MX2015007814A - Cepa de bifidobacterium animalis ssp. animalis. - Google Patents

Abstract

La presente invención se refiere a una cepa novedosa de Bifidobacterium animalis ssp. animalis que, entre otras cosas, tiene la capacidad de mejorar el funcionamiento del sistema nervioso entérico. También se refiere a composiciones que constan de esta cepa novedosa.

Description

CEPA DE BIFIDOBACTERIUM ANIMALIS SSP. ANIMALIS CAMPO DE LA INVENCIÓN La presente invención se refiere a una novedosa cepa de Bifidobacterium animalis ssp. animalis . Esta cepa tiene la capacidad, entre otras cosas, de mejorar el funcionamiento del sistema nervioso entérico (SNE) mediante, en particular, el aumento de los niveles de péptido intestinal vasoactivo (VIP, por sus siglas en inglés) en ese sistema, con el objeto, por ejemplo, de promover la motilidad intestinal o las funciones de integridad de la barrera. De esa manera, a esta cepa se la puede utilizar para prevenir o reducir, o hacer ambas cosas a la vez, la incomodidad gastrointestinal o los trastornos gastrointestinales.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN El sistema nervioso entérico (SNE) es un sistema nervioso integrado que está organizado todo a lo largo del intestino, en dos plexos principales que desempeñan papeles funcionales específicos (Furness, J. Auton . Nerv. Syst . , 81(1-3):87-96, 2000). El plexo mientéríco, situado entre los músculos longitudinales y circulares, contiene neuronas que intervienen, principalmente. en el control de la motilidad gastrointestinal (GI). El plexo submucoso, situado entre los músculos circulares y la mucosa, contiene neuronas cuya intervención principal es en el control de las funciones de la barrera epitelial intestinal (IEB, por sus siglas en inglés). Las neuronas entéricas controlan las funciones de control de la GI, por medio de la liberación de neuromediadores que actúan sobre células blanco a las que inervan.

Con respecto al sistema digestivo, un VIP neuromediador induce la relajación de los músculos lisos (esfínter esofágico inferior, estómago y vesícula biliar), estimula la secreción de agua hacia el interior del jugo pancreático y de la bilis, y causa la inhibición de la secreción y la absorción de ácido gástrico desde la cavidad intestinal. Su papel en el intestino es el de estimular en gran medida la secreción agua y de electrólitos, así como dilatar el músculo liso intestinal, dilatar los vasos sanguíneos periféricos, estimular la secreción de bicarbonato pancreático e inhibir la secreción de ácido gástrico gastroestimulada. Estos efectos trabajan en conjunto para aumentar la motilidad. De ese modo, el aumento del VIP mejora de modo beneficioso la relajación de los músculos del tracto GI.

La barrera epitelial intestinal está constituida por una monocapa continua de células especializadas polarizadas que se mantienen unidas por medio de proteínas asociadas con junturas estrechas, tales como la zonula occludens -1 (ZO-1), que controlan la permeabilidad de la barrera, asi como la polaridad de las células epiteliales. Estudios in vitro e in vivo han demostrado que los probióticos pueden tener efecto sobre la resistencia epitelial y disminuir la permeabilidad por medio de la modulación de la ZO-1 (Eun y col., APMIS, 119(1):49-56, 2011; Miyauchi y col., J. Dairy Sci . , 92(6):2400-8, 2009). Neuromediadores sintetizados por el SNE también intervienen en la regulación de la permeabilidad intestinal (Hállgren y col., Am . J. Physiol . Gastrointest . Liver Physiol . , 275:G95-103, 1998; Hayden y col., AIR . J. Physiol . Regul .

Integr . Comp. Physiol . , 278:R1589-94, 2000; Neunlist y col., Am . J. Physiol . Gastrointest . Liver Physiol . , 285(5):G1028-36, 2003). Por ejemplo, la síntesis neuronal mejorada de acetilcolina en el colon, inducida por la separación neonatal de la madre, lleva a un aumento de la permeabilidad epitelial paracelular en las ratas (Gareau y col., Am . J. Physiol . Gastrointest . Liver Physiol . , 293:G198-203, 2007). En cambio, el péptido intestinal vasoactivo (VIP) liberado por las neuronas de la submucosa aumentó la resistencia de la IBE por medio de la regulación de la expresión de la proteína ZO-1 de juntura estrecha en las células del epitelio intestinal (Neunlist y col., J. Intern . Med. , 263(6):577-83, 2008). Para reforzar más el papel del VIP en la regulación de la función de barrera, hay un estudio reciente que muestra que el VIP aumentó la resistencia de la barrera ante la colitis inducida por Citrobacter rodentium en ratones (Conlin y col., Am. J. Physiol . Gastrointest . Liver Physiol . , 297(4):G735-50, 2009) .

Varios estudios midieron el efecto de algunos probióticos sobre neuromediadores del SNE, comprendido el VIP. Kamm y col. (Neurogastrointest . Motil . , 16:53-60, 2004) dieron a conocer los efectos de Saccharomyces boulardii sobre la disminución de la calbindina 28k (CALB) y que no se obtuvo efecto alguno sobre otros marcadores neuronales (ChAT, VIP, SP, NF-160 y similares) del ycyuno de cerdo. Metugriachuk y col. ( Rejuvenation Res. , 9:342-345, 2006) dieron a conocer que una preparación simbiótica sobre la motilidad del intestino delgado y del grueso en ratas Wistar añosas aumentó de manera significativa la actividad bioeléctrica del intestino delgado y del colon, y dio por resultado una aumento de la expresión del ARNm del VIP, pero no tuvo un efecto de importancia sobre la concentración del VIP.

Se sabe que las cepas bacterianas pueden brindar beneficios relacionados con la salud. A tales cepas se les denomina, a menudo, probióticas y se las utiliza en alimentos. Existe la necesidad de que en los alimentos se introduzcan cepas nuevas, con beneficios relativos a la salud modificados o con otros beneficios, tales como propiedades organolépticas o procesabilidad, o estos dos al mismo tiempo, o con todas estas características al mismo tiempo .

En la solicitud de patente internacional WO 2011/148219 se encontró que las composiciones que comprendían bacterias del ácido láctico aumentaban los niveles del VIP en el SNE y, de esa manera, mejoraban la función del SNE. Estas bacterias del ácido láctico eran, en particular, Lactobacillus plantarum CNCM 1-4318, Bifidobacterium breve CNCM 1-2219, Bifidobacterium animalis ssp. lactis CNCM 1-2494, y Bifidobacterium breve CNCM I-4321.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN En este contexto, los presentes inventores identificaron una nueva cepa bacteriana que, entre otras cosas, puede modular el sistema nervioso entérico, en especial con el objeto de promover las funciones de la motilidad intestinal y de la integridad de barrera y, en particular, que aumenta el nivel dle VIP más que las cepas que se da a conocer en la WO 2011/148219. a esta cepa se le califica como cepa de Bifidobacterium animalis subespecie animalis, y se depositó de acuerdo con el tratado de Budapest, en la CNCM ( Collection Na tionale de Cultures de Microorganismes) [Colección Nacional de Cul tivos de Microorganismos] en carácter de autoridad internacional depositaría, el 6 de marzo de 2012, bajo el número 1-4602.

De esta manera, la presente invención es atinente a la cepa CNCM 1-4602 de B. animalis ssp. animalís.

Las características de esta cepa son las siguientes: Morfología de colonia (sobre cisteína + MRS sólido, 72h a 37° C, condiciones anaeróbicas): colonias pequeñas, redondas y blancas, regulares y traslúcidas; Morfología microscópica (sobre cisteína + MRS sólido, 16h a 37° C, condiciones anaeróbicas): bacilos gruesos, grandes, bipolares, con forma de calabaza; Fermentación de los sustratos siguientes (sobre una tira de API 50 CH en medio API MRS a 37° C durante 48h): L-arabinosa, D-xilosa, D-galactosa, D-glucosa, D-maltosa, D-melibiosa, D-sacarosa y D-rafinosa; Identificación bioquímica (sobre una tira de API 20 A en medio API 20 A a 36° C durante 24h): no hay esporas, tinción gram positiva, forma de bastones, acidificación en presencia de D-glucosa, D-sacarosa, D-maltosa, salicina, D-xilosa, L-arabinosa y D-rafinosa, gelatina y hidrólisis de esculina.

Actividades enzimáticas detectadas (sobre una tira API ZYM, a 37° C durante 4h): esterasa (C4), arilamidasa de leucina, arilamidasa de cistina, a-galactosidasa, b-galactosidasa, y a-glucosidasa.

La presente invención también abarca todas las cepas mutantes o transformadas en forma genética que se deriven de la cepa objeto de la presente invención que aún tengan actividad sobre el VIP. Estas cepas mutantes o transformadas en forma genética pueden ser cepas en las que un gen endógeno, o más de uno, de la cepa madre hubiera(n) mutado para, por ejemplo, modificar alguna de las propiedades metabólicas de la cepa madre (por ejemplo, su capacidad para fermentar azúcares, su resistencia a la acidez, su supervivencia al transporte en el tracto gastrointestinal, su postacidificación o su producción de metabolitos). También pueden ser cepas que hubieran sido resultado de la transformación genética de la cepa madre por parte de un gen de interés, o de más de uno, con el objeto de, por ejemplo, darle a la mencionada cepa características fisiológicas adicionales o para permitirle expresar proteínas de interés terapéutico o como vacunas que se desea administrar a través de las mencionadas cepas.

La cepa objeto de la presente invención, así como las mutantes que se definiera arriba, se pueden utilizar como probiótico. Se la puede utilizar para impedir o reducir, o ambas cosas a la vez, la incomodidad gastrointestinal o los trastornos gastrointestinales. La cepa aumenta, en un sujeto de experimentación, los niveles de péptido intestinal vasoactivo (VIP) del sistema nervioso entérico. Puede inhibir el crecimiento de patógenos en productos alimenticios o en un sujeto de experimentación después de que se la hubo suministrado, o hacer eso en alimentos y sujetos al mismo tiempo. Puede brindar propiedades mejoradas de barrera intestinal mediante, por ejemplo, el aumento de la Resistencia Eléctrica Transepitelial (TEER, por sus siglas en inglés) de las células del epitelio intestinal. Puede proporcionar una interesante producción de ácidos grasos de cadena corta en el momento de la fermentación o de la digestión, o en estos dos momentos al mismo tiempo como, por ejemplo, un aumento de la producción o una composición modificada de los ácidos grasos. Puede proporcionar una reducción en la producción de gases en el momento de la fermentación o de la digestión, o en ambos momentos a la vez. Puede tener una resistencia interesante al estrés gástrico. Puede brindar buenas propiedades de motilidad gastrointestinal en, por ejemplo, mamíferos recién nacidos; en particular, en seres humanos recién nacidos. Puede promover la maduración del sistema nervioso entérico y, de ese modo, de la función intestinal y de la motilidad gastrointestinal y, de esa manera, disminuir, en particular, el tiempo de tránsito gastrointestinal, aumentar la contractibilidad muscular gastrointestinal, mejorar la peristalsis gastrointestinal, evitar el vaciado gástrico lento, aumentar las contracciones coordinadas del sistema gastrointestinal, disminuir el tiempo de evacuación del meconio, disminuir el tiempo en el que empieza la motilidad gastrointestinal después del nacimiento y permitir la nutrición enteral temprana después del nacimiento en mamíferos recién nacidos como, por ejemplo, seres humanos recién nacidos. La cepa puede presentar un buen crecimiento o una buena supervivencia, o ambas cosas a la vez, en un producto lácteo fermentado en, por ejemplo, la presencia de vitamina K.

La invención también es atinente a una composición que consta de una cepa de bacterias, prebióticas o no, o a más de una de esas cepas como, por ejemplo, una cepa bacteriana, o más de una, que se seleccione de los géneros Lactobacillus, Lactococcus, Streptococcus, y Bífidobacteria . En particular, esta(s) otra(s) cepa(s) pueden comprender una cepa, o más de una, de Streptococcus thermophilus y una cepa o más de una, o todas al mismo tiempo, de Lactobacillus bulgaricus .

Esta composición que obedece a la presente invención puede comprender, ventajosamente, cuando menos una, de las cepas de bacterias que se seleccionaron del grupo consistente en Bif idobacterium breve CNCM 1-4321, Bifidobacterium breve CNCM 1-2219, Bif idobacterium animalis ssp. lactis CNCM 1-2494, Lactobacillus plantarum CNCM I- 4318, Bifidobacterium bifidum CNCM 1-4319, y Lactobacillus rhamnosus CNCM 1-4316. A B. bifidum CNCM 1-4319 y L. rhamnosus CNCM 1-4316 se las dio a conocer en la solicitud de patente internacional WO 2011/148220.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN La composición que se da a conocer en la presente invención puede estar en cualquier forma adecuada para el suministro; en particular, el suministro por vía oral: esto comprende, por ejemplo, sólidos, semisólidos, líquidos y polvos. En general, lo que se prefiere son las composiciones líquidas como, por ejemplo, las bebidas por su facilidad de suministro.

Ejemplos de la composición que se da a conocer en la presente invención son las composiciones nutritivas, entre ellas los productos alimenticios. La composición puede ser, por ejemplo, un producto lácteo, de preferencia un producto lácteo fermentado. Como opción pueden estar presentes otras cepas de bacterias del ácido láctico. En una realización práctica de preferencia hay presentes cepas de Streptococcus thermophilus y de Lactobacillus bulgaricus . El producto fermentado puede estar en la forma de un líquido o en la forma de un polvo seco que se obtuvo por secado del líquido fermentado: de preferencia, el producto fermentado es un producto fresco. Un producto fresco, que no sufrió las severas etapas del tratamiento térmico, tiene la ventaja de que las cepas bacterianas que están presentes lo están en forma viva. El producto fermentado puede ser, en particular, un producto lácteo; de mayor preferencia, leche fermentada o suero fermentado de leche, o ambos al mismo tiempo. Por ejemplo, la composición nutricional es yogurt, o leche fermentada, en forma cuajada, batida o bebible. El producto fermentado también puede ser un queso, o una hortaliza fermentada tal como soja, cereales o frutas, o todos estos al mismo tiempo, en formas cuajada, batida o bebible. La composición nutricional que responde a la presente invención puede ser un alimento para bebés, una fórmula de leche para lactantes o una fórmula de seguimiento para lactantes.

La composición que obedece a la presente invención también puede ser un producto nutracéutico o farmacéutico, un suplemento nutricional o un alimento médico.

Las composiciones nutricionales que obedecen a la presente invención también comprenden suplementos para las comidas y alimentos funcionales. Por suplemento para las comidas se designa un producto fabricado a partir de compuestos que son de utilización normal en los alimentos, pero que está en forma de tabletas, polvo, cápsulas, pócima o en cualquier otra forma que no es usual que se asocie con alimentos, y que tiene efectos beneficiosos para la salud de la persona. Un alimento funcional es un alimento que también tiene efectos beneficiosos para la salud de la persona. En particular, los suplementos para las comidas y el alimento funcional pueden tener un efecto fisiológico -protector o curativo- contra una enfermedad como, por ejemplo, contra una enfermedad crónica.

La composición acorde con la presente invención puede constar, por ejemplo, de, cuando menos 105 unidades formadoras de colonias (cfu, por sus siglas en inglés); de preferencia, de, cuando menos, 106 cfu por g de peso seco, de la cepa objeto de la presente invención, Bifidobacterium animalis ssp. animalis CNCM 1-4602.

En la composición que responde a la presente4 invención, las cepas bacterianas y, en particular, la B. animalis ssp. animalis CNCM 1-4602, se pueden utilizar en la forma de bacterias enteras que pueden estar vivas o no estarlo. Como alternativa se las puede emplear en la forma de lisado bacteriano o en la forma de fracciones bacterianas. Las fracciones bacterianas adecuadas para esta utilización se pueden elegir, por ejemplo, sometiendo a prueba sus propiedades para aliviar los efectos sobre los niveles del VIP del modelo de cocultivo que se describe en la presente solicitud. De preferencia, las células bacterianas están presentes como células vivas y viables.

Cuando las bacterias están en la forma de bacterias vviivvaass,, la composición típicamente puede comprender de 105 a 1013 cfu; de preferencia, cuando menos 106 cfu; de mayor preferencia, cuando menos 107 cfu; aún de mayor preferencia, cuando menos 108 cfu y, de máxima preferencia, cuando menos 109 cfu por g de peso seco de la composición. En el caso de una composición líquida, esto corresponde en general a 104 a 1012 cfu/ml; de preferencia, cuando menos 105cfu/ml; de mayor preferencia, cuando menos 106 cfu/ml; aún de mayor preferencia, cuando menos 107 cfu/ml y, de máxima preferencia, cuando menos 109cfu/ml.

La cepa o la composición que obedece a la presente invención es especialmente apropiada para el empleo en la prevención o la reducción, o ambas cosas a la vez, de la incomodidad gastrointestinal o de los trastornos gastrointestinales. Se la puede suministrar a un sujeto de experimentación que sufra incomodidad intestinal o un trastorno intestinal. Por eso es ventajosa para usar en la prevención o la atención de la incomodidad intestinal o de un trastorno intestinal. Entre esa incomodidad o trastornos figuran, por ejemplo, la incomodidad o los trastornos relacionados con los gases, la hinchazón, la distensión abdominal, la constipación y, en algunos aspectos graves, el síndrome de colon irritable (IBS, por sus siglas en inglés) y la enfermedad inflamatoria del intestino (IBD, por sus siglas en inglés).

De acuerdo con uno de los aspectos particulares, la cepa CNCM 1-4602, o la composición que obedece a la presente invención, es para el empleo en el aumento de los niveles de péptido intestinal vasoactivo (VIP) del sistema nervioso entérico en un sujeto de experimentación. De modo más particular, este aumento del nivel de VIP es útil para mejorar la motilidad gastrointestinal, mejorar la peristalsis intestinal o disminuir la permeabilidad intestinal, o hacer estas tres cosas a la vez, en particular en un sujeto de experimentación que tuviera un trastorno que se selecciona del grupo consistente en un trastorno de la motilidad intestinal o de la permeabilidad intestinal, o de ambas cosas a la vez; el síndrome de colon irritable (IBS), tal como IBS-C, IBS-D e IBS-PI, la enfermedad de irritación intestinal (IBD), la constipación y las infecciones intestinales, o en un sujeto de experimentación elegido del grupo consistente en gente añosa, infantes y obesos, la función intestinal de los cuales, en general, se ha de mejorar. El IBS, o colon espástico, es un trastorno funcional del intestino que se caracteriza por dolor abdominal crónico, incomodidad, hinchazón y alteración de los hábitos intestinales en ausencia de cualquier causa orgánica detectable. Pueden predominar la diarrea o la constipación, clasificándose entonces al IBS como IBS-D o IBS-C, respectivamente, o ambos pueden alternarse. El IBS puede empezar después de una infección, denominándoselo entonces IBS-PI (por postinfeccioso) , un evento estresante en la vida o el comienzo de la madurez sin que hubiera otros indicadores médicos .

La composición que obedece a la presente invención se puede utilizar, de esa manera, para el tratamiento o la prevención, o ambas cosas a la vez, de un trastorno que se selecciona del grupo consistente en un trastorno de la motilidad intestinal, un trastorno de la permeabilidad intestinal, el IBS (comprendidos los IBS-D, IBS-C e IBS-PI), la IBD, la constipación y las infecciones intestinales, en especial en personas añosas u obesas o en infantes.

Detalles o ventajas de la presente invención se pueden hallar en el ejemplo no limitante de abajo.

EJEMPLO 1: EFECTO DE LAS BACTERIAS DEL ÁCIDO LÁCTICO SOBRE LA PRODUCCIÓN DEL VIP NEURONAL, EN UN MODELO DE COCULTIVO DE CULTIVOS PRIMARIOS DE SNE Y CÉLULAS T84 Se estudió la respuesta diferencial de las neuronas entéricas primarias sobre la producción del VIP. Después de la interacción de 107 cepas probióticas, comprendidas bacterias del ácido láctico y, en particular, bifidobacterias.

Cepas bacterianas y condiciones de crecimiento Se cultivaron Lactobacilli en medio Man, Rogosa y Sharpe (MRS) (Biokar Diagnostics, Beauvais, Francia), a 37° C en condiciones aeróbicas, durante 24 horas.

Se cultivaron Bif idobacteria en un medio definido que consistía en una base de peptona de triptona (Becton Dickinson, EEUU) a la que se agregó, como suplemento, glucosa (Sigma, Francia), extracto de levadura (Becton Dickinson, EEUU) y hemina (Calbiochem, Francia) y se les hizo crecer a 37° C en condiciones anaeróbicas durante 24 horas. Cepas de B. anímalis ssp. lactis se cultivaron en medio MRS (Biokar Diagnostics),al que se agregó, como suplemento, cisteína (Sigma, Francia) y se las hizo crecer a 37° C en condiciones anaeróbicas durante 24 horas. Obtención de un modelo de cocultivo de cultivos primarios de SNE y células T84 Para el cribado de bacterias se utilizó un modelo de cocultivo desarrollado por Moriez y col. ( Biochem. Biophys . Res. Commun . , 382(3):577-82, 2009), con células neuronales entéricas cultivadas con células epiteliales T84 del intestino.

Se obtuvieron cultivos primarios de SEN de rata según lo que se describiera previamente (Chevalier y col., J. Physiol . , 586(7):1963-75, 2008).

La linea de células T84 se cultivó en DMEM-F12 (1:1, GIBCO) al que se agregó, como suplemento, 10% de FBS inactivado por calor y 50 Ul/ml de penicilina y 50 mg/ml de estreptomicina. Se sembró células en filtros de 12 alvéolos Transwell® (Corning, NY EEUU) en una densidad de 2 x 105 células / inserción y se las cultivó para obtener confluencia. 24 horas antes del asentamiento del cocultivo, al medio de cultivo de las células T84 se la remplazó por medio SNE primario.

Un dia después de que las células epiteliales llegaran a confluencia, se transfirieron filtros Transwell® en las placas de 12 alvéolos sembradas en el fondo con células nerviosas entéricas. Se cocultivaron células epiteliales y neuronales en el medio para células epiteliales.

Se lavó cultivos bacterianos en PBS y se los volvió a suspender en un medio Medio Eagle Modificado de Dulbecco (DMEM): Mezcla de Nutrientes F-12 (de Ham) (1:1), que contiene 1% de suplemento N-2 (Life Technologies, Cergy-Pontoise, Francia). A cada cepa de bacteria se la sometió a prueba por triplicado como mínimo, con el objeto de llevar a cabo el análisis de la varianza. Las cepas se añadieron en el compartimiento de filtros en una MOI de 40 bacterias / célula epitelial. Como testigo, no se añadieron bacterias. Después de 8 horas de coincubación se extrajo el compartimiento de filtros que contenía células epiteliales y bacterias y al cultivo primario de SNE se lo mantuvo durante 22 horas en la incubadora (95% de aire, 5% de CO2) a 37° C. En los alvéolos testigo se estimularon células neuronales con 40 M de KC1, cuando se llevaron a cabo las mediciones del VIP.

Mediciones del VIP Después, las células del SNE se recogieron de las placas de 12 alvéolos y se las utilizó para preparar extractos de proteina para la cuantificación del péptido intestinal vasoactivo (VIP). Para la determinación del VIP intracelular, a las proteínas intracelulares se las extrajo utilizándose solución madre para lisis RIPA (Millipore, Billerica, MA, EEUU) que contenía un cóctel dé inhibidores de proteasas (Roche Diagnostics, Mcylan, Francia). Al VIP se lo cuantificó utilizándose un equipo comprado de análisis para el inmunoensayo de enzimas (EIA, por sus siglas en inglés) (Península Laboratories, Bachem, SA). Método estadístico para el modelo de SNE A todos los valores del marcador de VIP se les normaliza por medio del testigo negativo (T84), de acuerdo con la fórmula siguiente: (VIPcepa - VIPT84) / VIPT84.

A las cepas se ordenan de acuerdo con su valor estimado de normalización, que proviene de un modelo mixto con la cepa como efecto fijo. El modelo dio un valor P asociado con cada valor normalizado estimado para cada epa. Si el valor P era inferior al (< 0,05), el efecto la cepa era significativo Los resultados se muestran en la Tabla 1 de abajo.

Tabla 1: El KC1, utilizado como testigo positivo, aumentó el nivel del VIP en un promedio del 15,7%.

Nueve cepas tuvieron la capacidad de aumentar de manera significativa el nivel del VIP, desde el 0,18 hasta el 62,5%. La Tabla 1 da los resultados que se obtuvieron para 7 de ellas. Entre las 9 cepas, la de B. animalis ssp. animalis CNCM 1-4602 demostró aumentar el VIP hasta el nivel más elevado: hubo un aumento del 62,5%, respecto del nivel que se obtuvo en ausencia de cualesquiera cepas.

Por otro lado se observó que 15 cepas disminuían significativamente (P < 0,05) el nivel del VIP. Los resultados correspondientes a 10 de estas 15 cepas se indican en la Tabla 1.

Las otras cepas que se sometieron a prueba no tuvieron un efecto significativo (P > 0,05) sobre el VIP, comprendidas, por ejemplo, Bifidobacterium longum NCC 2705 (CNCM 1-2618), Lactobacillus rhamnosus GG (ATCC 53103), Bifidobacterium inf antis UCC 3564, Bifidobacterium longum Bb536, Bifidobacterium animalis ssp. lactis Bi-07 (ATCC SD 5220), Lactobacillus johnsonii Lal (CNCM 1-1225), Lactobacillus plantarum 299v (DSM 9843) y Lactobacillus reuteri SD 2112 (ATCC 55730).

Claims (8)

REIVINDICACIONES

1. Una cepa de Bif idobacterium animalis subespecie animalis que se depositó el 6 de marzo de 2012 bajo el número 1-4602 en la CNCM ( Collection Nationale de Cultures de Microorganismes) [Colección Nacional de Cultivos de Microorganismos] .

2. Una composición que consta de la cepa según la reivindicación 1 y de, cuando menos una, cepa de otras bacterias, que se selecciona a partir del grupo consistente en Bif idobacterium breve CNCM 1-4321, Bif idobacterium breve CNCM 1-2219, Bif idobacterium animalis ssp. lactis CNCM I-2494, Lactobacillus plantarum CNCM 1-4318, Bif idobacterium bifidum CNCM 1-4319 y Lactobacillus rhamnosus CNCM 1-4316.

3. La composición según la reivindicación 2, caracterizado porque es un producto lácteo; de preferencia, un producto lácteo fermentado.

4. La composición según las reivindicaciones 2 o 3, caracterizado porque consta de, cuando menos, 105 cfu; de preferencia, de, cuando menos, 106 cfu, por g de peso seco, de Bif idobacterium animalis ssp. animalis CNCM I-4602.

5. La cepa según la reivindicación 1 o la composición según una cualquiera de las reivindicaciones 2 a 4, para la utilización en la prevención y/o reducción, de la incomodidad gastrointestinal o los trastornos gastrointestinales.

6. La cepa según la reivindicación 1 o la composición según una cualquiera de las reivindicaciones 2 a 4, para la utilización en el aumento de los niveles de péptido intestinal vasoactivo (VIP) del sistema nervioso entérico en un sujeto de experimentación.

7. La cepa según la reivindicación 1 o la composición según una cualquiera de las reivindicaciones 2 a 4, para la utilización en el mejoramiento de la motilidad gastrointestinal, el mejoramiento de la peristalsis intestinal y/o la disminución de la permeabilidad intestinal.

8. La cepa o la composición para utilización según la reivindicación 5, en donde el trastorno se selecciona del grupo consistente en un trastorno de la motilidad intestinal, un trastorno de la permeabilidad intestinal, el síndrome de colon irritable (IBS), la enfermedad inflamatoria del intestino (IBD), la constipación y las infecciones intestinales.