MXPA06013952A - Metodo para el tratamiento de cancer. - Google Patents

Abstract

La presente invencion se refiere a un metodo para tratar cancer en un mamifero mediante la administracion de 4- quinazolinaminas y al menos un compuesto anti-neoplasico adicional. En particular, el metodo se refiere a un metodo para tratar canceres mediante la administracion de N-{3-cloro-4-[(3- fluorobencil)oxijfenil}-6-[5-({[2-(metanosulfonil)etil]ami no}metil)-2- furilj4-quinazolinamina y sales o solvatos de ella en combinacion con al menos un compuesto antineoplasico adicional.

Description

MÉTODO PARA EL TRATAMIENTO DE CÁNCER Antecedentes de la invención La presente invención se refiere a un método para tratar el cáncer en un mamífero mediante la administración de 4-quinazolinaminas en combinación con otros compuestos antineoplásicos. En particular, el método se relaciona con métodos para el tratamiento de cánceres por administración de una combinación de N-{3-cloro-4-[(3-fluorobencil)oxi]fenil}-6-[5-({[2-(metanosulfonil)etil]amino}metil)-2-furil]-4-quinazolinamina y sus sales o solvatos además de compuestos antineoplásicos. La quimioterapia efectiva para el tratamiento del cáncer es un objetivo continuo en el campo de la oncología. Generalmente, el cáncer es el resultado de la desregulación de los procesos normales que controlan la división, diferenciación y muerte apoptótica de la célula. La apoptosis (muerte celular programada) juega papeles esenciales en el desarrollo embriónico y en la patogénesis de diversas enfermedades, tales como enfermedades neuronales degenerativas, enfermedades cardiovasculares y cáncer. U na de las rutas estudiadas más comúnmente, la cual involucra la regulación quinasa de la apoptosis, es la señalización celular de receptores del factor de crecimiento en la superficie celular hacia el núcleo (Crews y Erikson , Cell, 74:215-1 7, 1993) . Una ruta particular de interés es la señalización celular desde los receptores del factor de crecimiento de la familia erbB .

Hay una interacción significativa entre la familia erbB que regula los efectos celulares mediados pro estos receptores. Seis diferentes ligandos que se fijan a EGFR incluyen EGF, factor de crecimiento transformante, amfiregulina, heparina que se fija a EGF, betacelulina y epiregulina (Alroy y Yarden, FEBS Letters, 410:83-86, 1997; Burden y Yarden, Neuron, 18: 847-855, 1997; Klapper eí al., Proc Nati Acad Sci, 4994-5000, 1999). Las heregulinas, otra clase de ligandos, se unen directamente a HER3 y/o a HER4 (Holmes eí al., Science, 256:1205, 1992; Klapper eí al., 1997, Oncogene, 14:2099- 2109; Peles eí al., Cell, 69:205, 1992). La fijación de ligandos específicos induce homo- o heterodimerización de los receptores dentro de miembros de la familia erbB (Carraway y Cantley, Cell, 78:5-8, 1994; Lemmon y Schlessinger, Trends Biochem Sci, 19:459- 463, 1994). En contraste con los otros miembros receptores de ErbB, todavía no se ha identificado un ligando soluble para HER2, el cual parece ser transactivado después de la heterodimerización. La heterodimerización del receptor erbB-2 con los receptores EGFR, HER3 o HER4 se prefiere para la homodimerización (Klapper eí al., 1999; Klapper eí al., 1997). La dimerización del receptor da como resultado la fijación del ATP al sitio catalítico del receptor, la activación de la tirosina quinasa del receptor, y la auto fosforilación en los residuos tirosina del terminal C. Los residuos de tirosina fosforilados sirven entonces como sitios de acoplamiento para proteínas tales como Grb2, Shc, y fosfolipasa C, que a su vez, activan rutas de señalización corriente abajo, incluyendo las rutas Ras/MEK/Erk y PI3K/Akt, las cuales regulan los factores de transcripción y otras proteínas involucradas en respuestas biológicas tales como proliferación , motilidad celular, angiogénesis, supervivencia celular, y diferenciación (Alroy y Yarden, 1997; Burgering y Coffer, Nature, 376:599-602 , 1995; Chan eí al. , Ann Rev Biochem, 68:965-1014, 1999; Lewis eí al. , Adv Can Res, 74:49-139, 1998; Liu eí al. , Genes and Dev, 13:786-791 , 1999; Muthuswamy eí al. , Mol and Cell Bio, 19, 10:6845-6857, 1999; Riese y Stern , Bioessays, 20:41 -48, 1998) . Se han desarrollado varias estrategias, incluyendo anticuerpos monoclonales (Mab), inmunoconjugados, vacuna anti-EGF, e inhibidores de tirosina quinasa , para apuntar a la familia de receptores erbB y bloquear su activación en células cancerosas (revisado en (Sridhar eí al. , Lancet, 4,7:397-406,2003)). Debido a que los heterodímeros que contienen erbB2 son los más estables, y preferidos iniciadores de eventos para la señalización , la interrupción tanto de erbB2 como de EGFR simultáneamente, es una estrategia terapéutica atractiva. Se ha sintetizado una serie de inhibidores duales 6-tiazolilquinazolina de erbB-2/EG FR TK que poseen eficacia en modelos pre-clínicos para el cáncer. (Cockerill eí al. , Biorg Med Chem Lett, 1 1 : 1401 -1405, 2001 ; Rusnak eí al. , Can Res, 61 :7196-7203, 2001 a; Rusnak eí al. , Mol Ca n Ther, 1 :85-94,2001 b). GW572016 es un inhibidor quinasa dual reversible 6-furanilquinazolina , activo oralmente , tanto de quinasas EGFR como de erbB2 (Rusnak eí al., 2001b). En estudios con xenoínjertos humanos, el GW572016 ha mostrado inhibición de quinasa dependiente de la dosis, e inhibe selectivamente las células tumorales que sobreexpresan EGFR o erbB2 (Rusnak eí al., 2001b; Xia et al., Oncogene, 21 :6255-6263, 2002). El tratamiento de combinación rápidamente se está convirtiendo en la norma, en vez de en la excepción en el tratamiento de cáncer. Los oncólogos continuamente están buscando compuestos antineoplásicos, los cuales utilizados en combinación proporcionan un tratamiento más efectivo o mejorado al individuo que sufre los efectos del cáncer. Típicamente, el tratamiento de combinación exitoso proporciona un efecto mejorado y hasta sinérgico con por encima del monotratamiento. Los presentes inventores han identificado ahora novedosos métodos para el tratamiento de cáncer que incluyen la administración de N-{3-cloro-4-[(3-fluorobencil)oxi]fenil}-6-[5-({[2-(metanosulfonil)etil]amino}metil)-2-furil]-4-quinazolinamina (GW572016) así como también sus sales y/o solvatos en combinación con compuestos antineoplásicos adicionales. Breve descripción de la invención En un primer aspecto de la presente invención, se proporciona un método para el tratamiento de cáncer de mama en un mamífero, que comprende: administrar a dicho mamífero cantidades efectivas terapéuticamente de (i) un compuesto de la fórmula (I") (I") •[HßO] . y y (ii) trastuzumab. En un segundo aspecto de la presente invención, se proporciona un método para el tratamiento de cáncer de mama en un mamífero, que comprende: administrar a dicho mamífero cantidades efectivas terapéuticamente de (i) un compuesto de la fórmula (I") (i") »[H20] . y y (ii) letrozole. En un tercer aspecto de la presente invención, se proporciona un método para el tratamiento de cáncer de mama en un mamífero, que comprende: administrar a dicho mamífero cantidades efectivas terapéuticamente de (i) compuesto de la fórmula (I") y (ii) capecitabina. En un cuarto aspecto de la presente invención , se proporciona un método para el tratamiento de cáncer de mama en un mamífero, que comprende: administrar a dicho mamífero cantidades efectivas terapéuticamente de (i) un compuesto de la fórmula (I") y (ii) topotecan . En un quinto aspecto de la presente invención , se proporciona un método para el tratamiento de cáncer de pulmón en un mamífero, que comprende: administrar a dicho mamífero cantidades efectivas terapéuticamente de (i) un compuesto de la fórmula (I") y (ii) docetaxel. En un sexto aspecto de la invención , se proporciona un método para el tratamiento de cáncer de pulmón en un mamífero, que comprende: administrar a dicho mamífero cantidades efectivas terapéuticamente de (i) un compuesto de la fórmula (I") y (ii) topotecan . En un séptimo aspecto de la invención , se proporciona un método para el tratamiento de cáncer colorectal en un mamífero, que comprende: administrar a dicho mam ífero cantidades efectivas terapéuticamente de (i) un compuesto de la fórmula (I") y (ii) topotecan. En un octavo aspecto de la invención, se proporciona un método para el tratamiento de cáncer de mama en un mamífero, que comprende: administrar a dicho mamífero cantidades efectivas terapéuticamente de (ii) un compuesto de la fórmula (I") y (ii) topotecan. Descripción detallada de la invención Como se usa aquí, el término "neoplasma" se refiere a un crecimiento anormal de células o de tejido y se entiende que incluye crecimientos benignos, es decir, no cancerosos, y malignos, es decir, crecimientos cancerosos. El término "neoplásico" significa de o relacionado con un neoplasma. Como se usa aqu í, el término "cantidad efectiva" significa la cantidad e un fármaco o agente farmacéutico que desencadenará la respuesta biológica o médica de un tejido, sistema, animal o humano que está siendo buscada, por ejemplo, por un investigador o cl ínico. Adicionalmente, el término "cantidad efectiva terapéuticamente" significa cualquier cantidad que, cuando se compara con un sujeto correspondiente que no ha recibido tal cantidad , da como resultado mejoras en el tratamiento, curación , prevención o mejora de una enfermedad , trastorno o efecto colateral, o una disminución en la tasa de avance de una enfermedad o trastorno. El término también incluye dentro de su alcance cantidades efectivas para mejorar la función fisiológica normal . Tal como es bien conocido en la materia , los tumores frecuentemente son metastásicos, en que un primer locus (primario) de crecimiento tumoral se extiende a uno o más sitios separados anatómicamente. Como se usa aqu í, la referencia a "un tumor" en un sujeto incluye no sólo el tumor primario, sino también el crecimiento del tumor metastásico también . Las "EGFR" también conocidas como "erbB-1 " y "erbB-2" son receptores del factor de crecimiento transmembrana de la proteína tirosina quinasa de la familia erbB. Las proteínas tirosina quinasa catalizan la fosforilación de residuos tirosilo específicos en diversas proteínas involucradas en la regulación de crecimiento y diferenciación celular (A. F. Wilks, Progress in Growth Factor Research, 1990, 2, 97-111 ; S.A. Courtneidge, Dev. Supp. I, 1993, 57-64; J.A. Cooper, Semin. Cell Biol., 1994, 5(6), 377-387; R.F. Paulson, Semin. Immunol., 1995, 7(4). 267-277; A.C. Chan, Curr. Opin. Immunol., 8(3). 1996, 394-401). La familia ErbB de las tirosina quinasas receptoras de tipo I incluye ErbB1 (también conocido como el receptor del factor de crecimiento epidérmico (EGFR o HER1)), erbB2 (también conocido como Her2), erbB3, y erbB4. Estas tirosina quinasas receptoras se expresan ampliamente en los tejidos epitelial, mesenquimal y neuronal, en donde juegan un papel en la regulación de la proliferación, supervivencia y diferenciación celular (Sibilia y Wagner, Science, 269: 234 (1995); Threadgill eí al., Science, 269: 230 (1995)). La expresión aumentada de erbB2 o de EGFR de tipo natural, o la expresión de mutantes del receptor activados constitutivamente, transforma las células in vitro (Di Fiore eí al., 1987; DiMarco eí al, Oncogene, 4: 831 (1989); Hudziak eí al., Proc. Nati. Acad. Sci USA., 84:7159 (1987); Qian eí al., Oncogene, 10:211 (1995)). La expresión aumentada de erbB2 o de EGFR ha sido correlacionada con un resultado clínico más deficiente en algunos cánceres de mama y en una variedad de otras malignidades (Slamon eí al., Science, 235: 177 (1987); Slamon eí al., Science, 244:707 (1989); Bacus eí al, Am. J. Clin. Path, 102:S13 (1994)). Como se usa aquí, el término "solvato" se refiere a un complejo de estequiometría variable formado por un soluto (en esta invención, compuestos de la fórmula (I) o una sal de ellos) y un solvente. Estos solventes para el propósito de la invención pueden no interferir con la actividad biológica del soluto. Los ejemplos de solventes apropiados aceptables para uso farmacéutico incluyen, sin limitación, agua, etanol y ácido acético. Mucho más preferiblemente el solvente usado es agua. Como se menciona arriba, la presente invención está dirigida a métodos para el tratamiento de cáncer que incluye administración de N-{3-cloro-4-[(3-fluorobencil)oxi]fenil}-6-[5-({[2- (metanosulfonil)etil]amino}metil)-2-furil]-4-quínazolinamina (GW572016) así como sales y/o solvatos de esta en combinación con otros compuestos antineoplásicos. Los métodos para el tratamiento de cáncer descritos aquí, incluyen administrar un compuesto de la fórmula (I): o sales o solvatos de él. En otra modalidad, el compuesto es un compuesto de la fórmula (I) o sus formas anhidrato o hidrato. La sal de ditosilato del compuesto de la fórmula (I) tiene el nombre químico N-{3-cloro-4-[(3-fluorobencil)oxi]fenil}-6-[5-({[2-(metanosulfonil)etil]amino}metil)-2-fupl]-4-quinazolinamina y se conoce también como lapatinib.

(!') En una modalidad , el compuesto es la sal ditosilato anhidro del compuesto de la fórmula (I'). En otra modalidad , el compuesto es un compuesto de la fórmula (I"), q ue es la sal ditosilato monohidratada del compuesto de la fórmula (I'). 0') La base libre, sales de HCl y sales ditosilato del compuesto de la fórmula (I) pueden prepararse de acuerdo con los procedimientos de la solicitud de patente internacional número PCT/EP99/00048, presentada el 8 de enero de 1 999, y publicada como WO 99/35146 el 15 de julio de 1999, a la cual se hace referencia anteriormente y en la solicitud de patente internacional PCT/US01 /20706, presentada el 28 de junio de 2001 y publicada como WO 02/02552 el 10 de enero de 2002, y de acuerdo con los ejemplos apropiados descritos más adelante. Un procedimiento de este tipo para preparar la sal ditosilato del compuesto de la fórmula (I) se presenta a continuación en el esquema 1. Esquema 1 En el esquema 1, la preparación de la sal ditosilato del compuesto de la fórmula (III) se realiza en cuatro fases: Fase 1: Reacción del compuesto bicíclico y amina indicados para dar el derivado de yodoquinazolina indicado; Fase 2: preparación de la correspondiente sal aldehido: Fase 3: preparación de la sal ditosilato de quinazolina ; y Fase 4: preparación de la sal ditosilato monohidratada . Típicamente, las sales de la presente invención son sales aceptables para uso farmacéutico. Las sales comprendidas dentro del término "sales aceptables para uso farmacéutico" se refieren a sales no tóxicas de los compuestos de la presente invención. Las sales de los compuestos de la presente invención pueden contener sales de adición de ácido derivadas de un nitrógeno en un sustitutivo en un compuesto de la presente invención. Las sales representativas incluyen las siguientes sales: acetato, bencenosulfonato, benzoato, bicarbonato, bisulfato, bitartrato, borato, bromuro, edetato de calcio, camsilato, carbonato, cloruro, clavulanato, citrato, diclorhidrato, edetato, edisilato, estolato, esilato, fumarato, gluceptato, gluconato, glutamato, glicolilarsanilato, hexilresorcinato, hidrabamina, bromhidrato, clorhidrato, hidroxinaftoato, yod uro, isotionato, lactato, lactobionato, lau rato, malato, maleato, mandelato, mesilato, bromuro de metilo, nitrato de metilo, sulfato de metilo, maleato monopotásíco, mucato, napsilato, nitrato, N-metilglucamina , oxalato, pamoato (embonato), palmitato, pantotenato, fosfato/difosfato, poligalacturonato, potasio, salicilato, sodio, estearato, subacetato, succinato, tanato, tartrato, teoclato, tosilato, trietyoduro, trimetilamonio y valerato. Otras sales, que no son aceptables para uso farmacéutico, pueden ser útiles para la preparación de compuestos de esta invención , y estas forman un aspecto adicional de la invención. En una modalidad , el método de tratamiento de cáncer es un método para tratar el cáncer de mama en el cual el compuesto de la fórmula (I") se administra con trastuzumab. El trastuzumab es un anticuerpo derivado por recombinación de ADN humanizado monoclonal que se enlaza selectivamente al dominio extracelular de H ER2 (erbB2); que está disponible comercialmente como un polvo liofilizado para inyección intravenosa como HERCEPTI N®. El trastuzumab se indica como agente único para el tratamiento de pacientes con cáncer de mama metastásico que sobreexpresa erbB2 , quienes han recibido con anterioridad u no o dos regímenes de quimioterapia. En una modalidad, el método de tratamiento de cáncer es un método para tratar el cáncer de mama en el cual el compuesto de la fórmula (I") se administra con al menos un compuesto antiestrógeno. El compuesto antiestrógeno puede ser un antagonista de receptor de estrógeno o un inhibidor de la síntesis de estrógeno. Los ejemplos de antagonistas de receptor de estrógeno incluyen , pero no se limitan a fulvestrant, tamoxifen y su metabolito 4-OH-tamoxifen y toremifeno. Los ejemplos de inhibidores de la síntesis de estrógeno incluyen los inhibidores de aromatasa letrozole, anastrozole y exemestano. El Fulvestrant, 7-alfa-[9-(4, 4,5,5-pentafluorosulfonil)nonil]estra-1 ,3,5-(1 0)-trieno-3, 1 7-beta-diol; está disponible comercialmente como una solución inyectable con el nombre de FAS LODEX®. El fulvestrant se indica para el tratamiento cáncer de mama metastásico positivo de hormonas en mujeres postmenopáusicas después de la terapia antiestrógeno. El fulvestrant es un antagonista de receptor de estrógeno que se enlaza al receptor de estrógeno de forma competitiva y regula hacia abajo la proteína ER en las células humanas con cáncer de mama. El tamoxifen (Z)2-[4-( 1 ,2-difenil-1 -butenil)fenoxi]-N , N-dimetiletanamína 2 hidroxi-1 ,2,3-propanotricarboxilato( 1 : 1 ) ; está disponible comercialmente como tabletas de 10 ó 20 mg con el nombre de NOLVADEX®. El tamoxifen se indica para el tratamiento de cáncer de mama metastásico en hombres y mujeres y como un tratamiento adyuvante en el cáncer de mama. El tamoxifen es u n antagonista de receptor de estrógeno que se enlaza al receptor de estrógeno de forma competitiva. El toremifeno, citrato de 2-{p[(Z)-4cloro-1 ,2-difenil-1 butenil]fenoxi}-N , N-dimetiletilamina (1 : 1 ); está d isponible comercialmente como tabletas de 60 mg con el nombre de FARESTON®. El toremifeno se indica para el tratamiento de tumores positivos de receptor de estrógeno o desconocidos en cáncer de mama metastásico en mujeres postmenopáusicas. El toremífeno es un modulador selectivo de receptor de estrógeno que se enlaza al receptor de estrógeno y puede ejercer actividad estrógena o antiestrógena dependiendo de la duración del tratamiento, especie, género, órgano objetivo o punto de finalización seleccionado. En otra modalidad, el método de tratamiento de cáncer es un método para el tratamiento de cáncer de mama donde el compuesto de la fórmula (I") se administra con letrozole. El letrozole es 4-4'-(1 H-1 ,2,4-triazol-1-il metileno) dibenzonitrilo; que está disponible comercialmente como tabletas de 2.5 mg con el nombre de FEMARA®. El letrozole es un inhibidor de aromatosa no esteroide de administración oral. Específicamente, es un inhibidor de la síntesis de estrógeno en que inhibe la conversión de andrógenos a estrógenos. El letrozole se indica para el tratamiento de cáncer de mama avanzado en mujeres postmenopáusicas con progresión de la enfermedad siguiendo a terapia antiestrógeno. El anastrozole es 1 ,3-bencenodiacetonitrilo a, a, a', a'-tetrametil-5-(1 H-1 ,2,4-triazol-1-ilmetil); comercialmente disponible en tabletas de 1 mg como ARIMIDEX®. El anastrozole es un inhibidor de aromatosa no esteroide de administración oral. Específicamente, es un inhibidor de la síntesis de estrógeno en que inhibe la conversión de andrógenos a estrógenos. El anastrozole se indica para el tratamiento adyuvante de cáncer de mama en etapa temprana en mujeres postmenopáusicas. El exemestane es 6-metilenandrosta-1 ,4-dieno-3,17-d¡ona; que está disponible comercialmente como tabletas de 25 mg con el nombre de AROMASIN®. El exemestane es un inhibidor de aromatosa no esteroide de administración oral. Específicamente, es un inhibidor de la síntesis de estrógeno en que inhibe la conversión de andrógenos a estrógenos. El exemestane se indica para el tratamiento de cáncer de mama avanzado en mujeres postmenopáusicas con progresión de la enfermedad siguiendo al tratamiento con tamoxifen. En una modalidad, el método de tratamiento de cáncer es un método para tratar cáncer de mama donde el compuesto de la fórmula (I") se administra con capecitabina. La capecitabina, 5'-desoxi-5-fluoro-N-[(pentiloxi)carbonil]-citidina; está disponible comercialmente como tabletas de 150 o 500 mg con el nombre de XELODA®. La capecitabina es un pro-fármaco de administración oral de 5'-desoxi-5-fluoruridina (5'-DFUR) que se convierte en 5-fluorouracilo in vivo. La capecitabina se indica para el tratamiento de cáncer de mama metastásico resistente al paclitaxel y a un régimen de tratamiento que contenga antracilina. En una modalidad, el método de tratamiento de cáncer es un método para tratar cáncer de mama donde el compuesto de la fórmula (I") se administra con topotecan. El clorhidrato de topotecan , monoclorhidrato de (S)-10[(dimetilamino)metil]-4-etil-4,9-d i hidroxi- 1 H-pirano[3',4',6,7]indolizino[1,2-b]quinolina-3,14-(4H,12H)-diona, está disponible comercialmente como la solución inyectable HYCAMTIN®. El topotecan es un derivado de la camptotecina que se enlaza al complejo de topoisomerasa I — ADN y evita la religación de rompimientos de cadena individuales causados por la topoisomerasa I en respuesta a la presión torsional de la molécula de ADN. El topotecan se indica para tratamiento de segunda línea de carcinoma metastásico del ovario y cáncer de pulmón de célula pequeña. El efecto secundario limitante de dosis del topotecan HCL es la mielosupresión, principalmente la neutropenia. En una modalidad, el método de tratamiento de cáncer es un método para tratar cáncer pulmonar donde el compuesto de la fórmula (I") se administra con docetaxel. En una modalidad, el cáncer pulmonar es cáncer pulmonar de célula pequeña. El docetaxel, éster, 13-éster (2R.3S)- N-carboxi-3-fenilisoserina, N-tert-butíl, con 5ß-20-epoxi-1 ,2a,4,7ß,10ß,13a-hexahidroxítaxa-11-en-9-ona 4-acetato 2-benzoato, trihidrato; que está disponible comercialmente como una solución inyectable con el nombre de TAXOTERE®. El docetaxel se indica para el tratamiento de cáncer de mama. El docetaxel es un derivado semisintético del paclitaxel q.v., preparado utilizando un precursor natural, 10-desacetil-bacatina III, extraído de la aguja del árbol de tejo europeo. La toxicidad limitante de dosis del docetaxel es la neutropenia. En una modalidad, el método de tratamiento de cáncer es un método para tratar cáncer pulmonar donde el compuesto de la fórmula (I") se administra con topotecan. En una modalidad, el cáncer pulmonar es cáncer pulmonar de células no pequeñas. El topotecan es como se describe arriba. En una modalidad, el método de tratamiento de cáncer es un método para tratar cáncer colorectal donde el compuesto de la fórmula (I") se administra con topotecan . El topotecan es como se describe arriba . En una modalidad , el método de tratamiento de cáncer es un método para tratar cáncer de mama donde el compuesto de la fórmula (I ") se administra con al menos un inhibidor de bcl-2. La apoptosis, o muerte celular programada, es un mecanismo mediante el cual se eliminan las células superfluas, no deseadas o excesivas. La mayoría de los tumores malignos sufren camino de apoptosis aberrantes en el sentido de que se bloquea o inhibe la apoptosis, llevando a la supervivencia celular mejorada y posiblemente la resistencia al tratamiento. El Bcl-2 es uno de una familia de reguladores de la apoptosis. Bcl-2 es un supresor del camino de la apoptosis y cuando se sobreexpresa en las células cancerígenas puede tener un papel en promover el desarrollo del cáncer y su crecimiento. Así, se piensa que un inhibidor de bcl-12 podría resultar efectivo para el tratamiento del cáncer. (Sara eí al. , Current Med Chem , 1 1 : 1031 -1040; Líe eí al, Curr Med Chem -AntiCancer Agents, 3:21 7-229,2003.). Un in hibidor de BCL conocido es HA14-1 , que es etil [2-amino-6-bromo-4-(1 -cíano-2-etoxi-2oxoetil)]-4H-cromeno-3-carboxilato, disponible en Calbiochem de San Diego, California. Las terapias de combinación , de acuerdo con la presente invención , por lo tanto incluyen la administración del compuesto de la fórmula (I") así como el uso de al menos otro agente neoplásíco.

Dicha combinación de agentes se puede administrar junta o por separado y, cuando se administre por separado, esto puede ocurrir simultáneamente o secuencialmente en cualquier orden , ya sea cercanos o lejanos en el tiempo. Las cantidades del compuesto de la fórmula (I") y los otros agentes farmacéuticamente activos, y los tiempos relativos de administración se seleccionarán con el fin de lograr el efecto terapéutico combinado deseado. También en la presente invención se contemplan combinaciones farmacéuticas que incluyen compuestos de la fórmula (I") y al menos un agente antineoplásico. Dichos compuestos de fórmulas (I") y el al menos un agente antineoplásico son como se describe arriba y se pueden utilizar en cualquiera de las combinaciones descritas arriba en el método para tratar cáncer de la presente invención . Si bien es posible que, para su uso en los métodos para el tratamiento de cáncer de la presente invención , se pueden administrar cantidades efectivas terapéuticamente de un compuesto de la fórmula ( I ") así como también sales o solvatos de él, como materia prima, es posible presentar el ingrediente activo como una composición farmacéutica. De acuerdo con esto, la invención proporciona además composiciones farmacéuticas, que pueden ser administradas en los métodos para el tratamiento de cáncer de la presente invención . Las composiciones farmacéuticas incluyen cantidades efectivas terapéuticamente de un compuesto de la fórmula (I ") y sus sales o solvatos, y uno o más portadores, diluyentes o excipientes aceptables para uso farmacéutico. El portador o portadores, diluyente o diluyentes, excipiente o excipientes, pueden ser aceptables en el sentido de ser compatibles con los otros ingredientes de la formulación y no perjudiciales para el receptor. Las formulaciones farmacéuticas pueden ser presentadas en formas de dosis unitaria que contengan una cantidad predeterminada de ingrediente activo por dosis unitaria . Este tipo de unidad puede contener, por ejemplo, desde 0.5 mg hasta 1 g , preferiblemente desde 1 mg hasta 700 mg, más preferiblemente desde 5 mg hasta 100 mg de un compuesto de la fórmula (I) , dependiendo de la condición que está siendo tratada , de la vía de administración y de la edad , peso y condición del paciente, o se puede presentar formulaciones farmacéuticas en formas de dosis unitaria que contengan una cantidad predeterminada de ingrediente activo por dosis unitaria. Las formulaciones de dosificación unitaria preferidas son aquellas que contienen una dosis o sub-dosis diaria, tal como se describió anteriormente, o una fracción de ella apropiada , de un ingrediente activo. Además, estas formulaciones farmacéuticas pueden ser preparadas mediante cualquiera de los métodos bien conocidos en la técnica de farmacia. El compuesto de la fórmula (I") se puede administrar por cualquier vía apropiada. Las vías apropiadas incluyen oral , rectal, nasal, tópica (incluyendo bucal y sublingual), vaginal, y parenteral (incluyendo subcutánea , intramuscular, intravenosa , intradérmica , intratecal y epidural). Se tendrá en cuenta que la vía preferida puede variar, por ejemplo, con la condición del receptor de la combinación. Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para la administración oral pueden ser presentadas como unidades discretas, tales como cápsulas o tabletas, polvos o granulos, soluciones o suspensiones en líquidos acuosos o no acuosos, espumas o batidos comestibles, o emulsiones líquidas de aceite en agua o emulsiones líquidas de agua en aceite. Por ejemplo, para la administración oral en la forma de una tableta o cápsula, el componente fármaco activo puede ser combinado con un portador inerte oral, no tóxico, aceptable para uso farmacéutico, tal como etanol, glicerol, agua y similares. Los polvos se preparan desmenuzando el compuesto hasta un tamaño fino apropiado y mezclándolo con un portador farmacéutico desmenuzado de manera similar, tal como un carbohidrato comestible, como por ejemplo, almidón o manitol. También puede estar presente un agente saborizante, conservador, dispersante y colorante. Las cápsulas se elaboran preparando una mezcla en polvo como la que se describió anteriormente, y llenando fundas de gelatina formadas. Se puede añadir deslizantes y lubricantes tales como sílice coloidal, talco, estearato de magnesio, estearato de calcio o polietilenglicol sólido a la mezcla en polvo antes de la operación de rellenado. También se puede añadir un agente desintegrante o solubilizante tal como agar-agar, carbonato de calcio o carbonato de sodio, para mejorar la disponibilidad del medicamento cuando se ingiere la cápsula. Más aún , cuando se desea o cuando es necesario, también se puede incorporar en la mezcla enlazantes, lubricantes, agentes desintegrantes y agentes colorantes apropiados. Los enlazantes apropiados incluyen almidón , gelatina, azúcares naturales tales como glucosa o beta-lactosa, endulzantes de ma íz, gomas naturales y sintéticas tales como acacia, tragacanto o alginato de sodio, carboximetilcelulosa , polietilenglicol, ceras y similares. Los lubricantes usados en estas formas de dosis incluyen oleato de sodio, estearato de sodio, estearato de magnesio, benzoato de sodio, acetato de sodio, cloruro de sodio y similares. Los desintegradores incluyen , sin limitación a ellos, almidón , metil celulosa, agar, bentonita, goma xantana y similares. Las tabletas se formulan, por ejemplo, preparando una mezcla en polvo, granulando o troceando, añadiendo un lubricante y desintegrante y prensándolo en tabletas. U na mezcla en polvo se prepara mezclando el compuesto, apropiadamente desmenuzado, con un diluyente o base como se describe anteriormente, y opcionalmente, con un enlazante tal como carboximetilcelulosa , un alginato, gelatina o polivinilpirrolidona, u na solución retardante tal como parafina, un acelerador de resorción tal como una sal cuaternaria y/o un agente de absorción tal como bentonita, caolín o fosfato dicálcico. La mezcla en polvo puede ser g ranulada humedeciéndola con un enlazante tal como jarabe, pasta de almidón, mucílago de acacia o soluciones de materiales celulósicos o poliméricos y empujándola a través de un tamiz. Como una alternativa para granular, la mezcla en polvo puede ser corrida a través de la máquina tableteadora y el resultado es trozos formados imperfectamente divididos en granulos. Los granulos pueden ser lubricados para evitar que se peguen a los moldes para formar tabletas, por medio de la adición de ácido esteárico, una sal estearato, talco o aceite mineral. La mezcla lubricada se comprime luego en tabletas. Los compuestos de la presente invención también se pueden combinar con portador inerte de flujo libre y comprimirse en tabletas directamente sin pasar por los pasos de granulación o troceado. Se puede proporcionar un recubrimiento transparente u opaco que consiste en un recubrimiento sellador de Shellac, un recubrimiento de azúcar o material polimérico y un recubrimiento de pulitura de cera. Se puede añadir colorantes a estos recubrimientos para distinguir diferentes unidades de dosis. Los fluidos orales tales como solución , jarabes y elíxires, se pueden preparar en forma de unidad de dosis de tal forma que una cantidad dada contenga una cantidad predeterminada del compuesto. Los jarabes se pueden preparar disolviendo el compuesto en una solución acuosa saborizada apropiadamente, mientras que los elíxires se preparan medíante el uso de un vehículo alcohólico no tóxico. Las suspensiones pueden ser formuladas dispersando el compuesto en un veh ículo no tóxico. Se puede añadir también solubilizantes y emulsificantes tales como alcoholes isoestearílicos etoxilados y éteres de polioxietilen sorbitol, conservadores, aditivos saborizantes tales como aceite de menta o endulzantes naturales o sacarina u otros endulzantes artificiales y similares. En donde sea apropiado, las formulaciones de unidad de dosis para su administración oral pueden ser micro encapsuladas. La formulación también se puede preparar para prolongar o mantener la liberación, como por ejemplo recubriendo o imbuyendo material en partículas en polímeros, cera o similares. También se puede administrar agentes para su uso de acuerdo con la invención en la forma de sistemas de suministro de liposomas, tales como vesículas unílaminares pequeñas, vesículas unilaminares grandes y vesículas multilaminares. Los liposomas pueden formarse a partir de una variedad de fosfolípídos tales como colesterol, estearilamína o fosfatidilcolinas. También se puede suministrar los agentes para uso de acuerdo con la presente invención mediante el uso de anticuerpos monoclonales como portadores individuales a los cuales están acopladas las moléculas del compuesto. Los compuestos también pueden estar acoplados con polímeros solubles como portadores de fármaco apuntables. Estos polímeros pueden incluir polivinilpirrolidona, copolímero pirano, polihidroxipropilmetacrilamida-fenol, polihidroxietilaspartamidafenol, o polietilenoxidopolilisina sustituidos con residuos de palmitoilo.

Adicionalmente, los compuestos pueden estar acoplados con una clase de polímeros biodegradables útiles para lograr la liberación controlada de un fármaco, por ejemplo, ácido poliláctico, poliépsilon caprolactona, ácido polihidroxi butírico, p?liortoésteres, poliacetales, polidíhidropiranos, policíanoacrilatos y copolímeros de hidrogeles en bloque reticulados o amfifáticos. Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para la administración transdérmica pueden ser presentadas como parches discretos dirigidos a permanecer en contacto íntimo con la epidermis del receptor durante un periodo de tiempo prolongado. Por ejemplo, el ing rediente activo puede ser suministrado desde el parche mediante iontoforesis, tal como se describe en general en Pharmaceutical Research 3(6), 318 (1 986). Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para la administración tópica pueden ser formuladas como ungüentos, cremas, suspensiones, lociones, polvos, soluciones, pastas, geles, rocíos, aerosoles o aceites. Para tratamientos del ojo o de otros tejidos externos, por ejemplo boca y piel, las formulaciones preferiblemente se aplican como un ungüento o crema tópica . Cuando se formulan en un ungüento, el ingrediente activo se puede emplear ya sea con una base parafínica o con una base miscible en agua para ungüento. Alternativamente, el ingrediente activo puede ser formulado en una crema con una base para crema de aceite en agua o una base de agua en aceite.

Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para administración tópica en la boca incluyen pildoras, pastillas y enjuagues bucales. Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para administración rectal pueden ser presentadas como supositorios o como enemas. Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para administración nasal en donde el portador es un sólido incluyen un polvo grueso que tiene un tamaño de partícula por ejemplo en el rango desde 20 hasta 500 mieras, el cual se administra en la manera en la cual se toma la inspiración , es decir, mediante inhalación rápida a través del conducto nasal desde un recipiente con el polvo, que se mantiene cerca de la nariz. Las formulaciones apropiadas en donde el portador es un líquido, para su administración como un rocío nasal o como gotas nasales, incluyen soluciones acuosas o aceitosas del ing rediente activo. Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para su administración por inhalación incluyen polvos en partículas finas o rocíos que pueden ser generados por medio de diversos tipos de aerosoles presurizados, nebulizadores o rocíos de dosis medida . Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para administración vaginal pueden ser presentadas como formulaciones en pesarios, tampones, cremas, geles, pastas, espumas o rocío. Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para administración parenteral incluyen soluciones para inyección estéril acuosas y no acuosas, las cuales pueden contener anti-oxidantes, reguladores, bacteriostatos y solutos que hagan la formulación isotónica con la sangre del receptor al cual están destinadas, y suspensiones estériles y no estériles acuosas, que pueden incluir agentes suspensores y agentes espesantes. Las formulaciones pueden ser presentadas en recipientes con dosis unitarias o con dosis múltiples, por ejemplo ampollas selladas y frascos, y pueden ser almacenadas en una condición secada por congelación (liofilizadas) que solamente requiera la adición del portador líquido estéril, por ejemplo agua para inyecciones, inmediatamente antes de su uso. Las soluciones y suspensiones para inyección extemporáneas pueden ser preparadas a partir de polvos estériles, granulos y tabletas. Se debe entender que además de los ingredientes particularmente mencionados anteriormente, las formulaciones pueden incluir otros agentes convencionales en la técnica, teniendo en consideración el tipo de formulación en cuestión, por ejemplo aquellas que son apropiadas para su administración oral pueden incluir agentes saborizantes. Como se indicó, las cantidades efectivas terapéuticamente de un compuesto específico de la fórmula (I) se administran a un mamífero. Típicamente, la cantidad efectiva terapéuticamente de uno de los agentes administrados de la presente invención dependerá de una cantidad de factores, incluyendo, por ejemplo, la edad y peso del mamífero, la condición precisa que requiere tratamiento, la gravedad de la condición, la naturaleza de la formulación, y la vía de administración . Finalmente, la cantidad efectiva terapéuticamente será a discreción del médico o veterinario a cargo. Típicamente, el compuesto de la fórmula (I) se administrará en el rango desde 0.1 hasta 100 mg/kg de peso corporal del receptor (mamífero) por día, y más usualmente en el rango desde 1 hasta 10 mg/kg de peso corporal por día. Los siguientes ejemplos están dirigidos solamente a ilustración y no pretenden limitar el alcance de la invención en manera alguna. Ejemplos Como se usa aqu í, los símbolos y convenciones usados en estos procesos, esquemas y ejemplos son consistentes con los utilizados en la literatura científica contemporánea, por ejemplo, el Journal of the American Chemical Society or the Journal of Biological Chemistry. Las abreviaturas estándar de una sola letra o de tres letras se usan generalmetne para designar residuos de aminoácidos, los cuales se asume que están en configuración L, a menos que se indique otra cosa. A menos que se indique otra cosa, todos los mateirales iniciales fueron obtenidos de proveedores comerciales y usados sin purificación adicional. Específicamente, las siguientes abreviaturas pueden usarse en los ejemplos y en toda la especificación: g (gramos); mg (miligramos) I (litros); mL (mililitros) ; µL (microlitros); psi (libras por pulgada cuadrada); M (molar); mM (milimolar); N (normal); kg (kilogramo); i.v. (intravenoso); Hz (Hertz); MHz (megahertz); mol (moles); mmol(milimoles); RT (temperatura ambiente); min (minutos); h (horas); mp (punto de fusión); TLC (cromatografía de capa delgada) Tr (tiempo de retención); RP (fase inversa); DCM (diclorometano); DCE (dicloroetano); DMF (N,N-dimetilformamida); HOAc (ácido acético); TMSE (2-(trimetilsilil)etilo); TMS (trimetilsililo); TIPS (triisopropilsililo); TBS (t-butildimetilsilílo); HPLC (cromatografía líquida de alta presión); THF (tetrahidrofurano); DME (1 ,2-dimetoxietano); EDTA ácido etilendíaminotetraacétíco FBS suero fetal bovino IMDM Medio de Iscove modificado con Dulbecco IMS Espíritus metilados industriales PBS salina regulada fosfatada RPMI Roswell Park Memorial Institute RIPA buffer RT temperatura ambiente * NaCI 50 mM, Tris-HCl 50 mM, pH 7.5, 0.25% (peso/voluman) -de desoxicolato, 1% de NP-40, ortovanadato de sodio 5 mM, fluoruro de sodio 2 mM , y un coctel inhibidor de proteasa . A menos que se indique otra cosa, todas las temperaturas se expresan en °C (grados centígrados) . Todas las reacciones fueron realizadas bajo una atmósfera inerte a temperatura ambiente a menos que se indique otra cosa. GW572016F es lapatanib, cuyo nombre químico es monohidrato ditosilato de N-{3-cloro-4-[(3-fluorobencil)oxi]fenil}-6-[5-({[2- (metanosulfonil)etil}amino}metil)-2-furil]-4-quinazolinam¡na. Eiemplo 1 Preparación de GW572016F Fase 1 Una suspensión agitada de 3H-6-yodoquinazolin-4-ona (compuesto A) en tolueno (5 vol) se trató con tri-n-butílamina (1 .2 eq.) a 20 a 25°C, luego se calentó hasta 90 °C. Se le añadió oxicloruro de fósforo (1.1 equ.), luego se calentó la mezcla de la reacción por reflujo. La mezcla de la reacción se enfrió hasta 50 °C y se le añadió tolueno (5 vol). Se le añadió el compuesto C (1.03 eq.) como un sólido, y se calentó la suspensión de nuevo a 90 °C y se agitó durante 1 hora. La suspensión se transfirió a un segundo recipiente; el primer recipiente fue enjuagado con tolueno (2 vol) y combinado con la mezcla de la reacción. Se enfrió la mezcla e la reacción hasta 70 °C y se le añadió una solución de hidróxído de sodio acuoso 1.0 M (16 vol) por goteo durante 1 hora a la suspensión agitada, menteniendo la temperatura del contenido entre 68 y 72 °C. Se agitó la mezcla a 65 - 70 °C durante 1 hora y luego se enfrió hasta 20 °C durante 1 hora. Se agitó la suspensión a 20 °C durante 2 horas, el producto se recolectó por filtración, y se lavó sucesívametne con agua (3 x 5 vol) y etanol (IMS, 2 x 5 vol), luego se secó in vacuo a 50 - 60 °C. Los volúmenes se establecen con respecto a la cantidad del compuesto A usado. Rango de porcentaje de rendimiento observado: 90 a 95 % como cristales blancos o amarillos. Fase 2 H,C- _H-°H Una mezcla de N-{3-cloro-4-[(3-fluorobencil)oxi]fenil}-6-yodo- 4-quinazolinamina - Compuesto D (1 peso), ácido borónico -compuesto E (0.37 peso, 1.35 equivalente), y 10% de paladio sobre carbón (0.028 peso, 50% de humedad en agua) fue suspendida en IMS (15 vol). Se agitó la suspensión resultante durante 5 minutos, se trató con di-isopropiletílamina (0.39 vol, 1.15 equiv) y luego se calentó hasta cerca de 70 °C durante cerca de 3 horas cuando la reacción se completó (según se determinó mediante análisis de HPLC). Se diluyó la mezcla con tetrahidrofurano (THF, 15 vol), y luego se filtró en caliente para eliminar el catalizador. Se enjuagó el recipiente con IMS (2 vol). Una solución de ácido p-toluenosulfónico monohidratado (1.5 peso, 4 equiv) en agua (1.5 vol), se añadió durante 5 - 10 minutos a la solución filtrada mantenida a 65 °C. Después de la cristalización, se agitó la suspensión a 60 - 65 °C durante 1 hora, se enfrió hasta cerca de 25 °C durante 1 hora y se agitó a esta temperatura durante 2 horas adicionales. Se recolectó el sólido por filtración, se lavó con IMS (3 vol), luego se secó in vacuo a cerca de 50 °C para dar el compuesto deseado F como un sólido cristalino de color amarillo-naranja (aislado como el solvato de etanol que contenía aproximadamente 5% p/p de EtOH).

El compuesto F# (1 peso) y clorhidrato de 2-(metilsulfonil)etilamina (0.4 peso, 162 equiv.) fueron suspendidos en THF (10 vol). Secuencialmente, se le añadió ácido acético (0.354 vol., 4 equiv.) y di-isopropiletilamina (DIPEA, 1.08 vol., 4.01 equiv.). Se agitó la solución resultante a 30°-35°C durante cerca de 1 hora, luego se enfrió hasta cerca de 22°C. Luego se le añadió triacetoxiborohidruro de sodio (0.66 peso, 2.01 equiv.) luego se añadió como una carga continua durante aproximadamente 15 minutos (se observó algo de efervescencia en este punto). Se agitó la mezcla resultante a cerca de 22°C durante cercad e 2 horas, luego se muestreó por análisis con HPLC. Se extinguió la reacción medíante la adición de hidróxido de sodio acuoso (25% w/w, 3 vol) seguido por agua (2 vol) y se agitó durante cerca de 30 minutos (se observó algo de efervescencia al inicio de la adición cáustica). Luego se separó la fase acuosa, se extrajo con THF (2 vols) y se lavaron los extractos combinados de THF dos veces con 25% p/v de solución acuosa de cloruro de amonio (2 x 5 vol)2. Se preparó una solución de monohidrato de ácido p-toluenosulfónico (p-TSA, 0.74 peso, 2.5 equiv. )en agua (1 vol)1 se calentó hasta cerca de 60 °C, y se le añadieron simientes de GW572016F (Compound G) (0.002 peso). La solución en THF de la base libre de GW572016 se le añadió a la solución de p-TSA durante al menos 30 minutos, mientras se mantenía la temperatura del lote a 60 ± 3 °C. Se agitó la suspensión resultante a cerca de 60 °C durante 1 a 2 horas, se enfrió hasta 20 - 25 °C durante una hora y se dejó madurar a esta temperatura durante cerca de 1 hora. Se recolectó el sólido por filtración, se lavó con TH F:agua 95:5 (3 x 2 vol) y se secó in vacuo a cerca de 35 °C para dar GW572016F - compound G como un sólido cristalino amarillo brillante. Rendimiento esperado teórico 80%, 1 17% p/p. 1 Volumen de reacción mínimo cerca de 1 vol. 2 Volumen de reacción máximo cerca de 17 vol. * Corregido para el ensayo. Fase 4 Se calentó una suspensión de sal ditosilato monohidratada de N-{3-Cloro-4-[(3-fluorobencil)oxi]fenil}-6-[5-({[2-(metanosulfonil)etil]-amino}metil)-2-furil]-4-quinazolinamina - compound G (1 peso), en tetrahidrofurano (THF, 14 vol) y agua (6 vol) hasta cerca de 55 - 60 °C durante 30 minutos para dar una solución que fue clarificada mediante filtración y las líneas se lavaron en el recipiente para cristalización con TH F/agua (proporción 7:3, 2 vol) . Se calentó la solución resultante por reflujo y se destiló el tetrahídrofurano (9 vol, azeotropo 95% p/p con agua) a presión atmosférica. Se sembró la solución con ditosilato monohidratado de N-{3-Cloro-4-[(3-fluorobencil)oxi]fenil}-6-[5-({[2-metanosulfonil)etil]am¡no}-metil)-2-furil]-4-quinazolinamina (0.002 peso). Una vez que se estableció la cristalización (6 vol) se le añadió agua, al tiempo que se mantenía la temeratura de la reacción por encima de 55°C. Se enfrió la mezcla hasta 5 - 15 °C durante cerca de 2 horas. Se recolectó el sólido por filtración, se lavó con tetrahídrofurano/agua (proporción 3:7, 2 vol) luego con tetrahidrofurano/agua (proporción 19:1, 2 vol) y se secó in vacuo a 45 °C para dar ditosilato mono hidratado de N-{3-Cloro-4-[(3-fluorobencíl)oxi]fenil}-6-[5-({[2-(methanosulfonil)etil]amino}metil)-2-furil]-4-quinazolinamina como un sólido cristalino amarillo brillante. Eiemplo 2 Dosificación con lapatinib y docetaxel o topecan Se obtuvieron las líneas celulares en la American Type Culture Collection. Las células se mantuvieron en frascos para cultivo de tejido en RPMI 1640 (Invitrogen # 22400-089) con 10 % de suero fetal bovino (FBS, HyClone # SH30071.03) y se incubaron a 37° Celsius en una atmósfera de 5% de CO2, hasta colocarse en placas para la determinación de la IC50. Para la determinación de la IC50 las células fueron colocadas en placas en el medio apropiado a 5,000 células por receptáculo en una placa para cultivo de tejidos de 96 receptáculos y se volvió a poner en la incubadora durante la noche. Aproximadamente veinticuatro horas después de la siembra inicial, se expusieron las células a la forma sal ditosilato de GW 572016, GW 572016F solas, topotecan o docetaxel solos o GW 572016F y topotecán o docetaxel en combinación. Se dosificaron las células en 50% de RPMI y 50% de medio DMEM bajo en glucosa, que contenía FBS 5% sw, 50 microgramos/mL de gentamicina y 0.3% de DMSO . Toda la dosificación se realizó de manera concomitante, y la razón de dosis de cada agente se ajustó para reflejar aproximadamente la potencia relativa de cada agente en cada línea celular. En la mayoría de los casos, los agentes se dosificaron a una razón de dosificación fija única. En algunas instancias los datos también incluyen calores Cl generados mediante la dosificación en un formato de matriz. Se incluyeron los valores Cl de dosificación por matriz cuando la razón de dosificación en ambos formatos de dosificación fue de 1 : 1 . Véase el formato de dosificación siguiente. Después de tres días de exposición del compuesto, el medio de crecimiento se eliminó por aspiración. La biomasa celular fue estimada tiñendo las células en 0.1 mL por receptáculo de azul de metileno (Sigma #M9140, 0.5% en etanol:agua en proporción de 50:50), seguido por incubación a temperatura ambiente duante al menos 30 minutos. Se aspiró el tinte y se enjagaron las placas mediante inmersión en agua desionizada, seguido por secado al aire. Se liberó el tinte de las células medíante la adición de 0.1 mL de solución para solubilización (1 .0% de N-lauril sarcosina, sal de sodio, Sigma #L5121 en PBS). Se incubaron las placas a temperatura ambiente durante 40 minutos. Se leyó la absorbancia a 620 nM en un lector de micro-placas Tecan Spectra. Se calculó el porcentaje de inhibición de crecimiento celular con relación a los receptáculos de control no tratados. Se interpolaron los valores de IC50 usando el método de Levenberg y Marquardt (Mager, 1972) y la ecuación: y = Vmax * [1 - (xn /(Kn + xn))], en donde "K" es igual a IC50. Dosificación de razón única Concentración 0 0 Vacío oooooooooooo Compuesto A FTOOOOOO •©oooooo Compuestos A + B FOOOOOOO FOOOOOOO Compuesto B ••••©OOOOOO ••••ooooooo Vacío oooooooooooo Dosificación de matriz Fármaco A Los valores IC50 se generaron para cada agente de forma individual y en combinación. Los valores IC50 se insertaron con la ecuación del índice de combinación (Cl) de Chou y Talalay: Da,comb/Da+Db ,co b/Db, donde Da y Db son los IC50 de cada agente individual . Da com b es la cantidad de agente a en la combinación donde el efecto es 50% de inhibición . Db comb es la cantidad de agente b en la combinación donde el efecto es 50% de inhibición . Si los agentes se dosifican a una razón de 1 : 1 con respecto u no a otro , Da com b = Db com b. Los valores mayores a 1 sugieren antagonismo. Los valores menores a 1 sugieren sinerg ismo. La extensión de antagonismo o sinergismo se puede asumir pa ra ser reflejada por la diferencia del valor de 1 .0, es decir 0.5 es más sinergético que 0.8 y 2.0 es más antagon ístico que 1 .5. Es importante notar que el valor 1 .0 es una predicción de ad itívidad . Es posible para una combinación dar un efecto in hibitorio más grande que su agente por si solo, y que aun se le considere antagonista. Esto sucede cuando la magnitud del efecto combinado no es tanta como el modelo matemático hubiera predicho . Se está desarrollando otra tabla de análisis para comparar la combinación con el mejor agente ind ividual. El modelo de Chou y Talay también asume que el agente individual actúa de manera independiente o sigue caminos independientes y son mutuamente excluyentes . Utilizando un modelo que asume q ue los agentes están fu ncionando mediane el mismo mecanismo q ue GW 572016F (no excluyentes mutuamente) a umenta algunos de los valores de Cl , pero no cambia la jerarq uízación de los agentes en este juego de datos . La tabla abajo incluye los valores de índice de combinación de la determinación de Cl mutuamente excluyente y la no excluyente mutuamente.

Tabla 1 Eiemplo 3 BT474 vs. combinación de lapatinib y docetaxel Se administró lapatinib solo (200 y 100 mg/kg; SID X 21 días, o 2 días y un día antes que el docetaxel) y en combinación con docetaxelc(25 y 50 mg/kg IP, una vez a la semana X 3 semanas) a ratones con tumores BT474. En ambos experimentos, el docetaxel a 50 mg/kg solo, y en combinación con lapatínib resultó altamente efectivo. Sin embargo, en ambos experimentos, el taxotere a 25 y 50 mg/kg causó pérdida de peso después de 3 dosis semanales. En el primer experimento no hubo muertes, y en el segundo experimento h ubo una muerte en un grupo de ocho ratones que recibieron docetaxel (25 mg/kg) y lapatinib (200 mg/kg X 21 d ías) . Todos los ratones sobrevivientes recuperaron peso corporal rápidamente cuando se completó la dosis . Los g rupos de tratamiento y resultados son los siguientes.

Eiemplo 4 Estudio clínico de lapatinib en combinación con trastuzumab Se reclutó a pacientes (pts) con cáncer de mama metastásico avanzado que sobreexpresa la proteina erbB2 2+ o 3+. Confirmado por inmunohistoquímica y/o por hibridación in situ con fluorescencia. Se les administró diariamente niveles de dosis aumentables de lapatinib (750-1500 mg) 4 semanas en combinación con dosis estándar semanales de trastuzumab (4 mg/kg de dosis de carga seguida por infusiones semanales de 2 mg/kg). 3 pacientes fueron tratados en cada nivel de dosis, con expansión a 6 en el caso de toxicidad limitante de dosis. Se obtuvieron pruebas fármacocinéticas limitadas para determinar cualquier correlación entre las concentraciones pico y las toxicidades relacionadas con el tratamiento. Con una incidencia en cada uno de fatiga limitante de dosis en la clasificación 3 y náusea de clasificación 3 se reportaron por separado en el nivel de dosis de 1500 mg/d. En los clasificacións 1 y 2 diarrera, anorexia, fatiga y erupciones son las toxicidades comunes. Análisis de respuesta clínica mediante criterio RECIST se llevaron a cabo en la semana 8 y luego cada 8 semanas. Se trató a 28 pacientes (cohorte 750 - 3; cohorte 1000 - 10; cohorte 1250-10, cohorte 1500-3). El promedio de edad fue de 54 años (30-81). Se completaron 75 periodos de tratamiento (4 semanas = 1 periodo de tratamiento): media 2. 20 pacientes mostraron respuesta evaluable: 4 PR, duración 1-4 meses; 9 SD, duración 1-5 meses, y 7 PD, dentro de 1 a 6 meses.

Después de 152 periodos de tratamiento, la evaluación de respuesta fue: 5 PR, duración 1.9, 2.6, 3.9, 5.0+, y 6.7+ meses respectivamente y 1 CR de 7.7 meses. CR - respuesta completa definida como la disaparación de las lesiones objetivo. PR - respuesta parcial, definida como reducción de al menos 30% en lesiones objetivo. SD - enfermedad estable, definida como no crecimiento o algo de reducción en la lesión objetivo. Eiemplo 5 Estudio clínico de lapatinib adminsitrado en combinación con letrozole Se reclutó a pacientes con cáncer de mama avanzado, positivo por ER o PR, u otros tumores (por ejemplo, en ovarios, endometrial) que sería probable respondieran al tratamiento de combinación.

Dosis elevables de lapatinib (1250-1500 mg) se administraron q4 semanas en combinación con una dosis estándar de latrozole (2.5 mg/d). Tres pacientes (pts) fueron tratados en cada nivel de dosis, con expansión a 6 en el caso de toxicidad limitante de dosis (DLT). Se reclutó a diecisiete pacientes (17 mujeres, con media de edad de 50, rango entre 32 y 74 años; media Karnofsky PS 90%) a los dos niveles de dosis (1250 mg cohorte - 4 pts, 1500 mg cohorte - 13 pts). Se completaron 33 periodos (4 semanas = 1 periodo) de tratamiento: media 2. Se reportó un incidente de DLT (diarrea de clasificación 3) al nivel de dosis de 1500 mg/d. El régimen óptimamente tolerado fue determinado como letrozole 2.5 mg + lapatinib 1500 mg/d. Las toxicidades no hematológicas fueron diarrea 1 -2, náusea, erupciones y fatiga. De 16 pacientes evaluables, 3 pacientes experimentaron SD por = 2 meses (mama, 1 pt, vejiga - 1 pt endometrial - 1 pt y cervical - 1 pt) y 4 pacientes han experimentado PD a entre 2 y 4 meses. Eiemplo 6 Estudio clínico de lapatini b en combinación con capecitabina Se realizó un estudio de Fase I en dos partes combinando lapatiníb con capecitabina en 45 pacierntes (pts) con tumores sólicos avanzados: (A) fase de aumento de dosis (24 pts) y (B) fase farmacocínética en el régimen tolerado óptimamente (OTR) (21 puntos) : M/F (23:22) edad media 57 años (34-78), ECOG (0/1 /2:29/13/3), pretratados fuertemente:ligeramente (23:22), tipos de tumor (cabeza y cuello (8), mama (8), colorectal (7), pulmón (6) , otros (16)) y ciclo medio 3 (1 -9). Los pacientes fueron tratados con 14 días de capecitabina (C) (1500-2500 mg/m2) y lapatinib diariamente (L) (1250-1500 mg) cada 3 semanas. Las toxicidades limitantes de la dosis (DLT) fueron : mucositis de clasificación 3, fatiga y anorexia-1250 L/2000 C(n = 1 ); erupción de clasificación 3 (n = 1 ), diarrea de clasificación 3 (N = 1 )- 1 500 L/2000 C y estomatitis sangrante de clasificación 2 (N = 1 ), diarrea de clasificación 3 (n = 1 )- 1250 L/2500 C. Otras toxicidades incluyeron estomatitis (36%), náusea/vómitos (30%), diarrea (45%), hiperbilirubinemia no conjugada (14%), fatiga (19%), erupción (38%) , y síndrome de mano - pie (29%). El OTR fue de 1250 L/2000 C. Las respuestas (criterios RECIST) incluyeron 1 CR en una mujer con cáncer de mama inflamatorio refractario al trastuzimab y a la quimioterapia. Su tumor sobreexpresó ErB2 (3+) con TS bajo. Además, se observaron 4 PR (1 de cabeza y cuello resistente a erlotinib; cabeza y cuello refractario a taxano; mama; gástrico) y 6 SD >12 semanas. Eiemplo 7 Combinación de Lapatinib con un inhibidor de Bcl-2 Se examinó el efecto de una combinación de lapatinib con un inhibidor de Bcl-2 (HA14-1) en el crecimiento de células cancerosas de mama humana MCF-7, una línea celular MCF-7 transfectada con HER-2/neu y una línea celular MCF-7 resistente a tamoxifén (TAM). Se determinó el crecimiento celular determinado usando el análisis con color tetrazolio MTT. A las células se les asignaron dosis con Lapatínib y HA14-1 como monoterapías. Tanto el lapatinib (1-10 uM) como el HA14-1 (1-10 uM) dieron inhibición de crecimiento dependiente de la dosis en cada una de las 3 líneas celulares. El tratamiento con la combinación de lapatinib inhibidor de EGFR/erbB-2 y con el HA14-1 inhibidor de Bcl-2 dio como resultado inhibición sinérgica del crecimiento en las 3 líneas celulares.

Claims (8)

REIVIN DICACIONES

1 . Un método para tratar un cáncer de mama en un mamífero, que comprende: administrar a dicho mamífero cantidades efectivas terapéuticamente de (i) un compuesto de la fórmula (I")

") • [H20] . y (ii) trastuzumab. 2. Un método para tratar cáncer de mama en un mamífero, que comprende: adminsitrar a dicho mamífero cantidades efectivas terapéuticamente de (i) un compeueto de la fórmula (I") (i") •[H20] . y (ii) letrozole.

3. Un método para tratar cáncer de mama en un mamífero, que comprende: adminsitrar a dicho mamífero cantidades efectivas terapéuticamente de (i) un compuesto de la fórmula (I") O") •[H20] . y (ii) capecitabina.

4. Un método para tratar cáncer de mama en un mamífero, que comprende: administrar a dicho mamífero cantidades efectivas terepéuticamente de (i) un compuesto de la fórmula (I") (I") »[H20] . y (ii) topotecan

5. Un método para tratar cáncer de pulmón en un mamífero, que comprende: administrar a dicho mamífero cantidades efectivas terapéuticamente de (i) un compuesto de la fórmula (I") (i") >[H20J . y (ii) docetaxel.

6. Un método para tratar cáncer de pulmón en un mamífero, que comprende: administrar a dicho mamífero cantidades efectivas terapéuticamente de (i) un compuesto de la fórmula (I") (i") >[H20] . y (ii) topotecan.

7. Un método para tratar cáncer colorectal en un mamífero, que comprende: administrar a dicho mamífero cantidades efectivas terapéuticamente de (i) un compuesto de la fórmula (I") (!") »[H20] . y (ii) topotecan.

8. Un método para tratar cáncer de mama en un mamífero, que comprende: administrar a dicho mamífero cantidades efectivas terapéuticamente de (i) un compuesto de la fórmula (I") (i") »[H20] . y (ii) un compuesto anti-estrógeno.