NO134006B

NO134006B -

Info

Publication number: NO134006B
Application number: NO157248A
Authority: NO
Inventors: D W Henry; D R Hoff
Original assignee: Merck & Co Inc
Priority date: 1964-03-18
Filing date: 1965-03-17
Publication date: 1976-04-26
Also published as: DK113435B; DK113998B; FI46069C; DE1595928A1; FR4881M; DK115628B; US3515728A; DK113434B; NL6503442A; IL23035A; NL139973B; SE348733B; CH485717A; GB1097081A; FI46069B; US3472864A; US3646016A; BE661262A; BR6567919D0; FI46382B

Description

Foreliggende oppfinnelse angår nye 1-substituert-2-formyl-5-nitroimidazoler med den generelle formel:

for teknisk bruk og for anvendelse ved fremstilling av nye terapeutisk aktive forbindelser, som er antiprotozoale og antibakteri-elle midler, og som har den generelle formel: hvor R er lavere alkyl eller -(CH2)nOY, hvor n er 2, 3 eller 4>og Y er hydrogen el* ler lavere alkanoyl, R X. er hydrogen, lavere alkyl eller fenyl, og Q er -0R2, -NR^R^ eller

, hvor R^er hydrogen

eller lavere alkyl, R^er hydrogen eller lavere alkanoyl, og R, er fenyl, carboxyfenyl, carbamoyl-laverealkyl, lavere alkanoyl eller lavere carboalkoxy, eller -NR^R^danner sammen oxazolidinon, imida-zolidinon, imidazolidindion, hydroxysubstituert piperidin, hydroxy-laverealkylsubstituert piperazin eller morfolin, X er oxygen, svovel eller =NH, og Z er amino, laverealkylamino eller l-laverealkyl-5-nitro-2-imidazolyl, og hvis fremstilling er beskyttet i patent nr. 122.427.

De 1-substituert-2-formyl-5-nitroimidazoler ifølge oppfinnelsen har den generelle formel I hvor R er lavere alkyl, fortrinnsvis

methyl, eller hydroxyalkyl med 2-4 carbonatomer.

Forbindelsene med formel I kan fåes ved oxydasjon av en 1- R-5-nitroimidazol med en oxyderbar substituent i 2-stillingen. Nar en hydroxyalkylgruppe er tilstede i 1-stillingen i nitroimida-zolutgangsmaterialet, foretrekkes det å forestre den før oxydasjonen for å unngå uønskede bireaksjoner. Dette oppnåes ved å overføre den ved kjente metoder til en acyloxyalkylsubstituent, såsom 2-acetoxyethyl, 3-acetoxypropyl, 2-p-toluensulfonyl-oxyethyl og lignende. Valget av oxydasjonsmiddel er kritisk bare i den ut-strekning at det må gi en formylgruppe i 2-stillingen i imidazol-ringen. Flere oxydasjonsmidler er egnet, idet valget hovedsakelig avhenger av den substituent som skal oxyderes til formylgruppen.

De nye l-R-2-formyl-5-nitroimidazolforbindelser ifølge oppfinnelsen kan også fåes ved å behandle en passende 1-substituert 2- (P-fenylvinyl)-5-nitroimidazol med et oxydasjonssystem inneholdende et alkalimetallperjodat og osmiumtetroxyd. Når reaksjonen ut-føres på en 1-lavere alkyl-2-(|3-f enylvinyl)—5-nitroimidazol, som 1-methyl-, 1-ethyl- og 1-propyl-forbindelsene, påvirkes ikke alkyl-gruppen i 1-stillingen under reaksjonen og den tilsvarende 1-lavere alkyl-2-fonnyl-5-nitroimidazol dannes direkte. På den annen side er det for å få en l-[YO-(CH2)n]-substituert-2-formyl-5-nitroimidazol hvor n er som ovenfor angitt og Y er hydrogen, nødvendig, som tidligere nevnt, å overføre 1-hydroxyalkylsubstituenten til en acyloxyalkylsubstituent for å hindre uønsket oxydasjon. l-(2-hydroxyethyl)-2-formyl-5-nitroimidazol erholdes således ved alkali-metallper jodat -osmiumtetroxydoxydasjon av l-(2-acetoxyethyl) -2-( (3-fenylvinyl)-5-nitroimidazol, og påfølgende syrehydrolyse av den dannede l-(2-acetoxyethyl)-2-formyl-5-nitroimidazol.

Denne oxydasjonsprosess utføres bekvemt ved temperaturer fra ca. 20 - 35°C. Reaksjonstiden er ikke særlig kritisk, og det har vist seg at ved de nevnte temperaturer er reaksjonen praktisk talt fullstendig i løpet av 10 - 20 timer. Det foretrekkes å utføre prosessen i et passende vandig oppløsningsmedium, et foretrukket eksempel er vann-1,2-dimethoxyethan. Det er selvsagt nødvendig at det spesielle organiske oppløsningsmiddel er et som er bestandig overfor oxydasjon. Det foretrekkes å anvende et overskudd av alkalimetaliperjodatet, såsom natriumperjodat, og gode resultater er erholdt ved anvendelse fra 2,0 - 2,5 mol perjodat pr. mol nitro-imidazolreaktant. Bare katalytiske mengder osmiumtetroxyd er nød-vendig, og fra 1-3 mol% er tilfradast:U.l-aade. Ved avslutningen av oxydasjonsreaksjonen kan den ønskede 1-substituert-2-formyl-5-nitroimidazol skilles fra og isoleres ved kjente fremgangsmåter.

Ved en annen utførelsesform av den her beskrevne oxydasjonsprosess fåes l-R-2-formyl-5-nitroimidazol, hvor R er lavere alkyl eller acyloxyalkyl som tidligere angitt, ved oxydasjon av l-R-2-hydroxymethyl-5-nitroimidazol med et oxydasjonsmiddel, såsom blytetraacetat, mangandioxyd, nitrogentetroxyd, dimethylsulfoxyd-dicyclohexyl-carbodiimid, salpetersyre eller pyridin-kromtrioxyd-kompleks, eller med andre reagenser som er i stand til å overføre 2-hydroxymethylsubstituenten til en 2-formylgruppe. Disse fremgangsmåter utføres fortrinnsvis i organiske oppløsningsmidler som er inerte ved reaksjonsbetingelsene, under anvendelse av et lite overskudd av oxydasjonsmiddel for å få de beste resultater. Et stort overskudd av oxydasjonsmiddel bør i alminnelighet unngåes for å nedsette overoxydasjon av den ønskede formylforbindelse. Med blytetraacetat eller mangandioxyd er oppløsningsmidler såsom benzen, toluen eller xylen, tilfredsstillende og foretrekkes.

Gode resultater er oppnådd ved å oppvarme reaksjonsblandingen ved temperaturer på ca. 60- 120°C i 2 - 12 timer, fortrinnsvis 4 - IO timer. De oppløselige metallsalter fraskilles ved filtrering, sentrifugering eller dekantering, og den ønskede l-R-2-formyl-5-nitroimidazol utvinnes fra reaksjonsoppløsningen og renses ved kjente metoder, som ekstraksjon i et ublandbart oppløsningsmiddel, kromatografi over aluminiumoxyd eller silicagel og krystallisasjon. På denne måte fåes følgende forbindelser fra de tilsvarende 2-hydroxymethylimidazoler: l-ethyl-2-formyl-5-nitroimidazol, 1-propyl-2-formyl-5-nit roimidazol, 1-(2-propionoxyethyl)-2-formyl-5-nitro - imidazol, 1-(3-acetoxypropyl)-2-formyl-5-nitroimidazol og l-(2-benzoyloxyethyl)-2-formy1-5-nitroimidazol. 1-(acetoxyalkyl)-2-formyl-5-nitroimidazol-forbindelsene som fåes på denne måte, over-føres til de tilsvarende 1-(hydroxyalkyl)-forbindelser ved syrehydrolyse av esteren, som med fortynnet svovelsyre eller saltsyre.

Når nitrogentetroxyd (N-jO^) anvendes som oxydasjonsmiddel, fåes tilfredsstillende resultater ved å utføre reaksjonen ved værelsetemperatur eller litt over, dvs. opptil ca. 45°C, i oppløsnings-midler som kloroform, methylendiklorid, tetraklorethan eller di-methylsulf on , og den dannede l-R-2-formyl-5-nitroimidazol utvinnes ved å fjerne oppløsningsmidlet efterfulgt av ekstraksjon i en vandig base og til slutt i et med vann ublandbart oppløsningsmiddel, som ether. Med alle disse 2-formylimidazoler kan utvinningen innbefatte overføring til et relativt uoppløselig derivat, som et semicarbazon eller dinitrofenylhydrazon, og påfølgende regenerering av aldehydet.

Ved en ytterligere fremgangsmåte oxyderes den 1,5-disubsti-tuerte-2-hydroxymethylimidazol til aldehydet ved å bringe den i kontakt med dimethylsulfoxyd og dicyclohexylcarbodiimid. Denne reaksjon utføres vanligvis i nærvær av en syre, såsom orthofosfor-syre. Reaksjonstider på 15 - 30 timer ved værelsetemperatur er egnet, og disse kan reduseres ved å anvende høyere temperaturer på 40 - 80°C. Dicyclohexylurea dannes under oxydasjonen og fjernes ved filtrering efter fortynning av blandingen med vann efter avslutningen av reaksjonen. 2-formylimidazolen fåes like-ledes ved behandling av en sulfonatester av 1-lavere alkyl-2-hydroxymethyl-5-nitroimidazol, såsom 2-methansulfonat- eller p-toluensulfonatesteren,med dimethylsulfoxyd.

Ved en ytterligere fremgangsmåte fåes den 1-substituert-2-formyl-5-nitroimidazol ved oxydasjon av den tilsvarende 2-methyl-imidazol med selendioxyd. Denne reaksjon kan utføres ved å bringe l-R-2-methyl-5-nitroimidazolreaktanten hvor R er lavere alkyl eller acyloxyalkyl, i kontakt med selendioxyd og oppvarme blandingen inntil reaksjonen begynner, hvilket fremgår av varme-utvikling. Ved avslutningen av den eksoterme reaksjon avkjøles blandingen, og imidazolene skilles ved ekstraksjon i et organisk oppløsningsmiddel. Avsluttende rensning av 1-R-2-formyl-5-nitroimidazolen kan lettes ved å danne et uoppløselig aldehyd-derivat, såsom et oxim, hydrazon eller semicarbazon.

De nye l-R-2-formyl-5-nitroimidazoler ifølge oppfinnelsen hvor R er som tidligere angitt, oppviser bl.a. aktivitet mot bakterier, og særlig mot arter av Salmonella og Streptococci,

og er videre virksomme mot de såkalte PPLO (pleuro-pneumonia-

lignende organismer). De er derfor anvendbare til desinfisering av egg og områder infisert med Salmonella.

De følgende eksempler er gitt for å belyse oppfinneisen.

Eksempel 1

40 g l-methyl-2-(|3-fenylveinyl)-5-nitroimidazol og 80 g natriumperjodat tilsettes til en blanding av 800 ml 1,2-dimethoxyethan og 200 ml vann ved værelsetemperatur. 1 g osmiumtetroxyd tilsettes så, og blandingen omrøres i 17 timer ved værelsetemperatur. Den bleke, gule reaksjonsblandingesom inneholder et tungt, hvitt bunnfall, helles i 6 1 vann, og hele blandingen ekstraheres med tre 1.300 ml porsjoner kloroform. KLorof ormekst rakt ene forenes, tørres over natriumsulfat og konsentreres så til tørrhet i vakuum til en brun olje. Denne olje krystalliserer ved avkjøling. Det dannede krystallinske residuum ekstraheres med fire 200 ml porsjoner varm ethylether. Etherekst raktene forenes og fortynnes med et like stort volum hexan. Den dannede oppløsning kromatograferes på en kolonne av 350 g syrevasket aluminiumoxyd fremstilt i 1:1 ether-hexan.Kolonnen elueres med 1:1 ether-hexan for å fjerne en farveløs fraksjon inneholdende 8»2 g av en olje med en lukt av benzaldehyd. Kolonnen elueres så med ca. 1,5 1 ether, og dette eluat konsentreres til et volum på ca. 350 ml. Det får stå ved værelsetemperatur i ca. 12 timer, og i løpet av denne tid krystalliserer ca„ 4,1 g l-methyl-2-formyl-5-nitroimidazol. Produktet utvinnes ved filtrering og tørres og har smeltepunkt 95 - 98°C.

Eksempel 2

2 g l-(2-hydroxyethyl) -2-((3-fenylvinyl) -5-nitroimidazol blandes med 1,2-g eddiksyreanhydrid i 10 ml pyridin ved værelsetemperatur i 4 timer.Blandingen fortynnes så med 100 ml vann og innstilles på pH 2 med konsentrert saltsyre. Den filtreres og de utvundne krystaller av 1-(2-acetoxyethyl) -2-(|3-f enylvinyl) -5-nitroimidazol vaskes omhyggelig med vann. Krystallene tørres så i luft.

Det erholdte krystallinske produkt beskrevet ovenfor, tilsettes til en blanding av 40 ml dimethoxyethan, IO ml vann og 3,6 g natriumperjodat. 50 mg osmiumtetroxyd tilsettes, og reaksjonsblandingen får stå i ca. 15 timer ved værelsetemperatur. Den fortynnes så med 100 ml vann og ekstraheres med to 100 ml porsjoner kloroform. Kloroformekstraktene forenes, tørres over natriumsulfat og inndampes så til tørrhet i vakuum til et oljeaktig residuum av rått l-(2-acetoxyethyl)-2-formyl-5-nitroimidazol.

Dette råmateriale tilsettes ti en blanding av IO ml methanol og IO ml 4N saltsyre. Denne blanding kokes under tilbakeløp i 1 time og avkjøles så. Methanolen fjernes ved destillasjon i vakuum. Den gjenværende vandige blanding bringes til en pH på 1,5 med 2N vandig ammoniumhydroxyd. Den ekstraheres så med tre 20 ml porsjoner ethylacetat. Ethylacetatekstraktene forenes og inndampes til tørrhet i vakuum og efterlater et residuum av l-(2-hydroxy-ethyl)-2-formyl-5-nitroimidazol, smp. 217 - 225°C. Dette renses ved triturering med hexan og kromatografering av det faste materiale over syrevasket aluminiumoxyd under anvendelse av ethylacetat som oppløsningsmiddel.

Utgangsmaterialene i eksempel 1 og 2 fremstilles på følgende måte:

A. 5 g (0,035 M) 1,2-dimethyl-5-nitroimidazol og 18 ml (0,18M) benzaldehyd tilsettes til en blanding av 90 ml absolutt ethanol og 6 g (0,054 M) kalium-t-butoxyd. Den dannede blanding oppvarmes til 70 - 75°C i et vannbad i 20 minutter. Den avkjøles så i et isbad, og det faste bunnfall av 1-methy 1-2-((3-f enylvinyl) -5-nitroimidazol fjernes ved filtrering. Det faste materiale vaskes først med ethanol og derpå med vann. Det gjenværende, krystallinske produkt er l-methyl-2-(P~fenylvinyl)-5-nitroimidazol med smeltepunkt 198 199°C efter lufttørring.

B. 1,0 g 1-(2-hydroxyethyl)-2-methyl-5-nitroimidazol, 1 ml benzaldehyd og 500 mg natriummethoxyd oppløses i 20 ml ethanol, og blandingen oppvarmes til 70°C i 25 minutter. Blandingen avkjøles så til værelsetemperatur, og et like stort volum vann tilsettes. Det således utfelte 1-(2-hydroxyethyl) -2-((3 -f enylvinyl) -5-nit roimidazol oppsamles ved filtrering og lufttørres. Det krystalliseres fra ether og derpå fra ethylacetat, hvorved man får praktisk talt rent materiale med smeltepunkt 156 - 158°C.

Eksempel 3

1-( 2- hydroxyethyl)-2-formyl-5-nit roimidazol

2,3 g (10 ramol) l-(2-acetoxyethyl)-2-hydroxymethyl-5-nitroimidazol omrøres i 8 timer ved 78°C med 7,2 g blytetraacetat i 6o ml benzen. Oppløsningen avkjøles så og filtreres for å fjerne utfelt blydiacetat. Benzenfiltratet ekstraheres to ganger med 20 ml's porsjoner mettet, vandig kaliumbicarbonatoppløsning. Benzenoppløs-ningen inndampes så til tørrhet i vakuum. Det gjenværende, rå 1-(2-acetoxyethyl)-2-formyl-5-nitroimidazol oppløses i 15 ml 10%-ig svovelsyre, og oppløsningen oppvarmes ved 100°C i 1 time. Den av-

kjøles så og nøytraliseres med fast natriumbicarbonat, og ekstraheres med 3 x 20 ml's porsjoner ethylacetat. Ethylacetatekstraktene forenes, tørres over natriumsulfat og inndampes så i vakuum til tørrhet, hvorved man får praktisk talt rent l-(2-hydroxyethyl)-2-formyl-5-nitroimidazol.

Eksempel 4

1- methy1- 2- formyl- 5- nitroimidazol

100 g (0,64 M) l-methyl-2-hydroxymethyl-5-nitroimidazol opp-løses i 3.500 ml benzen ved 70°C. Der tilsettes i løpet av 20 minutter 460 g blytetraacetat (på forhånd vasket med iseddik og tørret i mørke). Reaksjonsblandingen omrøres ved 78°C i 8 timer i løpet av hvilke hvitt, krystallinsk blydiacetat felles fra oppløs-ningen. Blandingen får lov til å stå over natten ved værelsetemperatur og blydiacetatet fjernes så ved filtrering og vaskes med 2 x lOO ml benzen. De forenede benzenfiltrater og vaskinger ekstraheres med to 1 liters porsjoner mettet, vandig natriumbicarbonat, derpå med 1.500 ml vann. De vandige ekstrakter forenes og ekstraheres med 3 x 2.500 ml's porsjoner kloroform. Kloroformekstraktene utvaskes igjen hver for seg med 50O ml vann og forenes derpå med benzenoppløsningen og inndampes i vakuum til tørrhet. Residuet opp-løses i 500 ml 10%-ig svovelsyre og oppvarmes på dampkjegle ved 75 - 90°C i 35 minutter.

Den sure oppløsning avkjøles så til værelsetemperatur og nøytraliseres med natriumbicarbonat. Denne vandige oppløsning ekstraheres så med 4 x 2.500 ml's porsjoner kloroform, og hvert ekstrakt utvaskes igjen med 500 ml vann. De organiske ekstrakter forenes og inndampes til tørrhet i vakuum. Det således erholdte, krystallinske residuum oppløses i et minimalt volum kloroform og filtreres over ca. 250 g silicagel. Silicagelen elueres med 7.500 ml methylendiklorid. Eluatet inndampes i vakuum, hvorved man får et residuum av praktisk talt ren l-methyl-2-formyl-5-nitroimidazol. Omkrystallisasjon av produktet fra 500 ml kokende hexan gir 79 g l-methyl-2-formyl-5-nitroimidazol med smeltepunkt 90 - 94°C.

Eksempel 5

1- methyl- 2- formyl- 5- nitroimidazol

157 mg (1 mmol) 1-methyl-2-hydroxymethyl-5-nitroimidazol og 348 mg aktivert mangandioxyd kokes under tilbakeløp i 2 timer i

5 ml benzen. Mangandioxydet fjernes ved sentrifugering og vaskes tre ganger med 5 ml kokende benzen.Denforenede benzenoverstående væske og vaskingene oppløses i ether og filtreres gjennom 1,0 g syrevasket aluminiumoxyd. Ethereluatet inndampes i vakuum, hvorved man får 4l mg krystallinsk l-methyl-2-formyl-5-nitroimidazol.

Eksempel 6

312 mg l-methyl-2-hydroxymethyl-5-nitroimidazol oppløses i

10 ml kloroform. 1,0 g di-nitrogentetroxyd tilsettes, og den dannede suspensjon omrøres ved værelsetemperatur i 5 dager. Blandingen inndampes så til tørrhet i vakuum, og residuet oppløses i 10 ml mettet, vandig kaliumbicarbonat. Den vandige oppløsning ekstraheres med 5 x 25 ml ether. Etherekst raktene forenes, utvaskes med 10 ml vann, tørres over natriumsulfat og inndampes til slutt i vakuum til et residuum av l-methyl-2-formyl-5-nitroimidazol.

Produktet renses ved å oppløse det i 2 ml ethanol og tilsette 300 mg semicarbazid-hydroklorid i 3 ml varmt vann. Oppløsningen av-kjøles til værelsetemperatur, og bunnfallet av l-methyl-2-formyl-5-nitroimidazol-semicarbazon utvinnes ved filtrering og tørres og har smeltepunkt 251 - 253°C.

Eksempel 7

l- methyl- 2- formyl- 5- nitroimidazol

0,156 g (1 mmol) l-methyl-2-hydroxymethyl-5-nitroimidazol oppløses i 1,3 ml dimethylsulfoxyd. Til denne oppløsning tilsettes 0,412 g (2 mmol) dicyclohexylcarbodiimid' i 3,3 ml dimethylsulfoxyd under omrøring. Til slutt tilsettes 0,05 g (0,5 mmol) orthofosfor-syre i 0,4 ml dimethylsulfoxyd under omrøring, og reaksjonsblandingen omrøres i 29 timer ved værelsetemperatur.Blandingen fortynnes så med 20 ml vann og filtreres for å fjerne dicyclohexylurea. Det faste materiale vaskes med fem 1 ml•s porsjoner vann. Det forenede filtrat og vaskinger ekstraheres med fire 50 ml"s porsjoner ether. Etherekstraktene forenes så og utvaskes med 10 ml vann. Den etheriske oppløsning tørres over natriumsulfat og inndampes til tørrhet i vakuum.

Det således erholdte materiale er en blanding av uomsatt 1-methyl-2-hydroxymethyl-5-nitroimidazol og 1-methyl-2-formyl-5-nitroimidazol . Det oppløses i 1 ml varm ethanol og behandles med lOO mg semicarbazid-hydroklorid i 1 ml vann. Blandingen avkjøles til værelsetemperatur. 8 mg l-methyl-2-formyl-5-nitroimidazol-semicarbazon utfelles. Det utvinnes ved filtrering og tørres og har smeltepunkt 250 - 254°C.

Eksempel 8

1- methy1- 2- formyl- 5- nitroimidazol

1,41 g (10 mmol) 1,2-dimethyl-5-nitroimidazol og 1,11 g

(10 mmol) selendioxyd blandes og oppvarmes til ca. l40°C uten opp-løsningsmiddel, inntil reaksjonen begynner. En kraftig eksoterm reaksjon følger, og varmen fjernes ved isbadavkjøling. Blandingen avkjøles så til værelsetemperatur og ekstraheres med 150 ml methylendiklorid. Ekstraktene inndampes i vakuum til et krystallinsk residuum. Dette råmateriale oppløses i 2,5N saltsyre, og den sure oppløsning vaskes med ether. Vannfasen nøytraliseres så til pH 5 og ekstraheres med ether. Etherekstraktet konsentreres til et krystallinsk residuum (A). Vannfasen gjøres så alkalisk og reekstraheres med ether. Dette etherekstrakt inndampes til tørrhet og gir et residuum (B). De faste fraksjoner A og B forenes og opp-løses i 4 - 5 ml ethanol. Ethanoloppløsningen blandes med overskudd av hydroxylamin-hydroklorid i et lite volum vann. Den dannede blanding oppvarmes til 100°C, avkjøles derpå straks til ca. 15 - 20°C, hvorved l-methyl-2-formyl-5-nitroimidazol-oxim felles og oppsamles ved filtrering.

Claims

1. 5-nitroimidazol for teknisk antibakteriell anvendelse og for anvendelse som utgangsmateriale ved fremstilling av terapeutisk aktive 5-nitroimidazolforbindelser med den generelle formel:

hvor R er lavere alkyl eller -(CH2 )n 0Y, hvor n er 2, 3 eller 4, og Y er hydrogen eller lavere alkanoyl, Rx er hydrogen, lavere alkyl eller fenyl, og Q er -0R2 , -NRgR, eller

hvor R2 er hydrogen eller lavere alkyl, R^ er hydrogen eller lavere alkanoyl, og R^ er fenyl, carboxyfenyl, carbamoyl-lavere alkyl, lavere alkanoyl eller lavere carboalkoxy, eller -NR^ R^ danner sammen oxazolidinon, imida- zolidinon, imidazolidindion, hydroxysubstituert piperidin, hydroxy-laverealkylsubstituert piperazin eller morfolin, X er oxygen, svovel eller =NH, og Z er amino, laverealkylamino eller l-laverealkyl-5-nitro-2-iroidazolyl, karakterisert ved at den er en l-R-2-formyl-5-nitroimidazol med den generelle formel:

hvor R er lavere alkyl eller hydroxyalkyl med 2-4 carbonatomer.

2. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at R er methyl.