MX2014013931A - Metodos para tratar el cancer gastrico. - Google Patents

Abstract

La solicitud proporciona métodos de detección, diagnóstico, prognosis, profilaxis y tratamiento del cáncer gástrico que expresa el receptor alfa del folato con el uso de anticuerpos que se unen específicamente al receptor alfa del folato.

Description

MÉTODOS PARA TRATAR EL CÁNCER GÁSTRICO CAMPO DE LA INVENCION El tema descrito en la presente descripción se refiere a métodos de profilaxis y tratamiento del cáncer gástrico que expresa el receptor alfa del folato con el uso de proteínas de unión al antígeno anticuerpos y fragmentos de estos de unión al que se unen específicamente al receptor alfa del ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN El folato fótico o vitamina es esencial para la biosíntesis de bases de nucleótidos y para muchas otras reacciones de Las células que se dividen tal como las células requieren mayores cantidades de ácido Los receptores de folato pueden mediar el transporte unidireccional de folatos a las Entre las cuatro isoformas de receptores del folato identificadas y las isoformas a y b del receptor del folato son proteínas ancladas al glicosilfosfatidilinositol con dos sitios de y ambas tienen una afinidad alta de aproximadamente 1 por el Elnakat et Adv Drug Deliv Rev El receptor alfa del folato como o se expresa en varios tejidos epiteliales que incluyen tejidos del plexo trompas de y glándulas SD et Cáncer Res Weitman SD et Cáncer Res El cáncer gástrico o estomacal es un cáncer que se forma en tejidos que revisten el De conformidad con el centro National Cáncer se calcula que en 2012 se diagnosticará alrededor de casos nuevos de hombres y de cáncer de estómago en los Estados La mayoría de los individuos a quien se diagnostique la enfermedad serán personas mayores de 70 se calcula que en 2012 fallecerán personas por cáncer de estómago en los Estados De conformidad con la Organización Mundial de la se calcula que en 2008 se produjeron aproximadamente casos nuevos de cáncer de de manera que es la cuarta malignidad más común en el Más del 70 de los casos se produjeron en países en desarrollo en en Las tasas de incidencia de cáncer de estómago más altas se observaron en Asia Oriental Japón y El cáncer de estómago fue la segunda causa principal de muerte por cáncer en ambos sexos en el mundo Las tasas de mortalidad más altas calculadas corresponden a Asia Oriental por en por en La detección y tratamiento temprano del cáncer gástrico mejora las tasas de supervivencia y calidad de Con el fin de mejorar la probabilidad de detección y tratamiento existe una necesidad urgente de métodos no invasivos para diagnosticar el cáncer determinar el nivel de riesgo del cáncer gástrico en predecir el avance del cáncer gástrico y tratar el cáncer La presente invención satisface estas necesidades relacionadas con el cáncer gástrico que expresa el receptor alfa del SUMARIO DE LA INVENCIÓN En la presente descripción se proporcionan métodos para tratar el cáncer gástrico que expresa el receptor alfa del folato en un sujeto que necesita dicho Los métodos implican la administración de una cantidad terapéuticamente eficaz de un anticuerpo antireceptor del folato o un fragmento de unión al antigeno de En algunas el anticuerpo comprende una CDR1 de cadena pesada que comprende las secuencias de aminoácidos de la con de CDR2 que comprende las secuencias de aminoácidos de la con de 2 y CDR3 que comprende las secuencias de aminoácidos de la con de y una CDR1 de cadena liviana que comprende las secuencias de aminoácidos de la con de CDR2 de cadena liviana que comprende las secuencias de aminoácidos de la con de 5 y CDR3 que comprende la secuencia de aminoácidos de la con de En algunas modalidades el anticuerpo es En modalidades el anticuerpo o fragmento de unión al antigeno se suministra por administración El anticuerpo o fragmento de unión al antigeno se puede administrar En algunas el anticuerpo o fragmento se administra en una dosificación de aproximadamente 50 a 400 en la presente descripción se proporcionan métodos para detectar el cáncer gástrico que expresa el receptor alfa del folato en una muestra En algunas los métodos implican la exposición de la muestra a un anticuerpo que se une específicamente al receptor alfa del folato que comprende una cadena pesada que comprende una CDR1 que comprende la secuencia de aminoácidos de la con de una CDR2 que comprende la secuencia de aminoácidos de la con de 14 y una CDR3 que comprende la secuencia de aminoácidos de la con de 15 y una cadena liviana que comprende una CDR1 que comprende la secuencia de aminoácidos de la con de una CDR2 que comprende la secuencia de aminoácidos de la con de 10 y una CDR3 que comprende la secuencia de aminoácidos de la con de 11 o un fragmento de unión al antígeno de o un anticuerpo o un fragmento de unión al antigeno de este capaz de unirse al epítopo del receptor alfa del folato que está unido por un anticuerpo que se une específicamente al receptor alfa del folato que comprende una cadena pesada que comprende una CDR1 que comprende la secuencia de aminoácidos de la con de una CDR2 que comprende la secuencia de aminoácidos de la con de 14 y una CDR3 que comprende la secuencia de aminoácidos de la con de 15 y una cadena liviana que comprende una CDR1 que comprende la secuencia de aminoácidos de la con de una CDR2 que comprende la secuencia de aminoácidos de la con de 10 y una CDR3 que comprende la secuencia de aminoácidos de la con de seguido de la detección del receptor alfa del En algunas el anticuerpo o fragmento de unión al antigeno se fija a un soporte se proporcionan métodos para tratar el cáncer gástrico que expresa el receptor alfa del folato en un sujeto que necesita dichos métodos por medio de la detección del cáncer gástrico que expresa el receptor alfa del folato en una muestra biológica mediante la exposición de la muestra a un primer anticuerpo que se une específicamente al receptor alfa del folato o a un fragmento de unión al antígeno de la detección del receptor alfa del folato y la administración al sujeto de una cantidad terapéuticamente eficaz de un segundo anticuerpo que se une específicamente al receptor alfa del folato o a un fragmento de unión al antígeno de En algunas el primer anticuerpo que se une específicamente al receptor alfa del folato comprende una cadena pesada que comprende una CDR1 que comprende la secuencia de aminoácidos de la con de una CDR2 que comprende la secuencia de aminoácidos de la con de 14 y una CDR3 que comprende la secuencia de aminoácidos de la con de 15 y una cadena liviana que comprende una CDR1 que comprende la secuencia de aminoácidos de la con de una CDR2 que comprende la secuencia de aminoácidos de la con de 10 y una CDR3 que comprende la secuencia de aminoácidos de la con de En algunas el primer anticuerpo que se une específicamente al receptor alfa del folato es un anticuerpo capaz de unirse al epítopo del receptor alfa del folato que está unido por un anticuerpo que se une específicamente al receptor alfa del folato que comprende una cadena pesada que comprende una CDR1 que comprende la secuencia de aminoácidos de la con de una CDR2 que comprende la secuencia de aminoácidos de la con de 14 y una CDR3 que comprende la secuencia de aminoácidos de la con de 15 y una cadena liviana que comprende una CDR1 que comprende la secuencia de aminoácidos de la con de una CDR2 que comprende la secuencia de aminoácidos de la con de 10 y una CDR3 que comprende la secuencia de aminoácidos de la con de El primer anticuerpo o fragmento de unión al antígeno se a un soporte En algunas el segundo anticuerpo que se une específicamente al receptor alfa del folato comprende una CDR1 de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la con de CDR2 que comprende la secuencia de aminoácidos de la con de y CDR3 que comprende la secuencia de aminoácidos de la con de y una CDR1 de cadena liviana que comprende la secuencia de aminoácidos de la con de CDR2 de cadena liviana que comprende la secuencia de aminoácidos de la con de 5 y CDR3 que comprende la secuencia de aminoácidos de la con de En modalidades el segundo anticuerpo es La etapa de administración puede implicar la inyección intravenosa de ese segundo anticuerpo o fragmento de unión al La etapa de administración puede comprender la administración semanal del segundo anticuerpo o fragmento de unión al En algunas el segundo anticuerpo o fragmento de unión al antígeno se administra en una dosificación de aproximadamente 50 a aproximadamente 400 una dosificación de aproximadamente 400 BREVE DESCRIPCIÓN DE LAS FIGURAS La Figura 1 muestra el cambio en la suma del diámetro más grande del tumor y el nivel del antígeno carcinoembrionario del marcador tumoral en el paciente con cáncer gástrico DESCRIPCION DETALLADA DE LA INVENCION A lo largo de la especificación y reivindicaciones se usa varios términos relacionados con aspectos de la Dichos términos se proporcionan en su significado común en la materia a menos que se indique de cualquier otra Otros términos definidos específicamente se interpretarán de manera consistente con las definiciones proporcionadas en la presente Como se usa en esta especificación y en las reivindicaciones las formas singulares y incluyen los equivalentes en plural a menos que el contenido indique claramente lo Por lo por la referencia a incluye una combinación de dos o más y lo El término se refiere a polipéptidos de es polipéptidos de la familia de inmunoglobulinas que contienen un sitio de unión al antígeno que se une específicamente a un antígeno específico el receptor alfa del e incluye todos los isotipos IgD e clases subclases y varias formas monoméricas y poliméricas de cada isotipo de las a menos que se especifique de cualquier otra manera y variantes sustituidas conservadoramente de dichos polipéptidos de inmunoglobulina que se unen inmunoespecífreamente al antígeno receptor alfa del Los anticuerpos se por en Harlow A Laboratory Manual Spring Harbor Laboratory A menos que sea evidente de cualquier otra manera a partir del la referencia a un anticuerpo los derivados del anticuerpo tal como se describe más abajo con mayor de comprende una porción de un anticuerpo en toda su la región de unión al antígeno o región variable de tal como fragmentos y anticuerpos anticuerpos moléculas de anticuerpos y anticuerpos multiespecificos formados a partir de fragmentos de Se han desarrollado varias téenicas para la producción de fragmentos de anticuerpos que incluyen digestión proteolitica de anticuerpos y producción recombinante en células sin otras técnicas para la producción de fragmentos de anticuerpos resultarán evidentes para el experto en la En algunas el fragmento del anticuerpo elegido es un fragmento Fv monocatenario Los fragmentos de anticuerpos o comprenden los dominios VH y VL de en donde estos dominios están presentes en una sola cadena de el polipéptido del Fv un conector de polipéptidos entre los dominios VH y VL que permite al scFv formar la estructura deseada para la unión al Un análisis del scFv y otros fragmentos de anticuerpos se incluye en James Antibody capitulo Oxford University Press Un de significa un tal como se definió modificado por unión covalente de una molécula heteróloga tal por por medio de la unión de un polipéptido heterólogo o por medio de acetilación o fosforilación no asociada normalmente con el y lo El término se refiere a un anticuerpo derivado de un clon de una sola célula que incluye cualquier clon de células eucariotas o procariotas o un clon del fago y no al método por el cual se Por lo el término no se limita a anticuerpos producidos a través de teenología de Un es una entidad a la cual un anticuerpo se une El receptor alfa del folato es el antígeno al cual se une específicamente un anticuerpo del antirecepor alfa del Los términos y son muy conocidos en la materia y se refieren a la por en un de células que tienen características típicas de células que causan tales como proliferación potencial índice de crecimiento y proliferación rápida y ciertos rasgos morfológicos Las células cancerosas en la forma de un pero dichas células pueden estar en un sujeto en forma individual o pueden ser células cancerosas no tales como las células de la Como se usa en la presente el término incluye cánceres premalignos asi como cánceres Como se usa en la presente un gástrico que expresa el receptor alfa del incluye cualquier tipo de cáncer gástrico caracterizado porque las células cancerosas expresan o presentan el receptor alfa del folato en su Los cánceres gástricos que expresan el receptor alfa del folato sin limitarse adenocarcinomas gástricos del tipo tipo diferenciado de células en anillo de y adenocarcinoma sarcomas de tejido blando leiomiosarcomas y tumores estromales linfomas tejidos linfoides asociados a mucosas tumores carcinoides y carcinomas neuroendócrinos de células Como se usa en la presente un sujeto que de cáncer gástrico que expresa el receptor alfa del es un sujeto al cual un profesional clínico calificado diagnosticó clínicamente ese cáncer por los métodos descritos en la presente o aquel que exhibe uno o más signos o síntomas de dicho cáncer y al un profesional clínico calificado diagnostica clínicamente ese cáncer por los métodos descritos en la presente un sujeto no humano útil como modelo animal de cáncer gástrico que expresa el receptor alfa del folato puede estar comprendido dentro del alcance de la definición de un sujeto que de cáncer gástrico que expresa el receptor alfa del El término o significa reducir en una cantidad medible o evitar El término en el contexto del efecto de un anticuerpo del receptor alfa del folato en células que expresan el receptor alfa del se refiere a una reducción en la cantidad o a la eliminación de las células que expresan el receptor alfa del El término en el contexto de un anticuerpo del antireceptor alfa del folato que se usará de conformidad con los métodos descritos en la presente indica que el anticuerpo es capaz de unirse al receptor alfa del folato disminuye o inhibe la proliferación de las células que expresan el receptor alfa del El término se refiere a la administración de un anticuerpo del antireceptor alfa del folato o fragmento de unión al antígeno de este a un sujeto antes del inicio de un síntoma clínico o diagnóstico de un cáncer gástrico que expresa el receptor alfa del folato administración a un individuo que tiene predisposición o un riesgo alto de contraer cáncer para bloquear la ocurrencia o el inicio del cáncer gástrico que expresa el receptor alfa del folato o uno o más síntomas clínicos o diagnósticos de inhibir la gravedad del inicio del cáncer gástrico que expresa el receptor alfa del folato o reducir la probabilidad de inicio del cáncer gástrico que expresa el receptor alfa del Los términos o se refieren a detener o revertir el avance de un cáncer gástrico que expresa el receptor alfa del folato en un tal como se evidencia por la reducción o eliminación de un síntoma clínico o diagnóstico de la mediante la administración de un anticuerpo del antireceptor alfa del folato o fragmento de unión al antígeno de este al sujeto después del inicio de un síntoma clínico o diagnóstico del cáncer gástrico que expresa el receptor alfa del folato en cualquier etapa El tratamiento puede por una reducción en la gravedad de un la cantidad de síntomas o frecuencia de El término se refiere a aquellas propiedades sustancias que son aceptables para el paciente desde un punto de vista y para el químico farmacéutico del fabricante desde un punto de vista con respecto a la aceptación del paciente y biodisponibilidad e incluye las propiedades sustancias aprobadas por un organismo regulador del gobierno Federal o estatal o listadas en la Farmacopea de los Estados Unidos u otra farmacopea reconocida generalmente para uso en animales más en seres El término farmacéuticamente se refiere a un excipiente o vehículo farmacéuticamente aceptable con el cual se administra un anticuerpo del antireceptor alfa del farmacéuticamente se refiere a un medio que no interfiere con la eficacia de la actividad biológica del o los ingredientes activos y que no es tóxico para el huésped al cual se Los términos y terapéuticamente se usan indistintamente en la presente descripción en el contexto de la administración de un agente se refieren a la cantidad de agente que es suficiente para inhibir la ocurrencia o mejorar uno o más síntomas clínicos o diagnósticos de un cáncer gástrico que expresa el receptor alfa del folato en un Una cantidad terapéuticamente eficaz de un agente puede variar de conformidad con factores tales como la condición de la género y peso de la persona y la capacidad del anticuerpo o fragmento de unión al antígeno de este para obtener una respuesta deseada en el Tales resultados pueden sin limitarse el tratamiento de un cáncer gástrico que expresa el receptor alfa del tal como se determina por cualquier medio adecuado en la Una cantidad eficaz de un agente se administra de conformidad con los métodos descritos en la presente descripción en un El término se refiere a una combinación entre la cantidad del agente y la frecuencia de dosificación adecuada para tratar un cáncer gástrico que expresa el receptor alfa del Los términos y se usan indistintamente para referirse a seres humanos y otros animales no humanos que incluyen animales que reciben tratamiento de profiláctico o El término no incluye todos los por mamíferos y no tales como primates no anfibios y En una modalidad el sujeto es un ser En algunas el sujeto es de descendencia los agentes terapéuticos están sustancialmente puros de contaminantes Esto significa que un agente al menos 50 de y que está sustancialmente libre de proteínas y contaminantes Algunas la pureza de los agentes es de al menos aproximadamente 80 con mayor al menos 90 o aproximadamente 95 Sin el uso de téenicas convencionales de purificación de proteínas permite obtener péptidos homogéneos con una pureza de al menos 99 General La invención proporciona métodos de profilaxis y tratamiento y monitoreo del tratamiento del cáncer gástrico que expresa el receptor alfa del folato con el uso de anticuerpos para el receptor alfa del folato o fragmento de unión al antígeno de Los métodos están en en los resultados presentados en los ejemplos que muestran que el receptor alfa del folato se expresa en ciertos cánceres gástricos y que la estabilización de la enfermedad a largo plazo del cáncer gástrico que expresa el receptor alfa del folato puede obtenerse mediante la administración de un anticuerpo del antireceptor alfa del Anticuerpos para el receptor alfa del folato La siguiente descripción considera primero las propiedades de los anticuerpos para el receptor alfa del folato aplicables a la detección del receptor alfa del folato en el cáncer gástrico y tratamiento de este se centra en las propiedades preferidas de los anticuerpos para dicha Anticuerpos para el receptor alfa del folato en Los anticuerpos del antireceptor alfa del folato incluyen anticuerpos quiméricos que tienen una región constante en seres humanos y una región variable en recubiertos o anticuerpos monocatenarios o lo Las moléculas de inmunoglobulina pueden ser de cualquier tipo o clase IgA e o subclase IgAl e Los anticuerpos del antireceptor alfa del folato pueden ser un fragmento de anticuerpos de unión al tal como una cadena de Fv monocatenario un anticuerpo Fv vinculado a disulfuro un fragmento que comprende un dominio VL o que incluyen nanocuerpos o fragmentos de llamas o lo o fragmentos producidos por una genoteca de expresión de Fab o fragmentos de unión al receptor alfa del folato de cualquiera de los anticuerpos anteriores descritos supra Los fragmentos de anticuerpos de unión al que incluyen anticuerpos pueden comprender la o las regiones variables solas o en conjunto con la totalidad o una parte la región bisagra o los dominios CH3 y los fragmentos de unión al antigeno pueden comprender cualquier combinación de regiones variables con una región bisagra o con los dominios CH3 y los anticuerpos son de seres humanos o de roedores ratón y conejillos de caballos o Los anticuerpos pueden ser monoespecí triespecificos o de una multiespecíficidad Los anticuerpos multiespecíficos pueden ser específicos para los distintos epítopos del receptor alfa del folato o pueden ser específicos para el receptor alfa del folato y para una proteína por las publicaciones de patentes internacionales WO WO WO WO Tutt et patentes de los y Kostelny et Los anticuerpos del antireceptor alfa del folato pueden en términos de su afinidad de unión al receptor alfa del de 5 x 10 5 x 14 M o Un anticuerpo del antireceptor alfa del folato puede ser un anticuerpo Un anticuerpo quimérico es una molécula en la cual distintas porciones del anticuerpo se derivan de especies animales tales como anticuerpos que tienen una región variable derivada de un anticuerpo monoclonal murino y una región constante de inmunoglobulina En la materia se conocen métodos para producir anticuerpos por Oi et 1986 BioTechniques Gillies et Methods patentes de los y Un anticuerpo del antireceptor alfa del folato puede un anticuerpo humanizado que incluye un anticuerpo Los anticuerpos humanizados son moléculas de anticuerpos que se unen al antigeno deseado y tienen una o más regiones determinantes de la complementariedad a partir de una especie no humana y regiones de marco y constantes a partir de una molécula de inmunoglobulina los residuos de marco en las regiones de marco en humanos se sustituirán por el residuo correspondiente del anticuerpo dador de CDR para alterar mejorar la unión al Estas sustituciones de marco se identifican por métodos muy conocidos en la por mediante el modelado de las interacciones de los residuos de la CDR y de marco para identificar residuos de marco importantes para la unión al antigeno y la comparación de secuencias para identificar residuos de marco inusuales en posiciones por Queen et patente de los Riechmann et Nature Los anticuerpos pueden humanizarse con el uso de diversas téenicas conocidas en la materia tal como injerto de CDR EP O 239 patente WO patentes de los y recubrimiento o revestimiento EP 0 592 EP 0 519 Molecular Studnicka et Protein Engineering Roguska et PNAS y barajado de cadenas de los estas referencias se incorporan en la presente descripción como Un anticuerpo del antireceptor alfa del folato puede un anticuerpo Los anticuerpos humanos pueden elaborarse por diversos métodos conocidos en la tal como métodos de exhibición de fagos con el uso de genotecas de anticuerpos derivados de secuencias de inmunoglobulina por las patentes de los y patentes WO WO WO WO WO y WO un anticuerpo humano que reconoce un epitopo seleccionado puede generarse con el uso de una téenica a la que se hace referencia como en la cual un anticuerpo monoclonal no humano por un anticuerpo de se usa para guiar la selección de un anticuerpo completamente humano que reconoce el mismo epítopo por Jespers et Biotechnology Los anticuerpos humanos pueden con el uso de ratones transgénicos que expresan genes de inmunoglobulina Los anticuerpos monoclonales dirigidos contra el antigeno pueden obtenerse a partir de los ratones transgénicos inmunizados con el uso de teenología de Un análisis sobre la tecnología para producir anticuerpos humanos se encuentra en Lonberg and Para conocer una descripción detallada sobre esta tecnología útil para producir anticuerpos humanos y anticuerpos monoclonales humanos y protocolos para producir dichos por las publicaciones de patentes internacionales WO WO WO WO la patente europea y las patentes de los y Los anticuerpos pueden ensayarse para determinar la unión específica al receptor alfa del folato por métodos tal por sistemas de inmunoensayos competitivos y no competitivos con el uso de técnicas tales como Western ELISA por inmunoabsorción ligado a inmunoensayos ensayos de reacciones de reacciones de precipitación por difusión en ensayos de ensayos de ensayos de fijación de ensayos inmunoensayos inmunoensayos de la proteína por Ausubel et Short Protocols in Molecular Biology New Harlow Using A Laboratory Manual Spring Harbor Laboratory Coid Spring la afinidad de unión de un anticuerpo al receptor alfa del folato y la constante de disociación de la interacción entre un anticuerpo y un receptor alfa de folato pueden determinarse mediante ensayos de unión Un ejemplo de un ensayo de unión competitivo es un radioinmunoensayo que comprende la incubación del receptor alfa del folato marcado 3H o con el anticuerpo de interés en presencia de cantidades crecientes del receptor alfa del folato no marcado y la detección del anticuerpo unido al receptor alfa del folato la afinidad del anticuerpo por el receptor alfa del folato y las constantes de disociación de la unión pueden determinarse a partir de los datos por medio del análisis del gráfico de La competencia con un segundo anticuerpo puede con el uso de En este el receptor alfa del folato se incuba con el anticuerpo de interés conjugado con un compuesto marcado 3H o en presencia de cantidades crecientes de un segundo anticuerpo no la afinidad de unión de un anticuerpo al receptor alfa del folato y las constantes de asociación y disociación de la interacción entre un anticuerpo y un receptor alfa del folato pueden determinarse por medio de resonancia de plasmones Los anticuerpos pueden prepararse a partir de fragmentos que contienen antigeno de la proteina del receptor alfa del folato mediante procedimientos estándar de conformidad con el tipo de anticuerpo por et Harlow A Laboratory Manual Queen et USA y la patente WO Dower et patente WO y McCafferty et patente una de las cuales se incorpora como referencia para todo Como los anticuerpos monoclonales pueden prepararse con el uso de una amplia variedad de téenicas que por el uso de tecnologías de recombinantes y exhibición de fagos o una combinación de Las téenicas de hibridomas se por en Harlow et y et en Monoclonal Antibodies and Los ejemplos de métodos de exhibición de fagos que se pueden usar para preparar los anticuerpos del antireceptor alfa del folato por aquellos descritos en Brinnan et Methods Ames et Methods Kettleborough et Persic et Gene Burton et Advances in Immunology solicitud del PCT solicitudes del PCT WO WO WO WO WO WO WO y las patentes de los y descripciones de las cuales se incorporan en la presente descripción como Las técnicas para generar fragmentos de anticuerpos que reconocen epitopos específicos se en la Por los fragmentos Fab y pueden producirse mediante fragmentación proteolitica de moléculas de con el uso de enzimas tales como papaina producir fragmentos o pepsina producir fragmentos Los fragmentos contienen la región la región constante de cadena liviana y el dominio CH1 de la cadena Las téenicas para producir recombinantemente fragmentos y se pueden por a través de los métodos descritos en la patente WO Mullinax et BioTechniques y Sawai et AJRI y Better et Science descripciones de las cuales se incorporan en la presente descripción como Los ejemplos de técnicas que pueden usarse para producir Fvs monocatenarios y anticuerpos incluyen aquellas descritas en las patentes de los y Huston et Methods in Enzymology Shu et USA y Skerra et Science Los anticuerpos del antireceptor alfa del folato y derivados de estos que son útiles en los métodos de la presente descripción pueden mediante téenicas de expresión La expresión recobinante de un anticuerpo o derivado de este que se une al receptor alfa del folato disminuye o inhibe la proliferación de las células que expresan el receptor alfa del folato requiere la construcción de un vector de expresión que contiene un ácido nucleico que codifica el anticuerpo o derivado de Una vez que se obtiene un ácido nucleico que codifica dicha el vector para la producción de la molécula proteica puede producirse mediante tecnología de ADN recombinante con el uso de técnicas muy conocidas en la Las técnicas tales como aquellas descritas en Sambrook and Molecular A Laboratory Manual Spring Harbor Laboratory Coid Spring Sambrook et Molecular A Laboratory Manual Spring Harbor Laboratory Coid Spring Ausubel et Short Protocols in Molecular Biology New y Glick Molecular Principies and Applications of Recombinant DNA pueden usarse para los métodos en los que se usa ácido nucleico síntesis del ácido cultivo incorporación de transgenes y expresión de proteína Por para la expresión recombinante de un anticuerpo del antireceptor alfa del un vector de expresión puede codificar una cadena pesada liviana de este o un dominio variable de cadena pesada unido operativamente a un Un vector de expresión puede por la secuencia de nucleótidos que codifica la región constante de la molécula del anticuerpo por las patentes WO WO y la patente de los y el dominio variable del anticuerpo puede clonarse en ese vector para la expresión de la cadena pesada o liviana El vector de expresión se transfiere a una célula huésped por téenicas conocidas y las células transfectadas se para producir el anticuerpo del antireceptor alfa del para la expresión de los anticuerpos de cadena los vectores que codifican las cadenas pesada y liviana pueden coexpresarse en la célula huésped para la expresión de toda la molécula de Una variedad de sistemas de vectores de expresión de huéspedes procariotas y eucariotas puede usarse para expresar un anticuerpo del antireceptor alfa del folato o derivado de las células particularmente para moléculas enteras de anticuerpos del antireceptor alfa del folato se usan para la expresión de la proteina Por las células tales como las células NSO o células de ovario de hámster chino DG44 o junto con un elemento tal como el elemento promotor de genes tempranos intermedios principales del citomegalovirus humano o el promotor lalfa del ovario de hámster chino constituyen un sistema de expresión eficaz para la producción de anticuerpos del antireceptor alfa del folato y derivados de estos por Foecking et Gene Cockett et patente de los Otros sistema de expresión de huéspedes incluyen sistemas de expresión basados en plásmidos en células bacterianas por Ruther et EMBO Inouye Nucleic Acids Van Heeke sistemas de tal como el uso del vector de expresión del virus de la poliedrosis nuclear múltiple de Autographa californica en células de Spodoptera y sistemas de expresión viral en células tales como los sistemas basados en adenovirus por Logan USA Bittner et Methods in Anticuerpos para detectar el cáncer gástrico que expresa el receptor alfa del folato Un anticuerpo preferido para detectar el receptor alfa del folato en cánceres gástricos es el anticuerpo monoclonal Otros anticuerpos preferidos para detectar el receptor alfa del folato en cánceres gástricos compiten con 26B3 por la unión especifica al receptor alfa del Otros anticuerpos preferidos para detectar el receptor alfa del folato en cánceres gástricos comprenden una cadena pesada que comprende las tres CDR de la cadena pesada de y una cadena liviana que comprende las tres CDR de la cadena liviana de 26B3 tal como se muestra en la Tabla Otros anticuerpos preferidos para detectar el receptor alfa del folato en cánceres gástricos comprenden una región variable de cadena pesada madura que tiene al menos 90 de identidad de secuencia con la región variable de cadena pesada madura de 26B3 y una región variable de cadena liviana madura que tiene al menos 90 de identidad de secuencia con la región variable de cadena liviana madura de Anticuerpos para el receptor alfa del folato para aplicaciones terapéuticas Los anticuerpos usados para aplicaciones terapéuticas se unen específicamente al receptor alfa del folato en células del cáncer Por el anticuerpo se selecciona del grupo que consiste un anticuerpo que comprende la con de 1 como la con de 2 como la con de 3 como la con de 4 como la con de 5 como CDRL2 y la con de 6 como o un anticuerpo que se une al mismo epítopo que el anticuerpo En algunas el anticuerpo comprende una región variable de cadena liviana madura que comprende la secuencia de aminoácidos de la con de 1 DIQLTQSPSS LSASVGDRVT ITCSVSSSIS SNNLHWYQQK PGKAPKPWIY 51 GTSNLASGVP SRFSGSGSGT DYTFTISSLQ PEDIATYYCQ QWSSYPYMYT 101 FGQGTKVEIK RTVAAPSVFI FPPSDEQLKS GTASVVCLLN NFYPREAKVQ 151 WKVDNALQSG NSQESVTEQD SKDSTYSLSS TLTLSKADYE KHKVYACEVT 201 HQGLSSPVTK SFNRGEC En algunas el anticuerpo comprende una región variable de cadena pesada madura que comprende la secuencia de aminoácidos de la con de 1 EVQLVESGGG VVQPGRSLRL SCSASGFTFS GYGLSWVRQA PGKGLEWVAM 51 ISSGGSYTYY ADSVKGRFAI SRDNAKNTLF LQMDSLRPED TGVYFCARHG 101 DDPAWFAYWG QGTPVTVSSA STKGPSVFPL APSSKSTSGG TAALGCLVKD 151 YFPEPVTVSW NSGALTSGVH TFPAVLQSSG LYSLSSVVTV PSSSLGTQTY 201 ICNVNHKPSN TKVDKKVEPK SCDKTHTCPP CPAPELLGGP SVFLFPPKPK 251 DTLMISRTPE VTCVVVDVSH EDPEVKFNWY VDGVEVHNAK TKPREEQYNS 301 TYRVVSVLTV LHQDWLNGKE YKCKVSNKAL PAPIEKTISK AKGQPREPQV 351 YTLPPSRDEL TKNQVSLTCL VKGFYPSDIA VEWESNGQPE NNYKTTPPVL 401 DSDGSFFLYS KLTVDKSRWQ QGNVFSCSVM KSLSLSPGK En algunas el anticuerpo comprende una región variable de cadena liviana madura que comprende la secuencia de aminoácidos de la con de 7 y una región variable de cadena pesada madura que comprende la secuencia de aminoácidos de la con de Un ejemplo de dicho anticuerpo es Las células de CHO que producen se depositaron en el centro ATCC University VA el 24 de abril de 2006 y se asignó el de identificación a Otros anticuerpos útiles comprenden regiones variables de cadenas liviana y pesada maduras que tienen al menos 90 al menos 95 o 99 de identidad de secuencia con la con de 7 y la con de Otros anticuerpos del antireceptor alfa del folato útiles o derivados de estos pueden inhibir competitivamente la unión de al receptor alfa del tal como se por mediante La inhibición competitiva significa que un cuando está presente en una cantidad excedente de al menos el doble el inhibe la unión de al receptor alfa del folato en al menos 50 al menos 60 aun con mayor al menos 70 con la máxima al menos 75 al menos 80 al menos 85 al menos 90 o al menos 95 Un derivado de un anticuerpo del antireceptor alfa del folato puede en la práctica de los métodos de la presente Las modificaciones típicas por derivatización por grupos fragmentación enlace a un ligando celular u otra proteína y lo el derivado puede contener uno o más aminoácidos no Los anticuerpos descritos y los fragmentos de unión al antígeno pueden marcarse En algunas los anticuerpos y fragmentos de unión al antigeno marcados pueden facilitar la detección de FRA a través de los métodos descritos en la presente Los expertos en la materia conocen muchos marcadores Por los marcadores adecuados pero no se limitan marcadores fluorescentes como etiquetas de marcadores de marcadores ECL o Más los marcadores descritos incluyen ácido dietilentriaminapentaacético peroxidasa de rábano fosfatasa alcalina y tintes de tintes de tintes de tintes de tintes de tintes de tintes y lo similar Detección del receptor alfa del folato Las muestras que se ensayarán para aplicaciones de diagnóstico pueden obtenerse mediante procedimientos por El receptor alfa del folato se mediante un inmunoensayo en el cual una muestra que contiene células que se conoce o supone que son de un cáncer cáncer se pone en contacto con un anticuerpo o fragmento de unión al Después del se determina la presencia o ausencia de un evento de unión del anticuerpo o fragmento de unión al antigeno a las células en el La unión se relaciona con la presencia o ausencia del antigeno expresado en células cancerosas en este la muestra se pone en contacto con un complemento de unión especifico marcado del anticuerpo del antireceptor alfa del folato o fragmento de unión al antigeno capaz de producir una señal el anticuerpo del antireceptor alfa del folato o fragmento propiamente dicho puede Los ejemplos de tipos de marcadores incluyen marcadores de marcadores marcadores no marcadores marcadores de toxinas y marcadores La detección de una señal a partir del marcador indica la presencia del anticuerpo o fragmento unido específicamente al receptor alfa del folato en la Los anticuerpos y anticuerpos de fragmentos de unión al antigeno y fragmentos de unión al antígeno de estos pueden usarse en diversos ensayos para detectar FRA en una Algunos ensayos adecuados pero no se limitan análisis de western diálisis de inmunoensayo de electroquimioluminiscencia clasificación de células activadas por fluorescencia o ensayo En algunas modalidades descritas en la presente descripción la detección de células del cáncer gástrico que expresan FRA en un sujeto puede usarse para determinar que el sujeto puede ser tratado con un agente terapéutico dirigido contra En algunas el agente terapéutico dirigido contra FRA puede ser un tal como En algunas la detección de FRA en una tal como una muestra una muestra de aspirado con aguja tejido tumoral células células tumorales circulantes y lo permite diagnosticar el cáncer gástrico que expresa FRA en el sujeto del cual se obtuvo la En algunas modalidades es posible que ya se conozca que el sujeto del cual se obtuvo la muestra tiene pero posiblemente aun no se diagnosticó el tipo de cáncer que sufre el sujeto o el diagnóstico preliminar puede ser confuso por lo la detección de FRA en una muestra obtenida del sujeto puede permitir o determinar con certeza el diagnóstico de La muestra en la cual se realiza el ensayo puede estar fijada o congelada para permitir el seccionamiento las muestras de tejido extirpado se fijan en fijadores de tal como o fijadores de metales tal como cloruro Con mayor las muestras de tejido extirpado se fijan en formalina y se incorporan en cera de parafina antes de la incubación con el los especímenes de FFPE pueden tratarse con digestión enzimática o calor para aumentar la accesibilidad de los una fracción de la proteína puede aislarse a partir de células de cáncer gástrico conocido o supuesto y analizarse mediante Western inmunoprecipitación o lo En otra las células pueden analizarse para determinar la expresión del receptor alfa del folato por análisis en conjunto con otro marcador celular del cáncer En otra el ARNm puede extraerse a partir de células de cáncer gástrico conocido o el ARNm o un ácido nucleico derivado de él tal como ADNc puede analizarse mediante hibridación a una sonda nucleica que se une al receptor alfa del folato que codifica el En otra un cáncer gástrico puede detectarse in vivo mediante la administración de un anticuerpo del antireceptor alfa del folato marcado o fragmento de unión al antigeno de este a un paciente y la detección del anticuerpo o fragmento mediante captación de imágenes in La detección del receptor alfa del folato en muestras de tejido puede ser cualitativa o cuantitativa o La detección cualitativa significa detectar la presencia o ausencia de la expresión del receptor alfa del La expresión cuantitativa significa determinar un nivel de expresión del receptor alfa del La presencia nivel del receptor alfa del folato en una muestra de tejido gástrico en discusión determinarse con respecto a uno o más Los patrones pueden determinarse históricamente o El patrón puede por una muestra de tejido gástrico no canceroso de un sujeto un tejido del paciente o de otro sujeto que no expresa el receptor alfa del folato o una linea celular El patrón puede la muestra del paciente que se analiza en contacto con un anticuerpo irrelevante un anticuerpo dirigido a un antigeno La presencia de una señal detectable de la unión de un anticuerpo del antireceptor alfa del folato o fragmento al receptor alfa del folato con respecto a un patrón se indica la presencia del receptor alfa del folato en la muestra de y el nivel de unión detectable proporciona una indicación del nivel de expresión del receptor alfa del En ensayos realizados en secciones de el nivel de expresión puede expresarse como un porcentaje del área de superficie de la muestra que exhibe la expresión detectable del receptor alfa del Alternativamente o el nivel de la expresión puede usarse como una medida de la expresión total en la muestra o de las células que expresan el receptor alfa del folato en la diseño y control del tratamiento La detección de la expresión del receptor alfa del folato en una muestra de tejido gástrico es una indicación de que la muestra es La indicación de cáncer proporcionada por la presencia el nivel del receptor alfa del folato puede combinarse con medios de tal como el examen interno o externo de un paciente realizado por un análisis de materia fecal para controlar la presencia de sangre en las recuento sanguíneo completo para controlar la esofagogastroduodenoscopía con exploración por CT exploración por PET por emisión de exploración por MRI de resonancia ensayos para detectar la gonadotropina coriónica humana CA125 antígeno carcinoembrionario en la examen histológico y cultivo tisular para obtener un diagnóstico Tal vez el factor más significativo para el médico es gue la presencia y el nivel del receptor alfa del folato proporciona información útil para diseñar un protocolo de tratamiento para el paciente administrar un anticuerpo contra el receptor alfa del folato o un fragmento de unión al antígeno de este a un Cuanto mayor es el nivel de expresión del receptor alfa del folato mayor el porcentaje de un tumor que expresa el receptor alfa del probablemente más eficaz será el El análisis continuo del receptor alfa del folato después del tratamiento proporciona un medio para controlar si el tratamiento es en donde la estabilización o reducción en el nivel de la señal positiva del receptor alfa del folato como un representante de la presencia de células cancerosas positivas del receptor alfa del es un indicio de que el tratamiento es Pacientes que responden al tratamiento Los pacientes que responden al tratamiento proporcionado por los métodos niveles detectables del receptor alfa del folato en su tejido gástrico además de otros signos y síntomas de tal como se describió Existen diversos subtipos y etapas de cáncer tal como se describe más abajo con mayor Algunas los pacientes tratados por los métodos de la presente descripción recibieron anteriormente otros tipos de tratamiento quimioterapia En algunos el tratamiento anterior puede no haber inducido la remisión o puede haber reducido la velocidad del crecimiento del En algunos de estos pacientes el cáncer es refractario al tratamiento por medio de una o más de esas algunos pacientes en riesgo de padecer cáncer gástrico pueden ser tratados profilácticamente antes de que aparezcan los signos y síntomas de la Tales individuos incluyen aquellos que tienen parientes que han sufrido la aquellos cuyos riesgo se determina mediante análisis de marcadores genéticos o aquellos que tienen una infección estomacal por Helicobacter aquellos que han tenido un pólipo en el estómago con un tamaño mayor que 2 aquellos que han sufrido inflamación e hinchamiento del estómago por un periodo prolongado atrófica aquellos que habitualmente ingieren aquellos que consumen productos del aquellos que consumen alcohol y aquellos que se identificó sufren de anemia La histología del tumor obtenida en un informe patológico permite determinar que una persona sufre de cáncer La histología determina muchos aspectos del manejo y prognosis La mayoría de los tumores gástricos son adenocarcinomas del tipo tipo diferenciado célula de anillo de y adenocarcinoma Otros tumores gástricos incluyen sarcomas de tejido blando leiomiosarcomas y tumores estromales linfomas tejidos linfoides asociados a mucosas tumores carcinoides y carcinomas neuroendócrinos de células La estadificación del cáncer gástrico puede realizarse de conformidad con el sistema de TN En la etapa O in las células anormales se encuentran en el revestimiento interno de la mucosa de la pared Estas células anormales pueden tornarse cancerosas y esparcirse en el tejido normal En la etapa el cáncer ya se ha formado en el revestimiento interno de la mucosa de la pared La etapa I se divide en la etapa IA y la etapa dependiendo del lugar en el que se ha dispersado el En la etapa el cáncer se puede haber dispersado a la submucosa de tejido próxima a la de la pared mientras que en la etapa el se puede haber dispersado a la submucosa de la pared estomacal y se encuentra en 1 o 2 nodos linfáticos cerca del o el cáncer se ha dispersado a la capa muscular de la pared El cáncer gástrico de la etapa II se divide en la etapa IIA y etapa dependiendo del lugar en el cual se dispersó el En la etapa el cáncer se ha dispersado a la subserosa de la pared a la capa muscular de la pared estomacal y se encuentra en 1 o 2 nodos linfáticos cerca del o a la submucosa de la pared estomacal y se encuentra en 3 a nodos linfáticos cerca del En la etapa el cáncer se ha dispersado a la serosa de la pared a la subserosa de la pared estomacal y se encuentra en 1 o 2 nodos linfáticos cerca del a la capa muscular de la pared estomacal y se encuentra en 3 a 6 nodos linfáticos cerca del o a la submucosa de la pared estomacal y se encuentra en 7 o más nodos linfáticos cerca del En la etapa el cáncer gástrico se divide en la etapa etapa IIIB y etapa dependiendo del lugar en el cual se dispersó el En la etapa el cáncer se ha dispersado a la capa serosa de la pared estomacal y se encuentra en 1 o 2 nodos linfáticos cerca del a la subserosa de la pared estomacal y se encuentra en 3 a 6 nodos linfáticos cerca del o a la capa muscular de la pared estomacal y se encuentra en 7 o más nodos linfáticos cerca del En la etapa el cáncer se ha dispersado a órganos cercanos tales como el colon glándula adrenal o intestino delgado y puede encontrarse en o 2 nodos linfáticos cerca del a la serosa de la pared estomacal y se encuentra en 3 a 6 nodos linfáticos cerca del o a la subserosa de la pared estomacal y se encuentra en 7 o más nodos linfáticos cerca del En la etapa el cáncer se ha dispersado a órganos cercanos tales como el colon glándula adrenal o intestino delgado y puede encontrarse en 3 o más nodos linfáticos cerca del a la serosa de la pared estomacal y se encuentra en 7 o más nodos linfáticos cerca del En la etapa el cáncer se ha dispersado a partes distantes del Una alternativa para el sistema de estadificación del TNM es la clasificación de tres etapas localmente avanzado y que se basa en hallazgos se consideran otros factores de La clasificación del cáncer gástrico una indicación de la anormalidad de las células observadas bajo el El nivel proporciona una indicación de la rapidez con la cual pueden desarrollarse las células en donde el nivel 1 indica un crecimiento lento las células están bien y es menos probable que se dispersen en comparación con los niveles más el nivel 2 indica un aspecto más anormal y un crecimiento ligeramente más y el nivel en el cual las células cancerosas tienden a crecer más el aspecto de las células es bastante anormal poco y es más probable que se En el caso de pacientes que fueron operados el alcance de la es si se eliminó o no todo el tumor importante con respecto al A veces esto se indica en una escala de RO a en donde RO indica que todo el tumor que puede observarse se ha extirpado y R2 indica que una parte del tumor que puede observarse no se ha Los síntomas tempranos del cáncer gástrico no son Los síntomas comunes incluyen saciedad o dolor que puede producirse después de una comida materia fecal dificultad para que empeora con el flatulencia empeoramiento general de la pérdida de que pueden contener debilidad o pérdida de Métodos de tratamiento y composiciones farmacéuticas La presente invención proporciona métodos para el tratamiento o profilaxis del cáncer gástrico por los anticuerpos y fragmentos de unión al antígeno que se hace referencia colectivamente en la presente descripción como descritos en la presente descripción que pero no se limitan aquellos descritos en la Parte Para administrar los agentes pueden usarse varios sistemas de suministro que incluyen las vías epidural y Los agentes pueden por mediante infusión o inyección de absorción a través de revestimientos epiteliales o mucocutáneos mucosa rectal e y lo La administración puede ser sistémica o Los agentes pueden administrarse mediante por medio de un por medio de un supositorio o por medio de un el implante es de un material no poroso o que incluye una tal como una membrana de silicona y plático o una los agentes pueden suministrarse en un sistema de liberación Por puede usarse una bomba Science CRC Ref Buchwald et Surgery Saudek et pueden usarse materiales poliméricos Medical Applications of Controlled Release Wise CRC Boca Controlled Drug Drug Product Design and Performance Ball New Ranger Levy et Science During et Howard et Otros sistemas de liberación controlada se por en Los agentes pueden administrarse como composiciones farmacéuticas que comprenden una cantidad de agente con eficacia terapéutica o profiláctica y uno o más ingredientes farmacéuticamente Por la composición farmacéutica uno o más portadores farmacéuticos líquidos tales como agua y que incluyen los basados en o de origen vegetal o tal como aceite de aceite de aceite aceite de sésamo y lo Cuando la composición farmacéutica se administra por vía intravenosa se prefiere usar agua como las soluciones salinas solución salina regulada con y las soluciones acuosas de dextrosa y glicerol pueden usarse como portadores para soluciones Los excipientes farmacéuticos adecuados por gel de estearato monoestearato de cloruro de leche descremada en etanol y lo Si se la composición puede cantidades menores de agentes humectantes o agentes reguladores del pH agentes solubilizantes o estabilizantes surfactantes no iónicos tal como tween o azúcares tales como trehalosa o lo Estas composiciones pueden estar en forma de formulaciones de liberación sostenida y lo se incluyen preparaciones en forma sólida previstas para poco antes del en preparaciones La composición puede formularse como un con aglutinantes tradicionales y portadores tales como La formulación oral puede incluir portadores estándar tales como estearato de sacarina de carbonato de de calidad Los ejemplos de portadores farmacéuticos adecuados se describen en Pharmaceutical de Tales composiciones contendrán una cantidad terapéuticamente eficaz del ácido nucleico o en forma junto con una cantidad adecuada de portador como para proporcionar la forma adecuada para la administración al Las formulaciones corresponden al modo de las composiciones para administración intravenosa son soluciones en regulador acuoso isotónico Cuando es el farmacéutico puede un agente solubilizante y un anestésico local tal como lignocaína para aliviar el dolor en el sitio de la los ingredientes se suministran en forma separada o se mezclan juntos en forma de dosificación por como un polvo liofilizado seco o un concentrado en un recipiente sellado tal como una ampolleta o sachet que indica la cantidad de agente Si la composición farmacéutica es para administrar mediante puede suministrarse en una botella de infusión que contiene agua de calidad farmacéutica estéril o solución salina Si la composición farmacéutica es para administrar mediante puede proporcionarse una ampolleta de agua estéril para inyección o solución salina de manera que los ingredientes puedan mezclarse antes de la Los anticuerpos y fragmentos de unión al antígeno y las composiciones farmacéuticas para usar tal como se describe en la presente descripción pueden administrarse oralmente en cualquier forma de dosificación aceptable tal como suspensiones soluciones o lo Los anticuerpos y fragmentos de unión al antigeno y composiciones farmacéuticas pueden por vía parenteral que pero no se limita téenicas de inyección o infusión en forma intralesional e los anticuerpos y los fragmentos de unión al antigeno y composiciones farmacéuticas se administrarán por vía intravenosa o por mediante La cantidad del agente eficaz para el tratamiento o profilaxis del cáncer gástrico puede determinarse mediante técnicas clínicas pueden ensayos in vitro para ayudar a identificar intervalos de dosificación La dosis precisa que se usará en la formulación de la vía de administración y la etapa del y debería determinarse de conformidad con el criterio del médico y las circunstancias de cada Las dosis eficaces pueden extrapolarse a partir de curvas de respuesta a dosis derivadas de sistemas de prueba de modelos de animales o in Una dosis puede formularse en modelos animales para obtener un intervalo de concentración de plasma circulante que incluye la IC50 la concentración del compuesto de prueba que alcanza una inhibición media máxima de tal como se determina en el cultivo Por la toxicidad y eficacia terapéutica de los agentes puede determinarse en cultivos celulares o animales para experimento mediante procedimientos farmacéuticos estándar para determinar la LD50 dosis letal para el 50 de la y la ED50 dosis terapéuticamente eficaz en 50 de la La relación de dosis entre los efectos tóxicos y terapéuticos es el índice terapéutico y puede expresarse como la relación Se prefieren los agentes que exhiben índices terapéuticos Cuando un agente exhibe efectos secundarios tóxicos puede usarse un sistema de suministro que dirige al agente al sitio del tejido afectado para minimizar el daño potencial a las células que expresan el receptor alfa de una sustancia distinta al folato de esta reducir los efectos En algunas se puede administrar al sujeto un fragmento de unión al antígeno o composición farmacéutica descritos en la presente descripción en un intervalo de dosificación diaria de aproximadamente a aproximadamente 500 por kg de peso del la dosificación del agente administrado a un paciente con un cáncer gástrico que expresa el receptor alfa del folato es de a 100 de peso corporal del Con mayor la dosificación administrada a un sujeto es de a 10 de peso corporal del aún con mayor de a 5 o de a 3 de peso corporal del En algunas la dosificación del agente administrado a un sujeto que tiene cáncer gástrico que expresa el receptor alfa del folato es de aproximadamente a aproximadamente 10 de peso corporal del los anticuerpos humanos tienen un periodo de semidesintegración más prolongado que los anticuerpos de otras especies debido a la respuesta inmune a las proteínas Por lo frecuentemente es posible usar dosificaciones menores de la composición farmacéutica que comprende anticuerpos quiméricos o humanos y administrarla con menor La dosis administrada al sujeto puede en términos de la cantidad total de al menos una proteína de unión al antígeno administrada por En algunas se administra a un sujeto de aproximadamente 5 a aproximadamente 5000 miligramos de al menos una proteina de unión al antígeno por En algunas se administra a un sujeto hasta aproximadamente 10 miligramos de al menos una proteína de unión al antígeno por En algunas se administra a un sujeto hasta aproximadamente 100 miligramos de al menos una proteína de unión al antígeno por En algunas se administra a un sujeto hasta aproximadamente 250 miligramos de al menos una proteína de unión al antígeno por En algunas se administra a un sujeto hasta aproximadamente 500 miligramos de al menos una proteína de unión al antígeno por En algunas se administra a un sujeto hasta aproximadamente 750 miligramos de al menos una proteína de unión al antígeno por En algunas se administra a un sujeto hasta aproximadamente 1000 miligramos de al menos una proteína de unión al antígeno por En algunas se administra a un sujeto hasta aproximadamente 1500 miligramos de al menos una proteína de unión al antígeno por En algunas se administra a un sujeto hasta aproximadamente 2000 miligramos de al menos una proteína de unión al antígeno por En algunas se administra a un sujeto hasta aproximadamente 2500 miligramos de al menos una proteína de unión al antígeno por En algunas se administra a un sujeto hasta aproximadamente 3000 miligramos de al menos una proteína de unión al antígeno por En algunas se administra a un sujeto hasta aproximadamente 3500 miligramos de al menos una proteína de unión al antígeno por En algunas se administra a un sujeto hasta aproximadamente 4000 miligramos de al menos una proteína de unión al antígeno por En algunas se administra a un sujeto hasta aproximadamente 4500 miligramos de al menos una proteína de unión al antígeno por En algunas se administra a un sujeto hasta aproximadamente 5000 miligramos de al menos una proteína de unión al antígeno por En algunas el fragmento de unión al antígeno o composición farmacéutica se administra a un sujeto una o dos veces por Para que el tratamiento sea el experto en la materia puede recomendar un cronograma de dosificación y una cantidad de dosificación adecuada para el sujeto que se Si se la dosificación puede administrarse una a cuatro o más veces al día por el tiempo La dosificación puede ser menos frecuente si las composiciones se formulan en vehículos de suministro El cronograma de dosificación puede dependiendo de la concentración del fármaco activo que puede depender de las necesidades del Los métodos de la presente pueden combinarse con otros medios de tratamiento tal como terapia uso de inhibidores del factor de crecimiento o factores Un anticuerpo del antireceptor alfa del folato o fragmento de unión al antígeno de este puede administrarse a un paciente simultáneamente con una tratamiento por quimioterapia o terapia de un paciente puede ser operado o puede recibir tratamiento por quimioterapia o terapia de radiación antes o después de la administración de un anticuerpo del antireceptor alfa del folato o fragmento de unión al antígeno de este por al menos una hora y hasta varios por al menos una cinco 12 un una un mes o tres antes o después de la administración del anticuerpo o fragmento de unión al Kits La invención proporciona kits de diagnóstico para usar con los métodos anteriores para detectar cáncer gástrico que expresa el receptor alfa del Los kits un anticuerpo o fragmento de unión al antígeno de este que se une específicamente al receptor alfa del folato útil para la detección tal como se describió Uno o más recipientes adicionales pueden contener elementos tales como reactivos o amortiguadores que se usarán en el Tales kits pueden además o un reactivo de detección que contiene un grupo reportero adecuado para la detección directa o indirecta de la unión al La invención kits farmacéuticos para tratar el cáncer gástrico que expresa el receptor alfa del dichos kits contienen reactivos formulados como una composición terapéutica tal como se describe en la presente y pueden estar en cualquiera de las formas adecuadas para distribución en un Tales formas pueden incluir una formulación en suspensión y lo similar para proporcionar el anticuerpo del antireceptor alfa del folato o fragmento de unión al Los kits pueden un diluyente farmacéuticamente aceptable agua para resconstitución o dilución del anticuerpo o fragmento La invención kits combinados para diagnóstico y Tales kits al menos un anticuerpo que se une al receptor alfa del folato para usar en la detección de secciones de tejido fijadas y un anticuerpos diferente que se une al receptor alfa del folato para usar en el tratamiento Los kits una etiqueta o instrucciones para usar en los métodos de detección tratamiento descritos en la presente La etiqueta o instrucción se refiere a cualquier material escrito o grabado que se une o adjunta de cualquier otra manera a un kit en cualquier momento durante su venta o Puede ser un aviso en la forma indicada por un organismo público que regula la uso o venta de productos farmacéuticos o un aviso que menciona la aprobación por parte del organismo para la uso o para administración a un ser La etiqueta o instrucción puede folletos promocionales e materiales de casetes de audio o discos de computadora como también impresiones directas en los kits Los ejemplos siguientes se proporcionan para describir aun más algunas de las modalidades descritas en la presente Los ejemplos están previstos para ilustrar y no las modalidades Ejemplos Ejemplo 1 Detección de cáncer gástrico que expresa FRA con el uso del anticuerpo 26B3 Se realizaron estudios de inmunohistoquimica para determinar la unión a muestras de tejido incorporado en parafina fijada con formalina La Tabla 2 identifica las muestras de tejido incluidas en el se incluyen muestras de cáncer gástrico con metástasis con a otros tejidos Por el espécimen 4 es una muestra de cáncer gástrico con metástasis a la vejiga Se usó tejido de carcinoma ovárico seroso en FFPE como control Se realizó la prueba de IHC indirecta para FRalfa con el uso de un kit de detección de polímeros HRP Universal Los especímenes incorporados en parafina fijada con formalina se colocaron en secciones de 5 micrones en portaobjetos de vidrio de carga positiva y se calentaron por aproximadamente 60 minutos a 60 Los portaobjetos se desparafinizaron en 3 baños secuenciales de xileno por 3 minutos cada se transfirieron a tres baños secuenciales de alcohol al 100 por 3 minutos cada uno seguido de tres baños secuenciales de alcohol al 95 por 3 minutos cada uno se enjuagaron por 5 minutos en agua desionizada las muestras preparadas se pretrataron con solución de recuperación de epítopos inducida por calor Diva diluida hasta en agua DI y se colocaron dentro de una cámara Decloaking presurizada en la gue previamente se vertió 500 mi de agua Las muestras se incubaron por 15 minutos dentro de la cámara en donde la incubación presurizada alcanzó un máximo de 125 a MPa por 30 segundos se enfrió por 15 minutos hasta 95 los portaobjetos se enfriaron a temperatura ambiente por 15 Después del los portaobjetos se lavaron en 3 baños secuenciales con regulador de lavado de solución salina Tris por 3 minutos cada Cualquier lavado posterior en regulador se realizó de esta los portaobjetos se bloquearon en solución de bloqueo de por 5 minutos a temperatura se lavaron con TBST se colocó reactivo de bloqueo universal libre de suero Background Sniper por 10 minutos a temperatura Después del bloqueo de las los portaobjetos se incubaron con de anticuerpo 26B3 diluido en diluyente de anticuerpos o anticuerpo de control negativo listo para usar Universal Negative Control Mouse para tejido de isotipo por 60 minutos a temperatura los portaobjetos se lavaron con TBST y se incubaron con de sondas de anticuerpos primarios de ratón en el kit Biocare Medical por 15 minutos a temperatura los portaobjetos se lavaron otra vez con TBST y se incubaron con un reactivo de en el kit Biocare Medical por 20 minutos a temperatura Después de la los portaobjetos se lavaron con TBST y se incubaron con una solución de tetraclorhidrato de por 5 minutos a temperatura los portaobjetos se enjuagaron bien con agua DI 3 veces por segundos cada uno y se contratiñeron con hematoxilina por 2 se lavaron con se deshidrataron en 3 baños secuenciales cada uno de alcohol al 95 y 100 por 30 segundos cada uno y se purificaron en 3 baños secuenciales de xileno por 30 segundos cada Por se colocaron cubreobjetos en los portaobjetos antes del Se analizó la expresión de FRA por un puntaje semicuantitativo de tinción Los resultados se muestran en la Tabla Como se demuestra por medio de este el anticuerpo 26B3 puede usarse para detectar cáncer gástrico que expresa Ejemplo 2 Tratamiento de cáncer gástrico con el uso de Farletuzumab es un anticuerpo monoclonal humanizado dirigido contra el receptor a del folato Se ha demostrado que media la citotoxicidad tumoral a través de la citotoxicidad celular dependiente del anticuerpo y la citotoxicidad dirigida por el complemento de una linea celular de cáncer ovárico humano que expresa FRA in vitro y que reduce el crecimiento tumoral en células de cáncer ovárico humano que expresa FRA in vivo en un modelo de xenoinjerto et Cáncer Imun Se reporta que la expresión de FRA es del 40 en el cáncer Se realizó un estudio de etiqueta abierta de fase I con escalamiento de dosis del tratamiento del tumor sólido que expresa FRA después de obtener el consentimiento informado escrito en el centro médico Saitama Medical University International Medical Center y el hospital National Cáncer Center Hospital en Japón para controlar la toxicidad limitante de la dosis y calcular la dosis máxima tolerada como los objetivos El criterio principal de inclusión para el estudio incluyó pacientes de 20 a años de pacientes con tumor sólido que no responden o que resisten la terapia estándar y que no tienen otro tratamiento tumor FRA positivo confirmado por pacientes con función orgánica principal sin efecto de arrastre de y reacción adversa a los estado general de 0 a 1 según el grupo oncológico cooperativo del este El criterio principal de exclusión para el estudio metástasis de cerebro que presenta sintomas clínicos o que requiere tratamiento anticuerpos HCV o HBs antígeno infección grave que requiere tratamiento antecedentes de hipersensibilidad a formulación de proteínas o anticuerpos otra malignidad sincrónica o derrame pleural o ascitis que requieren En el estudio participaron dos pacientes que sufrían de cáncer gástrico con tumor sólido que expresa FRA resistente a los tratamientos Después de una sola administración de farletuzumab para la evaluación se administró farletuzumab por inyección intravenosa y se repitió cada semana hasta el avance de la se administró farletuzumab por infusión de gota intravenosa a una dosis de 400 en el Ciclo 0 sola y se administró desde el Ciclo 1 una vez a la semana por 4 semanas los días 15 y como un La administración de Farletuzumab continuó hasta que los sujetos cumplieron el criterio de discontinuación que incluye la evidencia del avance de la enfermedad o la aparición de una o varias lesiones Las concentraciones de farletuzumab en suero se determinaron mediante el ensayo por inmunoabsorción ligado a enzimas Los parámetros farmacocinéticos se analizaron con el uso de Los niveles de anticuerpos antihumanos humanos en suero se ensayaron mediante La expresión de FRA se evaluó mediante La intensidad inmunoreactiva se clasificó como sin reacción débil marrón claro con un reborde fino a lo largo de la membrana moderada marrón oscuro con un reborde fino a lo largo de la membrana o fuerte marrón oscuro o intensidad mayor con un reborde grueso a lo largo de la membrana Dos pacientes con cáncer gástrico edad intensidad de tinción de paciente edad intensidad de tinción de recibierton infusión de El tumor sólido que expresa FRA del paciente 16 era un tumor resistente a los tratamientos estándar que incluyen terapia de primera linea Pharmaceutical Co y terapia de segunda línea con En un paciente con cáncer gástrico se observó estabilización de la enfermedad a largo plazo por 20 En este paciente no se observó toxicidad La Figura 1 muestra el cambio en la suma del diámetro más grande del tumor y el nivel del CEA del marcador en el paciente con cáncer gástrico Si bien no se observó achicamiento del se identificó una estabilización significativa del tumor en un paciente con cáncer gástrico que expresa La estabilización de la enfermedad a largo plazo se observó en una subpoblación de cáncer 15 5 Resultados H Tinción heterogénea equívoco I Células inflamatorias i i i l insufficientOCRQuality

Claims (7)

NOVEDAD DE LA INVENCIÓN Habiéndose descrito la presente se considera como novedad, y por lo tanto, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes: Reivindicaciones:

1. Un método para tratar cáncer gástrico que expresa el receptor alfa del folato en un sujeto que necesita de este; el método comprende administrar al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de un anticuerpo que se une específicamente al receptor alfa del folato o un fragmento de unión al antigeno de este.

2. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado además porque el anticuerpo comprende una CDR1 de cadena pesada (CDRHl) que comprende la secuencia de aminoácidos de la sec. con núm. de ident.: 1; CDR2 (CDRH2) que comprende la secuencia de aminoácidos de la sec. con núm. de ident.: 2 y CDR3 (CDRH3) que comprende la secuencia de aminoácidos de la sec. con núm. de ident.: 3, y una CDRl de cadena liviana (CDRL1) que comprende la secuencia de aminoácidos de la sec. con núm. de ident.: 4; CDR2 de cadena liviana (CDRL2) que comprende la secuencia de aminoácidos de la sec. con núm. de ident.: 5 y CDR3 (CDRL3) que comprende la secuencia de aminoácidos de la sec. con núm. de ident.:6.

3. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado además porque la etapa de administración comprende la inyección intravenosa.

4. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado además porque la etapa de administración comprende la administración semanal al sujeto.

5. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado además porque el anticuerpo o fragmento de unión al antigeno se administra en una dosificación de aproximadamente 50 mg/m2 a aproximadamente 400 mg/m2.

6. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado además porque el anticuerpo o fragmento de unión al antigeno se administra en una dosificación de aproximadamente 400 mg/m2.

7. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado además porque el anticuerpo es farletuzumab.