NO762545L

NO762545L -

Info

Publication number: NO762545L
Application number: NO762545A
Authority: NO
Inventors: R C Erickson; R E Bambury
Original assignee: Richardson Merrell Inc
Priority date: 1975-07-22
Filing date: 1976-07-21
Publication date: 1977-01-25
Also published as: CH625529A5; FR2318641B1; FR2318641A1; CA1054144A; US4020060A; ES449688A1; NL7607100A; DE2632006A1; IE43376L; DK296576A; AU1463176A; SE7608160L; IE43376B1; ZA763248B; BE844402A; IL49717A; IL49717A0; JPS5214794A

Description

Fremgangsmåte ved fremstilling av 7-[a-amino-oo-( 3 , 4-methylendioxyfenyl) acylamido] cefalosporansyrederivater

Foreliggende oppfinnelse angår en fremgangsmåte ved fremstilling av 7-[a-amino-w-(3,4-methylendioxyfeny1)-acylamido]cefalosporansyrederivater som er anvendbare som antibakterielle midler.

Cefalosporinforbindelser tilhører en velkjent familie av antibiotica som har vært vidt anvendt i de siste år for behandling av infektiøse sykdommer. Et antall anvendbare cefalosporiner er blitt erholdt ved å variere substitusjonen ved 3- og 7-stillingene i cefalosporinkjernen. Søk-ningen fortsetter imidlertid etter nye forbindelser med en høyere grad av aktivitet og en høyere grad av stabilitet.

I et forsøk på å forbedre de eksisterende egenskaper av disse forbindelser er forsøk vært rettet mot forbed-ring av substitusjonen ved 7-stillingen i cefalosporinkjernen. Det er funnet at nærvær av en a-amino-tø—(3,4-methylendioxyfenyl)acylamidodel i 7-stillingen i en cefalosporinkjerne fører til visse nye cefalosporinderivater med en forbedret aktivitet overfor én eller flere gram-positive eller gram-negative mikroorganismer. Som antibakterielle midler er forbindelsene ifølge oppfinnelsen terapeutisk effektive ved behandling av infektiøse sykdommer som skyldes gram-positive og gram-negative bakterier i fjærfe og dyr, innbefattet mennesket. Ennvidere er disse forbindelser anvendbare som dyreforsupplementer og som aktiv bestanddel i bakteriedre-pende preparater anvendt som overflatedesinfiseringsmiddel.

Den halv-syntetiske fremstilling av 7-acylamido-desacetoxycefalosporinantibiotica fra penicillinutgangs-materialer er blitt av betydning takket være fremgangsmåten ifølge Morin et al. (US pat. 3 275 626) hvori det beskrives en fremgangsmåte for omdannelse av penicillinsulfoxydestere til desacetoxycefalosporansyreestere. Fremstillingen av forskjellige 7-[ ct-amino-a-arylacetamido) cef alopsoransyrer og de tilsvarende desacetoxyforbindelser i hvilke arylgruppen kan representere en substituert fenyl, er beskrevet f.eks.

i US patentskrifter 3 489 750, 3 489 751, 3 489 752 og 3'641 021.

Japansk patentskrift 24428/67 (Farmdoc 29.840T) beskriver visse 7-[(substituerte)fenylacylamido]cefalosporansyrer hvori fenylgruppen er substituert med en alkylendioxy-gruppe.

Belgisk patentskrift 769 609 (Farmdoc 04557T) og nederlandsk patentskrift;7206931 (Farmdoc 79349T) beskriver bredt 7-[a-substituert-a-arylacylamido]cefalosporansyrer.

Belgisk patentskrift .776 222 beskriver 7-(a-hydroxy-a-fenylacetamido)cefalosporansyrer og 7-(a-amino-a-fenyl-acetamido)cefalosporansyrer hvori fenylringen kan være substituert med forskjellige grupper innbefattet hydroxy>halo-gen, nitro, amino, trifluormethyl, lavere alkyl og lavere

.alkoxygrupper.

Foreliggende oppfinnelse angår nye 7-[a-amino-co-1 (3,4-methylendioxyfenyl)acylamido]cefalosporansyrederivater. Nærmere bestemt angår oppfinnelsen 7-[ ct-amino-io- ( 3 , 4-methylendioxyf enyl)acylamido]cefalosporansyrederivater som er anvendbare som antibakterielle midlér og kan representeres av den følgende formel:

hvori Z er valgt fra gruppen bestående av en sigmabinding, methylen. og ethylen, R-^ er valgt fra gruppen bestående av

hydrogen, hydroxy, acetoxy, pyridinium og -S-R2/ R2er en methyl og ethyl usubstituert eller mono og disubstituert heterocyklisk del valgt fra gruppen bestående av pyrazolyl, imidazolyl, triazolyl, tetrazolyl, thiazolyl, isothiazolyl, thiadiazolyl, oxazolyl, isoxazolyl, oxadiazol, pyrimidinyl, pyrazinyl og pyridazinyl, R 3 er valgt fra gruppen bestående av hydrogen, formyloxymethyl og alkanoyloxymethyl hvori alkanoylgruppen inneholder fra 1 til 5 carbonatomer, og farmasøytisk akseptable salter derav.

Forbindelsene ifølge oppfinnelsen fremstilles ved kondensasjon av en a-amino-w•(3,4-methylendioxyfenylalkan-syre méd strukturen: med en 7-aminocefalosporansyre av strukturen:

hvori Z , R-^ og R^ er som ovenfor definert og B er en blokkerende gruppe valgt fra gruppen bestående av t-butyloxycarbonyl, benzyloxycarbonyl, carbomethoxypropen-2-yl, trifluor-acetyl, triklorethoxycarbonyl, p-methoxycarbobenzoxy, p-nitrocarbobenzoxy og saltsyresaltet. Disse blokkerende grupper fjernes etter kondensasjon under anvendelse av velkjente prosesser innen faget under dannelse av de ønskede 7-[a-aminb-w-(3,4-methylendioxyfenyl)acylamido]cefalosporansyrederivater ifølge oppfinnelsen (I).

Alternativt og fortrinnsvis fremstilles forbindelsene ifølge oppfinnelsen hvori 3-stillingen i cefalosporin kjernen er substituert med en heterocyklisk thiomethylgruppe ved fortrengning av 3-acetoxygruppen i 7-aminocefalosporansyre med en heterocyklisk thiol som illustrert i følgende reaksjonsskjema:

hvori symbolene Z, R>> og B er som ovenfor definert. Fjerning av den blokkerende gruppe fører til fremstilling av forbindelser av formel (I).

Som det fremgår fra formel (I) inneholder alle forbindelsene ifølge oppfinnelsen en 1,3-benzodioxolring ved enden av acylamidosidekjeden i 7-stillingen i cefalosporinkjernen. Av nomenklaturhensyn vil imidlertid alle forbindelser bli betegnet som 3,4-methylendioxyfenylderivater. I tillegg inneholder alle forbindelsene en' obligatorisk amino-substituent som er i a-stilling i forhold til carbonylfunk-sjonen av amidgruppen.

Acylamidosidekjeden kan i seg selv variere fra 2 til 4 carbonatomer i lengde som indikert ved symbolet Z. Når således Z er en sigmabinding angis acetamidosidekjeden og forbindelsene betegnes' som 7-[2-amino-2-(3,4-methylendioxyfenyl)acetamido]cefalosporansyrer. Uttrykket "sigmabinding" angir en vanlig enkeltbinding mellom to tilstøtende carbonatomer resulterende fra overlapping av deres tilsvarende orbitaler. Når Z er methylen defineres 7-[2-amino-3-(3,4- méthylendioxyfenyl)propionamido]cefalosporansyrer og når Z er ethylen, defineres 7-[2-amino-4-(3,4-methylendiqxyfenyl)-butyramido]cefalosporansyrer.

Foreliggende oppfinnelse angår hovedsakelig fremstilling og beskrivelse av 7-[a-amino-w-(3,4-methylendioxyfenyl)acylamido-sidekjedederivatene av forskjellige cefalosporansyrer. Disse derivater fremstilles lett ved kondensasjon ved 7-stillingen . av |3-lactamkjernen med en hvilken som helst av de lett tilgjengelige 7-aminocefalosporinutgangs-inaterialer.

Symbolet'representerer substituentene på 3-methylgruppen i cefalosporinkjernen. Forbindelsene erholdt når R-^er hydrogen, betegnes som desacetoxycef alosporansyrer. Når R^ er hydroxy tilhører forbindelsene en klasse av forbindelser som angis som desacetylcefalosporansyrer. Når R^representerer acetoxygruppen, angis forbindelsene som cefalo-sporansyrederivater . I det tilfelle hvor R-^representerer pyridiniumradikalet er 3-stillingen substituert ved en pyri-diniummethylgruppe, dvs. kjeden til pyridinringen er gjennom det heterocykliske nitrogen. Hvor 3-stillingen er substituert med hydrogen, er klassen av forbindelser decefalosporan-syrer.

Den foretrukne substitusjon ved 3-methylstillingen er en heterocyklisk thioether som representert ved symbolet

-SR2. Generelt innbefatter de forskjellige heterocykliske grupper som representeres ved symbolet R2fem eller seks-delte heterocykliske ringer inneholdende carbon og 1 til 4 atomer valgt fra gruppen bestående av nitrogen, oxygen og svovel. Nærmere bestemt innbefatter disse heterocykliske ringer pyrazol, imidazol, triazol, tetrazdl, thiazol, iso-thiazol, thiadiazol, oxazol, isoxazol, oxadiazol, pyrimidin, pyrazin og pyridazin og deres forskjellige isomerer. Alle disse heterocykliske grupper er kjedet som thioethere ved 3-, methylstillingen. Således er de kjedet via et heterocyklisk carbon til thioethersvovelatomet ved 3-stillingen. De heterocykliske grupper som representert ved R.> kan bære én eller flere lavere alkylgrupper bundet til den gjenværende

heterocykliske ring. Uttrykket lavere alkyl innbefatter de mettede monovalente hydrocarbongrupper som har fra 1 til 4 carbonatomer slik som f.eks. methyl, ethyl, propyl, iso-propyl, butyl- siobutyl og tertiær butyl. Fortrinnsvis er substitusjonen med methyl- eller ethylgrupper og helst med methylgruppen.

2-stillingen av cefalosporinkjernen er substituert med en carboxylsyre eller en carboxylsyreester som indikért ved formyloxymethy1 og .alkanoyloxymethylgrupper. Uttrykket alkanoyl som anvendt i denne henseende innbefatter de grupp som har totalt fra 1 til 5 carbonatomer, slik som f.eks. acetyloxy, propionyloxy, butyryloxy, isobutyryloxy, 2-methylbutyryloxy, 3-methylbutyryloxy og 2,2-dimethylpropionylbxy. Disse estere gir molekylet forbedrede absorpsjonsegénskaper

og er samtidig fysiologisk labile. Således absorberes disse estere lett fra den gastro-intestinale traktus og hydrolyseres enzymatisk til de tilsvarende cefalosporansyrer og tilveiebringer derved glimrende oral aktivitet.

De farmasøytisk akseptable salter av forbindelsene av formel (I) innbefatter de ikke-toksiske, carboxylsyresalter som dannes med en hvilken som helst egnet uorganisk eller organisk base. Illustrative eksempler på disse salter innbefatter de med alkalimetaller slik som f.eks. natrium og kalium, jordalkalimetaller slik som kalsium og magnesium, lettmetal-ler fra gruppe HIA innbefattet aluminium, og organiske primære, sekundære og tertiære aminer slik som f.eks. trialkyl-aminer, innbefattet triethylamin, procain, dibenzylamin, vinylamin, N,N'-dibenzylethylendiamin, dihydroabiethylamin, N-(lavere)alkylpiperidin og ytterligere aminer som har vært anvendt til å danne ikke-toksiske salter med benzylpenicil.lin. Disse salter kan fremstilles under anvendelse av konvensjo-nelle metoder slik som ved at carboxylsyren i et polart løs-ningsmiddel bringes i kontakt med og nøytraliseres med en s.tøkiometrisk mengde av en base.

Også innbefattet som farmasøytisk akseptable syreaddisjonssalter er de ikke-toksiske organiske eller uorganiske syreaddisjonssalter av baseforbindelsene av formel (I). Illustrative eksempler på uorganiske syrer som danner egnede salter innbefatter saltsyre, hydrobromsyre, svovelsyre og fosforsyrer såvel som sure metallsalter slik som natrium-hydrogenortofosfat og kaliumhydrogensulfat. Illustrative organiske syrer som danner egnede salter innbefatter mono-di- og tricarboxylsyrer slik som f.eks. eddiksyre, glycol-syre, melkesyre, pyrodruesyre, malonsyre, ravsyre, glutarsyre, fumarsyre, eplesyre, vinsyre, sitronsyre, ascorbinsyre, maleinsyre, hydroxymaleinsyre, benzoesyre, p-hydroxybenzoe-syre, fenyleddiksyre, cinnaminsyre, salicylsyre, 2-fenoxy-benzoesyre og sulfonsyrer slik som methansulfonsyre og 2-hydroxyethansulf onsyre'. Slike salter kan foreligge i enten en hydratisert eller hovedsakelig vannfri form.

I tillegg til de ikke-toksiske carboxylsyresalterbg de ikke-toksiske syreaddisjonssalter av baseforbindelsene innbefatter uttrykket farmasøytisk akseptable salter indre salter eller zwitterioner av forbindelsene av formel (I) som er amfotære av natur. Slike zwitterioner er farmasøytisk ekvivalent ved enhver av de ovenfor angitte ikke-toksiske carboxylsyresalter eller de organiske og uorganiske syre-addis jonssalter og faller således innen oppfinnelsens ramme.

Stereoisomeri finner sted rundt det asymmetriske a-carbonatom i disse syrer. De foretrukne mest aktive forbindelser ifølge oppfinnelsen er de med D-konfigurasjon av det •a-carbonatom i sidekjeden i 7-stillingen og fremstilles fra de tilsvarende D (-)-a-amino-w-(3,4-methylendioxyfenyl)-alkansyrer (II).

Illustrative spesifike baseforbindelser omfattet

av formel (I) innbefatter: 7-[2-amino-2-(3,4-methylendioxyfenyl)acetamido]cefalosporansyre,

pivaloyloxymethyl-7-[2-amino-2-(3,4-methylendioxyfenyl)-acetamido]cefalosporanat,

7- [ 2.-amino-2- ( 3 , 4-methy lendioxyf enyl) acetamido] desacetoxy-cefalosporansyre,

acetyloxymethyl-7-[2-amino-2-(3,4-methylendioxyfenyl)acetamido] desacetoxycef alosporanat,

7- [ 2-amino-2- (3 , 4-methy lendioxyf enyl) acetamido] desacetylcef alo-

sporansyre,

7-[2-amino-2-(3,4-methylendioxyfenyl)acetamido]-3-(pyridinium-methyl) decef alosporanat,

formyloxymethyl-7-[2-amino-2-(3,4-methylendioxyfenyl)acetamido] -3- [ (py razol-3-ylthio ) methyl] decef alosporanat , 7-[2-aminc—2-(3,4-methylendioxyfenyl)acetamido]-3-[(1-methyl-pyrazol-3-ylthio)methyl]decefalosporansyre,

7-[2-amino-2-(3,4-methylendioxyfenyl)acetamido]-3-[(5-ethyl-pyrazol-3-ylthio)methyl]decefalosporansyre,

7-[2-amino-2-(3,4-methylendioxyfenyl)acetamido]-3-[(imidazol-2-ylthio.) methyl] decef alosporansyre ,

7-[2-amino-2-(3,4-methylendioxyfenyl)acetamido]-3-[(4-methy1-imidazol-2-ylthio)methyl]decefalosporansyre,

acetyloxymethyl-7-[2-amino-2-(3,4-methylendioxyfenyl)acetamido] -3-[(l-ethylimidazol-2-ylthio)methyl]decefalosporanat, 7-[2-amino-2-(3,4-methylendioxyfenyl)acetamido]-3-[(4-ethyl-1,2,3-triazol-5-ylthio)methyl]decefalosporansyre, 7-[2-amino-2-(3,4-methylendioxyfenyl)acetamido]-3-[(5-methyl-1,2, 3-triazol-4-ylthio)'methyl] decef alosporansyre, pivaloyloxymethyl-7-[2-amino-2-(3,4-methylendioxyfenyl)-acetamido]-3-[(1,5-dimethyl-l,2,3-triazol-4-ylthio)methyl]-decefalosporanat, 7-12-amino-2-(3,4-methylendioxyfenyl)acetamido]-3-[(l-ethyl-01,2,3,4-tetrazol-5-ylthio)methyl]decefalosporansyre. 7-[2-amino-2-(3,4-methylendioxyfenyl)acetamido]-3-[(thiazol-4-ylthio)methyl]decefalosporansyre,

7-[2-amino-2-(3 , 4-methy.lendioxyf enyl) acetamido]-3-[ (4-methyl-thiazol-5-ylthio)methyl]decefalosporansyre,

formyloxymethyl-7-[2-amino-2-(3,4-methylendioxyfenyl)acetamido-3-[(4,5-diethyl-thiazol-2-ylthio)methyl]decefalosporanat,

7-[2-amino-2-(3,4-methylendioxyfenyl)acetamido]-3-[(isothia-zo1-3-ylthio)methyl]decefalosporansyre,

7-[2-amino-2-(3,4-methylendioxyfenyl)acetamido]-3-[(3-methyl-isothiazol-5-ylthio)methyl]decefalosporansyre, 7-[2-amino-2-(3,4-methylendioxyfenyl)acetamido]-3-[(1,2,3-thiadiazol-5-ylthio)methyl]decefalosporansyre, 7-[2-amino-2-(3,4-methylendioxyfenyl)acetamido]-3-[(5-methyl-

1,2,3-thiadiazol-4-ylthio)methyl] decefalosporansyre, acetyloxymethyl-7- [ 2-amino-2- ( 3 , 4-methylendioxyf enyl) acetamido] — 3— ['(1,2, 5-thiadiazol-3-ylthio)methyl] decef alosporanat, 7-[2-amino-2-(3,4-methylendioxyfenyl)acetamido]-3-[(4-ethyl-1,2,5-thiadiazol-3-ylthio)methyl]decefalosporansyre, 7-[2-amino-2-(3,4-methylendioxyfenyl)acetamido]-3-[(oxazol-2- ylthio)methyl]decefalosporansyre,

7-[2-amino-2-(3,4-methylendioxyfenyl)acetamido]-3-[(4-methyl-oxazol-5-ylthio)methyl]decefalosporansyre,

7-[2-amino-2-(3,4-methylendioxyfenyl)acetamido]-3-[(4,5-di-ethyloxazol-2-ylthio)methyl]decefalosporansyre, pivaloyloxymethyl-7-[2-amino-2-(3,4-methylendioxyfenyl)-'acetamido]-3-[(2-methyloxazol-4-ylthio)methyl]decefalosporanat,

7- [ 2-amino-2- (.3, 4-methy lendioxyf enyl) acetamido] -3- [ (isoxazol-3- tylthio). methyl] decef alosporansyre,

7-[2-amino-2-(3,4-methylendioxyfenyl)acetamido]-3-[(4-methyl-isoxazol-5-ylthio)methyl]decefalosporansyre,

7-[2-amino-2-(3,4-methylendioxyfenyl)acetamido]-3-[(3-ethyl-isoxazol-4-ylthio)methyl]decefalosporansyre,

formyloxymethyl-7-[2-amino-2-(3,4-methylendioxyfenyl)acetamido] -3-[(1,2,3-oxadiazo1-4-ylthio)methyl]decefalosporanat, 7-[2-amino-2-(3,4-methylendioxyfenyl)acetamido]-3-[(4-methyl-1,2, 3 -^oxadiazo 1-5-ylthio) methyl] decef alosporansyre , 7-[2-amino-2-(3,4-methylendioxyfenyl)acetamido]-3-[(1,2,5-oxadiazol-3-ylthio)methyl]decefalosporansyre, 7-[2-amino-2r(3,4-methylendioxyfenyl)acetamido]-3-[(4-ethyl-. \, 2,5-oxadiazol-3-ylthio)methyl]decefalosporansyre, 7-[2-amino-2-(3,4-methylendioxyfenyl)acetamido]-3-[(4-methyl-pyrimidin-2-ylthio)methyl]decefalosporansyre, acetyloxymethyl-7-[2-amino-2-(3,4-methylendioxyfenyl)acetamido] -3-[(4,6-diethylpyrimidin-2-ylthio)methyl]decefalosporanat ,

7-[2-amino-2-(3,4-methylendioxyfenyl)acetamido]-3-[(2-methyl1 pyrimidin-5-ylthio)methyl]decefalosporansyre, 7-[2-amino-2-(3,4-methylendioxyfenyl)acetamido]-3-[(pyrazin-2-ylthio)decefalosporansyre,

7-[2-amino-2-(3,4-methylendioxyfenyl)acetamido]-3-[(3,5-dimethylpyrazin-2-ylthio)methyl]decefalosporansyre,

pivaloyloxymethyl-7- [ 2-amino-2- (3 , 4-methylendioxyf enyl). - acetamido]-3-[(5-methylpyrazin-3-ylthio)methyl]decefalosporanat,

7-[2-amino-2-(3,4-methylendioxyfenyl)acetamido]-3-[(pyridazin-3-ylthio)methyl]decefalosporansyre,

7-[2-amino-2-(3,4-methylehdioxyfenyl)acetamido]-3-[(5-ethyl-pyridazin-3-ylthio)methyl]decefalosporansyre,

formyloxymethyl-7-[2-amiho-2-(3,4-methylendioxyfenyl)acetamido] -3-[(6-methylpyridazin-4-ylthio)methyl]devefalosporanat, 7-[2-amino-3-(3,4-methylendioxyfenyl)propionamido]cefalosporansyre ,

pivaloyloxymethyl-7- [2-amino-3- (3 , 4-methylendioxyf enyl)'-propionamido]cefalosporanat,

7-[2-amino-3-(3,4-methylendioxyfenyl)propionamido]desacetoxy-cefalosporansyre,

7-[2-amino-3-(3,4-methylendioxyfenyl)propionamido]desacetyl-cefalosporansyre,

acetyloxymethyl-7-[2-amino-3-(3,4-methylendioxyfenyl)propionamido] desacetoxycefalosporanat,

7-[2-amino-3-(3,4-methylendioxyfenyl)propionamido]- 3-(pyri-diniummethyl) decef alosporanat,

7-[2-amino-3-(3,4-methylendioxyfenyl)propionamido]-3-[(pyra-zo1-4-ylthio)methyl]decefalosporansyre, formyloxymethyl-7-[2-amino-3-(3,4-methylendioxyfenyl)propionamido] -3-[(3-methylpyrazol-4-ylthio)methyl]decefalosporanat,

7-[2-amino-3-(3,4-methylendioxyfenyl)propionamido]-3-[(1-ethylpyrazol-4-ylthio)methyl]decefalosporansyre,

7-[2-amino-3-(3,4-methylendioxyfenyl)propionamido]-3-[(imida-zo1-4-ylthio)methyl]decefalosporansyre,,

7-[2-amino-3-(3,4-methylendioxyfenyl)propionamido]-3-[(2-ethylimidazol-4-ylthio)methyl]decefalosporansyre, acetyloxymethyl-7-[2-amino-3-(3,4-methylendioxyfenyl)propionamido] -3-[(l-methylimidazol-4-ylthio)methyl]decefalosporanat, 7- [ 2-amino-3- ( 3 , 4-methylendioxyf enyl) propionamido] -3- [ (1,2,4.-triazol-5-ylthio)methyl]decefalosporansyre,

7-[2-amino-3-(3,4-methylendioxyfenyl)propionamido]-3-[(3-ethyl-1,2,4-triazol-5-ylthio)methyl]decefalosporansyre, 7-[2-amino-3-(3,4-methylendioxyfenyl)propionamido]-3-[(4-methyl-1,2,4-triazol-5-ylthio)methyl]decefalosporansyre,

7-[2-amino-3-(3,4-methylendioxyfenyl)propionamido]-3-[ (1-methyl-1,2,4-triazol-5-ylthio)methyl]decefalosporansyre, formyloxymethyl-7-[2-amino-3-(3,4-methylendioxyfenyl)propionamido] -3-%(1,2,3,4-tetrazol-5-ylthio)methyl]decefalosporanat, 7-[2-amino-3-(3,4-methylendioxyfenyl)propionamido]-3-[(1-methyl-^1,2,3, 4-tetrazol-5-ylthio) methyl] decef alosporansyre , 7-[2-åmino-3-(3,4-methylendioxyfenyl)propionamido]-3-[(thiazol-2-ylthio)methyl]decefalosporansyre,

7-[2-amino-3-(3,4-methylendioxyfenyl)propionamido]-3-[(4,5-dimethylthiazol-2-ylthio)methyl]decefalosporansyre, pivaloyloxymethyl-7-[2-amino-3-(3,4-methylendioxyfenyl)propionamido] -3-[(5-ethylthiazol~4-ylthio)methyl]decefalosporanat.

7-[2-amino-3-(3,4-methylendioxyfenyl)propionamido]-3-[(3-methylthiazol-5-ylthio)methyl]decefalosporansyre, 7- [2-amino-3- ( 3 , 4-methylendioxyf enyl)'propionamido] -3- [ (iso-thiazol-4-ylthio)methyl]decefalosporansyre,

7- [ 2-amino--3- (3 , 4-methylendioxyf enyl) propionamido] -3- [(3,5-diethylisothiazol-4-ylthio)mcthyl]decefalosporansyre, acetyloxymethyl-7-[2-amino-3-(3,4-methylendioxyfenyl)propionamido] -3-[(1,2,4-thiadiazol-3-ylthio)methyl]decefalosporanat,

7-[2-amino-3-(3,4-methylendioxyfenyl)propionamido]-3-[(3-methyl-1,2,4-thiadiazol-5-ylthio)methyl]decefalosporansyre, 7- [ 2-aiaino-3- ( 3 , 4-methylendioxyf enyl) propionamido] -3-[(1,3,4-thiadiazol-2-ylthio)methyl]decefalosporansyre, piyaloyloxymethyl-7- [ 2-amino-3-.( 3 , 4-methylendioxyf enyl) - propionamido]decefalosporanat,

7-[2-amino-3-(3,4-methylendioxyfenyl)propionamido]-3-[(oxazol-4-ylthio)methyl]decefalosporansyre,

7-[2-amino-3-(3,4-methylendioxyfenyl)propionamido]-3—[(5-methyloxazol-2-ylthio) methyl] decef alosporansyre formyloxymethyl-7-[2-amino-3-(3,4-methylendioxyfenyl)propionamido] -3-[(2,4-dimethyloxazol-5-ylthio)methyl]decefalo- - sporanat,

7-[2-amino-3-(3,4-methylendioxyfenyl)propionamido]-3-[(1,2,4-oxadiazo1-3-ylthio)methyl]decefalosporansyre, 7-[2-amino-3-(3,4-methylendioxyfenyl)propionamido]-3-[(5-ethyl-1,2,4-oxadiazo1-3-ylthio)methyl]decéfalosporansyre,

acetyloxymethyl-7-[2-amino-3-(3.,4-methylendioxyfenyl)propionamido] -3-[(1,3,4-oxadiazol-2-ylthio)methyl]decefalosporanat, 7-[2-amino-3-(3,4-methylendioxyfenyl)propionamido]-3-[(5-methyl-1,3,4-oxadiazol-2-ylthio)methyl]decefalosporansyre, 7-[2-amino-3-(3,4-methylendioxyfenyl)propionamido]-3-[(2-ethyl-1,3,4-oxadiazol-5-ylthio)methyl]decefalosporansyre, formyloxymethyl-7-[2-amino-3-(3,4-methylendioxyfenyl)propionamido] -3-[(pyrimidin-2-ylthio)methyl]decefalosporanat, 7- [ 2-amino-3- ( 3 , 4-methylendioxyf enyl) propionamido] -:3- [ (5., 6-dimethylpyrimidin-2-ylthio)methyl]decefalosporansyre, pivaloyloxymethyl-7-[2-amino-3-(3,4-methylendioxyfenyl)propionamido] -3-[(6-ethylpyrimidin-4-ylthio)methyl]decefalosporanat ,

7-[2-amino-3-(3,4-methylendioxyfenyl)propionamido]-3-[(pyrazin-2-ylthio)methyl]decefalosporansyre,

7-[2-amino-3-(3,4-methylendioxyfenyl)propionamido]-3-[(3,5-dimethylpyrazin-2-ylthio)methyl]decefalosporansyre, 7-[2-amino-3-(3,4-methylendioxyfenyl)propionamido]-3-[(2-methylpyrazin-3-ylthio)methyl]decefalosporansyre, formyloxymethyl-7-[2-amino-3-(3,4-methylendioxyfenyl)propionamido] -3-[(pyridazin-3-ylthio)methyl]decefalosporanat, 7-[2-amino-3-(3,'4-methylendioxyfenyl)propionamido]-3-[(3-ethylpyridazin-4-ylthio)methyl]decefalosporansyre,

7-[2-amino-4-(3,4-methylendioxyfenyl)butyramido]cefalosporansyre ,

acetyloxymethyl-7-[2-amino-4-(3,4-methylendioxyfenyl)butyramido] cef alosporanat,

7-[2-amino-4-(3,4-methylendioxyfenyl)butyramido]-desacetoxy-cefalosporansyre,

pivaloyloxymethyl-7-[2-amino-4-(3,4-methylendioxyfenyl)butyramido] desacetoxycef alosporanat,

7-[2-amino-4-(3,4-methylendioxyfenyl)butyramido]desacetyl-cefalosporansyre,

7-[2-amino-4-(3,4-methylendioxyfenyl)butyramido]-3-(pyridinium-methyl)decefalosporanat, formyloxymethyl-7-[2-amino-4-(3,4-methylendioxyfenyl)butyramido] -3-[(pyrazol-3-ylthio)methyl]decefalosporanat, 1- [ 2-amino.-4- ( 3 , 4-methylendioxyf enyl) butyramido-3- [ ( 4 , 5-di-methylpyrazol-3-ylthio)methyl]decefalosporansyre,

acyloxymethyl-7-[2-amino-4-(3,4-methylendioxyfenyl)butyramido] -3-[(l-methylpyrazol-4-ylthio)methyl]decefalosporanat, 7-[2-amino-4-(3,4-methylendioxyfenyl)butyramido-3-[(3-ethyl-pyrazol-4-ylthio)methyl]decefalosporansyre, 7-[2-amino-4-(3,4-methylendioxyfenyl)butyramido-3-[(1-methyl-pyrazol-5-ylthio)methyl]decefalosporansyre,

7-[2-amino-4-(3,4-methylendioxyfenyl)butyramido-3-[(5-methyl-pyrazol-2-ylthio)methyl]decefalosporansyre, - 7-[2—amino-4-(3,4-methylendioxyfenyl)butyramido-3-[(4-ethyl-imidazol-2-ylthio)methyl]decefalosporansyre,.

pivaloyloxymethyl-7-[2-amino-4-(3,4-methylendioxyfenyl)butyramido-3-[(1,4-dimethylimidazo1-5-ylthio)methyl]decefalosporanat, 7-[2-amino-4-(3,4-methylendioxyfenyl)butyramido-3-[(1,2-di-methylimidazol-4-ylthio)methyl]decefalosporansyre, 7- [ 2-amiLno-4- (3 , 4-methylendioxyf enyl) butyramido] -3- [ (1,2,3-triazol-5-ylthio)methyl]decefalosporansyre,

7-[2-amino-4-(3,4-methylendioxyfenyl)butyramido]-3-[(4-methyl-1.2.3- triazol-5-ylthio)methyl]decefalosporansyre, formyloxymethyl-7-[2-amino-4-(3,4-methylendioxyfenyl)butyramido] -3-[(3-ethyl-l,2,4-triazol-5-ylthio)methyl]decefalosporanat,

7-[2-amino-4-(3,4-methylendioxyfenyl)butyramido]-3 -[(1-methyl-1.2.4- triazol-5-ylthio)methyl]decefalosporansyre, 7-[2-amino-4-(3,4-methylendioxyfenyl)butyramido]—3-[(1-methyl-1,2,3,4-tetrazol-5-ylthio)methyl]decefalosporansyre, acetyloxymethyl-7-[2-amino-4-(3,4-methylendioxyfenyl)butyramido (-3-[(4,5-diethylthiazol-2-ylthio)methyl]decefalosporanat,

7-[2-amino-4-(3,4-methylendioxyfenyl)butyramido]-3-[(2-methyl-thiazol-4-ylthio)methyl]decefalosporansyre,

7-t 2-amino-4-(3,4-methylendioxyfenyl)butyramido]-3-[(4-ethyl-thiazol-5-ylthio)methyl]decefalosporansyre,

7-[2-amino-4-(3,4rmethylendioxyfenyl)butyramido]-3-[(4,5-dimethylisothiazol-5-ylthio)methyl]decefalosporansyre, 7-[2-amino-4-(3,4-methylendioxyfenyl)butyramido]-3-[(3-ethyl-isothiazol-4-ylthio)methyl]decefalosporansyre,

7-[2-amino-4-(3,4-methylendioxyfenyl)butyramido]-3-[(4-methyl-1.2.3- thiadiazol-5-ylthio)methyl]decefalosporansyre, 7-[2-amino-4-(3,4-methylendioxyfenyl)butyramido]-3-[(5-ethyl-1.2.4- thiadiazol-3-ylthio)methyl]decefalosporansyre, 7-[2-amino-4-(3,4-methylendioxyfenyl)butyramido]-3-[(3-methyl-1.2.5- thiadiazo1-4-ylthio)methyl]decefalosporansyre, pivaloyloxymethyl-7-[2-amino-4-(3,4-methylendioxyfenyl)butyramido] -3-[(5-ethyl-l,3,4-thiadiazol-2-ylthio)decefalosporanat, 7-[2-amino-4-(3,4-methylendioxyfenyl)butyramido]-3-[(5-methyl-oxazol-2-ylthio)methyl]decefalosporansyre,

7-[2-amino-4-(3,4-methylendioxyfenyl)buryramido]-3-[(2,4-dimethyloxazol-5-ylthio)methyl]decefalosporansyre, 7-[2-amino-4-(3,4-methylendioxyfenyl)butyramido]-3-[(5-ethyl-iso a ol-3-ylthio)methyl]decefalosporansyre,

7-[2-amino-4-(3,4-methylendioxyfenyl)butyramido]-3-[(3,4-diethylisoxazol-5-ylthio)methyl]decefalosporansyre, formyloxymethyl-7-[2-amino-4-(3,4-methylendioxyfenyl)butyramido] -3-[(1,2,3-oxadiazol-4-ylthio)methyl]decefalosporanat, 7-[2-amino-4-(3,4-methylendioxyfenyl)butyramido]-3-[(5-methyl-1.2.4- oxadiazol-3-ylthio)methyl]decefalosporansyre, 7-[2-amino-4-(3,4-methylendioxyfenyl)butyramido]-3-[(4-ethyl-1.2.5- oxadiazol-3-ylthio)methyl]decefalosporansyre, 7-[2-amino-4-(3,4-methylendioxyfenyl)butyramido]-3-[(5-methyl-1,3,4-oxadiazol-2-ylthio)methyl]decefalosporansyre, 7-[2-amino-4-(3,4-methylendioxyfenyl)butyramido]-3-[(5-ethyl-pyrimidin-2-ylthio)methyl]decefalosporansyre,

7-[2-amino-4-(3,4-methylendioxyfenyl)butyramido]-3-[(2-methyl-pyrimidin-4-ylthio)methyl]decefalosporansyre,

acetyloxymethyl-7-[2-amino-4-(3,4-methylendioxyfenyl)butyramido] -3-[(5-methylpyrazin-2-ylthio)methyl]decefalosporanat, 7-12-amino-4-(3,4-methylendioxyfenyl)butyramido]-3-[(5,6-dimethylpyrazin-2-ylthio) methyl] decef alosporansyre , 7-[2-amino-4-(3,4-methylendioxyfenyl)butyramido]-3-[(4-ethyl-pyridazin-3—ylthio)methyl]decefalosporansyre og 7-[2-amino-4-(3,4-methylendioxyfenyl)butyramido]-3-[(5-methyl-pyridazin-4-ylthio)methyl]decefalosporansyre.

Forbindelsene ifølge oppfinnelsen fremstilles ved omsetning av 7-aminocefalosporansyre (III) eller et derivat deray med en a-amino-w-(3,4-methylendioxyfenyl)alkansyre (II). De forskjellige 7-aminocefalosporansyrer som anvendes som ut-gangsmaterialer er velkjente forbindelser som tidligere har vært beskrevet i litteraturen.

Således fører hydrolyse av cefalosporin C til dannelse av 7-aminocefalosporansyre, Loder.et al., Biochem. J. 79, 408 - 416 (1961) av formelen:

Forbindelsen 7-aminodesacetoxycefalosporansyre; som har formelen:

fremstilles ved katalytisk reduksjon av cefalosporin C, etterfulgt av hydrolysefjerning av 5-aminoadipoylsidekjeden som beskrevet i US patentskrift 3 129 224.

Behandling av cefalosporin C med acetylesterase fremstilt fra appelsinskall fører til dannelse av 3-hydroxy-methyl-7-aminodecefalosporansyre eller 7-aminodesacety1-cefalosporansyre (IX) som beskrevet av Jefferty et al. Biochem. J., 81, 591 (1961) og med følgende formel:

Behandling av cefalosporin'C med pyridin etterfulgt av en syrehydrolys.e gir forbindelsen 7-amino-3-(pyridinium-methyl)decefalosporansyre (X) som beskrevet f.eks. i US patentskrift 3 117 126 og britisk patentskrifter 9.32 644 , • 957 570 og 959 054 .

De 3-thiomethylerte 7-aminocefalosporansyrer erholdes ved omsetning av 7-aminocefalosporansyre med den egnede thiol som beskrevet i US patentskrift 3 516 997 og 3 641 021. Fortrengning av acetoxygruppen i cefalosporansyrer med en thiolgruppe er en velkjent reaksjon og kan utføres i vandig løsning ved en temperatur på fra 25° C til 150° C i et tidsrom varierende fra 15 minutter til 24 timer i nærvær av en mild base slik som natriumbicarbonat. Fortrinnsvis anvendes et overskudd av thiolen.

Egnede heterocykliske thioler innbefatter de følgen-de fem éller seks-delte ringer som inneholder carbon og fra 1 til 4 carboner valgt fra gruppen bestående av nitrogen, oxygen og svovel, slik som f.eks: pyrazol-3-thiol, 5-methyl-pyrazol-3-thiol, 3,5-dimethylpyrazol-4-thiol, imidazol-2-thiol, imidazol-4-thil, l-ethylimidazol-2-thiol, 1,2,3-triazol-4-thiol, 5-methyl-l,2,3-triazol-4-thiol, 1,2 ,4-triazol-3-thiol, 5-ethyl-l,2,4-triazol-3-thiol, tetrazol-5-thiol, . 1-ethyltetra-zol-5-thiol, thiazol-2-thiol, 2,4-dimethyltriazol-5-thio, isothiazol-3-thiol, 3,4-diethylisothiazol-5-thiol, 1,2,3-

thiadiazol-4-thiol, 5-méthyl-l,2,4-thiadiazol-3-thiol, 1,2,5-thiadiazol-3-thiol, 1,3,4-thiadiazol-2-thiol, 5-methyl-l,3,4-thiadiazol-2-thiol, oxazol-2-thiol, 2-ethyl-oxazpl-4-thiol, isoxazol-3-thiol, 3,4-dimethylisoxazol-5-thiol, 1,2,3-oxadiazol-4-thiol, 5-methyl-l,2,4-oxadiazol-3-thiol, 1,2,5-oxadiazol-3-thiol, 3-methylpyrazin-2-thiol, pyridazin-3-thiol og 3-methylpyridazin-4-thiol.

a-amino-to-(3 , 4-methylendioxyf enyl) alkansyrer er kjente forbindelser. Forbindelsen 2-amino-4-(3,4-methylendioxyf enyl) smørsyre kan erholdes fra 3-(3,4-methylendioxyfenyl)propionaldehyd ved omvandling av den sistnevnte forbindelse til det tilsvarende hydantoinderivat og etterfølgende hydrolyse derav som,illustrert i eksempel 2. Oppløsning av de racemiske a-amino-w-(3,4-methylendioxyfenyl)alkansyrer til deres optisk aktive isomerer utføres ved omvandling til klor-acetamidoderivatene og hydrolyse derav under anvendelse av et svinenyreacylasepreparat som illustrert i eksempel 1.

ct-amino-to- ( 3 , 4-methylendioxyf enyl) alkansyrene kobles generelt som funksjonelle ekvivalenter i form av acyle-ringsmidler for den primære amihogruppe som indikert i formel II. Symbolet B representerer en blokkerende gruppe av den type som anvendes enten i peptidsyntesen eller i en hvilken som helst av de utallige synteser av a-aminobenzylpenicilliri fra 2-fenylglycin. Særlig anvendbare blokkerende grupper innbefatter et proton som med a-aminosaltsyresaltet. Alternativt kan en '3-diketoester slik som methylacetoacetat, anvendes som beskrevet i britisk patentskrift 1 123 333. Den blokkerte aminosyre omvandles til et blandet anhydrid slik som f.eks. med ethylklorfofmiat og kondenseres deretter med en 7-aminocefalosporansyre (III). Fortrinnsvis er den blokkerende gruppe B valgt fra gruppen bestående av t-butyloxycarbonyl, benzyloxycarbonyl, carbomethoxypropen-2-yl- tri-fluoracetyl, triklorethoxycarbonyl/p-methoxycarbobenzoxy, p-nitrocarbobenzoxy og saltsyresaltet.

Etter kobling fjernes disse blokkerende grupper ved velkjente metoder innen faget under dannelse av de ønskede forbindelser ifølge oppfinnelsen. Således kan f.eks. t-butyloxycarbonylgruppen fjernes ved behandling med trifluor eddiksyre eller maursyre, benzyloxycarbonyl og p-methoxycar-bonbenzoxygrupper kan fjernes ved hjelp av trifluoreddiksyre ved romtemperatur, og p-nitrocarbbenzoxygruppen kan fjernes ved katalytisk hydrogenering. Selvsagt kan andre blokkerende grupper for a-aminogruppen også anvendes og slike grupper betraktes å falle innen oppfinnelsens ramme.

Funksjonelle derivater av a-amino-to-( 3, 4-methylendioxyf enyl)alkansyrene anvendt i koblingsreaksjonen innbefatter de tilsvarende acylhalogenider, syreanhydrider, blandede anhydrider og i særdeleshet de blandede anhydrider som fremstilles fra sterkere syrer. I tillegg kan et syreazid eller

en aktiv ester eller thioester slik som p-nitrofenol, thio-fenol eller thioeddiksyre anvendes.

De fri a-amino-w-(3,4-methylendioxyfenyl)alkansyrer kan også kobles til 7-aminocefalosporansyrene (III) ved først omsetning av alkansyren med N,N<1->dimethylklorformiminiumklo-rid, N,N'-carbonyldiimidazol, N,N'-carbonylditriazbl eller et carbodiimid. Spesielt anvendbare carbodiimider innbefatter N,N<1->dicyclohexylcarbodiimid, N,N'-diisopropylcarbodiimid eller N-cyclohexyl-N'-(2-morfolinoethyl)carbodiimid..

7-amihocefalosporansyrene (III) kan kobles som en fri syre. Fortrinnsvis kondenseres de imidlertid i form av egnede salter eller lett hydrolyserte estere. Egnede salter innbefatter natrium eller trialkylammoniumsaltene i hvilke alkylgruppen inneholder fra ltil 5 carbonatomer. Egnede

estere innbefatter.hvilke som helst av de estere som er beskrevet i US patentskrift 3 284 451 eller en hvilken som helst I av silylesterné som er beskrevet i US paténtskrift 3 249 622. Etter koblingsreaksjonen fjernes generelt disse estere under dannelse av produktene ifølge oppfinnelsen. Generelt utføres koblingsreaksjonen i nærvær av et egnet løsningsmiddel slik som aceton, dioxan,'kloroform, ethylenklorid og tetrahydrofuran. I visse tilfelle kan blandinger av vann og et bland--bart organisk løsningsmiddel med fordel anvendes. Tempera-turen ved koblingsreaksjonen varierer fra -30° C til 100° C hvor den foretrukne temperatur er ved eller ubetydelig under romtemperatur.. Reaksjonstiden varierer fra 15 minutter til så lenge som 36 timer. Fortrinnsvis anvendes en reaksjonstid

på fra 1 til 8 timer. Etter kondensasjonsreaksjonen isoleres produktet og renses under anvendelse av kjente metoder innen faget.

En foretrukket gruppe av forbindelser (VI) er de inneholdende en methylthioheterocyklisk gruppe ved 3-stillingen til cefalosporinkjernen. I tillegg til kondensasjonen eller acyleringsprosedyren kan disse forbindelser fremstilles ved fortrengning av 3-acetoxygruppen av en 7-[ a-amino-to-( 3 , 4-methylendioxyfenyl)acylamido]cefalosporansyre (IV) i hvilken a-aminogruppen kan være blokkert eller ublokkert. Denne for-, trengning eller solvolyse utføres med en substituert eller usubstituert heterocyklisk thiol (V) som tidligere beskrevet. Fortrengningen av acetoxygruppen som tidligere beskrevet ut-føres i vann eller buffret vandig løsning ved en temperatur, varierende fra 25° C til 150° C. Fortrinnsvis anvendes et temperaturområde fra 50 til 100° C og en pH på fra 4,0 til 9,0. Egnede vandige løsninger innbefatter de valgte grupper bestående av vann eller en vandig løsning av aceton, tetrahydrofuran og dimethylformamid.

Som angitt utføres solvolysen på en 7-[ct-amino-io-(3,4-methylendioxyfenyl)acylamido]cefalosporansyre av formel (TV) i hvilken a-aminogruppen kan enten være blokkert eller ublokkert. Egnede blokkerende grupper innbefatter de blokkerende grupper som-, tidligere er angitt -som er representert ved symbolet B. En foretrukket metode for utførelse av sol-volysereaksjonen er å anvende en blokkerende forbindelse av formel (IV) i hvilken reaksjonen utføres hovedsakelig, på samme måte. Etterfølgende fjerning av den blokkerende gruppe opp-nås ved anvendelse av kjente metoder innen faget.

Forbindelsene ifølge oppfinnelsen innbefatter de forskjellige cef alosporansyrer hvor symbolet R^er hydrogen

og visse estere derav slik som formyloxymethyl og alkanoyloxy-methylestere hvori alkanoylgruppen inneholder fra 1 til 5 carbonatomer. De foretrukne estere ifølge oppfinnelsen innbefatter formyloxymethyl, acetyloxymethyl og pivaloyloxymethyl-'

estere. Disse estere fremstilles generelt ved kondensering av en a-amino-u-(3,4-methylendioxyfenyl)alkansyre av formel (II) med den tilsvarende 7-aminocefalosporansyreester av formel (III). Disse estere kan fremstilles i henhold til de prosedyrer som er beskrevet av Binderup et al., Journal of Antibiotics 24, 767 (1971).

I visse tilfeller fører fortrengning av acetoxygruppen fra methylgruppen til 3-stillingen til vånding av dobbeltbindingen til 3-stillingen i 3-lactamkjernen. Under disse omstendigheter kan stillingen av dobbeltbindingen re-etableres ved oxydasjon av ringsvovelet til sulfoxydet med slike oxyderende midler som hydrogenperoxyd, natriummetaper-jodat eller en organisk persyre. Etterfølgende reduksjon av sulfoxydet ved hjelp av katalytisk hydrogenering eller natrium-dithionit gir de ønskede cefalosporinderivater som er umettet i 2-stillingen i 3-lactamkjernen.

De nye forbindelser ifølge oppfinnelsen er oralt og parenteralt aktive med god antibakteriell aktivitet. Således er de anvendbare antimikrobielle midler med et bredt spektrum av antimikrobiell aktivitet in vitro overfor standard laboratoriemikroorganismer som anvendes for å bestemme akti-viteten overfor patogene bakterier.- Det antibakterielle spektrum for typiske forbindelser ifølge oppfinnelsen kan bestem-mes på standard måte ved agar-fortynningsplatemetoden som vanligvis anvendes for testing av nye antibiotica.

Nærværet av a-aminogruppen i forbindelsene ifølge oppfinnelsen har en gunstig virkning idet den øker og forbed-rer spekteret av antimikrobiell aktivitet overfor visse, gram-negative mikroorganismer. I tillegg gir nærværet av a-aminogruppen visse ønskelige farmakologiske egenskaper til molekylet og øker derved dets orale aktivitet.

Den høye in vitro antibakterielle aktivitet til de nye forbindelser ifølge oppfinnelsen gjør dem ikke bare anvendbare som farmakologiske midler per se, men gjør dem også^anvendbare som additiver for dyrefor såvel som additiver i materialer som underkastes mikrobiell nedbrytning, slik som boreoljer og brenselsoljer. Disse forbindelser er også nyt-tige på grunn av sin antibakterielle effékt i såper, shampooer og i topiske komposisjoner for behandling av sår og brann-

^skader.

Oppfinnelsen illustreres ytterligere i det etter-følgende. U^^- y*'t- c^,.<^

Eksempel 1

D- 3, 4- methylendioxyferiylglycin

En prøve av 3,4-methylendioxyfenylglycin omdannes til kloracetamidoderivatet i henhold til den prosedyre som er beskrevet av E. Fisher, Ber., 37, 2486 (1904). Ifølge den prosedyre som er beskrevet av Birnbaum et al., J. Biol Chem., 194, 455 (1952), suspenderes.den kloracetylerte aminosyre i vann og pH på suspensjonen justeres til 7,5 med 2N lithium-hydroxyd. Løsningen inkuberes ved 37° C måd et svinenyreacylasepreparat inntil hydrolyse av L-stereoisomeren er fullført. pH på reaksjonsblandingen justeres til 5,0 og L-isomeren som separeres fjernes ved filtrering. pH på filtratet justeres til 1,0 under anvendelse av konsentrert saltsyre og filtratet ekstraheres med kloroform. De kombinerte kloroformekstrakter tørkes over vannfritt natriumsulfat og fordampes under dannelse av kloracetylderivatet av D-isomeren. Kloracetylgruppen fjernes ved hydrolyse under anvendelse av fortynnet saltsyre. pH på hydrolyseblandingen justeres til 5,5<p>g D-3,4-methylendioxyf enylglycinet oppsamles ved filtrering.

Ved å følge hovedsakelig den samme prosedyre opp-løses de racemiske blandinger av 3,4-methylendioxyfenylalanin og 2-amino-4-(3,4-methylendioxyfenyl)smørsyre i deres D- og L-isomere.

Eksempel 2

2- amino- 4-( 3, 4- methylendioxyfenyl) smørsyre

En prøve av 3-(3,4-methylendioxyfenyl)propionalde-hyd, Mosetig, Ber., 62, 127.4 (1929) omdannes til det tilsvarende hydantoinderivat 1 henhold til den prosedyre som er beskrevet av Henze and Speer, J. Am. Chem. Soc, 64 , 522 (1942) ved behandling med ammoniumcarbonat og kaliumcyanid. Det således erholdte hydantoin hydrolyseres med bariumhydroxyd som beskrevet i J. Chem. Soc, 1944 , 629 under dannelse av den ønskedw 2-amino-4-(3,4-methylendioxyfenyl)smørsyre.

Eksempel 3

. N- t- butyloxycarbonyl- 3, 4- méthylendioxyfenylglycin

En løsning av 1,7 ml t-butyloxycarbonylazid i 16 ml dioxan tilsettes til en løsning av 2 *g 3,4-methylendioxyfenylglycin (fremstilt i henhold til fremgangsmåten beskrevet av C.Lorenz Ber., 14, 785 (1881)) løst i en blanding av 4,2 ml trie.thylamin og 16 ml vann. Blandingen omrøres ved romtemperatur over natten og 50 ml vann tilsettes. Reaksjonsblandingen ekstraheres med ether og den vandige fase surgjøres til pH lik 1,5 under anvendelse av fortynnet saltsyre. Den vandige fase ekstraheres med ethylacetat, de kombinerte ekstrakter tørkes over vannfritt natriumsulfat og fordampes til tørr-het i vakuum. Residuet tritureres med. hexan og filtreres under dannelse av 2,3 g N-t-butyloxycarbonyl-3,4-methylendioxyf enylglycin med et- smeltepunkt på 120 - 123° C.

Eksempel 4

3, 4- methylendioxyfenylalanylkloridhydroklorid

Forbindelsen 3,4-methylendioxyfenylalanin, Ber., 59, 2952 (1926), behandles med hydrogenklorid og fosforpentaklorid .i henhold til den prosedyre som er beskrevet av Hartcastle et al., J. Org. Chem., 31, 897 (1966) for fremstilling av fenyl-glycylkloridhydrqklorid under dannelse av 3,4-methylendioxyfenylalanylkloridhydroklorid.

Eksempel 5

7- [ 2-amino-2- ( 3., 4-methylendioxyf enyl) acetamido] - desacetoxycefalosporansyre

En blanding av 2,7 g t-butyl-7-aminodesacetoxy-cefalosporanat, J. Med. Chem. 9, 444 (1966), 2,95 g N-t-butyloxycarbonyl-3 , 4-methylendioxyf enylglycin, fremstilt i henhold til eksempel 3, og 2,5 g N-ethoxycårbonyl-2-ethoxy-1,2-dihydrokinolin inneholdt i 50 ml kloroform omrøres ved

.romtemperatur i 12 timer. Løsningen ekstraheres med fortyn-" net vandig saltsyre, etterfulgt av ekstraksjon med en mettet vandig løsning av natriumbicarbonat og ekstraheres tilslutt med vann. Kloroformløsningen tørkes over vannfritt natriumsulfat og inndampes i vakuum. Det faste residuum løses i 25 ml kald trifluoreddiksyre og ' .blandingen omrøres i ca. 20 minutter. Løsningen fordampes under, redusert trykk under dannelse av et hvitt fast materiale som vaskes med ether og tørkes under vakuum under dannelse av 4 g av trifluoracetatsaltet av det ønskede produkt. Saltet løses i 200 ml vann og en ionebytterharpiks (baseform) tilsettes for å fjerne den beskyttende trifluoracetatgruppe. Blandingen omrøres inntil på på løsningen når 5,0. Harpiksen fjernes ved filtrering og filtratet konsentreres under redusert trykk. Det gjenværende residuum tritureres med ethanol og filtreres under dannelse av 1/2 g 7-[2-amino-2-(3,4-methylendioxyfenyl)acetamido]desacet-oxycefalosporansyre.

Ved å følge den samme prosedyre men anvende 2-N-t-butyloxycarbonyl-3,4-methylendioxyfenylalanin og 2-N-t-butyloxycarbonylamino-4-(3,4-methylendioxyfenyl)smørsyre istedenfor 2-N-t-butyloxycarbonyl-3,4-methylendioxyfenylglycin, erholdes 7-[2-amino-3-(3,4-methylendioxyfenyl)propionamido]desacetoxy-cefalosporansyre og 7-[2-amino-4-(3,4-methylendioxyfenyl)-butyramido]desacetoxycefalosporansyre.

Eksempel 6

7-[2-amino-3-(3,4-methylendioxyfenyl)propionamido]cefalo-. sporansyre

Til en oppslemning av 0,01 mol 7-aminocefalosporansyre i 50 ml kloroform tilsettes 4 ml N,0-bis-trimethylsilyl-acetamid. Blandingen omrøres inntil alt av det faste materiale løses og 0,02 mol N,N-dimethylanilin tilsettes. Løs-ningen avkjøles til 5° C og en 0,01 mol porsjon av 3,4-methylendioxyfenylalanylkloridhydroklorid tilsettes. Blandingen omrøres ved 5 - 10° C i ca. 2 timer under nitrogenat-mosfære. 50. ml vann tilsettes og pH på blandingen bringes til 2,0 med en vandig natriumbicarbonatløsning. Den vandige fase fraskilles, avfarves med benkull, filtreres og pH på filtratet justeres til 4,0 med en fortynnet, natriumhydroxyd-løsning. Den resulterende løsning avkjøles og det ønskede produkt som dannes fjernes ved filtrering, vaskes med vann og aceton og lufttørkes under dannelse av 7-[2-amino-3-(3,4-methylendioxyfenyl)propionamido]cefalosporansyre.

oVed å følge hovedsakelig den samme prosedyre men anvende 3,4-methylendioxyfenylglycylkloridhydroklorid og 2-amino-4-(3,4-methylendioxyfenyl)butyrylkloridhydroklorid er-• holdes 7-[2-amino-2-(3, 4-methylendioxyf enyl) acetamido] cefalo-0 sporansyre og 7-[2-amino-4-(3,4-methylendioxyfenyl)butyramido]-cefalosporansyre.

Eksempel 7 7-[2-N-t-butyloxycarbonylamino-2-(3,4-methylendioxyfenyl) acetamido] cef alosporansyre

En omrørt løsning av 0,05 mol N-t-butyloxycarbonyl-3,4-methylendioxyfenylglycin og 6,9 g (0,05 mol) triethylamin i. 200 ml tetrahydrofuran avkjøles til -10° C og 6,5 ml (0,05 mol) isobutylklorformiat tilsettes. Løsningen holdes ved en temperatur på -10 til -5° C i ca. 10 minutter til hvilken det deretter tilsettes under omrøring en kald løsning av 0,05 mol triethylammoniumsalt av 7-aminocefalosporansyre løst i 180 ml av en 50 %-ig vandig tetrahydrofuranløsning. Reaksjonsblandingen omrøres ved 5° C i ca. 1 time og tillates deretter å

nå romtemperatur i ytterligere 1 time. Tetrahydrofuranløs-ningsmidlet fjernes ved fordampning og residuet løses i en blanding av 300 ml vann og 100 ml ethylacetat. Det organiske lag fraskilles og fjernes. Det vandige lag avkjøles til. ca.

5° C og ytterligere 300 ml ethylacetat tilsettes. Blandingen surgjøres til pH 3,0 under anvendelse av en vandig 10 %-ig saltsyreløsning. Blandingen filtreres, ethylacetatlaget fraskilles og det vandige lag ekstraheres igjen med 150 ml ethylacetat. De. kombinerte organiske ekstrakter vaskes med vann, tørkes over vannfritt natriumsulfat og fordampes til tørrhet i vakuum. Restoljen tritureres med en blanding av ether og petrolether inntil den stivner. Krystallisering av dette residuum fra en ether-petroleumetherblanding gir den ønskede 7-t2-N-t-butyloxycarbonylamino-2-(3,4-methylendioxyfenyl)-acetamido]cefalosporansyre.

Ved hovedsakelig å følge den samme prosedyre men anvende 2-N-t-butyloxycarbonyl-3,4-methylendioxyfenylalanin og 2-N-t-butyloxycarbonylamino-4-(3,4-methylendioxyfenyl)-smørsyre istedenfor N-t-butyloxycarbonyl-3,4-methylendioxy f enylglycin, erholdes 7-[ 2-N-t-butyl.oxycarbonylamino-3-(3 , 4-methylendioxyfenyl)propionamidojcefalosporansyre og 7-[2-N-t-butyloxycarbonylamino-4-(3,4-methylendioxyfenyl)butyramido]-cefalosporansyre.

Eksempel 8

7-[2-amino-2-(3,4-methylendioxyfenyl)acetamido]-cefalosporansyre

En 5 grams prøve av 7-[2-N-t-butyloxycarbonylamino-2-(3,4-methylendioxyfenyl)acetamido]cefalosporansyre, fremstilt ifølge eksempel 7,. løses i 40 ml vannfritt trifluoreddiksyre som på forhånd er avkjølt til 5° C. Den resulterende løsning omrøres i ca. 10 minutter og heldes i vannfri . ether. Trifluoreddiksyresaltet som dannes oppsamles ved filtrering, løses i vann og den resulterende løsning omrøres med en mild basisk ionebytterharpiks inntil pH på løsningen når 5,0. Harpiksen fjernes ved filtrering, og filtratet fordampes til et lite volum. Det. gjenværende residuum tritureres med ethanol, avkjøles i 1 time og 7-[2-amino-2-(3,4-methylendioxyfenyl)acetamido]cefalosporansyre som dannes oppsamles ved filtrering.

Eksempel 9 Pivaloyloxymethyl-7- [ 2-amino-3- ('3 , 4-methylendioxyf enyl) - propionamido] cefalosporanat- hydroklorid

0,01 mol pivaloyloxymethy1-7-aminocefalosporanat-hydroklorid suspenderes med tilstrekkelig omrøring i 50 ml vannfri kloroform ved en temperatur på ca. 0° C. 2,2 g natriumbicarbonat.tilsettes etterfulgt av tilsetning av 0,01 mol 3,4-methylendioxyfenylalanylklorid-hydroklorid. Blandingen omrøres i ca. 4 timer ved 0° C, filtreres og filtratet fordampes til tørrhet i vakuum. Residuet løses i vann og lyofiliseres under dannelse av det ønskede pivaloyloxymethyl-7-[2-amino-3-(3,4-méthylendioxyfenyl)propionamido]cefalospo-ranat-hydroklorid .

Ved hovedsakelig å følge den samme prosedyre men anvende formyloxymethyl-7-aminocefalosporanat-hydroklorid, acetyloxymethyl-7-aminocefalosporanat-hydroklorid og propio-nyloxymethy1-7-aminocefalosporanat-hydroklorid istedenfor pivaloyloxymethyl-7-aminocefalosporanat-hydroklorid, erholdes f.ormyloxymethyl-7 - [ 2-amino-3-(3,4-methylendioxyfenyl)propionamido] cef alosporanat-hydroklorid, acetyloxymethyl-7-[2-amino-3-(3,4-methylendioxyfenyl)propionamido]cefalosporanat-hydroklorid og propionyloxymethyl-7-t2-amino-3-(3,4-methylendioxyf enyl) propionamido] cef alosporanat-hydroklorid.

Eksempel 10

Natrium-7-[2-amino-2-(3,4-methylendioxyfenyl)acetamido]-desacetylcefalosporanat

En suspensjon av 7-[2-amino-2-(3>4-methylendioxyfenyl)acetamido]cefalosporansyre fremstilt ifølge eksempel 8, suspenderes i 100 ml vann, justeres til en pH lik 7,1 med 0,2 N natriumhydroxydløsning og behandles med appelsinskall-esterase ved en pH på 7,0. pH på reaksjonsblandingen holdes konstant på 7,0 under reaksjonen ved titrering med en løsning av 0,2 N natriumhydroxyd. Etter ca. 4 timer behandles den resulterende løsning med aktivert carbon og filtreres gjennom en kake av diatoméjord. Kaken ekstraheres med en vandig 80 %-ig acetonløsning og ekstraktet fordampes i vakuum for å fjerne acetonet. Den resulterende vandige løsning lyofilise-.res under dannelse av det ønskede natrium-7-[2-amino-2-(3,4-methylendioxyfenyl)acetamido]desacetylcefalosporanat.

Ved hovedsakelig å følge den samme prosedyre men anvende forbindelsene 7-[2-amino-3-(3,4-methylendioxyfenyl)-propionamido]cefalosporansyre og 7-[2-amino-4-(3,4-methylendioxyfenyl)butyramido]cefalosporansyre istedenfor 7-[2-amino~

2-(3,4-methylendioxyfenyl)acetamido]cefalosporansyre, erholdes natriumsaltene av 7-[2-amino-3-(3,4-methylendioxyfenyl) propionamido]desacetylcefalosporansyre og 7-[2-amino-4-(3,4-methylendioxyfenyl)butyramido]desacetylcefalosporansyre.

Eksempel 11

'7-[2-amino-2-(3,4-methylendioxyfenyl)acetamido]-3-( pyridiniummethyl) decef alosporanat

N-t-butyloxycarbonylamino-3,4-methylendioxyfenylglycin, fremstilt ifølge eksempel 3, løses i tørr tetra-hydrof uran inneholdende triethylamin. Løsningen avkjøles i et isbad og isobutylklorformiat i tørr tetrahydrofuran ti]- settes dråpevis under omrøring. Etter ca. 20 minutter tilsettes en vandig kald løsning av 7~amino-3-(pyridiniummethyl)-decefalosporansyre dråpevis i løpet av 30 minutter. Blandingen omrøres under avkjøling i 3 timer. Kaldt vann tilsettes og tetrahydrofuranet fjernes i vakuum. Den gjenværende vandige løsning overheldes med ethylacetat og surgjøres til en pH lik 2,5 under anvendelse av IN saltsyre. Det vandige lag fordampes til tørrhet i vakuum. Det amorfe residuum løses i methanol, filtreres og konsentreres for å fremkalle krystallisering.'Det resulterende produkt behandles med trifluoreddiksyre for å fjerne N-t-butyloxycarbonylamino-beskyttende gruppe under dannelse av det ønskede 7-[2-amino-2-(3,4-methylendioxyfenyl)acetamido]-3-(pyridiniummethyl)decefalosporanat.

Ved hovedsakelig å følge den samme prosedyre men anvende 2-N-t-butyloxycarbonyl-3,4-methylendioxyfenylalanin og 2-N-t-butyloxycarbonylamino-4-(3,4-methylendioxyfenyl)-smørsyre istedenfor 2-N-t-butyloxycarbonyl-3,4-methylendioxyfenylglycin erholdes 7-[2-amino-3-(3,4-methylendioxyfenyl)-propionamido]-3-(pyridiniummethyl)decefalosporanat og 7-[2-amino-4-(3,4-methylendioxyfenyl)butyramido]-3-(pyridinium-methyl) decef alosporanat .

Eksempel 12

7-amino-3- [ (1-methyl-l ,2,3, 4-te'trazol-5-ylthio) methyl] - dé cefalosporansyre

Til en blanding av 7-aminocefalosporansyre og 1-methyl-1,2,3,4-tetrazol-5-thiol inneholdt i en 50 %-ig vandig acetonløsning, tilsettes natriumbicarbonat inntil alt av. reak-, tantene er fullstendig løst. Den resulterende løsning omrøres i ca. 6 timer ved 60° C og konsentreres til tørrhet under redusert trykk. Residuet løses i vann og pH på den resulterende . løsning justeres til 4,0 med en 10 %-ig saltsyreløsning for å danne et bunnfall som fjernes ved filtrering og vaskes med alkohol under dannelse av den ønskede 7-amino-3-[(1-methyl-1,2,3,4-tetrazol-5-ylthio)methyl]decefalosporansyre.

Ved hovedsakelig å følge den samme prosedyre men anvende 5-methyl-l,3,4-thiadiazol-2-thiol, 1,2,3-triazol-5- thiol, 5-methyl-imidazol-2-thiol og.1,3,4-oxadiazol-2-thiol

istedenfor l-methyl-l,2,3,4-tetrazol-5-thiol erholdes 7-amino-.• 3 - [ (5-methyl-l, 3 , 4-thiadia zol-2-ylthio) methyl] decef alosporansyre , 7-amino-3-[(5-methyl-imidazol-2-ylthio)methyl]decefalosporansyre og 7-amino-3-[(1,3,4-oxadiazol-2-ylthio)methyl]-decefalosporansyre.

Eksempel 13

7-[2-amino-3-(3,4-methylendioxyfenyl)propionamido]3-1(1,2,3- . triazol- 5- ylthio) methyl] decefalosporansyre

Til en omrørt og avkjølt (5 + 2° C) suspensjon av 0,05 mol 7-amino-3-[(1,2,3-triazol-5-ylthio)methyl]decefalosporansyre tilsettes 150 ml methylenklorid, 13,5 ml .(0,092 mol) triethylamin,.15 ml (0,118 mol) N,N-dimethylanilin og 19,1 ml (0,15 mol) trimethylklorsilan. Reaksjonsblandingen avkjøles i ca. 15 minutter og bringes deretter til tilbakeløpstempera-tur i 25 minutter. Ved avkjøling til 5° C tilsettes 0,061 mol 3-, 4-methy lendioxyf enylalanylkloridhydroklorid . Reaks jons-blandingen omrøres ved ca. 10° C i 1 time, 150 ml vann tilsettes, omrøringen fortsettes i ytterligere 15 minutter og blandingen filtreres. Den vandige fase separeres og dets pH justeres til 2,0 under anvendelse av en 10 %-ig vandig natriumhydroxydløsning. Den vandige løsning filtreres og pH

på filtratet justeres til 4,0 med 10 %-ig natriumhydroxyd. Den vandige fase ekstraheres med ether, fraskilles, filtreres og 50 ml acetonitril tilsettes. Blandingen avkjøles og det ønskede 7-[2-amino-3-(3,4-methylendioxyfenyl)propionamido]-3-[(1,2,3-triazol-5-ylthio)methyl]decefalosporansyre oppsamles ved filtrering, vaskes med vann og tørkes under vakuum. Ved hovedsakelig å følge den samme prosedyre men anvende 7-amino-3-[(l-methyl-l,2,3,4-tetrazol-5-ylthio)methyl]decefalosporansyre, 7-amino-3-[(5-methyl-l,3,4-thiadiazol-2-ylthio)-methyl]decefalosporansyre, 7-amino-3-[(5-methylimidazol-2-ylthio)methyl]decefalosporansyre og 7-amino-3-[(1,3,4-oxadiazol-2-ylthio)methyl]decefalosporansyre istedenfor 7-amino- . 3-t(1,2,3-triazol-5-ylthio)methyl]decefalosporansyre erholdes 7-i 2-amino-3-(3,4-methylendioxyfenyl)propionamido]-3-[(1-methyl-1,2,3,4-tetrazol-5-ylthio)methyl]decefalosporansyre,

7-[2-amino-3-(3,4-methylendioxyfenyl)propionamido]-3-[(5-methyl-1,3,4-thiadiazol-2-ylthio)methyl]decefalosporansyre, 7-[2-amino-3-(3,4-methylendioxyfenyl)propionamido]-3-[(5-methylimidazol-2-ylthio)methyl]decefalosporansyre og 7-[2-amino-3-(3,4-methylendioxyfenyl)propionamido]-3-[(1,3,4-oxadiazol-2-ylthio)methyl]decefalosporansyre.

Ved anvendelse av 3,4-methylendioxyfenylglycylkloridhydroklorid og 2-amino-4-(3,4-methylendioxyfenyl)butyryl-kloridhydroklorid istedenfor 3,4-methylendioxyfenylalanylkloridhydroklorid erholdes 7-[2-amino-2-(3,4-methylendioxyfenyl)-acetamido]-3-[(1,2,3-triazol-5-ylthio)methyl]decefalosporansyre og 7-[2-amino-4-(3,4-methylendioxyfenyl)butyramido]-3-[(1,2,3-triazol-5-ylthio)methyl]decefalosporansyre.

Eksempel 14

7-[2-amino-2-(3,4-methylendioxyfenyl)acetamido]-3-[(5-methyl-1, 3, 4- thiadiazol- 2- ylthio) methyl] decefalosporansyre

En blanding av 0,036 mol 7-[2-N-t-butyloxycarbonylamino-2-(3,4-methylendioxyfenyl)acetamido]cefalosporansyre, 0,038 mol 2-mercapto-5-methyl-l,3,4-thiadiazol, 0,038 mol natriumbicarbonat og 3 3 ml fosfatbuffer (pH 6,2) oppvarmes til 57° C i 23 timer. Løsningen avkjøles til romtemperatur og ekstraheres med ethylacetat. Den vandige fase avkjøles ytterligere til 5° C, ytterligere ethylacetat tilsettes og blandingen omrøres under tilsetning av 3N saltsyre for å justere pH til 3,0. Den organiske fase fraskilles og det. vandige lag reekstraheres med ethylacetat. De organiske ekstrakter kombineres, tørkes over vannfritt natriumsulfat

og^fordampes til tørrhet under redusert trykk. Det gjenværende residuum løses i vandig 5 %-ig natriumcarbonatløsning, behandles med benkull, filtreres og surgjøres under dannelse av N-t-butyloxycarbonylderivatet av det ønskede produkt. Dette derivat løses i kald trifluoreddiksyre (10 g syre pr.

1 g forbindelse) og blandingen tillates å stå i 15 minutter. Den resulterende sure løsning heldes i ti -volumer vannfri ether og trifluoracetatsaltet som utfelles oppsamles ved filtrering og vaskes med ether. Trifluoracetatsaltet løses i et minimum av vann og pH på løsningen justeres til 4,0 med en fortynnet løsning av ammoniumhydroxyd. Den ønskede 7-[2-amino-2-(3,4-methylendioxyfenyl)acetamido]-3-[(5-methyl-l,3,4-thiadiazol-2-ylthio)methyl]decefalosporansyre som utskilles,

oppsamles ved filtrering og tørkes. Ved å følge hovedsakelig, den.samme prosedyre men anvende 5-mercapto-l-methyl-l,2,3,4-tetrazol, 4-mercapto-l,2,3-triazol,.2-mercapto-5-methyl-imidazol og 2-mercapto-l,3,4-oxadiazol istedenfor 2-mercapto-5-methyl-l,3,4-thiadiazol erholdes 7-[2—amino-2-(3,4-methyleh-dioxyfenyi)acetamido]-3-t(l-methyl-l,2,3,4-tetrazol-5-ylthio)-methyl] decef alosporansyre, 7--[ 2-amino-2- (3 , 4-methylendioxyfenyl)acetamido]-3-[(1,2,3-triazol-5-ylthio)methyl]decefalosporansyre, 7-[2-amino-2-(3,4-methylendioxyfenyl)acetamido]-3-[(5-methylimidazol-2-ylthio)methyl]decefalosporansyre og 7-[2-amino-2-(3,4-methylendioxyfenyl)acetamido]-3-[(1,3,4-oxadiazol-2-ylthio)methyl]decefalosporansyre.

Ved hovedsakelig å følge den samme prosedyre men<*>anvende 7-[2-N-t-butyloxycarbonylamino-3-(3,4-methylendioxyfenyl)propionamido]cefalosporansyre og 7-[2-N-t-butyloxycarbonylamino-4-(3,4-methylendioxyfenyl)butyramido]cefalosporansyre istedenfor 7-[2-N-t-butyloxycarbonylamino-2-(3,4-methylendioxyfenyl)acetamido]cefalosporansyre erholdes 7-[a-amino-w-(3,4-methylendioxyfenyl)acylamido(cefalosporansyre.

Eksempel 15

Det følgende eksempel illustrerer in vitro aktivi-teten av forbindelsene ifølge oppfinnelsen.

Doble seriefortynninger av testforbindelsen gjøres/i trypticase soyakraft. En serie av rør med nærihgskraft inneholdende forskjellige konsentrasjoner av testforbindelsen podes med den bestemte bakteriekultur som anvendes for in vitro aktivitet. De podede rør undersøkes med hensyn til inhibering av bakterievekst etter 24 timers .inkubering ved

.37° C. Den følgende tabell angir den minimale inhiberende konsentrasjon (MIC) for forskjellige bakteriekulturer testet med forbindelsen 7-[2^amino-2-(3,4-methylendioxyfenyl)acetamido] desacetoxycefalosporansyre.

Følgende eksempel illustrerer den in vivo aktivitet til forbindelsene ifølge oppfinnelsen..

Flere grupper av 10 mus utfordres med en fatal bak-terieinfeksjon. Forskjellige doseringsnivåer av testforbindelsen administreres oralt eller subcutant til separate grupper av disse dyr 1 og 4 timer etter utfordringen. Etter 3 eller 4 dager, avhengig av testorganismen, opptegnes antall over-levende ved hvert doseringsnivå og den dose som er nødvendig pr. behandling for å beskytte 50 % av de infiserte mus (EDj-q) beregnes ved den metode som er beskrevet av Reed and Muench, Amer. J.Hyg. 27, 493-497 (1938).

Claims

!• Fremgangsmåte for fremstilling av en 7-[a-amino-w-(3,4-methylendioxyfenyl)acylamino]cefalosporansyre med formelen:

hvori Z er valgt fra gruppen bestående av en sigmabinding, methyleh og ethylen, R-^ er valgt fra gruppen bestående av hydrogen, hydroxy, acetoxy, pyridinium og -S-R2/ R2 er methyl og ethyl usubstituert eller mono og di-substituert heterocyklisk del valgt fra gruppen bestående av pyrazolyl, imidazolyl, triazolyl, tetrazolyl, thiazolyl, isothiazolyl, thiadiazolyl, oxazolyl, isoxazolyl, oxadiazol, pyrimidinyl, pyrazinyl.og pyridazinyl, R^ er valgt fra gruppen bestående av hydrogen, formyloxymethyl og alkanoyloxymethyl hvori alkanoylgruppen inneholder fra 1 til 5 carbonatomer, eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, karakterisert ved at en 7-aminocefalosporansyre av formelen:

hvori R-^ og R^ er som ovenfor definert, kondenseres i løsning med en a-amino-w-(3,4-methylendioxyfenyl)alkansyre med formelen:

hvori Z er som ovenfor definert og B .er en blokkerende gruppe valgt fra gruppen bestående av t-butyloxycarbonyl, benzyloxycarbonyl, carbomethoxypropen-2-yl, trifluoracety1, triklorethoxycarbonyl, p-methoxycarbobenzoxy, p-nitrocarbobenzoxy og saltsyresaltet, eller med dets funksjonelle ekvivalent som et acyleringsmiddel for en primær aminogruppe, idet kondenserin-gen av cefalosporansyre og alkansyren eller dets. funksjonelle derivater utføres ved en temperatur varierende fra -30° C til 100° C og i et tidsrom varierende fra 15 minutter til 36 timer, hvoretter den blokkerende gruppe fjernes og det ønskede produkt gjenvinnes.
2. Fremgangsmåte for fremstilling av 7-[2-amino-to-(3,4-methylendioxyfenyl)acylamido]cefalosporansyre av formelen:

, hvor Z er valgt fra gruppen bestående av en sigmabinding, methylen og ethylen, R2 er en methyl og ethyl usubstituert eller mono og disubstituert heterocyklisk del valgt fra gruppen bestående av pyrazolyl, imidazolylc triazolyl, tétrazolyl, thiazolyl, isothiazolyl, thiadiazolyl, .isothiazolyl, thiadiazolyl, oxazolyl, isoxazolyl, oxadiazol, pyrimidinyl, pyra- zinyl og pyridazinyl, eller et farmasøytisk akseptabelt salt . derav, karakterisert ved . at en 7-[ a-amino-w-(3,4-methylendioxyfenyl)acylamido]cefalosporansyre av formelen:

hvori Z er som ovenfor definert, og en methyl og ethylsubsti-tuert eller usubstituert heterocyklisk thiol R2 SH hvori R2 er som ovenfor definert, løses i et vandig løsningsmiddel valgt fra gruppen bestående av vann eller en vandig lø sning av aceton, tetrahydrofuran og dimethylformamid, hvoretter løsningen holdes ved en temperatur på fra 25° C til 150° C i et tidsrom varierende fra 15 minutter til 24 timer og hvoretter det ønskede produkt gjenvinnes.
3. Fremgangsmåte for fremstilling av 7-[a-amino-w-(3,4-methylendioxyfenyl)acylamido]cefalosporansyre av formelen:

hvori Z er valgt fra gruppen bestående av en sigmabinding, methylen.og ethylen, R2. er en methyl og ethyl usubstituert eller mono og disubstituert heterocyklisk del av gruppen bestående av pyrazolyl, imidazolyl, triazolyl, tétrazolyl, thiazolyl, isothiazolyl, thiadiazoly1, isothiazolyl, oxazolyl, isoxazolyl, oxadiazol, pyrimidinyl, pyrazinyl og pyridazinyl, eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, karak terisert ved at en blokkert 7-[ a-amino-w- ( 3 , 4-methy- •■ lendioxyfenyl)acylamido]cefalosporansyre av formelen:

hvori Z er som ovenfor definert og B er en. blokkerende gruppe valgt fra gruppen bestående av t-butyloxycarbonyl, benzyloxy- carbonyl ; carbomethoxypropen-2-.yl, trif luoracetyl, triklorethoxycarbonyl, p-methoxycarbobenzoxy, p-nitrocarbobenzoxy og saltsyresaltet, løses med en methyl og ethyl substituert eller usubstituert heterocyklisk thiol R2 SH hvori R2 er som ovenfor definert i et vandig løsningsmiddel valgt fra gruppen bestående av vann eller en vandig løsning av aceton, tetrahydrofuran og dimethylformamid, hvoretter løsningen holdes ved en temperatur på fra 25° C til 1.50° C i et tidsrom varierende fra 15 minutter til 24 timer, hvoretter den blokkerende gruppe fjernes og det ønskede produkt.gjenvinnes.
4. Fremgangsmåte ifølge krav 1 ved fremstilling av forbindelser av formel:

hvori A er valgt fra gruppen bestående av hydrogen, hydroxy, acetoxy og pyridinium, R^ er valgt fra gruppen bestående av hydrogen, formyloxymethyl og alkanoyloxymethyl hvori alkanoylgruppen inneholder fra 1 til 5 carbonatomer, og farmasøytisk akseptable salter derav.
5. Fremgangsmåte ifølge krav 1 ved fremstilling av forbindelser av formel:

hvori 1*2 er en methyl og ethyl usubstituert eller mono og disubstituert heterocyklisk del valgt fra gruppen bestående av pyrazolyl, imidazolyl, triazolyl, tétrazolyl, thiazolyl, isothiazolyl, thiadiazolyl, oxazolyl, isoxazolyl, oxadiazol, pyrimidinyl, pyrazinyl og pyridazinyl, R-^ er valgt fra gruppen bestående av hydrogen, formyloxymethyl og alkanoyloxymethy1 hvori alkanoylgruppen inneholder fra 1 til 5 carbonatomer, og farmasøytisk.akseptable salter derav.
6. Fremgangsmåte ifølge krav 1 ved fremstilling av 7— [2-amino-2-(3,4-methylendioxyfenyl)acetamido]desacetoxycefalo-sporansyre .
7. Fremgangsmåte ifølge krav 1 ved fremstilling av 7-[2-amino-2-(3,4-methylendioxyfenyl)acetamido]cefalosporansyre.
8. Fremgangsmåte ifølge krav 1 ved fremstilling av 7-[2-amino-2-(3,4-methylendioxyfenyl)acetamidoh3-[(5-methyl-1,3,4-thiadiazol-2-ylthio)methyl]decefalosporansyre.
9. Fremgangsmåte ifølge krav 1 ved fremstilling av 7-[2-amino-2-(3,4-methylendioxyfenyl)acetamido]-3-[(1-methyl-1,2,3,4-tetrazol-5-ylthio)methyl]decefalosporansyre.
10. Fremgangsmåte ifølge krav 1 ved fremstilling av 7-[2-amino-2-(3,4-methylendioxyfenyl)acetamido-3-[(1,2,3-triazol-5-ylthio)methyl]decefalosporansyre.