVEIRVNKP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- NUIURNJTPRWVAP-UHFFFAOYSA-N 3,3'-Dimethylbenzidine Chemical compound C1=C(N)C(C)=CC(C=2C=C(C)C(N)=CC=2)=C1 NUIURNJTPRWVAP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 4
- -1 hydrochlorides Chemical class 0.000 description 4
- 230000000394 mitotic effect Effects 0.000 description 4
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N trifluoroacetic acid Substances OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N Fluorane Chemical compound F KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229910004373 HOAc Inorganic materials 0.000 description 3
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000032823 cell division Effects 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 3
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 3
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 3
- 208000017520 skin disease Diseases 0.000 description 3
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 3
- ODHCTXKNWHHXJC-VKHMYHEASA-N 5-oxo-L-proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCC(=O)N1 ODHCTXKNWHHXJC-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000012404 In vitro experiment Methods 0.000 description 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 2
- 201000004681 Psoriasis Diseases 0.000 description 2
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N anisole Chemical compound COC1=CC=CC=C1 RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000006727 cell loss Effects 0.000 description 2
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 2
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 2
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 2
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 2
- NNJPGOLRFBJNIW-HNNXBMFYSA-N (-)-demecolcine Chemical compound C1=C(OC)C(=O)C=C2[C@@H](NC)CCC3=CC(OC)=C(OC)C(OC)=C3C2=C1 NNJPGOLRFBJNIW-HNNXBMFYSA-N 0.000 description 1
- ARSRBNBHOADGJU-UHFFFAOYSA-N 7,12-dimethyltetraphene Chemical compound C1=CC2=CC=CC=C2C2=C1C(C)=C(C=CC=C1)C1=C2C ARSRBNBHOADGJU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VFZRZRDOXPRTSC-UHFFFAOYSA-N DMBA Natural products COC1=CC(OC)=CC(C=O)=C1 VFZRZRDOXPRTSC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NNJPGOLRFBJNIW-UHFFFAOYSA-N Demecolcine Natural products C1=C(OC)C(=O)C=C2C(NC)CCC3=CC(OC)=C(OC)C(OC)=C3C2=C1 NNJPGOLRFBJNIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 229920004459 Kel-F® PCTFE Polymers 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 206010067482 No adverse event Diseases 0.000 description 1
- 102000015636 Oligopeptides Human genes 0.000 description 1
- 108010038807 Oligopeptides Proteins 0.000 description 1
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 1
- ODHCTXKNWHHXJC-GSVOUGTGSA-N Pyroglutamic acid Natural products OC(=O)[C@H]1CCC(=O)N1 ODHCTXKNWHHXJC-GSVOUGTGSA-N 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- ODHCTXKNWHHXJC-UHFFFAOYSA-N acide pyroglutamique Natural products OC(=O)C1CCC(=O)N1 ODHCTXKNWHHXJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010004398 benign neoplasm of skin Diseases 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000000711 cancerogenic effect Effects 0.000 description 1
- 235000011089 carbon dioxide Nutrition 0.000 description 1
- 231100000357 carcinogen Toxicity 0.000 description 1
- 239000003183 carcinogenic agent Substances 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 description 1
- 125000001309 chloro group Chemical group Cl* 0.000 description 1
- UUAGAQFQZIEFAH-UHFFFAOYSA-N chlorotrifluoroethylene Chemical compound FC(F)=C(F)Cl UUAGAQFQZIEFAH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000002808 connective tissue Anatomy 0.000 description 1
- 125000002933 cyclohexyloxy group Chemical group C1(CCCCC1)O* 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 210000004207 dermis Anatomy 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 210000001339 epidermal cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000000981 epithelium Anatomy 0.000 description 1
- 235000019439 ethyl acetate Nutrition 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 150000003840 hydrochlorides Chemical class 0.000 description 1
- 229910000040 hydrogen fluoride Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 1
- UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N methoxybenzene Substances CCCCOC=C UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007922 nasal spray Substances 0.000 description 1
- 229940097496 nasal spray Drugs 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- OXNIZHLAWKMVMX-UHFFFAOYSA-N picric acid Chemical compound OC1=C([N+]([O-])=O)C=C([N+]([O-])=O)C=C1[N+]([O-])=O OXNIZHLAWKMVMX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 1
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 1
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000008844 regulatory mechanism Effects 0.000 description 1
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 1
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 1
- 201000000849 skin cancer Diseases 0.000 description 1
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
- C07K7/06—Linear peptides containing only normal peptide links having 5 to 11 amino acids
- C07K7/067—Hemoregulatory peptides based on sequence Glp-Glu-Asp-Cys-Lys
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S930/00—Peptide or protein sequence
- Y10S930/01—Peptide or protein sequence
- Y10S930/12—Growth hormone, growth factor other than t-cell or b-cell growth factor, and growth hormone releasing factor; related peptides
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Public Health (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
Denne oppfinnelse angår nye pentapeptider som reversibelt vil hemme celleveksten i plate-epitel, og fremgangsmåte for fremstilling av slike pentapeptider.
Mange hudforstyrrelser kjennetegnes ved en unormalt hurtig cellevekst i epidermis. Innen denne kategori av hudlidelser er psoriasis den som er best undersøkt. Celleveksten skjer her •meget raskt, og cellene får ikke tilstrekkelig tid til å modnes på normal måte og avstøtes fra overflaten mens de ennu har sin kjerne. Ved mange andre hudlidelser er celleveksten sterkt øket, men ingen av disse har vært gjenstand for så omfattende undersøk-elser som psoriasis. Også i de fleste godartede og ondartede hudtumorer av epidermal opprinnelse finner man en høy mitotisk aktivitet.
I den normale epidermis er alle celledelinger (mitoser) begrenset til det nederste cellelag (det basale .cellelag) som ligger an mot det underliggende lag av bindevev (dermis). Efter at en basal celle har delt seg i. to datterceller, vil den ene av dattercellene - gjenomsnittlig - holde seg i basal-cellelaget, mens den annen gradvis modnes (keratiniseres) eftersom den passerer opp gjennom de forskjellige lag av epidermis. Den når overflaten som en fullstendig keratinisert celle uten kjerne og avstøtes til slutt. I voksen epidermis er det antall celler som avstøtes fra overflaten over et visst tidsrom, i nøyaktig balanse med dannelsen av nye celler i det basale cellelag. Bare på denne måte kan en konstant tykkelse av epidermis opprettholdes. Hvis et stort antall epidermale celler plutselig går tapt, f.eks. efter skade, øker celledelingshastigheten i det basale cellelag efter en kort forsinkelsesperiode. Efter en tid som er avhengig av graden av celletap, vil epidermis ha gjenvunnet sin opprinne-lige, normale tykkelse. En rekke forsøks-serier har vist at balansen mellom celletap' og cellefornyelse i epidermis reguleres biologisk i henhold til et negativt tilbake-informasjonsprinsipp (negativ "feed-back"). I et slikt system danner cellene under modning kontinuerlig en inhibitor som diffunderer ned til det basale cellelag hvor den hemmer cellevekst-hastigheten. Konsentrasjonen av inhibitor i det basale cellelag er avhengig av antall modne eller modnende celler. Når således modne celler går tapt fra overflaten, avtar konsentrasjonen av inhibitor, slik at de basale celler får anledning til å dele seg hurtigere. Til en viss grad synes denne reguleringsmekanisme å være virksom selv i maligne svulster.
Vi har nu funnet at de keratiniserende celler danner en inhibitor (eller en gruppe av inhibitorer) som er av peptid-natur. Vi har også vært i stand til å isolere og fastlegge strukturen av slike forbindelser. Nærmere bestemt har vi renset, identifisert kjemisk og syntetisert pentapeptider som ved undersøkelse med hensyn til biologisk aktivitet in vivo reversibelt hemmer cellevekst-hastigheten i det basale cellelag, f.eks. ved administrering til mus. Videre, har in vitro forsøk vist at selv celler med en etablert cellelinje hemmes av disse pentapeptider ved meget lave konsentrasjoner. Denne cellelinje stammer fra muse-epidermis behandlet med et hudcarcinogen (DMBA). Kontinuerlig behandling in vitro vil stanse celledelinger fullstendig over en periode på flere dager i normale, keratiniserende epitelceller, mens omdannede celler bare delvis hemmes. I begge tilfeller er hemningen fullstendig reversibel når behandlingen avsluttes. In vitro forsøk har også vist at både normale og omdannede celler modnes (keratiniseres) hurtigere ved avslutning av en 24 timers behandling med et av de nye pentapeptider. Ingen toksiske virkninger er iaktatt hverken in vivo eller in vitro ved de undersøkte konsentrasjoner.
Ifølge oppfinnelsen tilveiebringes et pentapeptid med formel
hvor X 1 og X 2 er like eller forskjellige og er OH eller NH2,
Y er H eller OH,
X<3>er CO eller CH_,
1 2
en av gruppene Z og Z er H og den annen er H eller CH^,
idet alle aminosyreleddene er i L-konfigurasjon, bortsett fra at det C-terminale aminosyreledd er i D-konfigurasjon når Z 2 er metyl,
og den C-terminale karboksylgruppe kan være redusert til
-CH2-OH eller i amidform -CO-NH2.
og kationkomplekser og salter derav.
Egnede kationkomplekser er særlig komplekser med Zn<++>, Ca<++>, Mg<+>v og Mn . Egnede salter er syreaddisjonssalter, f.eks. hydro-klorider, og alkali-, jordalkali- og aminsalter som er fysio-logisk godtagbare. De følgende aminosyreledd kan således inngå i pentapeptidet, regnet fra den C-terminale ende:
I den følgende tabell I er det som eksempler beskrevet in vivo resultater (forandring i epidermal mitotisk hastighet hos mus) for 3 forskjellige av de nye pentapeptider. Den epidermale mitotiske hastighet ble målt i de første 3 timer efter intra-peritoneal injeksjon av de nye pentapeptider. Mitotisk hastighet ble fastlagt ved hjelp av "Colcemid". Redusert hastighet ble bestemt som en prosentdel i forhold til kontrolldyr fra samme bur.
De nye pentapeptider kan på i og for seg kjent måte inn-arbeides i farmasøytiske preparater, f.eks. som tabletter, injeksjonsoppløsninger, nese-spraypreparater eller stikkpiller.
Forbindelsene med formel I kan fremstilles ved at en forbindelse med formel I hvor eventuelt tilstedeværende karbok-sylgrupper, aminogrupper eller hydroksylgruppe er beskyttet, underkastes en behandling for å fjerne beskyttelsesgruppen(e).
Ved oppbygning av pentapeptidet kan man f.eks. anvende en av de klassiske koblingsmetoder som er publisert i den omfattende .og vel kjente peptidlitteratur. Generelt vil enhver reaktiv • gruppe (f.eks. amino, hydroksyl og/eller karboksyl) som ikke skal inngå i peptidbinding, holdes beskyttet under hele syntesen, og det siste trinn vil således være avblokkering av et fullstendig beskyttet derivat av detønskede sluttprodukt. For koblings-trinnene hvor de enkelt beskyttede aminosyrer bindes sammen, kan en rekke forskjellige kjente metoder benyttes, og disse er beskrevet i detalj i den omfattende litteratur vedrørende peptidsyntese. Imidlertid foretrekkes her å fremstille de forskjellige peptider ved den såkalte fast-fase-metdde, som ansees som hensiktsmessig for fremstilling av oligopeptider og deres analoger på hurtig måte og med gode utbytter. Ved denne metode, som først ble innført av R.B. Merrifield i 1963, holdes den voksende peptidkjede bundet til en fast polymerbærer, og syntesen starter med å binde den C-terminale aminosyre til polymeren. De vanligste aminosyrer bundet til en polymer bærer er kommersielt tilgjengelig. Den neste aminosyre kobles derefter til denne polymer-bundne aminosyre ved en gjentatt syklus med avblokkering, vasking og kobling. På denne måte bygges hele peptidet opp i polymer-bundet form, og i det siste trinn av-spaltes sluttproduktet fra polymeren ved hjelp av et egnet reagens (vanligvis flussyre, HF). I det følgende er et typisk eksempel på en fast-fase-peptidsyntese beskrevet.
Polymerbærer:
Som fast bærer kan f.eks. anvendes enten
- klormetylert polystyren, fornettet med 2% divinylbenzen, "mesh" størrelse 200-400 med klorsubstitusjon på 0,3-1,5 mekv./g, eller -benzhydrylaminharpiks, også fornettet med 2% divenylbenzen, "mesh" størrelse 200-400 med NH2substitusjon på
0,3-1,5 mekv./g.
I det følgende eksempel er det benyttet en kommersielt tilgjengelig klormetylert polymer hvor aminogruppe-beskyttet glycin
er ferdig påkoblet.
Eksempel: Syntese av pGlu-Glu-Asp-Ala-Gly
2 mmol Boc-Gly-Rx ble anvendt som utgangsmateriale, og de følgende aminosyrer ble tilsatt i henhold til de vanlige prin-sipper for fast-fase-peptidsyntese:
Boc-Ala l,13g
Boc-Asp(OcHex) l,80g
Boc-Glu (OcHex) l,90g
pGlu 0,90g
Følgende syklus ble anvendt:
Vasking 3 ganger med metylenklorid (1 min.)
Vasking 1 gang med 40% TFA (1 min.)
Avblokkering med 40% TFA (30 min.)
Vasking 1 gang med metylenklorid (1 min.)
Vasking 1 gang med etanol (1 min.)
Vasking 2 ganger med metylenklorid (1 min.)
Vasking 1 gang med 10% TEA (1 min.)
Nøytralisering med 10% TEA (10 min.)
Vasking 3 ganger med metylenklorid (1 min.)
Tilsetning av 3 ganger molart overskudd av Boc-aminosyre og
DCC
Kobling i 3 timer.
Ved den siste syklus ble pyroglutaminsyren vasket i 30 minutter med 10% TFA istedenfor med 40% fordi det ikke var nødvendig med avblokkering.
Forkortelser: TFA = trifluoreddiksyre,
TEA = trietylamin,
Boe = t-butoksykarbonyl,
DCC = dicykloheksylkarbodiimid,
Rx = polymerbærer,
OcHex = cykloheksyloksy.
Hydrogenfluorid-behandling:
3,8 g tørket polymer med pentapeptid bundet til seg ble anbragt i et Kel-F reaksjonskar og fuktet med ca. 10 nil anisol. Reaksjonskaret ble avkjølt ved hjelp av tørr-is/aceton, og 40 ml HF ble destillert over til reaksjonskaret. Polymeren med bundet .pentapeptid ble derefter omrørt ved 0° i 45 minutter, hvorefter 'HF ble avdampet. Polymeren ble derefter vasket med eter og ekstrahert med 10% eddiksyre, og ekstrakten ble lyofilisert.
Alle de her beskrevne pentapeptider er fremstilt fra de passende beskyttede aminosyrer på lignende måte. I tabell II er de fysikalsk-kjemiske data for disse peptider angitt.
Forklaringer til tabell II
Tynnskiktkromatografi (TLC) - systemer
51 : Silika: nBuOH:EtOAc:HOAc:H20 (1:1:1:1)
Påvisning: o-tolidin
52 : Silika Fm: n-BuOH:Pyr:HOAc:H20(6:6:1,2:4,8)
Påvisning: o-tolidin
S3: Silika F: n-BuOH:Pyr:HOAc:H20(15:10:3:12)
Påvisning: o-tolidin
Elektroforese - system
Whatman 3MM Pyridin: eddiksyre, pH 6,4, 1500V, 1 time Påvisning: o-tolidin
Flekk vandret mot anoden
Rf verdi i forhold til arginin
a) Rf verdi i forhold til pikrinsyre.
Høy-ydelse væskekromatografi (HPLC) - systemer
Sl : Kolonne C-18
Strømningshastighet: 1 ml/min Løsningsmiddel: A 0,1% TFA, B 60% CH3CN i A Gradient: liniær, 0 til 100% B i 40 min. Detektor: UV 210 nm.
S2: Kolonne C-18
Strømningshastighet: 1 ml/min Løsningsmiddel: A 0.05 M NaH2PC>4, B 60% CH3CN i'A Gradient: liniær, 0 til 100% B i 40 min.
Detektor: UV 210 nm
Rentensjonstid (RT) i min.
Claims (6)
1. Nytt pentapeptid, karakterisert ved formelen
hvor X og X er'like eller forskjellige og er OH eller NH2 ,
Y er H eller OH,
X3 er CO eller CH-,
1 2
en av gruppene Z og Z er H og den annen H eller CH3 ,
idet alle aminosyreleddene er i L-konfigurasjon, bortsett fra at det C-terminale aminosyreledd er i D-konfigurasjon når Z 2 er metyl,
og den C-terminale karboksylgruppe kan være redusert til
-CH2 -OH eller er i amidform -CO-NH2 ,
og kationkomplekser og salter derav.
2. Pentapeptid ifølge krav 1,
karakterisert ved at det har formel I hvor X <1> er OH, X <2> er OH, Y er OH, Z1 er H og Z <2> er H.
3. Pentapeptid ifølge krav 1,
karakterisert ved at det har formel I hvor X1 er NH2, X2 er OH. Y er OH, Z <1> er H og Z <2> er H.
4. Pentapeptid ifølge krav 1,
karakterisert , ved at det har formel I hvor X^" er OH, X2 er OH, Y er H, Z1 er H og Z <2> er H.
5. Fremgangsmåte for fremstilling av forbindelse med formel I ifølge krav 1, karakterisert ved at et beskyttet derivat av nevnte forbindelse underkastes avblokkering.
6. Fremgangsmåte ifølge krav 1,
karakterisert ved at pentapeptidet, eventuelt i beskyttet.form, bygges opp ved hjelp av fast-fase-peptidsyntese hvor den C-terminale aminosyre først knyttes til den faste bærer og derefter de øvrige aminosyrer i ønsket rekkefølge.
Priority Applications (12)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| NO860752A NO860752L (no) | 1985-06-26 | 1986-02-28 | Pentapeptider med cellevekstregulerende virkning og fremgangsmaate for fremstilling derav. |
| JP61503343A JP2577730B2 (ja) | 1985-06-26 | 1986-06-18 | 細胞成長調節効果を有するペンタペプチド類およびその製造法 |
| EP86903626A EP0228404B1 (en) | 1985-06-26 | 1986-06-18 | Pentapeptides with cell growth regulatory effects and a process for the preparation thereof |
| AT86903626T ATE41014T1 (de) | 1985-06-26 | 1986-06-18 | Pentapeptide mit zellenwachstumsregulierender wirkung sowie herstellung. |
| AU59642/86A AU584438B2 (en) | 1985-06-26 | 1986-06-18 | Pentapeptides with cell growth regulatory effects and a process for the preparation thereof |
| DE8686903626T DE3662198D1 (en) | 1985-06-26 | 1986-06-18 | Pentapeptides with cell growth regulatory effects and a process for the preparation thereof |
| US07/030,959 US4794169A (en) | 1985-06-26 | 1986-06-18 | Pentapeptides with cell growth regulatory effects and a process for the preparation thereof |
| PCT/NO1986/000041 WO1987000180A1 (en) | 1985-06-26 | 1986-06-18 | Pentapeptides with cell growth regulatory effects and a process for the preparation thereof |
| CA000512369A CA1298435C (en) | 1985-06-26 | 1986-06-25 | Pentapeptides with cell growth regulatory effects and a process for the preparation thereof |
| NO870673A NO159279C (no) | 1985-06-26 | 1987-02-19 | Analogifremgangsmaate til fremstilling av pentapeptider med cellevekstregulerende virkning. |
| FI870811A FI86861C (fi) | 1985-06-26 | 1987-02-25 | Foerfarande foer framstaellning av pentapeptider med en cellvaextreglerande effekt |
| DK096987A DK96987D0 (da) | 1985-06-26 | 1987-02-25 | Pentapeptider med cellevaekstregulerende virkning og fremgangsmaade til fremstilling deraf |
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| NO852564 | 1985-06-26 | ||
| NO860752A NO860752L (no) | 1985-06-26 | 1986-02-28 | Pentapeptider med cellevekstregulerende virkning og fremgangsmaate for fremstilling derav. |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| NO860752L true NO860752L (no) | 1986-12-29 |
Family
ID=26647910
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| NO860752A NO860752L (no) | 1985-06-26 | 1986-02-28 | Pentapeptider med cellevekstregulerende virkning og fremgangsmaate for fremstilling derav. |
Country Status (10)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4794169A (no) |
| EP (1) | EP0228404B1 (no) |
| JP (1) | JP2577730B2 (no) |
| AU (1) | AU584438B2 (no) |
| CA (1) | CA1298435C (no) |
| DE (1) | DE3662198D1 (no) |
| DK (1) | DK96987D0 (no) |
| FI (1) | FI86861C (no) |
| NO (1) | NO860752L (no) |
| WO (1) | WO1987000180A1 (no) |
Families Citing this family (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| NO884054D0 (no) * | 1988-09-13 | 1988-09-13 | Bio Tech As | Nytt pentapeptid og fremgangsmaate for fremstilling derav. |
| GB8821785D0 (en) * | 1988-09-16 | 1988-10-19 | Nycomed As | Peptide compounds |
| HU206374B (en) * | 1990-09-03 | 1992-10-28 | Richter Gedeon Vegyeszet | Process for producing pentapeptide and its salts specifically inhibiting proliferation of epidermic cells, as well as pharmaceutical compositions comprising same as active ingredient |
| TW222280B (no) * | 1991-11-26 | 1994-04-11 | Smithkline Beecham Corp | |
| GR1001502B (el) * | 1992-11-26 | 1994-02-28 | Smithkline Beecham Corp | Αιμορυ?μιστικά πεπτίδια. |
| ES2052447B1 (es) * | 1992-12-14 | 1995-01-16 | Smithkline Beecham Corp | Peptidos hemorreguladores. |
| US7041506B2 (en) | 2001-11-19 | 2006-05-09 | Becton Dickinson And Company | Peptides promoting cell adherence, growth and secretion |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FI77875C (fi) * | 1982-11-26 | 1989-05-10 | Nyegaard & Co As | Foerfarande foer framstaellning av nya terapeutiskt anvaendbara peptider. |
-
1986
- 1986-02-28 NO NO860752A patent/NO860752L/no unknown
- 1986-06-18 EP EP86903626A patent/EP0228404B1/en not_active Expired
- 1986-06-18 AU AU59642/86A patent/AU584438B2/en not_active Ceased
- 1986-06-18 US US07/030,959 patent/US4794169A/en not_active Expired - Fee Related
- 1986-06-18 JP JP61503343A patent/JP2577730B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1986-06-18 WO PCT/NO1986/000041 patent/WO1987000180A1/en active IP Right Grant
- 1986-06-18 DE DE8686903626T patent/DE3662198D1/de not_active Expired
- 1986-06-25 CA CA000512369A patent/CA1298435C/en not_active Expired - Lifetime
-
1987
- 1987-02-25 FI FI870811A patent/FI86861C/fi not_active IP Right Cessation
- 1987-02-25 DK DK096987A patent/DK96987D0/da not_active Application Discontinuation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP0228404B1 (en) | 1989-03-01 |
| DE3662198D1 (en) | 1989-04-06 |
| AU584438B2 (en) | 1989-05-25 |
| US4794169A (en) | 1988-12-27 |
| CA1298435C (en) | 1992-03-31 |
| JPS62503170A (ja) | 1987-12-17 |
| FI86861B (fi) | 1992-07-15 |
| WO1987000180A1 (en) | 1987-01-15 |
| DK96987A (da) | 1987-02-25 |
| EP0228404A1 (en) | 1987-07-15 |
| FI86861C (fi) | 1992-10-26 |
| FI870811A0 (fi) | 1987-02-25 |
| JP2577730B2 (ja) | 1997-02-05 |
| DK96987D0 (da) | 1987-02-25 |
| AU5964286A (en) | 1987-01-30 |
| FI870811A (fi) | 1987-02-25 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| NO158021B (no) | Analogifremgangsmaate ved fremstilling av terapeutisk aktivt d-fenylalanyl-l-prolyl-l-argininaldehydsulfat. | |
| RU2223967C2 (ru) | Ингибиторы фактора VIIa | |
| CA1236786A (en) | Peptide compounds | |
| US4261886A (en) | Peptides having thymopoietin-like activity | |
| AU661003B2 (en) | Hexapeptide | |
| NO860752L (no) | Pentapeptider med cellevekstregulerende virkning og fremgangsmaate for fremstilling derav. | |
| DK161835B (da) | Grf-analoge peptider og farmaceutisk acceptable salte deraf samt middel indeholdende disse | |
| US3749703A (en) | Asn15-bovine thyrocalcitonin | |
| NO122483B (no) | ||
| Park et al. | Characterization of angiotensin receptors in vascular and intestinal smooth muscles | |
| NO148070B (no) | Analogifremgangsmaate ved fremstilling av nye, terapeutisk aktive angiotensin ii analoger | |
| US4868156A (en) | Pharmaceutical preparation containing a dipeptide with cell growth regulating effect | |
| US3309353A (en) | L-pyroglutamyl-l-prolyl-l-seryl-l-lysyl-l-spartyl-l-alanyl-l-phenylalanyl-l-isoleucyl-glycyl-l-leucyl-l-methioninamide and its acid addition salts with protective groupson the epsilon-amino radical of lysine | |
| DK149093B (da) | Analogifremgangsmaade til fremstilling af pentapeptidderivater eller farmaceutisk acceptable salte deraf | |
| JPH0631314B2 (ja) | 新規なゴナドリベリン誘導体 | |
| US4672054A (en) | Process for the preparation of angiotensin-II analogues substituted in the 1-, 5- and 8- positions | |
| JPS63198698A (ja) | 新規ペプチド、その製法およびそれを含有する医薬組成物 | |
| JPS60105697A (ja) | ペプチド及びその製造方法並びに該ペプチドを含有する医薬 | |
| NO751605L (no) | ||
| AU2010299079A1 (en) | Eye drops | |
| US4271152A (en) | Psycho-pharmacological peptides | |
| US4587233A (en) | Use of Arg-Phe-amide derivatives | |
| RU2087480C1 (ru) | Производные пептидов и способ их получения | |
| DK148303B (da) | Fremgangsmaade til fremstilling af cysteinholdige peptider | |
| Yajima et al. | Studies on Peptides. XIII. Contribution of the Arginine Residue in L-Histidyl-L-phenylalanyl-L-arginyl-L-tryptophyl-glycine to Its Melanotripic Activity |