MXPA00006376A - Metodo para producir materiales ultrapuros de proteina vegetal. - Google Patents

Abstract

Se describe un metodo para purificar un material de proteina vegetal, al eliminar los acidos ribonucleicos, el acido fitico y los fitatos del material de proteina; se forma una suspension de un material de proteina vegetal con un pH de entre 3 y 6; la suspension de material de proteina es tratada con una enzima fosfatasa acida y opcionalmente otra enzima fitasa, a una temperatura y durante el tiempo suficiente para degradar los acidos ribonucleicos, y opcionalmente el acido fitico y los fitatos, en el material de proteina; posteriormente, la suspension tratada con enzima es lavada para eliminar los materiales degradados.

Description

MÉTODO PARA PRODUCIR MATERIALES ULTRAPUROS DE PROTEINA VEGETAL CAMPO DE LA INVENCIÓN Esta invención se refiere a métodos para producir materiales purificados de proteína vegetal y más en particular, a métodos para producir aislados y concentrados ultrapuros de proteína vegetal.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN Muchos productos alimenticios y de bebidas incluyen complementos de proteínas derivados de materiales vegetales tales como frijol de soya, frijoles, guisantes, otras verduras y semillas oleaginosas tales como semilla de colza. Materiales de proteínas vegetales, particularmente soya, se utilizan para fortalecer fórmulas infantiles. El propósito del complemento de proteína vegetal en una fórmula infantil es incrementar el valor nutricional de la fórmula y proveer un contenido proteínico aproximado al contenido proteínico de la leche humana. Existen comercialmente concentrados y aislados de proteína, sin embargo, contienen algunas impurezas que no son aconsejables en productos como fórmulas infantiles. Las impurezas específicas que no son aconsejables en aislados y concentrados de proteína vegetal incluyen ácido fítico, fitatos, ácidos ribonucleicos, ceniza y minerales ligados a ácido fítico, fitatos o ácidos ribonucleicos que no son accesibles para asimilación humana tales como fósforo, calcio, cloruro, hierro, zinc y cobre. Es aconsejable proveer métodos para reducir los niveles de estas impurezas en aislados y concentrados de proteína vegetal, particularmente para uso en productos tales como fórmulas infantiles. La reducción del nivel de ácido fítico, también conocido como ácido hexafosfórico de inositol, y fitatos, los cuales son las sales de ácido fítico, en materiales de proteína vegetal ha sido de interés debido a que el ácido fítico y fitatos tienden a formar complejos con proteínas y cationes metálicos multivalentes, reduciendo el valor nutricional del material de proteína vegetal. Se han hecho importantes esfuerzos para reducir la concentración de ácido fítíco y fitatos en materiales de proteína vegetal. Por ejemplo, la patente de E.U.A. No. 5,248,765 para Mazer et al., provee un método para separar fitato y manganeso de proteína y fibra dietética tratando una suspensión acuosa del material que contiene fitato con alúmina a pH bajo. La alúmina, junto con fitato añadido a la alúmina, se separa de la proteína y material de fibra. La patente de E.U.A. No. 2,732,395 para Bolley et al., patente de E.U.A. No. 4,072,670 para Goodnight et al., patente de E.U.A. No. 4,088,795 para Goodnoght et al., patente de E.U.A. No. 4,091 ,120 para Goodnoght et al, y patente del R.U. No. 1 ,574,110 para deRham, todas muestran varios métodos para remover ácido fítico y fitatos de materiales de proteína mediante varias técnicas de precipitación y separación de solubilidad diferencial. Otros métodos para reducir ácido fítico o concentraciones de fitatos en materiales de proteína vegetal, utilizan enzimas para degradar ácido fítico o fitatos. La solicitud de patente europea No. 0 380 343 A2 provee un método para preparar aislados y concentrados de proteína de soya libre de fitato o de bajo fitato en los que se añade un ácido fítico y un enzima degradadora de fitato (en lo sucesivo una "fitasa") a un aislado o concentrado de proteína de soya a una temperatura de 20°C a 60°C y a un pH de 2-6 para degradar ácido fítico y fitatos en el material de proteína. La patente de E.U.A. No. 4,642,236 para Friend et al., patente de E.U.A. No. 3,733,207 para McCabe y la solicitud de patente japonesa Abierta al Público No. Hei 8

[1996]-214787, proveen todas procedimientos en los que se utilizan fitasas para degradar ácido fítico y fitatos en proteína de soya. Las preparaciones de enzima fitasa son particularmente útiles para purificar materiales de proteína vegetal, ya que no son costosas y son fáciles de disponer comercialmente. Las enzimas fitasa son monoéster fosfórico hidrolasas (I.U.B. 3.1.3) y normalmente se derivan de fuentes microbianas o fúngales como las especies Aspergillus y Rhizopus. Las composiciones de enzima fitasa comúnmente utilizadas incluyen normalmente la enzima 3-fitasa (mio-inositol-hexakisfosfato 3-fosfohidrolasa (I.U.B. 3.1.3.8)) como una enzima fitasa primaria. Algunas de las composiciones de enzima fitasa, pero no todas, incluyen concentraciones suficientes de la enzima fosfatasa acida (monoéster ortofosfórico fosfohidrolasa (I.U.B. 3.1.3.1.2)) para realizar degradación de ácido fítico y fitatos. Las composiciones de enzima fitasa no son reconocidas por reducir los niveles de materiales de ácido ribonucleico y minerales asociados en materiales de proteína vegetal debido a que las fitasas más comunes, especialmente 3-fítasa, no degradan la estructura de ácido ribonucleico. Las composiciones de enzima ribonucleasa se conocen por dividir y degradar ácidos ribonucleicos y se pueden utilizar para reducir niveles de ácidos ribonucleicos en proteínas vegetales, sin embargo, tales composiciones de enzima son muy caras y no son prácticas para utilizarse en una escala necesaria para producción comercial de materiales purificados de proteína vegetal. Es aconsejable reducir los niveles de materiales de ácido ribonucleico y minerales asociados en proteínas vegetales a costos que hagan prácticos los métodos para uso en una escala comercial.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN En un aspecto, la invención es un método para reducir las concentraciones de ácidos ribonucleicos y minerales ligados a ácidos ribonucleicos de un material de proteína vegetal. Un material de proteína vegetal se provee y se suspende en una solución acuosa. La suspensión se trata con una preparación de enzima que contiene fosfatasa acida a un pH y a una temperatura y durante efectivo para reducir sustancialmente las concentraciones de ácido ribonucleico en el material de proteína vegetal. Se lava entonces la suspensión tratada para proveer un material de proteína vegetal que tenga una concentración reducida de ácidos ribonucleicos. En una modalidad preferida de la invención, se reduce el contenido mineral del material de proteína vegetal medíante tratamiento de la suspensión de material de proteína vegetal con la preparación de enzima que contiene fosfatasa acida. En otra modalidad preferida de la invención, el material de proteína vegetal es una proteína de soya, el pH en el cual se trata la suspensión con la preparación de enzima es de aproximadamente 3 a aproximadamente 6, la temperatura en la cual se trata la suspensión con la preparación de enzima es de aproximadamente 20°C a aproximadamente 70°C, y el período durante el cual se trata la suspensión con la preparación de enzima es de aproximadamente 30 minutos a aproximadamente 4 horas. La suspensión lavada se lava después de ser tratada con la preparación de enzima. En otra modalidad preferida, la suspensión se trata con calor después de ser enzimáticamente tratada y lavada, y se seca la suspensión tratada con calor. En otro aspecto, la invención es un método para reducir las concentraciones de ácido fítico, fitatos, ácidos ribonucleicos y minerales ligados a ácido fítico, fitatos y ácidos ribonucleicos de un material de proteína vegetal. Un material de proteína vegetal se provee y se suspende en una solución acuosa. La suspensión se trata con una preparación de enzima que contiene fosfatasa acida a un pH y a una temperatura y durante efectivo para reducir sustancialmente las concentraciones de ácido ribonucleico en el material de proteína vegetal.

DESCRIPCIÓN DE LAS MODALIDADES PREFERIDAS La presente invención radica en el descubrimiento de que las enzimas fosfatasa acida dividen inesperadamente los ácidos ribonucleicos y por lo tanto, se pueden utilizar para degradar y reducir la concentración de materiales de ácido ribonucleico en materiales de proteína vegetal en una escala comercial, así como remover minerales y ceniza ligados por los materiales de ácido ribonucleico. Aunque ciertas preparaciones de enzima fitasa disponibles comercialmente incluyen fosfatasas acidas, no se ha reconocido previamente que las fosfatasas acidas son útiles para degradar ácidos ribonucleicos y que se puede reducir la concentración de ácidos ribonucleicos en materiales de proteína vegetal medíante tratamiento con una fosfatasa acida. La fosfatasa acida es capaz de degradar ácido fítico y fitatos así como ácidos ribonucleicos, por lo tanto, se puede utilizar una fosfatasa acida para degradar y reducir las concentraciones de ácido fítico y fitatos así como ácidos ribonucleicos, o se puede utilizar en combinación con otras fitasas.

El material de inicio para el procedimiento de la presente invención es un concentrado de proteína vegetal o un aislado de proteína vegetal. Como se utiliza en la presente, y de acuerdo a definición convencional, un concentrado de proteína vegetal es un material de proteína vegetal que contiene 65%-90% de proteína en una base seca y un aislado de proteína vegetal es un material de proteína vegetal que contiene al menos 90% de proteína en una base seca. Los concentrados y aislados de proteína vegetal son fáciles de conseguir a nivel comercial. Por ejemplo, aislados de proteína de soya que se pueden utilizar en el procedimiento de la presente invención están disponibles de Protein Technologies International, Inc., St. Louis, Missouri y se venden bajo las marcas comerciales de SUPRO® 500E y SUPRO® 620. Los concentrados de proteína vegetal y aislados de proteína vegetal se pueden preparar de acuerdo a métodos convencionales. Los concentrados de proteína vegetal se preparan comúnmente (i) lixiviando un material de proteína vegetal con una solución acuosa que tenga un pH de aproximadamente el pH del punto isoeléctrico de la proteína; (ii) extrayendo un material de proteína vegetal con un alcohol acuoso; o (¡ii) desnaturalizando un material de proteína vegetal con calor húmedo, seguido de extracción del material de proteína desnaturalizado con agua. En una modalidad preferida, un concentrado de proteína de soya se prepara para uso en el método de la presente invención. Las hojuelas de soya desgrasadas disponibles en el mercado (frijol de soya descascarado y desgrasado) se lavan con una solución acuosa que tiene un pH de aproximadamente el punto isoeléctrico de proteína de soya, a un pH preferible de aproximadamente 4 a aproximadamente 5, y de preferencia a un pH de aproximadamente 4.4 a aproximadamente 4.6. La solución acídica acuosa lixivia carbohidratos solubles en agua, minerales, fenólicos y otros materiales no proteínicos fuera de la proteína de soya, la cual no es soluble en la solución acuosa en su punto isoeléctrico, dejando el concentrado de proteína de soya. Los aislados de proteína vegetal se forman medíante extracción de material de proteína vegetal con una solución alcalina acuosa para solubilizar el material de proteína. El material de proteína solubilizado es separado de la materia vegetal insoluble tal como celulosa y otras fibras vegetales. El pH del extracto de proteína se ajusta entonces a aproximadamente el punto isoeléctrico de la proteína para precipitar la proteína. La proteína precipitada se separa de la solución mediante filtración o centrifugación para separar el material de proteína de carbohidratos solubles en agua, minerales, fenólicos y otros materiales no proteínícos, los cuales permanecen en la solución. La proteína separada se lava entonces con agua para formar el aislado de proteína. En una modalidad de mayor preferencia, un aislado de proteína de soya de prepara para uso en el método de la presente invención. Las hojuelas de soya desgrasada disponibles en el mercado se utilizan como el material de inicio. De preferencia, las hojuelas de soya han sido tratadas con un sulf¡to tal como sulfito de sodio para características de flujo mejoradas y control microbiano mejorado. Las hojuelas de soya se extraen con una solución alcalina acuosa, de preferencia, una solución de hidróxido de sodio acuoso, que tenga un pH de aproximadamente 8 a aproximadamente 11. De preferencia, la relación de peso del extractante al material de hojuela de soya es de aproximadamente 5:1 a aproximadamente 16:1. El extracto se separa de los materiales ¡nsolubles tales como fibra de soya y celulosa mediante filtración o centrifugación y decantación del extracto sobrenadante de los materiales insolubles. El pH del extracto separado se ajusta a casi el punto isoeléctrico de proteína de soya, preferiblemente desde aproximadamente pH 5, de preferencia desde aproximadamente pH 4.4 a aproximadamente pH 4.6, con un ácido adecuado, de preferencia ácido clorhídrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico o ácido acético, para precipitar un material de proteína de soya. El material de proteína precipitado se separa del extracto, de preferencia mediante centrifugación o filtración. El material de proteína separado se lava con agua, de preferencia a una relación en peso de agua a material de proteína de aproximadamente 5:1 a aproximadamente 12:1 para producir el aislado de proteína de soya. Se firma una suspensión acuosa del concentrado de proteína vegetal o aislado de proteína vegetal (en lo sucesivo, de manera general, el "material de proteína") al mezclar el material de proteína con agua para formar una suspensión. Preferiblemente, la suspensión debe contener de aproximadamente 2% a aproximadamente 30% en peso del material de proteína, y de preferencia debe contener de aproximadamente 5% a aproximadamente 20% en peso del material de proteína, y de mayor preferencia debe contener de aproximadamente 10% a aproximadamente 18% en peso del material de proteína. La suspensión se trata entonces con una preparación de enzima que contiene fosfatasa acida (monoéster ortofosfórico hidrolasa (I.U.B. 3.1.3.2)) a una concentración de fosfatasa acida, temperatura, un pH y durante un tiempo efectivo para reducir sustancialmente la concentración de ácidos ribonucleicos en el material de proteína. La preparación de enzima que contiene una fosfatasa acida se deriva de una fuente microbiana o fungal tal como las especies Aspergillus y Rhizopus. Una fuente preferida de la fosfatasa acida útil en el método de la presente invención es el hongo Aspergillus niger. Las preparaciones de enzima fitasa derivadas de Aspergillus niger y las cuales contienen fosfatasa acida están disponibles comercialmente. La preparación de enzima se añade a la suspensión en cantidad suficiente para proveer una concentración de fosfatasa acida efectiva para degradar y reducir sustancialmente la concentración de ácidos riobonucleicos presente en el material de proteína. De preferencia, al menos una gran parte de ácidos ribonucleicos presentes en el material inicial de proteína vegetal se degrada por la enzima fosfatasa acida, en donde el término una gran parte se define como 50% o más. De preferencia, la fosfatasa acida degrada al menos 60% de los ácidos ribonucleicos en el material de proteína vegetal, preferiblemente, al menos 70% de los ácidos ribonucleicos en el material de proteína, y de preferencia al menos 80% de los ácidos ribonucleicos en el material de proteína y de mayor preferencia, la fosfatasa acida degrada sustancialmente todos los ácidos ribonucleicos en el material de proteína. Con el fin de degradar y reducir efectivamente la concentración de los ácidos ribonucleicos en el material de proteína, la preparación de enzima debe incluir una cantidad suficiente de fosfatasa acida, o una combinación de fosfatasa acida y otra fitasa tal como 3-fitasa (mio-inosítol-hexakisfosfato 3-fosfohidrolasa (I.U.B. 3.1.3.8)), para degradar y reducir sustancialmente la concentración de los ácidos ribonucleicos. De preferencia, la preparación de enzima se añade para que la fosfatasa acida esté presente en la suspensión de aproximadamente 0.1 % a aproximadamente 10% en peso seco del material de proteína, de preferencia de aproximadamente 0.3% a aproximadamente 5% en peso seco del material de proteína, y de mayor preferencia de aproximadamente 0.5% a aproximadamente 3% en peso seco del material de proteína. En la modalidad más preferida de la invención, la preparación de enzima degrada y reduce la concentración de ácido fítíco y fitatos, así como ácidos ribonucleicos. De preferencia, la preparación de enzima degrada al menos una gran parte del ácido fítico y fitatos, en donde una gran parte se define como 50%, de preferencia se degradan al menos 75% del ácido fítíco y fitatos, de preferencia se degradan al menos 85% del ácido fítíco y fitatos y de mayor preferencia se degrada sustancialmente todo el ácido fítico y fitatos por medio de la preparación de enzima. Con el fin de degradar y reducir efectivamente la concentración del ácidos ribonucleicos, ácido fítico y fitatos en el material de proteína, la preparación de enzima debe incluir una cantidad suficiente de fosfatasa acida o una combinación de fosfatasa acida con otra fitasa tal como 3-fitasa(mio-inositol-hexakisfosfato 3-fosfohidrolasa (I.U.B. 3.1.3.8)) para degradar los ácidos ribonucleicos, ácido fítíco y fitatos. En una modalidad de mayor preferencia, la preparación de enzima se añade para que la fosfatasa acida y 3-fitasa estén presente en la suspensión de aproximadamente 0.1% a aproximadamente 10% en peso seco del material de proteína, de preferencia de aproximadamente 0.3% a aproximadamente 5% en peso seco del material de proteína, y de mayor preferencia de aproximadamente 0.5% a aproximadamente 3% en peso seco del material de proteína. La actividad de la preparación de enzima debe ser efectiva para degradar y reducir sustancialmente la concentración de ácidos ribonucleicos, la concentración de ácido fítico y la concentración de fitatos. La preparación de enzima tiene de preferencia, una actividad de aproximadamente 400 a aproximadamente 1400 kilo unidades fitasa por kilogramo de sólidos de proteína (KPU/kg de sólido de proteína), preferiblemente tiene una actividad de aproximadamente 600 a aproximadamente 1200 KPU/kg de sólido de proteína, y de preferencia tiene una actividad de aproximadamente 1000KPU7kg de sólido de proteína. Una unidad fitasa en kilo equivale a 1000 unidades fitasa, en donde una unidad fitasa equivale a la cantidad de enzima que libera un nanomol de fosfatos inorgánicos a partir de fitato de sodio en un minuto bajo condiciones normales (40°C, pH5.5 y 15 minutos de incubación). La actividad de la preparación de enzima incluye actividad de fosfatasa y la actividad de cualquier otra enzima fitasa incluida en la preparación de enzima. El pH de la suspensión tratada con la preparación de enzima debe ser a un pH en el cual la preparación de enzima sea efectiva para degradar ácidos ribonucleicos, y de preferencia, un pH en el cual la preparación de enzima degrade también ácido fítíco y fitatos. Se ha descubierto que las enzimas fosfatasa acida degradan de manera muy efectiva ácidos ribonucleicos en materiales de proteína vegetal a un pH de aproximadamente 4.5, y se conoce en la técnica que las enzimas fitasa degradan de manera muy efectiva ácido fítico y fitatos a un pH de aproximadamente 5.3. En una modalidad preferida, el pH de la suspensión tratada con la preparación de enzima es de aproximadamente 3 a aproximadamente 6, preferiblemente de aproximadamente 3.5 a aproximadamente 5.5 y de preferencia de aproximadamente 4 a aproximadamente 5, y de preferencia de aproximadamente 4.4 a aproximadamente 4.6. El pH de la suspensión se puede ajustar con un reactivo ácidico adecuado, tal como ácido clorhídrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico o ácido acético, o una reactivo básico adecuado, tal como hidróxido de sodio, hidróxido de calcio o hidróxído de amonio, según sea necesario para obtener el pH deseado.

La temperatura de la suspensión tratada con la preparación de enzima debe ser a una temperatura en la cual las enzimas en la preparación de enzima sean efectivas para degradar ácidos ribonucleicos, y de preferencia degradar también ácido fítico y fitatos. De preferencia, la temperatura de la suspensión debe ser lo suficientemente alta para maximízar la degradación enzimática de los ácidos ribonucleicos, ácido fítico y fitatos, pero no tan alta para inactivar la(s) enzima(s) o para degradar el material de proteína en la suspensión. En una modalidad preferida, la temperatura en la cual se trata la suspensión con la preparación de enzima que contiene fosfatasa acida es de aproximadamente 20°C a aproximadamente 70°C, preferiblemente de aproximadamente 30°C a aproximadamente 60°C, y de preferencia de aproximadamente 40°C a aproximadamente 55°C. El tiempo en el cual se trata la suspensión con la preparación de enzima debe ser suficiente para permitir que la(s) enzima(s) degrade y reduzca efectivamente la concentración de ácidos ribonucleicos, y de preferencia, degradar y reducir también las concentraciones del ácido fítico y fitatos en el material de proteína vegetal. De preferencia, la suspensión se trata con la preparación de enzima a un pH efectivo y temperatura de aproximadamente 30 minutos a aproximadamente 4 horas, de preferencia de aproximadamente 45 minutos a aproximadamente 3 horas y preferiblemente de aproximadamente 1 hora a aproximadamente 2 horas. Después del tratamiento de la suspensión del material de proteína vegetal con la preparación de enzima, se lava el material de proteína vegetal para remover los materiales degradados, ceniza y minerales. De preferencia, el material de proteína vegetal se lava diluyendo la suspensión del material de proteína vegetal con agua y centrifugando la suspensión diluida. De preferencia, el material de proteína vegetal se lava dos veces, por ejemplo, diluyendo la suspensión del material de proteína vegetal con agua, centrifugando la suspensión diluida en una centrífuga de disco y luego centrifugando la suspensión en una centrífuga de tazón. De preferencia, el pH de la suspensión en el paso de lavado es casi el punto isoeléctrico del material de proteína vegetal después de degradación de los ácidos reibonucleicos, ácido fítíco y fitatos para minimizar pérdida de material de proteína en el lavado. La degradación de los ácidos ribonucleicos, ácido fítíco y fitatos puede provocar que cambie el punto isoeléctrico del material de proteína. Por ejemplo, la proteína de soya que incluye ácidos ribonucleicos, ácido fítico y fitatos tiene un punto isoeléctrico de aproximadamente pH de 4.5, pero tiene un punto isoeléctrico de aproximadamente pH de 5.1 después de la degradación de estos materiales. Si es necesario, el pH de la suspensión se puede ajustar a casi el punto isoeléctrico del material de proteína, con un reactivo acídíco o básico adecuado previo al lavado del material de proteína. El lavado se debe efectuar con cantidades suficientes de agua de lavado, de preferencia, pH ajustado a casi el punto isoeléctrico de la proteína, para remover los ácidos ribonucleicos degradados, y preferiblemente, el ácido fítíco y fitatos, del material de proteína vegetal. En una modalidad preferida, se remueve al menos una gran parte de los ácidos ribonucleicos, ácido fítíco y fitatos degradados presentes en el material inicial de proteína vegetal por medio del procedimiento de la presente invención, en donde el término "gran parte" se define como 50% o más. Más preferiblemente, el procedimiento de la presente invención es efectivo para remover al menos 60% de los ácidos ribonucleicos degradados, ácido fítico, y fitatos presentes en el material de proteína vegetal, aún más preferiblemente al menos 70% de los ácidos ribonucleicos degradados, ácido fítico, y fitatos presentes en el material de proteína vegetal, y aún más preferiblemente al menos 80% de los ácidos ribonucleicos degradados, ácido fítico, y fitatos presentes en el material de proteína vegetal, y aún de manera más preferida se remueven sustancialmente todos los ácidos ribonucleicos degradados, ácido fítico, y fitatos presentes en el material de proteína vegetal. Después del lavado, un material de proteína vegetal purificado se puede recuperar de la suspensión mediante el secado del material de proteína. En una modalidad preferida, el material de proteína vegetal purificado se recupera mediante secado por aspersión del material de proteína de acuerdo con las técnicas convencionales de secado por aspersión. El material de proteína vegetal que tiene niveles reducidos de ácidos ribonucleicos, y de preferencia, niveles reducidos de ácido fítíco y fitatos, se pueden procesar adicionalmente, si se desea, para proveer un material de proteína purificado con características funcionales modificadas. La suspensión del material de proteína purificado se puede tratar con calor para desnaturalizar la proteína y para esterilizar el material de proteína. De preferencia la mezcla se trata con calor mediante cocción a chorro de acuerdo con las técnicas convencionales de cocción a chorro, y se enfría instantáneamente mediante la exposición de un horno de cocción a chorro en una cámara de vacío. Más preferiblemente, la suspensión del material de proteína purificado se trata con calor bajo presión a una temperatura de alrededor de 140°C a alrededor de 160°C durante un periodo de alrededor de 1 a 15 segundos. En una modalidad más preferida, el pH de la suspensión de proteína se neutraliza a un pH de alrededor de 6 a alrededor de 8 con un reactivo básico adecuado, de preferencia una solución acuosa de hidróxído de sodio/ hidróxido de potasio, previo al tratamiento con calor de la suspensión para ayudar en el procesamiento del material de proteína tratado con calor. El material de proteína purificado, ya sea tratado con calor o no tratado con calor también se puede someter a hidrólisis enzimática para reducir la viscosidad del material de proteína. La hidrólisis enzimátíca es particularmente deseable después del tratamiento con calor del material de proteína ya que el material de proteína desnaturalizada es más viscoso que el material de proteína similar que no se ha sometido a un tratamiento con calor. Una suspensión del material de proteína purificado se puede tratar con una enzima proteasa convencional, comercialmente disponible a un pH, una temperatura, una concentración y actividad de enzima, y durante un periodo para hidrolizar el material de proteína.

El pH en el cual se efectúa la hidrólisis enzimática depende de la enzima proteasa particular utilizada. Una enzima proteasa se debe seleccionar para efectuar la hidrólisis que tiene una escala de pH conocida en la que la enzima es efectiva para hidrolizar la proteína, y la hidrólisis del material de proteína purificado debe conducirse dentro de la escala de pH efectiva conocida de la enzima. En una modalidad preferida, la enzima proteasa Bromelain se utiliza a un pH de alrededor de 4 alrededor de 9. La concentración y actividad de la proteasa debe ser suficiente para efectuar el grado deseado de hidrólisis de la proteína. De preferencia se agrega la proteasa a una mezcla del material de proteína purificado, de manera que la proteasa está presente en alrededor de 0.1% a alrededor de 10% en peso seco del material de proteína, y más preferiblemente en alrededor de 0.5% alrededor de 5% en peso seco del material de proteína. Además, de preferencia, la proteasa debe tener una actividad del alrededor de 1000 a 4000 unidades tirosina por gramo ("TU/g"), y más preferiblemente debe tener una actividad de alrededor de 2000 a alrededor de 3000 TU/g, en donde 1 TU/g es igual a la actividad de enzima que libera un micromol de tirosina por minuto a 30°C después de 15 minutos de incubación en el pH óptimo de la proteasa para efectuar la hidrólisis de un material de proteína. La temperatura de la suspensión tratada con la proteasa debe ser una temperatura a la cual la proteasa sea efectiva para hidrolizar el material de proteína purificado. De preferencia, la temperatura de la suspensión debe ser lo suficientemente alta para llevar al máximo la hidrólisis enzimática del material de proteína, pero no lo suficientemente alta para inactivar la enzima. En una modalidad preferida, la temperatura a la cual se trata la suspensión con la proteasa es de alrededor de 15°C a alrededor de 75°C, más preferiblemente de alrededor de 30°C a alrededor de 65°C, y más preferiblemente de alrededor de 40°C a alrededor de 55°C. El periodo en el que se trata la suspensión con la proteasa debe ser suficiente para permitir que la enzima hidrolice al material de proteína al grado deseado de hidrólisis. De preferencia la suspensión se trata con la proteasa en un pH y temperatura efectivos de alrededor de 15 minutos a alrededor de 2 horas, más preferiblemente que alrededor de 30 minutos a alrededor de 1.5 horas, y más preferiblemente de alrededor de 45 minutos a alrededor de 1 hora. Después de que se completa la hidrólisis de enzima, la reacción se tritura mediante calentamiento de la suspensión a una temperatura por arriba de la temperatura de inactivación de la proteasa, por ejemplo, mediante calentamiento de la suspensión a una temperatura por arriba de 75°C. El material de proteína vegetal purificado hídrolizado se puede tratar con calor, si se desea esterilizar el material de proteína y para desnaturalizar el material de proteína hidrolizado sí el material de proteína no se ha tratado con calor previamente. De preferencia, la suspensión se trata con calor mediante cocción a chorro de acuerdo con técnicas convencionales de cocción a chorro, y se enfría instantáneamente mediante la exposición de un horno de cocción a chorro en una cámara de vacío. Más preferiblemente la suspensión del material de proteína hidrolizado se trata con calor bajo presión a una temperatura de alrededor de 140°C a alrededor de160°C durante un periodo de alrededor de 1 a 15 segundos. Después de la hidrólisis enzimátíca, y opcionalmente, del tratamiento con calor, el material de proteína purificado hidrolizado se puede recuperar de la suspensión mediante un secado del material de proteína. En una modalidad preferida, el material de proteína vegetal purificado hidrolizado se recupera mediante secado por aspersión del material de proteína de acuerdo con las técnicas convencionales de secado por aspersión. Los siguientes ejemplos proveen ilustraciones de los métodos de la presente invención, pero no se deben interpretar como limitantes de la invención a los métodos ejemplificados.

EJEMPLO 1 Un aislado de proteína vegetal purificado se forma de acuerdo con el procedimiento de la presente invención. Se agregan 110 kg de aislado de proteína de soya a 1 ,343.386 kg de agua para formar una suspensión de aislado de proteína de soya que contiene 7.6% de sólidos. El pH de la suspensión se ajusta a 4.5 con ácido clorhídrico, y la temperatura de la suspensión se eleva a 50°C. Una preparación de enzima que contiene una fosfatasa acida y una fitasa y que tiene una actividad de 1000 KPU/kg de sólidos de cuajo se agrega a la suspensión. La suspensión se trata con la preparación de enzima durante dos horas, después de la cual el pH de la mezcla se ajusta a 5.1 con una mezcla cáustica de hidróxido de potasio e hidróxído de sodio. La mezcla entonces se diluye con agua a una concentración de 4.2% de sólidos, y se lava en una centrifuga de tazón. 124.85 kg de la suspensión lavada se neutraliza con una mezcla cáustica de hidróxido de potasio e hidróxido de sodio. El material neutralizado se trata con calor mediante cocción a chorro a 150°C y se enfría instantáneamente a 53°C mediante exposición en una cámara de vacío que tiene una presión de alrededor de 26 torr. La suspensión tratada con calor entonces se seca mediante aspersión para recuperar 7.037 kg de aislado de proteína de soya purificado.

EJEMPLO 2 Un aislado de proteína vegetal purificado hidrolizado se forma de acuerdo con el procedimiento de la presente invención. 460.81 kg de una suspensión de aislado de proteína de soya purificado que contiene 15.5% de sólidos (aproximadamente 71.278 kg de material de proteína de soya purificado) se ajusta a un pH de 7.4 con 1400 mi de una mezcla de hidróxido de sodio/ hidróxido de potasio. La mezcla se somete a cocción a chorro a una temperatura de 150°C durante 9 segundos y se enfría instantáneamente mediante expulsión en una cámara de vacío. 329.15 kg de la suspensión se tratan con la enzima proteasa Bromelain, la enzima que tiene una actividad de 2500 TU/g y se agrega a la suspensión a una concentración de 0.29% en peso seco del material de proteína en la suspensión. La temperatura de la suspensión tratada con enzima se mantiene a alrededor de 50°C durante el tratamiento enzimático, que es de 40 minutos. Después del tratamiento de enzima la suspensión se enfría a 16°C y 190 mi adicionales de la mezcla de hidróxido de sodio/ hidróxido de potasio se agrega a la suspensión. La suspensión entonces se somete a cocción a chorro a 150°C durante 9 segundos y se enfría instantáneamente mediante expulsión en una cámara de vacío. La suspensión entonces se seca por aspersión para recuperar 34.05 kg de un aislado de proteína de soya purificado hidrolizado.

EJEMPLO 3 Se examina el efecto que tiene la actividad de enzima en la concentración de ácido ribonucleico y en la concentración de ácido fítíco en un aislado de proteína de soya, en donde el aislado de proteína de soya se purifica en un proceso llevado a cabo de acuerdo con la presente invención. Una suspensión de aislado de proteína de soya se forma mediante la combinación del aislado de proteína de soya y agua ajustada al pH 4.5 con ácido clorhídrico, en donde los sólidos totales en la suspensión están presentes en alrededor de 8.5% en peso de la suspensión. La suspensión se calienta a una temperatura de 50°C.

Dos muestras de la suspensión se preparan a partir de la suspensión del aislado de proteína para la degradación enzimática de los ácidos ribonucleicos y ácido fítico, la primera muestra pesando 694.62 kg y conteniendo 8.66% en peso total de los sólidos, y la segunda muestra pesando 685.54 kg y conteniendo 8.66% en peso total de los sólidos. Las preparaciones de enzima que contienen una fosfatasa acida y una enzima futasa se agregan a cada muestra en suspensión. Una preparación de enzima que tiene una actividad de 800 KPU/kg de sólidos de cuajo se agrega a la primera muestra. Una preparación de enzima que tiene una actividad de 1400 KPU/kg de sólidos de cuajo se agrega a la segunda muestra. Las muestras se reaccionan con las preparaciones de enzima durante 1 hora. Después del tratamiento las muestras con enzima, las muestras se lavan uniformemente y las enzimas se desactivan térmicamente mediante cocción a chorro a una temperatura de 150°C. Las muestras se enfrían instantáneamente a 50°C mediante expulsión en una cámara de vacío. Las muestras enfriadas entonces se secan mediante aspersión. Una muestra de control que tiene un contenido total de sólidos de 7.6% se provee a partir de la mezcla de proteína inicial para propósitos de comparación. La muestra de control se calienta a 50°C durante 1 hora, y entonces se lava uniformemente. La muestra de control lavada se somete a cocción a chorro a 150°C y entonces se enfría instantáneamente en una cámara de vacío a 52°C. La muestra de control entonces se seca mediante aspersión.

Las muestras se analizan para determinar el contenido de ácido ribonucleico y el contenido de ácido fítíco de las muestras. Los resultados del análisis se muestran en el cuadro 1 siguiente.

CUADRO 1 KPU/kg de sólido Acido fítíco Acido ribonucleico % de reducción de ácido de cuajo (%) (mg/kg) ribonucleico 0 (control) 1.4 9143 800 0.43 1784 80.5 1400 0.18 1769 80.7 Los resultados muestran claramente que las preparaciones de enzima que contienen una fosfatasa acida y una fitasa y que tienen una actividad de 800 y 1400 KPU/kg de sólidos de cuajo son efectivos para reducir sustancialmente el contenido de ácido ribonucleico de un aislado de proteína de soya. Los resultados también muestran que las preparaciones de enzima son muy efectivas en la reducción del contenido de ácido fítico del aislado de proteína.

EJEMPLO 4 Se examina el efecto de pH en la degradación enzímática de ácido ribonucleico y ácido fítico mediante una preparación de enzima que contiene una fosfatasa acida y una enzima fitasa en un aislado de proteína de soya, en donde el aislado de proteína de soya se purifica de acuerdo con la presente invención. Se forma una suspensión de aislado de proteína de soya mediante la mezcla suficiente del aislado de proteína de soya con agua ajustada a un pH 5.5 mediante ácido clorhídrico para formar una suspensión que contiene alrededor de 8% en peso del aislado de proteína de soya. La suspensión se calienta a una temperatura de 50°C. Dos muestras de la suspensión que contiene 8% de sólidos totales en peso se preparan a partir de la suspensión de aislado de proteína para la degradación enzimátíca del ácido ribonucleico y el ácido fítíco. La primera muestra se ajusta a un pH de 5.1 con una mezcla de hidróxído de potasio/hidróxído de sodio. La segunda muestra se deja en un pH de 4.5. Dichas muestras entonces se tratan durante 2 horas con una preparación de enzima que contiene una enzima fosfatasa y una enzima fitasa y que tiene una actividad de 1400 KPU/kg de sólidos de cuajo. Después el tratamiento de las muestras con enzima, las muestras se lavan uniformemente y las enzimas se desactivan térmicamente mediante cocción a chorro a una temperatura de 150°C. Las muestras se enfrían instantáneamente a 50°C mediante expulsión en una cámara de vacío. Las muestras enfriadas entonces se secan mediante aspersión. Una muestra de control que tiene un contenido total de sólidos de 7.6 % se provee a partir de la suspensión de proteína inicial para propósitos de comparación. La muestra de control se calienta a 50°C durante 1 hora, y entonces se lava uniformemente. La muestra de control lavada se somete a cocción a chorro a 150°C y entonces se enfría instantáneamente en una cámara de vacío a 52°C. La muestra de control entonces se seca mediante aspersión. Las muestras se analizan para determinar el contenido de ácido ribonucleico y el contenido de ácido fítíco de las muestras. Los resultados del análisis se muestran en el cuadro 2 siguiente.

CUADRO 2 PH Acido fítico Acido % de reducción de (%) ribonucleico ácido ribonucleico 4.5 muestra de 1.4 9143 — control 5.1 (muestra 1) 0.08 3180 65.3 4.5 (muestra 2) <0.7 1386 84.9 Los resultados muestran que una preparación de enzima que contiene una fosfatasa acida y una fitasa son efectivas para reducir sustancialmente el contenido de ácido fítico y ácido ribonucleico en un aislado de proteína de soya a pH 4.5 y a un pH 5.1. La reducción del contenido de ácido ribonucleico en el aislado de proteína es particularmente efectiva a un pH 4.5.

EJEMPLO 5 Se examina el efecto del tiempo del tratamiento enzimátíco en la degradación enzimática de los ácidos ribonucleicos y ácido fítico en el aislado de proteína de soya mediante una preparación de enzima que contiene una fosfatasa acida y una enzima fítasa, en donde el aislado de proteína de soya se purifica de acuerdo con la presente invención. Se forma una suspensión de aislado de proteína de soya mediante la mezcla suficiente del aislado de proteína de soya con agua ajustada a un pH 4.6 mediante ácido clorhídrico para formar una suspensión que contiene alrededor de 8% en peso del aislado de proteína de soya. La suspensión se calienta a una temperatura de 50°C. Dos muestras de la suspensión se preparan para la degradación enzimátíca de los ácidos ribonucleicos y el ácido fítico. La primera muestra de suspensión pesa 1453.708 kg y contiene 7.6% en peso del total de sólidos. La segunda muestra pesa 694.62 kg y contiene 8.6 % en peso del total de sólidos. Una preparación de enzima que contiene una fosfatasa acida y una fitasa y que tiene una actividad de 1400 KPU/kg de sólidos de cuajo se agrega a la primera muestra y a la segunda muestra. La primera muestra se trata con la preparación de enzima durantel hora, y la segunda muestra se trata con la preparación de enzima durante 2 horas. Después del tratamiento de las muestras con enzima, las muestras se lavan uniformemente y las enzimas se desactivan térmicamente mediante cocción a chorro de las muestras a una temperatura de 150°C. Las muestras se enfrían instantáneamente a 50°C mediante expulsión en una cámara de vacío. Las muestras enfriadas entonces se secan mediante aspersión. Una muestra de control que tiene un contenido total de sólidos de 7.6% se provee a partir de la suspensión de proteína inicial para propósitos de comparación. La muestra de control se calienta a 50°C durante 1 hora, y entonces se lava uniformemente. La muestra de control lavada se somete a cocción a chorro a 150°C y entonces se enfría instantáneamente en una cámara de vacío a 52°C. La muestra de control entonces se seca mediante aspersión. Las muestras se analizan para determinar el contenido de ácido ribonucleico y el contenido de ácido fítico de las muestras. Los resultados del análisis se muestran en el cuadro 3 siguiente.

CUADRO 3 Tiempo de tratamiento Acido fítico Acido % de reducción de enzima (%) ribonucleico de ácido (mg/kg) ribonucleico t=0 (control) 1.41 9143 ~ t=1 hora 0.18 1769 80.7 t=2 horas <0.06 1759 80.7 El tratamiento de aislado de proteína de soya con una preparación de enzima que contiene una fosfatasa acida y una fitasa durante un periodo de 1 hora o 2 horas es efectivo para reducir sustancialmente el contenido de ácido ribonucleico y el contenido de ácido fítico en el aislado de proteína. El tratamiento durante 2 horas incrementa la reducción del contenido de ácido fítico en el aislado de proteína con relación a un tratamiento de 1 hora, pero no incrementa significativamente la reducción del contenido de ácido ribonucleico en la proteína.

EJEMPLO 6 Se examina el efecto de la temperatura en la degradación enzimática de los ácidos ribonucleicos y el ácido fítico en el aislado de proteína de soya por una preparación de enzima que contiene una fosfatasa acida y una enzima fitasa, en donde el aislado de proteína de soya se purifica de acuerdo con la presente invención. Se forma una suspensión de aislado de proteína de soya mediante la mezcla suficiente de aislado de proteína de soya con agua ajustada a pH 4.5 medíante ácido clorhídrico para formar una suspensión que tiene alrededor de 8% en peso del aislado de proteína de soya. Una primera muestra de la suspensión que contiene 8% en peso del total de sólidos se prepara a partir de la mezcla de aislado de proteína para la degradación enzimática de los ácidos ribonucleicos y el ácido fítico. La primera muestra se ajusta a una temperatura de 50°C. Una segunda muestra de la suspensión que contiene 4% en peso del total de sólidos se prepara a partir de la suspensión de aislado de proteína. La segunda muestra se ajusta a una temperatura de 38°C. Dichas muestras entonces se tratan durante 2 horas con una preparación de enzima que contiene una enzima fosfatasa acida y una enzima fítasa y que tiene una actividad de 1400 KPU/kg de sólidos en cuajo. Después del tratamiento de las muestras con enzima, las muestras se lavan uniformemente y las enzimas se desactivan térmicamente mediante cocción a chorro a una temperatura de 150°C. Las muestras se enfrían instantáneamente a 53°C mediante expulsión en una cámara de vacío. Las muestras enfriadas entonces se secan por aspersión. Una muestra de control que tiene un contenido total de sólidos de 7.6% se provee a partir de la suspensión de proteína inicial para propósitos de comparación. La muestra de control se calienta a 50°C durante 1 hora, y entonces se lava uniformemente. La muestra de control lavada se somete a cocción á chorro a 150°C y entonces se enfría instantáneamente en una cámara de vacío a 52°C. La muestra de control entonces se seca por aspersión. Las muestras se analizan para determinar el contenido de ácido ribonucleico y el contenido de ácido fítico de las muestras. Los resultados del análisis se muestran en el cuadro 4 siguiente.

CUADRO 4 Temperatura Acido fítico (%) Acido % de reducción ribonucleico de ácido (mg/kg) ribonucleico Control 1.41 9143 — 50°C <0.07 1386 84.9 38°C 0.4 3848 58.0 El tratamiento del aislado de proteína de soya con una preparación de enzima que contiene una fosfatasa acida y una fitasa a temperaturas de 38°C y 50°C es efectivo para reducir significativamente el contenido de ácido ribonucleico y el contenido de ácido fítico en el aislado de proteína. El tratamiento a 50°C incrementa la reducción de contenido de ácido fítico y contenido de ácido ribonucleico en el aislado de proteína con relación al tratamiento a 38°C.

EJEMPLO 7 Se examina el efecto de la degradación enzimática del ácido fítíco y el ácido ribonucleico en el aislado de proteína de soya mediante una preparación de enzima que contiene una fosfatasa acida y una fitasa en el contenido mineral en la proteína. En particular, se examina el efecto de la degradación enzimática en las concentraciones de calcio, hierro, magnesio, sodio, zinc, cobre, potasio, manganeso, y fósforo en el aislado de proteína de soya.

Se forma una suspensión de aislado de proteína de soya medíante la mezcla suficiente del aislado de proteína de soya con agua ajustada a pH 4.6 mediante ácido clorhídrico para formar una suspensión que contiene alrededor de 8% en peso del aislado de proteína de soya. Se prepara una muestra para la degradación enzimática de ácido fítico y ácido ribonucleico de la suspensión, en donde la muestra pesa 137.108 kg y tiene una concentración total de sólidos de 7.6% en peso. La mezcla se calienta a una temperatura 50°C. Una preparación de enzimas que contiene una fosfatasa acida y una fitasa, con una actividad de 1400 KPU (kg de sólidos de cuajo), se añade a la muestra, y la muestra es tratada con la preparación de enzimas durante 1 hora. Posteriormente al tratamiento de la muestra con enzimas, la muestra es lavada a conciencia y las enzimas son desactivadas térmicamente por cocción a chorro a una temperatura de 150°C. La muestra es enfriada rápidamente hasta alcanzar 53°C por eyección en una cámara de vacío. Posteriormente, la muestra enfriada es deshidratada por aspersión. Se proporciona una muestra de control con un total de contenido de sólidos de 7.6% a partir de la suspensión de proteínas inicial, para objetos de comparación. La muestra de control es calentada a 50°C durante 1 hora, y posteriormente es lavada a conciencia. Luego la muestra de control es sometida a una cocción a chorro a 150°C y a continuación enfriada rápidamente en una cámara de vacío hasta alcanzar 52°C. Posteriormente la muestra de control es deshidratada por aspersión. Las muestras son analizadas para determinar el contenido de calcio, hierro, magnesio, sodio, zinc, cobre, potasio, manganeso y fósforo en las mismas. Los resultados de este análisis se ¡lustran en el cuadro 5 a continuación.

CUADRO 5 BMO.

Muestra Ca Fe Mg Na Zn Cu K Mn P Control 1820 149 587 9070 33 12.4 8225 9.9 7991 Muestra 1617 113 508 5988 26.8 11.7 5714 6.4 2583 El tratamiento del aislado de proteína de soya con una preparación de enzimas que contiene una fosfatasa acida y una fitasa reduce en forma eficaz el calcio, hierro, magnesio, sodio, zinc, cobre, potasio, manganeso y fósforo contenido en el aislado de proteína. El tratamiento enzimático es particularmente eficaz para reducir los contenidos de sodio, potasio y fósforo en el material de proteína. Los expertos en la técnica podrán apreciar que es posible realizar varios cambios en la invención descrita sin alejarse del alcance de la misma. Las modalidades descritas y ejemplos específicos son a manera enunciativa mas no limitativa, y sólo las reivindicaciones y sus equivalentes abarcan la totalidad del alcance de esta invención.

Claims (80)

NOVEDAD DE LA INVENCIÓN REIVINDICACIONES

1.- Un método para producir un material de proteína vegetal purificado con bajas concentraciones de ácido ribonucleico, que incluye: formar una suspensión acuosa de un material de proteína vegetal; tratar la suspensión con una enzima fosfatasa acida a una temperatura, pH y durante un período de tiempo eficaces para degradar los ácidos ribonucleicos en el material de proteína vegetal; y lavar la suspensión tratada para obtener un material de proteína vegetal con una concentración reducida de ácidos ribonucleicos.

2.- El método de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque el material de proteína vegetal es un concentrado de proteína vegetal o un aislado de proteína vegetal.

3.- El método de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado además porque el material de proteína vegetal es un concentrado de proteína de soya o un aislado de proteína de soya.

4.- El método de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque la suspensión contiene entre 2% y 30% en peso del material de proteína.

5.- El método de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque la suspensión contiene entre 5% y 20% en peso del material de proteína.

6.- El método de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque la suspensión contiene entre 10% y 18% en peso del material de proteína.

7.- El método de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque el tratamiento de la suspensión con la enzima sirve para degradar en forma eficaz la mayoría de los ácidos ribonucleicos en el material de proteína vegetal.

8.- El método de conformidad con la reivindicación 7, caracterizado además porque el lavado de la suspensión tratada sirve para eliminar en forma eficaz los ácidos ribonucleicos degradados para obtener un material de proteína vegetal del cual se han eliminado la mayoría de los ácidos ribonucleicos.

9.- El método de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque el tratamiento de la suspensión con la enzima sirve para degradar en forma eficaz al menos un 60% de los ácidos ribonucleicos en el material de proteína vegetal.

10.- El método de conformidad con la reivindicación 9, caracterizado además porque el lavado de la suspensión tratada sirve para eliminar en forma eficaz los ácidos ribonucleicos degradados para obtener un material de proteína vegetal del cual se han eliminado al menos el 60% de los ácidos ribonucleicos.

11.- El método de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque el tratamiento de la suspensión con la enzima sirve para degradar eficazmente al menos el 70% de los ácidos ribonucleicos en el material de proteína vegetal.

12.- El método de conformidad con la reivindicación 11 , caracterizado además porque el lavado de la suspensión tratada sirve para eliminar en forma eficaz los ácidos ribonucleicos degradados para obtener un material de proteína vegetal del cual se han eliminado al menos el 70% de los ácidos ribonucleicos.

13.- El método de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque el tratamiento de la suspensión con la enzima sirve para degradar eficazmente al menos el 80% de los ácidos ribonucleicos en el material de proteína vegetal.

14.- El método de conformidad con la reivindicación 13, caracterizado además porque el lavado de la suspensión tratada sirve para eliminar en forma eficaz los ácidos ribonucleicos degradados para obtener un material de proteína vegetal del cual se han eliminado al menos el 80% de los ácidos ribonucleicos.

15.- El método de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque el tratamiento de la suspensión con la enzima sirve para degradar sustancialmente todos los ácidos ribonucleicos en el material de proteína vegetal.

16.- El método de conformidad con la reivindicación 15, caracterizado además porque el lavado de la suspensión tratada sirve para eliminar en forma eficaz los ácidos ribonucleicos degradados para obtener un material de proteína vegetal del cual se han eliminado sustancialmente todos los ácidos ribonucleicos.

17.- El método de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque el tratamiento de la suspensión con la enzima sirve para degradar con eficacia el ácido fítico y los fitatos en el material de proteína vegetal.

18.- El método de conformidad con la reivindicación 17, caracterizado además porque lavar la suspensión tratada sirve para eliminar con eficacia el ácido fítico y los fitatos degradados para obtener un material de proteína vegetal del cual se hayan eliminado tanto el ácido fítico como los fitatos.

19.- El método de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque la suspensión es tratada con una fosfatasa acida a un pH de entre 3 y 6.

20.- El método de conformidad con la reivindicación 19, caracterizado además porque la suspensión es tratada con una fosfatasa acida a un pH de entre 3.5 y 5.5.

21.- El método de conformidad con la reivindicación 19, caracterizado además porque la suspensión es tratada con una fosfatasa acida a un pH de entre 4 y 5.

22.- El método de conformidad con la reivindicación 19, caracterizado además porque la suspensión es tratada con una fosfatasa acida a un pH de entre 4.4 y 4.6.

23.- El método de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque la suspensión es tratada con una fosfatasa acida a una temperatura de entre 20°C y 70°C.

24.- El método de conformidad con la reivindicación 23, caracterizado además porque la suspensión es tratada con una fosfatasa acida a una temperatura de entre 40°C y 55°C.

25.- El método de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque la suspensión es tratada con una fosfatasa acida, y esta fosfatasa acida tiene una actividad de alrededor de 600 KPU/g de sólidos de cuajo a alrededor de 1400 KPU/g de sólidos de cuajo.

26.- El método de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque la suspensión es tratada con una fosfatasa acida, donde esta fosfatasa acida está presente en la suspensión a una proporción del 0.1 % al 10% en peso seco del material de proteína.

27.- El método de conformidad con la reivindicación 26, caracterizado además porque la suspensión es tratada con una fosfatasa acida, donde esta fosfatasa acida está presente en la suspensión a una proporción del 0.3% al 5% en peso seco del material de proteína.

28.- El método de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque la suspensión es tratada con una fosfatasa acida durante un período de entre 30 minutos y 4 horas.

29.- El método de conformidad con la reivindicación 28, caracterizado además porque la suspensión es tratada con una fosfatasa acida durante un período de entre 45 minutos y 3 horas.

30.- El método de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque incluye un paso de secado de la suspensión tratada y lavada para obtener un material de proteína vegetal purificado.

31.- El método de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque incluye el paso adicional de un tratamiento por calor sobre la suspensión tratada.

32.- El método de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque incluye el paso adicional de tratar la suspensión de proteína vegetal lavada y tratada con fosfatasa acida, con un una enzima proteasa a una temperatura, pH y durante el tiempo suficiente para hidrolizar la proteína en la suspensión.

33.- El método de conformidad con la reivindicación 32, caracterizado además porque la enzima proteasa está presente en la suspensión en una concentración de entre 0.1 % y 10% en peso seco de la proteína contenida en la suspensión.

34.- El método de conformidad con la reivindicación 32, caracterizado demás porque incluye el paso de tratar por calor la suspensión de proteína hidrolizada.

35.- El método de conformidad con la reivindicación 32, que incluye además el paso de secar el material de proteína hidrolizado después de la hidrólisis con la enzima proteasa.

36.- El método de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque el tratamiento de la suspensión de material de proteína vegetal con una fosfatasa acida y el lavado de esta suspensión tratada sirven para disminuir con eficacia el contenido mineral en el material de proteína vegetal.

37.- Un método para producir un material de proteína vegetal purificado con bajas concentraciones de ácidos ribonucleicos, ácido fítico y fitatos, que incluye: formar una suspensión acuosa de un material de proteína vegetal; tratar la suspensión con una enzima fosfatasa acida y una enzima fitasa a una temperatura, pH, y durante el tiempo suficiente para degradar los ácidos ribonucleicos, el ácido fítico y los fitatos en el material de proteína vegetal; y lavar la suspensión tratada para obtener un material de proteína vegetal con concentraciones reducidas de ácidos ribonucleicos, ácido fítico y fitatos.

38.- El método de conformidad con la reivindicación 37, caracterizado además porque el material de proteína vegetal es un concentrado de proteína vegetal o un aislado de proteína vegetal.

39.- El método de conformidad con la reivindicación 38, caracterizado además porque el material de proteína vegetal es un concentrado de proteína de soya o un aislado de proteína de soya.

40.- El método de conformidad con la reivindicación 37, caracterizado además porque la suspensión contiene entre 2% y 30% en peso de material de proteína.

41.- El método de conformidad con la reivindicación 40, caracterizado además porque la suspensión contiene entre 5% y 20% en peso de material de proteína.

42.- El método de conformidad con la reivindicación 40, caracterizado además porque la suspensión contiene entre 10% y 18% en peso de material de proteína.

43.- El método de conformidad con la reivindicación 37, caracterizado además porque el tratamiento de la suspensión con las enzimas sirve para degradar en forma eficaz la mayoría de los ácidos ribonucleicos en el material de proteína vegetal.

44.- El método de conformidad con la reivindicación 43, caracterizado además porque el lavado de la suspensión tratada sirve para eliminar en forma eficaz los ácidos ribonucleicos degradados para obtener un material de proteína vegetal del cual se han eliminado la mayoría de los ácidos ribonucleicos.

45.- El método de conformidad con la reivindicación 37, caracterizado además porque el tratamiento de la suspensión con las enzimas sirve para degradar en forma eficaz al menos el 60% de los ácidos ribonucleicos en el material de proteína vegetal.

46.- El método de conformidad con la reivindicación 45, caracterizado además porque el lavado de la suspensión tratada sirve para eliminar en forma eficaz los ácidos ribonucleicos degradados para obtener un material de proteína vegetal del cual al menos el 60% de los ácidos ribonucleicos han sido eliminados.

47.- El método de conformidad con la reivindicación 37, caracterizado además porque el tratamiento de la suspensión con las enzimas sirve para degradar en forma eficaz al menos el 70% de los ácidos ribonucleicos en el material de proteína vegetal.

48.- El método de conformidad con la reivindicación 47, caracterizado además porque el lavado de la suspensión tratada sirve para eliminar en forma eficaz los ácidos ribonucleicos degradados para obtener un material de proteína vegetal del cual al menos el 70% de los ácidos ribonucleicos han sido eliminados.

49.- El método de conformidad con la reivindicación 37, caracterizado además porque el tratamiento de la suspensión con las enzimas sirve para degradar en forma eficaz al menos el 80% de los ácidos ribonucleicos en el material de proteína vegetal.

50.- El método de conformidad con la reivindicación 49, caracterizado además porque el lavado de la suspensión tratada sirve para eliminar en forma eficaz los ácidos ribonucleicos degradados para obtener un material de proteína vegetal del cual al menos el 80% de los ácidos ribonucleicos han sido eliminados.

51.- El método de conformidad con la reivindicación 37, caracterizado además porque la suspensión con las enzimas sirve para degradar en forma eficaz sustancialmente todos los ácidos ribonucleicos en el material de proteína vegetal.

52.- El método de conformidad con la reivindicación 51 , caracterizado además porque el lavado de la suspensión tratada sirve para eliminar en forma eficaz los ácidos ribonucleicos degradados para obtener un material de proteína vegetal del cual sustancíalmente todos los ácidos ribonucleicos han sido eliminados.

53.- El método de conformidad con la reivindicación 37, caracterizado además porque el tratamiento de la suspensión con las enzimas sirve para degradar en forma eficaz el ácido fítico y los fitatos en el material de proteína vegetal.

54.- El método de conformidad con la reivindicación 53, caracterizado además porque el lavado de la suspensión tratada sirve para eliminar en forma eficaz el ácido fítíco y los fitatos degradados para obtener un material de proteína vegetal del cual el ácido fítico y los fitatos han sido eliminados.

55.- El método de conformidad con la reivindicación 53, caracterizado además porque el tratamiento de la suspensión con las enzimas sirve para degradar en forma eficaz al menos una mayoría del ácido fítico y los fitatos en el material de proteína vegetal.

56.- El método de conformidad con la reivindicación 55, caracterizado además porque el lavado de la suspensión tratada sirve para eliminar en forma eficaz el ácido fítíco y los fitatos degradados para obtener un material de proteína vegetal del cual al menos una mayoría del ácido fítíco y los fítatos han sido eliminados.

57.- El método de conformidad con la reivindicación 53, caracterizado además porque el tratamiento de la suspensión con la enzima sirve para degradar en forma eficaz al menos el 75% del ácido fítico y de los fitatos en el material de proteína vegetal.

58.- El método de conformidad con la reivindicación 57, caracterizado además porque lavar la suspensión tratada sirve para eliminar en forma eficaz el ácido fítico y los fitatos degradados para obtener un material de proteína vegetal del cual al menos el 75% del ácido fítíco y los fitatos han sido eliminados.

59.- El método de conformidad con la reivindicación 53, caracterizado además porque el tratamiento de la suspensión con la enzima sirve para degradar en forma eficaz al menos el 85% del ácido fítíco y de los fitatos en el material de proteína vegetal.

60.- El método de conformidad con la reivindicación 59, caracterizado además porque lavar la suspensión tratada sirve para eliminar en forma eficaz el ácido fítico y los fitatos degradados para obtener un material de proteína vegetal del cual al menos el 85% del ácido fítico y los fitatos han sido eliminados.

61.- El método de conformidad con la reivindicación 53, caracterizado además porque el tratamiento de la suspensión con la enzima sirve para degradar sustancialmente todo el ácido fítico y los fitatos en el material de proteína vegetal.

62.- El método de conformidad con la reivindicación 61 , caracterizado además porque lavar la suspensión tratada sirve para eliminar en forma eficaz el ácido fítico y los fitatos degradados para obtener un material de proteína vegetal del cual sustancialmente todo el ácido fítico y los fitatos han sido eliminados.

63.- El método de conformidad con la reivindicación 37, caracterizado además porque la suspensión es tratada con una fosfatasa acida y una fitasa a un pH de entre 3 y 6.

64.- El método de conformidad con la reivindicación 63, caracterizado además porque la suspensión es tratada con una fosfatasa acida y una fitasa a un pH de entre 3.5 y 5.5.

65.- El método de conformidad con la reivindicación 63, caracterizado además porque la suspensión es tratada con una fosfatasa acida y una fitasa a un pH de entre 4 y 5.

66.- El método de conformidad con la reivindicación 63, caracterizado además porque la suspensión es tratada con una fosfatasa acida y una fitasa a un pH de entre 4.4 y 4.6.

67.- El método de conformidad con la reivindicación 37, caracterizado además porque la suspensión es tratada con una fosfatasa acida y una fitasa a una temperatura de entre 20°C y 70°C.

68.- El método de conformidad con la reivindicación 67, caracterizado además porque la suspensión es tratada con una fosfatasa acida y una fitasa a una temperatura de entre 40°C y 55°C.

69.- El método de conformidad con la reivindicación 37, caracterizado además porque la suspensión es tratada con una preparación de enzimas que contiene una fosfatasa acida y una fitasa, en donde la preparación de enzimas tiene una actividad de alrededor de 600 KPU/g de sólidos de cuajo a alrededor de 1 ,400 KPU/g de sólidos de cuajo.

70.- El método de conformidad con la reivindicación 37, caracterizado además porque la suspensión es tratada con una preparación de enzimas que contiene una fosfatasa acida y una fitasa, en donde la preparación de enzimas está presente en la suspensión en una proporción de alrededor de 0.1 % a alrededor de 10% en peso seco de material de proteína.

71.- El método de conformidad con la reivindicación 70, caracterizado además porque la preparación de enzimas está presente en la suspensión en una proporción de entre 0.3% y 5% en peso seco de material de proteína.

72.- El método de conformidad con la reivindicación 37, caracterizado además porque la suspensión es tratada con una preparación de enzimas que contiene una fosfatasa acida y una fitasa, durante un período de entre 30 minutos y 4 horas.

73.- El método de conformidad con la reivindicación 72, caracterizado además porque la suspensión es tratada con una preparación de enzimas durante un período de entre 45 minutos y 3 horas.

74.- El método de conformidad con la reivindicación 37, caracterizado además porque incluye el paso de secar la suspensión tratada y lavada para obtener un material de proteína vegetal purificado.

75.- El método de conformidad con la reivindicación 37, caracterizado además porque incluye el paso de tratar por calor la suspensión tratada enzimáticamente.

76.- El método de conformidad con la reivindicación 37, caracterizado además porque incluye el paso de tratar la suspensión de proteína vegetal lavada y tratada enzimáticamente con una enzima proteasa a una temperatura, pH y durante el tiempo suficiente para hidrolizar la proteína en la suspensión.

77.- El método de conformidad con la reivindicación 76, caracterizado además porque la enzima proteasa está presente en la suspensión en una concentración de entre 0.1% y 10% en peso seco de la proteína en la suspensión.

78.- El método de conformidad con la reivindicación 76, caracterizado además porque incluye el paso de tratar por calor la suspensión de proteína hidrolteada.

79.- El método de conformidad con la reivindicación 76, caracterizado además porque incluye el paso de secar el material de proteína hidrolizado después de la hidrólisis con la enzima proteasa.

80.- El método de conformidad con la reivindicación 37, caracterizado además porque el tratamiento de la suspensión de material de proteína vegetal con una fosfatasa acida y una fitasa, y el lavado de la suspensión tratada, sirven para disminuir en forma eficaz el contenido mineral del material de proteína vegetal.