NO762586L - - Google Patents
Info
- Publication number
- NO762586L NO762586L NO762586A NO762586A NO762586L NO 762586 L NO762586 L NO 762586L NO 762586 A NO762586 A NO 762586A NO 762586 A NO762586 A NO 762586A NO 762586 L NO762586 L NO 762586L
- Authority
- NO
- Norway
- Prior art keywords
- precipitate
- methanol
- supernatant
- temperature
- iii
- Prior art date
Links
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 67
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims description 40
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 20
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims description 17
- 102000006395 Globulins Human genes 0.000 claims description 13
- 108010044091 Globulins Proteins 0.000 claims description 13
- 108010074605 gamma-Globulins Proteins 0.000 claims description 12
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 claims description 11
- 108010051456 Plasminogen Proteins 0.000 claims description 9
- 102000013566 Plasminogen Human genes 0.000 claims description 9
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 8
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 8
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 7
- 102000008946 Fibrinogen Human genes 0.000 claims description 6
- 108010049003 Fibrinogen Proteins 0.000 claims description 6
- 229940012952 fibrinogen Drugs 0.000 claims description 6
- 208000002672 hepatitis B Diseases 0.000 claims description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 5
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims description 4
- 238000001816 cooling Methods 0.000 claims description 3
- 230000003053 immunization Effects 0.000 claims description 2
- 238000002649 immunization Methods 0.000 claims description 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 claims 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 claims 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 16
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 description 12
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 description 12
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 9
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 8
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 8
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 6
- 108010087504 Beta-Globulins Proteins 0.000 description 5
- 239000008351 acetate buffer Substances 0.000 description 5
- 239000000463 material Substances 0.000 description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- BPYKTIZUTYGOLE-IFADSCNNSA-N Bilirubin Chemical compound N1C(=O)C(C)=C(C=C)\C1=C\C1=C(C)C(CCC(O)=O)=C(CC2=C(C(C)=C(\C=C/3C(=C(C=C)C(=O)N\3)C)N2)CCC(O)=O)N1 BPYKTIZUTYGOLE-IFADSCNNSA-N 0.000 description 4
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 239000005457 ice water Substances 0.000 description 4
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 4
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 4
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 4
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 4
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- 102000006734 Beta-Globulins Human genes 0.000 description 3
- 206010023126 Jaundice Diseases 0.000 description 3
- 102100027378 Prothrombin Human genes 0.000 description 3
- 108010094028 Prothrombin Proteins 0.000 description 3
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 3
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 3
- 230000035931 haemagglutination Effects 0.000 description 3
- 229940036107 hepatitis b immunoglobulin Drugs 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- 229940039716 prothrombin Drugs 0.000 description 3
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- 108010068307 Alpha-Globulins Proteins 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010019799 Hepatitis viral Diseases 0.000 description 2
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 2
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 2
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 2
- 229910001220 stainless steel Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000010935 stainless steel Substances 0.000 description 2
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 2
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 2
- 201000001862 viral hepatitis Diseases 0.000 description 2
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 102000002572 Alpha-Globulins Human genes 0.000 description 1
- 241000700721 Hepatitis B virus Species 0.000 description 1
- 102000003929 Transaminases Human genes 0.000 description 1
- 108090000340 Transaminases Proteins 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- 229960000074 biopharmaceutical Drugs 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000397 disodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019800 disodium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 1
- 230000000521 hyperimmunizing effect Effects 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 1
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 1
- -1 isoalutinins Proteins 0.000 description 1
- 150000002576 ketones Chemical class 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 208000019423 liver disease Diseases 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 230000002085 persistent effect Effects 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 230000001376 precipitating effect Effects 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N propan-1-ol Chemical compound CCCO BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001436 propyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 1
- 230000001568 sexual effect Effects 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/08—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses
- C07K16/081—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses from DNA viruses
- C07K16/082—Hepadnaviridae, e.g. hepatitis B virus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10S436/804—Radioisotope, e.g. radioimmunoassay
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10S436/82—Hepatitis associated antigens and antibodies
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
- Y10S530/827—Proteins from mammals or birds
- Y10S530/829—Blood
- Y10S530/83—Plasma; serum
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
- Y10S530/827—Proteins from mammals or birds
- Y10S530/829—Blood
- Y10S530/83—Plasma; serum
- Y10S530/831—Cohn fractions
Description
Fremgangsmåte til fremstilling av et hepatitis
B immunglobulin.
Foreliggende oppfinnelse vedrører fremstilling av
et nytt gammaglobulin og mer spesielt en fremgangsmåte til fremstilling av et nytt spesifikt hyperimmunt gammaglobulin betegnet hepatitis B immunglobulin.
Siden dets. første rapporterte bruk i 1945 av Neefe, J.R., og Stokes, J.Jr. i "Journal of the American Medical Associ-ation", 145, 128, 1063, har nesten alle normale immunglobulinpreparater for mennesker hatt verdi i profylaksen av hepatitis ty-e A. Normalglobulin har blitt anbefalt for rutinebruk for hindring av sekundære tilfeller blant utsatte hustandskontakter. Bare tilfeldige partier har vist seg å ha en effektivitet under standard for dette formål.
Verdien av slike normale globulinpreparater har derimot for profylakse av hapatitis B virus (HBV)-infeksjon lenge vært et spørsmål. Se f.eks. Mosley, J.W., Galabos, J.T. "Diseases of the Liver" (utgitt av L. Schiff); side 410, Philadelphia, 1969 og National Academy og Sciences - "National Research Council Comittee on Viral Hepatitis", Morbidity and Mortality Weekly Report, 1972, 21, 133. De forskjellige konklusjoner fra de forskjellige undersøkelser av effektivitet til normale glubulinpreparater for hindring av hepatitis type B, kan ha resultert fra en rekke faktorer, inkludert variasjoner i konsentrasjonen av spesifikke antilegemer (anti-HBg) i de benyttede partier, og diagnoseupå-litelighet ved studier forut for testing av hapatitis B overflate-antigen (HB2Ag). Det er imidlertid bred enighet om at effektiv propylakse med normalglobulin er for utstadig til å berettige en anbefaling at det kan anvendes i forsøk på å hindre type B-sykdom.
Den spesifikke evne til å diagnostisere type B hepatitis frembragte den erkjennelse at fortsatt nær kontakt med bærere, kan resultere i en overføring innenfor husstanden, og dette har enda mer ansporet interessen for' oppnåelse av et immunoglobulin som effektivt kunne immunsiére mot B-typen av
sykdommen.
Ifølge oppfinnelsen tilveiebringes derfor et slikt materiale samt en fremgangsmåte til dets fremstilling og anvendelse av materiale for immunisering av mottagelige verter.
Det nye anti-HBg immungammaglobulin ifølge oppfinnelsen er rent og er vesentlig fritt for fibrinogen, 19 S globulin, plasminogen og lipider. Det fremstilles fra menneskeplasma inneholdende fortrinnsvis en høy titer av det antilegemet. En fagmann kan lett identifisere og oppnå et slikt plasma som utgangsmater-iale. Som kjent inneholder mennesekplasma mange komponenter slik som albumin, plasminogen, alfa-, beta- og gammeglobuliner og forskjellige lipider. Fraksjonen av et slikt materiale for oppnåelse av den ønskede komponent ifølge oppfinnelsen , er avhengig av opp-løseligheten av forskjellige komponenter i plasmaet ved forskjellige trinn og under forskjellige betingelser.
Ved hvert trinn i fraksjoneringen bestemmes separer-ingen av fraksjonen og den sluttlige fjerning av de komponenter som er uønsket i anti-HBs~globulinet ut fra nøye kontroll av pH-verdi, temperatur, konsentrasjon av utfellingsmidlet og system-ets ionestyrke. Oppfinnelsen anvender derfor en rekke trinn,for å bevirke fjerning av de komponenter som er uønsket via reguler-ing av betingelser som forandrer oppløseligheten til disse
komponenter.
Forskjellige organiske oppløsningsmidler med lav dielektrisk konstant slik som ketoner og alkoholer, utfeller pro-teiner og har blitt benyttet ved fraksjonering av plasma. Det organiske oppløsningsmiddel som anvendes ved foreliggende fremgangsmåte er fortrinnsvis metanol, skjønt andre lavere alkanoler. slik som etanol go propanol kan anvendes. Evnen til å opprett-holde de kritiske ionestyrker ved de forskjellige trinn i fraksjoneringen, lettes ved bruk av metanol. Når andre oppløsnings-midler anvendes, vil det forta passende forandringer i prosess-betingelser ettersom de påvirker oppløseligheten.
For å hindre denaturering av proteinene under fraksjonering, utføres utfelling ved lave temperaturer. Siden pro-teinoppløselighet er temperaturavhengig, bør den valgte temperatur i hvert trinn av fraksjoneringer, av økonomiske grunner, være den lavest mulige som tillater den ønskede separering for å hindre denaturering.
Under henvisning til det medfølgende flytskjema forløper fraksjoneringen fra hel menneskeplasma. Plasmaet av-kjøles til ca. 0-5°C og sentrifugeres deretter for å separere et kaldt uoppløselig bunnfall fra en ovenstående væske (supernatant). Den ovenstående væske blir ytterligere fraksjonert for oppnåelse av bunnfall I og ovenstående væske I.. Bunnfall I som består hovedsakelig av fibrinogen kasseres. Ovenstående væske I frak-sjoneres ytterligere for dannelse av ovenstående væske II + III og bunnfall II + III. Ovenstående væske II + III, som kasseres, inneholder alfa- og betaglobulin og lipider. Bunnfall II + III består hovedsakelig av beta- og gammaglobuliner og isoagglutininer, men inneholder også protrombin, plasminogen, kolesterol og andre lipider.. Bunnfall II + III gir ved videre fraksjonering ovenstående væske II + III W og bunnfall II + III W. Betaglobulinet, kolesterol og andre lipider er hovedsakelig fjernet i ovenstående væske II + III W som kasseres. Bunnfall II + III W består hovedsakelig av gammaglobuliner, isoaalutininer, plasminogen og protrombin og noe betaglobulin, kolesterol og andre lipider. Ved ytterligere fraksjonering gir bunnfall II + III W ovenstående væske II + bunnfall III. Bunnfall III som kasseres, inneholder isoagglutininer, plasminogen og protrombin. Ovenstående væske III består hovedsakelig av gammaglobuliner og mindre mengder fibrinogen og lipider. Det sluttlige trinn i fraksjoneringen gir bunnfall II som er hovedsakelig rent anti-HBs-immungammeglobulin nesten helt fritt for 19 S globulin, plasminogen og lipider.
Oppfinnelsen skal forklares nærmere under henvisning til følgende eksempel.
Eksempel 1
Menneskeplasma med en anti-HBg-titer på ca. 6000, avkjøles til 1°+ 1°C. Plasmaet sentrifugeres i en Sharples Supersentrifuge med en 3-ving-kule, ved 1° + 1°C med mating i en mengde på 1000 + 50 ml pr. minutt. Det kalde uoppløselige bunnfall kasseres. pH-verdien til. den ovenstående væske innstilles til 7,2 + 0,2. Metanolinnholdet i forsøksmassen bringes til 10,7 + 0,1% (vol/vol.) ved tilsetning av 177 ml 71% (vol/vol.) metanol pr. 1 plasma. Oppløsningen omrøres langsomt ved -5° + 0,5°C i 1 time og holdes ved -5° + 0,5°C natten over. Oppløsningen sentrifugeres i en Sharples Supersentrifuge med en 3-ving-kule ved -5° + 0,5°C, med mating i en mengde på 1000 + 100 ml pr. min. Den ovenstående væske I oppsamles i en kule forsynt med kjølean-anordning.
Til hver liter ovenstående væske I tilsettes, under avkjøling, 601 ml 71% (vol./vol.) metanol, 0,88 ml 10N eddiksyre og 0,44 ml 4N natriumacetat. Dette bringer metanolkonsentrasjon-en til 33,3%, ionestyrken til 0,086 gi./l og pH-verdien til 6,9. Oppløsningen bringes til en temperatur på -5° + 0,5°C og omrør-ing foretas langsomt i 2 timer. Oppløsningen hensettes deretter ved -5,5° + 0,5°C i 16 timer.
Oppløsningen sentrifugeres i en Sharples Supersentrifuge ved en 3-ving-kule ved -5° + 0,5°C ved en matemengde på 1000 ml +.100 ml/min. Bunnfall II + III fjernes fra kulen, veies.og lagres ved en temperatur på -20°C.
Ved opprettholdelse av en temperatur på 0°C suspenderes bunnfall II + III i 2 volumer (2 ganger den opprinnelige vekt av bunnfall II + III) vann ved 0°C i likevekt med is, ved å oppdele pasta med en spatel av rustfritt stål i en beholder av rustfritt stål og omrøring inntil suspensjonen er ensartet. 3 volumer (3 ganger den opprinnelige vekt av bunnfall II + III) av 0,0187 M dinatriumfosfatoppløsning tilsettes til suspensjonen under omrøring,'20 volumer (20 ganger den opprinnelige vekt av bunnfall II + III) av vann ved 0°C tilsettes og omrøring ved.0°C fortsettes i 30-60 min. pH-verdien er 7,2 + 0,2. For oppnåelse av en metanolandel på 26,7 + 0,2%, tilsettes 15 volumer (15 ganger den opprinnelige vekt av bunnfall II + III) av en 71% (vol./vol.) metanol ved -10°C. Ionestyrken til oppløsningen er 0,0052 + 0,0005 gi./liter.
Oppløsningen bringes til en temperatur på -5°C og sentrifugeres i Sharples Supersentrifugen med en 3-ving-kule ved en temperatur på -5,5 + 0,5°C ved en matningsmengde på 500 + 50 ml/min. Bunnfall II + III W fjernes fra kulen og veies.
Bunnfall II +.III W suspenderes i 2 volumer (2 ganger vekten av bunnfall II + III W) av isvann. Til suspensjonen tilsettes 2 volumer (2 ganger vekten av bunnfall II + III W) av 0,175 M natriumacetat. Ytterligere 1 volum (1 ganger vekten av bunnfall II + III W) av isvann inneholdende 0,216 ml acetatbuffer for hvert gram bunnfall II + III W-pasta tilsettes. Acetatbufferen fremstilles ved fortynning av 40 ml 10N eddiksyre og 20 ml 4N natriumacetat til 100 ml med destillert vann. pH-verdien til oppløsningen er 5,2 + 0,2. Oppløsningen omrøres langsomt i 1 time. Deretter tilsettes 13,5 volumer ('13,5 ganger den opprinnelige vekt av bunnfall II + III W) av isvann og 8\66 volumer (8,66 ganger den opprinnelige vekt av bunnfall II + III W) av 71% (vol./vol.) metanol under opprettholdelse av temperaturen ved -6°+ 0,5°C. Oppløsningen omrøres langsomt i 1 time og hensettes natten over. Oppløsningen inneholder 22,7% metanol og har en pH-verdi på 5,2 og en ionestyrke på 0,015 gi./l.
Oppløsningen sentrifugeres i en Sharples Supersentrifuge med en 3-ving-kule ved en temperatur på -6° + 0,5°C og en matningsmengde på 500 + 50 ml/min. Volumet av ovenstående væske III måles. Bunnfall III kasseres.
Ovenstående væske III behandles med 0,4% vekt/vol. "Celite 512" og omrøres i 20 min. Blandingen filtreres gjennom en Eitel-filterpresse inneholdende "D-8"-filterputer.
En acetatbuffer med pH-verdi på 5,2 lages som følger: 25 ml 4N natriumacetat og 3 ml 10N eddiksyre lages opp til 100 ml
med destillert vann. Acetatbufferen fortynnes 100 ganger med 22,7% metanol i Denne oppløsning har en ionestyrke på 0,01 gi./l. En Eitel-filterpresse forbelagt med acetatbufferen pluss "Celite 512" (0,5 g/tomme 2 puteoverflate) under anvendelse av 40 ml acet-at-metanolbuffer/tomme 2 puteoverflate. Ovenstående væske III
filtreres og til filtratet tilsettes 50 millimol (2,923 g) natri-umklorid og 7,65 ml IM natriumbikarbonat pr. liter filtrert ovenstående væske III. pH-verdien til filtratet er 7,2 +0,2.
Til filtratet tilsettes 160 volumdeler 100% metanol ved en temperatur under -5°C. Blandingen omrøres langsomt i 1 time ved en, temperatur på -6,5° + 0,5°C. Blandingen hensettes natten over.
Oppløsningen sentrifugeres i en Sharples Supersentrifuge med en 3-ving-kule, ved en temperatur på -6° + 0,5°C og en matemengde på 500 + 50 ml/min. Den ovenstående væske kasseres.
Bunnfallet II fjernes, suspenderes i 4 volumer isvann og frysetørkes. Det frysetørkede pulver veies og lagres ved en temperatur på -5°C.
Bunnfall II som fremstilt i dette eksempel er 99% rent anti-HBs-immungammaglobulin fritt for plasminogen, fibrinogen, lipider og 19 S globuliner.
Eksempel II
To menneskeimmunglobuliner ble fremstilt som 13,5
+ 1,5 g/dl oppløsninger ved bruk av metoderi4 i eks. I. Menneskeplasma-utgangsmateriale ble avledet fra plasmaenheter som man visste inneholdt anti-HBg i moderate til høye titere, ved pass-
iv hemagglutinering. Kontrollglobulinet ble avledet fra plasmaenheter hvor man ikke kunne påvise noe anti-HBg ved passiv hemagglutinering. Begge immunglobulinpreparater ble fordelt som 5 ml volumer i identiske, enkeltdoseprøverør podet med en til-feldig valgt to-sifferbetegnelse. Begge preparater tilfreds-stilte alle anvendelige standarder for "immunglobulin (menneske)" til Bureau of Biologics, Food and Drud Administration, U.S. Depart-ment of Health, Education and Welfare. Hepatitis B immunglobulinet innehold 442 yg av spesifikt anti-HB2/ml ved en kvantitativ fast-fase-radioimmunoprøve. Dets anti-HBg-titer ved passiv hemggluti-nering var 1-200.000 og 1-150.000, respektivt, mot celler belagt med HBgAg-subtyper adw og ayw.
I løpet av 29 måneders perioden fra july 1972 til desember 1974, ble 96 menneske-stamidivider identifisert til å ha ictiritisk hepatitis med symptomer, tegn og laboratoriefunn samm-enlignbare med akutt viral hepatitis og en positiv test for HBgAg bekreftet ved subtypebestemmelse eller spesifisitet. I løpet av denne periode hadde disse individer et totale på 100 seksual-partnere med hvilke de levde i løpet av perioden som omfattet 2 uker til 2 måneder før sykdomsutbrudd. To behandlingsgrupper ble dannet av ektefellene til de nevnte individer, og en enkelt intra-muskulær injeksjon på 5 ml av anti-HBs-immunglobulinet fremstilt som beskrevet ovenfor, ble ingitt. Ytterligere kliterier for ektefellen inkluderte at det ikke var noen forutgående hepatitis eller gulsott eller kronisk leverskydom, at de ikke var brukere av injeksjonsstoffer, at de ikke hadde hatt noen transfusjon i løpet av 6 månder og at de var tilgjengelige for tilstands-opp-følging i løpet av de etterfølgende 10 månder.
Blant de 100 ektefeller ble 47 fordelt til behandlet gruppe og 53 til kontrollgruppe. På grunn av eksklusjoner av en eller annen type forble 33 til analyse i den behandlende gruppe og-40 i kontrollgruppen. For nærværende har 58 av de 73 kvalifiserte ektefeller blitt studert i 150 dager eller mer etter injeksjonen av globulinet som fremstilt ifølge foreliggende oppfinnelse.
Intervaller fra oppdagelsen av gulsott hos stam-individene til injeksjonen av ektefellene varierte fra 7 dager før til 30 dager etter med en median på 9 d<*>ager. Totalt var det 11 tilfeller av hepatitt rapportert hos ektefellene, hvorav 9 av icteriske. 9 tilfeller av hepatitt B-sykdom forekom hos kontrollgruppen og ingen hos ektefellene behandlet med hepatitis B-immunglobulin som fremstilt ifølge oppfinnelsen.
For studie i denne sammenheng ble icteritisk hepatitt definert som mistenkt gulsott i huden eller øynene bekreftet av et serum bilirubin-nivå på 2 mg/dl eller høyere. Anicteritisk hepatitt ble definert som symptomatisk hepatitt bekreftet av passende nivåer og mønstere av serum aminotrafsferaseaktiviteter, men uten at det ble observert et serum bilirubin-nivå så høyt som 2,0 mg/dl. Både icteritiske og anicteritiske former av symptomatisk hepatitt ble definert som type B-sykdom på basis av føglende kriterier: (1) de novo tilsynekomst av HBgAg; (2) de novo tilsynekomst av anti-HBg hos mottagere av kontrollglobulin; (3) en fallende titer for anti-HBsetter hepatitis immunglobulininjek-sjon fulgt av en 4-gangers eller større økning. Symptomatiske tilfeller som ikke oppfylte disse kriterier ble klassifisert som "ikke-B"-hepatitis.
En effektiv mengde av materialet fremstilt ifølge oppfinnelsen egnet for å hindre frembrytning av hepatitis B<y>iral sykdom hos mottagelige verter, varierer fortrinnsvis fra 25-50 yg av spesifikt anti-HBs/ml/kg legemsvekt. Materialet adiminstreres parenteralt og fortrinnsvis intramuskulært som en enkeltdoseinjek-sjon.
Claims (5)
1. Fremgangsmåte til fremstilling av et anti-HBg-gammaglobulin fra menneskeplasma, karakterisert ved følgende trinn:
(a) avkjøling av menneskeplasma til ca. 1°C og fraseparering fra nevnte plasma av en første ovenstående væske og et første bunnfall;
(b) tilsetning av metanol til den første ovenstående væske og innstilling av temperaturen til ca. -2°C, idet mengden av metanolen er mellom 10,5 og 10,9%, pH-verdien mellom 7 og 7,4 og ionestyrken 0,136 gi:/l, og fraseparering av et annet bunnfall og en annen ovenstående væske fra det resulterende væskesystem;
(c) tilsetning av metanol til den andre ovenstående væske og innstilling av temperaturen til ca. -5°C, idet metanolmengden er mellom 33,25% og 35,35%, pH-verdien mellom 6,7 og 7,1 og ionestyrken mellom 0,081 og 0,091 gi./l, og fraseparering av et tredje bunnfall og en tredje ovenstående væske fra det resulterende væskesystem;
(d) tilsetning av metanol til det tredje bunnfall og innstilling av temperaturen til ca. -5°C, idet metanolmengden er mellom 26,5 og 26,9%, pH-verdien mellom 7,0 og 7,4 og ionestyrken mellom 0,0047 og 0,00057 gi./l, og fraseparering av en fjerde bunnfall og en fjerde ovenstående væske fra det resulterende væskesystem;
(e) tilsetning av metanol til det fjerde bunnfall og innstilling av temperaturen til ca. -6°C, idet metanolmengden er mellom 22,5 og 22,9%, pH-verdien mellom 5,0 og 5,4 og ionestyrken mellom 0,008 og 0,018 gi./l, og fraseparering av et femte bunnfall og en femte ovenstående væske fra det resulterende væskesystem;
(f) tilsetning av metanol til den femte ovenstående væske og innstilling av temperaturen til -6,5°C, idet metanolmengden er mellom 33,0 og 33,4%, pH-verdien mellom 7,0 og 7,4 og ionestyrken mellom 0,055 og 0,065 gi./l, og fraseparering av et sjette bunnfall og en sjette ovenstående væske til det resulterende væskesystem.
2. Fremgangsmåte.ifølge krav 1, karakterisert ved at det sjette bunnfall frysetørkes.
3. Vesentlig rent anti-HBs -gammaglobulin, karakterisert ved at det er i det vesentlige fritt for plasminogen, fibrinogen, lipider og 19 S globuliner.
4. Fremgangsmåte til immunisering mot forekomst av hepatitt B viral sykdom, karakterisert ved at man til en mottagelig vert administrerer en effektiv mengde av et vesentlig rent anti-HBs -gammaglobulin som i det vesentlige er fritt for plasminogen, fibrinogen, lipider og 19 S globuliner.
5. Vesentlig rent anti-HBs -gammaglobulin, karakterisert ved at det er fremstilt ved fremgangsmåten ifølge hvilket som helst av kravene 1 eller 2.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US05/599,619 US4021540A (en) | 1975-07-28 | 1975-07-28 | Preparation of a hepatitis B immune globulin and use thereof as a prophylactic material |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| NO762586L true NO762586L (no) | 1977-01-31 |
Family
ID=24400364
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| NO762586A NO762586L (no) | 1975-07-28 | 1976-07-23 |
Country Status (17)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4021540A (no) |
| JP (1) | JPS5215814A (no) |
| AU (1) | AU512235B2 (no) |
| BE (1) | BE844566A (no) |
| CA (1) | CA1069822A (no) |
| DE (1) | DE2633932A1 (no) |
| DK (1) | DK336776A (no) |
| ES (1) | ES450208A1 (no) |
| FR (1) | FR2319376A1 (no) |
| GB (1) | GB1548014A (no) |
| IL (1) | IL50134A (no) |
| IT (1) | IT1192145B (no) |
| NO (1) | NO762586L (no) |
| PH (1) | PH11597A (no) |
| PT (1) | PT65411B (no) |
| SE (1) | SE7608475L (no) |
| ZA (1) | ZA764509B (no) |
Families Citing this family (20)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CA1064396A (en) * | 1975-02-18 | 1979-10-16 | Myer L. Coval | Fractional precipitation of gamma globulin with polyethylene glycol |
| DK139056B (da) * | 1976-04-06 | 1978-12-11 | Nordisk Insulinlab | Fremgangsmåde til udvinding af immunoglobulin, der er egnet til intravenøs indgivelse. |
| US4164495A (en) * | 1976-04-06 | 1979-08-14 | Nordisk Insulinlaboratorium | Method of recovering immunoglobulin using a polyol and an alkanoic acid |
| US4165370A (en) * | 1976-05-21 | 1979-08-21 | Coval M L | Injectable gamma globulin |
| US4174388A (en) * | 1977-02-14 | 1979-11-13 | Merck & Co., Inc. | Method for preparing hepatitis B immune globulin |
| JPS5822085B2 (ja) * | 1977-07-19 | 1983-05-06 | 株式会社ミドリ十字 | 静注用ガンマ・グロブリン製剤 |
| US4296027A (en) * | 1977-08-31 | 1981-10-20 | The Regents Of The University Of Minnesota | Pure intravenous human and animal gamma globulins |
| US6297355B1 (en) | 1978-12-22 | 2001-10-02 | Biogen, Inc. | Polypeptides displaying HBV antigenicity or hbv antigen specificity |
| US4346073A (en) * | 1980-04-11 | 1982-08-24 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Hepatitis B immune globulin used to inactivate hepatitis B virus in injectable biological products |
| AU8746582A (en) * | 1981-09-02 | 1983-03-10 | Biogen N.V. | Hepatitis b virus e type antigen |
| JPS5855432A (ja) * | 1981-09-29 | 1983-04-01 | Fujirebio Inc | 静脈注射用免疫グロブリンの製法 |
| US4482483A (en) * | 1983-04-06 | 1984-11-13 | Armour Pharmceutical Company | Composition of intravenous immune globulin |
| US4719290A (en) * | 1983-09-02 | 1988-01-12 | Armour Pharmaceutical Corporation | Composition of intravenous immune globulin |
| DE4115910A1 (de) * | 1991-05-15 | 1992-11-19 | Schweigle Bernhard Dipl Chem | Verfahren zur herstellung von nativem, intravenoes verabreichbarem, stabilisiertem immunglobulin |
| US6096872A (en) * | 1997-10-14 | 2000-08-01 | Ortho Diagnostic Systems, Inc. | Viral clearance process |
| AU784808B2 (en) * | 2001-04-02 | 2006-06-29 | Kedrion Melville Inc. | Prion and viral clearance process |
| KR101239818B1 (ko) * | 2002-05-23 | 2013-03-07 | 오르토-클리니칼 다이아그노스틱스, 인코포레이티드 | 심층 여과를 이용한 생물학적 유체로부터 이상 프리온단백질의 포획, 농축 및 정량 |
| AU2005229674B2 (en) * | 2004-11-18 | 2010-11-04 | Kedrion Melville Inc. | Low concentration solvent/detergent process of immuneglobulin with pre-treatment |
| US9815886B2 (en) | 2014-10-28 | 2017-11-14 | Adma Biologics, Inc. | Compositions and methods for the treatment of immunodeficiency |
| US10259865B2 (en) | 2017-03-15 | 2019-04-16 | Adma Biologics, Inc. | Anti-pneumococcal hyperimmune globulin for the treatment and prevention of pneumococcal infection |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR1539016A (fr) * | 1966-06-03 | 1968-09-13 | Ortho Pharma Corp | Procédé de production de gobuline anti-rh |
-
1975
- 1975-07-28 US US05/599,619 patent/US4021540A/en not_active Expired - Lifetime
-
1976
- 1976-06-21 PH PH18590A patent/PH11597A/en unknown
- 1976-06-21 CA CA255,319A patent/CA1069822A/en not_active Expired
- 1976-06-23 GB GB26171/76A patent/GB1548014A/en not_active Expired
- 1976-06-28 AU AU15359/76A patent/AU512235B2/en not_active Expired
- 1976-07-23 NO NO762586A patent/NO762586L/no unknown
- 1976-07-26 DK DK336776A patent/DK336776A/da not_active Application Discontinuation
- 1976-07-26 IT IT50604/76A patent/IT1192145B/it active
- 1976-07-27 JP JP51088755A patent/JPS5215814A/ja active Pending
- 1976-07-27 BE BE169283A patent/BE844566A/xx unknown
- 1976-07-27 IL IL50134A patent/IL50134A/xx unknown
- 1976-07-27 ZA ZA00764509A patent/ZA764509B/xx unknown
- 1976-07-27 ES ES450208A patent/ES450208A1/es not_active Expired
- 1976-07-27 SE SE7608475A patent/SE7608475L/xx unknown
- 1976-07-27 PT PT65411A patent/PT65411B/pt unknown
- 1976-07-27 FR FR7622904A patent/FR2319376A1/fr active Granted
- 1976-07-28 DE DE19762633932 patent/DE2633932A1/de not_active Withdrawn
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| AU1535976A (en) | 1978-01-05 |
| GB1548014A (en) | 1979-07-04 |
| FR2319376A1 (fr) | 1977-02-25 |
| PT65411A (en) | 1976-08-01 |
| SE7608475L (sv) | 1977-01-29 |
| FR2319376B1 (no) | 1979-07-13 |
| CA1069822A (en) | 1980-01-15 |
| IL50134A0 (en) | 1976-09-30 |
| ZA764509B (en) | 1978-03-29 |
| DK336776A (da) | 1977-01-29 |
| US4021540A (en) | 1977-05-03 |
| IL50134A (en) | 1979-09-30 |
| IT1192145B (it) | 1988-03-31 |
| AU512235B2 (en) | 1980-10-02 |
| PT65411B (en) | 1978-06-09 |
| PH11597A (en) | 1978-03-31 |
| DE2633932A1 (de) | 1977-02-17 |
| JPS5215814A (en) | 1977-02-05 |
| ES450208A1 (es) | 1977-08-16 |
| BE844566A (fr) | 1977-01-27 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| NO762586L (no) | ||
| Woodruff et al. | Effect of antilymphocytic antibody and antibody fragments on human lymphocytes in vitro | |
| Gürcan et al. | A review of the current use of rituximab in autoimmune diseases | |
| Stuart et al. | Collagen‐induced arthritis in rats | |
| BIELORY et al. | Human serum sickness: a prospective analysis of 35 patients treated with equine anti-thymocyte globulin for bone marrow failure | |
| Fudenberg et al. | “Acquired Agammaglobulinemia” with Auto‐Immune Hemolytic Disease: Graft‐versus‐Host Reaction? | |
| US3869436A (en) | Method for fractionating plasma proteins using peg and ion-exchangers | |
| Weir | Liver autoantibodies in the rat | |
| Herbert et al. | The administration of adrenocorticotrophic hormone to normal human subjects. The effect of the leucocytes in the blood and on circulating antibody levels | |
| Henson et al. | Immunological induction of increased vascular permeability: I. A rabbit passive cutaneous anaphylactic reaction requiring complement, platelets, and neutrophils | |
| JP2926463B2 (ja) | 抗ｄ−免疫グロブリンｇの濃縮物の製造方法、それを含む製薬的調剤 | |
| Laurell et al. | Electrophoretic studies of the conversion products of serum β1C-globulin | |
| Stevens et al. | Studies on antibody synthesis initiated in vitro | |
| Neftel et al. | Effect of storage of penicillin-G solutions on sensitisation to penicillin-G after intravenous administration | |
| Carter | Rh hapten: its preparation, assay and nature | |
| Stark et al. | Sensitization to human lymphocyte antigens by corneal transplantation | |
| Robinson et al. | Plasmapheresis followed by intravenous immunoglobulin in presensitized patients awaiting thoracic organ transplantation | |
| CN107028982B (zh) | 人胎盘乙型肝炎特异免疫活性多肽 | |
| Archer et al. | Eosinophil granule lysis in vitro induced by soluble antigen antibody complexes | |
| Gerber et al. | Attempts to transmit infectious mononucleosis to rhesus monkeys and marmosets and to isolate herpes-like virus | |
| Cooke et al. | Agammaglobulinaemia | |
| Karthigasu et al. | The nature of the opsonins in adult hen serum and developing chick embryos to certain Gram‐negative bacteria | |
| Nakamura et al. | Suppression of thyroid lesions in rabbits by treatment with cyclophosphamide after the induction of thyroiditis | |
| WOLLHEIM | Immunoglobulin changes in the course of infectious mononucleosis | |
| HACKEL | Rh antibodies in the serum of two‐D‐/‐D‐people |