NO319037B1 - Syntetiske polysakkarider, fremgangsmater for a fremstille dem og farmasoytiske blandinger inneholdende nevnte polysakkarider - Google Patents

Syntetiske polysakkarider, fremgangsmater for a fremstille dem og farmasoytiske blandinger inneholdende nevnte polysakkarider Download PDF

Info

Publication number
NO319037B1
NO319037B1 NO19985831A NO985831A NO319037B1 NO 319037 B1 NO319037 B1 NO 319037B1 NO 19985831 A NO19985831 A NO 19985831A NO 985831 A NO985831 A NO 985831A NO 319037 B1 NO319037 B1 NO 319037B1
Authority
NO
Norway
Prior art keywords
methyl
sulfo
acid
formula
tri
Prior art date
Application number
NO19985831A
Other languages
English (en)
Other versions
NO985831L (no
NO985831D0 (no
Inventor
Maurice Petitou
Jean-Marc Herbert
Philippe Duchaussoy
Guy Jauran
Constant Van Boeckel
Original Assignee
Sanofi Aventis
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Sanofi Aventis filed Critical Sanofi Aventis
Publication of NO985831D0 publication Critical patent/NO985831D0/no
Publication of NO985831L publication Critical patent/NO985831L/no
Publication of NO319037B1 publication Critical patent/NO319037B1/no

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
    • C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
    • C08B37/006—Heteroglycans, i.e. polysaccharides having more than one sugar residue in the main chain in either alternating or less regular sequence; Gellans; Succinoglycans; Arabinogalactans; Tragacanth or gum tragacanth or traganth from Astragalus; Gum Karaya from Sterculia urens; Gum Ghatti from Anogeissus latifolia; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/60—Salicylic acid; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/04—Antihaemorrhagics; Procoagulants; Haemostatic agents; Antifibrinolytic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
    • C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Materials Engineering (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Transplantation (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Cephalosporin Compounds (AREA)

Abstract

Oppfinnelsen angår et syntetisk polysakkarid inneholdende fra 8 til 24 monosakkaridenheter dannet ved en sekvens av disakkarider dannet fra en uronsyre og fra en heksose, hvor alle polysakkaridets hydroksylgrupper er foretret med en (C-C)-alkyl gruppe eller forestret i form av en sulfogruppe, idet hvert disakkarid er minst monoforetret; samt dets salter. Oppfinnelsen angår videre et salt med formelen. hvor bølgelinjen indikerer enten en binding nedenfor eller ovenfor planet i pyranoseringen; Ri, R, Ru og R16 er et (d-C^-alkyl; R2, R3, R4, R5, R7, Rs, R9, Rio, R12, R, Ri4, R15 og R17 er et (d-C6)-alkyl eller en S0-gruppe; m, n og p er slik at summen m + n + p er større enn eller lik 4 og mindre enn eller lik 12, idet én eller to av de tre kan være null; en fremgangsmåte for fremstilling derav, farmasøytiske preparater som inneholder polysakkaridene, samt anvendelse av polysakkaridene.

Description

Foreliggende oppfinnelse angår nye syntetiske polysakkarider som har de farmakologiske aktiviteter som heparin, men som utøves selektivt.
Heparin tilhører glykosaminoglykan (GAG) -familen, som er naturlige heterogene sulfaterte polysakkarider.
Heparinpreparatene er blandinger av kjeder omfattende flere monosakkaridenheter, fra 10 til 100 og mer. Til denne heterogenitet i størrelse tilkommer en heterogenitet i struktur, på nivå med naturen av de vesentlige monosakkarider, men likeledes ved nivået for de substituenter som de bærer (L. Rodén i: The Biochemistry of Glycoproteins and Glycosaminoglycans, redigert av Lennarz W.J., Plenum Press, 1980, New York og London, 267-371).
Hver naturlig GAG-familie har generelt et område av farmakologiske aktiviteter. Alle kombineres i preparatene som kan oppnås med utgangspunkt i natur-produkter. Således har for eksempel heparinene og de sulfaterte heparaner en antitrombotisk aktivitet som er knyttet til den samtidige virkning på flere koaguleringsfaktorer. De utøver likeledes en virkning på flere vekstfaktorer, hvor den mest velkjente er den fundamentale fibroblast vekstfaktor (bFGF = basic fibroblast growth faktor).
Denne virkning manifesteres ved en virkning på prolrferasjonen av de glatte muskelceller og på angiogenese. Heparin utøver i tillegg virkninger på auto-immunitet, betennelse og dannelse av tumormetastaser.
Heparin katalyserer spesielt hemningen av to enzymer som medvirker i blodkoaguleringskaskaden, nemlig faktor Xa og faktor Ila (eller trombin). Heparinpreparatene med lav molekylvekt (LMWH = low molecular weight heparin) inneholder kjeder dannet av 4 til 30 monosakkarider og har den egenskap at de virker mer selektivt på faktor Xa enn på trombin.
Visse syntetiske oligosakkarider, spesielt de beskrevet i EP 84999, har den egenskap at de, via antitrombin III, selektivt inhiberer faktor Xa uten noen som helst aktivitet på trombin.
I US-patent 5 378 829 beskrives sulfaterte glykosaminoglykanoidderivater av heparin- eller heparansulfat-type som har en virkning som er antitrombotisk og hemmende på proliferasjonen av glatte muskelceller. I dette dokument beskrives imidlertid bare oligosakkarider som har maksimalt 7 monosakkairdenheter.
I løpet av tidligere år var tendensen innenfor feltet GAGS å undersøke spesielt oligosakkarider med lavest mulig molekylvekt, men det har deretter blitt observert at mange av de ovenfor nevnte biologiske aktiviteter har sitt utspring i fragmenter som har minst 8 sakkaridenheter. Den hemmende aktivitet for trombin vil for eksempel gjøre det nødvendig med fragmenter inneholdende minst mellom 14 og 20 sakkaridenheter, mens det for aktivering av bFGF vil være nødvendig med minst 12 sakkaridenheter (M. Maccarana et ai, J. Biol. Chem., 1993, 268, 23998-23905; J.E. Turnbull era/., J. Biol. Chem., 1992, 267,10337-10341).
En syntese av polysakkarider med denne størrelse er svært vanskelig og er faktisk aldri blitt utført.
Med det formål å oppdage aktiviteten for produkter med langstrakt
størrelse, er det blitt foreslått å forbinde to oligosakkarider med liten størrelse med en andel som ikke innvirker på den biologiske aktivitet. EP 649854 beskriver slike derivater som har antitrombotisk aktivitet.På samme måte beskriver WO 95 05182 konjugater som er aktive ved regulering av bFGF.
Disse produkter har i virkeligheten en selektiv aktivitet på de forskjellige koaguleringsfaktorer og hemmende egenskaper for vekstfaktorer, uttrykt ved en hemning av celleproliferasjon.
Det er nå blitt funnet at fragmenter av GAG'er (glykosaminoglykaner) inneholdende 8 eller flere sakkaridenheter og som kan syntetiseres relativt enkelt, har biologiske aktiviteter som ikke bare er selektive men også kvantitativt høye.
Mer spesielt er det blitt funnet at det er mulig kvantitativt å modulere aktiviteten for de nevnte polysakkarider i henhold til lengden av kjedene og fordelingen av de funksjonelle substituenter.
Således er det for eksempel overraskende blitt funnet at sulfaterte og alkylerte dekasakkarider kan være virksomme antitrombotiske forbindelser eller selektive inhibitorer for bFGF i henhold til anordningen av alkylgruppene og av sulfatgruppene i dekasakkaridbindingen og at det likeledes er mulig å oppnå selektive inhibitorer for faktor Xa, for eksempel med et tetradekasakkarid eller produkter som har en aktivitet av heparintype, nemlig en aktivitet like mye på faktor Xa som på trombin, for eksempel med et heksadekasakkarid.
Mer generelt er det blitt funnet at ved produksjon av disakkaridsekvenser dannet av en uronsyre og av en heksose, slik at det dannes polysakkarider med 8 til 24 monosakkaridenheter hvor hydroksylgruppene alle er substituert med alkylgrupper eller med sulfatgrupper, er det mulig med presisjon å modulere aktivitete-ne av GAG-type for å oppnå meget aktive og selektive produkter.
Således, i henhold til et av dens aspekter, angår foreliggende oppfinnelse et nytt syntetisk polysakkarid inneholdende fra 8 til 24 monosakkaridenheter dannet ved en sekvens av disakkarider dannet fra en uronsyre og fra en heksose, hvor nevnte polysakkarid er karakterisert ved at alle dets hydroksylgrupper er foretret med en (Ci-Ce)-alkylgruppe eller forestret i form av en sulfogruppe, idet hvert disakkarid er minst monoforetret; samt dets salter.
Fortrinnsvis angår oppfinnelsen et polysakkarid så som definert ovenfor, karakterisert ved at alle dets hydroksylgrupper er foretret med en metylgruppe eller forestret i form av en sulfogruppe, idet hvert disakkarid er minst monoforetret; og dets salter, spesielt farmasøytisk godtagbare salter.
Fordelaktige produkter er alkylerte, fortrinnsvis metylerte, på hydroksylene i stilling 2 og 3 i uronsyren, idet nevnte uronsyre fortrinnsvis er glukuronsyre eller iduronsyre og er trisulfatert på heksosen, hvor nevnte heksose fortrinnsvis er glukose. En annen gruppe av foretrukkede produkter blir dannet fra polysakkarider som er alkylerte, fortrinnsvis metylerte, på hydroksylene i stilling 3 på uronsyren, idet nevnte syre fortrinnsvis er glukuronsyre eller iduronsyre og er alkylert, fortrinnsvis metylert, på hydroksylet i stilling 3 på glukosen.
Salt ifølge krav 1, samt den tilsvarende syre ifølge foreliggende oppfinnelse dannes således fra et anion og et kation fortrinnsvis fra regulare sekvenser av gjentatte disakkarider som i sin tur er dannet av glukuronsyre og av glukose eller av iduronsyre og av glukose, kjennetegnet ved at anionet har formelen:
hvor
bølgelinjen indikerer enten en binding nedenfor eller ovenfor planet i
pyranoseringen;
Ri, Re, Rn og R16 er et (d-C6)-alkyl;
R2, R3, FU, R5, R7, Re, R9. R10. R12. R13. Ru, R15 og R17 er et (CrC6)-alkyl
eiler en S03" gruppe;
m, n og p er slik at summen m + n + p er større enn eller lik 4 og mindre enn eller lik 12, idet én eller to av de tre kan være null,
idet kationet er et farmasøytisk godtagbart monovalent kation.
Det skal generelt bemerkes at i foreliggende oppfinnelse indikerer en bølge-linje en binding som enten er nedenfor eller ovenfor pyranoseringens plan.
I den generelle formel (I) og i foreliggende beskrivelse representerer strukturene (a) eller (b) nedenfor et glukose-skjelett i <4>Ci konformasjon. Strukturene (c) eller (d) nedenfor representerer et uronsyre-skjelett som enten er L-iduronsyre (representert her i sin <1>C4 konformasjon) eller D-glukuronsyre (representert her i sin <4>Ci konformasjon).
På disse strukturer (a), (b), (c) og (d), har Rx-substituentene de definisjoner som er tillagt Ri til R-17 i (I).
Strukturene (a) og (b) er således den samme representasjon av et glukose-skjelett i <4>Ci konformasjonen.
Strukturene (c) og (d) representerer et uronsyreskjelett som enten er av L-iduronsyre (representert her i sin <1>C4 konformasjon) eller av D-glukuronsyre (representert her i sin 4Ci konformasjon).
Når strukturen er L-iduronsyre, er (c) og (d) de følgende konformer:
Når strukturen er D-glukuronsyre, er (c) og (d) de følgende konformer:
I foreliggende beskrivelse er det blitt valgt å anføre <1>C4 konformasjonene for L-iduronsyre, 4Ci konformasjonene for D-glukuronsyre, men det er velkjent at konformasjonen i løsning av monosakkaridenhetene er variabel.
Disakkaridene DB1, DB2 og DB3 representerer identiske eller forskjellige disakkarider.
Foretrukne forbindelser ifølge oppfinnelsen er de med formel (I) hvor n og p er lik null og m er 4 til 10, og deres salter, spesielt farmasøytisk godtagbare salter.
Like fordelaktige er forbindelsene med formel (I) hvor n og p er lik null, m er 4 til 10; minst én av substituentene R12, R13, R14 og R15 er en sulfatgruppe; Ri, Rie og R17 er som definert for (I), så vel som deres salter, spesielt farmasøytisk godtagbare salter.
Like fordelaktige er forbindelsene med formel (I) hvor n og p er lik null, m er 4 til 10; minst to av substituentene R12, R13. R14 og R15 er en sulfatgruppe; Ri, Ri6 og R17 er som definert for (I), så vel som deres salter, spesielt farmasøytisk godtagbare salter.
Like fordelaktige er forbindelsene med formel (I) hvor n og p er lik null, m er 4 til 10; minst tre av substituentene R12, Ri3, R14 og R15 er en sulfatgruppe; Ri, R16 og R17 er som definert for (I), så vel som deres salter, spesielt farmasøytisk godtagbare salter.
Like fordelaktige er forbindelsene med formel (I) hvor n og p er lik null, m er 4 til 10; gruppene R12, R13, R14 og R15 representerer alle en sulfatgruppe; Ri, Ri6 og R17 er som definert for (I), og deres salter, spesielt farmasøytisk godtagbare salter.
Andre fordelaktige forbindelser er saltene dannet fra et anion og fra et kation, hvor anionet tilsvarer formelen (1,1):
hvor m er 4 til 10; R-i, R-is, Rie og R17 er som definert for (I), hver uronsyre er enten en iduron- eller glukuronsyre og kationet er et farmasøytisk godtagbart monovalent kation, så vel som deres tilsvarende syrer.
Saltene dannet fra et anion og fra et kation hvor anionet tilsvarer formelen 0,2):
hvor m er 4 til 10; Ri, R15, Ri6 og R17 er som definert for (I), hver uronsyre er enten en iduron- eller glukuronsyre og hvor kationet er et farmasøytisk godtagbart monovalent kation, så vel som deres korresponderende syrer, er like fordelaktige.
I formlene (I), (1,1), (l,2) ovenforer de foretrende alkylgrupper fortrinnsvis metylgrupper.
Saltene dannet fra et anion og fra et kation, hvor anionet har formelen (1,3): hvor m er 2 eller 3, Ri, R12, R13, Ru, R15, R16 og R17 er som definert for (I), hver uronsyre er enten en iduron- eller glukuronsyre og hvor kationet er et farmasøytisk godtagbart monovaient kation, så vel som deres tilsvarende syrer, er spesielt fordelaktige.
Blant disse forbindelser (1,3), er de meget spesielt foretrukket hvor Ri er metyl, R13 i stilling 3 i glukosen er metyl, R12 i stilling 2 og Ru i stilling 6 i glukosen er S03' og Rie i stilling 3 i iduron- eller glukuronenheten er metyl, og m er lik 2 eller 3.
De foretrukne salter ifølge foreliggende oppfinnelse er de hvor kationet er valgt fra kationer av alkalimetallene og mest foretrukket også de hvor kationet er Na<+> eller K<+>.
De følgende polysakkarider er spesielt foretrukket:
1) Metyl-(1-4)-0-(2,3-di-0-metyl-4-0-sulfo-a-L-idopyranosyluronsyre)-[(1 -4)-0-(2,3,6-tri-0-sulfo-a-D-glukopyranosyl)-(1-4)-0-(2,3-di-0-metyl-a-L-idopyra-nosyluronsyre)]9-2,3,6-tri-0-sulfo-a-D-glukopyranosid, natriumsalt, 2) metyl-(1 -4)-0-(2,3-di-0-metyl-4-0-sulfo-a-L-idopyranosyluronsyre)-[(1 -4)-0-(2,3,6-tir-0-sulfo-a-D-glukopyranosyl)-(1-4)-0-(2,3-di-0-metyl-a-L-idopyra-nosyluronsyre)]4-2,3,6-tri-0-sulfo-a-D-glukopyranosid, natriumsalt, 3) metyl-(1-4)-0-(2,3-di-0-metyl-4-0-sulfo-a-L-idopyranosyluronsyre)-[(1-4)-0-(2,3,6-tir-0-sulfo-a-D-glukopyranosyl)-(1-4)-0-(2,3-di-0-metyl-a-L-idopyra-nosyluronsyre)]5-2,3,6-tri-0-sulfo-a-D-glukopyranosid, natriumsalt, 4) metyl-(1-4)-0-(2,3-di-0-metyl-4-0-sulfo-a-L-idopyranosyluronsyre)-[(1-4)-0-(2,3,6-tri-0-sulfo-a-D-glukopyranosylH1-4)-0-{2,3-di-0-metyl-a-L-idopyra-nosyluronsyre)[6-2,3,6-tri-0-sulfo-a-D-glukopyranosidt natriumsalt, 5) metyl-(1-4)-0-(2,3-di-0-metyl-4-0-sulfo-a-L-idopyranosyluronsyre)-[(1-4)-0-(2,3t6-tir-0-sulfo-a-D-glukopyranosyl)-(1-4)-0-(2,3-di-0-metyl-a-L-idopyra-nosyluronsyre)]7-2,3,6-tri-0-sulfo-a-D-glukopyranosid, natriumsalt, 6) metyl-(1-4)-0-(2,3-di-0-metyl-4-0-sulfo-a-L-idopyranosyluronsyre)-[(1-4)-0-(2,3,6-tri-0-sulfo-a-D-glukopyranosyl)-(1-4)-0-(2,3-di-0-metyl-a-L-idopyra-nosyluronsyre)]8-2,3,6-tri-0-sulfo-a-D-glukopyranosid, natriumsalt, 7) metyl-(1-4)-0-(2,3-di-0-metyl-4-0-sulfo-p-D-glukopyranosyluronsyre)-[(1-4)-0-(2,3,6-tri-0-sulfo-a-D-glukopyranosyl)-{1-4)-0-(2,3-di-0-metyl-p-D-gluko-pyranosyluronsyre)]4-2,3,6-tri-0-sulfo-a-D-glukopyranosid, natriumsalt, 8) metyl-(1-4)-0-(2,3-di-0-metyl-4-0-sulfo-p-D-glukopyranosyluronsyre)-[(1-4)-0-(2l3,6-tri-0-sulfo-a-D-glukopyranosyl)-(1-4)-0-(2,3-di-0-metyl-p-D-gluko-pyranosyluronsyre)]3-2,3,6-tri-0-sulfo-a-D-glukopyranosid, natriumsalt, 9) metyl-(1-4)-0-(3-0-metyl-2,4-di-0-sulfo-a-L-idopyranosyluronsyre)-[(1-4)-0-(3-0-metyl-2,6-di-0-sulfo-a-D-glukopyranosyl)-(1-4)-0-(3-0-metyl-2-0-sulfo-a-L-idopyranosyluronsyre)]4-3-0-metyl-2,6-di-0-sulfo-a-D-glukopyranosid, natriumsalt, 10) metyl-(1 -4)-0-(3-0-metyl-2,4-di-0-sulfo-a-L-idopyranosyluronsyre)-[(1 -4)-0-(3-O-metyl-2,6-di-O-sulfo-a-D-glukopyranosyl)-(1-4)-O-(3-0-metyl-2-0-sulfo-a-L-idopyranosyluronsyre)]3-3-0-metyl-2,6-di-0-sulfo-a-D-glukopyranosid, natriumsalt, 11) metyl-(1-4)-0-(3-0-metyl-2,4-di-0-sulfo-a-L-idopyranosyluronsyre)-[(1-4)-0-(3-0-metyl-2,6-di-0-sulfo-a-D-glukopyranosyl)-(1-4)-0-{3-0-metyl-2-0-sulfo-a-L-idopyranosyluronsyre)]5-3-0-metyl-2,6-di-0-sulfo-a-D-glukopyranosid, natriumsalt, 12) metyl-(1 -4)-0-(3-0-metyl-2,4-di-0-sulfo-p-D-glukopyranosyfuronsyre)-[(1 -4)-0-(3-0-metyl-2,6-di-0-sulfo-a-D-glukopyranosyl)-(1-4)-0-(3-0-metyl-2-0-sulfo-p-D-glukopyranosyluronsyre)]4-3-0-metyl-2,6-di-0-sulfo-a-D-glukopyranosid, natriumsalt, 13) metyl-{1 -4)-0-(3-0-met<y>l-2,4-di-0-sulfo-a-L-idopyranosyluronsyre)-[(1-4)-0-(3-OnTietyl-2,6<li-0-sulfcHa-D-glukopyranosyl)-(1-4)-0-(3-0-metyl-2-0-sulfo-a-L-idopyranosyluronsyre)]2-(1-4)-0-(2,3,6-tri-0-sulfo-a-D-glukopyra-nosyl)-{ 1 -4)-0-{3-0-metyl-2-0-sulfo-a-L-idopyranosylu ronsyre)-3-0-metyl-2,6-di-O-sulfo-a-D-glukopyranosid, natriumsalt, 14) metyl-(1-4)-0-(3-0-metyl-2,4-di-0-sulfo-a-L-idopyranosyluronsyre)-[(1-4)-0-(3-0-metyl-2,6-di-0-sulfo-a-D-glukopyranosyl)-(1-4)-0-(3-0-metyl-2-0-sulfo-a-L-idopyranosyluronsyre)]3-(1-4)-0-(2,3,6-tri-0-sulfo-a-D-glukopyra-nosylH 1 -4)-0-<3-0-metyl-2-0-sulfo-a-L-idopyranosylu ronsyre)-3-0-metyl-2,6-di-O-sulfo-a-D-glukopyranosid, natriumsalt. Foreliggende oppfinnelse angår likeledes en fremgangsmåte for fremstilling av forbindelsene med formel (I) karakterisert ved at (a) et glykosidisk forbindelses-donor-rrtonosakkarid kobles til et glykosidisk forbindelses-akseptor-monosakkarid i henhold til de klassiske metoder i sukkerkjemien for, etter de kjemiske modifikasjoner velkjente av fagfolk på området, å oppnå et mellomprodukt-sakkarid-synton av fullstendig beskyttet disakkarid-type med formel (A): hvor de identiske eller forskjellige substituenter Ti, T2, T3, T4, T5, Te, T7 og Z er valgt fra de beskyttende grupper anvendt i sukkerkjemien som permanente, semi-permanente eller temporært beskyttende grupper, (b) disakkaridet med formel (A) ovenfor blir modifisert kjemisk slik at det oppnås et mellomprodukt-sakkarid-synton av glykosidisk forbindelses-donor-disakkarid-type med formel (B):
hvor T2 til T7 og Z er som definert ovenfor for (A), og X er en aktiverende gruppe i det anomere karbon, så som et imidat, et tioglykosid, et pentenylglykosid, et xantat, etfosfitt, et halogenid eller hvilken som helst annen
gruppe velkjent for aktivering av det anomere karbon, deretter
(c) modifiseres disakkaridet med formel (A) ovenfor kjemisk slik at det oppnås et glykosidisk forbindelses-akseptor-sakkarid-synton-mellomprodukt med formel (C): hvor T-i til T7 er som definert for (A), ved selektiv eliminering av den beskyttende gruppe Z i henhold til metoder velkjent for fagfolk på området, deretter (d) kobles et glykosidisk forbindelses-donor-disakkarid med formel (B) oppnådd ovenfor og et glykosidisk forbindelses-akseptor-disakkarid med formel (C) oppnådd ovenfor, slik at det oppnås et fullstendig beskyttet tetrasakkarid med formel (D):
hvor Ti til T7 og Z er som definert ovenfor for (A) og T8, Tg, T10l Tu, T12 og
T13 er så som definert for T2 til Tz.deretter
(e) modifiseres tetrasakkaridet med formel (D) kjemisk slik at det oppnås et mellomprodukt-sakkarid-synton av glykosidisk forbindelses-donor-tetrasakkarid- type med formel (E):
hvor X har den samme definisjon som for (B) og T2 til T13 er som definert for
(D), deretter,
(f) avbeskyttes tetrasakkaridet med formel (D) selektivt slik at det oppnås et glykosidisk forbindelses-akseptor-tetrasakkarid med formel (F):
hvor Ti til T13 er så som definert ovenfor for (D), deretter
(g) kobles det glykosidiske forbindelses-akseptor-tetrasakkarid med formel (F)
og et glykosidisk forbindelses-donor-disakkarid med formel (B) så som de
oppnådd ovenfor, for å danne et mellomprodukt-sakkarid-synton av fullstendig beskyttet heksasakkarid-type med formel (G):
hvor Ti til T13 er som definert ovenfor for (D) og Tu til T19 er som definert for T2 til T7 for (B), eller så kobles det glykosidiske forbindelses-akseptor-tetrasakkarid med formel (F) og et glykosidisk forbindelses-donor-tetrasakkarid med formel(E) slik at det oppnås et fullstendig beskyttet oktasakkarid med formel (H):
hvor Ti til T19 og Z er som definert tidligere og T20 til T2s er som definert for
T2 til T7 for (B), deretter,
(h) modifiseres heksasakkaridet med formel (G) eller oktasakkaridet med formel (H) oppnådd ovenfor kjemisk slik at det oppnås et mellomprodukt-sakkarid-synton av glykosidisk forbindelses-akseptor-heksasakkarid-type med formel (G) hvor Z er hydrogen, eller ellers et glykosidisk forbindelses-akseptor-oktasakkarid med formel (H) hvor Z er hydrogen,
(i) de ovenfor angitte avbeskyttelses- og koblingstrinn gjentas inntil det fullstendig beskyttede oligosakkarid som har den ønskede struktur blir oppnådd, idet glykosyl-donor- og glykosyl-akseptor-mellomprodukt-sakkarid-syntonene velges som en funksjon av den endelige struktur, slik at det således oppnås den beskyttede forløper for det ønskede endelige polysakkarid med formel (I), hvor naturen av de beskyttende grupper Ti bestemmer stillingen av alkyl- og sulfatgruppene på sluttproduktet (I), og
(j) avbeskyttelsen av alkoholfunksjonene som må sulfateres, og karboksyl-syrer, blir utført ved eliminering av de beskyttende grupper Ti som beskyttet disse funksjoner under forløpet av trinnene for utforming av skjelettet, og
deretter
(k) gjennomføres til sist sulfateringen for å oppnå forbindelsene (I) eller ett av deres salter.
Fremgangsmåten beskrevet ovenfor er den foretrukne fremgangsmåte ifølge foreliggende oppfinnelse. Forbindelsene med formel (I) kan imidlertid fremstilles ved andre metoder kjent fra sukkerkjemien og f.eks. beskrevet i Monosacca-rides, their chemistry and their roles in natural products, P.M. Collins og R.J. Ferner, J. Wiley & Sons, 1995 og i G.J. Boons, Tetrahedron, 1996, 52,1095-1121.
Som en variant kan forbindelsene med formel (I) fremstilles i henhold til fremgangsmåten beskrevet i M. Dreef, XVIIth Carbohydrates Symposium, Ottawa, 1-22 juli 1994, Abstract D 2,5.
Semi-permanente grupper skal forstås å bety grupper som først kan elimineres etter glykosyleringsreaksjonene når karbohydratskjelettet inneholder det ønskede antall enheter, uten fjerning eller endring av de andre grupper som er til stede, hvoretter så innføringen av ønskede funksjonelle grupper kan finne sted i stillingene som de opptar.
De permanente grupper er grupper som er i stand til å opprettholde beskyt-telsen av -OH-radikaler under innføringen av funksjonelle grupper i stedet for semi-permanente grupper.
Disse grupper er valgt fra de som er kompatible med de funksjonelle grupper innført etter eliminering av de semi-permanente grupper. De er i tillegg grupper som er inerte med henblikk på reaksjoner utført for innføring av disse funksjonelle grupper og som kan elimineres uten at disse funksjonelle grupper blir endret.
Ifølge oppfinnelsen er de permanente grupper Ci-C6-alky!grupper.
Et eksempel på en semi-permanent og/eller temporær gruppe som kan nevnes er benzyl- og acetatgrupper.
Substituentene i stilling 3 i uronenheten i målforbindelsen kan allerede være til stede i utgangs-syntonene med formel (A), så vel som substituenten Ri.
I fremgangsmåten ovenfor har substituentene Tn, Te, T12, Tie og T24 den samme definisjon som R1t R6, Rn og Rie i formelen (I), det vil si at de er et (d-CeJ-alkyl.
De beskyttende grupper anvendt i fremstillingsprosessen for forbindelsene (I) er de som nå anvendes i sukkerkjemien, for eksempel i "Protective Groups in Organic Synthesis", T.W. Green, John Wiley & Sons, New York, 1981.
De beskyttende grupper velges fordelaktig for eksempel fra acetyl-, halo-genmetyl-, benzoyl-, levulinyl-, benzyl-, substituerte benzyl-, eventuelt substituerte trityl-, tetrahydropyranyl-, allyl-, pentenyl-, ferf-butyldimetylsilyl- (tBDMS) eller tri-metylsilyletyl- (...) grupper.
Aktivatorgruppene er slike som klassisk anvendes i sukkerkjemien i henhold til for eksempel G.J. Boons, Tetrahedron, 1996, 52,1095-1121. Disse aktiva-torgrupper velges for eksempel fra imidater, tioglykosider, pentenylglykosider, xan-tater, fosfitter eller halogenider.
Fremgangsmåten beskrevet ovenfor fører til at forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse kan oppnås i form av salter. For å oppnå de tilsvarende syrer, bringes forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse i form av salter i kontakt med en kationebytterharpiks i syreform.
Forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse i form av syrer kan deretter nøytraliseres med en base for å oppnå et ønsket salt.
For fremstilling av saltene av forbindelsene med formel (I), er det mulig å anvende hvilken som helst uorganisk eller organisk base som gir farmasøytisk godtagbare salter med forbindelsene med formel (I).
Basen som fortrinnsvis anvendes er natriumhydroksyd, kaliumhydroksyd, kalsiumhydroksyd eller magnesiumhydroksyd. Natrium- og kalsiumsaltene av forbindelsene med formel (I) er de foretrukne salter.
I trinn (a) ifremgangsmåten er de beskyttende grupper anvendt de som van-ligvis anvendes av fagfolk i sukkerkjemien, for eksempel i henhold til EP-084 999 eller alternativt i henhold til "Protective Groups in Organc Synthesis", TW Green, J.Wiley & Sons, 1995.
De beskyttende grupper Z som beskytter stilling 4 i den ikke-reduserende terminale ende, og Ti som beskytter stilling 1 i den reduserende terminale enhet, kan elimineres selektivt for å tillate funksjonaliseringen av de tilsvarende stillinger i disakkaridet under forløpet av de påfølgende syntesetrinn. Naturen av de andre beskyttende grupper T2 til T8 velges under hensynstagen til alkoholfunksjonene som skal sulfateres i sluttproduktet. En stilling som bærer en alkylgruppe i sluttproduktet er beskyttet av denne gruppe fra syntesens begynnelse, mens en stilling som skal sulfateres er beskyttet av en temporær beskyttelsesgruppe så som aralkyl (benzyl eller substituert benzyl), estere (acetater, benzoater). Stillingen og naturen av substituentene Ti i sluttproduktet bestemmer således sulfateringspro-filen for disakkaridfragmentet som stammer fra (A). Det er mulig å oppnå svært forskjellige disakkarider av de med formel (A). Fremstillingen av disakkaridene med formel (A) utføres i det vesentlige som beskrevet i søknaden EP-90 201 006 eller alternativt i publikasjonen C.A.A. van Boeckel og M. Petitou, Angew. Chem. Int. Ed. Engl., 1993, 32,1671-1690 eller alternativt i henhold til G.J. Boons, Tetrahedron, angitt ovenfor.
I henhold til trinn (b) er det dersom Ti er et alkyl, mulig å anvende en acetolysereaksjon i eddiksyreanhydrid, som så tjener som et løsemiddel og som reagens, i nærvær av en sterk syre så som svovelsyre eller trifluoreddiksyre, for selektivt å frigi den beskyttende gruppe i den anomere stilling. Når Ti er en ester er det mulig selektivt for å fjerne denne ester ved anvendelse av for eksempel benzylamin og et aprotisk løsemiddel så som dietyleter eller diklormetan eller ellers alternativt N-metylmorfolin i tetrahydrofuran. Når Ti er en allylgruppe er det mulig å isomerisere den til vinyl og så gå over til en mild syrehydrolyse av vinyl-eteren, for eksempel i nærvær av kvikksølvklorid i en acetonløsning. Ved hjelp av de ovenfor angitte metoder oppnås det en hydroksylert forbindelse som deretter blir omdannet til forbindelse (B), for eksempel ved hjelp av en reaksjon med trikloracetonitril i nærvær av en base for i dette tilfelle å oppnå en forbindelse (B) hvor X er et imidat. I tilfellet hvor X er et tioglykosid etler et pentenylglykosid, kan gruppen Ti i forbindelse (A) være lik X.
I henhold til trinn (c) er det mulig å oppnå et glykosidisk forbindelses-akseptor-disakkarid ved selektiv eliminering av gruppen Z i henhold til en velkjent fremgangsmåte, avhengig av naturen av Z, under anvendelse av for eksempel (1) hy-drazinacetat eller hydrazinhydrat, i pyridin eller i toluen, i tilfellet hvor Z er en levu-linisk gruppe eller ellers (2) tiourea i etanol i tilfellet hvor Z er en trikloracetyl-gruppe.
I henhold til trinn (d) kobles et glykosidisk forbindelses-donor-disakkarid med formel (B) oppnådd ovenfor og et glykosidisk forbindelses-akseptor-disakkarid med formel (C) oppnådd ovenfor, slik at det oppnås et fullstendig beskyttet tetrasakkarid med formel (D); for dette anvendes en kjent aktivator for glykosyl-donoren X, for eksempel trimetylsilyltriflat eller TMS eller ferf-butyldimetylsilyltriflat eller TBDMS eller alternativt bortrifluorid i dietyleter, for eksempel dersom et imidat er involvert, eller ellers N-jodsuksinimidsystemet eller NIS, triflik-syre når et tioglykosid er involvert eller hvilken som helst annet system kjent for å aktivere X i henhold til de referanser som er angitt ovenfor. Løsemidlene anvendt for reaksjonen er fortrinnsvis diklormetan, dikloretan, kloroform, klorbenzen, dietyleter, toluen, benzen; reaksjonen blir utført under vannfrie betingelser og generelt ved lav temperatur mellom -70 og 0°C. Det er også mulig å gjennomføre reaksjonen ved omgivelsestemperatur.
For trinn (e) er prosedyren i det vesentlige som beskrevet i trinn (b), med utgangspunkt i tetrasakkaridene oppnådd i henhold til trinn (d).
For trinn (f) er prosedyren som beskrevet i (c) for selektivt å avbeskytte tetrasakkaridene oppnådd i henhold til trinn (d), og tetrasakkaridene med formel
(F) blir oppnådd.
For trinn (g) er prosedyren som beskrevet i trinn (d), og med fordel separe-res reaksjonsproduktene med formel (G) ved hjelp av gelgjennomtrengningskromatografi.
For trinn (h) er prosedyren er i det vesentlige som beskrevet i trinn (b), med utgangspunkt i heksasakkarider eller oktasakkarider med formel (H) oppnådd i henhold til trinn (g).
De ovenfor beskrevne avbeskyttelses- og koblingstrinn gjentas inntil det fullstendig beskyttede oligosakkarid som har den ønskede struktur blir oppnådd, idet glykosyl-donor- og glykosyl-akseptor-mellomprodukt-sakkarid-syntoner velges som en funksjon av den endelige struktur, for således å oppnå den beskyttede for-løper for det ønskede endelige polysakkarid med formel (I), hvor naturen av de beskyttende grupper Ti bestemmer stillingen av sulfat- og alkylgruppene på sluttproduktet (I).
Beskyttelsesgruppene på alkoholfunksjonene som må sulfateres blir deretter eliminert i henhold til trinn (j), ved forsåpning med natriumhydroksyd eller litiumhydroksyd og/eller ved katalytisk hydrogenering, for eksempel i nærvær av palladium på karbon.
I henhold til trinn (k) gjennomføres sulfateringen ved hjelp av et sulfate-ringsmiddel så som et S03-amin-kompleks, for eksempel pyridin-S03-komplekset eller ved hjelp av klorsulfonsyre i et aprotisk løsemiddel så som dimetylformamid, fortrinnsvis ved en temperatur mellom 0°C og 100°C, for å oppnå forbindelsene (I), som eventuelt renses ved gelgjennomtrengningskromatografi, ved anvendelse av vann eller en oppløsning av natriumklorid som elueringsmiddel.
Forbindelsene (I) således oppnådd kan eventuelt omdannes til salter.
Forbindelsene med formel (I) ovenfor omfatter likeledes de hvor ett eller flere hydrogen- eller karbonatomer er blitt erstattet med sine radioaktive isotoper, for eksempel tritium eller karbon 14. Slike merkede forbindelser er nyttige innen forskning, metabolisme eller farmakokinetisk arbeid og i biokjemiske undersøkel-ser som ligander.
Forbindelsene ifølge oppfinnelsen har gjennomgått biokjemiske og farmakologiske studier som har vist at de har meget interessante egenskaper.
Forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse som er bundet til AT III (KD < 200 nM) eller til heparin ko-faktor (HC II) med an affinitet lik eller større enn de for heparin, harde antikoagulerende egenskaper for heparin.
De hemmer derfor mange koaguleringsfaktorer så som faktor Xa (titer < 10 u for anti-Xa/mg) eller trombin (IC50 < 10 ug/ml) og er ved denne titer utmer-kede antitrombotiske midler i modeller av venetrombose og arteriell trombose.
Affiniteten til forbindelsene med formel (I) for AT III er blitt bestemt ved spektrofluormetri under de betingelser som er beskrevet av D. Atha ef al. i Biochemistry, 1987, 26,6454-6461. Resultatene av forsøkene har vist at forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse har en meget høy affinitet for AT III (Ko på mellom 0,1 uM og 1 nM).
Anti-faktor-Xa (anti-Xa) -aktiviteten for produktene ifølge foreliggende oppfinnelse er blitt evaluert ved pH 8,4 i henhold til metoden beskrevet av Teien A.N. og Lie M., i Thrombosis Research, 1977, 10, 399-410 og det er blitt vist at noen forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse har en anti-Xa-aktivitet lik eller større enn den for de syntetiske heparinoider allerede kjente, og spesielt er den større enn 50 u for anti-Xa/mg.
Som nevnt ovenfor aktiverer i koaguleringskaskaden faktor Xa protrombin til trombin, som proteolyserer oppløselig fibrinogen under frigivning av uoppløselig fibrin, hovedbestanddelen av blodklumper. Hemningen av faktor Xa er således et favorisert middel for å oppnå en antikoagulerende og antitrombotisk aktivitet.
Den globale antitrombotiske aktivitet for produktene med formel (I) er blitt evaluert på den intravenøse måte eller subkutant i rotte, ved hjelp av en modell av venøs stase og induksjon ved tromboplastin, i henhold til metoden beskrevet av J. Reyers et al. iThrombosis Research, 1980, 18, 669-674. ED50 for forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse er minst av samme størrelse eller mindre enn for de andre syntetiske heparinoider allerede kjent (ED50 på mellom 5 og 500 ug/kg). Forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse har således en spesifikk virkning og en spesielt interessant antikoagulerende og antitrombotisk virkning.
Forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse som er i stand til å modulere, spesielt å inhibere, aktiviteten for vekstfaktorer, spesielt for bFGF, tillater at proliferasjonen av vaskulære glatte muskelceller i kultur (CML) kan inhiberes med en hemmende effekt som er litt større enn den for heparin når det gjelder veksten av de glatte muskelceller.
Virkningen av forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse på aktiviteten for bFGF er blitt evaluert ved immobilisering av jodert FGF på menneskelig CML i kultur.
Hemningen av proliferasjonen av CML er blitt evaluated in vitro på kulturer av aortisk menneskelig CML (R. Ross, J. Cell. Biol., 1971,172-186).
Forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse som også har antivirale eller hypolipidemiske egenskaper, anti-fri-radikal-egenskaper ved frigivning av super-oksyd-dismutase eller antimetastasiske, antiangiogenetiske eller anti-inflammatoriske egenskaper, kan likeledes virke på veksten og differensieringen av neuronale celler i kultur. De er derfor nyttige i alle de patologier hvor perturbasjoner av disse biologiske mekanismer intervenerer.
Noen forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse utøver også en beskyttende og regenererende virkning på nervefibrene.
På grunn av deres selektive biokjemiske og farmasøytiske aktivitet er forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse meget interessante medisiner. Deres toksisitet er perfekt kompatibel med denne anvendelse. De er også meget stabile og er således spesielt passende for å danne den aktive bestanddel i farmasøy-tiske spesialiteter.
På grunn av deres aktivitet på koaguleringsfaktorer kan forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse anvendes i forskjellige patologier i forbindelse med koa-gulering og spesielt når det gjelder lidelser i det kardiovaskulære og cerebrovaskulære system. Mer spesielt har de en høy affinitet for antitrombin III, så vel som en betydelig anti-faktor-Xa- og antitrombin-aktivitet. Hemningen av disse koaguleringsfaktorer er således en foretrukket måte for å oppnå en antikoagulerende og antitrombotisk aktivitet.
De kan anvendes i forskjellige patologier etter en modifikasjon av hemosta-sen for koaguleringssystemet, som opptrer spesielt under lidelser i det kardiovaskulære og cerebrovaskulære system så vel som tromboemboliske lidelser forbundet med aterosklerose og med diabetes, så som ustabil angina, hjerneslag, restenose etter angioplasti, endarteriektomi, tilpasning av endovaskulære proteser; eller tromboemboliske lidelser forbundet med retrombose etter trombolyse, med infarkt, med demens av ischemisk opprinnelse, med perifere arteriale sykdommer, med hemodialyse, med aurikulær fibrillering eller alternativt under anvendelse av vaskulære proteser for aorto-koronare by-pass. Disse produkter kan videre anvendes for behandling eller forhindring av tromboemboliske patologier av for-skjellig opprinnelse, så som pulmonale embolismer. De kan anvendes enten for å forhindre eller for å behandle trombotiske komplikasjoner som opptrer under kirurgiske inngrep eller sammen med andre patologier så som kreft eller bakterielle in-feksjoner eller virusinfeksjoner. Dersom de anvendes under tilpasning av proteser, kan forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse belegge protesene og gjøre dem hemokompatible. Spesielt kan de bindes til intravaskulære proteser (stents). I dette tilfelle kan de eventuelt modifiseres kjemisk ved innføring ved den ikke-reduserende eller reduserende ende av en passende arm, som beskrevet i henhold til EP 649 854.
Anvendelse i restenose etter angioplasti favoriseres av de hemmende egenskaper for visse vekstfaktorer, så som bFGF.
^ Forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse kan likeledes anvendes som et hjelpemiddel under endarterektomi utført med porøse ballonger.
Resultatene oppnådd ved forskjellige farmakokinetiske studier utført med produktene ifølge foreliggende oppfinnelse har demonstrert at de meget godt absorberes i mave-tarm-kanalen, og at deres halveringstid er lang. Dette gjør det mulig med én enkelt daglig administrering ved deres terapeutiske anvendelse.
Disse studier har også vist at de farmasøytiske preparater fremstilt med produktene med formel (I), gjenstanden for foreliggende oppfinnelse, absorberes i mave-tarm-kanalen uten at mengdene administrert forhindrer anvendelse i human terapi. Forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse er således nyttige for fremstilling av farmasøytiske preparater, som kan administreres like enkelt på parenteral som på oral måte.
Forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse er meget stabile og er således spesielt passende for å utgjøre den aktive bestanddel av medisiner.
I henhold til et annet av oppfinnelsens aspekter angår foreliggende oppfinnelse et farmasøytisk preparat inneholdende som aktiv bestanddel et syntetisk polysakkarid inneholdende fra 8 til 24 monosakkaridenheter dannet av en sekvens av disakkarider dannet fra en uronsyre og fra en heksose, idet det nevnte polysakkarid er karakterisert ved at alle dets hydroksylgrupper er foretret med en (Ci-C6)-alkylgruppe eller forestret i form av sulfogruppen, idet hvert disakkarid er minst monoforetret; eller et av dets farmasøytisk godtagbare salter. Det nevnte syntetiske polysakkarid, den aktive bestanddel av preparatene ifølge foreliggende oppfinnelse, er fortrinnsvis alkylert med en metylgruppe.
Oppfinnelsen angår fortrinnsvis farmasøytiske preparater inneholdende, som aktiv bestanddel, en forbindelse med formel (I), (1,1), (l,2), (1,3) eller ett av dens farmasøytisk godtagbare salter, eventuelt i kombinasjon med én eller flere inerte og passende eksipienter.
I hver doseenhet er den aktive bestanddel til stede i mengder tilpasset til de daglige tiltenkte doser. Generelt er hver doseenhet på egnet måte regulert i henhold til den dosering og og den type administrering som er tiltenkt, for eksempel pressede tabletter, gelatinkapsler og lignende, lukteposer, ampuller, siruper og lignende, drops, et transdermalt eller transmukosalt plaster, slik at en slik doseenhet inneholder fra 0,1 til 100 mg aktiv substans, fortrinnsvis 0,5 til 50 mg.
Forbindelsene ifølge oppfinnelsen kan også anvendes i kombinasjon med en annen aktiv forbindelse nyttig forden ønskede terapi, som foreksempel antitrombotiske midler, antikoagulanter, blodlegeme-aggregeringsinhibitorer som for eksempel dipyridamol, aspirin, ticlopidin, clopidogrel eller antagonister for glykoprotein-llb/llla-komplekset.
De farmasøytiske preparater formuleres for administrering til pattedyr, omfattende mennesker, for behandling av de foran angitte sykdommer.
De farmasøytiske preparater således oppnådd presenteres fordelaktig i forskjellige former, som for eksempel injiserbare løsninger eller løsninger som kan drikkes, belagte tabletter, pressede tabletter eller gelatinkapsler. De injiserbare løsninger er de foretrukne farmasøytiske former. De farmasøytiske preparater ifølge foreliggende oppfinnelse er spesielt nyttige for den preventive eller helende behandling av lidelser i den vaskulære vegg, så som aterosklerose, hyperkoagu-leringstilstander observert for eksempel etter kirurgiske operasjoner av tumorut-viklinger eller for koaguleringslidelser, indusert av bakterie-, virus eller enzym-aktivatorer. Doseringen kan variere i høy grad som en funksjon av alderen, vekten og helsetilstanden for pasienten, naturen og alvorlighetsgraden av lidelsen, så vel som av administreringsmåten. Denne dosering omfatter administrering av én eller flere doser med omtrent 0,1 mg til 100 mg pr. dag, fortrinnsvis omtrent 0,5 til 50 mg pr. dag, på intramuskulær eller subkutan måte, med satsvise administreringer eller administreringer med regulære intervaller.
Foreliggende oppfinnelse angår således likeledes de farmasøytiske preparater som inneholder som aktiv bestanddel én av de ovenfor angitte forbindelser, eventuelt i kombinasjon med en annen aktiv bestanddel. Disse preparater blir fremstilt slik at de kan administreres gjennom fordøyelsessystemet eller parenteralt.
I de farmasøytiske preparater ifølge foreliggende oppfinnelse for oral, sublingval, subkutan, intramuskulær, intravenøs, transdermal, transmucosal, lokal eller rektal administrering, kan den aktive bestanddel administreres i enhets-administreringsformer, som en blanding med konvensjonelle farmasøytiske bærere, til dyr og til mennesker. De passende enhets-administreringsforrner omfatter de former som administreres oralt, så som komprimerte tabletter, gelatinkapsler, pulvere, granuler og orale løsninger eller suspensjoner, samt sublingval og bukkat administreringsform, subkutan, intramuskulær, intravenøs, intranasal eller intraokulær administreringform og rektal administreringform.
Når det fremstilles et fast preparat i form av pressede tabletter, blandes den aktive hoved bestanddel med en farmasøytisk bærer så som gelatin, stivelse, laktose, magnesiumstearat, talk, gummi arabicum eller lignende. Det er mulig å belegge de pressede tabletter med sakkarose eller andre passende materialer eller alternativt er det mulig å behandle dem på en slik måte at de har forlenget eller forsinket aktivitet og at de frigir en på forhånd bestemt mengde av aktiv bestanddel på en kontinuerlig måte.
Et preparat i gelatinkapsler blir oppnådd ved blanding av den aktive bestanddel med et fortynningsmiddel og ved å helle den oppnådde blanding i myke eller harde gelatinkapsler.
Et preparat i sirup- eller eliksir-form kan inneholde den aktive bestanddel sammen med et fortrinnsvis kalorifritt søtningsmiddel, metylparaben og propyl-paraben som antiseptika, så vel som et smaksmiddel og et passende farvestoff.
De vanndispergerbare pulvere eller granuler kan inneholde den aktive bestanddel som en blanding med dispergeirngsmidler eller fuktemidler eller suspen-deringsmidler, så som polyvinylpyrrolidon, så vel som med søtningsmidler eller smakskorrigerende midler.
For rektal administrering kan det anvendes suppositorier som blir fremstilt med bindemidler som smelter ved rektal temperatur, for eksempel kakaosmør eller polyetylenglykoler.
For parenteral, intranasal eller intraokulær administrering, anvendes vandi-ge suspensjoner, isotoniske saltvannsløsninger eller sterile og injiserbare løsnin-ger som inneholder farmakologisk kompatible dispergeringsmidler og/eller fuktemidler, for eksempel propylenglykol eller butylenglykol.
For transmucosal administrering kan den aktive bestanddel formuleres i nærvær av en aktivator så som et galle-salt, en hydrofil polymer som for eksempel hydroksypropylcellulose, hydroksypropylmetylcellulose, hydroksyetylcellulose, etylcellulose, karboksymetylcellulose, dekstran, polyvinylpyrrolidon, pektiner, stivelser, gelatin, kasein, akrylsyrer, akrylsyreestere og deres kopolymerer, vinyl-polymerer eller kopolymerer, vinylalkoholer, alkoksypolymerer, polyetylenoksyd-polymerer, polyetere eller en blanding derav.
Den aktive bestanddel kan også formuleres i form av mikrokapsler, eventuelt med én eller flere bærere eller additiver.
Den aktive bestanddel kan også være til stede i kompleks form med et cyklodekstrin, for eksempel a-, B- eller y-cyklodekstrin, 2-hydroksypropyl-B-cyklodekstrin eller metyl-B-cyklodekstrin.
Den aktive bestanddel kan også frigis ved hjelp av en ballong inneholdende bestanddelen eller ved hjelp av en endovaskulær ekstensor innført i blodkarene. Den farmakologiske effekt av den aktive bestanddel er således upåvirket.
Administrering på subkutan måte er foretrukket.
De følgende METODER, PREPARATER og SKJEMAER illustrerer syntesen av de forskjellige mellomprodukter som kan anvendes for å oppnå polysakkarider ifølge oppfinnelsen.
For en bedre forståelse av fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen, kan opp-nåelsen av forbindelsene (I) skjematiseres som følger:
Strategi anvendt for syntesen av oligomerer av disakkaridet metyl- 4- 0-( 2, 3-di- 0- metyl- ct- L- idopyranosyluronat)- 2, 3, 6- tri- O- sulfo- cc- D- glukopyranosid. Ved å kondensere imidatene ( venstre kolonne, hvitt triangel på den reduserende ende) og glykosylakseptorene ( midtkoionnen, sort triangel på den ikke- reduserende ende) oppnås fullstendig beskyttede oligosakkarider som vist i den høyre kolonne. Sistnevnte blir deretter avbeskyttet og funksjonalisert, hvilket gir forbindelsene ifølge EKSEMPEL 1 og TABELL I.
Alle forbindelsene beskrevet nedenfor er homogene ved tynnskiktkromatografi (TLC) og har spektrale egenskaper i samsvar med deres struktur. Smelte-punktene blir bestemt i kapillarrør ved hjelp av et Mettler-apparat og er ikke korri-gerte. Rotasjonsenergiene måles ved hjelp av et Perkin-Elmer 241 polarimeter ved 22 + 3°C. Renheten av forbindelsene undersøkes ved TLC på silikagel 60<®> F254 (E. Merck) med deteksjon ved karbonisering i nærvær av svovelsyre. Dersom ikke annet er angitt ble kolonnekromatografi utført på silikagel 60<®> 40-63 eller 63-200 pm (E. Merck). <1>H NMR-spektrene blir registrert på Bruker AC 200,
AM 250, AC 300 eller AM 500 apparateer, på løsninger av produktene i CDCI3 eller D2O. Før analyse i D20 føres prøvene gjennom en kolonne av Chelex<®> ione-bytterharpiks (Bio-Rad) og lyofiliseres deretter tre ganger i D20. De kjemiske skift er i forhold den eksterne TMS når spektrene blir tatt opp i CDCI3 og til ekstern TSP når spektrene blir tatt opp i D20. De massespektrometriske analyser blir utført i et ZAB-2E instrument (Fisons). Elementanalysene blir utført i en Fisons analysator.
De følgende forkortelser blir anvendt:
TBDMS: fert-butyldimetylsilyl; Lev: levulinyl; Bn: benzyl; Bz: benzoyl; MCA: klor-acetyl; CCM: tynnskiktkromatografi; Olm: trikloracetimidyl; LSIMS: er forbokstavene i Liquid Secondary lon Mass Spectrometry, ESI MS: er forbokstavene i Electron Spray lonization Mass Spectrometry, TMS: trimetylsilyl; TSP: natrium-trimetyl-silyltetradeuteriopropionat; Tf: triflat; MS: molekylsikt. Dowex<®>, Sephadex<®>, Chelex<®>, Gel 60® er handelsbetegnelser.
I metodene, preparatene og i eksemplene beskrevet nedenfor, kan generelle arbeidsmetoder når det gjelder spaltningen av levulinsyreestrene, den kataly-tiske kobling av imidatene, avbeskyttelsen og sulfateringen av oligo- og polysakkaridene ved hydrogenolyse av estrene eller av benzyl etrene, forsåpingen av estrene eller alternativt sulfateringene, benyttes ved anvendelse av de generelle metoder nedenfor, til de passende mellomprodukter.
GENERELLE METODER
METODE 1. Spaltning av Lev- gruppen
En oppløsning av hydrazinhydrat (1 M i 3:2 pyridin/eddiksyre) settes til
(5 ml/mmol) av en avkjølt løsning (0°C) i pyridin (5 ml/mmol) av forbindelsen som skal behandles. Etter 15-30 minutter (TLC) konsentreres løsningen. Residuet blir oppløst i etylacetat, vasket med vann, en 10% løsning av kaliumhydrogensulfat, en 2% løsning av natriumhydrogenkarbonat og med vann og blir tørret (natriumsulfat) og konsentrert.
METODE 2. Kobling til imidatene katalysert med tert- butyldimetylsilyltriflat
ferf-Butyldimetylsilyltriflat (0,5 mol/mol imidat) settes dråpevis, under argon, til en omrørt og avkjølt løsning (-20°C) av akseptoralkohol og donor-imidatet i toluen (35 ml/mmol), i nærvær av 4 Å molekylsikt i pulverform. Etter 15-30 minutter (TLC) tilsettes fast natriumhydrogenkarbonat under omrøring. Etter 5 minutter tilsettes toluen, løsningen blir filtrert og vasket med en oppløsning av 2% natriumhydrogenkarbonat og med vann og blir tørret (natriumsulfat) og konsentrert.
METODE 3. Kobling til imidatene katalysert med trimetylsiiyltriflat
Tri metyl si I yl triflat (0,04 M i toluen; 0,06 mol/mol imidat) settes dråpevis, under argon, til en omrørt og avkjølt løsning (-20°C) av akseptoralkoholen og donor-imidatet, i toluen (15 ml/mmol), i nærvær av 4 Å molekylsikt i pulverform. Etter 15-30 minutter (TLC), tilsettes fast natriumhydrogenkarbonat under omrøring. Etter 5 minutter tilsetts toluen, løsningen blir filtrert og vasket med en oppløsning av 2% natriumhydrogenkarbonat og med vann og blir tørret (magnesiumsulfat) og konsentrert.
METODE 4. Avbeskyttelse og sulfatering av oligo- og polysakkaridene
Hydrogenolyse av benzyletrene og benzylestrene. En oppløsning av forbindelse (5 mg/ml) i dimetylformamid eller metanol blir omrørt i 2-6 timer (TLC-under-søkelse) under en hydrogenatmosfære (5 bar) i nærvær av 10% Pd/C-katalysator (2 x massen av forbindelsen). Etter filtrering anvendes produktet direkte i det følgende trinn.
Forsåping av estrene. En vandig løsning av 5 M natriumhydroksyd settes til (i en mengde slik at konsentrasjon av natriumhydroksyd er 0,5 M ved slutten av til-setningen) en oppløsning av en ester i metanol (150 ml/mmol). Etter 2-5 timer
(TLC) tilsettes vann etterfulgt harpiksen Dowex<®> 50 H+ til pH 1-2. Etter filtrering og konsentrasjon, føres residuet gjennom en kolonne av Sephadex® G-25 gel
(1,6 x 115 cm) eluert med vann. Den fullstendig avbeskyttede forbindelse blir deretter oppnådd etter lyofilisering. Ved dette trinn undersøkes ved hjelp av <1>H NMR at alle beskyttende grupper er blitt fjernet. Dersom det er nødvendig, gjennomgår produktet igjen hydrogenering og/eller forsåping.
Sulfatering. Pyridin/svoveltrioksyd-kompleks (5 mmol/mmol hydroksylfunk-sjon) settes til en løsning i dimetylformamid (10 mg/ml) av forbindelsen som skal sulfateres. Etter én dag ved 55° C anbringes løsningen på toppen av en kolonne av Sephadex G-25 (1,6 x 115 cm) eluert med 0,2 M natriumklorid. Fraksjonene inneholdende produktet konsentreres og avsaltes ved anvendelse av den samme kolonne eluert med vann. Den endelige forbindelse blir oppnådd etter lyofilisering.
PREPARAT 1
Metyl-4-O-(2-0-benzoyl-4,6-isopropyliden-3-O-metyl-a-L-idopyranosyl)-2,3,6-tri-O-benzyl-a-D-glukopyranosid (3)
En oppløsning av trifliksyre i toluen (0,15 M, 0,27 ml) settes under omrø-ring, under argon, til en avkjølt løsning (-20°C) av etyl-2-0-benzoyl-4,6-0-isopro-pyliden-3-0-metyl-1-tio-a-L-idopyranosid 2 (Jaurand, G. et al., BioMed. Chem. Lett. 1992, 2, 897-900) (1,1 g, 2,87 mmol), av 1 (Garegg P.J., Hultberg H., Carbo-hydr. Res. 93,1981 C10-C11) (1,34 g, 2,87 mmol) og av W-jodsuksinimid (1,61 g, 7,2 mmol) i toluen (40 ml) inneholdende 4 A molekylsikter i pulverform. Den samme mengde syre tilsettes etter 25 og 50 minutter. Etter 1,5 timer tilsettes fast natriumbikarbonat (20 mg) og 15 minutter senere blir løsningen filtrert, fortynnet med diklormetan, vasket med en natriumtiosulfatløsning og vann, tørret (natriumsulfat) og inndampet. Råproduktet således oppnådd (2,49 g) blir anvendt direkte for fremstilling av 4.
Etter kolonnekromatografi (3:1 cykloheksan/etylacetat) blir forbindelse 3 oppnådd i ren form. TLC, Rf = 0,36, 3:1 cykloheksan/etylacetat; [a]o + 31 (c = 1, diklormetan) ESI MS, positiv modus: m/z + NaCI, 345 (M+Na)<+>; + KF, 361 (M+K)<+>. <1>H NMR(CDCI3) 8 7,17-7,35 (m,20H,4Ph), 5,10 (d, 1H, H-T), 4,60 (d, 1H, J = 3,0 Hz, H-1), 3,37 (s, 3H, OMe), 1,95; 2,04; 2,09 (3s, 9H, 3Ac), 1,24; 1,33 (2s, 6H,:C(CW3)2).
Anal. beregnet for C45H52O12 (784,86): C, 68,86, H, 6,68.
Funnet: C, 68,61; H, 6,77.
PREPARAT 2
Metyl-2,3,6-tri-0-benzyl-4-0-(4,6-isopropyliden-3-0-metyl-a-L-idopyranosyl)-a-D-glukopyranosid (4)
En 2 M løsning av natrium-metoksyd (2,2 ml, 4,4 mmol) settes til en oppløs-ning av forbindelse 3 (2,34 g) i en 1:1 metanol/diklormetan-blanding (13 ml). Etter 2,5 timer ved omgivelsestemperatur blir blandingen nøytralisert med Dowex<®> 50 harpiks (H<+>), filtrert og konsentrert, for å få 4 (1,74 g; 86% i forhold til 1 og 2) etter kolonnekromatografi (3:1 deretter 2:1 cykloheksan/etylacetat); [<x]d + 23 (c = 1, diklormetan). ESI MS, positiv modus: m/z + NaCI, 703 (M+Na)<+>; + KF, 719 (M+K)<+>. <1>H NMR (CDCI3) 5 7,31-7,21 (m, 15H, 3Ph), 4,94 (d, 1H, H-V), 4,60 (d, 1H, J = 3,6 Hz, H-1), 3,44; 3,36 (2s, 6H, OMe); 3,06 (dd, 1H, J = 3,6 Hz, J = 12,2 Hz, H-6'). 1,31; 1,28 (2s, 6H, :C(CH3)2).
Anal. beregnet for C38H48OU (680,76): C, 67,04; H, 7,11.
Funnet: C, 67,05; H.7,16.
PREPARAT 3
Metyl-2,3,6-tri-0-benzyl-4-0-(4,6-isopropyliden-2,3-di-0-metyl-a-L-idopyrano-syl)-a-D-glukopyranosid (5)
Metyljodid (3,2 ml, 50,8 mmol) settes ved 0°C til en oppløsning av 4 (26,6 g, 39,1 mmol) og av natriumhydrid (1,48 g, 58,7 mmol) i dimetylformamid (60 ml). En ny tilsetning av metyljodid (1,6 ml, 25,4 mmol) og av natriumhydrid (0,74 g,
29,3 mmol) blir utført etter 5 timer ved omgivelsestemperatur. Etter 1 natt tilsettes metanol (10 ml) dråpevis og etter 1,5 timer konsentreres reaksjonsblandingen. Produktet blir ekstrahert med etylacetat (1,51). Løsningen blir vasket med vann, tørret (natriumsulfat) og konsentrert. Den urene forbindelse 5 således oppnådd (32,1 g) blir anvendt som sådan i de følgende trinn. TLC, Rf = 0,55, 3:2 cykloheksan-etylacetat.
Syntese av basis- disakkaridene for fremstilling av oiigomerer av metyl- 4- 0-( 2, 3- di-0- metyl- a- L- idopyranosyluronat)- 2, 3, 6- tri- 0- sulfo- a- D- glukopyranosid
PREPARAT 4
Metyl-2,3,6-tri-0-benzyl-4-0-(2,3-di-0-metyl-a-L-idopyranosyl)-a-D-glukopyranosid (6)
En vandig løsning av trifluorediksyre (70%, 43 ml) settes dråpevis i løpet av 10 minutter til en oppløsning av den ovenfor fremstilte urene forbindelse (32,1 g) i diklormetan (215 ml). Etter 25 minutter ved omgivelsestemperatur fortynnes løsningen med diklormetan (1 I), vaskes med en mettet vandig løsning av natriumhydrogenkarbonat og med vann og tørres (natriumsulfat). Den urene forbindelse 6 oppnådd etter konsentrasjon (27,5 g) blir anvendt som sådan i de føl-gende trinn. TLC, Rf = 0,29, 2:3 cykloheksan-etylacetat.
PREPARAT 5
Metyl-2,3,6-tri-0-benzyl-4-0-(6-0-ferr-butyldimetylsilyl-4-0-Ievulinyl-2,3-di-0-metyl-a-L-idopyranosyl)-a-D-glukopyranosid (10)
En oppløsning av 6 (1,7 g), av trietylamin (0,54 ml, 3,8 mmol), av 4-dimetylaminopyridin (38 mg, 0,3 mmol) og av fert-butyldimetylsilylklorid (0,54 g, 3,6 mmol), i metylenklorid (6 ml) blir oppvarmet på 50°C i 3 timer, for å få 9 som isoleres. Etter avkjøling til omgivelsestemperatur tilsettes levulinsyreanhydrid (0,771 g, 3,6 mmol), trietylamin (0,50 ml, 3,6 mmol) og 4-dimetylaminopyridin (59 mg, 0,48 mmol). Etter 4 timer fortynes blandingen med metylenklorid og vaskes suksessivt med en vandig løsning av kaliumhydrogensulfat, vann, en mettet vandig løsning av natriumhydrogenkarbonat og vann, tørres (natriumsulfat) og konsentreres, for å gi 10 (2,45 g) som blir anvendt slik det er i det følgende trinn. TLC, Rf 0,5,12:1 cykloheksan/etylacetat.
PREPARAT 6
Metyl-2,3,6-tri-0-benzyl-4-0-(benzyl 4-0-levulinyl-2,3-di-0-metyl-a-L-idopyra-nosyluronat)-a-D-glukopyranosid (12)
En oppløsning av kromtrioksyd (0,64 g, 6,4 mmol) i vandig svovelsyre
(3,5 M, 2,7 ml) settes langsomt til en avkjølt løsning (0°C) av 10 (2,45 g) i aceton (18 ml). Etter 5 timer tilsettes metylenklorid, deretter blir blandingen helt i is-vann, omrørt kraftig og vasket med vann til nøytral pH og tørret (natriumsulfat). Konsentrasjon gir 11 (2,45 g) i sirupform. TLC, RF 0,56,12:1 metylenklorid/metanol. Dette produktet blir deretter oppløst i dimetylformamid (19 ml) og behandlet i én natt ved omgivelsestemperatur med benzylbromid (2,9 mi, 12 mmol). Metanol (1,5 ml)
tilsettes og produktet blir ekstrahert med eter, vasket med vann, tørret og konsentrert. Etter kolonnekromatografi (2:1 deretter 3:2 cykloheksan/etylacetat) blir 12 oppnådd (1,07 g). TLC, RF 0,53, 5:1 metylenklorid/etylacetat.
PREPARAT 7
Metyl-2,3,6-tri-0-benzyl-4-0-(benzyl-2,3-di-0-metyl-a-L-idopyranosyluronat)-a-D-glukopyranosid (8)
Disakkaridet 12 (0,65 g, 0,76 mmol) behandlet i henhold til generell metode 1 gir 8 (0,52 g, 91%) etter kolonnekromatografi (2:1 deretter 3:1 cykloheksan/ etylacetat). [cx]d + 34 (c = 0,97, metylenklorid).
PREPARAT 8
1,3,6-tri-0-Acetyl-2-0-benzyM-0-(benzyl-4-0-Ievulinyl-2,3-di-0-metyl-a-L-idopyranosyluronat)-D-glukopyranose (13).
Trifluoreddiksyre (28 ml, 0,364 mol) settes til en oppløsning av 12 (7,8 g, 9,1 mmol) i eddiksyreanhydrid (194 ml, 2,06 mol) og eddiksyre (7,8 ml, 0,136 mol). Etter oppvarming på 60°C i 4 timer blir løsningen avkjølt til 0°C og vann (30 ml) blir tilsatt dråpevis, fulgt av trietylamin (69 ml). Etter inndamping blir residuet oppløst i diklormetan, vasket med en mettet løsning av natriumhydrogenkarbonat og vann, tørret (natriumsulfat) og konsentrert. Kolonnekromatografi (5:1 diklormetan/etylacetat)giren blanding (oc/p=8/2) av anomerene av 13 (4,7 g, 67%). TLC, RF 0,35; 3:2 cykloheksan/aceton. <1>H NMR (CDCI3) 5 7,37-7,20 (m, 10H, 2Ph), 6,30 (d, J = 3,6 Hz, H-1a), 5,62 (d, J = 7,6 Hz, H-1B), 5,04 (t, 1H, H^'),3,45; 3,41 (2s, 6H, 2 OMe), 2,6-2,3 (m, 4H, 0(C:0)CH2CH2(C:0)CH3), 2,15; 2,12; 2,06; 1,94; 1,88 (5s, 12H, 3 Ac og 0(C:0)CH2CH2(C:0)CH3).
PREPARAT 9
3,6-di-0-Acetyl-2-0-benzyl-4-0-(benzyl 4-0-levulinyl-2,3-di-0-metyl-a-L-ido-pyranosyluronat)-D-glukopyranose (14)
En løsning av etanolamin (1,3 ml, 21,6 mmol) og av 13 (4,25 g, 5,28 mmol) i tetrahydrofuran (80 ml) oppbevares én natt ved 4°C. Etanolamin (0,65 ml, 10,8 mmol) blir så tilsatt, og deretter får blandingen stå ved omgivelsestemperatur i 3 timer. Etter avkjøling til 0°C, tilsettes 1 M saltsyre til sur pH, deretter diklormetan (150 ml). Løsningen blir vasket med vann, tørret og konsentrert. Kolonnekromatografi (2:1 deretter 1:1 diklormetan/etylacetat) gir 14 (3 g, 74%). TLC, RF 0,21,1:1 toluen/etylacetat. [od] + 3 (c = 1, diklormetan). LSIMS, positiv modus: m/ztiogly-cerol + NaCI, 769 (M+Na)<+>; tioglycerol + KF, 785 (M+K)<+>. <1>H NMR (CDCI3) 6 7,36-7,25 (m, 10H, 2Ph), 5,21 (d, J = 3,5 Hz, H-1cc), 4,98 (d, 1H, J = 3,4 Hz, H-V), 4,79 (d, J = 8 Hz, H-16), 3,45; 3,42 (2s, 6H, 2 OMe), 2,56-2,23 (m, 4H, 0(C:0)CW2CH2(C:0)CH3), 2,23; 2,12; 1,94; 1,88 (4s, 9H, 2 Ac, a og p 0{C:0)CH2CH2(C:0)CH3).
Anal. beregnet for C37H460i6 (746,72); C, 59,51; H, 6,21.
Funnet: C, 58,87, H, 6,13.
PREPARAT 10
3,6-di-0-Acetyl-2-0-benzyl-4-0-(benzyl 4-0-levulinyl-2,3-di-0-metyl-a-L-ido-pyranosyluronat)-D-glukopyranose-trikloracetimidat (15)
En blanding av trikloracetonitril (0,7 ml, 6,92 mmol), av 14 (1,03 g; 1,38 mmol) og av kaliumkarbonat (191 mg; 2,21 mmol) i metylenklorid (26 ml) blir om-rørt i 1,5 timer ved omgivelsestemperatur. Løsningen blir deretter filtrert og konsentrert. Kolonnekromatografi (4:1 toluen/aceton) gir 15 (1,16 g; 94%). TLC, Rf 0,31 og 0.48, 2:3 cykloheksan/etylacetat. LSIMS, positiv modus: m/z tioglycerol + LiCI, 896 (M+Li)<+>; tioglycerol + NaCI, 912 (M+Na)<+>; tioglycerol + KF, 928 (M+K)<+>.
<*>H NMR (CDCI3) 8 8,67 (s, NH-p), 8,60 (s, NH-a), 7,37-7,22 (m, 10H, 2Ph); 6,44 (d, J = 3,6 Hz, H-1a), 5,83 (d, J = 7,3 Hz, H-ip), 3,47; 3,44; 3,42; 3,40 (4s, 6H, 2 OMe), 2,7-2,2 (m, 4H, 0(C:0)CH2CH2(C:0)CH3), 2,15; 2,08; 1,94; 1,88 (4s, 9H, a og p Ac og 0(C:0)CH2CH2(C:0)CH3).
Syntese av heksasakkaridet 18. Fremstillingen av oligomerer med større størrelse blir utført i henhold til den samme strategi ( spaltning av Lev- gruppen for å oppnå en glykosyl- akseptor, kobling med et di-, tetra- eller heksasakkaird- imidat - som angitt i Skjema 1 - og til sist avbeskyttelse og sulfatering). Lev- gruppen i 18 elimineres selektivt hvilket gir akseptor- heksasakkaridet 19 ( SKJEMA 1).
PREPARAT 11
Metyl-(1 -4)-0-(benzyl 4-0-levulinyl-2,3-di-0-metyl-a-L-idopyranosyluronat)-{1-4)-0-(3,6-di-0-acetyl-2-0-benzyl-a-D-glukopyranosyl)-(1-4)-0-(benzyl-2,3-di-0-metyl-a-L-idopyranosyluronat)-2,3,6-tri-0-benzyl-a-D-glukopyranosid
(16)
En blanding av 8 (2,90 g, 3,83 mmol) og 15 (4,16 g, 4,67 mmol) blir behandlet i henhold til metode 2. Kolonnekromatografi (1:1 cykloheksan/etylacetat) gir ren 16 (3,2 g; 54%). TLC, RF 0,52, 2:3 cykloheksan/etylacetat. <1>H NMR (CDCI3) 6 7,21-7,36 (m, 30H, 6Ph), 5,27 (d, 1H, H-1, ikke-reduserende enhet), 5,14 (d, 1H, H-1 "sentralt ved siden av ikke-reduserende" enhet), 4,90 (d, 1H, H-1, "sentralt ved siden av reduserende" enhet), 4,56 (d, 1H, H-1 reduserende enhet), 3,43;
3,39; 3,35; 3,25 (5s, 15H, 5 OMe), 2,25-2,60 (m, 4H, 0(C:0)CH2CH2(C:0)CH3), 2,12; 2,00; 1,91 (3s, 9H, 2Acog 0(C:0)CH2CH2(C:0)CH3).
PREPARAT 12
Metyl-(1-4)-0-(benzyl-2,3-di-0-rnetyl-a-L-idopyranosyluronat)-(1-4)-0-(3,6-di-0-acetyl-2-0-benzyl-a-D-glukopyranosyl)-(1-4)-0-(benzyI-2,3-di-0-metyl-a-L-idopyranosyluronat)-2,3,6-tri-0-benzyl-a-D-glukopyranosid (17)
Forbindelse 16 (1 g; 0,672 mmol) blir behandlet i henhold til metode 1 for å gi 17 kvantitativt etter kolonnekromatografi (1:1 cykloheksan/aceton).
PREPARAT 13
Metyl-(1 -4)-0-(benzyl 4-0-levuliny!-2,3-di-0-metyl-<x-L-idopyranosyluronat)-[(1-4)-0-(3,6-di-0-acetyl-2-0-benzyl-a-D-glukopyranosyl)-(1-4)-0-(L-fc>enzyl-2,3-di-0-metyl-a-idopyranosyluronat)]2-2,3,6-tri-0-benzyl-a-D-glukopyranosid
(18)
En blanding av 15 (386 mg, 434 umol) og 17 (500 mg; 360 umol) blir behandlet i henhold til metode 2. Kolonnekromatografi (Sephadex<®> LH 20,
195 x 3,7 cm; 1:1 diklormetan/etanol) gir heksasakkaridet 18 (495 mg; 64%). TLC, Rf 0,36; 10:1 diklormetan/aceton.
<1>H NMR (CDCI3)8: 5,23; 5,12; 5,10; 4,92; 4,89; 4,56 ppm.
PREPARAT 14
Metyl-tl^-O-fbenzyl^.S-di-O-metyl-a-L-idopyranosyluronatJ-KI^J-O-tS.e-di-0-acetyl-2-0-benzyl-a-D-glukopyranosyl)-(1-4)-0-(benzyl-2,3-di-0-metyl-a-L-idopyranosyluronat)]2-2,3,6-tri-0-benzyl-a-D-glukopyranosid (19)
Forbindelse 18 (485 mg; 229 umol) blir behandlet i henhold til metode 1. Kolonnekromatografi (10:1 diklormetan/aceton) gir 19 (392 mg; 85%). TLC, RF 0,38,10:1 diklormetan/aceton.
PREPARAT 15
Metyl-2,3,6-tri-0-benzyl-4-0-{benzyl 4-0-kloracetyl-2,3-di-0-metyl-a-L-idopy-ranosyluronat)-a-D-glukopyranosid (20)
En blanding av 8 (326 mg, 0,43 mmol), av kloreddiksyreanhydrid (103 g, 0,6 mmol), av 4-dimetylaminopyridin (5,3 mg, 42 umol) og av trietylamin (90 pl, 64 umol) i diklormetan (96 ml) blir omrørt ved omgivelsestemperatur i 30 minutter. Metanol (0,5 ml) blir deretter tilsatt og løsningen blir fortynnet med diklormetan, vasket med vann, tørret (natriumsulfat) og konsentrert. Kolonnekromatografi (2:3 deretter 1:2 cykloheksan/eter) gir ren 20 (242 mg, 67%). TLC, RF 0,35,1:2 cykloheksan/eter. <1>H NMR (CDCI3) 6 7,36-7,19 (m, 20H, 4Ph), 5,20 (d, 1H, H-1'), 4,56 (d, 1H, H-1), 3,70 og 3,36 (AB system, J = 15,3 Hz, CICH2(C:0)0), 3,49, 3,35; 3,26 (3s, 3 OCH3).
PREPARAT 16
1,3,6-tri-0-Acetyl-2-0-benzyl-4-0-(benzyl 4-O-kloracetyl-2,3-di-0-metyl-a-L-idopyranosyluronat)-a,p-D-glukopyranose (21)
En oppløsning av trifluoreddiksyre (183 ul, 2,4 mmol) settes til en oppløs-ning av 20 (50 mg, 0,06 mmol) i eddiksyreanhydrid (1,28 ml, 13,5 mmol) og eddiksyre (52 pl, 0,9 mol). Etter oppvarming på 60°C i 4 timer, blir løsningen avkjølt til 0°C og nøytralisert med trietylamin. Etter inndamping gir kolonnekromatografi av residuet (1:2 deretter 2:5 cykloheksan/eter) en blanding (a/p ~ 8/2) av anomerene av 21 (28 mg, 60%). TLC, RF 0,31, 2:5 cykloheksan/eter. <1>H NMR (CDCI3) 5 7,20-7,35 (m, 10H, 2Ph), 6,30 (d, J = 3,6 Hz, H-1a), 5,63 (d, J = 8,1 Hz, H-1p), 3,39 og 3,46 (2s, 2 OCH3).
PREPARAT 17
1,3,6-tri-O-Acetyl-2-O-benzyl-4-0-(benzyl-2,3-di-0-metyl-a-L-idopyranosyl-uronat)-a,B-D-glukopyranose (22)
Tiourea (678 mg; 8,9 mmol) settes til en oppløsning av 21 (1,71 g; 2,23 mmol) i en blanding av pyridin (108 ml) og etanol (22 ml) og blandingen blir oppvarmet på 110°C i 30 minutter. Etter avkjøling og inndamping blir residuet oppløst i diklormetan. Løsningen blir vasket med en mettet vandig løsning av natriumhydrogenkarbonat, deretter en 5% kaliumhydrogensulfatløsning, tørret (natriumsulfat) og konsentrert. Kolonnekromatografi (1:1, deretter 1:2 cykloheksan/etylacetat) gir ren 22 (1,17 g; 76%). TLC, RF 0,34; 3:1 diklormetan/ether. <1>H NMR (CDCl3) 8 7,36-7,20 (m, 10H, 2Ph), 6,30 (d, J = 3,6 Hz, H-1 a), 5,65 (d, J = 8 Hz, H-ip), 4,90 (1H, H-1'), 3,41 og 3,40 (2s, 2 OCH3).
PREPARAT 18
(1 -4)-0-(benzyI 4-0-levulinyl-2,3-di-0-metyl-a-L-idopyranosyluronat)-(1 -4)-0-(3,6-di-0-acetyl-2-0-benzyl-a-D-glukopyranosyl)-(1-4)-0-{benzyl-2,3-di-0-me-tyt-a-L-idopyranosyluronat)-1,3,6-tri-0-acetyl-2-0-benzyl-a,(3-D-glukopyrano-se (23)
En blanding av 15 (1,5 g, 1,7 mmol) og 22 (1,18 g; 1,7 mmol) blir behandlet i henhold til metode 3 (under erstatning av toluenet med diklormetan). Gelgjennomtrengningskromatografi på en kolonne av LH-20, likevektsinnstilt i diklormetan/etanol 1:1, gir ren 23 (1,75 g; 73%). [a]D + 19 (c = 0,9, diklormetan). LSIMS, positiv modus: m/z tioglycerol + NaCI, 1441 (M+Na)<+>; tioglycerol + KF, 1457
(M+K)<+>.
<*>H NMR (CDCb) 8 : 6,27; 5,45; 5,10; 4,96; 4,90 ppm.
Anal. beregnet for C71H86O30 (1419,46); C, 60,08; H, 6,11.
Funnet: C, 60,06; H, 6,40.
PREPARAT 19
(1 -4)-0-(benzyl 4-0-levulinyl-2,3-di-0-metyl-a-L-idopyranosyluronat)-(1 -4)-0-(3,6-di-0-acetyl-2-0-benzyl-a-D-glukopyranosyl)-{1-4)-0-(benzyl-2,3-di-0-metyl-a-L-idopyranosyluronat)-3,6-di-0-acetyl-2-0-benzyl-a,0-D-glukopyranose
(24)
Etanolamin (80 pl; 1,31 mmol) settes til en oppløsning av tetrasakkaridet 23 (465 mg; 327 umol) i tetrahydrofuran (5 ml), deretter får løsningen stå natten over ved 4°C. Etter nøytralisering med saltsyre (1 M; 2 ml) tilsettes diklormetan (20 ml), deretter blir løsningen vasket med vann, tørret (natriumsulfat) og konsentrert. Kolonnekromatografi (3:1 toluen/aceton) gir 24 (326 mg; 79%).
TLC, Rf 0,33, 3:1 toluen/aceton. LSIMS, positiv modus: m/z tioglycerol + NaCI, 1399 (M+Na)<+>; tioglycerol + KF, 1415 (M+K)<+>.
* H NMR (CDCI3) 8 : 5,18; 5,10; 4,96; 4,93; 4,75
PREPARAT 20
(1 -4)-0-(benzyl 4-0-levulinyl-2,3-di-0-metyl-a-L-idopyranosyluronat)-(1 -4)-0-(3,6-di-0-acetyl-2-0-benzyl-a-D-glukopyranosyl)-{1-4)-0-(benzyl-2,3-di-0-metyl-a-L-idopyranosyluronat)-3,6-di-0-acetyl-2-0-benzyl-a-a,p-D-glukopyrano-se-trikloracetimidat (25)
En blanding av trikloracetonitril (151 ul; 1,5 mmol), av tetrasakkaridet 24 (343 mg; 249 uM) og av kaliumkarbonat (62 mg; 448 umol) i diklormetan (2 ml) blir omrørt i én natt ved omgivelsestemperatur. Diklormetan tilsettes og etter filtrering blir løsningen konsentrert. Kolonnekromatografi (3:1 toluen/aceton) gir 25
(346 mg; 91%).
TLC, RF 0,42; 0,63, 2:1 diklormetan/etylacetat.
<1>H NMR (CDCI3) 8 : 8,67 (s, NH-b), 8,59 (s, NH-a), 7,40-7,20 (m, 10H, 2Ph), 6,40 (d, J = 3,5 Hz, H-1 a), 5,90 (d, J = 7,5 Hz, H-ip), 3,45; 3,44; 3,42; 3,40; 3,39; 3,37 (6s, 12H, 4 OMe), 2,7-2,2 (m, 4H, 0(C:0)CH2CH2(C:0)CH3), 2,12; 2,08; 2,07; 2,04; 2,02; 1,91; 1,89 (7s, 15H, 4 Ac og 0(C:0)CH2CH2(C:0)CH3). NH-a og NH-b betegner signalene oppnådd for hver av syn- og anti-isomerene.
PREPARAT 21
Metyl-(1-4)-0-(benzyl 4-0-levulinyl-2,3-di-0-metyl-a-L-idopyranosyluronat)-t(1-4)-0-(3,6-di-0-acetyl-2-0-benzyl-a-D-glukopyranosyl)-(1-4)-0-(benzyl-2,3-di-0-metyl-a-L-idopyranosyluronat)-]3-2,3,6-tri-0-benzyl-a-D-glukopyranosid
(26)
Startmaterialer er 17 og 25. - En blanding av 17 og 25 (459 mg, 0,3 mmol) blir behandlet i henhold til metode 3. Kolonnekromatografi (Sephadex<®> LH 20, 195 x 3,7 cm; 1:1 diklormetan/etanol), fulgt av silikagel-kolonnekromatografi (3:2 cykloheksan-aceton) gir ren 26 (420 mg; 59%). [<x]D + 20 (c = 0,20, diklormetan). LSIMS, positiv modus: m/z tioglycerol + NaCI, 2771 (M+Na)<+>; tioglycerol + KF, 2787 (M+K)<+>.
<1>H NMR (CDCI3) 8 : 5,26; 5,14; 5,10; 4,93; 4,92; 4,90; 4,56
PREPARAT 22
26 med utgangspunkt i 15 og 19. - En blanding av 15 (332 mg; 373 umol) og 19 (377 mg; 186 umol) blir behandlet i henhold til metode 2. Kolonnekromatografi (Sephadex<®> LH 20,195 x 3,7 cm; 1:1 diklormetan/etanol) gir det rene oktasakkarid 26 (460 mg; 90%).
PREPARAT 23
Metyl-tl^J-O^benzyl^^-di-O-Metyl-a-L-idopyranosyluronatJ-ttl^-O^S.e-di-0-acetyl-2-0-benzyl-a-D-glukopyranosyl)-(1-4)-0-(2,3-di-0-metyl-a-L-benzyl-idopyranosyluronat)]3-2,3,6-tri-0-benzyl-a-D-glukopyranosid (27)
Forbindelse 26 (275 mg; 100 umol) blir behandlet i henhold til metode 1 for å gi 27 (265 mg; 96%); [ct]D + 27 (c = 0,56, diklormetan). LSIMS, positiv modus: m/z tioglycerol + NaCI, 2673 (M+Na)<+>; tioglycerol + KF, 2689 (M+K)<+>.
<1>H NMR (CDCI3) 8 : 5,26; 5,15; 5,10; 5,08; 4,89; 4,88; 4,55.
PREPARAT 24
Metyl-(1-4)-0-(benzyl 4-0-levulinyl-2,3-di-0-metyl-a-L-idopyranosyluronat)-[(1-4)-0-{3,6-di-0-acetyl-2-0-bGnzyl-a-D-glukopyranosyl)-(1-4)-0-(benzyl-2,3-di-0-metyl-a-L-idopyranosyluronat)]5-2,3,6-tri-0-benzyl-a-D-glukopyranosid
(28)
En blanding av 27 (97,3 mg; 36 umol) og av 25 (83,8 mg, 55 umol) blir behandlet i henhold til metode 3. Kolonnekromatografi (cykloheksan-aceton 2:1, deretter 7:4, deretter 3:2) gir ren 28 (102 mg; 69%). [ a] o + 22 (c = 0,51, diklormetan). TLC, RF 0,18, 3:2 cykloheksan-aceton.
<1>H NMR (CDCI3) 8 : 5,26; 5,14; 5,10; 5,08; 4,93; 4,92; 4,90; 4,56.
PREPARAT 25
Metyl-(1-4)-0-(benzyl-2,3-di-0-metyl-a-L-idopyranosyluronat)-[(1-4)-0-(3,6-di-0-acetyl-2-0-benzyl-a-D-glukopyranosyl)-(1-4)-0-(benzyl-2,3-di-0-metyl-a-L-idopyranosyluronat)]5-2,3,6-tri-0-benzyl-a-D-glukopyranosid (29)
Forbindelsen 28 (216 mg; 54 umol) blir behandlet i henhold til metode 1 for å gt 29 (199 mg; 95%). TLC, RF 0,56,1:1 cykloheksan/aceton; RF 0,55, 2:1 toluen/aceton. LSIMS, positiv modus: m/z tioglycerol + NaCI, 3934 (M+Na)<+>; tioglycerol + KF, 3950 (M+K)<+>.
PREPARAT 26
Metyl-(1-4)-0-(benzyl-4-0-levulinyl-2,3-di-0-metyl-a-L-idopyranosyluronat)-[(1-4)-0-(3,6-di-0-acetyl-2-0-benzyl-a-D-glukopyranosyl)-(1-4)-0-(benzyl-2,3-di-0-metyl-a-L-idopyranosyluronat)]7-2,3,6-tri-0-benzyl-a-D-glukopyranosid
(30)
En blanding av 25 (33 mg, 21,4 umol) og 29 (52,4 mg; 13,3 umol) blir behandlet i henhold til metode 2. Kolonnekromatografi (7:4 cykloheksan-aceton) gir ren 30 (43,8 mg; 62%). [<x]D + 19 (c = 0,5, diklormetan). TLC, RF 0,36, 3:2 cykloheksan/aceton. LSIMS, positiv modus: m/z tioglycerol + KF, 5310 (M+K)<+>.
<1>H NMR (CDCI3) 8 av de viktigste anomere protoner: 5,26; 5,14; 5,10; 5,08; 4,92; 4,90; 4,56.
PREPARAT 27
Metyl-(1-4)-0-(benzyl-2,3-di-0-metyl-a-L-idopyranosyluronat)-[(1-4)-0-(3,6-di-0-acetyl-2-0-benzyl-a-glukopyranosyl)-(1-4)-0-{benzyl-2,3-di-0-mGtyl-a-L-idopyranosyluronat)-]7-2,3,6-tri-0-benzyl-a-D-glukopyranosid (31)
Heksadekasakkaridet 30 (100 mg; 19 umol) blir behandlet i henhold til metode 1, for å gi 31 som blir anvendt direkte i de følgende trinn. [<x]d + 20 (c = 0,38, diklormetan). TLC, Rf 0,31,4:3 cykloheksan-aceton. LSIMS, positiv modus: m/z tioglycerol + NaCI, 5196 (M+Na)<+>; tioglycerol + KF, 5212 (M+K)<+>.
PREPARAT 28
Metyl-(1-4)-0-{benzyl-4-0-levulinyl-2,3<li-0-metyl-a-L-idopyranosyluronat)-[{1-4)-0-(3,6-di-O-acetyl-2-0-benzyl-a-D-glukopyranosyl)-(1-4)-O-(benzyl-2,3-di-0-metyl-a-L-idopyranosyluronat)]9-2,3,6-tri-0-benzyl-a-D-glukopyranosid
(32)
En blanding av 25 (31 mg; 21,7 umol) og 31 (94,5 mg, 18,3 umol) blir behandlet i henhold til metode 3, hvilket ga 32 etter mange kolonnekromatografiske trinn (29,2 mg; 25%). [a]D + 22 (c = 0,33, diklormetan). TLC, RF 0,26; 4:3 cykloheksan/aceton. <1>H NMR (CDCI3) 8 for de viktigste anomere protoner: 5,26; 5,14; 5,10; 5,09; 4,92; 4,91; 4,90; 4,56 ppm.
EKSEMPEL 1
Metyl-(1-4)-0-(2,3-d i-O-mety I-4-0-s ulfo-a-L-idopy ran osy I uronsyre)-[(1-4)-O-(2,3,6-tn-0-sulfo-a-D-glukopyranosyl)-(1-4)-0-(2,3-di-0-metyl-a-L-idopyrano-syluronsyre)]9-2,3,6-tri-0-sulfo-a-D-glukopyranosid, natriumsalt (33)
Forbindelse 32 blir behandlet i henhold til metode 4, hvilket ga 33 (60% over de tre trinn), [afo + 27 (c = 0,4, D20); ESIMS, negativ modus: eksperimentell masse = 7077,3 a 3,2 a.m.u.
<1>H NMR (D20) 8 viktigste anomere protoner: 8 5,41; 5,40; 5,15; 5,09; 5,07; 5,06 ppm.
Ved å gå frem i henhold til EKSEMPEL 1 og i henhold til SKJEMA 1 ovenfor, blir forbindelser 34 til 38 (EKSEMPLER 2 til 6), beskrevet i TABELL I nedenfor, fremstilt.
EKSEMPEL 7
Metyl-{1-4)-0-(2,3-di-0-metyl-4-0-sulfo-p-D-glukopyranosyluronsyre)-[(1-4)-0-(2,3,6-tri-0-sulfo-a-D-glukopyranosyl)-{1-4)-0-{2,3-di-0-metyl-p-D-gluko-pyranosyluronsyre)]4-2,3,6-tri-0-sulfo-a-D-glukopyranosid, natriumsalt (39)
Glykosyl-donor-disakkaridet og glykosyl-akseptor-disakkaridet
blir fremstilt i henhold til metodene beskrevet i Westerduin et al., BioOrg. Med. Chem., 2,1994,1267, deretter kombinert som beskrevet under fremstilling av 34. Det resulterende dekasakkarid blir behandlet i henhold til metode 4, for å gi 39.
[<x]D + 45 (c = 1, H20). <1>H NMR (D20) 6 av de viktigste anomere protoner: 5,53; 5,18; 4,65; 4,63 ppm.
Ved å følge fremgangsmåten i henhold til EKSEMPEL 7 og i henhold til SKJEMA 1 ovenfor, blir forbindelse 40 (EKSEMPEL 8), beskrevet i TABELL II nedenfor, fremstilt.
EKSEMPEL 9 Metyl-(1^)-0-(3-0-metyl-2,4-di-0-sulfo-a-L-idopyranosyluronsyre)-[(1-4)-0-{3-0-metyl-2,6-di-0-sulfo-a-D-glukopyranosyl)-(1-4)-0-(3-0-metyl-2-0-sulfo-a-L-idopyranosyluronsyre)]4-3-0-metyl-2,6-di-0-sulfo-a-D-glukopyranosid, natriumsalt (41) Disakkarid-syntonet (TLC, Rf 0,54,1:1 cykloheksan/EtOAc) blir behandlet som beskrevet for 12, for å gi glykosyl-donor-imidatet og akseptoren
[<1>H NMR (CDCI3) 5 8,00-7,15 (m, 20H, 4Ph), 5,15 (d, 1H, H-1"), 4,57 (d, 1H, H-1), 3,48; 3,47; 3,32 (3s, 3 OCH3)].
Disse tre syntoner blir deretter kombinert som er beskrevet for fremstilling av 34. Det resulterende dekasakkarid blir deretter behandlet i henhold til metode 4, for å gi 41.
[<x]d + 17 (c = 1, H20). <1>H NMR (D20) 5 for de viktigste anomere protoner: 5,36; 5,34; 5,13; 5,11; 5,09; 5,05 ppm.
Ved å gå frem i henhold til EKSEMPEL 9 og i henhold til SKJEMA 1 ovenfor, blir forbindelsene 42 og 43 (EKSEMPEL 10 og 11), beskrevet i TABELL III nedenfor, fremstilt.
EKSEMPEL 12 Metyl-(1-4)-0-(3-0-metyl-2,4-di-0-sulfo-B-D-gIukopyranosyluronsyre)-[(1-4)-O-(3-0-metyl-2,6-di-0-sulfo-a-D-glukopyranosyl)-(1-4)-O-(3-0-metyl-2-0-sulfa-p-D-glukopyranosyIuronsyre)]4-3-0-metyl-2,6-di-0-$utfo-a-D-glukopyranosid, natriumsalt (44) Disakkarid-syntonene blir fremstilt og deretter forenet som beskrevet for 34. Det oppnådde dekasakkarid behandlet i henhold til metode 4 gir 44: [a]D + 25 (c = 0,2, H20). 'H NMR (D20) 6 av de viktigste anomere protoner: 5,47; 5,07; 4,74; 4,71; 4,70 ppm.
EKSEMPEL 13
Metyl-(1-4)-0-(3-0-metyl-2,4-di-0-sulfo-a-L-idopyranosyluronsyre)-[(1-4)-0-(-0-metyl-2,6-di-0-sulfo-a-D-glukopyranosyl)-(1-4)-0-(3-0-metyl-2-0-sulfo-a-L-idopyranosyluronsyre)]2-(1-4)-0-(2,3,6-tri-0-sulfo-a-D-glukopyranosyl)-(1-4)-0-(3-0-metyl-2-0-sulfo-a-L-idopyranosyluronsyre)-3-0-metyl-2,6-di-0-sulfo-a-D-glukopyranosid, natriumsalt (45)
Glykosyl-donoren 15 og glykosyl-akseptoren forenet i henhold til metode 3, gir tetrasakkaridet Etter spaltning av Lev-gruppen (metode 1) og gjentatt omsetning med det følgende glykosyl-donor-disakkarid, i henhold til prinsippet beskrevet i Skjema 1,
oppnås den fullstendig beskyttede forløper for 45, som blir behandlet i henhold til metode 4, for å gi 45.
<1>H NMR (D20) 5 (ppm) [600 MHz] for de viktigste anomere protoner: 5,35; 5,33; 5,30; 5,22; 5,21; 5,18; 5,15; 4,98.
Ved å gå frem i henhold til EKSEMPEL 13 og i henhold til SKJEMA 1 ovenfor, med utgangspunkt i fullstendig beskyttede oligosakkarid-forløpere, blir forbindelse 46 (EKSEMPEL 14), beskrevet i TABELL IV nedenfor, fremstilt.

Claims (24)

1. Syntetisk polysakkarid inneholdende fra 8 til 24 monosakkaridenheter dannet ved en sekvens av disakkarider dannet fra en uronsyre og fra en heksose, karakterisert ved at alle polysakkaridets hydroksylgrupper er foretret med en (Ci-C6)-alkyl gruppe eller forestret i form av en sulfogruppe, idet hvert disakkarid er minst monoforetret; samt dets salter.
2. Salt ifølge krav 1, dannet fra et anion og et kation, samt den tilsvarende syre, karakterisert ved at anionet har formelen hvor bølgelinjen indikerer enten en binding nedenfor eller ovenfor planet i pyranoseringen; Ri, Re, Rn og R16 er et {Ci-C6)-alkyl; R2, R3, R4, R5, R?, Ra, Rg, R10, R12, R13, Ri4, R15 og R17 er et (d-CeJ-alkyl eller en SOY-gruppe; m, n og p er slik at summen m + n + p er større enn eller lik 4 og mindre enn eller lik 12, idet én eller to av de tre kan være null; idet kationet er et farmasøytisk godtagbart monovalent kation.
3. Salt ifølge krav 2, karakterisert ved at kationet er valgt fra kationene av alkalimetaller, spesielt natrium og kalium.
4. Salt så vel som den tilsvarende syre ifølge ett av kravene 2 eller 3, karakterisert ved atalkylgruppeneermetylgrupper.
5. - Salt så vel som den tilsvarende syre ifølge ett av kravene 2 eller 3, karakterisert ved at n og p er lik null.
6. Salt så vel som den tilsvarende syre ifølge ett av kravene 2 eller 3, karakterisert ved at n og per lik null og mer 4 till 0.
7. Salt så vel som den tilsvarende syre ifølge ett av kravene 2 eller 3, karakterisert ved at n og p er lik null, m er 4 til 10; minst én av substituentene R12, R13, Ru og R15 er en sulfatgruppe; Ri, R16 og R17 er som definert for (I).
8. Salt så vel som den tilsvarende syre ifølge ett av kravene 2 eller 3, karakterisert ved at n og p er lik null, m er 4 til 10; minst to av substituentene R12, R13, Ru og R15 er en sulfatgruppe; Ri, Ri6 og R17 er som definert for (I).
9. Salt så vel som den tilsvarende syre ifølge ett av kravene 2 eller 3, karakterisert ved at n og p er lik null, m er 4 til 10; minst tre av substituentene Ri2, R13, R14 og R15 er en sulfatgruppe; R1f Ris og R17 er som definert for (I).
10. Salt så vel som den tilsvarende syre ifølge krav 2 eller 3, karakterisert ved at dets anion har formelen (1,1) hvor m er 4 til 10; Ri, R15, R16 og R17 er som definert for (I), hver uronsyre er enten en iduron- eller glukuronsyre.
11. Salt så vel som den tilsvarende syre ifølge ett av kravene 2 eller 3, karakterisert ved at dets anion har formelen (1,2) hvor m er 4 til 10, n og p er som definert i krav 2; Rl R15i R16 og R17 er som definert for (I), hver uronsyre er enten en iduron- eller glukuronsyre.
12. Salt så vel som den tilsvarende syre ifølge krav 2 eller 3, karakterisert ved at dets anion har formelen (1,3) hvor m er 2 eller 3; Ri, R12, R13, Ru, R15, Rie og R17 er som definert for (I), hver uronsyre er enten en iduron- eller glukuronsyre.
13. Salt ifølge krav 12, karakterisert ved atRier metyl, R13 i stilling 3 på glukosen er metyl, R12 i stilling 2 og Ru i stilling 6 på glukosen er S03~, og Ri6 i stilling 3 på iduron- eller glukuronenheten er metyl, idet m er lik 2 eller 3.
14. Salt av et polysakkarid ifølge krav 3, karakterisert ved at det er valgt fra metyl-(1-4)-0-(2,3-di-0-metyl-4-0-sulfo-a-L-idopyranosyluronsyre)-[(1-4)-0- (2,3,6-tri-0-sulfo-a-D-glukopyranosyl)-(1^)-0-(2,3-di-0-metyl-a-L-idopyra-nosyluronsyre)]g-2,3,6-tri-0-sulfo-a-D-glukopyranosid, natriumsalt, metyl-(1-4)-0-{2,3-di-0-metyl-4-0-sulfo-a-L-idopyranosyluronsyre)-[(1-4)-0- (2,3,6-tri-0-sulfo-a-D-glukopyranosyl)-(1-4)-0-<2,3-di-0-metyl-a-L-ido-pyranosyluronsyre)]4-2,3,6-tri-0-sulfo-a-D-glukopyranosid, natriumsalt, metyl-(1 -4)-0-(2,3-di-0-metyl-4-0-sulfo-a-L-idopyranosyluronsyre)-[(1 -4)-0- (2,3,6-tri-0-sulfo-a-D-glukopyranosyl)-(1-4)-0-(2,3-di-0-metyl-a-L-ido-pyranosyluronsyre)]5-2,3,6-tri-0-sulfo-a-D-glukopyranosid, natriumsalt, metyl-(1-4)-0-(2,3-di-0-metyl-4-0-sulfo-a-L-idopyranosyluronsyre)-[(1-4)-0- (2,3,6-tir-0-sulfo-a-D-glukopyranosyl)-(1-4)-0-(2,3-di-0-metyl-a-L-ido-pyranosyluronsyre)]6-2,3,6-tri-0-sulfo-a-D-glukopyranosid, natriumsalt, metyl-(1-4)-0-(2,3-di-0-metyl-4-0-sulfo-a-L-idopyranosyluronsyre)-[(1-4)-0- (2,3,6-tri-0-sulfo-a-D-glukopyranosyl)-(1-4)-0-(213-di-0-metyl-a-L-ido-pyranosyluronsyre)]7-2,3,6-tir-0-sulfo-a-D-glukopyranosid, natriumsalt, metyl-(1-4)-0-{2,3-di-0-metyl-4-0-sulfo-a-L-idopyranosyluronsyre)-[(1-4)-0- (2,3,6-tri-0-sulfo-a-D-glukopyranosyl)-(1-4)-0-(2,3-di-0-metyl-a-L-ido-pyranosyluronsyre)]8-2,3,6-tri-0-sulfo-a-D-glukopyranosid, natriumsalt, metyl-(1 -4)-0-(2,3-di-0-metyl-4-0-sulfo-B-D-glukopyranosyluronsyre)-[(1 -4)- 0-(2,3,6-tri-0-sulfo-a-D-glukopyranosyl)-(1-4)-0-(2,3-di-0-metyl-p-D-gluko-pyranosyluronsyre)]4-2,3,6-tri-0-sulfo-a-D-glukopyranosid, natriumsalt, metyl-(1 -4)-0-(2,3-di-0-metyl-4-0-sulfo-p-D-glukopyranosyluronsyre)-[(1 -4)- 0-{2,3,6-tri-0-sulfo-a-D-glukopyranosyl)-(1-4)-0-(2,3-di-0-metyl-p-D-gluko-pyranosyluronsyre)]3-2,3,6-tri-0-sulfo-a-D-glukopyranosid, natriumsalt, metyl-( 1 -4)-0-(3-0-metyl-2,4-di-O-sulfo-a-L-idopyranosylu ronsyre)-[( 1 -4)-0- (3-0-metyl-2,6-di-0-sulfo-a-D-glukopyranosyl)-(1-4)-0-(3-0-metyl-2-0-sulfo-a-L-idopyranosyluronsyre)]4-3-0-metyl-2,6-di-0-sulfo-a-D-glukopyranosid, natriumsalt, metyl-{1-4)-0-(3-0-metyl-2,4-di-0-sulfo-a-L-idopyranosyluronsyre)-[(1-4)-0- (3-0-metyl-2,6-di-0-sulfo-a-D-glukopyranosyl)-(1-4)-0-(3-0-metyl-2-0-sulfo-a-L-idopyranosyluronsyre)]3-3-0-metyl-2,6-di-0-sulfo-a-D-glukopyranosid, natriumsalt, metyl-(1-4)-0-(3-0-metyl-2,4-di-0-sulfo-a-L-idopyranosyluronsyre)-[(1-4)-0- (3-0-metyl-2,6-di-0-sulfo-a-D-glukopyranosylH1-4)-0-(3-0-metyl-2-0-sulfo-a-L-idopyranosyluronsyre)]5-3-0-metyl-2,6-di-0-sulfo-a-D-glukopyranosid, natriumsalt, metyl-(1-4)-0-(3-0-metyl-2,4-di-0-sulfo-p-D-glukopyranosyluronsyre)-[(1-4)- 0-(3-0-metyl-2,6-di-0-sulfo-a-D-glukopyranosyl)-(1-4)-0-(3-0-rnetyl-2-0-sulfo-p-D-glukopyranosyluronsyre)]4-3-0-metyl-2,6-di-0-sulfo-a-D-glukopyranosid, natriumsalt, metyl-(1-4)-0-{3-0-metyl-2,4-di-0-sulfo-a-L-idopyranosyluronsyre)-[{1-4)-0- (3-0-metyl-2,6-di-0-sulfo-a-D-glukopyranosyl)-(1-4)-0-(3-0-metyl-2-0-sulfo-a-L-idopyranosyluronsyre)]2-0-(2,3,6-tri-0-sulfo-a-D-glukopyranosyl)-(1-4)-0-(3-(1-4}-0-metyl-2-0-sulfo-a-L-idopyranosyluronsyre)-3-0-metyl-2,6-di-O-sulfo-a-D-glukopyranosid, natriumsalt, og metyl-(1-4)-0-(3-0-metyl-2,4-di-0-sulfo-a-L-idopyranosyluronsyre}-[(1-4}-0- (3-0-metyl-2,6-di-0-sulfo-a-D-glukopyranosyl)-(1-4)-0-(3-0-metyl-2-0-sulfo-a-L-idopyranosyluronsyre)]3-(1-4)-0-{2,3,6-tri-0-sulfo-a-D-glukopyra-nosyl)-(1-4)-0-(3-0-metyl-2-0-sulfo-a-L-idopyranosyluronsyre)-3-0-metyl-2,6-di-O-sulfo-a-D-glukopyranosid, natriumsalt.
15. Fremgangsmåte for fremstilling av forbindelsene med formel (I) ifølge krav 2, karakterisert ved at (a) et glykosidisk forbindelses-donor-monosakkarid kobles til et glykosidisk forbindelses-akseptor-monosakkarid i henhold til de klassiske metoder i sukkerkjemien for å oppnå et mellomprodukt-sakkarid-synton av fullstendig beskyttet disakkarid-type med formel (A): hvor de identiske eller forskjellige substituenter Ti, T2, T3, T4, T5, Te, T7 og Z velges fra de beskyttende grupper anvendt i sukkerkjemien som permanente, semi-permanente eller temporært beskyttende grupper, (b) disakkaridet med formel (A) ovenfor blir modifisert kjemisk slik at det oppnås et mellomprodukt-sakkarid-synton av glykosidisk forbindelses-donor-disakkarid-type med formel (B): hvor T2 til T7 og Z er som definert ovenfor for (A), og X er en aktiverende gruppe i det anomere karbon, deretter (c) modifiseres disakkaridet med formel (A) ovenfor kjemisk slik at det oppnås et mellomprodukt-sakkarid-synton av glykosid-forbindelses-akseptor-disakkarid-type med formel (C): hvor Ti til T7 er som definert for (A), ved selektiv eliminering av den beskyttende gruppe Z i henhold til klassiske metoder i sukkerkjemien, deretter (d) kobles et glykosidisk forbindelses-donor-disakkarid med formel (B) oppnådd ovenfor og et glykosidisk forbindelses-akseptor-disakkarid med formel (C) oppnådd ovenfor, slik at det oppnås et fullstendig beskyttet tetrasakkarid med formel (D) hvor Ti til T7 og Z er som definert ovenfor for (A) og Te, Tg, T10, T11t T12 og T13 er som definert for T2 til T7.derett.er (e) modifiseres mellomprodukt-sakkarid-syntonet av tetrasakkarid-type med formel (D) kjemisk slik at det oppnås et mellomprodukt-sakkarid-synton av glykosidisk forbindelses-donor-tetrasakkarid-type med formel (E) hvor X har den samme definisjon som for (B) og T2 til T13 er som definert for (D), deretter, (f) avbeskyttes tetrasakkaridet med formel (D) selektivt slik at det oppnås et glykosidisk forbindelses-akseptor-tetrasakkarid med formel (F): hvor Ti til Ti3 er så som definert ovenfor for (D), deretter (g) kobles det glykosidiske forbindelses-akseptor-tetrasakkarid med formel (F) og et glykosidisk forbindelses-donor-disakkarid med formel (B) så som de oppnådd ovenfor, for å danne et mellomprodukt-synton av fullstendig beskyttet heksasakkarid-type med formel (G): hvor Ti til T13 er som definert ovenfor for (D) og Tu til T19 er som definert for T2 til T7 for (B), eller ellers kobles det glykosidiske forbindelses-akseptor-tetrasakkarid med formel (F) og et glykosidisk forbindelses-donor-tetrasakkarid med formel (E) slik at det oppnås et fullstendig beskyttet oktasakkarid med formel (H): hvor Ti til T19 og Z er som definert tidligere og T20 til T25 er som definert for T2 til T7 for (B), deretter, (h) modifiseres heksasakkaridet med formel (G) eller oktasakkaridet med formel (H) oppnådd ovenfor kjemisk, slik at det oppnås et mellomprodukt-synton av glykosidisk forbindelses-akseptor-heksasakkarid-type med formel (G) hvor Z er hydrogen, eller ellers et glykosidisk forbindelses-akseptor-oktasakkarid med formel (H) hvor Z er hydrogen, (i) de ovenfor angitte avbeskyttelses- og koblingstrinn gjentas inntil det fullstendig beskyttede oligosakkarid som har den ønskede struktur blir oppnådd, idet glykosyl-donor- og glykosyl-akseptor-mellomprodukt-sakkarid-syntonene velges som en funksjon av den endelige struktur, slik at det således oppnås den beskyttede forløper for det ønskede endelige polysakkarid med formel (I), hvor naturen av de beskyttende grupper Ti bestemmer stillingen av alkyl- og sulfatgruppene på sluttproduktet (I), og (j) avbeskyttelsen av alkoholfunksjonene som må sulfateres blir utført ved eliminering av substituentene Ti til T25 som beskyttet funksjonene under for-løpet av trinnene for utforming av skjelettet, og til sist (k) gjennomføres sulfateringen for å oppnå forbindelsene (I) eller et av deres salter.
16. Farmasøytiske preparater, karakterisert ved de som aktiv bestanddel inneholder et polysakkarid eller salt ifølge hvilket som helst av kravene 1 til 14, i saltform med en farmasøytisk godtagbar base eller i syreform, i kombinasjon eller som en blanding med en inert, ikke-toksisk, farmasøytisk godtagbar eksipient.
17. Farmasøytisk preparat ifølge krav 16, karakterisert ved at det er i form av doseenheter, hvor den aktive bestanddel er blandet med minst én farmasøytisk eksipient.
18. Preparat ifølge krav 17, karakterisert ved at hver doseenhet inneholder fra 0,1 til 100 mg aktiv bestanddel.
19. Preparat ifølge krav 18, karakterisert ved at hver doseenhet inneholder fra 0,5 til 50 mg aktiv bestanddel.
20. Farmasøytisk preparat, karakterisert ved at det inneholder et polysakkarid eller salt ifølge krav 1 til 14, i kombinasjon med en annen antitrombotisk eller antikoagulant aktiv bestanddel, blodlegeme-aggregerings-inhibitor eller antagonist av glykoprotein-llb/llla-komplekset.
21. Farmasøytisk preparat ifølge krav 20, karakterisert ved at de samlede aktive bestanddeler omfatter et polysakkarid eller dets salt ifølge kravene 1 til 14, dipyridamol, aspirin, ticlopidin eller clopidogrel.
22. Anvendelse av polysakkaridene og saltene ifølge krav 1 til 14, for fremstilling av en medisin nyttig i patologier avhengig av en koagulerings-dysfunksjon.
23. Anvendelse av polysakkaridene og saltene ifølge krav 1 til 14, for fremstilling av en medisin nyttig for hemningen av vekstfaktorer og som er vist ved en hemning av celleproliferasjon.
24. Anvendelse av polysakkaridene og saltene ifølge krav 1 til 14, for fremstilling av en medisin som har antivirale, hypolipidemiske, anti-fri-radikale, antimetastasiske, antiangiogeniske eller anti-inflammatoriske egenskaper.
NO19985831A 1996-06-14 1998-12-11 Syntetiske polysakkarider, fremgangsmater for a fremstille dem og farmasoytiske blandinger inneholdende nevnte polysakkarider NO319037B1 (no)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR9607457A FR2749849B1 (fr) 1996-06-14 1996-06-14 Polysaccharides synthetiques, procede pour leur preparation et compositions pharmaceutiques les contenant
PCT/FR1997/001048 WO1997047659A1 (fr) 1996-06-14 1997-06-11 Polysaccharides synthetiques, procede pour leur preparation et compositions pharmaceutiques les contenant

Publications (3)

Publication Number Publication Date
NO985831D0 NO985831D0 (no) 1998-12-11
NO985831L NO985831L (no) 1999-02-11
NO319037B1 true NO319037B1 (no) 2005-06-06

Family

ID=9493087

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO19985831A NO319037B1 (no) 1996-06-14 1998-12-11 Syntetiske polysakkarider, fremgangsmater for a fremstille dem og farmasoytiske blandinger inneholdende nevnte polysakkarider

Country Status (15)

Country Link
US (1) US7919614B2 (no)
EP (1) EP0904299B1 (no)
JP (1) JP3501813B2 (no)
AT (1) ATE204883T1 (no)
AU (1) AU3266797A (no)
BR (1) BR9709722B1 (no)
CA (1) CA2258146C (no)
CY (1) CY2281B1 (no)
DE (1) DE69706418T2 (no)
DK (1) DK0904299T3 (no)
ES (1) ES2163171T3 (no)
FR (1) FR2749849B1 (no)
NO (1) NO319037B1 (no)
PT (1) PT904299E (no)
WO (1) WO1997047659A1 (no)

Families Citing this family (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2751334B1 (fr) * 1996-07-19 1998-10-16 Sanofi Sa Polysaccharides synthetiques, procede pour leur preparation et compositions pharmaceutiques les contenant
FR2773804B1 (fr) * 1998-01-19 2000-02-18 Sanofi Sa Polysaccharides de synthese, procede pour leur preparation et compositions pharmaceutiques le contenant
EP1574516A1 (en) * 2004-03-05 2005-09-14 Sanofi-Aventis Antithrombotic compound
JP4796758B2 (ja) * 2004-08-24 2011-10-19 学校法人 京都産業大学 組成物及びそれを含有する抗腫瘍剤
TWI403334B (zh) 2004-12-23 2013-08-01 Merck Sharp & Dohme 包含生物素殘基之抗血栓雙重抑制劑
WO2009155108A1 (en) * 2008-05-30 2009-12-23 Momenta Pharmaceuticals, Inc. Saccharide structures and methods of making and using such structures
FR2949114B1 (fr) * 2009-08-14 2011-08-26 Sanofi Aventis OCTASACCHARIDES N-ACYLES ACTIVATEURS DES RECEPTEURS DES FGFs, LEUR PREPARATION ET LEUR APPLICATION EN THERAPEUTIQUE
FR2949115B1 (fr) 2009-08-14 2012-11-02 Sanofi Aventis OLIGOSACCHARIDES N-SULFATES ACTIVATEURS DES RECEPTEURS DES FGFs, LEUR PREPARATION ET LEUR APPLICATION EN THERAPEUTIQUE
FR2970969B1 (fr) * 2011-01-27 2013-10-18 Sanofi Aventis Oligosaccharides 3-o-alkyles activateurs des recepteurs des fgfs, leur preparation et leur application en therapeutique
EP2578594A1 (en) * 2011-10-04 2013-04-10 Sanofi Process of preparation of L-iduronic acid comprising a decarboxylation/intramolecular cyclisation tandem reaction
WO2021211441A1 (en) * 2020-04-13 2021-10-21 The Board Of Regents Of The University Of Oklahoma Modified sugar polymers with low anticoagulant activity and therapeutic activity

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5382570A (en) * 1990-04-23 1995-01-17 Akzo, N.V. Sulfated glycosaminoglycanoid derivatives of the dermatan sulfate and chondroitin sulfate type
US5378829A (en) * 1990-04-23 1995-01-03 Akzo N.V. Sulfated glycosaminoglycanoid derivatives of the heparin and heparan sulfate type
US5529985A (en) * 1990-04-23 1996-06-25 Akzo Nobel Nv Sulfated glycosaminoglycanoid derivatives of the dermatan sulfate and chondroitin sulfate type
US5668274A (en) * 1991-04-23 1997-09-16 Akzo Nobel N.V. Sulfated glycosaminoglycanoid derivatives of the dermatan sulfate and chondroitin sulfate type

Also Published As

Publication number Publication date
ES2163171T3 (es) 2002-01-16
PT904299E (pt) 2002-02-28
EP0904299B1 (fr) 2001-08-29
FR2749849B1 (fr) 1998-09-04
JPH11513061A (ja) 1999-11-09
WO1997047659A1 (fr) 1997-12-18
NO985831L (no) 1999-02-11
US20040068108A1 (en) 2004-04-08
DE69706418D1 (de) 2001-10-04
DK0904299T3 (da) 2001-12-17
CA2258146C (fr) 2003-10-07
DE69706418T2 (de) 2002-05-29
FR2749849A1 (fr) 1997-12-19
JP3501813B2 (ja) 2004-03-02
NO985831D0 (no) 1998-12-11
BR9709722A (pt) 2000-01-25
ATE204883T1 (de) 2001-09-15
AU3266797A (en) 1998-01-07
CY2281B1 (en) 2003-07-04
CA2258146A1 (fr) 1997-12-18
BR9709722B1 (pt) 2010-12-14
US7919614B2 (en) 2011-04-05
EP0904299A1 (en) 1999-03-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR100311857B1 (ko) 합성 폴리사카라이드, 그의 제조방법 및 그를 함유하는 약학적 조성물
KR20030055269A (ko) 바이오틴 또는 바이오틴 유도체와의 1 이상의 공유 결합을포함하는 항혈전 활성이 있는 다당류
JP4402835B2 (ja) 合成多糖類、それらの製造法およびそれらを含む医薬組成物
JP4364959B2 (ja) 炭水化物誘導体
NO319037B1 (no) Syntetiske polysakkarider, fremgangsmater for a fremstille dem og farmasoytiske blandinger inneholdende nevnte polysakkarider
KR100533565B1 (ko) 신규한 오당류, 이의 제조방법 및 이를 포함하는 제약 조성물
AU711630B2 (en) Carbohydrate derivatives
EP1694714B1 (en) Low molecular weight polysaccharides having antithrombotic activity
US5529985A (en) Sulfated glycosaminoglycanoid derivatives of the dermatan sulfate and chondroitin sulfate type

Legal Events

Date Code Title Description
MK1K Patent expired