MXPA00003181A - Acidos dioxociclopentil-hidroxamicos - Google Patents

Abstract

La presente invención se refiere a derivados de dioxociclopentil- hidroxiamida de la fórmula:en la que X, Z y Q son como se han definido en la memoria descriptiva, y a sus composiciones farmacéuticas y a métodos de tratamiento con ellas.

Description

ÁCIDOS DIOXOCICLOPENTIL-HIDROXAMICOS ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN La presente invención se refiere a derivados de dioxociclopentil- hidroxiamida, y a composiciones farmacéuticas que comprenden dichos derivados y al uso de dichos derivados en el tratamiento de artritis, cáncer y otras enfermedades. Los compuestos de la presente invención son inhibidores de zinc- 10 metalo-endopeptidasas, especialmente de las que pertenecen a las subfamilias matriz-metalo-proteinasa (también denominada MMP o matrixina) y reprolisina (también conocida como adamilsina) de las metzincinas (Rawlings, y colaboradores. Methods in Enzymoloqy, 248, 183-228 (1995) y Stocker, y colaboradores, Protein Science, 4, 823-840 (1995)). 15 La subfamilia MMP de enzimas contiene actualmente diecisiete miembros (MMP-1 , MMP-2, MMP-3, MMP-7, MMP-8, MMP-9, MMP-10, MMP-11 , MMP-12, MMP-13, MMP-14, MMP-15, MMP-16, MMP-17, MMP-18, MMP-19 y MMP-20). Las MMP's son en su mayor parte bien conocidas por su cometido en regular el cambio de proteínas de matriz extracelulares y como tales desempeñan papeles importantes en procesos fisiológicos normales tales como reproducción, desarrollo y diferenciación. Además, las MMP's son expresadas en muchas situaciones patológicas en las cuales se está produciendo un recambio anormal de tejido conjuntivo. Por ejemplo, se ha demostrado que la -a^afe.

MMP-13, una enzima con potente actividad en la degradación del colágeno del tipo II (que es el colágeno principal en un cartílago), es sobreexpresada en un cartílago osteoartrítico (Mitchell, y colaboradores, J. Clin. Invest., 97, 761 (1996)). Otras MMP's (MMP-2, MMP-3, MMP-8, MMP-9, MMP-12) son también sobreexpresadas en un cartílago osteoartrítico y se espera que la inhibición de algunas o la totalidad de estas MMP's decelere o bloquee la pérdida acelerada de cartílago que es típica de enfermedades de las articulaciones, tales como osteoartritis o artritis reumatoide. Las reprolisinas de mamíferos son conocidas como ADAMs (de A Disintegrin And Metalloproteinase - una desintegrina y metalo-proteinasa) (Wolfberg, y colaboradores, J. Cell. Biol., 131 , 275-278 (1995)) y contienen un dominio de desintegrina además de un dominio similar a una metalo-proteinasa. Hasta la fecha se han identificado veintitrés ADAM's distintas. La ADAM-17, también como enzima convertidora del factor alfa de necrosis de tumores (TACE, de tumor necrosis factor-alpha converting enzyme) es la ADAM mejor conocida. La ADAM-17 (TACE) es responsable de la escisión del factor alfa de necrosis de tumores (TNF-a, también conocido como caquectina) fijado a células. Se reconoce que el TNF-a está implicado en muchas enfermedades infecciosas y autoinmunitarias (W. Friers, FEBS Letters, 285, 199 (1991 )). Además, se ha mostrado que el TNF-a es el mediador principal de la respuesta inflamatoria observada en septicemia y choque séptico (Spooner, y colaboradores, Clinical Immunoloqv and Immunopatholoqy, 62 S11 (1992)). Hay dos formas de TNF-a, una proteína membranal del tipo II con una masa m^^^^ ^^ ^í^^^ ^tí^^m^^^^^^^^^^ molecular relativa de 26.000 (26 kD) y una forma de 17 kD soluble generada a partir de la proteína fijada a células por escisión proteolítica específica. La forma de 17 kD soluble del TNF-a es liberada por la célula y está asociada con los efectos perniciosos del TNF-a. Esta forma del TNF-a es también capaz de actuar en sitios distantes del sitio de síntesis. Así, los inhibidores de TACE impiden la formación de TNF-a solubles e impiden los efectos perniciosos del factor soluble. Compuestos selectos de la invención son potentes inhibidores de agrecanasa, una enzima que es importante en la degradación del agrecano de cartílagos. Se cree también que la agrecanasa es una ADAM. La pérdida de agrecano desde la matriz de cartílagos es un importante factor en la progresión de enfermedades de las articulaciones tales como osteoartritis y artritis reumatoide y se espera que la inhibición de la agrecanasa decelere o bloquee la pérdida de cartílago en estas enfermedades. Otras ADAM's que han puesto de manifiesto expresión en situaciones patológicas incluyen la ADAM TS-1 (Kuno, y colaboradores, J. Biol. Chem., 272, 556-562 (1997)), y las ADAM's 10, 12 y 15 (Wu, y colaboradores, Biochem. Biophys. Res. Comm., 235, 437-442, (1997)). Según aumente el conocimiento de la expresión, de los substratos fisiológicos y de la asociación con enfermedades de las ADAM's se apreciará la importancia plena del papel de la inhibición de esta clase de enzimas. Los compuestos de la invención son útiles en el tratamiento de artritis (inclusive osteoartritis y artritis reumatoide), enfermedad de intestino inflamatorio, enfermedad de Crohn, enfisema, síndrome de angustia respiratoria -.cMcM^c.c.c..a ¿tao^^^^Üta aguda, asma, enfermedad pulmonar obstructiva crónica, enfermedad de Alzheimer, toxicidad en un trasplante de órganos, caquexia, reacciones alérgicas, hipersensibilidad alérgica al contacto, cáncer (tal como un cáncer de tumor sólido inclusive cáncer de colón, cáncer de mama, cáncer de pulmón y cáncer de próstata y malignidades hematopoyéticas inclusive leucemias y linfomas), ulceración de tejidos, reestenosis, enfermedad periodontal, epidermólisis ampollar o bullosa, osteoporosis, relajación de implantes de articulaciones artificiales, aterosclerosis (inclusive rotura de placas ateroscleróticas), aneurisma aórtico (inclusive aneurisma aórtico abdominal y aneurisma aórtico cerebral), insuficiencia cardíaca congestiva, infarto de miocardio, apoplejía, isquemia cerebral, traumatismo de cabeza, lesión de medula espinal, trastornos neurodegenerativos (agudos y crónicos), trastornos autoinmunitarios, enfermedad de Huntington, enfermedad de Parkinson, migraña, depresión, neuropatía periférica, dolor, angiopatía de amiloides cerebrales, mejoría nootrópica o cognitiva, esclerosis lateral amiotrófica, esclerosis múltiple, angiogénesis ocular, lesión de la córnea, degeneración macular, curación anormal de heridas, quemaduras, diabetes, invasión con tumores, crecimiento de tumores, metástasis de tumores, cicatrización de la córnea, esclerotitis, SIDA, septicemia o choque séptico. Los compuestos de la presente invención son útiles también en el tratamiento de enfermedades en las que una inhibición de las MMP's y/o ADAM's proporcionará un beneficio terapéutico, tales como las caracterizadas por una expresión de metalo-proteinasa de matriz o ADAM. Este invento se refiere también a un método para usar los compuestos de la invención en el tratamiento de las anteriores enfermedades en mamíferos, especialmente seres humanos, y a las composiciones farmacéuticas útiles para ello. Se reconoce que diferentes combinaciones de MMP's y ADAM's son expresadas en diferentes situaciones patológicas. Correspondientemente, se pueden preferir para enfermedades individuales inhibidores con selectividades específicas para ADAM's y/o MMP's individuales. Por ejemplo, la artritis reumatoide es una enfermedad inflamatoria de las articulaciones, caracterizada por niveles excesivos de TNF y por la pérdida de constituyentes de matriz de articulaciones. En este caso, un compuesto que inhiba a la TACE y a la agrecanasa así como a las MMP's tales como a la MMP-13 puede constituir la terapia preferida. En contraste, en una enfermedad menos inflamatoria de las articulaciones tal como osteoartritis, pueden preferirse compuestos que inhiban a las MMP's que degraden a la matriz, tales como MMP-13, pero no a la TACE. Los autores de la presente invención han descubierto también que es posible diseñar inhibidores con actividad diferencial de metalo-proteasas. Específicamente, por ejemplo, los autores de la invención han sido capaces de diseñar moléculas que inhiben selectivamente la a metalo-proteasa de matriz-13 (MMP-13) de modo preferente con respecto a la MMP-1.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN La presente invención se refiere a compuestos de la fórmula en la que X es >CR3R4 ó >C=0; Z es >CH2 ó >NR1; R1 es hidrógeno, alquilo (C?-C6), aril (C6-C?0)-alquilo (C?-C6), heteroaril (C2-C9)-alquilo (CrC6) o un grupo de la fórmula n es un número entero de uno a seis; R2 es hidrógeno o alquilo (C C6); R3 es hidrógeno o alquilo (CrC6); R4 es hidrógeno, alquilo (CrC6), alcoxi (d-C6)-alquilo (CrC6), arilo (Cß-C?o), heteroarilo (C2-C9), aril (C6-C?0)-alquilo (C C6), aril (C6-C?0)-arilo (Cedo), aril (C6-C?o)-heteroarilo (C2-C9), heteroaril (C2-C9)-alquilo (C?-C6), heteroaril (C2-C9)-arilo (C6-C?0), heteroaril (C2-C9)-heteroarilo (C2-C9), aril (C6-C?0)-ox¡-alquilo (CrC6), aril (C6-C?0)-oxi-arilo (C6-C?0), aril (C6-C?o)-oxi-heteroarilo (C2-C9), ^ ^ heteroaril (C2-C9)-oxi-alquilo (CrC6), heteroaril (C2-C9)-oxi-arilo (C6-C?0), heteroaril (C2-C9)-oxi-heteroarilo (C2-C9), aril (C6-C10)-alquil (C?-C6)-arilo (C6-C?0), aril (C6-C?o)-alquil (C?-C6)-heteroar¡lo (C2-C9), aril (C6-C?o)-alcoxi (C?-Ce)-arilo (C6- C10), aril (C6-C10)-alcoxi (C?-C6)-heteroarilo (C2-C9), aril (C6-C?o)-oxi-alquil (CrC6)- arilo (C6-C?o), aril (C6-C?0)-oxi-alquil (C?-C6)-heteroarilo (C2-C9), heteroaril (C2-C9)- alquil (C C6)-arilo (Ce-Cío), heteroaril (C2-C9)-alquil (CrC6)-heteroarilo (C2-C9), heteroaril (C2-Cg)-alcoxi (d-CßJ-arilo (C6-C?0), heteroaril (C2-C9)-alcoxi (C?-C6)- heteroarilo (C2-C9), heteroaril (C2-Cg)-oxi-alquil (d-CeJ-arilo (C6-C?0), heteroaril (C2-C9)-oxi-alquil (CrC6)-heteroarilo (C2-C9), aril (C6-C?0)-aril (C6-C?0)-alquilo (Cr C6) o aril (C6-C?0)-alcoxi (CrC6)-alquilo (CrC6), en que cada uno de dichos restos arilo (C6-C?0) o heteroarilo (C2-C9) está opcionalmente sustituido en cualquiera de los átomos de carbono de anillo capaces de formar un enlace adicional, con uno o más sustituyentes por cada anillo, seleccionados independientemente entre fluoro, cloro, bromo, alquilo (CrC6), alcoxi (CrC6), perfluoro-alquilo (C1-C3), perfluoro-alcoxi (C1-C3) y aril (C6-C?0)-oxi; Q es alquilo (C C6), arilo (C6-C?0), heteroarilo (C2-C9), aril (C6-C?0)- alquilo (C?-C6), aril (C6-C?o)-arilo (C6-C10), aril (C6-C?o)-heteroarilo (C2-C9), heteroaril (C2-C9)-alquilo (C Cß), heteroaril (C2-C9)-arilo (C6-C?0), heteroaril (C2- C9)-heteroarilo (C2-C9), aril (C6-C?0)-oxi-alquilo (CrC6), aril (C6-C?0)-oxi-arilo (C6- Cío), aril (C6-C?o)-oxi-heteroarilo (C2-C8), heteroaril (C2-C9)-oxi-alquilo (C?-C6), heteroaril (C2-C9)-oxi-arilo (C6-C?0), heteroaril (C2-C9)-oxi-heteroarilo (C2-C9), aril (C6-C?0)-alquil (C?-C6)-arilo (C6-C?0), aril (C6-C10)-alquil (C?-C6)-heteroarilo (C2-C9), aril (C6-C?0)-alcoxi (CrC6) arilo (C6-C?0), aril (C6-C?0)-alcoxi (CrC6)-heteroarilo (C2-C9), aril (C6-C?o)-oxi-alquil (C C6)-arilo (C6-C?0), aril (C6-C?0)-oxi-alquil (d-C6)-heteroarilo (C2-Cg), heteroaril (C2-Cg)-alquil (C?-C6)-arilo (C6-C?0), heteroaril (C2-C9)-alquil (C?-C6)-heteroarilo (C2-C9), heteroaril (C2-C9)-alcoxi (C?-C6)-arilo (C6-C?o), heteroaril (C2-C9)-alcoxi (C?-C6)-heteroarilo (C2-C9), heteroaril (C2-C8)-oxi-alquil (C?-C6)-arilo (C6-C?0), heteroaril (C2-C9)-oxi-alquil (C -C6)-heteroarilo (C2-C9), aril (C6-C?0)-aril (C6-C?0)-alquilo (C C6) o aril (C6-C10)-alcoxi (C?-C6)-alquilo (C C6), en que cada uno de dichos restos arilo (C6-d0) o heteroarilo (C2-Cg) está opcionalmente sustituido en cualquiera de los átomos de carbono de anillo capaces de formar un enlace adicional, con uno o más sustituyentes por cada anillo, seleccionados independientemente entre fluoro, cloro, bromo, alquilo (d-C6), alcoxi (C?-C6), perfluoro-alquilo (d-d), perfluoro-alcoxi (C C3) y aril (C6-C10)-oxi; con la condición de que cuando X es >C=0 y Z es >NR1, entonces R1 debe ser hidrógeno, alquilo (CrC4), aril (C6-do)-alquilo (d-C6) o heteroaril (C2-C9)-alquilo (d-C6); o sus sales farmacéuticamente aceptables. El término "alquilo", tal como se usa en el presente contexto, a menos que se indique otra cosa distinta, ¡ncluye radicales hidrocarbilo monovalentes saturados que tienen restos lineales, ramificados o cíclicos o combinaciones de ellos. El término "alcoxi", tal como se usa en el presente contexto, incluye grupos O-alquilo en los que "alquilo" es como se ha definido anteriormente. El término "arilo", tal como se usa en el presente contexto, a menos ^^^^^^ que se indique otra cosa distinta, incluye un radical orgánico derivado de un hidrocarburo aromático por eliminación de un hidrógeno, tal como fenilo o naftilo. El término "heteroarilo", tal como se usa en el presente contexto, a menos que se indique otra cosa distinta, incluye un radical orgánico derivado de un compuesto heterocíclico aromático por eliminación de un hidrógeno, tal como piridilo, furilo, pirrolilo, tienilo, isotiazolilo, imidazolilo, bencimidazolilo, tetrazolilo, pirazinilo, pirimidilo, quinolilo, isoquinolilo, benzofurilo, isobenzofurilo, benzotienilo, pirazolilo, indolilo, isoindolilo, purinilo, carbazolilo, isoxazolilo, tiazolilo, oxazolilo, benzotiazolilo o benzoxazolilo. Los heteroarilos preferidos incluyen piridilo, furilo, tienilo, isotiazolilo, pirazinilo, pirimidilo, pirazolilo, isoxazolilo, tiazolilo u oxazolilo. Los heteroarilos sumamente preferidos incluyen piridilo, furilo o tienilo. El término "anillo terminal" se refiere al anillo que está más alejado del punto de unión del sustituyente (es decir, el anillo terminal en el grupo aril (C6-C?0) -alquil (C?-C6)-heteroarilo (C2-C9) es arilo). El compuesto de fórmula I puede tener centros quirales y por lo tanto existir en diferentes formas enantioméricas. Esta invención se refiere a todos los isómeros ópticos, tautómeros y estereoisómeros de los compuestos de fórmula I y sus mezclas en los que el sistema de anillo bicíclico [3.3.0] está condensado en cis. Otros compuestos de la invención se refieren a un compuesto de fórmula I, en la que X es -CH - y Z es -CH2-. Otros compuestos de la invención se refieren también a un ^^ ¿¡g!j^^^*^^^^^^^^ compuesto de fórmula I, en la que X es >C=0 y Z es -CH2-. Compuestos preferidos de la invención se refieren a un compuesto de fórmula I en la que Z es >NR1, más preferiblemente en que R1 es hidrógeno, alquilo (C C6), aril (C6-C?0)-alquilo (C C6) o heteroaril (C2-C9)-alquilo (d-C6). Otros compuestos preferidos de la invención se refieren a un compuesto de fórmula I en la que X es -CH2- y Z es >NR1, más preferiblemente en que R1 es hidrógeno, alquilo (d-C6), aril (C6-C?0)-alquilo (d-C6) o heteroaril (C2-C9)-alquilo (C?-C6). Otros compuestos preferidos de la invención se refieren a un compuesto de fórmula I en la que X es >C=0 y Z es >NR1, más preferiblemente en que R1 es hidrógeno, alquilo (d-C6), aril (C6-C?0)-alquilo (d-C6) o heteroaril (C2-C9)-alquilo (d-C6). Compuestos más preferidos de la presente invención se refieren a un compuesto de fórmula I en la que Q es arilo (C6-C?0), aril (C6-C?o)-oxi-arilo (C6-C?o), heteroaril (C2-C9)-oxi-arilo (C6-C?o) o aril (C6-C?0)-alcoxi (C?-C6)-arilo (Cedo) opcionalmente sustituidos, preferiblemente sustituidos con cero a tres sustituyentes (lo más preferiblemente cero, uno o dos sustituyentes) seleccionados independientemente entre hidrógeno, fluoro, cloro, alquilo (d-C6) o alcoxi (d-d). Cuando el compuesto de fórmula I posee un sustituyente, ese sustituyente está situado del modo más preferible en la posición para u orto del anillo terminal. Compuestos preferidos específicos de fórmula I se seleccionan entre el grupo que consta de: [3aR-(3aß,5a,6aß]-hidroxiamida de ácido 5-[4-(4-fluoro-fenox¡)-benceno-sulfonilamino]-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, [3aS-(3aa,5a,6aa]-hidroxiamida de ácido 5-[4-(4-fluoro-fenoxi)-benceno-sulfonilamino]-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, [3aR-(3aß,5a,6aß]-hidroxiamida de ácido 5-[4-(4-cloro-fenox¡)-benceno-sulfonilamino]-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxíl¡co, [3aS-(3aa,5a,6aa]-hidroxiamida de ácido 5-[4-(4-cloro-fenoxi)-benceno-sulfonilamino]-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, [3aR-(3aß,5a,6aß]-hidroxiamida de ácido 5-[4-(4-fluoro-fenoxi)-benceno-sulfonilamino]-2-oxo-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, [3aS-(3aa,5a,6aa]-hidroxiamida de ácido 5-(4-benciloxi-bencenosulfonil-amino)-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, y [3aS-(3aa,5a,6aa]-hidroxiamida de ácido 5-[4-(4-fluoro-benciloxi)-benceno-sulfonilamino]-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico. Otros compuestos de fórmula I se seleccionan entre el grupo que consta de: hidroxiamida de ácido 5-[4-(4-cloro-benciloxi)-bencenosulfonilamino]-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, hidroxiamida de ácido 5-[4-(2-metil-benciloxi)-bencenosulfonilamino]-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, hidroxiamida de ácido 5-[4-(4-fluoro-2-metil-benciloxi)-bencenosulfonilamino]-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, hidroxiamida de ácido 5-[4-(5-fluoro-2-metil-benciloxi)- %?* ^ 4,^^¡i^ému^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^&^^^^^^^^^^^^^^^í^ bencenosulfonilamino]-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, hidroxiamida de ácido 5-[4-(piridin-4-iloxi)-bencenosulfonilamino]-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, hidroxiamida de ácido 5-[4-(piridin-3-iloxi)-bencenosulfonilamino]-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, hidroxiamida de ácido 5-[4-(piridin-2-iloxi)-bencenosulfonilamino]-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, hidroxiamida de ácido 5-[4-(piridin-4-ilmetoxi)-bencenosulfonilamino]-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxíl¡co, hidroxiamida de ácido 5-[4-(2-piridin-4-il-etoxi)-bencenosulfonilamino]-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, hidroxiamida de ácido 5-{4-[2-(4-fluoro-fenil)-etoxi]-bencenosulfonilamino}-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, hidroxiamida de ácido 5-[4-(tiazol-4-ilmetoxi)-bencenosulfonilamino]-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, hidroxiamida de ácido 5-[4-(2-cloro-tiazol-4-ilmetoxi)-bencenosulfonilamino]-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, hidroxiamida de ácido 5-[4'-fluoro-bifenil-4-sulfonilamino)-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, hidroxiamida de ácido 5-[4-(benzotiazol-2-iloxi)-bencenosulfonilamino)-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]d¡oxol-5-carboxílico, hidroxiamida de ácido 5-[5-(4-fluoro-fenoxi)-furano-2-sulfonilamino]-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, -**"*-•«* *"-*-' --*- ? i, ir r • ?i? t-Ti *^^ it i II tnntf 'ini-? trr hidroxiamida de ácido 5-(5-piridin-2-il-tiofeno-2-sulfonilamino)-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, hidroxiamida de ácido 5-[4-(4-cloro-fenoxi)-bencenosulfonilamino]-2-oxo-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, hidroxiamida de ácido 5-[4-(4-fluoro-benciloxi)-bencenosulfonilamino]-2-oxo-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, hidroxiamida de ácido 5-[4-(4-cloro-benciloxi)-bencenosulfonilamino]-2-oxo-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, hidroxiamida de ácido 5-[4-(2,5-difluoro-benciloxi)-bencenosulfonilamino]-2-oxo-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, hidroxiamida de ácido 5-[4-(2-metil-benciloxi)-bencenosulfonilamino]-2-oxo-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, hidroxiamida de ácido 5-[4-(4-fluoro-2-metil-benciloxi)-bencenosulfonilamino]-2-oxo-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, hidroxiamida de ácido 5-[4-(5-fluoro-2-metil-benciloxi)-bencenosulfonilamino]-2-oxo-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, hidroxiamida de ácido 5-[4-(piridin-4-iloxi)-bencenosulfonilamino]-2-oxo-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, hidroxiamida de ácido 5-[4-(p¡ridin-3-iloxi)-bencenosulfonilamino]-2-oxo-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, hidroxiamida de ácido 5-[4-(piridin-2-iloxi)-bencenosulfonilamino]-2-oxo-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, hidroxiamida de ácido 5-[4-(piridin-4-ilmetoxi)- ¿ ¡¡ ¡á?¡ - áHnÉ?a?tdi.ákÍtttt bencenosulfonilam¡no]-2-oxo-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]d¡oxol-5-carboxílico, hidroxiamida de ácido 5-[4-(2-piridin-4-il-etoxi)-bencenosulfonilamino]-2-oxo-tetrahidro-c¡clopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, hidroxiamida de ácido 5-{4-[2-(4-fluoro-fenil)etoxi]-bencenosulfonilamino}-2-oxo-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, hidroxiamida de ácido 5-[4-(tiazol-4-ilmetoxi)-bencenosulfonilamino]-2-oxo-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, hidroxiamida de ácido 5-[4-(2-cloro-tiazol-4-ilmetox¡)-bencenosulfonilamino]-2-oxo-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, hidroxiamida de ácido 5-(4'-fluoro-bifenil-4-sulfonilamino)-2-oxo-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, hidroxiamida de ácido 5-[4-(benzotiazol-2-iloxi)-bencenosulfonilamino]-2-oxo-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, hidroxiamida de ácido 5-[5-(4-fluoro-fenoxi)-furano-2-sulfonilamino]-2-oxo-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, hidroxiamida de ácido 5-(5-piridin-2-il-tiofeno-2-sulfonilamino)-2-oxo-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, ácido 3-[[4-(4-fluoro-fenoxi)-bencenosulfonil]-(5-hidroxicarbamoil-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-il)-amino]-propiónico, ácido 3-[[4-(4-cloro-fenoxi)-bencenosulfonil]-(5-hidroxicarbamoil-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-il)-amino]-propiónico, ácido 3-[[4-(4-fluoro-benciloxi)-bencenosulfonil]-(5-hidroxicarbamoil-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-il)-amino]-propiónico, ácido 3-[[4-(4-cloro-benc¡loxi)-bencenosulfonil]-(5-hidroxicarbamoil-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-il)-amino]-propiónico, ácido 3-[[4-(2,5-difluoro-benciloxi)-bencenosulfonil]-(5-hidroxicarbamoil-tetrahidro-c¡clopenta[1 ,3]dioxol-5-¡l)-amino]-propiónico, ácido 3-[[4-(2-metil-benciloxi)-bencenosulfonil]-(5-hidroxicarbamoil-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-il)-amino]-propiónico, ácido 3-[[4-(4-fluoro-2-metil-benciloxi)-bencenosulfonil]-(5-hidroxicarbamoil-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-il)-amino]-propiónico, ácido 3-[[4-(5-fluoro-2-metil-benciloxi)-bencenosulfonil]-(5-hidroxicarbamoil-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-il)-amino]-propiónico, hidroxiamida de ácido 5-[[4-(4-fluoro-fenoxi)-bencenosulfonil]-(3-metil-butil)-amino]-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, hidroxiamida de ácido 5-{[4-(4-fluoro-fenoxi)-bencenosulfonil]-tiazol-4-ilmetil-amino}-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, hidroxiamida de ácido 5-{[4-(4-fluoro-benciloxi)-bencenosulfonil]-tiazol-4-ilmetil-amino}-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, hidroxiamida de ácido 5-{(4-fluoro-bencenosulfonil)-[2-(4-fluoro-fenil)-etil]-amino}-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxíl¡co, hidroxiamida de ácido 5-[[4-(2-p¡ridin-4-il-etoxi)-bencenosulfonil]-(3-metil-butil)-amino]-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, hidroxiamida de ácido 5-[4-(4-fluoro-fenoxi)-bencenosulfonilmetil]-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, hidroxiamida de ácido 5-[4-(4-cloro-fenoxi)-bencenosulfonilmetil]- ^^^^ tetrah id ro-ciclopenta[1 ,3]d ioxol-5-carboxíl ico , hidroxiamida de ácido 5-[4-(4-fluoro-bencilox¡)- bencenosulfonilmetil]-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, hidroxiamida de ácido 5-[4-(4-cloro-benciloxi)-bencenosulfonilmetil]- tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, hidroxiamida de ácido 5-[4-(2,5-difluoro-benciloxi)- bencenosulfonilmetil]-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, hidroxiamida de ácido 5-[4-(2-metil-benciloxi)-bencenosulfonilmetil]- tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, hidroxiamida de ácido 5-[4-(4-fluoro-2-metil-bencilox¡)- bencenosulfonilmetil]-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, hidroxiamida de ácido 5-[4-(5-fluoro-2-metil-benciloxi)- bencenosulfonilmetil]-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, hidroxiamida de ácido 5-[4-(piridin-4-iloxi)-bencenosulfonilmetil]- tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, hidroxiamida de ácido 5-[4-(piridin-3-iloxi)-bencenosulfonilmetil]- tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, hidroxiamida de ácido 5-[4-(piridin-2-iloxi)-bencenosulfonilmetil]- tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, hidroxiamida de ácido 5-[4-(piridin-4-ilmetoxi)-bencenosulfonilmetil]- tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, hidroxiamida de ácido 5-[4-(2-piridin-4-il-etoxi)- bencenosulfonilmetil]-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, hidroxiamida de ácido 5-{4-[2-(4-fluoro-fenil)-etoxi]- bencenosulfonilmetil}-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, hidroxiamida de ácido 5-[4-(tiazol-4-ilmetoxi)-bencenosulfonilmet¡l]- tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, 5 hidroxiamida de ácido 5-[4-(2-cloro-tiazol-4-ilmetoxi)- bencenosulfonilmetil]-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, hidroxiamida de ácido 5-(4'-fluoro-bifenil-4-sulfonilmetil)-tetrahidro- ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, hidroxiamida de ácido 5-[4-(benzotiazol-2-iloxi)- 10 bencenosulfonilmetil]-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, hidroxiamida de ácido 5-[5-(4-fluoro-fenoxi)-furano-2-sulfonilmetil]- tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, hidroxiamida de ácido 5-(5-piridin-2-il-tiofeno-2-sulfonilmetil)- tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, 15 hidroxiamida de ácido 5-[4-(4-fluoro-fenoxi)-bencenosulfonilmetil]-2- oxo-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, hidroxiamida de ácido 5-[4-(4-cloro-fenoxi)-bencenosulfonilmetil]-2- oxo-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, hidroxiamida de ácido 5-[4-(4-fluoro-benciloxi)- 20 bencenosulfonilmetil]-2-oxo-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, hidroxiamida de ácido 5-[4-(4-cloro-benciloxi)-bencenosulfonilmetil]- 2-oxo-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, hidroxiamida de ácido 5-[4-(2,5-difluoro-benciloxi)- * , a"At •' - - •-- '* • - jB-fcat.,». i . ^ .^.^»., — nirrr--?- i ir nfw- -r- rr r bencenosulfonilmetil]-2-oxo-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, hidroxiamida de ácido 5-[4-(2-metil-benciloxi)-bencenosulfon¡lmetil]- 2-oxo-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, hidroxiamida de ácido 5-[4-(4-fluoro-2-metil-benciloxi)- 5 bencenosulfonilmetil]-2-oxo-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxíl¡co, hidroxiamida de ácido 5-[4-(5-fluoro-2-metil-benciloxi)- bencenosulfonilmetil]-2-oxo-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, hidroxiamida de ácido 5-[4-(piridin-4-iloxi)-bencenosulfonilmetil]-2- oxo-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, 10 hidroxiamida de ácido 5-[4-(pirid¡n-3-iloxi)-bencenosulfonilmetil]-2- oxo-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, hidroxiamida de ácido 5-[4-(piridin-2-iloxi)-bencenosulfonilmetil]-2- oxo-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, hidroxiamida de ácido 5-[4-(piridin-4-ilmetoxi)-bencenosulfonilmetil]- 15 2-oxo-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, hidroxiamida de ácido 5-[4-(2-piridin-4-il-etoxi)- bencenosulfonilmetil]-2-oxo-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, hidroxiamida de ácido 5-{4-[2-(4-fluoro-fenil)-etox¡]- bencenosulfonilmetil}-2-oxo-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, 20 hidroxiamida de ácido 5-[4-(tiazol-4-ilmetoxi)-bencenosulfonilmet¡l]- 2-oxo-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, hidroxiamida de ácido 5-[4-(2-cloro-tiazol-4-ilmetoxi)- bencenosulfonilmetil]-2-oxo-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, hidroxiamida de ácido 5-(4'-fluoro-bifenil-4-sulfonilmetil)-2-oxo-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, hidroxiamida de ácido 5-[4-(benzotiazol-2-iloxi)-bencenosulfonilmetil]-2-oxo-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, hidroxiamida de ácido 2-bencil-5-[4-(2,4-difluorobenciloxi)-bencenosulfonil-amino]-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, hidroxiamida de ácido 2-(2-metoxietil)-5-[4-(quinolin-5-ilmetoxi)-benceno-sulfonilamino]-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, hidroxiamida de ácido 5-[4-(4-fluorofenoxi)-bencenosulfonilamino]-2-(2-metoxietil)-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, hidroxiamida de ácido 5-[4-(5-cloropiridin-2-¡loxi)-bencenosulfonilamino]-2-furan-2-ilmetil-2-metil-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, hidroxiamida de ácido 5-[4-(4-clorofenoxi)-bencenosulfonilmetil]-2-etoximetil-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, ácido 3-[(5-hidroxicarbamoil-2-feniletil-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-il)-(4-fenoxi-bencenosulfonil)-amino]-propiónico, hidroxiamida de ácido 5-[5-(4-fluoro-fenoxi)-furano-2-sulfonilmetil]-2-oxo-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, y hidroxiamida de ácido 5-(5-pirid¡n-2-il-tiofeno-2-sulfonilmetil)-2-oxo-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico. La presente invención se refiere también a las sales por adición de ácidos farmacéuticamente aceptables de compuestos de la fórmula I. Los ácidos .¿á m^..^.,* ^,^. que se usan para preparar las sales por adición de ácidos farmacéuticamente aceptables de los compuestos de carácter básico antes mencionados de esta invención son los que forman sales por adición de ácidos no tóxicas, es decir, sales que contienen aniones farmacológicamente aceptables, tales como las 5 sales hidrocloruro, hidrobromuro, hidroyoduro, nitrato, sulfato, bisulfato, fosfato, fosfato ácido, acetato, lactato, citrato, citrato ácido, tartrato, bitartrato, succinato, maleato, fumarato, gluconato, sacarato, benzoato, metanosulfonato, etanosulfonato, bencenosulfonato, p-toluenosulfonato y pamoato [es decir, 1 ,1'- metilen-bis-(2-hidroxi-3-naftoato)]. 10 La invención se refiere también a sales por adición de bases de fórmula I. Las bases químicas que se pueden usar como reactivos para preparar las sales de bases farmacéuticamente aceptables de los compuestos de fórmula I que son de carácter ácido, son las que forman sales de bases no tóxicas con dichos compuestos. Dichas sales de bases no tóxicas incluyen, pero no se limitan a, las que se derivan de los cationes farmacológicamente aceptables tales como cationes de metales alcalinos (p.ej., de potasio y sodio) y los cationes de metales alcalino-térreos (p.ej., de calcio y magnesio), amonio o sales por adición de aminas solubles en agua tales como N-metil-glucamina (meglumina), y las sales de alcanol inferior-amonio u otras sales de bases de aminas orgánicas farmacéuticamente aceptables. La presente invención se refiere también a una composición farmacéutica para el tratamiento de una condición seleccionada entre el grupo de consta de artritis (inclusive osteoartritis y artritis reumatoide), enfermedad de ^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^¡^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^ ^^^^^^^^^^^^ ^^ ^^^^^^^^^^^ intestino inflamatorio, enfermedad de Crohn, enfisema, síndrome de angustia respiratoria aguda, asma, enfermedad pulmonar obstructiva crónica, enfermedad de Alzheimer, toxicidad en un trasplante de órganos, caquexia, reacciones alérgicas, hipersensibilidad alérgica al contacto, cáncer (tal como un cáncer de tumor sólido inclusive cáncer de colón, cáncer de mama, cáncer de pulmón y cáncer de próstata y malignidades hematopoyéticas inclusive leucemias y linfomas), ulceración de tejidos, reestenosis, enfermedad periodontal, epidermólisis ampollar o bullosa, osteoporosis, relajación de implantes de articulaciones artificiales, aterosclerosis (inclusive rotura de placas ateroscleróticas), aneurisma aórtico (inclusive aneurisma aórtico abdominal y aneurisma aórtico cerebral), insuficiencia cardíaca congestiva, infarto de miocardio, apoplejía, isquemia cerebral, traumatismo de cabeza, lesión de medula espinal, trastornos neuro-degenerativos (agudos y crónicos), trastornos autoinmunitarios, enfermedad de Huntington, enfermedad de Parkinson, migraña, depresión, neuropatía periférica, dolor, angiopatía de amiloides cerebrales, mejoría nootrópica o cognitiva, esclerosis lateral amiotrófica, esclerosis múltiple, angiogénesis ocular, lesión de la córnea, degeneración macular, curación anormal de heridas, quemaduras, diabetes, invasión con tumores, crecimiento de tumores, metástasis de tumores, cicatrización de la córnea, esclerotitis, SIDA, septicemia o choque séptico en un mamífero, inclusive un ser humano que comprende una cantidad de un compuesto de fórmula I o de una sal farmacéuticamente aceptable de éste que es eficaz en dichos tratamientos y un soporte farmacéuticamente aceptable. ^íü& La presente invención se refiere también a una composición farmacéutica para el tratamiento de enfermedades caracterizadas por una actividad de metalo-proteinasa y otras enfermedades caracterizadas por una actividad de reprolisina de mamífero en un mamífero, inclusive un ser humano, 5 que comprende una cantidad de un compuesto de fórmula I o unas de sus sales farmacéuticamente aceptables, eficaces en dichos tratamientos y un soporte farmacéuticamente aceptable. La presente invención se refiere también a una composición farmacéutica para la inhibición de (a) metalo-proteinasas de matriz u otras metalo-proteinasas implicadas en la degradación de una matriz, o (b) una reprolisina de mamífero (tal como agrecanasa o las ADAM's TS-1 , 10, 12, 15 y 17, lo más preferiblemente ADAM-17) en un mamífero, inclusive un ser humano, que comprende una cantidad eficaz de un compuesto de fórmula I o de una de sus sales farmacéuticamente aceptables. 15 La presente invención se refiere también a un método para tratar una condición seleccionada entre el grupo que consta de artritis (inclusive osteoartritis y artritis reumatoide), enfermedad de intestino inflamatorio, enfermedad de Crohn, enfisema, síndrome de angustia respiratoria aguda, asma, enfermedad pulmonar obstructiva crónica, enfermedad de Alzheimer, toxicidad en un trasplante de órganos, caquexia, reacciones alérgicas, hipersensibilidad alérgica al contacto, cáncer (tal como un cáncer de tumor sólido inclusive cáncer de colón, cáncer de mama, cáncer de pulmón y cáncer de próstata y malignidades hematopoyéticas inclusive leucemias y linfomas), ulceración de tejidos, reestenosis, enfermedad periodontal, epidermólisis ampollar o bullosa, osteoporosis, relajación de implantes de articulaciones artificiales, aterosclerosis (inclusive rotura de placas ateroscleróticas), aneurisma aórtico (inclusive aneurisma aórtico abdominal y aneurisma aórtico cerebral), insuficiencia cardíaca congestiva, infarto de miocardio, apoplejía, isquemia cerebral, traumatismo de cabeza, lesión de medula espinal, trastornos neuro-degenerativos (agudos y crónicos), trastornos autoinmunitarios, enfermedad de Huntington, enfermedad de Parkinson, migraña, depresión, neuropatía periférica, dolor, angiopatía de amiloides cerebrales, mejoría nootrópica o cognitiva, esclerosis lateral amiotrófica, esclerosis múltiple, angiogénesis ocular, lesión de la córnea, degeneración macular, curación anormal de heridas, quemaduras, diabetes, invasión con tumores, crecimiento de tumores, metástasis de tumores, cicatrización de la córnea, esclerotitis, SIDA, septicemia o choque séptico en un mamífero, inclusive un ser humano que comprende administrar a dicho mamífero una cantidad de un compuesto de fórmula I o de una de sus sales farmacéuticamente aceptables eficaz para tratar dicha condición. La presente invención se refiere también al tratamiento de enfermedades caracterizadas por una actividad de metalo-proteinasa de matriz y otras enfermedades caracterizadas por actividad de reprolisina de mamíferos en un mamífero, inclusive un ser humano, que comprende administrar a dicho mamífero una cantidad de un compuesto de fórmula I o de una de sus sales farmacéuticamente aceptables, eficaces para tratar dicha condición. La presente invención se refiere también a un método para la ii¿¿j?iiiÉ^¿-¿^ ^^É¿ , ¿-*^^'** - *--**- ^^^^^fekj j gefc^^j-^^ inhibición de (a) metalo-proteinasas de matriz u otras metalo-proteinasas implicadas en la degradación de una matriz o (b) una reprolisina de mamífero (tal como agrecanasa o las ADAM's TS-1 , 10, 12, 15 y 17, preferiblemente ADAM-17) en un mamífero, inclusive un ser humano, que comprende administrar a dicho mamífero una cantidad eficaz de un compuesto de fórmula I o de una de sus sales farmacéuticamente aceptables. Esta invención abarca también composiciones farmacéuticas que contienen profármacos de compuestos de la fórmula I. Esta invención abarca también métodos para tratar o prevenir trastornos que se pueden tratar o prevenir por la inhibición del metalo-proteinasas de matriz o la inhibición de reprolisina de mamífero, que comprende administrar profármacos de compuestos de la fórmula I. Los compuestos de fórmula I que tienen grupos amino, amido, hidroxi o carboxílicos libres se pueden convertir en profármacos. Los profármacos incluyen compuestos en los que un residuo de aminoácido, o una cadena polipeptídica de dos o más (p.ej., dos, tres o cuatro) residuos de aminoácidos que están enlazados covalentemente a través de enlaces peptídicos a grupos amino, hidroxi o de ácidos carboxílicos libres de compuestos de fórmula I. Los residuos de aminoácidos incluyen los 20 aminoácidos presentes en la naturaleza, designados corrientemente por símbolos de tres letras e incluyen también 4-hidroxi-prolina, hidrolisina, demosina, isodemosina, 3-metil-histidina, norvalina, beta-alanina, ácido gamma-aminobutírico, citrulina, homocisteína. homoserina, ornitina y metionina-sulfona. Los profármacos incluyen también compuestos en los que se presentan carbonatos, carbamatos, ^^¿2"^^^ amidas y esteres de alquilo, que están enlazados covalentemente a los anteriores sustituyentes de fórmula I a través de la cadena lateral de profármaco del carbono de carbonilo. Una persona con experiencia ordinaria en la técnica apreciará que 5 los compuestos de la invención son útiles para tratar un conjunto diverso de enfermedades. Una persona con experiencia ordinaria en la técnica apreciará también que cuando se usan los compuestos de la invención en el tratamiento de una enfermedad específica, los compuestos de la invención se pueden combinar con diversos agentes terapéuticos existentes usados para esa enfermedad. Para el tratamiento de la artritis reumatoide, los compuestos de la invención se pueden combinar con agentes tales como inhibidores de TNF-a tales como anticuerpos monoclonales anti-TNF y las moléculas de inmunoglobulinas de receptores de TNF (tales como Enbrel®), metotrexato en baja dosis, lefunimida, hidroxicloroquina, d-penicilamina, auranofin o bien oro parenteral u oral. Los compuestos de la invención se pueden usar también en combinación con agentes terapéuticos existentes para el tratamiento de la osteoartritis. Agentes apropiados que se han de usar en combinación incluyen agentes antiinflamatorios no esteroideos clásicos (citados en lo sucesivo como NSAID's) tales como piroxicam, diclofenaco, ácidos propiónicos tales como naproxeno, flubiprofeno, fenoprofeno, cetoprofeno e ibuprofeno, fenamatos tales como ácido mefenámico, indometacina, sulindaco, apazona, pirazolonas tales ^^^^^^^¡^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^l^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^j^^j^^^^^^^^. como fenilbutazona, salicilatos tales como aspirina, inhibidores de COX-2 tales como celecoxib y rofecoxib, agentes analgésicos y para terapias intraarticulares tales como corticoesteroides y ácidos hialurónicos tales como hialgan y sinvisc. Los compuestos de la presente invención se pueden usar también en combinación con agentes anticancerosos tales como endostatina y angiostatina o fármacos citotóxicos tales como adriamicina, daunomicina, cisplatino, etoposido, taxol, taxotere, y alcaloides tales como vincristina, y antimetabolitos tales como metotrexato. Los compuestos de la presente invención se pueden usar también en combinación con agentes cardiovasculares tales como bloqueadores de los canales de calcio, agentes para disminuir lípidos tales con estatinas, fibratos, beta-bloqueadores, inhibidores de Ace, antagonistas de receptores de angiotensina-2 e inhibidores de agregación de plaquetas. Los compuestos de la presente invención se pueden usar también en combinación con agentes para el CNS (sistema nervioso central) tales como antidepresivos (tales como sertralina), fármacos antiparkinsonianos (tales como deprenil, L-dopa, requip, mirapex, inhibidores de MAOB tales como segelina y rasagilina, inhibidores de comP tales como Tasmar, inhibidores de A-2, inhibidores de la reabsorción de dopamina, antagonistas de NMDA, agonistas de Nicotina, agonistas de Dopamina, e inhibidores de óxido nítrico-sintasa neuronal) y fármacos anti-Alzheimer tales como donepecil, tacrina, inhibidores de COX-2, propentofilina o metrifonato. Los compuestos de la presente invención se pueden usar también en combinación con agentes para osteoporosis tales como roloxifeno, droloxifeno o fosomax y agentes inmunosupresores tales como FK-506 y rapamicina.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN El siguiente Esquema de reacciones ilustra la preparación de los compuestos de la presente invención. A menos que se indique otra cosa distinta, n, X, Z, Q y R1, R2, R3 y R4 en los Esquemas de reacciones y en la discusión que sigue, están definidos como anteriormente.

ESQUEMA 1 VI ....^.J._. JB?.M** ...>. ^, -„»„.^.&^ .^. , ^^^ ESQUEMA 2 XI ESQUEMA 2 CONTINUACIÓN 15 20 ESQUEMA 3 ESQUEMA 4 El Esquema 1 se refiere a la preparación de compuestos de la fórmula I, en la que Z es >NR1 y R1 es hidrógeno. Refiriéndose al Esquema 1 , los compuestos de fórmula I se preparan a partir de compuestos de fórmula II por activación del resto de ácido carboxílico en compuestos de fórmula II seguida por tratamiento del ácido activado con hidroxilamina o un equivalente de hidroxilamina protegida que luego se desprotege para formar el ácido hidroxámico. La activación del grupo carbonilo de fórmula II se consigue mediante la acción de un apropiado agente activador tales como dialquil-carbodiimidas, sales de (benzotriazol-1-iloxi)-tris(dialquilam¡no)-fosfonio, o cloruro de oxalilo en la presencia de una cantidad catalítica de N,N-dimetil-formamida (se prefiere el hexafluorofosfato de (benzotriazol-1-iloxi)-tris(dimetilamino)fosfonio). Generalmente, la hidroxilamina o el equivalente de hidroxilamina protegido se genera in situ a partir de una forma de sal, tal como hidrocloruro de hidroxilamina, en la presencia de una base de amina tal como trietilamina, o N.N-diisopropil-etilamina. Apropiadas hidroxilaminas protegidas incluyen O-terc.-butil-hidroxilamina, O-alil-hidroxilamina, 0-terc-butil-dimetil-silil-hidroxilamina, O-trimetil-silil-etil-hidroxilamina, O-bencil-hidroxilamina o N,0-bis-trimetil-silil-hidroxilamina. La eliminación del grupo protector se lleva a cabo por hidrogenolisis en el caso en el que se use O-bencil-hidroxilamina (el paladio al 5% sobre sulfato de bario es el catalizador preferido) o por tratamiento con un ácido fuerte tal como ácido trifluoroacético en la situación en la que se usa O-terc.-butil-hidroxilamina o bien O-trimetil-silil-etil-hidroxilamina. Cuando se emplea O-alil-hidroxilamina, el grupo alilo se elimina preferiblemente por tratamiento con "-— — ""*- - tl-l " formiato de amonio en la presencia de una cantidad catalítica de tetraquis(trifenil-fosfina) paladio(O) en acetonitrilo acuoso a 60°C o por tratamiento con piperidina en la presencia de una cantidad catalítica de cloruro de alil-paladio dímero o difenil-fosfino-etano en tetrahidrofurano (THF) a aproximadamente 0°C hasta aproximadamente 35°C, preferiblemente a alrededor de 23°C. En el caso de que se use N.O-bis-trimetil-silil-hidroxilamina (preferiblemente generada in situ a partir de cloruro de trimetil-sililo e hidrocloruro de hidroxilamina en piridina a alrededor de 0°C), los grupos protectores sililo se eliminan por tratamiento con un ácido acuoso diluido tal como ácido clorhídrico 1 N. Disolventes apropiados para la activación y la reacción con hidroxilamina que antes se mencionan incluyen diclorometano, N,N-dimetil-formamida o tetrahidrofurano, preferiblemente diclorometano. La activación y la reacción con hidroxilamina que antes se mencionan se llevan a cabo a temperaturas entre aproximadamente 0°C y aproximadamente 60°C (se prefieren los 23°C) durante períodos de tiempo comprendidos entre aproximadamente 1 hora y aproximadamente 20 horas (se prefieren las 4 horas). Los compuestos de fórmula II se preparan a partir de compuestos de fórmula lll por eliminación del grupo protector PG1 para formar un ácido carboxílico. En los casos en los que el grupo protector PG1 sea metilo o etilo, esta conversión se consigue por saponificación con una fuente apropiada de hidróxido tal como hidróxido de sodio o litio (se prefiere el hidróxido de litio). Preferiblemente, la saponificación se realiza con agitación, en una mezcla acuosa de disolventes tales como la de tetrahidrofurano, metanol y agua o la de 1 ,4-dioxano, metanol y agua, a una temperatura comprendida desde aproximadamente 0°C hasta cerca del punto de ebullición del sistema de disolventes (se prefieren los aproximadamente 60°C). En los casos en los que el grupo protector PG1 sea bencilo, la conversión se consigue por hidrogenolisis del grupo bencilo. La hidrogenolisis se lleva a cabo en el seno de un apropiado disolvente tal como etanol, metanol o acetato de etilo bajo una atmósfera de hidrógeno, en la presencia de un catalizador tal como paladio al 10% sobre carbono. Generalmente, las reacciones que implican la eliminación de un grupo protector PG1 se realizan durante períodos de tiempo comprendidos entre aproximadamente 30 minutos y aproximadamente 8 horas, preferiblemente durante alrededor de 4 horas. A menos que se mencione otra cosa distinta, las reacciones antes señaladas se realizan a una temperatura desde aproximadamente 0°C y aproximadamente 25°C, preferiblemente a alrededor de 23°C. Alternativamente, los compuestos de fórmula lll se pueden convertir directamente en compuestos de fórmula I mediante la acción de hidroxilamina. Preferiblemente, el grupo protector PG1 es metilo. Disolventes apropiados incluyen metanol, etanol o 2-propanol, preferiblemente metanol. Para esta reacción, el método preferido para generar la hidroxilamina se realiza por tratamiento de hidrocloruro de hidroxilamina con hidróxido de potasio. La reacción se realiza a una temperatura comprendida entre alrededor de 0°C y alrededor de 23°C (se prefieren los 0°C) durante un período de tiempo entre aproximadamente 10 minutos y aproximadamente 4 horas (se prefieren las 2 horas). Los compuestos de fórmula lll se preparan a partir de compuestos de fórmula IV por la reacción del resto diol en cis en compuestos de fórmula IV con una fuente de metileno activo, carbonilo activo o un compuesto de la fórmula R3R4C=0. Las fuentes de metileno activo incluyen formaldehído, dimetoximetano y dibromometano. Las fuentes de carbonilo activo incluyen fosgeno, 1 ,1'-carbonil-diimidazol y trifosgeno (carbonato de bis(triclorometilo)). El método preferido para preparar compuestos de fórmula lll, en la que X es CH2, se realiza por reacción de compuestos de fórmula IV con dimetoximetano en la presencia de un ácido fuerte tal como ácido p-toluenosulfónico, ácido canfosulfónico o Amberlyst® 15 (se prefiere el Amberlyst® 15). Preferiblemente, esta reacción de metilenación se realiza en el seno de un disolvente tal como benceno o diclorometano (se prefiere el diclorometano) a una temperatura comprendida entre aproximadamente 23°C y el punto de ebullición de la mezcla de disolventes (preferiblemente a 40°C) durante un período de tiempo desde alrededor de 2 horas hasta alrededor de 24 horas, preferiblemente alrededor de 17 horas. Preferiblemente la antedicha reacción se realiza con el uso de un colector de Dean-Stark cargado con tamices de 4 Angstróm (Á). El método preferido para preparar compuestos de fórmula lll, en la que X es CO, se realiza por reacción de compuestos de fórmula IV con 1 ,1-carbonil-diimidazol. Preferiblemente, esta reacción de carbonilación se realiza en el seno de un disolvente tal como tolueno, diclorometano o tetrahidrofurano (se prefiere el diclorometano), a una temperatura comprendida entre alrededor de 0°C y alrededor de 35°C (se ^¡& '- -ijlfthr" -«** ~>-**-¿» - prefiere la de alrededor de 23°C) durante un período de tiempo entre aproximadamente 1 hora y aproximadamente 2 días (se prefiere 1 día). Los métodos preferidos para preparar compuestos de la fórmula lll, en la que X es >CR3R4 y en la que uno de los R3 ó R4 es distinto de hidrógeno, se realiza por reacción de compuestos de la fórmula IV con un compuesto aldehido o cetona de la fórmula R3R4C=0, en la presencia de un ácido, tal como ácido p- toluenosulfónico, en condiciones de deshidratación tales como la puesta a reflujo de la mezcla de reacción en un disolvente de alto punto de ebullición tal como tolueno o benceno en la presencia de un colector de Dean-Stark o de tamices moleculares de 4 Á. Los aldehidos o las cetonas de la fórmula R3R4C=0 están comercialmente disponibles o se pueden preparar por métodos bien conocidos por los que poseen experiencia ordinaria en la técnica. Los compuestos de la fórmula IV se preparan a partir de compuestos de la fórmula V por bis-hidroxilación. Preferiblemente, la reacción de bis-hidroxilación se realiza usando tetróxido de osmio en el seno de un apropiado disolvente o una adecuada mezcla de disolventes tales como piridina, una mezcla de acetona y agua o una mezcla de tetrahidrofurano y agua. Se prefiere el uso de una cantidad catalítica de tetróxido de osmio y una cantidad estequiométrica de un oxidante conjunto tal como N-óxido de 4-metil-morfolina o N-óxido de trimetil-amina en el seno de una mezcla de tetrahidrofurano y agua. La reacción antes mencionada se realiza a una temperatura comprendida entre aproximadamente 0°C y aproximadamente 35°C, preferiblemente a alrededor de 23°C, durante un período de tiempo de aproximadamente 1 hora hasta aproximadamente 8 horas (se prefieren las 2 horas). Los compuestos de fórmula IV producidos de esta manera se obtienen como una mezcla de diastereoisómeros, que se pueden separar por cristalización, por medios cromatográficos o por métodos químicos. Los métodos químicos incluyen 5 someter la mezcla de diastereoisómeros a condiciones de lactonización, seguido por separación cromatográfica de la lactona resultante y del remanente isómero de diol. El método preferido de lactonización implica calentar la mezcla de diastereoisómeros de fórmula IV en tolueno a reflujo en la presencia de ácido p- toluenosulfónico o Amberlyst® 15 durante un período de tiempo de 10 aproximadamente 20 horas, usando un colector de Dean-Stark cargado con tamices de 4 Angstróm. Los compuestos de fórmula V, en la que PG1 es metilo, etilo o bencilo, se preparan a partir de compuestos de fórmula VI por reacción con compuestos de la fórmula QS02CI. Preferiblemente, la reacción antes 15 mencionada se lleva a cabo en el seno de un disolvente apropiado tal como diclorometano, tetrahidrofurano o N,N-dimetil-formamida. Las bases apropiadas incluyen trietilamina y N,N-diisopropil-etilamina. Se prefiere el uso de diclorometano como disolvente y de N,N-diisopropil-et¡lamina como la base en la presencia de una cantidad catalítica de 4-(dimetilamino)piridina. La mezcla de 20 reacción se agita a una temperatura entre aproximadamente 0°C y aproximadamente 35°C, preferiblemente a alrededor de 23°C, durante un período de tiempo comprendido entre aproximadamente 2 horas y aproximadamente 1 día, preferiblemente de alrededor de 12 horas. Los ^^A »»A . », ^. _ v ~&..*I*A &**. «fa.^„ . „>., -*.. Ada*,,,.. vA-AA-a, .... ,..- ?^,,.M?,„. . „ „. ,.^..«^4»..^, compuestos de fórmula VI, en la que PG1 es metilo, etilo o bencilo, son conocidos en la bibliografía (Park, K.-H.; Olmstead, M.M.; Kurth, M. J. J. Org. Chem. 1998, 63, 113-117, véase también Kotha, S.; Sreenivasachary, N. Bioorg. Med. Chem. Lett. 1998, 8, 257-260) o se pueden preparar de una manera 5 análoga. Los compuestos de la fórmula QS02CI son conocidos y se pueden preparar de acuerdo con métodos descritos en la publicación de patente PCT WO 98/07697, publicada el 26 de Febrero de 1998, o en la publicación PCT WO 98/33768, publicada el 6 de Agosto de 1998, están comercialmente disponibles, o se pueden preparar por métodos bien conocidos por los que poseen experiencia ordinaria en la técnica. El Esquema 2 se refiere a la preparación de compuestos de fórmula I, en la que Z es >CH2 Refiriéndose al Esquema 2, un compuesto de la fórmula I se prepara a partir de un compuesto de la fórmula Vil por oxidación del azufre. Oxidantes apropiados incluyen ácido meta-cloroperbenzoico, peróxido de hidrógeno, perborato de sodio u Oxone® (se prefiere el Oxone®). Preferiblemente, la reacción se realiza en el seno de un apropiado disolvente o de una adecuada mezcla de disolventes tal como una mezcla de metanol y agua, una mezcla de dioxano y agua, una mezcla de tetrahidrofurano y agua, cloruro de metileno o cloroformo, preferiblemente una mezcla de metanol y agua. Las temperaturas adecuadas para la antedicha reacción fluctúan entre aproximadamente 0°C y aproximadamente 60°C, preferiblemente la temperatura puede fluctuar entre aproximadamente 20°C y aproximadamente 25°C (es decir, la temperatura ambiente). La reacción está completa en el transcurso de &^^-tó^gg g^^^^^^^^^^^^^^^^^-g j-jg^l^^ aproximadamente 0,5 horas a aproximadamente 24 horas, preferiblemente en alrededor de 16 horas. Los compuestos de la fórmula Vil se preparan a partir de compuestos de las fórmulas VIII como se han descrito en el Esquema 1 para la 5 preparación de compuestos de fórmula I. Los compuestos de fórmula VIII, en la que X es >CO, se pueden preparar a partir de compuestos de fórmula IX por eliminación del grupo protector P, seguida por formación del carbonato cíclico. La eliminación del grupo protector preferido, P igual a >Cme2, se consigue mediante una reacción de hidrólisis.

Preferiblemente, esta hidrólisis se realiza con ácido clorhídrico acuoso en el seno de una mezcla de tetrahidrofurano y agua a una temperatura de aproximadamente 23°C. La formación del carbonato cíclico se realiza tal como se ha descrito en la preparación 1. Los compuestos de la fórmula VIII en la que X es >CR3R4 se pueden preparar a partir de compuestos de la fórmula IX por métodos análogos a los métodos del Esquema 1 para la conversión de compuestos de fórmula IV en compuestos de la fórmula lll. Los compuestos de la fórmula IX, en la que P es CH2, son compuestos de fórmula VIII, en la que X es CH2, y por lo tanto se pueden convertir directamente en compuestos de fórmula Vil como se han descrito anteriormente. 20 Los compuestos de la fórmula IX se pueden preparar a partir de compuestos de la fórmula X por reacción con un compuesto de la fórmula QSH, en la que Q es como antes se ha definido, en la presencia de una base fuerte en el seno de un disolvente polar aprótico. Bases apropiadas incluyen hidruro de sodio, diisopropil-amiduro de litio, t-butóxido de potasio, amiduro de sodio o hidruro de potasio, preferiblemente hidruro de sodio. Los disolventes apropiados incluyen éteres (tales como THF, dietil-éter o 1 ,2-dimetoxi-etano) o N,N-dimetil- formamida, preferiblemente el disolvente es THF. La reacción antes mencionada se realiza a temperaturas de aproximadamente -78°C a aproximadamente 0°C, preferiblemente a alrededor de 22°C durante un período de tiempo de 30 minutos a aproximadamente 24 horas, preferiblemente durante alrededor de 2 horas. Los compuestos de la fórmula X se preparan a partir de compuestos de la fórmula XI por deshidratación en la presencia de una base de amina terciaria, preferiblemente trietilamina, opcionalmente en la presencia de 4-(dimetilamino)-piridina, y de un agente deshidratante en el seno de un disolvente inerte. Apropiados agentes deshidratantes incluyen anhídrido trifluorometanosulfónico, anhídrido metanosulfónico, cloruro de metanosulfonilo, cloruro de p-toluenosulfonilo o cloruro de bencenosulfonilo, preferiblemente cloruro de bencenosulfonilo. Los disolventes apropiados incluyen dietil-éter o diclorometano. La reacción se realiza a una temperatura entre aproximadamente -80°C y aproximadamente 0°C, preferiblemente alrededor de 0°C. La reacción se lleva a cabo durante alrededor de 10 minutos a 4 horas, preferiblemente durante alrededor de 1 hora. Los compuestos de la fórmula XI se preparan a partir de un compuesto de fórmula XII, en la que PG2 es metilo o etilo, por saponificación con una base, tal como hidróxido de litio, en el seno de una mezcla de disolventes.

Apropiadas mezclas de disolventes incluyen las de agua y metanol o de agua, metanol y THF. La reacción se realiza a una temperatura entre aproximadamente 60°C y aproximadamente 120°C, preferiblemente a alrededor de la temperatura de reflujo de la mezcla de disolventes que se usa. La reacción se lleva a cabo durante alrededor de 30 minutos a 24 horas, preferiblemente durante alrededor de 16 horas. Los compuestos de fórmula XII se preparan a partir de compuestos de fórmula XIII por una reacción de reducción. En general, una solución de un compuesto de fórmula XIII se disuelve en un disolvente aromático inerte, preferiblemente benceno o tolueno, y se enfría a aproximadamente -40°C hasta -20°C, preferiblemente a alrededor de -40°C. A la solución fría se le añade un agente reductor impedido apropiado, preferiblemente hidruro de diisobutilaluminio, en el seno de un disolvente aromático inerte, manteniendo la temperatura por debajo de -25°C. Después de que está completa la adición, la reacción se mantiene por debajo de 0°C durante alrededor de 3 horas. A alrededor de -15°C, se añade un disolvente prótico, preferiblemente etanol. Después de haber agitado alrededor de -15°C durante alrededor de 1 hora, se añade borohidruro de sodio y se deja que la mezcla de reacción se caliente hasta aproximadamente la temperatura ambiente mientras que se agita durante un período de tiempo de 2 a 24 horas, preferiblemente durante alrededor de 16 horas. Los compuestos de fórmula XII producidos de esta manera se obtienen como una mezcla de diastereoisómeros y se pueden separar por cristalización, cromatografía o métodos químicos.

Los compuestos de fórmula XIII, en la que P es un grupo protector del tipo de un diol, se preparan a partir de compuestos de fórmula XIV por reacción con un agente apropiado para grupo protector. Agentes apropiados para grupos protectores incluyen dimetoximetano, dimetoxipropano, benzaldehído y 2-metoxi-propeno. El método preferido para preparar compuestos de fórmula XIII, en la que P es CH2> consiste en hacer reaccionar compuestos de fórmula XIV con dimetoximetano en la presencia de un ácido fuerte tal como ácido p-toluenosulfónico, ácido canfosulfónico o Amberlyst® 15 (se prefiere el Amberlyst® 15). Preferiblemente, esta reacción de metilenación se realiza en el seno de un disolvente tal como benceno o diclorometano (se prefiere diclorometano) a una temperatura comprendida entre 23°C y el punto de ebullición de la mezcla de disolventes (preferiblemente 40°C) durante un período de alrededor de 2 horas hasta alrededor de 24 horas, preferiblemente alrededor de 17 horas. Preferiblemente, la reacción antedicha se realiza con el uso de un colector de Dean-Stark cargado con tamices de 4 Angstrom. El preferido grupo protector P, (cuando P no es CH2, es la acetonida o isopropiliden-cetal (P es >Cme2 en la fórmula XIII). El método preferido de preparar compuestos de fórmula XIII, en la que P es >Cme2, se realiza por reacción de compuestos de fórmula XIV con 2-metoxi-propeno y ácido p-toluenosulfónico. Preferiblemente, la reacción antedicha se realiza en el seno de un disolvente tal como benceno, tolueno o diclorometano (se prefiere el diclorometano), durante un período de tiempo comprendido entre aproximadamente 30 minutos y aproximadamente 24 horas, a una temperatura comprendida entre aproximadamente 0°C y . ?Á*¿x ~„ .J*>&?»?¿* ^ . .^¿ Jtt?* , .^ -^ ..,. • .^ aproximadamente 35°C (se prefieren los aproximadamente 23°C). Los compuestos de fórmula XIV, en la que PG2 es etilo o metilo, se preparan a partir de compuestos de la fórmula XV por una reacción de bis-hidroxilación. Preferiblemente, la reacción de bis-hidroxilación se realiza usando tetróxido de osmio en el seno de un apropiado disolvente o de una adecuada mezcla de disolventes tal como piridina, una mezcla de acetona y agua o una mezcla de tetrahidrofurano y agua. Se prefiere el uso de una cantidad catalítica de tetróxido de osmio y de una cantidad estequiométrica de un oxidante conjunto tal como N-óxido de 4-metil-morfolina o N-óxido de trimetil-amina en el seno de una mezcla de tetrahidrofurano y agua. La reacción antedicha se realiza a una temperatura comprendida entre aproximadamente 0°C y 23°C, preferiblemente a 23°C, durante un período de tiempo desde alrededor de 1 hora hasta alrededor de 8 horas (se prefieren las 2 horas). Los compuestos de fórmula XV están disponibles comercialmente (Frinton Labs, Apartado de Correos 2428, Vineland, NJ, 08360), o son conocidos en la bibliografía (Depres, J.-P.; Greene, A. E. J. Org. Chem. 1984, 49, 928-931 ; Chang, S.; Jones II, L.; Chunming, W., Lawrence, H.M.; Grubbs, R.H. Organometallics 1998, 3.460-3.465; Nugent, W. A.; Feldman, J.; Calabrese, J. C. J. Am. Chem. Soc. 1995, 117, 8.992-8.998). Los compuestos de la fórmula QSH se pueden preparar por reacción de un haluro de alquilo o arilo con sulfhidruro de sodio como se describe en la obra de Jerry March, Advanced Qrqanic Chemístry, páginas 360 y 589 (3a edición, 1985). Alternativamente, los compuestos de la fórmula QSH ^¡*^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^ ^^^^^^ ^^^^b^^i^^^^^^^^^^^^^^^^^^¡¿^í^ se pueden preparar también por reacción de una sal de aril-diazonio con sulfhidruro de sodio como se ha descrito en la cita de March ibid. en la página 601. Alternativamente, los compuestos de la fórmula QSH se pueden preparar también por reacción de un reactivo de Grignard con azufre como se ha descrito en March ibjd. en la página 550. Alternativamente, los compuestos de la fórmula QSH se pueden preparar por reducción de un cloruro de sulfonilo, ácido sulfónico o disulfuro como se describe en March ibid. en las páginas 1.107 y 1.110. El Esquema 3 se refiere a la preparación de compuestos de la fórmula I, en la que Z es NR1 y R1 es alquilo (d-C6), aril (C6-C?0)-alquilo (d-C6), heteroaril (C2-C9)-alquilo (d-C6) o un grupo de la fórmula -(CH2)nC02R2, en la que n es 1 , 3, 4, 5 ó 6 y R2 es alquilo (d-C6). Refiriéndose al Esquema 3, los compuestos de la fórmula I, en la que X es CH2 y Z es NR1 y R1 es alquilo (d-C6), aril (C6-d0)-alquilo (d-C6), heteroaril (C2-C9)-alquilo (d-C6) o un grupo de la fórmula -(CH2)nC02R2, en la que n es 1 , 3, 4, 5 ó 6 y R2 es alquilo (CrC6), se preparan a partir de compuestos de la fórmula XVI como se ha descrito en el Esquema 1 para la preparación de compuestos de fórmula I a partir de compuestos de la fórmula II. El compuesto de fórmula XVI se prepara a partir de un compuesto de la fórmula XVII por eliminación del grupo protector bencilo. Específicamente, el grupo protector bencilo se elimina por hidrogenolisis usando paladio o paladio sobre carbón en el seno de un disolvente tal como metanol o etanol, durante un período de tiempo entre aproximadamente 30 minutos y aproximadamente 48 horas, preferiblemente durante 16 horas, a una temperatura de -^¡¡¡ ^ aproximadamente 20°C a aproximadamente 25°C (es decir, la temperatura ambiente). El compuesto de fórmula XVII se prepara a partir de un compuesto de la fórmula lll, en la que PG1 es bencilo, por reacción con un derivado reactivo 5 de un alcohol de la fórmula R1OH tal como el derivado de metanosulfonato, tosilato, cloro, bromo o yodo, preferiblemente el derivado de yodo, en la presencia de una base tal como carbonato de potasio o hidruro de sodio, preferiblemente hidruro de sodio, y de un disolvente polar, tal como N,N-dimetil- formamida. La mezcla de reacción se agita a la temperatura ambiente durante 10 un período de tiempo entre alrededor de 60 minutos y alrededor de 48 horas, preferiblemente durante alrededor de 16 horas. Los compuestos de fórmula lll, en la que PG1 es bencilo, se preparan de acuerdo con los métodos del Esquema 1. El Esquema 4 se refiere a la preparación de compuestos de 15 fórmula I, en la que X = CH2, Z es >NR1, R1 es un grupo de fórmula - (CH2)2C02R2 (es decir, n es 2) y R2 es alquilo (d-C6). Refiriéndose al Esquema 4, los compuestos de dicha fórmula I se preparan a partir de compuestos de la fórmula XVIII, en la que R2 es alquilo (d- C6), por reacción con cloruro de oxalilo o cloruro de tionilo, preferiblemente 20 cloruro de oxalilo, y un catalizador, preferiblemente alrededor de 2% de N,N- dimetil-formamida, en el seno de un disolvente inerte, tal como cloruro de metileno, para formar un cloruro de ácido in situ que subsiguientemente se hace reaccionar con O-trimetil-silil-hidroxilamina en la presencia de una base, tal como piridina, 4-N,N-dimetilamino-piridina o trietilamina, preferiblemente piridina. La reacción se realiza a una temperatura de alrededor de 22°C (es decir, la temperatura ambiente) durante alrededor de 1 a alrededor de 12 horas, preferiblemente durante alrededor de 1 hora. Los compuestos de la fórmula XVIII, en la que R2 es alquilo (CrC6), se pueden preparar a partir de compuestos de la fórmula XIX, en la que R2 es alquilo (CrC6), por reducción en el seno de un disolvente polar. Agentes reductores apropiados incluyen hidrógeno por encima de paladio e hidrógeno por encima de paladio sobre carbono, preferiblemente hidrógeno por encima de paladio sobre carbono. Los disolventes apropiados incluyen metanol, etanol e isopropanol, preferiblemente etanol. La reacción antedicha se realiza a una temperatura de aproximadamente 22°C (es decir, la temperatura ambiente) durante un período de tiempo de aproximadamente 1 hora a aproximadamente 7 días, preferiblemente durante alrededor de 2 días. Los compuestos de la fórmula XIX, en la que R2 es alquilo (d-C6), se pueden preparar a partir de compuestos de la fórmula lll, en la que PG1 es bencilo, mediante una reacción por adición de Michael con un éster propiolato en la presencia de una base en el seno de un disolvente polar. Los apropiados propiolatos tienen la fórmula H-C=C-C02R2, en la que R2 es alquilo (C?-C6). Las bases apropiadas incluyen fluoruro de tetrabutil-amonio, carbonato de potasio y carbonato de cesio, preferiblemente fluoruro de tetrabutil-amonio. Los disolventes apropiados incluyen tetrahidrofurano, acetonitrilo, terc.-butanol y N,N-dimetil-formamida, preferiblemente tetrahidrofurano. La reacción antedicha se ¡jj^ij^^ aÉ| ^Ma?a| ¡|||a¡a|M!| j||aMM| realiza a una temperatura de aproximadamente -10°C a aproximadamente 60°C, que fluctúa preferiblemente entre 0°C y alrededor de 22°C (es decir, la temperatura ambiente). Los compuestos de fórmula XIX se obtienen como mezclas de isómeros geométricos en torno al doble enlace olefínico; no es necesaria la separación de los isómeros. Los compuestos de la fórmula lll, en la que PG1 es bencilo, se pueden preparar de acuerdo con los métodos del Esquema 1. Los compuestos de dicha fórmula I, en la que X es CH2, Z es >NR1, R1 es un grupo de la fórmula -(CH2)nC02R2, n es de 1 a 6 y R2 es hidrógeno, se preparan a partir de compuestos de fórmula I, en la que Z es >NR1 , R1 es un grupo de la fórmula -(CH2)nC02R2 n es de 1 a 6 y R2 es alquilo (CrC6), por saponificación usando una base tal como hidróxido de sodio en el seno de un disolvente prótico tal como etanol, metanol o agua, o una mezcla tal como la de agua y etanol, la de agua y tolueno o la de agua y THF. El sistema preferido de disolventes es agua y etanol. La reacción se realiza durante un período de tiempo de 30 minutos a 24 horas, preferiblemente durante alrededor de 2 horas. Los compuestos de la fórmula I que son de naturaleza básica son capaces de formar una amplia diversidad de diferentes sales con diversos ácidos inorgánicos y orgánicos. Aunque dichas sales deben de ser farmacéuticamente aceptables para su administración a animales, con frecuencia en deseable en la práctica aislar ¡nicialmente un compuesto de la fórmula I a partir de la mezcla de reacción como una sal farmacéuticamente inaceptable y luego simplemente convertir esta última de vuelta en el compuesto de base libre por tratamiento con un reactivo alcalino, y subsiguientemente convertir la base libre en una sal por adición de ácido farmacéuticamente aceptable. Las sales por adición de ácidos de los compuestos de carácter básico de esta invención se preparan con facilidad tratando el compuesto de carácter básico con una cantidad 5 sustancialmente equivalente del ácido inorgánico u orgánico escogido en el seno de un medio disolvente acuoso o en un disolvente orgánico apropiado tal como metanol o etanol. Después de cuidadosa evaporación del disolvente, se obtiene la deseada sal sólida. Los ácidos que se usan para preparar las sales por adición de 10 ácidos farmacéuticamente aceptables de los compuestos de carácter básico de esta invención son los que forman sales por adición de ácidos no tóxicas, es decir, sales que contienen aniones farmacológicamente aceptables, tales como las sales hidrocloruro, hidrobromuro, hidroyoduro, nitrato, sulfato o bisulfato, fosfato o fosfato ácido, acetato, lactato, citrato o citrato ácido, tartrato o bitartrato, 15 succinato, maleato, fumarato, gluconato, sacarato, benzoato, metanosulfonato y pamoato [es decir, 1 ,1'-metilen-bis-(2-hidroxi-3-naftoato)]. Los compuestos de la fórmula I que son también de naturaleza acida, son capaces de formar sales de bases con diversos cationes farmacológicamente aceptables. Ejemplos de dichas sales incluyen las sales de 20 metales alcalinos o metales alcalino-térreos y particularmente las sales de sodio y potasio. Estas sales se preparan todas ellas por técnicas convencionales. Las bases químicas que se usan como reactivos para preparar las sales de bases farmacéuticamente aceptables de esta invención son las que forman sales de , S-&& -v.¿*« -^ -.^ ^^-*^^£*i&3& &^^ ^ 3i*.- ^- ?. <* - ^ | *fe ^í ^f^ß^Sm^^^^^^^^^^^^^^^^.^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^ bases no tóxicas con los compuestos de carácter ácido de fórmula I que aquí se describen. Estas sales de bases no tóxicas incluyen las que se derivan de cationes farmacológicamente aceptables tales como sodio, potasio, calcio y magnesio, etc. Estas sales se pueden preparar con facilidad tratando los correspondientes compuestos de carácter ácido con una solución acuosa que contiene los deseados cationes farmacológicamente aceptables, y luego evaporando la solución resultante hasta sequedad, preferiblemente bajo presión reducida. Alternativamente, éstas se pueden preparar también mezclando conjuntamente soluciones alcanólicas inferiores de los compuestos de carácter ácido y el deseado alcóxido de metal alcalino, y luego evaporando la solución resultante hasta sequedad de la misma manera que anteriormente. En cualquiera de los casos, se emplean preferiblemente cantidades estequiométricas de los reactivos con el fin de asegurar la compleción de la reacción y máximos rendimientos de los productos. La capacidad de los compuestos de fórmula I o de sus sales farmacéuticamente aceptables (que en lo sucesivo se citan también como los compuestos de la presente invención) para inhibir metalo-proteinasas o reprolisina de mamífero y, consiguientemente, demostrar su eficacia para tratar enfermedades caracterizadas por metalo-proteinasa o la producción de factor de necrosis de tumores, se muestra por los siguientes ensayos de análisis in vitro.

Análisis biológico Inhibición de una colaqenasa humana (MMP-1 ) Una colagenasa recombinante humana se activa con tripsina. La cantidad de tripsina se optimiza para cada lote de colagenasa-1 , pero una reacción típica usa la siguiente relación: 5 µg de tripsina por 100 µg de colagenasa. La tripsina y la colagenasa se incuban a la temperatura ambiente durante 10 minutos y luego se añade un exceso quíntuple (de cinco veces) (50 mg/10 mg de tripsina) del inhibidor de tripsina de soja. Soluciones de reserva (10 mM) de inhibidores se preparan en dimetil-sulfóxido y luego se diluyen usando el siguiente esquema: 10 mM > 120 µM > 12 µM > 1 ,2 µM > 0,12 µM Luego se añaden veinticinco microlitros de cada una de las concentraciones en triplicado a apropiados pocilios de una placa de Microfluor de 96 pocilios. La concentración final del inhibidor será una dilución a 1 :4 después de la adición de la enzima y del substrato. Testigos positivos (enzima, sin inhibidor) se disponen en los pocilios D7-D12 y testigos negativos (ninguna enzima, ningún inhibidor) se disponen en los pocilios D1-D6. La colagenasa-1 es diluida a 240 ng/ml y luego se añaden 25 ml a apropiados pocilios de la placa de Microfluor. La concentración final de colagenasa en el análisis es de 60 ng/ml. El substrato (DNP-Pro-Cha-Gly-Cys(Me)-His-Ala-Lys(NMA)-NH2) se constituye como una reserva 5 mM en dimetil-sulfóxido y luego se diluye a 20 µM en un tampón para análisis. El análisis se inicia por la adición de 50 ml de ?¿Mg¿?&á e&lbs 2 j^a^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^g^^^^^ substrato por pocilio de la placa de Microffuor para dar una concentración final de 10 mM. Las lecturas de fluorescencia (excitación a 360 nM, emisión a 460 nm) se toman en el momento 0 y luego a intervalos de 20 minutos. El análisis se realiza a la temperatura ambiente con un tiempo típico de análisis de 3 horas. Luego se representa gráficamente la fluorescencia en función del tiempo tanto para la muestra en vacío como para las muestras que contienen colagenasa (se promedian los datos procedentes de determinaciones en triplicado). Un momento que proporciona una buena señal (al menos cinco veces mayor con respecto a la de vacío) y que está en una parte lineal de la curva (usualmente en alrededor de 120 minutos) se escoge para determinar los valores de IC50 El momento cero se usa como un valor en vacío para cada compuesto en cada concentración y estos valores se restan de los datos obtenidos a los 120 minutos. Los datos se representan gráficamente como la concentración del inhibidor en función de % del testigo (fluorescencia del inhibidor dividido por fluorescencia de colagenasa a solas x 100). Las IC50 se determinan a partir de la concentración de inhibidor que da una señal que es 50% de la del testigo. Si se informa que las IC50 son menores que 0,03 mM, entonces los inhibidores se analizan en concentraciones de 0,3 mM, 0,03 mM y 0,003 mM.

Inhibición de qelatinasa (MMP-2) La gelatinasa de 72 kD recombinante humana (MMP-2, gelatinasa A) se activa durante 16-18 horas con acetato p-aminofenil-mercúrico 1 mM (a „^ ^ __¿„^_..^^ ^ „„ ..^ ^. . ?S?^.^Á^?^A.. partir de una reserva 100 mM recientemente preparada en NaOH 0,2 N) a 4°C, oscilando suavemente. Soluciones originales en dimetil-sulfóxido 10 mM de inhibidores se diluyen en serie en el tampón para análisis (TRIS 50 mM, de pH 7,5, NaCI 200 mM, CaCI25 mM, ZnCI2 20 µM y BRIJ-35 al 0,02% (vol./vol.)) usando el siguiente esquema: 10 mM — > 120 µM > 12 µM > 1 ,2 µM > 0,12 µM Diluciones adicionales se hacen cuando sea necesario siguiendo este mismo esquema. Se tratan en cada análisis un mínimo de cuatro concentraciones del inhibidor para cada compuesto. Luego se añaden 25 µl de cada una de las concentraciones a pocilios en triplicado de una placa de Microfluor con fondo en U de 96 pocilios de color negro. Como el volumen final de análisis es 100 µl, las concentraciones finales de inhibidor son el resultado de una dilución a 1 :4 adicional (es decir, 30 µM — > 3 µM — > 0,3 µM — > 0,03 µM, etc.). Una muestra en vacío (sin enzima, sin inhibidor) y una muestra testigo positivo con enzima (con enzima, sin inhibidor) se preparan también en triplicado. La enzima activada es diluida a 100 ng/ml en un tampón para análisis; se añaden 25 µl por pocilio a apropiados pocilios de la microplaca. La concentración final de enzima en el análisis es de 25 ng/ml (0,34 nM). Una solución original en dimetil-sulfóxido 5 mM de substrato (Mca- Pro-Leu-Gly-Leu-Dpa-Ala-Arg-NH2) se diluye en un tampón para análisis a 20 µM. El análisis se inicia por la adición de 50 µl de substrato diluido, proporcionando una concentración final de análisis de 10 µM de substrato. En el momento cero, se toma inmediatamente la lectura de fluorescencia (excitación a 320 nm; emisión a 390 nm) y se toman subsiguientes lecturas cada quince minutos a la temperatura ambiente con un lector de placas de pocilios múltiples PerSeptive Biosystems CytoFluor Multi-Well Píate Reader con la ganancia de 90 unidades. El valor medio de la fluorescencia de la enzima y de la muestra en vacío se representan gráficamente en función del tiempo. Un momento temprano en la parte lineal de esta curva se escoge para las determinaciones de IC50. El momento cero para cada compuesto en cada dilución se resta de este último momento y los datos se expresan luego como tantos por ciento del testigo con enzima (fluorescencia del inhibidor dividida por fluorescencia del testigo positivo con enzima x 100). Los datos se representan gráficamente como concentración del inhibidor en función del tanto por ciento de testigo con enzima. Las IC50 se definen como la concentración de inhibidor que da una señal que es 50% del testigo positivo con enzima.

Inhibición de actividad de estromelisina (MMP-3) La estromelisina recombinante humana (MMP-3, estromelisina-1 ) se activa durante 20-22 horas con acetato p-aminofenil-mercúrico 2 mM (a partir de una reserva 100 mM recientemente preparada en NaOH 0,2 N) a 37°C. Soluciones de reserva de inhibidores en dimetil-sulfóxido 10 mM se diluyen en serie en un tampón para análisis (TRIS 50 mM, de pH 7,5, NaCI 150 mM, CaCI2 10 mM y BRIJ-35 al 0,05% (vol./vol.)) usando el siguiente esquema: mM > 120 µM > 12 µM » 1 ,2 µM > 0,12 µM Se hacen diluciones adicionales cuando sea necesario siguiendo este mismo esquema. Se realizan en cada análisis un mínimo de cuatro concentraciones de inhibidores para cada compuesto. Se añaden luego 25 µl de cada concentración a pocilios en triplicado de una placa de Microfluor con fondo en U de 96 pocilios de color negro. Como el volumen final de análisis es de 100 µl, las concentraciones finales del inhibidor son el resultado de una dilución adicional a 1 :4 (es decir, 30 µM — 3 µM — > 0,3 µM > 0,03 µM, etc.). Un testigo en vacío (sin enzima, sin inhibidor) y un testigo positivo con enzima (con enzima, sin inhibidor) se preparan también en triplicado. La enzima activada se diluye a 200 ng/ml en un tampón para análisis, se añaden 25 µl por pocilio a pocilios apropiados de la microplaca. La concentración final de enzima en el análisis es de 50 ng/ml (0,875 nM). Una solución original en dimetil-sulfóxido 10 mM de substrato (Mca-Arg-Pro-Lys-Pro-Val-Glu-Nva-Trp-Arg-Lys(DNP)-NH2) se diluye en un tampón para análisis hasta 6 µM. El análisis se inicia por adición de 50 µl de substrato diluido, proporcionando una concentración final de análisis de substrato 3 µM. En el momento cero, la lectura de fluorescencia (excitación a 320 nm; emisión a 390 nm) se toma inmediatamente y se toman subsiguientes lecturas cada quince minutos a la temperatura ambiente con un lector de microplacas de pocilios múltiples PerSeptive Biosystems CytoFluor Multi-Well Píate Reader con la ganancia de 90 unidades. El valor medio de la fluorescencia de la enzima y de la muestra en vacío se representan gráficamente en función del tiempo. Un momento temprano en la parte lineal de esta curva se escoge para las determinaciones de IC50. El momento cero para cada compuesto en cada dilución se resta del último momento y los datos se expresan luego como tantos por ciento del testigo con enzima (fluorescencia del inhibidor dividida por fluorescencia del testigo positivo con enzima x 100). Los datos se representan gráficamente como concentración del inhibidor en función del tanto por ciento de testigo con enzima.

Inhibición de MMP-13 La MMP-13 recombinante humana se activa con APMA (acetato p-aminofenil-mercúrico) 2 mM durante 2,0 horas, a 37°C, y se diluye a 240 ng/ml en un tampón para análisis (Tris 50 mM, de pH 7,5, cloruro de sodio 200 mM, cloruro de calcio 5 mM, cloruro de zinc 20 mM, BRIJ-35 al 0,02%). Se añaden veinticinco microlitros de enzima diluida por pocilio de una placa de microflúor de 96 pocilios. Luego la enzima se diluye en una relación de 1 :4 en el análisis por la adición de inhibidor y substrato para dar una concentración final en el análisis de 60 ng/ml. Las soluciones de reserva (10 mM) de inhibidores se constituyen en dimetil-sulfóxido y luego se diluyen en el tampón de análisis como para el esquema de dilución de inhibidor para la inhibición de colagenasa humana-1 (MMP-1 ). Se añaden veinticinco microlitros de cada una de las concentraciones en triplicado a la placa de Microfluor. Las concentraciones finales en el análisis son 30 mM, 3 mM, 0,3 |^^^^ ¡¿ mM y O,03 mM. El substrato (DNP-Pro-Cha-Gly-Cys(Me)-His-Ala-Lys(NMA)-NH2) se prepara como para la inhibición de colagenasa humana (MMP-1 ) y se añaden 50 µl a cada uno de los pocilios para dar una concentración final de análisis de 10 µM. Las lecturas de fluorescencia (excitación a 360 nm, emisión a 450 nm) se toman en los momentos 0 y cada 5 minutos durante 1 hora. Los testigos positivos y testigos negativos se disponen en triplicado como se bosqueja en el análisis de MMP-1. Las IC50 se determinan como para la inhibición de colagenasa humana (MMP-1 ). Si se informa que las IC50 son menores que 0,03 mM, se analizan entonces los inhibidores en concentraciones finales de 0,3 mM, 0,03 mM, 0,003 mM y 0,0003 mM.

Inhibición de la producción de TNF La capacidad de los compuestos o de sus sales farmacéuticamente aceptables para inhibir la producción de TNF y, consiguientemente, demostrar su eficacia para tratar enfermedades que implican la producción de TNF, se muestra por el siguiente análisis in vitro. Células mononucleares humanas se aislaron a partir de sangre humana anti-coagulada usando una técnica de separación Ficoll-hypaque de una etapa. (2) Las células mononucleares se lavaron tres veces en solución salina equilibrada de Hanks (HBSS, de Hanks balanced salt solution) con cationes divalentes y se vuelve a suspender hasta una densidad de 2 x 106/ml en un -~<="-"*fra»' -- -«~- -*-^~ 1 lil i 1 rt i M iM .GIÍIM tipr ?á' i r'il r HBSS que contiene 1 % de BSA. Los cómputos diferenciales determinados usando el analizador Abbott Cell Dyn 3500 indicaron que los monocitos fluctuaban entre 17 y 24% de las células totales en esas preparaciones. 180 µl de la suspensión de células se dispusieron en partes 5 alícuotas dentro de placas de 96 pocilios de fondo plano (Costar). Las adiciones de compuestos y LPS (concentración final 100 ng/ml) dieron un volumen final de 200 µl. Todas las condiciones se realizaron en triplicado. Después de una incubación durante cuatro horas a 37°C en un incubador con C02 humidificado, las placas se retiraron y centrifugaron (durante 10 minutos a aproximadamente 10 250 x g) y los materiales sobrenadantes se retiraron y analizaron en cuando a TNFa usando el estuche R&D ELISA Kit.

Inhibición de la producción de TNF-a soluble La capacidad de los compuestos o de sus sales farmacéuticamente 15 aceptables para inhibir la liberación celular de TNF-a y, consiguientemente, demostrar su eficacia para tratar enfermedades que implican la desregulación de TNF-a soluble, se muestra por el siguiente análisis in vitro.

Análisis de monocitos humanos 20 Células mononucleares humanas se aislan a partir de sangre humana anti-coagulada usando una técnica de separación Ficoll-hypaque de una sola etapa. (2) Las células mononucleares se lavan tres veces en una solución salina equilibrada de Hanks (HBSS) con cationes divalentes y se vuelven a suspender hasta una densidad de 2 x 106/ml en un HBSS que contiene 1 % de BSA. Los cómputos diferenciales determinados usando el analizador Abbott Cell Dyn 3500 indicaron que los monocitos fluctuaban entre 17 y 24% de las células totales en estas preparaciones. 5 180 µl de la suspensión de células se dispusieron en partes alícuotas dentro de placas de 96 pocilios de fondo plano (Costar). Las adiciones de compuestos LPS (concentración final 100 ng/ml) dieron un volumen final de 200 µl. Todas las condiciones se realizaron en triplicado. Después de una incubación durante cuatro horas a 37°C en un incubador con C02 humidificado, 10 las placas se retiraron y centrifugaron (durante 10 minutos a aproximadamente 250 x g) y los materiales sobrenadantes se retiraron y analizaron en cuanto a TNF-a usando el estuche R&D ELISA Kit.

Análisis de aqrecanasa 15 Condrocitos porcinos primarios procedentes de un cartílago de junta articular se aislan mediante digestión consecutiva con tripsina y colagenasa, seguida por digestión con colagenasa durante una noche y se siembran a razón de 2 x 105 células por pocilio en placas de 48 pocilios con 5 µCi/ml de 35S (1.000 Ci/mmol) de azufre el placas revestidas con colágeno del 20 tipo I. Las células se dejan incorporar una marca en su matriz de proteoglicano (aproximadamente 1 semana) a 37°C, bajo una atmósfera de 5% de C02. La noche antes de iniciar el análisis, las monocapas de condrocitos se lavan dos veces en DMEM/1% de PSF/G y luego se dejan incubar en DMEM de nueva aportación/1 % de FBS durante una noche. A la mañana siguiente, los condrocitos se lavan una vez en una mezcla de DMEM/1 % de PSF/G. El líquido de lavado final se deja sedimentar sobre las placas en el incubador mientras que se hacen diluciones. Los medios y las diluciones se pueden hacer como se ha descrito en la Tabla siguiente: Las placas se marcan y solamente se usan los 24 pocilios interiores de la placa. En una de las placas, varias columnas se designan como de IL-1 (sin fármaco) y testigo (sin IL-1 , sin fármaco). Estas columnas testigos se recuentan periódicamente para vigilar la liberación de 35S-proteoglicano. Se añaden a pocilios medios testigo y de IL-1 (450 µl) seguidos por el compuesto (50 µl) de ^^g &g- manera que se inicia el análisis. Las placas se incuban a 37°C, con una atmósfera con 5% de C02. Con la liberación de 40-50% (cuando los CPM procedentes de los medios con IL-1 son de 4-5 veces los de los medios testigos) como se comprueba por recuento de la escintilación en líquido (LSC, de liquid scintillation counting) de muestras de medios, el análisis se termina (a las 9-12 horas). Los medios se retiran de todos los pocilios y se colocan en tubos de escintilación. Se añade un agente de escintilación y se adquieren los cómputos radiactivos (LSC). Para solubilizar las capas de células, se añaden a cada pocilio 500 µl de tampón de digestión con papaína (Tris 0,2 M, pH 7,0, EDTA 5 mM, DTT 5 mM y papaína 1 mg/ml). Las placas con solución para digestión se incuban a 60°C durante una noche. La capa de células se retira de las placas al día siguiente y se coloca en tubos para escintilación. Se añade luego el agente de escintilación y las muestras se recuentan (por LSC). Se determina el tanto por ciento de cómputos liberados con respecto del total presente en cada pocilio. Los promedios de los triplicados se hacen con el fondo de testigo restado de cada pocilio. El tanto por ciento de inhibición del compuesto está basado en muestras de IL-1 como inhibición de 0% (100% de los cómputos totales). Todos los compuestos que se ensayaron tenían unas IC50 de menos de 30 nM en al menos uno de los anteriores análisis. Los compuestos preferidos de la invención tenían una IC50 de menos que 10 nM en por lo menos uno de los anteriores análisis. ^^«^^^^^^^t^^^^^^^j^^^^^^^^^^^^^^gtój?»^»^^^^^ Para la administración a mamíferos, inclusive seres humanos, en cuanto la inhibición de metalo-proteinasas de matriz o reprolisina de mamífero, se puede usar una diversidad de vías convencionales, inclusive las orales, parenterales (p.ej., intravenosas, intramusculares o subcutáneas), bucales, 5 anales y tópicas. En general, los compuestos de la invención (en lo sucesivo conocidos también como los compuestos activos) se administrarán en dosificaciones comprendidas entre aproximadamente 0,1 y 25 mg/kg de peso corporal del individuo que se ha de tratar por día, preferiblemente de alrededor de 0,3 a 5 mg/kg. Preferiblemente, el compuesto activo será administrado por vía 10 oral o parenteral. Sin embargo, se producirá alguna variación en la dosificación necesariamente dependiendo de la condición del sujeto que se esté tratando. La persona responsable de la administración determinará, en cualquier caso, la dosis apropiada para el sujeto individual. Los compuestos de la presente invención se pueden administrar 15 en una amplia diversidad de diferentes formas de dosificación, en general, los compuestos terapéuticamente eficaces de esta invención están presentes en tales formas de dosificación a unos niveles de concentración que fluctúan entre aproximadamente 5,0% y aproximadamente 70% en peso. Para la administración por vía oral, se pueden emplear tabletas que 20 contengan diversos excipientes tales como celulosa microcristalina, citrato de sodio, carbonato de sodio, fosfato de dicalcio y glicina junto con diversos desintegrantes tales como almidón (y preferiblemente almidón de maíz, patata o tapioca), ácido algínico y ciertos silicatos complejos, conjuntamente con -*- &-fc «A -—- .. . .^«j^... ^-^. .. .^ ^^—. .. '^M*li*"t- * ******. ^~ k*.. ~.. ~.. ~A. ,I*. .-~*.J ~>..*. - *.~ ~ aglutinantes para granulación tales como poli(vinil-pirrol¡dona), sacarosa, gelatina y goma arábiga. Adicionalmente, agentes lubricantes tales como estearato de magnesio, lauril-sulfato de sodio y talco son muy útiles para finalidades de comprimir tabletas. Las composiciones sólidas de un tipo similar se pueden emplear también como materiales de carga o relleno en cápsulas de gelatina; materiales preferidos a este respecto incluyen también lactosa o azúcar de leche así como también polietilen-glicoles de alto peso molecular. Cuando se desean suspensiones acuosas y/o elixires para administración por vía oral, el ingrediente activo se puede combinar con diversos agentes edulcorantes o saboreantes, material colorante o tintes y, si así se desea, agentes emulsionantes y/o suspendedores también, junto con diluyentes tales como agua, etanol, propilenglicol, glicerol y diversas combinaciones similares de ellos. En el caso de animales, estos están contenidos ventajosamente en un pienso para animales o agua para beber en una concentración de 5-5.000 ppm, preferiblemente de 25 a 500 ppm. Para administración por vía parenteral (uso intramuscular, intraperitoneal, subcutáneo e intravenoso) se prepara usualmente una solución inyectable estéril del ingrediente activo. Se pueden emplear soluciones de un compuesto terapéutico de la presente invención en aceite de sésamo o cacahuete o en propilen-glicol acuoso. Las soluciones acuosas deberán ser ajustadas y tamponadas apropiadamente, preferiblemente a un pH mayor que 8, si es necesario, y el diluyente líquido deberá ser primeramente hecho isotónico. Estas soluciones acuosas son apropiadas para finalidades de inyección intravenosa. Las soluciones oleosas son apropiadas para finalidades de inyección intraarticular, intramuscular y subcutánea. La preparación de todas estas soluciones en condiciones estériles se consigue con facilidad por medidas técnicas farmacéuticas clásicas bien conocidas por los expertos en la técnica. En el caso de animales, los compuestos se pueden administrar por vía intramuscular o subcutánea en niveles de dosificación de aproximadamente 0,1 a 50 mg/kg/día, ventajosamente de 0,2 a 10 mg/kg/día administradas en una única dosis o hasta en 3 dosis divididas. Los compuestos activos de la invención se pueden formular también en composiciones para vía rectal tales como supositorios o enemas de retención, p.ej., que contienen bases convencionales para supositorios tales como manteca de cacao u otros glicéridos. Para administración por vía ¡ntranasal o administración por inhalación, los compuestos activos de la invención se suministran convenientemente en la forma de una solución o suspensión procedente de un recipiente de proyección con bomba que es exprimido o bombeado por el paciente o como una presentación de proyección por aerosol procedente de un recipiente puesto a presión o un nebulizador, con el uso de un agente propulsor apropiado, p.ej., dicloro-difluoro-metano, tricloro-fluoro-metano, dicloro- tetrafluoro-etano, dióxido de carbono u otro gas apropiado. En el caso de un aerosol puesto a presión, la unidad de dosificación se puede determinar proporcionando una válvula para suministrar una cantidad medida. El recipiente puesto a presión o el nebulizador puede contener una solución o suspensión del compuesto activo. Las cápsulas y cartuchos (que se hacen, por ejemplo, de gelatina) para usarse en un ¡nhalador o insuflador se pueden formular conteniendo una mezcla de polvos de un compuesto de la invención y una base apropiada para polvos tal como lactosa o almidón. Los siguientes Ejemplos ¡lustran la preparación de los compuestos de la presente invención. Los puntos de fusión están sin corregir. Los datos de NMR (resonancia magnética nuclear) se informan en partes por millón (d) y se establecen como referencia a una señal de bloqueo con deuterio procedente del mismo disolvente (deuterio-cloroformo a menos que se especifique otra cosa distinta). Los reactivos comerciales se usaron sin purificación adicional. El THF se refiere a tetrahidrofurano. El DMF se refiere a N,N-dimetil-formamida. La cromatografía se refiere a una cromatografía en columna realizada usando gel de sílice de 32-63 mm y ejecutada bajo condiciones de presión de nitrógeno (cromatografía de resolución rápida). La temperatura de la habitación o ambiente se refiere a 20-25°C. Todas las reacciones no acuosas se realizaron bajo una atmósfera de nitrógeno por razones de conveniencia y para hacer máximos los rendimientos. La concentración a presión reducida significa que se usó un evaporador rotatorio.

EJEMPLO 1 r3aR-(3aß,5a,6aß1-Hidroxiamida de ácido 5-r4-(4-fluoro-fenoxi)- bencenosulfonilaminol-tetrahidro-ciclopentari,31dioxol-5-carboxílico A) Ester etílico de ácido 1-[4-(4-fluoro-fenox¡)- bencenosulfonilaminol-ciclopent-3-eno-carboxílico A una solución fría (a 0°C) y agitada del éster etílico de ácido 1- amino-ciclopent-3-eno-1 -carboxílico (7,0 g, 45,1 mmol) (Park, K.-H.; Olmstead, M.M.; Kurth, M.J. J. Org. Chem. 1998, 63, 113-117, véase también Kotha, S.; Sreenivasachary, N. Bioorg. Med. Chem. Lett. 1998, 8, 257-260) en 150 ml de diclorometano se le añadió N,N-diisopropil-etilamina (9,4 ml, 54,1 mmol). Se añadió cloruro de 4-(4-fluorofenoxi)-bencenosulfonilo en una porción seguida por una cantidad catalítica (45 mg) de 4-(dimetilamino)p¡r¡d¡na. El baño de hielo se retiró y la mezcla se agitó durante 48 horas a 23°C bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla se concentró en vacío, se diluyó con bicarbonato de sodio acuoso, y se extrajo con acetato de etilo (2x =2 veces). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con bicarbonato de sodio acuoso (2x), con ácido clorhídrico acuoso diluido (2x), con agua (2x), con salmuera (1x), se secaron (sobre sulfato de magnesio), se filtraron y el material filtrado se concentró para dar aproximadamente 17 g de un aceite de color pardo. Este aceite se purificó por cromatografía de resolución rápida, eluyendo con mezclas 3:1 de hexanos y acetato de etilo para proporcionar 9,9 g (54%) del éster etílico de ácido 1-[4-(4- fluoro-fenoxi)-bencenosulfonilamino]-ciclopent-3-eno-carboxílico como un aceite 5 de color amarillo.

B) Ester etílico de ácido 1-[4-(4-fluoro-fenox¡)- bencenosulfonilaminol-3,4-dihidroxi-ciclopentano-carboxílico A una mezcla enérgicamente agitada de ester etílico de ácido 1-[4- 10 (4-fluoro-fenoxi)-bencenosulfonilamino]-ciclopent-3-eno-carboxílico (6,3 g, 15,5 mmol) y N-óxido de 4-metil-morfolina (3,8 g, 32,6 mmol) en 33 ml de tetrahidrofurano y 11 ml de agua se le añadió una solución de tetróxido de osmio (0,196 M en tetrahidrofurano, 2,0 ml, 0,39 mmol) a 23°C bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla se agitó durante 2 h, se diluyó con bisulfito de sodio acuoso, y se agitó durante 2 minutos adicionales. La mezcla se filtró a través de un taco de algodón y se extrajo con acetato de etilo (3x). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con bisulfito de sodio acuoso (2x), agua (2x), salmuera (1x), se secaron (sobre sulfato de sodio), se filtraron y el material filtrado se concentró para dar un aceite de color amarillo. Este aceite se purificó por cromatografía de resolución rápida, eluyendo con una mezcla 28:72 de hexanos y acetato de etilo para proporcionar 5,65 g (82%) del éster etílico de ácido 1-[4- (4-fluoro-fenoxi)-bencenosulfonilam¡no]-3,4-dih¡droxi-c¡clopentano-carboxílico como una espuma de color blanco (relación diastereoisomérica de dioles aproximadamente 1 ,3:1 ; 1H-NMR dmso-d6).

C) Una solución agitada de éster etílico de ácido 1-[4-(4-fluoro- fenoxi)-bencenosulfonilamino]-3,4-dihidroxi-ciclopentano-carboxílico (mezcla de diastereoisómeros; 5,6 g, 12,8 mmol) y ácido p-toluenosulfónico monohidratado (100 mg) en 100 ml de benceno y 50 ml de tetrahidrofurano se calentó a reflujo bajo una atmósfera de nitrógeno (se interpuso entre el recipiente de reacción y el condensador de reflujo un colector Dean-Stark cargado con tamices moleculares de 4 Angstróm). Después de 2 horas se añadió una cantidad adicional de 300 mg de ácido p-toluenosulfónico monohidratado. Después de un período de tiempo adicional de 4 horas la mezcla se concentró en vacío (para eliminar el tetrahidrofurano). El residuo se recogió en 150 ml de benceno; se añadió una cantidad adicional de 400 mg de ácido p-toluenosulfónico monohidratado y la mezcla se calentó a reflujo durante 17 horas. La mezcla se enfrió a 23°C, se diluyó con bicarbonato de sodio acuoso, y se extrajo con acetato de etilo (3x). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con bicarbonato de sodio acuoso (2x), con agua (1x), con salmuera (1x), se secaron (sobre sulfato de sodio), se filtraron y el material filtrado se concentró para dar un aceite de color amarillo. Este aceite se purificó por cromatografía de resolución rápida eluyendo con una mezcla 35:65 de hexanos y acetato de etilo para proporcionar después de una segunda purificación de las fracciones mixtas 1 ,8 g (36%) de la lactona y 1 ,18 gramos (21%) del diol [1a,3aR,4aS]-éster etílico de ácido 1 -[4-(4-fluoro-fenoxi)-bencenosulfonilamino]-3,4-dihidroxi-ciclopentano- carboxílico.

D) [3aR-(3aß,5a,6aß1-Ester etílico de ácido 5-f4-(4-fluoro-fenox¡)-bencenosulfon¡lam¡nol-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3ld¡oxol-5-carboxíl¡co Una mezcla agitada de [1a,3aR,4aS]-éster etílico de ácido 1-[4-(4-fluoro-fenoxi)-bencenosulfonilamino]-3,4-dihidroxi-ciclopentano-carboxílico (600 mg, 1 ,37 mmol), Amberlyst-15® (136 mg) y dimetoximetano (0,6 ml, 6,83 mmol) en 27 ml de diclorometano se calentó a reflujo durante 4 horas bajo una atmósfera de nitrógeno (se había interpuesto entre el recipiente de reacción y el condensador de reflujo un colector de Dean-Stark cargado con tamices moleculares de 4 Angstróm). La mezcla se enfrió a 23°C, se filtró, se concentró en vacío y el residuo transparente se purificó por cromatografía de resolución rápida (elución con una mezcla 55:45 de hexanos y acetato de etilo) para proporcionar 500 mg (81 %) de [3aR-(3aß,5a,6aß]-éster etílico de ácido 5-[4-(4-fluoro-fenoxi)-bencenosulfonilamino]-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico como una espuma de color blanco. Alternativamente, una solución agitada de la mezcla de dioles diastereoisómeros del éster etílico de ácido 1-[4-(4-fluoro-fenoxi)-bencenosulfonilamino]-3,4-dihidroxi-ciclopentano-carboxílico (2,1 g, 4,78 mmol), dimetoximetano (2,1 ml, 23,89 mmol) y una cantidad catalítica (50 mg) de ácido p-toluenosulfónico monohidratado en 15 ml de diclorometano se calentó a 40°C durante 20 horas bajo una atmósfera de nitrógeno. Se añadió una cantidad adicional de 50 mg de ácido p-toluenosulfónico monohidratado en 4 ml de dimetoximetano. Un colector de Dean-Stark cargado con tamices de 4 Angstróm fue interpuesto entre el recipiente de reacción y el condensador de reflujo y la mezcla se calentó a reflujo durante 20 horas. La mezcla se enfrió a 22°C, se diluyó con bicarbonato de sodio acuoso y se extrajo con acetato de etilo (3x). Los 5 extractos orgánicos combinados se lavaron con bicarbonato de sodio acuoso (1x), con ácido clorhídrico acuoso diluido (2x), con agua (2x), con salmuera (1x), se secaron (sobre sulfato de magnesio), se filtraron y el material filtrado se concentró para dar un sólido de color pardo. Este material se suspendió en acetato de etilo, precipitando el [3aS-(3aa,5a,6aa]-éster etílico de ácido 5-[4-(4- 10 fluoro-fenoxi)-bencenosulfonilamino]-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5- carboxílico. La filtración y la recogida de los materiales sólidos dieron 600 mg (27%) del [3aS-(3aa,5a,6aa]-éster etílico de ácido 5-[4-(4-fluoro-fenoxi)- bencenosulfonilamino]-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico como un sólido de color blanco. 15 E) [3aR-(3aß,5a,6aßl-Ester etílico de ácido 5-[4-(4-fluoro-fenoxi)- bencenosulfonilam¡no1-tetrah¡dro-ciclopenta[1 ,31dioxol-5-carboxílico Una solución agitada de [3aR-(3aß,5a,6aß]-éster etílico de ácido 5-[4-(4-fluoro-fenoxi)-bencenosulfonilamino]-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5- 20 carboxílíco (500 mg, 1 ,1 mmol) e hidróxido de litio monohidratado (186 mg, 4,4 mmol) en 17 ml de tetrahidrofurano, 9 ml de metanol y 20 ml de agua se calentó a 60°C durante 15,5 horas bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla de reacción se enfrió a 23°C, se diluyó con agua y el pH se ajustó a 3,5 con ácido clorhídrico acuoso. La mezcla se extrajo con acetato de etilo (3x) y los extractos orgánicos combinados se secaron (sobre sulfato de sodio), se filtraron y el material filtrado se concentró para dar 449 mg (96%) de [3aR-(3aß,5a,6aß]- ácido 5-[4-(4-fluoro-fenoxi)-bencenosulfonilamino]-tetrahidro- 5 ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico como una espuma de color blanco. Este material se usó en la subsiguiente operación sin purificación.

F) [3aR-(3aß,5a,6aßl-Hidroxiamida de ácido 5-[4-(4-fluorofenox¡)- bencenosulfon¡laminol-tetrah¡dro-ciclopenta[1 ,3ld¡oxol-5-carboxílico 10 A una solución fría (a 0°C) y agitada de [3aR-(3aß,5a,6aß] ácido 5- [4-(4-fluoro-fenoxi)-bencenosulfonilamino]-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]d¡oxol-5- carboxílico (442 mg, 0,98 mmol) en 5 ml de diclorometano, se le añadió una cantidad catalítica de N,N-dimetil-formamida (16 µl) y cloruro de oxalilo (109 µl, 1 ,2 mmol) bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla se agitó durante 7 horas a 23°C. Mientras tanto, se añadieron piridina (0,84 ml, 10 mmol) seguida por cloruro de trimetil-sililo (0,6 ml, 5,0 mmol) a un matraz frío (a 0°C) cargado con hidrocloruro de hidroxilamina (145 mg, 2,0 mmol) bajo una atmósfera de nitrógeno. El baño frío se retiró y la mezcla se agitó durante 7 horas a 23°C. Ambos recipientes de reacción se enfriaron a 0°C y la solución del cloruro de ácido se añadió a la suspensión agitada de la N.O-bis-trimetil-silil- hidroxilamina a través de una jeringa. El baño frío se retiró y la mezcla se agitó durante 20 horas a 23°C. La mezcla de reacción se diluyó con agua y se extrajo con acetato de etilo (3x). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con agua (2x), se secaron (sobre sulfato de sodio), se filtraron y el material filtrado se concentró para dar un sólido de color amarillo pálido. Este sólido se agitó como una suspensión en cloroformo y dietil-éter. La filtración, la recogida y la desecación de los materiales sólidos dieron 331 mg (77%) de [3aR-(3aß,5a,6aß]- hidroxiamida de ácido 5-[4-(4-fluorofenoxi)-bencenosulfonilamino]-tetrahidro- ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílíco como un sólido de color blanco. P.f. 182-183°C. MS: m/z 439 (M+1 ). 1H-NMR (dmso-d6): d 10,40 (s, 1 H), 8,80 (s, 1 H), 7,98 (s, 1 H), 7,78 (d, J = 8,9 Hz, 2H), 7,08-7,35 (m, 6H), 4,79 (s, 1 H), 4,60 (s, 1 H), 4,41 (s ancho, 2H), 2,33-2,40 (m, 2H), 1 ,68-1 ,74 (m, 2H).

EJEMPLO 2 r3aS-(3aa,5a,6aa1-H¡droxiam¡da de ácido 5-r4-(4-fluoro-fenoxi)- bencenosulfonil-aminol-tetrahidro-ciclopentari,31dioxol-5-carboxílico Este compuesto se preparó de acuerdo con el mismo procedimiento que en el Ejemplo 1 , comenzando con el éster etílico de ácido [3aS-(3aa,5a,6aa]-5-[4-(4-fluoro-fenoxi)-bencenosulfonilamino]-tetrahidro- ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico obtenido en la operación D. Alternativamente, la síntesis puede usar el isómero de diol del [1a, 3ßS, 4ßR]-éster etílico de ácido 1-[4-(4-fluoro-fenoxi)-bencenosulfonil-amino]-3,4-dihidroxi-ciclopentano- carboxílico obtenido en forma pura por cristalización en la operación B. P.f. 146-149°C. MS: m/z 437 (M-1). 1H-NMR (dmso-d6): d 10,38 (s, 1 H), 8,75 (s, 1 H), 7,88 (s, 1 H), 7,73 (d, J = 8,9 Hz, 2H), 7,04-7,28 (m, 6H), 4,83 (s, 1 H), 4,65 (s, 1 H), 4,10 (s ancho, 2H), 2,29-2,33 (m, 2H), 1 ,76-1 ,80 (m, 2H).

EJEMPLO 3 r3aR-(3aß,5a,6aßl-H¡droxiam¡da de ácido 5-[4-(4-cloro-fenoxi)- bencenosulfonilam¡no1-tetrahidro-ciclopentari,31dioxol-5-carboxílico Este compuesto se preparó de acuerdo con el mismo procedimiento que en el Ejemplo 1 , comenzando con cloruro de 4-(4-cloro- fenoxi)-bencenosulfonilo en la operación A. El requerido isómero de diol del [1a,3aR,4aS]-éster etílico de ácido 1-[4-(4-cloro-fenoxi)-bencenosulfonilamino]- 3,4-dihidroxi-ciclopentano-carboxílico se obtuvo por lactonización de una mezcla de dioles (operación C) y aislamiento por cromatografía del isómero de diol remanente. MS: m/z 453 (M-1 ).

EJEMPLO 4 [3aS-(3aa,5a,6aal-Hidroxiamida de ácido 5-r4-(4-cloro-fenox¡)- bencenosulfonilamino1-tetrahidro-ciclopentaf1 ,31dioxol-5-carboxílico Este compuesto se preparó de una manera análoga a la del Ejemplo 2, comenzando con cloruro de 4-(4-cloro-fenoxi)-bencenosulfonilo en la operación A. El requerido isómero de diol del [1a,3ßS,4ßR]-éster etílico de ácido 1-[4-(4-cloro-fenoxi)-bencenosulfonilamino]-3,4-dihidroxi-ciclopentano-carboxílico se separó por cristalización en forma pura en la operación B. MS: m/z 455 (M+1 ).

EJEMPLO 5 f3aR-(3aß,5a,6aß1-Hidroxiamida de ácido 5-r4-(4-fluoro-fenox¡)- bencenosulfonilamino1-2-oxo-tetrahidro-c¡clopentaí1,31dioxol-5- carboxílico A) [1 a,3aR,4aS1-Acido 1 -[4-(4-fluoro-fenoxi)-bencenosulfonil- aminol-3,4-d¡hidroxi-ciclopentano-carboxílico A una solución agitada del [1 a,3aR,4aS]-éster etílico de ácido 1-[4- (4-fluoro-fenoxi)-bencenosulfonilamino]-3,4-dihidroxi-ciclopentano-carboxílico (570 mg, 1 ,3 mmol); preparado de acuerdo con el mismo procedimiento que en el Ejemplo 1 , operaciones A y B), en tetrahidrofurano (17 ml) se le añadió hidróxido de litio monohidratado (217 mg, 5,2 mmol), metanol (9 ml) y agua (20 ml). La mezcla resultante se calentó a 60°C durante 4 horas. La mezcla de reacción se añadió a ácido clorhídrico acuoso diluido. El pH se ajustó a 2,5 usando cloruro de hidrógeno acuoso 1 N y la mezcla se extrajo con acetato de etilo (3x). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron, y el material filtrado se concentró para proporcionar [1a,3aR,4aS]- ácido 1-[4-(4-fluoro-fenoxi)-benceno-sulfonilamino]-3,4-dihidroxi-ciclopentano- »^^í|^^^^g^^^^^^^^^^^^^^¿^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^»^^^j ^| ^^^^^^^«^^^^^^y carboxílico como un sólido que se usó en la subsiguiente operación sin purificación.

B) [3aR-(3aß,5a,6aß1-Acido 5-r4-(4-fluoro-fenoxi)-bencenosulfonil- 5 am¡nol-2-oxo-tetrahidro-ciclopenta[1 ,31d¡oxol-5-carboxílico A una solución fría (a 0°C) y agitada de [1a,3aR,4aS]-ácido 1-[4-(4- fluoro-fenoxi)-bencenosulfonilam¡no]-3,4-dihidroxi-c¡clopentano-carboxílico (428 mg, 100 µmol) en cloruro de metileno (10 ml) se le añadió 1 ,1'-carbonil-diimidazol (169 mg, 100 µmol). El baño de hielo se retiró 45 minutos más tarde. La suspensión se agitó bajo una atmósfera de nitrógeno a la temperatura ambiente (23°C) durante 72 horas. La reacción se sofocó con agua y la capa acuosa se separó. La capa acuosa se acidificó a un pH de 4 usando cloruro de hidrógeno 1 N y se extrajo con acetato de etilo (3x). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y el material filtrado se concentró. 15 El material bruto resultante se purificó por cromatografía en gel de sílice (elución con una mezcla 85:15 de cloruro de metileno y metanol y ácido acético al 1 %) para proporcionar el [3aR-(3aß,5a,6aß]-ácido 5-[4-(4-fluoro-fenoxi)- bencenosulfonilamino]-2-oxo-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico como un sólido.

+J*-. J& v mt «<8---*A^ ÉÉiir -rr-t rftBhi- -*-*^*^5"-- '- -^*^*ittM* -^ C) [3aR-(3aß,5a,6aßl-Hidroxiamida de ácido 5-[4-(4-fluoro-fenox0- bencenosulfonilam¡no1-2-oxo-tetrahidro-ciclopenta[1 ,31d¡oxol-5-carboxíl¡co A una suspensión fría (a 0°C) y agitada del [3aR-(3aß,5a,6aß]- ácido 5-[4-(4-fluoro-fenoxi)-bencenosulfonilamino]-2-oxo-tetrahidro- ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico (70 mg, 160 µmol) en cloruro de metileno (1 ml) se le añadió cloruro de oxalilo (16 µl, 192 µmol) gota a gota mientras que se agitaba bajo una atmósfera de nitrógeno. Mientras tanto, se añadió gota a gota cloro-trimetil-silano (91 µl, 720 µmol) a una solución fría (a 0°C) y agitada de hidrocloruro de hidroxilamina (22 mg, 320 µmol) en piridina (129 µl, 1 ,6 mmol). Ambas mezclas de reacción se calentaron a la temperatura ambiente (a 23°C). Después de 72 horas, ambas mezclas de reacción se enfriaron a 0°C y la solución del cloruro de ácido se añadió a la suspensión agitada de la bis-(trimetil- silil)hidroxilamina a través de una jeringa. La mezcla resultante se agitó a la temperatura ambiente (a 23°C) durante 24 horas antes de que se añadiesen 200 µl de cloruro de hidrógeno acuoso 1 N. La mezcla de reacción se agitó durante 7 horas, momento en que se añadió a agua y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (3x). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con agua (2x) y con salmuera (2x) y se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y el material filtrado se concentró. El material bruto resultante se suspendió en dietil- éter y la mezcla se agitó durante 16 horas. La filtración y la recogida de los materiales sólidos proporcionaron 52 mg de [3aR-(3aß,5a,6aß]-ácido 5-[4-(4- fluoro-fenoxi)-bencenosulfonilamino]-2-oxo-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5- carboxílico. MS: m/z 451 (M-1 ).

EJEMPLO 6 [3aS-(3aa,5a,6aa1-Hidroxiamida de ácido 5-(4-benciloxi-benceno- sulfon¡lamino)-tetrahidro-ciclopentari,31d¡oxol-5-carboxílico Este compuesto se preparó de una manera análoga a la del Ejemplo 2, comenzando con cloruro de 4-(4-benciloxi)-bencenosulfonilo en la operación A. El requerido isómero de diol del [1a,3aS,4aR]-éster etílico de ácido 1-[4-(4-benciloxi)-bencenosulfonilamino]-3,4-dihidroxi-ciclopentano-carboxílico se separó por cristalización en forma pura en la operación B. MS: m/z 435 (M+1 ). ^sg^^j-^ .^, vbM?v?u ifi ?.^ EJEMPLO 7 r3aS-(3aa,5a,6aa1-H¡droxiam¡da de ácido 5-[4-(4-fluoro-benc¡loxi)- bencenosulfonilamino1-tetrahidro-ciclopentaf1,31dioxol-5-carboxílico A) [3aS-(3aa,5a,6aal-Ester etílico de ácido 5-(4-hidroxi-bencenosulfonil-am¡no)-tetrahidro-ciclopenta[1 ,31dioxol-5-carboxílico Una mezcla del [3aS-(3aa,5a,6aa]-éster etílico de ácido 5-(4-benciloxi-bencenosulfonilamino)-tetrahidro-ciclopenta-[1 ,3]dioxol-5-carboxílico (1 ,2 g, 2,7 mmol; obtenido de la operación D del Ejemplo 6) y 10% de paladio sobre carbono en cloruro de metileno y metanol se agitó durante 3 horas bajo una atmósfera de 45 psi (3,15 kg/cm^) de hidrógeno gaseoso. La mezcla resultante se filtró a través de nylon, y el material filtrado se concentró en vacío para dar [3aS-(3aa,5a,6aa]-éster etílico de ácido 5-(4-hidrox¡-bencenosulfonilamino)-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico. - c?tJ*'t?¿?fal?fttltt?it - -*r~**l -r*-">< -*- — . *as"-"" -•• lltflft- lr --'"- — '"•fe*-*-*- ...... ~¿ ? . -. «** --...*»^ .. - B) f3aS-(3aa,5a,6aa1-Ester etílico de ácido 5-[4-(4-fluoro-bencilox¡)-bencenosulfon¡laminol-tetrah¡dro-ciclopenta[1 ,3l-d¡oxol-5-carboxíl¡co A una solución agitada del [3aS-(3aa,5a,6aa]-éster etílico de ácido 5-(4-hidroxi-bencenosulfonilamino)-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico (431 mg, 1 ,2 mmol) en dimetilformamida (6 ml) se le añadió carbonato de cesio (432 mg, 1 ,3 mmol), seguido por bromuro de 4-fluoro-bencilo (165 µl, 1 ,3 mmol). La suspensión se agitó a la temperatura ambiente (23°C) bajo una atmósfera de nitrógeno durante 19 horas. El material resultante se añadió a agua, y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (3x). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y el material filtrado se concentró. El residuo se cristalizó usando cloroformo y acetato de etilo para proporcionar el [3aS-(3aa,5a,6aa]-éster etílico de ácido 5-[4-(4-fluoro-benciloxi)-bencenosulfonilamino]-tetrahidro-ciclopenta-[1 ,3]dioxol-5-carboxílico como cristales de color blanco.

C) [3aS-(3aa,5a,6aal-Acido 5-[4-(4-fluoro-bencilox¡)-bencenosulfon¡l-amino1-tetrah¡dro-ciclopenta[1 ,3ldioxol-5-carboxíl¡co Una solución del [3aS-(3aa,5a,6aa]-éster etílico de ácido 5-[4-(4-fluoro-benciloxi)-bencenosulfonilamino]-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico (360 mg, 770 µmol), tetrahidrofurano (10 ml), hidróxido de litio monohidratado (130 mg, 3,1 mmol), metanol (8 ml) y agua (13 ml) se calentó a 60°C durante 4 horas. La capa acuosa se acidificó a un pH de 3,5 usando cloruro de hidrógeno acuoso 1 N y la mezcla se extrajo con acetato de etilo (3x). Los ^^¿^ extractos orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y el material filtrado se concentró para proporcionar ácido [3aS-(3aa,5a,6aa]-5- [4-(4-fluoro-benciloxi)-bencenosulfonil-amino]-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5- carboxílico.

D) [3aS-(3aa,5a,6aal-Hidroxiamida de ácido 5-[4-(4-fluoro- benciloxi)-bencenosulfon¡laminol-tetrahidro-ciclopenta[1.3ldioxol-5-carboxílico A una suspensión fría (a 0°C) y agitada del [3aS-(3aa,5a,6aa]- ácido 5-[4-(4-fluoro-benciloxi)-bencenosulfonilamino]-tetrah¡dro-ciclopenta[1 ,3]- dioxol-5-carboxílico (336 mg, 768 µmol) en cloruro de metileno (4 ml) se le añadió dimetil-formamida (50 µl) seguida por cloruro de oxalilo (80 µl, 920 µmol) gota a gota bajo una atmósfera de nitrógeno. Mientras tanto, se añadió gota a gota cloro-trimetil-silano (430 µl, 3,4 mmol) a una solución fría (a 0°C) y agitada de hidrocloruro de hidroxilamina (106 mg, 1 ,5 µmol) en piridina (620 µmol, 7,7 mmol). Ambas mezclas de reacción se calentaron a la temperatura ambiente (a 23°C). Después de 24 horas, ambas mezclas de reacción se enfriaron a 0°C y la solución del cloruro de ácido se añadió a la suspensión agitada de la bis- (trimetil-silil)hidroxilamina a través de una cánula. La mezcla resultante se agitó a la temperatura ambiente (23°C) durante 48 horas antes de que se añadiesen 2 ml de cloruro de hidrógeno acuoso 1 N. La mezcla de reacción se agitó durante 2 horas, en cuyo momento se añadió a agua y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo. Los extractos orgánicos combinados se lavaron con agua y con salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron, y el material filtrado se concentró. El material bruto resultante se suspendió en dietil-éter y cantidades trazas de cloroformo y hexanos, y la mezcla se agitó durante 16 horas. La filtración y la recogida de los materiales sólidos proporcionó 285 mg de [3aS- (3aa,5a,6aa]-hidroxiamida de ácido 5-[4-(4-fluoro-benciloxi)- bencenosulfonilamino]-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]-dioxol-5-carboxílico. MS: m/z 453 (M+1 ).

EJEMPLO 8 r3aS-(3aa,5a,6aa1-Hidroxiamida de ácido 5-f4-(2,5-difluoro-benciloxi)- bencenosulfonilamino1-tetrahidro-ciclopentaf1 ,31dioxol-5-carboxílico Este compuesto se preparó de una manera análoga a la del Ejemplo 7 excepto que se usó bromuro de 2,5-difluoro-bencilo en la operación B. MS: m/z 469 (M-1 ).

Claims (10)

NOVEDAD DE LA INVENCIÓN REIVINDICACIONES

1.- Un compuesto de la fórmula: 10 , en la que X es >CR3R4 ó >C=0; Z es >CH2 ó >NR1; R1 es hidrógeno, alquilo (C d), aril (C6-C 0)-alquilo (d-C6), heteroaril (C2-C9)-alquilo (CrC6) o un grupo de la fórmula n es un número entero de uno a seis; R2 es hidrógeno o alquilo (d-C6); R3 es hidrógeno o alquilo (d-d); R4 es hidrógeno, alquilo (d-C6), alcoxi (CrC6)- alquilo (CrC6), arilo (C6-C?o), heteroaplo (C2-C9), aril (C6-C?0)-alquilo (CrC6) .aril 20 (C6-C?o)-arilo (C6-C?0), aril (C6-C?o)-heteroarilo (C2-C9), heteroaril (C2-C9)-alquilo (CrC6), heteroaril (C2-C9)-arilo (C6-C?o), heteroaril (C2-C9)-heteroarilo (C2-C9), aril (C6-C?o)-oxi-alquilo (C Ce), aril (C6-C10)-oxi-arilo (C6-C?0), aril (C6-C?0> oxi- heteroarilo (C2-C9), heteroaril (C2-C9)-oxi-alquilo (C?-C6), heteroaril (C2-C9) oxi- ^a^^^^^^». ^,..,..^ ^^^^^*^-^^^^^ J* + ..^J*^. -^ ^»^a^w^^jMJCajfc^,^^.. i^1^^^^ J»^ ..... ~ - ..^»^^i$.»i£ , arilo (C6-C?o), heteroaril (C2-C9)-oxi-heteroarilo (C2-C9), aril (C6-C10)-alqu?l (d-C6)- arilo (d-Cio), aril (C6-C?o)-alquil (C?-C6)-heteroarilo (C2-C9), aril (C6-C?0)-alcoxi (C?-C6)-arilo (C6-C?0), aril (C6-C?0)-alcoxi (C?-C6)-heteroarilo (C2-C9), aril (C6-C10)- oxi-alquil (C?-C6)-arilo (C6-C?o), aril (C6-C?0)-oxi-alquil (C?-C6)-heteroarilo (C2-Cg), 5 heteroaril (C2-C9)-alquil (C?-C6)-arilo (C6-C?0), heteroaril (C2-C9)-alquil (d-C6)- heteroarilo (C2-C9), heteroaril (C2-C9)-alcoxi (C?-Ce)-arilo (C6-C?0), heteroaril (C2- Cg)-alcoxi (C?-C6)-heteroarilo (C2-C9), heteroaril (C2-C9)-oxi-alquil (CrCe)-arilo (C6-C?o), heteroaril (C2-C9)-oxi-alquil (C?-C6)-heteroarilo (C2-C9), aril (C6-C?o)-aril (C6-C10)-alquilo (C?-C6) o aril (C6-C?0)-alcoxi (CrC6)-alquilo (CrC6), en que cada 10 uno de dichos restos aplo (C6-C?0) o heteroarilo (C2-C9) está opcionalmente sustituido en cualquiera de los átomos de carbono de anillo capaces de formar un enlace adicional, con uno o más sustituyentes por cada anillo, seleccionados independientemente entre fluoro, cloro, bromo, alquilo (CrC6), alcoxi (d-d), perfluoro-alquilo (d-C3 ), perfluoro-alcoxi (C1-C3) y aril (C6-C?0)-oxi; Q es alquilo 15 (d-d), arilo (C6-C?0), heteroarilo (C2-C9), aril (C6-C?0)-alquilo (d-C6), aril (C6- C?0)-arilo (C6-C?0), aril (C6-C?0)-heteroarilo (C2-C9), heteroaril (C2-C8)-alquilo (C C6), heteroaril (C2-C9)-arilo (C6-C?o), heteroaril (C2-C9)-heteroarilo (C2-C8), aril (C6- C?o)-oxi-alquilo (CrC6), aril (C6-C?0)-oxi-arilo (C6-C?0), aril (C6-C?o)-oxi-heteroarilo (C2-Cg) heteroapl (C2-C9) oxi-alquilo (CrC6), heteroaril (C2-Cg)-oxi-arilo (C6-C10), 20 heteroaril (C2-C9)-oxi-heteroarilo (C2-C9), aril (C6-C?0)-alquil (CrC6)-arilo (C6-C?0), aril (C6-C?o)-alquil (d-C6)-heteroarilo (C2-C9), aril (C6-C10)-alcoxi (CrC6) arilo (C6- C10), aril (C6-C?0)-alcoxi (d-C6)-heteroarilo (C2-C9), aril (C6-C?o)-oxi-alquil (C C6)- arilo (C6-C?o), aril (C6-C?0)-oxi-alquil (CrC6)-heteroarilo (C2-C9), heteroaril (C2-C9)-

^ *^^ -Tir»" -~rt ^^j^^^^^^^^sa^^^^^^^^?^^Bj^^^^^^ alquil (C?-C6)-arilo (C6-C?0), heteroaril (C2-C9)-alquil (C?-C6)-heteroarilo (C2-Cg), heteroaril (C2-C9)-alcoxi (CrCe)-arilo (C6-C?0), heteroaril (C2-C9)-alcoxi (d-C6)-heteroarilo (C2-C8), heteroaril (C2-C9)-oxi-alquil (C?-C6)-arilo (C6-C?0), heteroaril (C2-C9) oxi-alquil (CrC6)-heteroarilo (C2-C9), aril (C6-C?0)-ar¡l (C6-C?0)-alquilo (d-C6) o aril (C6-C?0)-alcoxi (d-C6)-alquilo (CrC6), en que cada uno de dichos restos arilo (C6-C?0) o heteroarilo (C2-C9) está opcionalmente sustituido en cualquiera de los átomos de carbono de anillo capaces de formar un enlace adicional, con uno o más sustituyentes por cada anillo, seleccionados independientemente entre fluoro, cloro, bromo, alquilo (CrC6), alcoxi (CrC6), perfluoro-alquilo (d-C3), perfluoro-alcoxi (d-C3) y aril (C6-C?0)-oxi; con la condición de que cuando X es >C=0 y Z es NR1, entonces R1 debe ser hidrógeno, alquilo (CrC4), aril (C6-C?0)-alqu¡lo (d-C6) o heteroaril (C2-C9)-alquilo (d-C6); o una de sus sales farmacéuticamente aceptables. 2.- Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 , en el que Z es >NR1.

3.- Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 2, en el que R1 es hidrógeno, alquilo (d-C6), aril (C6-C?0)-alquilo (d-C6) o heteroaril (C2-C9)-alquilo (C C6).

4.- Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 , en el que X es >C=0.

5.- Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 , en el que Q es arilo (C6-C?0), aril (C6-C?o)-oxi-ar¡lo (C6-C?0), heteroaril (C2-C9)-oxi-arilo (C6-C?0) o aril (C6-C?o)-alcoxi (d-C6)-arilo (C6-C?0) opcionalmente sustituido.

6.- Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 5, en el que dicho sustituyente opcional de Q es hidrógeno, fluoro, cloro, alquilo (d-C6) o alcoxi (d-C6).

7.- Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 5, en el que 5 dicho sustituyente opcional de Q está en la posición para con respecto al anillo terminal.

8.- Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 , en el que dicho compuesto se selecciona entre el grupo que consta de: [3aR-(3aß,5a,6aß]- hidroxiamida de ácido 5-[4-(4-fluoro-fenoxi)-benceno-sulfonilamino]-tetrahidro- 10 ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, [3aS-(3aa,5a,6aa]-hidroxiamida de ácido 5-[4- (4-fluoro-fenoxi)-benceno-sulfonilamino]-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5- carboxílico, [3aR-(3aß,5a,6aß]-hidroxiamida de ácido 5-[4-(4-cloro-fenox¡)- benceno-sulfonilamino]-tetrahidro-c¡clopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, [3aS- (3aa,5a,6aa]-hidroxiamida de ácido 5-[4-(4-cloro-fenoxi)-benceno-sulfonilamino]- 15 tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]díoxol-5-carboxílico, [3aR-(3aß,5a,6aß]-hidroxiamida de ácido 5-[4-(4-fluoro-fenoxi)-benceno-sulfonilamino]-2-oxo-tetrahidro- ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, [3aS-(3aa,5a,6aa]-hidroxiamida de ácido 5- (4-benciloxi-bencenosulfonil-amino)-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico, y [3aS-(3aa,5a,6aa]-hidroxiamida de ácido 5-[4-(4-fluoro-benciloxi)-benceno- 20 sulfonilamino]-tetrahidro-ciclopenta[1 ,3]dioxol-5-carboxílico.

9.- Una composición farmacéutica para el tratamiento de una condición seleccionada entre el grupo que consta de artritis, enfermedad de intestino inflamatorio, enfermedad de Crohn, enfisema, síndrome de angustia ^^^^^^^^^^¿¡^^^^^^^^^^^^^^^^¡¡^^^¡^^^¡^^^¿¿^^^^^^^^^^^ ^^ ^^^^^^^^^^^í^^^^^^^^^^^^^^^^^^ ^^^ respiratoria aguda, asma, enfermedad pulmonar obstructiva crónica, enfermedad de Alzheimer, toxicidad en un trasplante de órganos, caquexia, reacciones alérgicas, hipersensibilidad alérgica al contacto, cáncer, ulceración de tejidos, reestenosis, enfermedad periodontal, epidermólisis ampollar o bullosa, osteoporosis, relajación de implantes de articulaciones artificiales, aterosclerosis, aneurisma aórtico, insuficiencia cardíaca congestiva, infarto de miocardio, apoplejía, isquemia cerebral, traumatismo de cabeza, lesión de medula espinal, trastornos neuro-degenerativos, trastornos autoinmunitarios, enfermedad de Huntington, enfermedad de Parkinson, migraña, depresión, neuropatía periférica, dolor, angiopatía de amiloides cerebrales, mejoría nootrópica o cognitiva, esclerosis lateral amiotrófica, esclerosis múltiple, angiogénesis ocular, lesión de la córnea, degeneración macular, curación anormal de heridas, quemaduras, diabetes, invasión con tumores, crecimiento de tumores, metástasis de tumores, cicatrización de la córnea, esclerotitis, SIDA, septicemia o choque séptico en un mamífero, que comprende una cantidad de un compuesto de la reivindicación 1 eficaz en dicho tratamiento y un soporte farmacéuticamente aceptable.

10.- El uso de un compuesto como el que se reclama en la reivindicación 1 , para la fabricación de un medicamento para tratar una condición seleccionada entre el grupo que consta de artritis, enfermedad de intestino inflamatorio, enfermedad de Crohn, enfisema, síndrome de angustia respiratoria aguda, asma, enfermedad pulmonar obstructiva crónica, enfermedad de Alzheimer, toxicidad en un trasplante de órganos, caquexia, reacciones alérgicas, hipersensibilidad alérgica al contacto, cáncer, ulceración de tejidos, reestenosis, ¿^g^ | j ^ mfiMt-wiÉ?ÍfrMfii «?r? ft -Titr - nr enfermedad periodontal, epidermólisis ampollar o bullosa, osteoporosis, relajación de implantes de articulaciones artificiales, aterosclerosis, aneurisma aórtico, insuficiencia cardíaca congestiva, infarto de miocardio, apoplejía, isquemia cerebral, traumatismo de cabeza, lesión de medula espinal, trastornos 5 neuro-degenerativos, trastornos autoinmunitarios, enfermedad de Huntington, enfermedad de Parkinson, migraña, depresión, neuropatía periférica, dolor, angiopatía de amiloides cerebrales, mejoría nootrópica o cognitiva, esclerosis lateral amiotrófica, esclerosis múltiple, angiogénesis ocular, lesión de la córnea, degeneración macular, curación anormal de heridas, quemaduras, diabetes, 10 invasión con tumores, crecimiento de tumores, metástasis de tumores, cicatrización de la córnea, esclerotitis, SIDA, septicemia o choque séptico en un mamífero. ?*a*¿*. . ,...,. . . ^..*.^^. ^..^ ,. . ¿ ií??Íáah.. * *, *. ^- ..>* .. .... . ^ .A ,...,