NO752516L - - Google Patents

Info

Publication number
NO752516L
NO752516L NO752516A NO752516A NO752516L NO 752516 L NO752516 L NO 752516L NO 752516 A NO752516 A NO 752516A NO 752516 A NO752516 A NO 752516A NO 752516 L NO752516 L NO 752516L
Authority
NO
Norway
Prior art keywords
enzyme
stated
culture medium
glucose isomerase
curtobacterium
Prior art date
Application number
NO752516A
Other languages
English (en)
Inventor
J L Meers
Original Assignee
Ici Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from GB33578/74A external-priority patent/GB1492258A/en
Application filed by Ici Ltd filed Critical Ici Ltd
Publication of NO752516L publication Critical patent/NO752516L/no

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/90Isomerases (5.)
    • C12N9/92Glucose isomerase (5.3.1.5; 5.3.1.9; 5.3.1.18)
    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10STECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/8215Microorganisms
    • Y10S435/822Microorganisms using bacteria or actinomycetales
    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10STECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/8215Microorganisms
    • Y10S435/822Microorganisms using bacteria or actinomycetales
    • Y10S435/83Arthrobacter
    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10STECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/8215Microorganisms
    • Y10S435/822Microorganisms using bacteria or actinomycetales
    • Y10S435/867Micromonospora
    • Y10S435/869Micromonospora purpurea
    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10STECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/8215Microorganisms
    • Y10S435/822Microorganisms using bacteria or actinomycetales
    • Y10S435/886Streptomyces
    • Y10S435/887Streptomyces albus

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Description

Oppfinnelsen vedrører fremstilling av glukose-isomerasé
og enzymatisk omdannelse av glukose til fruktose.
I de senere år er en stor del av forskningsarbeidet blitt rettet mot utvikling av fremgangsmåter for omdannelse av glukose til fruktose, siden fruktose er betydelig søtere. De mest egnede prosesser er de hvor omdannelsen istandbringes av enzymet glukose-isomerase. Således er fremgangsmåter for fremstilling av dette enzym blitt viet stor oppmerksomhet. Opptil idag har de fremgangsmåter som er blitt foreslått for fremstilling av enzymet, vært batch-metoder.
Søkeren har funnet at når glukose-isomerase fremstilles
ved kontinuerlig fermentering under anvendelse av egnede betingelser, kan utbyttet av enzym (både når det gjelder enzym-mengde fremstilt pr. gram karbonkilde og når det gjelder enzymproduksjon pr. enhet av fermentatorvolum) og dets aktivitet ved isomerisering av glukose til fruktose forbedres.
I henhold til foreliggende oppfinnelse tilveiebringes en fremgangsmåte for fremstilling av glukose-isomerase-enzym eller et enzympreparat som inneholder glukose-isomerase ved kontinuerlig dyrkning av en glukose-isomerase-produserende mikroorganisme i et dyrkningsmedium som omfatter en kilde for åssimilerbart karbon og uorganiske næringsmidler under betingelser som er egnet for fremstilling av det nevnte enzym eller enzympreparat, og kontinuerlig utvinning av enzymet eller enzympreparatet, hvorved konsentrasjonen av en næringskilde, spesielt karbonkilden, i dyrkningsmediet holdes på et slikt nivå at veksten begrenses.
I henhold til oppfinnelsen tilveiebringes videre en fremgangsmåte for isomerisering av glukose til fruktose under anvendelse av et glukose-isomerase-enzym eller et enzympreparat som inneholder glukose-isomerase, som er blitt fremstilt ved kontinuerlig dyrkning av en glukose-isomerase-produserendé mikroorganisme i et dyrkningsmedium som omfatter en kilde av assimilerbart karbon og uorganiske næringsstoffer under betingelser som er egnet for fremstilling av det nevnte enzym eller enzympreparat, og kontinuerlig utvinning av enzymet eller enzympreparatet, hvorved konsentrasjonen av an næringskilde, spesielt karbonkilden, i dyrkningsmediet holdes på et slikt nivå at veksten begrenses.
I denne beskrivelse refereres næringskilden hvis konsentrasjon holdes på et slikt nivå at veksten begrenses, til som det begrensende næringsstoff.
Fremgangsmåten i henhold til oppfinnelsen for fremstilling av glukose-isomerase igangsettes med dyrkning av en mikroorganisme ved en konvensjonell batch-metpde. Når kulturen vokser tilfredsstillende, begynner man med kontinuerlig tilsetning av næringsstoffer, idet kulturen fjernes fra fermentatoren i en hastighet i likhet med den som næringsstoffer tilsettes i. Egnede næringsstoffer er kilder for karbon, nitrogen, fosfor, magnesium, svovel, kalium og sporelementer. En kilde for organisk nitrogen som kan inneholde vekstfaktorer, f.eks. gjærekstrakt eller maisstøpvæske, tas også ofte med. Næringsstoffene tilsettes
fortrinnsvis til kulturen i konsentrasjoner (vekt/vekt% av kilde-forbindelsen) innen de følgende områder (prosentene angir vekt):
Ved fremgangsmåten i henhold til oppfinnelsen for fremstilling av glukose-isomerase er det begrensende næringsstoff, f.eks. karbonkilden, tilstede i slike konsentrasjoner at ytterligere økning i den tørre vekt av mikroorganismene som anvendes, bare begrenses ved mangel på ytterligere mengder av det begrensende næringsstoff.
Enhver glukose-isomerase-produserende mikroorganisme kan anvendes ved fremgangsmåten i henhold til oppfinnelsen for frem stilling av enzymet eller enzympreparatet. Egnede mikro-organismer innbefatter stammer av slektene Streptomyces, Arthrobacter, Mycobacterium og Curtobacterium. Sistnevnte slekt omfatter stammer som tidligere var klassifisert i slektene Bréyibacterium og Corynebacterium og er definert av K. Yåmada og
K. Komagata i J. Gen. Appl. Microbiol., 18, 417-431, (1972), s. 424-5. Anvendelsen av stammer av slekten Curtobacterium er beskrevet i søkerens samtidige britiske søknad nr. 13994/74.
Eksempler på egnede Curtobacterium-stammer for anvendelse ved fremgangsmåten i henhold til oppfinnelsen er glukose-isomerase-produserende stammer av Curtobacterium citreum - f.eks. NCIB 10702, Curtobacterium pusillum - f.eks. NCIB 10354; Curtobacterium luteum - f.eks. NCIB 11029, Curtobacterium helvolum - f.eks. NCIB 10352&
10353 og Curtobacterium alvedum - f.eks. NCIB 11030, hvorav alle tidligere ble klassifisert i slekten Brevibacterium. Nyttige er også Curtobacterium-stammene GS/4 og LW/3 hvis karakteristika er beskrevet i søkerens samtidige britiske søknad nr. 13994/74 (tilsvarende New Zealand-søknad nr. 177026, sør-afrikansk søknad nr. 1898/75 og US-søknad nr. 561662) og hvorav kulturer er blitt deponert 1 følgende kulturkolleksjoner og er gitt følgende nr. &ccession-nr.): 1. The National Collection of Industrial Bacteria (NCIB), Torry Research Station, Aberdeen, Skottland, - NCIB Accession-nr. NCIB 11072&11073. 2. US Department of Agriculture, Agricultural Research Service,
Northern Regional Research Laboratory (NRRL), Peoria, Illinois - NRRL Accession-nr.NRRL B-8069 og B-8068. 3. The Fermentation Research Institute (FRI), Japan - FRI Accession-nr. FERM 2975 & 2974.
Eksempler på meget nyttige stammer av andre slekter er Arthrobacter nov. sp. stammer NRRL B 3724, 3725, 3726, 3727 gg 3728, Streptomyces albus stamme YT-No4 og Mycobacterium smegmatis stamme ATCC 19420.
Ved fremgangsmåten for fremstilling av glukose-isomerase eller et enzympreparat som inneholder glukose-isomerase dyrkes først den glukose-isomerase-produserende mikroorganisme i en batch-kultur før den overføres til kontinuerlig dyrkning. Eksempelvis fremstilles et podestoff som inneholder en glukose-isomerase-produserende stamme, f.eks. på en agar-skråkultur, og anvendes for inokulering av et egnet kulturmedium. Der dyrkes organismen i batch-kultur, fortrinnsvis i 4-48 timer. En alikvot eller hele kulturen anvendes så for inokulering av et større volum av næringsstoff. Dette kan gjentas en eller flere ganger før kontinuerlig dyrkning påbegynnes. Mikrobielle celler som inneholder enzymet kan separeres fra kulturmediet som kontinuerlig fjernes fra enzymproduksjonsprosessen på kjent måte. Fortrinnsvis anvendes de hele celler til å utføre isomeriseringen av glukose til fruktose. Imidlertid kan enzymet, om ønskes, ekstraheres fra cellene ved enhver egnet metode, eller den endelige kultur kan selv anvendes uten fraseparering av cellene, ved omdannelsen av glukose til fruktose. Anvendelse av den endelige kultur selv muliggjør på denne måte at glukose-til-fruktose-isomeriseringen utføres på kontinuerlig basis, idet kulturen skrider kontinuerlig frem fra isomerase-produksjons-prosessen til isomerisasjonsprosessen.
Dyrkningsmediet for fremstillingen av enzymet eller enzympreparatet inneholder fortrinnsvis som karbonkilde et egnet karbohydrat, f.eks. glukose og/eller xylose, en egnet organisk syre eller et salt derav, f.eks. et acetat, eller en alkohol,
f.eks. etanol. Det kan også inneholde komplekse organiske næringsstoffer, f.eks. en vitaminrik buljong som omfatter gjærekstrakt, kjøttekstrakt, maisstøpvæske osv. Nitrogenkilden er gjerne ammoniakk, et ammoniumsalt, et nitrat, en aminosyre eller urinstoff, og fosforkilden er gjerne et fosfat. Andre elementer som er tilstede, innbefatter fortrinnsvis magnesium, kalium og svovel, f.eks. tilsatt som magnesiumsulfat og kaliumsulfat, og sporelementer så som jern, kobolt, sink, kobber, mangan, kalsium osv. De foretrukne andeler i hvilke de forskjellige næringsstoffer er tilstede i dyrkningsmediet for produksjon av enzymet, vil variere i en viss grad avhengig av den mikroorganisme som anvendes og andre faktorer.Egnede andeler i hvert spesielt til-felle kan lett bestemmes av en kompetent mikrobiolog.
Under fremstillingen av glukose-isomerase holdes dyrkningsmediet fortrinnsvis ved en temperatur i området 20-55°C, idet den nøyaktige temperatur er avhengig av den anvendte organisme. Når det gjelder Arthrobacter-stamme, er temperaturen gjerne i området 25-37°C, idet området 25-33°C foretrekkes, og området 28-32°C er spesielt egnet. Fortrinnsvis holdes mediets pH-verdi i området 4,5-8,5, spesielt 6,0-8,0, igjen avhengig av den anvendte organisme.
Spenningen av oppløst oksygen i mediet reguleres gjerne innen området 0-150 mm Hg, idet området 1-100 mm Hg foretrekkes og området 30-100 mm Hg er spesielt godt egnet.
Betegnelsen "oppløst oksygen-spenning" (DOT) betyr det partielle trykk av oksygen i væsken, kfr. artikkelen av Maclennan og Pirt, J. Gen Microbiol. (1966), 45, 286-302, spesielt side 290. Fortynningshastigheten ligger fortrinnsvis i området 0,05 - 0,4 time"1.
Fortynningshastigheten D er hastigheten for utbytting
av medium i fermentatoren og er gitt ved forholdet mellom strømningshastighet F og det totale medium-volum V i fermentatoren,
(F) —1 —1
dvs. D = -^yy bg har dimensjoner på time (h ).
Ved isomeriseringen av glukose til fruktose ved fremgangsmåten i henhold til oppfinnelsen holdes temperaturen fortrinnsvis i området 20 til 90°C, spesielt 50-75°C. pH-verdien til den glukoseholdige væske som gjennomgår isomerisering, holdes fortrinnsvis i området 5-9, spesielt 7-8,5,09nødvendig under anvendelse av et egnet puffersystem, f.eks. en fosfatpuffer. Imidlertid må pufring unngås om mulig i en proséss i større skala. Andre aktivatorer, f.eks. magnesiumj, kobolt- eller manganioner, kan være tilstede. Enzymaktiviteten kan økes til et maksimum ved anvendelse av en enzym-kofaktor, f.eks. koboltioner tilsatt i form av et koboltsalt, f.eks. koboltklorid. Enzymet eller enzympreparatet kan svært gjerne bli immobilisert, f.eks. som beskrevet i britisk patentskrift nr. 1.368.650 i hvilken fremgangsmåte . flokkulerte, hele mikrobielle celler som inneholder enzymet, anvendes og brukes som del av en kontinuerlig søyleprosess. . Glukosen selv kan være tilstede i væsken i mengder på opptil ca... 70%, fortrinnsvis 20-50%. Den kan innføres i væsken som glukose eller som en glukosesirup som inneholder andre sukker-arter, f.eks. maltose, maltotriose og dekstriner.
Glukose-isomerasen eller enzympreparatet som inneholder den, kan innføres i væsken i mengder på mellom 4 og 20 GIU (glukose-isomerase-enheter) pr. gram glukose 1 løsningen. Ved økning av enzymmengdene opp til flere tusen GIU pr. gram glukose øker hastigheten<:>av isomeriseringsreaksjonen.
Enzymet eller enzympreparatet immobiliseres fortrinnsvis
i et fast skikt gjennom hvilket den glukoseholdige væske kan perkoleres og omdannes til isomerisert sirup.
Glukose-isomerasen i henhold til oppfinnelsen kan, analyseres med hensyn på sin fruktoseproduserende aktivitet ved hjelp av følgende metodes
Glukose- isomerase - analysemetode
En analyse av aktiviteten av glukose-isomeriserendé enzym ble utført i følgende reaksjonsblanding:
Løsningen.ble fylt opp til 2 ml med destillert vann og.. inkubert ved 70°C i 1 time. Reaksjonen ble stanset ved tilsetning av 4 ml 0,5 m perklorsyre, og fruktosen ble bestemt ved cystein-karbazol-metoden (Dische Z&Borenfreund E., J. Biol. Ghemi. 192,583
(1951)).<*.>■■<,>'••
Aktivitetsnivåer på minst 64 enheter.pr. ml kultur er
blitt observert under standard-analyse-bétingeiser.
Den enzymmengde som er nødvendig for å produsere 1 mg fruktose fra glukose pr. time ved 70°C. under de ovennevnte analysebetingelser, ble definert som en enzyménhet.
Under anvendelse av fremgangsmåten i henhold til oppfinnelsen er det mulig å oppnå gode utbytter a<y>enzym både basert på mengden av karbdnbilde som anvendes og på volumet, av fermentatoren.
Dessuten viser det produserte enzym høy grad av aktivitet ved omdannelse, av glukose til' fruktose.
Oppfinnelsen skal illustreres ved følgende eksempler:
Eksempel 1
Afthrobacter nov. sp-stamme NRRL B-3728 ble dyrket kontinuerlig under betingelser for karbon og nitrogen-begrensning alternativt, i dyrkningsmedia som inneholdt to alternative karbonr kilder: glukose og,xylose. Nivåene for glukose-isomerase produsert av kulturen ble fastslått og regnet om til dyrkningsbetingelser.
Det medium som ble anvendt var som følger: 1,596 g/l P04<3>"
2 ml 40% MgS04/liter 0,075 g/l Na2S04
0,45 g/l K2 S04
0,05 g/l gjærekstrakt
Sporelementer (alle i ppm)s Fe<2+>-3, Cu<2+>-0,075, Mn<2+>- 0, 375,
Zn2+ -0,345, Ca2+ -0,075,H3B03-0,384, Na2Mo04 -0,135.
I forsøk som anvender nitrogenbegrensning, ble dette medium supplert med 2,5 g/l (NH4) S04. I karbbnbegrenséde forsøk ble pH-verdien regulert under anvendelse av ammoniakkgass som også tjente som nitrogenkilde.
Karbonkilden ble tilført som en 40 vekt/.vol.% løsning av glukose eller xylose og ble pumpet.inn i fermentatoren separat fra mineralsaltmediet slik at man fikk en endelig konsentrasjon på 20 g/l karbohydrat.
Fermenteringsbetingelser
(a) En 5 liter fermentator ble anvendt i alle tilfeller med et arbeidsvolum på tilnærmet 2 liter.
(b) Rørerhastighet 1500 opm.
(c) pH-verdien ble regulert til 6,9 ved automatisk tilsetning av ammoniakkgass, når det gjaldt betingelser for karbon-
bégrenshing, og av. alkali (4nNaOH, 4n KOH) under betingelser for nitrogenbegrensning.
(d) Temperaturen ble automatisk regulert ved 30°C.
(e) Oppløst oksygen-spenning ble kontinuerlig målt, notert og regulert manuelt slik at den lå i området 50-150 mm Hg partial-trykk. (f) Antiskunu Skummet ble regulert på automatisk programmert basés. Hastigheten av antiskumtilsetningen varierte med de dyrkningsbetingelser som ble anvendt. (g) Fortynningshastigheten var 0,11.
Enzymanalyse: Ble utført ved den analysemetode som er beskrevet ovenfor. •
Proteinbestemmelse; er uttrykt som totalt nitrogen x 6,25.. Prøvetagnlng: En 250 ml prøve av kultur ble tatt, cellene ble sentrifugert og vasket og deretter frysetørket. Det ble utført analyser på den frysetørkeéé prøve. Prøvene ble tatt fra opp-samlingskaret som ble avkjølt i en fryseblanding. Detté er å
foretrekke fremfor å ta prøver direkte fra fermentatoren, da det ikke innebærer fjerning av en stor prøve fra. fermentatoren.
Inokulering; Et podestoff som var blitt sub-dyrket bare 8 timer før inokulering, ble anvendt.
En oppsummering av karbonomdannelsene og enzymutbyttene som ble oppnådd i de forskjellige fermenteringer, er gjengitt i tabell 1. Det kan sees fra tabell 1 at det ikke var noen bemerkelsesverdig forskjell i enzymutbyttet, uttrykt som enheter/g tørr vekt, da substratet ble forandret.
Et sammenlignende batch-kulturforsøk ble utført under anvendelse av glukose som karbonkilde. I dette forsøk var det næringsmedium som ble anvendt, det samme som det som ble anvendt for kontinuerlig kultur med en utgangsglukosekonsentrasjon på
20,0 g/l. pH-verdien ble regulert til £,9 - 7,0 under anvendelse
av ammoniakkgass.
Fermenteringsbetingelser
(a) Den anvendte fermentator har et arbeidsvolum på 51.
(b) Rørerhastighet 750 opm.
(c) pH-verdien ble regulert ved 6,9 - 7,0 ved automatisk tilsetning av ammoniakkgass.
(d) Temperaturen Me automatisk regulert ved 30°C.
(e) .Den oppløste oksygen-spenning ble målt og registrert, men ikke regulert. (f) Antiskum.. Skummet ble regulert ved manuell tilsetning av antiskum etter behov.
(g) Fermenteringstiden var 30-35 timer.
(h) Podestoffet var 1 volum% av en rystekolbekultur.
Enzymanalyser og proteinbestemmelser ble utført som beskrevet for kontinuerlig kultur.
Resultatene var som følger:
Karbonomdannelse 35%
Enzymutbytte (enheter/g tørr vekt) 730.
Eksempel 2
Eksempel 1 ble gjentatt under anvendelse av Mycobacterium smegmatis-stamme ATCC 19420 med xylose som karbonkilde. I dette eksempel var det imidlertid følgende små forskjeller i forsøks-betingelsene:
(1) Temperaturen ble automatisk regulert til 37°C.
(2) Prøver ble tatt direkte fra fermentatoren. Prøvetagnings-metoden fra eksempel 1 ble ikke anvendt, på grunn av den inhomogene natur av Mycobacterium Smegmatis-kulturen. Resultatene er gjengitt i tabell 2. Alle tall er gjennomsnitt av minst 4 stabile bestemmelser.

Claims (25)

1. Fremgangsmåte for fremstilling av glukose-isomerase-^ enzym eller et enzympreparat som inneholder glukose-isomerase, ved kontinuerlig dyrkning av en glukose-isomerase-produserende mikroorganisme i et dyrkningsmedium som omfatter en kilde for assmmilerbart karbon og uorganiske næringsstoffer under betingelser som er egnet for fremstilling av enzymet eller enzympreparatet og kontinuerlig utvinning av enzymet eller enzympreparatet, hvorved konsentrasjonen av en næringskilde i kulturmediet holdes på et slikt nivå at veksten begrenses.
2. Fremgangsmåte som angitt i krav 1,. karakterisert ved at næringskilden hvis konsentrasjon i dyrkningsmediet holdes på et nivå som begrenser veksten, er <1> karbonkilden.
3. Fremgangsmåte som angitt i krav 1 eller 2, karakterisert ved at kildene for karbon, nitrogen, fosfor, magnesium, svovel, kalium og organisk nitrogen tilsettes til dyrkningsmediet i konsentrasjoner (vekt/yekt% av kilde- forbindelsen) i områdene:
4. Fremgangsmåte som angitt i hvilket som helst av de foregående krav, karakterisert ved at det som mikroorganisme anvendes én stamme av slektene Streptomyces, Arthrobacter, Mycobacterium eller Curtobacterium.
5. Fremgangsmåte som angitt i krav 4, karakterisert ved at det som mikroorganisme anvendes Curtobacterium citreum-stamme NCIB 10702, Curtobacterium pus i Hum-stamme NCIB 10354, Curtobacterium luteum-stamme NCIB 11029, Curtobacterium helvolumestamme NCIB 10352 eller 10353, Curtobacterium alvedum-stamme NCIB 11030, Arthrobacter nov. sp stamme NRRL B-3724, B-3726, B-3727 eller B-3728, Streptomyces albus-stamme YT-No4 eller Mycobacterium smegmatis-stamme ATCC 19420.
6. Fremgangsmåte som angitt i krav 5, ) karakterisert ved at det som mikroorganisme anvendes Curtobacterium-starame 11072 eller 11073.
7. Fremgangsmåte som angitt i hvilket som helst av de foregående krav, karakterisert ved at det som karbonkilde anvendes et karbohydrat, en organisk syre eller et salt derav eller en alkohol.
8. Fremgangsmåte som angitt i krav 7, karakterisert ved at det som karbonkilde anvendes ,;, glukose eller xylose.
9. Fremgangsmåte som angitt i hvilket som helst av de foregående krav, karakterisert ved at ammoniakk, et ammoniumsalfc, et nitrat, en aminosyre eller urinstoff er tilstede i dyrkningsmediet som nitrogenkilde.
10. Fremgangsmåte som angitt i hvilket som helst av de foregående krav, karakterisert ved at dyrkningsmediet holdes ved en temperatur i området 20-55°.
11. Fremgangsmåte som angitt i hvilket som helst av de foregående krav, karakterisert ved at pH-verdien til dyrkningsmediet holdes i området 6,0-8,0.
12. Fremgangsmåte som angitt i hvilket som helst av de foregående krav, karakterisert ved at den oppløste oksygen-spenning (DOT) i dyrkningsmediet reguleres i området 0 - 150 mm kvikksølv.
13. Fremgangsmåte som angitt i krav 12, karakterisert ved at den oppløste oksygen-spenning (DOT) reguleres i området 30 - 100 mm kvikksølv.
14. Fremgangsmåte som angitt i hvilket som helst av de foregående krav, karakterisert ved at fortynningshastigheten ligger i området 0,05 - 0,4 h"" <1> .
15. Fremgangsmåte for isomerisering av glukose til fruktose under anvendelse av et glukose-isomerase-enzym eller et enzympreparat som inneholder glukose-isomerase, som er fremstilt ved kontinuerlig dyrkning av en glukose-isomerase-produserende mikroorganisae i et dyrkningsmedium som omfatter en kilde av assimilerbart karbon og uorganiske næringsstoféer under betingelser som egner seg for fremstilling av enzymet eller enzympreparatet, og kontinuerlig utvinning av enzymet eller enzympreparatet hvor V konsentrasjonen av en næringskilde i dyrkningsmediet holdes på et slikt nivå at veksten begrenses.
16. Fremgangsmåte som angitt i krav 15, karakterisert ved at under produksjonen av enzymet eller enzympreparatet, næringskilden hvis konsentrasjon i dyrkningsmediet holdes på et nivå som begrenser veksten, er karbonkilden.
17. Fremgangsmåte som angitt i krav 15 aller 16, karakterisert ved at enzymet eller enzympreparatet fremstilles ved dyrkning av en mikroorganisme som er en stamme av slektene Streptomyces, Arthrobacter, Mycobacterium eller Curtobacterium.
18. Fremgangsmåte som angitt i hvilket som helst av kravene 15 til 17, karakterisert ved at kultur som kommer kontinuerlig fra fremgangsmåten for dyrkning av den glukose-isomerase-produserende mikroorganisme, passerer kontinuerlig til isomeriaasjonsprosessen som utføres kontinuerlig.
19. Fremgangsmåte som angitt i hvilket som helst av kravene 15 til 18, karakterisert ved at enzymet, iiår det er anvendt 1 isomerisasjonsprosessen, inneholdes i hele celler i mikroorganismen.
20. Fremgangsmåte som angitt i hvilket som helst av kravene 15 til 19, karakterisert ved at under isomeriseringen holdes temperaturen i området 20-90°C.
21. Fremgangsmåte som angitt i hvilket som helst av kravene 15 til 20, karakterisert ved at pH-verdien til den glukoseholdige væske som gjennomgår isomerisering, holdes i området 5-9.
22. Fremgangsmåte som angitt i hvilket som helst av kravene 15 til 21, karakterisert ved at magnesium-?, kobolt- eller manganioner er tilstede under isomeriseringen.
23. Fremgangsmåte for fremstilling av glukose-isomerase-enzym eller et enzympreparat som inneholder glukose-isomerase, vesentlig som her beskrevet og som vist i eksemplene.
24. Glukose-isomerase-enzym eller et enzympreparat som inneholder glukose-isomerase, karakterisert ved at det er fremstilt ved en fremgangsmåte som angitt i hvilket som helst av kravene 1 til 14 eller 23.
25. Fruktose som Inneholder sirup, karakterisert ved at den er fremstilt ved en fremgangsmåte som angitt i hvilket som helst av kravene 15 til 22.
NO752516A 1974-07-30 1975-07-14 NO752516L (no)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GB33578/74A GB1492258A (en) 1974-07-30 1974-07-30 Production of glucose isomerase
GB5599474 1974-12-30

Publications (1)

Publication Number Publication Date
NO752516L true NO752516L (no) 1976-02-02

Family

ID=26261925

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO752516A NO752516L (no) 1974-07-30 1975-07-14

Country Status (14)

Country Link
US (1) US4059489A (no)
JP (1) JPS571987B2 (no)
AU (1) AU8323975A (no)
CA (1) CA1054084A (no)
CH (1) CH614464A5 (no)
DE (1) DE2533193A1 (no)
DK (1) DK144424C (no)
ES (1) ES439848A1 (no)
FR (1) FR2280709A1 (no)
IE (1) IE41489B1 (no)
IT (1) IT1040158B (no)
LU (1) LU73076A1 (no)
NL (1) NL7509019A (no)
NO (1) NO752516L (no)

Families Citing this family (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB1545766A (en) * 1975-07-22 1979-05-16 Novo Industri As Process for the production of a glucose isomerase product by fermentation
US4373025A (en) * 1976-05-27 1983-02-08 Uop Inc. Process for the isomerization of glucose
JPS54104212A (en) * 1978-02-02 1979-08-16 Fujitsu Ltd Receiver for multi-frequency signal
US4501814A (en) * 1978-10-26 1985-02-26 The Amalgamated Sugar Company Process for producing a high fructose sweetener, high protein meal, and cereal germ oils
US4247636A (en) * 1978-10-26 1981-01-27 The Amalgamated Sugar Company Process for producing a high fructose sweetener, high protein meal, and cereal germ oils
US4593001A (en) * 1984-01-09 1986-06-03 Nabisco Brands, Inc. High temperature isomerization process
JPH0325496Y2 (no) * 1986-02-06 1991-06-03
JPH0413890U (no) * 1990-05-24 1992-02-04
JPH0413891U (no) * 1990-05-24 1992-02-04
EP0970236B1 (en) * 1997-02-20 2006-05-24 DSM IP Assets B.V. Fermentative production of valuable compounds on an industrial scale using chemically defined media

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2822319A (en) * 1954-08-17 1958-02-04 Monod Jacques Methods for the cultivation of micro-organisms
GB1109362A (en) * 1964-04-10 1968-04-10 Nat Res Dev Improvements in fermentation processes for the production of antibiotics from emericellopsis-cephalosporium fungi

Also Published As

Publication number Publication date
IT1040158B (it) 1979-12-20
FR2280709B1 (no) 1978-09-22
AU8323975A (en) 1977-01-27
DK344875A (da) 1976-01-31
US4059489A (en) 1977-11-22
NL7509019A (nl) 1976-02-03
CH614464A5 (no) 1979-11-30
LU73076A1 (no) 1976-11-11
ES439848A1 (es) 1977-06-16
DE2533193A1 (de) 1976-02-12
JPS5138484A (no) 1976-03-31
IE41489L (en) 1976-01-30
IE41489B1 (en) 1980-01-16
JPS571987B2 (no) 1982-01-13
DK144424B (da) 1982-03-08
DK144424C (da) 1982-08-23
CA1054084A (en) 1979-05-08
FR2280709A1 (fr) 1976-02-27

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US4403034A (en) Ethanol Production
US5356812A (en) Processes for production of optically active 3-phenyl-1,3-propanediol by asymmetric assimilation
NO752516L (no)
US4687742A (en) Xylose isomerase (glucose isomerase) from Streptomyces murinus cluster
EP3633023A1 (en) Strain in microbacterium and method for producing psicose using same
NO162347B (no) Fremgangsmaate for enzymatisk hydrolyse av raffinose.
US3391059A (en) Process for producing l-aspartic acid
EP0486024B1 (en) Lactobacillus SP.B001 and method of producing mannitol
US3553081A (en) Process of microbiological oxidation
NO139691B (no) Fremgangsmaate for fremstilling av glukoseisomeriserende enzym fra mikroorganismer
US4283496A (en) Preparation and use of glucose isomerase
Gough et al. Production of ethanol from molasses at 45 C using alginate-immobilized Kluyveromyces marxianus IMB3
US4061539A (en) Preparation and use of glucose isomerase
EP0250407A1 (en) CONVERSION OF SUCROSE TO ETHANOL AND OTHER PRODUCTS USING $i(ZYMOMONAS MOBILIS)
US4742006A (en) Fermentation process for the production of fructose from aqueous mixtures of fructose and glucose and Zymomonas mobilis mutants which can be used for such fermentation
JPH0515369A (ja) 新規プルラナーゼおよびその製造法
JPS6131091A (ja) 発酵によるポリオ−ル類の製造方法
JP2009148212A (ja) マンニトールの発酵製造方法及びその実施に用いる微生物
EP0247044A1 (en) CONVERSION OF SUCROSE TO ETHANOL USING THE BACTERIUM $i(ZYMOMONAS MOBILIS)
WO1992018637A1 (en) Method for the production of d-gluconic acid
Al-Tai et al. Isomerization of glucose to fructose: production and some properties of glucose isomerase from Streptomyces sp. strain C7
JP3173176B2 (ja) S(+)−シトラマル酸の製造方法
US4003793A (en) Media containing molasses and soy flour for producing glucose isomerase and method
JP2580534B2 (ja) エタノールの製造法
KR0136642B1 (ko) 메틸이소부틸키톤으로부터 엘-류신을 생산하는 새로운 미생물 및 그 미생물을 이용하는 엘-류신의 제조방법