MXPA05003638A - Intermediarios para la preparacion de aminoacidos biciclicos fusionados terapeuticos. - Google Patents

Abstract

La invencion presenta compuestos de formula (I), en donde R representa H o un grupo de proteccion de un acido carboxilico adecuado, los cuales son intermediarios en la preparacion de aminoacidos biciclicos fusionados terapeuticos.

Description

INTERMEDIARIOS PARA LA PREPARACIÓN DE AMINOÁCIDOS BICÍCLICOS FUSIONADOS TERAPÉUTICOS CAMPO DE LA INVENCIÓN Esta invención se refiere a intermedios de derivados de aminoácidos cíclicos novedosos útiles como agentes farmacéuticos y a procedimientos para su producción.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN Gabapentina (Neurontin ® es un agente anti-convulsivo que es útil en el tratamiento de epilepsia y que se ha mostrado recientemente que es un tratamiento potencial para dolor neurológico. Es ácido 1-(aminometii)ciclohexilacético de fórmula estructural: La gabapentina es uno de una serie de compuestos de fórmula en la que Ri es hidrógeno o un radical alquilo inferior y n es 4, 5, ó 6. Estos compuestos se describen en el documento US - A - 4024175 y su divisional US - A - 4087544. Sus usos descritos son: protección contra espasmo inducido por tiosemicarbazida; protección contra espasmo por cardiazol; las enfermedades cerebrales, epilepsia, ataques de vértigo, hipoquinesia, y traumas craneales; y mejora en las funciones cerebrales. Los compuestos son útiles en pacientes geriátricos. El documento WO 99/21824 describe además aminoácidos cíclicos que son útiles en el tratamiento de epilepsia, ataques de vértigo, trastornos neurodegenerativos, depresión, ansiedad, pánico, trastornos neuropatológicos, trastornos gastrointestinales tales como síntoma de intestino irritable (IBS) e inflamación, especialmente artritis. Los compuestos descritos incluyen los de la fórmula: y las sales de los mismos, en la que: R es hidrógeno o un alquilo inferior; y R1 a R8 cada uno de ellos se seleccionan independientemente entre hidrógeno, alquilo linea! o ramificado de entre 1 a 6 carbonos, fenilo, bencilo, flúor, cloro, bromo, hidroxi, hidroximetilo, amino, aminometilo, trifluorometilo, -C02H, -C02R15, -CH2C02H, -CH2C02R15, -OR15 en los que R15 es un alquilo lineal o ramificado de entre 1 a 6 carbonos, fenilo, o bencilo, R1 a R8 no siendo simultáneamente hidrógeno. La publicación de solicitud de patente internacional N° WO 0128978 describe una serie de aminoácidos bicíclicos novedosos, sus sales farmacéuticamente aceptables, y sus profármacos de fórmulas: en las que n es un número entero entre 1 y 4, cuando existen estereocentros, cada centro puede ser independientemente R o S, los compuestos preferidos siendo aquellos de fórmula I - IV anteriores en los que n es un número entero de entre 2 y 4. Los compuestos se describen por ser útiles en el tratamiento de de una diversidad de trastornos incluyendo epilepsia, ataques de vértigo, hipoquinesia, trastornos craneales, trastornos neurodegenerativos, depresión, ansiedad, pánico, dolor, trastornos neuropatológicos, y trastornos del sueño. La solicitud de patente N° EP 0140214,1 describe el uso de los compuestos de fórmula I a IV anteriores para la prevención y tratamiento de dolor visceral, trastornos gastrointestinales. Más recientemente, la solicitud de patente internacional número PCT/IB02/01146 (no publicada en la fecha de prioridad de la presente invención), incorporada en esta memoria descriptiva como referencia, describe aminoácidos cíclicos de fórmulas (I) - (XXV): (V) (VI) (VII) (VIII) ?/vJI XXfll XXIV XXV en las que R1 y R2 se seleccionan cada uno de ellos independientemente entre H, alquilo lineal o ramificado de 1 a 6 átomos de carbono, cicloalquilo de entre 3 - 6 átomos de carbono, fenilo y bencilo, sujeto a la condición de que, excepto en el caso de un compuesto triciclooctano de fórmula (XVII), R1 y R2 no sean simultáneamente hidrógeno; para uso en el tratamiento de un número de indicaciones, incluyendo dolor. La solicitud describe, como procedimiento H, la preparación de los siguientes compuestos: La solicitud también describe, como procedimiento F, la preparación de los siguientes compuestos: El compuesto de fórmula (70) se puede preparar mediante el procedimiento A descrito en el documento PCT/IB02/01146, ilustrado en esta memoria descriptiva a partir del compuesto (9), un compuesto conocido, véase L. Y. Chen, L. Ghosez, Tetrahedron Letters, 1990, 31, 4467; C. Houge, A. M. Frisque - Hesbain, A. ockel, L. Ghosez, J. P. Declercq, G. Germain, M. Van Meerssche, J. Am. Chem. Soc, 1982, 104, 2920.

Los compuestos de fórmula (73) se han descrito en Hoffmann, H. M. R.; Ismael, Zeinhom .; Weber, Anette. Dep. Chem., Univ. Hannover, Hannover, Fed. Rep. Ger. Tetrahedron Lett (1981), 22 (21), 1953 - 6. Los inventores ahora proponen las mezclas racémicas de un compuesto de fórmula (73) ó (77) y nuevos procedimientos para la fabricación de los compuestos (73) y (77), que se pueden usar en la síntesis de compuestos terapéuticos descritos en el documento PCT/IB02/01146.

SUMARIO DE LA INVENCIÓN La presente invención proporciona un intermedio racémico de fórmula (I) o (IA): en la que R representa H o un grupo protector de ácido carboxílico adecuado, tal como alquilo Ci _ 6 o bencilo. Como un aspecto adicional, la invención proporciona un procedimiento para la preparación de un compuesto de fórmula (I) o (IA), que comprende la reacción de un compuesto de fórmula (II) o (NA) con un compuesto de fórmula (III) en las que R1 representa un grupo fosfonil éter adecuado, tal como alquilo C-i .6, y R representa un grupo protector de ácido carboxílico adecuado, tal como alquilo Ci - 6 o bencilo, seguido de hidrólisis opcional del grupo R.

Los compuestos de fórmula (I) y (IA) son útiles en la preparación de compuestos terapéuticos descritos en el documento PCT/1B02/01146. Como un aspecto preferido, la presente invención proporciona el uso de un compuesto de fórmula (I) o (IA) en la preparación de un compuesto terapéutico de fórmula (XII) Como un aspecto incluso adicional de la presente invención, se proporciona un procedimiento para la preparación de un compuesto intermedio de fórmula (IV) o (IVA) en las que R representa H o un grupo protector de ácido carboxílico adecuado, tal como alquilo Ci - 6 o bencilo, que comprende: (i) donde R es H, hidrólisis enzimática de un compuesto de fórmula (I) o (IA) donde R es un grupo protector de ácido carboxílico; o (ii) donde R es un grupo protector de ácido carboxílico, esterificación enzimática de un compuesto de fórmula (I) o (IA) donde R es H; o (iii) resolución cromatográfica de los isómeros de un compuesto de fórmula (I) o (IA); o (iv) donde R es un grupo protector de ácido carboxílico, mediante hidrólisis enzimática de un compuesto de fórmula (I) o (IA) donde R es un grupo protector de ácido carboxílico , seguido de reesterificación; o (v) donde R es un grupo protector de ácido carboxílico , mediante eliminación del estereoisómero indeseado de un compuesto de fórmula (I) o (IA) donde R es un grupo protector de ácido carboxílico mediante hidrólisis enzimática. Los R grupos protectores de ácido carboxílico adecuados los conocen bien los expertos en la técnica e incluyen grupos alquilo Ci . 6 o bencilo o derivados relacionados. Los grupos protectores adecuados se describen en 'Protective Groups In Organic Synthesis', 3a edición, por Greene y Wuts, Wiley Interscience Publishing, ISBN 0-471-16019-9, particularmente la lista de esteres en las páginas 369 - 372 y la descripción, con referencias, entre las páginas 372 - 422, que se incorpora en esta memoria descriptiva como referencia. Las enzimas adecuadas para hidrólisis enzimática incluyen Altus 13, Altus 57, solución Chirazyme L2, Thermomyces langinosus o Mucor meihei, preferiblemente Novozyme 435. Los compuestos adecuados de fórmula (I) y (IA) son: (+/-) bicicIo[3.2.0]hept-2-en-6-ilidenoacetato de etilo; (+/-) ácido biciclo[3.2.0]hept-2-en-6-ilidenoacético; (+/-) biciclo[3.2.0]hept -6-ilidenoacetato de etilo;y (+/-) ácido biciclo[3.2.0]hept-6-ilidenoacético. Los presentes compuestos pueden existir en formas no solvatadas así como formas solvatadas, incluyendo las formas hidratadas, que pueden contener sustituciones isotópicas (por ejemplo, D20, d6-acetona, d6-D SO), son equivalentes a las formas no solvatadas y están abarcadas dentro del alcance de la presente invención. Los compuestos de la presente invención poseen uno o más centros quirales. La separación de diastereoisómeros o isómeros cis y trans se puede lograr mediante técnicas convencionales, por ejemplo, cristalización fraccionada, cromatografía o H. P. L. C. de una mezcla estereoisomérica de un compuesto de la invención o una sal o derivado del mismo adecuado. Un enantiómero individual de un compuesto de la invención también se puede preparar a partir de un intermedio ópticamente puro correspondiente o mediante resolución, tal como H. P. L. C. del racemato correspondiente usando un soporte quiral adecuado o mediante cristalización fraccionada de las sales diasteroisoméricas formadas mediante reacción del racemato correspondiente con un ácido o base ópticamente activos adecuados, según sea apropiado. Los compuestos de la invención pueden formar sales básicas. Las sales básicas adecuadas se forman a partir de bases que forman sales no tóxicas y ejemplos son las sales de sodio, potasio, aluminio, calcio, magnesio, cinc, colina, dio!arnina, olamina, arginina, glicina, trometamina, benzatina, lisina, medlumina y dietilamina. Sales con iones de amonio cuaternario se pueden preparar con, por ejemplo, el ion tetrametilamonio. También incluidos dentro del alcance presente de los compuestos de la invención son los polimorfos de los mismos. Los compuestos terapéuticos formados a partir de los intermedios de la presente invención son útiles como agentes para tratar o aliviar los síntomas de trastornos neurodegenerativos. Tales trastornos neurodegenerativos incluyen, por ejemplo, enfermedad de Alzheimer, enfermedad de Huntington, enfermedad de Parkinson, y esclerosis lateral amiotrófica. La presente invención también cubre el tratamiento de trastornos neurodegenerativos denominados lesión cerebral aguda. Éstos incluyen pero no se limitan a: accidente cerebrovascular, trauma cefálico, y asfixia. Accidente cerebral se refiere a enfermedad vascular cerebral y también se puede denominar accidente vascular cerebral (CVA) e incluye accidente cerebral tromboembólico agudo. Accidente cerebrovascular incluye tanto isquemia focal como global. También, incluidos están ataques isquémicos cerebrales transitorios y otros problemas vasculares cerebrales acompañados de isquemia cerebral. Estos trastornos vasculares se pueden producir en un paciente que se somete a endarterectomía carótida específicamente u otros procedimientos quirúrgicos cerebrovasculares o vasculares en general, o procedimientos vasculares diagnósticos que incluyen angiografía cerebral y similares. Otros incidentes son trauma cefálico, trauma de la columna vertebral, o lesión a partir de anoxia general, hipoxia, hipoglucemia, hipotensión así como lesiones similares observadas durante procesos de embolia, hiperfusión, e hipoxia. La presente invención sería útil en una gama de incidentes, por ejemplo, durante cirugía de derivación cardiaca, en incidentes de hemorragia intracraneal, en asfixia perinatal, en parada cardiaca, y estado epiléptico. Los compuestos terapéuticos descritos son también útiles para el tratamiento general de dolor, particularmente dolor neuropático. Dolor fisiológico es un mecanismo protector importante diseñado para prevenir del peligro de estímulos potencialmente perjudiciales del ambiente externo. El sistema opera a través de un conjunto específico de neuronas sensoriales primarias y se activa exclusivamente por estímulos nocivos mediante mecanismos transductores periféricos (Millan 1999 Prog Neurobio. 57: 1 - 164 para una revisión integral). Estas fibras sensoriales se conocen como nociceptores y se caracterizan por axones de diámetro pequeño con velocidades de conducción lenta. Los nociceptores codifican la intensidad, duración y calidad de estímulos nocivos y en virtud de su proyección topográficamente organizada a la columna vertebral, la localización del estímulo. Los nociceptores se encuentran sobre fibras nerviosas nociceptivas de las cuales hay dos tipos principales, fibras A - delta (mielinizadas) y fibras C (no mielinizadas). La actividad generada por la entrada nociceptora se transfiere después del procesamiento complejo en el asta dorsal, bien directamente o mediante núcleos transmisores del tronco cerebral al tálamo ventrobasal y después sobre el cortex, donde se genera al sensación de dolor.

Dolor agudo intenso y dolor crónico pueden implicar las mismas rutas dadas por procesos patofisiológicos y como tal cesan para proporcionar un mecanismo protector y en cambio contribuir a los síntomas debilitantes asociados a una amplia gama de estados patológicos. El dolor es una característica de muchos estados traumáticos y patológicos. Cuando se produce una lesión sustancial, mediante enfermedad o trauma, en el tejido corporal las características de activación de nociceptores se alteran. Existe sensibilización en la periferia, localmente alrededor de la lesión y centralmente donde los nociceptores terminan. Esto conduce a hipersensibilidad en el sitio de daño y cerca del tejido normal. En dolor agudo estos mecanismos pueden ser útiles y permiten que tengan lugar procesos reparadores y la hipersensibilidad vuelve a normal una vez que la lesión se ha curado. Sin embargo, en muchos estados de dolor crónico, la hipersensibilidad dura más que el proceso de curación y normalmente se debe a lesión del sistema nervioso. Esta lesión a menudo conduce a la inadaptación de las fibras aferentes (Woolf y Salter 2000 Science 288: 1765 - 1768). El dolor clínico está presente cuando el malestar y sensibilidad anormal destacan entre los síntomas del paciente. Los pacientes tienden a ser completamente heterogéneos y pueden presentar diversos síntomas de dolor. Existe un número de subtipos de dolor típico: 1) dolor espontáneo que puede ser sordo, ardiente o punzante; 2) respuestas de dolor a estímulos inocuos son exageradas (hlperalgesia); 3) el dolor se produce mediante estímulos normalmente inocuos (alodinia) ( eyer y col., 1994 Textbook of Pain 13 - 44). Aunque los pacientes con dolor de espalda, dolor de artritis, trauma del SNC, o dolor neuropático pueden tener síntomas similares, los mecanismos que subyacen son diferentes y, por lo tanto, pueden requerir estrategias de tratamiento diferentes. Por lo tanto el dolor se puede dividir en un número de áreas diferentes debido a patofisiología diferente, éstos incluyen dolor nociceptivo, inflamatorio, neuropático, etc. Se debe apreciar que algunos tipos de dolor tienen múltiples etiologías y de esta manera se pueden clasificar en más de un área, por ejemplo, dolor de espalda, dolor de cáncer tienen tanto componentes nociceptivos como neuropáticos. El dolor nociceptivo está inducido por lesión de tejido o mediante estímulos intensos con el potencial para producir lesión. Los aferentes de dolor se activan mediante la transducción de estímulos por los nociceptores en el sitio de lesión y sensibilizan la columna vertebral a nivel de su terminación. Esto después se transmite de la columna vertebral al cerebro donde se percibe el dolor (Meyer y col., 1994 Textbook of Pain 13 - 44). La activación de los nociceptores activa dos tipos de fibras nerviosas aferentes. Las fibras A - delta mielinizadas se transmiten rápidamente y son responsables de las sensaciones de dolor agudas y punzantes, mientras que las fibras C no mielinizadas se transmiten a una velocidad más lenta y conducen el dolor sordo o doloroso. El dolor nociceptivo agudo moderado a grave es una característica prominente de, pero no se limita a dolor de torceduras/esguinces, dolor post - operativo (dolor que sigue a cualquier tipo de procedimiento quirúrgico), dolor postraumático, quemaduras, infarto de miocardio, pancreatitis aguda, y cólico renal. También síndromes de dolor agudo relacionados con cáncer debidos comúnmente a interacciones terapéuticas tales como toxicidad por quimioterapia, inmunoterapia, terapia hormonal y radioterapia. El dolor nociceptivo agudo moderado a grave es una característica prominente de, pero sin limitación, dolor de cáncer que puede ser dolor relacionado con tumores, (por ejemplo, dolor óseo, cefalea y dolor facial, dolor visceral) o asociado a terapia de cáncer (por ejemplo, síndromes después de quimioterapia, síndromes de dolor post -quirúrgico crónico, síndromes post - radiación), dolor de espalda que se puede deber a discos intervertebrales herniados o quebrados o anormalidades de las articulaciones de facetas lumbares, articulaciones sacroilíacas, músculos paraespinales o el ligamento posterior longitudinal. El dolor neuropático se define como dolor iniciado o producido por una lesión primaria o disfunción en el sistema nervioso (definición IASP). El daño nervioso se puede producir por trauma y enfermedad y así el término 'dolor neuropático' abarca muchos trastornos con diversas etiologías. Éstos incluyen pero no se limitan a, neuropatía diabética, neuralgia post - herpética, dolor de espalda, neuropatía de cáncer, neuropatía de VIH, dolor de miembros de Phanton, síndrome de túnel carpiano, alcoholismo crónico, hipotiroidismo, neuralgia trigeminal, uremia, o deficiencias de vitaminas. El dolor neuropático es patológico ya que no tiene papel protector. A menudo está presente después de que de la causa original se haya disipado, comúnmente durando años, descendiendo significativamente la calidad de vida de los pacientes (Woolf y Mannion 1999 Lancet 353: 1959 - 1964). Los síntomas de dolor neuropático son difíciles de tratar, ya que a menudo son heterogéneos incluso entre pacientes con la misma enfermedad (Wolf y Decosterd 1999 Pain Supp. 6: S141 - S147; Wolf y Mannion 1999 Lancet 353: 1959 - 1964). Incluyen dolor espontáneo, que puede ser continuo, o paroximal y dolor evocado anormal, tal como hiperalgesia (aumento de sensibilidad a un estímulo nocivo) y alodinia (sensibilidad a un estímulo inocuo). El proceso inflamatorio es una serie compleja de procesos celulares activados en respuesta a lesión de tejido o la presencia de sustancias extrañas, que dan como resultado hinchazón y dolor (Levine y Taiwo 1994: Textbook of Pain 45 - 56). El dolor artrítico completa la mayoría de la población con dolor inflamatorio. La enfermedad reumatoide es una de las afecciones inflamatorias crónicas más comunes en países desarrollados y artritis reumatoide es una causa común de incapacidad. La etiología exacta de RA es desconocida, pero las hipótesis actuales sugieren que pueden ser importantes tanto los factores genéticos como microbiológicos (Grennan y Jayson 1994 Textbook of Pain 397 - 407). Se ha estimado que casi 16 millones de americanos tienen osteoartritis sintomática (OA) o enfermedad de articulaciones degenerativas, la mayoría de las cuales tienen alrededor de 60 años de edad, y esto se espera que se incremente hasta 40 millones a medida que la edad de la población aumenta, haciendo de esto un problema de salud pública, de enorme magnitud (Rouge y Mersfelder 2002 Ann Pharmacother. 36: 679 - 686; McCarthy y col., 1994 Textbook of Pain 387 - 395). La mayoría de los pacientes con OS buscan atención médica debido a dolor. La artritis tiene un impacto significativo sobre la función psicosocial y física y se sabe que es la causa principal de incapacidad en la vida más tarde. Otros tipos de dolor inflamatorio incluyen pero no se limitan a enfermedades inflamatorias del intestino (IBD). Otros tipos de dolor incluyen pero no se limitan a: Trastornos músculo - esqueléticos que incluyen pero no se limitan a mialgia, fibromialgia, espondilitis, artropatías sero - negativas (no reumatoide, reumatismo no articular, distrofinopatía, glucogenolisis, polimiositis, piomiositis; dolor central o 'dolor talámico' como se define mediante el dolor producido por lesión o disfunción del sistema nervioso incluyendo pero sin limitación dolor después de accidente cerebrovascular central, esclerosis múltiple, lesión de la columna vertebral, enfermedad de Parkinson y epilepsia; dolor cardiaco y vascular incluyendo pero sin limitación angina, infarto de miocardio, estenosis mitral, pericarditis, fenómeno de Raynaud, escleredoma, isquemia del músculo esquelético; dolor visceral, y trastornos gastrointestinales. La viscera abarca los órganos de la cavidad abdominal. Estos órganos incluyen los órganos sexuales, bazo y parte del sistema digestivo. El dolor asociado a la viscera se puede dividir en dolor visceral digestivo y dolor visceral no digestivo. Los trastornos gastrointestinales (Gl) comúnmente encontrados incluyen los trastornos del intestino funcionales (FBD) y enfermedades inflamatorias del intestino (IBD). Estos trastornos Gl incluyen un amplio rango de estados patológicos que están actualmente solamente moderadamente controlados, incluyendo para FBD, reflujo gastro - esofágico, dispepsia, el síndrome de intestino irritable (IBS) y síndrome de dolor abdominal funcional (FAPS), y para IBD, enfermedad de Crohn, ileitis, y colitis ulcerosa, todos los cuales producen dolor visceral. Otros tipos de dolor visceral incluyen el dolor asociado a dismenorrea, dolor pélvico, cistitis y pancreatitis; dolor de cabeza que incluye pero sin limitación migraña, migraña con aura, migraña sin aura, cefalea en racimos, cefalea de tipo tensión; dolor orofacial incluyendo sin limitación dolor dental, dolor miofacial temporomandibular.

Los compuestos terapéuticos también se espera que sean útiles en el tratamiento de ansiedad y pánico como se demuestra por medio de procedimientos farmacológicos habituales. La actividad biológica de los compuestos terapéuticos de la invención se pueden medir en un ensayo de unión a radioligandos usando [3H]gabapentina y la subunidad a2d derivada de tejido de cerebro bovino (Gee N. S., Brown J. P., Dissaanyake V. U. K., Oxford J., Thurlow R., Woodruff G. N., J. Biol. Chem., 1996; 271; 5879 - 5776). Los resultados se pueden expresar en términos de afinidad de ensayo de a2d µ? o nM. Los compuestos terapéuticos se pueden administrar, por ejemplo pero sin limitación a la siguiente vía: por vía oral, bucal o sublingual en la forma de comprimidos, cápsulas, multi y nano partículas, geles, películas (incluyendo, muco - adhesivas), polvo, óvulos, elixires, grageas, (incluyendo, llenas de líquido), gomas masticables, soluciones, suspensiones y pulverizaciones. Los compuestos de la invención también se pueden administrar en forma de dosificación osmótica, o en forma de una dispersión de alta energía o en forma de partículas recubiertas o forma de disolución rápida, de desintegración rápida como se describe en Ashley Publications, 2001 de Liang y Chen. Los compuestos terapéuticos también se pueden administrar por inyección, es decir, por vía intravenosa, intramuscular, intracutánea, intraduodenal, o intraperitoneal, intraarterial, intratecal, intraventricular, intrauretral, intrasternal, intracraneal, intraespinal o subcutánea, o se pueden administrar mediante infusión, inyectores sin aguja o técnicas de inyección de implantes. También, los compuestos terapéuticos se pueden administrar por vía intranasal, o mediante inhalación. Como alternativa, los compuestos terapéuticos se pueden administrar por vía tópica a la piel, mucosa, por vía dérmica o tópica, por ejemplo, en forma de un gel, hidrogel, loción, solución, crema, ungüento, polvo suelto, vendaje, espuma, película, parche cutáneo, obleas, implante, esponjas, fibras, venda, microemulsiones, y las combinaciones de los mismos. Como alternativa, los compuesto terapéuticos se pueden administrar por vía rectal, por ejemplo, en la forma de un supositorio o pesario. También se pueden administrar mediante vía vaginal. Los compuestos terapéuticos también se pueden administrar mediante la vía ocular. También se pueden administrar en el oído, usando por ejemplo pero sin limitación las gotas. Los compuestos terapéuticos también se pueden usar en combinación con una ciclodextrina. Las alfa-, beta- y gamma - ciclodextrinas son las más comúnmente usadas y los ejemplos adecuados se describen en los documentos WO - A - 91/11172, WO - A - 94/02518 y WO - A - 98/55148. El término 'administrado' incluye distribución mediante técnicas virales o no virales. Los mecanismos de distribución viral incluyen pero no se limitan a vectores adenovirales, vectores virales adeno asociados (AAV), vectores virales herpes, vectores retrovirales, vectores lentivirales, y vectores baculovirus. Los mecanismos de distribución no virales incluyen transfección mediada por lípidos, liposomas, inmunoliposomas, lipofectina, anfifilos faciales catiónicos (CFA) y las combinaciones de los mismos. Las vías de tales mecanismos de distribución incluyen pero no se limitan a vías mucosal, nasal, oral, parenteral, gastrointestinal, tópica o sublingual.

La preparación farmacéutica de los compuestos terapéuticos es preferiblemente en forma de dosificación unitaria. En tal forma la preparación se subdivide en dosis unitarias que contienen cantidades apropiadas del componente activo. La forma de dosificación unitaria puede ser una preparación envasada, el . envase conteniendo cantidades discretas de preparación, tales como comprimidos envasados, cápsulas, y polvos en víales o ampollas. También, la forma de dosificación unitaria puede ser una cápsula, comprimido, sello, o la propia gragea, o puede ser el número apropiado de cualquiera de éstos en forma envasada. La cantidad de componente activo en una preparación de dosis unitaria puede variar o ajustarse entre 0,1 mg y 1 g según la aplicación particular y la potencia del componente activo. En uso médico el fármaco se puede administrar tres veces al día en forma de, por ejemplo, cápsulas de 100 ó 300 mg. En uso terapéutico, los compuestos utilizados en el procedimiento farmacéutico de esta invención se administran en la dosificación inicial de aproximadamente 0,01 mg a aproximadamente 100 mg/kd al día. Se prefiere un intervalos de dosis diaria de aproximadamente 0,01 mg a aproximadamente 100 mg/kg. Sin embargo, las dosificaciones, se pueden variar dependiendo de los requerimientos del paciente, la gravedad de la afección que se está tratando, y el compuesto que se emplea. La determinación de la dosificación apropiada para una situación particular está dentro de la práctica en la técnica. En general, el tratamiento se inicia con dosificaciones más pequeñas que son menores que la dosis óptima del compuesto. En lo sucesivo, la dosificación se incrementa en incrementos pequeños hasta que se alcanza el efecto óptimo en las circunstancias. Por conveniencia, la dosificación diaria total se puede dividir y administrar en porciones durante el día si se desea.

La invención se ilustra mediante los siguientes ejemplos no limitantes.

EJEMPL0 1 Biciclor3.2.01hept-2-en-6-ilidenacetato de (+/-)etilo Una solución de trietilfosfonoacetato (10,7 g; 48 mmoies) en tetrahidrofurano (5 mi) se añadió a una suspensión de dispersión de hidruro sódico al 60% (1,91 g; 48 mmoies) en tetrahidrofurano (30 mi) manteniendo la temperatura entre 5 - 15°C. Una solución de biciclo[3.2.0]hept-2-en-6-ona (5 g; 46 mmoies) en tetrahidrofurano (5 mi) se añadió manteniendo la temperatura entre 5 - 15°C. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos después se añadió agua desmineralizada (30 mi). Se separaron las fases y se añadió tolueno a la fase orgánica que se lavó con agua desmineralizad (2 x 20 mi). La fase orgánica se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró a vacío para producir el compuesto del título en forma de un aceite (7,74 g). 1H - RMN (CDCI3, 400 MHz): d = 5,84 - 5,61 (3H, m), 4,16 - 4,11 (2H, c), 3,91 - 3,61 (1H, m), 3,45 - 3,39 (1H, m), 3,32 - 3,06 (1H, m), 2,92 - 2,76 (1H, m), 2,69 - 2,62 (1 H, m), 2,53 - 2,42 (1 H, m), 1 ,29 - 1 ,25 (3H, t).

EJEMPLO 2 Ácido f 1 S.5R)-b¡ciclor3.2.01hept-2-en-6-ilidenacético El éster racémico (1,0 g; 5,6 mmoles) del ejemplo 1 se disolvió en terc-butanol (4 mi) y íampón fosfato potásico (pH = 7,2; 6 mi). La suspensión resultante se agitó durante 5 minutos a 30°C. Se añadió a la reacción Novozima 435 (500 mg) lipasa B de Candida antárctica inmovilizada y la suspensión después se agitó a 30°C durante 10 horas. La mezcla heterogénea se filtró para recuperar la enzima inmovilizada. El filtrado se extrajo tres veces con acetato de etilo ( 00 mi) para retirar el enantiomero no deseado en forma del éster. Después la solución acuosa se acidificó hasta pH 3,5 con ácido clorhídrico diluido y se extrajo tres veces con acetato de etilo (100 mi), las fases orgánicas combinadas se secaron con sulfato sódico y se concentraron a vacío para proporcionar el compuesto de título.

EJEMPLO 3 Biciclor3.2.01heDt-2-en-6-ilidenacetato de (1S.5R)etilo El compuesto del ejemplo 2 se disolvió en etanol (20 mi) y se añadió ácido sulfúrico concentrado. La reacción se calentó hasta 80°C y se agitó durante 18 horas. El disolvente se retiró a vacío para producir el compuesto del título en forma de un aceite. 1H - RMN (CDCI3, 400 MHz): d = 5,84 - 5,61 (3H, m), 4,16 - 4,11 (2H, c), 3,91 - 3,61 (1H, m), 3,45 - 3,39 (1H, m), 3,32 - 3,06 (1H, m), 2,92 - 2,76 (1H, m), 2,69 - 2,62 (1 H, m), 2,53 - 2,42 (1 H, m), 1 ,29 - 1 ,25 (3H, t).

EJEMPLO 4 Biciclof3.2.01hept-6-ilidenacetato de (+/-)etilo Se añadió trietilfosfonoacetato (96,2 g; 429 mmoles) a una suspensión de dispersión de hidruro sódico al 60% (16,5 g; 413 mmoles) en tetrahidrofurano (480 mi) manteniendo la temperatura entre 1 - 4°C. Se añadió una solución de biciclo[3.2.0]hept-6-ona (35,0 g; 318 mmoles) en tetrahidrofurano (320 mi) manteniendo la temperatura entre 5 - 15°C. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante toda una noche. Se añadió agua desmineralizada (350 mi) y el producto se extrajo con dietil éter (3 x 450 mi). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (300 mi), se secaron sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtraron y se concentraron a vacío para dejar un aceite naranja pálido. Esto se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice, eluyendo con acetato de etilo : n-hexano. Las fracciones que contienen el producto se combinaron y se concentraron a vacío para producir el compuesto del título en forma de un aceite incoloro (47,8 g). 1H - RMN (CDCI3, 400 MHz): d = 5,55 (1H, d), 4,15 (2H, c), 3,40 (1H, m), 3,20 (1 H, m), 2,90 (1H, m), 2,55 (1H, m), 1,8 1,5 (6H, m), 1,30 (3H, t).

EJEMPLO 5 Ácido ( 1 R.5R)-biciclof3.2.01heDt-6-ilidenacético El éster racémico del ejemplo 4 (1,0 g; 5,5 mmoles) se disolvió en terc-butanol (4 mi) y tampón fosfato potásico (pH = 7,2; 6 mi). La suspensión resultante se agitó durante 5 minutos a 30°C. Se añadió a la reacción Novozlma 435 (500 mg) lipasa B de Candida antárctica inmovilizada y la suspensión después se agitó a 30°C durante 10 horas. La mezcla heterogénea se filtró para recuperar la mezcla inmovilizada. El filtrado se extrajo tres veces con acetato de etilo (100 mi) para retirar el enantiomero no deseado en forma del éster. La solución acuosa se acidificó después hasta pH 3,5 con ácido clorhídrico diluido y se extrajo tres veces con acetato de etilo (100 mi), las fases orgánicas combinadas se secaron con sulfato sódico y se concentraron a vacío para proporcionar el compuesto de título. 1H - RMN (CDCIa, 400 MHz): d = 5,79 - 5,54 (1H, m), 3,75 - 3,40 (1H, m), 3,25 - 3,18 (1H, m), 2,94 - 2,83 (1H, m), 2,61 - 2,26 (1H, m), 1,84 - 1,52 (6H, m).

EJEMPLO 6 Bicicloí3.2.01hept-6-ilidenacetato de (1R,5R)etilo El compuesto del ejemplo 5 (20 mg; 0,13 mmoles) se disolvió en etanol (20 mi) y se añadió ácido sulfúrico concentrado 50 µ?). La reacción se calentó hasta 80°C y se agitó durante 18 horas. El disolvente se retiró a vacío para producir el compuesto del título en forma de un aceite. 1H - RMN (CDCI3, 400 MHz): d = 5,55 (1 H, d), 4,15 (2H, c), 3,40 (1H, m), 3,20 (1 H, m), 2,90 (1H, m), 2,55 (1 H, m), 1,8 - 1 ,5 (3H, t).

EJEMPLO 7 (1 R.5R.6SVr6-fnitrometinbic¡clor3.2.0lheDt-6-inaecetato de etilo El éster acrílico del ejemplo 6 (0,85 g; 4,7 mmoles) se disolvió en acetato de etilo (10 mi) y se agitó a 20 - 25°C. Se añadieron trihidrato de fluoruro de tetrabutilamonio (1,93 g; 6,12 mmoles) y nitrometano (0,46 g; 7,5 mmoles) y la reacción se agitó hasta reflujo durante 3 horas. La reacción se enfrió y se añadió ácido clorhídrico 2 M (8 mi). Las dos fases se mezclaron después se dejó que se separan, la fase orgánica se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, y se concentró a vacío para producir el compuesto del título en forma de un aceite (1 ,39 g). 1H - RMN (CDCI3, 400 MHz): d = 4,80 (2H, m), 4,15 (2H, m), 2,85 (1H, m), 2,65 (1 H, m), 2,55 (2H, m), 2,20 (1 H, m), 1 ,25 (3H, t).

EJEMPLO 8 Ácido (1 R,5R.6S)-r6-(nitrometil)biciclor3.2.0lhept-6-illacético Una solución del nitro éster del ejemplo 7 (200 g; 828,9 mmoles) en tetrahidrofurano (1,0 I) se combinó con hidróxido sódico 2 M (1,04 I; 2,08 moles) y se agitó a temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla bifásica se diluyó con tolueno (500 mi) y se separaron las fases. La acuosa se ajustó hasta pH 1 - 3 con ácido clorhídrico concentrado y se extrajo con diclorometano (1,0 I + 600 mi). Los extractos de diclorometano se combinaron y se concentraron a vacío para producir el compuesto del título en forma de un aceite de color naranja, que sedimentó hasta un sólido (163,4 g). 1H - RMN (CDCI3, 400 MHz): d = 4,80 (2H, m), 2,85 (1H, m), 2,60 (3H, m), 2,20 (1H, m), 1,85 (1H, m), 1,70 (2H, m), 1,6 - 1,4 (4H, m).

EJEMPLO 9 Ácido nR.5R.6S)-r6-(Am¡nometinbÍc¡clor3.2.01heDt-6-inacético El nitro ácido del ejemplo 8 (17,5 g; 82,1 mmoles) se disolvió en una mezcla de tetrahidrofurano (123 mi; 7 ml/g) y agua desmineralizada (123 mi; 7 ml/g) y se hidrogenó usando catalizador humedecido con agua al 50% de Pd al 10%/C (1,8 g; 0,1 g/g) a 50°C y una presión de hidrógeno de 150 psi (1034,5 kPa) durante 18 horas. La mezcla de reacción se filtró a través de celita y el filtro se lavó con una mezcla 1:1 de tetrahidrofurano y agua desmineralizada (150 mi). El filtrado y lavado se combinaron y los disolventes de retiraron a vacío para dejar un residuo de blanco a marrón. Este residuo se disolvió en una mezcla de tetrahidrofurano (30 mi) y agua desmineralizada (200 mi) a 40°C. Se añadió acetato de etilo (100 mi) y la mezcla de reacción se enfrió hasta temperatura ambiente. Se separaron las fases y la fase acuosa se lavó con acetato de etilo (100 mi). El agua de la fase acuosa se retiró a vacío para dejar un sólido blanco. El sólido se suspendió en acetonitrilo (45 mi) a 55°C durante 5 minutos. El producto se recogió mediante filtración, el sólido aislado después se secó a vacío a 45°C para producir el compuesto del título en forma de un sólido blanco (6,16 g). 1H - RMN (d6-DMSO, 400 MHz): d = 7,94 (3H, s a), 3,15 (1H, d), 3,07 (1H, d), 2,72 (1H, quin.), 2,46 (1 H, m), 2,42 (1H, d), 2,33 (1 H, d), 1,98 (1H, m), 1 ,80 - 1 ,64 (2H, m), 1 ,59 (1 H, m), 1 ,48 - 1 ,28 (1 H, m), 1 ,23 (1 H, dd).

Claims (6)

REIVINDICACIONES

1. Un intermedio racémico de fórmula (I) o (IA) que R representa H o un grupo protector de ácido carboxílico adecuado.

2. Un compuesto según la reivindicación 1 donde R representa H, alquilo Ci .6 o bencilo.

3. Un procedimiento para la preparación de un compuesto de fórmula (I) y (IA) que comprende la reacción de compuestos de fórmula (II) y (HA) con un compuesto de fórmula (III). (ttl) en la que R representa un grupo fosfonil éter adecuado y R representa un grupo protector de ácido carboxílico adecuado, seguido de hidrólisis opcional del grupo R.

Uso de compuestos de fórmula (I) y (IA) en la preparación de compuesto de fórmula (XII).

5. Un procedimiento para la preparación de un compuesto de fórmula (IV) o (IVA) que comprende la reacción: (i) donde R es H, hidrólisis enzimática de un compuesto de fórmula (I) o (IA) donde R es un grupo protector de ácido carboxílico; o (ii) donde R es un grupo protector de ácido carboxílico, esterificación enzimática de un compuesto de fórmula (I) o (IA) donde R es H; o (iii) resolución cromatográfica de los isómeros de un compuesto de fórmula (I) o (IA); o (iv) donde R es un grupo protector de ácido carboxílico, mediante hidrólisis enzimática de un compuesto de fórmula (I) o (IA) donde R es un grupo protector de ácido carboxílico, seguido de reesterificación; o (v) donde R es un grupo protector de ácido carboxílico, mediante eliminación del estereoisómero indeseado de un compuesto de fórmula (I) o (IA) donde R es un grupo protector de ácido carboxílico mediante hidrólisis enzimática. Un procedimiento según la reivindicación 5 donde la hidrólisis enzimática se efectúa mediante Novozima 435. Un procedimiento para la preparación de un compuesto de fórmula (XII) según la reivindicación 4, que comprende, como una etapa intermedia, un procedimiento según la reivindicación 5 ó

6.