NO743448L - - Google Patents

Description

F remgangsmåte ved fremstilling av nye D- homo- steroider

Foreliggende oppfinnelse angår nye D-homo-steroider, en fremgangsmåte for fremstilling av disse såvel som anvendelse av disse som mellomprodukter og/eller som aktive bestanddeler i lege-midler .

De nye D-homo-steroider er kjennetegnet ved den generelle formel I:

hvor bindingen - ■- -■ - er en enkeltbinding eller en dobbeltbinding, betegner grupperingen

hvor

•* R 2 betegner et hydrogenatom eller en methylgruppe,

R3betegner en hydroxylgruppe eller en acyloxygruppe,

R 4 betegner en methylgruppe, en hyd-oxylgruppe eller en acyloxygruppe ,

Rrbetegner et hydrogenatom eller en lavere alkylgruppe og

Rg betegner en lavere alkylgruppe eller en fenylgruppe, og hvor

R-^ betegner et hydrogenatom, et fluoratom, et kloratom eller en

fri eller forestret hydroxygruppe,

X betegner et hydrogenatom, et fluoratom eller en methylgruppe og

Y og Z kan sammen betegne en carbon-carbonbinding eller en oxido-gruppe eller Y kan betegne et hydrogenatom og Z betegner en i a-stilling hydroxyl- eller lavere alkanoyloxygruppe eller, såfremt R^. og R2betegner en substituent forskjellig fra hydrogen, også betegne et hydrogenatom. ^

Som fores trede 21-hydroxy grupper R-^kommer fortrinnsvis acyloxygrupper med 1-16 carbonatomer i acylresten, sulfatgrupper eller fosfatgrupper i betraktning. Egnede acyloxygrupper er eksempelvis slik som er avledet fra rettkjedede eller forgrenede, mettede eller umettede alifatiske mono- eller dicarbonsyrer, som på vanlig måte eksempelvis er substituert med hydroxygrupper, aminogrupper eller halogenatomer. Ennvidere er som acyloxygrupper også egnet rester av cycloalifatiske, aromatiske, blandede aroma-tisk-alifatiske eller heterocykliske syrer, som eventuelt på vanlig måte kan være substituert. Som egnede acyloxygrupper kan eksempelvis nevnes: formyloxy-, acetoxy-, propionyloxy-, butyryloxy-, pentanoyloxy-, hexanoyloxy-, octanoyloxy-, undecyanoyloxy-, dimethylacetoxy-, trimethylacetoxy-, diethylacetoxy-, tertiær butylacetoxy-, benzoyl-oxy-, fenacetyloxy-, cyclopentylpropionyloxy-, hydroxyacetoxy-, monokloracetoxy.-, dikloracetoxy-, trik.loracetoxy-, og ennvidere di-methylaminoacetoxy-, trimethylaminoacetoxy-, diethylaminoacetoxy-, piperidinbacetoxy-, nicotinoyloxy-, w-carboxypropionyloxy- og w-carboxy-pentanoyloxygruppen.

For fremstilling av vannløselige aktive forbindelser kan 21-acylforbindelsen med en basisk nitrogengruppe i acylresten omdan-nes til de tilsvarende syreaddisjonssalter slik .som f.eks. hydro-kloridet, hydrobromidet, sulfatet, fosfatet, oxalatet, tartratet eller maleatet. Ennvidere kan 21-carbonsyremonoesteren såvel som svovelsyre- og fosforsyreesteren overføres til alkalisalter for å høyne vannløseligheten, slik som f.eks. natrium- eller kaliumsaltet.

Som acyloxygrupper R^og R^kommer fortrinnsvis slike i betraktning som inneholder 1-8 carbonatbmer i acylresten. Særlig foretrukne acyloxygrupper er alkanoyloxygrupper slik som f.eks. formyloxygruppen, acetoxygruppen, propionyloxygruppen, butyryloxy-gruppen eller hexanoyloxygruppen.

Blandt et "D-homosteroid av generell formel I hvor R^og/eller Rg betegner en lavere alkylgruppe skal fortrinnsvis forståes en forbindelse hvis alkylgrupper R^og Rg har 1-4 carbonatomer. Som alkylgrupper R^og Rg kan eksempelvis nevnes methyl-gruppen, ethylgruppen, propylgruppen og butylgruppen.

Blandt en lavere alkanoyloxygruppe Z skal fortrinnsvis forståes en gruppe med .1 - 6 carbonatomer. Som alkanoyloxygruppe Z kan eksempelvis nevnes: formyloxygruppen, acetoxygruppen, propionyloxygruppen, butyryloxy gruppen eller triinethy lacetoxy gruppen.

De nye D-homo^steroider av generell formel I kan fremstilles på i og for seg kjent måte ved en fremgangsmåte som er

kjennetegnet ved at,

a) en forbindelse av generell formel II

hvor X, Y, Z, -A-B C og R-^har de tidligere angitte betydninger og

R7 ' betegner et hydrogenatom eller en lavere acylrest med fortr4inns-vis 1-6 carbonatomer, oxyderes til det tilsvarende 3-keto~A - steroid eventuelt etter forsåpning av 3-acyloxyg.ruppen, eller

b) at man fra en forbindelse av generell formel III

hvor X, Y, Z, -A-B ^ og R-^har de tidligere angitte betydninger

og V betegner en hydroxygruppe eller et bromatom, avspaltes HV, eller

c) at en forbindelse av generell formel IV

hvor X, -A-B C og har de tidligere■angitte betydninger, hydroxyleres med 11-hydroxylerende mikroorganismer i lia- eller 116-stilling, eventuelt at 11-hydroxylgruppen avspaltes, at det til det dannede A.^"1"1^-steroid av generell formel I adderes under-klor-eller underbromsyre og at det dannede llB-hydroxy-9a-halogensteroid ved behandling med baser overføres til 9,11-epoxysteroidet av generell formel I, eller d) at det for fremstilling av D-homosteroider av generell formel I hvor R^og R^betegner en hydroxylgruppe, ved A 17-dobbeltbindingen i en forbindelse av generell formel V hvor X, Y, Z og Rj har de tidligere angitte betydninger, adderes hydroxylgrupper, eller e) at det i en forbindelse av generell formel VI hvor - - - -, X, Y, Z og -A-B ^ har de tidligere angitte betydninger og W betegner en alkyls.ulfonyloxygruppe, en arylsulfonyloxy-gruppe, et bromatom eller et jodatom, utbytter substituenten W imot et hydrogenatom, et fluoratom, et kloratom, en acyloxygruppe eller mot en fosfatrest, eller f). at det for fremstilling av 17-methyl-D-homosteroider av generell formel I, forbindelser av generell formel VII

hvor XfY, Z og har de tidligere angitte betydninger, og hvor U betegner en alkylenrest, fortrinnsvis en forgrenet alkylenrest, med 3-10 carbonatomer, eksempelvis 2,2-dimethyl-propylenrest, eller en fenylenrest, omsettes med et methylmagnesiumhalogenid eller lithiumkobberdimethyl, eventuelt at 20-oxogruppen ved omsetning med acylklorider eller acylbromider overføres til 20-enolacylatet og at dette•epoxyderes med persyrer og at det erholdte reaksjonsprodukt deretter hydrolyseres ved syrebehandling,

og om ønsket at de ifølge fremgangsmåtealternativ a-f erholdte D-homo-A<4->steroid av generell formel I dehydreres i 1,2-stilling og/eller foreliggende estergruppe eller ketalgruppe avspaltes hydrolytisk og/eller foreliggende hydroxylgrupper forestres eller kondenseres med carbonylforbindelser av generell formel R^RgCO

hvor Rg og Rg har de tidligere angitte betydninger.

Ved foreliggende fremgangsmåte kan eksempelvis følgende

i 9- og 11-stilling usubstitueråe D-homosteroider fremstilles: 21-hydroxy-17a-methyl-D-homo-4-pregnen-3,20-dion,

21-hydroxy-17a-methyl-D-homo-l,4-pregnadien-3,20-dion, 6a-fluor-21-hydroxy-17a-methyl-D-homo-4-pregnen-3,20-dion, 6a-fluor-21-hydroxy-17a-methyl-D-homo-l,4-pregnadien-3,20-dion, 21-hydroxy-6a,17a-dimethyl-D-homo-4-pregnen-3,20-dion, 21-hydroxy-6a,17a-dimethyl-D-homo-l,4-pregnadien-3,20-dion, 17aa,21-dihydroxy-17a-methyl-D-homo-4-pregnen-3,20-dion, 21-hydrox.y-17aa-acetoxy-17a-methyl-D-homo-4-pregnen-3,20-dion, 17aa,21-dihydroxy-17a-methyl-D-homo-l,4-pregnadien-3,20-dion, 6a~f luor-17aa,-21.-dihydroxy-17a-methyl-D-homo-4-pregnen-3, 20-dion, 6a >-fluor-21-hydroxy-17aa-acetoxy-17a-methyl-D-homo-4-pregnen-3,20-dion,

6a-fluor-17aa,2l-dihydroxy-17a-methyl-D-homo-l,4-pregnadien-3,20-dion,

6a-fluor-21-hydroxy-17aa-acetoxy-17a-methyl-D-homo-l,4-pregnadien-•y.3,20-dion,

6a-fluor-17a,17aa,21-trihydroxy-D-homo-4-pregnen-3,20-dion, 6a-fluor-21-hydroxy-17a,17aa-isopropylidendioxy-D-homo-4-pregnen-3,20-dion

'6a-fluor-17a,17aa,21-trihydroxy-D-hom6-l,4-pregnadien-3,20-dion og 6a-fluor-21-hydroxy-17a,17aa-isopropylidendioxy-D-homo-l,4-pregnadien-3,20-dion,

såvel som 21~acetatet, 21-butyratet, 21-valerianatet, 21-capronatet og natriumsaltet av 21-monosulfatesteren eller 21-fosfatesteren av disse forbindelser og ennvidere

6a,21-difluor-17a-methyl-D-homo-4-pregnen-3,20-dion,

6a-fluor-21-klor-17a-methyl-D-homo-4-pregnen-3,20-dion, 6a,21-difluor-17a-methyl -D-homo-1,4-pregnadien-3,20-dion, 6a-f luor-21-klor-17a-methyl-D-homo--l, 4-pregnadien-3, 20-dion, 6a,21-difluor-17a,17aa-isopropylidendioxy-D-homo-4-pregnan-3,20-dion,

6a-fluor-21-klor-17a,17aa-isopropylidendioxy-D-homo-4-pregnen-3,20-dion, 6a,21-difluor-17a,17aa-isopropylidendioxy-D-homo-l,4-pregnadien-3,20-dion og

6a-fluor-21-klor-17a,17aa-isopropylidendioxy-l,4-pregnadien-3,20-dion.

Ennvidere kan ved foreliggende fremgangsmåte følgende i lla-stilling hydroxylerte D-homosteroider av generell formel I fremstilles : lla;.21-dihydroxy-D-homo-4-pregnen-3,20-dion,

lia,21-dihydroxy-D-homo-l,4-pregnadien-3,20-dion,

6a-fluor-lla,21-dihydroxy-17a-methyl-D-homo-4-pregnen-3,20-dion, 6a-fluor-lla,21-dihydroxy-17a-methyl-D-homo-l,4-pregnadien-3,20-dion,

lia,17aa,21-trihydroxy-17a-methyl-D-homo-4-pregnen-3,20-dion, lia,17aa,2l-trihydroxy-17a-methyl-D-homo-l,4-pregnadien-3,20-dion, 6a-fluor-lla,17aa,21-trihydroxy-17a-methyl-D-homo-4-pregnen-3,20-dion,

6a-fluor-lla,17aa,21-trihydroxy-17a-methyl-D-homo-l,4ppregnadien-3,20-dion,

6a-fluor-lla,21-dihydroxy,17a,17aa-isopropylidendioxy-D-homo-4-pregnen-3,20-dion og

6a-fluor-lla,21-dihydroxy-17a,17aa-isopropylidendioxy-D-homo-1,4--V.pregnadien-3,20-dion,

såvel som llct-acetatet, 21-acetatet og lia, 21-diacetatet av disse forbindelser.

Ennvidere lar det seg ved hjelp av foreliggende fremgangsmåte å fremstille følgende i 9,11-stilling umettede. D-homosteroider av generell formel I: 21-hydroxy-D-homo-4,9(11)-pregnadien-3,20-dion,

21-hydroxy-D-homo-l,4,9(11)-pregnatrien-3,20-dion,

6a-f luor-21-hydroxy-17a-methyl-D-homo-4 ,9 (11) -pregnadien-3 , 20--dion, 6a-fluor-21-hydroxy-17a-methyl-D-homo-l,4,9(11)-pregnatrien-3,20-dion,

6a-fluor-21-hydroxy-17a,17aa-isopropylidendioxy-D-homo-4,9(11)-pregnadien-3,20-dion og

6a-fluor-21-hydroxy-17a,17aa-isopropylidendioxy-D-homo-l,4,9(11)-pregnatrien-3,20-dion,

•■i

såvel som 21-acetatet og 21-trimethylacetatet og videre 6a-fluor-17a,17aa-isopropylidendioxy-D-homo-4,9(11)-pregnadien-3,20-dion og 6 a- fluor-17a,17aa-isopropylidendioxy-D-homo-l,4,9(11)-pregnatrien-3,20-dion.

Dessuten kan ved hjelp av foreliggende fremgangsmåte følgende 9,11-epoxy-D-homosteroider av generell formel I fremstilles: 21-hydroxy-9 3,113-epoxy-D-homo-l,4-pregnadien-3,20-dion, 6a-fluor-21-hydroxy-93,113-epoxy-17a-methyl-D-homo-l,4-pregnadien-3,20-dion og

6a- f luor-21-hydroxy-9 3,113;repoxy-17a, 17aa-isopropylidendioxy-D-homo-1,4-pregnadien-3,20-dion,

såvel som deres 21-acetat og 21—trimethylacetat.

Det er allerede omtalt at de nye D-homosteroider av generell formel I kan fremstilles etter i og for seg kjente metoder.

For utførelse av fremgangsmåten ifølge alternativ a) kan man anvende såvel mikrobiologiske som rene kjemiske arbeidsmetoder. Således kan eksempelvis forbindelser av formel II hvor substituenten Ry betegner hydrogen eller en lavere acylrest, fermenteres under vanlige betingelser med mikroorganismer av arten Flavobacterium (f.eks. Flavobacterium dehydrogenans, Flavobacterium buccalis eller Flavobacterium fulvum) hvorved det erholdes det tilsvarende

i 1,2-stilling mettede 3-keto-A^-steroid av generell formel I. Under disse betingelser forsåpes den i 3-stilling og eventuelt i 21-stilling foreliggende acyloxygrupper under omsetningen.

I stedet for mikroorganismen av arten Flavobacterium kan man for denne mikrobiologiske oxydasjon også anvende andre mikroorganismer, f.eks. stammer av arten Micrococcus (fieks* Coryne-bacterium mediolanum), ,Norcardia eller Fusarium (f.eks. Fusarium solani), ved hvis anvendelse som bekjent i tillegg til oxydasjon

av 3-hydroxygruppen og isomerisering av A -dobbeltbindingen ofte inntrer en A''"-dehydrering.

Til den mikrobiologiske oxydasjon ifølge fremgangsmåtealternativ a) egner seg fortrinnsvis slike forbindelser av generell formel II i hvilke substituenten X betegner et hydrogenatom.

Utføres oxydasjonen ifølge fremgangsmåtealternativ a) i/. ed hjelp av en ren kjemisk arbeidsmetode, er det nødvendig å avspalte en eventuelt i 3-stillingen foreliggende acylrest før oxydasjonen. Ennvidere er det fordelaktig å beskytte eventuelt foreliggende

hydroxylgrupper i 17a- og/eller 21-stilling gjennom acylering.

Den kjemiske oxydasjon av forbindelsene av generell formel II skjer etter kjente metoder, eksempelvis kan nevnes Oppenauer-oxydasjonen av disse forbindelser med aluminiumisopropylat eller aluminium-tertiært butylat i ketoner, slik som aceton eller fortrinnsvis cyclohexanon.

Fremgangsmåten ifølge fremgangsmåtealternativ b) kan likeledes utføres på i og for seg kjent måte. Således kan man eksempelvis fra forbindelser av generell formel III ved behandling med baser (f.eks. triethylamin, kaliumcarbonat, kalsiumcarbonat, natriumacetat og lithiumcarbonat) avspalte bromhydrogen. Ennvidere kan man for avspaltning av bromhydrogen og i særdeleshet vann anvende uorganiske eller organiske syrer, slik som f.eks. maursyre, eddiksyre, oxalsyre, klorhydrogen, fosforsyre eller svovelsyre. Ved denne sistnevnte avspaltning blir en eventuelt i 3-stilling foreliggende substituent X (fluor eller methyl) isomerisert.

For utførelse av fremgangsmåten ifølge alternativ c) anvendes den vanlige fermentering med lia- eller 113-hydroxylerende mikroorganismer. For 11 -hydroxyleringen anvendes det fortrinnsvis soppstammer av arten Aspergillus (f.eks. Aspergillus occhraceus) som mikroorganisme. For llg-hydroxyleringen kan eksempelvis anvendes soppstammer av arten Curvularia (f.eks. Curvularia lunata),

Cunninghamella (f.-eks. Cunninghamella bainieri, Cunninghamella elegans, Cunninghamella echinolata og Cunhinghamelle blackesleana),

Absidia (f.eks. Absidia orchidis og Absidia coerula), Helmintos-porium, Rhizoctonia (f.eks. Rhizoctonia solani), Verticillium (f.eks. Verticillium theobromae), Stachylidium (f.eks. Stachylidium bicolor), Pellicularia (fieks. Pellicularia filamentosa) eller Colletotrichum (f.eks. Colletotrichum pisi). Fermenteringen med disse mikroorganismer 'utføres under de vanlig anvendte betingelser. Ved denne omsetning blir en i 21-stilling foreliggende acylgruppe som regel avspaltet. Fremgangsmåtealternativ c) utføres fortrinnsvis med slike forbindelser av generell formel IV som i 21-stilling bærer en hydroxylgruppe eller en acyloxygruppe.

Den eventuelt medfølgende avspaltning av ll-hydroxyl~gruppen ved den mikrobiologiske hydroxylering kan likeledes utføres ved hjelp av kjente metoder. For eksempel ved omsetning av 11-hydroxysteroidet med thionylklorid, methansulfonsyreklorid eller trimethylacetylklorid i nærvær av baser, slik som pyridin. Ved denne omsetning anvendes fortrinnsvis slike steroider av generell formel IV som utgangsmaterialer som i 21-stilling ikke bærer noen fri hydroxylgruppe. Det skal nevnes at vannavspaltningen av 113-hydroxysteroidet gir høyere utbytte av fremgangsmåteproduktet enn avspaltning fra det tilsvarende lla-hydroxysteroid.

Det således erholdte A^-steroid kan på i og for seg kjent måte overføres til 9,11-epoxydet. Dette kan eksempelvis ut-føres på den måte at A^-steroidet i nærvær av vandig mineralsyre. (f.eks. perklorsyre) omsettes med N-kloracylamid (f.eks. N-kloracetamid), N-bromacylamid (f.eks. N-bromacetamid), N-kloracyl-imid (f.eks. klorsuccinimid) eller N-bromacylimid (f.eks. N-bromsuccinimid) hvoretter det således erholdte 9ct-halogen-ll3-hydroxysteroid ved behandling med baser (f.eks. natriumhydroxyd, kaliumhydroxyd, kaliumcarbonat, natriumacetat, kaliumacetat og pyridin) overføres til det tilsvarende 93/113-epoxyd.

Fremgangsmåten ifølge fremgangsmåtealternativ d) kan ut-føres under de samme betingelser som man vanligvis anvender ved omvaiidling av A 16-steroider i 16 ,17-dihydroxysteroider. Eksempelvis kan nevnes omsetning av forbindelser av generell formel V med osmiumtetroxyd eller kaliumpermanganat.

Fremgangsmåten ifølge fremgangsmåtealternativ e) kan ut-føres under de samme betingelser som man vanligvis anvender for i en organisk forbindelse å utskifte et bromr eller jodatom, en

•i

alkansulfonylgruppe (fortrinnsvis en methansulfonylgruppe) eller en arylsulfonylgruppe (fortrinnsvis en p-toluensulfonsyregruppe) mot hydrogen, fluor, klor, en acyloxygruppe eller en fosfatrest. Således kan eksempelvis forbindelsene av generell formel VI hvor

W betegner et jodatom eller en p-toluensulfonsyregruppe reduseres ved omsetning med sinkstøv, hvorved det erholdes det tilsvarende i 21-stilling usubstituerte D-^homosteroid av generell formel I. Ennvidere kan forbindelsen av generell formel VI i et polart løs-ningsmiddel omsettes med et alkalihalogenid (fortrinnsvis kalium-hydrogendifluorid eller lithiumklorid) eller et alkaliacylat (som f.eks. natriumacetat) hvorved det erholdes den tilsvarende 21-fluor-, 21-klor- eller 21-acyloxy-forbindelse av generell formel I. For denne omsetning anvendes som polare løsningsmidler fortrinnsvis di-polare aprotiske løsningsmidler som som dimethylformamid, dimethyl-acetamid, hexamethylfosforsyretriamid eller N-methylpyrrolidon, hvilke man om ønsket tilsetter en literi mengde av et protonisk. løs-ningsmiddel slik som methanol, ethanol eller vann. Utføres frem- gangsinåtealternativ e) under anvendelse av alkaliacylater som reaksjonspartner, er det hensiktsmessig som løsningsmiddel for reaksjonen å anvende den til alkaliacylatet tilsvarende frie car-bonsyre. 21-brom- eller 21-jod-forbindelsene av generell formel VI kan ennvidere ved omsetning med sølvfluorid eller sølvacylater

(slik som f.eks. sølvacetat) overføres til den tilsvarende 21-fluor-eller 21-acyloxy-forbindelse. 21-monofosfatesteren av generell formel I kan eksempelvis fremstilles på den måte at den tilsvarende jodforbindelse av generell formel VI oppvarmes med en fosforsyre i nærvær av en organisk base slik som triethylamin.

Fremgangsmåten ifølge fremgangsmåtealternativ f) utføres under de samme betingelser som man vanlig anvender til methyladdi-sjon i en A/^-dobbeltbinding av pregnan-20-on-derivater. Således kan eksempelvis forbindelsene av generell formel VII omsettes med et methylmagnesiumhalogenid, fortrinnsvis i nærvær av kobber-(I)-klorid eller med lithiumkobberdimethyl, hvorved det erholdes etter vanlig spaltning av Grignard-løsningen, eksempelvis med mineralsyre, D-homosteroid av generell formel I med en i". 17a-stilling foreliggende methylgruppe og et i 17aa-stilling foreliggende hydrogenatom.

Tilsetter man på den annen side Grignard-løsningen med acylhalogenider (fortrinnsvis acetylklorid)

persyrer og epoxyderer reaksjonsblandingen ved behandling med persyrer og spalter reaksjonsblandingen deretter med mineralsyrer, erholdes D-homosteroider av generell formel I med en i 17a-stilling foreliggende methylgruppe og en i 17aa-stilling foreliggende hydroxylgruppe.

Ved opparbeidelse av reaksjonsblandingen vil man hvis den utføres i surt medium, ketalgruppen i 3-stilling avspaltes og sam-tidig vil den i molekylet foreliggende A^-dobbeltbinding isomeri-seres.

Den eventuelt etterfølgende dehydrering av det i 1,2-stilling mettede A^~D-homo-steroid av generell formel I kan utføres såvel mikrobiologisk som rent kjemisk. Således kan eksempelvis A^-steroidet under de vanlige betingelser dehydreres i 1,2-stilling med bakteriekulturer av artene Bacillus (f.eks. Bacillus lentus eller eller Bacillus sphaericus) eller Arthrobacter (f.Eks. Arthrobacter simplex) . På den annen side er det også mulig å utføre A^-dehydre-ringen ved at A^-steroidet oppvarmes med et for denne reaksjon vanlig oxydasjonsmiddel, som selendioxyd eller 2,3-diklor-5,6-dizyano-

benzokinon i inerte løsningsmidler.

Den eventuelt etterfølgende forsåpning av de i 17,17a-og/eller 21-stilling foreliggende acyloxygrupper skjer etter vanlige fremgangsmåter, f.eks. ved omsetning av esteren i vannholdig eller alkoholholdig løsning eller løsningsmiddelblanding i nærvær av sterke syrer, slik som f.eks. svovelsyre, kl<p>rhydrogen, p-toluensulfonsyre eller trifluoreddiksyre eller ved omsetning av esteren i vannholdig eller alkoholholdig løsning eller løsningsmiddelblanding i nærvær av alkalialkoholater, alkalihydroxyder eller alkalicarbo-nater.

Hvis forsåpningen utføres under milde betingelser er det mulig selektivt å forsåpe 17aa,21-diacyloxy-D-homo-steroid av generell formel I til 21-hydroxy-17a-acyloxy-D-homosteroidet.

Om ønsket kan en i 17,17a-stilling foreliggende ketalgruppe hydrolyseres, eksempelvis ved behandling av denne forbindelse med syrer i vannholdige løsningsmidler eller vannholdige løs-ningsmiddelblandinger.

En eventuell etterfølgende fremstilling av frie hydroxylgrupper i 17,17a- og/eller 21-stilling skjer likeledes ved hjelp av i og for seg kjente metoder. Således kan f.eks. hydroxysteroidet forestres med acylklorider eller acylanhydrider i nærvær, av syrer, slik som f.eks. klorhydrogen, p-toluensulfonsyre, trifluoreddiksyre^eller i•nærvær av baser, slik som kaliumcarbonat, pyridin, collidin eller p-dimethylaminopyridin. På den annen side. er det mulig å forestre hydroxyforbindelsen med carbonsyrer i nærvær av trifluor-eddiksyreanhydrid. Utføres denne forestring under milde betingelser vil som kjent bare den primære og sekundære hydroxylgruppe forestres, mens en eventuelt foreliggende tertiær hydroxylgruppe ikke omsettes. Har man til .hensikt bare å forestre 21-hydroxylgruppen i 17,17a,21-trihydroxysteroidet, utføres denne reaksjon fortrinnsvis på den måte at trihydroxyforbindelsen omsettes med det tilsvarende acylanhydrid i nærvær av blyacetat.

Fra 21-hydroxylforbindelsen av generell formel I kan alkalisulfat av 21-monosvovelsyreesteren fremstilles på i og for seg kjent'måte, f.eks. ved at 21-hydroxylforbindelsen omsettes med svoveltrioxyd i pyridin, og at den erholdte svovelsyreester ved behandling med alkalibaser overføres i alkalisaltet.

Om ønsket kan en i D-homo-steroid av generell formel I eventuelt foreliggende 17,17a-diolgruppering kondenseres med carbonylforbindelser av generell formel R5RgCO^ Denne reaksjon utføres fortrinnsvis ved at man omsetter diolet i nærvær av sterke syrer, slik som f.eks. klorhydrogen eller perklorsyre eller p-toluensulfonsyre, og under tilsetning av vannfjernende middel, slik som f.eks. enolacetater eller orthomaursyreester, med den tilsvarende carbonylforbindelse.

Det er allerede omtalt at D-homo-steroidet av generell formel I er verdifullt mellomprodukt, som i særdeleshet kan anvendes ved fremstilling av anti-inflammatorisk aktive D-homo-steroider av generell formel VIII

hvor - - -, X, -A-B og R-^ har de tidligere angitte betydninger «,og hvor Y1 betegner et hydrogenatom eller et fluoratom og Z<1>betegner en hydroxylgruppe eller hvor Y<1>betegner et kloratom og Z' en hydroxylgruppe, et fluoratom eller et kloratom. Dette kan eksempelvis skje ved at forbindelsen av generell formel I hvor Y og Z betegner hydrogen hydroxyleres i 113-stilling etter allerede beskrevne metoder, eller ved at man i D-homo-steroidet hvor Y og Z betegner en carbon-carbonbinding adderes underklorsyre, idet man på denne forbindelse lar innvirke for eksempel vandig perklorsyre og N-bromsuccinimid.

Ennvidere kan 9,11-epoxydet av generell formel I omsettes med fluorhydrogen eller klorhydrogen hvorved det erholdes det tilsvarende llB-hydroxy-9a-klor- eller ll8-hydroxy-9a-fluorsteroid av generell formel VIII.

Ennvidere er i særdeleshet forbindelsene av generell formel I hvor X og Y betegner hydrogen, farmakologisk virksomme og viser et lignende aktivitetsspektrum som de tilsvarende struktur-analoger kjente steroider som inneholder en femdelt D-ring i

steroidskjelettet.

De nye forbindelser utviser imidlertid den fordel at de metaboliseres på en annen måte i kroppen enn de kjente steroider, slik at de ofte viser en gunstigere likevekt mellom ønsket aktivi-tet og uønsket bivirkning.

Fra de farmakologisk aktive D-homo-steroider av generell formel I kan på vanlig måte fremstilles legemiddelpreparater, idet den aktive bestanddel med egnede tilsatsstoffer, bærere og smaks-korrigerende stoffer overføres i de ønskede administreringsformer, slik som tabletter, dragéer, kapslser, løsninger, salver osv.

Utgangsmaterialene av generell formel II - VII som anvendes ved fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen fremstilles etter kjente metoder og hvis typiske eksempler illustreres i de etter-følgende utførelseseksempler.

De etterfølgende eksempler belyser oppfinnelsen.

Eksempel 1

a) Til 45 g magnesiumspon i 1400 ml absolutt ether ble dråpe-. vis tilsatt 130 ml methyljodid. Etter at magnesiumet var løst, ble

langsomt tilsatt 2500 ml absolutt tetrahydrofuran og blandingen ble destillert til destillatet nådde et kokepunkt på 55° C. Deretter ble blandingen avkjølt til 20° C, 7 g kobber-(I)-klorid ble tilsatt^og en løsning av 100 g 33-acetoxy-D-homo-5,17(17a)-dien-20-on i

1000 ml absolutt tetrahydrofuran ble tilsatt hvoretter blandingen ble omrørt i 50 minutter ved 20° C.

Blandingen ble deretter avkjølt til 0° C, hvoretter 2 30

ml 2n-svovelsyre ble dråpevis tilsatt og blandingen ble ekstrahert, med eddikester. Ekstraktet ble vasket med natriumthiosulfatløsning og vann, tørket over natriumsulfat og inndampet i vakuum.

Det således erholdte residuum ble under oppvarming tilsatt 300 ml pyridin og 150 ml acetanhydrid og den erholdte løsning fikk stå i 16 timer ved romtemperatur. Deretter ble blandingen heldt over i isvann, det utfelte produkt ble fraskilt og løst i methylenklorid. Methylenkloridløsningen ble,vasket med fortynnet svovelsyre og vann, inndampet i vakuum og residuet ble omkrystallisert fra methylenklorid-eddikester. Det ble erholdt 75,6 g 3B-acetoxy-17a-methyl-D-homo-5-pregnen-20-on med smeltepunkt. 212 - 213° C,

b) 30 g 33-acetoxy-17a-methyl-D-homo-5-pregnen-20-on ble tilsatt 300 ml iseddik og oppvarmet til 40 - 45° C. Deretter ble

en løsning av 7,9 ml brom i 60 ml iseddik dråpevis tilsatt blandingen i løpet av 10 minutter. Reaksjonsblandingen fikk avkjøles, og ble heldt over i iskald kaliumacetat-løsning hvoretter det utfelte produkt ble fraskilt, løst i eddikester, hvoretter eddikesterfasen ble vasket med vann, inndampet i vakuum til tørrhet ved 40° C hvorved det ble erholdt 5 ,6 ,21-tribro-m-3P-acetoxy-17a-niethyl-D-homo-pregnen-20-on som et urent produkt.

c) Det således erholdte urene produkt ble tilsatt 800 ml aceton og 80 g natriumjodid og ble omrørt ved 20° C i 16 timer, i

mørke. Deretter ble reaksjonsblandingen tilsatt iskald natriumthio-sulfatløsning, det utskilte jodid ble filtrert fra, løst i eddikester og eddikesterfasen ble vasket med vann og inndampet i vakuum.

d) . Det således erholdte residuum ble løst i 420 ml dimethylformamid, ble tilsatt 24 ml iseddik og 42 ml triethylamin og ble om-rørt i 4,5 timer under nitrogen ved 110° C. Deretter fikk reaksjonsblandingen avkjøles til romtemperatur, og ble deretter heldt over i iskald natriumkloridløsning, det utfelte produkt ble filtrert fra og løst i methylenklorid. Methylenkloridløsningen ble vasket med vann, tørket over natriumsulfat, inndampet i vakuum og residuet ble kromatografisk renset over en silicagelsøyle. Det ble erholdt 19,5 g 33 r21-diacetoxy-17a-methyl-D-homo-5-pregnen-20-on som etter<p>mkrystallisering fra ether-pentan smeltet ved 135,5 - 137,5° C. e) 24,4 g 33,21-diacetoxy-17a-methyl-D-homo-5-pregnen-20-on ble løst i 250 ml methylenklorid, ble tilsatt 250 ml 1 %-ig methanolisk kaliumhydroxydløsning og ble oppvarmet under tilbakeløps-kjøling i 25 minutter. Deretter ble det tilsatt 3 ml iseddik til reaksjonsblandingen, denne ble inndampet i vakuum, og residuet ble tatt opp i tetrahydrofuran og den erholdte løsning ble inndampet i vakuum. Residuet ble omkrystallisert. fra aceton og det ble erholdt 15,8 g 33,21-dihydroxy-17a-methyl-D-homo-5-pregnen-20-on med smeltepunkt 198 - 202° C. f) 11/7, g 33/21-dihydroxy-17a-methyl-D-homo-5-pregnen-20-on ble tilsatt 150 ml dimethylformamid, 20 ml acetanhydrid og 1,1 g

blydiacetat og ble omrørt ved romtemperatur i 9 0 minutter. Deretter ble blandingen heldt over i iskald natriumkloridløsning, det utfelte produkt ble fraskilt og løst i methylenklorid. Methylen-kloridekstraktet ble vasket med vann, tørket og inndampet i vakuum.

Det erholdte produkt ble omkrystallisert fra methylenklorid-diisopropylether og det ble erholdt 11,6 g 36-hydroxy-21-a,cetoxy-17a-methyl-D-homo-5-pregnen-20-on med smeltepunkt 188,5 - 191° C. g) 20,5 g 33-hydroxy-21-acetoxy-17a-méthyl-D-homo-5;rpregnen-20-on ble tilsatt 500 ml toluen og 20 ml cyclohexanon.og oppvarmet til kokning inntil enkelte ml ble avdestillert. Deretter ble blandingen tilsatt en løsning av 4,4 g aluminiumisopropylat i 50 ml toluen, hvoretter blandingen ble oppvarmet ytterligere 1 time så pass sterkt at alltid noe løsningsmiddel ble avdestillert.

Reaksjonsblandingen fikk avkjøles, ble fortynnet med eddikester, eddikesterfasen ble vasket med ln svovelsyre og vann og inndampet i vakuum. Residuet ble kromatografert over en kisel-syregelsøyle, omkrystallisert fra aceton-hexan hvorved det ble erholdt 15,7 g 21-acetoxy-17a-methyl-D-homo-4-pregnen-3.2 0-dion med smeltepunkt 200,5 - 202° C.

h) En 2 liters Erlenmeyer-kolbe som inneholdt 500 ml av en i 30 minutter ved 120° C i autoklav sterilsert næringsløsning på

1 % maisstøpvæske, 1 % soyamel og 0,005 % soyaolje inntilt på pH 6,2 ble podet med en lyofilkultur av Curvularia lunata (NRRL 2380) og ble ristet på en rotasjonsrister i 72 timer ved 30° C. Med denne forkultur ble deretter et 20 liters fermenteringskar av rustfritt stål som inneholdt 15 liter av et ved 121° C og- 1,1 ato sterilisert medium av 1 % maisstøpvæske, 0,5 % stivelsesukker og •4,0,005 % soyaolje innstilt på pH 6,2, podet. Under tilsetning av Silicon SH som anti-skumningsmiddel fikk blandingen spire ved 29° C under en gjennomluftning på 10 liter/min, 0,7 ato trykk og en om- røring på 220 omdr./min i 24 timer. 1 liter av kulturvæsken ble under sterile betingelser overført til 14 liter av et sterilisert medium inneholdende 1 % maisstøpvæske, 1,25 % soyamel og 0,005 % soyeolje og dyrket under samme betingelser. Etter 6 timer ble en løsning av 3 g 21-acetoxy-17a-methyl-D-homo-4-pregnen-3,20-dion i 150 ml dimethylformamid tilsatt.

Etter 23 timer kontakttid ble fermenteringsinnholdet ut-rørt to ganger, hver gang med 10 liter methylisobutylketon og ekstraktet ble inndampet i vakuum ved 50° C. Residuet ble vasket flere ganger med hexan for å fjerne siliconoljen og omkrystallisert fra eddikester under tilsetning av aktivt carbon, hvorved det ble erholdt 608 mg rent 11$,21-dihydroxy-17a-methyl-D-homo-4-preg-nen-3,20-dion med smeltepunkt 200,3° C.

Eksempel 2

En 2 liters Erlenmeyer-kolbe som inneholdt en 500 ml næringsløsning sterilisert i autoklav i 30 minutter ved 120° C, bestående av 1,5 % pepton, 1,2 % maisstøpvæske og 0,2 % magnesium-sulfat, innstilt på pH 6,5, ble innpodet med en lyofilkultur av Bacillus lentus (ATCC 13 805) og ble ristet i 24 timer ved 30° C. Med denne forkultur ble deretter et 20 liters fermenteringskar av rustfritt stål inneholdende 15 liter av en ved 121° C og 1,1 ato sterilisert flytende næringsmedium inneholdende 0,2 % gjærekstrakt, 1 % maisstøpvæske og 0,1 % stivelsesukker innstilt på pH 7,0, innpodet. Under tilsetning av Silicon SH som anti-skummiddel ble blandingen spiret ved 29° C under gjennomluftning og omrøring. Etter en voksefase på - 6 timer ble en løsning.av 3 g 113,21-dihydroxy-17a-methyl-D-homo-4-pregnen-3,20-dion i 15 0 ml dimethylformamid tilsatt.

Etter 15 timers kontakttid ble fermenteringsinnholdet ekstrahert to ganger, hver gang med 10 liter methylisobutylketon og ekstraktet ble inndampet i vakuum. Residuet ble vasket med hexan for å fjerne siliconoljen og omkrystallisert fra aceton/diisopropyl-eilier i nærvær av aktivt carbon, hvorved det ble erholdt 2,2 g 113 ,.21-dihydroxy-17a-methyl-D-homo-l, 4-pregnadien-3,20-dion med smeltepunkt 159° C.

Eksempel 3

200 mg 113,21-dihydroxy-17a-methyl-D-homo-l,4-pregnadien-3,20-dion ble tilsatt 3 ml pyridin og 0,3 ml smørsyreanhydrid og ble oppvarmet under tilbakeløpskjøling i 15 minutter. Blandingen fikk avkjøles, ble fortynnet med cyclohexan og inndampet i vakuum. Det oljeaktige residuum ble revet med pentan, pentanløsningen ble dekantert fra og det således erholdte urene produkt ble omkrystallisert fra methylenklorid-diisopropyleter hvorved det ble erholdt 140 mg ll3-hydroxy-21-butyryloxy-17ct-methyl-D-homo-l,4-pregnadien-3,20-dion med smeltepunkt 156 - 158° C.

Eksempel 4

5,0 g 110 ,21-dihydroxy-17a-methyl-D-homo-l,4-pregnad.ien-3,20-dion ble tilsatt 20 ml pyridin og 10 ml acetanhydrid og ble holdt i 60 minutter ved romtemperatur. Deretter ble reaksjonsblandingen heldt over i isvann, det utfelte produkt ble fraskilt, løst i methylenklorid, methylenkloridfasen ble vasket med 2n svovelsyre og vann og deretter inndampet i vakuum. Residuet ble omkrystalli-

sert fra methylenklorid-dlisopropylether og det ble erholdt 5,1 g llg-hydroxy-21-acetoxy-17a-mctlxyl-D^homo-l, 4-pregnadien-3 ,'20-dion med smeltepunkt 170 - 172° C.

Eksempel 5

a) 50 g llB-hydroxy-21-acetoxy-17a-methyl-D-homo-l,4-pregnadien-3,20-dion ble løst i 44 ml pyridin og under omrøring ble 22 ml

methansulfonsyreklorid dråpevis tilsatt. Reaksjonsblandingen ble oppvarmet i 90 minutter ved 80° C, fikk deretter avkjøles og helt i isvann. Det utfelte produkt ble fraskilt, vasket med vann, inndampet i vakuum, omkrystallisert fra methylenklorid-diisopropylether hvorved der ble erholdt 39,2 g 21-acetoxy-17a-methyl-D-homo-l,4,9-(11)-pregnatrien-3,20-dicn med smeltepunkt 161 - 163° C.

b) 11 g 21-acetoxy-17a-methyl-D-homo-l,4,9X11)-pregnatrien-3,20-dion ble suspendert i 200 ml tetrahydrofuran og tilsatt 88 ml

ln perklorsyre. Deretter ble reaksjonsblandingen under omrøring tilsatt 14,3 g N-bromsuccinimid og omrørt i 30 minutter ved 30° C. Blandingen ble heldt over i iskald natriumsulfitløsning, det utfelte produkt ble fraskilt, tatt opp i methylenklorid, methylenkloridfasen ble vasket med vann, inndampet i vakuum, hvorved det ble erholdt 9a-brom-llB-hydroxy-21-acetoxy-17a-methyl-D-homo-l,4-pregnadien-3,20-dion som urent produkt.

c) 13,6 g av de't således erholdte bromhydrin ble tilsatt 22 g

.^kaliumacetat og 100 ml ethanol og ble oppvarmet i 2 timer under

tilbakeløpskjøling. Deretter ble reaksjonsblandingen heldt over i vann, det utskilte produkt ble<:>fraskilt, tørket i vakuum hvorved det ble erholdt 9 3 , ll$-epoxy--21-acetoxy-17a-methyl-D-homo-l, 4-pregnadien-3,20-dion som urent produkt.

d) 8,0 g av det således erholdte urene produkt ble innført i en til -10° C avkjølt b'landing av '24 ml dimethylformamid og 24 ml

fluorhydrogen og blandingen ble omrørt i 10 timer ved romtemperatur. Deretter ble reaksjonsblandingen heldt over i ammoniakkholdig isvann, det utfelte produkt ble fraskilt, løst i methylenklorid, methylenkloridfasen ble vasket med vann og inndampet i vakuum. Residuet ble omkrystallisert fra aceton-hexan og det ble erholdt

5,8 g 9a-fluor-llS-hydroxy-21-acetoxy-17a-methyl-D-homo-l,4-pregnadien-3,20-dion med smeltepunkt 183 - 185° C.

Eksempel 6

3 g 9a-fluor-ll3-hydroxy-21-acetoxy-17a-methyl-D-~homo-1,4-pregnadien-3,20-dion ble tilsatt 12 ml methanol og 12 ml methylenklorid, ble avkjølt til -5° C og ble dråpevis tilsatt en løsning av 0,18 g kaliumhydroxyd i 6 ml methanol. Deretter ble blandingen omrørt i 60 minutter ved 0° C, nøytralisert med eddiksyre, fortynnet med methylenklorid, methylenkloridfasen ble vasket med vann, inndampet i vakuum og residuet ble krystallisert fra methanol. Det ble erholdt 2,4 g 9ot-f luor-113, 21-dihydroxy-17ot-methyl-D-homo-l, 4-pregnadien-3,20-dion med smeltepunkt 223 - 225° C.

Eksempel 7

4 ml pyridin ble avkjølt til -15° C og under omrøring tilsatt 0,26 ml friskt destillert svoveltrioxyd på en slik måte at temperaturen på blandingen ikke overskred +5° C. I den således erholdte løsning ble innført 2 g 9ct-f luor-113,21-dihydroxy-17a-methyl-D-homo-1,4-pregnadien-3,20-dion, blandingen ble omrørt i 30 minutter ved 20° C, ble tilsatt 40 ml vann og omrørt i ytterligere 30 minutter. Til reaksjonsblandingen ble deretter tilsatt 7 ml av en ln natriumhydroxydløsning til pH 8,5. Blandingen ble ekstrahert med methylenklorid og den vandige fase ble etter at denne var innstilt på pH 8,5 med ln natriumhydroxydløsning inndampet i vakuum. Residuet ble løst i 50 ml methanol, filtrert, filtratet ble inndampet i vakuum og residuet tørket i vakuum. Det ble erholdt 1,8 g "natrium- (9ot-f luor-ll3-hydroxy-3, 20-dioxo-17a-methyl-D-homo-l, 4- pregnadien-21-yl}-sulfat med spaltningspuhkt 191° C.

Eksempel 8

a) En Grignard-løsning (fremstilt fra 21 g magnesiumspon,

72,5 g methyljodid og 1000 ml ether) ble fortynnet med 1000: ml

absolutt tetrahydrofuran og.destillert så langt at destillatet hadde et kokepunkt på 50° C. Deretter ble den erholdte løsning avkjølt til 20° C, tilsatt 4 g kobber-(I)-klorid og en løsning av 50 g 3$-hydroxy-D-homo-5,17(17a)-pregnadien-20-on i 2000 ml absolutt tetrahydrofuran hvoretter blandingen ble omrørt i 20 minutter ved romtemperatur. Reaksjonsblandingen ble deretter opparbeidet som vanlig, det urene produkt ble krystallisert fra aceton og det ble erholdt 32,5 g 3g-hydroxy-17a-methyl-D-homo-5-pregnen-20-on med smeltepunkt 207 - 209° C.

b) 10 g 33-hydroxy-17a-methyl-D-homo-5-pregnen-20-on ble sus pendert i 1000 ml tetrahydrofuran og dråpevis tilsatt en løsning av 3,6 ml brom i 10 ml iseddik (tilsetningstid ca. 15 minutter). Deretter ble reaksjonsblandingen opparbeidet som beskrevet i eksempel lb og det ble erholdt 3B-hydroxy-5,6,21-tribrom-17a-methyl-D-homo-pregnan-20-on som urent produkt.

c) Det således erholdte tribromderivat ble under de i eksempel lc beskrevne betingelser omsatt med 300 ml aceton og 35 g

natriumjodid, hvorved det ble erholdt 21-jodidforbindelsen som et urent produkt.

d) 21-jodidet ble løst i 140 ml dimethylformamid, ble tilsatt 8 ml iseddik og 14 ml triethylamin og ble omrørt i 11 timer

ved 90° C. Reaksjonsblandingen ble opparbeidet som beskrevet i eksempel ld og det ble erholdt 4,4 g 3B-hydroxy-21-acetoxy-17a-methyl-D-homo-5-pregnen-20-on som etter omkrystallisering fra methylenklorid/diisopropylether smelter ved 188 - 190° C.

e) I en til -30° C avkjølt løsning av 3 ml fluorhydrogen og 3 ml dimethylformamid ble 470 mg N-bromsuccinimid innført. Deretter

ble tilsatt en på forhånd avkjølt løsning av 1 g 3$-hydroxy-21-acetoxy-17ct-methyl-D-homo-5-pregnen-20-on i 8 ml methylenklorid, hvoretter blandingen ble omrørt i 10 minutter ved -30° C og ble heldt over i en iskald kaliumhydrogencarbonatløsning og ekstrahert med methylenklorid. Methylenkloridfasen ble vasket med vann, . inndampet i vakuum til tørrhet, residuet omkrystallisert fra aceton, ^hvorved det ble erholdt 627 mg 6$-fluor-5ct-brom-33-hydroxy-21-acetoxy-17ct-methyl-D-homo-5a-pregnan-20-on med smeltepunkt 16 8,5° C (spaltning).

f) 300 mg 63-fluor- 5a-brom-33-hydroxy-21-acetoxy-17a-methyl-D-homo-5a-pregnan-20-on ble i 10 ml aceton dråpevis- tilsatt med

0,19 ml Jones-reagens inneholdende-pr. liter 267 g krom(VI)-oxyd,

230 ml konsentrert svovelsyre i vann, og blandingen ble omrørt i 10 minutter ved 20° C. Deretter ble blandingen heldt over i isvann,

det utskilte produkt ble fraskilt, tatt opp i methylenklorid, hvoretter methylenkloridfasen ble vasket med vann og inndampet i vakuum. Det ble erholdt 298 mg 63-fluor-5a-brom-21-acetoxy-17a-methyl-D-homo-5a-pregnan-3,20-dion som urent produkt.

g) Det urene produkt ble løst i 5 ml iseddik og ble omrørt i 3 timer ved 30° C. Deretter ble blandingen tilsatt 100 mg natriumacetat og ble omrørt i 10 minutter ved 30° C hvoretter blandingen ble helt over i isvann og det utskilte produkt ble filtrert fra og tatt opp i methylenklorid. Methylenkloridfasen ble vasket med vann, inndampet i vakuum, residuet ble omkrystallisert fra<*>aceton, hvorved det ble erholdt 250 mg 6a-fluor-21-acetoxy-17a-methyl-D-homo-4-pregnen-3,20-dion.

h) Under de i eksempel lh beskrevne betingelser ble 3 g 6a-fluor-21-acetoxy-17a-methyl-D-homo-4-pregnen-3,20-dion fermentert

med Curvularia lunata og opparbeidet, hvorved det ble erholdt 6a-fluor-113,21-dihydroxy-17a-methyl-D-homo-4-pregnen-3,20-dion.

Eksempel 9

Under de i eksempel 2 beskrevne betingelser ble 1,2 g 6a-fluor-113,21-dihydroxy-17a-methyl-D-homo-4-pregnen-3,20-dion omsatt med en kultur av Bacillus lentus og opparbeidet, hvorved det ble erholdt 6a-fluor-113,21-dihydroxy-17a-methyl-D-homo-l,4-pregnadien-3,20-dion.

Eksempel 10

10 g 6a-fluor-113,21-dihydroxy-17a-methyl-D-homo-l,4-pregnadien-3,20-dion ble 1 40 ml pyridin tilsatt 20 ml acetanhydrid og ble omrørt i 90 minutter ved romtemperatur. Reaksjonsblandingen ble opparbeidet som beskrevet i eksempel 3 hvorved det ble erholdt 9,5 g 6a-fluor-H3-hydroxy-21-acetoxy-17a-methyl-D-homo-l,4-pregnadien-3,20-dion med smeltepunkt 213 - 215° C.

■ Eksempel 11

a) 5 g 6a-fluor-113,21-dihydroxy-17a-methyl-D-homo-l,4-pregnadien-3,20-dion ble tilsatt 15 ml pyridin og 5 ml trimethyleddik-syreanhydrid og ble oppvarmet i 6 timer under tilbakeløpskjøling. Deretter ble reaksjonsblandingen fortynnet med 30 ml pyridin, av-kjølt til +5° C hvoretter en løsning av 2 ml trionylklorid ble dråpevis tilsatt og blandingen ble omrørt i 30 minutter ved 0° C. Blandingen ble deretter heldt over i isvann, det utfelte produkt ble fraskilt, vasket med vann, tørket i vakuum, krystallisert fra methylenklorid, hvorved det ble erholdt 4,9 g 6a-fluor-21-trimethylacetoxy~17a-methyl-D-homo-l,4,9(11)-pregnatrien-3,20-dion med smeltepunkt 191 - 192,5° C. b) 380 mg 6a-fluor-21-trimethylacetoxy-17a-methyl-D-homo-1,49(11)-pregnatrien-3,20-dion ble løst i 15 ml tetrahydrofuran og

ble tilsatt 1,2 g N-klorsuccinimid og 11 ml ln vandig perklorsyre. Deretter ble blandingen omrørt i 3 timer ved 35° C og ble deretter

heldt over i isvann, ekstrahert med methylenklorid, hvoretter methylenkloridfasen ble vasket med vann og inndampet i vakuum. Residuet ble omkrystallisert fra aceton-diisopropylether, hvorved

det ble erholdt 250 mg 6ot-fluor-9a-klor-ll3-hydroxy-21-trimethylacetoxy-17a-methyl-D-homo-l,4-pregnadien-3,20-dion med smeltepunkt 221 - 223° C.

Eksempel 12

a) 500 mg 6a-fluor-ll3-hydroxy-21-acetoxy-17a-methyl-D-homo-1,4-pregnadien-3,20-dion ble tilsatt 25 ml dimethylformamid, 4,5 ml

pyridin og 2,^2 ml methansulfonsyreklorid og oppvarmet til 80° C i 90 minutter. Reaksjonsblandingen ble opparbeidet som beskrevet i eksempel 5a og det ble erholdt 402 mg 6a-fluor-21-acetoxy-17a-methyl-D-homo-1,4,9(11)-pregnatrien-3,20-dion med smeltepunkt 187 - 189° C.

b) 375 mg 6a-fluor-21-acetoxy-17a-methyl-D-homo-l,4,9(11)-pregnatrien-3,20-dion ble løst i 15 ml tetrahydrofuran, ble tilsatt

1,2 g N-klorsuccinimid og 11 ml ln vandig perklorsyre og ble omrørt i 3 timer ved 35° C. Reaksjonsblandingen ble opparbeidet som beskrevet i eksempel 11b og det ble erholdt 266 mg 6a-fluor-9a--klor-li3-hydroxy-21-acetoxy-17a-methyl-D-homo-l,4-pregnadien-3,20-dion med smeltepunkt 207 - 209° C.

Eksempel 13

a) Under de i eksempel 5a beskrevne betingelser ble 5,0 g 6a-fluor-113-hydroxy-21-acetoxy-17a-methyl-D-homo-l,4-pregnadien-3,20-dion omsatt og opparbeidet, hvorved det ble erholdt 3,7 g 6a-fluor-21-acetoxy-17a-methyl-D-homo-l,4,9(11)-pregnatrien-3,20-dion med smeltepunkt 173 - 175° C. b) Den således erholdte pregnatrien-forbindelse ble under de i eksempel 5b - d beskrevne betingelser overført til 6a,9a-difluor-113-hydroxy-21-acetoxy-17a-methyl-D-homo-l,4-pregnadien-3,20-dion med smeltepunkt 199 - 201° C..

Eksempel 14

3,0 g 6a,9a-difluor-ll3-hydroxy-21-acetoxy-17a-methyl-D-homo-1,4-pregnadien-3,2 0-dion ble under de i eksempel 6 beksrevne betingelser forsåpet og det ble erholdt 2,6 g 6a,9a-difluor-113,21-dihydroxy-17a-methyl-D-homo-l,4-pregnadien-3,20-dion med smeltepunkt 190 - 191° C.

Eksempel 15

1,0 g 6a-fluor-21-acetoxy-17a-methyl-D-homo-l,4,9(11)-pregnatrien-3,20-dion ble løst i 50 ml iseddik, ble tilsatt 4 g lihtiumklorid og avkjølt til 0° C. Blandingen ble deretter tilsatt 400 mg N-klorsuccinimid og en løsning av 110 mg klorhydrogen i 1 ml tetrahydrofuran, hvoretter blandingen ble omrørt i 5 timer ved romtemperatur og deretter heldt over i isvann. Det utfelte produkt ble fraskilt, tatt opp i methylenklorid og methylenkloridfasen ble vasket med vann, inndampet i vakuum hvoretter residuet ble krystallisert fra ether-pentan og det ble erholdt 590 mg 6a-fluor-9a, 113-diklor-21-acetoxy-17a-methy_l-D-homo-l, 4-pregnadien-3, 20-dion med smeltepunkt 232 - 234° C.

Eksempel 16

En blanding av 4,2 ml fluorhydrogen, 5,7 ml tetrahydrofuran .og 8 ml methylenklorid ble avkjølt til -70° C og tilsatt 2,0 g 6a-fluor-21-acetoxy-17a-methyl-l,4,9(11)-pregnatrien-3,20-dion og 1,0 g N-klorsuccinimid og ble omrørt i 5 timer ved -60° C. Deretter ble blandingen ytterligere tilsatt 2,0 g N-klorauccinimid og fikk stå i 15 timer ved 0° C. Reaksjonsblandingen ble héldt over i en iskald kaliumhydrogencarbonatløsning, ekstrahert med methylenklorid hvoretter methylenkloridfasen ble vasket med natrium-sulfatløsning og vann og inndampet i vakuum. Residuet ble omkry-ss tallisert fra aceton-hexan hvorved det ble erholdt 1,3 g 6a,113-difluor-9a-kior-21-acetoxy-17a-methyl-D-homo-l,4-pregnadien-3,20-dion med smeltepunkt 244 - 246° C.

Eksempel 17

I en løsning av 20 g 6a-fluor-113,21-dihydroxy-17a-methyl-D-homo-1,4-pregnadien-3,20-dion i 200 ml pyridin ble under avkjø-ling og omrøring 20 ml methansulfonsyreklorid dråpevis tilsatt.. Etter en reaksjonstid på 30 minutter ble reaksjonsløsningen heldt over i isvann og det utfelte 21-mesylat ble filtrert fra. 15,4 g av det. således erholdte 6a-fluor-113-hydroxy-21-mesylozy-17a-methyl-D-horno-1,4-pregnadien-3,20-dion ble løst i 500 ml aceton og etter tilsetning av 15,4 g natriumjodid i 400 ml aceton ble blandingen oppvarmet til kokning i 15 minutter. Den filtrerte reaksjonsløs-ning ble inndampet i vakuum. Residuet ble revet med fortynnet natriumthiosulfatløsning, fraskilt, vasket med vann og løst i 300 ml aceton og under oppvarming utfelt med 120 ml vann. Etter av- kjøling ble det isolert 14,1 g 6a-fluor-21-jod-llB-hydroxy-17<*->methyl-D-homo-1,4-pregnadien-3,2 0-dion. 14,1 g av 21-jodforbind-elsen ble løst i 700 ml acetonitril og oppvarmet under tilbakéløps-kjøling med 14,1 ml orthofosforsyre og 42 ml triethylamin i 3 timer. Deretter ble reaksjonsløsningen inndampet under redusert trykk, residuet ble tatt opp i methanol og løsningen innstilt på pH 11

med ln methanolisk nafcronlut. Residuet ble filtrert fra, filtratet ble inndampet i vakuum og residuet ble tatt opp i 70 ml methanol. Ved tilsetning av ether ble dinatriumsaltet utfelt. Dinatriumsaltet kan renses ved omfelling fra methanol med ether. Det ble erholdt 11,9 g di-natrium-(6a-fluor-113-hydroxy-3,20-dioxo-17a-methyl-D-homo-1,4-pregnadien-21-yl)-fosfat.

Eksempel 18 '

Under de i eksempel 8e, f og 9 beskrevne betingelser ble det fra 3$-hydroxy-21-acetoxy-D-h6mo-5-pregnen-20-on fremstilt 6a-fluor-21-ace-oxy-D-homo-4-pregnen-3,20-dion med smeltepunkt 178 - 180° C, som under de i eksempel lh beskrevne betingelser ble over-ført til 6a-fluor-113,21-dihydroxy-D-homo-4-pregnen-3,20-dion.

Eksempel 19

a) En ERlenmeyer-kolbe med 500 ml sterilisert vandig medium inneholdende 0,3 % gjærekstrakt, 0,5 % mairstøpvæske og 0,2 % stiv-else innstilt på pH 7, ble podet med en lyofilkultur av Flavobac-' terium dehydrogenans (ATCC 13930) og ristet i 48 timer ved 30 C

og 145 omdr./min. Med 250 ml av bakteriesuspensjonen ble et 20 liters fermenteringskar inneholdende 14,75 liter sterilisert nær-ingsløsning av samme sammensetning inokulert og omrørt i 24 timer ved 29° C med en gjennomledning på 1650 liter/time og 220 omdr./min.

Fra denne forfermentering ble 0,9 liter overført til et

20 liters fermenteringskar som inneholdt 15 liter sterilisert

medium av samme, .sammensetning. For hovedfermetneringen ble det anvendt de samme betingelser som det for forfermenteringen. Derved ble pH-verdien under hovedfermenteringen holdt mellom 6 og 7.

Etter 6 timer voksefase ble 3,0 g 3f' ; 21-diacetoxy-17Xj-methyl-D-homo-5-pregnen-20-on i 60 ml dimethylformamid tilsatt og fermentert.

Etter 32 timers kontakttid ble fermenteringsløsningen ekstrahert med 2 x 16 liter methylisobutylketon, den organiske fase ble inndampet, residuet ble tatt opp i methylenklorid, methylenkloridfasen ble filtrert over silicagel og inndampet i vakuum. Det ble erholdt 2,7 g 21-hydroxy-17a-methyl-D-homo-4-pregnen-3,20-dion som urent produkt.

b) Det således erholdte 21-hydroxy-17a-methyl-D-homo-4-pregnen-3,20-dion ble uten ytterligere rensing fermentering under

de i eksempel lh beskrevne betingelser med Curvularia lunata og det ble erholdt etter vanlig opparbeidelse 480 mg 113,21-dihydroxy-17a-methyl-D-homo-4-pregnen-3,20-dion med smeltepunkt 198 - 199,5° C.

Eksempel 20

a) Under de i eksempel lh beskrevne betingelser ble 3,0 g 6a-fluor-21-acetoxy~17a-methyl-D-homo-4-pregnen-3,20-dion fermentert

med Aspergillus occhraceus (ATTC 1008) . Etter endt fermentering ble fermenteringsblandingen ekstrahert med methyl-isobutylketon, methyl-isobutylketon-ekstraktet ble inndampet i vakuum og det ble erholdt 6a-fluor-113,21-dihydroxy-17a~methyl-D-homo-4-pregnen-3,20-dion som urent produkt b) Det således erholdte urene produkt ble under de i eksempel 2 beskrevne betingelser fermentert-med Bacillus lentus. Reaksjonsblandingen ble opparbeidet på vanlig måte, hvorved det ble erholdt 890 mg 6a-fluor-113,21-dihydroxy-17a-methyl-D-homo-l,4-pregnadien-3,20-dion. c) 750 mg 6a-fluor-113,21-dihydroxy-17a-methyl-D-homo-l,4-pregnadien-3,20-dion ble i 10 ml dimethylformamid tilsatt 2 ml acet-\. aldehyd og 0,2 g blydiacetat og ble omrørt i 60 minutter ved romtemperatur.

Deretter ble reaksjonsblandingen fortynnet med methylenklorid, methylenkloridfasen ble vasket med vann og inndampet til tørrhet.

d) Det således fremstilte urene produkt av 6a-fluor-113-hydroxy-21-acetoxy-173-methyl-D-homo-l,4-pregnådien-3+20-dion ble

oppbevart med 7 ml pyridin og 0,8 ml methansulfonsyreklorid i 3 timer ved 0° C. Deretter ble reaksjonsblandingen heldt over i isvann, ekstrahert med vann og vasket med methylenklorid hvoretter methylenkloridfasen ble inndampet i vakuum.

Det således erholdte residuum ble løst i 10 ml dimethylformamid, ble tilsatt 0,8 g lithiumklorid og hvoretter blandingen ble oppvarmet til 100° C i 90 minutter.

Deretter ble blandingen heldt over i isvann, ekstrahert

• \ (-5

med methylenklorid hvoretter methylenkloridfasen ble vasket med vann og inndampet i vakuum. Det således erholdte urene produkt ble renset ved kromatografi over en kiselgelsøyle, omkrystallisert fra methylenklorid-diisopropylether hvorved det ble erholdt 210 mg 6a-fluor-21-acetoxy-17a-methyl-D-homo-l, 4,9(11)-pregnatrien-3,20-dion-med smeltepunkt 186 - 188° C. e) 200 mg 6a-fluor-21-acetoxy-17a-methyl-D-homo-l,4,9(11)-pregnatrien-3,20-dion ble under de i eksempel 5b beskrevne betingelser omsatt med N-bromsuccinimid hvorved det ble erholdt 180 mg 6a-fluor-9a-brom-ll3-hydroxy-21-acetoxy-17a-methyl-D-homo-l,4-pregnadien-3 , 20-dion som urent produkt. f) Det således erholdte bromhydrin ble løst i 4ml tetrahydrofuran, ble tilsatt 1,2 ml tributyltinnhydrid og ble oppvarmet i 90

minutter ved 80° C. Deretter ble blandingen tilsatt 1 mg azodiiso-butyronitril og ble ytterligere oppvarmet i 30 minutter.

Reaksjonsblandingen ble deretter heldt over i isvann, ble ekstrahert med methylenklorid, hvoretter methylenkloridfasen ble vasket med ln svovelsyre,.natriumhydrogencarbonatløsning og,vann og inndampet i vakuum, hvorved det ble erholdt 110 mg 6a-fluor-113-hydroxy-21-ace-oxy-17a-methyl-D-homo-4-pregnen-3,20-dion.

Eksempel 21

a) 5,6 g 33-acetoxy-D-homo-5,17~pregnadien-20-on ble tilsatt ''350 ml tetrahydrofuran og 6,8 g kobber-(II)-bromid og ble oppvarmet under tilbakeløpskjøling i 4 timer. Deretter ble blandingen heldt over i isvann, ekstrahert med methylenklorid hvoretter methylenkloridfasen ble vasket, inndampet i vakuum hvorved det ble erholdt 21-brom-3 -acetoxy-D-homo-5,17-pregnadien-20-on som urent produkt, som etter omkrystallisering fra ether-hexan smeltet ved 155 - 157° C. b) Under de i eksempel ld beskrevne betingelser ble bromidet omsatt hvorved det ved vanlig opparbeidelse ble erholdt 33,21-di-acetoxy-D-homo-5,17-pregnadien-20-on med smeltepunkt 133 - 134° C). c) Det således erholdte diacetat ble under de i eksempel le beskrevne betingelser forsåpet hvorved det ble erholdt 33,21-dihydroxy-D-homo-5,17-pregnadien-20-on. d) Dihydroxy-forbindelsen ble under de i eksempel lf beskrev-K ne betingelser forestret hvorved det ble erholdt 33-hydroxy-21-acetoxy-D-homo-5,17-pregnadien-20-on med smeltepunkt 201 - 202° C.

pregnadien-20-on ble tilsatt 170 ml toluen, 80 ml cyclohexanon og 6,6 g aluminium-tert. butylat og ble oppvarmet under tilbakeløps-kjøling i 2 timer på en vannskiller. Deretter ble blandingen heldt over 1 isvann, surgjort med saltsyre og ekstrahert med methylenklorid. Methylenkloridfasen ble vasket med vann, tørket over natrium-aulfat, inndampet i vakuum hvoretter residuet ble renset ved kromatografi over en kiselgelsøyle. Det ble erholdt 21-acetoxy-D-homo-4,17-pregnadien-3,20-dion med smeltepunkt 159 - 160° C.

£)... En løsning av 3,0 g 21-acetoxy-D-homo-4,17-pregnadien-3,20-dion med løst i 300 ml benzen og 30 ml pyridin og ble tilsatt en løsning av 2,4 g osmiumtetroxyd i 60 ml benzen. Blandingen ble omørt i 2 timer ved romtemperatur og ble inndampet i vakuum, residuet ble løst i 400 ml dioxan, ble tilsatt 80 ml av en 40 %-ig natriumhydrogensulfidløsning hvoretter blandingen ble omrørt i ytterligere 30 minutter. Blandingen ble inndampet i vakuum til det halve volum, og residuet ble heldt over i isvann, ekstrahert med methylenklorid hvoretter methylenkloridfasen ble vasket med natrium-carbonatløsning og vann, tørket over natriumsulfat og inndampet i vakuum. Residuet ble renset over en kiselgelsøyle hvorved det ble erholdt 17a,17aa-dihydroxy-21-acetoxy-D-homo-4-pregnen-3,20-dion med smeltepunkt 230 - 232° C (fra aceton).

g) 17a,17aa-dihydroxy-21-acetoxy-D-homo-4-pregnen-3,20-dion ble under de i eksempel lh beskrevne betingelser fermentert med

Curvularia lunata hvoretter det etter vanlig opparbeidelse ble erholdt 11$,17a,17aa-21-tetrahydroxy-D-homo-4-pregnen-3,20-dion med smeltepunkt 261 - 26 2° C.

Eksempel 22

a) 3$,ll$-diacetoxy-androsta-3,5-dien-17-on ble i methylenklorid omsatt med ethylenglycol i' nærvær av orthomaursyremethyl-ester og p-toluensulfonsyre ved romtemperatur til 3,11 -acetoxy-17,17-ethylendioxy-androsta-3,5-dien med smeltepunkt 183 - 186° C.

Dette 17-ketal ble i.tetrahydrofuran-methanol redusert med natriumborhydrid til ll$-acetoxy-17,17-ethylendioxy-3$-hydroxy-androst-5-en med smeltepunkt 125 - 126° C.

Spaltning aV ketalet i vandig aceton med p-toluensulfonsyre ga ll$-acetoxy-3$-hydroxy-androst-5-en-17-on med smeltepunkt 193 - 195° C.

Dette 17-ketosteroid ble omsatt , med dimethylsulfoxonium-methylid i dimethylformamid til 21-nor-llB-acetoxy-17,20-epoxy-3B-hydroxy-pregn-5-en med smeltepunkt 155 - 156° C.

Epoxydet ble i alkohol og konsentrert ammoniakk omsatt i autoklav- til llB-acetoxy-17 -aminomethyl-3B,17 -dihydroxy-androst-5-en. -Med natriumnitrit i iseddik og vann ble det derfra erholdt D-homo-113-acetoxy-33-hydroxy-androst-5-en-17a-on med smeltepunkt 230 - 2 32° C.

Forsåpning av llB-acetatet i kokende methanolisk kalilut ga D-homo-3B,113-dihydroxy-androst-5-en-17a-on med smeltepunkt 234 - 236° C.

33,llB-dihydroxy-D-homo-androst-5-en-17a-on ble konden-sert med oxalsyrediethylester til 3$,llB-dihydroxy-17-ethoxalyl-D-homo-androst-5-en-17a~on.

Dette ble omsatt med methyljodid i aceton i nærvær av

kaliumcarbonat til 17-methylderivatet.

Etter spaltning av oxalylresten i methanolisk natrium-methylatløsning ble det erholdt 33,ll3-dihydroxy-17a-methyl-D-homo-androst-5-en-17a-on med smeltepunkt 209 - 211° C.

33/113-dihydroxy-17a-methyl-D-homo-5-androsten-17a-on ble i tetrahydrofuran omsatt med ethinylmagnesiumbromid og det ble erholdt 38,113,17aa-trihydroxy-17a-methyl-17aa-ethinyl-D-homo-5-andros ten, som etter behandling med kvikksølv-p-toluensulfonsyre-amid i kokende alkohol ga 33,113,17aa-trihydroxy-17a-methyl-D-homo-5-pregnen-20-on med smeltepunkt 212 - 214° C.

b) 1,7 g 33,113,17aa-trihydroxy-17a-methyl-D-homo-pregn~5-en-20-on ble i 10 ml methanol ; 'tilsatt 2,1 ml 10 %-ig methanolisk

kalsiumkloridløsning og 1 g avkjølt kalsiumoxyd. Deretter ble en løsning av 2,32 g jod og 600 mg kalsiumklorid i 6 ml methanol dråpevis tilsatt i løpet av 3o minutter under stadig omrøring. Blandingen ble omrørt ytterligere 10 minutter og ble heldt over i isvann og ekstrahert med methylenklorid. Ekstraktet ble vasket med fortynnet koksaltløsning, tørket og fordampet. Det ble erholdt 2,5 g 33,118,17aa-trihydroxy-21,21-dijod-17a-methyl-D-homo-pregn-5-en-20-on som viste seg å være enhetlig ved tynnskiktskromatografi, slik at ingen ytterligere rensning ble utført.

c) 2,5 g av det ovenfor beskrevne dijodid ble i 30 ml aceton kokt med 0,3 ml vann, 0,3 ml eddiksyre og 3 g kaliumacetat i 5 dager under tilbakeløpskjøling. Blandingen ble heldt over i vann og ekstrahert med methylenklorid. Etylenkloridløsningen b^le vasket med fortynnet koksaltløsning og tørket og inndampet.. Det ble erholdt 1,9 g tynnskiktsktomatograf isk enhetlige 38,118,17aa-tri-hydroxy-21-acetoxy-17a-methyl-D-homo-pregn-5-en-20-on. d) Dette ble på samme måte som beskrevet i eksempel lg omsatt til 21-acetoxy-118,17aa-dihydroxy-17a-methyll-D-homopregn-4-en-3,20-dion. Kromatografi av det urene produkt ga 118,17aa-di-hdyroxy-21-acetoxy-17a-methyl-D-homo-4-pregnen-3,20-dion med smeltepunkt 210 - 212° C (fra eddikester).

Eksempel 2 3

2 g 3$,113,17aa-trihydroxy-17a-methyl-D-homo-pregn-5-en-20-on ble i 20 ml cyclohexanon og 60 ml toluen oppvarmet til kokning, 10 ml av løsningsmidlet ble isolert fra. Til den til ca. 5° avkjøl-te blanding ble 2 g aluminiumtritertiær-butylat tilsatt. Deretter ble reakSjnsblandingen kokt i 1 time på vannavskiller. Etter av-kjøling ble blandingen heldt over i fortynnet vandig eddiksyre og ekstrahert med methylenklorid. Methylenkloridløshingen ble vasket med vann, tørket og inndampet. Ved høyvakuum ble de tungtflyktige deler destillert av ved en temperatur på 140° C. Residuet ble renset kromatografisk. Derved ble det erholdt 118,17aa-dihydroxy-17a-methyl-D-homo-pregn-4-en-3,20-dion med smeltepunkt 231 - 234- C.

-t Eksempel 24

a) 38,lla-dihydroxy-5-androsten-17-on ble omsatt med dimethylsulfoxniummethylid i dimethylformamid til 38,lla-dihydroxy-17,20-epoxy-21-nor-5-pregnen med smeltepunkt 190 - 193° C.

Det således erholdte spoxyd ble i autoklav omsatt med alkohol og konsentrert ammoniakk til 17-aminomethyl-38,Ila,17-trihydroxy-5-androsten som ved behandling med natriumnitrit i fortynnet eddiksyre ga 38>lla-dihydroxy-D-homo-5-androsten-17a-on med smeltepunkt 200 - 2101° C.

Denne D-homo-forbindelse ble i flytende ammoniakk omsatt med kaliumacetylid og det ble erholdt 38,lia,17a-trihydroxy-17a-ethinyl-D-homo-4-androsten med smeltepunkt 204 - 205° C.

Denne ethinyl-forbindelse ble forestret med acetanhydrid med pyridin ved romtemperatur og det ble erholdt 17a-hydroxy-33,11a-diacetoxy-17a-ethinyl-D--homo-5-androsten med smeltepunkt 208 -

211° C. (,

Den.således erholdte diacetoxyforbindelse ble i 2,4-lutidin omsatt med fosforoxyklorid ved 120° C i 20 timerhvorved det ble erholdt 38,lla-diacetoxy-17a-ethinyl-D-homo-5,17-androsta-dien som en farveløs olje.

Androstadienet omsettes med p-toluensulfonsyreamid-kvikk-sølv i vandig ehtanol til 3£,lla-diacetoxy-D-homo-5,17-pregnadien-20-on med smeltepunkt 216 - 217° C.

Det således erholdte diacetat omsettes med natriumcarbonat i methanol og det erholdes 3B-hydroxy-lla-acetoxy-D-homo-5,17-pregnadien-20-on med smeltepunkt 220 - 222° C, som etter Oppenauer-oxydasjon gir 11 -acetoxy-D-homo-4,17-pregnadien-3,20^dion med smeltepunkt 147 - 148° C.

Den således erholdte forbindelse omsettes i ether/pyridin med osmiumtetroxyd til 17a,17aa-dihydroxy-lla-acetoxy-D-homo-4-pregnen-3,20-dion (smeltepunkt 231 - 232° C), som ved omsetning med aceton i nærvær av perklorsyre danner lla-acetoxy-17a-17aa-isopro-lyidendioxy-D-homo-4-pregnen-3,20-dion med smeltepunkt 198 - 200°e.

Den således erholdte lla-acetoxy-forbindelse forsåpes i methanolisk. løsning med kaliumhydroxyd ved romtemperatur og det erholdes lla-hydroxy-17a,17aa-isopropylidendioxy-D-homo-4-pregnen-3,20-dion med smeltepounkt 252 - 258° C.

b) En løsning av 2,15 g lla-hydroxy-17a,17a-isopropyliden-•(. dioxy-D-homo-pregn-4-en-3,20-dion og 2,2 ml methansulfoklorid i 20

ml pyridin ble holdt ved> 0° C i 3 timer. Reaksjonsblandingen ble heldt over i isvann og ekstrahert med ethylacetat. Det organiske ekstrakt ble vasket med fortynnet saltsyre, vann, natriumcarbonat og igjen med vann, ble tørket over natriumsulfat og inndampet til tørrhet i vakuum. Residuet ble løst i 100 ml dimethylformamid, tilsatt 10 g lithiumklorid og oppvarmet til 100° C i 90 minutter. For opparbeidelse ble blandingen heldt over i 500 ml isvann og ekstrahert med methylenklorid. Ekstraktet ble vasket med fortynnet saltsyre, vann, natriumcarbonatløsning og vann, tørket over natriumsulfat og inndampet i vakuum. Residuet ble kromatografert på silicagel. De med ether-hexan (1:1) eluerte etter tynnskiktskromatografi enhetlige fraksjoner ble forenet og krystallisert fra aceton-hexan. Det ble erholdt rent 17a-17aa-isopropylidendioxy-D-homo-pregna-4,9(11)-dien-3,20-dion med smeltepunkt 150 - 151° C.

< v

cX Under de i eksempel 11b beskrevne betingelser ble 17a,17aa-isopropylidendioxy-D-homo-4,9(11)-pregnadien-3,20-dion omsatt med N-klorsuccinimid og perklorsyre hvorved dét ble erholdt 9a-klor-ll$-hydroxy-17a,17aa-isopropylidendioxy-D-homo-4-pregnen-3/20-dion.

Eksempel 25

a) 800 mg 11$,21-dihydroxy-l,4-pregnadien-3,20-dion ble løst i 8 ml dimethylformamid, ble tilsatt 1,6 ml acetanhydrid og 112 mg

blydiacetat og ble omrørt ved romtemperatur i 2 timer. Deretter ble produktet utfelt i isvann, fraskilt, vasket med vann og tørket. Etter omkrystallisering fra aceton-hexan ble det erholdt 820 mg ll$-hydroxy~21-acetoxy-D-homo-l,4-pregnadien-3,20-dion med smeltepunkt 192 - 193° C.

b) 760 mg 21-acetoxy-ll$-hydroxy-D-homo-l, 4)r-pregnadien-3, 20-dion ble løst i 4 ml dimethylformamid og 0,76 ml pyridin og 0,38 ml

methansulfonsyreklorid ble dråpevis tilsatt. Deretter ble blandingen omrørt i 1 \ time ved 80° C. Blandingen ble deretter avkjølt til 20° C, ble heldt over i isvann og det utfelte produkt ble fraskilt, vasket med vann og tørket i vakuum. Det ble erholdt etter . omkrystallisasjon fra aceton-hexan 650 mg 21-acetoxy-D-homo-1,4,9(11)-pregna-trien-3,20-dion med smeltepunkt 135 - 136° C.

c) 374 mg 21-acetoxy-D-homo-pregna-l,4,9(11)-trien-3,20-dion ,t ble løst i 9 ml tetrahydrofuran, 535 mg N-bromsuccinimid ble tilsatt, blandingen ble avkjølt til 0 - 5° C og 3,3 ml lN-perklorsyre ble dråpevis tilsatt. Blandingen ble omrørt i 30 minutter ved 20° C, og ble deretter heldt over i iskold natriumsulfidløsnihg og det utfelte produkt ble frasKilt og løst i methylenklorid. Methylen-kloridløsningen ble vasket med vann og inndampet i vakuum. Det ble erholdt 520 mg urent 21-acetoxy-9a-brom-ll$-hydroxy-D-homo-l,4-pregnadien-3,20-dion. d) 520 mg av det urent bromhydrin ble i 25 ml ethanol oppvarmet med 1,25 g kaliumacetat i 1 time ved tilbakeløpskjøling.

Reaksjonsblandingen ble heldt over i isvann, det utfelte produkt ble fraskilt, vasket med vann og tørket i vakuum. Etter omkrystallisering fra cyclohexan ble det erholdt 320 mg 21-acetoxy-9$-11$-epoxy-D-homo-l,4-pregna-dien-3,20-dion med smeltepunkt 152 - 153° C. *x

Claims (15)

1. Fremgangsmåte ved fremstilling av D-homo-steroider av generell formel I ■■.....

hvor bindingen - - - - betegner en enkeltbinding eller en dobbeltbinding,

hvori

1*2 betegner et hydrogenatom eller en methylgruppe, R3 betegner en hydroxylgruppe eller en acyloxygruppe, R 4 betegner en methylgruppe, en hydroxylgruppe eller en acyloxy gruppe , R^ betegner et hydrogenatom eller en lavere alkylgruppe og Rg betegner en lavere alkylgruppe eller en fenylgruppe, og hvori R-^ betegner et hydrogenatom, et fluoratom, et. kloratom eller en fri eller forestret hydroxylgruppe, X' betegner et hydrogenatom, et fluoratom eller en methylgruppe og Y og "Z sammen betegner en carbon-carbonbinding eller en cxydo- gruppe eller hvor Y betegner et hydrogenatom og Z en a-stående hydroxyl- eller lavere alkanoyloxygruppe eller, såfremt og R2 betegner en substituent forskjellig fra hydrogen, også en hydrogenatom, karakterisert ved at på i og for seg kjent måtea) en forbindelse av generell formel II

hvor X, 'Y, Z, -A-B C og R^ har dé tidligere angitte betydninger, og hvor Ry betegner et hydrogenatom eller en lavere acylrest, eventuelt etter forsåpning av 3-acyloxygruppen oxyderes til det tilsvarende 3-keto-A^-steroid, ellerb) det fra en forbindelse av generell formel III

hvor X, Y, Z, -A-B ^ og R-j _ har de tidligere angitte betydninger og hvor V betegner en hydroxylgruppe eller et bromatom, avspaltes HV, ellerc) en forbindelse av den generell formel IV

hvor X, -A-B og har de tidligere angitte betydninger, hydroxyleres med 11-hydroxylerende mikroorganismer i lia- eller 118-stilling, eventuelt at 11-hydroxygruppen avspaltes, at de på det dannede A^-steroid av generell formel I adderes underklor eller underbromsyre og at det dannede llB-hydroxy-9a-halogensteroid ved behandling med baser overføres til 9,11-epoxysteroidet av generell formel I, eller d) det for fremstilling av D-homosteroider av generell formel I hvor R^ og R^ betegner en hydroxylgruppe, ved A 17-dobbeltbindin- gen av en forbindelse av generell formel V

hvor X, Y, Z og R-^ har de tidligere angitte betydninger, adderes hydroxylgrupper, ellere) det i en forbindelse av generell formel VI

hvor - - - -, X, Y, Z og -A-B C. har de' tidligere angitte betydninger og hvor W betegner en alkylsulfonyloxygruppe, en arylsulfonyl-oxygruppe, et bromatom eller et jodatom,. utbytter substituenten W mot et hydrogenatom, et fluoratom, et kloratom, en acyloxygruppe eller mot en fosfatrest, eller f) det for fremstilling av 17-methyl-D-homo-steroider av generell formel I, forbindelser av generell formel VII

hvor X, Y, Z og har de tidligere angitte betydninger, og hvor U betegner en alkylenrest eller en fenylenrest, omsettes med et methylmagnesiumhalogenid eller lithiumkobberdimethyl, eventuelt at 20-oxogruppen ved omsetning med acylklorider eller acylbromider overføres i 20-enolacylatet og denne epoxyderes med persyrer, og at det erholdte reaksjonsprodukt hydrolyseres véd syrebehandling, og om ønsket at det ifølge fremgangsmåtealternativ a-f erholdte D-homo-A^-steroid av generell formel I dehydreres i 1,2-stilling og/eller foreliggende estergrupper eller ketalgrupper avspaltes hydrolytisk og/eller foreliggende hydroxylgrupper foresires eller kondenseres med carbonylforbindelser av generell formel RgRgCO hvor Rg og Rg har de tidligere angitte betydninger.

2. Fremgangsmåte ifølge krav 1 ved fremstilling av 21-acetoxy-17a-methyl-D-homo-4-pregnen~ 3,20-dion.

3. Fremgangsmåte ifølge krav 1 ved fremstilling av 21-acetoxy-17a-methyl-D-homo-l,4,9(11)-pregnatrien-3,20-dion.

4. • Fremgangsmåte ifølge krav 1 ved fremstilling av 9 3,118-epoxy-21-acetoxy-17a-methyl-D-homo-l,4-pregnadien-3,20-dion.

5. Fremgangsmåte ifølge krav 1 ved fremstilling av 6a-fluor-21-acetoxy-17a-methyl-D-homo-4-pregnen-3,20-dion.

6. Fremgangsmåte ifølge krav 1 ved fremstilling av 6a-fluor-21-trimethylacetoxy-17ot-methyl-D-homo-l, 4,9 (11) -pregnatrien-3, 20-dion.

7. Fremgangsmåte ifølge krav 1 ved f r Divts tilling av 6a~ fluor-21-acetoxy-17a-methyl-D-homo-l,4,9(11)-pregnatrien-3,20-dion.

8. Fremgangsmåte ifølge krav 1 ved fremstilling av 6a-fluor-21-aceroxy-17a-methyl-D-homo-l,4,9(11)-pregnatrien-3,20-dion.

9. Fremgangsmåte ifølge krav 1 ved fremstilling av 17a,17aa-dihydroxy-21-acetqxy-D-homo-4-pregnen-3,20-dion.

10. Fremgangsmåte ifølge krav 1 ved" fremstilling av 17a,17aa-dihydroxy-lla-acetoxy-D-homo-4-pregnen-3,20-dion.

11. Fremgangsmåte ifølge krav 1 ved fremstilling av lia-acetoxy-17a,17aa-isopropylidendioxy-D-homo-4-pregnen-3,20-dion.

12. Fremgangsmåte ifølge krav 1 ved fremstilling av 11a-hydroxy-17a-17aa-isop37opylidendioxy-D-homo-4-pregnen-3, 20-dion.

13. Fremgangsmåte ifølge krav 1 ved fremstilling av 17a,17aa-isopropylidendioxy-D-homo-4,9(11)-pregnadien-3,20-dion.

14. Fremgangsmåte ifølge krav 1 ved fremstilling av 21-acetoxy-D-homo-1,4,9(11)-pregnatrien-3,20-dion.

15. Fremgangsmåte ifølge krav 1 ved fremstilling av 21-acetoxy-98,ll$-epoxy-D-homo-l,4-pregnadien-3,2 0-dion.