MXPA06006045A - Agentes formadores de imagen novedosos. - Google Patents

Abstract

La presente invencion se refiere a agentes formadores de imagen de diagnostico. Los agentes formadores de imagen comprenden un inhibidor de caspasa-3 sintetico marcado con una porcion formadora de imagen adecuada para la formacion de imagenes de diagnostico, in vivo. La invencion tambien proporciona composiciones farmaceuticas y radiofarmaceuticas que comprenden los agentes formadores de imagen, con equipos para la preparacion de los radiofarmaceuticos. Tambien se describen conjugados de quelatador del inhibidor de caspasa-3, los cuales son adecuados para la preparacion de agentes formadores de imagen que comprenden un ion metalico radioactivo o paramagnetico. Los agentes formadores de imagen son utiles para la formacion de imagenes de diagnostico y/o verificacion de terapia in vivo de varios estados de enfermedad en donde esta involucrada la caspasa-3.

Description

AGENTES FORMADORES DE IMAGEN NOVEDOSOS Campo de la invención La presente invención se refiere a agentes formadores de imagen diagnósticos para formación de Imagen ¡n vivo. Los agentes formadores de imagen comprenden un Inhibidor de caspasa-3 sintético marcado con una porción formadora de imagen adecuada para formación de imágenes de diagnóstico in vivo.

Antecedentes de la invención La muerte celular programada por apoptosls es un proceso complejo que involucra un gran número de procesos celulares con numerosos niveles de control. Se inicia con una de dos rutas. La primera es a través de una ruta extrínseca iniciada vía una receptor de muerte de superficie celular y la segunda es a través de iniciadores intrínsecos, tales como daño de DNA por radiación UV. Ambas rutas culminan en la muerte coordinada de células, lo cual requiere energía y, a diferencia de la muerte celular por necrosis, no Involucra una respuesta Inflamatoria. Las células comprometidas por apoptosis presentan señales de "cómeme" en su superficie celular, lo cual invita a otras células a consumirlas por fagocitosis. La apoptosis es un caso crítico en numerosos procesos dentro del cuerpo. Por ejemplo, el desarrollo embriónico depende totalmente de la apoptosis, y los tejidos que cambian rápidamente requieren una regulación estrecha para evitar serias consecuencias patológicas. La falla para regular la apoptosis puede dar lugar a cáncer (muerte celular insuficiente) y neuropatologías, tales como enfermedad de Alzheimer (demasiada muerte celular). Adlcionalmente, la apoptosls también puede ser Indicativa de tejidos dañados, tales como áreas dentro del corazón siguiendo ataques de reperfusión/isquemia. Annexin-5 es una proteína humana endógena (RMM 36 kDa), ia cual se une a la fosfatldilserlna (PS) en la membrana externa de células apoptóticas con una afinidad de alrededor 10"9 M. Se ha usado Annexin-5 marcada con 99mTc para formar imágenes de apoptosis in vivo [Blankenberg et al, J. Nucí. Med. , 40, 184-191 (1999)]. Sin embargo, existen varios problemas con esta aproximación. Primero, Annexin-5 también puede entrar células necróticas para unirse a PS expuesta en la hojuela Interna de la membrana celular, lo cual podría conducir a resultados positivos falsos. Segundo es la alta actividad de depósito de sangre, la cual se mantiene durante al menos dos horas después de la Inyección de annexin-5 marcada. Esto significa que el tiempo óptimo de formación de imagen está entre 1 0 y 15 h después de la inyección [Reutelingsperger et al, J. Immunol. Meth. , 265 (1 -2), 123-32 (2002)], haciéndola inadecuada para toma de decisión clínica en pacientes con síndromes coronarios agudos. Adicionalmente, la clarificación de annexln-5 ocurre vía el riñon y el hígado, con una muy fuerte señal de respaldo en las regiones abdominales. Esto hace imposible la formación de imagen de muerte celular abdominal (por ejemplo, en monitoreo de tumor y transplantes de riñon). WO 01 /89584 describe en los Ejemplos 16 a 18 y 21 , que un conjugado quelante del tetrapéptido de substrato de caspasa-3 (DEVD (es decir, Asp-Glu-Val-Asp) puede ser útil para formación de imagen in vivo de tejido apoptótlco usando MRI o centellografía. Haberkorn et al [Nucí. Med. Biol. , 28, 793-798 (2001 )] estudiaron el inhibidor de pan-caspasa, Z-VAD-fmk, es decir, benciloxIcarbonll-Val-Ala-DL-Asp(O-metll)-fluorometllcetona marcada con el radioisótopo 131 l como un agente de formación de imagen de apoptosis potencial. Encontraron que la captación celular absoluta del agente es baja y esto se atribuye a que atrapa solamente una molécula inhibidora por caspasa activada. Concluyeron que un substrato de caspasa marcado no debería sufrir de este problema y sería una mejor aproximación para un agente formador de imagen. Los radiofarmacéuticos para formación de imagen de apoptosis han sido revisados por Lahorte et al [Eur. J. Nucí. Med. , 31 , 887-919 (2004)]. Por lo tanto, existe la necesidad de un agente formador de imagen de apoptosis, lo cual permite la formación de imagen rápida (por ejemplo, dentro de una hora de inyección), y con buena clarificación de la sangre y órganos de respaldo.

La presente invención Se ha encontrado ahora que los inhibidores de caspasa-3 sintéticos marcados con una porción formadora de imagen son agentes formadores de imagen diagnósticos útiles para ¡magenología in vivo de esas enfermedades del cuerpo mamífero donde está involucrada apoptosis anormal, especialmente apoptosis excesiva.

La porción formadora de imagen puede ser radioactiva (por ejemplo, un ion de metal radioactivo, un halógeno radioactivo emisor de gamma o un no metal radioactivo emisor de positrones) o no radioactivo (por ejemplo, un ion metálico paramagnético, un núcleo NMR-actlvo hiperpolarizado o un tinte óptico adecuado para ¡magenología in vivo). La apoptosis excesiva está asociada con un amplio rango de enfermedades humanas y la importancia de caspasas en la progresión de muchos de estos desórdenes ha sido demostrada. De ahí, los agentes formadores de imagen de la presente invención son útiles para la imagenología diagnóstica in vivo y/o verificación de terapia en un rango de estados de enfermedad, los cuales incluyen: (a) desórdenes agudos, tal como respuesta a lesión de reperfusión/isquemia cardíaca y cerebral (por ejemplo, infarto miocardíaca o apoplejía respectivamente), lesión de médula espinal, lesión cerebral traumática, rechazo de órgano durante el transplante, degeneración de hígado (por ejemplo, hepatitis), sepsis y meningitis bacteriana; (b) desórdenes crónicos, tales como enfermedades neurodegenerativas (por ejemplo, enfermedad de Alzheimer, enfermedad de Huntington, síndrome de Down, atrofia muscular espinal, esclerosis múltiple, enfermedad de Parkinson), enfermedades de inmunodeficiencia (por ejemplo, HIV), artritis, aterosclerosis y diabetes; (c) El monitoreo de eficacia de agentes usados para inducir apoptosls en cáncer, tales como: de vejiga, pecho, colon, endometrio, cabeza y cuello, leucemia, de pulmón, melanoma, llnfoma no de Hodgklns, de ovario, próstata y recto.

Descripción detallada de la invención En un primer aspecto, la presente Invención proporciona un agente formador de imagen el cual comprende un inhibidor de caspasa-3 sintético marcado con una porción formadora de imagen, en donde el inhibidor de caspasa-3 tiene una K¡ para caspasa-3 de menos de 2000 nM, y en donde siguiendo la administración de dicho inhibidor de caspasa-3 marcado al cuerpo de mamífero in vivo, la porción formadora de Imagen puede ser ya sea detectada externamente en una manera no invasiva o mediante el uso de detectores diseñados para uso in vivo, tal como radiación intravascular o detectores ópticos (por ejemplo, endoscopios), o detectores de radiación diseñados para uso ¡ntra-operativo. Al menos catorce diferentes caspasas han sido identificadas en humanos hasta la fecha, las cuales son designadas caspasa-1 , caspasa-2, etc. Las caspasas han sido categorizadas en tres categorías funcionales principales: Caspasas de Grupo I (por ejemplo, caspasa-1 , -4, -5 y -13), las cuales están involucradas predominantemente en la ruta de respuesta inflamatoria; Caspasas de Grupo ll (por ejemplo, caspasa-3, -6 y -7), las cuales son las caspasas efectoras o "ejecutadoras"; Caspasas de Grupo III (por ejemplo, caspasa-8, -9 y -2), las cuales son las caspasas iniciadoras. La presente invención se refiere a inhibidores de caspasa-3, los cuales también son conocidos como CPP32, y es una proteasa de cisteína de 29 kDa.

Los agentes formadores de imagen adecuados de la presente invención exhiben buena permeabilidad de membrana celular, y de ahí son capaces de enfocar la caspasa-3, la cual es una enzima intracelular. Para facilitar el transorte de membrana celular, los agentes formadores de Imagen de la presente Invención pueden comprender opcionalmente un "péptido líder", como se define más adelante. Los agentes formadores de imagen preferidos no experimentan un metabolismo fácil in vivo y de ahí muy preferiblemente exhiben una vida media in vivo de 60 hasta 240 min en humanos. El agente formador de imagen es excretado de preferencia vía el riñon (es decir, exhibe excreción urinaria). El agente formador de imagen de preferencia exhibe una proporción de señal-a-respaldo a focos apoptóticos de al menos 1 .5, muy preferiblemente al menos 5, siendo especialmente preferido al menos 10. Cuando la porción formadora de imagen es radioactiva, la clarificación de una mitad del nivel pico de agente formador de imagen el cual está ya sea ligado de manera no específica o libre in vivo, de preferencia ocurre sobre un periodo menor que o igual a la vida media de declinación radioactiva del radioisótopo. El peso molecular del agente formador de imagen es adecuadamente hasta 5000 Daltones. De preferencia, el peso moleuclar está en el rango de 150 hasta 3000 Daltones, muy preferiblemente 200 hasta 1500 Daltones, prefiriéndose especialmente 300 hasta 800 Daltones. Los inhibidores de caspasa-3 sintéticos adecuados de la presente invención exhiben una K¡ para caspasa-3 de menos de 2000 nM. La caspasa-3 puede ser expresada en casi todos los tejidos a altos niveles en relación a otras caspasas y exhibe una alta actividad catalítica comparada con otras caspasas de Grupo I I. Sin embargo, la caspasa-3 es expresada solamente en forma activa durante la apoptosis. Esto forma la base de los inhibidores marcados de la presente invención que son agentes formadores de imagen viables con buena señal-a-ruido. La constante de inhibición K¡ es la constante de disociación para la combinación enzima-inhibidor [Lehninger, A. L. , Nelson, D. L. y Cox, M.M. (1993) Principies of Biochemlstry (Principios de bioquímica) (2a ed.) Worth, New York Stryer, L. (1995) Biochemistry (4a ed.) Freeman, New York]. De preferencia, el Inhibidor tiene una K¡ para caspasa-3 de menos de 500 nM, muy preferiblemente menos de 100 nM. Los inhibidores de caspasa-3 sintéticos de la presente invención también son de preferencia selectivos para caspasa-3 sobre otras caspasas. Tales inhibidores selectivos exhiben de manera adecuada una mayor potencia para caspasa-3 sobre caspasa-1 , definida por K¡, de un factor de al menos 50, de preferencia al menos 100, muy preferiblemente al menos 500. Los inhibidores de caspasa-3 sintéticos preferidos de la presente invención son irreversibles, es decir, se unen covalentemente a la enzima. Debido a que la caspasa-3 es una enzima intracelular, Inhibidores de caspasa-3 preferidos exhiben buena permeabilidad de membrana celular, es decir, son transportados de manera eficiente a través de membranas celulares de mamífero in vivo. A este respecto, los inhibidores no peptídicos son preferidos. El término "marcado con" signfica que ya sea el Inhibidor de caspasa-3 por sí mismo comprende la porción formadora de imagen, o la porción formadora deimagen está unida como una especie adicional, opcinalmente vía un grupo enlazador, como se describe para la Fórmula I a continuación. Cuando el inhibidor de caspasa-3 por sí mismo comprende la porción formadora de imagen, esto significa que la "porción formadora de Imagen" forma parte de la estructura química del inhibidor, y es un isótopo radioactivo o no radioactivo presente a un nivel significativamente por arriba del nivel de abundancia natural de dicho isótopo. Tales niveles elevados o enriquecidos de isótopo son adecuadamente al menos 5 veces, de preferencia al menos 10 veces, muy preferiblemente al menos 20 veces; y de manera ideal ya sea al menos 50 veces el nivel de abundancia natural del isótopo en cuestión, o está presente a un nivel donde el nivel de enriquecimiento del isótopo en cuestión es 90 a 100%. Ejemplos de inhibidores de caspasa-3 comprendiendo la "porción formadora de imagen" como se describe más adelante, pero incluyen grupo CH3 con niveles elevados de 3C o 1 1C y fluoroalquilo con niveles elevados de 18F, de manera que la porción formadora de imagen es 13C, 1 1C o 18F marcado isotópicamente dentro de la estructura química del inhibidor de caspasa-3. los radioisótopos 3H y 1 C no son porciones formadoras de imagen adecuadas. La "porción formadora de Imagen" puede ser detectada ya sea externa al cuerpo de mamífero o vía el uso de detctores diseñados para uso in vivo, tal como radiación intravascular o detectores ópticos, tales como endoscopios, o detectores de radiación diseñados para uso ¡ntra-operativo. Las porciones formadoras de imagen preferidas son aquéllas que pueden ser detectadas externamente en una manera no invasiva siguiendo la administración in vivo. La "porción formadora de imagen" es elegida de preferencia de: (i) un ion metálico radioactivo; (i¡) un ion metálico paramagnético; (iii) un halógeno radioactivo emisor de gamma; (iv) un no metal radioactivo emisor de positrones; (v) un núcleo NMR-activo hlperpolarizado; (vi) un tinte óptico adecuado para formación de imagen in vivo. Las porciones formadoras de imagen más preferidas son radioactivas, especialmente iones metálicos radioactivos, halógenos radioactivados emisores de gamma y no metales radioactivos emisores de positrones, en particular aquéllos adecuados para formación de imagen usando SPECT o PET. Cuando la porción formadora de imagen es un ion metálico radioactivo, es decir, un radiometal. El término "radiometal" incluye elementos de transición radioactivos más lantánidos y actínidos, y elementos metálicos de grupo principal. Los seml-metales arsénico, selenio y telurio son excluidos del panorama. Los radlometales adecuados pueden ser emisores de positrones, tales como 6 Cu, 48V, 52Fe, 55Co, 9 mTc o 68Ga; o ?-emlsores, tales como 99mTc, 11 1 ln, 113mln, 67Cu o 67Ga. Los radiometales preferidos son 99 Tc, 64Cu, 68Ga e 1 11 ln. Los radiometales más preferidos son ?-emisores, especialmente 99 Tc. Cuando la porción formadora de imagen es un ion metálico paramagnético, tales iones metálicos adecuados incluyen: Gd(lll), Mn(ll), Cu(ll), Cr(l ll), Fe(lll), Co(l l), Er(ll), Ni(l l), Eu(ll l) o Dy(ll l). Los iones metálicos paramagnéticos preferidos son Gd(ll l), Mn(ll) y Fe(lll), prefiriéndose especialmente Gd(lll). Cuando la porción formadora de imagen es un halógeno radioactivo gamma-emisor, el radiohalógeno es elegido adecuadamente de 123l, 131 l o 77Br. Un halógeno radioactivo gamma-emisor preferido es 123l. Cuando la porción formadora de imagen es un no metal radioactivo emisor de positrones, tales emisores de positrones adecuados incluyen: 11C, 3N , 17F, 18F, 75Br, 76Br o 124l . Los no metales radioactivos emisores de positrones preferidos son 1 1C, 13N, 124l y 18F, especialmente 1 1C y 18F, muy especialmente 18F. Cuando la porción formadora de imagen es un núcleo NMR-activo hiperpolarlzado, tales núcleos NMR-activos tienen un giro nuclear no de cero, e Incluyen 13C, 15N, 19F, 29Si y 31 P. De éstos, se prefiere 13C. Por el término "hiperpolarizado" significa intensificación del grado de polarización del núcleo NMR-activo sobre su polarización de equilibrio. La abundancia natural de 13C (en relación a 2C) es aproximadamente 1 % y compuestos marcados con 13C adecuados son enriquecidos de manera adecuada a una abundancia de al menos 5%, de preferencia al menos 50%, muy preferiblemente al menos 90% antes de ser hiperpolarizado. Al menos un átomo de carbono de un substltuyente conteniendo carbono del inhibidor de caspasa-3 de la presente invención es enriquecido de manera adecuada con 13C, que subsecuentemente es hiperpolarizado. Cuando la porción formadora de imagen es un reportador adecuado para imagenología óptica in vivo, el reportador es cualquier porción capaz de detección, ya sea directa o indirectamente en un procedimiento de imagenología óptica. El reportador pudiera ser un dispersor de luz (por ejemplo, una partícula coloreada o no coloreada), un absorbedor de luz o un emisor de luz. Más preferiblemente, el reportador es un tinte, tal como un cromóforo o un compuesto fluorescente. El tinte puede ser cualquier tinte que interactúa con luz en el espectro electromagnético con longitudes de onda de la luz ultravioleta a infrarrojo cercano. Muy preferiblemente, el reportador tiene propiedades fluorescentes. Los reportadores cromofóricos y fluorofóricos orgánicos preferidos incluyen grupos teniendo un sistema de electrones deslocalizado extenso, por ejemplo, cianinas, merocianinas, indocianinas, ftalocianinas, naftalocianinas, trifenilmetinas, porfirinas, tintes de pirilio, tintes de tiapirilio, tintes de escuarilio, tintes de croconio, tintes de azúlenlo, ¡ndoanilinas, tintes de benzofenoxazinio, tintes de benzotiafenotiazinio, antraqulnonas, naftoqulnonas, indatrenos, ftaloilacridonas, trlsfenoquinonas, tintes azo, tintes de transferencia de carga intramolecular e intermolecular y complejos de tintes, troponas, tetrazlnas, complejos de bis(ditioleno), complejos de bis(benceno-ditiolato), tintes de yodoanilina, complejos de bis(ditioleno), complejos de bis(benceno-ditiolato), tintes de yodoanilina, complejos de bis(S,O-ditioleno). Las proteínas fluorescentes, tales como proteína fluorescente verde (GFP) y modificaciones de GFP que tienen diferentes propiedades de absorción/emisión también son útiles. Los complejos de ciertos metales de tierras raras (por ejemplo, europio, samario, terbio o disprosio) son usados en ciertos contextos, ya que son nanocristales fluorescentes (puntos de quantum). Ejemplos particulares de cromóforos que pueden ser usados Incluyen: fluoresceína, sulforohadmlna 101 (rojo Texas), rodamina B, rodamina 6G, rodamina 19, verde indocianina, Cy2, Cy3, Cy3.5, Cy5, Cy5.5, Cy7, Marina Blue, Pacific Blue, Oregon Green 88, Oregon Green 514, tetrametilrodamina, y Alexa Fluor 350, Alexa Fluor 30, Alexa Fluor 532, Alexa Fluor 546, Alexa Fluor 555, Alexa Fluor 568, Alexa Fluor 594, Alexa Fluor 633, Alexa flúor 647, Alexa Fluor 660, Alexa Fluor 680, Alexa Fluor 700 y Alexa Fluor 750. Son particularmente preferidos los tintes que tienen absorción máxima en la región visible o infrarroja cercana, entre 400 nm y 3 µm, en particular entre 600 y 1300 nm. Las modalidades formadoras de Imagen ópticas y técnicas de medición Incluyen, pero no están limitadas a: imagenelogía de luminiscencia; endoscopía; endoscopía de fluorescencia; tomografía de coherencia óptica; imagenología de transmitancia; imagenología de transmitancia resuelta por tiempo; imagenología confocal; microscopía no lineal; imagenología fotoacústica; imagenología acusto-óptica; espectroscopia; espectroscopia de reflectancia; interferometría; interferometría de coherencia; tomografía óptica difusa y tomografía óptica difusa medianía por fluorescencia (sistemas de dominio de frecuencia, dominio de tiempo y onda continua), y medición de dispersión de luz, absorción, polarización, luminiscencia, tierno de vida de fluorescencia, rendimiento de quantum y extinción. Los agentes formadores de imagen de la presente invención son de preferencia de fórmula I : [{inhibidor}-(A)n]-[péptido líder]m-Xa '[porción formadora de imagen] (Fórmula I) donde: {Inhibidor} es el Inhibidor de caspasa-3 de la presente Invención; [péptido líder] es un péptido transportador de membrana celular de péptido de 4 a 20 meros, el cual es conjugado ya sea por su extremo de amina o carboxilo; -(A)n- es un grupo enlazador, en donde cada A es independientemente -CR2-, -CR=CR-, -C=C-, -CR2C02-, -CO2CR-2, -NRCO-, -CONR-, -NR(C=O)NR-, -NR(C=S)NR-, -S02NR-, -NRSO2-, -CR2OCR2-, -CR2SCR2-, -CR2NRCR2-, un grupo cicioheteroalquileno de C4-8, un grupo clcloalqulleno de C4-8, un grupo arileno de C5-?2, o un grupo heteroarileno de C3-12, un aminoácido, un azúcar o un bloque constructor de polietilenglicol (PEG) monodisperso; R es elegido independientemente de H, alquilo de C1-4, alquenilo de C2- , alquinilo de C2-4, alcoxialquilo de C?_4 o hidroxialquilo de C1-4; n es un entero de valor 0 a 10, m es 0 o 1 ; y Xa es H, OH, Hal, NH2, alquilo de C1 -4, alcoxi de C1 -4, alcoxialquilo de C1-4, hidroxialquilo de C1-4 o Xa es la porción formadora de imagen.

Como se muestra en la Fórmula I, los compuestos de la presente Invención son "marcados con" una porción formadora de imagen. Como se define antes, esto significa que uno o más del {inhibidor}, grupo enlazador- (A)n o péptido líder, ya sea comprende o tiene conjugada al menos una "porción formadora de imagen". De preferencia, el inhibidor de caspasa-3 o el grupo enlazador está unido a o comprende la porción formadora de imagen. El "péptido líder" de la presente invención es un péptido de 4 a 20 meros, el cual facilita el transporte de membrana celular. Esto es Importante debido a que la caspasa-3 es una enzima intracelular, y de ahí los agentes formadores de imagen deben ser capaces de cruzar membranas celulares. Sin embargo, el "péptido líder" no proporciona enfoque biológico in vivo. Los péptidos líderes adecuados son conocidos en la técnica, e incluyen: péptidos Tat, derivados de taquilplesina y derivados de protegrina. Secuencias de "péptido líder" específicas y referencias a las mismas están dadas a continuación: Tabla 1 : Péptidos líderes Los "péptidos líderes" preferidos son péptidos Tat, derivados de taquilplesina y derivados de protegrina. Los más preferidos son derivados de taquilplesina y derivados de protegrina. Por el término "aminoácido" se quiere decir un L- o D-aminoácido, análogo de aminoácido (por ejemplo naftilalanina) o imitador de aminoácido, el cual pueda ocurrir de manera natural o de origen puramente sintético, y puede ser ópticamente puro, es decir, un enantiómero simple y de ahí quiral, o una mezcla de enantiómeros. De preferencia, los aminoácidos de la presente invención son ópticamente puros. Por el término "azúcar" se quiere decir, un mono-, di- o tri-sacárido. Los azúcares adecuados incluyen: glucosa, galactosa, maltosa, mañosa y lactosa. De manera opcional, el azúcar puede ser funcionalizado para permitir el fácil acoplamiento a aminoácidos. De esta manera, por ejemplo, un derivado de glucosamina de un aminoácido puede ser conjugado con otros aminoácidos vía enlaces de péptido. El derivado de glucosamina de asparagina (comercialmente disponible de Novabiochem) es un ejemplo de esto: En la Fórmula I , Xa es de preferencia la porción formadora de imagen. Esto tiene la ventaja de que el grupo enlazador -(A)n- de Fórmula I separa la porción formadora de imagen del sitio activo del inhibidor de metaloproteinasa. Esto es particularmente importante, cuando la porción formadora de imagen es relativamente voluminosa (por ejemplo, un complejo de metal o un átomo de radioyodo), de manera que la unión del inhibidor a la enzima de caspasa no es deteriorada. Esto puede lograrse mediantela combinación de flexibilidad (por ejemplo, cadenas de alquilo simples), de manera que el grupo voluminoso tiene la libertad para posicionarse lejos del sitio activo y/o la rigidez tal como un separador de cicloalquilo o arllo, el cual orienta el complejo de metal lejos del sitio activo. La naturaleza del grupo enlazador también puede ser usada para modificar la biodistribuclón del agente formador de imagen. De esta manera, por ejemplo, la introducción de grupos de éter en el enlazador ayudará a minimizar la unión de proteína de plasma. Cuando -(A)n-comprende un bloque constructor de polietilenglicol (PEG) o una cadena de péptido de 1 a 1 0 residuos de aminoácidos, el grupo enlazador puede funcionar para modificar la farmacocinétlca y velocidades de clarificación de sangre del agente formador de imagen in vivo. Tales grupos enlazadores "biomodificadores" pueden acelerar la clarificación del agente formador de imagen del tejido de respaldo, tal como músculo o hígado, y/o de la sangre, dando así una mejor imagen de diagnóstico debido a menos interferencia de respaldo. Un grupo enlazador biomodificador también puede ser usado para favorecer una ruta de excreción particular, por ejemplo, vía los ríñones como se opone a vía el hígado. Cuando -(A)n- comprende una cadena de péptido de 1 a 10 residuos de aminoácidos, los residuos de aminoácidos son elegidos de preferencia de glicina, lisina, ácido aspártico, ácido glutámico o serina. Cuando -(A)n-comprende una porción de PEG, de preferencia comprende unidades derivadas de la oligomerización de las estructuras similares a PEG monodispersas de las Fórmulas HA o MB: (IJA) Acido 17-amino-5-oxo-6-aza-3,9, 12,15-tetraoxaheptadecanoico de Fórmula HA en donde p es un entero de 1 a 10 y donde la unidad C-terminal (*) está conectada a la porción formadora de imagen. De manera alternativa, una estructura similar a PEG basada en un derivado de ácido propiónico de Fórmula IIB puede ser usada: <?B) donde p es como se define para la Fórmula HA y q es un entero de 3 a 15. En la Fórmula I IB, p es de preferencia 1 o 2, y q es de preferencia 5 a 12. Cuando el grupo enlazador no comprende PEG o una cadena de péptido, los grupos -(A)n- preferidos tienen una cadena de esqueleto de átomos enlazados, los cuales forman la porción -(A)n- de 2 a 10 átomos, muy preferiblemente 2 a 5 átomos, prefiriéndose especialmente 2 o 3 átomos. Una cadena de esqueleto de grupo enlazador mínimo de 2 átomos confiere la ventaja de que la porción formadora de imagen está bien separada del Inhibidor de caspasa-3 de manera que cualquier interacción sea minimizada. Los grupos enlazadores no de péptldo, tales como grupos de alquileno o grupos de arileno tienen la ventaja de que no existen interacciones de unión de hidrógeno significativas con el inhibidor de caspasa-3 conjugado, de manera que el enlazador no se envuelve sobre el inhibidor. Los grupos separadores de alquileno preferidos son -(CH2)q-, donde q es 2 a 5. Los separadores de arileno preferidos son de fórmula: donde: a y b son independientemente 0, 1 o 2. El grupo enlazador -(A)n- de preferencia comprende una porción de ácido diglicóllco, una porción de maleimida, un ácido glutárico, ácido succínico, una unidad basada en polietilenglicol o una unidad similar a PEG de Fórmula HA. Cuando la porción formadora de imagen comprende un ion metálico, el ion metálico está presente como un complejo de metal. Tales conjugados de inhibidor de caspasa-3 con iones metálicos son, por lo tanto, de manera adecuada de Fórmula la: [{inhibidor}-(A)n]-[péptido líder]m-Xe '[complejo metálico] (Fórmula la) donde: A, n, m y Xa son como se define para la Fórmula I anterior. Por el término "complejo metálico" se quiere decir un complejo de coordinación del ion metálico con uno o más ligandos. Se prefiere fuertemente que el complejo metálico es "resistente a la trasquelación", es decir no experimenta fácilmente intercambio de ligando con otros ligandos potencialmente competitivos para los sitios de coordinación de metal. Los ligandos potenclalmente competitivos incluyen el inhibidor de caspasa-3 por sí mismo más otros excipientes en la preparación in vitro (por ejemplo, radioprotectores o conservadores antimicrobianos usados en la preparación), o compuestos endógenos in vivo (por ejemplo, glutationa, transferina o proteínas de plasma). El complejo metálico está unido de preferencia al grupo enlazador -(A)n- o a uno de los residuos de aminoácidos del péptido líder. El complejo metálico está unido más preferiblemente a uno de los residuos A más lejanos del inhibidor, de manera que un péptido líder también puede estar presente por ya sea unión en el residuo A terminal del grupo enlazador, o por ramificación de un residuo A no terminal. Los complejos metálicos de Fórmula la son derivados de conjugados de ligandos de Fórmula Ib: [{inhibidor}-(A)n]-[péptido líder]m-Xe "[ligando] (Fórmula Ib) donde: A, n, m y Xa son como se define para la Fórmula I anterior. Los ligandos adecuados para usarse en la presente invención, los cuales forman complejos metálicos resistentes a la transquelación incluyen: agentes quelantes, donde 2-6, de preferencia 2-4, átomos donadores de metal están dispuestos de manera que resulten anillos quelados de 5 o 6 miembros (al tener un esqueleto no-coordinante de ya sea átomos de carbono o heteroátomos no coordinantes que enlacen los átomos donadores de metal); o llgandos monodentados, los cuales comprenden átomos donadores los cuales se unen fuertemente al ion metálico, tal como isonitrilos, fosfinas o diazenldas. Ejemplos de tipos de átomos donadores los cuales se ligan bien a metales como parte de agentes quelantes son: aminas, tioles, amidas, oximas y fosfinas. Las fosfinas forman tales complejos de metales fuertes, que Incluso fosflnas monodentados o bidentados forman complejos de metales adecuados. La geometría lineal de isonitrilos y dlazenidas es tal que no se prestan fácilmente a Incorporación en agentes quelantes, y de ahí son normalmente usados como ligandos monodentados. Ejemplos de isonitrilos adecuados incluyen alquil isonitrilos simples, tales como ter-butilisonitrllo, e ¡sonltrilos substituidos con éter, tal como mibi (es decir, 1-¡sociano-2-metoxi-2-metilpropano). Ejemplos de fosfinas adecuadas Incluyen Tetrofosmin y fosfinas monodentadas, tal como tris(3-metoxipropll)fosfina. Ejemplos de diazenidas adecuadas incluyen la serie HYNIC de ligandos, es decir, nlcotinamidas o plridinas substituidas con hidrazina. Ejemplos de agentes quelantes adecuados para tecnecio, los cuales forman complejos de metales resistentes a transquelación incluyen, pero no están limitados a: (i) diamlnodioximas de fórmula: donde E1-E6 son cada uno independientemente un grupo R'; cada R' es H o alquilo de C?-10, alquilarilo de C3-10, alcoxialqullo de C2-10, hidroxialquilo de C1 -10, fluoroalquilo de C1-10, carboxialquilo de C2-10 o aminoalquilo de C?.10 l o dos o más grupos R' junto con los átomos a los cuales están unidos, forman un anillo carbocíclico, heterocícllco, saturado o insaturado, y en donde uno o más de los grupos R' es conjugado al inhibidor de caspasa-3; y q es un grupo de puenteo de fórmula -(J)f-; donde f es 3, 4 o 5 y cada J es independientemente -O-, -NR'- o -C(R')2-, siempre que -(J)r contiene un máximo de un grupo J, el cual es -O- o - NR'-. Los grupos Q preferidos son como sigue: Q=-(CH2)(CHR')(CH)2- es decir, propilenamina oxima o derivados de PnAO; Q=-(CH2)2(CHR')(CH2)2- es decir, pentilenamina oxima o derivado de PentAO; Q=-(CH2)2NR'(CH2)2-. E a E6 son elegidos de preferencia de: alquilo de C1 -3, alquilarilo, alcoxialquilo, hidroxialquilo, fluoroalquilo, carboxialquilo o aminoalquilo. Muy preferiblemente, cada grupo E1 a E6 es CH3. El inhibidor de caspasa-3 es conjugado de preferencia a ya sea el grupo E1 o E6 R', o un grupo R' de la porción Q. Muy preferiblemente, el Inhibidor de caspasa-3 es conjugado a un grupo R' de la porción Q. Cuando el inhibidor de caspas-3 es conjugado a un grupo R' de la porción Q, el grupo R' es de preferencia a la posición de cabeza de puente. En este caso, Q es de preferencia -(CH2)(CHR')(CH2)-I -(CH2)2(CHR')(CH2)2- o -(CH2)2NR'(CH2)2-, muy preferiblemente -(CH2)2(CHR')(CH2)2-. Un quelante de diaminodioxima bifuncional especialmente preferido es el Quelante 1 : (Quelante 1 ) de manera que el inhibidor de caspasa-3 es conjugado vía el grupo -CH2CH2NH2 de cabeza de puente. (¡i) Ligandos de N3S teniendo un conjunto donador de tioltriamida, tal como MAG3 (mercaptoacetiltriglicina) y ligandos relacionados: o teniendo un conjunto donador de diamidapiridinatiol tal como Pica; (iii) Ligandos de N2S2 tenidndo un conjunto donador de diaminaditiol tal como BAT o ECD (es decir, dímero de etilcisteinato), o un conjunto donador de amidaaminoditiol tal como MAMA; (iv) ligandos de N4, los cuales son ligandos macrocíclicos o de cadena abierta teniendo un conjunto donador de tetramina, amidatriamina o diamidadlamlna, tal como ciclam, monoxoclclam o dioxociclam. (v) ligandos de N202 teniendo un conjunto donador de diaminodifenol. Los ligandos descritos antes son particularmente adecuados para formar complejo de tecnecio, por ejemplo, 94 Tc o 99mTc y se describen de manera más completa por Jurisson et al [Chem. Rev. , 99, 2205-2218 (1999)]. Los ligandos también son útiles para otros metales, tales como cobre (64Cu o 67Cu), vanadio (por ejemplo, 48V), hierro (por ejemplo, 52Fe) o cobalto (por ejemplo, 55Co). Otros ligandos adecuados son descritos en Sandoz WO 91/01 144, la cual ¡ncluye ligandos que son particularmente adecuados para ligandos de indio, itrio y gadolinio, especialmente ácido aminofosfónico y aminocarboxilato macrocícllco. Los ligandos que forman complejos de metales no iónicos (es decir, neutrales) de gadolinio son conocidos y descritos en US 4885363. Cuando el ion de radiometal es tecneclo, el ligando de preferencia es un agente quelante, el cual es tetradentado. Los agentes quelantes preferidos para tecnecio son las diaminodioximas o aquéllas teniendo un conjunto donador de N2S2 o N3S como se describe antes. Cuando la porción formadora de imagen es un halógeno radioactivo, tal como yodo, el inhibidor de caspasa-3 es elegido adecuadamente para Incluir: un átomo de halógeno de precursor no radioactivo, tal como un yoduro o bromuro de arilo (para permitir el intercambio de radioyodo); un anillo de aplo precursor activado (es decir, un grupo de fenol); un compuesto precursor organometálico (por ejemplo, trialquilestaño o trialquilsililo); o un precursor orgánico, tal como triazenos o un buen grupo que sale para substitución nucleofílica, tal como una sal de yodonio. Los métodos para introducir halógenos radioactivos (incluyendo 123l y 18F) son descritos por Bolton [J. Lab. Comp. Radiopharm. , 45, 485-528 (2002)]. Ejemplos de grupos de arilo precursores adecuados a los cuales los halógenos radioactivos, especialmente de yodo, pueden ser unidos, están dados a continuación: de radioyodo fácil sobre el anillo aromático. Los substituyentes alternativos que contienen yodo radioactivo pueden ser sintetizados por yodinación directa vía intercambio de radiohalógeno, por ejemplo: Cuando la porción formadora de imagen es un isótopo radioactivo de yodo, el átomo de radioyodo está unido de preferencia vía un enlace covalente directo a un anillo aromático, tal como un anillo de benceno, o un grupo vlnilo debido a que es conocido que los átomos de yodo unidos a los sistemas alifáticos saturados son propensos a metabolismo in vivo y de ahí la pérdida del radioyodo. Cuando la porción formadora de imagen comprende un isótopo radioactivo de flúor (por ejemplo, 18F), la radiohalogenación puede ser realizada vía marcado directo usando la reacción de 18F-fluoruro con un precursor adecuado teniendo un buen grupo que sale, tal como un alquil bromuro, alquil mesilato o alquil tosilato. 18F también puede ser introducido por N-alquilación de precursores de amina con agentes alquilantes, tal como 18F(CH2)3OMs (donde Ms es mesilato) para dar N-(CH2)318F, u O-alquilación de grupos hidroxilo con 18F(CH2)3OMs o 18F(CH2)3Br. 18F también puede ser introducido mediante alquilación de grupos de N-haloacetilo con un reactivo de 18F(CH2)3OH, para dar derivados de -NH(CO)CH2O(CH2)318F. Para sistemas de arilo, el desplazamiento nucleofílico de 18F-fluoruro desde una sal de aril diazonio, compuesto aril nitro o una sal de aril amonio cuaternario son rutas adecuadas para derivados de aril-18F. Los inhibidores de caspasa-3 conteniendo amina primaria también pueden ser marcados con 18F mediante amlnación reductiva usando 18F-C6H4-CHO como se muestra por Kahn et al [J. Lab. Comp. Radiopharm. 45, 1045-1053 (2002)] y Borch et al [J. Am. Chem. Soc. 93, 2897 (1971 )]. Esta aproximación también puede ser aplicada de manera útil a aril aminas primarias, tales como compuestos comprendiendo grupos de fenil-NH2 o fenil-CH2NH2. Para inhibidores basados en péptido, los cuales tampoco contienen un grupo funcional de haloalquilcetona, esta aproximación puede ser aplicada a derivados aminoxi de péptidos como se muestra por Poethko et al [J. Nuc. Med. , 45, 892-902 (2004)]. Los Inhibidores de caspasa-3 conteniendo amina también pueden ser marcados con 18F por reacción con esteres activos marcados con 18F, tales como: para dar productos enlazados a enlace de amida. El éster de N- hidroxisuccinimida mostrado y su uso para marcar péptidos es mostrado por Vaidyanathan et al [Nucí. Med. Biol. , 19(3), 275-281 (1992)] y Johnstrom et al [Clin. Sci. , 103 (Suppl. 48), 45-85 (2002)]. Detalles adicionales de rutas sintéticas para derivados marcados con 18F son descritos por Bolton, J. Lab. Comp. Radiopharm. 45, 485-528 (2002). Para sensibilidad máxima in vivo, se prefiere más que la porción formadora de imagen comprenda un elemento radioactivo. La porción formadora de imagen comprende un radioisótopo emisor de positrones o emisor de gamma. Los inhibidores de caspasa-3 sintéticos de la presente Invención son seleccionados de preferencia de los siguientes: (i) un derivado de tetrapéptido de Fórmula III: Z1-Asp-Xaa1 -Xaa2-Asp-X1 (II I) donde Z1 es un grupo inhibidor de metabolismo unido al extremo N del tetrapéptido; Xaa1 y Xaa2 son independientemente cualquier aminoácido; Asp es la abreviatura de tres letras convencional para ácido aspártico; X1 es -R1 o grupo -CH2OR2 unido al extremo carboxi del tetrapéptido; donde R1 es H, -CH2F, -CH2CI, alquilo de C1-5, alcoxi de C1-5 o -(CH2)qAr1 , donde q es un entero de valor 1 a 6 y Ar1 es arllo de C6-?2, alqull-arllo de C5-?2, arilo fluoro substituido de C5-12 o heteroarilo de C3-?2; R2 es alquilo de C1-5, acilo de C1 -10 o Ar1 ; (ii) una quinazolina o anilinoquinazolina; (iii) una 2-oxindol sulfonamida; (iv) una oxoazepinoindolina; (v) un compuesto de Fórmula IV: (IV) donde X2 es H, alquilo de C1-5 o -(CH2)r-(S)s-(CH2)tAr3, donde r y t son enteros de valor 0 a 6, s es 0 o 1 y Ar3 es arilo de C6-?2, arilo alquilo substituido de C5-12, arilo halo-substituido de C5-?2, o heteroarilo de C3-?2; Ar2 es arilo de C6-?2 o heteroarilo de C3-12; X3 es un grupo Rb; X4 es -SO2- o -CR2- Ra es H, alquilo de C1 -5 o PG P, donde PGP es un grupo protector; Rb es un grupo Ra o acilo de C1 -5; cada Rc es independientemente H o alquilo de C-?-5; (vi) un compuesto de Fórmula V: 00 (vii) una pirazlnona; (viii) un dipéptido de Fórmula VI: Z1-Val-Asp-CH2-S-R1 (VI) donde el grupo -CH2-S-R1 está unido al extremo carboxi del dipéptido y Z1 y R1 son como se define para la Fórmula (I II). (ix) una sulfonamida de ácido salicílico de Fórmula XI: Fórmula XI donde Ar6 es un anillo de arilo o heteroarilo de C4-6 de 5 o 6 miembros y X6 es H o -CH2SR2, donde R2 es como se define antes. El término "aminoácido" es como se define antes. Aldehido de péptido (X1 = R1 = H), cetona [X1 = R1 = alquilo de C1-5 o -(CH2)qAr1] o inhibidores de fenoximetilcetona (X1 = -CH2OR2 y R2 = Ar1 = fenilo) de Fórmula I II son inhibidores de caspasa reversibles, mientras que los derivados de clorometilo y fluorometilo (X1 = R1 = -CH2F o -CH2CI), más aciloximetilcetonas (X1 = -CH2OR2 y R2 = acilo de C1-10) son inhibidores irreversibles. Se cree que los péptidos de halometilcetona se ligan a cisteína tiol de caspasa-3, formando una tiometil cetona y de esta manera inactivan irreversiblemente la enzima. Como se indica antes, se prefieren tales inhibidores irreversibles. De ahí, X1 de Fórmula III es de preferencia -CH2F o -CH2OR2 con R2 = acilo de C1-10. Cuando R2 es acilo de C1 -10, uno de tales grupos acilo preferido es benzoil 2,6-disubstltuido, tal como (2,6-dlmetilfenil)(C=O)- o [2,6-bis(trifluorometll)fenil](C=O). Por el término "grupo inhibidor de metabolismo" (Z1) se quiere decir un grupo biocompatible, el cual inhibe o suprime el metabolismo in vivo del péptido o aminoácido en el extremo amino. Tales grupos son bien conocidos para aquéllos expertos en la técnica y son elegidos de manera adecuada de, para el extremo amino de péptido: acetil, Boc (donde Boc es ter-butlloxicarbonilo), Fmoc (donde Fmoc es fluorenllmetoxicarbonilo), benciloxicarbonilo, trifluoroacetilo, aliloxicarbonllo, Dde [es decir, 1 -(4,4-dimetil-2,6-dioxociclohexiliden)etilo] o Npys (es decir, 3-nitro-2-piridin sulfenilo). Un grupo inhibidor de metabolismo preferido para el N-extremo de péptido es acetilo. En la Fórmula III , Xaa1 y Xaa2 son muy preferiblemente cualquier L-amlnoácido. Xaa1 -Xaa2 es de preferencia Glu-Val o Gln-Met, de manera que los compuestos preferidos de Fórmula II I son: Z1-Asp-Glu-Val-Asp-X1 o Z1-Asp-Gln-Met-Asp-X1 (es decir, Z1-DEVD-X1 o Z1-DQMD-X1). En la Fórmula III, el grupo carboxi de la cadena lateral de aspartilo y glutamilo, de preferencia está presente como el carboxilato libre, de manera que el inhibidor de caspasa-3 es potente. Sin embargo, el grupo carboxi también puede estar presente como un éster, por ejemplo, metil éster para mejorar la permeabilidad celular. El éster es desprotegido subsecuentemente por las esterasas presentes en las células no necróticas. Para la Fórmula 111, la porción formadora de imagen de preferencia está unida a las posiciones Z1 o X1. Cuando la porción formadora de imagen comprende un metal, la Inhibición de metabolismo del extremo amino o carboxilo de péptido del péptido de Fórmula III, de preferencia se logra por unión de cualquiera o ambos extremos a un complejo metálico del metal. Por el término "grupo protector" (PG P) se quiere decir un grupo que inhibe o suprime reacciones químicas no deseadas, pero el cual está diseñado para ser suficientemente reactivo de manera que puede ser cortado del grupo funcional en cuestión bajo condiciones suficientemente suaves que no modifiquen el resto de la molécula. Después de la desprotección, el producto deseado es obtenido. Los grupos protectores son bien concidos para aquéllos expertos en la técnica y son elegidos convenientemente de, para grupos de amina: Boc (donde Boc es ter-butiloxicarbonilo), Fmoc (donde Fmoc es fluorenilmetoxicarbonilo), trlfluoroacetilo, aliloxicarbonilo, Dde [es decir, 1 -(4,4-dimetil-2,6-dioxociclohexiliden)etilo] o Npys (es decir, 3-nitro-2-piridin sulfenllo); y para grupos carboxilo: metil éster, ter-butil éster o bencil éster. Para grupos hidroxilo, los grupos protectores adecuado son: bencilo, acetilo, benzoilo, trifilo (Trt) o trialquilsililo, tal como tetrabutildimetüsililo. Para grupos tiol, los grupos protectores adecuados son: trifilo y 4-metoxibenciIo. El uso de grupos protectores adicionales son descritos en "Protective Groups in Organic Synthesis" (Grupos protectores en síntesis orgánica), Theorodora W. Greene y Peter G.M. Wuts (tercera edición, John Wiley & Sons), 1999). Algunos Inhibidores de caspasa-3 de Fórmula III están comercialmente disponibles, por ejemplo, Ac-DEVD-CHO, Ac-AAVALLPAVLLALLAP-DEVD-CHO, Z-DEVD-FMK y Ac-DEVD-CMK, los cuales pueden ser comprados a Calbiochem a través de VWR INTERNATIONAL LTD. Hunter Boulevard, Magna Park, Lutterworth LE17 4XN REINO UNIDO. Otros pueden ser preparados como se describe por Thornberry et al [J. Biol. Chem. , 272 (29), 17907-1791 1 (1 997); ¡bid, 273 (49), 32608-32613 (1998)]. Los inhibidores de caspasa-3 conteniendo péptido y péptldos líder de la presente Invención también pueden ser obtenidos mediante síntesis de fase sólida convencional, como se describe en P. Lloyd-Williams, F. Albericio y E. Girald; Chemical Approaches to the Synthesis of Peptides and Proteins (Aproximaciones químicas para la síntesis de péptidos y proteínas), CRC Press, 1997. Los inhibidores de caspasa-3 de quinazolina o anilinoquinzolina son descritos por Scott et al [J. Pharmacol. Exper. Ther. , 304(1 ), 433-440 (2003)]. Tales compuestos preferidos tienen la Fórmula general Vil: (VII) donde R3 es H o Cl; R4 es Cl o F; R8 es -CONH-X5 o -CH=CH-Ar\ donde X5 es alquilo de C1-6, alquenilo de C2-6 o -(CH2)sAr4; donde s es 0 o 1 , Ar4 es -C6H5X6 y X6 es Hal, CF3 o -SO2NR6R7. R6 y R7 son independientemente alquilo de C1-3 o pueden combinarse para formar un anillo de cicloalqullo de C5-7. R8 de preferencia es -CONH-X5 con X5 = -(CH2)sAr4. X6 es de preferencia F, CF o -SO2NC6H10. Los derivados de 2-oxoindol sulfonamida preferidos de la presente invención son de Fórmula Vlll: (vpi) donde: R9 es H o alquilo de C?-4; R10 es alquilo de C1-10, ar¡IC?-4 alquilo, heteroaril C1.4 alquilo cicloalquilo de C3-7, o R9 y R10 junto con el átomo de nitrógeno al cual están unidos forman un anillo de 3 a 10 miembros, el cual opcionalmente contiene un heteroátomo adicional seleccionado de O, N o S; R11 y R12 son independientemente H , alquilo de C1 -6, NO2 o Hal; R13 es H, alquilo de C1-6, arilalquilo de C6-?2 o heteroarilalquilo de C3- 12 > R y R son Cl o junto con el átomo de carbono al cual están unidos forman un grupo carbonilo de C=O. En la Fórmula Vlll, R14 y R15 son de preferencia juntos iguales a C=O, es decir, un derivado de Isatin. R13 de preferencia es H o CH3. R9 y R10 son de preferencia cicloalquilo de C4-6, muy preferiblemente cicloalqullo de C5. Cuando R9 y R10 son cicloalquilo de C4-6, el anillo de cicloalqullo es substituido de preferencia con un grupo X7, donde X7 es -CH2OR16 o -CH2NHR16 y R16 es alquilo de C1-3 o arilo de C4-7. Los derivados de 2-oxindol sulfonamida de Fórmula Vlll pueden ser preparados como se describe por Lee et al [J. Biol. Chem. , 275, 16007-16014 (2000)]. La porción formadora de imagen está unida de preferencia a los substituyentes R9, R10, R11, R12 o R13 de los inhibidores de Fórmula Vlll, muy preferiblemente los substituyentes R9, R10 o R 3. Para el marcado con F18, el R13 es elegido para ser ya sea -CH2ONH2 para la ruta de 4-18F-benzaldehído ¡mina (descrita antes), o es -CH2OH para el marcado con agentes O-alquilantes tipo 18F-(CH2)3Br o 18F-(CH2)3OTs. De manera alternativa, R13 es elegido para ser H, de manera que la N-alquilación directa conduce a los derivados de 18F deseados. Una oxoazepinoindolina preferida de la presente invención es IDN5370, la cual es mostrada en la Fórmula IX: (LX) Una oxoazepinoindolina muy preferida es Indun A: Las oxoazeplnoindolinas de la presente invención son descritas por Decwerth et al [Drug Devel. Res. , 52, 579-586 (2001 )] y en WO 98/1 1 109. Las pirazinonas de la presente invención son convenientemente de Fórmula X: donde: R17 es OH, NH2, NHR¡, N(R¡)2, R\ alcoxi de C1-6, Ar5, Het1 , X8(CO)-X8SO- o X8SO2-, donde cada R1 es independientemente alquilo de C1-6, el cual puede ser opcionalmente substituido por 1 a 3 substituyentes elegidos de OH, Hal, CO2H, CF3, NH2, NHCH3, N(CH3)2, Ar5 y acilo de C1 -4, Ar5 es un anillo aromático de C6- 4 el cual puede ser opcionalmente substituido por 1 a 3 substituyentes de OH, Hal, CO2H, CF3, NH2, NHCH3, N(CH3)2, alquilo de C1 -6, alcoxi de C?-6, het1 o acilo de C1-4, y X8 es R\ Ar5 o Het1 ; Het1 es un anillo de heteroarilo o heterocíclico de 5 a 15 miembros que contiene 1 a 4 heteroátomos elegidos de O, S y N, el cual puede ser opcionalmente substituido con uno dos grupos oxo, y 1 a 3 grupos elegidos de alquilo de C -4, alcoxi de C l-4, acilo de C1-4 y CF3; R18 es H, alquilo de C1-20, Ar5 o Het1 ; R19 es H, Hal o alquilo de C1-6; R20 es H, alquilo de C1 -6, Ar5, Het1 , -(CH2)ZSR¡, -(CH2)zOR¡, -(CH2)zOC(O)Rj o -(CH2)ZNR21 R22, donde z es 1 , 2 o 3; Rj es alquilo de C1-8, Ar5 o Het1 ; y R21 y R22 son independientemente H, R¡, Ar5 o Het1 , o R21 y R22 tomados junto con el átomo de nitrógeno al cual están unidos forman un sistema de anillo de 3 a 10 miembros conteniendo 1 a 4 heteroátomos elegidos de O, S y N, los cuales pueden ser opclonalmente substituidos con uno o dos grupos oxo, y 1 a 3 grupos elegidos de alquilo de C1-4, Het1 , carboxi de C-?-4, acllo de C -4 y carboxamida de C -6; Rd y Re son independientemente H, alquilo de C -6 o Ar5 o pueden combinarse con el átomo de carbono al cual están unidos para formar un anillo heterocíclico o alicíclico, no aromático, de 3 a 7 miembros opcionalmente conteniendo un heteroátomo elegido de O, S y NR23, donde R23 es H, alquilo de C?-4 o acilo de C1-4; Rf y R9 son independientemente H, Ar5, alquilo de C1 -6, C-?-6 alcoxialquilo o C5-7 cicloalquilo; w es un entero de valor de 0 a 6. Una pirazinona preferida, la cual es selectiva para caspasa-3 es L-826,791 o M-826 [Hotchkiss et al, Nature Immunol. 1 (6), 496-501 (2000)]: MF-826 La síntesis de inhibidores de caspasa-3 de pirazinona de la invención se describe en US 6,444,81 1 y se muestra en el Esquema 1 (siguiente hoja). El material de inicio es dimetilglioxima, el cual está comercialmente disponible.

Esquema 1 NaN3, DMSO Chem. Heter. Comp.2002, -Cl 36(9), 1091-6 N3 SnC EtOH -NH, // » // \\ // N„ .N N, -N \ .\ , M O O O DCC, NET3, HOBt, DMF Los compuestos de Fórmula V pueden ser preparados como se describe en WO 03/024955. Los compuestos de Fórmula VI pueden ser preparados como se muestra en el Esquema 2: Esquema 2 Los inhibidores de dipéptido de Fórmula VI son aspartil cetonas y son descritas por Han et al [Bioorg. Med. Chem. Lett. 2004, 14, 805-808)]. Estos son inhibidores de caspasa-3 potentes y selectivos. Para la Fórmula VI, la porción formadora de imagen es unida de preferencia en las posiciones de Z1 o X1. Los inhibidores de caspasa-3 preferidos de Fórmula VI son de Fórmula Via: (Vía) donde R24 es arilo de C6-?2 o heteroarilo de C6-?2; y R25 es alquilo de C?-4 o bencilo, donde el anillo fenilo del grupo bencilo es opclonalmente substituido por 1 o 2 átomos de halógeno; R24 de preferencia es un grupo bencilo donde el anillo fenilo del grupo bencilo es opcionalmente substituido por 1 o 2 grupos elegidos de: halógeno, alcoxi de C?-3; alcoxi de C1-3 substituido con un grupo carboxilo de C1-3 o carboxiéster de C2-4; acilo de C1-3; alquenilo de C2-4 o alquilsulfonilo de C1 -3. R25 es de preferencia un grupo bencilo o un grupo 2-cloro-5-fluoro-bencilo. Los inhibidores especialmente preferidos de Fórmula VI contienen un grupo 2-cloro-6-fluorobencilo substituido a R y un bencilcarbonilo 2,5-disubstituido en Z1. Estos son de Fórmula Vlb: Inhibidor z2 6A OCH2CO,Me 6A' OCH,C02H 6B OCHJCOJPr 6C SO,Me (VIb) Los Inhibidores 6A, 6A', 6B y 6c exhiben una IC50 para caspasa-3 en el rango nanomolar bajo [Han et al Bioorg. Med. Chem. Lett. 2004, 14, 805-808)]. Los derivados de éster 6A y 6B son hidrolizados intracelularmente al ácido más potente 6A'. La síntesis de los compuestos de Fórmula VI, e inhibidores de caspasa-3 potentes más preferidos basados en los mismos son descritos por Han et al [Bioorg. Med. Chem. Lett. , 14(3), 805-808 (2004)]. La porción formadora de imagen es unida de preferencia a cualquiera de los anillos de fenilo de la Fórmula Vib, muy preferiblemente en la posición Z2. Se prevé que una etiqueta de 18F podría ser introducida como se muestra en el Esquema 3: Esquema 3 Los inhibidores de Fórmula XI pueden ser preparados mediante el método de Choong et al [J. Med. Chem. 45, 5005-5022 (2002)]; Erlanson et al. [Nature Biotech. , 21 , 308-314 (2003)] o de WO 03/024955. Los Inhibidores preferidos de Fórmula XI tienen Ar6 elegido de fenilo, tiofeno o piridina; especialmente tiofeno. En la Fórmula XI , X6 es de preferencia -CH2SAr7, donde Ar7 es un anillo de fenilo substituido con halógeno. Un inhibidor preferido de Fórmula XI es de Fórmula Xla: (Xla) Los inhibidores de caspasa-3 preferidos de la presente invención son los tetrapéptidos de Fórmula II I , dipéptidos de Fórmula VI o de 2-oxoindol sulfonamidas de Fórmula Vlll. Los inhibidores más preferidos son los tetrapéptidos de Fórmula III, y los dipéptidos de Fórmula VI . Cuando el agente formador de Imagen de la presente invención comprende un ¡ón de metal paramagnético o radioactivo, el ¡ón de metal está presente de manera adecuada como un complejo de metal. Tales complejos de metal son preparados convenientemente mediante reacción del conjugado de Fórmula la con el ion de metal apropiado. El conjugado de ligando o conjugado de quelante del inhibidor de caspasa-3 de Fórmula la pueden prepararse vía la aproximación de quelato blfuncional. De esta manera, es bien sabido preparar llgandos o agentes quelantes, los cuales tienen unidos a ellos un grupo funcional ("enlazadores bifuncionales" o "quelatos bifuncionales", respectivamente). Los grupos funcionales que han sido unidos incluyen: amina, tiocianato, maleimida y esteres activos, tales como N-hidroxisuccinimida o pentafluorofenol. El quelante 1 de la presente invención es un ejemplo de un quelato bifuncional amino-funcionalizado. Tales quelatos bifuncionales pueden hacerse reaccionar con grupos funcionales adecuados en el Inhibidor de caspasa-3 para formar el conjugado deseado. Tales grupos funcionales adecuados en el inhibidor de caspasa-3 incluyen: carboxilos (para formación de enlace de amida con un quelante bifuncional ami no-funciona I Izado); aminas (para formación de enlace de amida con un quelante bifuncional carboxilo- o éster activo-funcionalizado); halógenos, mesilatos y tosilatos (para N-alqu¡lación de un quelante bifuncional amino-funclonalizado) y tioles (para reacción con un quelante blfunclonal maleimida-funcinalizado). Los complejos de radiometal de la presente invención pueden ser preparados al hacer reaccionar una solución del radiometal en el estado de oxidación apropiado con el conjugado de ligando de Fórmula la en el pH apropiado. La solución puede contener de preferencia un ligando, el cual forma complejo débilmente con el metal (tal como gluconato o citrato), es decir, el complejo de radiometal es preparado mediante intercambio de ligando o transquelación. Tales condiciones son útiles para suprimir reacciones laterales no deseadas, tal como hidrólisis del ¡ón metálico. Cuando el ¡ón de radiometal es 99mTc, el material de inicio usual es pertecnetato de sido de un generador de 99Mo. El tecnecio está presente en 99mTc-pertecnetato en el estado de oxidación de Tc(VII), el cual está relativamente no reactivo. La preparación de complejos de tecnecio de estado de oxidación menor Tc(l) a Tc(V), por lo tanto, usualmente requiere la adición de un agente reductor farmacéuticamente aceptable adecuado, tal com ditionita de sodio, bisulfito de sodio, ácido ascórbico, ácido sulfínlco de formamidina, ion estañoso, Fe(ll) o Cu(l), para facilitar la formación de complejo. El agente reductor farmacéuticamente aceptable es de preferencia una sal estañosa, muy preferiblemente cloruro estañoso, fluoruro estañoso o tartrato estañoso. Cuando la porción formadora de imagen es un núcleo NMR-activo hiperpolarizado, tal como un átomo de 13C hiperpolarizado, el compuesto hiperpolarizado deseado puede ser preparado mediante intercambio de polarización de un gas hiperpolarizado (tal como 29Xe o 3He) a un inhibidor de caspasa-3 13C-enpquecido adecuado. En un segundo aspecto, la presente invención proporciona una composición farmacéutica, la cual comprende el agente formador de Imagen como se describe antes, junto con un portador biocompatible, en una forma adecuada para administración a mamífero. El "portador biocompatible" es un fluido, especialmente un líquido, en el cual el agente formador de Imagen puede ser suspendido o disuelto, de manera que la composición es fisiológicamente tolerable, es decir, puede ser administrada al cuerpo mamífero sin toxicidad o incomodidad Indebida. El portador biocompatible es adecuadamente un líquido portador inyectable, tal como agua libre de pirógeno, estéril, para inyección; una solución acuosa, tal como solución salina (la cual puede ser balanceada ventajosamente de manera que el producto final para inyección es ya sea isotónico o no hipotónico); una solución acuosa de una o más substancias ajustadoras de tonicidad (por ejemplo, sales de cationes de plasma con contraiones biocompatibles), azúcares (por ejemplo, glucosa o sacarosa), alcoholes de azúcar (por ejemplo, sorbitol o mantiol), glicoles (por ejemplo, glicerol), u otros materiales de poliol no iónicos (por ejemplo, polietilengllcoles, propilenglicoles y similares). En un tercer aspecto, la presente invención proporciona una composición radiofarmacéutica, la cual comprende el agente formador de imagen como se describe antes, en donde la porción formadora de imagen es radioactiva, junto con un portador biocompatible (como se define en la segunda modalidad anterior), en una forma adecuada para la administración a mamífero. Tales radiofarmacéuticos son provistos de manera adecuada ya sea en un recipiente, el cual es provisto con un sello, el cual es adecuado para perforación simple o múltiple con una aguja hipodérmica (por ejemplo, un cierre de sello de septo encrespado), al tiempo que mantiene la integridad estéril. Tales recipientes pueden contener dosis de paciente simple o múltiples. Los recipientes de dosis múltiples preferidos comprenden un frasco a granel simple (por ejemplo de 10 a 30 cm3 de volumen), el cual contiene dosis de pacientes múltiples, por lo cual la dosis de paciente simple pueden ser retiradas así en jeringas de grado clínico a varios Intervalos de tiempo durante del tiempo de vida viable de la preparación para adecuarse a la situación clínica. Las jeringas pre-llenadas son diseñadas para contener una dosis humana simple, y por lo tanto, de preferencia son desechables u otra jeringa adecuada para uso clínico. La jeringa pre-llenada puede ser provista opcionalmente con un escudo de jeringa para proteger al operador de la dosis radioactiva. Tales escudos de jergina radiofarmacéutica adecuados son conocidos en la técnica y de preferencia comprenden ya sea plomo o tungsteno. Cuando la porción formadora de imagen comprende 99mTc, un contenido de radioactividad adecuado apra un radiofarmacéutico de imagenología diagnóstica está en el rango de 180 a 1500 MBq de 99mTc, dependiendo del sitio a ser formada la imagen in vivo, la captación y la proporción objetivo a respaldo. Los radiofarmacéuticos de la presente invención pueden ser preparados a partir de conjuntos, como se describe en la quinta y sexta modalidades más adelante. De manera alternativa, los radiofarmacéuticos pueden ser preparados bajo condiciones de fabricación asépticas para dar el producto estéril deseado. Los radiofarmacéuticos también pueden ser preparados bajo condiciones no estériles, seguido por esterilización terminal usando, por ejemplo, tratamiento de irradiación gamma, autoclave, calor seco o químico (por ejemplo, con óxido de etileno). De preferencia, los radiofarmacéuticos de la presente invención son preparados a partir de conjuntos. En un cuarto aspecto, la presente invención proporciona un conjugado del inhibidor de caspasa-3 sintético de la invención con un ligando. Dichos conjugados son útiles par la preparación de inhibidores de caspasa-3 sintéticos marcados ya sea con un ion de metal radioactivo o ion de metal paramagnético. De preferencia, el conjugado de ligando es de Fórmula la, como se define antes. El ligando del conjugado del cuarto aspecto de la invención de preferencia es un agente quelante. De preferencia, el agente quelante tiene un conjunto donador de diaminadloxima, N2S2 diamiaditiol o N3S diamidapiridinatiol. Muy preferiblemente, el agente quelante es una diaminadloxima. En un quinto aspecto, la present einvención proporciona un conjunto no radioactivo para la preparación de la composición radiofarmacéutica descrita antes, donde la porción formadora de imagen comprende un radiometal. El conjunto comprende un conjugado de un ligando con el inhibidor de caspasa-3 de Fórmula (I). Cuando el radiometal es 99 Tc, el conjunto comprende además convenientemente un reductor biocompatible. Los conjugados de ligando, y aspectos preferidos de los mismos, son descritos en la cuarta modalidad anterior. Tales conjuntos son diseñados para dar productos radiofarmacéuticos estériles adecuados para administración a humanos, por ejemplo, vía inyección directa en el torrente sanguíneo. Para 99mTc, el conjunto es de preferencia liofilizado y es diseñado para ser reconstituido con 99mTc-pertecnetato (Tc04") estéril a partir de un generador de radioisótopo de 99mTc, para dar una solución adecuada para administración a humanos sin manipulación adicional. Los conjuntos adecuados comprenden un recipiente conteniendo el conjugado de ligando o quelante ya sea en forma de sal de ácido o base libre, junto con un "reductor biocompatible", tal como ditionito de sodio, bisulfito de sodio, ácido ascórbico, ácido sulfínico de formamidina, ion estañoso, Fe(ll) o Cu(l). El reductor biocompatible es de preferencia una sal estañosa, tal como cloruro estañoso o tartrato estañoso. De manera alternativa, el conjunto puede contener opcionalmente un complejo de metal el cual, sobre adición del radiometal, experimenta la transmetalización (es decir, intercambio de metal) dando el producto deseado. Los recipientes de conjunto adecuados comprenden un recipiente sellado, el cual permite el mantenimiento de la integridad estéril y/o seguridad radioactiva, más opcionalmente un gas de espacio superior inerte (por ejemplo, nitrógeno o argón), mientras que permite la adición y retiro de soluciones por jeringa. Uno de tales recipiente preferido es un fraso sellado con septo, en donde el cierre hermético a gas es encrespado con un sobre sello (normalmente de aluminio). Tales recipientes tienen la ventaja adicional de que el cierre puede soportar el vacío si se desea, por ejemplo, para cambiar el gas de espacio superior o desgasificar soluciones. Los conjuntos no radioactivos pueden comprender además de manera opcional, componentes adicionales tales como un trasnquelante, radloprotector, conservador antimicrobiano, agente ajustador de pH o relleno. El "transquelante" es un compuesto que reacciona rápidamente para formar un complejo débil con el radiometal, entonces es desplazado por el ligando. Para el tecnecio, esto minimiza el riesgo de la formación de tecnecio hidrolizado reducido (RHT) debido a la rápida reducción de pertecnetato que compite con la formación de complejo de tecnecio. Tales transquelantes adecuados son sales de un ácido orgánico débil, es decir, un ácido orgánico teniendo un pKa en el rango de 3 a 7, con un catión biocompatible. Tales ácidos orgánicos débiles adecuados son ácido acético, ácido cítrico, ácido tartárico, ácido glucónico, ácido glucoheptónico, ácido benzoico, fenoles o ácidos fosfónicos. De ahí, las sales adecuadas son acetatos, citratos, tartratos, gluconatos, glucoheptonatos, benzoatos, fenolatos o fosfonatos. Tales sales preferidas son tartratos, gluconatos, glucoheptonatos, benzoatos o fosfonatos, muy preferiblemente fosfonatos, muy especialmente difosfonatos. Por el término "catión biocompatible" se quiere decir un contraión cargado positivamente el cual forma una sal con un grupo ionizado, cargado de manera negativa, donde dicho contraión cargado de manera positiva también es no tóxico y de ahí adecuado para administración al cuerpo de mamífero, especialmente el cuerpo humano. Ejemplos de cationes biocompatibles adecuados incluyen: los metales alcalinos de sodio o potasio; los metales alcalino-térreos de calcio y magnesio; y el ion de amonio. Los cationes biocompatibles preferidos son sodio y potasio, muy preferiblemente sodio. Uno de tales transquelantes preferidos es una sal de MDP, es decir, ácido metilendifosfónico, con un catión biocompatible. Por el término "radioprotector" se quiere decir un compuesto que inhibe las reacciones de degradación, tales como procesos de redox, al atrapar radicales libres altamente reactivos, tales como radicales libres conteniendo oxígeno que surgen de la radiólisis de agua. Los radioprotectores de la presente invención son elegidos convenientemente de: ácido ascórbico, ácido para-aminobenzoico (es decir, ácido 4-aminobenzoico), ácido gentísico (es decir, ácido 2,5-dihidroxibenzoico) y sales de los mismos con un catión biocompatible como se describe antes.

Por el término "conservador antimicrobiano", se quiere decir un agente que inhibe el crecimiento de microorganismos potencialmente dañinos, tales como bacterias, levaduras o mohos. El conservador antimicrobiano también puede exhibir algunas propiedades bactericidas, dependiendo de la dosis. El papel principal del o los conservadores antimlcrobianos de la presente invención es inhibir el crecimiento de tal microorganismo en la post-reconstituclón de composición radiofarmacéutica, es decir, en el producto diagnóstico radioactivo por sí mismo. Sin embargo, el conservador antimicrobiano también puede ser usado opcionalmente para inhibir el crecimiento de microorganismos potencialmente dañinos en uno o más componentes del conjunto no radioactivo de la presente invención antes de la reconstitución. El o los conservadores antimicrobianos adecuados incluyen: los parabenos, es decir, metil, etil, propil o butil parabeno o mezclas de los mismos; alcohol bencílico; fenol; cresol; cetrimida y tiomersal. El o los conservadores antlmicrobianos preferidos son los parabenos. El término "agente ajustador de pH" significa un compuesto o mezcla de compuestos útiles para asegurar que el pH del conjunto reconstituido está dentro de los límites aceptables (aproximadamente pH 4.0 a 10.5) para administración a humanos o mamíferos. Tales agentes ajustadores de pH adecuados incluyen amortiguadores farmacéuticamente aceptables, tales como tricina, fosfato o TRIS [es decir, tps(hidrox¡metil)aminometano] y bases farmacéuticamente aceptables, tales como carbonato de sodio, bicarbonato de sodio o mezclas de los mismos. Cuando el conjugado es empleado en forma de sal de ácido, el agente ajustador de pH puede ser provisto opcionalmente en un frasco o recipiente separado, de manera que el usuario del conjunto pueda ajustar el pH como parte de un procedimiento de múltiples pasos. Por el término "relleno" se quiere decir un agente formador de volumen farmacéuticamente aceptable, el cual puede facilitar el manejo de material durante la producción y liofilización. Los rellenos adecuados incluyen sales inorgánicas, tales como cloruro de sodio y azúcares o alcoholes de azúcares solubles en agua, tales como sacarosa, maltosa, manitol o trehalosa. En un sexto aspecto, la presente invención proporciona conjuntos para la preparación de preparaciones radiofarmacéuticas, donde la porción formadora de imagen comprende un radioisótopo no metálico. Tales conjuntos comprenden un "precursor", de preferencia en forma no pirogénica estéril, de manera que la reacción con una fuente estéril del radioisótopo da el radiofarmacéutico deseado con el número mínimo de manipulaciones. Tales consideraciones son particularmente importantes para los radiofarmacéuticos, donde el radioisótopo tiene una vida media relativamente corta, y para facilidad de manejo y de ahí dosis de radiación reducida para el radiofarmacéuta. De ahí, el medio de reacción para reconstitución de tales conjuntos de preferencia es un "portador" biocompatible" como se define antes, y muy preferiblemente es acuoso. El "precursor" comprende de manera adecuada un derivado no radioactivo del material inhibidor de caspasa-3 en forma apirogénica, estéril, la cual es diseñada de manera que la reacción química con una forma química conveniente del radioisótopo no metálico deseado pueda ser conducida en el número mínimo de pasos (de manera ideal en un solo paso), y sin la necesidad de purificación significativa (de manera ideal sin purificación adicional) para dar el producto radioactivo deseado. Tales precursores pueden ser obtenidos convenientemente en buena pureza química. El "precursor" puede comprender opcionalmente un grupo protector (PGP) , como se define antes, para ciertos grupos funcionales del inhibidor de caspasa-3. Los precursores adecuados son descritos por Bolton, J. Lab. Comp. Radiopharm. , 45, 485-528 (2002).

Los precursores preferidos de esta modalidad comprenden un derivado, el cual ya sea experimenta halogenación electrofílica o nucleofílica; experimenta fácil alquilación con un gente alquilante elegido de un alquil o fluoroalquil haluro, tosilato, triflato (es decir, trifluorometanosulfonato) o mesilato; o porciones de tiol de alquilatos para formar enlaces de tioéter. Ejemplos de la primera categoría son: (a) derivados organometálicos, tales como trialquilestañano (por ejemplo, trimetilestañilo o tributilestañilo) o un trialquilsilano (por ejemplo, trimetilsililo); (b) un yoduro de alquilo o bromuro de alquilo no radioactivo para intercambio de halógeno y alquil tosilato, mesilato o triflato para halogenación nucleofíllca; (c) anillos aromáticos activados hacia halogenación electrofílica (por ejemplo, fenoles) y anillos aromáticos activados hacia halogenación nucleofílica (por ejemplo, aril yodonio, aril diazonio, nitroarilo). Los derivados preferidos que experimentan fácil alquilación son alcoholes, fenoles o grupos amina, especialmente fenoles y aminas primarias o secundarias estérica ente no obstruidas. Los derivados preferidos, los cuales alquilan reactivos de radioisótopo conteniendo tiol son grupos N-haloacetilo, especialmente derivados de N-cloroacetilo y N-bromoacetllo. Los precursores pueden ser empleados bajo condiciones de fabricación aséptica para dar el material no pirogénico, estéril, deseado.

Los precursores también pueden ser empleados bajo condiciones no estériles, seguido por esterilización terminal usando, por ejemplo, irradiación gamma, autoclave, calor en seco o tratamiento químico (por ejemplo, con óxido de etlleno). De preferencia, los precursores son empleados en forma estéril, no pirogénica. Muy preferiblemente, los precursores no pirogénicos, estériles, son empleados en el recipiente sellado como se describe antes. El "precursor" del conjunto es provisto de preferencia unido de manera covalente a una matriz de soporte sólido. En esa forma, el producto radiofarmacéutico deseado se forma en solución, mientras que los materiales de inicio e impurezas permanecen unidas a la fase sólida. Los precursores para fluoraclón electrofílica de fase sólida con 18F-fluoruro se describen en WO 03/002489. Los precursores para fluoración nucleofílica de fase sólida con 18F-fluoruro se describen en WO 03/002157. Por lo tanto, el conjunto puede contener un cartucho, el cual puede ser conectado en un sintetizador automatizado adaptado de manera conveniente. El cartucho puede contener, además del precursor unido a soporte sólido, una columna para remover el ¡ón de fluoruro no deseado y un recipiente apropiado conectado con el fin de permitir que la mezcla de reacción sea evaporada y permitir que el producto sea formulado según se requiere. Los reactivos y solventes y otros consumibles requeridos para la síntesis también pueden ser incluidos junto con un disco compacto portando el programa de cómputo que permite que el sintetizador sea operado en una manera con el fin de cumplir los requerimientos del cliente para concentración radioactiva, volúmenes, tiempo de entrega, etc. De manera conveniente, todos los componentes del conjunto son desechables para minimizar la posibilidad de contaminación entre corridas y serán estériles y de calidad asegurada. En un séptimo aspecto, la presente invención describe el uso del agente formador de imagen de la primera modalidad para la ¡magenología diagnóstica in vivo de estados de enfermedad del cuerpo de mamífero donde está implicada la caspasa-3. Tal ¡magenología no invasiva se relacionaría con caspasa-3 en apoptosis anormal, y sería útil para monitorear muerte celular en una variedad de enfermedades. Se cree que en patologías donde la proliferación celular y apoptosis es alta, por ejemplo, infarto miocardíaco, tumores agresivos y rechazo de transplante, la formación de imagen de apoptosis sería valiosa. Tal formación de imagen sería también de valor para monitorear la terapia de medicamento quimioterapéutico para estas condiciones. En otras enfermedades donde se piensa que la apoptosis es importante, pero el número de casos apoptóticos es relativamente raro, tal como en la enfermedad de Alzheimer, el depósito celular disponibles sería pequeño y de ahí mucho más difícil de visualizar. Por lo tanto, se cree que probablemente los agentes formadores de imagen de apoptosis de la presente invención serán mejor aplicados a patologías donde la apoptosis es relativamente aguda, de manera que se ve en Infartos miocardíacos, tumores agresivos y rechazo de transplantes. Para esas enfermedades en las cuales la apoptosis es más crónica, tales como neuropatologías y tumores menos agresivos, puede haber céulas apoptóticas insuficientes para registrar por arriba del respaldo. Esencialmente todos los tratamientos para cáncer, incluyendo radioterapia, quimioterapia o ¡nmunoterapia, pretenden inducir apoptosls en sus objetivos de células de tumor. La formación de imagen de apoptosis pueden tener la capacidad para proporcionar valoración directa, rápida o monitorear la efectividad de tratamiento de tumor, lo cual puede alterar fundamentalmente la manera en que son manejados los pacientes con cáncer. Se anticipa que los pacientes cuyos tumores están respondiendo a la terapia mostrarán captación significativamente incrementada del agente formador de imagen debido a la elevada respuesta apoptótica en el tumor. Los pacientes cuyos tumores no responderán a tratamiento adicional pueden ser identificados por la falla de sus tumores para aumentar la captación del post-tratamiento de agente formador de imagen. La evaluación de Intervención terapéutica en pacientes con cáncer con enfermedad medible tiene varias aplicaciones: • la evaluación de la activida anti-neoplástica de nuevos medicamentos anti-cáncer; • para determinar regímenes terapéuticos eficaces; • la identificación de la dosis óptima y programas de dosificación para nuevos medicamentos anticáncer; • la identificación de dosis óptima y programas de dosificación para medicamentos anticáncer existentes y combinaciones de medicamentos; • la estratificación más eficiente de pacientes con cáncer en ensayos clínicos hacia respondedores y no respondedores de los regímenes terapéuticos; • la evaluación eficiente y oportuna de respuesta de pacientes individuales a regímenes anticáncer terapéuticos establecidos. La invención es ilustrada por los ejemplos no limitantes detallados a continuación. El Ejemplo 1 describe la síntesis del compuesto 1 , 1 , 1-tris(2-aminoetil)metano. El Ejemplo 2 proporciona una síntesis alternativa de 1 ,1 ,1 -tris(2-amioetil)metano, la cual evita el uso de intermediarios de azida potencialmente peligrosos. El Ejemplo 3 describe la síntesis de un precursor de cloronltrosoalcano. El Ejemplo 4 describe la síntesis de una diaminadioxima bifunclonal amina-substituida preferida de la presente invención (Quelante 1 ). El Ejemplo 5 proporciona la síntesis de un inhibidor de péptido de la invención. Los Ejemplos 6 y 8 proporcionan la síntesis de dos precursores de radiohalogenación de la invención. El Ejemplo 7 proporciona la síntesis de un inhibidor de caspasa-3 no de péptido de la invención. El Ejemplo 9 describe un ensayo de inhibidión de caspasa-3 y el Ejemplo 10 es un esnayo de caspasa-3 basado en célula. Los Ejemplos 1 1 y 12 proporcionan la síntesis de compuestos marcados con 8F adecuados para radiomarcado con 18F de los Inhibidores de caspasa-3. El Ejemplo 13 describe la radioyodación de un inhibidor de la presente invención.

Ejemplo 1 : Síntesis de 1 ,1.1 -tris(2-aminoetil)metano (Paso a): dimetiléster de ácido 3-(metoxicarbonilmetilen)glutárico El carbometoximetilentrifenilfosforano (167 g, 0.5 mol) en tolueno (600 ml) se trató con 3-oxogluarato de dimetilo (87 g, 0.5 mol) y la reacción se calentó a 100°C en un baño de aceite a 120°C bajo una atmósfera de nitrógeno durante 36 h. La reacción se concentró entonces a vacío y el residuo oleoso se trituró con 40/60 petróleo éter/dietil éter 1 : 1 , 600 ml. El óxido de trifenilfosfina se precipitó y el líquido sobrenadante se decantó/filtró. El residuo sobre evaporación a vacío fue destilado con Kugelrohr bajo Bpt de alto vacío (temperatura de horno 180-200°C a 0.2 torr) para dar dimetil éster de ácido 3-(metoxicarbonilmetilen)glutárico (89.08 g, 53%). NMR 1 H (CDCI3): d 3.31 (2H, s, CH2), 3.7 (9H, s, 3xOCH3), 3.87 (2H, s, CH2), 5.79 (1 H, s, =CH) ppm. NMR 13C (CDCI3), d 36.56, (CH3, 48.7, 2xCH3, 52.09 y 52.5 (2xCH)2;; 122.3 y 146.16 (c=CH; 165.9, 170.0 y 170.5 3xCOO ppm.

(Paso b): Hidrogenación de dimetiléster de ácido 3- (metoxicarbonilmet¡len)glutárico Se agitó dimetiléster de ácido 3-(metoxicarbonilmetilen)glutárico (89 g, 267 mmol) en metanol (200 ml) con (10% paladio en carbón: 50% agua) (9 g) bajo una atmósfera de gas hidrógeno (3.5 bar) durante (30 h). La solución se filtró a través de kleselguhr y se concentró a vacío para dar dimetiléster de ácido 3-(metoxicarbon¡lmetN)glutárico como un aceite, rendimiento (84.9 g, 94%). NMR 1 H (CDCI3), d 2.48 (6H, d, J=8Hz, 3xCH2), 2.78 (1 H, hexteto, J=8Hz CH), 3.7 (9H, s, 3xCH3). NMR 13C (CDCI3), d 28.6, CH; 37.50, 3xCH3; 51 .6, 3xCH2; 172.28, 3xCOO.

(Paso c): Reducción v esterificación de trimetil éster al tríacetato Bajo una atmósfera de nitrógeno en un matraz de fondo redondo de 2 I, de 3 cuellos, hidruro de litio aluminio (20g, 588 mmol) en tetrahidrofurano (400 ml) se trató con cuidado con tris(metiloxicarbonilmetil)metano (40 g, 212 mmol) en tetrahldrofurano (200 ml) durante 1 h. Ocurrió una reacción fuertemente exotérmica, provocando que el solvente se sometiera a reflujo fuertemente. La reacción se calentó en un baño de aceite a 90°C a reflujo durante 3 días. La reacción se extinguió mediante la adición cuidadosa en forma de gotas de ácido acético (100 ml) hasta que cesó la emisión de hidrógeno. La mezcla de reacción agitada se trató cuidadosamente con solución de anhídrido acético (500 ml) a tal velocidad con el fin de provocar un reflujo suave. El matraz fue equipado para destilación y se agitó y entonces se calentó a 90°C (temperatura de baño de aciete) para destilar el tetrahldrofurano. Una porción adicional de anhídrido acético (300 ml) fue agregada, la reacción regresó a configuración de reflujo y se agitó y calentó en un baño de aceite a 140°C durante 5 h. Se permitió que la reacción se enfriara y se filtrara. El precipitado de óxido de aluminio se lavó con acetato de etilo y los filtrados combinados se concentraron en un evaporador rotatorio a una temperatura de baño de agua de 50°C a vacío (5 mmHg) para dar un aceite. El aceite fue captado en acetato de etilo (500 ml) y se lavó con solución acuosa saturada de carbonato de potasio. La solución de acetato de etilo fue separada, secada sobre sulfato de sodio y concentrada a vacío para dar un aceite. El aceite fue destilado de Kugelrohr en alto vacío para dar tris(2-acetoxietil)metano 845.3 g, 96%) como un aceite. Pe 220°C a 0.1 mmHg. NMR 1 H (CDCI3), d 1 .66 (7H, m, 3xCH2, CH), 2.08 (1 H, s, 3xCH3); 4.1 (6H, t, 3xCH2O). NMR 13C(CDCI3), d 20.9, CH3; 2.34, CH; 32.17, CH2; 62.15, CH2O; 171 , CO.

(Paso d). Remoción de grupos acetato del triacetato Se calentó tris(2-acetoxietil)metano (45.3 g, 165mM) en metanol (200 ml) y 880 amoníaco (1 00 ml) en un baño de aceite a 80°C durante 2 días. La reacción se trató con una porción adicional de 880 amoníaco (50 ml) y se calentó a 80°C en un baño de aceite durante 24 h. Una porción adicional de 880 amoníaco (50 ml) se adicionó y la reacción se calentó a 80°C durante 24 h. La reacción se concentró entonces a vacío para remover todos los solventes para dar un aceite. Esto se captó en 880 amoníaco (150 ml) y se calentó a 80°C durante 24 h. La reacción se concentró entonces a vacío para remover todos los solventes para dar un aceite. La destilación de Kugelrohr dio acetamlda, pe 170-180 0.2 mm. Los bulbos conteniendo la acetamida fueron lavados y la destilación se continuó. El tris(2-hidroxietiI)metano (22.53 g, 92%) destiló a pe 220°C 0.2 mm. NMR 1 H(CDCI3), d 14.5(6H, q, 3xCH2), 2.2(1 H, quinteto, CH); 3.7(6H, t 3xCH2OH); 5.5(3H, brs, 3xOH). NMR 13C(CDCI3), d 22.13, CH; 33.95, 3xCH2; 57.8, 3xCH2OH.

(Paso e): Conversión del triol al tris(metanosulfonato) A una solución helada agitada de tris(2-hidroxietil)metano (10g, 0.0676 mol) en dlclorometano (50 ml), se goteó lentamente una solución de cloruro de metanosulfonilo (40 g, 0.349 mol) en diclorometano (50 ml) bajo nitrógeno a tal velocidad que la temperatura no se elevó por arriba de 15°C. La piridina (21 .4 g, 0.27 mol, 4 eq) disuelta en diclorometano (50 ml) se adicionó entonces en fomra de gotas a tal velocidad que la temperatura no se elevó por arriba de 15°C, reacción exotérmica. La reacción se dejó agitar a temperatura ambiente durante 24 h y entonces se trató con solución de ácido clorhídrico 5N (80 ml) y las capas se separaron. La capa acuosa se extrajo con diclorometano adicional (50 ml) y los extractos orgánicos se combinaron, secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y concentraron a vacío para dar tris[2-(met¡Isulfoniloxi)etil]metano contaminado con cloruro de metanosulfonilo en exceso. El rendimiento teórico fue 25.8 g. NMR 1H(CDCI3), d 4.3 (6H, t, 2xH2), 3.0 (9H, s, 3xCH3), 2 (1 H, hexteto, CH), 1 .85 (6H, q, 3xCH2).

(Paso f): Preparación de 1 , 1 , 1 -tr¡s(2-azidoetil)metano Una solución agitada de tris[2-(metilsulfoniloxi)et¡l]metano [del Paso 1 (e), contaminada con cloruro de metllsulfonilo en exceso (25.8g, 67mmol, teórico) en DMF seco (250 ml) bajo nitrógeno se trató con azida de sodio (30.7 g, 0.47 mol) en forma de porciones sobre 15 minutos. Se observó una exoterma y la reacción se enfrió en un baño de hielo. Después de 30 minutos, la mezcla de reacción se calentó en un baño de aceite a 50°C durante 24 h. La reacción se volvió de color café. Se permitió que la reacción se enfriara, se trató con solución de carbonato de potasio diluida (200 ml) y se extrajo tres veces con 40/60 petróleo éter/dietil éter 10: 1 (3x150 ml). Los extractos orgánicos se lavaron con agua (2x150 ml), se secaron sobre sulfato de sodio y se filtraron. El etanol (200 ml) se adicionó a la solución de petróleo/éter para mantener la triazlda en solución y el volumen se redujo a vacío a no menos de 200 ml. Se adicionó etanol (200 ml) y se volvió a concentrar a vacío para remover las últimas trazas de petróleo dejando no menos de 200 ml de solución etanólica. La solución de etanol de triazida se usó directamente en el Paso 1 (g). CUIDADO: NO REMOVER TODO EL SOLVENTE YA QUE LA AZIDA ES POTENCIALMENTE EXPLOSIVA Y DEBERÍA SER MANTENIDA EN SOLUCIÓN DILUIDA EN TODO MOMENTO. Menos de 0.2ml de la solución se evaporó a vacío para remover el etanol y se corrió una NMR en esta pequeña muestra: NMR 1H(CDCI3), d 3.35 (6H, t, 3xCH2), 1 .8 (1 H, septeto, CH), 1 .6 (6H, q, 3xCH2.

(Paso g): Preparación de 1 , 1 , 1 -tris(2-aminoetil)metano El tris(2-azidoetil)metano (15.06 g, 0.0676 mol), (asumiendo el 100% de rendimiento de la reacción previa) en etanol (200 ml) se trató con 10% paladio en carbón (2g, 50% agua) y se hidrogenó durante 12 h. El recipiente de reacción se evacuó cada 2 horas para remover el nitrógeno emitido de la reacción y se volvió a llenar con hidrógeno. Se tomó una muestra para análisis de NMR para confirmar la conversión completa de la traizida a la triamina. Precaución: la azida no reducida podría explotar sobre la destilación. La reacción se filtró a través de un cojín de Celite para remover el catalizador y se concentró a vacío para dar tris(2-aminoetil)metano como un aceite. Esto se purificó adicionalmente por destilación de Kugelrohr pe. 180-200°C a 0.4mm/Hg para dar un aceite incoloro (8.1 g, 82.7% de rendimiento global a partir del triol). NMR 1H(CDCI3), d 2.72 (6H, t, 3xCH2N), 1 .41 (H, septeto, CH), 1 .39 (6H, q, 3xCH2). NMR 13C(GDCI3), d 39.8 (CH2NH2), 38.2 (CH,), 31 .0 (CH).

Ejemplo 2: Preparación alternativa de 1 ,1 ,1 -tris(2-am¡noetil)metano (Paso a): Amidación de trimetilléster con p-metoxi-bencilamina Tris(metilox¡carbonilmetil)metano [2 g, 8.4 mmol; preparada como en el Paso 1 (b) anterior] se disolvió en p-metoxi-bencilamina 825 g, 178.6 mmol). El aparato se fijó para destilación y se calentó a 120°C durante 24 h bajo flujo de nitrógeno. El progreso de la reacción se monitoreó mediante la cantidad de metanol recolectada. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y se adicionaron 30 ml de acetato de etilo, entonces el producto de triamida precipitado se agitó durante 30 min. La triamida se aisló mediante filtración y la torta de filtración se lavó varias veces con cantidades suficientes de acetato de etilo para remover el exceso de p-metoxi-bencilamina. Después de secar se obtuvieron 4.6 g, 100%, de un polvo blanco. El producto altamente ¡nsoluble se usó directamente en el siguiente paso sin purificación o caracterización adicional.

(Paso b): Preparación de 1 , 1 , 1 -trisr2-(p-metoxibencilamíno)etillmetano A un matraz de fondo redondo de 3 cuellos, de 1 000 ml, enfriado en un baño de agua helada, se adicionó cuidadosamente la triamida del paso 2(a) (10 g, 17.89 mmol) a 250 ml de solución de borano 1 M (3.5 g, 244.3 mmol). Después de la adición completa, el baño de agua helada es removido y la mezcla de reacción se calentó lentamente a 60°C. La mezcla de reacción se agitó a 60°C durante 20 h. Una muestra de la mezcla de reacción (1 ml) fue retirada, y se mezcló con 0.5 ml de HCl 5N y se dejó permanecer durante 30 min. A la muestra se adicionó 0.5 ml de 50 NaOH, seguido por 2 ml de agua y la solución se agitó hasta que se disolvió todo el precipitado blanco. La solución se extrajo con éter (5 mi) y se evaporó. El residuo se disolvió en acetonitrilo a una concentración de 1 mg/ml y se analizó por MS. Si se ven mono- y diamida (M+Hz = 520 y 534) en el espectro de MS, la reacción no está completa. Para completar la reacción, se agregan 100 ml adicionales de solución de THF borano 1 M y la mezcla de reacción se agitó durante 6 horas más a 60°C y una nueva muestra se retió sugiendo el procedimiento de muestreo previo. Se continúa más adición del borano 1 M en solución de THF según sea necesario hasta que se complete la conversión a la triamina. La mezcla de reacción se enfría a temperatura ambiente y el HCl 5N se agrega lentamente [CUIDADO: ocurre una formación de espuma vigorosa]. Se agrega HCl hasta que no se observa más emisión de gas. La mezcla se agitó durante 30 min y entonces se evaporó. La torta se suspendió en solución de NaOH acuosa (20-40%; 1 :2 p/v) y se agitó durante 30 minutos. La mezcla se diluyó entonces con agua (3 volúmenes). La mezcla se extrajo entonces con dietiléter (2 x 150 ml) [CUIDADO: no usar solventes halogenados]. Las fases orgánicas combinadas fueron lavadas entonces con agua (1 x200 ml) , salmuera (150 ml) y se secó sobre sulfato de magnesio. Rendimiento después de la evaporación: 7.6 g, 84% como aceite. NMR 1H(CDCI3), d: 1 .45, (6H, m, 3xCH2; 1 .54, (1 H, septeto, CH); 2.60 (6H, t, 3xCH2N); 3.68 (6H, s, ArCH2); 3.78 (9H, s, 3xCH3O); 6.94 (6H, d, 6xAr), 7.20 (6H, d, 6xAr). NMR 13C(CDCI3), d: 32.17, CH; 34.44, CH2; 47.00, CH2; 53.56, ArCH2; 55.25, CH3O; 1 13.78, Ar; 129.29, Ar; 132.61 ; Ar; 158.60, Ar.

(Paso c): Preparación de 1 , 1 .1 -tri(2-aminoetil)metano Se disolvió 1 , 1 , 1 -tris[2-(p-metoxibencilamino)etil]metano (20.0 g, 0.036 mol) en metanol (100 ml) y se adicionó Pd(OH)2 (5.0 g). La mezcla se hidrogenó (3 bar, 100°C, en una autoclave) y se agitó durante 5 horas. Se adicionó Pd(OH)2 en dos porciones más (2 x 5 g) después de 10 y 15 horas, respectivamente. La mezcla de reacción se filtró y el filtrado se lavó con metanol. La fase orgánica combinada se evaporó y el residuo se destiló bajo vacío (1 x 10"2, 1 10°C) para dar 2.60 g (50%) de 1 , 1 , 1 -tri(2-aminoetil)metano idéntico con el Ejemplo 1 previamente descrito.

Ejemplo 3: Preparación de 3-cloro-3-metil-2-nitrosobutano Una mezcla de 2-metilbut-2-eno (147 mi, 1 .4 mol) y nitrito de isoamilo (156 ml, 1 .16 mol) se enfrió a -30°C en un baño de cardice y metanol y se agitó vigorosamente con un agitador de aire superior y se trató en forma de gotas con ácido clorhídrico concentrado (140 ml, 1 .68 mol) a una velocidad tal que la temperatura se mantuvo por debajo de -20°C. Esto requiere aproximadamente 1 h ya que existe una exoterma significativa y debe tenerse cuidado para prevenir el sobrecalentamiento. Se adicionó etanol (100 ml) para reducir la viscosidad de la pasta que se había formado al final de la adición y la reacción se agitó a -20 hasta -10°C durante unas 2h adicionales para completar la reacción. El precipitado se recolectó mediante filtración bajo vacío y se lavó con 4x30 mi de etanol frío (-20°C) y 1 00 ml de agua helada y se secó a vacío para dar 3-cloro-3-metil-2-nitrosobutano como un sólido blanco. El filtrado de etanol y lavados se combinaron y diluyeron con agua (200 ml) y se enfrió y permitió que permaneciera durante 1 h a -10°C cuando una cosecha adicional de 3-cloro-3-metil-2-nitrosobutano se cristalizó. El precipitado se recolectó mediante filtración y se lavó con el mínimo de agua y se secó a vacío para dar un rendimiento total de 3-cloro-3-metil-2-nitrosobutano (1 15 g, 0.85 mol, 73). >98% puro por NMR. NMR 1H(CDCI3), como una mezcla de isómeros (isómero 1 , 90%), 1 .5 d, (2H, CH3), 1 .65 d, (4H, 2xCH3), 5.85, q y 5.95, q, junto 1 H. (isómero 2, 10%), 1.76 s, (6H, 2xCH3), 2.07 (3H, CH3).

Ejemplo 4: Síntesis de bisrN-(1 ,1 -dimetil-2-N-hidroximina propil)2-aminoet¡p-(2-aminoetil)metano (Quelante 1 ) A una solución de tris(2-aminoetil)metano (4.047 g, 27.9 mmol) en etanol seco (30 ml) se adicionó carbonato de potasio anhidro (7.7 g, 55.8 mmol, 2eq) a temperatura ambiente con agitación vigorosa bajo una atmósfera de nitrógeno. Una solución de 3-cIoro-3-metil-2-nitrosobutano (7.56 g, 55.8 mol, 2eq) se disolvió en etanol seco (100 ml) y 75 ml de esta solución se goteó lentamente en la mezcla de reacción. La reacción fue seguida por TLC en sílice [placas corridas en diclorometano, metanol, amoníaco concentrado (0.88sg); 100/30/5 y la placa de TLC se develó al atomizar con ninhidrina y calentamiento]. Los productos mon-, di- y tri-alquilados fueorn vistos con RF's aumentando en ese orden. La HPLC analítica fue corrida usando una columna de fase inversa de RPR en un gradiente de 7.5-75% de acetonitrilo en amoníaco acuoso al 3%. La reacción se concentró a vacío para remover el etanol y se volvió a suspender en agua (1 10 ml). La pasta acuosa fue extraída con éter (100 ml) para remover algo del compuesto trlalquilado y las impurezas lipofíllcas dejando el producto mono y dialquilado deseado en la capa acuosa. La solución acuosa fue amortiguada con acetato de amonio (2eq, 4.3g, 55.8 mmol) para asegurar una buena cromatografía. La solución acuosa fue almacenada a 4°C durante la noche antes de purificar mediante HPLC preparatoria automatizada. Rendimiento (2.2g, 6.4mmol, 23%). Espec. Masa; voltaje de cono de 10 V de ion poisitivo. Encontrado: 344; calculado M+H=344 NMR 1H(CDCI3), d 1 .24 (6H, s, 2xCH3), 1 .3 (6H, s, 2xCH3), 1 .25-1 .75 (7H, m, 3xCH2,CH), (3H, s, 2xCH2), 2.58 (4H, m, CH2N), 2.88 (2H, t CH2N2), 5.0 (6H, s, NH2, 2xNH, 2xOH). NMR 1 H((CD3)2SO), d 1 .1 4xCH; 1 .29, 3xCH2; 2.1 (4H, t, 2xCH2); NMR 13C((CD2)3SO), d 9.0 (4xCH3), 25.8 (2xCH3), 31 .0 2xCH2, 34.6 CH2, 56.8 2xCH2N; 160.3, C=N.

Condiciones de HPLC: velocidad de flujo 8 ml/min, usando una columna de PRP de 25 mm A= 3% solución de amoníaco (sp.gr=0.88)/agua; B = acetonitrilo Tiempo %B 0 7.5 15 75.0 20 75.0 22 7.5 30 7.5 Cargar 3 ml de solución acuosa por corrida y recolectar en un tiempo de 12.5-13.5 min.

Ejemplo 5 Síntesis de 3-vodo-benzoil-Asp(OMe)-Glu(OMe)-Val- Asp(QMe)-H (Compuesto 3) Compuesto 3 La resina de peptidilo correspondiente a la secuencia anterior fue montada mediante química de péptido de fase sólida estándar (Baranh, G; Kneib-Cordonier, N.; Mullen, D.G. (1987) Int. J. Peptide Protein Research 30, 705-739) en una resina H-Asp(tBu)-H NovaSyn TG (NovaBiochem). Se usó un aparato burbujeador de nitrógeno manual (Wellings, D.A. , Atherton, E. (1997) en Methods in Enzymology (Métodos de enzimología) (Fields, G. ed), 289, p. 53-54, Academic Press, Nueva York). La resina de peptidilo montada (3-yodo-benzoil-Asp(OtBu)-Glu(OtBu)-Val-Asp(OtBu)-H NovaSyn TG (Compuesto 1 ) se trató con ácido trifluoroacético (TFA) conteniendo 2.5% de agua con el fin de remover los grupos ter-butilo protectores. Las cadenas laterales de los residuos de aspartilo y glutamilo fueron transformadas a sus esteres de metilo usando cloruro de tionllo (20 eq) en metanol dando resina de péptido (Compuesto 2). El producto de péptido (Compuesto 3) fue liberado de la resina al tratar la resina de peptidilo con 60% de acetonitrilo (ACN) en agua conteniendo 0.1 % de ácido trifluoroacético (TFA) sobre 4 horas. El residuo de resina se filtró y el filtrado se concentró mediante evaporación rotatoria, se trituró con dietil éter y el producto fue aislado mediante centrifugación. El producto fue caracterizado por LC-MS usando una columna de RP-HPLC analítica (Phenomenex Luna 3µ C18(2) 50 mm x 2 mm) levigada con un gradiente de 0 a 70% de ACN en 0.1 % TFA ac sobre 10 min a 0.3 ml/min, detectando el levigante por absorción de UV a ?=214 nm y con espectroscopia de masa de electroatomlzación. El producto deseado fue confirmado a tR = 8.2 min con [M+H]+ a 733.5 m/z, esperado a 733.2 m/z.

Ejemplo 6: Síntesis de precursor de trimetilestañilo par radiohaloqenación (Compuesto 4) La resina de péptido 3-yodo-benzoil-Asp(OMe)-Glu(OMe)-Val-Asp(OMe)-H NovaSyn TG (Compuesto 2) del Ejemplo 5 anterior, fue estañilada usando tecnología de microondas. La resina funcionalizada con 3-yodo (50 mlg, 0.012 mmol) se colocó en un tubo de Irradiación bajo argón y se trató con tetrakis(trifenilfosfina)paladio (7 mg, 0.006 mmol) y hexametildiestaño (7.86 mg, 5 µl, 0.024 mmol) en N-metilpirrolidona seca (NMP) (1 ml). El tubo fue señalado, posiclonado en la cavidad e irradiado durante 5 minutos a 100°C. Después de enfriarse, la mezcla de color negro se lavó y el péptido estañilado (Compuesto 4) fue cortado de la resina y trabajado como se describe en el Ejemplo 5 anterior. El producto fue caracterizado por LC-MS usando una columna de RP-HPLC analítica (Phenomenex Luna 3µ C1 8(2) 50 mm x 2 mm) levigada con un gradiente de 10 a 80% ACN en 0.1 % TFA ac sobre 10 min a 0.3 ml/min detectando el levigante mediante absorción de UV a ?=214 nm y con espectroscopia de masa de electroatomización. El producto deseado fue confirmado a tR = 8.3 min con [M+H]+ a 771 .1 m/z, esperado a 771 .2 m/z.

Ejemplo 7: Síntesis de 1 -(4-yodobencip-5-(2-metoximetil-pirrolidin-1 -sulfonilo)-1 H-indol-2.3-diona (Compuesto 5) Compuesto 5 Bajo argón y a temperatura ambiente, se adicionó 60% de hidruro de sodio a la solución clara y amarilla de 5-(2-metoximetil-pirrolidin-1 -sulfonil)-1 H-indol-2,3-dlona (derivado de Isatln; comercialmente disponible de Calblochem Cat=218826; 50 mg, 0.154 mmol) en DMF anhidro (5 ml). La mezcla se volvió morado obscuro instantáneamente. Después de agitar durante 1 0 minutos, se adicionó bromuro de 4-yodobencilo (45.56 mg) en DMF (200 µl) y continuó la agitación a temperatura ambiente. El color morado se desvaneció conforme progresó la reacción y después de 24 horas, la TLC (cloroformo:metanol, 8:2) rf ca 2 indicó una reacción completa. Se removió entonces DMF mediante evaporación bajo presión reducida y el residuo fue sometido a cromatografía instantánea usando cloroformo:metanol (8:2), produciendo 61 mg (73%) de un seml-sólido amarillo. El producto fue purificado adicionalmente mediante RP-HPLC preparatoria. La columna (Phenomenex Luna C1 8 10µ, 22 x 250 mm) se levigó a 10 ml/min con un gradiente de 30 a 80% de acetonitrilo (ACN) en?.1 % ácido trifluoroacético ac. (TFA) sobre 60 min. Las fracciones de pico deseadas fueron depositadas proporcionando compuesto puro 5. RP-HPLC analítica: tR = 5.39 mln, (Phenomenex Luna 3 µ C18(2) 50 mm x 2 mm, 30-80% ACN en 0.1 % TFA ac sobre 10 min a 0.3 ml/min, ?=214 nm). MS de electroatomización: [M+H]+ de producto esperada a 541 .0 m/z, encontrada a 540.9 m/z.

Ejemplo 8: 5-(2-metoxi meti I-pirro lid i na-1 -sulf onil )-1 -(4trimeti lestañil-benciQ-1 H-indol-2.3-diona (Compuesto 6) ' Compuesto 6 Una solución amarilla clara del Compuesto 5 (27 mg, 0.05 mmol; del Ejemplo 7 anterior), tetrakis(trifenilfosfina)paladio (5.78 mg, 0.005 mmol) y hexametildiestaño (21 µl, 0.10 mmol) en tolueno (8 ml) se calentó bajo irradiación de microondas a 120°C durante 5 minutos. La mezcla negra resultante se filtró. El filtrado se evaporó a sequedad y el residuo se purificó mediante cromatografía instantánea usando acetato de etilo:hexano (1 : 1 ) para dar el producto puro como un aceite amarillo en 83% de rendimiento. RP-HPLC analítica: tR = 7.92 min (Phenomenex Luna 3µ C18(2) 50 mm x 2 mm, 30-80% ACN en 0.1 % TFA ac sobre 10 mln a 0.3 ml/min, ?=214 nm). MS de electroatomización: [M+H]+ del producto esperada a 578.9 m/z, encontrada a 578.9 m/z.

Ejemplo 9: Ensayo de inhibición de caspasa-3 in vitro La potencia in vitro de los inhibidores de caspasa-3 se valoró usando conjuntos de ensayo comercialmente disponibles (por ejemplo: Biomol, BIOMOL International L.P. 5120 Butler Pike, Plymouth Meeting, PA 19462-1202). En breve, el conjunto de ensayo de caspasa-3 es un sistema de ensayo completo diseñado para medir la actividad de proteasa de la caspasa-3. Contiene tanto un substrato colorimétrico (DEVD-pNA) y un substrato fluorogénico (DEVD-AMC). El corte de la p-nitroanllida (pNA) del substrato colorimétrico aumenta la absorción a 405 nm. El ensayo fluorescente se basa en el corte de tinte 7-amino-4-metilcoumarina (AMC) del extremo C del substrato de péptido. El corte del tinte del substrato aumenta su intensidad de fluorescencia a 460 nm. Los ensayos son realizados en un formato de microplaca de 96 cavidades conveniente. El conjunto es úitl para clasificar inhibidores de caspasa-3, un objeto terapéutico potencial. Un inhibidor, DEVD-CHO (aldehido), también es incluido como un inhibidor de control prototipo 1 . La secuencia de aminoácido DEVD es derivada del sitio de corte de caspasa-3 en PARP [poli(ADP-ribosa) polimerasa].

Ejemplo 10: Ensayo celular de caspasa-3 Se usaron células Jurkat y HL-60 en un modelo basado en células, con apoptosis inducida con Staurosporina como se describe por Wang et al: "A Role for Michondrial Bak in Apoptotic Response to Anticancer Drugs" (Un papel para Bak mitocondrial en respuesta apoptótica a medicamentos anticáncer), J. Biol. Chem. , Aug 2001 ; 276: 34307-34317. Se requiere un ensayo basado en células bifuncionales para probar los inhibidores de caspasa-3 por su capacidad para entrar en las células y subsecuentemente unirse al objetivo de caspasa-3. El ensayo se basa en inhibidores de fluorocromo de caspasas (FLICA). Los inhibidores son permeables a células y una vez dentro de la célula, se unen covalentemente a la caspasa-3 activa y la fluorescencia de FLICA puede ser detectada. Cuando se adiciona a una población de células, la sonda de FLICA entra a cada célula y se une covalentemente a un residuo de cisteína reactivo que reside en la gran subunidad del heterodímero de caspasa activa, Inhibiendo por ello la actividad enzimática adicional. El reactivo marcado unido es retenido dentro de la célula, mientras que cualquier reactivo no unido se difundirá de la célula y se lava. La señal fluorescente verde es una medida directa de la cantidad de caspasa-3 activa presente en la población celular en el momento en que se adicionó el reactivo. Las células que contienen el reactivo marcado unido puede ser analizado en placas de 96 cavidades por fluorescencia. Los artículos de preuba de validación de ensayo también fueron inhibidores enfocados de caspasa-3 y estos se adicionaron a células apoptótlcas antes del tratamiento a FLICA. Los compuestos de prueba potentes bloquearían la unión de FLICA a caspasa-3 activa, permitiendo monitorear una medida de potencia al seguir cualquier reducción en la fluorescencia asociada a FLICA.

Ejemplo 11 : Síntesis del derivado 18F-marcado para N-alquilación: Síntesis de 3-f18F1 fluoropropil tosilato [ 1dF] F7 Kr yp 2. 2. 2/ K2CO. TsO^^^OTs >" "F ^ OTs CH3C , 100°a i0 rri n Vía un Kryptofix 222 de llave de dos vía (10 mg) en acetonitrilo (300 µl) y carbonato de potasio (4 mg) en agua (300 µl), preparado en un frasco de vidrio, se transfirió usando una jeringa de plástico (1 ml) hacia un recipiente de reacción de vidrio de carbono situado en un calentador de bronce. Entonces se adicionó 18F-fluoruro (185-370 MBq) en el agua objetivo (0.5-2ml) a través de la llave de dos vías. El calentador se fijó a 125°C y el cronómetro se inició. Después de 15 minutos, se adicionaron tres alícuotas de acetonitrilo (0.5 ml) a intervalos de 1 min. El 18F-fluoruro se secó hasta 40 min en total. Después de 40 min, el calentador se enfrió con aire comprimido, la tapa de la marmita se removió y 1 ,3-propanodiol-di-p-tosilato (5-12 mg) y acetonitrilo (1 ml) se adicionaron. La tapa de la marmita se reemplazó y las tuberías con tapones se destaparon. El calentador fue fijado a 100°C y se marcó a 1 00°C/1 0 min. Después de marcar, se aisló 3-[18F]fluoropropil tosilato por RP HPLC de Gilson usando las siguientes condiciones: Columna u-bondapak C18 7.8x300mm Levigante Agua (bomba A):acetonitrilo (bomba B) Tamaño de lazo 1 ml Velocidad de bomba 4ml/min Longitud de onda 254 nm Gradiente 5-90% de levigante B sobre 20 min Rt de producto 12 min Una vez ailsado, la muestra cortada (ca. 10 ml) se diluyó con agua (10 ml) y se cargó sobre un C18 sep pak acondicionado. El sep pak se secó con nitrógeno durante 15 min y se descargó con un solvente orgánico, piridina (2 ml), acetonitrilo (2 ml) o DMF (2 ml). Aprox. 99% de la actividad se descargó. Se usó 3-[18F] fluoropropil tosilato a aminas N-alquiladas al someter reflujo en piridina.

Ejemplo 12: Derivado de r18Fl-tiol para S-alquilación Paso (a): Preparación de 3-f18F| fluoro-tritilsulfanil-propano [ 8F]F7Kryp 2.2.2/K2C03 TrS'^-^^OMs — TrS"^-^«p DMSO, 80°C/5 min Vía un Kryptofix 222 de llave de dos vías (10 mg) en acetonitrilo (800 µl) y carbonato de potasio (1 mg) en agua (50 µl), preparado en un frasco de vidrio, se transfirió usando una jeringa de plástico (1 ml) al recipiente de reacción de vidrio de carbono situado en el calentador de bronce. Entonces también se adicionó 18F-fluoruro (185-370 MBq) en el agua objetivo (0.5-2ml) a través de la llave de dos vías. El calentador se fijó a 125°C y el cronómetro se Inició. Después de 15 min, se adicionaron tres alícuotas de acetonitrilo (0.5 ml) a intervalos de 1 min. El 8F-fluoruro se secó hasta 40 mln en total. Después de 40 min, el calentador se enfrió con aire comprimido, la tapa de marmita fue removida y se adicionaron trimetil-(3-tritilsuIfanil-propoxi)silano (1-2 mg) y DMSO (0.2 ml). La tapa de marmita se reemplazó y las tuberías con tapones se destaparon. El calentador se fijó a 80°C y se marcó a 80°C/5 min. Después de marcar, la mezcla de reacción se analizó por RP HPLC usando las siguientes condiciones de HPLC: Columna u-bondapak C18 7.8x300mm Levigante 0.1 %TFA/agua (bomba A):0.1 %TFA / acetonitrilo (bomba B) Tamaño de rizo 100 ul Velocidad de bomba 4ml/mln Longitud de onda 254nm Gradiente 1 min 40% B 15 min 40-80%B 5 min 80% B La mezcla de reacción se diluyó con DMSO/agua (1 : 1 v/v, 0.15 ml) y se cargó sobre un t-C1 8 sep-pak acondicionado. El cartucho se lavó con agua (10 ml), se secó con nitrógeno y 3-18[F] fluoro-1 -tritilsulfanil-propano se levigó con 4 alícuotas de acetonitrilo (0.5 ml por alícuota).

Paso (b): Preparación de 3-f18F1 fluoro-propano-1 -tiol 80°C/10 min Se evaporó a sequedad una solución de 3-[18F] fluoro-1 -tritilsulfanil-propano en acetonitrilo (1 -2 ml) usando una corriente de nitrógeno a 100°C/10 min. Una mezcla de TFA (0.05 ml), triisopropilsilano (0.01 m) y agua (0.01 ml) se adicionó seguido por calentamiento a 80°C/10 min para producir 3-[18F] fluoro-propano-1 -tiol.

Paso (c): Reacción con precursores de -NfCOCH^Cl Un procedimiento general para marcar un precursor de cloroacetilo es enfriar el recipiente de reacción conteniendo el 3-[18F] fluoro-1 -mercapto-propano del Paso (b) con aire comprimido y entonces se adicionó amoníaco (27% en agua, 0.1 ml) y el precursor (1 mg) en agua (0.05 ml). La mezcla es calentó a 80°C/10 min.

Ejemplo 13: r123p-Radiomarcado de un inhibidor de caspasa-3 Paso (a): Síntesis alternativa de Compuesto 5 El Compuesto 5 es el análogo no radioactivo, es decir, donde el isótopo de yodo es 127l y se preparó de acuerdo con el Esquema 4 a continuación.

Esquema 4 RT 5' Compuesto 6 Compuesto 5 El análisis espectroscópico de masa confirmó la identidad del Compuesto 5.

Paso (b): Síntesis del Compuesto 5A. Para la preparación del compuesto 5 123l-marcado (Compuesto 5A), se siguió un protocolo similar al paso (a). A entre 8-30 µl de [123l] yoduro de sodio libre de portador, se adicionaron 100 µl de amortiguador de acetato de amonio 0.2M, pH 4, 10 µl de [127l] de sodio, 15mg/100 ml de yoduro de sodio en solución en hidróxido de sodio 0.01 M, (1 x 10"8 moles) y 50 µl de acetonitrilo. Los reactivos se mezclaron y transfirieron a un frasco P15 silanizado. Finalmente se adicionaron 10 µl de solución de ácido peracético 0.001 M (1 x 10"8 moles) y 58 µl de una solución de 1 mg/ml de Compuesto 6 en acetonitrilo (1 x 1 0"7 moles). El [1 3l]-Compuesto 5 (Compuesto 5A) fue purificado mediante HPLC y se diluyó en amortiguador de fosfato de sodio 50 mM, pH 7.4, con 10% etanol (para ayudar a la solubilidad) a 20 MBq/ml o 100 MBq/ml con una actividad específica típcia de 14 MBq/nmol y 41 MBq/nanomol, respectivamente. Ambas preparaciones fuern encontradas estables a pH 7.5 (>95% RCP sobre 4 horas). La co-levigación con el estándar 127l del paso (a) fue observada, confirmando la identidad.

Claims (1)

1. REIVINDICACIONES 1. Un agente formador de Imagen, el cual comprende un inhibidor de caspasa-3 sintético marcado con una porción formadora de imagen, en donde el inhibidor de caspasa-3 tiene una K¡ para caspasa-3 de menos de 500 nM, y en donde siguiendo la administración de dicho inhibidor de caspasa-3 marcado al cuerpo de mamífero in vivo, la porción formadora de imagen puede ser detectada ya sea externamente en una manera no invasiva o vía el uso de detectores diseñados para usarse in vivo. 2. El agente formador de imagen de la reivindicación 1 , donde el inhibidor de caspasa-3 sintético tiene un peso molecular de 150 a 3000 Daltones. 3. El agente formador de imagen de las reivindicaciones 1 o 2, donde la porción formadora de imagen comprende: (i) un ion de metal radioactivo; (ii) un ion de metal paramagnético; (iii) un halógeno radioactivo emisor de gamma; (iv) un no metal radioactivo emisor de positrones; (v) un núcleo NMR-activo hiperpolarizado; (vi) un tinte óptico adecuado para formación de imagen in vivo. 4. El agente formador de imagen de las reivindicaciones 1 a 3, que comprende además una secuencia de péptido líder de 4 a 20 meros, en donde dicho péptido líder facilita el transporte de membrana celular desde el exterior hasta el interior de una célula de mamífero in vivo. 5. El agente formador de imagen de la reivindicación 4, donde el conjugado de inhibidor de caspasa-3 sintético es de la Fórmula I: [{inhibidor}-(A)n]-[péptido líder]m-Xs [porción formadora de imagen] (Fórmula I) donde: {inhibidor} es el inhibidor de caspasa-3 de las reivindicaciones 1 o 2; [péptido líder] es como se define en la reivindicación 4 y está unido ya sea por su extremo de amina o carboxilo; -(A)p- es un grupo enlazador, en donde cada A es independientemente -CR2-, -CR=CR-, -C=C-, -CR2C02-, -C02CR-2, -NRCO-, -CONR-, -NR(C=0)NR-, -NR(C=S)NR-, -S02NR-, -NRS02-, -CR2OCR2-, -CR2SCR2-, -CR2NRCR2-, un grupo cicioheteroalquileno de C -8, un grupo cicloalquileno de C4-8, un grupo arlleno de C5-?2, o un grupo heteroarileno de C3-12, un aminoácido, un azúcar o un bloque constructor de polietilenglicol (PEG) monodisperso; R es elegido independientemente de H, alquilo de C1-4, alquenilo de C2- , álquinilo de C2-4, alcoxialquilo de C1- o hidroxialquilo de C1-4; n es un entero de valor 0 a 10, m es 0 o 1 ; y Xa es H, OH, Hal, NH2, alquilo de C1 -4, alcoxi de C1 -4, alcoxialquilo de C -4, hidroxialqullo de C?-4 o Xa es la porción formadora de imagen. 6. El agente formador de imagen de las reivindicaciones 1 a 5, donde el ion de metal radioactivo es un emisor de gamma o un emisor de positrones. 7. El agente formador de imagen de la reivindicación 6, donde el ion de metal radioactivo es 99mTc, 1 11 ln, 64Cu, 67Cu, 67Ga o 68Ga. 8. El agente formador de Imagen de las reivindicaciones 1 a 5, donde el ion de metal paramagnético es Gd(lll), Mn(l l) o Fe(lll). 9. El agente formador de imagen de las reivindicaciones 1 a 5, donde el halógeno radioactivo emisor de gamma es 123l . 10. El agente formador de imagen de las reivindicaciones 1 a 5, donde el no metal radioactivo emisor de positrones es elegido de 18F, 1C, 12 l o 13N. 1 1 . El agente formador de imagen de las reivindicaciones 1 a 10, donde el inhibidor de caspasa-3 sintético comprende uno o más de los inhibidores de caspasa-3 definidos en (i) a (ix): (i) un derivado de tetrapéptido de Fórmula I II: Z1-Asp-Xaa1 -Xaa2-Asp-X1 (I II) donde Z1 es un grupo inhibidor de metabolismo unido al extremo N del tetrapéptido; Xaa1 y Xaa2 son independientemente cualquier aminoácido; X1 es -R1 o grupo -CH2OR2 unido al extremo carboxi del tetrapéptido; donde R1 es H, -CH2F, -CH2CI, alquilo de C1-5, alcoxi de C1-5 o -(CH2)qAr1 , donde q es un entero de valor 1 a 6 y Ar1 es arilo de C6-12, alquil-arilo de C5-?2, arilo fluoro substituido de C5-12 o heteroarilo de C3.12; R2 es alquilo de C?-5, acilo de C1-10 o Ar1 ; (ii) una quinazollna o anillnoqulnazolina; (¡ii) una 2-oxindol sulfonamida; (¡v) una oxoazepinoindolina; (v) un compuesto de Fórmula IV: (IV) donde X2 es H, alquilo de C1-5 o -(CH2)r-(S)s-(CH2)tAr3, donde r y t son enteros de valor 0 a 6, s es 0 o 1 y Ar3 es arilo de C6-12, arilo alquilo substituido de C5-12, arilo halo-substituido de C5-12, o heteroarilo de C3-12; Ar2 es arllo de C6-?2 o heteroarllo de C3-12; X3 es un grupo Rb; X4 es -SO2- o -CR2- Ra es H, alquilo de C1-5 o PGP, donde PGP es un grupo protector; R es un grupo Ra o acilo de d-5; cada Rc es independientemente H o alquilo de C1-5; (vi) un compuesto de Fórmula V: (vii) una pirazinona; (viii) un dipéptido de Fórmula VI: Z1-Val-Asp-CH2-S-R1 (VI) donde el grupo -CH2-S-R1 está unido al extremo carboxi del dipéptido y Z1 y R1 son como se define para la Fórmula (II I). (ix) una sulfonamida de ácido salicílico de Fórmula XI: Fórmula XI donde Ar6 es un anillo de arilo o heteroarilo de C4-6 de 5 o 6 miembros y X6 es H o -CH2SR2, donde R2 es como se define antes. 12. El agente formador de imagen de la reivindicación 1 1 , donde el inhibidor de caspasa-3 sintético comprende: (I) un tetrapéptido de Fórmula I II; o (ii) una 2-oxaindol sulfonamlda; o (iii) un dipéptido de Fórmula VI. 13. El agente formador de imagen de las reivindicaciones 1 a 12, donde el inhibidor de caspasa-3 sintético es selectivo para caspasa-3 sobre caspasa-1 , por un factor de al menos 50. 14. El agente formador de imagen de las reivindicaciones 12 o 13, donde el inhibidor de caspasa-3 sintético comprende un tetrapéptido de Fórmula II I o un dipéptido de Fórmula VI. 15. Una composición farmacéutica, la cual comprende el agente formador de imagen de las reivindicaciones 1 a 14 junto con un portador biocompatible, en una forma adecuada para administración a mamífero. 16. Una composición radiofarmacéutica, la cual comprende el agente formador de imagen de las reivindicaicones 1 a 14, en donde la porción formadora de imagen es radioactiva, junto con un portador biocompatible, en una forma adecuada para administración a mamífero. 17. La composición radiofarmacéutica de la reivindicación 16, donde la porción formadora de imagen comprende un no metal radioactivo emisor de positrones o un halógeno radioactivo emisor de gamma. 18. La composición radiofarmacéutica de la reivindicación 16, donde la porción formadora de imagen comprende un ion de metal radioactivo. 19. Un conjugado de un inhibidor de caspasa-3 sintético con un ligando, en donde el inhibidor de caspasa-3 tiene una K¡ para caspasa-3 de menos de 500 nM, y en donde dicho ligando es capaz de formar un complejo de metal con un ion de metal paramagnético o radioactivo. 20. El conjugado de la reivindicación 19, de Fórmula Ib: [{¡nhibidor}-(A)p]-[péptido líder]m-Xa '[porción formadora de imagen] (Ib) donde: A, n, m y Xa son como se define en la reivindicación 5. 21 . El conjugado de las reivindicaciones 1 o 20, en donde el ligando es un agente quelante. 22. El conjugado de la reivindicación 21 , en donde el agente quelante tiene un conjunto donador de diaminadioxima, N2S2 o N3S. 23. Un conjunto para la preparación de la composición radiofarmacéutica de la reivindicación 18, el cual comprende el conjugado de las reivindicaciones 19 a 22. 24. El conjunto de la reivindicación 23, donde el ¡ón de metal radioactivo es 99mTc, y el conjunto comprende además un reductor biocompatible. 25. Un conjunto para la preparación de la composición radiofarmacéutica de la reivindicación 17, el cual comprende un precursor, siendo dicho precursor un derivado no radioactivo del Inhibidor de caspasa-3 de las reivindicaciones 1 a 14, en donde dicho derivado no radioactivo es capaz de reacción con una fuente del no metal radioactivo emisor de positrones o halógeno radioactivo emisor de gamma para dar el radiofarmacéutico deseado. 26. El conjunto de la reivindicación 25, donde el precursor está en forma apirogénica, estéril. 27. El conjunto de las reivindicaciones 25 o 26, donde la fuente del no metal radioactivo emisor de positrones o halógeno radioactivo emisor de gamma es elegido de: a. ion de haluro o F+ o l+; o b. un agente alquilante elegido de un alquil o fluoroalquil haluro, tosilato, triflato o mesilato; 28. El conjunto de las reivindicaciones 25 a 27, donde el derivado no radioactivo es elegido de: a. un derivado organometálico tal como trialquilestañano o un trialquilsilano; b. un derivado conteniendo un haluro de alquilo, tosilato de alquilo o mesilato de alquilo para substitución nucleofílica; c. un derivado conteniendo un anillo aromático activado hacia substitución nucleofílica o electrofílica; d. un derivado conteniendo un grupo funcional, el cual experimenta fácil alquilación; e. un derivado el cual alquila compuestos conteniendo tiol para dar un producto conteniendo tioéter. 29. El conjunto de las reivindicaciones 25 a 28, donde el precursor está unido a una fase sólida. 30. El uso del agente formador de imagen de las reivindicaciones 1 a 14 en un método de diagnóstico de un estado de enfermedad implicado con caspasa-3 del cuerpo de mamífero, en donde dicho mamífero es administrado previamente con la composición farmacéutica de la reivindicación 15, o la composición farmacéutica de las reivindicaciones 16 a 18.