NO301423B1 - Analogifremgangsmåte for fremstilling av inhibitorer av purin nukleosid fosforylase - Google Patents

Analogifremgangsmåte for fremstilling av inhibitorer av purin nukleosid fosforylase Download PDF

Info

Publication number
NO301423B1
NO301423B1 NO921679A NO921679A NO301423B1 NO 301423 B1 NO301423 B1 NO 301423B1 NO 921679 A NO921679 A NO 921679A NO 921679 A NO921679 A NO 921679A NO 301423 B1 NO301423 B1 NO 301423B1
Authority
NO
Norway
Prior art keywords
substituted
compound
pyrrole
amino
pyrimidin
Prior art date
Application number
NO921679A
Other languages
English (en)
Other versions
NO921679D0 (no
NO921679L (no
Inventor
Iii John A Secrist
Mark David Erion
John A Montgomery
Steven E Ealick
Wayne C Guida
Shri Niwas
Original Assignee
Biocryst Pharm Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from US07/429,098 external-priority patent/US4985434A/en
Priority claimed from US07/429,097 external-priority patent/US5008270A/en
Priority claimed from US07/429,100 external-priority patent/US4985433A/en
Priority claimed from US07/429,099 external-priority patent/US5008265A/en
Application filed by Biocryst Pharm Inc filed Critical Biocryst Pharm Inc
Publication of NO921679D0 publication Critical patent/NO921679D0/no
Publication of NO921679L publication Critical patent/NO921679L/no
Publication of NO301423B1 publication Critical patent/NO301423B1/no

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C255/00—Carboxylic acid nitriles
    • C07C255/01—Carboxylic acid nitriles having cyano groups bound to acyclic carbon atoms
    • C07C255/31—Carboxylic acid nitriles having cyano groups bound to acyclic carbon atoms having cyano groups bound to acyclic carbon atoms of a carbon skeleton containing rings other than six-membered aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C255/00—Carboxylic acid nitriles
    • C07C255/01—Carboxylic acid nitriles having cyano groups bound to acyclic carbon atoms
    • C07C255/32—Carboxylic acid nitriles having cyano groups bound to acyclic carbon atoms having cyano groups bound to acyclic carbon atoms of a carbon skeleton containing at least one six-membered aromatic ring
    • C07C255/35—Carboxylic acid nitriles having cyano groups bound to acyclic carbon atoms having cyano groups bound to acyclic carbon atoms of a carbon skeleton containing at least one six-membered aromatic ring the carbon skeleton being further substituted by halogen atoms, or by nitro or nitroso groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C255/00—Carboxylic acid nitriles
    • C07C255/01—Carboxylic acid nitriles having cyano groups bound to acyclic carbon atoms
    • C07C255/32—Carboxylic acid nitriles having cyano groups bound to acyclic carbon atoms having cyano groups bound to acyclic carbon atoms of a carbon skeleton containing at least one six-membered aromatic ring
    • C07C255/40—Carboxylic acid nitriles having cyano groups bound to acyclic carbon atoms having cyano groups bound to acyclic carbon atoms of a carbon skeleton containing at least one six-membered aromatic ring the carbon skeleton being further substituted by doubly-bound oxygen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C255/00—Carboxylic acid nitriles
    • C07C255/01—Carboxylic acid nitriles having cyano groups bound to acyclic carbon atoms
    • C07C255/32—Carboxylic acid nitriles having cyano groups bound to acyclic carbon atoms having cyano groups bound to acyclic carbon atoms of a carbon skeleton containing at least one six-membered aromatic ring
    • C07C255/42—Carboxylic acid nitriles having cyano groups bound to acyclic carbon atoms having cyano groups bound to acyclic carbon atoms of a carbon skeleton containing at least one six-membered aromatic ring the carbon skeleton being further substituted by singly-bound nitrogen atoms, not being further bound to other hetero atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/30—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D207/34—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms

Description

Foreliggende oppfinnelse vedrører en analogifremgangsmåte for fremstilling av en forbindelse som er en purin nukleosid fosforylase inhibitor.
Purin nukleosid fosforylase (PNP) katalyserer fosforolyse av purin nukleosider i en reversibel reaksjon. Individer som mangler PNP utviser svekket T-celle utvikling som resulterer i lavere celleformidlet immunitet, men normal B-celle utvikling som resulterer i normal humoral immunitet. Spesifikke inhibitorer av PNP som selektivt inhiberer T-celle utviklingen uten å skade den humorale immuniteten kan være potensiell effektiv overfor forstyrrelser der aktiverte T-celler er patogene.
Foreliggende oppfinnelse vedrører følgelig en analogifremgangsmåte for fremstilling av en forbindelse som er en purin nukleosidfosforylase inhibitor valgt fra gruppen bestående av 2-amino-7-(R)-3H,5H-pyrrblo[3,2-d]pyrimidin-4-one (I) og en forbindelse med formel II
hvor for forbindelse I er R cykloheksyl, cykloheksenyl eller
-CH2-R1, og hvor R^er en med laverealkyl eller trifluormetyl substituert eller usubstituert C^Cg-cykloalkyl eller cykloalkenylgruppe, en tetrahydrofuranylgruppe, en adamantyl-gruppe eller en pyridylgruppe og hvori forbindelsen med formel II er R;^ H, NH2eller SCH3, R<2>er en evt. med ett eller flere halogenatomer substituert fenylgruppe eller er en
C4-Cg-cykloalkylgruppe, m er 0-4, X er OH CN, karboksy laverealkoksykarbonyl eller aminokarbonyl, kjennetegnet ved fremstilling av forbindelsen I hvori R er cykloheksenyl eller -CZtø-Ri når R^er pyridinyl eller alicyklisk gruppe omfatter følgende trinn 1) til 7): 1) omsetning av en 3-substituert propannitril med en alkylformat og en base for å danne en 3-cyklo-2-formyl-propannitril; 2) omsetning av 2-formyl-3-substituert propannitril med glycinmetylesterhydroklorid og natrium eller ammoniumacetat for å danne tilsvarende enamin; 3) omsetning av enaminet med en alkylklorformat og DBN eller DBU for å danne tilsvarende N-blokkerte pyrrol; 4) omsetning av N-blokkert pyrrol med en base for å danne tilsvarende deblokkerte pyrrol; 5) omsetning av deblokkert pyrrol med benzoylisotiocyanat for å danne tilsvarende tioureido forbindelse; 6) omsetning av tioureido forbindelsen, med et alkylhalid for å danne den tilsvarende metyltioforbindelsen; og 7) omsetning av metyltioforbindelsen med metanolisk eller etanolisk ammoniakk for å danne en blanding av 2-amino-7-(R)-3E,5H-pyrrolo[3,2-d]pyrimidin-4-one forbindelsen (I) og 2-metyltio biproduktet; og når forbindelse I fremstilles hvori R er cykloheksenyl eller -CH2-R1når R^er en cykloalkenylgruppe, trinnene 1) til 7) som definert ovenfor og eventuelt følgende trinn 8: 8) hydrogenering av 2-amino-7-(R)-3H,5H-pyrrolo[3,2-d] pyrimidin-4-one forbindelsen fra trinn 7) til 2-amino-7-(R)-3H,5H-pyrrolo [3,2-d] pyrimidin-4-one; og eventuelt følgende trinn 1) til 9) når forbindelsen I fremstilles hvor R er CEtø-Ri når R^er tetrahydrofuranyl, 1) omsetning av en 3-substituert eller usubstituert furanyl-propannitril med et alkylformat og en base for å danne en 3-substituert eller usubstituert furanyl-2-formyl-propannitril; 2) omsetning av 3-substituert eller usubstituert furanyl-2-formyl-propannitril med glycinmetylesterhydroklorid og natrium eller ammoniumacetat for å danne tilsvarende enamin; 3) omsetning av enaminet med en alkylklorformat og DBN eller DBU for å danne tilsvarende N-blokkerte pyrrol; 4) omsetning av N-blokkert pyrrol med en base for å danne tilsvarende deblokkerte pyrrol; 5) omsetning av deblokkerte pyrrol med benzoylisotiouryanat for å danne tilsvarende tioureido forbindelse; 6) omsetning av tioureido forbindelsen med et alkylhalid for å danne tilsvarende metyltio forbindelse; 7) omsetning av metyltio forbindelsen med metanolisk eller etanolisk ammoniakk for å danne en blanding av 2-amino-7-substituert eller usubstituert furanyl-3H,5E-pyrrol[3,2-d]pyrimidin-4-one forbindelse (I) og 2-metyltiobi-produktet; 8) hydrogenering av 2-amino-7-substituerte eller usubstituerte furanyl-3H,5H-pyrrolol[3,2-d]pyrimidin-4-one forbindelsen fra trinn 7) til 2-amino-7-substituerte eller usubstituerte tetrahydrofuranyl-3H,5B>pyrroi [3,2-d] pyrimidin-4-one; og og hvori ved fremstilling av forbindelse med formel II omfatter følgende trinn: a) omsetning av et eventuelt substituert cyklisk aldehyd med cyanoeddiksyre i nærvær av ammoniumacetat for å danne en 3-substituert pentandinitril; b) omsetning av 3-substituert-pentandinitril med et alkylformat og en base for å danne et 2-formyl-3-substituert-pentandinitril; c) omsetning av 2-formyl-3-substituert-pentandinitril med glycinmetylesterhydroklorid og natrium eller ammoniumacetat for å danne metyl N-[3-substituert-2,4-dicyano)-2-butenyl]glycin; d) omsetning av metyl N-[3-substituert-2,4-dicyano)-2-butenyl]glycin med en alkylklorformat og DBN eller DBU for å danne l-etyl-2-metyl 3-amino-4-substituert lH-pyrrol-1,2-dikarboksylat; og e) omsetning av l-etyl-2-metyl-3-amino-4-substituert-lE-pyrrol-1,2-dikarboksylat med en base for å danne metyl 3-amino-4-substituert-lH-pyrrol-2-karboksylat (i)og følgende trinn f)-h) for fremstilling av 3-substituert-3- [2-amino-4-okso-3H-5H-pyrrolo [3 ,2-d] -pyrimidin-7-yl]-propannitril; f) omsetning av metyl 3-amino-4-substituert-lE-pyrrol-2-karboksylat med benzoylisotiocyanat for å danne N-benzoyl-N' - (2-metoksykarbonyl -4-substituert-lE-pyrrol-3-benzoylisotiocyanat for å danne N-benzoyl-N'-(2-metoksykarbonyl-4- substituert-lE-pyrrol-3-yl)tiourea; g) omsetning av N-benzoyl-N'-[2-metoksykarbonyl-4-substituert-lE-pyrrol-3-yl]tiourea med et alkylhalid for å
fremstille N-benzoyl-N'-2-metoksykarbony1-4-substituert-lE-pyrrol-3-yl]-S-alkyltiourea; og
h) omsetning av N-benzyl-N'-[2-metoksykarbonyl-4-substituert-lE-pyrrol-3-yl]-S-alkyltiourea med metanolisk eller
etanolisk ammoniakk for å danne en blanding av 3-substituert 3-(2-amino-4-okso-3E,5E-pyrrolo[3,2-d]pyrimidin-
7-yl)propannitril og 3-substiutert-3-(2-metyltio-4-okso-3H,5H-pyrrolo[3,2-d]pyrimidin-7-yl)propannitril; (ii) og følgende trinn f)-j) ved fremstilling av 3-substituert-3-[2-alkoksy-4-okso-3E,5H-pyrrolo[3,2-d]pyrimidin-7-yl]propannitril; f) omsetning av metyl 3-amino-4-substituert-lE-pyrrol-2-karboksylat med benzoylisotiocyanat for å danne N-benzoyl-N'-2-metoksykarbonyl-4-substituert-lH-pyrrol-3-yl )tiourea; g) omsetning av N-benzoyl-N'-(2-metoksykarbonyl-4-substituert-lH-pyrrol-3-yl)tiourea med et alkylhalid for å danne N-benzoyl-N'-(2-metoksykarbonyl-4-substituert-lE-pyrrol-3-yl]-S-alkyltiourea; og h) omsetning av N-benzoyl-N'-(2-metoksykarbonyl-4-substituert-lH-pyrrol-3-yl(-S-alkyltiourea med metanolisk eller etanolisk ammoniakk for å danne en blanding av 3-substituert-3-(2-amino-4-okso-3E,5B-pyrrolo[3 ,2-d]pyri-midin-7-yl)propannitril og 3-substituert-3-(2-alkyltio-4-okso-3E,5E-pyrrolo[3,2-d]pyrimidin-7-yl)propannitril; i) omsetning av 3-substituert-3-(2-metyltio-4-okso-3E,5E-pyrrolo[3,2-d]pyrimidin-7-yl)propannitril med et oksi-deringsmiddel for å danne 3-substituert-3-(2-metyl-sulfonyl-4-okso-3H,5H-pyrrolo[3,2-d]pyrimidin-7-yl )propannitril; og j) omsetning av 3-substituert-3-(2-metylsulfonyl-4-okso-3H,5H-pyrrolo[3,2-d]pyrimidin-7-yl]propannitril med natriumalkoksid for å danne 3-substituert-3-(2-alkoksy 4-okso-3H,5H-pyrrolo[3,2-d]pyrimidin-7-yl)propannitril; (ili) og følgende trinn f)-g) ved fremstilling av 3- subst i tuert-3-(4-okso-3E, 5H-pyrrolo[3,2-d] pyr imi din-7-yl)propannitril;
k) omsetning av metyl 3-amino-4-substituert-lE-pyrrol-2-karboksylat med dimetylformamiddimetylacetal for å danne metyl 4-substituert-3-[N-(dimetylaminometylen)amino]-1E-pyrrol-2-karboksylat; og
1) omsetning av metyl 4-substituert-3-[N-(dimetylamino-metylen)amino]-lE-pyrrol-2-karboksylat med metanolisk ammoniakk for å danne 3-substituert-3-(4-okso-3H,5H-pyrrolo[3,2-d]pyrimidin-7-yl)propannitril.
En farmasøytisk sammensetning for selektiv suppressjon av pattedyr T-celle funksjonen uten å redusere virkningen på den humorale immuniteten som omfatter en effektiv mengde av forbindelsen og et farmasøytisk akseptabelt fortynningsmiddel derfor kan fremstilles. Disse er egnede for enteral, såsom oral eller rektal, transdermal og parenteral administrasjon til pattedyr inkludert menneske, og kan inhibere purin nukleosid fosforylaseaktiviteten.
De farmasøytiske sammensetningene kan være tabletter og gelatinkapsler omfattende det aktive ingredienset sammen med a) fortynningsmiddel, f.eks. laktose, dekstrose, sukrose, mannitol, sorbitol, cellulose og/eller glycerin; b) smøremid-ler, f.eks. silika, talkum, stearinsyre, dets magnesium eller kalsiumsalt og/eller polyetylenglykol; for tabletter også c) bindemidler, f.eks., magnesiumalminiumsilikat, stivelsepasta, gelatin, tragakant, metylcellulose, natriumkarboksymetyl-cellulose og/eller polyvinylpyrrolidon; om ønskelig d) oppløsningsmidler, f.eks. stivelser, agar, alginsyre eller natriumsalter derav, eller brusende blandinger; og/eller e) adsorberingsmidler, fargemidler, smakstoffer og søtnings-stoffer. Injiserbare sammensetninger er fortrinnsvis vandige isotoniske oppløsninger eller suspensjoner, og suppositorier blir fortrinnsvis fremstilt fra fettholdige emulsjoner eller suspensjoner. Nevnte sammensetninger kan bli steriliserte og/eller inneholde hjelpestoffer, såsom konserveringsmidler, stabiliseringsmidler, fuktemidler eller emulgeringsmidler, oppløsningsfremmende midler, salter for regulering av det osmotiske trykket og/eller buffere. I tillegg kan de også inneholde andre terapeutisk verdifulle forbindelser. Nevnte sammensetninger blir fremstilt ifølge konvensjonelle bland-ingsmetoder, granuleringsmetoder eller belegningsmetoder og kan inneholde omtrent 0.1 til 75$, fortrinnsvis omtrent 1 til 50% av det aktive ingredienset.
Egnede formuleringer for transdermal applikasjon omfatter en effektiv mengde av en forbindelse ifølge oppfinnelsen med en bærer. Fordelaktige bærere omfatter adsorberbare farmakolog-iske akseptable oppløsningsmidler for å behjelpe passering gjennom huden til verten. Transdermale anordninger er vanligvis i form av en bandasje omfattende et støtteledd, et reservoar inneholdende forbindelsen eventuelt med bærere, eventuelt en hastighetskontrollerende barriere for å levere forbindelsen til huden i verten ved en kontrollert og forutbestemt rate over en forlenget tidsperiode, og midler for å sikre anordningen til huden.
Purin nukleosid fosforylase-aktiviteten i pattedyr kan inhibere sykdommer og tilstander som reagerer overfor dette, f.eks. autoimmune forstyrrelser, utstøtelse av trans-plantasjon eller psoriasis kan behandles ved administrering til et pattedyr som trenger dette en effektiv mengde av en forbindelse fremstilt ifølge oppfinnelsen.
Farmasøytisk akseptable effektive doseringer av den aktive forbindelsen fremstilt ifølge oppfinnelsen som skal bli administrert er avhengig av arten av det varmblodige dyret (pattedyret), kroppsvekten, alderen og den individuelle tilstanden, og av administrasjonsformen.
Den farmasøytiske sammensetningen kan være oral, parenteral, suppositorisk eller i annen form som leverer forbindelsen inn i blodstrømmen til et pattedyr som skal bli behandlet. En oral form har fra omtrent 1 til omtrent 150 mg av forbindelsen for en voksen (50 til 70 kg) som blir blandet sammen med farmasøytisk akseptable fortynningsmidler såsom laktose. I en vanlig kapsel blir 25 mg av forbindelsen blandet sammen med 192 mg laktose, 80 mg modifisert stivelse og 3 mg magnesiumstearat. Injiserbare former av forbindelsen blir også betraktet for administrasjon.
Forbindelsen fremstilt ifølge foreliggende oppfinnelse er også nyttig med andre terapeutiske midler. En daglig dosering for et menneske som veier 50 til 70 kg på 1-50 mg/kg inhiberer den metabolske nedbrytningen av visse anti-cancer midler som beta-2'-deoksy-6-tioguanosin og antivirale midler såsom 2',3'-dideoksyinosin, som er et anti-AIDS medikament. Disse typene av midler er kjent for å være mottagelige for spaltning. Ved spaltning mister midlene effektiviteten. Forbindelsene fremstilt ifølge foreliggende oppfinnelse kan redusere en slik spaltning. Denne beskyttelsen forsterker derfor effektiviteten til andre kjemo-terapeutiske midler.
En fremgangsmåte for å fremstille forbindelse (I) anvender 3-substituerte propionitriler som utgangsmaterialer. Slike utgangsmaterialer kan bli oppnådd ved forskjellige fremgangs-måter som er godt dokumentert i litteraturen. Forbindelse (I) blir deretter fremstilt fra utgangsmaterialet ved en tilpasning av syntetisk metodologi beskrevet i M.I.Lim, R.S. Klein og J.J. Fox, J.Org.Chem., 44, 3826 (1979); M.I.Lim, R.S. Klein, og J.J. Fox, Tetrahedron Lett., 21, 1013 (1980); M.I. Lim and R.S. Klein Tetrahedron Lett. 22, 25 (1981); M.I. Lim, W.Y. Ren, B.A. Otter, og R.S. Klein, J.Org.Chem., 48, 780 (1983).
En fremgangsmåte for å fremstille forbindelse (II) anvender 3-(pyridinyl)propionitril som utgangsmateriale for å fremstille forbindelsen (II). Det hensiktsmessige 3-(pyridinyl)propionitrilet kan bli fremstilt ved å omdanne det tilsvarende 3-(pyridinyl)propionyl kloridet til det tilsvarende amidet ved aminolyse med f.eks., ammoniumhydroksid, som deretter blir dehydrert til ønsket nitril ved destillering med et dehydreringsmiddel, såsom POCI3eller SOCI2. Alternativt blir utgangsmaterialet fremstilt ved kondensasjon av 3-aldehydet med cyanoeddiksyre etterfulgt av dekarboksyl-ering for å tilveiebringe det tilsvarende substituerte akrylonitrilet, som blir hydrert for å tilveiebringe det korresponderende 3-(pyridinyl)propionitrilet ved enten katalytisk hydrering eller magnesium metall oppløsning i metanol ved 0°C, som beskrevet i Profitt, J., et al., J.Org.Chem., 40, 127 (1975). Forbindelsen (II) blir deretter fremstilt fra utgangsmaterialet ved en tilpasning av den syntetiske metodologien beskrevet i M.I. Lim, E.S. Klein og J.J. Fox, J.Org. Chem., 44, 3826 (1979); M.I. Lim, R.S. Klein, og J.J. Fox, Tetrahedron Lett., 21, 1013 (1980); M.I. Lim og R.S. Klein, Tetrahedron Lett., 22, 25 (1981); M.I. Lim, W.Y. Ren, B.A. Otter, og R.S. Klein, J. Org. Chem, 48, 780 (1983).
En annen fremgangsmåte for fremstilling av forbindelsen anvender en kjent forbindelse, dvs. cykloheksenyl aceto-nitril, som utgangsmateriale. Forbindelsen (III) blir fremstilt ved å omsette utgangsmaterialet i en tilpasning av den syntetiske metodologien beskrevet i M.I. Lim, R.S. Klein og J.J. Fox, J.Org.Chem. 44, 3826 (1979); M.I. Lim. R.S. Klein og J.J. Fox, Tetrahedron Lett., 21, 1013 (1980); M.I. Lim og R.S. Klein, Tetrahedron Lett., 22, 25 (1981); M.I. Lim, W.Y. Ren, B.A. Otter og R. S. Klein, J.Org.Chem., 48, 780 (1983). Katalytisk hydrering av enten (HIA), (UIB) eller (IIIC) tilveiebringer forbindelsen (IIID).
Forbindelser med forskjellige verdier for "m" i henhold til formlen ovenfor blir oppnådd ved enten å gå opp eller gå ned med seriene av det nødvendige antall karbonatomer i henhold til kjente prosedyrer. Reaksjoner som innbefatter noen mellomprodukter krever beskyttelse av nitrogen eller oksygenatomene på mellomproduktene ved anvendelse av kjente prosedyrer.
For å beskrive foreliggende oppfinnelse mer fullstendig, gis nå følgende eksempler. I eksemplene er alle deler og prosentandelene i vekt dersom ikke annet er angitt. Proporsjoner av oppløsningsmiddel-blandinger som blir anvendt som kromatografiske elueringsmidler er i volum.
EKSEMPEL 1
3-(2-pyridinyl)propionitril blir fremstilt ved anvendelse av fremgangsmåten til V. Boekelheide, et al., J.Am.Chem.Soc. , 75, 3243 (1953). En oppløsning av kaliumcyanid (83.74 g) i vann (160 ml) blir tilsatt til en oppløsning av frisk destillert 2-vinylpyridin (67.59 g) i eddiksyre-anhydrid (131.30 g) idet tilsetningsraten justeres for å opprettholde forsiktig tilbakeløp. Når tilsetningen er fullført, blir den resulterende mørkerøde blandingen oppvarmet i omtrent 70 timer ved 105°C i et oljebad med omfattende omrøring. Den avkjølte reaksjonsblandingen blir justert ved pH 8 med en mettet Na2C03oppløsning. Blandingen blir ekstrahert med CHC13(4 x 150 ml), vasket med vann, tørket med Na2S04og avdampet til en mørk viskøs olje. Oljen blir fraksjons-destillert i vakuum gjennom en Vigreaux kolonne. Etter en liten forkjøring inneholdende 2-vinylpyridin (0.35 g), blir ønsket 3-(2-pyridinyl)propionitril samlet som en klar, fluoriserende gul-grønn, viskøs olje: utbytte 59.8 g; 70.4$; kp 86 °C ved 1.0 mm Hg.
EKSEMPEL 2
3-(2-furanyl)propionitril blir fremstilt i dette eksemplet. I en tre-halset flaske utstyrt med en kondensator og et tørkerør, blir magnesiumbiter (20 g) tilsatt til en oppløs-ning av 3-(2-furanyl)acrylonitril (67.2 g) i tørr metanol
(2 1). Ytterligere magnesium blir tilsatt i deler ettersom hva reaksjonsraten muliggjør helt til totalt 145 g er blitt tilsatt. Etter omtrent 5 timer blir oppløsningsmidlet avdampet helt til innholdet formes til en fast pasta som blir justert til en pH på omtrent 6.5 med 6N HC1 ved avkjøling. Blandingen blir ekstrahert med flere porsjoner CECI3, tørket med Na2S04og konsentrert til en mørk olje. Destillering i vakuum gjennom en kort Vigreaux kolonne tilveiebringer propionitril som en fargeløs olje; utbytte 49.5 g (72$); kp 46.0-46.5°C ved 0.5 mm.
EKSEMPEL 3a
Glycin metyl ester hydroklorid (67.05 g) og vannfri natriumacetat (43.79 g) blir tilsatt til en oppløsning av rå formylforbindelse (53.05 g) i MeOH/H20 (4:1, 1500 ml). Etter 24 timer blir MeOH avdampet i vakuum, og blandingen av vann og olje blir ekstrahert med CHCI3. CHCI3laget blir tørket (Na2S04) og avdampet for å tilveiebringe en gul olje (59.1
g)<.>
EKSEMPEL 3b
Under en nitrogen-atmosfære blir etylklorformat (43.68 g) dråpevis tilsatt til en oppløsning av den gule oljen ifølge Eksempel 3a (59.1 g) og DBN (133 g) i tørr CH2C12(400 ml) med ytre avkjøling i et isbad. Etter omrøring ved 0°C i 1 time blir oppløsningen latt stå ved romtemperatur over natt. Etter å ha undersøkt forløpet ved TLC ble ytterligere ClC02Et og DBN tilsatt for å fullføre omdanningen, og oppløsningen blir latt stå i 24 timer. Det flyktige materialet blir avdampet til vakuum, den viskøse resten renset på en silikagel-kolonne (der hovedhensikten er å fjerne mindre mobil DBN) for å tilveiebringe en N-blokkert pyrrol, en tilsvarende pyrrol uten den etoksykarbonyl-blokkerende gruppen på pyrrol-nitrogenet og utgangspropionitril.
EKSEMPEL 3c
Til en oppløsning av N-blokkert pyrrol ifølge Eksempel 3b (11.66 g) i MeOH (200 ml) blir det tilsatt fast Na2C03(4.23
g), og reaksjonsblandingen blir omrørt ved romtemperatur i 24 timer med separasjon av den resulterende deblokkerte pyrrolen. Blandingen blir avdampet til tørrhet og resten blir triturert grundig med H20 (200 ml) for å oppløse uorganiske stoffer og ekstrahert med CHCI3(3 x 200 ml). Ekstraktet blir tørket (Na2S04) og avdampet for å tilveiebringe en viskøs gummi som krystalliserte ved tørking i vakuum for anvendelse som et mellomprodukt uten ytterligere rensning. Mer omfattende rensning kan derimot bli oppnådd ved anvendelse av enten kolonne-kromatografi ved anvendelse av silikagel/CECl3eller omkrystallisering fra toluen/cykloheksan (1:3).
EKSEMPEL 3d
Benzoyl isotiocyanat (4.58 g) blir dråpevis tilsatt til en oppløsning av ublokkert pyrrol ifølge Eksempel 3c (5.15 g) i tørr CH2CI2(75 ml). Etter 1 time ved romtemperatur blir oppløsningen avdampet og den gummi-holdige resten blir løst opp i Et20 (100 ml) med nesten øyeblikkelig separasjon av det krystallinske faste stoffet, som blir samlet ved filtrering. Et20 filtratet blir oppvarmet til koking og fortynnet med et likt volum varmt cykloheksan. Ved sakte avkjøling tilveiebringer oppløsningen ytterligere tioureido produkt.
EKSEMPEL 3e
Metyljodid (8.70 g) blir tilsatt til en oppløsning av tioureido produktet ifølge Eksempel 3d (10.68 g) og DBN (4.15
g) i tørr CE2CI2(250 ml) ved 0°C. Oppløsningen blir omrørt ved 0°C i 15 min., ved romtemperatur i 1 time og deretter
avdampet i vakuum. En oppløsning av resten i CECI3blir kromatografert på en silikagel-kolonne med CEC13som elueringsmiddel for å tilveiebringe homogene fraksjoner av metyltio mellomforbindelsen.
EKSEMPEL 3f
En oppløsning av metyltio-forbindelsen ifølge Eksempel 3e (0.80 g, 2.0 mmol) i 25 ml MeOH som er blitt mettet med NE3ved 0"C blir oppvarmet ved 90 - 95"C i 24 timer i en glass-kledd rustfri stålbombe. Innholdet av den avkjølte bomben blir avdampet i vakuum for å tilveiebringe en blanding av 2-amino forbindelsen, benzamid og et bi-produkt som er et 2-metyltio derivat, i motsetning til 2-amino forbindelsen. Blandingen ble kraftig omrørt i flere minutter med 30 ml 2:1 Et20/cykloheksan, og det uoppløselige hvite faste stoffet blir filtrert ut og vasket med Et2-Filtratet inneholdt de fleste benzamid og 2-metyltio komponentene. En oppløsning av Et20/cykloheksan uoppløselig fast stoff (0.425 g) i MeOH blir avdampet med omtrent 10 g silikagel. Den pulverformige resten blir fordelt jevnt på toppen av en silikagel-kolonne som deretter blir eluert med CHCl3/Me0H/H0Ac (95:5:1) for å tilveiebringe 2-metyltio biproduktet og det ønskede furanyl mellomproduktet. Mellomproduktet blir omkrystallisert ved ekstrahering inn i kokende isopropylacetat i en Soxhlet apparatur. De hvite krystallene blir samlet i tre porsjoner og tørket i vakuum over P2°5ved 110°C i 7 timer.
En oppløsning av mellomproduktet (116 g, 0.5 mmol) i metanol (50 ml) blir hydrert med 30% palladium-på-trekull (40 mg) ved 28 kg/6.4 cm<2>H2trykk i omtrent 36 timer. Katalysatoren ble fjernet ved filtrering under N2trykk og filtratet blir avdampet og på ny avdampet med toluen. Den faste resten blir omkrystallisert ved ekstraksjon inn i kokende isopropylacetat i en Soxhlet apparatur. 2-tetrahydrofuranyl forbindelsen (IE) blir oppnådd som et hvitt krystallinsk fast stoff, som blir tørket i vakuum over P2O5ved 110°C i omtrent 6 timer og ga 73 mg (61.8$); smp. 284-286°C dek.
EKSEMPEL 4a
1-cykloheksenylacetonitril blir behandlet i syntesen ifølge foreliggende oppfinnelse. Under en atmosfære av tørr N2blir en oppløsning av 1-cykloheksenylacetonitril (9.2 g; 75.92 mmol) i vannfri tetrahydrofuran (THF, 10 ml) tilsatt til en omrørt blanding av natriumhydrid (3.18 g; 132.86 mmol) og etylformat (30.14 g; 406.93 mmol i 50 ml THF, og den resulterende blandingen blir omrørt ved romtemperatur i omtrent 18
timer. Flyktig materiale blir avdampet i vakuum ved romtemperatur. Vann (30 ml) blir tilsatt til resten ved 0°C, og oppløsningen justert til pH 6 ved dråpevis tilsetning av 6N HC1. Det resulterende precipitatet av tung olje blir ekstrahert inn i CHCI3. Ekstraktet blir vasket med vann og tørket med Na2S04, og det resulterende organiske laget blir avdampet for å tilveiebringe en rå formylforbindelse som en rød-brun olje (9.6 g).
EKSEMPEL 4b
Glycin-metyl-ester hydroklorid (16.68 g, 132.85 mmol) og vannfri natriumacetat (10.89 g, 132.85 mmol) blir tilsatt til en oppløsning av rå formylforbindelse (9.6 g) ifølge Eksempel 4a uten ytterligere rensning i MeOH/H20 (4:1, 150 ml). Etter 24 timer blir MeOH avdampet i vakuum, og blandingen av vann og olje blir ekstrahert med CHCI3. CHCI3laget blir tørket (Na2S04) og avdampet for å tilveiebringe en gul olje som blir applisert på en silikagel kolonne. Eluering med CHCI3ga det ønskede enaminet: utbytte 4.5 g.
EKSEMPEL 4c
Under en nitrogenatmosfaere blir etylklorformat (3.04 g; 28.06 mmol) dråpevis tilsatt til en oppløsning av enaminet ifølge Eksempel 4b (4.12 g, 18-70 mmol) og 1,5-diazabicyklo[4.3.0]-non-5-ene (DBN, 6.96 g, 56.11 mmol) i tørr CH2C12(100 ml) med ytre avkjøling i et isbad. Etter omrøring ved 0°C i 1 time blir oppløsningen latt stå ved romtemperatur over natt. Etter å undersøke progresjonen ved TLC, blir ytterligere ClC02Et (0.5 ml) og DBN (3.0 ml) tilsatt for å fullføre omdanningen, og oppløsningen blir latt stå i 24 timer. Flyktige materialer blir avdampet i vakuum, den viskøse resten renset på en kort silikagel-kolonne (hvor hovedhensikten er å fjerne mindre mobile DBN) for å tilveiebringe en N-blokkert pyrrol, som blir anvendt i det neste trinnet uten ytterligere rensning.
EKSEMPEL 4d
Til en oppløsning av N-blokkert pyrrol ifølge Eksempel 4c (3.0 g, 10.26 mmol) i MeOH (100 ml) blir det tilsatt fast Na2C03(2.71 g, 25.65 mmol) og reaksjonsblandingen blir omrørt ved romtemperatur i 48 timer ved separasjon av den resulterende deblokkerte pyrrolen. Blandingen blir avdampet til tørrhet, og resten blir triturert grundig med H20 (50 ml) for å oppløse uorganiske stoffer og ekstrahert med CHC13(3 x 50 ml). Ekstraktet blir tørket (Na2S04) og avdampet for å tilveiebringe en viskøs gummi, som blir renset på en silika gelkolonne ved anvendelse av CHCI3som elueringsmiddel; utbytte 2.04 g; smp. 125°C.
EKSEMPEL 5
Benzoyl isotiocyanat (0.76 g, 4.65 mmol) blir dråpevis tilsatt til en oppløsning av ublokkert pyrrol ifølge Eksempel 4d (0.91 g, 4.13 mmol) i tørr CH2C12(30 ml). Etter 1 time ved romtemperatur blir oppløsningen avdampet, og gummiresten blir triturert med metanol for å tilveiebringe et tioureidoprodukt; utbytte 0.70 g; smp. 170"C.
EKSEMPEL 6
Metyljodid (0.678 g, 4.78 mmol) blir tilsatt til en oppløs-ning av tioureidoproduktet ifølge Eksempel 5 (0.630 g, 1.64 mmol) og DBN (0.230 g, 1.85 mmol) i tørr CH2C12(50 ml) ved 0°C. Oppløsningen blir omrørt ved 0°C i 15 min. ved romtemperatur i 1 time, og deretter avdampet i vakuum. En oppløsning av resten i CHC13blir kromatografert på en silikagel kolonne med CHCI3som elueringsmiddel for å tilveiebringe homogene fraksjoner av metyltio mellomproduktet; utbytte 0.7 g.
EKSEMPEL 7
En oppløsning av metyltioforbindelsen ifølge Eksempel 6 (0.70 g, 1.76 mmol) i 50 ml MeOH som er blitt mettet med NH3ved 0°C blir oppvarmet ved 90 - 95°C i 24 timer i en glass-kledd rustfri stålbombe. Innholdet av den avkjølte bomben blir avdampet i vakuum for å tilveiebringe en blanding av forbindelsen (HIA) benzamid og et bi-produkt som er et 2-metyltio derivat, i forhold til 2-aminoforbindelsen (HIA). Blandingen blir grundig omrørt i flere minutter med omtrent 50 ml Et20, og uoppløselig fast stoff blir filtrert ut og vasket med Et20. Filtratet inneholdt det meste av benzamid og 2-metyltiokomponentene. En oppløsning av Et20-uoppløselig fast stoff (0.342 g) i MeOH blir avdampet med omtrent 10 g silikagel. Den pulverformige resten blir applisert jevnt på toppen av en silika gelkolonne, som deretter blir eluert med CHCl3/Me0H/H0Ac (95:5:1) for å tilveiebringe 2-metyltio bi-produkt og ønsket 2-aminoprodukt (HIA). (HIA) blir omkrystallisert ved ekstrahering inn i kokende isopropylacetat i en Soxhlet apparatur. De hvite krystallene blir samlet i tre porsjoner og tørket i vakuum over P2O5ved 110°C i 7 timer; utbytte 44$; smp. 280°C dek., anal. beregnet for C12<H>14N40-0.6H20: C, 59.78; H, 6.35; N, 23.23. Funnet: C, 59.98; H, 6.46; N, 23.15.
EKSEMPEL 8
Forbindelsen ifølge Eksempel 7 blir testet for enzym-inhibisjonsaktivitet. En purin nukleosid fosforylase (PNP) enzymanalyse blir utført der PNP aktiviteten for forbindelsen blir bestemt radiokjemisk ved måling av dannelsen av [<14>C]-hypoksantin fra [<14>C]-inosin (se Biomedicine, 33, 39 (1980) ved anvendelse av kalvemilt som enzymkilde. Ved 1 mM fosfat er IC50 1.9 jjM, og ved 50 mM fosfat er IC5019 uM.
EKSEMPEL 9
Forbindelse (IIID) blir fremstilt ved anvendelse av 2-amino-7-(l-cykloheksenyl )-3Hj.5H-pyrrolo[3,2-d]pyrimidin-4-one som et mellomprodukt. En oppløsning av mellomproduktet (0.2 g; 0.86 mmol) i etanol (50 ml) blir hydrert med 10% Pd-C (50 mg) ved 20,4 kg/6.4 cm<2>i 16 timer og filtrert varmt gjennom Celite. Filtratet blir avdampet til tørrhet, og resten blir krystallisert fra varm etanol for å tilveiebringe forbindelsen (IIID); utbytte 157 mg ( 78%), smp. >300°C dek. anal. beregnet for C12H16N40'0. EtOH: C, 61.80; H, 7.10; N, 23.51. Funnet: C, 61.95; H, 7.43; N, 23.56.
EKSEMPEL 10
Forbindelsen (IIID) fremstilt i Eksempel 95 blir testet for enzym-inhibisjonsaktivitet som i Eksempel 8. Ved 1 mM fosfat er I<C>501.3 uM, og ved 50 mM fosfat er IC50145 uM.
EKSEMPEL 11
3-(2-adamantyl)propionitril blir fremstilt i dette eksemplet ved anvendelse av en modifikasjon av fremgangsmåten til M. Ohno, et al., J. Org. Chem. 53, 1285 (1988). En oppløsning av 2-bromoadmantan (20 g; 92.96 mmol); BusSnH (32.46 g; 111.5 mmol), akrylonitril (9.86 g; 185.92 mmol) og AIBN (740 mg) i toluen (280 ml) blir omrørt ved tilbakeløpstemperatur i 3 timer. Reaksjonsblandingen blir vasket med ammoniakkvann (0.4 M, 500 ml), det organiske laget blir vasket med H20 og tørket over MgS04og avdampet. Resten blir destillert mellom 110 - 118°C (omtrent 0.2 mmEg); fraksjonene blir kombinert for å tilveiebringe en rå prøve av kontaminert 3-(2-adamantyl)propionitril med tinnkomplekser, som blir renset på silikagel kolonne med heksaner; etterfulgt av heksaner/etyl-
acetat 97:3 og heksaner/etylacetat 95:5, ga 9.4 g (53.456); smp. semi-fast.
EKSEMPEL 12a
Glycln metyl ester hydroklorid (6.96 g, 55.46 mmol) og vannfri natriumacetat (4.55 g, 55.46 mmol) blir tilsatt til en oppløsning av rå formylforbindelse (8.0 g) i MeOH/E20 (4:1, 500 ml). Etter 24 timer blir MeOH avdampet i vakuum, og blandingen av vann og olje blir ekstrahert med CHCI3. CHCI3laget blir tørket (NagSO^ og avdampet for å tilveiebringe en gul olje som blir applisert på en silikagel kolonne. Eluering med CHCI3ga to hovedbånd; (1) 3-(2-adamantyl )-propionitril (anvendt som utgangsmateriale i det tidligere trinnet) og (2) ønsket enamin; utbytte 6 g.
EKSEMPEL 12b
Under en nitrogenatmosfære blir etyl klorformat (2.82 g, 26.0 mmol) dråpevis tilsatt til en oppløsning av enamin ifølge Eksempel 12a (5.0 g, 17.34 mmol) og 1,5-diazabicyklo[4.3.0]-non-5-ene ("DBN," 6.46 g, 52.0 mmol) i tørr CH2C12(50 ml) med ytre avkjøling i et isbad. Etter omrøring ved 0"C i 1 time blir oppløsningen latt stå ved romtemperatur over natt. Etter å undersøke prosessen ved TLC, blir ytterligere ClC02Et (1.81 ml) og DBN (3.23 g) tilsatt for å fullføre omdanningen, og oppløsningen blir latt stå i 24 timer. Det flyktige materialet blir avdampet i vakuum, den viskøse resten renset på en kort silikagelkolonne (der hovedhensikten er å fjerne mindre mobil DBN) for å tilveiebringe en N-blokkert pyrrol, som blir anvendt i det neste trinnet uten ytterligere rensing.
EKSEMPEL 12c
Til en oppløsning av rå N-"blokkert pyrrol ifølge Eksempel 12b (6.0 g, 16.59 mmol) i MeOH (100 ml) blir det tilsatt fast Na2C03(4.39 g, 41.49 mmol), og reaksjonsblandingen blir omrørt ved romtemperatur i 48 timer med separasjon av resulterende deblokkert pyrrol. Blandingen blir avdampet til tørrhet, og resten blir triturert grundig med H2O (50 ml) for å oppløse det uorganiske materialet og ekstrahert med CHCI3(3 x 100 ml). Ekstraktet blir tørket (Na2S04) og avdampet for å tilveiebringe en viskøs gummi som krystalliserte ved triturering med eter; utbytte 4 g; smp. 162 - 163°C.
EKSEMPEL 13
Benzoyl isotiocyant (1.22 g, 7.47 mmol) blir tilsatt dråpevis til en oppløsning av ublokkert pyrrol ifølge Eksempel 12c (1.91 g, 6.62 mmol) i tørr CH2C12(50 ml). Etter 1 time ved romtemperatur blir oppløsningen avdampet, og den gummiholdige resten blir løst opp i Et20 (100 ml) med nesten øyeblikkelig separasjon av det krystallinske faste stoffet. Et20 filtratet blir oppvarmet til koking og fortynnet med et likt volum varm cykloheksan. Ved sakte avkjøling tilveiebringer oppløsningen ytterligere tioureidoprodukter; utbytte 2.81 g (95#); smp. 193 - 194°C.
EKSEMPEL 14a
Metyljodid (2.46 g, 17.39 mmol) blir tilsatt til en oppløs-ning av tioureidoproduktet ifølge Eksempel 13 (2.7 g, 5.98 mmol) og DBN (0.82 g, 6.57 mmol) i tørr CH2C12(50 ml) ved 0"C. Oppløsningen blir omrørt ved 0°C i 15 min., ved romtemperatur i 1 time, og deretter avdampet i vakuum for å tilveiebringe en rå prøve av metyltio mellomproduktforbind-elsen; utbytte 2.78 g (rå).
EKSEMPEL 14b
En oppløsning av metyltio forbindelsen ifølge Eksempel 14a (2.78 g, 5.18 mmol) i 150 ml MeOH som er blitt mettet med NH3ved 0°C blir oppvarmet ved 90 - 95°C i 24 timer i en glass-kledd rustfri stålbombe. Innholdet av den avkjølte bomben blir avdampet i vakuum for å gi en blanding av forbindelsen (IVA), benzamid og et bi-produkt som er et 2-metyltio derivat, i motsetning til 2-aminoforbindelsen (IVA). Blandingen blir kraftig omrørt i flere minutter med omtrent 75 ml Et20, og det uoppløselige hvite faste stoffet blir filtrert ut og vasket med Et20. Filtratet inneholdt det meste av benzamidet og 2-metyltiokomponentene. En oppløsning av Et20-uoppløselig fast stoff (1.38 g) i MeOH blir avdampet med omtrent 25 g silikagel. Den pulverholdige resten blir fordelt jevnt på toppen av en silikagel kolonne som deretter blir eluert med CHC123/Me0H/H0Ac (95:5:1) for å tilveiebringe 2-metyltio bi-produktet og det ønskede 2-amino produktet (IVA). (IVA) blir omkrystallisert ved ekstrahering inn i kokende isopropyl acetat i en Soxhlet apparatur. De hvite krystallene blir samlet i tre porsjoner og tørket i vakuum over P205ved 110°C i 7 timer; utbytte 51.656; smp. >350°C dek.; anal. beregnet for C17<H>22<N>40-0.21MeOH-0.22H20: C, 66.88; H, 7.59; N, 18.12. Funnet: C, 66.86; H, 7.59; N, 18.12.
EKSEMPEL 15
Forbindelsen ifølge Eksempel 14b blir testet for enzym-inhibisjonsaktivitet. Et purin nukleosid fosforylase (PNP) enzymanalyse blir utført der PNP aktiviteten (IC50) for forbindelsen blir funnet, bestemt radiokjemisk ved måling av dannelsen av [14C]-hypoksantin fra [14C]-inosin (se Biomedicine, 33, 39 (1980)) ved anvendelse av kalvemilt som enzymkilde. Ved 1 mM fosfat er IC500.090 uM, og ved 50 mM fosfat er IC50 2.5 jjM.
EKSEMPEL 16
3-cyklopentylpropionitril blir fremstilt i dette eksemplet. 3-cyklopentylpropionyl klorid (57.7 g, 0.36 mol) blir dråpevis tilsatt til et stort overskudd konsentrert ammoniumhydroksid (400 ml) avkjølt i et is/salt bad. Den tunge suspensjonen av hvitt fast stoff blir omrørt over natt, samlet ved filtrering, vasket med kaldt vann og omkrystallisert fra omtrent 2 liter kokende vann. Skinnende hvite plater av amider blir tørket i vakuum over P2O5; utbytte 31.6 g (62.3$; smp. 122°C).
Med beskyttelse fra atmosfærisk trykk blir en oppløsning av amidet (23.5 g, 0.166 mol) i POCI3(150 ml) oppvarmet ved 120°C i 1 time. Oljebadet blir avkjølt til omtrent 70°C og overskudd POCI3blir destillert ut under vakuum, og den avkjølte resten blir heilt på is (omtrent 300 g). Blandingen blir nøytralisert ved forsiktig tilsetning av fast Na2CC"3 og ekstrahert med flere porsjoner Et20. Det tørkede (Na2S04) ekstraktet blir avdampet for å tilveiebringe en klar, svak gul olje som blir destillert i vakuum for å tilveiebringe den ønskede nitril; utbytte, 16.86 g ( 82%) kp 88.0 - 88.5 "C/8.7 mm). MS (EI): m/z 122 (M-H)<+>; IR (kap.film), 2245 cm_<1>(CN), komplekse multipletter sentrert rundt 1.11, 1.63, 1.86 (cyklopentyl protoner).
EKSEMPEL 17a
3-cyklopentylpropiontril ifølge det tidligere eksemplet blir ytterligere behandlet ved syntesen ifølge foreliggende oppfinnelse. Under en atmosfære av tørr N2blir en blanding av 3-cyklopentyl-propionitril (14.8 g, 0.12 mol) natriumhyd-
rid (5.8, 0.24 mol) og vannfri tetrahydrofuran (300 ml) oppvarmet ved 52°C i et vannbad i 15 min, og en oppløsning av etylformat (13.3 g, 0.18 mol) i THF (100 ml) blir tilsatt over en periode på 45 min. Etter to timer ved 50 - 55°C blir en annen porsjon NaH (1.9 g) og HC02Et (5.0 ml) tilsatt, etterfulgt i 30 minutter av en tredje porsjon HC02Et (ureagert nitril er inert i det neste trinnet og kan bli isolert ved det første rensetrinnet). Den tykke pastaen blir rørt over natt og avkjølt til romtemperatur. Det flyktige materialet blir avdampet under redusert trykk, og det gjenværende svake gule materialet blir oppløst i minimums-volumet av kaldt vann (omtrent 150 ml) ved 0°C. Oppløsningen blir justert til pH 6.0 ved tilsetning av 6N HC1 og ekstrahert med CHC13(3 x 100 ml). Ekstraktet blir vasket med H20, tørket over Na2S04og avdampet i vakuum til en tykk gul olje. Dette råproduktet (15.6 g) blir anvendt i nevnte reaksjon uten ytterligere rensning.
EKSEMPEL 17b
Glycin metylester hydroklorid (19.31 g, 0.154 mol) og vannfri natriumacetat (12.61 g, 0.154 mol) ble tilsatt til en oppløsning av rå formylforbindelse ifølge tidligere eksempel (15.6 g) i Me0H/H20 (4:1, 500 ml). Etter 24 timer blir MeOH avdampet i vakuum, og blandingen av vann og olje blir ekstrahert med CHCI3. CHCI3laget blir tørket (Na2S04) og avdampet for å tilveiebringe en gul olje som blir applisert på en silikagel kolonne. Eluering med CHCI3ga to hovedbånd: (1) 3-cyklopentylpropionitril (8.22 g, 66.7 mmol eller 55.656 nitril anvendt som utgangsmateriale i det tidligere trinnet) og (2) det ønskede enaminet (3.45 g; 29.156 basert på det teoretiske utbyttet korrigert for mengden av nitril tilstede i utgangsmaterialet; MS (FAB): 223 (M + H)<+>).
EKSEMPEL 18a
Under en nitrogenatmosfære blir etylklorformat (2.53 g, 23.3 mmol) dråpevis tilsatt til en oppløsning av enaminet ifølge det tidligere eksemplet (3.45 g, 15.5 mmol) og DBN (5.78 g, 46.6 mmol) i tørr CH2CI2(50 ml) med ytre avkjøling i et isbad. Etter omrøring ved 0°C i 1 time, blir oppløsningen latt stå ved romtemperatur over natt. Etter å undersøke prosessen ved TLC blir ytterligere ClC02Et (0.5 ml) og DBN (3.0 ml) tilsatt for å fullføre omdanningen, og oppløsningen blir latt stå i 24 timer. Det flyktige materialet blir avdampet i vakuum, den viskøse resten renset på en kort silikagel kolonne (der hovedfunksjonen er å fjerne mindre mobil DBN) for å tilveiebringe en N-blokkert pyrrol (4.50 g; 98%), som blir anvendt i det neste trinnet uten ytterligere rensning.
EKSEMPEL 18b
Til en oppløsning av N-blokkert pyrrol ifølge tidligere eksempel (4.50 g, 15.3 mmol) i MeOH (100 ml) blir det tilsatt fast Na2C03(1.62 g, 15.3 mmol), og reaksjonsblandingen blir omrørt ved romtemperatur i 48 timer med separasjon av den resulterende deblokkerte pyrrolen. Blandingen blir avdampet til tørrhet, og resten blir triturert grundig med H2O (50 ml) for å oppløse uorganiske stoffer og ekstrahert med CHCI3(3 x 100 ml). Ekstraktet blir tørket (Na2S04) og avdampet for å tilveiebringe en viskøs gummi som krystalliserte ved tørking i vakuum; ga 2.97 g (87.456) av materialet egnet for anvendelse som et mellomprodukt uten ytterligere rensning. Mer omfattende rensning kan derimot bli oppnådd ved å anvende enten kolonnekromatografi ved anvendelse av silikagel/CHCl3eller omkrystallisering fra toluen/cykloheksan (1:3).
EKSEMPEL 18c
Benzoyl isotiocyant (2.62 g, 16.03 mmol) blir dråpevis tilsatt til en oppløsning av ublokkert pyrrol ifølge Eksempel 18b (2.97 g, 13.36 mmol) i tørr CH2C12(100 ml). Etter 1 time ved romtemperatur blir oppløsningen avdampet og gummiresten blir løst opp i Et20 (100 ml) med nesten øyeblikkelig separasjon av det krystallinske faststoffet; utbytte 1.75 g. Et20 filtratet blir oppvarmet til koking og fortynnet med et likt volum varm cykloheksan. Ved sakte avkjøling ga oppløs-ningen et ytterligere 1.58 g tioureido produkt; totalt utbytte 3.33 g (64.696). En liten mengde av tioureidoproduktet blir omkrystallisert fra varm Et20/cykloheksan (15 ml hver); smp. 123 - 125°C. MS (FAB): 386 (M + H)<+>. Analyse beregnet for C20<E>23<N>3O3S-O.45C6<H>12<:>C, 64.40; H, 6.76;
N, 9.93. Funnet: C, 64.51; E, 7.10; N, 9.93.
EKSEMPEL 19a
Metyljodid (2.60 g, 18.32 mmol) blir tilsatt til en oppløs-ning av tioureidoproduktet ifølge Eksempel 18c (3.21 g, 8.33 mmol) og DBN (1.24 g, 9.99 mmol) i tørr CE2C12(80 ml) ved 0°C. Oppløsningen blir omrørt ved 0°C i 15 min., ved romtemperatur i 1 time og deretter avdampet i vakuum. En oppløsning av resten i CEC13blir kromatografert på en silikagel kolonne med CECI3som elueringsmiddel for å tilveiebringe homogene fraksjoner av metyltio mellomprodukter; utbytte, 2.46 g (7456).
EKSEMPEL 19b
En oppløsning av metyltio forbindelsen ifølge Eksempel 19a (2.07 g, 5.18 mmol) i 150 ml MeOH som er blitt mettet med NH3ved 0°C blir oppvarmet ved 90 - 95° C i 24 timer i en glass-kledd rustfri stålbombe. Innholdet av den avkjølte bomben blir avdampet i vakuum for å tilveiebringe en blanding av forbindelsen (IVC), benzamid og et bi-produkt som er et 2-metyltio derivat, i motsetning til 2-amino forbindelsen (IVC). Blandingen blir kraftig omrørt i flere minutter med omtrent 75 ml Et20, og det uoppløselige hvite faste stoffet blir filtrert ut og vasket med Et20. Filtratet inneholdt det meste av benzamidet og 2-metyltio komponentene. En oppløs-ning av Et20-uoppløselig fast stoff (1.13 g) i MeOH blir avdampet med omtrent 10 g silikagel. Den pulverformige resten blir applisert jevnt på toppen av en silikagel kolonne som deretter blir eluert med CHCl3/Me0H/H0Ac (95:5:1) for å tilveiebringe 2-metyltio bi-produktet (252 mg; MS (FAB): 264 (M + H)<+>) og det ønskede 2-amino produktet (IVC) (679 mg, 56.4$). (IVC) blir omkrystallisert ved ekstrahering inn i kokende isopropylacetat i en Soxhlet apparatur. De hvite krystallene blir samlet i tre porsjoner og tørket i vakuum over P2°5ved 110°C i 7 timer; utbytte 540 mg (44.9$); smp. 324 - 326<*>C dek.; MS (FAB): 233 (M + H)<+>; analyse beregnet for C12<H>16N40: c»62.05; H, 6.94; N, 24.12. Funnet: C, 62.04; H, 7.11; N, 24.48.
EKSEMPEL 20a
Glycin metyl ester hydroklorid (30.60 g, 0.24 mol) og vannfri natriumacetat (19.99 g, 0.24 mol) blir tilsatt til en oppløsning av rå formylforbindelse ifølge det tidligere eksemplet (25.22 g) i MeOH/H20 (4:1, 500 ml). Etter 24 timer blir MeOH avdampet i vakuum, og blandingen av vann og olje blir ekstrahert med CHCI3. CHCI3laget blir tørket (Na2S04) og avdampet for å tilveiebringe en gul olje som blir applisert på en silikagel kolonne. Eluering med CHCI3ga to hovedbånd: (1) 3-cykloheksylpropionitril (anvendt som utgangsmateriale i det tidligere trinnet) og (2) ønsket enamin; utbytte 16 g.
EKSEMPEL 20b
Under en nitrogenatmosfære blir etyl klorformat (1.38 g, 12.7 mmol) tilsatt dråpevis til en oppløsning av enamin ifølge Eksempel 20a (2.0 g, 8.46 mmol) og DBN (2.1 g, 16.9 mmol) i tørr CE2CI2(50 ml) med ytre avkjøling i et isbad. Etter omrøring ved 0°C i en time, blir oppløsningen latt stå ved romtemperatur over natt. Etter å ha undersøkt prosessen ved TLC blir ytterligere ClC02Et (0.5 ml) og DBN (1.5 ml) tilsatt for å fullføre omdanningen, og oppløsningen blir latt stå i 24 timer. Flyktig materiale blir avdampet i vakuum, den viskøse resten renset på en kort silikagel kolonne (der hovedhensikten er å fjerne det mindre mobile DBN) for å tilveiebringe en N-blokkert pyrrol, som blir anvendt i det neste trinnet uten ytterligere rensning.
EKSEMPEL 20c
Til en oppløsning av N-blokkert pyrrol ifølge Eksempel 20b (2.6 g, 8.43 mmol) i MeOH (100 ml) blir det tilsatt fast Na2C03(2.23 g, 21.07 mmol) og reaksjonsblandingen blir omrørt ved romtemperatur i 48 timer med separasjon av den resulterende deblokkerte pyrrolen. Blandingen blir avdampet til tørrhet, og resten blir triturert grundig med H2O (50 ml) for å oppløse uorganiske materialer og ekstrahert med CHCI3(3 x 100 ml). Ekstraktet blir tørket (Na2S04) og avdampet for å tilveiebringe en viskøs gummi, som blir renset på en silikagel kolonne ved anvendelse av CHCI3som elueringsmiddel; utbytte 1.67 g (8496); smp. 73 - 74°C.
EKSEMPEL 21
Benzoyl isotiocyanat (0.74 g, 4.02 mmol) blir tilsatt dråpevis til en oppløsning av ublokkert pyrrol ifølge Eksempel 20c (0.95 g) i tørr CH2C12(20 ml). Etter 1 time ved romtemperatur blir oppløsningen avdampet og den gummi- holdige resten blir løst opp i Et20 (100 ml) med nesten øyeblikkelig separasjon av det krystallinske faste stoffet. EtgO filtratet blir oppvarmet til koking og fortynnet med et likt volum varm cykloheksan. Ved sakte avkjøling oppnås fra oppløsningen et ytterligere tioureidoprodukt; totalt utbytte 1.41 g (8855); smp. 156 - 157°C.
EKSEMPEL 22a
Metyljodid (1.1 g, 7.6 mmol) blir tilsatt til en oppløsning av tioureidoproduktet ifølge Eksempel 21 (0.96 g, 2.61 mmol) og 1,5-diazabicyklo[4.3.0]non-5-ene (0.38 g, 3.01 mmol) i tørr CE2CI2(20 ml) ved 0°C. Oppløsningen blir omrørt ved 0°C i 15 min., ved romtemperatur i 1 time, deretter avdampet i vakuum. En oppløsning av resten i CHCI3blir kromatografert på en silikagel kolonne med CHCI3som elueringsmiddel for å tilveiebringe homogene fraksjoner av metyltio mellomprodukt-forbindelsen; utbytte 0.92 g.
EKSEMPEL 22b
En oppløsning av metyltio-forbindelsen ifølge Eksempel 22a (0.8 g, 1.93 mmol) i 50 ml MeOH som er blitt mettet med NH3ved 0°C blir oppvarmet ved 90 - 95° C i 24 timer i en glass-kledd rustfri stålbombe. Innholdet av den avkjølte bomben blir avdampet i vakuum for å tilveiebringe en blanding av forbindelsen (IVD) benzamid og et bi-produkt som er et 2-metyltio derivat, i motsetning til 2-amino forbindelsen (IVD). Blandingen blir grundig omrørt i flere minutter med omtrent 75 ml Et20, og det uoppløselige hvite faste stoffet blir filtrert ut og vasket med Et20. Filtratet inneholdt det meste av benzamidet og 2-metyltio komponentene. En oppløs-ning av Et20-uoppløselig fast stoff (0.390 g) i MeOH blir avdampet med omtrent 10 g silikagel. Den pulverholdige resten blir applisert jevnt på toppen av en silikagel kolonne, som deretter blir eluert med CHCl3/Me0H/H0Ac (95:5:1) for å tilveiebringe 2-metyltio bi-produkt og det ønskede 2-amino produktet (IVD). (IVD) blir omkrystallisert ved ekstrahering i kokende isopropylacetat i en Soxhlet apparatur. De hvite krystallene blir oppsamlet i tre porsjoner og tørket i vakuum over P2°5ved 110°C i 7 timer; utbytte 495é, smp. >300°C; analyse beregnet for C^Hig^O: C, 63.39; H, 7.36; N, 22.74. Funnet: C, 63.50; H, 7.74; N, 22.67.
EKSEMPEL 23
Forbindelsen ifølge Eksempel 22b blir testet for enzym inhibisjonsaktivitet som i Eksempel 105. Ved 1 mM fosfat er I<C>500.037 uM, og ved 50 mM fosfat er IC502.2 uM.
EKSEMPEL 24a
Forbindelsen ifølge Eksempel 22b blir testet for å bestemme effektiviteten i potensiering av toksisiteten til 2'-deoksy-guanosin (d-Guo) (se D.A. Schewach et al., Cancer ..., 46, 519 (1986), og J.C. Sircar et al., Agents and ..., 21, 253
(1987)). CCRF-CEM cellene blir dyrket i RPMI-1640 medium. Til en suspensjonskultur av disse cellene blir d-Guo ved en bestemt konsentrasjon (5.62 jjM) tilsatt og forbindelsen ved forskjellige konsentrasjoner blir også tilsatt og antall celler bestemt i en Coulter counter 24, 48 og .72 timer deretter. Ut fra disse data blir IC5Qberegnet å være 2.0 jjM som konsentrasjonen av forbindelsen som er nødvendig for å redusere økningen i celletallet mellom 0 og 72 timer til 50% av det til kontrollkulturene.
EKSEMPEL 24b
Forbindelsen 2-amino-7-(3-metylcykloheksylmetyl)-3H,5H-pyrrolo[3,2-d]pyrimidin-4-on blir fremstilt. Først ved anvendelse av fremgangsmåten anvendt i eksempelene 20a - 22b ovenfor, men med 3-(3-metylbenzyl)-propionitril som utgangsmateriale blir arylderivatet 2-amino-7-(3-metylbenzyl)-3H,5H-pyrrolo[3,2-d]-pyrimidin-4-on fremstilt. En oppløsning av arylderivatet (0.2 g, 0.78 mmol) i trifluoreddiksyre (TFA)
(20 ml) blir hydrert med Pt02ved 27,2 kg/6.4 cm<2>i 24 timer. Katalysatoren blir filtrert ut gjennom et Celite sjikt, og filtratet avdampet. Resten blir triturert med metanol og latt stå i fryseren over natt. Det resulterende krystalliserte trifluoracetatsaltet presipiterer fra oppløsningen og blir samlet ved filtrering. TFA saltet blir suspendert i 8 ml H2O, justert til pH 8 ved konsentrert NE4OE og sonikert. Det rene produktet blir samlet, vasket med H2O og tørket: utbytte 165 mg (81$); smp. 282"C. Analysert: Beregnet for
<C>14<H>20N40: c'64.60; H, 7.74; N, 21.52. Funnet: C, 64.24; H, 7.96; N, 21.5156.
EKSEMPEL 25
Fremgangsmåten beskrevet i Eksempel 24b blir gjentatt for å fremstille 2-amino-7-(3-trifluormetylcykloheksyl-metyl )-3H,5H-pyrrolo-[3,2-d]pyrimidin-4-on ved anvendelse av 3-(3-trifluormetylbenzyl)-propionitril som utgangsforbindelse: utbytte 6956; smp. 165°C. Analysert: Beregnet for C14<H>17N4OF3,0-6H20: c»51.72; H, 5.64; N, 17.23. Funnet: C, 51.82; H, 5.71; N, 16.8156.
EKSEMPEL 26
Forbindelsen fremstilt i Eksempel 24b blir testet for enzym- inhibisjonsaktivitet som i Eksempel 15. Ved 1 mM fosfat er I<C>500.025 pM, og ved 50 mM fosfat er IC500.820 jjM.
EKSEMPEL 27
Forbindelsen fremstilt i Eksempel 25 blir testet for enzym-inhibisjonsaktivitet som i Eksempel 15. Ved 1 mM fosfat er I<C>500.020 jjM, og ved 50 mM fosfat er IC500.740 jjM.
EKSEMPEL 28a
3-cykloheptylpropionitril blir fremstilt i dette eksemplet ifølge fremgangsmåten i Eksempel 11 ved anvendelse av en oppløsning av 2-bromcykloheptan (25.57 g; 144.38 mmol); Bu3SnH (50.42 g; 173.26 mmol), akrylonitril (15.32 g; 288.77 mmol) og AIBN (1.13 g) i toluen (300 ml). Utbytte er 16 g; smp. olje.
EKSEMPEL 28b
3-cykloheptylpropionitril ifølge Eksempel 28a blir ytterligere behandlet ved fremstillingen ifølge foreliggende oppfinnelse. Under en atmosfære av tørr N2blir en blanding av 3-cykloheptylpropionitril (8.5 g, 56.19 mmol), natriumhydrid (2.6 g, 112.39 mmol), og vannfri tetrahydrofuran (100 ml) oppvarmet ved 52°C i et vannbad i 15 min., og en oppløsning av etylformat (20.81 g, 280.99 mmol) i THF (100 ml) blir tilsatt over en periode på 45 min. Etter to timer ved 50-55°C blir en annen porsjon NaH (1.35 g) og HC02Et (10.4 g) tilsatt, etterfulgt i 30 min. av en tredje porsjon HC02Et (ureagert nitril er inert i det neste trinnet og kan bli isolert ved det første rensetrinnet). Den tykke pastaen blir omrørt over natt og latt bli avkjølt til romtemperatur. Det flyktige materialet blir avdampet under redusert trykk, og
det gjenværende svake gule materialet blir oppløst i minimalt volum kaldt vann (omtrent 150 ml) ved 0°C. Oppløsningen blir justert til pH 6.0 ved tilsetning av 6N HC1 og ekstrahert med CHCI3(3 x 100 ml). Ekstraktet blir vasket med H20, tørket over Na2S04, og avdampet i vakuum til en tykk gul olje. Dette råproduktet blir anvendt i neste trinn uten ytterligere rensning.
EKSEMPEL 28c
Glycin metyl ester hydroklorid (9.35 g, 74.47 mmol) og vannfri natriumacetat (6.10 g, 74.47 mmol) blir tilsatt til en oppløsning av rå formylforbindelse ifølge Eksempel 28b (8.9 g; 49.65 mmol) i MeOH/H20 (4:1, 250 ml). Etter 24 timer blir MeOH avdampet i vakuum, og blandingen av vann og olje blir ekstrahert med CHCI3. CHC13laget blir tørket (Na2S04) og avdampet for å tilveiebringe en gul olje som blir applisert på en silikagel kolonne. Eluering med CHCI3ga to hovedbånd; (1) 3-cykloheptylpropionitril (anvendt som utgangsmateriale i det tidligere trinnet) og (2) det ønskede enaminet, som blir omkrystallisert fra en CHCl3/Et20 blanding; utbytte 6.18 g; smp. 57 - 58°C.
EKSEMPEL 29a
Under en nitrogenatmosfære blir etyl klorformat (4.01 g, 37.03 mmol) dråpevis tilsatt til en oppløsning av enaminet ifølge Eksempel 28c (6.18 g, 24.69 mmol) og DBN (9.19 g, 74.04 mmol) i tørr CH2C12(100 ml) med ytre avkjøling i et isbad. Etter omrøring ved 0"C i 1 time blir oppløsningen latt stå ved romtemperatur over natt. Etter å ha undersøkt progressjonen av TLC blir ytterligere ClC02Et (0.5 ml) og DBN (3.0 ml) tilsatt for å fullføre omdanningen, og oppløsningen blir latt stå i 24 timer. Det flyktige materialet blir avdampet i vakuum, den viskøse resten blir renset på en silikagel kolonne (der hovedfunksjonen er å fjerne mindre mobilt DBN) for å tilveiebringe en N-blokkert pyrrol, som blir anvendt i det neste trinnet uten ytterligere rensing.
EKSEMPEL 29b
Til en oppløsning av N-blokkert pyrrol ifølge Eksempel 29a (7.8 g, 24.19 mmol) i MeOH (100 ml) blir det tilsatt fast NagCOs(6.41 g, 60.48 mmol) og reaksjonsblandingen blir omrørt ved romtemperatur i 48 timer med separasjon av den resulterende deblokkerte pyrrolen. Blandingen blir avdampet til tørrhet, og resten blir triturert grundig med H20 (50 ml) for å oppløse uorganiske materialer og ekstrahert med CHCI3(3 x 100 ml). Ekstraktet blir tørket (NagSO^ og avdampet for å tilveiebringe en viskøs gummi, som blir renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av silikagel/CHCl3; utbytte 4 g; smp. 88 - 89°C.
EKSEMPEL 30
Benzoyl isotiocyanat (1.5 g, 8.96 mmol) blir tilsatt dråpevis til en oppløsning av ublokkert pyrrol ifølge Eksempel 29b (1.99 g, 7.95 mmol) i tørr CH2C12(50 ml). Etter 1 time ved romtemperatur blir oppløsningen avdampet og den gummiholdige resten blir løst opp i Et20 (100 ml) med nesten øyeblikkelig separasjon av det krystallinske faste stoffet. Et20 filtratet blir oppvarmet til koking og fortynnet med et likt volum varm cykloheksan. Ved sakte avkjøling tilveiebringer oppløsningen ytterligere tioureidoprodukt: utbytte 2.89 g ( 88%) ; smp. 158 - 159°C.
EKSEMPEL 31a
Metyljodid (1.7 g, 11.96 mmol) blir tilsatt til en oppløsning av tioureidoprodukt ifølge Eksempel 30 (1.7 g, 4.1 mmol) og DBN (0.56 g, 4.52 mmol) i tørr CH2C12(80 ml) ved 0°C. Oppløsningen blir omrørt ved 0"C i 15 min., ved romtemperatur i 1 time og deretter avdampet i vakuum. En oppløsning av resten i CHCI3ble kromatografert på en silikagel kolonne med CHCI3som elueringsmiddel for å tilveiebringe homogene fraksjoner av metyltio mellomprodukt-forbindelsen.
EKSEMPEL 31b
En oppløsning av metyltioforbindelsen ifølge Eksempel 31a (1.72 g, 4.02 mmol) i 50 ml MeOH som er blitt mettet med NH3ved 0°C blir oppvarmet ved 90 - 95°C i 24 timer i en glass-kledd rustfri stålbombe. Innholdet av den avkjølte bomben blir avdampet i vakuum for å tilveiebringe en blanding av forbindelsen (IVE), benzamid og et bi-produkt som er et 2-metyltio derivat, i motsetning til 2-aminoforbindelsen (IVE). Blandingen blir grundig omrørt i flere minutter med omtrent 75 ml EtgO og dt uoppløselige hvite faste stoffet blir filtrert ut og vasket med EtgO. Filtratet inneholdt det meste av benzamidet og 2-metyltio komponentene. En oppløsning av EtgO-uoppløselig fast stoff (0.850 g) i MeOH blir avdampet med omtrent 10 g silikagel. Pulverformet rest blir fordelt jevnt på toppen av en silikagel kolonne som deretter blir eluert med CHCl3/Me0H/H0Ac (95:5:1) for å tilveiebringe 2-metyltio bi-produktet og det ønskede 2-amino produktet (IVE). (IVE) blir omkrystallisert ved ekstrahering i kokende isopropyl acetat i en Soxhlet apparatur. De hvite krystallene blir samlet i tre porsjoner og tørket i vakuum over P2O5ved 110°C i 7 timer; utbytte 5456, smp. >300°C dek.; analyse: beregnet for C14<H>20<N>4O: C, 64.60; H, 7.74; N, 21.52. Funnet: C, 64.78; H, 8.01; N, 21.61.
EKSEMPEL 32
Forbindelsen ifølge Eksempel 31b blir testet for enzyminhi-bisjons-aktivitet som i Eksempel 15. Ved 1 mM fosfat er I<C>500.030 uM, og ved 50 mM fosfat er IC500.840 uM.
EKSEMPEL 33
Ovennevnte mellomprodukt blir fremstilt i dette eksemplet ved en modifikasjon av fremgangsmåten til Schiemenz, G.P.; Engelhard, H. (Chem. Ber., 1962, 95, 195).
En blanding av cyanoeddiksyre (25.38 g, 298.38 mmol), 2,3,5-triklorbenzaldehyd (25.0 g, 119.35 mmol), ammoniumacetat (500 mg), toluen (120 ml) og pyridin (65 ml) blir oppvarmet ved tilbakeløp i 16 timer i en flaske utstyrt med en Dean-Stark felle og kondensator. Oppløsningsmidlene blir avdampet i vakuum, resten ekstrahert med CHCI3, som blir vasket med HgO, tørket med (NagSO^ og avdampet for å tilveiebringe råproduktet, som blir renset ved silikagel kolonnekromatografi ved anvendelse av heksan-EtOAc blandingen som elueringsmiddel. Utbytte 23.69 g (7356); smp. 90 - 91° C.
EKSEMPEL 34a
Ovennevnte mellomforbindelse blir fremstilt i dette eksemplet. Til en omrørt blanding av NaH (1.56 g, 65.05 mmol) og etyl format (14.78 g 199.51 mmol) i THF (100 ml) blir det tilsatt substituert pentandinitril ifølge Eksempel 33 (10.17 g, 37.17 mmol) ved romtemperatur under en nitrogenatmosfære, og den resulterende reaksjonsblandingen blir omrørt i 24 timer. Flyktige materialer blir avdampet i vakuum ved romtemperatur. Vann (50 ml) blir tilsatt til resten ved 0-5°C, og oppløsningen blir justert til pH 5 - 6 med 2056 kone. HC1 (v/v). Den tunge oljen blir ekstrahert inn i etylacetat, vasket med HgO (1 x 100 ml) og tørket (MgSC^). Etylacetat-laget blir avdampet for å tilveiebringe en rødbrun olje (11.0 g) som blir anvendt i det neste trinnet uten ytterligere rensning.
EKSEMPEL 34b
Ovennevnte mellomforbindelse blir fremstilt i dette eksemplet. Glycin metyl ester hydroklorid (8.17 g, 65.06 mmol) og natriumacetat (5.33 g, 65.06 mmol) blir tilsatt til en oppløsning av rå formylforbindelse ifølge Eksempel 34a (11.0 g) i en blanding av MeOH (80 ml) og HgO (20 ml), og den resulterende oppløsningen blir omrørt ved romtemperatur i 22 timer. Etter avdampning av oppløsningsmidlet ved romtemperatur, blir resten ekstrahert med etylacetat. Det vaskede (HgO) og tørkede (MgSO^ organiske laget blir avdampet for å tilveiebringe en olje. Flammekolonne kromatografi (silikagel ) ved anvendelse av CHCI3som elueringsmiddel ga det rene ønskede enaminet som en blanding av cis-trans isomerer som blir omkrystallisert fra MeOH, utbytte 10.41 g (7556), smp. 142 - 143°C. EKSEMPEL 35
Ovennevnte mellomforbindelse blir fremstilt i dette eksemplet. En oppløsning av enaminet ifølge Eksempel 34b (10.0 g, 26-84 mmol) i tørr CE2C12(100 ml) blir avkjølt til 0°C og behandlet med 1,5-diazabicyklo[4.3.0]non-5-ene (10.53 g, 84.79 mmol) under en nitrogenatmosfære etterfulgt av etylklorformat (6.90 g, 63.57 mmol). Oppløsningen blir omrørt ved 0°C i 1 time og deretter ved romtemperatur i 48 timer. De flyktige materialene blir avdampet i vakuum for å tilveiebringe en viskøs mørk gummi som blir renset ved flamme kolonne-kromatografi over silikagel ved anvendelse av CHCI3som elueringsmiddel. Alle fraksjonene inneholdende ønsket N-beskyttet pyrrol blir slått sammen og avdampet for å tilveiebringe et skumaktig lett lysegult materiale som blir omrørt i MeOH (100 ml) for å tilveiebringe det krystallinske materialet som blir omkrystallisert fra CHCl3-MeOH, utbytte 8.92 g (74 .756), smp. 160 - 161°C.
EKSEMPEL 36
Ovennevnte mellomforbindelse blir fremstilt i dette eksemplet. En suspensjon av N-beskyttet pyrrol ifølge Eksempel 35 (8.6 g, 19.34 mmol) i MeOH (300 ml) blir behandlet med Na2C03(5.12 g, 48.34 mmol) og reaksjonsblandingen blir omrørt ved romtemperatur i 17 timer med separasjon av deblokkert pyrrol iløpet av den første timen. Fast natrium karbonat blir fjernet ved filtrering og vasket grundig med MeOH. Filtratet blir redusert til et volum på 25 ml og holdt i et kjøleskap i 1 time for å tilveiebringe 5.23 g krystallinsk produkt. Ytterligere konsentrering av morvæsken ga et ytterligere 0.14 g rent produkt; totalt utbytte 6.45 g (89.5$), smp. 178-181°C.
EKSEMPEL 37
Ovennevnte mellomforbindelse blir fremstilt i dette eksemplet. Til en suspensjon av pyrrol i Eksempel 36 (5.83 g, 15.64 mmol) i diklormetan (100 ml) blir det tilsatt benzoylisotiocyanat (2.88 g, 17.64 mmol) ved romtemperatur under nitrogen. Reaksjonsblandingen blir omrørt i 30 min. med separasjon av den ønskede tioureido forbindelsen. Ytterligere benzoyl isotiocyanat (0.5 ml) blir tilsatt til denne og på ny omrørt i 30 min. Oppløsningsmidlet blir avdampet til tørrhet, og den lysegule resten blir triturert med metanol. Det hvite krystallinske materialet blir isolert ved filtrering og omkrystallisert fra en kloroform-eterblanding for å tilveiebringe den nødvendige tioureidoforbindelsen som en analytisk ren prøve, utbytte 7.71 g ( 92%), smp. 210 - 211'C.
EKSEMPEL 38
Ovennevnte mellomforbindelse blir fremstilt i dette eksemplet. En oppløsning av tioureido forbindelsen ifølge Eksempel 37 (6.75 g, 12.6 mmol) og 1,5-diazabicyklo[4.3.0]non-5-ene (1.76 g, 14.20 mmol) i tørr CH2C12(200 ml) blir avkjølt til 0'C og behandlet med metyljodid (5.20 g, 36.65 mmol). Reaksjonsblandingen blir omrørt ved 0°C i 10 min. og deretter i 1 time ved romtemperatur. Oppløsningsmidlet blir avdampet ved romtemperatur og resten blir ekstrahert med CHCI3, vasket med E20 (2 x 50 ml), tørket (Na2S04) og avdampet for å tilveiebringe et glassaktig skum (6.95 g) som blir anvendt i det neste trinnet uten rensing.
EKSEMPEL 39
De ovennevnte forbindelsene A og B blir fremstilt i dette eksemplet. Forbindelse A er en forbindelse ifølge foreliggende oppfinnelse og forbindelse B er et mellomprodukt. En oppløsning av metyltio mellomproduktet ifølge Eksempel 38 (6.90 g, 12.54 mmol) i MeOH (200 ml) er mettet ved 0°C med ammoniakk og oppvarmet ved 100°C i 20 timer i en glass-kledd rustfri stålbombe. Reaks j" onsblandingen blir bragt til romtemperatur og oppløsningsmidlet avdampet ved romtemperatur. Rensing av den rå blandingen ved flamme kolonnekromatografi over silikagel ved anvendelse av CHCI3som elueringsmiddel ga 8B (1.1 g, 2156), smp. 290 - 291°C og deretter CHCl3-MeOH (95:5) ga ren 8A (2.76 g, 57 .556), smp. 284-285°C.
EKSEMPEL 40
Forbindelsen ifølge foreliggende oppfinnelse ifølge Eksempel 39 blir testet for enzym inhibisjonsaktivitet. En purin nukleosid fosforylase (PNP) enzymanalyse blir utført der PNP aktiviteten (IC50) for forbindelsen (8A) blir funnet, bestemt radiokjemisk ved måling av dannelsen av [<14>C]-hypoksantin fra [<14>C]-inosin (se Biomedicine, 1980, 33, 39) ved anvendelse av kalvemilt som enzymkilde. Ved 1 mM fosfat er IC500.64 jiM og ved 50 mM fosfat er IC5010 uM.
EKSEMPEL 41
Ifølge fremgangsmåten angitt i Eksemplene 33-39, blir 3-(3-klorfenyl )-3-(2-amino-4-okso-3E,5H-pyrrolo[3,2-d]pyrimidin-7-yl)propannitril fremstilt ved anvendelse av 3-(3-klorofenyl)-pentanedinitril som utgangsmateriale, utbytte 54.596, smp. 157 - 158°C.
EKSEMPEL 42
Forbindelsene ovenfor 3-(2-amino-4-okso-3EJ.5E-pyrrolo[3,2-d]-pyrimidin-7-yl)-3-fenylpropannitril blir fremstilt i dette eksemplet. En oppløsning av forbindelsen er oppnådd i Eksempel 39 (2.0 g, 5.22 mmol) i varm etanol (250 ml) og dimetylformamid (DMF) (150 ml) blir hydrert over 3096 Pd/C katalysator (1.0 g) i nærvær av trietylamin (2.64 g, 5.0 ekvivalent) ved atmosfærisk trykk. Etter 5 timer er reak-sjonen fullført og katalysatoren blir filtrert ut under Ng trykk. Det faste stoffet oppnådd ved avdampning av filtratet blir triturert og sonikert med EgO og tørket, utbytte 1.28 g
(8896), smp. 168 - 170° C.
EKSEMPEL 43
Forbindelsen fremstilt i Eksempel 42 blir testet for enzym inhibisjonsaktivitet som i Eksempel 188. Ved 1 mM fosfat er I<C>500.023 uM og ved 50 mM fosfat er IC50<4.>7 uM.
EKSEMPEL 44
Forbindelsen ovenfor 3-(2-amino-4-okso-3H,5H-pyrrolo[3,2-d]pyrimidin-7-yl)-3-fenylpropansyre blir fremstilt i dette eksemplet. En oppløsning av forbindelsen oppnådd i Eksempel 42 (0.200 g, 0.72 mmol) i 6N HC1 (3.0 ml) blir oppvarmet ved tilbakeløp i 18 timer. Oppløsningsmidlet blir avdampet i vakuum og resten blir triturert med HgO (6 ml), justert til pH 10 med kons. ammoniumhydroksid. Uoppløselig materiale blir samlet ved filtrering og filtratet blir på ny justert til pH 6.8. Hvitt materiale som blir presipitert ut blir oppsamlet, vasket med vann og tørket, utbytte 0.19 g (8996), smp. 290°C dek.
EKSEMPEL 45
Forbindelsen fremstilt i Eksempel 44 blir testet for enzym inhibisjonsaktivitet som i Eksempel 40. Ved 1 mM fosfat er IC500.012 uM og ved 50 mM fosfat er IC50 0.19 uM.
EKSEMPEL 46
Forbindelsen ovenfor 3-(2-amino-4-okso-3E,5E-pyrrolo[3,2-d]pyrimidin-7-yl)-3-fenylpropanamid blir fremstilt i dette eksempel. En oppløsning av forbindelsen oppnådd i Eksempel 42 (0.200 g, 0.72 mmol) i kons. H2S04(0.5 ml) blir omrørt ved romtemperatur i 20 timer og deretter heilt inn i knust is (5.0 g) og justert til pH 6.8 med kons. NH40H. Det presipi-terte faste stoffet blir oppsamlet, vasket med HgO og tørket, utbytte 0.180 g, smp. 199 - 201 °C dek.
EKSEMPEL 47
Forbindelsen fremstilt i Eksempel 46 blir testet for enzym inhibisjonsaktivitet som i Eksempel 40. Ved 1 mM fosfat er I<C>500.20 uM og ved 50 mM fosfat er IC506.6 >jM.
EKSEMPEL 48
3-(2-amino-4-okso-3H,5E-pyrrolo[3,2-d]pyr imidin-7-yl)-3-cykloheksylpropansyre blir fremstilt i dette eksemplet. En oppløsning av forbindelsen oppnådd i Eksempel 44 (83 mg, 0.28 mmol) i trifluoreddiksyre (TFA) (15 ml) blir hydrert med Pt02(83 mg) ved 27.2 kg/6.4 cm<2>i 24 timer. Katalysatoren blir filtrert ut gjennom et Celite sjikt, og filtratet blir avdampet ved 25° C. Resten blir suspendert i HgO (8 ml) og justert til pE 8.5 med kons. NE4OE og filtrert gjennom et Whatman filter papir for å fjerne brunfargede urenheter. Det fargeløse filtratet blir justert til pE 6.8 og den presipi-
terte forbindelsen blir filtrert, vasket med HgO og tørket, utbytte 65 mg ( 11%), smp. >300°C.
EKSEMPEL 49
Forbindelsen fremstilt i Eksempel 48 blir testet for enzym inhibisjonsaktivitet som i Eksempel 40. Ved 1 mM fosfat er I<C>500.097 >jM og ved 50 mM fosfat er IC501.0 uM.

Claims (8)

1. Analogifremgangsmåte for fremstilling av en forbindelse som er en purin nukleosidfosforylase inhibitor valgt fra gruppen bestående av 2-amino-7-(R)-3H,5H-pyrrolo[3,2-d]pyrimidin-4-one (I) og en forbindelse med formel II
hvor for forbindelse I er R cykloheksyl, cykloheksenyl eller -CHg-Ri»og hvor R^er en med laverealkyl eller trifluormetyl substituert eller usubstituert C4-Cg-cykloalkyl eller cykloalkenylgruppe, en tetrahydrofuranylgruppe, en adamantyl-gruppe eller en pyridylgruppe og hvori forbindelsen med formel II er R^H, NHg eller SCH3, R<2>er en evt. med ett eller flere halogenatomer substituert fenylgruppe eller er en C4~Cg-cykloalkylgruppe, m er 0-4, X er OH CN, karboksy laverealkoksykarbonyl eller aminokarbonyl,karakterisert vedfremstilling av forbindelsen I hvori R er cykloheksenyl eller -CHg-Rinår R^er pyridinyl eller alicyklisk gruppe omfatter følgende trinn 1) til 7):
1) omsetning av en 3-substituert propannitril med en alkylformat og en base for å danne en 3-cyklo-2-formyl-propannitril;
2) omsetning av 2-formyl-3-substituert propannitril med glycinmetylesterhydroklorid og natrium eller ammoniumacetat for å danne tilsvarende enamin;
3) omsetning av enaminet med en alkylklorformat og DBN eller DBU for å danne tilsvarende N-blokkerte pyrrol;
4) omsetning av N-blokkert pyrrol med en base for å danne tilsvarende deblokkerte pyrrol;
5) omsetning av deblokkert pyrrol med benzoylisotiocyanat for å danne tilsvarende tioureido forbindelse;
6) omsetning av tioureido forbindelsen, med et alkylhalid for å danne den tilsvarende metyltioforbindelsen; og
7) omsetning av metyltioforbindelsen med metanolisk eller etanolisk ammoniakk for å danne en blanding av 2-amino-7-(R)-3E,5E-pyrrolo[3,2-d]pyrimidin-4-one forbindelsen (I) og 2-metyltio biproduktet; og når forbindelse I fremstilles hvori R er cykloheksenyl eller -CEg-Rinår R^er en cykloalkenylgruppe, trinnene 1) til 7) som definert ovenfor og eventuelt følgende trinn 8:
8) hydrogenering av 2-amino-7-(R)-3H,5H-pyrrolo[3,2-d] pyrimidin-4-one forbindelsen fra trinn 7) til 2-amino-7-(R)-3E,5H-pyrrolo [3,2-d] pyrimidin-4-one; og eventuelt følgende trinn 1) til 9) når forbindelsen I fremstilles hvor R er CEg-R^når R^er tetrahydrofuranyl,
1) omsetning av en 3-substituert eller usubstituert furanyl-propannitril med et alkylformat og en base for å danne en 3-substituert eller usubstituert furanyl-2-formyl-propannitril;
2) omsetning av 3-substituert eller usubstituert furanyl-2-formyl-propannitril med glycinmetylesterhydroklorid og natrium eller ammoniumacetat for å danne tilsvarende enamin;
3) omsetning av enaminet med en alkylklorformat og DBN eller DBU for å danne tilsvarende N-blokkerte pyrrol;
4) omsetning av N-blokkert pyrrol med en base for å danne tilsvarende deblokkerte pyrrol;
5) omsetning av deblokkerte pyrrol med benzoylisotiouryanat for å danne tilsvarende tioureido forbindelse;
6) omsetning av tioureido forbindelsen med et alkylhalid for å danne tilsvarende metyltio forbindelse;
7) omsetning av metyltio forbindelsen med metanolisk eller etanolisk ammoniakk for å danne en blanding av 2-amino-7-substituert eller usubstituert furanyl-3H,5H-pyrrol[3,2-d]pyrimidin-4-one forbindelse (I) og 2-metyltiobi-produktet;
8) hydrogenering av 2-amino-7-substituerte eller usubstituerte furanyl-3H,5H-pyrrolol[3,2-d]pyrimidin-4-one forbindelsen fra trinn 7) til 2-amino-7-substituerte eller usubstituerte tetrahydrofuranyl-3H,5H-pyrrol [3,2-d] pyrimidin-4-one; og og hvori ved fremstilling av forbindelse med formel II omfatter følgende trinn: a) omsetning av et eventuelt substituert cyklisk aldehyd med cyanoeddiksyre i nærvær av ammoniumacetat for å danne en 3-substituert pentandinitril; b) omsetning av 3-substituert-pentandinitril med et alkylformat og en base for å danne et 2-formyl-3-substituert-pentandinitril; c) omsetning av 2-formyl-3-substituert-pentandinitril med glycinmetylesterhydroklorid og natrium eller ammoniumacetat for å danne metyl N-[3-substituert-2,4-dicyano)-2-butenyl]glycin; d) omsetning av metyl N-[3-substituert-2,4-dicyano )-2-butenyl]glycin med en alkylklorformat og DBN eller DBU for å danne l-etyl-2-metyl 3-amino-4-substituert lH-pyrrol-1,2-dikarboksylat; og e) omsetning av l-etyl-2-metyl-3-amino-4-substituert-lE-pyrrol-1,2-dikarboksylat med en base for å danne metyl 3-amino-4-substituert-lH-pyrrol-2-karboksylat (i) og følgende trinn f)-h) for fremstilling av 3-substituert-3 - [2-amino-4-okso-3H-5H-pyrrolo [3 ,2-d]-pyrimidin-7-yl]-propannitril; f) omsetning av metyl 3-amino-4-substituert-lH-pyrrol-2-karboksylat med benzoylisotiocyanat for å danne N-benzoyl-N' - ( 2-metoksykarbonyl -4-substituert-lH-pyrrol-3-benzoylisotiocyanat for å danne N-benzoyl-N'-(2-metoksykarbonyl-4-substituert-lH-pyrrol-3-yl)tiourea; g) omsetning av N-benzoyl-N'-[2-metoksykarbonyl-4-substituert-lH-pyrrol-3-yl]tiourea med et alkylhalid for å fremstille N-benzoyl-N'-2-metoksykarbonyl-4-substituert-lE-pyrrol-3-yl]-S-alkyltiourea; og h) omsetning av N-benzyl-N'-[2-metoksykarbonyl-4-substituert-lH-pyrrol-3-yl]-S-alkyltiourea med metanolisk eller etanolisk ammoniakk for å danne en blanding av 3-substituert 3-(2-amino-4-okso-3E,5H-pyrrolo[3,2-d]pyrimidin-7-yl )propannitril og 3-substiutert-3-(2-metyltio-4-okso-3H,5H-pyrrolo[3,2-d]pyrimidin-7-yl)propannitril; (ii) og følgende trinn f)-j) ved fremstilling av 3-substi tuert-3 - [2-alkoksy-4-okso-3H , 5H-pyrrolo[3 ,2-d]pyrimidin-7-yl]propannitril; f) omsetning av metyl 3-amino-4-substituert-lH-pyrrol-2-karboksylat med benzoylisotiocyanat for å danne N-benzoyl-N'-2-metoksykarbonyl-4-substituert-lH-pyrrol-3-yl)tiourea; g) omsetning av N-benzoyl-N'-(2-metoksykarbonyl-4-substituert-lH-pyrrol-3-yl)tiourea med et alkylhalid for å danne N-benzoyl-N' -(2-metoksykarbonyl-4-substituert-lH-pyrrol-3-yl]-S-alkyltiourea; og h) omsetning av N-benzoyl-N'-(2-metoksykarbonyl-4-substituert-lH-pyrrol-3-yl(-S-alkyltiourea med metanolisk eller etanol i sk ammoniakk for å danne en blanding av 3-substituert-3-(2-amino-4-okso-3H,5H-pyrrolo[3 , 2-d]pyri-midin-7-yl)propannitril og 3-substituert-3-(2-alkyltio-4-okso-3H,5H-pyrrolo[3,2-d]pyrimidin-7-yl)propannitril; i) omsetning av 3-substituert-3-(2-metyltio-4-okso-3H,5H-pyrrolo[3,2-d]pyrimidin-7-yl)propannitril med et oksi-der ingsmiddel for å danne 3-substituert-3-(2-metyl-sulfonyl-4-okso-3H,5E-pyrrolo[3,2-d]pyrimidin-7-ylpropan-nitril; og j) omsetning av 3-substituert-3-(2-metylsulfonyl-4-okso-3H,5H-pyrrolo[3,2-d]pyrimidin-7-yl]propannitril med natriumalkoksid for å danne 3-substituert-3-(2-alkoksy 4-okso-3H,5H-pyrrolo[3,2-d]pyrimidin-7-yl)propannitril; (iii) og følgende trinn f)-g) ved fremstilling av 3-subst i tuert-3-(4-okso-3H ,5H-pyrrolo[3 ,2-d] pyr imi din-7-yl)propannitril; k) omsetning av metyl 3-amino-4-substituert-lH-pyrrol-2-karboksylat med dimetylformamiddimetylacetal for å danne metyl 4-substituert-3-[N-(dimetylaminometylen)amino]-1H-pyrrol-2-karboksylat; og
1) omsetning av metyl 4-substituert-3-[N-(dimetylamino-metylen)amino]-lH-pyrrol-2-karboksylat med metanolisk ammoniakk for å danne 3-substituert-3-(4-okso-3H,5H-pyrrolo[3,2-d]pyrimidin-7-yl)propannitril.
2 . Analogifremgangsmåte ifølge krav 1, for fremstilling av en forbindelse med formel I eller II, hvori er 2-, 3- eller 4-pyridinyl, 1- eller 2-adamantyl, cyklopentyl, cykloheksyl eller cykloheptyl,karakterisert vedat man anvender tilsvarende substituerte utgangsmaterialer. 3. Analogifremgangsmåte ifølge krav 1 for fremstilling av forbindelse (I) hvori R er 3-pyridinylmetyl,karakterisert vedat man anvender tilsvarende substituerte utgangsmaterialer.
NO921679A 1989-10-31 1992-04-29 Analogifremgangsmåte for fremstilling av inhibitorer av purin nukleosid fosforylase NO301423B1 (no)

Applications Claiming Priority (6)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US07/429,098 US4985434A (en) 1989-10-31 1989-10-31 7-substituted derivatives of 2-amino-3H,5H-pyrrolo(3,2-d)pyrimidin-4-ones and pharamceutical uses and compositions containing the same
US07/429,097 US5008270A (en) 1989-10-31 1989-10-31 2-amino-7-(heterocyclomethyl)-3H,5H-pyrrolo[3,2-d]pyrimidin-4-ones and pharmaceutical uses and compositions containing the same
US07/429,100 US4985433A (en) 1989-10-31 1989-10-31 2-amino-7-(pyridinylmethyl)-3H,5H-pyrrolo[3,2-d]pyrimidin-4-ones and pharmaceutical uses and compositions containing the same
US07/429,099 US5008265A (en) 1989-10-31 1989-10-31 2-amino-7-(alicyclomethyl)-3H,5H,-pyrrolo[3,2-d]pyrimidin-4-ones and pharmaceutical uses and compositions containing the same
US44279889A 1989-11-29 1989-11-29
PCT/US1990/005756 WO1991006548A1 (en) 1989-10-31 1990-10-12 Inhibitors of purine nucleoside phosphorylase

Publications (3)

Publication Number Publication Date
NO921679D0 NO921679D0 (no) 1992-04-29
NO921679L NO921679L (no) 1992-06-17
NO301423B1 true NO301423B1 (no) 1997-10-27

Family

ID=27541578

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO921679A NO301423B1 (no) 1989-10-31 1992-04-29 Analogifremgangsmåte for fremstilling av inhibitorer av purin nukleosid fosforylase

Country Status (9)

Country Link
EP (1) EP0500653A4 (no)
JP (1) JP2866478B2 (no)
AU (1) AU654264B2 (no)
CA (1) CA2072123C (no)
FI (1) FI103972B (no)
HU (1) HUT61765A (no)
LV (1) LV10100B (no)
NO (1) NO301423B1 (no)
WO (1) WO1991006548A1 (no)

Families Citing this family (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5726311A (en) * 1989-11-29 1998-03-10 Biocryst Pharmaceuticals, Inc. 7-disubstituted-methyl-4-oxo-3H,5H-pyrrolo 3,2-d!pyrimidine and pharmaceutical uses and compositions containing the same
US5236926A (en) * 1992-02-03 1993-08-17 Warner-Lambert Company 9-substituted-8-halo or -8-hydroxy-9-deazaguanines as inhibitors or PNP for pharmaceutical compositions
CA2133346A1 (en) * 1992-04-21 1993-10-28 Shri Niwas 7-disubstituted-methyl-4-oxo-3h,5h-pyrrolo[3,2-d]pyrimidine and pharmaceutical uses and compositions containing the same
AU695032B2 (en) * 1994-10-05 1998-08-06 Darwin Discovery Limited Purine and guanine compounds as inhibitors of PNP
GB9520364D0 (en) * 1995-10-05 1995-12-06 Chiroscience Ltd Compouundds
GB9520363D0 (en) * 1995-10-05 1995-12-06 Chiroscience Ltd Compounds
EP0986563A1 (en) * 1997-05-29 2000-03-22 Novartis AG 2-amino-7-(1-substituted-2-hydroxyethyl)-3,5-dihydro-pyrrolo 3,2-d]pyrimidin-4-ones
US6174888B1 (en) 1998-05-28 2001-01-16 Novartis Ag 2-amino-7-(1-substituted-2-hydroxyethyl)-3,5-dihydropyrrolo[3,2-D]pyrimidin-4-ones
JP4496586B2 (ja) * 2000-01-24 2010-07-07 日産化学工業株式会社 キノリルアクリロニトリルの製造法及びその中間体
EP1539783B1 (en) * 2002-08-21 2011-04-13 Albert Einstein College Of Medicine Of Yeshiva University Inhibitors of nucleoside phosphorylases and nucleosidases
NZ523970A (en) * 2003-02-04 2005-02-25 Ind Res Ltd Process for preparing inhibitors of nucleoside phoshorylases and nucleosidases
EP2225226B1 (en) 2007-12-26 2016-08-17 Critical Outcome Technologies, Inc. Compounds and their use in a method for treatment of cancer
CA2730890C (en) 2008-07-17 2018-05-15 Critical Outcome Technologies Inc. Thiosemicarbazone inhibitor compounds and cancer treatment methods
EP3235818A3 (en) 2010-04-01 2018-03-14 Critical Outcome Technologies, Inc. Compounds for the treatment of hiv

Family Cites Families (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS5988484A (ja) * 1982-11-09 1984-05-22 Takeda Chem Ind Ltd 新規７−デアザプリン誘導体
CA1293727C (en) * 1986-08-26 1991-12-31 Catherine Rose Kostlan 9-deazaguanines
CA1294960C (en) * 1986-10-24 1992-01-28 Thomas C. Malone 7-deazaguanines as immunomodulators
US4921858A (en) * 1986-10-24 1990-05-01 Warner-Lambert Company 7-deazaguanines as immunomodulators
DE3726044A1 (de) * 1987-02-11 1988-08-25 Bayer Ag Akarizide mittel auf basis von azomethinderivaten und azomethine des 2,3-diaminomaleinsaeurenitrils
US4927830A (en) * 1988-04-08 1990-05-22 The Regents Of The University Of Michigan Acyclic pyrrolo[2,3-D]pyrimidine analogs as antiviral agents
EP0460116B1 (en) * 1989-02-27 1997-08-27 Biocryst Pharmaceuticals Inc. 9-substituted-8-unsubstituted-9-deazaguanines
US4985434A (en) * 1989-10-31 1991-01-15 Biocryst, Inc. 7-substituted derivatives of 2-amino-3H,5H-pyrrolo(3,2-d)pyrimidin-4-ones and pharamceutical uses and compositions containing the same
US4985433A (en) * 1989-10-31 1991-01-15 Biocryst, Inc. 2-amino-7-(pyridinylmethyl)-3H,5H-pyrrolo[3,2-d]pyrimidin-4-ones and pharmaceutical uses and compositions containing the same

Also Published As

Publication number Publication date
LV10100A (lv) 1994-05-10
NO921679D0 (no) 1992-04-29
JPH05504551A (ja) 1993-07-15
FI921900A (fi) 1992-04-28
EP0500653A4 (en) 1995-08-23
CA2072123C (en) 2001-06-12
NO921679L (no) 1992-06-17
HU9201450D0 (en) 1992-09-28
FI103972B1 (fi) 1999-10-29
LV10100B (en) 1995-08-20
AU654264B2 (en) 1994-11-03
JP2866478B2 (ja) 1999-03-08
WO1991006548A1 (en) 1991-05-16
HUT61765A (en) 1993-03-01
FI921900A0 (fi) 1992-04-28
AU6712590A (en) 1991-05-31
EP0500653A1 (en) 1992-09-02
CA2072123A1 (en) 1991-05-01
FI103972B (fi) 1999-10-29

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP4205168B2 (ja) ピリミジン誘導体およびその製造法
AU2002366811B2 (en) Pyrimidine A2B selective antagonist compounds, their synthesis and use
AU763658B2 (en) Pyrrolo(2,3d)pyrimidine compositions and their use
DE60319820T2 (de) Pyrazoloä1,5-aüpyrimidin-verbindungen als antivirale agentien
AU2004293416B2 (en) Benzylether and benzylamino beta-secretase inhibitors for the treatment of Alzheimer&#39;s disease
NO301423B1 (no) Analogifremgangsmåte for fremstilling av inhibitorer av purin nukleosid fosforylase
DE60030002T2 (de) Für den adenosin-a1-a2a-und-a3-rezeptor spezifische verbindungen und verwendungen davon
JP2000501694A (ja) 複素環置換シクロペンタン化合物
NO310359B1 (no) Pyrrolopyrimidiner og fremgangsmåter for fremstilling av samme, farmasöytisk sammensetning omfattende samme, samtanvendelse av samme for fremstilling av legemiddel
AU2004255191A1 (en) Phenylcarboxylate beta-secretase inhibitors for the treatment of Alzheimer&#39;s disease
ES2431279T3 (es) Arilciclohexiléteres de dihidro-tetraazabenzoazulenos para uso como antagonistas del receptor V1A de la vasopresina
JPH0276843A (ja) ビアリール化合物及びその製造方法
US5008270A (en) 2-amino-7-(heterocyclomethyl)-3H,5H-pyrrolo[3,2-d]pyrimidin-4-ones and pharmaceutical uses and compositions containing the same
EP0271040A2 (de) Neue Pyrrolobenzimidazole, Verfahren zu ihrer Herstellung, sowie Arzneimittel
IE58788B1 (en) Ethylenediamine monoamide derivatives
US5008265A (en) 2-amino-7-(alicyclomethyl)-3H,5H,-pyrrolo[3,2-d]pyrimidin-4-ones and pharmaceutical uses and compositions containing the same
US4985433A (en) 2-amino-7-(pyridinylmethyl)-3H,5H-pyrrolo[3,2-d]pyrimidin-4-ones and pharmaceutical uses and compositions containing the same
EP0460116B1 (en) 9-substituted-8-unsubstituted-9-deazaguanines
US5189039A (en) 7-disubstituted-methyl-4-oxo-3H,5H-pyrrolo[3,2d]pyrimidine and pharmaceutical uses and compositions containing the same
AU4276693A (en) 7-disubstituted-methyl-4-oxo-3H,5H-pyrrolo(3,2-d)pyrim idine and pharmaceutical uses and compositions containing the same
EP0464572A2 (de) Aminosäurederivate
US5726311A (en) 7-disubstituted-methyl-4-oxo-3H,5H-pyrrolo 3,2-d!pyrimidine and pharmaceutical uses and compositions containing the same
DE60107852T2 (de) Thienopyrrolidinone
RU2097384C1 (ru) Производные 2-амино-7-(chr2r3)-3н,5н-пирроло[3,2-d]-пиримидин-4-она, способы их получения и способ селективного ингибирования пролиферации т-лимфоцитов млекопитающего и не оказывающий воздействия на b-лимфоциты
Su et al. Pyrimidines. 21. Novel reactions of 5‐cyano‐1, 3‐dimethyluracil with carbon nucleophiles. A facile preparation of certain pyrido [2, 3‐d] pyrimidines

Legal Events

Date Code Title Description
MM1K Lapsed by not paying the annual fees

Free format text: LAPSED IN APRIL 2002