NO164305B - Fremgangsmaate for frembringelse av kjemiluminescens og toerrblanding for anvendelse deri. - Google Patents
Fremgangsmaate for frembringelse av kjemiluminescens og toerrblanding for anvendelse deri. Download PDFInfo
- Publication number
- NO164305B NO164305B NO853724A NO853724A NO164305B NO 164305 B NO164305 B NO 164305B NO 853724 A NO853724 A NO 853724A NO 853724 A NO853724 A NO 853724A NO 164305 B NO164305 B NO 164305B
- Authority
- NO
- Norway
- Prior art keywords
- glucose
- phosphate
- transferase
- determination
- fructose
- Prior art date
Links
- 239000000126 substance Substances 0.000 title claims description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims description 3
- 238000000034 method Methods 0.000 title description 7
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 41
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims description 40
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 claims description 18
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 claims description 18
- 102000004357 Transferases Human genes 0.000 claims description 13
- 108090000992 Transferases Proteins 0.000 claims description 13
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 12
- ZKHQWZAMYRWXGA-UHFFFAOYSA-N Adenosine triphosphate Natural products C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C1OC(COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)C(O)C1O ZKHQWZAMYRWXGA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 229940039227 diagnostic agent Drugs 0.000 claims description 7
- 239000000032 diagnostic agent Substances 0.000 claims description 7
- ZKHQWZAMYRWXGA-KQYNXXCUSA-J ATP(4-) Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP([O-])(=O)OP([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O)[C@@H](O)[C@H]1O ZKHQWZAMYRWXGA-KQYNXXCUSA-J 0.000 claims description 6
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 claims description 6
- HDVCHBLHEICPPP-UHFFFAOYSA-N O=P(=O)C1=CC=NC(P(=O)=O)=C1P(=O)=O Chemical class O=P(=O)C1=CC=NC(P(=O)=O)=C1P(=O)=O HDVCHBLHEICPPP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 102100031126 6-phosphogluconolactonase Human genes 0.000 claims description 3
- 108010029731 6-phosphogluconolactonase Proteins 0.000 claims description 3
- 108010018962 Glucosephosphate Dehydrogenase Proteins 0.000 claims description 3
- 125000002467 phosphate group Chemical group [H]OP(=O)(O[H])O[*] 0.000 claims description 3
- ODIGIKRIUKFKHP-UHFFFAOYSA-N (n-propan-2-yloxycarbonylanilino) acetate Chemical compound CC(C)OC(=O)N(OC(C)=O)C1=CC=CC=C1 ODIGIKRIUKFKHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 230000010933 acylation Effects 0.000 claims description 2
- 238000005917 acylation reaction Methods 0.000 claims description 2
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 claims description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 30
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 13
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 13
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 13
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 13
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 12
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 12
- 102000005548 Hexokinase Human genes 0.000 description 7
- 108700040460 Hexokinases Proteins 0.000 description 7
- -1 acyl phosphate-glucose Chemical compound 0.000 description 6
- ACFIXJIJDZMPPO-NNYOXOHSSA-N NADPH Chemical compound C1=CCC(C(=O)N)=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]2[C@H]([C@@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](O2)N2C3=NC=NC(N)=C3N=C2)O)O1 ACFIXJIJDZMPPO-NNYOXOHSSA-N 0.000 description 5
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 5
- FFQKYPRQEYGKAF-UHFFFAOYSA-N carbamoyl phosphate Chemical compound NC(=O)OP(O)(O)=O FFQKYPRQEYGKAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 5
- NBSCHQHZLSJFNQ-GASJEMHNSA-N D-Glucose 6-phosphate Chemical compound OC1O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O NBSCHQHZLSJFNQ-GASJEMHNSA-N 0.000 description 4
- VFRROHXSMXFLSN-UHFFFAOYSA-N Glc6P Natural products OP(=O)(O)OCC(O)C(O)C(O)C(O)C=O VFRROHXSMXFLSN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 4
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 4
- ZJXZSIYSNXKHEA-UHFFFAOYSA-N ethyl dihydrogen phosphate Chemical compound CCOP(O)(O)=O ZJXZSIYSNXKHEA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 4
- ZKHQWZAMYRWXGA-KQYNXXCUSA-N Adenosine triphosphate Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H]1O ZKHQWZAMYRWXGA-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 3
- 108010015776 Glucose oxidase Proteins 0.000 description 3
- 102000005731 Glucose-6-phosphate isomerase Human genes 0.000 description 3
- 108010070600 Glucose-6-phosphate isomerase Proteins 0.000 description 3
- LIPOUNRJVLNBCD-UHFFFAOYSA-N acetyl dihydrogen phosphate Chemical compound CC(=O)OP(O)(O)=O LIPOUNRJVLNBCD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- SYLLWWIXOMLOPY-UHFFFAOYSA-N benzoyl phosphate Chemical compound OP(O)(=O)OC(=O)C1=CC=CC=C1 SYLLWWIXOMLOPY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 3
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- XTWYTFMLZFPYCI-KQYNXXCUSA-N 5'-adenylphosphoric acid Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(=O)OP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H]1O XTWYTFMLZFPYCI-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 2
- BIRSGZKFKXLSJQ-SQOUGZDYSA-N 6-Phospho-D-gluconate Chemical compound OP(=O)(O)OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O BIRSGZKFKXLSJQ-SQOUGZDYSA-N 0.000 description 2
- GSXOAOHZAIYLCY-UHFFFAOYSA-N D-F6P Natural products OCC(=O)C(O)C(O)C(O)COP(O)(O)=O GSXOAOHZAIYLCY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 2
- 108010063907 Glutathione Reductase Proteins 0.000 description 2
- 102100036442 Glutathione reductase, mitochondrial Human genes 0.000 description 2
- XJLXINKUBYWONI-NNYOXOHSSA-N NADP zwitterion Chemical compound NC(=O)C1=CC=C[N+]([C@H]2[C@@H]([C@H](O)[C@@H](COP([O-])(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]3[C@H]([C@@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](O3)N3C4=NC=NC(N)=C4N=C3)O)O2)O)=C1 XJLXINKUBYWONI-NNYOXOHSSA-N 0.000 description 2
- BGWGXPAPYGQALX-ARQDHWQXSA-N beta-D-fructofuranose 6-phosphate Chemical compound OC[C@@]1(O)O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@@H]1O BGWGXPAPYGQALX-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 2
- 230000008033 biological extinction Effects 0.000 description 2
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 2
- 235000014103 egg white Nutrition 0.000 description 2
- 210000000969 egg white Anatomy 0.000 description 2
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- VLTRZXGMWDSKGL-UHFFFAOYSA-N perchloric acid Chemical compound OCl(=O)(=O)=O VLTRZXGMWDSKGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 2
- 230000007306 turnover Effects 0.000 description 2
- MSWZFWKMSRAUBD-IVMDWMLBSA-N 2-amino-2-deoxy-D-glucopyranose Chemical compound N[C@H]1C(O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O MSWZFWKMSRAUBD-IVMDWMLBSA-N 0.000 description 1
- OSJPPGNTCRNQQC-REOHCLBHSA-N 3-phosphoglyceric acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](O)COP(O)(O)=O OSJPPGNTCRNQQC-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- QCVGEOXPDFCNHA-UHFFFAOYSA-N 5,5-dimethyl-2,4-dioxo-1,3-oxazolidine-3-carboxamide Chemical compound CC1(C)OC(=O)N(C(N)=O)C1=O QCVGEOXPDFCNHA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 108010092060 Acetate kinase Proteins 0.000 description 1
- KXDHJXZQYSOELW-UHFFFAOYSA-M Carbamate Chemical compound NC([O-])=O KXDHJXZQYSOELW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- NBSCHQHZLSJFNQ-QTVWNMPRSA-N D-Mannose-6-phosphate Chemical compound OC1O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O NBSCHQHZLSJFNQ-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 1
- RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-N D-gluconic acid Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-N 0.000 description 1
- RGHNJXZEOKUKBD-UHFFFAOYSA-N D-gluconic acid Natural products OCC(O)C(O)C(O)C(O)C(O)=O RGHNJXZEOKUKBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710088194 Dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- 102000002322 Egg Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010000912 Egg Proteins Proteins 0.000 description 1
- 239000004366 Glucose oxidase Substances 0.000 description 1
- 241000588915 Klebsiella aerogenes Species 0.000 description 1
- OVRNDRQMDRJTHS-UHFFFAOYSA-N N-acelyl-D-glucosamine Natural products CC(=O)NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O OVRNDRQMDRJTHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N N-acetyl-beta-D-glucosamine Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N 0.000 description 1
- MBLBDJOUHNCFQT-LXGUWJNJSA-N N-acetylglucosamine Natural products CC(=O)N[C@@H](C=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO MBLBDJOUHNCFQT-LXGUWJNJSA-N 0.000 description 1
- 102000011755 Phosphoglycerate Kinase Human genes 0.000 description 1
- 108091000080 Phosphotransferase Proteins 0.000 description 1
- 102000001253 Protein Kinase Human genes 0.000 description 1
- 240000001890 Ribes hudsonianum Species 0.000 description 1
- 235000016954 Ribes hudsonianum Nutrition 0.000 description 1
- 235000001466 Ribes nigrum Nutrition 0.000 description 1
- 101001099217 Thermotoga maritima (strain ATCC 43589 / DSM 3109 / JCM 10099 / NBRC 100826 / MSB8) Triosephosphate isomerase Proteins 0.000 description 1
- 150000008065 acid anhydrides Chemical class 0.000 description 1
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-DVKNGEFBSA-N alpha-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-DVKNGEFBSA-N 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N beta-D-galactosamine Natural products NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- KXDHJXZQYSOELW-UHFFFAOYSA-N carbonic acid monoamide Natural products NC(O)=O KXDHJXZQYSOELW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 229940079919 digestives enzyme preparation Drugs 0.000 description 1
- 235000015203 fruit juice Nutrition 0.000 description 1
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 1
- 229960003082 galactose Drugs 0.000 description 1
- 229950006191 gluconic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000012208 gluconic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960002442 glucosamine Drugs 0.000 description 1
- 229940116332 glucose oxidase Drugs 0.000 description 1
- 235000019420 glucose oxidase Nutrition 0.000 description 1
- 229940041290 mannose Drugs 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000000691 measurement method Methods 0.000 description 1
- 229950006780 n-acetylglucosamine Drugs 0.000 description 1
- 239000002777 nucleoside Substances 0.000 description 1
- NPSIAHHANQRSIB-UHFFFAOYSA-N oxolane-2,5-dione;phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O.O=C1CCC(=O)O1 NPSIAHHANQRSIB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid Substances OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000020233 phosphotransferase Human genes 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 1
- KJAMZCVTJDTESW-UHFFFAOYSA-N tiracizine Chemical compound C1CC2=CC=CC=C2N(C(=O)CN(C)C)C2=CC(NC(=O)OCC)=CC=C21 KJAMZCVTJDTESW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001226 triphosphate Substances 0.000 description 1
- 235000011178 triphosphate Nutrition 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
- C09K—MATERIALS FOR MISCELLANEOUS APPLICATIONS, NOT PROVIDED FOR ELSEWHERE
- C09K11/00—Luminescent, e.g. electroluminescent, chemiluminescent materials
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
- C09K—MATERIALS FOR MISCELLANEOUS APPLICATIONS, NOT PROVIDED FOR ELSEWHERE
- C09K11/00—Luminescent, e.g. electroluminescent, chemiluminescent materials
- C09K11/06—Luminescent, e.g. electroluminescent, chemiluminescent materials containing organic luminescent materials
- C09K11/07—Luminescent, e.g. electroluminescent, chemiluminescent materials containing organic luminescent materials having chemically interreactive components, e.g. reactive chemiluminescent compositions
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B82—NANOTECHNOLOGY
- B82B—NANOSTRUCTURES FORMED BY MANIPULATION OF INDIVIDUAL ATOMS, MOLECULES, OR LIMITED COLLECTIONS OF ATOMS OR MOLECULES AS DISCRETE UNITS; MANUFACTURE OR TREATMENT THEREOF
- B82B3/00—Manufacture or treatment of nanostructures by manipulation of individual atoms or molecules, or limited collections of atoms or molecules as discrete units
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
- Materials Engineering (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Nanotechnology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Manufacturing & Machinery (AREA)
- Compositions Of Macromolecular Compounds (AREA)
- Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
- Detergent Compositions (AREA)
- Compounds Of Unknown Constitution (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
Description
Diagnostisk middel for enzymatisk bestemmelse
av glucose.
Enzymatisk-analytiske metoder utmerker seg i alminnelighet ved deres hbye substratspesifitet og muliggjor noyaktig bestemmelse av substratene i nærvær av de fleste konstitusjonsmessig beslektede stoffer som ville virke forstyrrende ved ikke-enzymatiske metoder. Også for bestemmelse av glucose er det allerede utarbeidet enzymatiske metoder som benyttes i praksis, f.eks. omsetningen av glucose med glucose-oxydase til D-gluconsyre og hydrogenperoxyd eller omsetningen med hexbkinase og adenosintrifosfat til glucose-6-fosfåt, idet de herved dannede produkter, hydrogenperoxyd og glueose-6-fosfat, i en påfSigende reaksjon omdannes til produkter som kan bestemmes kolorimetrisk eller fotometrisk (M.W. Slein, in: H.U. Bergmeyer, Methoden der
enzymatischen Analyse, Verlag Chemie, Weinheim, 1962, s. 117, og
H.U. Bergmeyer og E. Bernt, samme publikasjon, s. 123. Den hittil sikreste metode har vært hexokinasemetoden:
(Her betegner: ATP = adenosin-5'-trifosforsyre,
ADP = adenosin-5'-difosforsyre, G-6-P = gluco3e-6-fosforsyre, TPN og TPNH = trifosfopyridinnudeotid og dettes reduserte form, 6-PG = 6-fosfogluconsyre,
G-6-PDH = glucose-6-fosfat-dehydrogena8e.)
Til tross for utmerket bmfintlighet og nbyaktighet har den nevnte fremgangsmåte den mangel at den krever ekstremt rene og dermed.dyre enzympreparater. Dessuten omsetter hexokinase også fructose til fructose-6-fosfat og mannose til mannose-6-fosfat. Der-som enzympreparatet f.eks. også inneholder bare spor av enzymet fosfohexoseisomerase, så overfores fructose-6-fosfat i glucose-6-fosfat, og fructose gir således ved analysen samme utslag som glucose.
Det har nu overraskende vist seg at det av M.Y. Kamel og
R.L. Anderson nylig beskrevne enzym fra Aerobacter aerogenes
(J. Biol. Chem. 239, PC 3607, 1964) egner seg utmerket for enzymatisk bestemmelse av glucose. Dette enzym reagerer i motsetning til hexokinase praktisk talt ikke med fructose. Omsetningshastig-heten av det nye enzym med fructose er bare ca. 0,6 # av omset-ningshastigheten mea glucose, hvilket vil si at selv ved stort fructoseoverskudd fosforyleres fructosen praktisk talt ikke. Heller ikke mannose, galactose, glucosamin og N-acetylglucosamin reagerer etter ligninger (3) og (4), jfr. side 7.. Da dessuten det nye enzym allerede ved fremstillingen fåes temmelig fritt for fosfohexoseisomerase, og sammenlignet med hexokinase på vesentlig enklere måte kan befries for denne og andre ledsagende og forstyrrende enzymer (f.eks. gluthathion-reduktase, TPNH-oxydase, glucose-dehydrogenase), egner det seg langt bedre for enzymatisk analyse av glucose enn hexokinase.
Som fosfatdonator for det nylig beskrevne enzym kan der i henhold til oppfinnelsen benyttes ikke bare det av Kamel og Anderson nevnte acetylfosfat men alle forbindelser av- formelen hvor R betegner en organisk rest som ikke har noen negativ ladning i umiddelbar nærhet av fosfatgruppen. Enzymet skulle derfor kunne gis navnet "acylfosfat:glucose-transferase".
I den fblgende tabell 1 er oppfort de relative hastigheter av den ved hjelp av acylfosfatrglucosetransferase katalyserte om-setning av glucose til glucoae-6-fosfat under anvendelse av forskjellige fosfatdonatorer.
Av den ovenstående tabell går det frem at acylfosfat: glucose-transferasen fortrinnsvis reagerer med fosfatdonatorer hvor innflytelsen av en eventuelt tilstedeværende negativ ladning på bindingen fosfat-donator-enzym er minst mulig, se f.eks. glutaroylfosfat, succinylfosfat og 3-fosfoglycerinsyre-kfosfat sammenlignet med benzoylfosfat. Med den sistnevnte forbindelse som fosfatdonator reagerer enzymet sogar 60 # hurtigere enn med acetylfosfat.
Denne hby affinitet av acylfosfat:glueose-transferasen til fosfatdonatorer av formel 1 var overraskende, da de kjente fosfo-transferaser, såsom f.eks. den vanlige hexokinase og fosfoglycerat-kinase, bare reagerer med nucleosidtrifosfater. Dessuten, kunne man ikke forutse at det nye enzym skulle være så lett å befri for de ved glucosebestemmelsen forstyrrende enzymer, såsom fosfo-hexose-isomerase, glutathion-reduktase, TPNH-oxydase, glucose-dehydrogenase, osv., og at det derfor er særlig velegnet for anvendelse ved bestemmelse av glucose.
I henhold til oppfinnelsen tilveiebringes der således et diagnostisk middel for enzymatisk bestemmelse av glucose, bestående av en fosfatdonator, en transferase, glucose-6-fosfat-dehydrogenase og trifosforpyridinnucleitid, samt eventuelt en puffer, hvilket diagnostiske middel utmerker seg ved at det som fosfatdonator inneholder en substans av formelen: hvor R er en organisk rest som ikke har noen negativ ladning i umiddelbar nærhet av fosfatgruppen, eller istedenfor denne substans en blanding av adenosintrifosfat (ATP), acylationer og en acylatfosfokinase, og at det som transferase inneholder en acylfosfat:glucose-transferase. Bestemmelsen av glucosen skjer ved at glucosen overfores til glucose-6-fosfat, og glucose-6-fosfatet ved hjelp av trifosfo-pyridinnucleotid (TPN) i nærvær av G-6-dehydrogenase overfores til 6-fosfogluconsyre og redusert tri-fosfopyridinnucleotid og den sistnevnte forbindelse bestemmes spektrofotometrisk. Reaksjonene kan representeres ved de folgende ligninger:
Da vandige opplbsninger av acylfosfatet I bare har begrenset holdbarhet - det dreier seg her om blandede syreanhydrider - kan man for rutinemessig bruk syntetisere acylfosfatet som skal anvendes, umiddelbart for glucosebestemmelsen ved forutgående enzymatisk reaksjon i målekyvetten. Eksempelvis fåes acetylfosfat ut fra et stabilt acetat og ATP ved hjelp av acetatkinase, mens carbamylfosfat kan fremstilles ut fra carbaminsyre og ATP ved hjelp av carbamatfosfokinase .
En spesiell fordel ved det diagnostiske middel ifolge oppfinnelsen sammenlignet med de hittil kjente diagnostiske midler for enzymatisk bestemmelse av glucose er den hbye substratspesifitet av kombinasjonen av acylfosfatrglucose-transferase og glucose-6-fosfatdehydrogenase. Som det vil sees av tabell 2, ligger Michaelikonstantene (KM), som er et mål på affiniteten til substratet, for acylfosfat:glucose-transferase med hensyn på glucose og fructose 3 tierpotenser fra hverandre..
Oppfinnelsen skal ytterligere illustreres i de nedenstående eksempler.
Eksempel 1 - Glucosebestemmelse med carbamylfosfat
Fruktsaft (solbær) analyseres med hensyn på glucose.
Eventuelt tilstedeværende G-6-P reagerer. Deretter tilsettes 0,02 ml acylfosfat-transferasé'(1 mg/ml, 40 U/mg) ,0,26 U/ml Sluttverdien nåes etter ca. 5 minutter. Ved 366 mvi måles AE glucose = 0,'082.
Etter den vanlige beregningsformel gjelder:
£. = ekstinksjonskoeffisient for TPNH: 6,22 cm p/>Mol ved 340 m\i, 3,3 cm 2/uMol ved 366 mvi
d = kuvettens skikttykkelse (1 cm)
V = testvolumet (3 ml)
v = volumet av den anvendte prove
Por bestemmelse av glucose, målt ved 366 mvi, gjelder også
I det foreliggende tilfelle fåes fblgende:
Eksempel 2 - Glucosebestemmelse med benzoylfosfat
Man går frem på samme måte som i eksempel 1, bortsett fra
at man anvender benzoylfosfat istedenfor carbamylfosfat (sluttmolaritet = 3,3 mM).
Sluttverdien etter tilsetningen av acylfosfat-transferase nåes på samme måte som i eksempel 1 etter 5 minutter. Den samme ekstinksjon finnes.
Eksempel 3 - Glucosebestemmelse méd nicotoylfosfat
Det benyttes samme målemetode som i eksempel 1, bortsett fra at der anvendes nicotoylfosfat (sluttmolaritet = 3,3 mM). I dette tilfelle fremstilles og analyseres en 0,01 M a-D-glucose-opplbsning. Av denne opplbsning uttas 0,02 ml (= 0,2 \xMol = 0,036 mg glucose) for glucosebestemmelse. Etter tilsetningen av acylfosfat-transferase finnes etter 5 minutter sluttverdien AE = 0,222.
glucose/ml av den provede opplbsning
hvilket tilsvarer 0,0364 mg glucose/ml prbveopplbsning. Der gjen-finnes således 101 #.
Eksempel 4 - Glucosebestemmelse ved dannelse av aeetylfosfat i
Det startes med
0,"02 ml acylf osf at-trans f erase (1 mg/ml, 40 U/mg) 0,26 U/ml Sluttverdien for glucose nåes etter 8 minutter..
AEg-^ucoge ved 366 mvi: 0,170. Beregningen ifolge eksempel 1 gir:
Eksempel 5 - Glucosebestemmelse i blod med aeetylfosfat
Por bortskaffeise av eggehvite tilsettes de forskjellige blodprbver å 0,1 ml hver 1 ml 0,33 M perklorsyre. Etter sentri-fugering tas der ut prover å 0,2 ml. Man går frem som beskrevet i eksempel 1, bortsett fra at der istedenfor carbamylfosfat anvendes aeetylfosfat OVLuttmolaritet 4 mM) som P-donator. Ved utregning som vist i eksempel 1 finnes de folgende verdier (glucoseverdiene som finnes ved den samme prove etter hexokinase-mellomenzym-metoden er tatt med i parantes i sammenligningsoyemed):
Eksempel 6 - Glucose- og fructosé-bestemmelser i blod som tilsettes bkende mengder fructose
Por bortskaffelse av eggehvite tilsettes to forskjellige blodprover forskjellige mengder fructose (se tabell 4). Den videre arbeidsmåte er som beskrevet i eksempel 5. I tillegg bestemmes fructose etter H. Klotzsch og H.Ui Bergmeyer (se H.U. Bergmeyer: Methoden der enzymatischen Analyse, Verlag Chemie, Weinheim 1962, s. 156).
Eksempel 7 - Glucosebestemmelse i undersokelsesmateriale med hoyt fructoseinnhold
Målingen utfores som beskrevet i eksempel 1, bortsett fra at der istedenfor carbamylfosfat anvendes 4 mM aeetylfosfat som P-donator. Det er særlig å merke hvor lett målingen gjennomføres. Også spor av glucose i selv den reneste fructose kan med sikker-het påvises ved hjelp av det diagnostiske middel ifblge oppfinnelsen (se tabell 5).
Claims (1)
- Diagnostisk middel for enzymatisk bestemmelse av glucose, bestående av en fosfatdonator, en transferase, glucose-6-fosfat-dehydrogenase og trifosforpyridinnucleotid, samt eventuelt en puffer, karakterisert ved at det som fosfatdonator inneholder en substans av formelen:hvor R er en organisk rest som ikke har noen negativ ladning i umiddelbar nærhet av fosfatgruppen, eller istedenfor denne substans en blanding av adenosintrifosfat (ATP), acylationer og en acylatfosfokinase, og at det som transferase inneholder en acylfosfat:glucose-transferase.Anførte publikasjoner: The Journal of Biological Chemistry (Baltimore) nr. 10, 1964, p.3607-8
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US65340484A | 1984-09-24 | 1984-09-24 | |
| US65340684A | 1984-09-24 | 1984-09-24 | |
| US06/653,405 US4859369A (en) | 1984-09-24 | 1984-09-24 | Use of water-soluble polymers in aqueous chemical light formulations |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| NO853724L NO853724L (no) | 1986-03-25 |
| NO164305B true NO164305B (no) | 1990-06-11 |
| NO164305C NO164305C (no) | 1990-09-19 |
Family
ID=27417897
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| NO853724A NO164305C (no) | 1984-09-24 | 1985-09-23 | Fremgangsmaate for frembringelse av kjemiluminescens og toerrblanding for anvendelse deri. |
Country Status (8)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0175889B1 (no) |
| KR (1) | KR930009903B1 (no) |
| DE (1) | DE3565994D1 (no) |
| ES (2) | ES8702477A1 (no) |
| FI (1) | FI80065C (no) |
| IL (1) | IL76083A0 (no) |
| NO (1) | NO164305C (no) |
| PT (1) | PT81162B (no) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CA1340590C (en) * | 1986-07-24 | 1999-06-08 | John C. Voyta | Chemiluminescence enhancement |
| US4927769A (en) * | 1987-07-08 | 1990-05-22 | Ciba Corning Diagnostics Corp. | Method for enhancement of chemiluminescence |
| BE1009224A6 (fr) * | 1995-03-31 | 1997-01-07 | Continental Photo | Solution chimiluminescente amelioree. |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3994820A (en) * | 1972-06-19 | 1976-11-30 | American Cyanamid Company | Polymers in oxalate chemiluminescent systems |
| US4282357A (en) * | 1978-11-01 | 1981-08-04 | American Cyanamid Company | Aqueous chemiluminescent systems |
| US4226738A (en) * | 1978-11-01 | 1980-10-07 | American Cyanamid Company | N,N-Bis(trifluoromethylsulfonyl)oxamides and chemiluminescent compositions containing the same |
| US4366079A (en) * | 1981-02-26 | 1982-12-28 | American Cyanamid Company | Sulfonated rubrene and aqueous chemiluminescent compositions containing the same |
| US4407743A (en) * | 1982-03-19 | 1983-10-04 | American Cyanamid Company | Novel N,N'-bis(trifluoromethylsulfonyl)oxamides and chemiluminescent compositions containing the same |
| US4462931A (en) * | 1982-06-16 | 1984-07-31 | American Cyanamid Company | Enhanced aqueous chemiluminescent systems |
-
1985
- 1985-08-02 EP EP85109759A patent/EP0175889B1/en not_active Expired
- 1985-08-02 DE DE8585109759T patent/DE3565994D1/de not_active Expired
- 1985-08-13 IL IL76083A patent/IL76083A0/xx not_active IP Right Cessation
- 1985-09-19 ES ES547116A patent/ES8702477A1/es not_active Expired
- 1985-09-19 PT PT81162A patent/PT81162B/pt not_active IP Right Cessation
- 1985-09-23 FI FI853641A patent/FI80065C/fi not_active IP Right Cessation
- 1985-09-23 NO NO853724A patent/NO164305C/no unknown
- 1985-09-23 KR KR1019850006941A patent/KR930009903B1/ko active IP Right Grant
-
1986
- 1986-04-01 ES ES553607A patent/ES8800707A1/es not_active Expired
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| FI853641L (fi) | 1986-03-25 |
| ES553607A0 (es) | 1987-12-01 |
| ES547116A0 (es) | 1987-01-01 |
| FI80065B (fi) | 1989-12-29 |
| DE3565994D1 (en) | 1988-12-08 |
| FI853641A0 (fi) | 1985-09-23 |
| KR860002555A (ko) | 1986-04-26 |
| EP0175889A1 (en) | 1986-04-02 |
| KR930009903B1 (ko) | 1993-10-13 |
| NO853724L (no) | 1986-03-25 |
| PT81162A (en) | 1985-10-01 |
| EP0175889B1 (en) | 1988-11-02 |
| NO164305C (no) | 1990-09-19 |
| IL76083A0 (en) | 1985-12-31 |
| FI80065C (fi) | 1990-04-10 |
| PT81162B (pt) | 1987-10-20 |
| ES8800707A1 (es) | 1987-12-01 |
| ES8702477A1 (es) | 1987-01-01 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Hohorst | D-Glucose-6-phosphate and D-fructose-6-phosphate: determination with glucose-6-phosphate dehydrogenase and phosphoglucose isomerase | |
| Cairns | Colorimetric microtiter plate assay of glucose and fructose by enzyme-linked formazan production: applicability to the measurement of fructosyl transferase activity in higher plants | |
| EP0043181B1 (en) | Measuring composition containing enzymes | |
| US6448029B1 (en) | Method and reagent for quantitative determination of 1,5-anhydroglucitol | |
| IL46545A (en) | Analytical process for enzymatic determination of substrates in biological Niger | |
| US3778350A (en) | Diagnostic agent and method for determining glucose | |
| US5962248A (en) | Quantitative determination method for chloride ions | |
| JP3036708B2 (ja) | Ｄ−グルコース−６−リン酸の高感度定量法および定量用組成物 | |
| Scheer et al. | An improved assay for hexokinase activity in human tissue homogenates | |
| US4012286A (en) | Determination of creatine phosphokinase in body fluids | |
| US3509025A (en) | Method and agent for the enzymatic determination of glucose | |
| Klotzsch et al. | d-Fructose | |
| NO164305B (no) | Fremgangsmaate for frembringelse av kjemiluminescens og toerrblanding for anvendelse deri. | |
| US6268166B1 (en) | Method of quantitative assay for 1,5-anhydroglucitol | |
| US5468621A (en) | Method of quantitative assay for 1,5-anhydroglucitol | |
| US4247633A (en) | Reagent for colorimetric determination of creative phosphokinase | |
| CA1184101A (en) | Determination of lecithin | |
| JP3170320B2 (ja) | 物質の測定法 | |
| EP0071087B1 (en) | Improved determination of creatine phosphokinase in body fluids | |
| Gruber et al. | Analytical Differentiation of Purine and Pyrimidine Nucleotides Determination of ADP, ATP, and Sum of GTP+ ITP in Biological Material | |
| EBATA et al. | THE ENZYMATIC PHOSPHORYLATION OF SEDO-HEPTULOSE | |
| JPH05304997A (ja) | １，５−アンヒドログルシトールの定量法 | |
| Gleeson et al. | A simple enzymatic fluorimetric method for the determination of triglycerides in 10 μl of serum | |
| EP0005867B2 (en) | An alpha-amylase assay, a reagent composition and a reagent system therefor | |
| US5972635A (en) | Sulfonic acid group buffered dry analytical element for quantitative analysis of creatine kinase or its MB isozyme |