MX2012015200A - Polimorfos de osi-906. - Google Patents

Abstract

Las formas polimórficas del inhibidor de tirosina cinasa OSI-906, la preparación, composiciones farmacéuticos, y usos de los mismos; la invención incluye los métodos para tratar enfermedades tales como cáncer, incluyendo cáncer mediado por lo menos en parte por IGF-1R y/o IR, con los polimorfos y las composiciones; este resumen no es limitante de la invención.

Description

POLIMORFOS DE OSI-906 Esta solicitud reclama el beneficio y prioridad de la Sol. de EEUU. No. 61/357688, presentada el 23 de junio de 2010, que es incorporada en la presente en su totalidad por esta referencia.

ANTECEDENTES DE LA INVENCION La presente invención se refiere al menos en parte al tratamiento contra el cáncer, ciertos compuestos químicos y métodos de tratamiento de tumores y cánceres con los compuestos.

El desarrollo de terapias contra el cáncer basadas en dianas se ha vuelto el foco de muchos programas de investigación y desarrollo farmacéuticos. Varias estrategias de intervención incluyen el direccionamiento a proteínas tirosina cinasa, incluyendo tirosina cinasas receptoras que se piensa impulsan o median el crecimiento del tumor.

El receptor del factor del crecimiento-1 similar a insulina (IGF-1 R) es una tirosina cinasa receptora que juega un papel clave en la proliferación de células de tumor e inhibición de apoptosis, y se ha vuelto una diana atractiva de terapia de cáncer. IGF-1 R está involucrado en el estab ecimiento y el mantenimiento de la transformación celular, es con frecuencia sobre-expresado por tumores humanos, y la activación o sobre-expresión del mismo media aspectos del fenotipo maligno. La activación del IGF-1 R aumenta la propensión de invasión y metástasis.

La inhibición de la activación del receptor ha sido un método atractivo que tiene el potencial de bloquear la transducción de señal mediada por IGF. Han sido desarrollados anticuerpos anti-IGF-1 R para b oquear la porción de unión de ligando extracelular del receptor y pequeñas moléculas para apuntar a la actividad de la enzima del dominio de tirosina cinasa. Vea Expert Opin. Ther. Patents, 17(1):25-35 (2007); Expert Opin. Ther. Targets, 12(5):589-603 (2008); y Am J. Transí. Res., 1 :101-114 (2009).

US 2006/0235031 (publicada el 19 de Octubre de 2006) describe una clase de inhibidores de proteína cinasa sustituidos en el anillo bicíclico, incluyendo el Ejemplo 31 del mismo, que corresponde al inhibidor doble de IR/IGF-1 R conocido como OSI-906. Al 2011 , el OSI-906 está en desarrollo clínico en varios tipos de cánceres y tumores. La preparación y la caracterización de OSI-906, que puede ser denominado como c/s-3-[8-amino-1-(2-fenil-quinolin-7-¡l)-imidazo[1 ,5-a]pirazin-3-il]-1-metilciclobutanol, | es descrito en la mencionada US 2006/0235031.

El OSI-906 es un potente, selectivo, y oralmente biódisponible inhibidor de cinasa IGF-1 R/IR doble con propiedades favorables similares a fármaco. El perfil de selectividad del OSI-906 en conjunto con su capacidad de inhibir tanto el IGF-1 R como el IR proporciona la oportunidad especial de apuntar completamente el eje IGF-1 R/IR. Vea Future Med. Chem., "|(6), 1153-1171 , (2009) Nuevas formas polimórficas pueden proporcionár varias ventajas, incluyendo reproducibilidad para el uso en formulaciones farmacéuticas, y en características físicas mejoradas tal como la estabilidad, la solubilidad, la biodisponibilidad, o como características de procesabilidad/manejo. Las formas polimórficas son preparadas y son probadas para comprender mejor las propiedades fisicoquímicas relativas de un fármaco dado. La identificación de las formas más prometedoras puede ser esencial para el desarrollo exitoso de productos. Por ejemplo, la :orma más termodinámicamente estable puede ser seleccionada para desa'rollo. Vea Wiley Series in Drug Discovery and Development, Evaluation of Drug Candidates for Preclinical Development: Pharmacokinetics, l ietabolism, Pharmaceutics, and Toxicology, 1-281 , (2010).

Las agencias reguladoras pueden requerir el control definitivo de la forma polimórfica de las sustancias de fármaco. Por lo tanto, formas polimórficas novedosas de OSI-906 con propiedades físicas mejoradas y controlables son deseadas.

BREVE DESCRIPCION DE LA INVENCION En algunos aspectos, la invención proporciona formas polimórficas de OSI-906 (c/'s-3-[8-amino-1-(2-fenil-quinolin-7-il)-irjnidazo[1 ,5-a]pirazin-3-il]-1-metilciclobutanol).

En ciertos aspectos, la invención proporciona formas polimórficas hidratadas de OSI-906.

En ciertos aspectos, la invención proporciona formas polimórficas solvatadas de OSI-906.

En ciertos aspectos, la invención proporciona formas polimórficas no solvatadas de OSI-906.

En ciertos aspectos, la invención proporciona la forma de polimorfo A, que fue identificada como una forma cristalina no solvatada de OSI-906.

En aspectos adicionales la invención proporciona la Forma B, que fue identificada como siendo más probablemente una forma cristalina monohidratada de OSI-906.

En aspectos adicionales la invención proporciona la Forma C, que fue identificada como un hemihidrato o forma cristalina hidratada variable de OSI-906.

En aspectos adicionales la invención proporciona laj Forma D, que fue identificada como una forma cristalina monohidratada de OSI-906.

En aspectos adicionales la invención proporciona la Forma E, que fue identificada como una forma cristalina hemihidratada posible de OSI-906.

En aspectos adicionales la invención proporciona la Forma F, que fue identificada como una forma cristalina de solvato de isopropanol de OSI-906.

En aspectos adicionales la invención proporciona la Forma G, que fue identificada como una forma cristalina de solvato de nitrometano de OSI-906.

En aspectos adicionales la invención proporciona la Forma H, que fue identificada como una forma cristalina de solvato de acetonitrilo de OSI-906.

La invención proporciona los métodos de preparación y aislamiento de las formas polimórficas incluyendo las formas A-H de OSI-906. La invención proporciona composiciones farmacéuticas de las formas polimórficas de OSI-906 A-H. La invención proporciona los rrétodos de tratamiento de enfermedades tales como cáncer y condiciones para las que el tratamiento con un inhibidor de IGF-1 R/IR es efectivo, con las formas A-H de OSI-906. La invención proporciona el uso de los polimorfos de OSI-906 en la fabricación de un medicamento para tal tratamiento.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS Fig. 1 : Patrones de XRPD superpuestos de las Formas A-G de OSI-906.

Fig. 2: Patrón de XRPD de la Forma A de OSI-906.

Fig. 3: Patrón de XRPD de la Forma B de OSI-906.

Fig. 4: Patrón de XRPD de la Forma C de OSI-906.

Fig. 5: Patrón de XRPD de la Forma D de OSI-906.

Fig. 6: Patrón de XRPD de la Forma E de OSI-906.

Fig. 7: Patrón de XRPD de la Forma F de OSI-906.

Fig. 8: Patrón de XRPD de la Forma G de OSI-906.

Fig. 9: Patrón de XRPD de la Forma H de OSI-906.

Fig. 10: Espectro de FTIR de la Forma A de OSI-906.

Fig. 11 : Espectro de FTIR de la Forma B de OSI-906.

Fig. 12: Espectro de FTIR de la Forma C de OSI-906.

Fig. 13: Espectro de FTIR de la Forma D de OSI-906.

Fig. 14: Espectro de FTIR de la Forma E de OSI-906.

Fig. 15: Espectro de FTIR de la Forma F de OSI-906.

Fig. 16: Termograma de DSC de la Forma A de OSI-9p6.

Fig. 17: Perfil de TGA de la Forma A de OSI-906.

Fig. 18: Termograma de DSC de la Forma B de OSI-9¡06.

Fig. 19: Perfil de TGA de la Forma B de OSI-906.

Fig. 20: Termograma de DSC de la Forma C de OSI-906.

Fig. 21 : Perfil de TGA de la Forma C de OSI-906.

Fig. 22: Termograma de DSC de la Forma D de OSI-906 Fig. 23: Perfil de TGA de la Forma D de OSI-906. | Fig. 24: Termograma de DSC de la Forma E de OSI-906 Fig. 25: Perfil de TGA de la Forma E de OSI-906.

Fig. 26: Termograma de DSC de la Forma F de OSI-906 Fig. 27: Perfil de TGA de la Forma F de OSI-906.

Fig. 28: Termograma de DSC de la Forma G de OSI-906.

Fig. 29: Perfil de TGA de la Forma G de OSI-906.

Fig. 30: espectro de 1H RMN (en DMSO-cfe) de la Forma A de OSI-906.

Fig. 31 : Superposición de espectro de 1H RMN (en Di iSO-dg) de la Forma B de OSI-906 (superior) y la Forma A (inferior).

Fig. 32: Superposición del espectro de H RMN (en Di iSO-cfe) de la Forma C de OSI-906 (superior) y la Forma A (inferior).

Fig. 33: Superposición del espectro de 1H RMN (en Di iSO-d6) de la Forma D de OSI-906 (superior) y la Forma A (inferior).

Fig. 34: Superposición del espectro de 1H RMN (en Di iSO-d6) de la Forma E de OSI-906 (superior) y la Forma A (inferior).

Fig. 35: Superposición del espectro de 1H RMN (en Di iSO-de) de la Forma F de OSI-906 (superior) y la Forma A (inferior).

Fig. 36: Superposición del espectro de H RMN (en Di iSO-de) de la Forma G de OSI-906 (superior) y la Forma A (inferior).

Fig. 37: Dibujo del Diagrama Elipsoide Térmica de Oak Ridge (ORTEP) de OSI-906. Los átomos son representados por 50% de probabilidad de elipsoides térmicos anisótropos.

Fig. 38: Curva de Sorción de Humedad Gravimétrica dje la Forma i A.

Fig. 39: Diagrama apilado de sólidas de OSI-906 (de la parte superior): análisis de sorción de humedad de la Forma A; (c) 7 días de almacenamiento bajo condiciones de desecación; (d) 7 días de almacenamiento a 25 °C/60 % HR; (e) 7 días de almacenamiento a 40 °C 75 %HR.

Fig. 40: Diagrama apilado de patrones de XRPD de formas sólidas de OSI-906 (de la parte superior): (a) Forma A; (b) 7 días de almacenamiento a 40°C bajo vacío; (c) 7 días de almacenamiento a 80°C bajo vacío; (d) después molienda con mortero y triturador, 7 días de almacenamiento a 80°C bajo vacío; (e) después molienda con molino de bolas, 7 días de almacenamiento a 80°C bajo vacío.

Fig. 41 : Diagrama apilado de espectros de 1H-RMN de las formas sólidas de OSI-906 (desde la parte superior): (a) Forma A; (b) 7 días de almacenamiento a 40°C bajo vacío; (c) 7 días de almacenamiento a 80°C bajo vacío.

Fig. 42: Patrón de XRPD de OSI-906 Forma F obtenido de la cristalización de solvente único en IPA.

Fig. 43: Diagrama apilado de patrones de XRPD del solvato en IPA de OSI-906 (Forma F) (desde la parte superior): (a) Forma F; (b) Mezcla de Formas C y F obtenida después de 8 días de almacenamiento de la Forma F en un frasco sellado a temperatura ambiente; (c) Forma C.

Fig. 44: Regresión lineal para las muestras de ca ibración y validación con la Forma D.

Figs. 45A-45B: Espectros de FTIR de las Formas A y F de OSI-906; (bandas de adsorción únicas i la huella de la Forma F no fue observada en la Forma A.

Figs. 46A-46B: Espectros Raman de las Formas A y F de OSI-906; (bandas de absorción únicas i la huella de la Forma F no fue¡ observada (e) después de 7 días de almacenamiento de la Forma C + D a 40°C bajo vacío proporcionando la Forma C; (f) después de 7 días de almacenamiento de la Forma C + D a 80°C bajo vacío proporcionando la Forma C; |(g) Forma D.

Fig. 53: Diagrama apilado de patrones de XRPD de formas sólidas de OSI-906 (de la parte superior): (a) Forma C; (b) Forma D; (c) Forma I; (d) después de 3 días de almacenamiento de la Forma C + D bajo condiciones de desecación proporcionando una mezcla de Formas G + D + I.

Fig. 54: Diagrama apilado de patrones de XRPD de formas sólidas de OSI-906 (de la parte superior): (a) Después del día 11 el lodo a temperatura ambiente de la Forma C en THF proporciona la Forma A; (c) Después del día 11 el lodo a temperatura ambiente de las Formas A + C + D en IPA proporciona la Forma A; (d) Después del día 5 a 50°C el lodo de las Formas C + D en EtOH proporciona una mezcla de Formas A y E.

Fig. 55: Curva de Sorción de Humedad Gravimétrica dé la Forma D.

Fig. 56: Diagrama apilado de patrones de XRPD de formas sólidas de OSI-906 (de la parte superior): (a) Forma D; (b) después de análisis de sorción de humedad de la Forma D se tiene como resultado una mezcla de Formas C y D; (c) Forma C.

Fig. 57: Diagrama apilado de patrones de XRPD de formas sólidas de OSI-906 (de la parte superior): (a) Forma A; (b) 11 días del lodo a temperatura ambiente en THF proporciona la Forma A; (c) 5 días a 50°C del lodo en agua DI proporciona la Forma A; (d) 7 días a 50°C del lodo en agua DI proporciona la Forma D; (e) 11 días del lodo a temperatura ambiente en EtOH proporciona la Forma C.

Fig. 58: Diagrama apilado de patrones de XRPD de formas sólidas de OSI-906 (de la parte superior): (a) Forma A; (b) después de 5 días del lodo de las Formas C + D en THF a 50°C proporciona la Forma A; (c) después de 11 días del lodo a temperatura ambiente de las Formas) A + C + D en IPA proporciona la Forma A.

Fig. 59: Diagrama apilado de patrones de XRPD de formas sólidas de OSI-906 (de la parte superior): (a) Forma A; (b) Forma C; (c) después de 5 días del lodo de las Formas C + D en EtOH a 50°C proporciona las Formas A + E; (d) después de 11 días del lodo a temperatura ambiente de las Formas C + D en EtOH proporciona la Forma C; (e) después de 11 días a temperatura ambiente de las Formas C + D en (80:20) EtOH: Agua proporciona la Forma C.

Fig. 60: Espectros Raman representativos de las Formas A, C y D de OSI-906.

Fig. 61 : Regresión lineal para la muestra de calibración de la Forma C.

Fig. 62: Regresión lineal para la muestra de calibración de la Forma D.

Fig. 63: Regresión lineal para las muestras de calibración y validación con la Forma C.

Fig. 64: Los métodos de preparación de las Formas A G de OSI- 906.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN La presente invención concierne a las formas polimórficas de Fórmula I, como es mostrado a continuación y definido en la presen :e: (i) en donde, n y m son independientemente 0, 0.5, lj, o 2 y el término "solvente" es un solvente orgánico adecuado tal como pero no limitado a un alcohol o un solvente polar.

La presente invención incluye la Fórmula I, en donde el solvente es un solvente orgánico conveniente tal como pero no limitado a metanol, etanol, isopropanol, N-propanol, N-butanol, sec-butanol, t-butanol, Iso-butanol, acetonitrilo, y nitrometano.

La presente invención concierne además a las formas polimórficas de Fórmula II, como es mostrado a continuación y definido en la presente: en donde, n es 0, 0.5, 1 o 2.

La presente invención concierne a las formas polimórficas Fórmula III, como es mostrado a continuación y definido en la presente: (Solvente) m O") en donde, m es 0, 1 o 2 y el término "solvente" es un solvente orgánico conveniente tal como pero no limitado a un alcohol o un solvente polar.

En algunos aspectos, la presente invención proporciona el polimorfo cristalino de la Forma A de OSI-906.

En algunos aspectos del mismo, el polimorfo de la Forma A exhibe un patrón de difracción de rayos X que comprende picos a aproximadamente 12.4, 12.6, 16.6, 18.5, 19.4, 20.2, y 22; en algunos aspectos, el polimorfo está presente como un material que comprende por lo menos aproximadamente 95% en peso de la Forma A basado en la cantidad total de OSI-906; está presente como un material que comprende por lo menos aproximadamente 98% en peso de la Forma A basado en: la cantidad total de OSI-906; está presente como un material que es substancialmente libre de OSI-906 amorfo, hidratos de OSI-906, y solvatos de OSI-906; o está substancialmente libre de solvente.

En algunos aspectos, se proporciona el polimorfo cristalino de la Forma A, que exhibe uno o más de un patrón de difracción de ráyos X con picos característicos substancialmente como se establece en el Cúadro 1 , un patrón de difracción de rayos X pareciéndose substancialmente a ese de la Figura 2, un termograma de DSC pareciéndose substancialmente a ese de la Figura 16, una señal de TGA pareciéndose substancialmente a esa de la Figura 17, un espectro de IR pareciéndose substancialmente a ese de la Figura 10, o un espectro de 1H RMN en DMSO-d6 pareciéndose substancialmente a ese de la Figura 30.

En algunos aspectos, se proporciona un polimorfo cristalino de la Forma A, que está presente como un material que comprende por lo menos aproximadamente 50% a 98% o más en peso de la Forma A basado en la cantidad total de OSI-906. En algunos aspectos, la Forma A está presente como un material que comprende por lo menos aproximadamente 95% o aproximadamente 98% en peso de la Forma A basado en la cantidad total de OSI-906.

En algunos aspectos, se proporciona un polimorfo cristalino de la Forma A, que está presente como un material que está substancialmente libre de OSI-906 amorfo y substancialmente libre de hidratos o solvatos de OSI-906.

En algunos aspectos, se proporciona un polimorfo cristalino de la Forma A de OSI-906, que es preparado por un procedimiento que comprende: (a) preparar un lodo de OSI-906 en un alcohol; (b) calentar el lodo; y (c) aislar la Forma cristalina A tal como por filtración.

En algunos aspectos, se proporciona un polimorfo cristalino de la Forma A de OSI-906, que es preparado por un procedimiento que comprende: (1) disolver OSI-906 en agua a un pH ácido de aproximadamente 3, (2) levantar el pH para precipitar el producto tal como a pH aproximadamente de 5, (3) aislar el producto tal como por filtración, (4) suspender el producto en un alcohol tal como IPA para dar un lodo, y (5) aislar y secar dando como resultado la Forma A.

En aspectos adicionales, el preparar un lodo en (a) comprende además ajustar el pH a aproximadamente 5. En aspectos adicionales, la preparación de un lodo comprende además agitar el lodo a temperatura ambiente. En aspectos adicionales, el calentamiento comprende calentar a aproximadamente 60 °C a 90 °C, o aproximadamente 75-85 °C. En aspectos adicionales, el aislamiento de la Forma cristalina A comprende lavar la Forma cristalina A con un alcohol. En aspectos adicionales, el aislamiento de la Forma cristalina A comprende además filtrar la Forma cristalina A y secar la Forma cristalina A bajo vacío. En aspectos adicionales, el alcohol comprende isopropanol, N-propanol, N-butanol, sec-butanol, t-butanol, o Iso-butanol. En algunos aspectos, el alcohol es isopropanol (IPA).

La presente invención proporciona además el polimorfo cristalino de la Forma B de OSI-906.

En algunos aspectos, el polimorfo de la Forma B exhibe un patrón de difracción de rayos X que comprende picos (°2T) a aproximadamente 10.1 , 10.6, 11.2, 13.3, 15.3, 16.3, 21.8, 22.3, 22.4, 24.4, y 27.8.

En algunos aspectos, el polimorfo de la Forma B exhibe uno o más de un patrón de difracción de rayos X con picos característicos como se establece en el Cuadro 3, un patrón de difracción de rayos X pareciéndose substancialmente a ese de la Figura 3, un termograma de DSC pareciéndose substancialmente a ese de la Figura 18, una señal de TGA pareciéndose substancialmente a esa de la Figura 19, o de un espectro de H RMN en DMSO-d6 pareciéndose substancialmente a ese de la Figura 31.

En algunos aspectos, se proporciona el polimorfo cristalino de la Forma B, que está presente como un material que es aproximadamente 50% a 98% o más en peso de la Forma B basado en la cantidad total de OSI-906. En algunos aspectos, la Forma B está presente como un material que comprende por lo menos aproximadamente 95% o aproximadamente 98% en peso de la Forma B basado en la cantidad total de OSI-906.

En algunos aspectos, se proporciona el polimorfo cristalino de la Forma B, que está presente como un material que es substancialmente libre de OSI-906 amorfo.

En algunos aspectos, se proporciona el polimorfo cristalino de la Forma B, que está presente como un material que está substancialmente libre de OSI-906 diferente del polimorfo de la Forma B.

En algunos aspectos, se proporciona el polimorfo cristalino de la Forma B, que es preparado por un procedimiento que comprende: (a) preparar un lodo de OSI-906 en un solvente polar agua tal como CH3CN: agua (por ejemplo, 60:40); y (b) aislar la Forma cristalina B.

En aspectos adicionales, la preparación de un lodo en (a) comprende además sonicar el lodo. En aspectos adicionales, la preparación de un lodo en (a) comprende además agitar el lodo, por ejemplo, a temperatura ambiente, por ejemplo, por aproximadamente 4 días. En aspectos adicionales, el lodo es sembrado con la Forma B. En aspectos adicionales, el aislamiento de la Forma cristalina B en (b) comprende además filtrar la Forma cristalina B y secar la Forma cristalina B bajo vacío. En aspectos adicionales, el solvente polar en (a) comprende acetonitrilo. En algunas modalidades, una solución de OSI-906 es preparada antes de la preparación del lodo.

La presente invención proporciona además el polimorfo cristalino de la Forma C de OSI-906.

En algunos aspectos, el polimorfo de la Forma C exhibe un patrón de difracción de rayos X que comprende picos (°2T) a aproximadamente 10.6, 11.2, 13.3, 15.3, 21.2, 24.3, y 25.5.

En algunos aspectos, el polimorfo de la Forma C exhibe uno o más de un patrón de difracción de rayos X con picos característicos como se establece en el Cuadro 5, un patrón de difracción de rayos X pareciéndose substancialmente a ese de la Figura 4, un termograma de DSC pareciéndose substancialmente a ese de la Figura 20, una señal de TGA pareciéndose substancialmente a esa de la Figura 21 , o de un espectro de ·? RMN en DMSO-de pareciéndose substancialmente a ese de la Figura 32.

En algunos aspectos, se proporciona el polimorfo cristalino de la Forma C, que está presente como un material que comprende aproximadamente 50% a 98% o más en peso de la Forma C basado en la cantidad total de OSI-906. En algunos aspectos, la Forma C está presente como un material que comprende por lo menos aproximadamente 95% o cerca de 98% o más en peso de la Forma C basado en la cantidad total de OSI-906.

En algunos aspectos, se proporciona el polimorfo cristalino de la Forma C, que está presente como un material que está substancialmente libre de OSI-906 amorfo y substancialmente libre de hidratos o solvatos de OSI-906 diferentes del polimorfo de la Forma C.

En algunos aspectos, se proporciona el polimorfo cristalino de la Forma C, que es preparado por un procedimiento que comprende: (a) preparar una solución de OSI-906 en un alcohol; (b) calentar la solución; y (c) aislar la Forma cristalina C. En aspectos adicionales, la preparación de una solución en (a) comprende además sonicar la solución.

En aspectos adicionales, el calentamiento en (b) comprende además calentar a aproximadamente 60 °C a 90 °C, o aproximadamente 65 a 75 °C y/o agitar. En aspectos adicionales, el aislamiento de la Forma cristalina C en (c) comprende además filtrar la solución de la Forma C en un contenedor dentro de un baño de enfriamiento. En aspectos adicionales, el baño de enfriamiento es aproximadamente -0 °C a -20 °C. En aspectos adicionales, la solución de la Forma C es enfriada en un congelador. En aspectos adicionales, el aislamiento de la Forma cristalina C en (c) comprende además filtrar la Forma cristalina C y secar la Forma cristalina C bajo vacío. En aspectos adicionales, el alcohol en (a) comprende metanol, etanol, isopropanol, n-propanol, n-butanol, sec-butanol, o Iso-butanol. Én algunas modalidades, el alcohol es etanol.

La presente invención proporciona además el polimorfo cristalino de la Forma D de OSI-906.

En algunos aspectos, el polimorfo de la Forma D exhibe un patrón de difracción de rayos X que comprende picos a aproximadamente 8.9, 10.9, 11.1 , 13.8, 17.7, 20. 21.8, 22.2, y 26.2. ; En algunos aspectos, se proporciona el polimorfo cristalino de la Forma D, que exhibe uno o más de un patrón de difracción de rayos X con picos característicos como se establece en el Cuadro 7, un patrón de difracción de rayos X pareciéndose substancialmente a ese de la Figura 5, un termograma de DSC pareciéndose substancialmente a ese de la Figura 22, una señal de TGA pareciéndose substancialmente a esa de la Figura 23, o de un espectro de 1H RMN en DMSO-d6 pareciéndose substancialmente a ese de la Figura 33.

En algunos aspectos, se proporciona el polimorfo cristalino de la Forma D, que está presente como un material que es aproximadamente 50% a 98% o más en peso de la Forma D basado en la cantidad total de OSI-906. En algunos aspectos, la Forma D está presente como un material que comprende por lo menos aproximadamente 95% o cerca de 98% o más en peso de la Forma D basado en la cantidad total de OSI-906.

En algunos aspectos, se proporciona el polimorfo cristalino de la Forma D, que está presente como un material que es substancialmente libre de OSI-906 amorfo.

En algunos aspectos, se proporciona el polimorfo cristalino de la Forma D, que está presente como un material que es substancialmente libre de OSI-906 diferente del polimorfo de la Forma D.

En algunos aspectos, se proporciona el polimorfo cristalino de la Forma D, que es preparado por un procedimiento que comprende: (a) preparar un lodo de OSI-906 en un alcohol acuoso; (b) calentar el lodo; y (c) aislar la Forma cristalina D. En aspectos adicionales, la preparación de un lodo en (a) comprende además 60:40 (v/v) etanol: agua. En aspectos adicionales, la preparación de un lodo en (a) comprende además agitar la solución. En aspectos adicionales, el calentamiento en (b) comprende además calentar a aproximadamente 50 °C a 90 °C. En aspectos adicionales, el calentamiento en (b) comprende además agitar el lodo. En aspectos adicionales, el aislamiento de la Forma cristalina D en (c) comprende además sembrar el lodo con la Forma D. En aspectos adicionales el aislamiento de la Forma cristalina D en (c) comprende además filtrar la Forma cristalina D y secar la Forma cristalina D bajo vacío. En aspectos adicionales, él alcohol en (a) comprende metanol, etanol, isopropanol, n-propanol, n-butanol, sec-butanol, o Iso-butanol.

La presente invención proporciona además el polimorfo cristalino de la Forma E de OSI-906.

En algunos aspectos, se proporciona el polimorfo cristalino de la Forma E, que exhibe uno o más de un patrón de difracción de rayos X con picos característicos como se establece en el Cuadro 9, un patrón de difracción de rayos X pareciéndose substancialmente a ese de la Figura 6, un termograma de DSC pareciéndose substancialmente a ese de la Figura 24, una señal de TGA pareciéndose substancialmente a esa de la Figura 25, o de un espectro de 1H RMN en DMSO-d6 pareciéndose substancialmente a ese de la Figura 34.

En algunos aspectos, se proporciona el polimorfo cristalino de la Forma E, que está presente como un material que es por lo menos aproximadamente 50% o 98% o más en peso de la Forma E basado en la cantidad total de OSI-906.

En algunos aspectos, se proporciona el polimorfo cristalino de la Forma E, que está presente como un material que está substancialmente libre de OSI-906 amorfo.

En algunos aspectos, se proporciona el polimorfo cristalino de la Forma E, que está presente como un material que está substancialmente libre de OSI-906 diferente del polimorfo de la Forma E.

En algunos aspectos, se proporciona el polimorfo cristalino de la Forma E, que es preparado por un procedimiento que comprende: (a) preparar un lodo de OSI-906 en un alcohol; (b) calentar el lodo; y (b) aislar la Forma cristalina E. En aspectos adicionales, la preparación de un lodo en (a) comprende además sonícar el lodo. En aspectos adicionales, el calentamiento en (b) comprende además calentar a aproximadamente 60 °C a 90 °C. En aspectos adicionales, el calentamiento en (b) comprende además agitar el lodo. En aspectos adicionales, el aislamiento de la Forma cristalina E en (c) comprende además filtrar y enfriar el lodo a aproximadamente -0 °C a -20 °C. En aspectos adicionales, el aislamiento de la Forma cristalina E en (c) comprende además sembrar el lodo con la Forma C. En aspectos adicionales, el aislamiento de la Forma cristalina E en (c) comprende además filtrar la Forma cristalina E y secar la Forma cristalina E bajo vacío. En aspectos adicionales, el alcohol en (a) comprende metanol, etanol, isopropanol, n-propanol, n-butanol, sec-butanol, o Iso-butanol.

La presente invención proporciona además el polimorfo cristalino de la Forma F de OSI-906.

En algunos aspectos, se proporciona el polimorfo cristalino de la Forma F, que exhibe uno o más de un patrón de difracción de rayos X con picos característicos como se establece en el Cuadro 1 1 , un patrón de difracción de rayos X pareciéndose substancialmente a ese de la Figura 7, un termograma de DSC pareciéndose substancialmente a ese de la Figura 25, una señal de TGA pareciéndose substancialmente a ese de la Figura 26, o de un espectro de 1H RMN en DMSO-d6 pareciéndose substancialmente a ese de la Figura 35.

En algunos aspectos, se proporciona el polimorfo cristalino de la Forma F, que está presente como un material que es por lo menos aproximadamente 50% o cerca de 98% o más en peso de la Forma F basado en la cantidad total de OSI-906.

En algunos aspectos, se proporciona el polimorfo cristalino de la Forma F, que está presente como un material que es substancialmente libre de OSI-906 amorfo.

En algunos aspectos, se proporciona el polimorfo cristalino de la Forma F, que está presente como un material que está substancialmente libre de OSI-906 diferente del polimorfo de la Forma F.

En algunos aspectos, se proporciona el polimorfo cristalino de la Forma F, que es preparado por un procedimiento que comprende: (a) preparar una solución de OSI-906 en isopropanol; (b) calentar la solución; y aislar la Forma cristalina F.

En aspectos adicionales, la preparación de una solución en (a) comprende además agitar la solución. En aspectos adicionales, el calentamiento en (b) comprende además calentar a aproximadamente 60 °C a 90 °C. En aspectos adicionales, el aislamiento de la Forma cristalina F en (c) comprende además filtrar, enfriar la solución al ambiente y entonces a aproximadamente -0 °C a -20 °C. En aspectos adicionales, el aislamiento de la Forma cristalina F en (c) comprende además sembrar la solución con Forma F. En aspectos adicionales, allí el aislamiento de la Forma cristalina F en (c) comprende además filtrar la Forma cristalina F y secar la Forma cristalina F bajo vacío.

La presente invención proporciona además el polimorfo cristalino de la Forma G de OSI-906.

En algunos aspectos, se proporciona el polimorfo cristalino de la Forma G, que exhibe uno o más de un patrón de difracción de rayos X con picos característicos como se establece en el Cuadro 13, un patrón de difracción de rayos X pareciéndose substancialmente a ese de la Figura 8, un termograma de DSC pareciéndose substancialmente a ese de la Figura 26, una señal de TGA pareciéndose substancialmente a esa de la Figura 27, o de un espectro de 1H RMN en DMSO-d6 pareciéndose substancialmente a ese de la Figura 36.

En algunos aspectos, se proporciona el polimorfo cristalino de la Forma G, que está presente como un material que es por jlo menos aproximadamente 50% o cerca de 98% o más en peso de la Forma G basado en la cantidad total de OSI-906.

En algunos aspectos, se proporciona el polimorfo cristalino de la Forma G, que está presente como un material que está substancialmente libre de OSI-906 amorfo.

En algunos aspectos, se proporciona el polimorfo cristalino de la Forma G, que está presente como un material que está substancialmente libre de OSI-906 diferente del polimorfo de la Forma G.

En algunos aspectos, se proporciona el polimorfo cristalino de la Forma G, que es preparado por un procedimiento que comprende: (a) preparar una solución de OSI-906 en nitrometano; (b) calentar la solución; y (c) aislar la Forma cristalina G. En aspectos adicionales, el calentamiento en (b) comprende además agitar la solución. En aspectos adicionales, el aislamiento de la Forma cristalina G en (C) comprende además filtrar, enfriar la solución al ambiente y entonces a aproximadamente -0 °C a t20 °C. En aspectos adicionales, el aislamiento de la Forma cristalina G en (b) comprende además sembrar la solución con Forma G. En aspectos adicionales, el aislamiento de la Forma cristalina G en (b) comprende además filtrar la Forma cristalina G y secar la Forma cristalina G bajo vacío.

La presente invención proporciona además el polimorfo cristalino de la Forma H de OSI-906.

En algunos aspectos, se proporciona el polimorfo cristalino de la Forma H, que exhibe un patrón de difracción de rayos X pareciéndose substancialmente a ese de la Figura 9 y un patrón de difracción de rayos X de cristal único como se establece en los Cuadros 16-20.

En algunos aspectos, se proporciona el polimorfo cristalino de la Forma H, que está presente como un material que es por lo menos aproximadamente 50% o cerca de 98% o más en peso de la Forma H basado en la cantidad total de OSI-906.

En algunos aspectos, se proporciona el polimorfo cristalino de la Forma H, que está presente como un material que está substancialmente libre de OSI-906 amorfo.

En algunos aspectos, se proporciona el polimorfo cristalino de la Forma H, que está presente como un material que está substancialmente libre de OSI-906 diferente del polimorfo de la Forma H.

En algunos aspectos, se proporciona el polimorfo cristalino de la Forma H, que es preparado por un procedimiento que comprende: (a) preparar un lodo de OSI-906 en acetonitrilo; y (b) aislar la Forma cristalina H.

En algunos aspectos, se proporciona el polimorfo cristalino de la Forma H, que es preparado por un procedimiento que comprende: (a) preparar una solución de OSI-906 en nitrometano; (b) evaporar el nitrometano; y (b) aislar la Forma cristalina H.

En aspectos adicionales, la preparación de un lodo en (a) comprende además sonicar el lodo. En aspectos adicionales, la preparación de un lodo en (a) comprende además agitar el lodo al ambiente durante 4 días. En aspectos adicionales, el aislamiento de la Forma cristalina H en (b) comprende además filtrar la Forma cristalina H y secar la Forma cristalina H bajo vacío.

Experimental Técnicas instrumentales (Preparación y Caracterización - Formas A-l) La identificación de las formas cristalinas obtenidas por la presente invención puede ser hecha por métodos conocidos en la técnica, incluyendo pero no limitado a difracción de polvo de rayos X (XRPD, por sus siglas en inglés), espectro de Infrarrojo de la Transformada de Fourier (FTIR, por sus siglas en inglés), y Calorimetría de Exploración Diferencial (DSC, por sus siglas en inglés), Análisis Termogravimétrico (TGA, por sus siglas en inglés), Resonancia Magnética Nuclear (RMN), y difracción de rayos X de cristal único. Además, debe ser comprendido que el operario, el instrumento y otros cambios relacionados pueden tener como resultado algún margen de error con respecto a la caracterización analítica de las formas cristalinas.

Calorimetría de Exploración Diferencial (DSC): Los análisis fueron llevados a cabo en un calorímetro de exploración diferencial de TA Instruments 2920. El instrumento fue calibrado utilizando indio como el material de referencia. La muestra fue colocada en una cacerola estándar de aluminio de DSC, y en el peso se registró de manera exacta. La celda de la muestra fue equilibrada a -50 °C y calentada bajo una purga de nitrógeno a una velocidad de 10 °C/min, hasta una temperatura final de 325 °C. Para determinar la temperatura de transición vitrea (Tg) del material amorfo, la celda de la muestra fue calentada comenzando del ambiente bajo una purga de nitrógeno a una velocidad de 10 °C/min, hasta 260 °C, se mantuvo 1 min a 260 °C; se enfrió a -50 °C a una velocidad de 40 °C/min; entonces se calentó a una velocidad de 20 °C/min hasta una temperatura final de 325 °C. La Tg es reportada del punto de inflexión de las transiciones como el valor promedio.

FT-IR: Los espectros de IR fueron adquiridos en un espectrofotómetro de infrarrojo de transformada de Fourier Magna-IR 860® (FT-IR) (Thermo Nicolet) equipado con una fuente de IR Ever-Glo mid/far IR, un divisor de haz de bromuro de potasio (KBr) de intervalo ampliado, y un detector de sulfato de triglicina deuterado (DTGS, por sus siglas en inglés). Un accesorio de reflectancia total atenuada (ATR, por sus siglas en inglés) (Thunderdome™, Thermo Spectra-Tech) con un cristal de germanio (Ge) fue utilizado para la adquisición de datos. Los espectro representan 256 escaneos co-agregados recolectados a una resolución espectral de 4 cm'1. Un conjunto de datos de antecedente fueron adquiridos con un cristal limpio de Ge. Los espectros de Log MR (R = reflectancia) fueron adquiridos al tomar la proporción de estos dos conjuntos de datos uno contra el otro. La calibración de la longitud de onda fue realizada utilizando poliestireno. Los datos fueron analizados y listas de picos fueron generadas utilizando el software Omnic V. 7.2.

Termogravimétrico (TGA): Los análisis de TGA fueron llevados a cabo en un analizador termogravimétrico TA Instruments 2950. Los estándares de calibración fueron níquel y Alumel™. Cada muestra fue colocada en una cacerola de muestra de aluminio e insertada en el horno de TG. Las muestras fueron equilibradas primero a 25°C o comenzadas directamente de condiciones ambientes, entonces calentadas bajo una corriente de nitrógeno a una velocidad de la calentamiento de 10 °C/min, hasta una temperatura final de 325 °C a menos que sea especificado de otro modo.

Resonancia Magnética Nuclear (RMN): Los espectros de 1H RMN H de la solución fueron adquiridos a temperatura ambiente en un espectrómetro Varianu,v/7YINOVA-400. Las muestras fueron preparadas para la espectroscopia de RMN como soluciones - 5-50 mg en el solvente deuterado apropiado. Los parámetros específicos de la adquisición son listados en gráfico del primer espectro completo de cada muestra en la sección de datos. Las muestras fueron preparadas para la espectroscopia de RMN de estado sólido empacándolas en rotores de circonia de tipo LAPIZ de 4 mm. Los parámetros específicos de la adquisición son listados en gráfico del primer espectro completo de cada muestra en la sección de datos.

Difracción de Polvo de Rayos X (XRPD): Inel XRG-3000: Los análisis de difracción de polvo de rayos X fueron realizados en un difractómetro Inel XRG-3000, equipado con un detector curvo sensible a la posición con un intervalo de 2T de 120°. Los datos de tiempo real fueron recolectados utilizando radiación de Cu Ka a una resolución de 0.03 °2T. El voltaje y el amperaje del tubo fueron ajustados a 40 kV y 30 mA, respectivamente. Los patrones son desplegados de 2.5 a 40 °2T para facilitar las comparaciones directas de patrones. Las muestras fueron preparadas para el análisis empacándolas en capilares de vidrio de pared delgada. Cada capilar fue montado en una cabeza de goniómetro que está motorizada para permitir el giro del capilar durante la adquisición de datos. La calibración del instrumento fue realizada diariamente utilizando un estándar de referencia de silicio.

PANalytical X'Pert Pro: Los patrones de XRPD fueron recolectados utilizando un difractómetro PANalytical X'Pert Pro. El espécimen fue analizado utilizando radiación de Cu producida utilizando una fuente de foco fino largo Optix. Un espejo de capas múltiples gradado elípticamente fue utilizado para enfocar los rayos X de Cu Ka de la fuente a ¡través del espécimen y sobre el detector. El espécimen fue emparedado entre películas gruesas de 3 mieras, analizado en la geometría de transmisión, y girado paralelo al vector de la difracción para optimizar la estadística de la orientación. Un retén de rayo y purga de helio fue utilizado para minimizar el fondo generado por la difracción del aire. Las ranuras del Soller fueron utilizadas para los rayos incidente y difractado para minimizar la divergencia axial. Los patrones de difracción fueron recolectados utilizando un detector de exploración sensible a la posición (X'Celerator) ubicado a 240 mm del espécimen. Los parámetros de adquisición de datos de cada patrón de difracción son mostrados encima de la imagen de cada patrón en el apéndice C. Antes del análisis un espécimen de silicio (Material de referencia estándar NIST 640c) fue analizado para verificar la posición del pico del silicio 111.

Difracción de Rayos X de Cristal Único: Recolección de datos: La difracción de rayos X de cristal único fue realizada montando una aguja amarilla de OSI-906 en una fibra de vidrio en orientación aleatoria. Examen preliminar y la recolección de datos fueron realizados con radiación de Mo a (? = 0.71073 A) en un difractómetro Nonius KappaCCD equipado con un monocromador de rayo incidente, de cristal de grafito. Las refinaciones fueron realizadas en un LINUX PC utilizando SHELX97. (vea Sheldrick, G. M. SHELX97, A Program for Crystal Structure Refinement, University of Gottingen, Germany, 1997) Las constantes de la celda y una matriz de orientación para la recolección de datos fueron obtenidos por refinación de mínimos cuadrados utilizando los ángulos de ajuste de 16163 reflexiones en el intervalo 2° < T < 27°. La mosaicidad refinada de Denzo/Scalepack es 0.69° indicando calidad cristalina moderada. (Vea Otwinowski, Z.; Minor, W. Methods Enzymol., 276, 307, 1997) El grupo de espacio fue determinado por el programa XPREP. (Vea Bruker, XPREP en SHELXTL v. 6.12., (vea Bruker AXS Inc., Madison, Wl, USA, 2002) De la presencia sistemática de las siguientes condiciones: hOl h + I = 2n; OkO k; = 2n y de la refinación subsiguiente por mínimos cuadrados, el grupo de espacio fue determinado siendo P2i (SSCI Data Summary to OSI Pharmaceuticals, Standard Polymorph Screen of OSI-906, DS-5274.01 , 2007). Los datos fueron recolectados a un valor máximo 2T de 55.03, a una temperatura de 150 ± 1 K.

Reducción de datos: Los marcos fueron integrados con DENZO- SMN. (Vea Otwinowski, Z.¡ Minor, W. Methods Enzymol., 276, 307, 1997) Un total de 16163 reflexiones fueron recolectadas, de las cuales 4065 fueron únicas. Las correcciones de Lorentz y de polarización fueron aplicadas a los datos. El coeficiente de absorción lineal es 0.078 mm" para la radiación efe Mo Ka . Una corrección de la absorción emírica utilizando SCALEPACK (vea Otwinowski, Z.; Minor, W. Methods Enzymol., 276, 307, 1997) fue aplicada.

Los coeficientes de transmisión variaron de 0.967 a 0.991. Una corrección de extinción secundaria fue aplicada, (vea Sheldrick, G. M. SHELX97, A Program for Crystal Structure Refínement, University of Gottingen, Germany, 1997) El coeficiente final, refinado en mínimos cuadrados, fue 0.0190 (en unidades absolutas). Las intensidades de las reflexiones equivalentes fueron promediadas. El factor de concordancia para el promediar fue 7.7% basado en la intensidad.

Solución de la estructura y Refinación: La estructura fue resuelta por métodos directos utilizando métodos conocidos, (vea Burla, M.C., Caliandro, R., Camalli, M,. Carrozzini, B., Cascarano, G.L., De Caro, L., Giacovazzo, C, Polidori, G., and Spagna, R., J. Appl. Cryst, 38, 381 , 2005) Los átomos restantes fueron ubicados en síntesis de Fourier de diferencia sucesiva. Los átomos de hidrógeno fueron incluidos en la refinación pero restringidos a correr en el átomo al que están unidos. La estructura fue refinada en mínimos cuadrados de matriz completa minimizando la función: El peso es definido como 1/[s2(?02) + (0.1528P)2 +(0.0000P)], donde P = (F02 +2Fc2)/3. Los factores de difracción fueron tomados de los "Cuadros Internacionales para la Cristalografía". (International Tables for Crystallography, Vol. C, Kluwer Academic Publishers: Dordrecht, The Netherlands, Tables 4.2.6.8 and 6.1.1.4, 1992). De las 4065 reflexiones utilizadas en las refinaciones, sólo las reflexiones con F02 > 2a(F02) fueron utilizadas para calcular R. Un total de 3142 reflexiones fue utilizado en el cálculo. El ciclo final de la refinación incluyó 410 parámetros variables y convergidos (el cambio más grande del parámetro fue en esencia igual a su desviación estándar estimada) con factores de concordancia ponderados y no ponderados de: R =?\F„-FC\I?F0 = 0.070 La desviación estándar de una observación de unidad de peso fue 1.009. El pico más alto en el Fourier de diferencia final tuvo una altura de 0.28 e/A3. El pico negativo mínimo tuvo una altura de -0.46 e/A3.

ORTEP y Esquemas de Empacado: El esquema de ORTEP fue preparado utilizando el programa ORTEP III (Johnson, C. K. ORTEPIII, Report ORNL-6895, Oak Ridge National Laboratory, TN, U.S.A. 1996; OPTEP-3 for Windows V1.05., Farrugia, L.J., J. Appl. Cryst, 30, 565, 1997) dentro de PLATON (Spek, A. L. PLUTON. Molecular Graphics Program. Univ. of Ultrecht, The Netherlands 1991 ; Spek, A. L. Acta Crystallogr., A46, C34, 1990) paquete de software. Los átomos son representados por 50% de probabilidad de elipsoides térmicos anisótropos. Los esquemas de empacado fueron preparados utilizando el software de modelado CAMERON (Watkin, D. J.; Prout, C .K.; Pearce, L. J. CAMERON, Chemical Crystallography Laboratory, University of Oxford, Oxford, 1996). La evaluación de los centros quirales, cálculos de vacíos y figuras adicionales fueron realizados con el paquete de software PLATON (Watkin, D. J., Prout, C .K., Pearce, L. J., CAMERON, Chemical Crystallography Laboratory, University of Oxford, Oxford, 1996). La configuración absoluta es evaluada utilizando la especificación de las reglas de quiralidad molecular (Chan, R.S., Ingold, C, Prelog, V., Angéw. Chem. Intern. Ed., Eng, 5, 385, 1966; Prelog, V. G. Helmchen, Angew. Chem. Intern. Ed. Eng., 21, 567, 1982). Figuras adicionales también fueron generadas con el paquete de visualización Mercury 1.5 (Macrae, C. F. et. al., J. Appl. Cryst, 39, 453-457, 2006). Los enlaces de hidrógeno son representados como líneas de puntos.

Técnicas instrumentales (Experimentos de Termodinámica - Formas A-F) Análisis de Calorimetría de Exploración diferencial: Los análisis de Calorimetría de exploración diferencial (DSC) fueron llevados a cabo en las muestras "como son". Las muestras fueron pesadas en una cacerola de aluminio, cubierto con una tapa perforada, y entonces onduladas. Las condiciones del análisis fueron 30-105, 30-300, 30-350°C a 10 °C/min. Además, el mantenimiento de las isotermas fue realizado por una duración de cinco minutos a 105°C y 200°C.

Análisis Gravimétrico térmico: Los análisis del análisis gravimétrico térmico (TGA) fueron llevados a cabo en las muestras "como son". Las muestras fueron pesadas en un crisol de aluminio y analizados de 30°C- 230°C y 30°C- 300°C a 10 °C/min.

Difracción de polvo de rayos X: Las muestras fueron analizadas "como son". Las muestras fueron colocadas en sujetadores de muestra ultra-micro de cero retorno de Si. El análisis fue realizado utilizando' un ancho irradiado de 10 mm y los parámetros siguientes fueron ajustados dentro del hardware/software: Tubo de rayos X: Cu KV, 45 kV, 40 mA Detector: X'Celerator Ranura Primaria ASS: Fijo 1o Ranura de divergencia (Prog) : Automático - longitud irradiada de 5 mm Ranuras Soller: 0.02 radián Ranura de Exploración (PASS): Automático - longitud observada de 5 mm Intervalo de Exploración: 3,0-45,0° Modo de Exploración: Continuo Tamaño de paso: 0.02° Tiempo por Paso: 10 s Longitud activa: 2.54° Después del análisis los datos fueron convertidos de ranuras ajustables a fijas utilizando el software X'Pert HighScore Plus con los parámetros siguientes: Tamaño de Ranura de Divergencia Fija: 1.00°, 1.59 mm Punto de cruce: 44.3 "Omega Resonancia Magnética nuclear: La adquisición del espectro de 1H RMN fue realizado en 2-10 mg de muestra disuelta en 0.8 mL de DMSO-d6. Los espectros fueron adquiridos con 32 a 64 escaneos y una demora del pulso de 1.0 s con un ancho de pulso de (30°).

Técnicas instrumentales (Determinación Cuantitativa de las Formas A, C. y D en OSI-906 por la Espectroscopia Raman) : Espectroscopia Raman: La adquisición de los Espectros Raman fue realizada en un Káiser Raman WorkStation equipado con una sonda PhAT, o equivalente.

Software: HoloGRAMS 4.1 o equivalente, GRAMS/AI 7.02 o equivalente TQ Analyst 7.1 o equivalente.

Fuente de Raman: láser de 785 nm.

Intervalo del Espectro: Mayor que 300-1800 cm-1.

Tamaño del punto de la muestra: l.2m.

Tiempo de Exposición Único: 0.1 sec.

Accums: 24.

Opciones permitidas de la Exposición: Filtración de Rayos Cósmicos, Sustracción de Oscuridad, y Calibración de Intensidad.

Preparación y Caracterización En los ejemplos experimentales siguientes los Cuadros 1-20 revelan datos de XRPD, IR y de difracción de rayos X de cristal único obtenidos durante la caracterización de los Ejemplos 1-8, respectivamente. La descripción siguiente describe brevemente los Cuadros 1-20.

CUADRO 1 Datos de XRPD para la Forma A.

CUADRO 2 Datos de IR para la Forma A.

CUADRO 3 Datos de XRPD para la Forma B.

CUADRO 4 Datos de IR para la Forma B.

CUADRO 5 Datos de XRPD para la Forma C.

CUADRO 6 Datos de IR para la Forma C.

CUADRO 7 Datos de XRPD para la Forma D.

CUADRO 8 Datos de IR para la Forma D.

CUADRO 9 Datos de XRPD para la Forma E.

CUADRO 10 Datos de infrarrojo para la Forma E.

CUADRO 1 Datos de XRPD para la Forma F.

CUADRO 12 Datos de infrarrojo para la Forma F.

CUADRO 13 Datos de XRPD para la Forma G.

CUADRO 14 Datos de XRPD para la Forma H.

CUADRO 15 Los datos del cristal y Parámetros de recolección de datos para OSI-906 Forma H.

CUADRO 16 Parámetros posicionales y sus desviaciones estándar estimadas para OSI-906 Forma H.

CUADRO 17 Distancias de enlaces en angstroms para OSI-906 Forma H.

CUADRO 18 Ángulos de enlace en grados para OSI-906 Forma H.

CUADRO 19 Distancias de enlace de hidrógeno en ahgstroms y ángulos en grados para OSI-906 Forma H.

CUADRO 20 Ángulos de torsión en grados para OSI-906 Forma H.

En los ejemplos experimentales siguientes los Cuadros 21-26 revelan los datos de la estabilidad incluyendo XRPD y 1 H-RMN, obtenidos durante experimentos de estabilidad termodinámica de las Formas A, B, C, D, E, y F, respectivamente. La descripción siguiente describe brevemente los Cuadros 21-26.

CUADRO 21 Estabilidad de Estado Sólido de la Forma A y la Estabilidad de Estado Sólido de las Formas C + D.

CUADRO 22 Lodos de las Formas Sólidas de OSI-906.

CUADRO 23 Experimentos de Reflujo/Estabilidad.

CUADRO 24 Aislamiento de la Forma F (Solvato de IPA).

CUADRO 25 Experimentos adicionales para Aislar las Formas Sólidas de OSI-906.

CUADRO 26 Estudios de estabilidad física de las formas sólidas de OSI-906.

En los ejemplos experimentales siguientes los Cuadros 27-30 revelan espectros Raman, obtenidos durante la Determinación Cuantitativa de las Formas A, C, y D en OSI-906 por Espectroscopia Raman. La descripción siguiente describe brevemente los Cuadros 27-30.

CUADRO 27 Resumen de preparación de la muestra de calibración.

CUADRO 28 Resumen de preparación de la muestra de validación.

CUADRO 29 Resumen de resultados de Precisión con la Forma C.

CUADRO 30 Resumen de resultados de Precisión con la Forma D.

Generalmente, el procedimiento de preparar los polimorfos de OSI-906 (cis-3-[8-amino-1-(2-fenil-quinolin-7-il)-imidazo[1 ,5-a]pirázin-3-il]-1-metilciclobutanol) incluye: Preparar una solución o el lodo de OSI-906 en un solvente seleccionado de un solvente orgánico conveniente tal como pero no limitado a un alcohol, alcohol acuoso o solvente polar a una primera temperatura predeterminada para formar una solución; permitiendo a la solución enfriarse o mantenerse al ambiente a una segunda temperatura predeterminada con lo cual una porción o todo el OSI-906 cristaliza; y en donde dicha primera temperatura predeterminada está entre ambiente y 120 °C; y dicha segunda temperatura predeterminada está entre ambiente y -20 °C.

La presente invención proporciona los métodos de preparación de las Formas A-G de OSI-906 como se ilustra en la figura 64.

Examen de Polimorfo Se emplearon ambas técnicas de cristalización termodinámica y cinética. Estas técnicas son descritas con mayor detalle a continuación. Una vez que las muestras sólidas fueron cosechadas de intentos de cristalinoización, fueron ya sea examinadas bajo un microscopio para birrefringencia y morfología u observadas a simple vista. Alguna forma cristalina fue notada, pero a veces el sólido exhibió morfología desconocida, debido al pequeño tamaño de partícula. Las muestras sólidas entonces fueron analizadas por XRPD, y los patrones cristalinos comparados uno al otro para identificar nuevas formas cristalinas. ! Enfriamiento de choque (CC) : Las soluciones saturadas fueron preparadas en varios solventes a temperaturas elevadas y filtradas a través de un filtro de nilón de 0.2-µ?? dentro de un frasco. Los frascos entonces fueron ya sea colocados en un baño de enfriamiento (hielo seco + isopropanol) o colocados en el congelador. Los sólidos resultantes fueron aislados por filtración y secados antes del análisis.

Crio-molienda: Una muestra sólida fue colocada en una taza de molienda de acero inoxidable con una varilla de molienda. La muestra entonces fue molida en un Molino Congelador SPEX Certiprep modelo 6750 por una cantidad de tiempo establecido. El sólido molido fue aislado y fue almacenado en el congelador sobre desecante hasta su análisis.

Evaporación Rápida (FE) : Las soluciones fueron preparadas en varios solventes y sonicadas entre adiciones de alícuotas para ayudar a la disolución. Una vez que una mezcla alcanzó la disolución completa, como fue juzgado por observación visual, la solución fue filtrada a través de , un filtro de nailon de 0.2-µ?t?. La solución filtrada fue dejada evaporar al ambiente en un frasco destapado. Los sólidos que se formaron fueron aislados y fueron analizados.

Secado por Congelamiento: Las soluciones de 1,4-dioxano fueron preparadas, filtradas por un filtro de nilón, y congeladas en un frasco sumergido en un baño de nitrógeno líquido o hielo seco e ¡sopropanol. El frasco que contenía la muestra congelada fue unido a un liofilizador Flexi-Dry y secado por un período de tiempo medido. Después del secado, los sólidos fueron aislados y fueron almacenados en el congelador sobre desecante hasta su uso.

Fundido/Templado: Una porción de OSI-906 fue distribuida en una capa uniforme en un frasco de centelleo. El frasco fue tapado y fue calentado dentro de un baño de aceite en una placa caliente hasta que los sólidos se hubieran fundido completamente. El frasco entonces fue quitado de la placa caliente y colocado en la campana o un baño de nitrógeno líquido para enfriar.

Enfriamiento lento (SC) : Las soluciones saturadas fueron preparadas en varios solventes a temperaturas elevadas y filtradas a través de un filtro de nilón de 0.2-µ?? dentro de un frasco abierto mientras aún estaba caliente. El frasco fue cubierto y fue dejado enfriar lentamente a la temperatura ambiente. La presencia o la ausencia de sólidos fue notada. Si no había sólidos presentes, o si la cantidad de sólidos fue juzgada demasiado pequeña para el análisis de XRPD, el frasco fue colocado en un refrigerador. Otra vez, la presencia o la ausencia de sólidos fue notada y si no había ninguno, el frasco fue colocado en un congelador. Los sólidos que se formaron fueron aislados por filtración y dejados secar antes del análisis.

Evaporación lenta (SE) : Las soluciones fueron preparadas en varios solventes y sonicadas entre adiciones de alícuotas para ayudar a la disolución. Una vez que una mezcla alcanzó la disolución completa, como fue juzgado por observación visual, la solución fue filtrada a través de un filtro de nailon de 0.2-µ?t?. La solución filtrada fue dejada evaporar al ambiente en un frasco cubierto con papel de aluminio perforado con agujeros. Los sólidos que se formaron fueron aislados y fueron analizados.

Experimentos con lodo: Las soluciones fueron preparadas agregando suficientes sólidos a un solvente dado para que un exceso de sólidos estuviera presente. La mezcla entonces fue agitada en un frasco sellado a temperatura ambiente o a una temperatura elevada. Después de un periodo de tiempo dado, los sólidos fueron aislados por filtración de vacío.

Los métodos y los materiales de la invención son detallados además en los ejemplos siguientes no limitativos.

EJEMPLO 1 Preparación de la Forma A de OSI-906 a) OSI-906 fue disuelto en agua ajustada a pH de 3 y entonces se agregó IPA. Entonces se ajustó la solución a pH 5 para precipitar el producto. El sólido es aislado bajo filtración y secado bajo vacío. Entonces el sólido es suspendido en IPA para dar un lodo. El sólido es aislado bajo filtración y secado bajo vacío para proporcionar la Forma A. b) A un frasco de vidrio sellable de 20 mi se transfirieron 26.6 mg de OSI-906 que fue disuelto en 7,0 mL de EtOH para dar un lodo, que fue sonicado después de la adición de 256.9 mg de OSI-906. La solución fue agitada en el frasco sellado al ambiente. La solución fue sembrada con la Forma E. Entonces después de 19 días el sólido resultante fue aislado por filtración de vacío para dar 245.8 mg de la Forma A. c) A un frasco de vidrio de 20 mL sellable fue agregado 71.8 mg de la Forma C, que fue suspendida en 0.87 mL de IPA y entonces la solución se agitó y calentó por 3 h a 82 °C. Los sólidos fueron filtrados bajo nitrógeno, lavados con 0.1 mL de IPA y secados bajo vacío a 40 °C por aproximadamente 20 horas de dar un sólido amarillo claro como la Forma A.

El XRPD, IR, DSC, TGA, y 1H RMN (DMSO-d6) de |a muestra son registrados y son reproducidos en las Figs. 2, 3, 11 , 17, 18, y 31 y Cuadros 1 y 2.

CUADRO 1 CUADRO 2 EJEMPLO 2 Preparación de la Forma B de OSI-906 A un frasco de vidrio de 20 mL sellable fue agregado 23.7 mg de OSI-906 y 8 mL de 60:40 (v/v) acetonitrilo: agua para formar una solución después de sonicación. Entonces se agregó 248.4 mg de OSI-906 y el lodo fue agitado en el frasco sellado. Entonces la solución fue sembrada con la Forma B. Entonces después de 4 días el sólido resultante fue aislado por filtración para dar 257.2 mg de la Forma B.

El XRPD, IR, DSC, TGA, y 1H RMN (DMS0-d6) de la muestra son registrados y son reproducidos en las Figs. 2, 4, 12, 19, 20, y 32 y Cuadros 3 y 4.

CUADRO 3 CUADRO 4 EJEMPLO 3 Preparación de la Forma C de OSI-906 A un frasco de vidrio sellable de 20 mL fue agregado 24.3 mg de OSI-906 y 3.5 mL de EtOH. La mezcla fue agitada a aproximadamente 70 °C para formar una solución. Entonces la solución filtrada a través de un filtro de nilón de 0.2 pm precalentado en un frasco de vidrio de 20 mL pre-enfriado dentro de un baño de enfriamiento (hielo seco + IPA) seguido por enfriamiento del filtrado a 0 °C. Los sólidos resultantes fueron aislados por filtración de vacío para dar la Forma C.

El XRPD, IR, DSC, TGA, y H RMN (DMSO-d6) de la muestra son registrados y son reproducidos en las Figs. 2, 5, 13, 21 , 22, y 33 y Cuadros 5 y 6.

CUADRO 5 CUADRO 6 EJEMPLO 4 Preparación de la Forma D de OSI-906 A un frasco de vidrio sellable de 20 mL fue agregado 50.6 mg de OSI-906 y 5 mL de 60:40 (v/v) EtOH: agua para dar un lodo que fue calentado a aproximadamente 60 °C. Entonces se agregó-261.2 mg de OSI-906 a la solución y entonces se agitó en el frasco sellado y se !calentó a aproximadamente 60 °C. Entonces se sembró la solución con la Forma D y después de 2 días el sólido resultante fue aislado por filtración de vacío para dar 265.3 mg de la Forma D.

El XRPD, IR, DSC, TGA, y 1H RMN (DMSO-d6) de la muestra son registrados y son reproducidos en las Figs. 2, 6, 14, 23, 24, y 34 y Cuadros 7 y 8.

CUADRO 7 CUADRO 8 EJEMPLO 5 Preparaciones de la Forma E de OSI-906 A un frasco de vidrio sellable de 20 mL fue agregado 21.4 mg de OSI-906 y 7 mL de EtOH para formar una solución después de sonicación. Entonces se agregó 6.0 mg de OSI-906 para dar una solución túrbida. Entonces se agregó 31.9 mg de OSI-906. El lodo se agitó en el frasco sellado al ambiente. Después de 19 días el sólido resultante fue aislado por filtración de vacío para dar la Forma E.

A un 50 frasco de ml_ fue agregado 265.1 mg de OSI-906 y 40 ml_ de EtOH para formar una solución después de agitación a 70 °C. La solución filtrada por filtro de nilón precalentado en un frasco de vidrio de 20 mL pre-enfriado dentro de un baño de enfriamiento (hielo seco + IPA). Entonces la solución fue enfriada en el congelador. La solución fue sembrada con la Forma C. El sólido resultante fue aislado por filtración de vacío para dar 257.0 mg de la Forma E.

El XRPD, IR, DSC, TGA, y 1H RMN (DMSO-d6) de la muestra son registrados y son reproducidos en las Figs. 2, 7, 15, 25, 26, y 35 y Cuadros 9 y 10.

CUADRO 9 CUADRO 10 EJEMPLO 6 Preparación de la Forma F de OSI-906 A un frasco de vidrio fue agregado 267.0 mg de OSI-9Ó6 y 70 ml_ de IPA para formar una solución. La solución fue agitada y calentada a 70 °C para dar una solución túrbida. La solución fue filtrada por un filtro de nilón precalentado en un frasco de 125 mL precalentado. Enfriado lentamente al ambiente y se sembró la solución con la Forma F. La solución fue enfriada en el refrigerador y entonces en el congelador. Los sólidos resultantes fueron aislados por filtración de vacío para dar 207.9 mg de la Forma F.

El XRPD, IR, DSC, TGA, y 1H RMN (DMSO-d6) de ía muestra son registrados y son reproducidos en las Figs. 2, 8, 16, 27, 28, y 36 y Cuadros 11 y 12.

CUADRO 11 CUADRO 12 EJEMPLO 7 Preparación de la Forma G OS I -906 A un frasco del vidrio fue agregado 128.3 mg de OSI-906 y 75 mL de nitrometano. La solución fue agitada y calentada a 70 °C para dar una solución túrbida. La solución túrbida fue filtrada por un filtro de nilón precalentado en un frasco de 125 mL precalentado. La solución fue enfriada al ambiente y sembrada con la Forma G. La solución fue enfriada en el refrigerador y entonces en el congelador. Los sólidos resultantes fueron aislados por filtración de vacío para dar 67.6 mg de la Forma G.

El XRPD, DSC, TGA, y 1H RMN (DMSO-d6) de la muestra son registrados y son reproducidos en las Figs. 2, 9, 29, 30, y 37 y Cuadro 13.

CUADRO 13 EJEMPLO 8 Preparación de la Forma H de OSI-906 Los cristales de OSI-906 fueron cultivados por formación de lodo en acetonitrilo. Los detalles experimentales completos son proporcionados en el Cuadro 14. Los parámetros de la celda monoclínica y volumen calculado son: a = 13.7274(3) A, b = 10.9853(3) A, c = 15.6016(4) A, a = 90.00°, ß = 96.5346(12)°, ? = 90.00°, V = 2337.43(10) A3. El peso de la fórmula de la unidad asimétrica en la estructura cristalina de OSI-906 fue 462.56 g cm"3 con Z = 4, teniendo como resultado una densidad calculada de 1.314 g cm-3. El grupo del espacio fue determinado siendo F21/N (No. 14). Un resumen de los datos cristalinos y parámetros de recolección de datos cristalógrafos es proporcionado en 15. Los datos cristalógrafos únicos de rayos X fueron registrados y son reproducidos en la Fig. 37 y los Cuadros 15-20. El XRPD de la muestra es registrado y es reproducido en la Figura 10.

CUADRO 14 CUADRO 15 a Otwinowski Z. & Minor, W. Methods Enzymol., 276, 307, (1997).

CUADRO 16 Los átomos cruciformes fueron refinados isotrópicamente Ueq = (1/3)?¡?j UyaVjai.aj Los átomos de hidrógeno son incluidos en el cálculo de los factores de estructura pero no refinados CUADRO 17 Los números en paréntesis son desviaciones típicas estimadas en los útiimos dígitos significativos.

CUADRO 18 Los números en paréntesis son desviaciones estándar estimadas en los dígitos menos significativos.

CUADRO 19 Los números en paréntesis son desviaciones típicas estimadas en los últimos dígitos significativos.

CUADRO 20 Los números en paréntesis son desviaciones estándar estimadas en los dígitos menos significativos.

EJEMPLO 9 Preparación de la Forma I de OSI-906 A un frasco del vidrio fue agregado 1.0 g de OSI-906 y 10 mL de sec-butanol. La solución fue agitada y calentada a reflujo durante 30 minutos. El lodo resultante fue enfriado al ambiente. El sólido fino fue recolectado por filtración y fue lavado con 1 mL de sec-butanol. El sólido fue secado a 45°C bajo vacío para dar 795,0 mg de la Forma I.

Experimentos de Estabilidad Termodinámica Sorción de Humedad Gravimétrica: Los experimentos de sorción de humedad gravimétrica fueron llevados a cabo en materiales seleccionados secando primero la muestra a 40 % HR y 25°C hasta que un peso de equilibrio fuera alcanzado o por un máximo de cuatro horas. La muestra fue entonces sometida a un escaneo de adsorción de isoterma (25° C) de 40 a 90 % HR en pasos de 10 %. La muestra fue dejada equilibrarse a un peso asintótico en cada punto por un máximo de cuatro horas. Después de la adsorción, un escaneo de desorción de 85 a 0 % HR (a 25° C) fue corrido en pasos de -10 % otra vez permitiendo un máximo de cuatro horas para el equilibrio hasta un peso asintótico. Un escaneo de adsorción entonces fue realizado de 0 % HR a 40 % HR en pasos de +10 % HR. La muestra entonces fue secada durante 1-2 horas a 60°C y el sólido resultante fue analizado por XRPD.

Estabilidad del estado sólido: Aproximadamente 50 mg de la Forma A o las Formas C + D fueron pesados en frascos individuales de 8 ml_ y colocados destapados en las condiciones siguientes de almacenamiento: 40°C bajo vacío, 80°C bajo vacío, desecante, 25 °C/60 % HR y 40 °C/ 75 % HR. Después 24 horas y siete días de equilibrio los sólidos fueron analizados por XRPD y H-RMN. (Cuadro 21).

Experimentos de Molienda: Aproximadamente 50 mg de la Forma A fue ya sea molida en un mortero y triturador durante cinco minutos o en un molino de bolas durante 2 minutos a 10 Hz. Los materiales resultantes fueron analizados por XRPD para confirmar la forma sólida yt entonces transferidos a frascos de 8 mL. Los frascos fueron almacenados destapados a 80°C bajo vacío durante siete días y entonces analizados por XRPD y H-RMN. (Cuadro 21).

CUADRO 21 Experimentos con lodo: Aproximadamente 20-50 mg de formas cristalinas selectas fue pesado en frascos individuales de 8 ml_ equipados con una barra magnética de agitación. Ya sea THF, agua, EtOH, (80:20) EtOH: Agua o IPA fueron agregados para obtener un lodo de flujo libre. Después de 3, 5, 7 y 11 días de equilibrio a 50°C o temperatura ambiente, el i sólido de cada lodo fue recuperado por filtración de centrifugadora a través dé filtros de nilón de 0.45 µ??. Los sólidos aislados fueron analizados por XRPD para verificar la conversión de la forma. Los materiales selectos entonces fueron secados por la noche bajo vacío a temperatura ambiente y analizados por 1H-RMN para determinar el contenido de solvente residual. (Cuadro 22).

CUADRO 22 - no. determinado Experimento de calentamiento a reflujo: Estabilidad de la Forma- Aproximadamente 40-100 mg de formas cristalinas seleccionadas de OSI-906 fueron pesadas en frascos dé 4 mL o de 8 mL equipados con una barra magnética de agitación. A cada contenedor, 1 ,2 mL de EtOH o IPA fue agregado y el lodo resultante fue calentado a 80-83° C. Después de tres horas de agitación, las soluciones fueron énfriadas a temperatura ambiente a 10 °C/hr. Los lodos resultantes fueron dejados equilibrarse por hasta tres días a temperatura ambiente y los sólidos fueron aislados por filtración de centrifugadora. Los materiales recuperados fueron analizados por XRPD para determinar la forma cristalina (Cuadro 23).

CUADRO 23 no determinado Estabilidad termodinámica (Forma A) La Forma A fue determinada siendo no higroscópica por análisis i de sorción de humedad gravimétrica. La Forma sólida adsorbió 0.2 % en peso de agua a 60 % HR y 0.3 % en peso de agua a 90 % HR (Vea la Fig. 38). i Después del experimento, el análisis de XRPD del sólido secado proporcionó un patrón de difracción coherente con la forma inicial (Vea la Fig. 39).

Para valorar la estabilidad de la Forma A, la forma' sólida fue almacenada en condiciones ambientales diferentes como fue descrito en la presente. Aproximadamente 50 mg de la Forma A fue pesada en frascos de 8 mL y colocados destapados en las condiciones siguientes de almacenamiento: 40°C bajo vacío, 80°C bajo vacío, desecante, 25 °C/60 % HR y 40 °C/ 75 % HR. Después de 24 horas y siete días de equilibrio los sólidos fueron analizados por XRPD. (Vea el Cuadro 21).

La Forma A exhibió estabilidad después de 24 horas y siete días de almacenamiento a 40°C bajo vacío, 80°C bajo vacío, 25 °C/60 % HR, 40 °C/ 75% HR y bajo condiciones desecantes. Los patrones de XRPD representativos obtenidos siguiendo los puntos de tiempo son presentados en la Fig. 39 y la Fig. 40. espectro de 1H-RMN de las muestras obtenidas después del secado durante siete días a 40°C bajo vacío y 80°C bajo vacío, no mostró reducción significativa en los niveles de IPA (Vea la Fig. 41).

En un esfuerzo por comprender mejor la naturaleza de la retención de IPA, las cristalizaciones fueron realizadas para generar la Forma F, anteriormente identificada como un solvato de IPA. Se observó que estos experimentos fueron exitosos como es mostrado en el Cuadro 24, Fig. 42, Fig. 43, y Fig. 7.

CUADRO 24 - no determinado El espectro de H-RMN de la Forma F mostró aproximadamente 20.8 % en peso de IPA que es comparable al contenido teórico dé IPA (22.2 %) de un solvato de Di-IPA de OSI-906. La forma F fue analizada por Raman y FTIR y los espectros comparados a los correspondientes datos: obtenidos para la Forma A. Como es mostrado en las Figs. 45A-45B y Figs; 46A-46B, varias huellas de banda espectral mayor de la Forma F no fueron observadas en los datos obtenidos para la Forma A sugiriendo que el IPA retenido no es solvatado o la concentración está debajo de un límite detectable. Se determinó que la forma F fue inestable en el estado sólido convirtiéndose a una mezcla de Formas C + F después de ocho días de almacenamiento en un frasco sellado a temperatura ambiente (Vea la Fig. 43).

Estabilidad termodinámica (Forma C) La forma C fue confirmada siendo un monohidrato de OSI-906 por análisis de sorción de humedad gravimétrica. La Forma sólida adsorbió aproximadamente 4.2 % en peso de agua a 30% de HR lo que es consistente con el contenido teórico de agua (4.1 % en peso) de un monohidrato de OSI-906 (Vea la Fig. 47). Con la desorción, la histéresis fue observada entre 25 % HR y 5 % HR. La pérdida de agua fue observada a medida que la humedad fue reducida debajo de 15% indicando que esa Forma C no es estable en este ambiente. El análisis de XRPD del sólido recuperado del experimento que había sido secado a 60 °C/0 % de HR proporcionó durante dos horas un patrón de difracción indicativo de una mezcla de la Forma C y una forma cristalina no identificada (Vea la Fig. 48). Con base en estos hallazgos, un experimento adicional fue realizado en un esfuerzo de aislar esta nueva forma cristalina. Un sustrato de XRPD conteniendo la Forma C fue colocado en un desecador a temperatura ambiente. Después de almacenamiento durante la noche, el portaobjetos fue analizado inmediatamente por XRPD con la eliminación del ambiente y exposición breve (< 10 min) a la humedad del laboratorio (40-50 %HR). El patrón resultante de difracción exhibió reflexiones únicas con respecto a todas las otras formas identificadas y la forma sólida fue designada la Forma I (Vea la Fig. 48). La muestra fue reexaminada después de una hora de equilibrio a las condiciones del laboratorio y mostró conversión a la Forma C (Vea la Fig. 48).

El análisis de DSC de la Forma C mostró una endoterma amplia a 90°C atribuida a la pérdida de agua seguida por eventos adicionales a 205, 207 y fundido de la Forma A a 246°C (Vea la Fig. 49). En un esfuerzo de aclarar los eventos térmicos adicionales, experimentos adicionales de DSC fueron realizados. La forma C fue mantenida a 105°C durante cinco minutos, enfriada a la temperatura ambiente y entonces recalentada a la misma temperatura. Como es mostrado en la Fig. 50, la endoterma inicial a 90°C ya no estuvo presente indicando que el agua fue removida de la muestra. El análisis de XRPD del material recuperado exhibió un patrón de; difracción indicativo de la Forma C (Vea la Fig. 48). El experimento de mantenimiento de la isoterma fue repetido y la muestra entonces fue expuesta al ambiente del laboratorio (~40-50 % HR) por la noche. Un nuevo análisis de DSC mostró la reaparición de la endoterma amplia a 90°C indicando que la muestra re-adsorbió agua con la exposición al laboratorio (Vea la Fig. 50). Estas observaciones son consistentes con los resultados presentados anteriormente después de almacenamiento de la Forma C bajo condiciones desecantes.

Con base en estas conclusiones es probable que la ¡transición endotérmica a 205°C sea atribuida a la fundición de la Forma I seguido por recristalización a 207°C a la Forma A. Estos resultados sugieren que las Formas I y A están montrópicamente relacionadas. El análisis de KF de la Forma C mostró 4.2 % en peso de agua que es consistente con los resultados obtenidos del experimento de sorción de humedad gravimétrica que indicó que la forma sólida es un monohidrato de OSI-906. La formá C exhibió pérdida de 1.5 % en peso de agua por TGA (Vea la Fig. 51). Este resultado es más bajo que el valor regresado del análisis de Karl Fischer probablemente debido a deshidratación rápida soportada durante la exposición a temperatura elevada y al ambiente de nitrógeno de TGA.

Como es mostrado en el Cuadro 21 , las Formas C y D permanecieron como una mezcla después de 1 y sieté días de almacenamiento a 25 °C/60 % HR, 40 °C/ % HR y bajo condiciones desecantes (Vea la Fig. 52). Por contraste al experimento anterior de la estabilidad de la desecación mostró la conversión de la Forma C a; la Forma I, estas muestras tuvieron un tiempo de residencia mucho mayor en el ambiente de laboratorio (~40-50 % HR) probablemente promoviendo la conversión a las formas de hidrato. Esta conclusión también es apoyada por un experimento adicional con una mezcla de Formas C y D, que fue realizado en un esfuerzo de aislar una cantidad suficiente de la Forma I para un experimento competitivo de lodo en IPA. Como es mostrado en el Cuadro 25, después de tres días de almacenamiento desecante de las Formas C y D una mezcla de las Formas C, D e I fue obtenida (Vea la Fig. 53). La mezcla de las formas C + D mostró conversión a la Forma C después de uno y siete días de almacenamiento a condiciones desecantes elevadas (Vea la Fig. 52). Como es demostrado con experimentos anteriores, es sospechado que las formas de hidrato se deshidrataron a la Formar I seguido por conversión a la Forma C con la exposición al ambiente del laboratorio.

CUADRO 25 Los experimentos de lodo demostraron que la Forma C fue estable en agua y (80:20) de EtOH: Agua después de equilibrio prolongado a temperatura ambiente y elevada (Cuadro 22). Por contraste, la Forma C mostró conversión a la Formar A en THF e IPA (Vea la Fig. 53). La! estabilidad de la Forma C en EtOH probablemente está mediada por la temperatura ya que la forma cristalina mostró conversión a las Formas A o E a temperatura elevada mientras exhibía estabilidad a condiciones ambientes (Vea la Fig. 54).

Estabilidad termodinámica (Forma D) Se confirmó que la forma D fue un monohidrato de OSI-906 por análisis de sorción de humedad gravimétrica. La forma sólida adsorbió aproximadamente 3.9 % en peso de agua a 60 % HR que es comparable al contenido teórico de agua (4.2 % en peso de) de un monohidrato de OSI-906 (Vea la Fig. 55). Con la desorción, la pérdida de agua fue observada a medida que la humedad fue reducida debajo de 15% indicando que la Forma D no es estable en este ambiente. El análisis de XRPD del sólido recuperado del experimento que había sido secado a 60 °C/0 % HR proporcionó durante dos horas un patrón de difracción indicativo de una mezcla de Formas C y D (Vea la Fig. 56).

Como es mostrado en el Cuadro 21 , la Forma D exhibió estabilidad después de uno y siete días de almacenamiento a 25 °C/60 % HR, 40 °C7 75 % HR y bajo condiciones desecantes. Por contraste, la Forma D mostró conversión para la Forma C a condiciones de secado a alta temperatura (Vea la Fig. 52). Dado que esa Forma C es un monohidrato de OSI-906, es probable que esa Forma D se deshidratara a la Forma I que entonces se convirtió a la Forma C con la exposición al ambiente húmedo del laboratorio (40-50 % HR).

Los experimentos de lodo demostraron que la Forma D es estable en agua después de equilibrio prolongado a temperatura ambiente y elevada (Cuadro 22, Fig. 57). Las mezclas de las Formas C y D no mostraron signos de conversión en agua y como resultado investigación adicional sería requerida para determinar la forma más estable de hidrato de OSI-906. La forma D mostró conversión a la Forma A en THF e IPA (Vea la Fig. 58). La forma D exhibió inestabilidad en EtOH convirtiendo ya sea a la Forma A o E a temperatura elevada y la Forma C a temperatura ambiente (Anexo 39). En (80:20) EtOH: Agua, la Forma D mostró conversión a la Formar C después de equilibrio prolongado a temperatura elevada o ambiente (Vea la Fig. 59).

Experimentos de Estrés Térmico (Formas B, D, E, y F) Los sólidos fueron estresados bajo temperatura diferente (40°C u 80° C) en un horno de vacío por un período de tiempo medido. Las muestras fueron analizadas después de eliminación del ambiente de estré;s como es mostrado en el Cuadro 26.

CUADRO 26 Determinación cuantitativa de las Formas A, C y D en OSI-906 por Espectroscopia de Raman: Un método de cuantificación para la Formas A, C y D en OSI-906 ha sido desarrollado con base en la espectroscopia de Raman y regresión de PLS (mínimos cuadrados parciales).

Definiciones Precisión: La prueba de precisión es utilizada para verificar que el método de Raman tiene precisión adecuada para la determinación de la Forma C o D en la sustancia de fármaco OSI-906. Las concentraciones de la Forma C y D determinados por el método de Raman son comparadas con las concentraciones verdaderas por gravimetría para las mezclas sintéticas de las Formas A, C y D.

Especificidad: La especificidad se refiere a la capacidad del método de cuantificación para valorar la concentración de la Forma C o D en la sustancia de fármaco de OSI-906 con la presencia de la Forma A.

Límite de Detección (LOD) : La concentración más pequeña de la Forma C o D en la sustancia de fármaco de OSI-906 que! puede ser detectada por el método de cuantificación.

Límite de Cuantificación (LOQ) : La concentración más pequeña de las Formas C y D en la sustancia de fármaco de OSI-906 que puede ser determinada con precisión por el método de cuantificación.

Linealidad: El gráfico de las concentraciones de la Forma C y D determinadas por el método de Raman contra las concentraciones verdaderas especificadas gravimétricamente debe ser lineal dentro del intervalo del método.

Intervalo: El intervalo entre la concentración inferior y superior de las Formas C y D que puede ser determinado por el método de Raman con un nivel conveniente de precisión, exactitud y linealidad.

Robustez: La prueba de robustez es para evaluar el, desempeño del método de Raman con variaciones del tamaño medio de la muestra.

Método de Prueba Los materiales de referencia de las Formas A, C y D de OSI-906 fueron utilizados para la preparación de las muestras de calibración y validación.

Procedimiento del análisis: Moler levemente aproximadamente 250 mg de muestra en un mortero y triturador. Llene un crisol de aluminio de 100 pL que toma típicamente aproximadamente 25 mg de muestra molida dependiendo de la densidad en volumen del material (no menos de 12 mg debe ser utilizado para la preparación). Utilice una espátula para comprimir la muestra y proporcionar una superficie lisa. Coloque el crisol sobre' la etapa de muestra de Raman. Enfoque el microscopio y adquiera el espectro de Raman de la muestra. Repita la preparación de la muestra en el crisol y el procedimiento de adquisición dos veces adicionales para un total de tres mediciones para cada muestra molida. Salve cada espectro en el formato de archivo de GRAMS SPC.

Determinación cuantitativa de las Formas C y D y Cálculos: Un método de cuantificación para la Formas A, C y D en OSI-906 ha sido desarrollado con base en la espectroscopia de Raman y regresión de PLS (mínimos cuadrados parciales). El método asume la presencia sólo de las Formas A, C y D en la muestra. Los espectros representativos de: Raman de estas tres formas son mostrados en la Fig. 60. Para el propósito de cuantificación, los espectros de Raman son pretratados utilizando normalización de centrado medio. Los espectros dentro del intervalo de 1478-1644 cm"1 fueron utilizados para la regresión de PLS. El software TQ analyst es utilizado para establecer el modelo de calibración (como es mostrado en la Fig. 61 y la Fig. 62) y cuantificar las muestras. El porcentaje en peso (% en peso de) de las Formas C y D es determinado utilizando el I modelo de calibración.

Cargue el método de cuantificación utilizando el software de TQ Analyst para cuantificar los tres espectro obtenidos para la muestra. Imprima el informe de cuantificación para cada espectro. Calcule el promedio de la concentración de las Formas C y D en % en peso de para las mediciones por triplicado.

Informe el % en peso promedio de las Formas C y D a un lugar decimal si está arriba de LOQ (límite de cuantificación, 5% en peso), de otro modo informe como Forma C < LOQ y Forma D < LOQ.

Preparación de Mezclas de Prueba y Análisis de Datos Procedimiento de preparación de muestra: La cantidad calculada de las Formas A, C y D fue pesada según el % en peso deseado de las Formas C y D y a una cantidad total de aproximadamente 250 mg. Las muestras fueron mezcladas un mortero con la ayuda de una espátula y ligeramente molidas durante 5 minutos para obtener consistencia y homogeneidad. Los detalles de las muestras preparadas son resumidos en los Cuadros 27 y 28.

CUADRO 27 CUADRO 28 Las muestras de calibración y validación fueron , analizadas según el Método de Prueba para obtener el espectro de Raman. La determinación cuantitativa de las Formas C y Forma D entonces fue realizada utilizando el software de TQ Analyst (versión 7,1). Para el propósito de cuantificación, los espectros de Raman son pretratados utilizando una corrección cuadrática de línea de base basada en la región entre 1478 y 1654 cm" para corregir los cambios de la línea de base y la variación de! intensidad entre las muestras. Los espectros de Raman dentro del intervalo de 1478-1654 cm"1 fueron utilizados para la regresión de PLS (mínimos cuadrados parciales) normalización central media.

Criterios de aceptación: <8 % en peso calculado como abs[(% en peso promedio de la Forma A o Forma D determinado) - (% eri peso real de la Forma C o la Forma D)] Las determinaciones triplicadas fueron realizadas para cada muestra preparada según el Método de Prueba. El promedio, la desviación estándar (SD) y desviación estándar relativa (RSD) del % en peso de las Formas C y D para cada muestra fueron calculados y resumidos en los Cuadros 29 y 30. La precisión del método como es determinado por la diferencia máxima entre el % en peso promedio de la Formá C o D determinado y el % en peso real de la Forma C o D para todas las muestras de validación es ±1.7 % en peso. Esto es menos de 8 % en peso,! que es el criterio de aceptación para la precisión del método. La precisión del método así es confirmado.

CUADRO 29 1. Precisión = abs [(% en peso promedio de la Forma C determinado) - (% en peso real de la Forma C)j CUADRO 30 1 Precisión = abs [(% en peso promedio de la Forma D determinado) (% en peso real de la Forma D)j Criterios de aceptación: < 8 % en peso Según los resultados obtenidos, la precisión del método fue determinada siendo ± 1 ,7 % en peso. Basado en estas observaciones, el LOQ determinado como la concentración más baja de las Formas C y D en las muestras con precisión y exactitud aceptables es 5 % en peso, que es menor que los criterios de aceptación de 8 % en peso, así el LOQ del método es aceptable. Ya que la detección del método es a través de cuantificación, el LOD del método de cuantificación fue establecido como el mismo que LOQ, es decir 5 % en peso. Esto es menor de 8 % en peso, así el LOQ del método es aceptable.

Criterios de aceptación: Ri > 0.95 donde Ri es el coeficiente de correlación para las muestras de calibración R2 > 0.95 donde R2 es el coeficiente de correlación para las muestras combinadas de validación y de calibración ; El % en peso de las Formas C y D individuales determinado por Raman fue graficado contra el % en peso real de las Formas C y D especificado gravimétricamente para las muestras de calibración; como es mostrado en las Figuras 61 y 62. La regresión lineal fue realizada y es mostrada en la gráfica. El coeficiente de correlación (RT) para las muestras de calibración de la Forma C fue determinado siendo 0.9999, mayor1 que 0.95 fijado como los criterios de aceptación para la linealidad. La pendiente y la intercepción de y de la línea de regresión son 0.9929 y 0.0747, respectivamente. El coeficiente de correlación (R^ para las muestras de calibración de la Forma D fue determinado siendo 0.9999, mayor que 0.95 fijado como los criterios de aceptación para la linealidad. La pendiente y la intercepción de y de la línea de regresión son 1 .0136 y -0.0813, respectivamente. Los criterios de aceptación de Ri > 0.95 fueron cumplidos para ambas líneas de regresión.

Además de determinar la linealidad del método , que utiliza muestras de calibración, la linealidad fue evaluada utilizando los resultados combinados para las muestras de validación y las muestras de calibración por el requisito del protocolo de validación. El % en peso promedio de; las Formas C y D determinado por Raman fue graficado contra el % en peso' real de las Formas C y D especificado gravimétricamente para las muestras de validación y las muestras de calibración, como es mostrado en las Figuras 63 y 44. La regresión lineal fue realizada y es mostrada en la gráfica. El coeficiente de correlación (R2) fue determinado siendo 0.9967 para las muestras de la Forma C. La intercepción de y la pendiente de la línea de regresión son 0.9434 y 0.2317, respectivamente. El coeficiente de correlación (R2) fue determinado siendo 0.9978 para las muestras de la Forma D. La intercepción de y y la pendiente de la línea de regresión son 0.9676 y 0.643, respectivamente. Los criterios de aceptación de R2 > 0.95 fue cumplido indicando que el método es lineal para la determinación de la Forma C y Forma D en la sustancia de fármaco de OSI-906 en la presencia de la Forma A.

El intervalo del método de cuantificación es establecido como entre el LOQ y la concentración más alta de las Formas C o D utilizada en las muestras de validación con precisión y exactitud aceptables. Así el intervalo validado del método está entre 5 y 20 % en peso.

En algunos aspectos, se proporciona una composición farmacéutica que comprende el polimorfo de cualquiera de las Formas A-H, formulada con o sin uno o más portadores farmacéuticamente aceptables.

En algunos aspectos, se proporciona un método: para tratar cáncer mediado por lo menos en parte por IR y/o IGF-1 R que comprende administrar a un paciente en necesidad del mismo una cantidad terapéuticamente efectiva de la composición del polimorfo cristalino de cualquiera de las Formas A-H.

En algunos aspectos, se proporciona un método para tratar sarcoma, fibrosarcoma, osteoma, melanoma, retinoblastoma, rabdomiosarcoma, neuroblastoma, teratocarcinoma, [ malignidad hematopoyética, ascitos malignos, cáncer de pulmón, cáncer gástrico, cáncer de cabeza y cuello, cáncer de vesícula, cáncer de próstata, carcinoma de células escamosas esofágicas, linfoma de células grandes anaplásicas, tumor miofibroblástico inflamatorio, o glioblastoma con una cantidad terapéuticamente efectiva de la composición del polimorfo cristalino de cualquiera de las Formas A-H.

En aspectos adicionales, se proporciona un método para tratar carcinoma adrenocortical, cáncer colorrectal, cáncer de pulmón dé células no pequeñas, cáncer de mama, cáncer pancreático, cáncer ovárico, carcinoma hepatocelular, o cáncer renal con una cantidad terapéuticamente efectiva de la composición del polimorfo cristalino de cualquiera de las Formas A-H.

Composiciones La invención proporciona composiciones farmacéuticas de las Formas polimórficas A-H de OSI-906 formuladas para un modo deseado de administración con o sin uno o más portadores farmacéuticamente aceptables y útiles. Los compuestos también pueden incluirse en las composiciones farmacéuticas en combinación con uno u otros más compuestos terapéuticamente activos.

Las composiciones farmacéuticas de la presente invención comprenden un compuesto de la invención (o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo) como un ingrediente activo, portador o portadores opcionales farmacéuticamente aceptables y opcionalmente otros ingredientes terapéuticos o adyuvantes. Las composiciones incluyen composiciones convenientes para la administración oral, rectal, tópica, y parenteral (incluyendo subcutánea, intramuscular e intravenosa) y aunque la ruta más conveniente en cualquier caso dependerá del hospedero particular, y la naturaleza y severidad de las condiciones para las cuales se está administrando el ingrediente activo. Las composiciones farmacéuticas pueden ser presentadas convenientemente en forma de dosis unitaria y se pueden preparar por cualquier método conocido en la técnica de farmacia. : Compuestos de la invención se pueden combinar como el ingrediente activo en mezcla íntima con un portador farmacéutico de acuerdo con las técnicas convencionales de formación de compuestos farmacéuticas. El portador puede tomar una gran variedad de formas dependiendo de la forma de preparación deseada para la administración, por ejemplo, oral o parenteral (incluyendo intravenosa). Así, las composiciones farmacéuticas de la presente invención pueden presentarse como unidades discretas convenientes para la administración oral como cápsulas, sellos o tabletas cada uno conteniendo una cantidad predeterminada del ingrediente activo. Además, las composiciones pueden presentarse como un polvo, como gránulos, como una solución, como una suspensión en un líquido acuoso, como un líquido no acuoso, como una emulsión de aceite en agua o como una emulsión líquida de agua en aceite: Además para las formas de dosificación comunes expuestas anteriormente, el compuesto representado por la fórmula I, o su sal farmacéuticamente aceptable, también se puede administrar por medios de liberación controlada y/o dispositivos de suministro. Las composiciones se pueden preparar mediante cualquiera de los métodos de farmacia. En general, estos métodos incluyen un paso de llevar en asociación el ingrediente activo con el portador que constituye uno o más ingredientes necesarios. En general, las composiciones se preparan mediante la mezcla uniformemente e íntimamente del ingrediente activo con los portadores líquidos o finalmente portadores sólidos divididos o ambos. El producto entonces se puede formar convenientemente en la presentación deseada.

El portador farmacéutico empleado puede ser, por ejemplo, un sólido, líquido, o gas. Los ejemplos de los portadores sólidos incluyen lactosa, térra alba, sacarosa, talco, gelatina, agar, pectina, acacia, estearato de magnesio, y ácido esteárico. Los ejemplos de portadores líquidos son suero de azúcar, aceite de cacahuate, aceite de oliva, y agua. Los ejemplos de portadores gaseosos incluyen dióxido de carbono y nitrógeno.

Una tableta que contiene la composición de esta invención se puede preparar mediante compresión o moldeo, opcionalmente' con uno o más ingredientes adicionales o adyuvantes. Las tabletas comprimidas se pueden preparar mediante la compresión en una máquina adecuada, el ingrediente activo en una forma de flujo libre tal como polvo o gránulos, opcionalmente mezclados con un aglutinante, lubricante, diluyénte inerte, superficie activa o agente de dispersión. Las tabletas moldeadas se pueden hacer al moldear en una máquina adecuada, una mezcla del compuesto en polvo humedecido con un diluyénte líquido inerte. Cada tableta preferiblemente contiene de cerca de 0.05 mg a cerca de 5 g del ingrediente activo y cada oblea o cápsula preferiblemente contiene de cerca de 0.05 mg a cerca de 5 g del ingrediente activo.

Una formulación destinada para la administración oral a los seres humanos puede contener de aproximadamente 0.5 mg a aproximadamente 5 g de agente activo, compuesto con una cantidad apropiada y conveniente de material portador que puede variar de aproximadamente 5 a aproximadamente 95 por ciento de la composición total Las ¡formas de dosificación unitaria generalmente contendrán entre cerca de 1 mg a cerca de 2 g del ingrediente activo, usualmente 25 mg, 50 mg, 100 mg, 200 mg, 300 mg, 400 mg, 500 mg, 600 mg, 800 mg, o 1000 mg.

Los compuestos de la invención pueden ser proporcionados para una formulación de alta pureza, por ejemplo por lo menos aproximadamente 90%, 95%, o 98% puro en peso o más.

Las composiciones farmacéuticas de la presenté invención adecuadas para administración parenteral se pueden preparar como soluciones o suspensiones de compuestos activos en agua. Un agente tensoactivo adecuado se puede incluir tal como, por ejemplo, hidroxipropilcelulosa Las dispersiones también se pueden preparar en glicerol, polietilenglicoles líquidos y sus mezclas en aceites. Además, se puede incluir un preservativo para prevenir el crecimiento nocivo de microorganismos.

Las composiciones farmacéuticas de la presenté invención adecuadas para uso inyectable incluyen soluciones o dispersiones acuosas estériles. Además, las composiciones pueden estar en la forma de polvos estériles para la preparación extemporánea de dichas soluciones inyectables estériles o dispersiones. En todos los casos, la forma inyectable final debe ser estéril y debe ser efectivamente fluida para fácil inyectabilidad. Las composiciones farmacéuticas deben ser estables bajo condiciones de manufactura y almacenamiento; de esta manera, preferiblemente se deben conservar contra la acción contaminante de microorganismos tales como bacterias y hongos. El portador puede ser un solvente o medio de dispersión que contiene, por ejemplo, agua, etanol, poliol (por ejemplo, glicerol, propilenglicol y polietilenglicol líquido), aceites vegetales, y sus mezclas adecuadas.

Las composiciones farmacéuticas de la presente invención pueden estar en una forma adecuada para uso tópico tal como, por ejemplo, un aerosol, crema, ungüento, loción, capa de polvo, o lo similar. Además, las composiciones pueden estar en una forma adecuada para , el uso en dispositivos transdérmicos. Estas formulaciones se pueden preparar, utilizando un compuesto representado por la fórmula I de esta invención, o su sal farmacéuticamente aceptable, vía métodos de procesamiento convencional. Como un ejemplo, una crema o ungüento se prepara al mezclar el material hidrófilo y agua, junto con cerca de 5% en peso a cerca de 10% en peso del compuesto, para producir una crema o ungüento que tiene una consistencia deseada.

Las composiciones farmacéuticas de esta invención pueden estar en una forma adecuada para la administración rectal en donde el portador es un sólido. En preferible que la mezcla forme supositorios de dosis unitaria. Los portadores adecuados incluyen mantequilla de cacao y otros materiales usualmente usados en la técnica. Los supositorios se pueden formar convenientemente por primero mezclar la composición con el portador o portadores suavizados o fundidos seguidos por el enfriamiento y formación en moldes.

Además de los ingredientes portadores antes mencionados, las formulaciones farmacéuticas descritas anteriormente pueden incluir, como sea apropiado, uno o más ingredientes portadores adicionales tales como diluyentes, reguladores de pH, agentes aromatizantes, aglutinantes, agentes tensoactivos, espesantes, lubricantes, conservantes (incluyendo antioxidantes) y similares. Además, otros adyuvantes pueden incluirse para hacer a la formulación isotónica con la sangre del destinatario propuesto. Las composiciones que contienen un compuesto descrito por la fórmula I, o sus sales farmacéuticamente aceptables, también se pueden preparar en polvo o en forma de concentrado líquido.

Actividad Biológica Y Usos Aún más todavía, la invención proporciona los métodos para tratar cáncer con un las Formas polimórficas de OSI-906 inhibidoras de IGF-I R, que incluye la Forma A no solvatada, las Formas B-E hidratadas y las Formas F y G solvatadas.

La eficacia de OSI-906 como un inhibidor del receptor de factor de crecimiento-l similar a insulina (IGF-IR) fue demostrada y fue confirmada por varios ensayos farmacológicos in vitro. Los ensayos y sus respectivos métodos pueden ser llevados a cabo con los compuestos según la invención. La actividad poseída por OSI-906 ha sido demostrada in vivo. Vea, por ejemplo, Future Med. Chem., 2009, 1 (6), 1 153-1171.

EEUU 2006/0235031 (publicada el 19 de octubre de 2006) describe una clase inhibidores de proteína cinasa sustituida de anillo bicíclico, incluyendo el Ejemplo 31 del mismo, que corresponde al inhibidor de IGF-1R conocido como OSI-906. El OSI-906 está en desarrollo clínico en varios tipos de tumor.

La presente invención incluye un método para inhibir la actividad de la proteína cinasa que comprende la administración de un compuesto de fórmula I o su sal farmacéuticamente aceptable.

La presente invención incluye un método para inhibir la actividad de IGF-1 R que comprende administrar un compuesto de Fórmula I o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

La presente invención incluye un método para inhibir la actividad de la proteína cinasa en donde la actividad de dicha proteína cinasa afecta los trastornos hiperproliferativos que comprende administrar un compuesto de Fórmula I o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

La presente invención incluye un método para inhibir la actividad de la proteína cinasa en donde la actividad de dicha proteína cinasa influye en la angiogénesis, la permeabilidad vascular, la respuesta inmunitaria, la apoptosis celular, el crecimiento de tumor, o la inflamación que comprende administrar un compuesto de Fórmula I o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

La presente invención incluye un método de tratamiento de un paciente que tiene una condición que se media por la actividad de proteína cinasa, dicho método comprende la administración a un paciente de una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de fórmula' I o su sal farmacéuticamente aceptable.

La presente invención incluye un método para tratar a un paciente que tiene una condición que es mediada por la actividad de IGF-1 R, dicho método comprende administrar al paciente una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de Fórmula I o de una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

La presente invención incluye un método para tratar a un paciente que tiene una condición que es mediada por la actividad de proteína cinasa en donde la condición mediada por la actividad de la proteína cinasa es cáncer, dicho método comprende administrar al paciente una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de Fórmula I o de una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

En algunos aspectos, la invención incluye un método para tratar un cáncer, como esos anteriores, que es mediado por lo menos en parte por IR y/o IGF-1 R que comprende administrar a un mamífero en necesidad del mismo una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto o sal de la invención. En algunos aspectos del mismo, el cáncer es mediado por lo menos en parte por IGF-1 R amplificado. En algunos aspectos del mismo, el compuesto es un inhibidor doble de IGF-1R e IR, y puede ser un inhibidor selectivo.

Los compuestos de fórmula I de la presente invención son útiles en el tratamiento de una variedad de cánceres, incluyendo, pero no limitados a, tumor sólido, sarcoma, fibrosarcoma, osteoma, melanoma, retinoblastoma, rabdomiosarcoma, glioblastoma, neuroblastoma, teratocarcinoma, malignidad hematopoyética y ascitis maligna. Más específicamente, los cánceres incluyen, pero no limitado a, cáncer de pulmón, cáncer de vejiga, cáncer de páncreas, cáncer de riñon, cáncer gástrico, cáncer de mama, cáncer de colon, cáncer de próstata (incluyendo las metástasis óseas), carcinoma hepatocelular, cáncer de ovario, carcinoma de células escamosas de esófago, melanoma, un linfoma anaplásico de células grandes, un tumor miofibroblástico inflamatorio y un glioblastoma.

En algunos aspectos, los métodos anteriores se utilizan para tratar uno o más de cáncer de vejiga, colorrectal, pulmón de células no pequeñas, mama o cáncer de páncreas. En algunos aspectos, los métodos anteriores se utilizan para tratar uno o más de cáncer de ovario, gástrico, cabeza y cuello, próstata, hepatocelular, renal, glioma o cáncer de sarcoma.

En algunos aspectos, la invención incluye un método, incluyendo los métodos anteriores, en donde el compuesto se utiliza para inhibir EMT. El IGF-1 R es expresado extensamente en cánceres epiteliales humanos. El papel del IGF-1 R es crítico en los cánceres colorrectal, NSCLC, y ováricos, con lo cual los tumores pueden impulsar su crecimiento y supervivencia a través de sobre-expresión de IGF-II autócrino. El desarrollo de cáncer de próstata, mama y colorectal con respecto a la expresión de IGF-1 ha sido estudiado extensamente. De ahí, el IGF-1 R representa una diana terapéutica importante para el tratamiento de cáncer cuando es empleado para inhibir EMT. Se espera que el OSI-906 potencie la actividad antitumor de un amplio espectro de tipos de tumor a través de IGF-1R así como otros receptores.

La presente invención incluye una formulación destinada para la administración oral preferida a humanos.

En general, los niveles de dosificación en el orden de cerca de 0.01 mg/Kg a cerca de 150 mg/Kg del peso del cuerpo por día son útiles en el tratamiento de las condiciones indicadas anteriormente, o de manera alternativa cerca de 0.5 mg a cerca de 7 g por paciente por día. Por ejemplo, inflamación, cáncer, psoriasis, alergia/asma, enfermedad y condiciones del sistema inmune, enfermedades y condiciones del sistema nervioso central (CNS), se puede tratar eficazmente mediante la administración de aproximadamente 0.01 a 50 mg del compuesto por kilogramo de peso corporal por día, o alternativamente alrededor de 0.5 mg a aproximadamente 3.5 g por paciente por día.

Se entiende, sin embargo, que el nivel específico de dosis para cualquier paciente determinado dependerá de una variedad ¡de factores incluyendo la edad, peso corporal, general, salud, sexo, dieta, tiempo de administración, vía de administración, tasa de excreción, combinación de medicamentos y la severidad de la enfermedad particular que experimenta la terapia.

En algunos aspectos, la invención incluye un método de tratamiento de cáncer que comprende la administración a un mamífero que lo necesita de una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto o sal de la invención, en donde al menos un agente anti-cancerígeno activo adicional se utiliza como parte del método. La presente invención incluye un método para tratar tumores o metástasis de tumor en un paciente, que comprende administrar a dicho paciente simultáneamente o secuencialmente una cantidad terapéuticamente efectiva de un inhibidor de cinasa de EGFR y el compuesto de Fórmula I, comprendiendo adicionalmente uno o más de otros agentes contra el cáncer. La presente invención incluye un método para tratar tumores o metástasis de tumor en un paciente, que comprende administrar a dicho paciente simultáneamente o secuencialmente una cantidad terapéuticamente efectiva del inhibidor de EGFR cinasa erlotinib y el compuesto de Fórmula I, comprendiendo adicionalmente uno o más de otros agentes anti cáncer.

La presente invención incluye un método para tratar tumores o metástasis de tumor en un paciente, que comprende administrar a dicho paciente simultáneamente o secuencialmente una cantidad terapéuticamente efectiva de un inhibidor de EGFR cinasa y el compuesto dé Fórmula I, comprendiendo adicionalmente uno o más de otros agentes contra el cáncer, en donde los otros agentes contra el cáncer son uno o más agentes seleccionados de un agente de alquilación, ciclofosfamida, clorambucil, cisplatina, busulfan, melfalan, carmustina, streptozotocina, trietilenmelamina, mitomicina C, Un anti metabólico, metotrexato, etoposido, 6-mercaptopurina, 6- tiocguanina, citarabina, 5-fluorouracilo, raltitrexed, capecitabina, dacarbazina, un antibiótico, actinomicina D, doxorubicina, daunorubicina, bleomicina, mitramicina, un alcaloide, vinblastina, paclitaxel, un glucocorticoide, dexametasona, un corticosteroide, prednisona, un inhibidores de enzima de nucleósido, hidroxiurea, una enzima que agota aminoácidos, asparaginasa, ácido folínico, leucovorina, y un derivado de ácido fólico.

Los compuestos descritos pueden contener uno o más centros asimétricos y asi pueden dar lugar a diastereómeros e isómeros ópticos. La presente invención incluye todos tales posibles diastereómeros así como sus mezclas racémicas, su enantiómeros resueltos substancialmente puros, todos los isómeros geométricos posibles, y sales farmacéuticamente aceptables del mismo. La presente invención incluye todos los estereoisómeros de fórmula I y sus sales farmacéuticamente aceptables. Además, las mezclas de estereoisómeros así como estereisómeros específicos aislados también están incluidos. Durante el transcurso de los procedimientos de síntesis utilizados para preparar tales compuestos, o al utilizar racemización o procedimientos de epimerización conocidos por esos expertos en la técnica, los productos de tales procedimientos pueden ser una mezcla de estereoisómeros. j Además, los compuestos pueden ser amorfos o pueden existir o estar preparados en diversas formas cristalino o polimorfos, \ incluyendo solvatos e hidratos. La invención incluye cualquiera de tales formas proporcionadas aquí, en cualquier nivel de pureza. Una recitación de un compuesto per se significa el compuesto independientemente de cualquier estereoquímica sin especificar, forma física y ya sea asociado o no con un solvente o agua.

Los compuestos de la invención no se limitan a aquellos que contienen todos sus átomos en su abundancia isotópica natural. Más bien, una relación de un compuesto o un átomo dentro de un compuesto incluye isotopólogos, es decir, la especie en donde un átomo o compuesto varía sólo con respecto a enriquecimiento isotópico y/o en la posición de enriquecimiento isotópico. Por ejemplo, en algunos casos puede ser deseable enriquecer uno o más átomos de hidrógeno con deuterio (D) o enriquecer carbono con 13C.

Cuando un tautómero del compuesto de Fórmula1 I existe, el compuesto de Fórmula I de la presente invención incluyendo cualesquiera tautómeros posibles y sales farmacéuticamente aceptables del mismo, y las mezclas de los mismos, menos donde específicamente se indique de otro modo.

La invención también incluye una composición farmacéutica que está comprendida de un compuesto de fórmula I en combinación con un portador farmacéuticamente aceptable.

Preferiblemente la composición esta comprendida de! un portador farmacéuticamente aceptable y una cantidad terapéuticamente efectiva no tóxica de un compuesto de fórmula I como se describe anteriormente (o su sal farmacéuticamente efectiva).

Además, dentro de esta modalidad preferida, la invención incluye una composición farmacéutica para el tratamiento de la enfermedad mediante la inhibición de cinasa, que comprende un portador farmacéuticamente aceptable y una cantidad terapéuticamente efectiva no tóxica del compuesto de fórmula I como se define anteriormente (o su sal farmacéuticamente aceptable).

El término "sales farmacéuticamente aceptables" se refiere a las sales preparadas de bases o ácidos no tóxicos farmacéuticamente aceptables. Cuando el compuesto de la presente invención es ácido, su sal correspondiente se puede preparar convenientemente a partir de bases no tóxicas farmacéuticamente aceptables, que incluyen bases inorgánicas y bases orgánicas. Sales derivadas de tales bases inorgánicas incluyen aluminio, amonio, calcio, cobre (-ico y -oso), férrico, ferroso, litio, magnesio, manganeso (-ico y -oso), potasio, sodio, zinc y las sales similares. Son particularmente preferidas las sales de amonio, calcio, magnesio, potasio y sodio. Las sales derivadas de las bases no tóxicas, orgánicas y farmacéuticamente aceptables incluyen sales de aminas primarias, secundarias y terciarias, así como aminas cíclicas y aminas sustituidas tal como ocurre naturalmente y aminas sustituidas sintetizadas. Otras bases no tóxicas, orgánicas y farmacéuticamente aceptables de las que pueden ser formadas las sales incluyen resinas de intercambio iónico tales como, por ejemplo, arginina, betaina, cafeína, coline, ?', N' -dibenciletilendiamina, dietilamina, 2-dietilaminoetanol, 2- dimetilaminoetanol, etanolamina, etilendiamina, N-etilmorfolina, N-etilpiperidina, glucamina, glucosamina, histidina, hidrabamina, isopropilamina, lisina, metilglucamina, morfolina, piperazina, piperidina, resinas de poliamina, procainae, purinas, téobromina, trietilamina, trimetilamina, tripropilamina, trometamina y similares.

Cuando el compuesto de la presente invención es básico, su sal correspondiente se puede preparar convenientemente a partir de ácidos no tóxicos farmacéuticamente aceptables, que incluyen ácidos orgánicos e inorgánicos. Dichos ácidos incluyen, por ejemplo, ácido acético, bencenosulfónico, benzoico, camforsulfónico, cítrico, etanosulfónico fórmico, glucónico, glutámico, bromhídrico, clorhídrico, isetiónico, láctico, maléico, málico, mandelico, metanosulfónico, múcico, nítrico, pamóico, pantoténico, fosfórico, succínico, sulfúrico, tartárico, o-toluenosulfónico y lo similar. Los ácidos cítrico, bromhídrico, fórmico, clorhídrico, maleico, fosfórico, sulfúrico y tartárico son preferidos. Especialmente preferidos son los ácidos fórmico y clorhídrico.

Definiciones Generales Y Abreviaturas A menos que de otro modo sea especificado, los términos utilizados en la presente tendrán el mismo significado como es comprendido comúnmente por uno de experiencia ordinaria en la técnica, de acuerdo con la invención. Además, mientras los métodos y los materiales equivalentes pueden ser utilizados para practicar la invención, los métodos y los materiales preferidos son descritos.

Cada definición de variable anterior incluye cualquier subconjunto de los mismos y los compuestos de fórmula I incluyen cualquier combinación de dichas variables o subconjuntos de variables.

En algunos aspectos, la invención incluye cualquiera de los compuestos de ejemplo de la presente y las sales farmacéuticamente aceptables del mismo.

La invención incluye los compuestos y las sales del mismo, y sus formas físicas, la preparación de los compuestos, intermediarios útiles, y composiciones farmacéuticas y formulaciones de los mismos.

El término "XRPD" se refiere a difracción de polvo de rayos X.

El término "HR" se refiere a la humedad relativa.

El término "aislamiento" se refiere a indicar la separación o recolección o la recuperación del compuesto de la invención para ser aislado en la forma especificada.

La frase "preparar una solución" se refiere a obtener una solución de una sustancia en un solvente en cualquier manera. La frase también incluye una solución parcial o lodo.

El término "estable" se refiere a la tendencia de un compuesto a permanecer substancialmente en la misma forma física por lo menos un mes, preferiblemente seis meses, más preferiblemente por lo menos un año o por lo menos tres años bajo condiciones ambientes (20 °C/60% HR).

La frase "substancialmente en la misma forma física" se refiere a que permanece por lo menos 70%, preferiblemente 80%, y más preferiblemente 90% de la forma cristalina y más preferiblemente permanece 98% de la forma cristalina.

El término "forma" se refiere a una forma cristalina novedosa que puede ser distinguida por un experto en la técnica de otras formas cristalinas con base en los detalles proporcionados en la presente.

La frase "substancialmente libre" se refiere por lo menos a menos de 5%, preferiblemente menos de 2% como % en peso.

El término "lodo" se refiere a soluciones preparadas agregando suficientes sólidos a un solvente dado para que un exceso de sólidos estuviera presente.

El término "solvente polar" se refiere a 1 ,4-dioxano, diclorometano, tetrahidrofurano, acetato de etilo, acetona, dimetilformamida, acetonitrilo, nitrometano, sulfóxido de dimetilo, ácido fórmico, ri-butanol, t-butanol, 2-butanol, isopropanol, n-propanol, etanol, metanol, ácido acético, agua y solventes con una constante dieléctrica mayor que aproximadamente 15.

Las abreviaturas siguientes son utilizadas: B/R birrefringencia ext. extinción min. minuto(s) h hora(s) d días(s) RT o rt temperatura ambiente ÍR tiempo de retención L litro mL mililitro mmol milimoles pmol micromoles equiv. o eq. equivalentes RMN resonancia magnética nuclear MDP(S) purificación HPLC dirigida por masa (sistema) LC/EM espectrometría de masas cromatografía líquida HPLC Cromatografía Líquida de Alto Desempeño TLC cromatografía de capa fina CDCI3 cloroformo deuterado CD3OD o MeoD metanol deuterado DMSO-c/6 dimetilsulfóxido deuterado LDA diisopropilamida de litio DCM diclorometano THF tetrahidrofurano EtOAc acetato de etilo MeCN acetonitrilo DMSO dimetilsulfóxido Boc ter-butiloxicarbonilo DME 1 ,2-dimetoxietano DMF N,N-dimetilformamida DI PEA diisopropiletilamina PS-DIEA diisopropiletilamina soportada con polímero PS-PPh3- Pd soportado con polímero Pd(PPh3)4 EDC 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida HOBt 1 -hidroxibenzotriazol DMAP 4-dimetilaminopiridina TBTU O-íbenzotriazol-l-i -N.N.N'.N' -tetrafluoroborato de tetrametiluronio TEMPO 2,2,6,6-tetrametilpiperidina-l-oxilo TFA ácido trifluoroacético

Claims (28)

NOVEDAD DE LA INVENCIÓN REIVINDICACIONES

1.- La Forma A del polimorfo cristalino de OSI-906.

2. - La Forma A del polimorfo de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizada además porque exhibe un patrón de difracción de rayos X con picos característicos substancíalmente como se establece en el Cuadro 1 , un patrón de difracción de rayos X pareciéndose en esencia a ese de la Figura 2, un perfil de TGA pareciéndose substancíalmente a ese de la Figura 17, o un termograma de DSC pareciéndose substancíalmente a ese de la Figura 16.

3. - La Forma A del polimorfo de conformidad con la reivindicación 1 o 2, caracterizada además porque exhibe un patrón de difracción de rayos X que comprende picos (°2T) a aproximadamente 12.4, 12.6, 16.6, 18.5, 19.4, 20.2, y 22.

4. - El polimorfo de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-3, caracterizado además porque está presente como un material que comprende por lo menos aproximadamente 95% en peso de la Forma A basado en la cantidad total de OSI-906.

5. - El polimorfo de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-3, caracterizado además porque está presente, como un material que comprende por lo menos aproximadamente 98% en peso de la Forma A basado en la cantidad total de OSI-906.

6. - El polimorfo de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-5, caracterizado además porque está presente como un material que es substancialmente libre de OSI-906 amorfo, hidratos de OSI-906, y solvatos de OSI-906.

7. - El polimorfo de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-6, caracterizado además porque es substancialmente libre de solvente.

8. - El polimorfo de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-7, caracterizado además porque es preparado por un procedimiento que comprende: (a) preparar un lodo de OSI-906 en un alcohol; (b) calentar el lodo; y (c) aislar la Forma cristalina A.

9. - El polimorfo de conformidad con la reivindicación 8, caracterizado además porque la preparación de un lodo en (a) comprende además ajustar el pH a aproximadamente 5 y el alcohol en (a) comprende isopropanol, n-propanol, n-butanol, sec-butanol, t-butanol, o Iso-butanol.

10. - El polimorfo de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 8 o 9, caracterizado además porque el aislamiento de la Forma cristalina A en (c) comprende adicionalmente filtrar la Forma cristalina A y secarla bajo vacío.

11. - La Forma B del polimorfo cristalino de OSI-906.

12. - La Forma B del polimorfo de OSI-906 de conformidad con la reivindicación 11 , caracterizada además porque exhibe un patrón de difracción de rayos X con picos característicos como se establece en el Cuadro 3, un patrón de difracción de rayos X pareciéndose substancialmente a ese de la Figura 3, un termograma de DSC pareciéndose substancialmente a ese de la Figura 18, una señal de TGA pareciéndose substancialmente a esa de la Figura 19, o un espectro de 1H RMN en DMSO-d6 pareciéndose substancialmente a ese de la Figura 31.

13. - La Forma B del polimorfo de conformidad con la reivindicación 11 o 12, caracterizada además porque exhibe un patrón de difracción de rayos X que comprende picos (°2T) en aproximadamente 10.1 , 10.6, 11.2, 13.3, 15.3, 16.3, 21.8, 22.3, 22.4, 24.4, y 27.8.

14. - La Forma C del polimorfo cristalino de OSI-906.

15. - La Forma C del polimorfo de conformidad con la reivindicación 14, caracterizada además porque exhibe un patrón de difracción de rayos X con picos característicos como se establece en el Cuadro 5, un patrón de difracción de rayos X pareciéndose substancialmente á ese de la Figura 4, un termograma de DSC pareciéndose substancialmente a ese de la Figura 20, o de una señal de TGA pareciéndose substancialmente a esa de la Figura 21.

16. - La Forma C del polimorfo de conformidad con la reivindicación 14 o 15, caracterizada además porque exhibe un patrón de difracción de rayos X que comprende picos (°2T) a aproximadamente 10.6, 11.2, 13.3, 15.3, 21.2, 24.3, y 25.5. ;

17. - La Forma C del polimorfo de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 14-16, caracterizada además porque está presente como un material que comprende por lo menos cerca de 95% o más en peso de la Forma C basado en la cantidad total de OSI-906.

18. - El polimorfo de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 14-17, caracterizado además porque está presente como un material que es substancialmente libre de OSI-906 amorfo, hidratos de OSI-906, y solvatos de OSI-906, diferentes de la Forma C del polimorfo:

19. - El polimorfo de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 14-18, caracterizado además porque es preparado por un procedimiento que comprende: (a) preparar una solución de OSI-906 en un alcohol; (b) calentar la solución; y (c) aislar la Forma cristalina C.

20. - La Forma D del polimorfo cristalino de OSI-906.

21. - La Forma D del polimorfo de conformidad con la reivindicación 20, caracterizada además porque exhibe un patrón de difracción de rayos X con picos característicos como se establece en el Cuadro 7, un patrón de difracción de rayos X pareciéndose substancialmente a ese de la Figura 5, un termograma de DSC pareciéndose substancialmente a ese de la Figura 22, o una señal de TGA pareciéndose substancialmente a esa de la Figura 23.

22.- La Forma D del polimorfo de conformidad con la reivindicación 20, caracterizada además porque que exhibe un patrón de difracción de rayos X que comprende picos (°2T) a aproximadamente 8.9, 10.9, 11.1 , 13.8, 17.7, 20, 21.8, 22.2, y 26.2.

23. - La Forma H del polimorfo cristalino de OSI-906.

24. - La Forma H del polimorfo de conformidad con la reivindicación 23, caracterizada además porque exhibe un patrón de difracción de rayos X pareciéndose substancialmente a ese de la Figura 9 y un patrón de difracción de rayos X de cristal único substancialmente como se establece en los Cuadros 16-20.

25. - Una composición farmacéutica que comprende Lina cantidad terapéuticamente útil del polimorfo de cualquiera de las reivindicaciones 1-24, formulada con o sin uno o más portadores farmacéuticamente aceptables.

26.- El uso de la composición de la reivindicación 25 en la fabricación de un medicamento para tratar cáncer mediado por lo menos en parte por IR y/o IGF-1 R.

27.- El uso como se reclama en la reivindicación 26, en donde dicho cáncer es seleccionado de sarcoma, fibrosarcoma, osteoma, melanoma, retinoblastoma, rabdomiosarcoma, neuroblastoma, teratócarcinoma, malignidad hematopoyética, ascitos malignos, cáncer de pulmón, cáncer gástrico, cáncer de cabeza y cuello, cáncer de vesícula, cáncer de próstata, carcinoma de células escamosas esofágicas, linfoma de células grandes anaplásicas, tumor miofibroblástico inflamatorio, o glioblastoma.

28.- El uso como se reclama en la reivindicación 26, en donde dicho cáncer comprende carcinoma adrenocortical, cáncer colorrectal, cáncer de pulmón de células no pequeñas, cáncer de mama, cáncer pancreático, cáncer ovárico, carcinoma hepatocelular, o cáncer renal.