NO751546L - - Google Patents

Description

Fremgangsmåte .for utledning av oxygenassosiasjonskurver og apparatur for utforelse av fremgangsmåten

Foreliggende oppfinnelse angår fremgangsmåter og apparatur for måling av oxygeneringskarakteristikken til blod eller annet materiale hvis lysabsorberende karakteristika forandres mens det behandles med et reagens, og nærmere bestemt en fremgangsmåte og apparatur for utledning av en oxygeneringskurve for en hel blodprove.

Hovedmålet med oppfinnelsen er å tilveiebringe en ny og forbedret teknikk og apparatur for å studere de lysabsorberende egenskaper til materialer som behandles med reagenser som modifi-serer disse, lysabsorberende egenskaper, og i særdeleshet for måling av oxygeneringsgraden til en blodprove mens denne behandles med et oxygenerende reagens.

Et ytterligere mål med oppfinnelsen er å tilveiebringe en forbedret metode og apparatur for måling og opptegning av forandringen i lysabsorpsjonsgraden til en blodprove som behandles med et oxygenerende reagens, hvilken metode innbefatter relativt enkle prosedyretrinn og krever bare en liten mengde av proven, og hvor apparaturen er relativt rimelig å konstruere og lett å operere.

Et ytterligere mål med oppfinnelsen er å tilveiebringe en forbedret absorpsjonscelle for anvendelse med en fotometer-apparatur for måling av oxygeneringskarakteristika for blod eller lignende materiale som behandles med et reagens som foran-drer de lysabsorberende karakteristika til materialene.

Et ytterligere mål er å tilveiebringe en forbedret ab-sorps jonscelle for anvendelse med et fotometer med to bolgelengder eller lignende optisk instrument for utledning av oxygenassosiasjonskurven for en blodprove hvor cellen, er anordnet til å spre pr oven i et tynt lag som utsettes for oxygenerende gassreay' gens gjennom en flat, ikke-poros, gasspermeabel, gjennomskinnlig membran samtidig med at optiske absorpsjonsmålinger utfores for å bestemme fraksjonen av oxygenert hemoglobin i proven, og hvor arrangementet innbefatter anordninger for kontinuerlig å variere partialtrykket til oxygen som omgir cellen og derved muliggjore at en kontinuerlig oxygenassosiasjonskurve kan utvikles, bg hvor arrangementet muliggjor anvendelse av ufortynnet hel blodprove som prove, hvor den nodvendige anvendelse av sterke reagenser unngåes, hvor barer små provevolum er nodvendig, hvor et lineært mål av oxyhemoglobinfraksjonen tilveiebringes over det fullsten-dige oxygeneringsoraråde, hvilket arrangement gir kontinuerlig oxygenassosiasjonskurver med ukomplisert og pålitelig regulering og variasjon av oxygenpartialtrykket, hvor bare små mengder gassformige reagenser er nodvendig, og hvor der anvendes en oxy-genobserverende anordning som har hoy stabilitet og varighet og som ikke er i direkte kontakt med blodproven.

Et ytterligere mål med oppfinnelsen er å tilveiebringe en forbedret teknikk for måling og opptegning av forandringen i lysabsorpsjonsgraden til en blodprove som behandles med et oxygenerende reagens, hvilken teknikk innbefatter en ny og forbedret prosedyre for noyaktig' for-kondisjonering av blodproven for måling av den optiske response av proven overfor oxygeneringen.

Et ytterligere mål med oppfinnelsen er å tilveiebringe en forbedret apparatur for understøttelse av et tynt flatt lag av blodprove i lysveien for et fotometer med to bolgelengder eller lignende optisk instrument for utledning av oxygenassosiasjonskurven for blodproven, hvor den understøttende apparatur'er anordnet til å spre proven til å danne det nodvendige tynne flate lag for at proven noyaktig utsettes for de deoxygenerende og oxygenerende reagenser som anvendes, og for å tillate at optiske absorpsjonsmålinger kan utfores for å bestemme fraksjonen av oxygenert hemoglobin i proven under oxygeneringen av proven, og hvor den understøttende apparatur er enkel i konstruksjon og lett tilgjengelig for innforing eller erstatning av blodprover.

Ytterligere mål og fordeler ved oppfinnelsen fremgår av den efterfolgende beskrivelse og krav, og fra de medfolgende tegninger hvori:

Fig. 1 er en skjematisk tverrsnittstegning tatt gjennom

et typisk system for oxygeneringsassosiasjonsmåling av blodprove og konstruert i henhold til foreliggende oppfinnelse.\

Fig. 2 er en forstorret horisontal deltegning av den anvendte provecelle i systemet, tatt hovedsakelig ved ved linje 2 - 2 i fig. 1. Fig. 3 er et vertikalt tverrsnitt tatt hovedsakelig på linje 3 - 3 i fig. 2. Fig. 4 er en horisontal deltegning lik fig. 2, men som viser en modifisert form av provecellen ifblge foreliggende oppfinnelse . Fig. 5 er et vertikalt tverrsnitt tatt hovedsakelig på

linje 5 - 5 i fig. 4.

Fig. 6 er et forstorret endesnitt av en annen modifi-

sert form av systemet for blodproveoxygenassosiasjonsmålingen ifolge foreliggende oppfinnelse.

Fig. 7 er et vertikalt tverrsnitt tatt hovedsakelig på linje 7 - 7 i fig. 6, og som skjematisk viser de tilknyttede optiske og elektriske komponenter som anvendes med systemet i den-

ne form av oppfinnelsen.

Fig. 8 viser sett ovenfra den blodprove-understottende del som anvendes i utforelsesformen ifolge fig. 6 og 7, tatt hovedsakelig på linje 8 - 8 i fig. 7. Fig. 9 er et vertikaloppriss av den•prove-understot ten-de del tatt hovedsakelig på linje 9 - 9 i fig. 7. Fig. 10 viser forstorret og i tverrsnitt deler av apparaturen tatt hovedsakelig på linje 10 - 10 i fig. 8.

Oxygenbindingskurven (vanligvis kallt "oxygendissosia-sjonskurven<1*>) for hemoglobin dannes ved målinger av den fraksjon av det totale hemoglobin som oxygeneres som en funksjon av partialtrykket av oxygen (P02) overfor hvilket hemoglobinprdven utsettes. Den hele kurve og/eller parametre avledet fra denne er av vesentlig fysiologisk-og klinisk betydning. Hyppig anvendte metoder innen dette område anvender fotometre med to bølgeleng-der, og slike metoder omfatter foring av tidsoppdelte måle- og referansestråler /\M og gjennom proven mens den underkastes oxygenering, og hvor forskjellen i absorpsjon av disse stråler som målt- med en elektronmultiplikator og tilknyttede kretser anvendes for utledning av den onskede "oxygendissosiasjonskurve" som i realiteten er en oxygenassosiasjonskurve.

Foreliggende oppfinnelse gjor bruk av en teknikk hvori en prove omfattende et tynt lag av rent blod utsettes for- regulerte PO^(oxygenpartialtrykk) gjennom en flat, strukket, gass-permeabel, gjennomsiktig membran, samtidig som optiske absorpsjonsmålinger utfores for å bestemme fraksjonen av oxygenert hemoglobin. FC>2 varieres på regulert måte, likeledes målingen, og fra de observerte data utvikles en kontinuerlig "oxygendissosia-sj onskurve".

Teknikken og apparaturen ifolge foreliggende oppfinnelse, gir et uttall bestemte fordeler overfor de vanligvis anvendte teknikker, blant hvilke folgende kan nevnes: 1. Den tillater bruk av ufortynnet rent blod slik at der -derved unngåes mulige ikke-fysiologiske effekter (arti-fakt er). 2. Deoxygenering av blodproven utfores uten anvendelse av sterke reagenser slik som dithionat. 3. Bare et meget lite provevolum er nodvendig, hvilket er viktig i pediatriske tilfeller og for forskning på

sjeldne hemoglobintyper.

4. Et lineært mål av oxyhemoglobinfraksjonen tilveiebringes over hele oxygeneringsområdet, i motsetning til re-fleks j onsfaktormålinger. 5. Den utvikler kontinuerlige kurver og muliggjor regulering og variasjon av FO^som er ukomplisert, pålitelig og som bare krever små mengder av komprimerte, gasser. 6. Den anvender en oxygenfoiende . elektrode som er stabil av type, og som har en lang levetid, og som ikke er i direkte kontakt med blodproven.

Teknikken ifolge oppfinnelsen innbefatter anvendelse av en provecelle hvori en tynn film av blod utsettes for kontrol-lerte PO,, via en gasspermeabel membran, og gjennom hvilken der samtidig spektrofotometrisk utfores optiske absorpsjonsmålinger. En filtntykkelse av blod på 0,254 mm eller mindre anvendes for å tillate hurtig oxygenombytning innen blodet og for å gjore den ufortynnede blodprove tilstrekkelig gjennomsiktig for å tillate de optiske absorpsjonsmålinger. FiImtykkelsen må være stabil for. å gi stabile optiske målinger, og må ikke inneholde absorber-ende bobler, både av optiske og gassvekslingsgrunner.

I de medfolgende tegninger angir 11 en apparatur for utledning av oxygenassosiasjonskurver ifolge foreliggende oppfinnelse. Apparaturen 11 omfatter et gasskammer 26 av egnet ugjennomskinnlig materiale slik som aluminium eller lignende, avpasset til å anbringes f.eks. i lysveien for de tids-avdelte monokromatiske stråler<y>\ fra et spektrofotometer med to bølgelengder. I den typiske apparatur som er vist i fig. 1 i tegningen har kammeret et gjennomsiktig vindu 12 i sin bunnvegg for å slippe gjennom de tids-avdelte stråler .A^,°9et annet gjennomsiktig vindu 13 i sin toppvegg vertikalt på linje med vindu 12 for således å avgrense en optisk vei mellom disse, og hvor de frembrytende stråler ledes mot elektronmultiplikatoren 42 i spektrofotometret.

Angitt generelt ved 14 er en blodprovecelle som er horisontalt anbragt i veien for de tids-avdelte monokromatiske stråler ^ , j\ . I fig. 2 og 3 omfatter cellen 14 et generelt sirkulært legeme 15 av egnet gjennomsiktig materiale, slik som et gjennomsiktig plastmateriale, konsentrisk formet i sin topp-. fiatedel med et grundt sirkulært spor 16 med en dybde på ca. 0,254 mm og diameter i størrelsesordenen 9,72 mm. Respektive kapiIlarrorinnlop og -utlop 17 og 18 loper vertikalt og forseglende gjennom de diametralt motsatte deler av legemet 15 og står i forbindelse med tilsvarende diametralt motsatte deler av spor 16. Legemet 15 er formet med en avrundet randdel 43 som forer til en periferisk renne 19 som mottar randdelen av en gjennomsiktig gass-permeabel membran 20, hvilken randdel er forseglende og tett festet i rennen 19 med en elastisk 0-ring 21, og hvor hoveddelen av membranen er tett strukket over spo-ret 16.

Den gass-perméable gjennomsiktige membran 20 er 0,0254 mm tykk og kan omfatte ren silicongummifi lm eller en egnet kom- mersielt tilgjengelig gjennomsiktig gass-permeabel membran slik som "Perflex OM-110" silicongummicopolymer.

Legemet 15 er redusert ved sin nedre del som vist ved 22, og den reduserte nedre del er understottende mottatt i en knektring 23 utstyrt med en radial stottearm 24 som er stivt festet til tilstotende sidevegg 25 av kammer 26. Ring 23-er utstyrt med et set skruer 27 diametralt motsatt med arm 24 som klemmende fester den reduserte nedre del 22 i ringen 23.

Kapillarrørene 17 og 18 loper forseglende gjennom sidevegg 25 i gasskammer 26. En oxygentilforselsledning 28 utstyrt med en egnet reguleringsventi1 29 loper forseglende gjennom den motsatte sidevegg 30 i kammer 26, og en nitrogentilforselsled-ning 31 tilsvarende utstyrt med en egnet reguleringsventil 32 loper forseglende gjennom sidevegg 30. Roterbart og hovedsakelig forseglende opplagret i sidevegg 30 er akselen 33 av viften 34, passende drevet med en ytre elektrisk motor 35. En konvensjonell oxygen-foiende elektrode 36 er forseglende montert i veggen 30 og ragende inri i kammeret, idet elektroden utvendig er forbundet med egnede kretsanordninger for utvikling av X-komponenten til en konvensjonell X-Y skriver. Den oxygen-foiende . elektrode 36 kan være maken til modell 5331 av den type som er kjent som "Clark Electrode".

Et fuktende vann-absorbent vekestykke 46 som lett kan fuktes, er montert i den nedre del av kammeret 26, f.eks. i et spor anbragt i den nedre del av veggen 25»Veken 46 skaper den nodvendige fuktighet for å forhindre okende uttorring av oxygenelektroden 36 og blodproven. Kammeret 26 er temperaturregulert for å holde en hovedsakelig konstant temperatur deri ved hjelp av en elektrisk oppvarmer 37 festet til kammeret i en varme-overforende tilstand, hvis energiavgivelse reguleres på vanlig måte med et temperaturfolsomt element 40 innstopt i kammerveggen stotende til oppvarmeren.

Veggens 25 ovre del er utstyrt med en innsnevret venti-lasjonspassasje 41. I en typisk utforelsesform er kammerets veggtykkelse ca. 16 cm, og utluftningspassasjen 41 ca. 0,64 mm i diameter.

I det tilknyttede spektrofotoraeter med to bolgelengder kan forskjellige bolgelengdepar anvendes for' de monokromatiske stråler y\M og A^, f. eks. 650 nm - 800 nm, 547 nm - 560 nm eller 650 nm -• 724 nm.

Fordelene ved anvendelse av et to-bolgelengdesystem for ^ målingen innbefatter a) automatisk korreksjon for enhver forandring i spredt lys under utvikling av testkurven, b) anvendelse av en referansestrålevei som også går gjennom proven, og c)'den mulige evne til å måle hematocrit og andre parametre, såvel som utledning av oxygenassosiasjonskurven samtidig.

Et enkelt bolgelengdemålesystem kan anvendes med gass-kamre og blodcelleapparaturen ifolge oppfinnelsen, og som gir reduserte omkostninger og stbrre konstruksjonsforenkling, men

som ikke gir automatisk korreksjon for mulige forandringer i spredt lys under utvikling av oxygenassosiasjonskurven.

Ved drift tilfores membrancellen 14 en prove av rent blod tilfort gjennom kapillarinnlopsroret 17. Kammeret 26 fyl-les forst med N (innbefattet ca. 5 % C02) gjennom ledning 31

ved at ventilen 32 åpnes, for å deoxygeneare blodproven. Den umiddelbare deoxygenering av blodproven krever ca. 15 minutter. Derefter med ventil 32 lukket- og spektrofotometersystemet i drift utvikles en oxygenbindingskurve (oxygenassosiasjonskurve) på

den tilknyttede X-Y skriver ved at ventil 29 styres til langsomt å innfore O^(innbefattet ca. 5 % CO^). Oxygentilforsels-strommen kan innbefatte en sproytepumpe eller annen pumpe for å gi en oxygeninnforselshastighet tilstrekkelig til å oppnå 20 % oxygen i kammeret i lopet av 5 - 10 minutter. Variasjonen av P02med tiden vil være eksponensiell i stedet for lineær, slik

at oxygenbindingskurven fortrinnsvis utvikles ved bruk av X-Y skriveren hvor oxygenelektroden 36 driver X-aksen, og hvor elektronmultiplikatoren 42 tilveiebringer signalene for utvikling av Y-komponenten i skriveren. Da oxygenelektroden 36 ikke kommer

i kontakt med blodproven, må FO^ i kammeret varieres tilstrekkelig langsomt, slik at blodet alltid effektivt er i likevekt med PO,, i kammeret.

Viftens 34 dimensjoner er slik valgt at der tilveiebringes ensartet kraftig blanding under testforsoket.

Det 0,254 mm tykke blodlag i cellen 14 tillater regulert oxygenering av blodet som ovenfor beskrevet, i lopet av 5 - 10 minutter, og den umiddelbare deoxygenering krever ca. 15 minutter. Ved anvéndelse av mindre blodlagtykkelse (f.eks.

0, lOl mm eller mindre) kan den nodvendige tid tilsvarende reduse- \ res.

Ved '" å anbringe cellen 14 horisontalt som ovenfor beskrevet, elimineres muli:ge vanskeligheter forbundet med avleiring av rode blodceller under lange forsok.

Blodproven forbehandles med et egnet reagens, slik som Heparin eller andre velkjente anti-koaguleringsmidler, for å forhindre sammenklumpning. Dette gjores på det tidspunkt blodet trekkes ut av pasienten.

Fig. 4 og 5 viser en annen form for membrancelle, generelt angitt ved 14' og utformet i overensstemmelse, med foreliggende oppfinnelse. Cellen 14' omfatter en rustfri stålring 15' formet med et ringformet indre sete 50 i hvilket der er semen-

tert et sirkulært kvartsvindu 51 hvis toppflate er ca. 0,254 mm under ringens topplan, for å avgrense den blodprovemottagende grop. Diametralt motsatte kanalgroper 52 og 53 er formet i topp-, delen av ringen, og som står i forbindelse med hovedgropen. Ka-pillarrørene 18 og 17 loper vertikalt og forseglende gjennom de motsatte deler av ringen og står i forbindelse med kanalgropene 52 og 53. Ringen har den nedre reduserte del 22' som er fast-spent i den understøttende ring 23 på samme måte som tidligere beskrevet i forbindelse med fig. 2 og 3.

Ring 15' har en avrundet toppranddel 43' som forer til

en periferisk renne 19', og en strukket gjennomsiktig gass-permeabel membran 20 er festet over blodprovegropen ved hjelp av en 0-ring 21 som klemmer randdelen av membranen i rennen 19' som i den tidligere beskrevne celle 14.

Forskjellige anordninger kan anvendes i stedet for en 0-ring for å feste den strukne gjennomsiktige gass-permeable membran over blodprovegropen. Således kan f.eks. membranen klemmes i en egnet giggmontering. En film av silicongummisement kan på-fores randdelen av hovedcellelegemet, og denne randdel kan klem mes mot membranen, idet denne strekkes stramt., og holdes mot denne inntil sementen er herdet, hvorefter overskudd av membranma-teriale kan klippes vekk.

Selvom den ovenfor beskrevne prosed3/re gjor bruk av en hel blodprove som prove, er det også mulig å anvende fortynnet x blod eller hemoglobin i opplbsning som en prove ved fremgangsmåten. 1 noen tilfeller er det mulig og onskelig å utelate dekkmembranen 20 og bare anvende et tynt lag blod med tykkelse på 0,0254 mm på en flat gjennomsiktig bæreplate, passende montert i kammeret 26 i stedet for celle 14. Under disse omsten-digheter er omhyggelig kontroll av fuktigheten i kammeret nodvendig.

I den utforelsesform som er vist i fig. 6 - 10 er gasskammeret vist ved 26' utstyrt med en stor sirkulær åpning 60 i sin hoyre endevegg 25' som vist i fig. 7. En vertikal dekkplate 61 er glidbart understøttet på et par parallelle, horisontale, relativt lange stbttestaver 62, 62 som er gjengbart festet i de nedre hjbrnedeler av endevegg 25', hvilke stavstykker er utstyrt med ytre hodedeler 63, 63 for å begrense den hoyrerettede utvidelse av dekkplaten 61 til den stiplede posisjon som er vist i fig. 7. Dekkplate 61 er formet med aat indre utragende sirkulæ-

re fremspring 64 formet til hovedsakelig å passe inn i åpningen 60 når dekkplaten er i lukket stilling. De understøttende stavstykker 62, 62 er utstyrt ved sine indre endedeler med ringfor-mede stoppefjærspor 65, og bunnkantdelen av dekkplate 61 er utstyrt med fjæropplagrede baller 66 som er eftergivende og låsen-de i forbindelse med rennene 65 for å holde dekkplaten 61 i lukket stilling som vist fullt opptrukket i fig. 7. Dekkplate 61 er utvendig utstyrt med en sentral operasjonsknapp 67.

Stivt festet til den sentrale del av fremspringet 64

er den horisontale understøttende arm 24' som bærer blodprove-celleelementet vist ved 68. Det understøttende celleelement 68 omfatter et opprinnelig ringformet ugjennomsiktig stykke som har en sentral bunnåpning 69 og en oppstående periferisk krave

70 med motstående avkuttede flater 71, 71 som vist i fig. 8 for

o

å gi adgang for fingrene for fjerning av prover som vil bli be-

skrevet i det efterfdlgende. Som senere vil bli beskrevet, er

blodproven understøttet på en sirkulær gjennomskinnli,g skive 72 av glass eller lignende, plasert i setet avgrenset av elementet 68, og som er dekket med en gass-permeabel membranskive 73 plasert over proven og holdt derpå ved hjelp av overflatespennin-. - gen av blodproven, som vist ved 74 (se fig. 10).

Det anvendte optiske system med to bølgelengder kan væ-re lik det som tidligere er beskrevet, men et mer okonomisk system som kan anvendes omfatter en egnet polykromatisk lyskilde 75 inneholdende referansebolgelengdenA^ og målebolgelengden .A^, anordnet til å gi en stråle 76 rettet oppover gjennom bunnvindu 12, åpningen 69, blodproven 74 mellom skivene 72 og 73, og gjennom toppvinduet 13. Efter absorpsjon av blodproven fores strålen 76 gjennom toppvinduet 13 til en strålesplitter 77, slik som et halv-forsolvet 45° speil og danner to respektive utgangsstrå-ler 78 og 79, hvor strålen 78 overfores gjennom det halv-forsol-vede speil, og stråle 79 reflekteres fra dette. Strålen 78 fores gjennom et egnet J\filter 80 til en forste elektronmultiplikator 81, og strålen 79 passerer gjennom et egnet .A filter 82' til en andre elektronmultiplikator 82. Utgangsstrommene"'"AR°^"y\.Mtil ^^^o^U-^^P-^katorene 81 og 82 påtrykkes de respektive innganger i en konvensjonell logaritmisk regnefor-sterker 83 som gir et utgangssigna 1 lik log I - log 1-^?ell!.er log ■=

Utgangssignalet fra forsterker 83 avgis til Y-inngangen i den tilknyttede X-Y skriver. Som i de tidligere beskrevne ut-forelsesformer for oppfinnelsen er en oxygen-fSigende elektrode anbragt i gasskammeret 26' for utvikling av X-komponenten av skriveren.

I et typisk arrangement ifolge fig. 7-10 har glassski-ven 72 en diameter på ca. 18 mm, og den gjennomsiktige membranskive er ca. 10 mm i diameter. Det understøttende celleelement 68 er formet for å tilpasset motta skiven 72 på den måte sem er vist i fig. 7 - 10, hvorav fremgår at delene av skive 72 rager

utover på den annen side av flatene 71, 71 for at disse lett kan gripes mellom operatorens fingre når det er onsket å lofte ski-

ven 72 som bærer blodproven 74 og membranskiven 73 fra holderen 68 (med dekkplaten 61 i sin åpne stiplefie stilling vist i fig. 7).

Det blodlag som skal undersbkes fremstilles som folger: En skive 72 er plasert i holderen 68. En dråpe blod med 1-2 microliters volum plaseres på den sentrale del av skiven 72. Membranskiven 73 (som'kan være fremstillet av MEM-213 materiale fra General Electric) plaseres over blodproven som da danner et tynt lag 74 på grunn av kapillarvirkningen kombinert med skivens vekt. Derefter fores dekkplaten 61 til sin lukkede stilling, som vist fullt opptrukket i fig. 7.

Blodlaget 74 har en tykkelse på mindre enn 25 micron,

og kan være så liten som mellom 10 og 20 micron i tykkelse. Dette muliggjør fullstendig deoxygenering i lopet av 11/2-2 minutter, hurtig ett-trinns oxygenering på 3-5 sekunder, og dan-nelse av oxygenassosiasjonslikevektkurver i lopet av 5 minutter.

I motsetning til dette krever et 0,254 mm's tykt lag fra 15 til

20 minutter for deoxygenering og 30 - 50 sekunder for hurtig et-trinnsoxygenering. Anvendelsen av den gass-permeable, åkke-po-rose membranskive 73 utsetter også vanntap og tillater sikker håndtering av blodlaget i omgivende luft.

De egnede bølgelengder for spektrofotometri med to bøl-gelengder hvor et blodlag på 25 micron eller mindre i tykkelse anvendes er 438 nm og 448 nm, og derfor er disse bølgelengder fortrinnsvis anvendt for_A„ og<->A_.

M ^ R

Med proven installert i holderen 68 på den ovenfor beskrevne måte, forsirkuleres den forst for å oppnå en sikker blodkondisjonering (et meget viktig krav) som folger: Kammeret 26' spyles hurtig med nitrogeninneholdende 5 % C00, f.eks. i 1 minutt med en hastighet på 100 cm 3 /min, for å o deoxygenere proven. Proven oxygeneres derefter hurtig ved at oxygen inneholdende 5 % COg innfores i lopet av 5 sekunder ved 120 mm's trykk. X-Y - skriveren kalibreres derefter ved justering slik at det optiske signal gir en Y-komponent avlesning som lagres som 100 % oxygenering. Kammeret 26'. spyles derefter med nitrogen inneholdende 5 % CO,-,. Efter deoxygenering avleses igjen det optiske signal og lagres som 0 % oxygenering. De to lagrede verdier anvendes for å fastslå nullpunktet og utslaget for Y-aksen i X-Y skriveren, slik at kurven automatisk loper over 0 - 100 % på Y-aksen.

Oxygenassosiasjonskurven for proven kan derefter utle-des ved å folge den prosedyre som tidligere er beskrevet, nemlig ved å tilfore oxygen i kammeret og måle forandringen i

log •= overfor oxygenkonsentrasjoneh under anvendelse av det

.AR

ovenfor beskrevne optiske system i forbindelse med X-Y skriveren. Dette gir et mål for fraksjonsforandringen i optisk tetthet som tilsvarer oxyhemoglobinfraksjonen i proven over oxygenkonsentra-sjonsområdet i kammer 26'.

Den her beskrevne teknikk gir et blodlag som er relativt motstandsdyktig overfor fordampning og relativt stabilt med tiden,- slik at gjentatte assosias j onskurvemålin ger kan utfores på samme prove.

Når en prove skal fjernes fra kammeret 26', trekkes dekkplaten 61 ut i sin fulle uttrukne tilstand, hvilket tillater operatoren lett å fjerne proven ved å gripe de utstående, motsatte kantdeler av skiven 72 mellom fingrene og lofte skiven ut av holderen 68.

Claims (25)

1. Montasje for anvendelse i et fotometer for måling av oxygenassosiasjonskurver, karakterisert ved at det omfatter et kammer, anordninger for overforing av en målende lysstråle gjennom kammeret, lys-overforende celleanordninger ordnet til å understøtte et tynt flatt lag av en prove av materia-let i kammeret i den optiske vei for den målende lysstråle, • en kilde av deoxygenerende gass, regulerte ledningsanordninger som forbinder den deoxygenerende gasskilde til nevnte kammer, en oxygenkilde, og regulerte ledningsanordninger som forbinder oxy-genkilden med nevnte kammer.

2. Montasje ifolge krav 1, karakterisert ved at celleanordningene omfatter et lys-cverfbrende legeme med en grunn, flat prove-mottagende fordypning og en gass-permeabel gjennomskinnlig membran festet på legemet over og dekkende fordypningen .

3. Montasje ifolge krav 1, karakterisert ved at den omfatter oxygen-foiende anordninger montert i kammeret.

4. Montasje ifolge krav 3, karakterisert ved at de oxygen-fblende anordninger omfatter en oxygenelektrode.

5. Montasje ifolge krav 1, karakterisert ved at celleanordningéne omfatter et lys-overforende legeme med en grunn, flat prove-mottagende fordypning med en dybde på ca.

0,254 mm, og en gass-permeabel gjennomskinnlig membran festet på legemet og dekkende fordypningen.

6. Montasje ifolge krav 5, karakterisert ved at en oxygen-foiende elektrode er montert i kammeret.

7. Montasje ifolge krav 1, karakterisert ved at kammeret er utstyrt med en innsnevret gassutlopspassasje i en veggdel av kammeret.

8. Montasje ifolge krav 1, karakterisert ved at celleanordningéne omfatter et lys-overforende legeme, et gjennomskinnlig understøttende element montert på den lys-overforende legeme og ordnet til å motta provematerialet, og en gjennomskinnlig gass-permeabel membran beregnet på å ligge over provematerialet.

9. Montasje ifolge krav 8, karakterisert ved at det lys-overforende legeme er dannet med sete formet til å motta det gjennomskinnlige understottende legeme.

10. Montasje ifolge krav 9, karakterisert ved at det gjennomskinnlige understøttende element rager ut fra motsatte sider av setet.

11. Montasje ifolge krav 8, karakterisert ved at kammeret er utstyrt med et forlengbart lukkestykke, og at det lys-overfbrende legeme er understøttende forbundet med det for-len gba re lukkestykke.

12. Montasje ifolge krav 11, k a r a k t/ e^r i s e r t ved at lukkestykket omfatter en vertikal plate og hvori kammeret er utstyrt med anordninger som glidbart understøtter platen for horisontal utvidelse i forhold til kammeret.

13. Montasje ifolge krav 1, karakterisert ved at den omfatter en lyskilde som utvikler den målende lysstråle, hvilken kilde inneholder minst to bølgelengder, hvilke bølge-lengder har forskjellige absorpsjonskarakteristika når de fores gjennom en blodprove som underkastes oxygenering, og anordninger ti 1 å sammenligne de relative absorpsjonsgrader for de to bølge-lengder med oxygenmengden 'tilfort i kammeret.

14. Montasje ifolge krav 13, karakterisert ved at anordningene for å sammenligne de relative absorpsjonsgrader med mengden av oxygen tilfort i kammeret omfatter anordninger til å irfl.ede et forste elektrisk signal i henhold til de relative absorpsjonsgrader, midler til å utlede et andre elektrisk signal i henhold til graden av oxygen tilfort i kammeret, og midler til å avtegne det forste signal mot det annet signal.

15. Provecelle for måling av oxygenassosiasjonskurver av hemoglobin, karakterisert ved at den omfatter et lys-overf orende under slettende legeme dannet med en grunn fordypning, gjennomskinnlige anordninger på legemet for understøttelse av blodproven i fordypningen, og en gass-permeabel gjennomskinnlig membran beregnet på å ligge over en blodprove på den blod-proveunderstbttende anordning.

16. Provecelle ifolge krav 15.karakterisert ved at fordypningen har en dybde på 0,254 mm' for understøttelse av et tynt, flatt lag av blod i fordypningen.

17. Provecelle ifolge krav 15, karakterisert ved at legemet har en redusert del, og et ringformet understøt-tende knektstykke som understøttende mottar og omgir den reduserte del.

18. Fremgangsmåte for måling av oxygenassosiasjonskurven til en blodprove, karakterisert ved at blodproven anordnes i form av et tynt, flatt lag, hvorefter proven forst deoxygeneres ved at den utsettes for en deoxygenerende gass, hvorefter det deoxygenerte flate lag av blodproven utsettes for oxygen med en regulert hastighet, og at forandringer i lysab-sorpsjonsgrad av det flate lag måles samtidig som det utsettes for oxygen med den regulerte hastighet.

19. Fremgangsmåte ifolge krav 18, karakterisert ved at den deoxygenerende gass omfatter nitrogen.

20. Fremgangsmåte ifolge krav 18, karakterisert ved at den målte lysabsorpsjonsforandring kontinuerlig nedtegnes mot mengden av oxygen overfor hvilken det flate lag utsettes, for derved å utlede en oxygenassosiasjonskurve for blodproven.

21. Fremgangsmåte ifolge krav 18, karakterisert ved at det flate lag av blodproven utsettes for den deoxygenerende gass. og den regulerte mengde oxygen via en gass-permeabel membran.

22. Fremgangsmåte for måling av oxygenassosiasjonskurven for en blodprove, karakterisert ved at den omfatter anordning av blodproven i form av et tynt, flatt lag, og at proven forst deoxygeneres ved at den utsettes for en deoxygenerende gass, og at det deoxygenerte flate lag av blodproven utsettes for oxygen, og at mengden av oxygen som proven utsettes for, kontinuerlig måles, og at to respektive monokromatiske bblgelengder fores gjennom proven mens den oxygeneres, hvorved ved den ene. bølgelengde er ingen forandring i absorpsjonsgraden mellom oxygenert og deoxygenert blod, og hvor der ved den annen bølgelengde er en relativt stor forandring i absorpsjonsgrad mellom oxygenert og deoxygenert blod, og hvor forskjellen i absorpsjon for de to bblgelengder avtegnes mot mengden >av oxygen eftersom proven oxygeneres.

23. Fremgangsmåte for utledning av oxygenassosiasjonskurven for en blodprove, karakterisert ved at proven anordnes i form av et tynt, flatt lag, hvorefter proven deoxygeneres ved at den utsettes for en deoxygenerende gass og derefter at det deoxygenerte flate lag av blodproven utsettes for oxygen, og at oxygenmengden som proven utsettes for kontinuerlig måles., og at stråling, innbefattet to bolgelengder fores gjennom proven samtidig som den oxygeneres, hvor der ved den ene bblgeleng-de ikke er noen forandring i absorpsjonsgrad mellom oxygenert og deoxygenert blod, og hvor der ved den annen bolgelengde er en relativt stor forandring i absorpsjonsgrad mellom oxygenert og deoxygenert blod, og at en funksjon av den relative absorpsjonsgrad for de to bolgelengder nedtegnes mot oxygenmengden eftersom proven oxygeneres.

24. Fremgangsmåte ifolge krav 23, karakterisert ved at det flate lag av blodproven forst kondisjoneres ved at det utsettes for en deoxygenerende gass efterfulgt av at det utsettes for en oxygenerende gass.

25.. Fremgangsmåte ifolge krav 23, karakterisert ved at det tynne, flate lag er dannet ved at proven er plasert mellom et par av gjennomskinnlige deler og at proven tillates å spres mellom de gjennomskinnlige deler ved kapiliarvirkning.