NL9001834A

NL9001834A - Nieuwe antracyclineverbindingen met anti-tumorwerkzaamheid, nieuwe tussenverbindingen voor de bereiding van deze antracyclineverbindingen, alsmede preparaten die de aktieve antracyclineverbindingen bevatten.

Info

Publication number: NL9001834A
Application number: NL9001834A
Authority: NL
Original assignee: Pharmachemie Bv
Priority date: 1990-08-16
Filing date: 1990-08-16
Publication date: 1992-03-16
Also published as: EP0475473A3; JPH04297486A; CA2048510A1; US5294701A; EP0475473A2

Description

Korte aanduiding: Nieuwe antracyclineverbindingen met anti-tumorwerk-zaamheid, nieuwe tussenverbindingen voor de bereiding van deze antracyclineverbindingen, alsmede preparaten die de aktieve antracyclineverbindingen bevatten.

Daunonycine an adrianycine zijn reeds vele jaren als anti-neo-plastische (en tevens als antibiotische) verbindingen bekend.

X = H: daunonycine

X = OH: adrianycine

De uitvinding verschaft nu nieuwe verbindingen met een anti-tumor-werking, en wel verbindingen volgens formule 1

waarin R -000% of -0=0-¾ voorstelt; S4 Hof -Si (013)3 voorstelt; % en R2 H voorstellen of tesamen een groep -C1^=C%-CR7=CR8 / -CRg^Rio-CRu^- of -N^Rg-CR^cpCKll- vormen? elk der symbolen %, Rg, R7 en R8 Hf een C2-C3 alkylgroep, een 02-03 alkoxygroep of een -OH groep voorstelt? elk der symbolen Rg, R^ en R22 H of een C2-C3 alkylgroep voorstelt? en R3 H of -OOCF3 voorstelt? alsmede zouten hiervan met een zuur? uitgezonderd de verbindingen waarin en R2 een groep -CH=CH-aM: (002-03 alkyl)- of -CH=CH-Cft=C (OH) - vormen, R een groep- OOCH3 is en R3 H voorstelt; en zouten van deze verbinding met een zuur? en de verbindingen waarin R2 en R2 een groep -<3i<H-CS=CH-, -01=0(0¾) - C(CH3)=CH- of -C(CH3)=<H-CH=C(C%)- vormen, R een groep -000¾ voorstelt en R3 H voorstelt; en zouten van deze verbindingen met een zuur.

De uitvinding omvat zowel de afzonderlijke stereoiscmeren als mengsels hiervan, met inbegrip van racemische mengsels en mengsels van diastereoisoneren.

Behalve dauncmycine en adrianycine en zouten hiervan, zijn de onderstaande stereoiscmeren van 4-demethaxydauncnycine en hun HCl-zout beker

Verwezen wordt hiervoor naar de Nederlandse octrooiaanvrage 7600075 waarin de HCl-zouten van deze verbindingen vermeld worden. Ook worden de bovenstaande verbindingen beschreven in Anticancer Agents Based on Natural Product Models, onder redactie van J.M. Cassady en J.D. Douros, Academic Press 1980, Chester l, The Development of New Antitumor Anthracy-dines door Federico Arcamone. Deze publikatie vermeldt ook de anti-tu-morwerkzaamheid van de twee bovengenoemde bekende verbindingen. Verder vermeldt de laatstgenoemde literatuurplaats 4-demethcKy-l, 4-dimethyldau-rrcycine en 4-demethoxy-2,3-diTiethyldaunccycine alsmede carminccycine (4-demethojy-4-hydro^-daunccycine) en hun anti-tumorwerkzaanheid. Tenslotte zijn 4-demethoxy-4-etho5Qdaunccycine en 4-öemethoxy-4-iscprcpoxy-daunccycine en hun anti-tumorwerkzaanheid bekend uit Anthracycline Antibiotics, Ed. by Hassan S. El Ehaden, Ac. Press, 1982, N.Y., Chapter I, Anthracyclines in the National Cancer Institute Programme, M. Benton Naff, Jacqueline Plowman, V.L. Narayanan, 19 e.v.

Meer specifieke voorbeelden van de nieuwe verbindingen van de uitvinding zijn; verbindingen volgens formule 2

waarin R3 de hierboven gegeven definitie bezit, alsmede zouten hiervan met een zuur; verbindingen volgens formule 3

waarin R'^ en R*2 tesamen een groep -00=0((¾)-CH4I- of -N=CH-C(CH3) =CH-vormen en R3 de hierboven gegeven definitie bezit; alsmede zouten hiervan met een zuur; verbindingen volgens formule 4

waarin %'-%"=H of R^" en R2" tesamen een groep -CH=CH-CB=C(0CH3)- of -CH=CH-CB=CH- vormen en R3 en 1¾ de in oancdusie 1 gegeven betekenissen bezitten; alsmede zouten hiervan met een zuur; verbindingen volgens formule 5

waarin R3 de in conclusie l gegeven definities bezit; alsmede zouten hiervan met een zuur.

Op grond van de anti-tumorwerkzaaxnheid wordt in het bijzonder de voorkeur gegeven aan de verbinding met de formule 6

alsmede aan de zouten hiervan met een zuur.

Een aantal verbindingen werd onderzocht op de onderstaande humane tumorcellijnen volgens de methode van R. van Lambalgen en P. lelieveld, "Ihe PIT method: an automated in vitro technique for drug toxicity testing", Invest. New Drugs 5, 161-165, 1987.

A 204 rhabdomyosarcoma (A-cellen) MCF-7 borstsarcoomcellen (M-cellen) T 24 blaascarcinoomcellen (T-cellen)

WiDr colontumorcellen (W-cellen)

IgR-37 melanocmcellen (Z-cellen)

Men hield de cellijnen in een continue logarithmische cultuur in Dulbeco's medium, aangevuld met 10% kalf foetusserum, penicilline (100 IE/ml) en streptcxiycine (100 pg/ml).

Men onderzocht de volgende verbindingen:

Verbindincr Structuur HEM01 Figuur 18a HRM03 Figuur 16a HEM04 Figuur 17a HEMLO Figuur 18b HRM11* Figuur 52 HBM12 Figuur 30a HKM13 Figuur 41 HRM15** Figuur 49 HEML6 Figuur 40 HEM09 HC1 zout van a-7,9-bis-epi-4- denethoxydauncmycine. Vergelijkingsverbinding

Daunamycine, Hd zout Vergelijldngsverbinding

Adriaitycine, Hd zout Vergelij]dngsverbiix3ing

Etcposide*** Vergelijkit^sverbinding; ge bruikelijk anti-txmormiddel *) 1:1 mengsel van de 7S, 9S en 7R, 9R isameren **) 1:1 mengsel van 8Sf 10S en 8R, 10R iscmeren ***) structuur:

>

Men bepaalde van de bovenstaande verbindingen de ID50 waarden in mg/ml volgens de bovenvermelde methode van van Lambalgen en Lelieveld. De ID50 waarde is de hoeveelheid die 50% van de celgroei remt.

ID50 waarden in mcr/ml > Verbinding A204 MCF-7 T24 WiDr Icfe-37 HEM01 0,3 1 2 4 2 HRM03 97 151 444 156 146 HKM04 14 14 75 43 18 HKM10 243 420 728 372 469 ) HEM11 45 67 173 139 77 HKM12 21 39 140 87 63 HKM13 729 542 1047 1425 2441 HRM15 171 334 949 779 459 HRM16 280 338 1262 2116 1938 > Veraelii]dnqsverbindincren HRM09 302 745 1143 501 618

Daunomycine.Hd 1 14 3 1

Mriamycine.Hd 4 6 18 16 6

Etcposide 91 187 457 624 427 N.B.: Daar in mengsels van enantiomeren in het algemeen één der enantio-meren werkzaam is en het andere niet of zeer weinig, is voor HEM11 en HRM15 de aktiviteit van het feitelijk of meest werkzame stereoisameer beduidend groter dan in de bovenstaande tabel aangegeven, daar uiteraard alle verbindingen in dezelfde concentratie zijn onderzocht.

Blijkens de bovenstaande resultaten hebben sommige verbindingen van de uitvinding een grotere werkzaamheid dan bekende verbindingen, terwijl andere een geringere werkzaamheid bezitten. Hierbij wordt opgemerkt dat er behoefte aan zowel anti-tumormiddelen met een relatief zwakke aktiviteit als middelen met een hoge aktiviteit bestaat: daar anti-tumormiddelen ook gezonde cellen kunnen aantasten, zullen minder aktieve anti-tumormiddelen onder bepaalde omstandigheden juist gewenst zijn, terwijl anderzijds onder andere omstandigheden zeer aktieve middelen zullen worden gekozen.

Verder bestaat voortdurend behoefte aan uitbreiding van het bestaande assortiment geneesmiddelen tegen een bepaalde ziekte, daar in individuele gevallen patiënten slecht kunnen reageren op de békende geneesmiddelen.

l,4,9,10-tetrahvdro-5.8-dihydroxy-9,10-dioxo-l,4-ethanoantraceen (9).

7 8 9 19,0 g (100 mmol) zuivere naftazarine (8) en 12,5 g (160 mmol) 1,3-cyclohexadieen (7) werden gedurende 5 dagen gerefluxed in 190 ml THF. De reaktie werd gevolgd met behulp van TLC (ethylacetaat: n-hexaan, 2:5). De Meur van de oplossing veranderde van rood naar geel/bruin. Na indampen werd het product gezuiverd door het residu 1 uur te roeren in 200 ml petroleumether 40/65. De vaste stof werd afgefiltreerd en de opbrengst was 23,8 g (88%).

De gele verbinding werd onder roeren toegevoegd aan een oplossing van 20,0 g NaOH in 750 ml water. De oplossing werd gedurende 1 uur geroerd terwijl perslucht werd doorgeleid. De reaktie werd gevolgd met behulp van TLC (ethylacetaat: n-hexaan, 2 : 5). Na de reaktie werd 35 ml geconcentreerd zoutzuur (37%) toegevoegd. De vaste verbinding die precipiteerde werd afgefiltreerd. Deze rode verbinding werd met chloroform van het filter gespoeld waarna de organische fase werd gewassen met verzadigde natriumbicarbonaatoplossing. Na drogen op watervrij natriumsulfaat en indampen kon 20,1 g (85%, overall 75%) van de verbinding (9/9a) geïsoleerd worden. Smeltpunt 203-204°C.

1H-NMR (90 MHz, CDC13, TMS als interne standaard) : 5 = 1,16-1,58 ppm (4H, m, CH2-CH2), δ = 4,49 ppm (2H, m, Hx en H4), δ = 6,35 ppm (2H, dd, H-C=C-H), δ = 7,03 ppm (2H, s, ArH), δ = 12,48 ppm (2H, s, ArOH).

l,4,6a,9,10,10a-hexahydro-5,12-dihydroxy-7-ferf-butoxv-l,4-ethanonaftaceen-6,9,ll-(lOH)-trion (11).

9a 11 19,4 g (72 mmol) (9/9a) werd in 300 ml tolueen opgelost en onder argon atmosfeer gebracht. Hieraan werd 23,2 g (108 mmol, 1,5 eq.) l-tert-butoxy-3-trimethylsilyloxy- buta-l,3-dieen (10) toegevoegd. Het reaktieverloop werd gevolgd met behulp van TLC (ethylacetaat : n-hexaan, 2 : 5). Na 5 dagen roeren bij kamertemperatuur werd het reaktiemengsel ingedampt en opgenomen in 190 ml koude THF (0°C). Hieraan werd 9,7 ml 1 M HCl-oplossing toegevoegd en de oplossing werd gedurende 15 minuten bij 0°C geroerd. Het reaktieverloop werd gevolgd met behulp van TLC (ethylacetaat: n-hexaan, 2 : 5). Na afloop werd 500 ml water toegevoegd en werd de waterlaag geextraheerd met dichloormethaan (2 maal 500 ml). De organische laag werd gedroogd op watervrij natriumsulfaat en ingedampt.

Het produkt werd gezuiverd door het residu 1 nacht te laten roeren in 200 ml diethylether. De vaste stof (lichtgeel) werd afgefiltreerd. Het filtraat werd ingedampt en verder gezuiverd m.b.v. flash kolomchromatografie (kolom 25 cm, 5 cm φ, loopmiddel ethylacetaat : n-hexaan, 2 : 3). De totale opbrengst was 22,2 g (75%). Smeltpunt 154-158°C.

^-NMR (90 MHz, CDC13, TMS als interne standaard): (Mengsel endo en exo isomeer) δ = 0,7 ppm (9H, s, C(CH3)3), δ = 1,2-1,61 ppm (4H, m, CH2-CH2), δ = 2,1-2,57 ppm (3H, H10(ax) + H8(eq) + H8(ax)), δ = 3,23-3,6 ppm (3H, H10a+ H6a + H10(eq)), δ = 4,39 ppm (1H, m, H7), δ = 4,47-4,63 ppm (2H, m, Hx + H4), δ = 6,45 ppm (2H, dd, H-C=C-H), δ = 11,83 ppm (1H, s, ArOH), δ = 12,30 ppm (1H, s, ArOH).

cis-9-trimethvIsiIvlethvnvl-l,4<7<8,9,10-hexahvdro-6,9,ll-trihvdroxv-7-fórr-bu-toxv-l,4-ethanonaftaceen-5,12-dion (12).

11 12 4,2 g (43 mmol) trimethylsilylacetyleen werd opgelost in 450 ml over natrium gedestilleerde THF en onder argon atmosfeer gebracht De oplossing werd gekoeld tot -78°C en 26,2 ml (42 mmol) 1,6 M n-butyllithium werd toegevoegd. Na een half roeren bij -78°C werd 3,1 g (7,6 mmol) 11 toegevoegd. Het reaktiemengsel werd 3 uur bij -78°C geroerd terwijl de reaktie werd gevolgd met behulp van TLC (ethylacetaat: n-hexaan, 2 : > 5). Na afloop liet men het reaktiemengsel langzaam op kamertemperatuur komen en werd 150 ml van een 10% ammoniumchloride oplossing toegevoegd. Na 15 minuten werd 300 ml water toegevoegd en werd de oplossing geextraheerd met 2 maal 300 ml chloroform. De verzamelde organische fracties werden gedroogd op watervrij natriumsulfaat en na affiltreren ingedampt. Het residu werd opgelost in 60 ml ijsazijn en 3,4 g (7,7 mmol) loodtetraacetaat werd aan de oplossing toegevoegd. Na 1 nacht roeren werd 200 ml water toegevoegd. De rode vaste stof die precipiteerde werd afgefiltreerd en met 300 ml chloroform van het filter gespoeld. De oplossing werd geextraheerd met 75 ml van een verzadigde natriumbicarbonaatoplossing. De organische fase werd gedroogd op watervrij natriumsulfaat, afgefiltreeid en ingedampt. Het product werd gezuiverd met behulp van een kolomscheiding (kolom 15 cm, 5 cm φ, loopmiddel ethylacetaat: n-hexaan, 1 : 4). De opbrengst was 2,9 g (76%). Smeltpunt 116-118°C.

1H-NMR (90 MHz, CDC13, TMS als interne standaard): (Mengsel endo en exo isomeer) δ = 0,27 ppm (9H, s, Si(CH3)3), δ = 1,40 ppm (9H, s, C(CH3)3), δ = 1,20-1,80 ppm (4H, m, CH2-CH2), δ = 1,94 ppm (1H, dd, J=14,5 Hz en J=3 Hz, H8(ax)), δ = 2,67 ppm (1H, d, J=14,5 Hz, H8(eq)), δ = 3,04 ppm (1H, d, J=17,5 Hz, H10(ax)), δ = 3,55 ppm (1H, d, J=17,5 Hz, H10(eq)), δ = 4,63 ppm (2H, m, Hx + H4), δ = 5,27 ppm (1H, m, H7), δ = 5,72 ppm (1H, s, OH), δ = 6,48 ppm (2H, dd, H-C=C-H), δ = 12,95 ppm (1H, s, ArOH), δ = 13,12 ppm (1H, s,ArOH).

cis-9-trimethvIsiIvIethvnvI-7,8,9,10-tetrahvdro-6,9,ll-tnhvdroxv-7-rerf-butoxv-naftaceen-5,12-dion (13).

12 13 2,9 g (5,7 mmol) (12) werd opgelost in 30 ml o-xyleen. De oplossing werd gedurende 5 uur gerefluxed bij 150°C. De oplossing werd ingedampt en opgenomen in 30 ml ether. De ether werd gedurende een half uur gerefluxed. Nadat de oplossing was afgekoeld tot kamertemperatuur werd de oranje vaste stof afgefiltreerd. De opbrengst (13) was 2,5 g (91%). Smeltpunt 214-216°C.

!H-NMR (90 MHz, CDC13, IMS als interne standaard): δ = 0,18 ppm (9H, s, Si(CH3)3), δ = 1,40 ppm (9H, s, C(CH3)3), δ = 1,99 ppm (1H, dd, J=14,5 Hz en J=3 Hz, Hg(ax)), δ = 2,76 ppm (1H, d, J=14,5 Hz, Hg(eq)), δ = 3,02 ppm (1H, d, J=19,5 Hz, H10(ax)), δ = 3,67 ppm (1H, d, J=19,5 Hz, H10(eq)), δ = 5,33 ppm (1H, m, H7), δ = 5,87 ppm (1H, s, OH), δ = 7,72-7,87 ppm (2H, m, ArH), δ = 8,25-8,39 ppm (2H, m, ArH), δ = 13,33 ppm (1H, s, ArOH), δ = 13,67 ppm (1H, s, ArOH).

Vervolg reaktieschema B

1,25 g (2,6 mmol) (13) werd opgelost in 15 ml trifluorazijnzuur. Het reaktieverloop werd gevolgd met behulp van TLC (ethylacetaat: n-hexaan, 3 :5). Na ongeveer 10 minuten was de uitgangsstof omgezet en werd de oplossing uitgestort in 200 ml water en geextraheerd met 3 maal 75 ml chloroform. Na drogen op watervrij natriumsulfaat en indampen werd verbinding 13a gezuiverd via kolomchromatografie (loopmiddel ethylacetaat: n-hexaan, 3 : 5). De opbrengst (oranje product, (13a)) was 0,89 g (81%). Smeltpunt 208-210°C.

^-NMR (400 MHz, CDC13, TMS als interne standaard): δ = 0,20 ppm (9H, s, Si(CH3)3), 5 = 2,24 ppm (1H, dd, J=14,5 Hz en J=5,2 Hz, H8(ax)), δ = 2,65 ppm (1H, dt, J=14,5 Hz, J=2,3 Hz en J=2,2 Hz, H8(eq)), δ = 2,97 ppm (1H, d, J=18,8 Hz, H10(ax)), δ = 3,48 ppm (1H, dd, J=18,5 Hz en J=l,6 Hz, H10(eq)), δ = 3,49 ppm (1H, OH7), δ = 3,75 ppm (1H, br s, OHc,), δ = 5,24 ppm (1H, br s, H7), δ = 7,82-8,32 ppm (4H, m, ArH), δ = 13,27 ppm (1H, s, ArOH), δ = 13,57 ppm (1H, s, ArOH).

2,75 ml Trimethylsilyltriflaat (14,4 mmol) werd toegevoegd aan een suspensie van 3,55 gr 14 (6,6 mmol) en 20 g 4A moleculaire zeef in een mengsel van 125 ml dichloormethaan en 430 ml diethylether (beide gedestilleerd over resp. CaH2 en Natrium) bij -25°C en onder argon atmosfeer. De oplossing werd gedurende 1 uur geroerd bij 0°C tot de oplossing helder was geworden. Vervolgens werd de oplossing afgekoeld tot -20°C en werd 2,25 g (5,3 mmol) 13a opgelost in 250 ml dichloormethaan toegevoegd. Het reaktiemengsel werd gedurende het toevoegen op -20°C gehouden en vervolgens gedurende 3 uur bij -20°C geroerd. Het reaktieverloop werd m.b.v. TLC (loopmiddel ethylacetaat : benzeen, 1 : 4) gevolgd. Nadat alle uitgangsstof was omgezet werd het reaktiemengsel uitgestort in een oplossing van 1000 ml verzadigde natriumbicarbonaat die krachtig werd geroerd. De organische laag werd gescheiden en vervolgens gewassen met 1000 ml water en 1000 ml van een verzadigde NaCl oplossing. Na drogen op natriumsulfaat en indampen werden de verbindingen 15a en 15b gescheiden m.b.v. kolomchromatografie (loopmiddel ethylacetaat: tolueen, 1 : 16). Na indampen van het loopmiddel en behandelen met een geringe hoeveelheid n-hexaan kon 1,06 g (25%) van 15a geïsoleerd worden. Via een tweede kolomscheiding (loopmiddel etylacetaat: benzeen, 1:6) kon 0,64 g (15%) van 15b geïsoleerd worden.

Verbinding 15a:

Smeltpunt 157-159°C, [a20D] = -18,1° (c=0,105 in dioxaan),1H-NMR (400 MHz, CDC13, TMS als interne standaard): δ = 0,20 ppm (9H, s, Si(CH3)3), δ = 1,31 ppm (3H, d, J=6,5 Hz, 6’-Me), δ = 2,03-2,19 ppm (2H, m, 2-Η2·), δ = 2,33 ppm (1H, dd, J= 14,5 Hz and J= 4,8 Hz,H8(ax)), δ = 2,64 ppm (1H, br d,J=14,5 Hz, H8(eq)), δ = 3,02 ppm (1H, d, J=19 Hz, H10(ax)), δ = 3,57 ppm (1H, d, J=19 Hz, H10(eq)), δ = 3,76 ppm (1H, br s, 9-OH), δ = 4,48-4,58 ppm (2H, m, Η3· en Η5·), δ = 5,17 ppm (1H, m, H7), δ = 5,44 ppm (1H, br s, H4.), δ = 5,68 ppm (1H, m, Hr), δ = 6,51 ppm (1H, br d, J=7,5 Hz, NH), δ = 7,76-7,83 ppm (2H, m, ArH), δ = 8,22-8,36 ppm (6H, m, ArH), δ = 13,29 ppm (1H, s, ArOH), δ = 13,59 ppm (lH,s,ArH).

Verbinding 15b:

Smeltpunt 160-162°C, [cc20D] = -310,7° (c=0,112 indioxaan), XH-NMR (400 MHz, CDC13, TMS als interne standaard): δ = 0,22 ppm (9H, s, Si(CH3)3), δ = 1,27 ppm (3H, d, J=6,5 Hz, 6’-Me), δ = 1,92-2,18 ppm (3H, m,, 2-H2. en H8(ax)), δ = 2,90 ppm (1H, m, H8(eq)), δ = 3,10 ppm (1H, d, J=19 Hz, H10(ax)), δ = 3,70 ppm (1H, d, J=19 Hz, H10(eq)), δ = 4,21 ppm (1H, s, 9-OH), δ - 4,59 ppm (1H, m, Η3·), δ = 4,78 ppm (1H, q, J=6,5 Hz, %), δ = 5,44 ppm (1H, br s, H7), δ = 5,54 ppm (1H, m, H4>), δ = 5,58 ppm (1H, br d, J=3 Hz, Hr), δ = 6,36 ppm (1H, br d, J=7,5 Hz, NH), δ = 7,85-7,89 ppm (2H, m, ArH), δ = 8,25-8,41 ppm (6H, m, ArH), δ = 13,35 ppm (1H, s, ArOH), δ = 13,82 ppm (1H, s, ArH).

6,5 ml van een 0,1 M NaOH oplossing werd toegevoegd aan een roerende oplossing van 0,5 g (0,63 mmol) 15a in 4 ml dichloormethaan en 260 ml methanol bij 0°C en onder argon atmosfeer. De diep paarse oplossing werd gedurende 5 minuten bij 0°C geroerd en het verloop van de reaktie werd gevolgd met behulp van TLC (dichloormethaan : aceton, 9 : 1). Na afloop van de reaktie werden enkele druppels ijsazijn toegevoegd tot de oplossing oranje kleurde. Vervolgens werd aan de oplossing 400 ml ethylacetaat en 400 ml van een verzadigde NaCl oplossing toegevoegd. De organische laag werd nog 2 maal met 130 ml van een verzadigde NaCl oplossing geextraheerd en gedroogd op natriumsulfaat. Na indampen werd het oranje residu gezuiverd m.b.v. kolomchromato-grafie (loopmiddel dichloormethaan: aceton, 9:1). De opbrengst was 0,31 g (76%).

Verbinding 16a: Smeltpunt 140-142°C, [a20D] = +237° (c=0,076 in dioxaan), 1H-NMR (400 MHz, CDC13, IMS als interne standaard) : δ = 0,20 ppm (9H, s, Si(CH3)3), δ = 1,34 ppm (3H, d, J=6,5 Hz, 6’-Me), δ = 1,79-2,03 ppm (2H, m, 2-H2>), δ = 2,01 ppm (1H, br s, 4’-OH), δ = 2,28 ppm (1H, dd, J=14,7 Hz en J=4,5 Hz, H8(ax)), δ = 2,62 ppm (1H, m, H8(eq)), δ = 3,01 ppm (1H, d, J=19 Hz, H10(ax)), δ = 3,60 ppm (1H, dd, J=19 Hz and J=l,5 Hz„ H10(eq)), δ = 3,64-3,69 ppm (1H, m, H4.), δ = 3,92 ppm (1H, s, 9-OH), δ = 4,19-4,26 ppm (1H, m, H3<), δ = 4,32-4,38 ppm (1H, q, J=6,5 Hz, H50, δ = 5,19 ppm (1H, dd, J=4 Hz en J=2 Hz, H7), δ = 5,53 ppm (1H, br d, J=4 Hz, Hr), δ = 6,65 ppm (1H, br d, J=8 Hz, NH), δ = 7,82-7,86 ppm (2H, m, ArH), δ = 8,33-8,38 ppm (2H, m, ArH), δ = 13,35 ppm (1H, s, ArOH), δ = 13,63 ppm (1H, s, ArH).

16a 17a 0,244 g van verbinding 16a werd opgelost in 25 ml THF. Hieraan werd 0,178 tetrabutylammoniumfluoride toegevoegd. Het reaktiemengsel werd gedurende 5 minuten geroerd. Na afloop werd aan de oplossing 100 ml water en 100 ml chloroform toegevoegd. De waterlaag werd nog 2 maal geextraheerd met 100 ml chloroform. De organische fractie werd gedroogd op watervrij natriumsulfaat en ingedampt. Na kolomscheiding (dichloormethaan: aceton, 7 :3) kon 0,13 g van verbinding 17a geïsoleerd worden (60%).

Verbinding 17a:

Smeltpunt 146-148°C, [a20D] = +289° (c=0,076 in dioxaan), !H-NMR (400 MHz, CDC13, TMS als interne standaard) : δ = 1,31 ppm (3H, d, J=6,5 Hz, 6’-Me), δ = 1,80-2,08 ppm (3H, m, 2-H2. en H8(ax)), δ = 2,18 ppm (1H, br s, 4’-OH), δ = 2,57 ppm (1H, s, C=C-H), δ = 2,87 ppm (1H, m, Hg(eq)), δ = 3,10 ppm (1H, d, J=19 Hz, H10(ax)), δ = 3,71 ppm (1H, d, J=19 Hz, H10(eq)), δ = 3,62 ppm (1H, m, H4O, δ = 4,30 ppm (1H, s, 9-OH), δ = 4,31 ppm (1H, m, H3»), δ = 4,59 ppm (1H, m, Η5·), δ = 5,41 ppm (1H, m, H7), δ = 5,51 ppm (1H, br s, Hj»), δ = 6,64 ppm (1H, br d, J=8 Hz, NH), δ = 7,83-7,88 ppm (2H, m, ArH), δ = 8,35-8,40 ppm (2H, m, ArH), δ = 13,41 ppm (1H, s, AiOH), δ = 13,79 ppm (1H, s, ArH).

16a 18a 0,16 g (0,23 mmol) van verbinding 16a werd opgelost in 3 ml aceton. Hieraan werd toegevoegd 30 ml 0,1 M NaOH en het reaktiemengsel werd gedurende 30 minuten bij kamertemperatuur en onder argon atmosfeer geroerd. De reaktie werd gevolgd m.b.v. TLC (Water : Azijnzuur : Methanol : Chloroform, 12 : 26 : 54 : 160). Na afloop werd de oplossing aangezuurd tot pH 9 met 1 M HC1. De geneutraliseerde oplossing werd meerdere malen met 75 ml chloroform geextraheerd tot de organische laag niet meer kleurde. De gecombineerde organische lagen werden gewassen met water en gedroogd op natriumsulfaat Na filtreren en indampen werd het residu opgelost in zo weinig mogelijk van een oplossing van chloroform en methanol (9/1). Na toevoegen van 0,4 ml 0,6 M HC1 in methanol en 50 ml diethylether precipiteerde het HC1 zout. Na affiltreren kon 0,084 g (70%) van verbinding 18a geïsoleerd worden.

Verbinding 18a: Smeltpunt 177-179°C, [a20D] = +189° (c=0,037 in dioxaan).

15b 16b 11,8 ml van een 0,1 M NaOH oplossing werd toegevoegd aan een roerende oplossing van 0,9 g (1,13 mmol) 15b in 7 ml dichloormethaan en 475 ml methanol bij 0°C en onder argon atmosfeer. De diep paarse oplossing werd gedurende 20 minuten bij 0°C geroerd en het verloop van de reaktie werd gevolgd met behulp van TLC (dichloormethaan : aceton, 9 : 1). Na afloop van de reaktie werden enkele druppels ijsazijn toegevoegd tot de oplossing oranje kleurde. Vervolgens werd aan de oplossing 750 ml ethylacetaat en 750 ml van een verzadigde NaCl oplossing toegevoegd. De organische laag werd nog 2 maal met 190 ml van een verzadigde NaCl oplossing geextraheerd en gedroogd op natriumsulfaat. Na indampen werd het oranje residu gezuiverd m.b.v, kolomchromato-grafie (loopmiddel dichloormethaan: aceton, 9:1). De opbrengst was 0,58 g (80%).

Verbinding 16b:

Smeltpunt 138-140°C, [a20D] = -375° (c=0,0885 in dioxaan).

16b 18b 0,250 g (0,39 mmol) van verbinding Jt6b werd opgelost in 5 ml aceton. Hieraan werd toegevoegd 50 ml 0,1 M NaOH en het reaktiemengsel werd gedurende 30 minuten bij kamertemperatuur en onder argon atmosfeer geroerd, De reaktie werd gevolgd m.b.v. TLC (Water : Azijnzuur : Methanol : Chloroform, 12 : 26 : 54 : 160). Na afloop werd de oplossing aangezuurd tot pH 9 met 1 M HC1. De geneutraliseerde oplossing werd meerdere malen met 100 ml chloroform geextraheerd tot de organische laag niet meer kleurde. De gecombineerde organische lagen werden gewassen met water en gedroogd op natriumsulfaat. Na filtreren en indampen werd het residu opgelost in zo weinig mogelijk van een oplossing van chloroform en methanol (9/1). Na toevoegen van 0,7 ml 0,6 M HC1 in methanol en 100 ml diethylether precipiteerde het HC1 zout Na affiltreren kon 0,140 g (70%) van verbinding 18b geïsoleerd worden.

Verbinding 18b:

Smeltpunt 160-162°C, [oc20D] = -280° (c=0,0275 in dioxaan).

p-NCBz = para-nitrobenzyloxycarbonyl. TMS = trimethylsilyl. TFA = trifluorazijnzuur.

20,9 g (0,11 mol) naftazarine (8) en 28,4 g l-methoxy-l,3-cyclohexadieen (19) (technisch, 70%, 0,177 mol) werden gerefluxed in 330 ml dichloormethaan (temperatuur oliebad 50°C). Het reaktieverloop werd gevolgd met behulp van TLC (ethylacetaat: n-hexaan, 2: 5). Na indampen werd aan het residu 330 ml penataan toegevoegd en werd de oplossing gedurende 5 minuten geroerd. De oplossing werd afgekoeld tot 0°C en afgefiltreerd. Het filtraat werd gespoeld met 2 maal 50 ml petroleumether. De opbrengst van het geel/bruine product was 30,0 g (91%).De kristallen werden opgenomen in een oplossing van 22,0 g (0,55 mol) natronloog in 825 ml water. Gedurende een half uur werd lucht door de oplossing geblazen terwijl de oplossing werd geroerd. De kleur van de oplossing veranderde van groen naar blauw. Het reaktieverloop werd gevolgd met behulp van TLC (ethylacetaat: n-hexaan, 2 : 5). Na afloop werd aan de oplossing 46,2 ml geconcentreerd HC1 (37%) toegevoegd. Het product precipiteerde als een rode vaste stof die werd afgefiltreerd. Deze verbinding werd gedroogd aan een filmverdamper (2 mm Hg) en gedurende minimaal 1 nacht in een vacuumexcicator (boven P2O5). De opbrengst van de rode verbinding (20) was 27,0 g (91%). De overall opbrengst was 83%. Smeltpunt 239-241°C.

^-NMR (90 MHz, CDC13, TMS als interne standaard) : 5 = 1,39-1,92 ppm (4H, m, CH2-CH2), δ = 3,69 ppm (3H, s, OMe), δ = 4,53 ppm (1H, m, H4), 5 = 6,40 ppm (1H, dd, J=5,6 Hz en J=8 Hz), δ = 6,64 ppm (1H, dd, J=8 Hz en J=l,5 Hz), δ = 7,12 ppm (2H, s, ArH), δ = 12,60 ppm (1H, s, ArOH), δ = 13,06 ppm (1H, s, ArOH).

(4-nitrofenvI)-methvI-1.4,9,10-tetrahvdro-8-hvdroxv-l-methoxv-9.10-dioxo-1.4-etha-noantraceen-5-vI-carbonaat (21).

12,0 g (0,04 mol) van (20) werd opgelost in 300 ml over natrium gedestilleerde THR Hieraan werden toegevoegd 12,6 g (0,062 mol) para-nitrobenzyloxycarbonylchloride en 1,7 g (0,04 mol) calciumhydride. De oplossing werd gedurende 6 uur getrild m.b.v. een ultrasone trilstaaf bij 0°C. Vervolgens werd de oplossing gedurende 24 uur getrild in een > ultrasoon trilbad. De kleur van de oplossing veranderde van rood naar geel. Het reaktieverloop werd gevolgd met behulp van TLC (ethylacetaat : n-hexaan, 2 : 5). Na afloop werd het reaktiemengsel uitgestort in 500 ml van een 5% NaH2P04-oplossing en geextraheerd met 2 maal 500 ml chloroform. De organische fase werd gedroogd op watervrij natriumsulfaat en ingedampt. Het ruwe reaktiemengsel werd gezuiverd met ) behulp van kolomchromatografie (loopmiddel ethylacetaat: tolueen : n-hexaan, 1:5:5) en na indampen geroerd in 200 ml diethylether. De eerste gele fractie was het goede product (9,6 g, 50%). Smeltpunt 136-137°C.

^-NMR (90 MHz, CDC13, TMS als interne standaard) : δ = 1,33-1,89 ppm (4H, m, i CH2-CH2), δ = 3,66 ppm (3H, s, OMe), δ = 4,30-4,47 ppm (1H, m, H4), δ = 5,44 ppm (2H, s, CH2), δ = 6,34 ppm (1H, dd, J=5,6 Hz en J=8 Hz, H3), δ = 6,61 ppm (1H, dd, J=8 Hz-en J=l,5 Hz, Ha), δ = 7,26 ppm (2H, s, ArH), δ = 7,54 ppm (2H, AB, J=8,5 Hz, ArH), δ = 8,26 ppm (2H, AB, J=8,75 Hz, ArH), δ = 12,72 ppm (1H, s, ArOH), ) l,4,6a.9.10,10a-hexahydro-12-hydroxy-10-tert-butoxv-l-methoxv-6,8.11-(7H)-trioxo-l,4-ethanonaftaceen-5-vI-(4-nitrofenvI)-methvIcarbonaat (23).

)

7,5 g (0,0157 mol) (21) werd opgelost in 175 ml over Na gedestilleerde THF. Vervolgens werd voor een argon atmosfeer gezorgd en werd 6,75 g (0,0315 mol) 1-ierf-butoxy- > trimethylsilyloxybutadieen (10) toegevoegd. Er werd gedurende 2 dagen geroerd bij kamertemperatuur. Het reaktieverloop werd gevolgd met behulp van TLC (ethylacetaat: n-hexaan, 2 : 5). De kleur van het reaktiemengsel veranderde van geel/oranje naar geel/groen. Na afloop werd de oplossing ingedampt en werd het residu opgelost in 150 ml koude THF (0°C). Aan de oplossing werd 8,75 ml 1 M HC1 toegevoegd en de oplossing werd geroerd gedurende 15 minuten bij 0°C. Het reaktieverloop werd gevolgd met behulp van TLC (ethylacetaat : n-hexaan, 3 : 5). Na afloop werd 175 ml water toegevoegd en werd de waterige oplossing geextraheerd met 2 maal 125 ml dichloormethaan. De verzamelde organische fracties werden gedroogd op natriumsulfaat en ingedampt. Het residu werd gedurende 1 nacht geroerd in 300 ml diethylether. Na afkoelen tot 0°C werden de gele kristallen afgefiltreerd (7,8 g, 80%). Smeltpunt 147-150°C.

^ï-NMR (90 MHz, CDC13, TMS als interne standaard) : (Mengsel endo en exo isomeer) 6 = 0,74 ppm (9H, s, C(CH3)3), δ = 1,43-1,93 ppm (4H, m, CH2-CH2), δ = 2,08-2,62 ppm (3H, H7(ax), H^eq) en H^ax)), δ = 3,23-3,70 ppm (3H, H10a, H^ en H7(eq)), δ = 3,74 ppm (3H, s, OMe), δ = 4,11-4,26 ppm (1H, m, H10), δ = 4,43-4,56 ppm (1H, H4), δ = 5,42 ppm (2H, OÏ2), δ = 6,26-6,80 ppm (2Η, H-C=C-H), δ = 7,56-8,33 ppm (4H, ArH), δ = 13,19 ppm (lH,s,ArOH).

1,4,6a,9,10,10a-hexahvdro-5,12-dihvdroxY-10-fe?t-butoxv-l-methoxv-l,4-ethanonaf-taceen-6,8,ll-(7H)-trion (24).

5,0 g (0,0081 mol) van (23) werd opgelost in 20 ml THF. Nadat de oplossing was afgekoeld tot 0°C werd 20 ml ijsazijn en 5,2 g (0,08 mol) zink toegevoegd. Het reactimengsel werd gedurende 15 minuten bij 0°C geroerd. Het reaktieverloop werd gevolgd met behulp van TLC (ethylacetaat : n-hexaan ,3:5). Na 15 minuten werd nogmaals 5,2 g Zn toegevoegd. Na afloop werd het reaktiemengsel uitgestort in 150 ml dichloormethaan. Vervolgens werd het azijnzuur geneutraliseerd met een verzadigde natriumbicarbonaat oplossing totdat de pH van de waterlaag was gestegen tot 6. De lagen werden gescheiden en de waterlaag werd geextraheerd met 2 maal 150 ml dichloormethaan. De verzamelde organische fracties werden gewassen met een verzadigde

NaCl oplossing (250 nol). Na drogen (watervrij natriumsulfaat) werd de oplossing ingedampt en werd het residu gedurende 1 nacht geroerd in 500 ml diethylether. Na afkoelen tot 0°C werden de licht gele kristallen (3,45 g, 97%) afgefiltreerd. Smeltpunt 134-136°C.

1H-NMR (90 MHz, CDCI3, TMS als interne standaard): (Mengsel endo en exo isomeer) δ = 0,71 ppm (9H, s, C(CH3)3), δ = 1,38-1,89 ppm (4H, m, C^-CBj), δ = 2,22-2,64 ppm (3H, H7(ax)+H9(eq)+H9(ax)), δ = 3,33-3,75 ppm (3H, H10a+H6a+H7(eq)), δ = 3,69 ppm (3H, OMe), δ = 4,34-4,62 ppm (2H, H4+H10), δ = 6,04-6,75 ppm (2H, H-C=C-H), δ = 11,86 ppm (1H, ArOH), δ = 12,92 ppm (1H, ArOH).

cis-8-trimethvlsiIvlethynvI-7,8.9,10-tetrahvdro-6,8,ll-trihvdroxy-10-rerf-butoxy-l-methoxv-naftaceen-5,12-dion (26).

5,7 g (0,058 mol) trimethylsilylacetyleen werd opgelost in 750 ml over natrium gedestilleerde THF en onder argon atmosfeer gebracht. Vervolgens werd de oplossing afgekoeld tot -78°C en werd 37,9 ml 1,5 M BuLi (0,057 mol) toegedruppeld. Het reaktiemengsel werd gedurende 30 minuten geroerd bij -78°C. Aan het reaktiemengsel werd 5,0 g (0,0114 mol) (24) toegevoegd. Het reaktieverloop werd gevolgd met behulp van TLC (ethylacetaat: n-hexaan, 2 : 5). De kleur van oplossing veranderde van groen naar groen/geel. Na ± 2 uur liet men het reaktiemengsel langzaam op kamertemperatuur komen en werd 250 ml van een 10% NH4CI oplossing toegevoegd. Na 15 minuten geroerd te hebben werd de oplossing verdund met 500 ml water en geextraheerd met 2 maal 500 •Vtl r»Ul TlA < fA WWAWHaI AA Λ„Λ·Λ -* A AM A flIA A^< A n V*,A««A AM 4 Μ A.A Μ Am Ua^ OTAA4 miAM/4 opgelost in 100 ml ijsazijn. Aan de oplossing werd 5,5 g (0,012 mol) loodtetraacetaat toegevoegd en de oplossing werd gedurende 1 nacht bij kamertemperatuur geroerd. Het reaktieverloop werd gevolgd met behulp van TLC (ethylacetaat : n-hexaan, 2 : 5). De kleur van de oplossing veranderde van geel/rood naar rood. Na afloop werd het reaktiemengsel uitgestort in 400 ml water. De rode vaste stof werd afgefiltreerd en het Altraat werd opgelost in chloroform. De organische fractie werd gewassen met een verzadigde natriumbicarbonaat oplossing en gedroogd op watervrij natriumsulfaat. Het ruwe reaktiemengsel werd opgelost in 50 ml o-xyleen. De oplossing werd gedurende 3 uur gerefluxed (temperatuur oliebad 150°C). Het reaktieverloop werd gevolgd met behulp van TLC (ethylacetaat : n-hexaan, 3 : 5) en de kleur van de oplossing veranderde van rood naar oranje. Na afloop werd de oplossing ingedampt en het product werd omgekristalliseerd in diethylether. De opbrengst (oranje kristallen) was 4,2 g (74%). Smeltpunt 247-250°C.

^H-NMR (90 MHz, CDC13, TMS als interne standaard): δ = 0,23 ppm (9H, s, Si(CH3)3), δ = 1,39 ppm (9H, s, C(CH3)3), δ = 1,99 ppm (1H, dd, J=15 Hz, J=3 Hz, H^ax)), δ = 2,72 ppm (1H, d, J=15 Hz, H^eq)), δ = 2,98 ppm (1H, d, J=20 Hz, H7(ax)), δ = 3,64 ppm (1H, d, J=20 Hz, H7(eq)), δ = 4,05 ppm (3H, s, OCH3), δ = 5,35 ppm (1H, m, H10), δ = 5,87 ppm (1H, s, OH), δ = 7,23-8,05 ppm (3H, m, ArH), δ = 12,99 ppm (1H, s, ArOH), δ = 13,8 ppm (1H, s, ArOH).

cis-8-trimethvIsilyIethvnvI-7,8,9,10-tetrahvdro-6,8,10.11-tetrahvdroxy-l-methoxynaf-taceen-5.12-dion (27).

0,81 g (1,59 mol) (26) werd opgelost in 15 ml trifluorazijnzuur. Het reaktieverloop werd •gevolgd met behulp van TLC (ethylacetaat: n-hexaan, 3 : 5). Na ongeveer 10 minuten was de uitgangsstof omgezet en werd het reaktiemengsel uitgestort in 250 ml water en geextraheerd met CHCl3tot de waterlaag kleurloos was. Verbinding 27 werd gezuiverd m.b.v. kolomchromatografie (loopmiddel 3% methanol in chloroform). De opbrengst (oranje product) was 0,55 g (76%). Smeltpunt 235-237°C.

1H-NMR (400 MHz, CDC13, TMS als interne standaard): δ = 0,19 ppm (9H, s, Si(CH3)3), δ = 2,26 ppm (1H, dd, J=14,5 Hz en J=5 Hz, H^ax)), δ = 2,76 ppm (1H, dt, J=14,5 Hz, J=2,0 Hz en J= 2,5 Hz), H^eq)), δ = 2,96 ppm (1H, d, J=18,6 Hz, H7(ax)), δ = 3,48 ppm (1H, d, J=18,6 Hz en J=2,0 Hz, H7(eq)), δ = 3,54 (1H, s, 10-OH), δ = 3,68 ppm (1H, d, J=4,0 Hz, 7-OH), δ = 4,09 (3H, s, OCH3), δ = 5,28 ppm (1H, m, H7), δ = 7,38-8,05 ppm (3H, ArH), δ = 13,29 ppm (1Η, s, ArOH), δ = 14,03 ppm (1H, s, ArOH).

1,0 ml Trimethylsilyltriflaat werd toegevoegd aan een suspensie van 1,22 gr 14 (2,26 mmol) en 16 g 4A moleculaire zeef in een mengsel van 150 ml dichloormethaan en 50 ml diethylether (beide gedestilleerd over resp. CaH2 en Natrium) bij -25°C en onder argon atmosfeer. De oplossing werd gedurende 1 uur geroerd bij 0°C tot de oplossing helder was geworden. Vervolgens werd de oplossing afgekoeld tot -25°C en werd 0,8 g (1,8 mmol) 27 opgelost in 200 ml dichloormethaan toegevoegd. Het reaktiemengsel werd gedurende het toevoegen op -20°C gehouden en vervolgens gedurende 3 uur bij -20°C geroerd. Het reaktieverloop werd m.b.v. TLC (loopmiddel ethylacetaat: benzeen, 1: 4) gevolgd. Nadat alle uitgangsstof was omgezet werd het reaktiemengsel uitgestort in een oplossing van 800 ml verzadigde natriumbicarbonaat die krachtig werd geroerd. De organische laag werd gescheiden en vervolgens gewassen met 500 ml water en 500 ml van een verzadigde NaCl oplossing. Na drogen op natriumsulfaat en indampen werden de verbindingen 28a en 28b gescheiden m.b.v. kolomchromatografie (loopmiddel 2% aceton en 0,2% ijsaijn in dichloormethaan). Na indampen van het loopmiddel en behandelen met een geringe hoeveelheid n-hexaan kon 0,12 g (8%) van 28a en 0,17 g (12%) van 28b geïsoleerd worden.

Verbinding 28a:

Smeltpunt 161-163°C, [a20D] = +6° (c=0,5 in dioxaan), 1H-NMR (400 MHz, CDC13, IMS als interne standaard): δ = 0,20 ppm (9H, s, Si(CH3)3), δ = 1,29 ppm (3H, d, J=6,5 Hz, 6’-Me), δ = 2,04 ppm (2H, dd, J=9 Hz en J= 2,3 Hz, 2-Η2·), δ = 2,33 ppm (1H, dd, J=14,7 Hz en J=4,9 Hz, H9(ax)), δ = 2,61 ppm (1H, m, H^eq)), δ = 3,01 ppm (1H, d, J=18,7 Hz, H7(ax)), δ = 3,57 ppm (1H, dd, J=18,7 Hz en J=l,2 Hz, H7(eq)), δ = 3,70 ppm (1H, s, 8-OH), δ = 4,07 ppm (3H, s, OMe), δ = 4,44-4,55 ppm (2H, m, H3> en H5»), δ = 5,23 ppm (1H, br s, H10), δ = 5,46 ppm (1H, m, H4>), δ = 5,71 ppm (1H, br s, Hr), δ = 6,22 ppm (1H, br d, J=7,5 Hz, NH), δ = 7,37-8,04 ppm (3H, m, ArH), δ = 8,27-8,36 ppm (4H, m, ArH), δ = 13,29 ppm (1H, s, ΑιΟΗ), δ = 14,07 ppm (1H, s, ArH).

Verbinding 28b:

Smeltpunt 174-176°C, [a20D] = -347,7° (c=0,65 in dioxaan), JH-NMR (400 MHz, CDC13, TMS als interne standaard): δ = 0,22 ppm (9H, s, Si(CH3)3), δ = 1,25 ppm (3H, d, J=6,5 Hz, 6’-Me), δ = 1,90-2,17 ppm (3H, m, , 2-H2· en H^ax)), δ = 2,86-2,92 ppm (1H, m, H^eq)), δ = 3,08 ppm (1H, d, J=19 Hz, H7(ax)), δ = 3,71 ppm (1H, dd, J=19 Hz en J=l,3 Hz, H7(eq)), δ = 4,11 ppm (3H, s, OMe), δ = 4,23 ppm (1H, s, 8-OH), δ = 4,52-4,57 ppm (1H, m, H30, δ = 4,76-4,84 ppm (1H, m, H50, δ = 5,40 ppm (1H, br s, H10), δ = 5,56 ppm ) (1H, br s, H4.), δ = 5,57 ppm (1H, br s, H^), δ = 6,27 ppm (1H, br d, J=7,5 Hz, NH), δ = 7,79-8,27 ppm (3H, m, ArH), δ = 8,28-8,35 ppm (4H, m, ArH), δ = 13,31 ppm (1H, s, ArOH), δ = 14,23 ppm (1H, s, ArH).

28a 29a 1,2 ml van een 0,1 M NaOH oplossing werd toegevoegd aan een roerende oplossing van 0,09 g (0,11 mmol) 28a in 0,75 ml dichloormethaan en 37 ml methanol bij 0°C en onder argon atmosfeer. De diep paarse oplossing werd gedurende 3 minuten bij 0°C geroerd en het verloop van de reaktie werd gevolgd met behulp van TLC (dichloormethaan : aceton, 9 : 1). Na afloop van de reaktie werden enkele druppels ijsazijn toegevoegd tot de oplossing oranje kleurde. Vervolgens werd aan de oplossing 60 ml ethylacetaat en 60 ml van een verzadigde NaCl oplossing toegevoegd. De organische laag werd nog 2 maal met 25 ml van een verzadigde NaCl oplossing geextraheerd en gedroogd op natriumsulfaat. Na indampen werd het oranje residu gezuiverd m.b.v. kolomchromatografie (loopmiddel chloroform: methanol: ijsazijn, 100:1:0,5). De opbrengst was 0,060 g (82%).

Verbinding 29a: [a20D] = +196° (c=0,07 in dioxaan), ^-NMR (400 MHz, CDC13, IMS als interne standaard): δ = 0,20 ppm (9H, s, Si(CH3)3), δ = 1,33 ppm (3H, d, J=6,5 Hz, 6’-Me), δ = 1,78-2,09 ppm (2H, m, 4’-OH en 2-Η2·), δ = 2,28 ppm (1H, dd, J=14,7 Hz en J=4,5 Hz, HpCax)), δ = 2,60 ppm (1H, m, H^eq)), δ = 2,99 ppm (1H, d, J=19 Hz, H7(ax)), δ = 3,59 ppm (1H, dd, J=19 Hz en J=l,5 Hz, H7(eq)), δ = 3,63-3,67 ppm (1H, m, Η4·), δ = 3,90 ppm (1H, s, 8-OH), δ = 4,08 ppm (3H, s, OMe), δ = 4,20 ppm (1H, m, Η3·), δ = 4,33 ppm (1H, q, J=6,5 Hz, H50, δ = 5,21 ppm (1H, m, H10), δ = 5,54 ppm (1H, br d, J=3,8 Hz, Hr), δ = 6,58 ppm (1H, br d, J=8,5 Hz, NH), δ = 7,38-8,06 ppm (3H, m, ArH), δ = 13,32 ppm (1H, s, ΑιΟΗ), δ = 14,04 ppm (1H, s, ArH).

29a 30a 0,06 g (0,09 mmol) van verbinding 29a werd opgelost in 10 ml 0,1 M NaOH en het reaktiemengsel werd gedurende 30 minuten bij kamertemperatuur en onder argon atmosfeer geroerd. De reaktie werd gevolgd m.b.v. TLC (Water : Azijnzuur : Methanol: Chloroform, 12 : 26 : 54:160). Na afloop werd de oplossing aangezuurd tot pH 9 met 1M HC1. De geneutraliseerde oplossing werd meerdere malen met 25 ml chloroform geextraheerd tot de organische laag niet meer kleurde. De gecombineerde organische lagen werden gewassen met water en gedroogd op natriumsulfaat. Na filtreren en indampen werd het residu opgelost in zo weinig mogelijk van een oplossing van chloroform en methanol (9/1). Na toevoegen van 0,15 ml 0,6 M HC1 in methanol en 25 ml diethylether precipiteerde het HC1 zout. Na affiltreren kon 0,024 g (50%) van verbinding 30a geïsoleerd worden.

Verbinding 30a:

Smeltpunt 227-230°C, [cx20d] = +93° (c=0,0475 in dioxaan).

8 31 9.0 g naftazarine 8 (47 mmol) werd onder argon atmosfeer opgelost in 115 ml over natrium gedestilleerde THF. Hieraan werd 14,2 g (66 mmol) l-tert-butoxy-3-trimethylsily-loxy-l,3-butadieen (10) toegevoegd waarna opnieuw de oplossing onder argon atmosfeer werd gebracht De reaktie werd gevolgd met behulp van TLC (ethylacetaat: n-hexaan 2 : 5). Na 1 uur werd het reaktiemengsel afgekoeld tot 0°C en werd 5,75 ml 1 N HC1 aan de oplossing toegevoegd. Het reaktieverloop werd wederom gevolgd m.b.v. TLC (ethylacetaat: n-hexaan 3 : 5). Na 10 minuten werd 125 ml water toegevoegd en werd de oplossing geextraheerd met 2 maal 225 ml chloroform. De organische fase werd gewassen met 125 ml verzadigde NaCl oplossing en vervolgens gedroogd op watervrij natriumsulfaat. Vervolgens werd na indampen het residu opgelost in 300 ml gedroogde diethylether en gedurende 1 nacht geroerd. Na koelen tot 0°C werd de licht gele vaste stof afgefiltreerd en gewassen met koude diethylether tot het filtraat niet meer verkleurde. De opbrengst van verbinding (31) was 12,1 g (78%). Smeltpunt 180°C.

^-NMR (90 MHz, CDC13, TMS als interne standaard): δ = 0,75 ppm (9H, s, C(CH3)3), δ = 2,37 ppm (1H, dd, J=7,5 Hz en J=15,6 Hz, CH2), δ = 2,58 ppm (2H, d, J=2,5 Hz, 0¾). δ = 3,33-3,73 ppm (3H,m), δ = 4,42-4,50 ppm (1H, m, Hj), δ = 7,25 ppm (1H, AB, J=8,5 Hz, ArH), δ = 7,31 ppm (1H, AB, J= 8,5 Hz, ArH), δ = 12,1 ppm (1H, s, ArOH), δ = 12,30 ppm (1H, s, ArOH).

31 _32 6.0 g (61,4 mmol) trimethylsilylacetyleen werd opgelost in 740 ml over natrium gedestilleerde THF in een 1 liter driehalskolf en onder argon atmosfeer afgekoeld tot -78°C. Aan de oplossing werd 24,1 ml (60,2 mmol) 2,45 M n-butyllithium toegedruppeld. Na 30 minuten roeren bij -78°C werd 4,0 g (12,1 mmol) van verbinding (31) toegevoegd. De reaktie werd gevolgd m.b.v. TLC (ethylacetaat: n-hexaan 3 : 5). Na drie uur roeren bij -78°C werd 280 ml 10% ammoniumchloride oplossing toegevoegd en vervolgens 500 ml water. Het mengsel werd geextraheerd met 2 maal 500 ml chloroform en de verzamelde organische fracties werden gewassen met 500 ml van een verzadigde NaCl oplossing. Na indampen werd het residu opgelost in 100 ml ijsazijn en hieraan werd 5,3 g (12,0 mmol) loodtetraacetaat toegevoegd. Na een nacht roeren werd het reaktiemengsel uitgestort in 400 ml water en werd de rode vaste stof afgefiltreerd. Na spoelen met water werd de vaste stof met zo weinig mogelijk chloroform van het filter gespoeld en werd de organische fractie geextraheerd met achtereenvolgens 100 ml van een verzadigde NaHC03 oplossing, 2 maal 100 ml water en 200 ml van een verzadigde NaCl oplossing. De organische fase werd gedroogd op watervrij natriumsulfaat en ingedampt De verbinding werd m.b.v. kolomchromatografie (eerste rode fractie, loopmiddel chloroform) gezuiverd. Na indampen werd het produkt een nacht geroerd in 100 ml watervrij diethylether waarna de rode vaste stof (32) afgefiltreerd kon worden (2,6 g, 50%). Smeltpunt 191-193°C.

^I-NMR (90 MHz, CDC13, TMS als interne standaard) : δ = 0,18 ppm (9H, s, Si(CH3)3), δ = 1,33 ppm (9H, s, C(CH3)3), δ = 1,87 ppm (1H, dd, J=3,75 Hz en J=14,5 Hz, H2(ax)), δ = 2,64 ppm (1H, d, J=14,5 Hz, H2(eq)), δ = 2,77 ppm (1H, d, J=20 Hz, H4(ax)), δ = 3,47 ppm (1H, d, J=20 Hz, H4(eq)), δ = 5,19 ppm (1H, m, H^, δ = 5,57 ppm (1H, s, OH), δ = 7,18 ppm (2H, s, ArH), δ = 12,56 ppm (1H, s, ArOH), δ = 12,69 ppm (1H, s, ArOH).

32 33 1,0 g (3,8 mmol) (32) werd opgelost in 20 ml trifluorazijnzuur en 30 ml dichloormethaan. Het reaktieverloop werd gevolgd met behulp van TLC (ethylacetaat: n-hexaan, 3 : 5). Na ongeveer 10 minuten was de uitgangsstof omgezet en werd 100 ml water aan de oplossing toegevoegd. De organische fase werd gewassen met 1 maal 100 ml van een verzadigde natriumbicarbonaat oplossing, 100 ml water en 100 ml van een verzadigde NaCl-oplossing. Na omkrsitalliseren in diisopropylether kon 0,6 g (70%) van verbinding (33).

^-NMR (90 MHz, CDC13, TMS als interne standaard) : δ = 0,18 ppm (9H, s, Si(CH3)3), 5 = 2,17 ppm (1H, dd, J=15 Hz en J=5 Hz, H2(ax)), δ = 2,57 ppm (1H, d, J=15 Hz, H2(eq)), δ = 2,83 ppm (1H, d, J=18,75 Hz, H4(ax», δ = 3,21 ppm (1H, s, 3-OH), δ = 3,31 ppm (1H, d, J=18,75 Hz, H^eq)), δ = 3,68 ppm (1H, d, J=6,25 Hz, 1-OH), δ = 5,08 ppm (1H, m, Hi), δ = 7,22 ppm (2H, s, ArH), δ = 12,47 ppm (2Η, s, ArOH).

32 34 1,0 g (2,3 mmol) (32) werd opgelost in 50 ml THF. Hieraan werd toegevoegd 25 ml 3-Μ zwavelzuur en 0,5 g kwik(II)oxide. De oplossing werd gedurende 4 uur geroerd bij kamertemperatuur. Na afloop werd het reaktiemengsel uitgestort in 120 ml 1 M HC1 en geextraheerd met chloroform (3 maal 100 ml). De organische fase werd gedroogd op watervrij natriumsulfaat en ingedampt. Vervolgens werd het ruwe produkt opgelost in 60 ml chloroform en hieraan werd 40 ml trifluorazijnzuur toegevoegd. Na 15 minuten roren bij kamertemperatuur werd 100 ml water aan de oplossing toegevoegd. De organische fase werd gewassen met 1 maal 100 ml van een verzadigde natriumbicarbonaat oplossing, 100 ml water en 100 ml van een verzadigde NaCl-oplossing. Het product werd gezuiverd met behulp van kolomchromatografie (kolom 15 cm, 2,5 cm φ, loopmiddel ethylacetaat : tolueen : n-hexaan, 1 : 5 : 5). De opbrengst (34) was 0,45 g (60%) na omkristalliseren in diisopropylether/dichloormethaan. Smeltpunt 180-181°C.

1H-NMR (90 MHz, CDC13, IMS als interne standaard): δ = 2,06 ppm (1H, dd, J=14,5 Hz en J=5 Hz, H2(ax)), δ = 2,32 ppm (1H, dt, J=14,5 Hz, H2(eq)), δ = 2,40 ppm (3H, s, CH3) δ = 2,77 ppm (1H, d, J=19,5 Hz en J=l,2 Hz H4(ax)), δ = 3,08 ppm (1H, d, J=19,5 Hz en J=2,0 Hz, H^eq)), δ = 3,73 ppm (1H, d, J=6,5 Hz, 1-OH), δ = 4,46 ppm (1H, s, 3-OH), δ = 5,17 ppm (1H, m, H^, δ = 7,24 ppm (2H, s, ArH), δ = 12,47 ppm (2H, s, ArOH).

32 35 5,0 g (11,7 mmol) van verbinding (32) en 3,0 g (14,0 mmol) para-nitrobenzyloxycarbonyl-chloride werden opgelost in 150 ml over natrium gedestilleerde THF in een trilvat behorende bij een ultrasoon trilstaaf. Aan deze oplossing werd 0,5 g (5,71 mmol) fijngemaakte CaH2 toegevoegd en de oplossing werd afgekoeld tot 0°C. Gedurende 4 uur werd het reaktiemengsel getrild m.b.v. een ultrasone trilstaaf. Vervolgens werd de oplossing overgebracht in een 250 ml kolf die werd geplaatst in een ultrasoon trilbad en gedurende 24 uur bij 60°C werd gesonificeerd. Het reaktieverloop kan gevolgd worden m.b.v. TLC (ethylacetaat: n-hexaan 2 : 5), de kleur van de oplossing verandert van rood naar geel. Na afloop werd het reaktiemengsel uitgestort in 500 ml van een 5% NaH2P04-oplossing en geextraheerd met 500 ml chloroform. De organische fase werd gedroogd op watervrij natriumsulfaat en ingedampt. Het ruwe reaktiemengsel werd gezuiverd met behulp van kolomchromatografie (loopmiddel ethylacetaat: n-hexaan 1: 4) en na indampen geroerd in 50 ml diisopropylether. De opbrengst (35) was 5,0 g (71%). Smeltpunt 164°C.

^-NMR (400 MHz, CDC13, TMS als interne standaard): δ = 0,20 ppm (9H, s, Si(CH3)3), δ = 1,36 ppm (9H, s, C(CH3)3), δ = 1,90 ppm (1H, dd, J=3,75 Hz en J=14,5 Hz, H2(ax)), δ = 2,67 ppm (1H, d, J=14,5 Hz, H2(eq)), δ = 2,77 ppm (1H, d, J=20 Hz, H4(ax)), δ = 3,47 ppm (1H, d, J=20 Hz, H4(eq)), δ = 5,21 ppm (1H, s, Hj), δ = 5,43 ppm (2H, s, CH^, δ = 5,54 ppm (1H, s, 3-OH), δ = 7,33 ppm (2H, dd, H6+H7), δ = 7,69 ppm (2H, AB, J=8,6 Hz, ArH), δ = 8,29 ppm (2H, AB, J= 8,6 Hz, ArH), δ = 12,47 ppm (1H, s, ArOH).

0,48 ml (2,48 mmol) Trimethylsilyltriflaat werd toegevoegd aan een suspensie van 0,628 gr 14 (1,16 mmol) en 4 g 4A moleculaire zeef in een mengsel van 48 ml dichloormethaan en 40 ml diethylether (beide gedestilleerd over resp. CaH2 en Natrium) bij -30°C en onder argon atmosfeer. De oplossing werd gedurende 0,5 uur geroerd bij 0°C tot de oplossing helder was geworden. Vervolgens werd de oplossing afgekoeld tot -15°C en werd 0,342 g (0,92 mmol) 33 opgelost in 100 ml dichloormethaan toegevoegd. Het reaktiemengsel werd gedurende het toevoegen op -15°C gehouden en vervolgens gedurende 4 uur bij -15°C geroerd. Het reaktieverloop werd m.b.v. TLC (loopmiddel ethylacetaat: bezeen, 1 : 4) gevolgd. Nadat alle uitgangsstof was omgezet werd het reaktiemengsel onder krachtig roeren uitgestort in een oplossing van 400 ml verzadigde natriumbicarbonaat. De organische laag werd gescheiden en vervolgens gewassen met 200 ml water en 200 ml van een verzadigde NaCl oplossing. Na drogen op watervrij natriumsulfaat en indampen werden de verbindingen 36a en 36b gescheiden m.b.v. preperatieve TLC (loopmiddel ethylacetaat: benzeen, 1 : 4). Na indampen van het loopmiddel en behandelen met een geringe hoeveelheid n-hexaan konden 0,175 g (25%) van 36a geïsoleerd worden. [a20D] = -100 °, smeltpunt 145-147°C.

2,15 ml van een 0,1 M NaOH oplossing werd toegevoegd aan een roerende oplossing van 0,16 g (0,21 mmol) 36a in 1,4 ml dichloormethaan en 80 ml methanol bij 0°C en onder argon atmosfeer. De diep paarse oplossing werd gedurende 20 minuten bij 0°C geroerd en het verloop van de reaktie werd gevolgd met behulp van TLC (dichloormethaan : aceton, 9 : 1). Na afloop van de reaktie werden enkele druppels ijsazijn toegevoegd tot de oplossing oranje kleurde. Vervolgens werd aan de oplossing 100 ml ethylacetaat en 100 ml van een verzadigde NaCl oplossing toegevoegd. De organische laag werd nog 2 maal met 50 ml van een verzadigde NaCl oplossing geextraheerd en gedroogd op watervrij natriumsulfaat. Na indampen werd het oranje residu gezuiverd m.b.v. kolomchromatografie (loopmiddel chloroform : methanol : azijnzuur, 40 : 1 : 0,4). De opbrengst 38 was 0,050 g (39%). [a20D] = +56,7°.

Aan de oplossing van 0,050 g (0,08 mmol) 38 in 1 ml aceton werd 10 ml 0,1 M NaOH toegevoegd en het reaktiemengsel werd gedurende 30 minuten bij kamertemperatuur en onder argon atmosfeer geroerd. De reaktie werd gevolgd m.b.v. TLC (Water: Azijnzuur: Methanol: Chloroform, 12 : 26 : 54 : 160). Na afloop werd de oplossing aangezuurd tot pH 8 met 1 M HC1. De geneutraliseerde oplossing werd meerdere malen met 50 ml chloroform geextraheerd tot de organische laag niet meer kleurde. De gecombineerde organische lagen werden gewassen met water en gedroogd op watervrij natriumsulfaat. Na filtreren en indampen werd het residu opgelost in zo weinig mogelijk van een oplossing van chloroform en methanol (9/1). Na toevoegen van 0,25 ml 0,6 M HC1 in methanol en 25 ml diethylether precipiteerde het HC1 zout 40. Na affiltreren kon 0,018 g (40%) van verbinding 40 worden.

0,42 ml (2,17 mmol) Trimethylsilyltriflaat werd toegevoegd aan een suspensie van 0,542 gr 14 (1,00 mmol) en 3,2 g 4A moleculaire zeef in een mengsel van 40 ml dichloormethaan en 34 ml diethylether (beide gedestilleerd over resp. CaH2 en Natrium) bij -30°C en onder argon atmosfeer. De oplossing werd gedurende 0,5 uur geroerd bij 0°C tot de oplossing helder was geworden. Vervolgens werd de oplossing afgekoeld tot -20°C en werd 0,200 g (0,63 mmoL) 34 opgelost in 80 ml dichloormethaan toegevoegd. Het reaktiemengsel werd gedurende het toevoegen op -15°C gehouden en vervolgens gedurende 4 uur bij -20°C geroerd. Het reaktieverloop werd m.b.v. TLC (loopmiddel aceton : dichloormethaan, 1 : 39) gevolgd. Nadat alle uitgangsstof was omgezet werd het reaktiemengsel uitgestort in een oplossing van 250 ml verzadigde natriumbicarbonaat die krachtig werd geroerd. De organische laag werd gescheiden en vervolgens gewassen met 150 ml water en 150 ml van een verzadigde NaCl oplossing. Na drogen op watervrij natriumsulfaat en indampen werden de verbindingen 37a en 37b gescheiden m.b.v. preperatieve TLC (loopmiddel aceton : dichloormethaan, 1 : 39). Na indampen van het loopmiddel en behandelen met een geringe hoeveelheid n-hexaan konden 0,120 g (28%) van 37a geïsoleerd worden. Smeltpunt 150-152°C, [a20D] = -93,3°.

^-NMR (400 MHz, CDC13, TMS als interne standaard): δ = 1,26 ppm (3H, d, J=6,5 Hz, 6’-Me), 5 = 2,03-2,19 ppm (2H, m, 2-H2» and Hg(ax)), δ = 2,31 ppm (1H, m, Hg(eq)), δ = 2,43 ppm (3H, s, Me), δ = 2,88 ppm (1H, d, J=18,5 Hz, H10(ax)), δ = 3,16 ppm (1H, d, J=18,5 Hz, H10(eq)), δ = 4,14 ppm (1H, br s, 9-OH), δ = 4,40-4,51 ppm (2H, m, H3. en H5>), δ = 5,22 ppm (1H, m, H7), δ = 5,48 ppm (1H, br s, H4»), δ = 5,67 ppm (1H, br s, H^), δ = 6,33 ppm (1H, br d, J=7,5 Hz, NH), δ = 7,26 ppm (2H, s, ArH), δ = 8,27-8,36 ppm (4H, m, ArH), δ = 12,51 ppm (1H, s, ArOH), δ = 12,59 ppm (1H, s, ArH).

1,6 ml van een 0,1 M NaOH oplossing werd toegevoegd aan een roerende oplossing van 0,11 g (0,16 mmol) 37a in 1 ml dichloormethaan en 60 ml methanol bij 0°C en onder argon atmosfeer. De diep paarse oplossing werd gedurende 10 minuten bij 0°C geroerd en het verloop van de reaktie werd gevolgd met behulp van TLC (dichloormethaan : aceton, 9 : 1). Na afloop van de reaktie werden enkele druppels ijsazijn toegevoegd tot de oplossing oranje kleurde. Vervolgens werden aan de oplossing 75 ml ethylacetaat en 75 ml van een verzadigde NaCl oplossing toegevoegd. De organische laag werd nog 2 maal met 50 ml van een verzadigde NaCl oplossing geextraheerd en gedroogd op watervrij natriumsulfaat. Na indampen werd het oranje residu gezuiverd m.b.v. kolomchromatografie (loopmiddel chloroform : methanol : azijnzuur, 40 : 1 : 0,4). De opbrengst 39 was 0,055 g (64%). [a20D] = +88,6°.

Aan de oplossing van 0,053 g (0,098 mmol) 39 in 1 ml aceton werd 10 ml 0,1 M NaOH toegevoegd en het reaktiemengsel werd gedurende 10 minuten bij kamertemperatuur en onder argon atmosfeer geroerd. De reaktie werd gevolgd m.b.v. TLC (Water: Azijnzuur: Methanol: Chloroform, 12 : 26 : 54 : 160). Na afloop werd de oplossing aangezuurd tot pH 8 met 1 M HC1. De geneutraliseerde oplossing werd meerdere malen met 50 ml chloroform geextraheerd tot de organische laag niet meer kleurde. De gecombineerde organische lagen werden gewassen met water en gedroogd op watervrij natriumsulfaat. Na filtreren en indampen werd het residu opgelost in zo weinig mogelijk van een oplossing van chloroform en methanol (9/1). Na toevoegen van 0,25 ml 0,6 M HC1 in methanol en 25 ml diethylether precipiteerde het HC1 zout 41. Na affiltreren kon 0,020 g (42%) van verbinding 41 worden.

1,5 g (2,5 mmol) van verbinding 35 werd opgelost in 10 ml dichloormethaan. Hieraan werd 0,75 g (6,6 mmol) l-dimethylamino-3-methyl-l-aza-l,3-butadieen 42 toegevoegd. De oplossing werd verdeeld over 2 hoge druk vaatjes van 7,5 ml en aangevuld met dichloormethaan. Aan de oplossing werd een spatelpuntje hydrochinon toegevoegd. De vaatjes werden gedurende 16 uur bij kamertemperatuur onder hoge druk (12 kBar) gebracht. Na afloop werd het reaktiemengsel ingedampt en werd het residu geroerd in 20 ml watervrij diethylether. De oranje vaste stof werd afgefiltreerd en m.b.v. kolomchromatografie (20 cm, Φ = 4 cm, loopmiddel 1% methanol in dichloormethaan) gezuiverd. De opbrengst was 0,26 g (22%) van verbinding 43. Tevens kon 0,11 g (9%) van verbinding 45 geïsoleerd worden.

Verbinding 43 : Smeltpunt 229-231°C.

^-NMR (400 MHz, CDC13, TMS als interne standaard) : δ = 0,20 ppm (9H, s, Si(CH3)3), δ = 1,41 ppm (9H, s, C(CH3)3), δ = 2,01 ppm (1H, d, J=14,5 Hz, H^ax)), δ = 2,59 ppm (3H, s, CH3), δ = 2,76 ppm (1H, d, J=14,5 Hz, H^eq)), δ = 3,05 ppm (1H, d, J=20 Hz, H7(ax)), δ = 3,67 ppm (1H, d, J=20 Hz, H7(eq)), δ = 5,37 ppm (1H, brs, H10), δ = 5,91 ppm (1H, s, OH), δ = 8,39 ppm (1H, s, ArH), 8 = 8,91 ppm (1H, s, ArH), δ = 13,23 ppm (1H, s, ArOH), δ = 13,80 ppm (1H, s, ArOH).

Verbinding 45 Smeltpunt 258-260°C.

^-NMR (400 MHz, CDC13, TMS als interne standaard): δ = 0,22 ppm (9H, s, Si(CH3)3), δ = 1,41 ppm (9H, s, C(CH3)3), δ = 2,01 ppm (1H, d, J=14,5 Hz, H8(ax)), δ = 2,59 ppm (3H, s, CH3), δ = 2,76 ppm (1H, d, J=14,5 Hz, H8(eq)), δ = 3,08 ppm (1H, d, J=20 Hz, H10(ax)), δ = 3,70 ppm (1H, d, J=20 Hz, H10(eq)), δ = 5,37 ppm (1H, brs, H7), δ = 5,87 ppm (1H, s, OH), δ = 8,44 ppm (1H, s, ArH), δ = 8,94 ppm (1H, s, ArH), δ = 13,46 ppm (1H, s, ArOH), δ = 13,56 ppm (1H, s, ArOH).

1,07 g (2,5 mmol) van verbinding 32 werd opgelost in 10 ml dichloormethaan. Hieraan werd 0,75 g (6,6 mmol) l-dimethylamino-3-methyl-l-aza-l,3-butadieen 42 toegevoegd. De oplossing werd verdeeld over 2 hoge druk vaatjes van 7,5 ml en aangevuld met dichloormethaan. Aan de oplossing werd een spatelpuntje hydrochinon toegevoegd. De vaatjes werden gedurende 16 uur bij kamertemperatuur onder hoge druk (12 kBar) gebracht. Na afloop werd het reaktiemengsel ingedampt en werd het residu geroerd in 20 ml watervrij diethylether. De oranje vaste stof werd afgefiltreerd en m.b.v. kolomchromatografie (20 cm, Φ = 4 cm, loopmiddel 1% methanol in dichloormethaan) gezuiverd. De opbrengst was 0,27 g (22%) van verbinding 45. Tevens kon 0,10 g (8%) van verbinding 43 geïsoleerd worden.

0,57 g (1,15 mmol)van verbinding 43/45 werd opgelost in 22 ml THF en hieraan werd 11 ml 6 N H2S04-oplossing en 0,3 g (1,38 mmol) HgO aan toegevoegd. Het reaktiemengsel werd gedurende 24 uur getrild in een ultrasoon bad. Vervolgens werd het reaktiemengsel uitgestort in 75 ml 1 M HC1 oplossing en geextraheerd met chloroform (3 maal 50 ml). De organische fase weid gedroogd op watervrij natriumsulfaat en na indampen gezuiverd m.b.v. kolomchromatografie (loopmiddel chloroform : methanol: azijnzuur 40 : 1 : 0,4). De opbrengst was 0,38 g (86%).

Verbinding 44: smeltpunt 163-165°C

^-NMR (400 MHz, CDC13, IMS als interne standaard) : 5 = 2,19 ppm (1H, dd, J=14,5 Hz en J=4,9 Hz, H^ax)), 5 = 2,35 ppm (1H, dt, J=14,5 Hz, H^eq)), δ = 2,44 ppm (3H, s, CH3), δ = 2,60 ppm (3H, s, CH3), δ = 2,99 ppm (1H, d, J=18,7 Hz, H7(ax)), δ = 3,22 ppm (1H, dd, J=18,7 Hz en J=2,2 Hz, H7(eq)), δ = 3,77 ppm (1H, d, J=5 Hz, 10-OH), δ = 4,54 ppm (1H, s, 8-OH), δ = 5,36 ppm (1H, brs, H10), δ = 8,46 ppm (1H, d, J=2 Hz, ArH), δ = 8.96 ppm (1H, d, J=2 Hz, ArH), δ = 13,42 ppm (1H, s, ArOH), δ = 13,68 ppm (1H, s, ArOH).

Verbinding 46: smeltpunt 197-199°C

1H-NMR (400 MHz, CDC13, TMS als interne standaard): δ = 2,20 ppm (1H, dd, J=14,5 Hz en J=4,8 Hz, Hg(ax)), δ = 2,39 ppm (1H, dt, J=14,5 Hz, H8(eq)), δ = 2,44 ppm (3H, s, CH3), δ = 2,60 ppm (3H, s, CH3), δ = 3,00 ppm (1H, d, J=18,7 Hz, H10(ax)), δ = 3,24 ppm (1H, dd, J=18,7 Hz en J=2,l Hz, H10(eq)), δ = 3,84 ppm (1H, d, J=6,5 Hz, 7-OH), δ = 4,51 ppm (1H, s, 9-OH), δ = 5,34 ppm (1H, brs, H7), δ = 8,47 ppm (1H, d, J=2 Hz, ArH), δ = 8.96 ppm (1H, d, J=2 Hz, ArH), δ = 13,41 ppm (1H, s, ArOH), δ = 13,43 ppm (1H, s, ArOH).

Reaktieschema Η

0,27 ml Trimethylsilyltriflaat (1,4 mmol) werd toegevoegd aan een suspensie van 0,36 gr 14 (0,66 mmol) en 2 g 4A moleculaire zeef in een mengsel van 27 ml dichloormethaan en 23 ml diethylether (beide gedestilleerd over resp, CaH2 en Natrium) bij -30°C en onder argon atmosfeer. De oplossing werd gedurende 1 uur geroerd bij 0°C tot de oplossing helder was geworden. Vervolgens werd de oplossing afgekoeld tot -15°C en werd 0,200 g (0,52 mmol) 44 opgelost in 55 ml dichloormethaan toegevoegd. Het reaktiemengsel werd gedurende het toevoegen op -15°C gehouden en vervolgens gedurende 3 uur bij -15°C geroerd. Het reaktieverloop werd m.b.v. TLC (loopmiddel ethylacetaat: benzeen, 1 : 4) gevolgd. Nadat alle uitgangsstof was omgezet werd het reaktiemengsel onder krachtig roeren uitgestort in een oplossing van 350 rol verzadigde natriumbicarbonaat. De organische laag werd gescheiden en vervolgens gewassen met 100 ml water en 100 ml van een verzadigde NaCl oplossing. Na drogen op watervrij natriumsulfaat en indampen werden de verbinding 47 gezuiverd m.b.v. preperatieve TLC (loopmiddel dichloormethaan : aceton, 9 : 1). Na indampen van het loopmiddel en behandelen met een geringe hoeveelheid n-hexaan konden 0,165 g (42%) van 47 geïsoleerd worden.

47

48 3,9 ml van een 0,1 M NaOH oplossing werd toegevoegd aan een oplossing van 0,300 g (0,4 mmol) 47 in 3,9 ml dichloormethaan en 150 ml methanol bij 0°C en onder argon atmosfeer. De diep paarse oplossing werd gedurende 20 minuten bij 0°C geroerd en het verloop van de reakde werd gevolgd met behulp van TLC (dichloormethaan : aceton, 9 : 1). Na afloop van de reaktie werden enkele droppels ijsazijn toegevoegd tot de oplossing oranje kleurde. Vervolgens werd aan de oplossing 240 ml ethylacetaat en 240 ml van een verzadigde NaCl oplossing toegevoegd. De organische laag werd nog 2 maal met 80 ml van een verzadigde NaCl oplossing geextraheerd en gedroogd op watervrij natriumsulfaat. Na indampen werd het oranje residu gezuiverd m.b.v. preperatieve TLC (loopmiddel 5% methanol in chloroform). De opbrengst was 0,106 g (45%).

48 49

De diep paarse oplossing van 0,096 g (0,16 mmol) 48 in 20 ml 0,1 M NaOH werd gedurende 30 minuten bij kamertemperatuur en onder argon atmosfeer geroerd. De reaktie werd gevolgd m.b.v. TLC (Water: Azijnzuur: Methanol: Chloroform, 12 : 26 : 54:160). Na afloop werd de oplossing aangezuurd tot pH 8 met 1 M HC1. De geneutraliseerde oplossing werd meerdere malen met 75 ml chloroform geextraheerd tot de organische laag niet meer kleurde. De gecombineerde organische lagen werden gewassen met water en gedroogd op watervrij natriumsulfaat. Na filtreren en indampen werd het residu opgelost in zo weinig mogelijk van een oplossing van chloroform en methanol (9/1). Na toevoegen van 0,3 ml 0,6 M HC1 in methanol en 50 ml diethylether precipiteerde het HC1 zout 49. Na affiltreren kon 0,060 g (69%) van verbinding 49 geïsoleerd worden.

50 0,21 ml Trimethylsilyltriflaat (1,11 mmol) werd toegevoegd aan een suspensie van 0,283 'gr 14 (0,52 mmol) en 3,5 g 4A moleculaire zeef in een mengsel van 22 ml dichloormethaan en 18 ml diethylether (beide gedestilleerd over resp. CaH2 en Natrium) bij -30°C en onder argon atmosfeer. De oplossing werd gedurende 1 uur geroerd bij 0°C tot de oplossing helder was geworden. Vervolgens werd de oplossing afgekoeld tot -15°C en werd 0,155 g (0,41 mmol) 46 opgelost in 45 ml dichloormethaan toegevoegd. Het reaktiemengsel werd gedurende het toevoegen op -15°C gehouden en vervolgens gedurende 3 uur bij -15°C geroerd. Het reaktieverloop werd m.b.v. TLC (loopmiddel ethylacetaat : benzeen, 1 : 4) gevolgd. Nadat alle uitgangsstof was omgezet werd het reaktiemengsel onder krachtig roeren uitgestort in een oplossing van 250 ml verzadigde natriumbicarbonaat. De organische laag werd gescheiden en vervolgens gewassen met 100 ml water en 100 ral van een verzadigde NaCl oplossing. Na drogen op watervrij natriumsulfaat en indampen werden de verbinding 50 gezuiverd m.b.v. pieperatieve TLC (loopmiddel dicloormethaan : aceton , 9 :1). Na indampen van het loopmiddel en behandelen met een geringe hoeveelheid n-hexaan konden 0,126 g (41%) van 50 geïsoleerd worden.

2,7 ml van een 0,1 M NaOH oplossing werd toegevoegd aan een oplossing van 0,207 g (2,7 mmol) 50 in 16 ml dichloormethaan en 110 ml methanol bij 0°C en onder argon atmosfeer. De diep paarse oplossing werd gedurende 20 minuten bij 0°C geroerd en het verloop van de reaktie werd gevolgd met behulp van TLC (dichloormethaan : aceton, 9 : 1). Na afloop van de reaktie werden enkele druppels ijsazijn toegevoegd tot de oplossing oranje kleurde. Vervolgens werden aan de oplossing 150 ml ethylacetaat en 150 ml van een verzadigde NaCl oplossing toegevoegd. De organische laag werd nog 2 maal met 50 ml van een verzadigde NaCl oplossing geextraheerd en gedroogd op watervrij natriumsulfaat. Na indampen werd het oranje residu gezuiverd m.b.v. preperatieve TLC (loopmiddel 5% methanol in chloroform). De opbrengst was 0,075 g (45%).

De diep paarse oplossing van 0,063 g (0,10 mmol) 51 in 12 ml 0,1 M NaOH werd gedurende 30 minuten bij kamertemperatuur en onder argon atmosfeer geroerd. De reaktie werd gevolgd m.b.v. TLC (Water: Azijnzuur: Methanol: Chloroform, 12 : 26 : 54:160). Na afloop werd de oplossing aangezuurd tot pH 8 met 1 M HC1. De geneutraliseerde i oplossing werd meerdere malen met 50 ml chloroform geextraheerd tot de organische laag niet meer kleurde. De gecombineerde organische lagen werden gewassen met water, en gedroogd op watervrij natriumsulfaat. Na filtreren en indampen werd het residu opgelost in zo weinig mogelijk van een oplossing van chloroform en methanol (9/1). Na toevoegen van 0,2 ml 0,6 M HC1 in methanol en 25 ml diethylether precipiteerde het HC1 zout 52. Na i affiltreren kon 0,040 g (70%) van verbinding 52 geïsoleerd worden.

Claims

1. Verbindingen volgens formule 1: waarin

R -COCH3 of -Osc-R4 voorstelt; R4 H of -Si(CH3)3 voorstelt; R*L en R2 H voorstellen of tesamen een groep -CRg=CRg-CR7=CRg-*, -CRg^CR-j^Q-CR^^- of -N^Rg-CR^fpCRu- vormen, elk der symbolen R5, Rg, R7 en Rg H, een 0^-(¾ alkylgroep, een C3-C3 al- koxygroep of een -OH groep voorstelt; elk der symbolen Rg, R10 en R^ H of Cj-C^ alkyl voorstelt; en R3 H of -OOCF3 voorstelt; alsmede zouten hiervan met een zuur; uitgezonderd: de verbindingen waarin R^ en R2 een groep -CH-CH-OiC(0Ο]_-€3 alkyl)- of -OKH-Oi=C(Cii)- vormen, R een groep- OOCH3 is en R3 H voorstelt; en zouten van deze verbinding met een zuur; en de verbindingen waarin R^ en R2 een groep -CH=CH-CH=CH-, -00=0(0¾)- C(013)=01- of -C(Oi3)=CH-Oi=C(ai3)- vormen, R een groep -000¾ voorstelt en R3 H voorstelt; en zouten van deze verbindingen met een zuur.

2. Verbindingen volgens formule 2

waarin R3 de in conclusie 1 gegeven definitie bezit; alsmede zouten hiervan met een zuur.

3. Verbindingen volgens formule 3

waarin en R2' tesamen een groep -03=0(0¾) -Oï=N- of -MH-C (Oï3) =OI-vormen en R3 de in conclusie 1 gegeven definitie bezit? alsmede zouten hiervan met een zuur.

4. Verbindingen volgens formule 4

waarin Ri,,=R.2,,=H of R^' en R2" tesamen een groep -01=01-01=0(00¾)- of -OKH-Oi<H- vormen en R3 en 1¾ de in conclusie 1 gegeven definities bezitten; alsmede zouten hiervan met een zuur.

5. Verbindingen volgens formule 5