MX2014011451A - Procedimiento de tratamiento de la interrupcion del parto. - Google Patents

Abstract

La presente invención se refiere al uso de determinados glucosaminoglucanos sulfatados para el tratamiento de la interrupción del parto. Los glucosaminoglucanos sulfatados tienen una actividad anticoagulante reducida y son administrados en combinación con un agente capaz de estimular las contracciones del miometrio del útero y, de este modo, reestablecer el parto efectivo.

Description

PROCEDIMIENTO DE TRATAMIENTO DE LA INTERRUPCIÓN DEL PARTO CAMPO DE LA INVENCIÓN La presente invención se refiere al uso de determinados glucosaminoglucanos sulfatados para el tratamiento de la interrupción del parto restableciendo un parto efectivo en mujeres que durante el parto este se detiene.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN Un problema clínico frecuente en obstetricia es un parto prolongado o de algún modo disfuncional. El lento progreso del parto o su interrupción se documenta en aproximadamente el 40-60% de todos los alumbramientos en, por ejemplo, Europa y en EE.UU. En los países en desarrollo, la interrupción del parto con una fuerte hemorragia posparto son las causas más frecuentes de la muerte de la madre.

El útero está compuesto por dos partes, el cuerpo y el cuello uterino, que tienen funciones diferentes durante el embarazo y el alumbramiento. El cuerpo del útero está formado principalmente por haces de músculo liso, el miometrio, incluidos en la matriz extracelular, MEC, mientras que el cuello uterino consta principalmente de MEC. Los componentes predominantes en la MEC son colágeno de tipo I y II y proteoglicanos, aunque en menor cantidad. Los proteoglicanos consisten en un núcleo proteico al que están unidas de una a cien cadenas de polisacáridos, los glucosaminoglucanos. La coordinación entre las contracciones uterinas y el relajamiento o, en otras palabras, la maduración, y la dilatación del cuello uterino es crucial para un alumbramiento normal. La incongruencia entre estos procesos conduce a alumbramientos anormales.

En Acta Obstetricia et Gynecologica. 2010; 89: 147-150, se ha publicado que la dalteparina, una heparina de bajo peso molecular (HBPM) mejora el progreso del parto y, por tanto, reduce la duración del parto, y se sugiere que la dalteparina aumenta las contracciones del músculo liso uterino inducidas por la oxitocina y también estimula la liberación de citocinas en el cuello uterino durante el parto. Aunque la dalteparina generalmente parece producir efectos positivos sobre el proceso del parto, no es clínicamente viable utilizarla debido a los riesgos de hemorragia a causa de su efecto anticoagulante.

El documento WO 03055499 enseña que los glucosaminoglucanos sulfatados, como la heparina, que tienen actividad anticoagulante de 100 unidades BP/mg o menos, son eficaces como profiláctico o tratamiento curativo del cuello uterino y el endometrio para establecer un parto efectivo en las mujeres en general.

En este documento se sugiere que los glucosaminoglucanos puede usarse en combinación con oxitocina para sensibilizar al miometrio en los casos de bajos niveles de oxitocina endógena. No obstante, no se sugiere que los glucosaminoglucanos sulfatados sean útiles en terapias de intervención directa cuando surgen complicaciones que requieren una eficacia terapéutica directa.

A día de hoy, las mujeres que experimentan interrupción del parto reciben niveles crecientes de oxitocina hasta que se restablece un parto efectivo. Debido a la administración de una dosis elevada de oxitocina para reestablecer contracciones eficaces existe un alto riesgo de contracciones demasiado frecuentes que den lugar a un flujo sanguíneo más bajo en la placenta, lo que pone en peligro al feto y no pocas veces produce asfixia fetal.

Se han realizado esfuerzos para desarrollar nuevos fármacos para aumentar el parto a pesar del tremendo problema global de interrupción del parto en las mujeres durante el alumbramiento. La presente invención resuelve el problema administrando a las mujeres con interrupción del parto una cantidad eficaz de determinados glucosaminoglucanos sulfatados con el fin de reestablecer un parto efectivo.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN La presente invención se refiere al tratamiento de la interrupción del parto.

Se administra una heparina modificada químicamente o heparán sulfato con actividad anti-factor lia de menos de 10 Ul/mg y actividad anti-factor Xa de menos de 1 Ul/mg en combinación con un agente capaz de estimular las contracciones del miometrio del útero y, de este modo, reestablecer el parto efectivo y tratar la interrupción del parto. Con el procedimiento y usos de acuerdo con la presente invención se puede tratar la interrupción tanto primaria como secundaria.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LAS FIGURAS La Figura 1 es un gráfico que muestra el tiempo del parto en mujeres que han recibido oxitocina y se han tratado con una heparina modificada químicamente o heparán sulfato de acuerdo con la invención (DF01) o han recibido placebo.

Las Figuras 2A, 2B, 2C y 2D muestran la entrada de iones de calcio en las células del músculo uterino cuando se tratan con combinaciones de oxitocina y una heparina modificada químicamente o heparán sulfato de acuerdo con la invención (DF01) DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN Antes de describir la presente invención, debe entenderse que la terminología usada en el presente documento se usa con el fin de describir únicamente formas de realización concretas y no se pretende que sean limitantes, ya que el ámbito de la presente invención solo estará limitado por las reivindicaciones adjuntas y equivalentes de las mismas.

Cabe indicar que, como se usa en esta memoria descriptiva y las reivindicaciones adjuntas, las formas en singular "uno", "una" y "el/la" incluyen las referencias en plural a menos que el contexto indique claramente lo contrario.

Asimismo, el término "aproximadamente" se usa para indicar una desviación de +/- 2 % del valor dado, preferentemente +/- 5 %, y lo preferentemente +/- 10 % de los valores numéricos, cuando sea aplicable.

La expresión "interrupción del parto" se usa en el contexto de la presente invención para caracterizar anomalías en el parto durante todas las etapas del parto, desde que la mujer embarazada sufre repetidas contracciones del útero. El progreso normal del parto se define como contracciones regulares del miometrio del útero que conducen a una dilatación cervical de al menos aproximadamente 1 cm por hora hasta llegar a una dilatación de 10 cm. En el contexto de la presente invención, el progreso normal del parto también se define como un parto efectivo.

La interrupción del parto significa condiciones que varían desde un progreso más lento de lo normal (es decir, una dilatación cervical de menos de aproximadamente 1 cm durante 1 hora, durante 1-2 horas o durante al menos 2 horas) hasta una ausencia completa de progreso de la maduración cervical y de las contracciones del miometrio del útero. La interrupción del parto es más frecuente entre mujeres nulíparas que en multíparas. De acuerdo con la práctica actual y después de establecer que la mujer tiene un progreso más lento de lo normal, habitualmente se inicia tratamiento con oxitocina después de esperar una hora adicional con el fin de comprobar si la mujer puede entrar en un progreso normal sin tratamiento.

Una mujer puede sufrir interrupción del parto en diferentes etapas del parto. La interrupción del parto en las primeras etapas (en ocasiones denominada "interrupción primaria") a menudo se debe a una alteración de la dilatación cervical y en la fase tardía del parto (es decir, cuando la mujer ha dilatado > 5-6cm y con un progreso inicialmente normal se denomina "interrupción secundaria") debido a contracciones del miometrio uterino insuficientes o alteradas. El significado de interrupción del parto en este contexto se extiende a términos clínicamente comunes como distocia, progreso lento del parto, interrupción del parto, cese complejo del progreso, fallo de parto disfuncional y desproporción cefalopélvica que se producen después de haber experimentado varias contracciones uterinas. El inicio del parto antes de la interrupción puede ser espontáneo o inducido mediante procesos o terapias convencionales. Existe una mayor frecuencia de mujeres que experimentan interrupción del parto entre las mujeres a las que se les ha inducido el parto por medios farmacéuticos o físicos en comparación con las mujeres en las que el parto se inició de forma espontánea.

En el contexto de la presente invención, el término "tratamiento de la interrupción del parto" se refiere a una terapia en la que se requiere un efecto de respuesta directa desde la administración. En el contexto del parto se requiere que la administración conduzca directamente a la promoción o estimulación de las contracciones del miometrio del útero. En otros términos, la presente invención no está dirigida a una terapia profiláctica en la que las mujeres pueden recibir una terapia para prevenir o contrarrestar un parto prolongado antes de entrar en el parto.

La expresión "en combinación" tendrá el significado de un tratamiento combinado con una heparina químicamente modificada o heparán sulfato descrita en la presente invención y otro agente que es eficaz en la promoción o estimulación de las contracciones miométricas del útero. "En combinación" tendrá un significado amplio y abarcará cualquiera de las afecciones en las que los tratamientos se realizan de forma adyuntiva, simultánea, secuencial o en paralelo. También puede tener el significado de una heparina modificada químicamente o heparán sulfato descrita en la presente invención y administrada como tratamiento adyuvante de otro agente útil para promocionar o estimular las contracciones del miometrio del útero. En el caso de un tratamiento adyuvante, una heparina modificada químicamente o heparán sulfato descrita en la presente invención se administra a una mujer que ya está siendo tratada con un agente capaz de estimular las contracciones del miometrio del útero.

En el presente documento se divulgan glucosaminoglucanos sulfatados con un efecto anticoagulante bajo, tal como una actividad anti-factor Xa inferior a 200 Ul/mg, para reestablecer un parto efectivo en mujeres que están sufriendo una interrupción del parto. Los glucosaminoglucanos sulfatados se administran como una combinación con un agente capaz de estimular las contracciones del miometrio del útero en el tratamiento de la interrupción del parto.

Los glucosaminoglucanos son glucosaminoglucanos sulfatados seleccionados del grupo que consiste en heparán sulfato, heparán sulfato despolimerizado, heparina, heparina despolimerizada (p. ej., heparina de bajo peso molecular) dermatán sulfato, dermatán sulfato, condroitín sulfatos y condroitín sulfatos despolimerizados.

Los glucosaminoglucanos sulfatados son heparán sulfato, dermatán sulfato, y condroitín sulfato, que están compuestos por hexosamina y ácido urónico alternos.

La presencia de ácido D-glucurónico GlcA) y su epímero C-5 ácido L-idurónico (IdoA) y la sulfatación específica de las hexosaminas y el residuo uronosilo dotan al polímero de una variación estructural extrema. La estructura se construye sobre disacáridos repetidos que contienen de ninguno o muy pocos a casi 100% de disacáridos que contienen ácido idurónico. La organización de los disacáridos que contienen GlcA- y IdoA-N-hexosamína puede variar desde bloques largos hasta un patrón de disacáridos alternos. La variación de la sulfatación y el grado de sulfato de ácido idurónico genera una amplia variedad de actividad biológica. Existen diferentes polisacáridos bien definidos de dermatán sulfato, condroitín sulfato, heparán sulfato, heparina y heparina.

El heparán sulfato, que tiene glucosamina y ácido uránico como disacáridos repetidos y que consiste en disacáridos N-acetilados y N-sulfatados que están dispuestos principalmente de un modo segregado, tiene una distribución ubicua sobre las superficies celulares y en la matriz extracelular. Generalmente está menos sulfatado y tiene un contenido en iduronato menor que la heparina y tiene una estructura más variada. Las interacciones entre el heparán sulfato y las proteínas están implicadas en diversos procesos fisiológicos, tales como la adhesión celular, la proliferación celular, la regulación enzimática, la acción de las citoquinas, la entrada de virus y las propiedades anticoagulantes. Los heparán sulfatos poseen actividad anticoagulante en función de la presencia de un pentasacárido anticoagulante específico, aunque considerablemente menos que la heparina. El heparán sulfato es un polisacárido lineal que se puede preparar a partir de la mucosa intestinal porcina o de pulmón bovino, de fracciones secundarias de heparina usando fracciones de cloruro de cetilpiridinio y extracción secuencial de sales como describen Fransson et al., Structural studies on heparán sulphates, Eur. J. Biochem. 106, 59-69 (1980).

El condroitín sulfato es un polisacárido lineal de sulfato que consiste en residuos alternos de ácido glucurónico y N-acetilgalactosamina, estando el último sulfato en la posición 4 o 6. Se pueden preparar a partir de tráquea bovina o cartílago nasal. El condroitín sulfato es importante para la organización de la matriz extracelular y genera una presión de turgencia intersticial y participa en el reclutamiento de neutrófilos.

El dermatán sulfato es un polisacárido lineal de sulfato que consiste en residuos alternos de ácido urónico y N-acetil-galactosamina. Los ácidos uránicos son D-GlcA o L-ldoA y el disacárido puede ser sulfato en 4 y 6 y 2 sobre la galactosamina e IdoA, respectivamente. El dermatán sulfato se puede preparar a partir de piel porcina, mucosa intestinal y pulmón bovino. Posee actividades biológicas tales como organización de la matriz extracelular, interacciones con citoquinas, actividades anticoagulantes y reclutamiento de neutrófilos.

La heparina es un glucosaminoglucano de origen natural sintetizada por los mastocitos y almacenada intracelularmente en los mismos. Preparada industrialmente a partir de la mucosa intestinal porcina, la heparina es un potente anticoagulante y se ha usado clínicamente durante más de 60 años como fármaco de preferencia para la profilaxis y el tratamiento de trastornos tromboembólicos. Los principales efectos adversos del tratamiento con heparina son las complicaciones hemorrágicas causadas por sus propiedades anticoagulantes y baja biodisponibilidad. La heparina es altamente polidispersa y está compuesta por una población heterogénea de polisacáridos co pesos moleculares que varían de 5 a 40 kDa, con una media de aproximadamente 15 a 18 kDa.

La heparina de bajo peso molecular o la heparina son oligosacáridos lineales principalmente compuestos por residuos alternos de glucosamina e IdoA N-sulfatados y que a menudo contienen un pentasacárido anticoagulante. Se pueden preparar a partir de heparina mediante escisión química o enzimática específica. Su principal función clínica es potenciar la inhibición por la antitrombina del factor de coagulación Xa, lo que tiene como resultado un efecto antitrombótico. Se ha propuesto que tiene propiedades antimetastásicas. Fragmin® (Pfizer, EE.UU.) es un ejemplo de heparina de bajo peso molecular obtenida mediante control de la heparina y que tiene un efecto antitrombótico debido a la inhibición del factor Xa. Los fragmentos de heparina que tienen actividad anticoagulante selectiva, así como los procedimientos para la preparación de los mismos, se describen en la patente de EE.UU. N° 4.303.651. De acuerdo con la farmacopea europea (PharmEur), para que una heparina se denomina heparina de bajo peso molecular (heparina de baja masa molecular) deberá tener una actividad anti-factor Xa no inferior a 70 Ul(unidad internacional)/mg y un Mw inferior a 8.000 Da. La actividad anticoagulante de la heparina, las heparinas de bajo peso molecular y otros derivados de heparina a menudo se miden según su capacidad para potenciar la inhibición del factor de coagulación Xa y del factor lia por la antitrombina. Los procedimientos para medir la actividad anti-factor Xa y anti-factor lia son bien conocidos por los expertos en la materia y también se describen en las farmacopeas, tales como la farmacopea europea (Pharm Eur) y la farmacopea de EE.UU. (USP). La actividad anticoagulante se puede anular mediante, por ejemplo, oxidación selectiva con peryodato (véase, por ejemplo, Fransson LA, y Lewis W, Relationship between anticoagulant activity of heparin and susceptibility, to periodate oxidation, FEBS Lett. 1979, 97 :119-23; Lindahl et al., Proc Nati Acad Sci USA, 1980; 77(11):6551 -6555) y también por otros medios conocidos para el experto en la materia.

La heparina de bajo peso molecular o heparina despolimerizada es una mezcla de oligosacáridos lineales principalmente compuestos por residuos alternos de glucosamina e IdoA N-sulfatados y que a menudo contienen el pentasacárido anticoagulante. Se pueden preparar a partir de heparina mediante escisión química o específica. Su función clínica principal es inhibir el factor Xa, lo que tiene como resultado un efecto antitrombótico. Se ha propuesto que tiene propiedades antimetastásicas. Fragmin® (Pfizer, EE.UU.) es un ejemplo de heparina de bajo peso molecular obtenida mediante control de la heparina y que tiene un efecto antitrombótico debido a la inhibición del factor Xa. Los fragmentos de heparina que tienen actividad anticoagulante selectiva, así como procedimientos para la preparación de los mismos, se describen en la patente de EE.UU. número 4.303.651.

La presente invención se refiere a un procedimiento para el tratamiento de la interrupción del parto en una mujer que entra en interrupción del parto después de haber experimentado varias contracciones uterinas. Administrando a la mujer embarazada con interrupción del parto una cantidad eficaz de al menos una heparina modificada químicamente o heparán sulfato con actividad anti-factor lia de menos de 10 Ul/mg y actividad anti-factor Xa de menos de 10 Ul/mg en combinación con un agente capaz de estimular las contracciones del miometrio del útero, se reestablece el parto efectivo y, d este modo, se trata la interrupción del parto. En mujeres que experimentan interrupción primaria del parto, el tratamiento de la interrupción del parto significa recobrar las contracciones repetitivas del miometrio del útero de frecuencia, duración y fuerza crecientes que dan lugar al progreso normal de la dilatación cervical y, en mujeres que experimentan interrupción secundaria del parto reestablecer el parto efectivo y el tratamiento de la interrupción del parto significa recobrar contracciones cíclicas del miometrio del útero que conducen a la expulsión del neonato. El tratamiento de la interrupción del parto de acuerdo con la presente invención se realizará como una terapia de administración de intervención directa que directamente después de administrar inicia un proceso que conduce, directa o indirectamente, al reestablecimiento del parto efectivo y el tratamiento de la interrupción del parto.

La interrupción del parto se asocia tanto con bajas concentraciones uterinas como con una disminución significativa de la expresión génica de heparán sulfato (Hjelm Cluff A, Bystróm B, Klimaviciute A, Dahlqvist C, Cebers G, Malmstróm A and Ekman-Ordeberg G: Prolonged labour associated with lower expressiori of syndecan 3 and connexin 43 in human uterine tissue. Reproductive Biology and Endocrinology 2006, 4:24). Según los conocimientos de los presentes inventores, la administración de una heparina modificada químicamente o heparán sulfato de acuerdo con el procedimiento de la presente invención, la concentración de heparán sulfato en el músculo liso del útero se puede reestablecer y, por tanto, sirve para tratar la interrupción del parto y, de este modo, reestablecer las contracciones efectivas. El tratamiento de la interrupción del parto disminuye la duración del parto, lo que a su vez reduce las complicaciones, es decir hemorragia posparto y endometritis para la madre y mayor riesgo de asfixia letal e infecciones asociadas con una duración del parto prolongada. Es importante el hecho de que también reduce el número de cesáreas, que es una operación quirúrgica asociada con riesgos tanto para la madre como para el feto. Asimismo, las cesáreas son caras y, por tanto, la presente invención también proporciona ventajas económicas.

La interrupción del parto se puede asociar con una lenta maduración cervical o con una frecuencia baja de las contracciones o con contracciones ineficaces o con ambos. La heparina modificada químicamente o heparán sulfato que se va a administrar de acuerdo con la invención puede ejercer su efecto sobre el cuello uterino y sobre el útero. Con respecto a la maduración cervical y según los conocimientos de los presentes inventores, la heparina modificada químicamente o heparán sulfato que se va a administrar de acuerdo con la invención también podría ejercer un efecto sinérgico con la prostaglandina E2. Con respecto a las contracciones uterinas y según los conocimientos de los presentes inventores, la heparina modificada químicamente o heparán sulfato que se va a administrar de acuerdo con la invención repondrá los niveles en el tejido biométrico con dicha heparina modificada químicamente o heparán sulfato, de forma que, por ejemplo, la oxitocina (agente usado con frecuencia para inducir el parto) puede ejercer su efecto de contracción sobre el miometrio. U efecto será que la cantidad de oxitocina administrada se puede reducir y, por tanto, se pueden evitar los efectos secundarios negativos.

En un aspecto, la heparina modificada químicamente o heparán sulfato administrada de acuerdo con la invención tienen un peso molecular promedio en peso (Mw) de 3.000 Da o menor. En otro aspecto, la heparina modificada químicamente o heparán sulfato administrada de acuerdo con la invención tienen un peso molecular promedio en peso (Mw) inferior a 20.000 Da. En otro aspecto, la heparina modificada químicamente o heparán sulfato administrada de acuerdo con la invención tienen un peso molecular promedio en peso (Mw) de 10.000 Da o menos. En otro aspecto, la heparina modificada químicamente o heparán sulfato administrada de acuerdo con la invención tienen un peso molecular promedio en peso (Mw) no superior a 8.000 Da. En otro aspecto más, la heparina modificada químicamente o heparán sulfato administrada de acuerdo con la invención tienen un peso molecular promedio en peso (Mw) no superior a 7.000 Da.

En un aspecto, la invención se refiere a un procedimiento en el que una heparina modificada químicamente perteneciente al grupo que consiste en heparina que tiene un peso molecular promedio por debajo de 20.000 Da se administra a una mujer que sufre interrupción del parto. En otro aspecto, la heparina despolimerizada tiene un peso molecular promedio inferior a 10.000 Da. En otro aspecto, la heparina despolimerizada tiene un peso molecular promedio no superior a 8.000 Da y en otro aspecto más, la heparina despolimerizada tiene un peso molecular promedio no superior a 7.000 Da.

Como se ha mencionado anteriormente, algunos glucosaminoglucanos sulfatados tienen propiedades anticoagulantes. No obstante, para una preparación que se va usar, por ejemplo durante el parto, para tratar la interrupción del parto reestableciendo el parto efectivo, un efecto anticoagulante no es deseable.

Por tanto, para aplicaciones en las que un efecto anticoagulante no es deseable, la heparina químicamente modificada o heparán sulfato que se va a utilizar en el procedimiento de la presente invención tiene una actividad anti-factor Xa de 30 Ul/mg o menor y una actividad anti-factor lia 30 Ul/mg o menor. En otro aspecto, la heparina químicamente modificada o heparán sulfato que se va a utilizar en el procedimiento de la presente invención tiene una actividad anti-factor Xa de 10 Ul/mg o menor y una actividad anti-factor lia 10 Ul/mg o menor.

La actividad anticoagulante de la heparina, las heparinas de bajo peso molecular y otros derivados de heparina a menudo se miden según su capacidad para potenciar la inhibición del factor de coagulación Xa y del factor lia por la antitrombina. Procedimientos para medir la actividad anti-factor Xa- and anti-factor lia son bien conocidos por los expertos en la materia y también se describen en las farmacopeas, tales como la farmacopea europea (Pharm Eur) y la farmacopea de EE.UU. (USP).

La actividad anticoagulante se puede anular mediante, por ejemplo, oxidación selectiva con peryodato (véase, Fransson LA, and Lewis W, Relationship between anticoagulant activity of heparin and susceptibility, to periodate oxidation, FEBS Lett. 1979, 97 : 119-23; Lindahl et al., Proc Nati Acad Sci USA, 1980; 77(11):6551-6555) y también por otros medios conocidos para el experto en la materia.

En un aspecto, la heparina químicamente modificada o heparán sulfato que se va a utilizar en el procedimiento de la invención tiene una actividad anti-factor Xa de 10 Ul/mg o menor y una actividad anti-factor lia de 10 Ul/mg o menor.

En otro aspecto, la estructura disacárido de la heparina químicamente modificada o heparán sulfato está esencialmente desprovista de unidades de ácido glucurónico o idurónico no sulfatadas y tiene una actividad anti-factor Xa de 10 Ul/mg o menor y una actividad anti-factor lia 10 Ul/mg o menor.

En un aspecto, la heparina químicamente modificada es una heparina anticoagulante baja con una actividad anti-factor Xa de 10 Ul/mg o menor y un peso molecular promedio no superior a 8.000 Da o no superior a 7.000 Da.

En un aspecto, la invención está dirigida a los usos de una heparina químicamente modificada, en la que el efecto anticoagulante de la heparina se erradica mediante tratamiento con peryodato para eliminar las afinidades de unión de la antitrombina. Un modo no limitante de obtener dicha heparina químicamente modificada es la oxidación con peryodato, seguida de la eliminación ß alcalina del producto. Este proceso conduce a la eliminación de la actividad anticoagulante. El proceso divulgado en la patente de EE.UU. N° 4,990,502 (Lormeau et al) demuestra un modo de tratar la heparina para escindir de forma selectiva las secuencias de pentasacáridos responsables del efecto anticoagulante y una despolimerización posterior que tiene como resultado una heparina anticoagulante de bajo peso molecular con un peso molecular promedio de 5,8 a 7,0 kDa.

En un aspecto, la heparina químicamente modificada que se va a usar en el procedimiento de acuerdo con la invención tiene un peso molecular promedio (Mw) de aproximadamente 4,6 y 6,0 kDa.

En un aspecto, el procedimiento de la invención está dirigido al uso de una heparina químicamente modificada para el tratamiento de la interrupción del parto, que comprende (i) cadenas de polisacáridos esencialmente libres de secuencias de sacáridos intactos químicamente que participan en el efecto anticoagulante; y (ii) cadenas de polisacáridos correspondientes a pesos moleculares entre 1 ,2 y 12 kDa con un disacárido que aparece de forma predominante de acuerdo con la (fórmula I).

(Fórmula I), en la que, R'= n es un número entero de 2 a 20 En este contexto, una heparina modificada químicamente o heparán sulfato, que comprende cadenas de polisacáridos esencialmente libres de secuencias de sacáridos intactos químicamente que participan en el efecto anticoagulante significa que las cadenas de polisacáridos se han tratado químicamente para modificar esencialmente todos los pentasacáridos que participan específicamente en un efecto anticoagulante mediante antitrombina (AT).

Las cadenas de polisacáridos que aparecen de forma predominante de dicha heparina modificada químicamente tienen entre 6 y 12 unidades de disacáridos con pesos moleculares de 3,6 a 7,2 kDa, mientras que al menos el 70% de las cadenas de polisacáridos tiene un peso molecular por encima de al menos 3 kDa. La distribución de polisacáridos y su correspondiente masa molecular expresada como % acumulado de peso sería de acuerdo con la tabla: Adicionalmente, el polisacárido comprende cadenas de sacárido que tienen un residuo reducido en e extremo, como se muestra en la Fórmula I y que carecen esencialmente de ácidos idurónico y/o glucurónico o sulfatados intactos.

En un aspecto, esta heparina modificada químicamente comprende glucosaminas modificadas presentes como señales en el intervalo de 5,0 a 6,5 ppm, en un espectro de RMN de 1H con una intensidad (% proporción) inferior al 4% en relación con la señal a 5,42 ppm de la heparina nativa, Estas señales de glucosamina pueden estar presentes a 5,95 ppm y a 6,15 ppm. En un aspecto, menos del 1 % del contenido total de las glucosaminas está modificado.

En este contexto, "glucosaminas modificadas" tiene el significado de glucosaminas que tienen una estructura de residuo no prevista en un espectro RMN de 1H de los productos heparínicos o de productos de heparina de bajo peso molecular (heparinas despolimerizadas). La aparición de glucosaminas modificadas se puede atribuir al proceso de modificación química para oxidar el ácido idurónico y/o glucurónico no sulfatado con el fin de eliminar sustancialmente el efecto anticoagulante. Es deseable minimizar la presencia de glucosaminas modificadas, ya que pueden representar las características impredecibles del producto heparina químicamente modificada, tal como despolimerización inespecífica.

En un aspecto, la heparina químicamente modificada comprende glucosaminas modificadas en los extremos no reductores con enlaces insaturados. Dichas glucosaminas modificadas están presentes como señales a 5,95 ppm y 6,15 ppm en un espectro de RMN de H.

El procedimiento de la presente invención también se puede usar para tratar la interrupción del parto con independencia de si el inicio fue inducido o espontáneo. En el contexto de la presente invención, "inducción del parto" generalmente se define como una intervención que inicia directa o indirectamente un parto suficientemente efectivo a partir de contracciones biométricas del útero para llegar a un progreso que tiene lugar en el parto y el nacimiento del niño.

El parto se puede inducir de muchas formas, todas bien conocidas por los expertos en la materia. Ejemplos no limitantes de los procedimientos para inducir el parto son procesos de estimulación física, administración de oxitocina, prostaglandina E o derivados de los mismos, tales como misoprostol y dinoprostol; rotura del saco amniótico; expansión del cuello uterino y administración de un globo intracervical. Asimismo se pueden usar combinaciones de estos procesos de inducción del parto.

La presente invención se refiere a un tratamiento combinado con un agente capaz de promocionar o estimular las contracciones del miometrio del útero administrado a la mujer embarazada debido a un progreso inadecuado del parto. Ejemplos no limitantes de dicho agente son la oxitocina y las prostaglandinas como PGE1 (misoprostol) y PGE2. En un aspecto de la invención, el agente capaz de promocionar o estimular las contracciones del miometrio del útero es la oxitocina. Por tanto, cuando la heparina modificada químicamente o heparán sulfato se administra como adyuvante de la oxitocina, estimula las contracciones del miometrio del útero inducidas por la oxitocina. El experto en la materia fijará el régimen de tratamiento y, preferentemente, de un modo que se acomode a las rutinas clínicas para la oxitocina, ya que la heparina modificada químicamente o heparán sulfato se administrarán en paralelo con la oxitocina. En un ejemplo no limitante de este aspecto de la invención, la heparina modificada químicamente o heparán sulfato se administra al menos una vez cada 24 horas y de forma adyuvante con un tratamiento con oxitocina durante hasta aproximadamente 36 horas. En otro aspecto, la heparina modificada químicamente o heparán sulfato se administra 1-24 veces/24 horas. En otro aspecto más, la heparina modificada químicamente o heparán sulfato se administra 6 veces/24 horas. La administración se puede realizar por vía intravenosa y/o subcutánea. En un aspecto, la heparina modificada químicamente o heparán sulfato se administra mediante infusión continua. En la práctica clínica actual, la oxitocina se administra por vía intravenosa.

En un aspecto del procedimiento, las mujeres reciben hasta 1 ,5 g de la heparina modificada químicamente o heparán sulfato durante 24 horas. En otro aspecto, la mujer recibe hasta 1 ,2 g de la heparina modificada químicamente o heparán sulfato durante 24 horas y, como ejemplo no limitante, los 1 ,2 g/24 horas se administran 6 veces a dosis de 200 mg. En un aspecto del procedimiento, la mujer ha experimentado repetidas contracciones del miometrio pero ha entrado en interrupción del parto. En este aspecto, el procedimiento comprende la administración de la heparina modificada químicamente o heparán sulfato que puede ser adyuvante de un agente capaz de promocionar o estimular las contracciones del útero, tales como oxitocina, con el fin de recobrar las contracciones del miometrio.

En un aspecto, la heparina modificada químicamente o heparán sulfato que se va a usar con la invención se puede formular junto con una cantidad eficaz de un agente que estimula las contracciones del miometrio del útero y, de este modo, se administrarán juntos (coadministrarán) en una composición por vías de administración previamente sugeridas.

En un aspecto, una composición de la heparina modificada químicamente o heparán sulfato que se va a usar con la invención está incluida en un kit con al menos una composición de un agente capaz de estimular las contracciones del miometrio del útero. Las composiciones se pueden proporcionar en formas de una o de varias dosis adaptadas a las diferentes situaciones clínicas. Las formas de dosis se pueden adaptar a las herramientas de administración que también pueden formar parte del kit. Con este fin, el kit puede comprender además, instrucciones clínicas sobre cómo y cuándo administrar las composiciones incluidas.

De acuerdo con la práctica actual, la concentración del agente que estimula las contracciones del miometrio está titulada con el fin de alcanzar el efecto deseado y no administrar a la mujer más de lo necesario de dicho agente. La titulación normalmente se inicia con una dosis baja que se incrementa hasta obtener el efecto deseado (es decir, las contracciones del miometrio del útero). En un aspecto, una composición de la heparina modificada químicamente o heparán sulfato está incluida en un kit junto con una forma multidosis de al menos una composición que comprende un agente capaz de estimular las contracciones del miometrio del útero adaptado para admitir la administración en varias dosis. EN un ejemplo, el kit comprende una forma multidosis de oxitocina y la heparina modificada químicamente o heparán sulfato se administra en combinación con una dosis inicial baja o normalizada de oxitocina. Si el paciente sigue con el parto interrumpido, se puede administrar oxitocina una o varias veces a dosis controladas de la forma multidosis hasta reestablecer el progreso del parto.

Los procedimientos pueden comprender la administración de la heparina modificada químicamente o heparán sulfato que tienen las características definidas en cualquiera de las partes precedentes de la presente memoria descriptiva.

La oxitocina a menudo se administra a mujeres embarazadas para inducir el parto o para tratar la interrupción del parto. Con frecuencia el efecto de la oxitocina se altera, probablemente a causa de una falta de heparán sulfatos, lo que conduce a una sobredosis de oxitocina que puede dar lugar a efectos secundarios graves, tales como hipercontractilidad. El uso conjunto del procedimiento de la invención y la administración de la heparina modificada químicamente o heparán sulfato puede invertir el efecto alterado de la oxitocina y, de este modo, inducir un efecto ahorrador de oxitocina y prevenir la hipercontractilidad y el riesgo de complicaciones fetales. Según los conocimientos de los presentes inventores, también se podría expresar del siguiente modo: La oxitocina no puede ejercer sus efectos contráctiles a menos que se hayan restablecido niveles necesarios/adecuados de heparán sulfatos. Por tanto, el procedimiento y el uso de acuerdo con la presente invención conducen a una administración reducida de la oxitocina.

Mediante el tratamiento de la interrupción del parto reestableciendo el parto efectivo mediante terapia de intervención de acuerdo con la invención, se acorta la duración del parto y el número de complicaciones del parto, por ejemplo realización de cesáreas, se puede reducir significativamente. Un parto prolongado también se asocia con otras complicaciones para la madre, por ejemplo hemorragia posparto, partos con instrumentos y endometritis, así como un mayor riesgo de asfixia e infección fetal. La falta de efecto de la oxitocina sobre la contractilidad del útero tiene como resultado frecuentes cesáreas, incluyendo las realizadas de urgencia.

La heparina modificada químicamente o heparán sulfato que se va a usar en el procedimiento de la invención se puede administrar sistémicamente como composiciones farmacéuticas mediante administración parenteral, tal como mediante inyección subcutánea o intravenosa. Para la administración parenteral, los compuestos activos se pueden incorporar en una solución o suspensión, que también contenga uno o más adyuvantes tales como diluyentes estériles, tales como agua para inyectables, solución salina, aceites fijados, polietilenglicol, glicerol, propilenglicol u otros disolventes orgánicos, agentes antibacterianos, antioxidantes, agentes quelantes, tampones y agentes para ajustar la osmolalidad. La preparación parenteral se puede suministrar en ampollas, viales, jeringuillas desechables o como equipos para infusión, también para la autoadministración.

La heparina modificada químicamente o heparán sulfato que se va a usar en el procedimiento de la invención se puede administrar por vía subcutánea y, de este modo, también se puede administrar con herramientas de autoadministración adecuadas, tales como inyectores.

Adicionalmente, la heparina modificada químicamente o heparán sulfato que se va a usar en el procedimiento de la invención es adecuada para administración tópica, incluyendo la penetración de las membranas mucosas, tales como, entre otros, administración vaginal, rectal, intrauterina y nasal.

En un aspecto, la presente invención también se refiere a heparina modificada químicamente o heparán sulfato que tiene una actividad antifactor lia inferior a 10 Ul/mg y una actividad antifactor Xa inferior a 10 Ul/mg para su uso en combinación co un agente capaz de estimular las contracciones del miometrio del útero en el tratamiento de la interrupción del parto. Todas las características divulgadas anteriormente con respecto al procedimiento de la invención y la heparina modificada químicamente o heparán sulfato también se aplican a este aspecto de la invención.

En otro aspecto más, la presente invención se refiere al uso de una heparina modificada químicamente o heparán sulfato que tiene una actividad antifactor lia inferior a 10 Ul/mg y una actividad antifactor Xa inferior a 10 Ul/mg para su uso en combinación co un agente capaz de estimular las contracciones del miometrio del útero para la fabricación de un medicamento para su uso en el tratamiento de la interrupción del parto. Todas las características divulgadas anteriormente con respecto al procedimiento de la invención y la heparina modificada químicamente o heparán sulfato también se aplican a este aspecto de la invención.

La presente invención también se refiere a un procedimiento de reducir la cantidad administrada de oxitocina durante el parto, que comprende la etapa de administrar a una mujer embarazada de parto que sufre interrupción del parto una cantidad eficaz de al menos una heparina modificada químicamente o heparán sulfato que tiene una actividad antifactor lia inferior a 10 Ul/mg y una actividad antifactor Xa inferior a 10 Ul/mg. Todas las características divulgadas anteriormente con respecto al procedimiento de la invención y la heparina modificada químicamente o heparán sulfato también se aplican a este aspecto de la invención.

En la presente invención se abarca cualquier combinación de las realizaciones y aspectos divulgados en la presente invención.

La invención se divulgará adicionalmente en los ejemplos no limitantes siguientes Ejemplos Descripción detallada del proceso de fabricación de una heparina modificada químicamente de acuerdo con la invención Los siguientes ejemplos 1 a 9 sirven como ejemplos de cómo producir heparina modificada químicamente o heparán sulfatos para su uso de acuerdo con la presente invención.

La sustancia se prepara a partir de heparina sódica. La preparación implica la oxidación selectiva de residuos de ácido uránico no sulfatado en la heparina mediante peryodato, incluyendo el resto de ácido glucurónico en la secuencia de pentasacárido que se une a la AT. La rotura de la estructura de este residuo anihila la interacción de alta afinidad con la AT y, en consecuencia, el efecto anticoagulante (medido como FXa o a-Flla) esencialmente desaparece. El tratamiento alcalino posterior, la reacción de eliminación beta tiene como resultado la escisión del polímero en los sitios de los ácidos urónicos no sulfatados que se han oxidado con peryodato. En conjunto, estas manipulaciones conducen a una pérdida de actividad anticoagulante junto con la adecuada despolimerización de la cadena de heparina.

Adicionalmente, el terminal del extremo reductor en el sitio de la escisión se reduce con NaBH4, que convierte el aldehido terminal en los correspondientes dioles que son más estables. Posteriormente, los aditivos, impurezas y productos secundarios se eliminan mediante repetidas precipitaciones con etanol, filtración y centrifugaciones. A continuación, la sustancia se obtiene en forma de polvo mediante desecación con vacío y calor. La sustancia farmacológica se disuelve en tampón acuoso estéril, dando el producto farmacológico que se pretende administrar por vía intravenosa o subcutánea.

Los procesos descritos hasta ahora generalmente incluyen las etapas de oxidación, escisión polimérica (hidrólisis alcalina) y reducción. Los procesos de acuerdo con la presente invención se desarrollan para contrarrestar o eliminar cualquier tipo de despolimerización inespecífica de las cadenas de heparina. La polimerización inespecífica en este contexto significa, generalmente, la despolimerización que no está relacionada con la reacción alcalina de eliminación beta. La despolimerización inespecífica tiene como resultado inestabilidades estructurales del producto que pueden dar lugar a despolimerización y decoloración adicionales durante el almacenamiento del producto purificado. Además, puede contribuir a la aparición de especies atípicas en los espectros de RMN que normalmente no se encuentran en la heparina.

Los procesos descritos y ejemplificados en la sección siguiente incluyen diferentes aspectos de contrarrestar o eliminar la despolimerización inespecífica.

Ejemplo 1 Oxidación de de ácido qlucurónico e udirónico no sulfatados (residuos), deleción de la unión a AT del pentasacárido y actividad anticoagulante Una cantidad de aproximadamente 3.000 gramos de heparina se disuelve en agua purificada para obtener una solución al 10-20% en peso/volumen. El pH de esta solución se ajusta a 4,5-5,5. Posteriormente, a la solución del proceso se añade metaperyodato sódico (Nal04); cantidad de peryodato 15-25% del peso de la heparina. El pH se ajusta a de nuevo a 4,5 - 5,5. La reacción se realiza protegida de la luz. La solución del proceso se hace reaccionar durante 18 - 24 horas con agitación constante y mantenimiento de la temperatura a 13 - 17 °C, mientras que durante las últimas dos horas la temperatura se disminuye a aproximadamente 5 °C.

Terminación de la reacción de oxidación y la eliminación de los compuestos que contienen yodo A la mezcla de reacción se añade etanol (95-99,5%) durante un periodo de 0,5 - 1 hora, con agitación cuidadosa y a una temperatura de 5 - 25 °C. El volumen del etanol que se va añadir está en el intervalo de 1 - 2 volúmenes de etanol por volumen de la solución del proceso. La heparina oxidada se deja después precipitar y sedimentar durante 15- 20 horas, tras lo cual el licor madre se decanta y se desecha.

Después, el sedimento se disuelve en agua purificada para obtener una solución al 15-30% en peso/volumen. Se añade NaCI para obtener una concentración de 0.15-0.30 mol/litro en la solución del proceso. La agitación continúa durante 0,5 - 1 hora manteniendo a temperatura a 5 - 25 °C. Después, a esta solución se añaden 1.0 - 2.0 volúmenes de etanol (95 - 99,5 %) por volumen de la solución del proceso con agitación durante un periodo de 0,5 - 1 hora. Esto precipita el producto de la solución.

Despolimerización de las cadenas de polisacáridos mediante un proceso de eliminación beta alcalino Una vez decantado y desechado el licor madre, el sedimento se agita en aproximadamente 7 litros de agua hasta su disolución completa, la concentración de la solución es ahora de 15-30%. Manteniendo la temperatura a 5 - 25 °C, lentamente se añade una solución 4M de NaOH hasta obtener un pH de 10,5 -12. La reacción se inicia y procede durante 15 - 95 minutos. En este momento, el pH de la solución se registra y lentamente se añade una solución 4M de HCI hasta obtener un pH de 5,5 - 7.

Reducción de los terminales del extremo Manteniendo la temperatura a 13 - 17 °C, el pH de la solución se ajusta a 5,5 - 6,5. Una cantidad de 130-150 gramos de borohidruro sódico se añade después a la solución y mientras el pH aumenta inmediatamente a 10-11 , la reacción se continúa durante 14-20 horas. Después de este tiempo de reacción, lentamente se añade ácido diluido con el fin de ajustar el pH a un valor de 4, lo que degrada el borohidruro sódico restante. Después de mantener un pH de 4 durante 45 - 60 minutos, el pH de la solución se ajusta a 7 con una solución de NaOH diluido.

La purificación continúa de acuerdo con el ejemplo 5.

Ejemplo 2 Oxidación de ácido glucurónico e idurónico (residuos), deleción de la actividad anticoagulante Una cantidad de aproximadamente 3.000 gramos de heparina se disuelve en agua purificada para obtener una solución al 10-20% en peso/volumen. El pH de esta solución se ajusta a 4,5-5,5. Posteriormente, a la solución del proceso se añade metaperyodato sódico (NalO4); cantidad de peryodato 15-25% del peso de la heparina. El pH se ajusta a de nuevo a 4,5 - 5,5. La reacción se realiza protegida de la luz. La solución del proceso se hace reaccionar durante 22 - 26 horas con agitación constante y mantenimiento de la temperatura a 13 - 17 °C, mientras que durante las últimas dos horas la temperatura se disminuye a aproximadamente 5 °C. El pH al final del periodo de reacción se mide y se registra.

Terminación de la reacción de oxidación y la eliminación de los compuestos que contienen yodo A la mezcla de reacción se añade etanol (95-99,5%) durante un periodo de 0,5 - 1 hora, con agitación cuidadosa y a una temperatura de 5 - 25 °C. El volumen del etanol que se va añadir está en el intervalo de 1 - 2 volúmenes de etanol por volumen de la solución del proceso. La heparina oxidada se deja después precipitar y sedimentar durante 15- 20 horas, tras lo cual el licor madre se decanta y se desecha.

Despolimerización de las cadenas de polisacáridos mediante un proceso de eliminación beta alcalino Una vez decantado y desechado el licor madre, el sedimento se agita en aproximadamente 7 litros de agua hasta que visualmente parece haberse disuelto completamente. Manteniendo la temperatura a 20 - 25 °C, lentamente se añade NaOH 4M hasta obtener un pH de 10,5 -12 y la reacción iniciada de este modo puede proceder durante 15 - 95 minutos. En este momento, el pH de la solución se registra y lentamente se añade una solución 4M de HCI hasta obtener un pH de 5,5 -7.

Reducción de los terminales del extremo Después de decantar y desechar el licor madre, el sedimento se disuelve mediante la adición de agua purificada hasta obtener una concentración de la solución del proceso de 15-30% en peso/volumen. Manteniendo la temperatura a 13 - 17 °C, el pH de la solución se ajusta a 5,5 - 6,5. Una cantidad de 130-150 gramos de borohidruro sódico se añade después a la solución y se disuelve, el pH aumentará inmediatamente a un pH de 10-11 y la reacción se continúa durante 14-20 horas. Se registra el pH de la solución, tanto antes como después de este periodo de reacción. Después de este tiempo de reacción, lentamente se añade ácido diluido con el fin de ajustar el pH a un valor de 4, lo que degrada el borohidruro sódico restante. Después de mantener un pH de 4 durante 45 - 60 minutos, el pH de la solución se ajusta a 7 con una solución de NaOH diluido.

La purificación continúa de acuerdo con el ejemplo 5.

Ejemplo 3 Oxidación de ácido glucurónico e idurónico (residuos), deleción de la actividad anticoagulante Una cantidad de aproximadamente 3.000 gramos de heparina se disuelve en agua purificada para obtener una solución al 10-20% en peso/volumen. El pH de esta solución se ajusta a 4,5-5,5. Posteriormente, a la solución del proceso se añade metaperyodato sódico (NalO4); cantidad de peryodato 15-25% del peso de la heparina. El pH se ajusta a de nuevo a 4,5 - 5,5. El reactor está protegido de la luz. La solución del proceso se hace reaccionar durante 18 - 24 horas con agitación constante y mantenimiento de la temperatura a 13 - 17 °C, mientras que durante las últimas dos horas la temperatura se disminuye a aproximadamente 5 °C.

Despolimerización de las cadenas de polisacáridos mediante un proceso de eliminación beta alcalino Manteniendo la temperatura a 5 - 25 °C, lentamente se añade una solución 4M de NaOH hasta obtener un pH de 10,5 -12. La reacción se inicia y procede durante 15 - 95 minutos. En este momento, el pH de la solución se registra y lentamente se añade una solución 4M de HCI hasta obtener un pH de 5,5 - 7.

Reducción de los terminales del extremo de reducción Manteniendo la temperatura a 13 - 17 °C, el pH de la solución se ajusta a 5,5 - 6,5. Una cantidad de 130-200 gramos de borohidruro sódico se añade después a la solución y mientras el pH aumenta inmediatamente a 10-11, la reacción se continúa durante 14-20 horas. Después de este tiempo de reacción, lentamente se añade ácido diluido con el fin de ajusfar el pH a un valor de 4, lo que degrada el borohidruro sódico restante. Después de mantener un pH de 4 durante 45 - 60 minutos, el pH de la solución se ajusta a 7 con una solución de NaOH diluido.

Precipitación del producto reducido y eliminación inicial de compuestos que contienen yodo A la mezcla de reacción se añade etanol (95-99,5%) durante un periodo de 0,5 - 1 hora, con agitación cuidadosa y a una temperatura de 5 - 25 °C. El volumen del etanol que se va añadir está en el intervalo de 1 - 2 volúmenes de etanol por volumen de la solución del proceso. La heparina oxidada se deja después precipitar y sedimentar durante 15- 20 horas, tras lo cual el licor madre se decanta y se desecha.

Después, el sedimento se disuelve en agua purificada para obtener una solución al 15-30% en peso/volumen. Se añade NaCI para obtener una concentración de 0.15-0.30 mol/litro en la solución del proceso.

La purificación continúa de acuerdo con el ejemplo 5.

Ejemplo 4 Oxidación de ácido glucurónico e idurónico (residuos), deleción de la actividad anticoagulante Una cantidad de aproximadamente 3.000 gramos de heparina se disuelve en agua purificada para obtener una solución al 10-20% en peso/volumen. El pH de esta solución se ajusta a 4,5-5,5. Posteriormente, a la solución del proceso se añade metaperyodato sódico (NalO4); cantidad de peryodato 15-25% del peso de la heparina. El pH se ajusta a de nuevo a 4,5 - 5,5. El reactor está protegido de la luz. La solución del proceso se hace reaccionar durante 18 - 24 horas con agitación constante y mantenimiento de la temperatura a 13 - 17 °C, mientras que durante las últimas dos horas la temperatura se disminuye a aproximadamente 5 °C. Después se añade glicerol para inactivar la reacción, es decir para convertir el peryodato residual en yodato, se añaden 150 - 200 mi de una solución de glicerol al 85% y se hace reaccionar durante 30 - 60 minutos en agitación.

Precipitación de la eliminación del producto de compuestos gue contienen yodo y productos inactivadores/de reacción A la mezcla de reacción se añade etanol (95-99,5%) durante un periodo de 0,5 - 1 hora, con agitación cuidadosa y a una temperatura de 5 - 25 °C. El volumen del etanol que se va añadir está en el intervalo de 1 - 2 volúmenes de etanol por volumen de la solución del proceso. La heparina oxidada se deja después precipitar y sedimentar durante 15- 20 horas, tras lo cual el licor madre se decanta y se desecha.

Después, el sedimento se disuelve en agua purificada para obtener una solución al 15-30% en peso/volumen. Se añade NaCI para obtener una concentración de 0.15-0.30 mol/litro en la solución del proceso. La agitación continúa durante 0,5 - 1 hora manteniendo a temperatura a 5 - 25 °C. Después, a esta solución se añaden 1.0 - 2.0 volúmenes de etanol (95 - 99,5 %) por volumen de la solución del proceso con agitación durante un periodo de 0,5 - 1 hora. Esto precipita el producto de la solución.

Despolimerización de las cadenas de polisacáridos mediante un proceso de eliminación beta alcalino Una vez decantado y desechado el licor madre, el sedimento se agita en aproximadamente 7 litros de agua hasta que visualmente parece haberse disuelto completamente. Manteniendo la temperatura a 5 - 25 °C, lentamente se añade NaOH 4M hasta obtener un pH de 10,5 -12 y la reacción iniciada de este modo puede proceder durante 60 - 95 minutos. En este momento, el pH de la solución se registra y lentamente se añade una solución 4M de HCI hasta obtener un pH de 5,5 -7.

Reducción de los terminales del extremo de reducción Después de decantar y desechar el licor madre, el sedimento se disuelve mediante la adición de agua purificada hasta obtener una concentración de la solución del proceso de 15-30% en peso/volumen. Manteniendo la temperatura a 13 - 17 °C, el pH de la solución se ajusta a 5,5 - 6,5. Una cantidad de 130-150 gramos de borohidruro sódico se añade después a la solución y se disuelve, el pH aumentará inmediatamente a un pH de 10-11 y la reacción se continúa durante 14-20 horas. Se registra el pH de la solución, tanto antes como después de este periodo de reacción. Después de este tiempo de reacción, lentamente se añade ácido diluido con el fin de ajustar el pH a un valor de 4, lo que degrada el borohidruro sódico restante. Después de mantener un pH de 4 durante 45 - 60 minutos, el pH de la solución se ajusta a 7 con una solución de NaOH diluido. rificación continúa de acuerdo con el ejemplo 5.

Ejemplo 5 Purificación del porducto. Eliminación de aditivos e impurezas del proceso, adición de contraiones y filtración Las soluciones del proceso de acuerdo con los Ejemplos 1-4 que proceden de la etapa de modificación química final de reducción de los terminales del extremo mediante borohidruro se procesan de acuerdo con las metodologías indicadas más adelante.

Un volumen de la solución del proceso se añade a 1 ,5-2,5 volúmenes de etanol (95 - 99,5%), seguido de centrifugación a > 2.000 G, a <20°C durante 20-30 minutos, tras lo cual se decanta y se desecha el sobrenadante.

La pasta de producto obtenida mediante centrifugación se disuelve después en agua purificada para obtener una concentración del producto delm10-20% en peso/volumen. Después se añade NaCI para obtener una concentración de 0,20-0,35 mol/litro. Después se añaden 1 ,5-2,5 volúmenes de etanol (95-99,5%) por volumen de la solución de proceso que precipita el producto en la solución. La centrifugación sigue como se ha descrito anteriormente.

Después, la pasta restante se añade al agua purificada para disolverla. La concentración del producto estaría ahora en el intervalo de 10-20% en peso / volumen. El pH de la solución del producto se ajusta ahora a 6,5-7,5. La solución se filtra y después para eliminar todas las partículas. A continuación, a un volumen de la solución del proceso se añaden 1 ,5-2,5 volúmenes de etanol (95 - 99,5%). Le sigue centrifugación a > 2.000 G y a < 20 °C durante 20 - 30 minutos, tras lo cual el sobrenadante se decanta y se desecha.

Deshidratación de la pasta precipitada y reducción del tamaño de partícula Un reactor se carga con etanol, volumen de aproximadamente 2 litros. Agitando el etanol se añade la pasta precipitada. La agitación mecánica solidifica la pasta y sustituye el agua presente en el etanol, dando una suspensión de partículas homogéneas. La agitación se interrumpe tras 1-2 horas, tras lo cual se deja sedimentar las partículas. Después de la eliminación del exceso de líquido, las partículas se pasan por un tamiz o triturados para obtener partículas de tamaño menor y uniformes.

Desecado del producto El producto se distribuye de forma uniforme en dos bandejas y se introduce en una campana de vacío. Se aplica vacío y se calienta a 35 - 40°C. En este momento se pasa a través del secador una corriente de nitrógeno manteniendo la presión baja en el secador. Cuando se obtiene un peso constante del producto, es decir no se observa más evaporación, el secado se considera completo. El porducto se empaqueta y protege de la humedad.

Ejemplo 6 Oxidación de ácido qlucurónico e idurónico (residuos), deleción de la actividad anticoaqulante Una cantidad de aproximadamente 3.000 gramos de heparina se disuelve en agua purificada para obtener una solución al 10-20% en peso/volumen. El pH de esta solución se ajusta a 4,5-5,5. Posteriormente, a la solución del proceso se añade metaperyodato sódico (NalO4); cantidad de peryodato 15-25% del peso de la heparina. El pH se ajusta a de nuevo a 4,5 - 5,5. La reacción se realiza protegida de la luz. La solución del proceso se hace reaccionar durante 18 - 24 horas con agitación constante y mantenimiento de la temperatura a 13 - 17 °C, mientras que durante las últimas dos horas la temperatura se disminuye a aproximadamente 5 °C.

Despolimerización de las cadenas de polisacáridos mediante un proceso de eliminación beta alcalino Manteniendo la temperatura a 5 - 25 °C, lentamente se añade NaOH 4M hasta obtener un pH de 10,5 -12 y la reacción iniciada de este modo puede proceder durante 15 - 95 minutos. En este momento, el pH de la solución se registra y lentamente se añade una solución 4M de HCI hasta obtener un pH de 5,5 - 7.

Reducción de los terminales del extremo de reducción Después de decantar y desechar el licor madre, el sedimento se disuelve mediante la adición de agua purificada hasta obtener una concentración de la solución del proceso de 15-30% en peso/volumen. Manteniendo la temperatura a 13 - 17 °C, el pH de la solución se ajusta a 5,5 - 6,5. Una cantidad de 130-200 gramos de borohidruro sódico se añade después a la solución y se disuelve, el pH aumentará inmediatamente a un pH de 10-11 y la reacción se continúa durante 14-20 horas. Se registra el pH de la solución, tanto antes como después de este periodo de reacción. Después de este tiempo de reacción, lentamente se añade ácido diluido con el fin de ajustar el pH a un valor de 4, lo que degrada el borohidruro sódico restante. Después de mantener un pH de 4 durante 45 - 60 minutos, el pH de la solución se ajusta a 7 con una solución de NaOH diluido. Ahora se añade agua purificada a la solución hasta obtener una conductividad de 15 -20 mS/cm de la solución de reacción.

Purificación del producto mediante cromatografía de intercambio aniónico Una columna de 500 mm de diámetro se llena de medio, DEAE-Sefarosa o QAE-Sefarosa hasta un volumen de 25 - 30 litros correspondiente a una altura del lecho de 10 - 15 cm.

La cromatografía se realiza en 3-4 ciclos para consumir todo el producto.

Después se preparan tampones.

Tampón de equilibrado, tampón A, fosfato 15 mM, NaC1 150 mM Tampón de elución, Tampón B, solución 2 M de NaCI Tampón de limpieza NaOH 0,5 M La etapa de cromatografía se realiza a 15-25 °C, a un caudal de < 200 cm/hora o aproximadamente 350 litros/hora.

La columna se equilibra con el tampón de equilibrado hasta que el eluyente tiene una conductividad de 15-20 mS/cm. Después, la solución de heparina oxidada se bombea en la columna. La cantidad del producto bruto a aplicar corresponde a < 40 g/ litro de medio cromatográfico.

Después se realiza un lavado ¡socrático con tampón de equilibrado y se interrumpe cuando la UV 210-254 nm ha alcanzado un valor basal.

Normalmente se requieren 5 volúmenes del lecho de tampón para alcanzar el valor basal. La sustancias químicas añadidas al proceso y los productos formados se eliminan.

Después, la fuerza iónica del tampón aplicado a la columna se incrementa linealmente realizando una elusión por gradiente. El tampón A disminuye de 100% a 0% sustituido por 100% del tampón B en 5 volúmenes del lecho. El porducto, eluato, se recoge cuando la absorbancia de UV es >0,1 AU y se interrumpe cuando la señal es < 0,1 AU. La limpieza de la columna se realiza después, tras lo cual de nuevo queda preparada para el siguiente ciclo de cromatografía. Los eluatos de todos los ciclos se combinan y almacenan a 15-25 °C.

Desalado del producto A un volumen de los eluatos combinados de la etapa previa se añaden 3 volúmenes de 95-99,5% de etanol, a15-25 °C, en agitación constante. Esto precipita el producto de la solución. El producto se deja sedimentar durante > 3 horas. Después, el sedimento se disuelve en agua purificada hasta una concentración del 15 - 25%. A continuación se añade la solución a etanol frío (<-5 °C) 95-99,5%, normalmente se consumen 5 volúmenes de etanol por un volumen de la solución producto. Después se realiza la centrifugación en modo continuo, >2000 G, a continuación e recoge la pasta del producto y se prepara para el secado.

Desecado del producto El producto se distribuye de forma uniforme en dos bandejas y se introduce en una campana de vacío. Se aplica vacío y se calienta a 35 - 40°C. En este momento se pasa a través del secador una corriente de nitrógeno manteniendo la presión baja en el secador. Cuando se obtiene un peso constante del producto, es decir no se observa más evaporación, el secado se considera completo. El producto se tritura y se homogeneiza, después se empaqueta y se protege de la humedad.

Ejemplo 8 La heparina anticoagulante baja producida de acuerdo con los ejemplos 1 y 3 se sometió a análisis RMN de H y se comparó con el espectro de la heparina nativa.

La Tabla II demuestra señales en el intervalo de 5,00 ppm a 6,50 ppm no presentes en la heparina nativa generadas por las glucosaminas insaturadas del extremo no reductoras. Los resultados de la Tabla II muestran que es posible reducir a niveles bajos la presencia de dichos compuestos no previstos en el espectro de la heparina nativa. En comparación, el límite actual aplicable al control de calidad de la heparina, monografía 7, EDQM es <4% en comparación con la señal a 5,42 ppm para cualquier señal en la región de 5,70-8,00 ppm.

Tabla II Resultados cualitativos de una heparina anticoagulante baja con respecto a las señales inusuales. Intensidad de la señal para las señales 6,15 y 5,95 ppm en un espectro de RMN de 1H Adicionalmente, la presencia de glucosaminas insaturadas del extremo no reductor se cuantificó también mediante evaluación combinada de los espectros de RMN de 1H y RMN de 13C (HSQC) y se demostró como un % molar de las glucosaminas totales (véase la Tabla III).

Adicionalmente, la muestra se analizó siguiendo el procedimiento bidimensional (2D) de RMN que implica el uso combinado de espectroscopia de RMN de protones y de carbono (HSQC) como se ha descrito anteriormente (véase Guerrini M., Naggi A., Guglieri S, Santarsiero R, Torri G. Anal Biochem 2005; 337, 35-47.) La Tabla III depuesta la fracción (%) de glucosaminas modificadas en comparación con la cantidad total de glucosaminas de la heparina anticoagulante baja presente como señales a 5,95 ppm y 6,15 ppm en el espectro de RMN de 1H.

Tabla III: Resultados de la determinación cuantitativa de las señales inusuales 5,95 ppm, 6,15 ppm de la glucosamina total Ejemplo 9 El producto fabricado de acuerdo con uno cualquiera de los ejemplos anteriores se puede preparar como producto farmacológico mediante un proceso aséptico funcional, tal como una solución que comprende 150 mg/ml del producto activo y Na fosfato hasta 15 mM, pH 6-8. El fármaco obtenido de este modo está destinado principalmente a administración subcutánea pero es adecuado para a administración intravenosa.

El producto resultante es una forma despolimerizada de la heparina con un peso molecular promedio proyectado de 4,6-6,9 kDa y sin, esencialmente, actividad anticoagulante.

El producto tiene una distribución del tamaño de polímeros de polisacáridos con un intervalo para n de 2-20 correspondiente a pesos moleculares de 1 ,215 kDa. El tamaño predominante son 6-16 unidades de disacárido correspondientes a pesos moleculares de 3,6-9,6 kDa.

El peso molecular se determinó mediante GPC-HPLC llevada a cabo con columnas TSK 2000 y TSK 3000 SW en serie. Se usó el índice de refracción para la evaluación. Se usó el primer calibrador internacional para las HBPM.

A continuación se presenta la distribución de la masa molecular y la parte correspondiente del porcentaje acumulado del peso total.

Tabla IV. Distribución de polisacáridos y su correspondiente masa molecular como %acumulado del peso para varios lotes El valor correspondiente para el peso molecular promedio en peso, Mw, entra dentro del intervalo de 4,6-6,9 kDa.

Ejemplo 10 La estabilidad de la sustancia farmacológica (polvo) y el producto farmacológico disuelto en solución acuosa tamponada con fosfato de una heparina modificada químicamente producida de acuerdo con los ejemplos 1 a 3 y formulada de acuerdo con el ejemplo 9 se estudió para determinar la estabilidad en 36 meses a temperatura ambiente. El producto inicial era una solución de color blanco transparente a amarillo claro que tenía una absorbancia a 400 nm (solución al 10% en peso/volumen) de 0,14, un pH of 7,0 y una osmolalidad de 658 mOsm/kg, un peso molecular promedio de 5,6 kDa y un contenido de 150 mg/ml.

Tras 36 meses, el producto farmacológico tenía el mismo aspecto visual, una absorbancia a 400 nm (solución al 10% en peso/volumen) de 0,13, un pH of 7,1 y una osmolalidad de 657 mOsm/kg, un peso molecular promedio de 5,4 kDa y un contenido de 153 mg/ml.

Ejemplo 11 Administración subcutánea La heparina modificada químicamente producida mediante el procedimiento divulgado en el ejemplo 1 se marcó con tritio y se administró a ratas Sprauge Dawley y a perros.

Resultados: Tras la administración subcutánea a 2, 8 y24 mg de heparina / kg / día en ratas y 3, 15 y 45 mg de heparina / kg / día en perros, la absorción fue rápida y los niveles máximos en plasma generalmente se alcanzaron en 0,5 y 1 ,5 horas en ratas y perros, respectivamente. La biodisponibilidad subcutánea fue de aproximadamente el 90% en ratas y en perros. Es interesante el hecho de que la biodisponibilidad correspondiente para la heparina es de aproximadamente 10%.

Ejemplo 12. Tratamiento con DF01 durante las últimas fases del embarazo Diseño del estudio Estudio multicéntrico, aleatorizado, doble ciego y controlado con placebo para evaluar la seguridad y la eficacia del pretratamiento con DF01 durante las últimas fases del embarazo en la reducción de la duración del parto. En el estudio participaron dieciocho centros de estudio.

DF01 es una heparina modificada químicamente de acuerdo con la invención que es una heparina anticoagulante baja generada químicamente mediante oxidación con peryodato de la heparina de la mucosa intestinal de cerdo, seguida de la eliminación ß del producto siguiendo los Ejemplos 1 y 9.

El protocolo indicó que cada sujeto debía acudir a la clínica a diario desde el inicio del tratamiento a una edad gestacional desde la semana 38+0 hasta la semana 40+0 hasta el parto para recibir una inyección s.c. del medicamento en investigación. La duración prevista de la participación en el estudio era de 1-28 días (+ los periodos de selección y seguimiento) para cada sujeto. Se debía inducir el parto en todas las mujeres como máximo a la semana 42+0 de gestación. Se dio un máximo de 28 días de tratamiento [como mucho 28 dosis del medicamento en investigación (PEI)]. Se acudiría a una visita de seguimiento a las 8-16 semanas del parto.

Tratamientos DF01 es una heparina despolimerizada que está esencialmente desprovista de su actividad anticoagulante (< 10 Ul/mg mediante ensayos de anti-factor Xa- and anti-factor lia según la farmacopea). El peso molecular promedio en peso Mw es 5.000-7.000.

DF01 y el placebo equivalente se proporcionaron como soluciones para inyección subcutánea.

La preparación farmacéutica de DF01 es una solución para inyección subcutánea, 8 mi dispensados en viales de vidrio sellados con una tapón de caucho y cubiertos con una tapa de aluminio extraíble.

Cada mi de la solución de DF01 contiene lo siguiente: ? DF01 , 150 mg ? Tampón fosfato, 0,015 M ? Alcohol bencílico, 14 mg.

Como placebo se usó una solución de cloruro sódico fisiológica estéril conservada con alcohol bencílico. Ocho (8) mi del placebo se proporcionaron en viales del mismo modo que para el producto farmacológico.

Cada mi de la solución de placebo contiene lo siguiente: ? Cloruro sódico, 9 mg ? Alcohol bencílico, 14 mg.

Los sujetos recibieron 60 mg/día de DF01 (0,4 mi) (correspondiente a 1 ,00 mg/kg/día en un sujeto de 60 kg) o placebo (0,4 mi).

Los productos se administraron mediante inyecciones subcutáneas diarias con inicio del tratamiento a la edad gestacional de 38+0 semanas a 40+0 semanas y una duración del tratamiento hasta el parto. Si todavía no se ha producido el parto a la semana 42+0, se tiene que inducir. La duración máxima del tratamiento fue de 28 días. El intervalo de tiempo permitido entre las inyecciones diarias fue de 24 +/-6 horas, es decir 18-30 horas. Si ocasionalmente no se cumplieran los límites de tiempo o se perdiera una dosis, el tratamiento podía continuar.

Resultados Se produjo un total de 149 nacimientos sin cesárea, en los que las mujeres recibieron oxitocina (83 en el grupo de DF01 y 66 en el grupo de placebo). La prueba del orden logarítmico mostró una diferencia significativa en la duración del parto entre los grupos de tratamiento, con un valor p de 0,0158. En la Figura 1 se proporciona la curva de producto-nacimiento límite y se debe interpretar del siguiente modo. Cuando el parto dura hasta aproximadamente 6-8 horas, las mujeres no recibirán oxitocina en un alto número de casos y DF01 por sí solo parece tener un efecto mínimo (las dos curvas se siguen muy e cerca). No obstante, cuando el parto de prolonga durante más de 6-8 horas y las mujeres reciben normalmente oxitocina, la administración adicional de DF01 parece potenciar el efecto de la oxitocina y facilitar una menor duración del parto.

La incapacidad de la oxitocina para ejercer su efecto probablemente se debe a la falta de heparán sulfatos y, en muchos casos, ello conduce a una sobredosis de oxitocina que puede dar lugar a efectos secundarios graves, tales como hipercontractilidad. El uso conjunto de DF01 puede inducir un efecto de disminución de oxitocina y prevenir la hipercontractilidad y el riesgo de complicaciones fetales.

Ejemplo 11 Las células de músculo liso del útero humano se establecieron en un cultivo. Se midió el Ca2+ intracelular con el pigmento indicador de calcio Fluo-4 y se establecieron imágenes de células vivas con microscopía confocal Las células se trataron con oxitocina y se demostró una entrada de Ca2+-al citosol (Fig. 2B).

El efecto dependía de la dosis con un efecto máximo ya a 0,05 Ul/ml de oxitocina. Para los experimentos se usó DF01 como se describió en el Ejemplo 1.

La Figura 2A muestra que DF01 solo no afectaba a la concentración de Ca2+. No obstante, cuando se administró DF01 junto con oxitocina se alcanzó un nivel de Ca2+ mayor y sostenido en comparación con la oxitocina sola (Fig 2B y C). El patrón de respuesta a la dosis, véase la Figura 2D, muestra que el número de picos de Ca2+se correlacionan con la concentración de DF01. Los resultados demuestran un mecanismo para cómo ejerce el DF01 un efecto sobre la contracción uterina estimulando y manteniendo el efecto de la oxitocina.

El mecanismo se investigó adicionalmente preincubando las células de músculo liso del útero con 10 µ? de verapamilo durante 30 minitos. El verapamilo no afectó a la entrada de Ca2+, inducida por oxitocina o por la combinación de oxitocina y DF01. Por tanto, se puede concluir que los canales L no están implicados.

También se investigó si el mecanismo de transporte principal de inositol-3 fosfato (IP3) estimulaba el transporte de Ca2+ del retículo endoplásmico. Para estudiar esta vía se analizó 2-aminoetoxidifenilborato (2-APB) en Ca2+ tras 30 minutos de incubación con una concentración de 100 µ?. Este inhibidor disminuyó fuertemente el transporte de Ca2+estimulado por oxitocina y por oxitocina/DF01.

Para caracterizar adicionalmente la interacción entre la oxitocina y DF01 se usó el efecto del antagonista de receptores de oxitocina Atosiban y las células se sometieron al efecto de la oxitocina potenciado con DF01 sobre el transporte de Ca2+ Atosiban a una concentración de 10 "6 M inhibió claramente el efecto de la oxitocina y de la combinación de oxitocina/DF01 Los resultados indican que DF01 no afecta por sí solo al transporte de Ca +. No obstante, en combinación con oxitocina se observa una clara estimulación del transporte de Ca2+ en respuesta a la dosis. El DF01 estabiliza el efecto de la oxitocina que tiene como resultado periodos más prolongados de estimulación. El efecto no implica a los canales L pero sí implica a la entrada de Ca2+ estimulada por IP3 en la señalización de la oxitocina. El efecto del antagonista de oxitocina sugiere que el efecto sobre DF01 funciona a nivel de los receptores de oxitocina.

Se concluye que DF01 y las heparinas modificadas químicamente de acuerdo con la invención son agentes útiles para administrar para mejorar las contracciones del miometrio y tratar las complicaciones asociadas con contracciones del miometrio inadecuadas o ausentes. En resumen, se considera que DF01 y heparina químicamente modificada y heparán sulfatos similares son tratamientos de intervención directa eficaces requeridos para reestablecer un parto efectivo.

Aunque en el presente documento se han divulgado realizaciones concretas con detalle, esto se ha realizado a modo de ejemplo solo con fines ilustrativos y no se pretende que sena limitantes con respecto al alcance de las reivindicaciones adjuntas siguientes. En particular, el inventor contempla que se pueden realizar varias sustituciones, alteraciones y modificaciones de la invención sin desviarse del espíritu y el alcance de la invención como se define en las reivindicaciones.

Claims (24)

REIVINDICACIONES

1. Una heparina modificada químicamente o heparán sulfato con una actividad antifactor Ha inferior a 10 Ul/mg, una actividad antifactor Xa inferior a 10 Ul/mg y un peso molecular promedio (Mw) de aproximadamente 4,6 a aproximadamente 6,9 kDa, caracterizada porque comprende: (i) cadenas de polisacáridos esencialmente libres de secuencias de sacáridos intactos químicamente que participan en el efecto anticoagulante; y (ii) cadenas de polisacáridos correspondientes a pesos moleculares entre 1,2 y 12 kDa con un disacárido que aparece de forma predominante de acuerdo con la (fórmula I). (Fórmula I), en la que, n es un número entero de 2 a 20, en la que la heparina modificada o heparán sulfato comprende glucosaminas insaturadas en el extremo no reductor que están presentes como señales en el intervalo de 5,0 a 6,5 ppm en un espectro de RMN de 1H con una intensidad (% proporción) inferior al 4% en relación con la señal a 5,42 ppm de la heparina nativa, para su uso en combinación con un agente capaz de estimular las contracciones del miometrio del útero en el tratamiento de la interrupción del parto.

2. La heparina modificada químicamente o heparán sulfato para su uso de acuerdo con la reivindicación 1 , caracterizada porque la interrupción del parto es interrupción primaria del parto.

3. La heparina modificada químicamente o heparán sulfato para su uso de acuerdo con la reivindicación 1 , caracterizada porque la interrupción del parto es interrupción secundaria del parto.

4. La heparina modificada químicamente o heparán sulfato para su uso de acuerdo con la reivindicación 3, caracterizada porque la interrupción secundaria del parto es un progreso insuficiente o un cese completo del progreso.

5. La heparina modificada químicamente o heparán sulfato para su uso de acuerdo con la reivindicación 3, caracterizada porque la interrupción secundaria del parto se debe a una desproporción cefalopélvica.

6. La heparina modificada químicamente o heparán sulfato para su uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-5, caracterizada porque la interrupción del parto aparece en una mujer a la que se le ha inducido el parto.

7. La heparina modificada químicamente o heparán sulfato para su uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-6, caracterizada porque la interrupción del parto aparece en una mujer que es nulípara.

8. La heparina modificada químicamente o heparán sulfato para su uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-7, caracterizada porque el agente capaz de estimular las contracciones del miometrio del útero es oxitocina.

9. La heparina modificada químicamente o heparán sulfato para su uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-8, caracterizada porque las cadenas de polisacárido que aparecen de forma predominante tienen entre 6 y 12 unidades disacáridos con pesos moleculares de 3,6 a 7,2 kDa.

10. La heparina químicamente modificada o heparán sulfato para su uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 - 9, caracterizada porque al menos el 70 % de las cadenas de polisacáridos tiene un peso molecular superior a 3 kDa.

11. La heparina químicamente modificada o heparán sulfato para su uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 - 10, caracterizada porque tiene una distribución de los polisacáridos y su correspondiente masa molecular expresada como el % acumulado del peso de acuerdo con la tabla:

12. La heparina químicamente modificada o heparán sulfato para su uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 - 11 , caracterizada porque las señales de glucosamina modificad están presentes a 5,95 ppm y 6,15 ppm en el espectro de RMN de 1H.

13. La heparina químicamente modificada o heparán sulfato para su uso de acuerdo con la reivindicación 12, caracterizada porque las glucosaminas modificadas comprenden menos del 1 % del contenido total de glucosaminas.

14. La heparina químicamente modificada o heparán sulfato para su uso de acuerdo con de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 -13, caracterizada porque la heparina químicamente modificada o heparán sulfato está esencialmente desprovista de ácidos idurónico y/o glucurónico no sulfatados intactos.

15. La heparina químicamente modificada o heparán sulfato para su uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 -14, caracterizada porque la al menos una heparina químicamente modificada o heparán sulfato es administrada tópicamente en una preparación farmacéutica tópica.

16. La heparina químicamente modificada o heparán sulfato para su uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 - 14, caracterizada porque al menos una heparina químicamente modificada o heparán sulfato es administrada en una preparación farmacéutica parenteral.

17. La heparina químicamente modificada o heparán sulfato para su uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 - 16, caracterizada porque al menos una heparina químicamente modificada o heparán sulfato es administrada como un tratamiento adyuvante para, y/o a una mujer que ya está siendo tratada con, otro agente útil para promocionar o estimular las contracciones del miometrio del útero.

18. La heparina químicamente modificada o heparán sulfato para su uso de acuerdo con la reivindicación 17, caracterizada porque la heparina químicamente modificada o heparán sulfato es administrada por vía intravenosa cada 1-4 horas como adyuvante con un tratamiento con oxitocina durante hasta 36 horas.

19. Un procedimiento de tratamiento de la interrupción del parto, que comprende administrar a una mujer embarazada una heparina químicamente modificada o heparán sulfato con una actividad antifactor lia menor que 10 Ul/mg, una actividad antifactor Xa menor que 10 Ul/mg y un peso molecular promedio (Mw) de aproximadamente 4,6 a aproximadamente 6,9 kDa, que comprende: (') cadenas de polisacáridos esencialmente libres de secuencias de sacáridos intactos químicamente que participan en el efecto anticoagulante; y cadenas de polisacáridos correspondientes a pesos moleculares entre 1 ,2 y 12 kDa con un disacárido que aparece de forma predominante de acuerdo con la (fórmula I). (Fórmula I) en la que, n es un número entero de 2 a 20. en el que la heparina modificada o heparán sulfato comprende glucosaminas insaturadas en el extremo no reductor que están presentes como señales en el intervalo de 5,0 a 6,5 ppm en un espectro de RMN de 1H con una intensidad (% proporción) inferior al 4% en relación con la señal a 5,42 ppm de la heparina nativa, en combinación con un agente capaz de promocionar las contraciones del miometrio del útero.

20. Procedimiento de acuerdo con la reivindicación 19, en el que la heparina químicamente modificada o heparán sulfato es administrada como un tratamiento adyuvante para, y/o a una mujer que ya está siendo tratada con, otro agente útil para promocionar o estimular las contracciones del miometrio del útero.

21. Procedimiento de acuerdo con la reivindicación 19 o la reivindicación 20, en el que la heparina químicamente modificada o heparán sulfato es administrada por vía intravenosa cada 1-4 horas como adyuvante con un tratamiento con oxitocina durante hasta 36 horas.

22. Uso de una heparina modificada químicamente o heparán sulfato con una actividad antifactor lia inferior a 10 Ul/mg, una actividad antifactor Xa inferior a 10 Ul/mg, mg y un peso molecular promedio (Mw) de aproximadamente 4,6 a aproximadamente 6,9 kDa, que comprende: (i) cadenas de polisacáridos esencialmente libres de secuencias de sacáridos intactos químicamente que participan en el efecto anticoagulante; y (ii) cadenas de polisacáridos correspondientes a pesos moleculares entre 1 ,2 y 12 kDa con un disacárido que aparece de forma predominante de acuerdo con la (fórmula I). (Fórmula I), en la que, n es un número entero de 2 a 20 en el que la heparina modificada o heparán sulfato comprende glucosaminas insaturadas en el extremo no reductor que están presentes como señales en el intervalo de 5,0 a 6,5 ppm en un espectro de RMN de 1H con una intensidad (% proporción) inferior al 4% en relación con la señal a 5,42 ppm de la heparina nativa, para fabricar un medicamento para el tratamiento de la interrupción del parto en combinación con un agente capaz de promocionar las contracciones del miometrio del útero.

23. El uso de acuerdo con la reivindicación 22, en el que la heparina químicamente modificada o heparán sulfato es administrada como un tratamiento adyuvante para, y/o a una mujer que ya está siendo tratada con, otro agente útil para promocionar o estimular las contracciones del miometrio del útero.

24. El uso de acuerdo con la reivindicación 22 o la reivindicación 23, en el que la heparina químicamente modificada o heparán sulfato es administrada por vía intravenosa cada 1-4 horas como adyuvante con un tratamiento con oxítocina durante hasta 36 horas.