MXPA00008048A - 2-fenil-1-(3,4-dihidroxi-5-nitrofenil)-1-etanonas substituidas, su uso en el tratamiento de algunos trastornos en el sistema nervioso central y periferico y composiciones farmaceuticas que los contienen - Google Patents

Abstract

La presente invención se refiere a:Se describen compuestos nuevos de fórmula I (Ver Fórmula). Los compuestos tienen propiedades farmacéuticas potencialmenteútiles en el tratamiento de algunos desórdenes del sistema nervioso central y periférico, en donde una reducción en l O-metilación de catecolaminas puede ser de beneficio terapéutico, tales como enfermedad de Parkison y trastornos parkinsonianos, alteraciones gastrointestinales, estados de formación de edemas e hipertensión.

Description

2-FENIL-1-(3,4-DIHIDROXI-5-NITROFENIL)-1-ETANONAS SUSTITUIDAS, SU USO EN EL TRATAMIENTO DE ALGUNOS TRASTORNOS EN EL SISTEMA NERVIOSO CENTRAL Y PERIFÉRICO, Y COMPOSICIONES FARMACÉUTICAS QUE LOS CONTIENEN.

DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN El tratamiento sintomático más efectivo de la enfermedad de Parkinson involucra la administración de L-ß-3, 4-da hidrofenilalamna (L-DOPA) , el precursor inmediato ae dopamma. L-DOPA administrada oralmente es metabolizada predominantemente en la periferia por la L-ammoáciao aromático descarboxilasa (AADC) a dopamina, la cual provoca efectos adversos graves tales como emesis, nipotensioi. ortostatica y arritmia cardiaca. Por lo tanto, L-DOPA, habitualmente se administra en combinación con un inhibidor periférico de AADC (benserazida o carbidopa). Cuando se administra junto con tales inhibidores, se forma muy poca dopamma en la periferia, pero únicamente una cantidad pequeña de una dosis oral de L-DOPA alcanza al cerebro debido a que una cantidad considerable del medicamento experimenta REF:122487 metilación a 3-0-metil-L-DOPA ( annist?, P.A., et al., Progress Drug Research, 39: 291-350, 1992). La duración de la mejoría clínica inducida por L-DOPA es breve como resultado de la corta vida media de L-DOPA, lo que contrasta con la prolongada vida media de 3-O-metil-L-DOPA. En algunos años después del inicio de la terapia de L-DOPA habitual con 2 a 4 dosis al dia, la mejoría clínica inducida por L-DOPA se desvanece al final de cada ciclo de dosis, lo que produce un patrón de fluctuaciones motoras de "fin de la dosis" o "desvanecimiento". Se ha descrito una relación cercana entre la acumulación de 3-0-metil-L-DOPA y el desarrollo del fenómeno de "desvanecimiento" (Tohgi, H., et al., Neurosci. Letters, 132: 19-22, 1992). Se ha anticipado que éste puede ser el resultado de la inhibición del transporte de L-DOPA a nivel de la barrera he atoencefálica por su metabolito 0-metilado (Reches, A., et al., Neurolsgy, 32: 887-888, 1982) o simplemente debido a que existe menos L-DOPA disponible para llegar al cerebro (Nutt, J.G., Fellman, J.H. Clin. Neuropharmacol. , 7: 35-49, 1984). En años recientes se ha acelerado el desarrollo de inhibidores nuevos de la enzima catecol-O-metilo transferasa (COMT) por la hipótesis de que la inhibición de esta enzima puede mejorar las mejoras clínicas significativas en pacientes afligidos por la enfermedad de Parkinson que experimentan tratamiento con L-DOPA más un inhibidor periférico de AADC.

El razonamiento para el uso de inhibidores de COMT se basa en su capacidad para inhibir la O-metilación de L-DOPA a 3-0-metil-L-DOPA. La inhibición- por COMT disminuye la eliminación de L-DOPA del plasma al incrementar la vida media del plasma (lo que incrementa el área bajo la curva [ABC] sin alterar el tiempo para alcanzar el pico o la concentración máxima plasmáticas de L-DOPA) . Por lo tanto, las alteraciones farmacocinéticas pueden ser una ventaja sobre las dosis cada vez mayores de L-DOPA, lo cual también incrementa el ABC, pero adicionalmente incrementa las concentraciones pico. A su vez, el incremento de las concentraciones pico se relaciona con efectos adversos tales como discinesia, la cual se presenta inmediatamente cuando se suministran inhibidores COMT, pero se puede anticipar ya sea al reducir la dosis de L-DOPA o al .incrementar los intervalos de tiempo entre las dosis. Los efectos de la inhibición de COMT también difieren de aquellos de una formulación de L-DOPA de liberación controlada la cual disminuye la absorción y reduce la biodisponibilidad. Los cambios farmacocinéticos inducidos por la inhibición de COMT reducen la dosis diaria de L-DOPA al permitir una reducción de cada dosis o un incremento en los intervalos de dosis. Con dosis repetidas de L-DOPA cada 2-6 horas en presencia de inhibición de COMT, se incrementa la concentración media plasmática de L-DOPA y las concentraciones intermedias se incrementa proporcionalmente más que las concentraciones pico pese a una reducción en la dosis de L- DOPA. Como se predeciría por la eliminación frenada de L-DOPA, se prolonga la duración de acción antiparkinsoniana con dosis únicas de L-DOPA por inhibición con COMT (Nutt, J.G., Lancet, 351: 1221-1222, 1998) . Los inhibidores más potentes y selectivos para COMT encontrados hasta ahora son muy activos y no interactúan con otras enzimas, receptores, canales iónicos o transportadores hasta dosis muy altas. Algunos de ellos demuestran presentar efectos benéficos tanto en modelos experimentales de parkinsonismo como en pacientes con enfermedad de Parkinson. también se han adelantado otras aplicaciones terapéuticas de estos inhibidores de COMT, específicamente en el tratamiento de depresión o ansiedad, como medicamentos gastroprotectores y como agentes natriuréticos y antihipertensivos . Los inhibidores de COMT más potentes presentados hasta ahora, 3, 4-dihidroxi- ' -metil-5-nitrobenzofenona (tolcapona, patente australiana AU-B-69764/87) , y (E)-2-ciano-N,N-dietil-3 (3, 4-dihidroxi-5-nitrofenil) acrilamida (entacapona, patente alemana DE 3740383 A 1) tienen constantes de inhibición en el intervalo bajo de nM . La tolcapona difiere de entacapona en ser un inhibidor más potente de COMT en la periferia y además en penetrar en el cerebro para inhibir también la COMT cerebral. No se ha establecido cuál de estos dos inhibidores es más útil en el tratamiento de la enfermedad de Parkinson. Se puede es'tablecer la suposición de que los compuestos que penetran la barrera hematoencefálica son más efectivos pues teóricamente pueden tener beneficios adicionales al disminuir la metilación de dopamina a 3-metoxitiramina y ácido homovainíllico. Inversamente, la inhibición central puede no ser importante si la acción más importante es proteger a L-DOPA de una descomposición en la periferia. Esta distinción puede tener importancia práctica, pues el uso de los inhibidores de COMT se excluyen del cerebro pueden evitar efectos colaterales potenciales no deseados en el SNC de estos agentes. A este respecto, es interesante subrayar la carencia de una acción antiparkinsoniana de tolcapona cuando se administra sola (Hauser, R.A., et al., Mov Disord, 1998, 13, 643-647), y las observaciones relativamente frecuentes de una estimulación aumentada dopaminérgica central, principalmente discinesia y confusión, en pacientes que toman L-DOPA más tolcapona (Nutt, J.G., Lancet, 351: 1221-1222, 1998). Esto sugiere que los efectos centrales de la inhibición de COMT son muy pequeños cuando se administra sola, pero cuando se administra con L-DOPA, se puede asociar el riesgo de inhibición de COMT cerebral con la aparición de síntomas relacionados con la estimulación dopaminérgica aumentada lo cual puede requerir suspender la terapia.

Otro problema potencial con los inhibidores de COMT se relaciona con su vida media relativamente corta (tolcapona 2 h [Dingemanse, J. , et al., Clin. Pharmacol, Ther., 57: 508- 517, 1995]; entacapona, 0.3 h [Keranen, T., et al., Eur. J. Clin. Pharmacol., 46: 151-157, 1994]). Para resolver este problema, se recomienda que tanto tolcapona como entacapona se administren tan frecuentemente como tres veces al día; debido a que la vida media de entacapona es considerablemente más corta que la de tolcapona, la dosis recomendada de entacapona es dos veces la de tolcapona. Como se ha mencionado previamente, el grupo 3,4-dihidr xi-5-nitrofenilo se ha identificado como un farmacófero activo y se ha descubierto simultáneamente que la presencia de un grupo carbonilo (por ejemplo en tolcapona) o un grupo enona (por .ejemplo en entacapona) se conjuga con el farmacófero de la molécula generalmente mejora la inhibición de la transferencia catalizada por COMT del grupo metilo a partir de la coenzima S-adenosil-L-metionina a un sustrato que contiene un grupo funcional catecol. Entre los muchos compuestos probados que presentan un grupo 3, 4-dihidroxi-5-nitrobenzoilo, se reconocen a las benzofenonas correspondientes como los inhibidores de COMT más potentes con una DE5C < 1 mg/kg (rata, p.o.) (Borgulya J. , et al., Helvética Chimica Acta 72, 952-968, 1989) .

La formación de homólogos de compuestas biológicamente activos conocidos como medicamentos potencialmente mejorados es un principio bien conocido y se utilizan principalmente para optimización de actividad de medicamentos estructuralmente no específicos o para obtener cambios en la acción biológica predominante en medicamentos estructuralmente específicos (Korolkovas A. Essentials of Medicinal Chemistry, p. 76, 1988 por J. Wiley & Sons, Inc.). Por otra parte, la homologación generalmente no se utiliza ni se espera que afecte de manera predecible la vida media de un compuesto . Sorprendentemente hemos demostrado que el siguiente homologo superior de 3, 4-dihidroxi-5-nitrobenzofenona, es decir, el compuesto con un compuesto metileno entre el grupo benzoilo sustituido y el grupo fenilo, está dotado con una inhibición selectiva de COMT de larga duración y que este efecto es único en una serie de homólogos superiores. La invención se relaciona con 2-fenil-1- (3," 4-d?hidroxi-5-nitrofenil) -1-etanonas sustituidas de fórmula I en donde R: y R2 son hidrógenos o grupos hidrolizables bajo condiciones fisiológicas, iguales o diferentes, y opcionalmente significan alcanoilo o aroilo inferior sustituido, alquilo o arilsulfonilo inferior sustituido opcionalmente, o alquilcarbamoilo inferior sustituido opcionalmente, o, tomados juntos, significan un grupo alquilideno o ciclocalquilideno inferior; R3, R4 y R5 son iguales o diferentes y significan hidrógeno, un residuo de hidrocarburo inferior opcionalmente sustituido, saturado o parcialmente insaturado, hidroxilo, un grupo alcoxi o ariloxi inferior opcionalmente sustituido, arilo opcionalmente sustituido, alcanoilo opcionalmente sustituido o un grupo aroilo, un grupo alcanoilamino inferior, un grupo dialcanoilamino inferior, carboxilo, alquiloxicarbonilo inferior opcipnalmente sustituido o un grupo ariloxicarbonilo, carbamoilo opcionalmente sustituido, 'halógeno, nitro, amino, alquilamino inferior o dialquilamino inferior, o un grupo ciano, o tomados juntos significan anillos alifáticos o heteroalifáticos, o anillos aromáticos o heteroaromáticos, y las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos; con el uso de compuestos para la prevención o tratamiento de ciertos estados patológicos en los humanos, y para la preparación de composiciones farmacéuticas que los contienen. El término "inferior" indica residuos con un máximo de 8, preferiblemente un máximo de 4 átomos de carbono. El término "alquilo", tomado sólo o en* combinación con términos tales como "alcanoilo, alcoxicarbonilo, alquilideno, cicloalquilideno, alcoxicarboniloxi, alquilamino", indica residuos de hidrocarburos saturados de cadena lineal o ramificada. El término halógeno indica flúor, cloro, bromo y yodo. Ei término "arilo" indica un grupo aromático carbociclico, preferiblemente grupos monocíclicos o bicíclicos . Para la preparación de composiciones farmacéuticas de compuestos de fórmula I, se mezclan los portadores farmacéuticamente aceptables con los compuestos activos. Los portadores farmacéuticamente aceptables pueden ser sólidos o líquidos. Las preparaciones en forma sólida incluyen polvos, tabletas, granulos dispersables y cápsulas. Un portador sólido puede ser una. o más sustancias las cuales también actúan como diluyentes, agentes saborizantes, solubilizantes, lubricantes, agentes que mejoran la suspensión, aglutinantes o agentes de desintegración de tabletas; también pueden ser un material encapsulante. Preferiblemente, la preparación farmacéutica está en forma de dosificación unitaria, por ejemplo preparación empacada, el empaque contiene cantidades separadas de preparación tales como tabletas empacadas, cápsulas y polvos en frascos o ámpulas.

Las dosificaciones pueden variar dependiendo del requerimiento del paciente, la gravedad de la enfermedad y el compuesto particular que se utilice. Por conveniencia, la dosificación diaria en total se puede dividir y administrar en porciones a través del día. La determinación de la dosificación apropiada para una situación particular está dentro de la habilidad de aquellos en la técnica médica. Ahora se hace referencia a los dibujos anexos, en los cuales: la figura 1 es una gráfica que muestra la actividad cerebral de COMT en tiempos diferentes después de la administración oral del compuesto B (cuadros negros) , entacapona (círculos blancos) o tolcapona (cuadros blancos). La figura 2 es una gráfica que muestra la actividad hepática de COMT en diferentes tiempos después de la administración oral del compuesto B (cuadros negros) , entacapona (círculos blancos) o tolcapona (cuadros blancos) . La figura 3 es una gráfica que muestra la concentración dependiente de la inhibición de la actividad en cerebro de COMT una hora después de la administración oral del compuesto B (cuadros negros), entacapona (círculos blancos) o tolcapona (cuadros blancos) . La figura 4 es una gráfica que muestra la inhibición dependiente de la concentración de la actividad de COMT hepática una después de la administración oral del compuesto B (cuadros negros), entacapona (círculos blancos) o tolcapona (cuadros blancos). La figura 5 es una gráfica que muestra la actividad horizontal inducida por anfetamina, dependiente de la concentración, después de la administración oral del vehículo (columnas blancas), tolcapona (columnas negras), entacapona (columnas con diagonales) y el compuesto B (columnas con diagonales transversales) . La figura 6 es una gráfica que los estereotipias inducida por anfetamina, dependiente de la concentración, después de la administración oral del vehículo (columnas blancas), tolcapona (columnas negras), entacapona (columnas con diagonales) y el compuesto B (columnas con diagonales transversales) . En .las figuras 1 y 2, cada punto representa la media de 4 a 8 experimentos por grupo' y las líneas verticales la SEM (medio del error estándar) respectiva. En las figuras 3 y 4, cada punto representa la media de 8 experimentos por grupos y las líneas verticales la SEM respectiva. En las figuras 5 y 6, cada columna representa la media de 8 experimentos por grupos y las líneas verticales la SEM respectiva.

MATERIALES Y MÉTODOS Ensayo de la Actividad de COMT En todos los experimentos se utilizaron hígados y cerebros de ratas Wistar macho de 60 días de edad con un peso de 240-260 g (Harlan-Interfauna Ibérica, Barcelona, España) , que se mantienen en dos por jaula bajo condiciones ambientales controladas (ciclo de luz/oscuridad de 12 h y temperatura ambiente de 24°C). Después de la decapitación, los órganos se extirpan inmediato y se homogeinizan en amortiguador de fosfato 5 mM de pH 7.8. Se evalúa la actividad de COMT por la capacidad de metilar adrenalina a metanefrina. Se preincuban alícuotas de 0.5 ml de homogeneizado de hígado y de cerebro completo durante 20 minutos con 0.4 ml de amortiguador de fosfato 5 mM; posteriormente la mezcla de reacción se incuban durante 15 minutos, con concentraciones cada vez mayores de epinefrina (0.1 a 2000 µM; 0.1 ml ) en presencia de una concentración saturante de S-adenosil-L-metionina, el donador metilo (cerebro, 100 µM; hígado, 500 µM) ; el medio de incubación también contiene pargilina 100 µM, MgCl2 100 µM y EGTA 1 mM. La preincubación y la incubación se llevaron a cabo a 37°C bajo condiciones de protección de luz con agitación continua y sin oxigenación.

Los experimentos se llevaron a cabo con el objetivo de estudiar el efecto inhibidor de los inhibidores de COMT sobre la actividad enzimática, la mezcla de reacción se preincuba durante 20 minutos con concentraciones cada vez mayores de los compuestos de prueba (0.5 a 1000 nM) ; la inhibición se realiza en presencia de una concentración de adrenalina 5 veces el valor K-, correspondiente, determinado en experimentos de saturación. En experimentos diseñados para evaluar la biodisponibilidad oral, la vida media y el acceso a cerebro, se administran los compuestos de prueba mediante un tubo gástrico a ratas que han estado en ayuno durante la noche. Posteriormente, a intervalos definidos, se sacrifica a los animales por decapitación y se extirpan los hígados y cerebros y se utilizan para determinar la actividad de COMT, como se describe antes. Al final del periodo de incubación (cerebro, 15 minutos; hígado, 5 minutos), los tubos se transfieren a hielo y se detiene la reacción por la adición de 200 l de ácido perclórico 2 M. Después las muestras se centrifugan (200 x g, 4 minutos, 4°C) y se utilizan alícuotas de 500 µl del sobrenadante, filtrado con tubos filtro Spin-X de tamaño de poro de 0.22 µm (Costar) para el ensayo de metanefrina. El ensayo de metanefrina se lleva a cabo por medio de cromatografía líquida de alta presión con detección electroquímica. Los límites inferio'res para la detección de metanefrina varía de 350 a 500 fmol (0.5 a 1.0 pmol/mg de proteína/h) . Se calcula los valores Kra y Vmax para determinar la actividad de COMT a partir de un análisis de regresión no lineal utilizando el paquete de elementos de programación (software) estadístico GraphPad Prism (Motulsky, H.G., et al., GraphPad Prims, GraphPad Prism Software Inc., San Diego, 1994). Para el cálculo de los valores de CI50, se ajustan los parámetros de la ecuación para un sitio de inhibición, con los datos experimentales. Se proporcionan las medias geométricas con 95% de límite de confianza y las medias aritméticas se proporcionan con S.E.M. el análisis estadístico se realiza por medio de análisis de varianza de una vía (ANOVA) utilizando la prueba de comparación múltiple de Newman-Keuls para comparar valores. Se determina el contenido de proteína en los homogeneizados por el método de Bradford (Bradford, M.M., Anal. Biochem., 72: 248-254, 1976) con albúmina sérica humana como estándar. El contenido de proteína es similar en todos los ejemplos (aproximadamente 5 mg/500 µl de homogeneizado) .

Prueba de Comportamien to El" diseño experimental utilizado en el presente estudio tiene como objetivo determinar la potenciación de 5 hiperactividad inducida por anfetamina de sistemas dopaminérgicos cerebrales por inhibidores de COMT. Para este propósito, se dividen en 16 grupos a 128 ratas, y se les administra vehículo o uno de los tres inhibidores de COMT probados 6 horas antes de la evaluación de comportamiento. En todos los grupos de ratas, la prueba de comportamiento comienza 15 minutos después de la inyección s.c. del vehículo o dosis cada vez mayores de anfetamina (0.5, 2.0 ó 4.0 mg/kg) . En el día de la prueba, 7 h antes de que comience el experimento, se transfiere a un cuarto iluminado escasamente y con atenuamiento de sonido del cuarto de la colonia de animales en donde se mantienen las jaulas de prueba; la temperatura y humedad son las mismas que en cuarto fl* de la colonia. Se mide la actividad locomotora espontánea utilizando un monitor de actividad de roedores de San Diego Instruments (modelo Flex Field, San Diego Instruments, San Diego, CA) , con 48 sensores de movimiento infrarrojos. El bastidor inferior es de 50.5 x 50.5 cm, con 32 fotoceldas (separadas por 2.5 cm) localizadas longitudinalmente en 5 cm por encima del piso. El bastidor superior es de 50.5 x 50.5 cm con 16 fotoceldas (separada's po-r 2.5 cm) localizadas longitudinalmente 15 cm por encima del piso. El campo de prueba es una cámara acrílica con dimensiones internas de 40 x 40 x 37 cm. Los registros de actividad de 10 minutos comienzan inmediatamente después de colocar al sujeto de prueba en el centro de la cámara. Se mide la actividad automáticamente con una computadora personal utilizando los elementos de programación (software) Flex Field San Diego Instruments) el cual proporciona intervalos definidos por el usuario de interrupciones totales. Se registran 3 parámetros de movimiento espontaneo normal: actividad horizontal, actividad vertical y tiempo en el centro. Se cuantifica el comportamiento estereotípico (husmeo intenso, movimientos repetitivos de la cabeza y las extremidades y lamerse y morderse, como se define por Feldman, R.S. Meyer, J.S. Quenzer, L.F., Pinciples of Neuropharmacology, 1997, Sinauer Associates, Inc. Publishers, Sunderland, MA) , por un observador independiente después de que se registra en una cinta por medio de un sistema de seguimiento de video (VP200, HVS Image, Ltd) colocado 70 cm por encima del campo de prueba. Los animales se habitúan al ambiente de campo de prueba durante 1 hora antes de la prueba de comportamiento.

RESULTADOS Estudios de Inhibición In vi tro de COMT La incubación de los homogeneizados de hígado y de cerebro completo en presencia de concentraciones cada vez mayores de adrenalina resultan en una formación dependiente de la concentración de metanefrina, lo que proporciona valores de K-. (en µM) y V pax (en nmol de mg de proteína"1 h"1) de 0.7 (0.5, 0.9; 95% de intervalos de confianza) y de 1.31 ± 0.02 para cerebro, y 238.5 (128.5; 348.5) y de 61.6 ± 3.8 para hígado, respectivamente. A partir de estos parámetros cinéticos, se elige una concentración de saturación de adrenalina para utilización en los estudios de inhibición (hígado, adrenalina = 1000 µM; cerebro, adrenalina = 100 µM) . Los compuestos de las fórmulas A-E, más entacapona y tolcapona (los compuestos de referencia) producen una disminución dependiente de la concentración en la O-metilación de adrenalina con valores CI50 en el intervalo bajo de µM para el cerebro y el intervalo µM pa-ra el hígado (véase tabla 1) .

Tabla 1. Valores de CI50 (en nM) para la inhibición de COMT en cerebro e hígado de rata.

Compuesto Cerebro Hígado A 7.1 (3.4, 14.8) 935 (511, 1710) B 3.7 (1.7, 8.1) 696 (356, 1360) C 3.1 (1.1, 8.9) 829 (498, 1379) D 2.9 (1.4, 6.1) 1852 (758, 4522) E 6.7 (3.5, 12.9) 1285 (673, 2454) Entacapona 12.8 (4.0, 41.3) 2320 (741, 7263) Tolcapona 2.2 (0.8, 6.4) 927 (551, 1561) Los compuestos de fórmulas A-E se encuentra que son potentes inhibidores de COMT tanto cerebral como hepática, el efecto inhibidor máximo se obtiene en los siguientes 30 minutos después de su administración oral (tabla 2) . El compuesto A presenta un perfil inhibidor similar en COMT cerebral y hepático, mientras que el compuesto E tiene una potencia mucho mayor sobre COMT hepático en comparación con COMT cerebral. De manera similar, el compuesto B también tiene una potencia mucho mayor como un inhibidor COMT periférico en comparación con cerebro. Los compuestos con cadenas de carbono más grandes son menos potentes para inhibidor COMT en el cerebro, en comparación con sus efectos sobre COMT en hígado. Esta diferencia puede generar dificultades para tener acceso al cerebro. Los compuestos con cadenas cortas de carbono (A, B y C) no .son igualmente potentes para inhibidor COMT periférico y central, pero esta diferencia no es tan sorprendente como la observada con compuestos con cadenas grandes de carbono. Cuando se analiza la duración del efecto inhibidor sobre COMT hepático, se vuelve evidente que el compuesto B (una cadena de 2 carbonos) es un compuesto de acción particularmente prolongada. Notablemente, la inhibición de COMT hepático por este compuesto a las 9 h después de la administración oral casi alcanza 70% de inhibición, mientras que los compuestos con cadenas de carbono más cortas y más grandes no están dotados con tal efecto de acción prolongado.

La tolcapona a las 6 h y 9 h después de la administración producen una inhibición marcada en COMT cerebral y hepático. Como se muestra en las figuras 1 y 2, 9 horas después de la administración, el compuesto B y tolcapona son igualmente potentes para inhibir COMT hepática, mientras que entacapona está casi carente de propiedades inhibitorias de COMT. Por otra parte, el compuesto B y entacapona son mucho menos potentes que tolcapona para inhibir COMT cerebral.

Tabla 2. Porciento de inhibición de la actividad de COMT por los compuestos A-E, entacapona (Enta) y tolcapona (Tole) en homogeneizados de cerebro e hígado de rata, determinados a las 0.5, 1, 3, 6 y 9 h después de su administración por tubo gástrico. Los resultados son medias ± S.E.M. de 4 experimentos por grupo.

Cerebro % de inhibición Curso en el tiempo 0.5 h 1 h 3 h 6 h 9 h A 96.3 + 0.4 96.8 ± 0.3 97.0 ± 0.3 85.8 ± 7.5 34.9 + 6.0 B 83.6 + 1.3 80.9 ± 2.7 65.0 + 3.9 31.5 + 3.2 21.9 + 2.7 C 89.9 ± 0.7 86.2 + 0.5 59.8 + 5.8 33.4 + 7.0 0.4 + 5.3 D 85.1 + 1.7 69.3 ± 5.1 33.5 + 4.4 26.7 ± 4.0 12.2 + 5.8 E 87.4 + 1.3 74.2 ± 4.2 25.0 ± 3.1 -5.6 ± 7.5 -6.7 + 5.0 Hígado % de inhibición Curso en el tiempo 0.5 h 1 h 3 h 6 h 9 h A 99.0 ± 0.2 98.7 + 0.2 96.9 + 2.5 80.5 + 7.3 31.7 + 5.5 B 98.6 + 0.4 96.7 ± 1-7 96.2 + 0.8 75.9 + 4.2 69.8 + 3.6 C 98.4 + 0.3 97.8 ± 0.2 95.0 + 0.7 70.8 + 12.8 39.9 + 11.1 D 97.5 + 0.1 95.3 + 0.8 67.5 + 7.8 52.0 + 9.5 39.0 + 13.2 E 99.2 + 0.1 98.9 + 0.3 88.1 ± 3.9 36.0 + 6.3 -4.0 + 8.0 Enta 98.2 + 0.3 96.2 + 1.1 85.9 + 2.2 73.6 + 5.4 24.7 + 7.9 Tole 100.0 + 0.0 99.9 + 0.1 98.0 ± 0.7 94.1 + 0.3 67.0 + 4.0 Los compuestos F-J (véase abajo) también se prueban a las 6 h y 9 h después de la administración y se encuentra que producen un perfil inhibitorio similar al descrito para el compuesto B (tabla 3) .

Compuesto Ar r-^ La potencia del compuesto B, tolcapona y entacapona para inhibición de COMT cerebral y hepático se evalúa en experimentos en los cuales a las ratas se les administra dosis cada vez mayores de los compuestos bajo prueba (0.3 a 30 mg/kg) . En estos experimentos se sacrifica a las ratas 1 h después de la administración de los compuestos (a tmax) y se determina la actividad de COMT como se describe antes. Los resultados que se obtienen se muestran en las figuras 3 y 4, e indican que el compuesto B y tolcapona son igualmente potentes para inhibir COMT hepático con una DE50 de 0.7 + 1.1 y 0.7 + 0.1 mg/kg, respectivamente; entacapona es ligeramente menos potente con un valor de DE50 de 1.9 + 0.2 mg/kg. Sin embargo, el compuesto B es menos potente que tolcapona para inhibir el COMT cerebral con una DE50 de 5.3 ± 1.1 y 1.6 + 0.1 mg/kg, respectivamente. A la dosis más alta probada (30 mg/kg) , entacapona no alcanza el 50% de nivel de inhibición.

Tabla 3. Porciento de inhibición de actividad de COMT por compuestos F-J en homogeneizados de cerebro de rata e hígado, determinado a las 6 y 9 h después de su administración por tubo gástrico. Los resultados son medias ± S.E.M. de 4 experimentos por grupo Prueba de Comportamien to La anfetamina es un cicloestimulante potente que, dependiendo de la dosis administrada, produce un comportamiento locomotor aumentado y diversas actividades estereotípicas. Una sola dosis baja de anfetanima administrada a ratas lleva a un patrón de respuesta característico que consiste de actividad locomotora aumentada, levantamiento, husmeo moderado y oscilación de la cabeza. Un incremento gradual en la dosis de anfetanima resulta en una disminución en la locomoción y el levantamiento, lo que se sustituye por estereotipos enfocados (compotamientos repetitivos aparentemente sin sentido realizados de una manera relativamente no variante) confinados a un área pequeña del piso de la jaula (Feldman, R.S., Meyer, J.S., Quenzer, L.F. Principies of Neuropharmacology, 1997, Sinauer Associates, Inc. Publishers, Sunderland, MA) . El sistema dopaminérgico cerebral tradicionalmente ha sido crucial para determinar la capacidad de las anfetaminas para estimular la actividad locomotora y los comportamientos estereotípicos. Con respecto a .los sustratos anatómicos de la acción de anfetamina, existe evidencia de qué la estimulación de la actividad dopaminérgica en el núcleo auditivo es la responsable de la actividad locomotora inducida por las anfetaminas, mientras que la estimulación de la actividad dopaminérgica en el putamen caudado está relacionado con los estereotipos enfocados producidos por altas dosis de anfetamina . Como se predice, se encuentra que bajas dosis de anfetamina (0.5 y 2.0 mg/kg, s.c.) producen incrementos dependientes de la dosis en la actividad horizontal y el levantamiento, sin evidencia de comportamiento estereotípico (figuras 5 y 6). En contraste, una dosis elevada de anfetamina (4.0 mg/kg, s.c.) se encuentra que no produce incremento en la actividad locomotora sino que resulta en la aparición de estereotipos los cuales duran por 250 s durante el periodo de observación de 600 s. La tolcapona (30 mg/kg, p.o.) administrada 6 h antes de la exposición a anfetaminas se encuentra que incrementa significativamente la actividad locomotora en ratas tratadas con 0.5 y 2.0 mg/kg de anfetamina. En contraste, en ratas a las que se les administra 4.0 mg/kg de anfetamina, la tolcapona produce una disminución marcada en la actividad locomotora y un incremento de dos veces en la duración del comportamiento estereotípico. Las ratas tratadas con entacapona (30 mg/kg, p.o.) o con el compuesto B 6 horas antes de la exposición a anfetamina presentan el mismo patrón de actividad locomotora y comportamiento estereotípico que sus controles correspondientes .

CONCLUSIÓN Los compuestos de fórmula I son inhibidores de catecol-O-metiltransferasa (COMT) muy potentes y potencialmente tienen propiedades farmacéuticas útiles en el tratamiento de algunos trastornos en el sistema nervioso central y periférico en donde la inhibición de la O-metilación de catecolaminas puede ser de beneficio terapéutico, tales como la enfermedad de Parkinson, y los trastornos parkisonianos, alteraciones gastrointestinales, estados de formación de edema e hipertensión. La posibilidad de utilizar un inhibidor de COMT de acción prolongada con acceso limitado al cerebro, tales como el compuesto B, abre nuevas perspectivas en las terapias al mejorar la selectividad y prolongar la inhibición de COMT. Esto es particularmente importante cuando se considera el tratamiento de pacientes afectados por la enfermedad de Parkinson y quienes ingieren L-DOPA más un inhibidor periférico de AADC. Debido a la posibilidad de que los inhibidores de COMT, los cuales tienen acesso fácil al cerebro, pueden causar estimulación dopaminérgica, excesiva, específicamente al inducir discinesia y confusión mental en pacientes tratados con L-DOPA, se espera que el uso de una sustancia tal como el compuesto B carezca de tales efectos y que aun posea los beneficios de una sustancia de acción prolongada. La invención descrita en la presente se ejemplifica por los siguientes ejemplos de preparación, los cuales no se deben considerar como limitantes del alcance de la descripción. Las vías alternativas y las estructuras análogas pueden ser evidentes para aquellos expertos en la técnica.

Ejemplo 1 1- (3, 4-dihidroxi-5-nitrofenil ) -2-fenil-l- etanona Se agrega lentamente una solución de 20 g (82.64 mmoles) de O-bencilvainillina en 200 ml de tetrahidrofurano seco a una solución agitada de cloruro de bencilmagnesio (103.30 mmoles) en 150 ml de dietiléter a 10°C durante 20 minutos, y la mezcla de reacción se somete a ebullición durante 10 minutos, se enfría, se suspende con una mezcla de hielo y ácido clorhídrico diluido, y se evapora a presión reducida. El residuo se disuelve en diclorometano, la solución se lava con salmuera, se seca con sulfato de sodio y el solvente se evapora bajo presión reducida lo que proporciona un residuo cristalino que recristaliza a partir de dietiléter y éter de petróleo. Se obtiene 1- (4-benciloxi-3-metoxifenil) -2-fenil-l-etanol como cristales blancos, p.f. 97 a 98°C. Una solución de 10 g (30 mmoles) del alcohol secundario anterior en 90 ml de diclorometano y 30 ml de dietiléter se enfría a 0°C y se agregan 7.5 g de CeliteMR de una sola vez con agitación, seguido por 9 g (90 mmoles) de trióxido de cromo. La mezcla de reacción se agita durante la noche a temperatura ambiente, se filtra y el filtrado se evapora a presión reducida. El residuo cristalino recristaliza a partir de una mezcla de diclorometano y dietiléter, lo que proporciona 1- (4-benciloxi-3-metoxifenil) -2-fenil-1-etanona como cristales blancos, p.f. 134 a 135°C. Una solución de 5.9 g (17.8 mmoles) de la cetona anterior en una mezcla de 60 ml de diclorometano y ácido bromhídrico 30% en 27 ml de ácido acético se agita durante 1.5 h a temperatura ambiente y después se evapora el diclorometano a presión reducida y la mezcla de reacción se vierte en 200 ml de una mezcla de hielo/agua. El precipitado que se forma se separa por filtración y se seca bajo vacío para proporcionar 1- (4-hidroxi-3-metoxifenil ) -2-fenil-1-etanona como cristales beige, p.f. 107 a 108°C. A una solución de 3.87 g (16 mmoles) del intermediario anterior en 40 ml de ácido acético se agregan 1.4 ml (17.6 mmoles) de ácido nítrico 12.6 M bajo enfriamiento a 10°C, y la mezcla de reacción se agita durante 30 minutos a temperatura ambiente y -después se vierte sobre una mezcla de hielo/agua. El precipitado que se forma se separa por filtración, se lava con agua y se seca lo que proporciona 1- ( 4-hidroxi-3-metoxi-5-nitrofenil) -2-fenil-l-etanona como un polvo amarillo, p.f. 129 a 130°C. El nitro derivado anterior (3.76 g, 13 mmoles) se somete a ebullición con una mezcla de 37 ml de ácido bromhídrico azeotrópico, y HBr 30% en 18 ml de ácido acético durante 16 horas, y la mezcla de reacción enfriada se vierte sobre una mezcla de hielo/agua. El precipitado que se forma se separa por filtración, se lava cuidadosamente con agua y se recristaliza a partir de ácido acético para proporcionar el producto ' deseado como cristales amarillos, p.f. 181 a 182°C.

Ejemplos 2-12 Mediante la aplicación de la técnica descrita antes y los procedimientos relacionados conocidos por aquellos expertos en la técnica, y utilizandos los reactivos metaloorgánicos apropiados, se preparan los siguientes compuestos : 1- (3, -dihidroxi-5-nitrofenil) -2- (4-hidroxifenil) -1-etanona 1- (3, 4-dihidroxi-5-nitrofenil) -2- (2-metilfenil) -1-etanona 1- (3, 4-dihidroxi-5-nitrofenil) -2- (3-metilfenil) -1-etanona 1- (3, -dihidroxi-5-nitrofenil) -2- (4-metilfenil) -1-etanona 1- (3, 4-dihidroxi-5-nitrofenil)-2- ( -butilfenil) -1-etanona 1- (3, 4-dihidroxi-5-nitrofenil) -2- (3, 4-dimetilfenil) -1-etanona 1- (3, 4-dihidroxi-5-hitrofenil) -2- (3, 4- dimetoxifenil) -1-etanona 1- (3, 4-dihidroxi-5-nitrofenil) -2- (4-butiloxif enil) - 1-etanona 5 l-(3,4-dihidroxi-5-nitrofenil)-2-(l-metil-5- indolil) -1-etanona 1- (3, 4-dihidroxi-5-nitrofenil) -2- (3, 4 - metilendioxif enil) -1-etanona 1- (3, 4-dihidroxi-5-nitrofenil) -2- (2, 4, 6- 10 trimetilfenil) -1-etanona Ejemplo 13 1- (3, 4-dihidroxi-5-nitrofenil) -2- (2- metilfenil) -1-etanona A una mezcla de guayacol (1.24 g, 10 mmoles), ácido o-tolilacético (1.50 g, 10 mmoles) y ZnCl2 (5 g, 36.7 inmoles) se agrega P0C13 (15 ml, 161 mmoles) y la suspensión resultante se agita y se calienta a 80°C durante 1.5 h. La mezcla de ^ft reacción se enfría y se vierte sobre hielo/agua, y la suspensión resultante se agita a temperatura ambiente durante 1 h y después se extrae con acetato de etilo. La capa orgánica se separa, se lava con salmuera y se seca con sulfato de sodio. Las fracciones volátiles se evaporan bajo presión reducida y el residuo se disuelve en dietiléter. La solución se extrae dos veces con 50 ml de una solución acuosa 2N de NaOH y las capas acuosas combinadas se combinan y acidifican con ácido clorhídrico a pH = 2. La emulsión formada se extrae por acetato de etilo, y la capa orgánica se lava con salmuera, se seca y el solvente se evapora bajo presión disminuida. El residuo se somete cromatografía en una columna de gel de sílice con una mezcla de éter de petróleo y acetato de etilo para proporcionar 1- (4-hidroxi-3-metoxifenil) -2- (2-metilfenil) -1-etanona como cristales blancuzcos, p.f. 79 a 81°C. A una solución de 4.01 g (16 mmoles) del intermediario anterior en 40 ml de ácido acético, se agregan 1.4 ml (17.6 mmoles) de ácido nítrico 12.6 M bajo enfriamiento a 10°C, y la mezcla de reacción se agita durante 30 minutos a temperatura ambiente y después se vierte sobre una mezcla de hielo/agua. El precipitado que se forma se separa por filtración, se lava con agua y se seca, lo que proporciona l-( 4 -hidroxi-3-metoxi-5-nitrofenil ) -2- (2-metilfenil) -1-etanona como un polvo amarillo, p.f. 150 a 151°C. El nitro derivado anterior (3.91 g, 13 mmoles) se somete a ebullición con una mezcla de 37 ml de ácido bromhídrico azeotrópico, y HBr 30% en 18 ml de ácido acético, durante 16 horas, y la mezcla de reacción enfriada se vierte sobre una mezcla de hielo/agua. El precipitado que se forma se separa por filtración, se lava cuidadosamente con agua y se recristaliza a partir de ácido acético para proporcionar el producto deseado como cristales amarillos, p.f. 128 a 129°C.

Ejemplos 14-21 Mediante la aplicación de la técnica descrita antes y los procedimientos relacionados conocidos por aquellos expertos en la técnica, y mediante la utilización de ácido f eniláceticos sustituidos apropiadamente, se preparan los siguientes compuestos: 1- (3, 4-dihidroxi-5-nitrofenil) -2- (4-carboxifenil) -1-etanona 1- (3, 4-dihidroxi-5-nitrofenil) -2- (2-nitrofenil) -1-etanona 1- (3, 4-dihidroxi-5-nitrofenil) -2- ( -bifenil) -1-etanona 1- (3, 4-dihidroxi-5-nitrofenil) -2- (3-cianof enil) -1-etanona 1- (3, 4-dihidroxi-5-nitrofenil) -2- (1-naftil) -1-etanona 1- (3, 4-dihidroxi-5-nitrofenil) -2-(2-naftil)-l-etanona 1- (3, 4-dihidroxi-5-nitrofenil) -2- (2-clorofenil) -1-etanona 1- (3, 4-dihidroxi-5-nitrofenil) -2- (4-clorofenil) -1- etanona Ejemplo 22 1- (3, 4-diacetoxi-5-nitrofenil) -2-1- etanona Una suspensión de 9.20 g (33.6 mmoles) de l-(3,4-dihidroxi-5-nitrofenil) -2-fenil-1-etanona en 90 ml de diclorometano se trata con 7.85 g (100 mmoles) de cloruro de acetilo, 7.51 g (95 mmoles) de piridina y una cantidad catalítica de 4-dimetilaminopiridina . Después de 1 h de agitación a temperatura ambiente, la solución que se forma se lava sucesivamente con ácido clorhídrico 0.2N enfriado con hielo, una solución acuosa 1% de bicarbonato de sodio y salmuera. La _ solución seca (Na2SO se evapora bajo presión reducida y el residuo se recristaliza a partir de una mezcla de dietiléter y éter de petróleo, lo que proporciona el producto deseado como cristales amarillos, p.f. 94 a 95°C.

Ejemplos 23-27 Mediante la aplicación de la técnica descrita antes y los procedimientos relacionados conocidos por aquellos expertos en la técnica, y utilizando 1- (3, 4-dihidroxi-5-nitrofenil) -2-fenil-1-etanonas sustituidas apropiadamente, y halogenuros o anhídridos de ácidos, 'se preparan los siguientes compuestos : 1- (3, 4-dimetoximetiloxi-5-nitrofenil) -2-fenil-l-etanona 1- (3, 4-dibutiriloxi-5-nitrofenil) -2-fenil-l-etanona 1- (3, 4-di (4-tolilsulfoniloxi) -5-nitrofenil) -2-fenil-1-etanona 1- (3, 4-dibutiriloxicarboniloxi-5-nitrofenil ) -2-fenil-1-etanona 1- (3, 4-diacetoxi-5-nitrofenil) -2-fenil-l-etanona .

Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la .citada invención, es el convencional para la manufactura de los objetos o productos a que la misma se refiere .

Claims (7)

REIVINDICACIONES Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes reivindicaciones:

1. Un compuesto de fórmula I: en donde R: y R2 son iguales o diferentes y significan hidrógenos o grupos hidrolizables bajo condiciones fisiológicas, alcanoilo o aroilo inferior sustituido opcionalmente, alquilo inferior o arilsulfonilo sustituido opcionalmente, o alquilcarbamoilo inferior sustituido opcionalmente, o, tomadas juntas significan un grupo alquilideno o ciclocalquilideno inferior; R3, R4 y R5 son iguales o diferentes y significan hidrógeno, un residuo de hidrocarburo inferior opcionalmente sustituido, saturado o parcialmente insaturado, hidroxilo, un grupo alcoxi o ariloxi inferior opcionalmente sustituid'o, arilo opcionalmente sustituido, alcanoilo opcionalmente sustituido o un grupo aroilo, un ' grupo alcanoilamino inferior, un grupo dialcanoilamino inferior, carboxilo, alquiloxicarbonilo inferior opcionalmente sustituido o un grupo ariloxicarbonilo, carbamoilo opcionalmente sustituido, halógeno, nitro, amino, alquilamino inferior o dialquilamino inferior, o un grupo ciano, o tomados juntos significan anillos alifáticos o heteroalifáticos, o anillos aromáticos o heteroaromáticos, y las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.

2. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque comprende: 1- (3, 4-dihidroxi-5-nitrofenil) -2-fenil-l-etanona; 1- (3, 4-dihidroxi-5-nitrofenil) -2- (2-metilfenil) -1-etanona; 1- (3, 4-dihidroxi-5-nitrofenil) -2- (4-clorofenil) -1-etanona; 1- (3, 4-dihidroxi-5-nitrofenil) -2- (1-naftil)-l-etanona; l-(3, 4-dihidroxi-5-nitrofenil) -2- (2-naftil) -1-etanona o 1- (3, -dihidroxi-5-nitrofenil) -2- (4-bifenil) -1-etanona.

3. Un método para tratar a un sujeto quien padece de algún desorden del sistema nervioso central o periférico, en donde una reducción en la O-metilacion de catecolaminas puede ser de beneficio terapéutico, tal como enfermedad de Parkinson y desórdenes parkinsonianos, alteraciones gastrointestinales, estados de formación de edema e hipertensión, el método está caracterizado porque comprende administrar al sujeto una cantidad de un compuesto de conformidad con la reivindicación 1 ó 2 efectiva para tratar las enfermedades en el sujeto.

4. Una composición farmacéutica, caracterizada porque comprende una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de conformidad con la reivindicación 1 ó 2, en combinación con un portador farmacéuticamente aceptable.

5. El uso de un compuesto de conformidad con la reivindicación 1 ó 2, en la elaboración de un medicamento para tratar a un sujeto quien padece de desórdenes en el sistema nervioso central o periférico.

6. El uso de un compuesto de conformidad con la reivindicación 1 ó 2, en la elaboración de un medicamento para tratar la enfermedad de Parkinson y trastornos parkinsonianos, alteraciones gastrointestinales, estados de formación de edema e hipertensión.

7. El uso de un compuesto de conformidad con la reivindicación 1 ó 2, caracterizado porque se utiliza en terapia.