NO167295B - Fremgangsmaate for fremstilling av et terapeutisk aktivt peptid. - Google Patents
Fremgangsmaate for fremstilling av et terapeutisk aktivt peptid. Download PDFInfo
- Publication number
- NO167295B NO167295B NO850709A NO850709A NO167295B NO 167295 B NO167295 B NO 167295B NO 850709 A NO850709 A NO 850709A NO 850709 A NO850709 A NO 850709A NO 167295 B NO167295 B NO 167295B
- Authority
- NO
- Norway
- Prior art keywords
- molecular weight
- peptide
- sequence
- amino acids
- atriopeptigen
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 12
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 title description 2
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims abstract 2
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 44
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 35
- 102000002723 Atrial Natriuretic Factor Human genes 0.000 claims description 26
- ATDGTVJJHBUTRL-UHFFFAOYSA-N cyanogen bromide Chemical compound BrC#N ATDGTVJJHBUTRL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 19
- 101710187800 Natriuretic peptides A Proteins 0.000 claims description 14
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 9
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 claims description 8
- 210000002837 heart atrium Anatomy 0.000 claims description 6
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 claims description 5
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 5
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 claims description 3
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 claims description 3
- 238000001155 isoelectric focusing Methods 0.000 claims description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 3
- 239000002934 diuretic Substances 0.000 abstract description 12
- 230000001452 natriuretic effect Effects 0.000 abstract description 10
- 108010082685 antiarrhythmic peptide Proteins 0.000 abstract description 7
- 230000001882 diuretic effect Effects 0.000 abstract description 6
- YQAXFVHNHSPUPO-RNJOBUHISA-N 2-[[(2s)-2-[[2-[[(2s,4r)-1-[(2s)-1-(2-aminoacetyl)pyrrolidine-2-carbonyl]-4-hydroxypyrrolidine-2-carbonyl]amino]acetyl]amino]propanoyl]amino]acetic acid Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)CNC(=O)[C@@H]1C[C@@H](O)CN1C(=O)[C@H]1N(C(=O)CN)CCC1 YQAXFVHNHSPUPO-RNJOBUHISA-N 0.000 abstract description 3
- 230000000304 vasodilatating effect Effects 0.000 abstract description 3
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 15
- 101800001288 Atrial natriuretic factor Proteins 0.000 description 12
- NSQLIUXCMFBZME-MPVJKSABSA-N carperitide Chemical class C([C@H]1C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@H](C(NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CSSC[C@@H](C(=O)N1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CO)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(O)=O)=O)[C@@H](C)CC)C1=CC=CC=C1 NSQLIUXCMFBZME-MPVJKSABSA-N 0.000 description 12
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 11
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 10
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 9
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 7
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 7
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 7
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 6
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 6
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 6
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 5
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 5
- 230000001746 atrial effect Effects 0.000 description 5
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 5
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 5
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 5
- 102400001287 Atriopeptin-1 Human genes 0.000 description 4
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108010033590 atrial natriuretic factor prohormone (103-123) Proteins 0.000 description 4
- 229950008486 carperitide Drugs 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- 210000002460 smooth muscle Anatomy 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 101800001890 Atrial natriuretic peptide Proteins 0.000 description 3
- 102400001275 Atriopeptin-2 Human genes 0.000 description 3
- 102400001276 Atriopeptin-3 Human genes 0.000 description 3
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 3
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 3
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 3
- 108010034703 atrial natriuretic factor prohormone (103-125) Proteins 0.000 description 3
- 108010034646 atrial natriuretic factor prohormone (103-126) Proteins 0.000 description 3
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 210000004165 myocardium Anatomy 0.000 description 3
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 3
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 3
- 210000002254 renal artery Anatomy 0.000 description 3
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 3
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 3
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 3
- 230000024883 vasodilation Effects 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 2
- 208000004880 Polyuria Diseases 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 2
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- XXPVSJGWOXCVLF-VSJANKAZSA-N atriopeptin ii Chemical compound C([C@H]1C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@H](C(NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CSSC[C@@H](C(=O)N1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)CN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(O)=O)=O)[C@@H](C)CC)[C@@H](C)CC)C1=CC=CC=C1 XXPVSJGWOXCVLF-VSJANKAZSA-N 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 2
- 230000000747 cardiac effect Effects 0.000 description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 2
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 2
- 230000035619 diuresis Effects 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 2
- JMANVNJQNLATNU-UHFFFAOYSA-N oxalonitrile Chemical compound N#CC#N JMANVNJQNLATNU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N propan-1-ol Chemical compound CCCO BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 2
- 108010094135 rat atrial natriuretic peptide Proteins 0.000 description 2
- 230000008327 renal blood flow Effects 0.000 description 2
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 2
- SQGYOTSLMSWVJD-UHFFFAOYSA-N silver(1+) nitrate Chemical compound [Ag+].[O-]N(=O)=O SQGYOTSLMSWVJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 230000002048 spasmolytic effect Effects 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- AYCBRUDZNRVKGK-GWLSAQFNSA-N (2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-4-amino-2-[[(4R,10S,16S,19S,22S,28S,31S,34S,37S,40S,49S,52R)-52-[[(2S)-2-[[(2S)-2-amino-3-hydroxypropanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-19-(3-amino-3-oxopropyl)-49-benzyl-28,37-bis[(2S)-butan-2-yl]-31,40-bis(3-carbamimidamidopropyl)-34-(carboxymethyl)-16-(hydroxymethyl)-22-methyl-10-(2-methylpropyl)-6,9,12,15,18,21,24,27,30,33,36,39,42,45,48,51-hexadecaoxo-1,2-dithia-5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35,38,41,44,47,50-hexadecazacyclotripentacontane-4-carbonyl]amino]-4-oxobutanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]-3-(4-hydroxyphenyl)propanoic acid Chemical compound C([C@H]1C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@H](C(NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CSSC[C@@H](C(=O)N1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CO)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(O)=O)=O)[C@@H](C)CC)[C@@H](C)CC)C1=CC=CC=C1 AYCBRUDZNRVKGK-GWLSAQFNSA-N 0.000 description 1
- PQMRRAQXKWFYQN-UHFFFAOYSA-N 1-phenyl-2-sulfanylideneimidazolidin-4-one Chemical class S=C1NC(=O)CN1C1=CC=CC=C1 PQMRRAQXKWFYQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OMLWNBVRVJYMBQ-YUMQZZPRSA-N Arg-Arg Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O OMLWNBVRVJYMBQ-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- 102000005367 Carboxypeptidases Human genes 0.000 description 1
- 108010006303 Carboxypeptidases Proteins 0.000 description 1
- 102000005572 Cathepsin A Human genes 0.000 description 1
- 108010059081 Cathepsin A Proteins 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 1
- 101000757797 Geobacillus stearothermophilus Aminopeptidase 2 Proteins 0.000 description 1
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 1
- 101500027325 Homo sapiens Atrial natriuretic peptide Proteins 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 108020001621 Natriuretic Peptide Proteins 0.000 description 1
- 102000004571 Natriuretic peptide Human genes 0.000 description 1
- 238000013494 PH determination Methods 0.000 description 1
- QGMRQYFBGABWDR-UHFFFAOYSA-M Pentobarbital sodium Chemical compound [Na+].CCCC(C)C1(CC)C(=O)NC(=O)[N-]C1=O QGMRQYFBGABWDR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 108010033276 Peptide Fragments Proteins 0.000 description 1
- 102000007079 Peptide Fragments Human genes 0.000 description 1
- 241000276498 Pollachius virens Species 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101000733766 Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) Aminopeptidase 2, mitochondrial Proteins 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 239000000959 ampholyte mixture Substances 0.000 description 1
- 108010068380 arginylarginine Proteins 0.000 description 1
- 238000004166 bioassay Methods 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 239000000812 cholinergic antagonist Substances 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000001212 derivatisation Methods 0.000 description 1
- 230000000674 effect on sodium Effects 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 210000000750 endocrine system Anatomy 0.000 description 1
- 230000003176 fibrotic effect Effects 0.000 description 1
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 238000001502 gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 238000001641 gel filtration chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000007429 general method Methods 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 125000001360 methionine group Chemical group N[C@@H](CCSC)C(=O)* 0.000 description 1
- ZIUHHBKFKCYYJD-UHFFFAOYSA-N n,n'-methylenebisacrylamide Chemical compound C=CC(=O)NCNC(=O)C=C ZIUHHBKFKCYYJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002833 natriuretic agent Substances 0.000 description 1
- 239000000692 natriuretic peptide Substances 0.000 description 1
- 229940054441 o-phthalaldehyde Drugs 0.000 description 1
- 229960002275 pentobarbital sodium Drugs 0.000 description 1
- 239000000813 peptide hormone Substances 0.000 description 1
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- ZWLUXSQADUDCSB-UHFFFAOYSA-N phthalaldehyde Chemical compound O=CC1=CC=CC=C1C=O ZWLUXSQADUDCSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 230000012495 positive regulation of renal sodium excretion Effects 0.000 description 1
- 230000025627 positive regulation of urine volume Effects 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 229940124550 renal vasodilator Drugs 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 210000004739 secretory vesicle Anatomy 0.000 description 1
- 229910001961 silver nitrate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000050 smooth muscle relaxant Substances 0.000 description 1
- 239000007974 sodium acetate buffer Substances 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000000626 ureter Anatomy 0.000 description 1
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 1
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/575—Hormones
- C07K14/58—Atrial natriuretic factor complex; Atriopeptin; Atrial natriuretic peptide [ANP]; Cardionatrin; Cardiodilatin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/10—Antioedematous agents; Diuretics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
Description
Foreliggende oppfinnelse angår en fremgangsmåte for fremstilling av et terapeutisk aktivt, høymolekylært,
atrialt peptid med anvendbar natriuretisk, diuretisk og vasodilaterende aktivitet.
Det er kjent at cellene i det atriale myocardium i pattedyr inneholder utallige membran-bundne lagringsgranuler. Disse karakteristiske sekretoriske granuler som er blitt observert i rotter, hunder, katter og humane atria, ligner de som er i de peptid-hormonelle produserende celler. Se DeBold et al., J. Histochem. Cytochem. 26.» 1094-1102 (1978). Det er blitt rapportert at urene vevekstrakter fra atrial-myocardium produserer en hurtig og kraftig natriuretisk respons når de injiseres intravenøst i ikke-diuretiske rotter. Se DeBold et al., Life Sciences 28, 89-94 (1981). Delvis rensing av rotte-atriale homogenater med et kort koknings-trinn og fraksjonering på Sephadex® ble oppnådd av Trippodo et al., Proe. Soc. Exp. Biol. Med. 170, 502-508 (1982). Natriuretisk aktivitet ble funnet av disse forskere i det totale molekylvektområde på 3.600 til 44.000 dalton og i peptidfraksjoner av både det høyere molekylvektområde på 36.000-44.000 dalton og det lavere molekylvektområde på 3.600-5.500 dalton.
Rotteatriale ekstrakter er også blitt fraksjonert i lavmolekylære fraksjoner (< 10.000 dalton) og høymolekylære fraksjoner (20.000-30.000 dalton) som begge in vitro avspente glattmuskler og var kraftige natriuretiske midler når de ble administrert intravenøst til rotter. Se Currie et al., Science 221, 71-73 (1983).
I andre nylige publikasjoner har flere forskere beskrevet forskjellige lav- og mellom-molekylære atriale natriuretiske peptider med aminosyresekvenser i området fra 19 til 59 aminosyrer. Således har DeBold et al., Fed.
Proe. 4_2(3), Abstract 1870, s. 611 (1983), beskrevet rensing av et atrialt natriuretisk peptid med en molekylvekt på
5.150 dalton og en sekvens på 47 aminosyrer som forskerne betegnet som "Cardionatrin I". Tre ytterligere topper med natriuretisk aktivitet ble erholdt ved væskekromatografi med høy ytelse (HPLC).
I en senere publikasjon, Grammer et al., Biochem. Biophys. Res. Commun. 116(2), 696-703, 31. oktober 1983,
er det beskrevet delvis rensing av en rotteatrial natriuretisk faktor med en molekylvekt på ca. 3.800 og inneholdende 36 aminosyrerester.
I enda nyere publikasjoner, Flynn et al., Biochem. Biophys. Res. Commun. 117 (3), 859-65 (28. desember 1983),
og Kangawa og Matsuo, Ibid., 118(1), 131-39 (13. jan. 1984), beskrives atriale natriuretiske peptider av rotte og menneske med sekvenser på 28 aminosyrer.
Thibault et al., FEBS Letters 167, 352-56 (1984) beskriver rensing av et mellommolekylært atrialt natriuretisk peptid med 73 aminosyrer, og Kangawa et al., Biochem. Biophys. Res. Commun. 119 (3) , 933-40 (1984), beskriver rensing av et mellommolekylært fi-rotteatrialt natriuretisk peptid med 48 aminosyrer.
I søkerens US søknader 551 372 og 569 684 er lavmolekylære atriale peptider med fra 19 til 24 aminosyrer beskrevet. Flere av disse peptider er ytterligere beskrevet av en forsøksgruppe ledet av Currie et al., Science 223,
67-69 (1984).
Ifølge oppfinnelsen tilveiebringes en fremgangsmåte for fremstilling av et terapeutisk aktivt peptid med følgende aminosyresekvens:
eller et fragment derav, inneholdende sekvensen av aminosyrer 19-111 av ovennevnte peptid.
I peptidstrukturen er aminosyrekomponentene angitt ved konvensjonelle forkortelser som følger:
Peptidmaterialet er isolert i en delvis renset form som ikke eksisterer i rottemycardiet fra hvilket det først ble erholdt. Dvs. det er blitt fremstilt i en form som er hovedsakelig fri for lavmolekylære peptider og fri for andre cellulære komponenter og vevbestanddeler. Dette nye atriale peptid har fysiologiske karakteristika som antyder at det er betydningsfullt innen den medisinske forskning ved studium av det endocrine system av hjerteatriene når det gjelder humorale midler for avpasning av extracellulært volum, natrium og vaskulær resistens.
I særdeleshet har det nye peptid terapeutisk anvendelse som diureticum, natriureticum, renal vasodilator og glatt-muskelrelakserende middel. Dvs. at det utviser en grundig virkning på natrium, urinvolum, renal vasodilasjon og glatt-muskeltonus.
Fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen er kjennetegnet
ved at,
a) ekstrakter av hjerteatrier fra pattedyr fraksjoneres for å erholde fraksjoner med høy og lav molekylvekt,
b) fraksjonen med høy molekylvekt fraksjoneres for
å erholde et atriopeptigen med den ovennevnte sekvens av
111 aminosyrer,
c) atriopeptigenet spaltes med cyanogenbromid og fra cyanogenbromidekstraktet isoleres et fragment av atriopeptigenet som inneholder sekvensen av aminosyrene 19-111.
Fraksjoneringen i punkt a) utføres ved hjelp av gelfiltrering og den høymolekylære fraksjon (atriopeptigen-
APG) fraksjoneres ved hjelp av isoelektrisk fokusering og omvendt fase HPLC under erholdelse av delvis renset APG.
Ved rensing av cyanogenbromidoppslutninger av den delvis rensede høymolekylære fraksjon isoleres et enkelt bio-logisk aktivt cyanogenbromid-spaltet peptid på 93 aminosyrer omfattende aminosyrer 19 til 111 av det ovenfor angitte APG. Sekvensanalyser av disse peptider sammenkoblet med nylige rapporter vedrørende sekvensanalyser av intermediære molekylære atriale peptider (Thibault et al., FEBS Letters 167, 352-
356 (1984) og Kangawa et al., Biochem. Biophys. Res. Commun. 119, 933-940 (1984)) ga den fullstendige primærstruktur av det ovenfor angitte 111 rest-APG.
I det etterfølgende gis en detaljert beskrivelse av foretrukne utførelsesformer ved oppfinnelsen. Av hensikts-messige grunner er de angitte referanser oppført ved slutten av denne detaljerte beskrivelse.
Ved gelfiltreringskromatografi er den natriuretiske og diuretiske aktivitet av rotteatrialekstrakter blitt funnet i høymolekylære (20.000-30.000) og lavmolekylære (mindre enn 10.000) fraksjoner som også utviser spasmolytisk glattmuskel-aktivitet (in vitro) (1). Man har trukket den konklusjon at den høymolekylære fraksjon er forløperen for den lavmolekylære fraksjon i lys av virkningene av partiell proteolyse med trypsin. Trypsinbehandling av den høymolekylære fraksjon øker markert den spasmolytiske aktivitet. De aktive produkter som samvandrer med den lavmolekylære fraksjon ved gelfiltrering (2), er atriopeptin I, II og III (3) ved omvendt fase HPLC. Derfor er de aktive komponenter av den høymolekylære fraksjon blitt betegnet som atriopeptigener (APG), forløpere for atriopeptin (AP), de lavmolekylære bioaktive atriale peptider. Disse atriopeptiner omfatter følgende partielle sekvenser av det komplette 111 aminosyres atriopeptigen som beskrevet i de tidligere angitte patentsøknader:
AP I = aminosyre 88 til 108,
AP II = aminosyre 88 til 110, og
AP III = aminosyre 88 til 111.
Ved rensingen av høymolekylære atriale peptider og deres derivater ble en glattmuskel-biobestemmelse av hver fraksjon etter aktivering ved partiell tryptisk proteolyse utført (1,2). De aktive fraksjoner inneholder sekvensen av de lavmolekylære atriopeptiner (3). Det første trinn i rensingen av den høymolekylære fraksjon (erholdt ved G-75 Sephadex® kromatografi) var isoelektrisk fokusering som viste at denne var en blanding av bioaktive arter (tilsynelatende isoelektriske punkter ved pH 4,91, 5,01, 5,17, 5,34 og 6,03). Hovedmengden av bioaktive arter (mellom pH 4,6 og 5,4) etter fjerning av amfolytter og sucrose ble underkastet omvendt fase HPLC. Det typiske kromatogram utviste en kompleks blanding av bioaktive peptider sammenklumpet ved 31 og 34% acetonitril. Blant disse var en dominerende komponent av tilstrekkelig renhet ved gelanalyse (tilsynelatende molekylvekt 17.000) og ble valgt som et atriopeptigen for ytterligere rensing og karakterisering i henhold til oppfinnelsen.
I lys av kompleksiteten av atriopeptigener sammenlignet med den enkle sekvens av atriopeptiner avledet fra disse,
ble det konkludert med at atriopeptigenene kanskje i sin tur er derivater av et noe større peptid. Følgelig ble effekten av kjemisk splitting undersøkt. Cyanogenbromidsplitting ble valgt på grunn av mangel på methionin i den lavmolekylære atriopeptinsekvens (5). Cyanogenbromidsplitting finner sted ved methioninet i 18-stilling av den hele 111 aminosyresekvens av atriopeptigen under dannelse av et høymolekylært
fragment på 93 aminosyrer. Begynnelsestrinnet ved fraksjoneringen av en cyanogenbromidoppslutning av den totale høy-molekylære fraksjon ga et bioaktivt materiale (funnet ved 30-31% acetonitril) som ble renset ved omvendt fase HPLC under dannelse av en enkel komponent ved HPLC med en tilsynelatende molekylvekt på 9500 ved gelelektroforese.
Sekvensdata for begge peptider er vist i det etter-følgende. Overlapping av sekvensene av disse peptider og de ifølge Thibault et al., FEBS Letters 167, 352-6 (1984) og Kangawa et al., Biochem. Biophys. Res. Commun. 119, 933-40
(1984) ga primærstrukturen av et 111 rest-atriopeptigen. Resultatene av C-terminalanalyse er i overensstemmelse med dette. Carboxypeptidasebehandling av APG fjernet hurtig Phe uten frigivelse av påvisbar Tyr eller Arg. På den annen side ga lignende behandling av det cyanogenbromidsplittede peptid en hurtig frigivelse av Tyr, Arg og Phe (tabell 1)
som derved indikerte at dette preparat består av tre peptider med samme sekvenser som ender i Tyr, Arg og Phe.
Denne sekvens av 111 aminosyrerester inkorporerer ved dets C-ende de lavmolekylære peptider som nylig er blitt beskrevet (understreket i sekvensen i det etterfølgende) i forbindelse med et par av basiske aminosyrerester (Arg-Arg i dette tilfelle) som typisk danner splittingssetet i et utall av forløpere av utskilte peptider og proteiner.
Den komplette primærstruktur av det 111 aminosyres atriopeptigen ble utledet fra: A aminosyresekvens av de første 34 rester av atriopeptigenet, B aminosyresekvens av de første 39 rester av det cyanogenbromidsplittede peptid, C aminosyresekvens av "intermediær Mr form atrial natriuretisk faktor" (11) og D komplett aminosyresekvens av "(J-rotte atrialt natriuretisk polypeptid" (12) .
De etterfølgende eksempler beskriver rensing, delvis karakterisering og natriuretisk, diuretisk og vasodilaterende aktivitet av den ovenfor angitte komponent (111 aminosyrer) av den høymolekylære fraksjon (20.000-30.000) og av et cyanogenbromid-peptidfragment (93 aminosyrer) avledet fra denne fraksjon.
Eksempel 1
Fremstilling av et atriopeptigen - Et ekstrakt av atrier fra 1.200 rottehjerter ble fremstilt og underkastet kromatografi på G-75 Sephadex®ved den tidligere beskrevne generelle metode (3). Den høymolekylære fraksjon ble lyofilisert, oppløst i pH 4-6 'Ampholine" bærer-amfolytter og ble elektro-fokusert i en 110 ml sucrosedensitets-gradientkolonne ved 1.000 V i 40 timer (4). Kolonnen ble deretter tømt med 48 ml pr. time idet det ble oppsamlet 2 ml fraksjoner.
Etter bestemmelse av pH ble aliquoter (50^ul) av kolonnefraksjoner justert til pH 8 (ved tilsetning av 4 50^ul 0,1 M tris-buffer, pH 8,4) og inkubert med trypsin (en enhet pr. ml) i 1 time ved 22°. Disse preparater ble bestemt med hensyn til kyllingrectum-avspenningsaktivitet ved den generelle prosedyre som tidligere er beskrevet (1,2). Kombinerte kolonnefraksjoner (pH 4,6 til 5,4) inneholdende hovedmengden av bioaktivitet (~30 ml) ble kromatografert på G-50 Sephadex® (80 x 2,7 cm) i 0,5 M eddiksyre for å fjerne amfolytter og sucrose. Etter frysetørking ble dette materiale underkastet omvendt fase HPLC under anvendelse av "Brownlee RP-300 Aquapore" kolonne og løsningsmiddelsystem som tidligere beskrevet (3). Gradienten besto av (a) 0 til 24% A i 8,8 minutter, (b) 24 til 28% A i 25 minutter, (c) 28 til 36% A i 100 minutter. Aliquoter (50^ul) av HPLC kolonnefraksjonene (2 ml) ble tørket i vakuum, tatt opp i 500yUl 0,1 M tris, pH 8, ble trypsinert og biobestemt som ovenfor angitt.
Fremstilling av et cyanogenbromidpeptid fra den høymolekylære fraksjon
Den lyofiliserte høymolekylære fraksjon erholdt ved kromatografi på G-75 Sephadex® fra et ekstrakt av atrier fra 600 rottehjerter (1,3), oppløst i 10 ml 70% maursyre, ble tilsatt til 500 mg cyanogenbromid i et glassrør med kork (5). Etter 16 timer (ved 22°C) ble 90 ml vann tilsatt, og løs-ningen ble lyofilisert. Residuet ble underkastet omvendt fase HPLC under anvendelse av det ovenfor angitte system med (a) 0 til 27,2% A i 10 minutter etterfulgt av (b) 27,2 til 32% A i 60 minutter. Bioaktive fraksjoner (erholdt ved 29,6 til 31,2% A) ble bragt til tørrhet i vakuum og renset ved
en andre prosedyre under anvendelse av en blanding av løs-ningsmiddel A' (0,1% trifluoreddiksyre i propanol-1) og B (0,1% trifluoreddiksyre i vann) til 0,67 ml pr. minutt bestående av (a) 0 til 15% A<1> i 5 minutter etterfulgt av
(b) 15 til 24% A' i 90 minutter. Bioaktive fraksjoner (ved 22 til 22,5% A') ble bragt til tørrhet og deretter underkastet en tredje prosedyre under anvendelse av løs-ningsmidler A" (0,085% fosforsyre i propanol-1) og B"
(0,085% fosforsyre i vann) ved 0,67 ml pr. minutt, bestående av 0 til 50% A" i 50 minutter. Det bioaktive produkt
(erholdt ved 32,1% A") ble deretter Igjen underkastet HPLC to ganger, igjen under anvendelse av den andre prosedyre, som til slutt ga llCyug (protein) av en enkel bioaktiv komponent (påvist ved 215 nm) ved 22,1% A'.
Analyse av peptider
Aminosyreanalyser ble utført ved utført ved hydrolyse av 1 nmol peptid i 6~N HCl i 22 timer ved 110°C. Hydrolysatet ble lyofilisert og anbragt i et Waters aminosyre-analyse-system under anvendelse av o-fthalaldehyd-prekolonne-derivatisering (6) etterfulgt av omvendt fase HPLC.
Peptidsekvensering - N-terminal sekvensering
ble utført ved Edman sekvensnedbrytning av 2-4 nmol peptid under anvendelse av en "Applied Biosystems model 470A" gass-fasesekvenser (7) som påviser fenylthiohydantoinderivater ved HPLC (8). Gjennomsnittlige gjentatte utbytter overskred 93%. C-terminal sekvensering ble utført ved tilsetning av carboxypeptidase Y (2^ug, 2Cyu]) til 1-2 nmol peptid oppløst i 28Cyul 50 raM natriuraacetatbuffer, pH 5,5. Ved intervaller ble 50^ul aliquoter tilsatt til 25^ul 1% trifluoreddiksyre (9), og de frigitte aminosyrer ble bestemt ved aminosyre-analyse (som ovenfor angitt).
Gelanalyse - elektroforese av peptider (l-2^ug) ble foretatt med en 15% polyacrylamidgel (0,4% bis-acrylamid)
i henhold til Laemmll (10). Gelen ble beiset med 0,8% sølv-nitrat i 20 minutter, ble vasket og fremkalt med en løsning av 0,005% sitronsyre og 0,2% formaldehyd.
Eksempel 2
Det høymolekylære rotteatriale, cyanogenbromid-behandlede peptid renset som beskrevet i eksempel 1, ble testet med hensyn til natriuretisk aktivitet i hunder.
Det høymolekylære peptid ble enten injisert alene eller etter trypsinbehandling. Trypsin-(1 enhet/ml) inkuber-ingen ble utført i 60 minutter ved romtemperatur med 100^,ug av det cyanogenbromid-behandlede høymolekylære peptid. Atriopeptin I og III ble anskaffet fra Peninsula Labs,
San Carlos, California. Atriopeptin II og Ser-leu-arg-arg-Atriopeptin III (Flynn et al. peptid, henvisning 13) ble syntetisert ved en automatisert peptidsyntese.
Bastardhunder av begge kjønn ble bedøvet (i.v. med
30 mg/kg pentobarbitalnatrium. Et sideinnsnitt for retro-peritoneal eksponering av høyre nyre ble utført. Urinlederen ble kanylert med PE160 slange som ble koblet til en fraksjons-oppsamler for uringjenvinning. En elektromagnetisk strøm-ningssonde (8 mm i diameter) ble anbragt rundt den høyre nyrearterie for måling av renal blodstrømning. En nål nr. 22 (festet til PE50-slangen og sprøyte) ble innsatt i nyrearterien over strømningssonden. Hunden ble kontinuerlig infusert med saltvann (0,9% NaCl) med 1,3 ml/min. Urinprøve ble oppsamlet ved 5 minutters intervaller og analysert med hensyn til volum, natrium, kalium og osmolaritet. Peptidene ble injisert (i.a. i nyrearterien) ved 30 minutters intervaller.
Resultater
Det høymolekylære (cyanogenbromid) peptid fremkalte en konsentrasjonsavhengig diuresis som ikke signifikant ble forandret ved trypsinering. Terskelresponsen (en 50% økning i urinvolum) ble oppnådd med 0,3 nmol, mens en 450% økning i urlnstrømning ble oppnådd med 3 nmol. En sammen-ligning av mengden av peptid som var nødvendig for å gi en 200% økning i urinvolum, indikerte at ser-leu-arg-arg-APIII krever 0,3 nmol; høymolekylært peptid + trypsin krever 0,5 nmol, høymolekylært peptid alene 0,7 nmol; atrio-
peptin II og III krever 10 nmol; og atriopeptin I i dose på 30 nmol øket urinvolumet bare med 50%. Graderingsrekke-følgen når det gjelder styrken av vasodilatering idet man sammenligner den dose som er nødvendig for å fremkalle en økning på 20 ml/min i renal blodstrømning, er som følger: ser-leu-arg-arg-APIII krevet 1 nmol; det cyanogenbromid-behandlede høymolekylære peptid (i nærvær eller fravær av trypsin-forbehandling) krevet 3 nmol; atriopeptin III
krevet 8 nmol; atriopeptin II krevet 17 nmol; mens 30 nmol av atriopeptin I bare ga 6 ml/min forandring i renal blod-
strømning. Hvert peptid ble testet i 3-5 separate hunder.
En direkte injeksjon av renset cyanogenbromidfragment av høymolekylært atriopeptigen fremkalte en uttalt diurese som ikke kan skjelnes fra de mest kraftige av de lavmolekylære peptider. Dette kan gjenspeile en øyeblikkelig omdannelse av peptidet i nyren eller direkte gjenkjennelse av nyren av det intakte peptid. Ulikheten i rekkefølgen når det gjelder styrken av peptidene med hensyn til renal vasodilatering mot natriurese antyder at disse responser formidles av separate reseptorer. Hovedsakelig lignende dluresis ble oppnådd når det delvis rensede 111 aminosyres atriopeptigen (før cyanogenbromidsplitting) ble testet i hunder.
Referanser
1. Currie et al., Science 221, 71-73 (1983).
2. Currie et al., Proe. Nati. Acad. Sei. 81,
1230-1233 (1984).
3. Currie et al., Science 223, .67-69 (1984).
4. Geiler et al., Biochem. J. 127,865-874 (1972).
5. Gross og Witkop J. Biol. Chem. 237,
1856-1860 (1962).
6. Hill et al., Anal. Chem. 51, 1338-1341(7) (1979).
7. Hunkapiller et al., Methods Enzymol. 91,
399-413 (1983).
8. Hunkapiller og Hood, ibid., 486-493.
9. Hayashi, Methods Enzymol. 47, 84-93 (1977).
10. Laemmli, Nature 227, 680-685 (1970).
11. Thibault et al., FEBS Letters 167, 352-56 (1984).
12. Kangawa et al., Biochem. Biophys Res. Commun. 119,
933-40 (1984).
13. Flynn et al., Biochem. Biophys. Res. Commun. 117,
859-65 (1983).
Claims (3)
1. Fremgangsmåte for fremstilling av et terapeutisk aktivt peptid med følgende aminosyresekvens:
eller et fragment derav, inneholdende sekvensen av aminosyrer 19-111 av ovennevnte peptid, karakterisert ved at a) ekstrakter av hjerteatrier fra pattedyr fraksjoneres for å erholde fraksjoner med høy og lav molekylvekt, b) fraksjonen med høy molekylvekt fraksjoneres for å erholde et atriopeptigen med den ovennevnte sekvens av 111 aminosyrer, c) atriopeptigenet spaltes med cyanogenbromid og fra cyanogenbromidekstraktet isoleres et fragment av atriopeptigenet som inneholder sekvensen av aminosyrene 19-111.
2. Fremgangsmåten ifølge krav 1, karakterisert ved at fraksjoneringen i punkt a) utføres ved hjelp av gelfiltrering.
3. Fremgangsmåte ifølge krav 1, karakterisert ved at fraksjoneringen i punkt b) utføres ved hjelp av isoelektrisk fokusering og omvendt fase HPLC.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US06/607,064 US4508712A (en) | 1984-01-10 | 1984-05-04 | Atrial peptide |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| NO850709L NO850709L (no) | 1985-11-05 |
| NO167295B true NO167295B (no) | 1991-07-15 |
| NO167295C NO167295C (no) | 1991-10-23 |
Family
ID=24430657
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| NO850709A NO167295C (no) | 1984-05-04 | 1985-02-22 | Fremgangsmaate for fremstilling av et terapeutisk aktivt peptid. |
Country Status (14)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4508712A (no) |
| EP (1) | EP0162032B1 (no) |
| JP (1) | JPH0615559B2 (no) |
| AT (1) | ATE68503T1 (no) |
| AU (1) | AU569776B2 (no) |
| CA (1) | CA1244407A (no) |
| DE (1) | DE3584388D1 (no) |
| DK (1) | DK163930C (no) |
| FI (1) | FI79119C (no) |
| GR (1) | GR850474B (no) |
| IE (1) | IE57880B1 (no) |
| IL (1) | IL74426A (no) |
| NO (1) | NO167295C (no) |
| ZA (1) | ZA851376B (no) |
Families Citing this family (28)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4761469A (en) * | 1982-02-22 | 1988-08-02 | Queen's University At Kingston | Isolation, purification and sequence determination of cardionatrins |
| CA1241646A (en) * | 1982-02-22 | 1988-09-06 | Adolfo J. De Bold | Atrial natriuretic factor |
| AU572173B2 (en) * | 1983-08-29 | 1988-05-05 | Institut De Recherches Cliniques De Montreal | Natriuretic factors |
| JPS60136596A (ja) * | 1983-12-26 | 1985-07-20 | Suntory Ltd | ペプチド及びこれを有効成分とする利尿剤 |
| US4952561A (en) * | 1984-02-07 | 1990-08-28 | Merck & Co., Inc. | Cardiac atrial peptides |
| JPH0794473B2 (ja) * | 1984-03-02 | 1995-10-11 | サントリー株式会社 | 新規なペプチド及びこれを有効成分とする利尿剤 |
| US4618600A (en) * | 1984-04-19 | 1986-10-21 | Biotechnology Research Associates, J.V. | Novel polypeptide diuretic/vasodilators |
| AU4292785A (en) * | 1984-04-24 | 1985-11-15 | Salk Institute For Biological Studies, The | Atrial peptide analogs |
| NZ212291A (en) * | 1984-06-08 | 1991-10-25 | Suntory Ltd | Peptide from human atrium cordis having diuretic action, dna coding therefor and pharmaceutical compositions thereof |
| US4670540A (en) * | 1984-08-29 | 1987-06-02 | Ajinomoto Co., Inc. | Novel peptide |
| IE862891L (en) * | 1985-11-05 | 1987-05-05 | Behringwerke Ag | Analogs of atrial natriuretic peptides |
| US4757048A (en) * | 1985-11-05 | 1988-07-12 | Biotechnology Research Associates J.V. | Synthetic analogs of atrial natriuretic peptides |
| US4716147A (en) * | 1986-03-27 | 1987-12-29 | Monsanto Company | Synthetic airial peptides |
| US4721704A (en) * | 1986-05-09 | 1988-01-26 | Peninsula Laboratories, Inc. | Potent synthetic atrial peptide analogs |
| CA1339678C (en) * | 1986-09-29 | 1998-02-17 | Takeda Chemical Industries Ltd. | Atrial natriuretic peptide derivative, its production and use thereof for treating gardiac or cerebral circulatory disease |
| US4804650A (en) * | 1986-10-28 | 1989-02-14 | Biotechnology Research Associates, J.V. | Analogs of atrial natriuretic peptides |
| DE3856401D1 (de) * | 1987-01-23 | 2000-05-04 | Gen Hospital Corp | Hydralazin zur topischen Behandlung von Glaukom |
| US5500230A (en) * | 1987-01-23 | 1996-03-19 | The General Hospital Corporation | Method for treatment of glaucoma with nitrogen containing guanylate cyclase activators |
| CA1337400C (en) * | 1987-06-08 | 1995-10-24 | Norma G. Delaney | Inhibitors of neutral endopeptidase |
| US5461142A (en) * | 1987-11-07 | 1995-10-24 | Pharma Bissendorf Peptide Gmbh | Phosphorylated derivatives of cardiodilatin/ANF peptides |
| DE3737917A1 (de) * | 1987-11-07 | 1989-05-18 | Bissendorf Peptide Gmbh | Phosphorylierte derivate von cardiodilatin/anf-peptiden |
| US5047397A (en) * | 1988-08-26 | 1991-09-10 | California Biotechnology Inc. | Linear analogs of atrial natriuretic peptides |
| CA1339210C (en) | 1988-05-31 | 1997-08-05 | John Lewicki | Recombinant techniques for production of novel natriuretic and vasodilator peptides |
| US5114923A (en) * | 1988-05-31 | 1992-05-19 | California Biotechnology Inc. | Recombinant techniques for production of novel natriuretic and vasodilator peptides |
| KR20080095898A (ko) * | 2006-02-14 | 2008-10-29 | 칼피스가부시키가이샤 | 혈관확장제 |
| CN101420969B (zh) * | 2006-02-14 | 2013-03-20 | 卡尔皮斯株式会社 | 动脉硬化预防剂、血管内膜增厚抑制剂以及血管内皮功能改善剂 |
| EP2678002A2 (en) | 2011-02-25 | 2014-01-01 | Medtronic, Inc. | Therapy for kidney disease and/or heart failure |
| US20130244937A1 (en) | 2011-09-02 | 2013-09-19 | Nile Therapeutics, Inc. | Chimeric natriuretic peptide compositions and methods of preparation |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| AU4292785A (en) * | 1984-04-24 | 1985-11-15 | Salk Institute For Biological Studies, The | Atrial peptide analogs |
| NZ212291A (en) * | 1984-06-08 | 1991-10-25 | Suntory Ltd | Peptide from human atrium cordis having diuretic action, dna coding therefor and pharmaceutical compositions thereof |
-
1984
- 1984-05-04 US US06/607,064 patent/US4508712A/en not_active Expired - Lifetime
-
1985
- 1985-02-22 FI FI850744A patent/FI79119C/fi not_active IP Right Cessation
- 1985-02-22 EP EP85870029A patent/EP0162032B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1985-02-22 AT AT85870029T patent/ATE68503T1/de not_active IP Right Cessation
- 1985-02-22 AU AU39073/85A patent/AU569776B2/en not_active Ceased
- 1985-02-22 ZA ZA851376A patent/ZA851376B/xx unknown
- 1985-02-22 NO NO850709A patent/NO167295C/no unknown
- 1985-02-22 DE DE8585870029T patent/DE3584388D1/de not_active Expired - Fee Related
- 1985-02-22 JP JP60034281A patent/JPH0615559B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1985-02-22 IL IL74426A patent/IL74426A/xx not_active IP Right Cessation
- 1985-02-22 CA CA000475001A patent/CA1244407A/en not_active Expired
- 1985-02-22 DK DK081685A patent/DK163930C/da not_active IP Right Cessation
- 1985-02-22 GR GR850474A patent/GR850474B/el unknown
- 1985-02-22 IE IE436/85A patent/IE57880B1/en not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| IE850436L (en) | 1985-11-04 |
| NO850709L (no) | 1985-11-05 |
| JPS6127924A (ja) | 1986-02-07 |
| ATE68503T1 (de) | 1991-11-15 |
| DK81685A (da) | 1985-11-05 |
| FI850744A0 (fi) | 1985-02-22 |
| ZA851376B (en) | 1986-09-24 |
| AU3907385A (en) | 1985-11-07 |
| EP0162032A2 (en) | 1985-11-21 |
| FI850744L (fi) | 1985-11-05 |
| EP0162032A3 (en) | 1988-03-30 |
| NO167295C (no) | 1991-10-23 |
| FI79119C (fi) | 1989-11-10 |
| AU569776B2 (en) | 1988-02-18 |
| DE3584388D1 (de) | 1991-11-21 |
| EP0162032B1 (en) | 1991-10-16 |
| CA1244407A (en) | 1988-11-08 |
| IL74426A0 (en) | 1985-05-31 |
| IE57880B1 (en) | 1993-05-05 |
| IL74426A (en) | 1989-09-10 |
| DK163930B (da) | 1992-04-21 |
| JPH0615559B2 (ja) | 1994-03-02 |
| GR850474B (no) | 1985-05-10 |
| FI79119B (fi) | 1989-07-31 |
| DK163930C (da) | 1992-09-14 |
| US4508712A (en) | 1985-04-02 |
| DK81685D0 (da) | 1985-02-22 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| NO167295B (no) | Fremgangsmaate for fremstilling av et terapeutisk aktivt peptid. | |
| EP0142487B1 (en) | Novel atrial peptides | |
| Schulz-Knappe et al. | Isolation and structural analysis of “urodilatin”, a new peptide of the cardiodilatin-(ANP)-family, extracted from human urine | |
| Misono et al. | Rat atrial natriuretic factor: isolation, structure and biological activities of four major peptides | |
| US4647455A (en) | Process for extracting atrial natriuretic factor | |
| Kangawa et al. | Structural identification of β-and γ-human atrial natriuretic polypeptides | |
| DK173649B1 (da) | Fremgangsmåde til kædekombination til fremstilling af biologisk aktivt humant relaxin eller analoge deraf | |
| KR20010103772A (ko) | 공유적으로 가교결합된 인슐린 이량체 | |
| Arimura et al. | Isolation and identification of C-type natriuretic peptide in chicken brain | |
| Hetru et al. | Isolation and structural characterization of an insulin‐related molecule, a predominant neuropeptide from Locusta migratoria | |
| Gelher et al. | The sequence of an atriopeptigen: a precursor of the bioactive atrial peptides | |
| EP0014230A1 (en) | Undecapeptide and its acid addition salts and pharmaceutical compositions | |
| US4557864A (en) | Atrial peptides | |
| EP0116784B1 (en) | Atrial natriuretic factor | |
| EP0795562A1 (en) | Novel oxyntomodulin | |
| DK162130B (da) | Grf-analoge peptider, fremgangsmaade til fremstilling deraf, grf-analoge peptider som terapeutiske midler, anvendelse af grf-analoge peptider, fremgangsmaade til fremstilling af farmaceutiske praeparater indeholdende grf-analoge peptider samt parenterale farmaceutiske praeparater indeholdende grf-analoge peptider | |
| US4732972A (en) | Polypeptides having growth hormone releasing activity | |
| EP0070569B1 (en) | Novel heptadecapeptide, a method for its preparation and a pharmaceutical composition containing the same | |
| Cavari et al. | Isolation and characterization of somatolactin from pituitary glands of gilthead sea bream Sparus aurata | |
| EP0373218A1 (en) | Kidney growth accelerator and process for its preparation | |
| Shang-quan | Studies on structure and biological activity of insulin | |
| CA1340317C (en) | Atrial natriuretic factor | |
| MAJEWSKI et al. | Isolation and amino acid sequence of insulins and C‐peptides of European bison (Bison bonasus) and fox (Alopex lagopus) | |
| CA1340622C (en) | Atrial natriuretic factor | |
| KR101130283B1 (ko) | 평활근 이완활성을 지닌 칼시토닌 관련 펩타이드 |