NO143833B

NO143833B - Slukkeinnretning.

Info

Publication number: NO143833B
Application number: NO763061A
Authority: NO
Inventors: Albert Fritz Albach
Original assignee: Albach & Co
Priority date: 1975-09-08
Filing date: 1976-09-07
Publication date: 1981-01-12
Also published as: ATA654376A; BE845665A; DE2539825C3; AT376888B; DE2539825B2; NO143833C; NL7609629A; SE413287B; FR2322623B1; FR2322623A1; SE7609803L; NO763061L; DE2539825A1

Abstract

Slukkeinnretning.

Description

Denne oppfinnelse angår en analogifremgangsmåte for fremstilling av nye 7-aminocefalosporansyrederivater med den generelle formel I og salter derav med farmasøytisk egnede baser.

I formel I betyr R et fenylradikal, et cykloalkylradikal med

4-6 karbonatomer, hvilke radikaler kan være substituert med en alkylgruppe med 1-4 karbonatomer, eller et alkylradikal

med 1-10 karbonatomer. De nye forbindelser fremstilles i henhold til oppfinnelsen ved at 7-aminocefalosporansyre eller et

salt derav acyleres med et syrehalogenid, -anhydrid eller -azid eller en aktivert ester av en syre av den generelle formel II

eller med en syre av den generelle formel II i nærvær av et karbodiimid, og eventuelt omvandles den erholdte syre av den generelle formel I ved omsetning med en base til et salt.

Saltene av forbindelsene med formel I omfatter f.eks. vannoppløslige salter som f.eks. natrium-, kalium-, litium-, ammonium- og substituerte ammoniumsalter, så vel som de mindre vannoppløselige salter som kalsium-, barium-, prokain-, kinin-

og dibenzyletylendiaminsaltene.

De nye forbindelser fremstilt i henhold til fore-liggende oppfinnelse er beslektet med cefalosporin C for så vidt som de inneholder 5,6-dihydro-2H-l,3-tiazinringen med en til-leiret fl-laktaminring i 2,3-stillingen, som er karakteristisk for cefalosporin C. I motsetning til cefalosporin C, som inneholder 5'-amino-N'-adipamylgruppen i 7-stillingen, er imidlertid forbindelsene fremstilt i henhold til oppfinnelsen karakterisert ved en S-substituert merkaptoacetamidogruppe i 7-stillingen. I motsetning til cefalosporin C, som har en relativt lav anti-bakteriell virkning, er videre forbindelsene fremstilt i henhold til oppfinnelsen høyeffektive antibakterielle midler. De er videre karakterisert ved penicillinase-motstandsevne, syrestabilitet og aktivitet overfor et bredt område av mikroorganismer.

De følgende kjente penicillinforbindelser og forbindelser fremstilt ifølge oppfinnelsen ble sammenlignet med hver-andre med hensyn til bestandighet i nærvær av penicillinase: 6- [fenylmerkaptoacetamido]-penicillansyre, . 7- [fenylmerkaptoacetamido]-cefalosporansyre, 6- [n-butylmerkaptoacetamido]-penicillansyre, 7- [n-butylmerkaptoacetamido]-cefalosporansyre, 7-[(1'-metylcyklobutyl)-merkaptoacetamido]-cefalo-sporansyre .

Ved hvert forsøk ble den aktuelle forbindelse oppløst

i vann til en konsentrasjon på 1000 mikrog/ml, og penicillinase (Riker Laboratories, fra Bacillus cereus) ble tilsatt i en konsentrasjon på 1000 enheter pr ml. Oppløsningene ble bragt inn i en termostat som ble holdt på 37°C. Fra tid til annen ble det tatt ut prøver til analyse, og den mengde av prøveforbindqlsen som var til stede i prøven, ble bestemt ved hjelp av hydraksyl-aminmetoden som påviser Æ-laktamstrukturen [Ford, Ind. Eng. Chem.

(analytical Edition) , bind 19, 1947, side 1004 til 1006 ].

Det ble funnet at perdcillinforbindelsene ble fullstendig nedbrutt av penicillinase i løpet av 30 minutter, mens cefalosporinforbindelsene forble uangrepet.

En parallell forsøksrekke med vandige oppløsninger

som bare inneholdt prøveforbindelsene, viste at det i fravær av pericillinase ikke fant sted noen betydelig nedbrytning av noen av prøveforbindelsene.

Ved videre forsøk ble det fastslått av forbindelsene fremstilt i henhold til oppfinnelsen også er bedre enn den kjente forbindelse 6-( a- fenoksypropionamido)-penicillansyre som finnes i handelen. Sistnevnte anvendes til behandling av infeksjoner

med penicillinresistente stafylokokker, og for dette formål representerer den en forbedring sammenlignet med de tidligere anvendte penicilliner. Den ble imidlertid - slik som følgende forsøk viser - likeledes nedbrutt av penicillinase, imidlertid ikke så raskt som de ovennevnte penicilliners

Forsøket ble utført med bare uvesentlige endringer

i forhold til de ovenfor beskrevne forsøk. Penicillinet ble oppløst i vann- til en konsentrasjon på 500 mikrog pr ml. En 5

o

ml porsjon av oppløsningen ble bragt mn i en termostat pa 37 C

og tilsatt 500 enheter penicillinase. For analyse ble det straks, tatt en prøve, og ytterligere prøver ble tatt efter 10,

15 og 30,minutter. Den mengde penicillin som var tilbake i de

forskjellige prøver, ble bestemt ved den ovenfor beskrevne fremgangsmåte ifølge Ford.

De følgende resultater viser at 6-( a- fenoksypropion-amido) -penicillansyre inaktiveres temmelig raskt av penicillinase, mens cefalosporinene som fremstilles i henhold til oppfinnelsen, som angitt ovenfor, var helt bestandige:

Cefalosporin C kan fremstilles ved å dyrke en cefalosporin C-produserende organisme i et passende næringsmedium, slik som beskrevet i britisk patent nr. 810 196, publisert 11. mars 1959.

Fra de forskjellige cefalosporin C-forbindelser som

på denne måten er tilgjengelige, fåes den tilsvarende kjerne lett ved å kløve 5<1->amino-N'-adipamylsidekjeden mellom dens amidonitrogen og dens amidokarbonylgruppe. Således kan det fåes 7-aminocefalosporansyre ved å oppvarme cefalosporin C i en lengre periode i nærvær av en mineralsyre og i fravær av lys, i henhold til den fremgangsmåte som er beskrevet i belgisk patent 593 777.

Et passende acyleringsmiddel er syrehalogenidet av

en syre av formel II. Acyleringen utføres i vann eller i et passende organisk oppløsningsmiddel, fortrinnsvis under i alt vesentlig nøytrale forhold, og fortrinnsvis ved redusert temperatur, dvs. over frysepunktet til reaksjonsblandingen og opp

o

til ca-20 C. Ved en typisk fremgangsmåte oppløses 7-aminocefalosporansyre eller en av dennes derivater som her definert, sammen med en tilstrekkelig mengde av natriumbikarbonat eller et annet passende alkali for å påskynne oppløsningen, i vandig 50% aceton og konsentrasjon av 7-aminocefalosporansyren er ca 1 til ca 4 vekt%. Oppløsningen avkjøles til ca 0 til 5°C, og en oppløsning av acyleringsmidlet tilsettes med et overskudd av ca 20% under omrøring og avkjøling. Blandingens pH kan opprettholdes hvis den har en tendens til å variere, rundt nøytralpunktet ved at det bobles inn karbondioksyd. Efter at tilsetningen av acyleringsmidlet er fullstendig, fortsettes omrøringen av reaksjonsblandingen, og blandingen får anledning til å oppvarme seg til romtemperatur. Reaksjonsproduktet surgjøres derpå til pH ca 2 og ekstraheres med organisk oppløsningsmiddel som f.eks. etylacetat. Etylacetat-ekstrakten reguleres til pH ca 5,5 med en base som inneholder det ønskede kation i sluttproduktet og ekstraheres med vann. Vann-oppløsningen fraskilles og inndampes til tørrhet. Residuet opp-tas i en minimumsmengde vann og det ønskede produkt utfelles ved å tilsette et stort overskudd av aceton og om nødvendig eter.

Det krystallinske produkt som herved fåes, filtreres, vaskes med aceton og tørkes.

Syrebromidene av syrer med den generelle formel II

kan anvendes på lignende måte som syrekloridene. Acyleringen kan også utføres under anvendelse av selve syrene med den generelle formel II sammen med en ekvimolar mengde av et karbo-

diimid, f.eks. med N,N'-diisopropylkarbodiimid, N,N'-dicyklo-heksylkarbodiimid, N,N'-bis-(p-dimetylaminofenyl)-karbodiimid, N-etyl-N'-(4"-etylmorfolinyl)-karbodiimid, idet acyleringen i

disse tilfeller forløper ved romtemperatur.

Fremstillingen av acyleringsmidlet som er nødvendig

ved fremgangsmåten i henhold til oppfinnelsen, er enten be-

skrevet i litteraturen eller utføres analogt med en kjent fremgangsmåte.

De følgende eksempler skal tjene til å illustrere oppfinnelsen ytterligere.

Eksempel 1

7- fenylmerkaptoacetamidocefalosporahsyré

7-aminocefalosporansyre (12,05 g) og natriumbikar-

bonat (8,20 g) ble oppløst i en blanding av 200 ml vann og 160 ml aceton. Oppløsningen ble avkjølt på et.isbad, og fenyl-merkaptoacetylklorid (7,85 g, oppløst i 40 ml aceton) ble til-

satt under omrøring i løpet av 45 minutter,hvorefter omrøringen ble fortsatt i 2,5 timer under oppvarmning av blandingen til romtemperatur. Acetonen ble derpå utdrevet ved vanlig temperatur, under anvendelse av en roterende kolbefordamper ved redusert trykk. Den resulterende vandige oppløsning ble surgjort til pH

2,0 med konsentrert saltsyre og ekstrahert med 200 ml etyl-

acetat. Etylacetatfasen ble fraskilt, pH regulert til 5,5 med 0,5 N vandig kaliumhydroksydoppløsnihg og ekstrahert med 150 ml vann. Den vandige ekstrakt ble fraskilt og inndampet til tørr-

het ved romtemperatur og redusert trykk. Residuet ble oppløst

i en minimumsmengde vann og fortynnet med et stort overskudd

aceton. Den resulterende krystallinske utfeining ble filtrert

fra, vasket med aceton og atter oppløst og utfelt, hvorefter den

ble tørket. Produktet var kaliumsaltet av 7-f enylmerkaptoacetamido-cef alosporansyre og veiet 6,85 g.

Eksempel 2

7-aminocefalosporansyre (1,2 g, 80% renhet) ble

suspendert i 50 ml vann og oppløst ved tilsetning av natriumbikarbonat (1,0 g). Aceton (50 ml) ble derpå tilsatt, og opp-

■ rr >^ a

løsningen ble avkjølt til 5°C og omrørt under tilsetning av 0,743 g o-tolylmerkaptoacetylklorid i 15 ml aceton i løpet av en time. Omrøring ble fortsatt i en time ved 5°C, og acetonet ble derpå fjernet ved fordampning i en roterende kolbefordamper under vakuum ved vanlig temperatur. Etylacetat (75 ml) ble tilsatt, efterfulgt av regulering av pH til 2. Efter omhyggelig blanding ble lagene skilt. Etylacetatfasen ble påny ekstrahert med 75 ml vann og en tilstrekkelig mengde vandig 1 N kalium-hydroksydoppløsning så at pH var 5,5. Vannlaget ble fraskilt og inndampet til et halvfast produkt i en roterende kolbe-for-damper under vakuum ved vanlig temperatur. Residuet ble oppløst i metanol, fortynnet med isopropylalkohol og utdrevet så at det var i det vesentlige fritt for oppløsningsmiddel. Kaliumsaltet av 7-o-tolylmerkaptoacetamidocefalosporansyre ble derved oppnådd som et hvitt pulver som veiet 850 mg og hadde et maksimum i det ultrafiolette absorpsjonsspektrum med 245 nyu (£ = 10,200).

Eksempel 3

7-m-tolylmerkaptoacetamidocefalosporansyre ble fremstilt som kaliumsaltet ved reaksjon av 7-aminocefalosporansyre (1,0 g), natriumbikarbonat (810 mg) og m-tolylmerkaptoacetylklorid (700 mg) i henhold til den fremgangsmåte og de betingelser som er beskrevet i eksempel 1. Produktet veiet 400 mg og hadde et maksimum i det ultrafiolette absorpsjonsspektrum ved 250 nyu (£ = 12 000) .

Eksempel 4

7-p-tolylmerkaptoacetamidocefalosporansyre ble fremstilt som kaliumsaltet ved reaksjon av 7-aminocefalosporansyre

- (1.2 g, 80% renhet), natriumbikarbonat (1,0 g) og p-tolylmerkaptoacetylklorid (700 mg) i henhold til den fremgangsmåte og under de betingelser som er beskrevet i eksempel 1. Produktet veiet 840 mg og hadde et maksimum i det ultrafiolette absorpsjonsspektrum ved 251 nyu (£ = 11 060). ^

Eksempel 5

7-(l'-metylcyklobutylmerkaptoacetamido)cefalosporan-syre ble fremstilt som kaliumsaltet ved reaksjon av 7-aminocefalosporansyre (1,089), natriumbikårbonat (0,701 g) og 1-metylcyklo-butylmerkaptoacetylklorid (0,714 g) i henhold til den fremgangs-

måte og under de betingelser som er beskrevet i eksempel 1. Produktet veiet 1,2 g og hadde et maksimum i det ultrafiolette absorpsjonsspektrum ved 259 nyu (£ = 7600).

SAMMENLIGNINGSEKSEMPEL

I det følgende er foretatt en sammenligning mellom forbindelsene (med kodenummer angitt foran)

44304 -natrium-cefalosporin C

37414 -kalium-7-fenylacetamidocefalosporanat

(belgisk patent 593 777)

og en forbindelse fremstilt i henhold til oppfinnelsen

3 742 7 -kalium-7-fenylmerkaptoacetamido-cefalosporanat

Undersøkelsene ble foretatt som gradientplate-forsøk, og aktiviteten er angitt i mikrog/ml.

GRAMPOSITIVE

Pencillin G-resistente Staphylococcus aureus-stammer.

Disse data viser at 37427 , fremstilt i henhold til oppfinnelsen, er noe mer aktiv enn 7-fenylacetamido-cefalosporansyresaltet (37414) ifølge belgisk patent 593.777 overfor disse 3 stammer av denne grampositive organisme. De viser også at cefalosporin C selv er et meget svakt antibiotikum.

GRAMNEGATIVE ORGANISMER

Forklaringer:

X-68 .-Aerobacter aerogenes

X-253 -Vibro metschnikovii

X-47 -Salmonella enteritidis

X-87 -Shigella paradysenteriae

X-83 -Klebsiella pneumoniae

Disse siste data viser at forbindelsen fremstilt i henhold til oppfinnelsen er mer aktiv enn fenylacetamidocefalo-sporansyre (37414) overfor X-253.

Claims

Analogifremgangsmåte for fremstilling av antibakterielt virksomme 7-aminocefalosporansyrederivater av den generelle formel I

hvor R betyr et fenylradikal, et cykloalkylradikal med 4-6 karbonatomer, hvilke radikaler kan være substituert med en alkylgruppe med 1-4 karbonatomer, eller et alkylradikal med 1-10 karbonatomer, og salter derav med farmasøytisk egnede baser, karakterisert ved at 7-aminocefalosporansyre eller et salt derav acyleres med et syrehalogenid, -anhydrid eller -azid eller en aktivert ester av en syre av den generelle formel II

eller med en syre av den generelle formel II i nærvær av et karbodiimid, og eventuelt omvandles den erholdte syre av den generelle formel I ved omsetning med en base til et salt.