MX2011005379A - Metodos y composiciones para diagnosis y prognosis de lesion renal y falla renal. - Google Patents

Abstract

La presente invención es concerniente con métodos y composiciones para el monitoreo, diagnosis, prognosis y determinación de regímenes de tratamiento en sujetos que sufren de o se sospecha de tener una lesión renal. En particular, la invención es concerniente con el uso de análisis que detectan uno o más marcadores seleccionados del grupo que consiste de factor de crecimiento epidérmico, complemento C3, Interleucina-4, Interleucina-1 alfa, antígeno de nefritis tubulointersticial, factor beta-1 de crecimiento transformante, proteína 7 morfogenética de hueso, Osteopontina, Netrina-1, y proteína alfa de crecimiento regulado como biomarcadores de diagnóstico y prognóstico en lesiones renales.

Description

METODOS Y COMPOSICIONES PARA DIAGNOSIS Y PROGNOSIS DE LESION RENAL Y FALLA RENAL ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN La siguiente discusión de los antecedentes de la invención es provista solamente para ayudar al lector a entender la invención y no se admita que describa o constituya arte previo para la presente invención.

El riñon es responsable de la excreción de agua y solutos del cuerpo. Sus funciones incluyen mantenimiento del equilibrio ácido-base, regulación de concentraciones de electrolitos, control del volumen de sangre, y regulación de la presión sanguínea. Como tal, la pérdida de la función del riñon por medio de lesión y/o enfermedad da como resultado morbidez y mortalidad sustancial. Una discusión detallada de lesiones renales es provista en Harrison's Principies of Internal Medicine, 17th Ed. , McGraw Hill, New York, páginas 1741-1830, que son incorporadas en la presente por referencia en su totalidad. La enfermedad y/o lesión renal puede ser aguda o crónica. Enfermedad del riñon aguda y crónica son descritas como sigue (from Current Medical Diagnosis & Treatment 2008, 47th Ed, McGraw Hill, New York, páginas 785-815, que son incorporadas en la presente por referencia en su totalidad) : "La insuficiencia renal aguda es el empeoramiento de la función renal durante horas o días, dando como resultado la retención de desperdicios nitrogenosos (tales como nitrógeno de urea) y creatinina en la sangre. La retención de estas sustancias es llamada azotemia. La insuficiencia renal crónica (enfermedad del riñon crónica) resulta de una pérdida anormal de función renal durante meses a años".

La insuficiencia renal aguda ( ARF , también conocida como lesión de riñon aguda o AKI ) es una reducción abrupta (detectada comúnmente dentro de aproximadamente 48 horas a 1 semana) en filtración glomerular. Esta pérdida de capacidad de filtración resulta en la retención de productos de desperdicio nitrogenosos (urea y creatinina) y productos de desperdicio no nitrogenosos que son normalmente excretados por el riñon, una reducción en la salida.de orina o ambos. Se reporta que ARF se complica en aproximadamente 5% de admisiones en hospital, 4-15% de cirugías de bypass cardiopulmonar, y hasta 30% de admisiones de cuidado intensivo. La ARF puede ser clasificada como prerenal, renal intrínseca o postrenal en las causas. La enfermedad renal intrínseca puede ser dividida adicionalmente en anormalidades glomerulares , tubulares, intersticiales y vasculares. Las causas principales de ARF son descritas en la siguiente tabla, que es adaptada del Manual Merck, 17a ed. , Capítulo 222, y que es incorporado en la presente por referencia en su totalidad: Tipo Factores de riesgo Prerenal Agotamiento de volumen de ECF Diuresis excesiva, hemorragia, pérdidas GI, pérdida de fluido intravascular al espacio extravascular (debido a ascites, peritonitis, pancreatitis o quemaduras), pérdida de piel y membranas mucosas, estados de desperdicio de sal y agua renal Baja salida cardíaca Cardiomiopatía, MI, taponamiento cardíaco, embolismo pulmonar, hipertensión pulmonar, ventilación mecánica de presión positiva Baja resistencia vascular sistémica Choque séptico, falla del hígado, fármacos anti- hipertensores Resistencia vascular renal incrementada NSAID, ciclosporinas, tacrolimus, hipercalcemia, anafilaxis, anestésicos, obstrucción de arteria renal, trombosis de vena renal, sepsis, síndrome hepatorenal Tono arteriolar eferente disminuido (que Inhibidores de ACE o blpqueadores de receptor conduce a GFR disminuido de presión de angiotensina II transcapilar glomerular reducida, especialmente en pacientes con estenosis de arteria renal bilateral) Renal Intrínseca Lesión tubular aguda Isquemia (estado prerenal prolongado o severo): cirugía, hemorragia, obstrucción arterial o venosa; Toxinas: NSAID, ciclosporinas, tacrolimus, aminoglicósidos, foscarnet, etilenglicol, hemoglobina, mioglobina, ifosfamida, metales pesados, metotrexato, agentes de contraste radioopacos, estreptozotocina Glomerulonefritis aguda ANCA-asociada: glomerulonefritis crescéntica, poliarteritis nodosa, granulomatosis de Wegener; glomerulonefritis anti-GBM: síndrome de Goodpasture; Inmune-complejo: Lupus glomerulonefritis, glomerulonefritis postinfección, glomerulonefritis crioglobulinémica Tipo Factores de riesgo Nefritis tubulointersticial aguda Reacción de fármaco reacción (por ejemplo, ß- lactamas, NSAID, sulfonamidas, ciprofloxacino, diuréticos de tiazida, furosemida, fenitoína, alopurinol, pielonefritis, necrosis papilar Nefropatía vascular aguda Vasculitis, hipertensión maligna, microangiopatías trombóticas, escleroderma, ateroembolismo Enfermedades infiltrantes Linfoma, sarcoidosis, leucemia Postrenal Precipitación tubular Acido úrico (lisis de tumor), sulfonamidas, triamtereno, aciclovir, indinavir, metotrexato, ingestión de etilenglicol, proteína de mieloma, mioglobina Obstrucción uretral Intrínseca: Cálculos, coágulos, tejido renal desprendido, bola de hongos, edema, malignidad, defectos congenitales; Extrínseca: Malignidad, fibrosis retroperitoneal, trauma uretral durante cirugía o lesión de alto impacto Obstrucción de vejiga Mecánica: hiperplasia prostática benigna, cáncer de próstata, cáncer de vejiga, estructuras uretrales, fimosis, parafimosis, válvulas uretrales, catéter urinario a permanencia obstruido; Neurogénicos: fármacos anticolinérgicos, lesión de neúrona motriz superior o inferior En el caso de ARF isquémicos, el curso de la enfermedad puede ser dividido en cuatro fases . Durante una fase de inicio, que dura horas a días, la perfusión reducida del riñon está evolucionando a lesión. La ultrafiltración glomerular se reduce, el flujo del filtrado es reducido debido a desechos dentro de los túbulos, y ocurre fuga posterior del filtrado a través del epitelio lesionado. La lesión renal puede ser moderada durante esta fase mediante reperfusión del riñon. El inicio es seguido por una fase de extensión que está caracterizada por lesión isquémica continua e inflamación y puede involucrar daños endoteliales y congestión vascular. Durante la fase de mantenimiento, que dura de 1 a 2 semanas, se presenta la lesión de célula renal y la filtración glomerular y la salida de orina llegan a un mínimo. Una fase de recuperación puede seguir en la cual el epitelio renal es reparado y el GFR gradualmente se recupera. A pesar de esto, la proporción de supervivencia de sujetos con ARF puede ser tan baja como de aproximadamente 60%.

La lesión de riñon aguda provocada por agentes de rediocontraste (también llamados medio de contraste) y otras nefrotoxinas tales como ciclosporina, antibióticos en los que se incluyen aminoglicósidos y fármacos anti-cáncer tales como cisplatina se manifiesta en un período de días a aproximadamente una semana. Se cree que la nefropatía inducida por contraste (CIN, que es AKI provocada por agentes de radiocontraste) se piensa que es provocada por la vasorestricción intrarenal (conduciendo a lesión isquémica) y de la regeneración de especies oxígeno-reactivas que son directamente tóxicas a células epiteliales tubulares renales. CIN presenta clásicamente como una elevación aguda (comienzo dentro de 24-48 horas) pero reversible (pico de 3-5 días, resolución en 1 semana) en el nitrógeno de urea de sangre y creatinina en el suero.

Un criterio reportado comúnmente para definir y detectar AKI es una elevación abrupta (comúnmente dentro de alrededor de 2-7 días o dentro de un período de hospitalización) de creatinina en él suero. Aunque el uso de la elevación de creatinina en el suero para definir y detectar AKI está bien establecido, la magnitud de la elevación de creatinina en el suero y el tiempo en el cual es medida para definir ' AKI varía considerablemente entre publicaciones. Tradicionalmente, incrementos relativamente grandes en creatinina en el suero, tales como 100%, 200%, un incremento de por lo menos 100% a un valor de más de 2 mg/dL y otras definiciones fueron usados para definir AKI. Sin embargo, la tendencia reciente ha sido hacia utilizar elevaciones de creatinina en el suero más pequeñas para definir AKI. La relación entre la elevación de creatinina en el suero, AKI y los riesgos de salud asociaos son revisados en Praught y Shlipak, Curr Opin Nephrol Hypertens 14:265-270, 2005 y Chertow et al, J Am Soc Nephrol 16: 3365-3370, 2005, que, con¦ las referencias enlistadas en las mismas, son incorporadas por medio de la presente por referencia en su totalidad. Como se describe en estas publicaciones, el empeoramiento agudo de la función renal (AKI) y riesgo incrementado de muerte y otros resultados per udiciales son ahora conocidos que están asociados con incrementos muy pequeños de creatinina en el suero. Estos incrementos pueden ser determinado como un valor relativo (por ciento) o un nominal. Los incrementos relativos de creatinina en el suero tan pequeños como 20% del valor de pre-lesión han sido para reportados para indicar el empeoramiento agudamente de la función renal (AKI) y riesgo de salud incrementado, pero el valor más comúnmente reportado para definir AKI y riesgo de salud incrementado es un incremento relativo de por lo menos 25%. Incrementos nominales tan pequeños como de 0.3 mg/dL, 0.2 mg/dL o aún 0.1 mg/dL han sido reportados para indicar empeoramiento de función renal y riesgo de muerte incrementado. Varios períodos de tiempo para que la creatinina en el suero es eleve a estos valores de umbral han sido usados para definir AKI, por ejemplo, que varían de 2 días, 3 días, 7 días o un período variable definido como el tiempo en que el paciente está en el hospital o unidad de cuidado intensivo. Estos estudios indican que no hay una elevación de creatinina en el suero de umbral particular (o período de tiempo para la elevación) para empeoramiento de función renal o AKI, sino más bien un incremento continuo en riesgo con magnitud incrementada de elevación de creatinina en el suero.

Un estudio (Lassnigg et al., J Am Soc Nephrol 15:1597-1605, 2004, incorporado en la presente por referencia en su totalidad) investigó tanto los incrementos como disminuciones de creatinina en el suero. Los pacientes con una caída suave de creatinina en el suero de -0.1 a -0.3 mg/dL enseguida de la cirugía del corazón tuvieron la proporción de mortalidad más baja. Los pacientes con una caída más grande de creatinina en el suero (mayor o igual a -0.4 mg/dL) o cualquier incremento de creatinina en el suero tuvieron una proporción de mortalidad más grande. Estos hallazgos provocan que los autores concluyeran que aún cambios muy sutiles en función renal (tal como son detectados por cambios de creatinina pequeños dentro de 48 horas de cirugía) afectaron seriamente los resultados del paciente. En un esfuerzo por alcanzar consenso en un sistema de clasificación unificado para usar creatinina en el suero para definir AKI en pruebas clínicas y en práctica la clínica, Bellomo et al., Crit Care. 8 (4) :R204-12 , 2004, que es incorporada en la presente por referencia en su totalidad, propone las siguientes clasificaciones para estratificar pacientes con AKI: "Riesgo": creatinina en el suero incrementada 1.5 veces de la producción de orina de OR de referencia de <0.5 ml/Kg de peso corporal/hora por 6 horas; "Lesión": creatinina en el suero incrementada 2.0 veces de la producción de orina de OR de referencia <0.5 ml/Kg/hora por 12 horas "Falla": creatinina en el suero incrementada 3.0 veces de la creatinina de OR de referencia >355 µp???/??^? (con una elevación de >44) o salida de orina menor de 0.3 ml/Kg/hora por 24 horas o anuria por al menos 12 horas; Y concluyeron dos resultados clínicos: "Pérdida": necesidad persistente por terapia de reemplazo renal por más de cuatro semanas.

"ESRD" : enfermedad renal de etapa final — la necesidad de diálisis por más de 3 meses.

Estos criterios son llamados los criterios RIFLE, que proveen una herramienta clínica útil para clasificar el estatus renal. Como se discute en Kellum, Crit. Care Med. 36: S141-45, 2008 y Ricci e't al., Kidney Int. 73, 538-546, 2008, cada una incorporada por medio de la presente por referencia en su totalidad, los criterios de RIFLE proveen una definición uniforme de AKI que ha sido validada en numerosos estudios.

Más recientemente, Mehta et al., Crit. Care 11:R31 (doi : 10.1186. cc5713 ) , 2007, incorporada por medio de la presente por referencia en su totalidad, propone las siguientes clasificaciones similares para estratificar pacientes con AKI, que han sido modificados de RIFLE: "Etapa I": incremento de creatinina en el suero de mayor o igual a 0.3 mg/dL (= 26.4 µ????/L) o incremento a mayor o igual a 150% (1.5 veces) de la salida de orina de OR de referencia menor de 0.5 ml/Kg por hora por más de 6 horas; "Etapa II": incremento de creatinina en el suero a más de 200% (> 2 veces) de la salida de orina de OR de referencia menor de 0.5 ml/Kg por hora por más de 12 horas; "Etapa III": incremento de creatinina en el suero a más de 300% ( > 3 veces) de la creatinina en el suero de OR de referencia = 354 µp???/L acompañado por un incremento agudo de por lo menos 44 µp???/L de salida de orina de OR menor de 0 . 3 ml/Kg por hora por 24 horas o anuaria por 12 horas.

El Panel de Trabajo de Consenso de CIN (McCollough et al., Rev Cardiovasc ed. 2006 ; 7 ( 4 ) : 177 - 197 , incorporada en la presente por referencia en su totalidad) utiliza una elevación de creatinina en el suero de 25% para definir nefropatía inducida de Contraste (que es un tipo de AKI) . Aunque varios grupos proponen criterios ligeramente diferentes para usar creatinina en el suero para detectar AKI, el consenso es que cambios pequeños de creatinina en el suero, tales como 0 . 3 mg/dL o 25% , son suficientes para detectar AKI (empeoramiento de función renal) y que la magnitud del cambio de creatinina en el suero es indicador de la severidad del AKI y riesgo de mortalidad.

Aunque la medición serial de creatinina en el suero en un periodo de días es un método aceptado para detectar y diagnosticar AKI y es considerada una de las herramientas más importantes para evaluar pacientes con AKI, la creatinina en el suero es en general considerada que tiene varias limitaciones en la diagnosis, determinación y monitoreo de pacientes con AKI . El período de tiempo para que la creatinina en el suero se eleve a valores (por ejemplo, una elevación de 0 . 3 mg/dL o 25% ) considerados diagnóstico para AKI puede ser de 48 horas o mayor dependiendo de la definición usada. Puesto que la lesión celular en AKI puede ocurrir en un ^ período de horas, las elevaciones de creatinina en el suero detectadas a 48 horas o un tiempo más largo pueden ser un indicador tardío de lesión y depender de la creatinina en el suero puede así retardar la diagnosis de AKI. Además, la creatinina en el suero no es buen indicador del estatus exacto del riñon y necesidades del tratamiento durante las fases más agudas de AKI cuando la función del riñon está cambiando rápidamente. Algunos pacientes con AKI se recuperarán plenamente, algunos necesitarán diálisis (ya sea a corto plazo o largo plazo) y algunos tendrán otros resultados perjudiciales en los que se incluyen muerte, eventos cardíacos adversos mayores y enfermedad del riñon crónica. Debido a que la creatinina en el suero es un marcador de velocidad de filtración, no diferencia entre los casos de AKI (pre-renal, renal intrínseca, obstrucción- post-renal, ateroembómica, etc.) o la categoría o ubicación de lesión en enfermedad renal intrínseca (por ejemplo, de origen tubular, glomerular o intersticial) . La salida de orina es similarmente limitada, sabiendo que estas cosas pueden ser de vital importancia para manejar y tratar pacientes con AKI.

Estas limitaciones subrayan la necesidad de mejores métodos para detectar y determinar AKI, particularmente en las etapas prematuras y subclínicas, pero también en etapas posteriores cuando puede ocurrir la recuperación y reparación del riñon. Además, hay necesidad de identificar mejor pacientes que están en riesgo de tener un A I .

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN Es un objeto de la invención proveer métodos y composiciones para evaluar la función renal en un sujeto. Como se describe en la presente, la medición de uno o más marcadores seleccionados del grupo que consiste de factor de crecimiento epidérmico, complemento C3 , Interleucina-4 , Interleucina-1 alfa, antígeno de nefritis tubulointersticial , factor beta-1 de crecimiento transformante, proteína 7 morfogenética del hueso, Osteopontina, Netrina-1, y proteína alfa de crecimiento-regulado (denominados colectivamente en la presente como "marcadores de lesión de riñon, e individualmente como "marcador de lesión de riñon") puede ser usada para la diagnosis, prognosis, estratificación de riesgos, escalamiento, monitoreo, clasificación y determinación de diagnosis adicional y regímenes de tratamiento en sujetos que sufren o están en riesgo de sufrir de una lesión a la función renal, función renal reducida, y/o falla renal aguda (también llamada lesión de riñon aguda) .

Estos marcadores de lesión de riñon pueden ser usados individualmente o en paneles que comprenden una pluralidad de marcadores de lesión de riñon, para la estratificación de riesgo (esto es, para identificar sujetos en riesgo por una lesión futura a la función renal, para avance futuro a función renal 'reducida, para avance futuro a ARF, para mejora futura en función renal, etc.); para diagnosis de enfermedad existente (esto es, para identificar sujetos que han sufrido una lesión a la función renal, que han avanzado a función renal reducida, que han progresado a ARF, etc.); para monitoreo en cuanto al deterioro o mejora de función renal; y predecir un resultado médico futuro, tal como una función renal mejorada o empeorada, un riesgo de mortalidad disminuido o incrementado, un riesgo disminuido o incrementado de que un sujeto requerirá terapia de reemplazo renal (esto es, hemodiálisis, diálisis peritoneal, hemofiltración, y/o trasplante renal, un riesgo disminuido o incrementado que un sujeto se recuperará de una lesión a la función renal, un riesgo disminuido o incrementado de que un sujeto se recuperará de ARF, un . riesgo disminuido o incrementado de que un sujeto avanzará a enfermedad renal de etapa final, un riesgo disminuido o incrementado de que un sujeto avanzará a insuficiencia renal crónica, un riesgo disminuido o incrementado de que un sujeto sufrirá rechazo de un riñon trasplantado, etc.

En un primer aspecto, la invención es concerniente con métodos para evaluar él estatus renal en un sujeto. Estos métodos comprenden efectuar un método de análisis que está ( configurado para detectar uno o más marcadores de lesión de riñón de la presente invención en una muestra de fluido corporal obtenida del sujeto. El (los) resultado (s) de análisis, por ejemplo una concentración medida de uno o más marcadores seleccionados del grupo que consiste de factor de crecimiento epidérmico, complemento C3 , Interleucina-4 , Interleucina-1 alfa, antígeno de nefritis tubulointersticial , factor beta-1 de crecimiento transformante, proteína 7 morfogenética de hueso, Osteopontina, Netrina-1, y proteína alfa de crecimiento-regulado es (son) luego correlacionados con el estatus renal del sujeto. Esta correlación con estatus renal puede incluir correlacionar el (los) resultado (s) de análisis con uno o más de estratificación de riesgos, diagnosis, prognosis, escalamiento, clasificación y monitoreo del sujeto como se describe en la presente. Así, la presente invención utiliza uno o más marcadores de lesión de riñón de la presente invención para la evaluación de lesión renal.

En ciertas modalidades, los métodos para evaluar el estatus renal descritos en la presente son métodos para estratificación de riesgo del sujeto; esto es, asignar una probabilidad de uno o 'más cambios futuros en estatus renal al sujeto. En estas modalidades, el (los) resultado (s) de análisis está/están correlacionado (s) con uno o más de tales cambios futuros. Las siguientes son modalidades de estatificación de riesgos preferidas.

En modalidades de estratificación de riesgo preferidas, estos métodos comprenden determinar el riesgo de un sujeto por una lesión futura a la función renal y el (los) resultado (s) de análisis está/están correlacionado (s) con la probabilidad de tal lesión futura a la función renal. Por ejemplo, cada una de la(s) concentración (es) medida (s) puede (n) ser comparada (s) con un valor de umbral. Para un marcador de lesión de riñon "que va a positivo" se asigna una probabilidad incrementada de sufrir una lesión futura a la función renal al sujeto cuando la concentración medida está por encima del umbral, en comparación con una- probabilidad asignada cuando la concentración medida está debajo del umbral. Para un marcador de lesión de riñon que "va a negativo", se asigna una probabilidad incrementada de sufrir una lesión futura a la función renal al sujeto cuando la concentración medida está debajo del umbral, en relación con una probabilidad asignada cuando la concentración medida está por encima del umbral.

En otras modalidades de estratificación de riesgos preferida, estos métodos comprenden determinar el riesgo de un sujeto por función renal reducida futura, y el (los) resultado (s) de análisis está(n) correlacionado (s) con la probabilidad de tal función renal reducida. Por ejemplo, cada una de las concentraciones medidas pueden ser comparadas con un valor de umbral. Para un marcador de lesión de riñon que "va a positivo" , se asigna una probabilidad incrementada de sufrir una función renal reducida futura al sujeto cuando la concentración medida está por encima del umbral, en relación con una probabilidad asignada cuando la concentración medida está debajo del umbral. Para un marcador de lesión de riñon que "va a negativo", se asigna una probabilidad incrementada de función renal reducida futura al sujeto cuando la concentración medida está debajo del umbral, en relación con una probabilidad asignada cuando la concentración medida está por encima del umbral .

En todavía otras modalidades de estratificación de riesgos preferidas, estos métodos comprenden determinar la probabilidad de un sujeto por una mejora futura en función renal y el (los) resultado (s) de análisis es (son) correlacionados con la probabilidad de tal mejora futura en función renal. Por ejemplo, cada una de la(s) concentración (es ) medida(s) puede(n) ser comparada(s) con un valor de umbral. Para un marcador de lesión de riñon que "va a positivo" , se asigna una probabilidad incrementada de una mejora futura en función renal al sujeto cuando la concentración medida es mejor del umbral, en relación con una probabilidad asignada cuando la concentración medida está por encima del umbral. Para un marcador de lesión de riñon que "va a negativo", se asigna una probabilidad incrementada de una mejora futura en función renal al sujeto cuando la concentración medida está por encima del umbral, en relación con una probabilidad asignada cuando la concentración medida es menor del umbral .

En todavía otras modalidades de estratificación de riesgos preferida, estos métodos comprenden determinar el riesgo de un sujeto por avance a ARF, y el (los) resultado (s) es (son) correlacionado (s ) con la probabilidad de tal avance a ARF. Por ejemplo, cada una de la(s) concentración (es) medida (s) puede (n) ser comparada (s) con un valor de umbral. Para un marcador de lesión de riñon que "va a positivo", se asigna una probabilidad incrementada de avance a ARF al sujeto cuando la concentración medida está por encima del umbral, en relación con una probabilidad asignada cuando la concentración medida es menor del umbral. Para un marcador de lesión de riñon que "va a negativo", se asigna una probabilidad incrementada de avance a ARF al sujeto cuando la concentración medida es menor del umbral, en relación con una probabilidad asignada cuando la concentración medida está por encima del umbral .

Además, en otras modalidades de estratificación de riesgos preferida, estos métodos comprenden determinar el riesgo de resultado del sujeto y el (los) resultado (s) de análisis es (son) correlacionado (s) con la probabilidad de la presencia de un resultado clínico relacionado con una lesión renal sufrida por el sujeto. Por ejemplo, cada una de la(s) concentración (es) medida(s) puede(n) ser comparada(s) con un valor de umbral. Para un marcador de lesión de riñon que "va a positivo", una probabilidad incrementada de uno o más de: lesión de riñon aguda, avance a un estado de empeoramiento de AKI, mortalidad, un requerimiento por terapia de reemplazo renal, un requerimiento por abandono dé toxinas renales, enfermedad renal de etapa final, insuficiencia cardiaca, accidente cerebrovascular , infarto al miocardio, avance a · enfermedad del riñon crónica, etc., es asignada al sujeto cuando la concentración medida está por encima del umbral, en relación con una probabilidad asignada cuando la concentración medida está por debajo del umbral. Para un marcador de lesión de riñon que "va a negativo", una probabilidad incrementada de uno o más de: lesión de riñon aguda, avance a una etapa de empeoramiento de AKI, mortalidad, un requerimiento por terapia de reemplazo renal, un requerimiento para abandono de toxinas renales, enfermedad renal de etapa final, insuficiencia cardiaca, ' accidente cerebrovascular, infarto al miocardio, avance a enfermedad del riñon crónica, etc., es asignada al sujeto cuando la concentración medida está por debajo del umbral, en relación con una probabilidad asignada cuando la concentración medida está por encima del umbral .

En tales modalidades de estratificación de riesgos, preferiblemente la probabilidad o riesgo asignado es que un evento de interés es más o menos probable que ocurra dentro de 180 días el tiempo al cual la muestra de fluido corporal es obtenida del sujeto. En modalidades particularmente preferidas, la probabilidad o riesgo asignado es concerniente con un evento de interés que ocurre dentro de un período de tiempo más corto tal como 18 meses, 120 días, 90 días, 60 días, 45 días, 30 días, 21 días, 14 días, 7 días, 5 días, 96 horas, 72 horas, 48 horas, 36 horas, 24 horas, 12 horas o menos. Un riesgo a 0 horas del tiempo al cual la muestra de fluido corporal es obtenida del sujeto es equivalente a diagnosis de una condición actual .

En modalidades de estratificación de riesgos preferidas, el sujeto es seleccionado en cuanto a estratificación a riesgo en base a la pre-existencia en el sujeto de uno o más factores de riesgo conocidos por ARF prerenal, renal intrínseca o ARF post-renal. Por ejemplo, un sujeto que sufre o ha sufrido cirugía vascular mayor, desviación o bypass de arteria coronaria, u otra cirugía cardíaca; un sujeto que tiene insuficiencia cardiaca congestiva pre-existente, preeclampsia, eclampsia, diabetes mellitus, hipertensión, enfermedad de arteria coronaria, proteinuria, insuficiencia renal, filtración glomerular por debajo del intervalo normal, cirrosis, creatinina en el suero por encima del intervalo normal o sepsis; o un sujeto expuesto a NSAID, ciclosporinas , tacrolimus, aminoglicósidos , foscarnet, etilenglicol , hemoglobina, mioglobina, ifosfamida, metales pesados, metotrexato, agentes de contraste radiopacos, o estreptozotocina son todos sujetos preferidos para monitoreo de riesgos de acuerdo con los métodos descritos en la presente. Esta lista no pretende ser limitante. MPre-existencia" en este contexto significa que el factor de riesgo existe al tiempo en que la muestra de fluido corporal es obtenida del sujeto. En modalidades particularmente preferidas, un sujeto es escogido en cuanto a estratificación de riesgo en base a una diagnosis existente de lesión a función renal, función renal reducida, o ARF.

En otras modalidades, los métodos para evaluar el estatus renal descritos en la presente son métodos para diagnosticar una lesión renal en el sujeto; esto es, determinar si un sujeto ha sufrido o no de una lesión a la función renal, función renal reducida, o ARF. En estas modalidades, el (los) resultado (s) de análisis, por ejemplo una concentración medida de uno o más marcadores seleccionados del grupo que consiste de factor de crecimiento epidérmico, complemento C3 , Interleucina-4, Interleucina-1 alfa, antígeno de nefritis tubulointersticial, factor beta-1 de crecimiento transformante, proteína 7 morfogenética del hueso, Osteopontina , Netrina-1, y proteína alfa de crecimiento regulado es (son) correlacionados con la presencia o no presencia de un cambio en estatus renal. Las siguientes son modalidades de diagnóstico preferidas.

En modalidades de diagnóstico preferidas, estos métodos comprenden diagnosticar la presencia o no presencia de una lesión a función renal, y el (los) resultado (s) de análisis es (son) correlacionado (s) con la presencia o no presencia de tal lesión. Por ejemplo, cada una de la(s) concentración (es) medida (s) puede (n) ser comparada (s) con un valor de umbral. Para, un 'marcador que avanza a positivo, se asigna una probabilidad incrementada de la presencia de una lesión a función renal al sujeto cuando la concentración medida está por encima del umbral (en relación con la probabilidad asignada cuando la concentración medida está por debajo del umbral); alternativamente, cuando la concentración medida está por debajo del umbral, se . puede asignar una probabilidad incrementada de la no presencia de una lesión a función renal al sujeto (en relación con la probabilidad asignada cuando la concentración medida está por encima del umbral) . Para un marcador que avanza a negativo, se asigna una probabilidad incrementada de la presencia de una lesión a función renal al sujeto cuando la concentración medida está por debajo del umbral (en relación con la probabilidad asignada cuando la concentración medida está por encima del umbral); alternativamente, cuando la concentración medida está por encima del umbral, se puede asignar una probabilidad incrementada de la no presencia de una lesión a función renal al sujeto (en relación con la probabilidad asignada cuando la concentración medida está por debajo del umbral) .

En otras modalidades de diagnóstico preferidas, estos métodos comprenden diagnosticar la presencia o no presencia de función renal reducida, y el (los) resultado (s) de análisis es (son) correlacionado (s) con la presencia o no presencia de una lesión que provoca función renal reducida. Por ejemplo, cada una de la(s) concentración (es) medida (s) puede (n) ser comparada (s) con un valor de umbral. Para un marcador que va a positivo, se asigna una probabilidad incrementada de la presencia de una lesión que provoca función renal reducida al sujeto cuando la concentración medida está por encima del umbral (en relación con la probabilidad asignada cuando la concentración medida está por debajo del umbral) ; alternativamente, cuando la concentración medida está por debajo del umbral, se puede asignar una probabilidad incrementada de la no presencia de una lesión que provoca función renal reducida al sujeto (en relación con la probabilidad asignada cuando la concentración medida está por encima del umbral) . Para un marcador que avanza a negativo, se asigna una probabilidad incrementada de la presencia de una lesión que provoca función renal reducida al sujeto cuando la concentración medida está por debajo del umbral (en relación con la probabilidad asignada cuando la concentración medida está por encima del umbral) ; alternativamente, cuando la concentración medida está por encima del umbral, se puede asignar una probabilidad incrementada de la no presencia de una lesión que provoca función renal reducida al sujeto (en relación con la probabilidad asignada cuando la concentración medida está por debajo del umbral) .

En todavía otras modalidades de diagnóstico preferidas, estos métodos comprenden diagnosticar la presencia o no presencia de ARF, y el (los) resultado (s) de análisis es (son) correlacionado (s) con ' la presencia o no presencia de una lesión que provoca ARF. Por ejemplo, cada una de la(s) concentración (es) medida(s) puede(n) ser comparada(s) con un valor de umbral. Para un marcador que va a positivo, se asigna una probabilidad incrementada de la presencia de ARF al sujeto cuando la concentración medida está por encima del umbral . (en relación con la probabilidad asignada cuando la concentración medida está por debajo del umbral); alternativamente, cuando la concentración medida está por debajo del umbral, se puede asignar una probabilidad incrementada de la no presencia de ARF al sujeto (en relación con la probabilidad asignada cuando la concentración medida está por encima del umbral) . Para un marcador que va a negativo, se asigna una probabilidad incrementada de la presencia de ARF al sujeto cuando la concentración medida está por debajo del umbral (en relación con la probabilidad asignada cuando la concentración medida está por encima del umbral); alternativamente, cuando la concentración medida está por encima del umbral, se puede asignar una probabilidad incrementada de la no presencia de ARF al sujeto (en relación. con la probabilidad asignada cuando la concentración medida está por debajo del umbral) .

En todavía otras modalidades de diagnóstico preferidas, estos métodos comprende diagnosticar al sujeto por estar en necesidad de terapia de reemplazo renal, y el (los) resultado (s) de análisis es (son) correlacionado (s) con la necesidad para terapia de reemplazo renal. Por ejemplo, cada una de la(s) concentración (es) medida (s) puede (n) ser comparada (s) con un valor de umbral. Para un marcador que va a positivo, se asigna una probabilidad incrementada de la presencia de una lesión que crea necesidad de terapia de- reemplazo renal al sujeto cuando la concentración medida está por encima del umbral (en relación con la probabilidad asignada cuando la concentración medida está por debajo del umbral); alternativamente, cuando la concentración medida está por debajo del umbral, se puede asignar una probabilidad incrementada de la no presencia de una lesión que crea necesidad de terapia de reemplazo renal al sujeto (en relación con la probabilidad asignada cuando la concentración medida está por encima del umbral) . Para un marcador que va a negativo, se asigna una probabilidad incrementada de la presencia de una lesión que crea necesidad de terapia de reemplazo renal al sujeto cuando la concentración medida está por debajo del umbral (en relación con la probabilidad asignada cuando la concentración medida está por encima del umbral) ; alternativamente, cuando la concentración medida está por encima del umbral, se puede asignar una probabilidad incrementada de la no presencia de una lesión que crea necesidad de terapia de reemplazo renal al sujeto (en relación con la probabilidad asignada cuando la concentración medida está por debajo del umbral) .

En todavía otras modalidades de diagnóstico preferidas, estos métodos comprenden diagnosticar a un sujeto por estar en necesidad de trasplante renal, y el (los) resultado (s) de análisis es (son) correlacionado (s) con necesidad de trasplante renal. Por ejemplo, cada una de la(s) concentración (es) medida (s) puede (n) ser comparada (s) con un valor de umbral. Para un marcador que va a positivo, se asigna una probabilidad incrementada de la presencia de una lesión que crea necesidad de trasplante renal al sujeto cuando la concentración medida está por encima del umbral (en relación con la probabilidad asignada cuando la concentración medida está por debajo del ' umbral) ; alternativamente, cuando la concentración medida está por debajo del umbral, se puede asignar una probabilidad incrementada de la no presencia de una lesión que crea necesidad por trasplante renal al sujeto (en relación con la probabilidad asignada cuando la concentración medida está por encima del umbral). Para un marcador que va a negativo, se asigna una probabilidad incrementada de la presencia de una lesión que crea necesidad de trasplante renal al sujeto cuando la concentración medida está por debajo del umbral (en relación con la probabilidad asignada cuando la concentración medida está por encima del umbral) ; alternativamente, cuando la concentración medida está por encima del umbral, se puede asignar una probabilidad incrementada de la no presencia de una lesión que crea necesidad de trasplante renal al sujeto (en relación con la probabilidad asignada cuando la concentración medida está por debajo del umbral) .

En todavía otras modalidades, los métodos para evaluar el estatus renal descritos en la presente son métodos para el monitoreo de una lesión renal en el sujeto; esto es, determinar si una función renal está o no mejorando o empeorando en un sujeto que ha sufrido de una lesión a la función renal, función renal reducida, o ARF. En estas modalidades, el (los) resultado (s) de análisis, por ejemplo una concentración medida de uno o más marcadores seleccionados del grupo que consiste de factor de crecimiento epidérmico, complemento C3 , Interleucina- , Interleucina-1 alfa, antígeno de nefritis tubulointersticial, factor beta-1 de crecimiento transformante, proteína 7 morfogenética del hueso, Osteopontina, Netrina-1, y proteína alfa de crecimiento-regulado es (son) correlacionado (s) con la presencia o no presencia de un cambio en estatus renal. Las siguientes son modalidades de monitoreo preferidas .

En modalidades de monitoreo preferidas, estos métodos comprenden monitorear el estatus renal en un sujeto que sufre de una lesión a función renal, y el (los) resultado (s) de análisis es (son) correlacionado (s) con la presencia o no presencia de un cambio en estatus renal en el sujeto. Por ejemplo, la(s) concentración (es) medida (s) puede (n) ser comparada (s) con un valor de umbral. Para un marcador que va a positivo, cuando la concentración medida está por encima del umbral, se puede asignar un empeoramiento de la función renal al sujeto; alternativamente, cuando la concentración medida está por debajo del umbral, se puede asignar una mejora de función renal al sujeto. Para un marcador que va a negativo, cuando la concentración medida está por debajo del umbral, se puede asignar un empeoramiento de la función renal al sujeto; alternativamente, cuando la concentración medida está por encima del umbral, se puede asignar una mejora de función renal al sujeto.

En otras modalidades de monitoreo preferidas, estos métodos comprenden monitorear el estatus renal en un sujeto que sufre de función renal reducida, y el (los) resultado(s) de análisis es (son) correlacionado (s ) con la presencia o no presencia de un cambio en estatus renal en el sujeto. Por ejemplo, la(s) concentración (es) medida (s) puede (n) ser comparada (s) con un valor de umbral. Para un marcador que va a positivo, cuando la concentración medida está por encima del umbral, se puede asignar un empeoramiento de función renal al sujeto; alternativamente, cuando la concentración medida está por debajo del umbral, se puede asignar una mejora de función renal al sujeto. Para un marcador que va a negativo, cuando la concentración medida está por debajo del umbral, se puede asignar un empeoramiento de función renal al sujeto; alternativamente, cuando la concentración medida está por encima del umbral, se puede asignar una mejora de función renal al sujeto.

En todavía otras modalidades de monitoreo preferidas, estos métodos comprenden el monitoreo del estatus renal en un sujeto que sufre de insuficiencia renal aguda, y el (los) resultado (s) de análisis es (son) correlacionado (s) con la presencia o no presencia de un cambio en estatus renal en el sujeto. Por ejemplo, la(s) concentración (es) medida(s) puede(n) ser comparada (s) con un valor de umbral. Para un marcador que va a positivo, cuando la concentración medida está por encima del umbral, se puede asignar un empeoramiento de función renal al sujeto; alternativamente, cuando la concentración medida está por debajo del umbral, se puede asignar una mejora de función renal al sujeto. Para un marcador que va a negativo, cuando la concentración medida está por debajo del umbral, se puede asignar un empeoramiento de función renal al sujeto; alternativamente, cuando la concentración medida está por encima del umbral, se puede asignar una mejora de función renal al sujeto.

En otras modalidades de monitoreo preferidas adicionales, estos métodos comprenden el monitoreo del estatus renal en un sujeto en riesgo de una lesión a la función renal debido a la pre-existencia de uno o más factores de riesgo conocidos por ARF prerenal, renal intrínseca o ARF postrenal, y el (los) resultado (s) de análisis es (son) correlacionado (s) con la presencia o no presencia de un cambio en estatus renal en el sujeto. Por ejemplo, la(s) concentración (es ) medida (s) puede (n) ser comparada (s) con un valor de umbral. Para un marcador que va a positivo, cuando la concentración medida está por encima del umbral, se puede asignar un empeoramiento de función renal al sujeto; alternativamente, cuando la concentración medida está por debajo del umbral, se puede asignar una mejora de función renal al sujeto. Para un marcador que va a negativo, cuando la concentración medida está por debajo del umbral, se puede asignar un empeoramiento de función renal al sujeto; alternativamente, cuando la concentración medida está por encima del umbral, se puede asignar una mejora de función renal al sujeto.

En todavía otras modalidades, los métodos para evaluar el estatus renal descritos en la presente son métodos para clasificar una lesión renal en el sujeto; estó es, determinar si una lesión renal en un sujeto es prerenal, renal intrínseca, o postrenal; y/o subdividir adicionalmente estas clases en subclases tales como lesión tubular aguda, glomerulonefritis aguda, nefritis tubulointersticial aguda, nefropatía vascular aguda, o enfermedad infiltrativa; y/o asignar una probabilidad de que un sujeto avanzará a una etapa de RIFLE particular. En estas modalidades, el (los) resultado (s) de análisis, por ejemplo, una concentración medida de uno o más marcadores seleccionados del grupo que consiste de factor de crecimiento epidérmico, complemento C3 , Interleucina-4, Interleucina-1 alfa, antígeno de nefritis tubulointersticial, factor beta-1 de crecimiento transformante, prote na 7 morfogenética del hueso, Osteopontina, Netrina-1, y proteína alfa de crecimiento-regulado es (son) correlacionado (s) con una clase y/o subclase particular. Las siguientes son modalidades de clasificación preferidas.

En modalidades de clasificación preferidas, estos métodos comprenden determinar si una lesión renal en un sujeto es prerenal, renal intrínseca o postrenal; y/o subdividir además estas clases en subclases tales como lesión tubular aguda, glomerulonefritis aguda, nefritis tubulointersticial aguda, nefropatía vascular aguda, o enfermedad infiltrativa; y/o asignar una probabilidad de que un sujeto avanzará a una etapa de RIFLE particular, y el (los) resultado (s) de .análisis es (son) correlacionado (s) con la clasificación de lesión para el sujeto. Por ejemplo, la concentración medida puede ser comparada (s) con un valor de umbral, y cuando la concentración medida está por encima del umbral, se asigna una clasificación particular; alternativamente, cuando la concentración medida está por debajo del umbral, se puede asignar una clasificación diferente al sujeto.

Una variedad de métodos pueden ser usados por el técnico experimentado para llegar a un valor de umbral deseado para uso en estos métodos. Por ejemplo, el valor de umbral puede ser determinado de una población de sujetos normales al seleccionar una concentración que representa el 75o, 85o, 90o, 95o o 99o percentil de un marcador de lesión de riñon medido en tales sujetos normales. Alternativamente, el valor de umbral puede ser determinado a partir de una población "enferma" de sujetos, por ejemplo, aquellos que sufren de una lesión o que tienen una predisposición para una lesión (por ejemplo, avance a ARF o algún otro resultado clínico tal como muerte, diálisis, trasplante renal, etc.), al seleccionar una concentración que representa el 75o, 85o, 90o, 95o, o 99o percentil de un marcador de lesión de riñon medido en tales sujetos. En otra alternativa, el valor de umbral puede ser determinado a partir de una medición previa de un marcador de lesión de riñon en el mismo sujeto; esto es, un cambio temporal en el nivel de un marcador de lesión de riñon en el sujeto puede ser usado para asignar riesgo al sujeto.

La discusión anterior no pretende implicar, sin embargo, que los marcadores de lesión de riñon de la presente invención deben ser comparados con umbrales individuales correspondientes. Métodos para combinar resultados de análisis pueden comprender el uso de regresión logística multivariada, modelado lineal logarítmico, análisis de red neural, análisis n de m, análisis de árbol de decisión, calcular proporciones de marcadores, etc. Esta lista no pretende ser limitante. En estos métodos, un resultado compuesto que es determinado al combinar marcadores individuales puede ser tratado como si fuera en sí mismo un marcador; esto es, un umbral puede ser determinado para el resultado compuesto como se describe en la presente para marcadores individuales, y el resultado compuesto para un paciente individual comparado con este umbral.

La habilidad de una prueba particular para distinguir dos poblaciones puede ser establecida utilizando análisis de ROC. Por ejemplo, curvas de ROC establecidas de una "primera" subpoblación que está predispuesta a uno o más cambios futuros en estatus renal, y una "segunda" subpoblación que no está predispuesta puede ser usada para calculara una curva de ROC, y el área bajo la curva provee una medida de la calidad de la prueba. Preferiblemente, las pruebas descritas en la presente proveen un área de curva de ROC mayor que 0.5, preferiblemente por lo menos 0.6, más preferiblemente 0.7, todavía más preferiblemente por lo menos 0.8, aún más preferiblemente por lo menos 0.9, y más preferiblemente por lo menos 0.95.

En ciertos aspectos, la concentración medida de uno o más marcadores de lesión de riñon, o un compuesto de tales marcadores, puede ser tratada como variables continuas. Por ejemplo, cualquier concentración particular puede · ser convertida a una probabilidad correspondiente de reducción futura en función renal para el sujeto, la presencia de una lesión, una clasificación,, etc. En todavía otra alternativa, un umbral que puede proveer un nivel aceptable de especificidad y sensibilidad para separar una población de sujetos en "bandejas" tal como una "primera" subpoblacion (por ejemplo, que está predispuesta a uno o más cambios futuros en estatus renal, la presencia de una lesión, una clasificación, etc.) y una "segunda" subpoblacion que no está así predispuesta. El valor de umbral es seleccionado para separar la primera y segunda subpoblacion por una o más de las siguientes medidas de exactitud de prueba: una proporción de probabilidad es mayor de 1, preferiblemente por lo menos aproximadamente 2 o más o aproximadamente 0.5 o menos , más preferiblemente por lo menos aproximadamente 3 o más o aproximadamente 0.33 o menos, todavía más preferiblemente por lo menos aproximadamente 4 o más o aproximadamente 0.25 o menos, aún más preferiblemente por lo menos aproximadamente 5 o más o aproximadamente 0.2 o menos, y más preferiblemente por lo menos aproximadamente 10 o más o aproximadamente 0.1 o menos; una especificidad mayor que 0.5, preferiblemente por lo menos aproximadamente 0.6, más preferiblemente por lo menos aproximadamente 0.7, todavía más preferiblemente por lo menos aproximadamente 0.8, aún más preferiblemente por lo menos aproximadamente 0.9 y más preferiblemente por lo menos aproximadamente 0.95, con una sensibilidad correspondiente mayor de 0.2, preferiblemente mayor de aproximadamente 0.3, más preferiblemente mayor de 0.4, todavía más preferiblemente por lo menos aproximadamente 0.5, aún más preferiblemente aproximadamente 0.6, todavía más preferiblemente mayor que aproximadamente 0.7, todavía más preferiblemente mayor de aproximadamente 0.8, más preferiblemente mayor de aproximadamente 0.9, y más preferiblemente mayor de aproximadamente 0.95; una sensibilidad mayor que 0.5, preferiblemente por lo menos aproximadamente 0.6, más preferiblemente por lo menos aproximadamente 0.7, todavía más preferiblemente por lo menos aproximadamente 0.8, aún más preferiblemente por lo menos aproximadamente 0.9 y más preferiblemente por lo menos 1 aproximadamente 0.95, con una especificidad correspondiente mayor de 0.2, preferiblemente mayor de aproximadamente 0.3, más preferiblemente mayor de aproximadamente 0.4, todavía más preferiblemente por lo menos aproximadamente 0.5, aún más preferiblemente aproximadamente 0.6, todavía más preferiblemente mayor de aproximadamente 0.7, todavía más preferiblemente mayor de aproximadamente 0.8, más preferiblemente mayor de aproximadamente 0.9, y más preferiblemente mayor de aproximadamente 0.95; por lo menos aproximadamente 75% de sensibilidad, combinada con por lo menos aproximadamente 75% de especificidad; una proporción de probabilidad positiva (calculada como sensibilidad/ (1-especificidad) ) de mayor que 1, por lo menos aproximadamente 2 , más preferiblemente por lo menos aproximadamente 3 , todavía más preferiblemente por lo menos aproximadamente 5, y más preferiblemente por lo menos aproximadamente 10; o una proporción de probabilidad negativa (calculada como (1-sensibilidad) /especificidad) de menos de 1, menor o igual a aproximadamente 0.5, más preferiblemente menor o igual a aproximadamente 0.3, y más preferiblemente menor o igual a aproximadamente 0.1.

El término "aproximadamente" en el contexto de cualquiera de los anteriores mediciones se refiere a +/- 5% de una medición dada.

Múltiples umbrales pueden también ser usados para determinar estatus renal en un sujeto. Por ejemplo, una "primera" subpoblación que está predispuesta a uno o más cambios futuros en estatus renal, la presencia de una lesión, una clasificación, etc., y una "segunda" subpoblación que no está predispuesta pueden ser combinados en un solo grupo. Este grupo es luego subdividido en tres o más partes iguales (conocidos como tertiles, quartiles, quintiles, etc., dependiendo del número de subdivisiones) . Una proporción de probabilidad es asignada a sujetos en base a cual división caen. Si se considera un tercil, el tercil más bajo o más alto puede ser usado como referencia por comparación de las otras subdivisiones. Esta subdivisión de referencia es asignada a una proporción de probabilidades de 1. Se asigna al segundo tercil una proporción de probabilidades que es relativa al primer tercil. Esto es, alguien que está en segundo tercil podría ser 3 veces más probable de sufrir uno o más cambios futuros en estatus renal en comparación con alguien en el primer tercil. También se asigna al tercer tercil una proporción de probabilidades que es relativa a aquel primer tercil.

En ciertas modalidades, el método de análisis es un inmunoanálisis . Los anticuerpos para uso en tales análisis se enlazarán a un marcador de lesión de riñon de plena longitud de interés, y también se puede enlazar a uno o más polipéptidos que están "relacionados" con el mismo, como aquel término es definido posteriormente en la presente. Numerosos formatos de inmunoanálisis son conocidos para aquellos de habilidad en el arte. Muestras de fluido corporal preferidas son seleccionadas del grupo que consiste de orina, sangre, suero, saliva, lágrimas y plasma .

Las etapas de método anteriores no deben ser interpretadas para dar a entender que el (los) resultado(s) de análisis del marcador de lesión de riñon es (son) usado (s) en aislamiento en los métodos descritos en la presente. Más bien, variables adicionales u otros indicios clínicos pueden ser incluidos en los métodos descritos en la presente. Por ejemplo, un método de una estratificación de riesgos, diagnóstico, clasificación, . monitoreo, etc. puede combinar el (los) resultado (s) de análisis con una o más variables medidas para el sujeto seleccionado del grupo que consiste de información demográfica (por ejemplo, peso, sexo, edad, raza), historia médica (por ejemplo, historia familiar, tipo de cirugía, enfermedad pre-existente tal como aneurismo, insuficiencia cardiaca congestiva, preeclampsia, eclampsia, diabetes mellitus, hipertensión, enfermedad de arteria coronaria, proteinuria, insuficiencia renal o sepsis, tipo de exposición a toxina tales como NSAID, ciclosporinas , tacrolimus, aminoglicósidos , foscarnet, etilenglicol , hemoglobina, mioglobina, ifosfamida, metales pesados, metotrexato, agentes de contraste radiopacos o estreptozotocina) , variables clínicas (por ejemplo, presión sanguínea, temperatura, velocidad de respiración), puntuaciones de riesgo (puntuación APACHE, puntuación PREDICT, puntuación de riesgo TIMI por UA/NSTEMI, puntuación de riesgo de Framingham) , una proporción de filtración glomerular, una proporción de filtración glomerular estimada, una velocidad de producción de orina, uría concentración de creatinina en el suero o plasma, una concentración de creatinina en orina, una excreción fraccional de sodio, una concentración de sodio en la orina, una proporción de creatinina en orina a creatinina en el suero o plasma, una gravedad específica de orina, una osmolalidad de orina, una proporción de nitrógeno en urea de orina a nitrógeno en urea de plasma, una proporción de BUN en el plasma a creatinina, un índice de falla renal calculado como sodio en orina / (creatinina en orina / creatinina de plasma) , una concentración de (NGAL) , gelatinasa de neutrófilo en suero o plasma, una concentración de NGAL en orina, una concentración de cistatina C en suero o plasma, una concentración de troponina cardiaca en suero o plasma, una concentración de BNP en suero o plasma, una concentración de NTproBNP en suero o plasma, y una concentración de proBNP en suero o plasma. Otras medidas de función renal que pueden ser combinadas con uno o más resultado(s) de análisis de marcador de lesión de riñon son descritos posteriormente en la presente y en Harrison's Principies of Internal Medicine, 17th Ed. , McGraw Hill, New York, páginas 1741-1830, cada una de las cuales son incorporadas en la presente por referencia en su totalidad.

Cuando más de un marcador es medido, los marcadores individuales pueden ser medidos en muestras obtenidas al mismo tiempo, o pueden ser determinados de muestras obtenidas a tiempos diferentes (por ejemplo, una prematura o más tarde) . Los marcadores individuales pueden también ser medidos en las mismas o diferentes muestras de fluido corporal. Por ejemplo, un marcador de lesión de riñon puede ser medido en una muestra de suero o plasma y otro marcador de lesión de riñon puede ser medido en una muestra de orina. Además, una asignación de una probabilidad puede combinar un resultado de análisis de marcador de lesión de riñon individual con cambios temporales en una o más variables adicionales .

En varios aspectos relacionados, la presente invención también es concerniente con dispositivos y kits para efectuar los métodos descritos en la presente. Los kits apropiados comprenden reactivos suficientes para efectuar un análisis para por lo menos uno de los marcadores de lesión de riñon descritos, junto con instrucciones para efectuar las copmaraciones de umbral descritas .

En ciertas modalidades, reactivos para efectuar tales análisis son provistos en un dispositivo de análisis, y tales dispositivos de análisis pueden estar incluidos en tal kit. Reactivos preferidos pueden comprender uno o más anticuerpos en fase sólida, el anticuerpo en fase sólida que comprende anticuerpo que detecta el (los) objetivo (s) de biomarcador propuesto (s) enlazado (s) a un soporte sólido. En el caso de inmunoanálisis de emparedado, tales reactivos pueden también incluir uno o más anticuerpos marcados detectablemente, el anticuerpo marcado detectablemente que comprende anticuerpo qué detecta el (los) objetivo (s) de biomarcador propuesto (s) enlazado (s) a un marcador detectable. Elementos opcionales adicionales que pueden ser provistos como parte de un dispositivo de análisis son descritos posteriormente en la presente.

Marcadores detectables pueden incluir moléculas que son por si mismas detectables (por ejemplo,. porciones fluorescentes, marcadores electroquímicos, marcadores ecl (luminiscencia electroquímica), quelatos de metal, partículas de metal coloidales, etc.) también como moléculas que pueden ser detectadas indirectamente mediante producción de un producto de reacción detectable (por ejemplo, enzimas tales como peroxidasa de rábano, fosfatasa alcalina, etc.) o por medio del uso de una molécula de enlace específica que en sí misma puede ser detectable (por ejemplo, un anticuerpo marcado que se enlaza al segundo anticuerpo, biotina, digoxigenina, maltosa, oligohistidina, 2 , 4-dintrobenceno, fenilarseniato, ssADN, dsADN, etc.).

La generación de una señal del elemento de revelado de señal puede ser efectuada utilizando varios métodos ópticos, acústicos y electroquímicos bien conocidos en el arte. Ejemplos de modos de detección incluyen fluorescencia, detección radioquímica, reflectancia, absorbancia, amperometría, conductancia, impedancia, interferometría, elipsometría, etc. En ciertos de estos métodos, el anticuerpo de fase sólida es acoplado a un transductor (por ejemplo, rejilla de difracción, detector electroquímico, etc.) para generación de una señal, mientras que en otros , una señal es generada mediante un transductor que está separado espacialmente del anticuerpo en fase sólida (por ejemplo, un fluorómetro que emplea una fuente de luz de excitación y un detector óptico) . Esta lista no pretende ser limitante. Biodetectores a base de anticuerpos pueden también ser empleados para determinar la presencia o cantidad de analitos que eliminan opcionalmente la necesidad de una molécula marcada.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LAS FIGURAS La Figura 1 (que comprende de las figuras 1-1 a la 1-12) provee tablas de datos determinadas de acuerdo con el Ejemplo 6 para la comparación de niveles de marcador en muestra de orina recolectadas para el Cohorte 1 (pacientes que no avanzan más allá de la etapa 0 de RIFLE) y en muestras de orina recolectadas de los sujetos a 0, 24 horas, y 48 horas antes de llegar a la etapa R, I o F en el Cohorte 2. Las Tablas proveen estadísticas descriptivas, análisis de AUC, y sensibilidad, especificidad y cálculos de proporción de probabilidades a varios niveles de umbral (corte) para los varios marcadores.

La Figura 2 (que comprende de las figuras 2-1 a la 2-12 ) provee tablas de datos determinada de acuerdo con el Ejemplo 7 para la comparación de niveles de marcador en muestras de orina recolectadas para el Cohorte 1 (pacientes que no avanzan más allá de la etapa 0 o R de RIFLE) y en muestras de orina recolectadas de los sujetos a 0, 24 horas, y 48 horas antes de llegar a la etapa I o F en el Cohorte 2. Las Tablas proveen estadísticas descriptivas, análisis de AUC, y sensibilidad, especificidad y cálculos de proporción de probabilidades a varios niveles de umbral (corte) para los varios marcadores .

La Figura 3 (que comprende de las figuras 3-1 a la 3- 2) provee tablas de datos determinada.de acuerdo con el Ejemplo 8 para la comparación de niveles de marcador en muestras de orina recolectadas para el Cohorte 1 (pacientes que llegaron, pero no avanzaron más allá de la etapa R de RIFLE) y en muestras de orina recolectadas de sujetos a 0, 24 -horas, y 48 horas antes de llegar a la etapa I o F en el Cohorte 2. Las tablas proveen estadísticas descriptivas, análisis de AUC , y sensibilidad, especificidad y cálculos de proporción de probabilidades a varios niveles de umbral (corte) para los varios marcadores .

La Figura 4 (que comprende de las figuras 4-1 a la 4-4) provee tablas de datos determinadas de acuerdo con el Ejemplo 9 para la comparación de niveles de marcador en muestras de orina recolectadas para el Cohorte 1 (pacientes que no avanzan más allá de la etapa 0 de RIFLE) y en muestras de orina recolectada de sujetos a 0, 24 horas, y 48 horas antes de llegar a la etapa F en el Cohorte 2. Las tablas proveen estadísticas descriptivas, análisis de AUC, y sensibilidad, especificidad y cálculos de proporción de probabilidades a varios niveles de umbral (corte) para los varios marcadores.

La Figura 5 (que comprende de las figuras 5-1 a la 5- 11) provee tablas de datos determinada de acuerdo con el< Ejemplo 6 para la comparación de niveles de marcador en muestras de plasma recolectadas para el Cohorte 1 (pacientes que no avanzan más allá de la etapa 0 de RIFLE) y en muestras de plasma recolectadas de sujetos a 0, 24 horas, .y 48 horas antes de llegar a la etapa R, I o F en el Cohorte 2. Las tablas proveen estadísticas descriptivas, análisis de AUC y sensibilidad, especificidad y cálculos de proporción de probabilidades a varios niveles de umbral (corte) para los varios marcadores .

La Figura 6 (que comprende de las figuras 6-1 a la 6- 12 ) provee tablas de datos determinada de acuerdo con el Ejemplo 7 para la comparación de niveles de marcador en muestras de plasma recolectadas para el Cohorte 1 (pacientes que no avanzan más allá de la etapa 0 o R de RIFLE) y en muestras de plasma recolectadas de sujetos a 0, 24 horas, y 48 horas antes de llegar a la etapa I o F en el Cohorte 2. Las tablas proveen estadísticas descriptivas, análisis de AUC, y sensibilidad, especificidad y cálculos de proporción de probabilidades a varios niveles de umbral (corte) para los varios marcadores.

La Figura 7 (que comprende de las figuras 7-1 a la 7-2 ) provee tablas de datos determinadas de acuerdo con el Ejemplo 8 para la comparación de niveles de marcador en muestras de plasma recolectadas para el Cohorte 1 (pacientes que llegaron, pero no avanzaron más allá de la etapa R de RIFLE) y en muestras de plasma recolectadas de sujetos a 0, 24 horas, y 48 horas antes de llegar a la etapa I o F en el Cohorte 2. Las tablas proveen estadísticas descriptivas, análisis de AUC y sensibilidad, especificidad y cálculos de proporción de probabilidades a varios niveles de umbral (corte) para los varios marcadores .

La Figura 8 (que comprende de las figuras 8-1 a la 8-4 provee tablas de datos determinadas de acuerdo con el Ejemplo 9 para la comparación de niveles de marcador en muestras de plasma recolectadas para el Cohorte 1 (pacientes que no avanzan más allá de la etapa 0 de RIFLE) y en muestras de plasma recolectadas de sujetos a 0, 24 horas, y 48 horas antes de llegar a la etapa F en el Cohorte 2. Las tablas proveen estadísticas descriptivas, análisis de AUC, y sensibilidad, especificidad y cálculos de proporción de probabilidades a varios niveles de umbral (corte) para los varios marcadores.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN La presente invención es concerniente con métodos y composiciones para diagnosis, diagnosis diferencial, estratificación de riesgos, monitoreo, clasificación y determinación de regímenes de tratamiento en sujetos que sufren o están en riesgo de sufrir de lesión a la función renal, función renal reducida y/o falla renal aguda por medio de la. medición de uno o más marcadores de lesión de riñon. En varias modalidades, una concentración medida de uno o más marcadores seleccionados del grupo que consiste de factor de crecimiento epidérmico, complemento C3 , Interleucina-4 , Interleucina-1 alfa, antígeno de nefritis tubulointersticial , factor beta-1 de crecimiento transformante, proteína 7 morfogenética del hueso, Osteopontina, Netrina-1, y proteína alfa de crecimiento-regulado, o uno o más marcadores relacionados con los mismos, son correlacionados con el estatus renal del sujeto. .

Por propósitos de este documento, las siguientes definiciones se aplican: Como se usa en la presente, una "lesión a función renal" es una reducción mensurable abrupta (dentro de 14 días, preferiblemente dentro de 7 días, más preferiblemente dentro de 72 horas, y todavía más preferiblemente dentro de 48 horas) en una medida de función renal. Tal lesión puede ser identificada, por ejemplo, por una disminución en velocidad de filtración glomerular o GFR estimada, una reducción en salida de orina, un incremento en creatinina en el suero, un incremento de cistatina C en suero, un requerimiento por terapia de reemplazo renal, etc. "Mejora en Función Renal" es un incremento mensurable abrupto (dentro de 14 días, preferiblemente dentro de 7 días, más preferiblemente dentro de 72 horas, y todavía más preferiblemente dentro de 48 horas) en una medida de función renal. Métodos preferidos para medir y/o estimar GFR son descritos posteriormente en la presente.

Como se usa en la presente, "función renal reducida" es una reducción abrupta (dentro 14 días, preferiblemente dentro de 7 días, más preferiblemente dentro de 72 horas, y todavía más preferiblemente dentro de 48 horas) en función del riñon identificada por un incremento absoluto de creatinina en suero mayor o igual a 0.1 mg/dL (= 8.8 µ????/L) , un porcentaje de incremento de creatinina en el suero mayor o igual a 20% (1.2 veces de la referencia), o una reducción en salida de orina (oliguria documentada de menos de 0. 5 ml/Kg por hora) .

Como se usa en la presente, "falla renal agüda" o "ARF" es una reducción abrupta (dentro de 14 días, preferiblemente dentro de 7 días, más preferiblemente dentro de 72 horas, y todavía más preferiblemente dentro de 48 horas) en función del riñon identificada por un incremento absoluto de creatinina en el suero mayor o igual a 0.3 mg/dl (= 26.4 umol/l) , un porcentaje de incremento de creatinina en suero mayor o igual a 50% (1. 5 veces de la referencia), o una reducción en salida de orina (oliguria documentada de menos de 0.5 ml/Kg por hora por al menos 6 horas). Este término es sinónimo con "lesión de riñon aguda" o "AKI".

A este respecto, el experimentado entenderá que las señales obtenidas de un inmunoanálisis son un resultado directo de complejos formados entre uno o más anticuerpos y la biomolécula objetivo (esto es, el analito) y polipéptidos que contienen el (los) epítopo(s) necesario (s) al cual los anticuerpos se enlazan. Mientras que tales análisis pueden detectar el biomarcador de plena longitud y el resultado de análisis ser expresado como concentración de un biomarcador de interés, la señal del análisis es realmente un resultado de todos de tales polipéptidos "inmunoreactivos" presentes en la muestra. La expresión de biomarcadores puede también ser determinada por medios diferentes que los inmunoanálisis , incluyendo mediciones de prote na ' (tales como inmunoabsorciones , western blots, métodos cromatográficos , espectrometría de masas, etc.) y mediciones de ácido nucleico (cuantificación de mÁRN) . Esta lista no pretende ser limitante.

Como se usa en la presente, el término "factor de crecimiento epidérmico" se refiere a uno o más polipéptidos presentes en una muestra biológica que son derivado del precursor del factor de crecimiento epidérmico (Swiss-Prot P01133 (SEQ ID NO: 1) ) . 10 20 30 40 50 60 MLLTLIILLP WSKFSFVSL SAPQHWSCPE GTLAGNGNST CVGPAPFLIF SHGNSIFRID 70 80 90 100 110 120 TEGTNYEQLV VDAGVSVIMD FHYNEKRIYW VDLERQLLQR VFLNGSRQER VCNIEKNVSG 130 140 150 160 170 180 MAINWINEEV IWSNQQEGII TVTDMKGNNS HILLSALKYP ANVAVDPVER FIFWSSEVAG 190 " 200 210 220 230 240 SLYRADLDGV GVKALLETSE KITAVSLDVL DKRLFWIQYN REGSNSLICS CDYDGGSVHI 250 260 270 280 290 300 SKHPTQHNLF AMSLFGDRIF YSTWKMKTIW IANKHTGKDM VRINLHSSFV PLGELKWHP 310 320 330 340 350 _ 360 LAQPKAEDDT WEPEQKLCKL RKGNCSSTVC GQDLQSHLCM CAEGYALSRD RKYCEDVNEC 370 380 390 400 410 420 AFWNHGCTLG CKNTPGSYYC TCPVGFVLLP DGKRCHQLVS CPRNVSECSH DCVLTSEGPL 430 440 450 460 470 480 CFCPEGSVLE RDGKTCSGCS SPDNGGCSQL CVPLSPVSWE CDCFPGYDLQ LDEKSCAASG 490 500 510 520 530 540 PQPFLLFANS QDIRHMHFDG TDYGTLLSQQ MG VYALDHD PVENKIYFAH TALKWIERAN 550 560 570 580 590 600 MDGSQRERLI EEGVDVPEGL AVDWIGRRFY WTDRGKSLIG RSDLNGKRSK IITKENISQP 610 620 630 640 650 660 RGIAVHPMAK RLFWTDTGIN PRIESSSLQG LGRLVIASSD LIWPSGITID FLTDKLYWCD 670 680 690 700 710 720 AKQSVIEMA LDGSKRRRLT QNDVGHPFAV AVFEDYVWFS DWAMPSVIRV NKRTGKDRVR 730 740 750 760 770 780 LQGSMLKPSS LVWHPLAKP GADPCLYQNG GCEHICKKRL GTAWCSCREG FMKASDGKTC 790 800 810 820 830 840 LALDGHQLLA GGEVDLKNQV TPLDILSKTR VSEDNITESQ HMLVAEIMVS DQDDCAPVGC 850 860 870 880 890 900 SMYARCISEG EDATCQCLKG FAGDGKLCSD IDECEMGVPV CPPASSKCIN TEGGYVCRCS 910 920 930 940 950 960 EGYQGDGIHC LDIDECQLGV HSCGENASCT NTEGGYTCMC AGRLSEPGLI CPDSTPPPHL 970 980 990 1000 1010 1020 REDDHHYSVR NSDSECPLSH DGYCLHDGVC MYIEALDKYA CNCWGYIGE RCQYRDLKWW 1030 1040 1050 1060 1070 1080 ELRHAGHGQQ QKVIWAVCV WLVMLLLLS LWGAHYYRTQ KLLSKNPKNP YEESSRDVRS .1090 1100 1110 1120 1130 1140 RRPADTEDGM SSCPQPWFW IKEHQDLKNG GQPVAGEDGQ AADGSMQPTS WRQEPQLCGM 1150 1160 1170 1180 1190 1200 GTEQGCWIPV SSDKGSCPQV MERSFHMPSY GTQTLEGGVE KPHSLLSANP LWQQRALDPP HQMELTQ Más preferiblemente, el análisis del factor de crecimiento epidérmico detecta una o más formas solubles del factor de crecimiento epidérmico. El factor de crecimiento epidérmico es una proteína de membrana tipo I de un solo paso que tiene un dominio extracelular grande, algunos o todos de los cuales están presentes en formas solubles del factor de crecimiehto epidérmico generadas ya sea por medio de un evento de empalme alternativo que cancela todo o una porción del dominio de transmembrana, o mediante proteólisis de la forma membran -enlazada . En el caso de un inmunoanálisis , uno o más anticuerpos que se enlazan a epítopos dentro de este dominio extracelular pueden ser usados para detectar esta(s) forma (s) soluble(s). Los siguientes dominios han sido identificados en el factor de crecimiento epidérmico: Como se usa en la presente, el término "complemento C3" se refiere a uno o más polipéptidos presentes en una muestra biológica que son derivados del precursor de complemento C3 (Swiss-Prot P01024 (SEQ ID NO: 2)) . 10 20 30 40 50 60 MGPTSGPSLL LLLLTHLPLA LGSPMYSIIT PNILRLESEE TMVLEAHDAQ GDVPVTVTVH 70 80 90 100 110 120 DFPGKKLVLS SEKTVLTPAT NHMGNVTFTI PANREFKSEK GRNKFVTVQA TFGTQWEKV 130 140 150 160 170 180 VLVSLQSGYL FIQTDKTIYT PGSTVLYRIF TVNHKLLPVG RTVMVNIENP EGIPVKQDSL 190 200 210 220 230 240 SSQNQLGVLP LSWDIPELVN MGQWKIRAYY ENSPQQVFST EFEVKEYVLP SFEVIVEPTE 250 260 270 280 290 300 KFYYIYNEKG LEVTITARFL YGKKVEGTAF VIFGIQDGEQ RISLPESLKR IPIEDGSGEV 310 320 330 340 350 360 VLSRKVLLDG VQNPRAEDLV GKSLYVSATV ILHSGSDMVQ AERSGIPIVT SPYQIHFTKT 370 380 390 400 410 420 PKYFKPGMPF DLMVFVTNPD GSPAYRVPVA VQGEDTVQSL TQGDGVAKLS INTHPSQKPL 430 440 450 460 470 480 SITVRTKKQE LSEAEQATRT MQALPYSTVG NS NYLHLSV LRTELRPGET LNVNFLLRMD 490 500 510 520 530 540 RAHEAKIRYY TYLIMNKGRL LKAGRQVREP GQDLWLPLS ITTDFIPSFR LVAYYTLIGA 550 560 570 580 590 600 SGQREWADS VWVDVKDSCV GSLWKSGQS EDRQPVPGQQ MTLKIEGDHG ARWLVAVDK 610 620 630 640 650 660 GVFVLNKKNK LTQSKIWDW EKADIGCTPG SGKDYAGVFS DAGLTFTSSS GQQTAQRAEL 670 680 690 700 710 720 QCPQPAARRR RSVQLTEKRM DKVGKYPKEL RKCCEDGMRE NPMRFSCQRR TRFISLGEAC 730 740 750 760 770 780 KKVFLDCCNY ITELRRQHAR ASHLGLARSN LDEDIIAEEN IVSRSEFPES WLWNVEDLKE 790 800 810 820 830 840 PPKNGISTKL MNIFLKDSIT TWEILAVSMS DKKGICVADP FEVTVMQDFF IDLRLPYSW 850 860 870 880 890 900 RNEQVEIRAV LYNYRQNQEL KVRVELLHNP AFCSLATTKR RHQQTVTIPP KSSLSVPYVI 910 920 930 940 950 960 VPLKTGLQEV EVKAAVYHHF ISDGVRKSLK WPEGIRM K TVAVRTLDPE RLGREGVQKE 970 980 990 1000 1010 1020 DIPPADLSDQ VPDTESETRI LLQGTPVAQM TEDAVDAERL KHLIVTPSGC GEQ MIGMTP 1030 1040 1050 1060 1070 1080 TVIAVHYLDE TEQWEKFGLE KRQGALELIK KGYTQQLAFR QPSSAFAAFV KRAPSTWLTA 1090 1100 1110 1120 1130 1140 YWKVFSLAV NLIAIDSQVL CGAVKWLILE KQKPDGVFQE DAPVIHQEMI GGLRNNNEKD 1150 1160 1170 1180 1190 1200 MALTAFVLIS LQEAKDICEE QVNSLPGSIT KAGDFLEANY MNLQRSYTVA IAGYALAQMG 1210 1220 1230 1240 1250 1260 RLKGPLLNKF LTTAKDKNRW EDPGKQLYNV EATSYALLAL LQLKDFDFVP PWRWLNEQR 1270 1280 1290 1300 1310 1320 YYGGGYGSTQ ATFMVFQALA QYQKDAPDHQ ELNLDVSLQL PSRSSKITHR IHWESASLLR 1330 1340 1350 1360 1370 1380 SEETKENEGF TVTAEGKGQG TLSWTMYHA KAKDQLTCNK FDLKVTIKPA PETEKRPQDA 1390 1400 1410 1420 1430 1440 KNTMILEICT RYRGDQDATM SILDISMMTG FAPDTDDLKQ LANGVDRYIS KYELDKAFSD 1450 1460 1470 1480 1490 1500 RNTLIIYLDK VSHSEDDCLA FKVHQYFNVE LIQPGAVKVY AYYNLEESCT RFYHPEKEDG 1510 1520 1530 1540 1550 1560 KLNKLCRDEL CRCAEENCFI QKSDDKVTLE ERLDKACEPG VDYVYKTRLV KVQLSNDFDE 1570 1580 1590 1600 1610 1620 YIMAIEQTIK SGSDEVQVGQ QRTFISPIKC REALKLEEKK HYLMWGLSSD FWGEKPNLSY 1630 1640 1650 1660 IIGKDT VEH WPEEDECQDE ENQKQCQDLG AFTESMWFG CPN Los siguientes dominios han sido identificados en complemento C3 : Residuos Longitud ID de dominio 1-22 22 Péptido de señal 23-1663 1641 Complemento C3 23-667 645 Cadena beta de complemento C3 672-1663 992 Cadena alfa de complemento C3 672-748 77 Anafilatoxina de complemento C3 749-1663 915 Cadena alfa' de complemento C3b 749-954 206 Fragmento 1 de la cadena alfa' del complemento C3c 955-1303 349 Fragmento de complemento de C3dg 955-1001 47 Fragmento de complemento de C3g 1002-1303 302 Fragmento de complemento de C3d 1304-1320 17 Fragmento de complemento de C3f 1321-1663 343 Fragmento 2 de la cadena alfa' del complemento C3c Como se usa en la presente, el término "Interleucina- 4" se refiere a uno o más polipéptidos presentes en una muestra biológica que son derivados del precursor de Interleucina-4 (Swiss-Prot P05112 (SEQ ID NO: 3)). 10 20 30 40 50 60 MGLTSQLLPP LFFLLACAGN FVHGHKCDIT LQEIIKTLNS LTEQKTLCTE LTVTDIFAAS 70 80 90 100 110 120 KNTTEKETFC RAATVLRQFY SHHEKDTRCL GATAQQFHRH KQLIRFLKRL DRNLWGLAGL 130 140 150 NSCPVKEANQ STLENFLERL KTIMREKYSK CSS Los siguientes dominios han sido identificados en Interleucina-4 : Como se usa en la presente, el término "Interleucina- 1 alfa" se refiere a uno o más polipéptidos presentes en una muestra biológica que son derivados del precursor de Interleucina-1 alfa (Swiss-Prot P01583 (SEQ ID NO: 4)). 10 20 30 40 50 60 MAKVPDMFED LKNCYSENEE DSSSIDHLSL NQKSFYHVSY GPLHEGCMDQ SVSLSISETS 70 80 90 100 110 120 KTSKLTFKES MWVATNGKV LKKRRLSLSQ SITDDDLEAI ANDSEEEIIK PRSAPFSFLS 130 140 150 160 170 180 NVKYNFMRII KYEFILNDAL NQSIIRANDQ YLTAAALHNL DEAVKFDMGA YKSSKDDAKI 190 200 210 220 230 240 TVILRISKTQ LYVTAQDEDQ PVLLKEMPEI PKTITGSETN LLFFWETHGT KNYFTSVAHP 250 260 270 NLFIATKQDY WVCLAGGPPS ITDFQILENQ A Los siguientes dominios han sido identificados en Interleucina-1 alfa: Como se usa en la presente, el término "antígeno de nefritis tubulointersticial" se refiere a uno o más polipéptidos presentes en una muestra biológica que son derivados del precursor del antígeno de nefritis tubulointersticial (Swiss-Prot Q9UJW2 (SEQ ID NO: 5)). 10 20 30 40 50 60 WTGYKILIF SYLTTEIWME KQYLSQREVD LEAYFTRNHT VLQGTRFKRA IFQGQYCRNF 70 80 90 100 110 120 GCCEDRDDGC VTEFYAA AL CYCDKFCDRE NSDCCPDYKS FCREEKEWPP HTQPWYPEGC 130 140 150 160 170 180 FKDGQHYEEG SVIKENCNSC TCSGQQWKCS QHVCLVRPEL IEQVNKGDYG WTAQNYSQFW 190 200 210 220 230 240 G TLEDGFKF RLGTLPPSPM LLSMNEMTAS LPATTDLPEF FVASYKWPGW THGPLDQKNC 250 260 270 280 .290 300 AASWAFSTAS VAADRIAIQS KGRYTANLSP QNLISCCAKN RHGCNSGSID RAWWYLRKRG 310 320 330 340 350 360 LVSHACYPLF KDQNATNNGC AMASRSDGRG KRHATKPCPN NVEKSNRIYQ CSPPYRVSSN 370 380 390 400 410 420 ETEIMKEIMQ NGPVQAIMQV REDFFHYKTG IYRHVTSTNK ESEKYRKLQT HAVKLTGWGT 430 440 450 460 470 LRGAQGQKEK FWIAANSWGK SWGENGYFRI LRGVNESDIE KLIIAAWGQL TSSDEP Los siguientes dominios han sido identificados antígeno de nefritis tubulointersticial : Como se usa en la presente, el término "factor beta-1 de crecimiento transformante" se refiere a uno o más polipéptidos presentes en una muestra biológica que son derivados del precursor del factor beta-1 de crecimiento transformante (Swiss-Prot P01137 (SEQ ID NO: 6)) . 10 20 30 40 50 60 MPPSGLRLLL LLLPLLWLLV LTPGRPAAGL STCKTIDMEL VKRKRIEAIR GQILSKLRLA 70 80 90 100 110 120 SPPSQGEVPP GPLPEAVLAL YNSTRDRVAG ESAEPEPEPE ADYYAKEVTR VLMVETHNEI 130 140 150 160 170 ' 180 YDKFKQSTHS IYMFFNTSEL REAVPEPVLL SRAELRLLRL KLKVEQHVEL YQKYSNNSWR 190 200 210 220 230 240 YLSNRLLAPS DSPEWLSFDV TGWRQWLSR GGEIEGFRLS AHCSCDSRDN TLQVDINGFT 250 260 270 280 290 300 TGRRGDLATI HGMNRPFLLL MATPLERAQH LQSSRHRRAL DTNYCFSSTE KNCCVRQLYI 310 320 330 340 350 360 DFRKDLGWKW IHEPKGYHAN FCLGPCPYIW SLDTQYSKVL ALYNQHNPGA SAAPCCVPQA 370 380 390 LEPLPIVYYV GRKPKVEQLS NMIVRSCKCS Los siguientes dominios han sido identificados en factor beta-1 de crecimiento transformante: Como se usa en la presente, el término "proteína 7 morfogenética del hueso" se refiere a uno o. más polipéptidos presentes en una muestra biológica que son derivados del precursor de proteína 7 morfogenética del hueso (Swiss-Prot P18075 (SEQ ID NO: 7)) . 10 . 20 30 40 50 60 MHVRSLRAAA PHSFVALWAP LFLLRSALAD FSLDNEVHSS FIHRRLRSQE RREMQREILS 70 80 90 100 110 120 ILGLPHRPRP HLQGKHNSAP MFMLDLYNAM AVEEGGGPGG QGFSYPYKAV FSTQGPPLAS 130 140 150 160 170 180 LQDSHFLTDA DMVMSFV LV EHDKEFFHPR YHHREFRFDL SKIPEGEAVT AAEFRIYKDY 190 200 210 220 230 240 IRERFDNETF RISVYQVLQE HLGRESDLFL LDSRTLWASE EGWLVFDITA TSNHWWNPR 250 260 270 280 290 300 HNLGLQLSVE TLDGQSINPK LAGLIGRHGP QNKQPFMVAF FKATEVHFRS IRSTGSKQRS 310 320 330 340 350 360 QNRSKTPKNQ EALRMANVAE NSSSDQRQAC KKHELYVSFR DLGWQDWIIA PEGYAAYYCE 370 380 390 . 400 410 420 GECAFPLNSY MNATNHAIVQ TLVHFINPET VPKPCCAPTQ LNAISVLYFD DSSNVILKKY 430 RNMWRACGC H Los siguientes dominios han sido identificados en la prote na 7 morfogenética del hueso: Residuos Longitud ID de dominio 1-29 29 Péptido de señal 30-292 263 Propéptido 293-431 139 Proteína 7 morfogenética de hueso Como se usa en la presente, el término "Osteopontina" se refiere a uno o más polipéptidos presentes en una muestra biológica que son derivados del precursor de Osteopontina (Swiss-Prot P10451 (SEQ ID NO: 8)). 10 20 30 40 50 60 RIAVICFCL LGITCAIPVK QADSGSSEEK QLYNKYPDAV ATWLNPDPSQ KQNLLAPQNA 70 80 90 100 110 120 VSSEETNDFK QETLPSKSNE SHDHMDDMDD EDDDDHVDSQ DSIDSNDSDD ^VDDTDDSHQS 130 140 150 160 170 180 DESHHSDESD ELVTDFPTDL PATEVFTPW PTVDTYDGRG DSWYGLRSK SKKFRRPDIQ 190 200 210 220 230 240 YPDATDEDIT SHMESEELNG AYKAIPVAQD LNAPSDWDSR GKDSYETSQL DDQSAETHSH 250 260 270 280 290 300 KQSRLYKRKA NDESNEHSDV IDSQELSKVS REFHSHEFHS HEDMLWDPK SKEEDKHLKF 310 RISHELDSAS SEVN Los siguientes dominios han sido identificados en Osteopontina : Como se usa en la presente, el término "proteína alfa de crecimiento regulado" se refiere a uno o más polipéptidos presentes en una muestra biológica que son derivados del precursor de proteína alfa de crecimiento regulado (Swiss-Prot P09341 (SEQ ID NO: 9) ) . 10 20 30 40 50 60 MARAALSAAP SNPRLLRVAL LLLLLVAAGR RAAGASVATE LRCQCLQTLQ GIHPKNIQSV 70 80 90 100 NVKSPGPHCA QTEVIATLKN GRKACLNPAS PIVKKIIEKM LNSDKSN Los siguientes dominios han sido identificados en la proteína alfa de crecimiento regulado: Residuos Longitud ID de dominio 1-34 34 Péptido de señal 35-107 73 Proteína alfa de crecimiento regulado 38-107 70 Proteína alfa de crecimiento regulado (4-73) 39-107 69 Proteína alfa de crecimiento regulado (5-73) 40-107 68 Proteína alfa de crecimiento regulado (6-73) Como se usa en la presente , el término "Netrina-1 " se refiere a uno o más polipéptidos presentes en una muestra biológica que son derivados del precursor de . Netrina-1 ( Swiss-Prot 095631 ( SEQ ID NO : 10 ) ) . 10 20 30 40 50 60 MMRAVWEALA ALAAVACLVG AVRGGPGLSM FAGQAAQPDP CSDENGHPRR CIPDFVNAAF 70 80 90 100 110 120 GKDVRVSSTC GRPPARYCW SERGEERLRS CHLCNASDPK KAHPPAFLTD LNNPHNLTCW 130 140 150 160 170 180 QSENYLQFPH NVTLTLSLGK KFEVTYVSLQ FCSPRPESMA IYKSMDYGRT WVPFQFYSTQ 190 200 210 220 230 240 CRKMYNRPHR APITKQNEQE AVCTDSHTDM RPLSGGLIAF STLDGRPSAH DFDNSPVLQD 250 260 270 280 290 300 WVTATDIRVA FSRLHTFGDE NEDDSELARD SYFYAVSDLQ VGGRCKCNGH AARCVRDRTD 310 320 330 340 350 360 SLVCDCRHNT AGPECDRCKP FHYDRPWQRA TAREANECVA CNCNLHARRC RFNMELYKLS 370 380 390 400 410 420 GRKSGGVCLN CRHNTAGRHC HYCKEGYYRD MGKPITHRKA CKACDCHPVG AAGKTCNQTT 430 440 450 460 470 480 GQCPCKDGVT GITCNRCAKG YQQSRSPIAP CIKIPVAPPT TAASSVEEPE DCDSYCKASK 490 500 510 520 530 540 GKLKINMKKY CKKDYAVQIH ILKADKAGDW WKFTVNIISV YKQGTSRIRR GDQSL IRSR 550 560 570 580 590 600 DIACKCPKIK PLKKYLLLGN AEDSPDQSGI VADKSSLVIQ WRDTWARRLR KFQQREKKGK CKKA Los siguientes dominios han sido identificados Netrina-1: Residuos Longitud ID de dominio 1-24 24 Péptido de señal 25-604 580 Netrina-1 Como se usa en la presente, el término "relacionar una señal con la presencia o cantidad" de un analito refleja este entendimiento. Las señales de análisis son comúnmente relacionadas con la presencia o cantidad de un analito por medio del uso de una curva estándar calculada utilizando concentraciones conocidas del analito de interés. Como el término es usado en la presente, un análisis está "configurado para detectar" un analito si un análisis puede generar una señal detectable indicadora de la presencia o cantidad de una concentración fisiológicamente relevante del analito. Debido a que un epítopo de anticuerpo es del orden de 8 aminoácidos, un inmunoanálisis configurado para detectar un marcador de interés también detectará polipéptidos relacionados con la secuencia del marcador, en tanto que aquellos polipéptidos contengan el (los) epítopo (s) necesario (s). para enlazarse al anticuerpo o anticuerpos usados en el análisis. El término "marcador relacionado" como se usa en la presente con respecto a un biomarcador tal como uno de los marcadores de lesión de riñon descritos en la presente se refiere a uno o más fragmentos, variantes, etc., de un marcador particular o su padre biosintético que puede ser detectado como un subrogado por el marcador sí mismo o como biomarcadores independientes . El término también se refiere a uno o más polipéptidos presentes en una muestra biológica que son derivados del precursor de biomarcador acomplejado a especies adicionales, tales como proteínas de enlace, receptores, heparina, lípidos, azúcares, etc .

El término marcador que "va a positivo" como aquel término es usado en la presente se refiere a un marcador que se determina que es elevado en sujetos que sufren de una enfermedad o condición, en relación con sujetos que no sufren de aquella enfermedad o condición. El término marcador que "va a negativo" como aquel término es usado en la presente se refiere a un marcador que se determina que es reducido en sujetos que sufren de una enfermedad o condición, en relación con sujetos que no sufren de aquella enfermedad o condición.

El término "sujeto" como se usa en la presente se refiere a un organismo humano u organismo no humano. Así, los métodos y composiciones descritos en la presente son aplicables tanto para enfermedad humana como veterinaria. Además, mientras que un sujeto es preferiblemente un organismo viviente, la invención descrita en la presente puede ser usada en análisis post-mortem también. Los sus preferidos son humanos, y más preferiblemente "pacientes", que como se usa en la presente se refiere a humanos vivientes que están recibiendo cuidado médico por una enfermedad o condición. Esto incluye personas sin una enfermedad definida que están siendo investigados por signos de patologí .

Preferiblemente, un analito es medido en una muestra. Tal muestra puede ser obtenida de un sujeto, o puede ser obtenida de materiales biológicos destinados a ser provistos al sujeto. Por ejemplo, una muestra puede ser obtenida de un riñon que es evaluado por posible transplante a un sujeto, y una medición de analito usada para evaluar el riñon en cuanto a daños preexistentes. Las muestras preferidas son muestras de fluido corporal.

El término "muestra de fluido corporal" como, se usa en la presente se refiere a una muestra de fluido corporal obtenida por el propósito de diagnosis, prognosis, clasificación o evaluación de un sujeto de interés, tal como, un paciente o donador de trasplante. En ciertas modalidades, tal muestra puede ser obtenida por el propósito de determinar el resultado de una condición en marcha o el efecto de un régimen de tratamiento sobre una condición. Muestras de fluido corporal preferidas incluyen sangre, suero, plasma, fluido cerebroespinal, orina, saliva, esputo, y efusiones pleurales. Además, el experimentado en el arte se daría cuenta que ciertas muestras de fluido corporal serían analizadas más fácilmente siguiendo una procedimiento de fraccionamiento o purificación, por ejemplo, separación de sangre entera en componentes de suero o plasma.

El término "diagnosis" como se usa en la presente se refiere a métodos mediante los cuales el experimentado en el arte puede estimar y/o determinar la probabilidad ("una probabilidad") de si un paciente está sufriendo o no de una enfermedad o condición dada. En el caso de la presente invención, "diagnóstico" incluye usar los resultados de un análisis, más preferiblemente un inmunoanálisis, por un marcador de lesión de riñon de la presente invención, opcionalmente junto con otras características clínica, para llegar a una diagnosis (esto es, la presencia o no presencia) de una lesión renal aguda o ARF por el sujeto del cual una muestra fue obtenida y analizada. Que tal diagnosis es "determinada" no se propone implicar que la diagnosis es 100% exacta. Muchos biomarcadores son indicadores de múltiples condiciones . El experimentado en el arte no usa resultados de biomarcador en un vacío informal, sino que más bien los resultados de prueba son usados junto con otros indicios clínicos para llegar a una diagnosis. Así, un nivel de biomarcador medido en un lado de un umbral de diagnóstico predeterminado indica una probabilidad mayor de la presencia de enfermedad en el sujeto en relación con un nivel medido en el otro lado del umbral de diagnóstico predeterminado.

Similarmente, un riesgo de prognóstico señala una probabilidad ("una probabilidad") que un curso o resultado dado se presentará. Un nivel o un cambio en nivel de un indicador de prognósticó, que a su vez está asociado con una probabilidad incrementada de morbidez (por ejemplo, empeoramiento de función renal, ARF futura o muerte) es denominada por ser "indicadora de probabilidad incrementada" de un resultado adverso en un paciente.

Análisis de Marcador En general, los inmunoanálisis involucran poner en contacto una muestra que contiene o sospechosa de contener un biomarcador de interés con por lo menos un anticuerpo que se enlaza específicamente al biomarcador. Una señal es luego generada indicadora de la presencia o cantidad de complejos formados mediante el enlace de polipéptidos en la muestra al anticuerpo. La señal es luego relacionada con la presencia o cantidad del biomarcador en la muestra. Numerosos métodos y dispositivos son bien conocidos para el experimentado en el arte para la detección y análisis de biomarcadores . Véase, por ejemplo, patentes estadounidenses 6,143,576; 6,113,855; 6,019,944; 5,985,579; 5,947,124; 5,939,272; 5,922,615; 5,885,527; 5,851,776; 5,824,799; 5,679,526; 5,525,524; y 5,480,792, y The Immunoassay Handbook, David Wild, ed. Stockton Press, New York, 1994, cada una de las cuales es incorporada en la presente por referencia en su totalidad, incluyendo todas las tablas, figuras y reivindicaciones.

Los dispositivos de análisis y métodos conocidos en el arte pueden utilizar moléculas marcadas en varios formatos de análisis de emparedado, competitivos o no competitivos, para generar una señal que está relacionada con la presencia o cantidad del biomarcador de interés. Formatos de análisis apropiados también incluyen métodos cromatográficos , espectrográficos másicos y de "inmunoabsorción" de proteína. Adicionalmente, ciertos métodos y dispositivos, tales como biodetectores e inmunoanálisis ópticos, pueden .ser empleados para determinar la presencia o cantidad de analitos sin la necesidad de una molécula marcada. Véase, por ejemplo, patentes estadounidenses 5,631,171; y 5,955,377, cada una de las cuales es incorporado en la presente por referencia en su totalidad, incluyendo todas las tablas, figuras y reivindicaciones. El experimentado en el arte también reconoce que instrumentación robótica en los que se incluyen pero no limitados a los sistemas Beckman ACCESS®, Abbott AXSYM®, Roche ELECSYS®, Dade Behring STRATUS® están entre los analizadores de inmunoanálisis que son aptos de efectuar inmunoanálisis. Sin embargo cualesquier inmunoanálisis apropiados pueden ser utilizados, por ejemplo, inmunoanálisis enzima-enlazado (ELISA) , radioinmunoanálisis (RIA) , análisis de enlace competitivo y los semejantes.

Los anticuerpos u otros polipéptidos pueden ser inmovilizados sobre una variedad de soportes sólidos para uso en análisis. Las fases sólidas que pueden ser usadas para inmovilizar miembro de enlace específicos incluyen aquellas desarrolladas y/o usadas como fases sólidas en análisis de enlace en fase sólida. Ejemplos de fases sólidas apropiadas incluyen filtros de membrana, papeles a base de celulosa, perlas (incluyendo partículas poliméricas, de látex y paramagnéticas) , vidrio, plaquetas de silicio, micropartículas , nanopartículas , TentaGeles, AgroGeles, geles de PEGA, geles de SPOCC, y placas de múltiples cavidades. Una banda de análisis podría ser preparada al recubrir el anticuerpo o una pluralidad de anticuerpos en un arreglo sobre soporte sólido. Esta banda podría luego ser sumergida a la muestra de prueba y luego procesada rápidamente por medio de lavados y etapas de detección para generar una señal mensurable, tal como un punto coloreado. Los anticuerpos u otros polipéptidos pueden ser enlazados a zonas específicas de dispositivos de análisis ya sea mediante conjugación directamente a una superficie del dispositivo de análisis o mediante enlace indirecto. En un ejemplo del último caso, anticuerpos u otros polipéptidos pueden ser inmovilizados sobre partículas u otros soportes sólidos y aquel soporte sólido inmovilizado a la superficie del dispositivo.

Los análisis biológicos requieren métodos para detección, y uno de los métodos más comunes para cuantificación de resultados es conjugar un marcador detectable a una proteína o ácido nucleico que tiene afinidad por uno de los componentes en el sistema biológico que es estudiado. Los marcadores detectables pueden incluir moléculas que son por sí mismas detectables (por ejemplo, porciones fluorescentes, marcadores electroquímicos, quelatos de metal, etc.) también como moléculas que pueden ser detectadas indirectamente mediante producción de un producto de reacción detectable (por ejemplo, enzimas tales como peroxidasa de rábano, fosfatasa alcalina, etc.) o mediante una molécula de enlace específica que en sí misma puede ser detectable (por ejemplo, biotina, digoxigenina, maltosa, oligohistidina, 2 , 4-dinitrobenceno, fenilarseniato, ssADN, dsADN, etc.).

La preparación de fases sólidas y conjugados de marcador detectables frecuentemente comprende el uso de agentes de reticulación químicos. Reactivos de reticulación contienen por lo menos dos grupos reactivos y son divididos en general en agentes de reticulación homofuncionales (que contienen grupos reactivo idénticos) y agentes de reticulación heterofuncionales (que contienen grupos reactivos no idénticos) . Los agentes de reticulación homobifuncionales que acoplan por medio de aminas, sulfhidrilos o reaccionan no específicamente están disponibles de muchas fuentes comerciales. Las maleimidas, alquil y aril haluros, alfa-haloacilos y piridil disulfuros son grupos tiol reactivos. Las maleimidas, alquil y aril haluros, y alfa-haloacilos reaccionan con sulfhidrilos para formar enlaces de tiol éter, mientras que los piridil disulfuros reaccionan con sulfhidrilos para producir disulfuros mezclados. El producto de piridil disulfuro es escindible. Los imidoésteres son también muy útiles para la formación de enlaces cruzados de proteína-proteína. Una variedad de agentes de reticulación heterobifuncionales , cada uno que combinan atributos diferentes para conjugación exitosa, están disponibles comercialmente.

En ciertos aspectos, la presente invención provee kits para el análisis de los marcadores de lesión de riñon descritos . El kit comprende reactivos para el análisis de por lo menos una muestra . de prueba que comprende por lo menos un anticuerpo que un marcador de lesión de riñon. El kit puede también incluir dispositivos e instrucciones para efectuar una o más de las correlaciones de diagnóstico y/o prognóstico descritas en la presente. Los kits preferidos comprenderán un par de anticuerpos para efectuar un análisis de emparedado, o una especie marcada para efectuar un análisis competitivo por el analito. Preferiblemente, un par de anticuerpos comprende un primer anticuerpo conjugado a una fase sólida y un segundo anticuerpo conjugado a un marcador detectable, en donde cada uno de los primeros y segundos anticuerpos que se enlazan a un marcador de lesión de riñon. Más preferiblemente cada uno de los anticuerpos son anticuerpos monoclonales. Las instrucciones para uso del kit y efectuar las correlaciones pueden estar en forma de etiquetado, que se refiere a cualquier escrito o grabado que es anexado a o acompaña de otra manera a un kit en cualquier tiempo durante su manufactura, transporte, venta o uso. Por ejemplo, el término etiquetado comprende panfletos de publicidad y folletos, materiales de empaque, instrucciones, casets de audio o video, discos de computadora, también como escritos impresos directamente sobre los kits.

Anticuerpos El término "anticuerpo" como se usa en la presente se refiere a un péptido o polipéptido derivado de, modelado después o codificado sustancialmente por un gen de inmunoglobulina o genes de inmunoglobulina o fragmentos de los mismos, aptos de enlazarse específicamente a un antígeno o epítopo . Véase, por ejemplo Fundamental Immunology, 3rd Edition, W.E. Paul, ed. , Raven Press, N.Y. (1993); Wilson (1994; J. Immunol. Methods 175:267-273; Yarmush (1992) J. Biochem. Biophys . Methods 25:85-97. El término anticuerpo incluye porciones de enlace de antígeno, esto es, "sitios de enlace de antígeno", (por ejemplo, fragmentos, subsecuencias , regiones que determinan la complement reidad (CDR) ) que retienen capacidad para enlazarse al antígeno, incluyendo (i) un fragmento de Fab, un fragmento monovalente que consiste de los dominios de VL, VH, CL y CHl; (ii) un fragmento de F(ab')2, un fragmento bivalente que comprende dos fragmentos de Fab enlazados por un puente de disulfuro en la región de engozne; (iii) un fragmento de Fd que consiste de los dominios de VH y CHl; (iv) un fragmento de Fv que consiste de los dominios de VL y VH de un solo brazo de un anticuerpo, (v) un fragmento de dAb (Ward et al., (1989) Nature 341:544-546), que consiste de un dominio de VH; y (vi) una región que determina la complementareidad (CDR) aislada. Los anticuerpos de una sola cadena también están incluidos por referencia en el término "anticuerpo" .

Los anticuerpos usados en los inmunoanálisis descritos en la presente se enlazan de preferencia específicamente a un marcador de lesión de riñon de la presente invención. El término "se enlaza específicamente" no pretende indicar que un anticuerpo se enlaza exclusivamente a su objetivo propuesto, puesto que, como se indica anteriormente, un anticuerpo se enlaza a cualquier polipéptido que muestra el (los) epítopo(s) al (a los) cuales el anticuerpo se enlaza. Más bien, un anticuerpo "se enlaza específicamente" si su afinidad por su objetivo propuesto es aproximadamente 5 veces mayor cuando se compara con su afinidad por una molécula no objetivo que no muestra el (los) epítopo(s) apropiado (s ) . Preferiblemente, la afinidad del anticuerpo será por lo menos aproximadamente 5 veces, preferiblemente 10 veces, más preferiblemente 25 veces, aún más preferiblemente 50 veces, y más preferiblemente 100 veces o más, mayor por una molécula objetivo que su afinidad por una molécula no objetivo. En modalidades preferidas, los anticuerpos preferidos se enlazan con afinidades de por lo menos aproximadamente 107 M"1, y preferiblemente entre aproximadamente 108 M"1 a aproximadamente 109 M"1, aproximadamente 109 M"1 a aproximadamente 1010 M"1 ó aproximadamente 1010 M"1 a aproximadamente 1012 M"1.

La afinidad es calculada como Kd = kapagado/kencendido (Apagado es la constante de velocidad de disociación, Kencendido es la constante de velocidad de asociación y Kd es la constante de equilibrio) . La afinidad puede ser determinada al equilibrio al medir la fracción enlazada (r) de ligando marcado a varias concentraciones (c) . Los datos son graficados utilizando la ecuación de Scatchard: r/c = K(n-r): en donde r = moles de ligando enlazado/mol de receptor al equilibrio; c = concentración de ligando libre al equilibrio; = constante de asociación al equilibrio; y n = número de sitios de enlace de ligando por molécula receptora. Mediante análisis gráfico, r/c es graficado en el eje Y contra r en el eje X, produciendo así una gráfica de Scatchard. La medición de afinidad de anticuerpo mediante el análisis de Scatchard es bien conocida en el arte. Véase, por ejemplo, van Erp et al., J. Immunoassay 12: 425-43, 1991; Nelson and Griswold, Comput . Methods Programs Biomed. 27: 65-8, 1988.

El término "epítopo" se refiere a un determinante antigénico apto de enlace específico a un anticuerpo. Los epítopos consisten usualmente de agrupaciones de superficie químicamente activa de moléculas tales como aminoácidos o cadenas laterales de azúcar y usualmente tienen características estructurales tridimensionales específicas, también como características de carga específicas. Los epítopos conformacionales y no conformacionales son distinguidos en que el enlace al primero pero no al último se pierde en presencia de solventes desnaturalizantes.

Numerosas publicaciones discuten el uso de tecnología de despliegue de fago para producir y seleccionar bibliotecas de polipéptidos para enlace a un analito seleccionado. Véase, por ejemplo, C irla et al., Proc. Nati. Acad. Sci. USA 87 , 6378 - 82 , 1990 ; Devlin et al., Science 249 , 404- 6 , 1990 , Scott y Smith, Science 249 , 386-88 , 1990 ; y Ladner et al., U.S. Pat. No. 5 , 571 , 698 . Un concepto básico de métodos de despliegue de fago es el establecimiento de una asociación física entre ADN que codifica un polipéptido a ser seleccionado y el polipéptido. Esta asociación física es provista por la partícula de fago, que despliega un polipéptido como parte de un cápsido que encierra el genoma de fago que codifica el polipéptido. El establecimiento de una asociación física' entre polipéptidos y su material genético permite la selección en masa simultánea de números muy grandes de fagos que llevan diferentes polipéptidos. El despliegue de fago de un polipéptido con afinidad a un objetivo enlazado al objetivo y este fago son enriquecidos por selección de afinidad al objetivo. La identidad de polipéptidos desplegados de estos fagos puede ser determinada a partir de sus genomas respectivos. Utilizando estos métodos un polipéptido identificado por tener una afinidad de enlace por un objetivo deseado puede luego ser sintetizado a granel mediante medios convencionales. Véase, por ejemplo, patente estadounidense No. 6,057,098, que es incorporado en la presente en su totalidad, incluyendo todas las tablas, figuras y reivindicaciones.

Los anticuerpos que son generados por estos métodos pueden luego ser seleccionados mediante primera selección en cuanto a afinidad y especificidad con el polipéptido purificado de interés y si se requiere, comparar los resultados con la afinidad y especificidad de los anticuerpos con polipéptidos que se desea excluir del enlace. El procedimiento de selección puede involucrar inmovilización de los polipéptidos purificados en cavidades separadas de placas de microtítulo. La solución que contiene un anticuerpo potencial o grupos de anticuerpos es luego colocada en las cavidades de microtitulación respectivas e incubada por aproximadamente 30 minutos a 2 horas. Las cavidades de microtitulación son luego lavadas y un anticuerpo secundario marcado (por ejemplo, un anticuerpo anti-ratón conjugado a fosfatasa alcalina si los anticuerpos criados son anticuerpos de ratón) es agregado a. las cavidades e incubado por aproximadamente 30 minutos y luego lavado. El sustrato es agregado a las cavidades y una reacción de color aparecerá en donde el anticuerpo al (los) polipéptido (s) inmovilizado (s) están presentes.

Los anticuerpos asi identificados pueden luego ser analizados adicionalmente en cuanto a afinidad y especificidad en el diseño de análisis seleccionado. En el desarrollo de inmunoanálisis por una proteína objetivo, la proteína objetivo purificada actúa como estándar con la cual se puede juzgar la sensibilidad y especificidad del inmunoanálisis utilizando los anticuerpos que han sido seleccionados. Debido que la afinidad de enlace de varios anticuerpos puede diferir; ciertos pares de anticuerpo (por ejemplo, en análisis de emparedado) pueden interferir entre sí estéricamente, etc., el desempeño de análisis de un anticuerpo puede ser una medida más importante que la afinidad y especificidad absoluta de un anticuerpo.

Correlaciones de Análisis El término "correlacionar" como se usa en la presente con referencia al uso de biomarcadores se refiere a comparar la presencia o cantidad del (los) biomarcador (es) en un paciente con su presencia o cantidad en personas que se sabe que sufren de o que se sabe que están en riesgo de una condición dada; o en personas que se sabe que están libres de una condición dada. Frecuentemente, esto toma la forma de comparar un resultado de análisis en forma de una concentración de biomarcador con un umbral predeterminado seleccionado por ser indicador de la presencia o no presencia de una enfermedad o la probabilidad de algún resultado futuro .

La selección de un umbral de diagnóstico involucra, entre otras cosas, consideración de la probabilidad de enfermedad, distribución de diagnosis verdaderas y falsas a diferentes umbrales de prueba, y valores estimativos de las consecuencias de tratamiento (o una falla de tratar) en base a la diagnosis. Por ejemplo, cuando se considera administrar una terapia específica que es altamente eficaz y tiene un bajo nivel de riesgo, pocas pruebas son necesarias debido a que los clínicos pueden aceptar incertidumbre de diagnóstico sustancial. Por otra parte, en situaciones en donde las opciones de tratamiento son menos efectivas y más riesgosas, los clínicos frecuentemente necesitan un grado más alto de certidumbre de diagnóstico. Así, el análisis de costo/beneficio está involucrado en la selección de un umbral de diagnóstico.

Los umbrales apropiados pueden ser determinados de una variedad de maneras. Por ejemplo, un umbral de diagnóstico recomendado para la diagnosis de infarto al miocardio agudo utilizando proponina cardiaca es el 97.5o percentil de la concentración observada en una población normal . Otro método puede ser observar muestras seriales del mismo paciente, en donde un resultado de "referencia" previo es usado para monitorear cambios temporales en un nivel de biomarcador.

Estudios de población pueden también ser usados para seleccionar un umbral de decisión. La característica de operación del receptor ("ROC") surgió del campo de teoría de detección de señal desarrollada durante la Segunda Guerra Mundial para el análisis de imágenes de radar, y el análisis de ROC es frecuentemente usado para seleccionar un umbral apto de definir mejor una subpoblación "enferma" de una subpoblación wno enferma" . Un positivo falso en este caso ocurre cuando la persona prueba positiva, pero realmente no tiene la enfermedad. Un negativo falso, por otra parte, ocurre cuando la persona prueba negativa, sugiriendo que son saludables, cuando realmente tienen la enfermedad. Para trazar una curva de ROC, la proporción de positivos verdaderos (TPR) y proporción de positivos falsos (FPR) son determinados a medida que el umbral de decisión se hace variar continuamente. Puesto que TPR es equivalente con la sensibilidad y FPR es igual a 1 - la especificidad, la gráfica de ROC es algunas veces llamada la gráfica de sensibilidad vs (1 - especificidad). Una prueba perfecta tendrá un área bajo la curva de ROC de 1.0; una prueba aleatoria tendrá un área de 0.5. Se selecciona un umbral para proveer un nivel aceptable de especificidad y sensibilidad.

En este contexto, "enfermo" se propone referirse a una población que tiene una característica (la presencia de una enfermedad o condición o la presencia de algún resultado) y "no enfermo" se propone referirse a una población que carece de la característica. En tanto que un solo umbral de decisión es la aplicación más simple de tal método, múltiples umbrales de decisión pueden ser usados. Por ejemplo, debajo de un primer umbral, la ausencia de enfermedad puede ser asignada con una confianza relativamente alta y por encima de un segundo umbral, la presencia de enfermedad puede también ser asignada con confianza relativamente alta. Entre los dos umbrales se puede considerar indeterminado. Esto se propone ser ejemplar por naturaleza solamente.

Además de comparaciones de umbral, otros métodos para correlacionar resultados de análisis con la clasificación de paciente (presencia o no presencia de enfermedad, probabilidad de un resultado, etc.) incluyen árboles de decisión, conjuntos de regla, métodos Bayesianos y métodos de red neural . Estos métodos pueden producir valores de probabilidad que representan el grado al cual un sujeto pertenece a una clasificación de una pluralidad de clasificaciones.

Medidas de exactitud de prueba pueden ser obtenidas como se describe en Fischer et al., Intensive Care Med. 29: 1043-51, 2003, y usarse para determinar la efectividad de un biomarcador dado. Estas medidas incluyen sensibilidad y especificidad, valores predictivos, proporciones de probabilidad, proporciones de probabilidad de diagnósticos, y áreas de curva de ROC. El área bajo la curva ("AUC") de una gráfica de ROC es igual a la probabilidad de que un clasificador clasificará una instancia positiva escogida aleatoriamente más alta que una negativa escogida aleatoriamente. El área bajo la curva de ROC puede ser considerada como equivalente a la prueba U de Mann-Whitney, que prueba la diferencia mediana entre puntuaciones obtenidas en los dos grupos considerados si los grupos son de datos continuos o la prueba de Wilcoxon de rangos.

Como se discute anteriormente, pruebas apropiadas pueden exhibir uno o más de los siguientes resultados en estas varias medidas: una especificidad mayor de 0.5, preferiblemente por lo menos 0.6, más preferiblemente por lo menos 0.7, todavía más preferiblemente por lo menos 0.8, aún más preferiblemente por lo menos 0.9 y más preferiblemente por lo menos 0.95, con una sensibilidad correspondiente mayor de 0.2, preferiblemente mayor de 0.3, más preferiblemente mayor de 0.4, todavía más preferiblemente por lo menos 0.5, aún más preferiblemente 0.6, todavía más preferiblemente mayor de 0.7, todavía más preferiblemente mayor de 0.8, más preferiblemente mayor de 0.9, y más preferiblemente mayor de 0.95; una sensibilidad mayor de 0.5, preferiblemente por lo menos 0.6, más preferiblemente por lo menos 0.7, todavía más preferiblemente por lo menos 0.8, aún más preferiblemente mayor de 0.2, preferiblemente mayor de 0.3, más preferiblemente mayor de 0.7, todavía más preferiblemente mayor de 0.8, más preferiblemente mayor de 0.9 y más preferiblemente mayor de 0.95; por lo menos 75% de sensibilidad, combinada con por lo menos 75% de especificidad; un área de curva de ROC mayor de 0.5 preferiblemente por lo menos 0.6, más preferiblemente 0.7, todavía más preferiblemente por lo menos 0.8, aún más preferiblemente por lo menos 0.9 y más preferiblemente por lo menos 0.95; una proporción de probabilidades diferente de 1, preferiblemente por lo menos aproximadamente 2 o más o aproximadamente 0.5 o menos , más preferiblemente por lo menos aproximadamente 3 o más o aproximadamente 0.33 o menos, todavía más preferiblemente por lo menos aproximadamente 4 o más o aproximadamente 0.25 o menos, aún más preferiblemente por lo menos aproximadamente 5 o más o aproximadamente 0.2 o menos, y más preferiblemente por lo menos aproximadamente 10 o más o aproximadamente 0.1 o menos; una proporción de probabilidades positiva (calculada como sensibilidad/ ( 1-especificidad) ) mayor que 1, por lo menos 2, más preferiblemente por lo menos 3 , todavía más preferiblemente por lo menos 5, y más preferiblemente por lo menos 10; y una proporción de probabilidad negativa (calculada como (1-sensibilidad) /especificidad) menor de 1, menor o igual a 0.5, más preferiblemente menor o igual a 0.3, y más preferiblemente menor o igual a 0.1 Indicios clínicos adicionales pueden ser combinados con el (los) resultado (s) de análisis de marcador de lesión de riñon de la presente invención. Estos incluyen otros biomarcadores relacionados con el estatus renal. Ejemplos incluyen los siguientes, que citan el nombre de biomarcador común, seguido por el número de entrada Swiss-Prot por aquel biomarcador o su padre: actina (P68133); proteína de enlace de adenosina desaminasa (DPP4, P27487) ; glicoproteína 1 de alfa-1-ácido (P02763); alfa-l-microglobulina (P02760) ; albúmina (P02768); angiotensinogenasa (Renina, ?00797),·, anexina A2 (P07355); beta-glucuronidasa (P08236) ; ?-2-microglobulina (P61679); beta-galactosidasa (P16278); BMP-7 (P18075) ; ptd netriurético del cerebro (proBNP, BNP-32, NTproBNP ; P16860) ; proteína beta de enlace de calcio (SlOO-beta, P04271); anhidrasa carbónica (Q16790); cinasa 2 de caseína (P68400) ; catepsina B (P07858); ceruloplasmina (P00450) ,- clusterina (P10909); complemento C3 (P01024); proteína rica en cisteína (CYR61 , 000622); citocromo C (P99999) ; factor de crecimiento epidérmico (EGF, P01133); endotelina-1 (P05305); fetuína A exosomal (P02765); proteína de enlace de ácido graso, corazón (FABP3, P05413); proteína de enlace de ácido graso, hígado (P07148); ferritina (cadena ligera, P02793; cadena pesada P02794); fructosa-1, 6-bifosfatasa (P09467); GRO-alfa (CXCL1, (P09341); hormona de crecimiento (P01241) ; factor de crecimiento de hepatocito (P14210) ; factor I de crecimiento semejante a insulina (P01343); inmunoglobulina G; cadenas ligeras de inmunoglobulina (Kappa y Lambda) ; interferón gamma (P01308); lisozima (P61626); ínterl.eucina-1 alfa (P01583); interleucina-2 (P60568); interleucina-4 (P60568) ; interleucina-9 (P15248); interleucina-12p40 (P29460); interleucina-13 (P35225); interleucina-16 (Q14005) ; molécula de adhesión de célula Ll (P32004); lactato deshidrogenasa (P00338); leucina aminopeptidasa (P28838); subunidad A-alfa de meprina (Q16819); subunidad A-beta de meprina (Q16820); midkina (P21741) ; IP2-alfa (CXCL2, P19875); MP-2 (P08253); MMP-9 (P14780); Netrina-1 (095631); endopeptidasa neutra (P08473); osteopontina (P10451) ; antígeno 1 papilar renal (RPA1) ; antígeno 2 papilar renal (RPA2); proteína de enlace de retinol (P09455); ribonucleasa; proteína A6 de enlace de calcio S100 ( P06703 ) ;' componente P amiloide de suero (P02743); isoforma intercambiador de sodio/hidrógeno (NHE3, P48764) ; espermidina/espermina Nl-acetiltransferasa (P21673); TGF-Betal (P01137); transferrina (P02787); factor 3 de . Trefoil (TFF3, Q07654 ) ; proteína 4 semejante a Toll (000206) ; proteína total; antígeno de nefritis tubulointersticial (Q9UJW2); uromodulina (proteína de Tamm-Horsfall, P07911) .

Por propósitos de estratificación de riesgos, adiponectina (Q15848); fosfatasa alcalina (P05186); aminopeptidasa N (P15144) ; calbindina D28k (P05937) ; cistatina C (P01034); subunidad 8 de ATPasa de FlFO (P03928) ; gamma-glutamiltransferasa (P19440); GSTa (alfa-glutationa-S-transferasa, P08263); GSTpi (glutationa-S-transferasa P; clase-pi de GST; P09211); IGFBP-1 (P08833); IGFBP-2 (P18065); IGFBP-6 ( P24592 ) ; proteína 1 de membrana integral (Itml, P46977); interleucina-6 (P05231) ; interleucina-8 (P10145) ; interleucina-18 (Q14116); IP-10 (proteína interferón-gamma-inducida de 10 kDa, P02778); IRPR ( IFRDl , 000458); isovaleril-CoA deshidrogenasa (IVD, P26440); I-TAC/CXCLll (014625); gueratina 19 (P08727); Kim-1 (receptor 1 celular de virus de hepatitis A, 043656); L-arginina : glicina amidinotransferasa (P50440) ; leptina (P41159); lipocalina 2 (NGAL, P80188) ; MCP-1 (P13500) ; MIG (monoquina gamma-interferón-inducida Q07325) ; MIP-la (P10147); MIP-3a (P78556); ???-lbeta (P13236) ; MIP-ld (Q16663); NAG (N-acetil-beta-D-glucosaminidasa, P54802); transportador de ion orgánico (0CT2, 015244); osteoprotegerina (014788); prote na P8 (060356); inhibidor 1 activador de plasminógeno (PAI-1, P05121); ProANP(l-98) (P01160); proteina fosfatasa 1-beta (PPI-beta, P62140) ; Rab GDI-beta (P50395); calicreína renal (Q86U61); RTl.B-1 (alfa) cadena de la proteína de membrana integral (Q5Y7A8); miembro 1A de la superfamilia del receptor del factor de necrosis de tumor soluble (sTNFR-I, P19438) ; miembro IB de la subfamilia del receptor de factor de necrosis de tumor soluble (sTNFR-II, P20333); inhibidor de tejido de metaloproteinasas 3 (TIMP-3, P35625); uPAR (Q03405) pueden ser combinados con el (los) resultado (s) de análisis de marcador de lesión de riñon de la presente invención.

Otros indicios clínicos que pueden ser combinados con el (los) resultado (s) de análisis de marcador de lesión de riñon de la presente invención incluyen información demográfica (por ejemplo, peso, sexo, edad, raza), historia médica (por ejemplo, historia de familia, tipo de cirugía, enfermedad preexistente tal como aneurismo, insuficiencia cardiaca congestiva, preeclampsia, eclampsia, diabetes mellitus, hipertensión, enfermedad de arteria coronaria, proteinuria, insuficiencia renal o sepsis, tipo de exposición de toxina tales como NSAID, ciclosporinas, tacrolimus, aminoglicósidos , foscarnet, etilenglicol, hemoglobina, mioglobina, ifosfamida, metales pesados, metotrexato, agentes de contraste radiopacos, o estreptozotocina) , variables clínicas (por ejemplo, presión sanguínea, temperatura, velocidad de respiración) , puntuaciones de riesgo (puntuación APACHE, puntuación PREDICT, puntuación de riesgo de TIMI o UA/NSTEMI, puntuación de riesgo de Framingham) , una medición de proteína total en orina, una velocidad de filtración glomerular, una velocidad de filtración glomerular estimada, una velocidad de producción de orina, una concentración de creatinina en suero o plasma, una medición de antígeno 1 papilar renal (RPA1) ,· una medición de antígeno 2 papilar renal (RPA2); una concentración de creatinina en orina, una excreción fraccional de sodio, una concentración de sodio en orina, una proporción de creatinina en orina a creatinina en suero o plasma, una gravedad específica de orina, una osmolalidad de orina, una proporción de nitrógeno en urea de orina a nitrógeno en urea de plasma, una proporción de BUN de plasma a creatinina, y/o un índice de falla renal calculado como sodio en orina / (creatinina en orina / creatinina en plasma) . Otras medidas de función renal que pueden ser combinadas con el (los) resultado (s) de análisis de marcador de lesión de riñon son descritos posteriormente en la presente y en Harrison's Principies of Internal Medicine, 17th Ed. , McGraw Hill, New York, pages 1741-1830, and Current Medical Diagnosis & Treatment 2008, 47th Ed, McGraw Hill, New York, páginas 785- 815, cada una de las cuales son incorporadas en la presente por referencia en su totalidad.

La combinación de resultados de análisis/índice clínico de esta manera puede comprender el uso de regresión logística multivariada, modelado logarítmico lineal, análisis de red neural, análisis n de m, análisis de árbol de decisión, etc. Esta lista no pretende ser limitante.

Diagnosis de Falla Renal Aguda Como se indica anteriormente, los términos "lesión renal (o de riñon) aguda" y "falla renal (o de riñon) aguda" como se usan en la presente, son definidos en parte en términos de cambios de creatinina en el suero de un valor de referencia. La mayoría de las definiciones de ARF tienen elementos comunes, en los que se incluyen el uso de creatinina en el suero y, frecuentemente, salida de orina. Los pacientes se pueden presentar con disfunción renal sin una medición de referencia disponible de función renal para uso en esta comparación. En tal caso, se puede estimar un valor de creatinina en suero de referencia al suponer que el' paciente tenía inicialmente una GFR normal. La velocidad de filtración glomerular (GFR) es el volumen de fluido filtrado de los papilares glomerulares renales (riñon) a la cápsula de Bowman por tiempo unitario. La velocidad de filtración glomerular (GFR) puede ser calculada al medir cualquier químico que tiene un nivel estable en la sangre y es -filtrado libremente pero ni reabsorbido ni secretado por los ríñones . La GFR es expresada comúnmente en unidades de ml/min: Concentración de orina x flujo de orina Concentración de plasma Al normalizar la GFR al área superficial del cuerpo, se puede suponer una GFR de aproximadamente 75-100 ml/min por 1.73 m2. La velocidad medida por consiguiente es la cantidad de la sustancia en la orina que se originó de un volumen de sangre calculable.

Hay varias técnicas diferentes usadas para calcular o estimar la velocidad de filtración glomerular (GFR o eGFR) . En la práctica clínica, sin embargo, el despeje de creatinina es usado para medir la GFR. La creatinina es producida naturalmente por el cuerpo (la creatinina es un metabolito de creatina, que es encontrada en el músculo) . Es filtrada libremente por el glomérulo, pero también secretada activamente por los túbulos renales en cantidades muy pequeñas de tal manera que el despeje de creatinina sobreestima la GFR real por 10-20%. Este margen de error es aceptable considerando la facilidad con la cual se mide el despeje de creatinina.

El despeje de creatinina (CCr) puede ser calculado si valores para la concentración de creatinina en la orina, velocidad de flujo de orina (V) , y concentración de creatinina en plasma (Per) son conocidos. Puesto que el producto de la concentración de orina y la velocidad de flujo de orina produce la velocidad de excreción de creatinina, también se dice que el despeje de creatinina es su velocidad de excreción (UCrxV) dividida por su concentración en el plasma. Esto es comúnmente representado matemáticamente como: POr Comúnmente, se emprende una recolección de orina de 24 horas, desde la vejiga vacía en una mañana al contenido de la vejiga la mañana siguiente, con una prueba de sangre comparativa tomada entonces : C - Ur Crr x 24 horas volumen PCr x 24x 60min Para permitir la comparación . de resultados entre gente de diferentes tamaños, la CCr es frecuentemente corregida para el área superficial corporal (BSA) y expresada comparada con el tamaño del hombre promedio como ml/min/1.73 m2. Mientras que la mayoría de los adultos tienen una BSA que se aproxima a 1.7 (1.6-1.9), los pacientes extremadamente obesos o esbeltos deben tener su CCr corregida por su BSA real : _ ., Cp. x l.73 CCr - corregida = u La exactitud de una medición de despeje de creatinina (aún cuando la recolección es completa) es limitada debido que a medida que la velocidad de filtración glomerular (GFR) cae la secreción de creatinina es incrementada, y así la elevación de creatinina en el suero es menor. Así, la excreción de creatinina es mucho mayor que la carga filtrada, dando como resultado una sobreestimación potencialmente grande de la GFR (tanto como una diferencia de dos veces) . Sin embargo, por propósitos clínicos es importante determinar si la función renal es estable o está empeorando o mejorando. Esto es determinado frecuentemente al monitorear la creatinina en el suero sola. Como el despeje de creatinina, la creatinina en el suero no serpa un reflejo exacto de GFR en la condición de estado no estable de ARF. No obstante, el grado al cual los cambios de creatinina en el suero de la referencia reflejarán el cambio en GFR. La creatinina en suero es medida rápida y fácilmente y es específica para la función renal.

Por propósitos de determinar la salida de orina en una salida de orina en una base de ml/Kg/hora, la recolección y medición de orina por hora es inapropiada. En el caso en donde, por ejemplo, solamente una salida acumulativa de 24 horas estaba disponible y no se proporcionaron pesos de los pacientes, modificaciones menores de los criterios de salida de orina de RIFLE han sida descritas. Por ejemplo, Bagshaw et al., Nephrol. Dial. Transplant. 23: 1203-1210, 2008, supone un peso del paciente promedio de 70 Kg, y se asigna a los pacientes una clasificación de RIFLE en base a lo siguiente: <35 ml/h (Riesgo), <21 ml/h (Lesión) o <4 ml/h (Falla).

Selección de un Régimen de Tratamiento Una vez que se obtiene una diagnosis, el médico puede seleccionar fácilmente un régimen de tratamiento que es compatible con la diagnosis, tal como iniciar terapia de reemplazo renal, abandonar la administración de compuestos que se sabe que son dañinos al riñon, trasplante de riñon, retardar o evitar procedimientos que se sabe que son dañinos al riñón, modificar la administración diurética, iniciar la terapia dirigida a objetivo, etc. El experimentado en el arte está consciente de tratamientos apropiados para numerosos enfermedades discutidas en relación con los métodos de diagnosis descritos en la presente. Véase, por ejemplo, Merck Manual of Diagnosis and Therapy, 17th Ed. Merck Research Laboratories, Whitehouse Station, NJ, 1999. Además, puesto que los métodos y composiciones descritos en la presente proveen información de prognóstico, los marcadores de la presente invención pueden ser usados para monitorear un curso de tratamiento. Por ejemplo, un estado de prognóstico mejorado o empeorado puede indicar que un tratamiento particular es o no es eficaz.

El experimentado en el arte apreciará fácilmente que la presente invención es bien apta para llevar a cabo los objetos y obtener los fines y ventajas mencionados, también como aquellos inherentes en la misma. Los ejemplos provistos en la presente son representativos de modalidades preferidas, son ejemplares y no pretenden ser limitaciones en cuanto al alcance de la invención.

Ejemplo 1; Recolección de muestras de nefropatía contraste-inducida El objetivo de este estudio de recolección de muestras es recolectar muestras de plasma y orina y datos clínicos de pacientes antes y después de recibir medios de contraste intravasculares . Aproximadamente 250 adultos que sufren procedimientos radiográficos/angiográficos que involucran administración intravascular de medios de contraste yodados son reclutados . Para ser reclutados en el estudio, cada paciente debe cumplir con todos los criterios de inclusión siguientes y ninguno de los siguientes criterios de exclusión: Criterios de inclusión varones y mujeres 18 años de edad o mayores; sufrir un procedimiento radiográfico / angiográfico (tal como una exploración de CT o intervención coronaria) que involucra la administración intravascular de medios de contraste; se espera que sean hospitalizados por lo menos 48 horas después de la administración del contraste; aptos y deseosos de proveer consentimiento por escrito para participación en el estudio y para cumplir con todos los procedimientos de estudio.

Criterios de exclusión receptores de trasplante renal; función renal que se empeora agudamente antes del procedimiento de contraste; que ya reciben diálisis (ya sea aguda o crónica) o en necesidad inminente de diálisis en el reclutamiento; se espera que sufran un procedimiento quirúrgico mayor (tal como que involucra bypass o desvío cardiopulmonar) o un procedimiento de formación de imagen adicional con medios de contraste con riesgos significativos por ataque renal adicional dentro de las 48 horas enseguida de la administración de contraste; participación en un estudio clínico intervencional con una terapia experimental dentro los 30 días previos; infección conocida con virus de inmunodeficiencia humana (VIH) o un virus de hepatitis.

Inmediatamente antes de la primera administración de contraste (y después cualquier hidratación de pre-procedimiento) , una muestra de sangre anti-coagulada de EDTA (10 mi) y una muestra de orina (10 mi) son recolectadas de cada paciente. Luego muestras de sangre y orina son recolectadas 4 (±0.5), 8 (±1), 24 (±2) 48 (±2), y 72 (±2) horas enseguida de la última administración del medio de contraste durante el procedimiento de contraste de índice. La sangre es recolectada vía venipunción directa o vía otro acceso venoso disponible, tal como una envolvente femoral existente, línea venosa central, línea intravenosa periférica o hep-lock. Estas muestras de sangre de estudio son procesadas a plasma en el sitio clínico, congeladas y embarcadas al Astute Medical, Inc., San Diego, CA. Las muestras de estudio de orina son congeladas y embarcadas a Astute Medical, Inc.

La creatinina en el suero es determinada en el sitio inmediatamente antes de la primera administración de contraste (después de cualquier hidratacion de pre-procedimiento) y a 4 (±0.5), 8 (±1), 24 (±2) y 48 (±2)), y 72 (±2) horas enseguida de la última administración de contraste (idealmente al mismo tiempo como las muestras de estudio son obtenidas) . Además, cada estatus de paciente es evaluado a través del día 30 con respecto a mediciones de creatinina en suero y orina adicionales, necesidad de diálisis, estatus de hospitalización y resultados clínicos adversos (incluyendo mortalidad) .

Antes de la administración del contraste, se asigna a cada paciente un riesgo en base a la siguiente determinación: presión sanguínea sistólica <80 mm Hg = 5 puntos; bomba de globo intra-arterial = 5 puntos; insuficiencia cardiaca congestiva (clase III-IV o historia de edema pulmonar) = 5 puntos; edad >75 años = 4 puntos; nivel de hematócrito <39% para hombres, <35% para mujeres = 3 puntos; diabetes = 3 puntos; volumen de medio de contraste = 1 punto por cada 100 mi; nivel de creatinina en el suero >1.5 g/dL = 4 puntos OR estimada GFR 40-60 ml/min/1.73 m2 = 2 puntos, 20-40 ml/min/1.73 m2 = 4 puntos, <20 ml/min/1.73 m2 = 6 puntos. Los riesgos asignados son como sigue: riesgo por CIN y diálisis: 5 o menos puntos totales = riesgo de CIN - 7.5%, riesgo de diálisis -0.04%; 6-10 puntos totales = riesgo de CIN - 14%, riesgo de diálisis - 0.12%; 11-16 puntos totales = riesgo de CIN - 26.1%, riesgo de diálisis - 1.09%; >16 puntos totales = riesgo de CIN - 57.3%, riesgo de diálisis - 12.8%.

Ejemplo 2; Recolección de muestra de cirugía cardiaca El objetivo de este estudio de recolección de muestras es recolectar muestras de plasma y orina y datos clínicos de pacientes antes y después de sufrir cirugía cardiovascular, un procedimiento conocido por ser potencialmente dañino a la función del riñon. Aproximadamente 900 adultos que sufren tal cirugía son reclutados. Para ser reclutados-. én el estudio, cada paciente debe cumplir con todos los siguientes criterios de inclusión y ninguno de los siguientes criterios de exclusión: Criterios de inclusión varones y mujeres de 18 años de edad o mayores; que sufren cirugía cardiovascular; índice Riesgo Predictivo de Toronto/Ottawa por puntuación de riesgo de reemplazo renal de por lo menos 2 (Wijeysundera et al., JAMA 297: 1801-9, 2007); y aptos y tener la voluntad de proveer consentimiento por escrito para participación en el estudio y para cumplir con todos los procedimientos de estudio.

Criterios de exclusión embarazo conocido; trasplante renal previo; empeoramiento agudo de función renal antes del reclutamiento (por ejemplo, cualquier categoría de los criterios de RIFLE) ; ya recibiendo diálisis (ya sea aguda o crónica) o en necesidad inminente de diálisis en el reclutamiento; actualmente reclutado en otro estudio clínico o se espera que sea reclutado en otro estudio clínico dentro de 7 días de cirugía cardíaca que involucra infusión de fármaco o intervención terapéutica por AKI; infección conocido con virus de inmunodeficiencia humana (HIV) o virus de hepatitis.

Dentro de 3 horas antes de la primera incisión (y después de cualquier hidratación de pre-procedimiento) , una muestra de sangre anti-coagulada de EDTA (10 mi) , sangre entera (3 mi), y una muestra de orina (35 mi) son recolectados de cada paciente. Las muestras de sangre y orina son luego recolectadas a 3 (±0.5), 6 (±0.5), 12 (±1), 24 (±2) y 48 (±2) horas enseguida del procedimiento y luego diariamente en los días 3 a 7 si el sujeto permanece en el hospital. La sangre es recolectada vía venipunción directa o vía otro acceso venoso disponible, tal como una envolvente femoral existente, línea venosa central, la intravenosa periférica o hep-lock. Estas muestras de sangre de estudio son congeladas y embarcadas a Astute Medical, Inc., San Diego, CA. Las muestras de orina de estudio son congeladas y embarcadas a Astute Medical, Inc.

Ejemplo 3; Recolección de muestras de sujeto agudamente enfermo El objetivo de este estudio es recolectar muestras de pacientes agudamente enfermos. Aproximadamente 900 adultos que se esperan en el ICU por al menos 48 horas serán reclutados. Para ser reclutados en el estudio, cada paciente debe cumplir con todos los siguientes criterios de inclusión y ninguno de los siguientes criterios de exclusión: Criterios de inclusión varones y mujeres de 18 años de edad o mayores; Población de estudio 1: aproximadamente 300 pacientes que tienen por lo menos uno de: · choque (SBP <90 mmHg y/o necesidad por apoyo de vasosupresor para mantener MAP > 60 mmHg y/o caída documentada en SBP de por lo menos 40 mmHg) ; y sepsis; Población de estudio 2: aproximadamente 300 pacientes que tienen por lo menos uno de: antibióticos IV ordenados en la entrada de orden del médico computarizada (CPOE) dentro de 24 horas del reclutamiento; exposición de medios de contraste dentro de 24 horas del reclutamiento; presión intra-abdominal incrementada con insuficiencia cardiaca descompensada aguda; y trauma severo como la razón primaria para admisión a ICU y probablemente a ser hospitalizado en la ICU por 48 horas después de reclutamiento; Población de Estudio 3: aproximadamente 300 pacientes se espera que sean hospitalizados a través de ajuste de equipo de cuidado agudo (ICU o ED) con un factor de riesgo conocido por lesión renal aguda- (por ejemplo, sepsis, hipotensión/choque (Choque = BP sistólica < 90 mm Hg y/o la necesidad de apoyo de vasosupresor para mantener un MAP > 60 mm Hg y/o una caída documentada en SBP > 40 mm Hg) , trauma mayor, hemorragia o cirugía mayor) ; y/o que se espera ser hospitalizado a la ICU por al menos 24 horas después de reclutamiento .

Criterios de Exclusión embarazo conocido; individuos institucionalizados; trasplante renal previo; empeoramiento agudo de función renal conocido antes del reclutamiento (por ejemplo, .cualquier categoría de criterios RIFLE) ; diálisis recibida (ya sea aguda o crónica) dentro de 5 días antes del reclutamiento o en necesidad inminente de diálisis al tiempo del reclutamiento; infección conocida con virus de inmunodeficiencia humana (VIH) o un virus de hepatitis; cumple solamente con el criterio de inclusión de SBP < 90 mm Hg resumido anteriormente, y no tiene choque en la opinión del médico o investigador principal que atiende.

Después de proveer consentimiento por escrito, una muestra de sangre anti-coagulada de EDTA (10 mi) y una muestra de orina (25-30 mi) son recolectadas de cada paciente. Muestras de sangre y orina son luego recolectadas a 4 (± 0.5) y 8 (± 1) horas después de · la administración de contraste (si es aplicable); a 12 (± 1), 24 (± 2), y 48 (± 2) horas después de reclutamiento, y después de esto diariamente hasta día 7 a día 14 mientras que el sujeto es hospitalizado. La sangre es recolectada vía venipunción directa o vía otro acceso venoso disponible, tal como una envolvente femoral existente, línea venosa central, línea intravenosa periférica o hep-lock. Estas muestras de sangre de son procesadas a plasma en el sitio clínico, congeladas y embarcadas al Astute Medical, Inc., San Diego, CA. Las muestras de orina de estudio son congeladas y embarcadas a Astute Medical, Inc.

Ejemplo 4. Formato de inntunoanálisis Los analitos son medidos utilizando técnicas de inmunoanálisis de enzima de emparedado estándar. Un primer anticuerpo que se enlaza al analito es inmovilizado en cavidades de una microplaca de poliestireno de 96 cavidades. Los estándares de analito y muestras de prueba son pipeteadas a las cavidades apropiadas y cualquier analito presente es enlazado por el anticuerpo inmovilizado. Después de lavado de cualesquier sustancias sin enlazar, un segundo anticuerpo peroxidasa de rábano-conjugado que se enlaza al analito es agregado a las cavidades, formando mediante esto complejos de emparedado con el analito (si está presente) y el primer anticuerpo. Enseguida de un lavado para remover cualquier reactivo anticuerpo-enzima sin enlazar, una solución de sustrato que comprende tetrametilbencidina y peróxido de hidrógeno es agregada a las cavidades. El color se desarrolla en proporción a la cantidad de analito presente en la muestra. El desarrollo del color es detenido y la intensidad de color es medida a 540 nm o 570 nm. Una concentración de analito es asignada a l muestra de prueba por comparación con una curva estándar determinada de los estándares de analito.

Las concentraciones son expresadas en los siguientes ejemplos como sigue: factor de crecimiento epidérmico - pg/ml, complemento C3 - mg/ml, Interleucina-4 - pg/ml, Interleucina-1 alfa - ng/ml, antígeno de nefritis tubulointersticial - g/ml, factor beta-1 de crecimiento transformante - pg/ml, proteína 7 morfogenética de hueso - pg/ml, Osteopontina - pg/ml, Netrina-1 - ng/ml, y proteí a alfa de crecimiento regulado - pg/ml.

Ejemplo 5. Muestras de Donador Aparentemente Saludable y Paciente Enfermo Crónico Muestras de orina humana de donadores sin ninguna enfermedad crónica o aguda ("Donadores Aparentemente Saludables") fueron compradas de dos proveedores (Golden West Biologicals, Inc., 27625 Commerce Center Dr., Temecula, CA 92590 y Virginia Medical Research, Inc., 915 First Colonial Rd.., Virginia Beach, VA 23454). La muestras de orina fueron embarcadas y almacenadas congeladas por lo menos a menos de -202C. Los proveedores proporcionaron información demográfica por los donadores individuales incluyendo género, raza (blanco/negro) , estatus de fumar y edad.

Muestras de orina humana de donadores con varias enfermedades crónicas ("Pacientes con Enfermedad Crónica") incluyendo insuficiencia cardiaca congestiva, enfermedad de arteria coronaria, enfermedad del riñon crónica, enfermedad pulmonar obstructiva crónica, diabetes mellitus e hipertensión fueron compradas de Virginia Medical Research, Inc., 915 First Colonial Rd., Virginia Beach, VA 23454. Las muestras de orina fueron embarcadas y almacenadas congeladas a menos de -20 grados centígrados. El proveedor proporcionó una forma de reporte de casos para cada, donador individual con la edad, género, raza (negro/blanco) , estatus de fumar y uso de alcohol, altura, peso, diagnosis de enfermedad (es ) crónica(s), medicaciones actuales y cirugías previas.

Ejemplo 6. Marcadores de lesión de riñon para evaluar el estatus renal en pacientes en la Etapa 0 de RIFLE Los pacientes de la unidad de cuidado intensivo (ICU) fueron clasificados por estatus de riñon como sin lesión (0) , riesgo de lesión (R) , lesión (I), y falla (F) de acuerdo con la etapa máxima alcanzada dentro de 7 días del reclutamiento tal como se determina por los criterios de RIFLE.

Dos cohortes fueron definidos como (Cohorte 1) pacientes que no avanzaron más allá de la etapa 0, y (Cohorte 2) pacientes que llegaron a la etapa R, I, o F dentro de 10 días. Para tratar fluctuaciones de marcador normales que ocurren dentro de pacientes en la ICU y mediante esto determinar la utilidad para monitorear el estatus de A I, los niveles de marcador fueron medidos en muestras de orina recolectadas para el Cohorte 1. Las concentraciones de marcador fueron medidas en muestras de orina recolectadas de un sujeto a 0, 24 horas y 48 horas antes de llegar a la etapa R, I o F en el Cohorte 2. En las siguientes tablas, el tiempo "previo a la etapa max" representa el tiempo en el cual una muestra es recolectada, en relación con el tiempo en que un paciente particular llega al estado de enfermedad más bajo tal como es definido para aquel cohorte, pegado a tres grupos que son +/-12 horas. Por ejemplo, 24 horas previo para este ejemplo (0 contra R, I, F) significaría 24 hora ( +/- 12 horas) antes de llegar a la etapa R (o I si ninguna muestra en R, o F sin ninguna muestra en R o I) .

Cada marcador fue medido mediante métodos de inmunoanálisis estándar utilizando reactivos de análisis disponibles comercialmente . Una curva característica de operación del receptor (ROC) fue generada para cada marcador y el área debajo de cada curva de ROC (AUC) fue determinada. Los pacientes en el Cohorte 2 fueron también separados de acuerdo con la razón para adjudicación a la etapa R, I, o F al estar basada en las, mediciones de creatinina en el suero (sCr) , estando basadas en la salida de orina (UO) , o estando basadas ya sea en las mediciones de creatinina en suero o salida de orina. Esto es, para aquellos pacientes adjudicados a la etapa R, I, o F en base a las mediciones de creatinina en el suero solo, el cohorte de etapa 0 puede haber incluido pacientes adjudicados a la etapa R, I, o F en base a la salida de orina; para aquellos pacientes adjudicados a la etapa R, I, o F en base a la salida de orina sola, el cohorte de etapa 0 puede haber incluido pacientes adjudicados a la etapa R, I, o F en base a las mediciones de creatinina en suero; y para aquellos pacientes adjudicados a la etapa R, I, o F en base a las mediciones de creatinina en suero o salida de orina, la cohorte de etapa 0 contiene solamente pacientes en la etapa 0 tanto para mediciones de creatinina en suero como para la salida de orina. También, para aquellos pacientes adjudicados a la etapa R, I, o F en base a las mediciones de creatinina en el suero o salida de orina, el método de adjudicación que produjo la etapa RIFLE más severa fue utilizado.

La habilidad para distinguir el cohorte 1 (sujetos que permanecen en la etapa 0 de RIFLE) del Cohorte 2 (sujetos que avanzan a la etapa R, I o F de RIFLE) fue determinada utilizando análisis de ROC. SE es el error estándar de la AUC, n es el número de muestra o pacientes individuales ("pts", como se indica) . Los errores estándar fueron calculados como se describe en Hanley, J. A., y cNeil, B.J., El significado y uso del área debajo de una curva característica de operación de receptor (ROC) . Radiology (1982) 143: 29-36; los valores p fueron calculados con una prueba Z de dos colas . Una AUC < 0.5 es indicadora de un marcador que va a negativo por comparación y una AUC > 0.5 es indicadora de un marcador que va a positivo para la comparación.

Se seleccionaron varias concentraciones de umbral (o "corte"), y la sensibilidad y especificidad asociadas para distinguir el cohorte 1 del cohorte 2 fueron determinadas. La OR es la proporción de probabilidades calculada para la concentración de corte particular y 95% de CI es el intervalo de confianza para la proporción de probabilidades.

Los resultados de estos tres análisis para varios marcadores de la presente invención son presentados en la Figura 1.

Ejemplo 7. Marcadores de lesión de riñon para evaluar estatus de riñon en pacientes en Etapas 0 y R de RIFLE Los pacientes fueron clasificados y analizados como se describe en el Ejemplo 6. Sin embargo, los pacientes que llegaron a la etapa R pero no avanzaron a la etapa I o F fueron agrupados con pacientes de la etapa 0 sin lesión en el Cohorte 1. El Cohorte 2 en este ejemplo incluía solamente pacientes que avanzaron a la etapa I o F. Las concentraciones de marcador en las muestras de orina fueron incluidas para el Cohorte 1. Las concentraciones de marcador en las muestras de orina recolectadas dentro de 0, 24 y 48 horas para llegar a la etapa I o F fueron incluidas para el Cohorte 2.

La habilidad para distinguir el cohorte 1 (sujetos que permanecen en la etapa 0 o R de RIFLE) del Cohorte 2 (sujetos que avanzan a la etapa I o F de RIFLE) fue determinada utilizando análisis de ROC.

Varias concentraciones de umbral (o "corte") fueron seleccionadas y la sensibilidad y especificidad asociadas para distinguir el cohorte. 1 del cohorte 2 fueron determinadas.. OR es la proporción de probabilidades calculada para la concentración de corte particular y 95% de CI es el intervalo de confianza para la proporción de probabilidades .

Los resultados de estos tres análisis para varios marcadores de la presente invención son presentados en la Figura 2.

Ejemplo 8. Marcadores de lesión de riñon para evaluar el estatus renal en pacientes que avanzan de la Etapa R a Etapas I y F Los pacientes fueron clasificados y analizados como se describe en el Ejemplo 6, pero solamente aquellos pacientes que llegaron a la Etapa R fueron incluidos en este ejemplo. El Cohorte 1 contenía pacientes que llegaron a la etapa R pero no avanzaron a la etapa I o F dentro de 10 días, y el Cohorte 2 incluía solamente pacientes que avanzaron a la etapa I o F. Las concentraciones de marcador en muestras de orina recolectadas dentro de 12 horas de llegar a la etapa R fueron incluidas en el análisis tanto para el Cohorte 1 como el Cohorte 2.

La habilidad para distinguir el cohorte 1 (sujetos que permanecen en la etapa R de RIFLE) del Cohorte 2 (sujetos que avanzan a la etapa I o F de RIFLE) fue determinada utilizando análisis de ROC.

Varias concentraciones de umbral (o "corte") fueron seleccionadas, y la sensibilidad y especificidad asociadas para distinguir el cohorte 1 del cohorte 2 fueron determinadas. OR es la proporción de probabilidades calculada para la concentración de corte particular, y 95% de CI es el intervalo de confianza para la proporción de probabilidades.

Los resultados de estos tres análisis para varios marcadores de la presente invención son presentados en la Figura 3.

Ejemplo 9. Marcadores de lesión de riñon para evaluar estatus renal en pacientes en la Etapa 0 de RIFLE Los pacientes fueron clasificados y analizados como se describe en el Ejemplo 6. Sin embargo, los pacientes que llegaron a la etapa R o l pero no avanzaron a la etapa F fueron eliminados del análisis. Los pacientes de la etapa 0 sin lesión están incluidos en el Cohorte 1. El Cohorte 2 en este ejemplo incluía solamente pacientes que avanzaron a la etapa F. Las concentraciones de marcador máximas en las muestras de orina fueron incluidas para cada paciente en el Cohorte 1. Las concentraciones de marcador máximas en las muestras de orina recolectadas dentro de 0, 24 y 48 horas llegar a la etapa F fueron incluidas para cada paciente en el Cohorte 2.

La habilidad para distinguir el cohorte 1 (sujetos que permanecen en la etapa 0 o R de RIFLE) del Cohorte 2 (sujetos que avanzan a la etapa I o F de RIFLE) fue determinada utilizando el análisis de ROC.

Varias concentraciones de umbral (o "corte") fueron seleccionadas, y la sensibilidad y especificidad asociadas para distinguir el cohorte 1 del cohorte 2 fueron determinadas. OR es la proporción de probabilidades calculada para la concentración de corte particular, y 95% de CI es el intervalo de confianza para la proporción de probabilidades.

Los resultados de estos tres análisis para varios marcadores de la presente invención son presentados en la Figura 4.

Ejemplo 10. Marcadores de lesión de riñon para evaluar el estatus renal en pacientes en la Etapa 0 de RIFLE Pacientes de la unidad de cuidado intensivo (ICU) fueron clasificados por estatus de riñon como sin lesión (0), riesgo de lesión (R) , lesión (I) y falla (F) de acuerdo con la etapa máxima alcanzada dentro de 7 días del reclutamiento como se determina por los criterios de RIFLE.

Dos cohortes fueron definidos como (Cohorte 1) pacientes que no avanzaron más allá de la etapa 0, y (Cohorte 2) pacientes que llegaron a la etapa R, I, o F dentro de 10 días. Para tratar fluctuaciones de marcador normales que ocurren dentro de pacientes en la ICU y mediante esto determinar la utilidad para monitorear el estatus de AKI, los niveles de marcador fueron medidos en el componente de plasma de muestras de sangre recolectadas para el Cohorte 1. Las concentraciones de marcador fueron medidas en el componente de plasma de muestras de sangre recolectadas de un sujeto a 0, 24 horas y 48 horas antes de llegar a la etapa R, I o F en el Cohorte 2. En las siguientes tablas, el tiempo . "antes de etapa máxima" representa el tiempo al cual una muestra es recolectado, en relación con el tiempo en que un paciente particular llega al estado de enfermedad más bajo como es definido para aquel cohorte, enlazado a tres grupos que están +/- 12 horas. Por ejemplo, 24 horas antes para este ejemplo (0 contra R, I, F) significaría 24 horas ( +/- 12 horas) antes de llegar a la etapa R (o I si ninguna muestra en R o F sin ninguna muestra en R o I) .

Cada marcador fue medido mediante métodos de inmunoanálisis estándar utilizando reactivos de análisis disponibles comercialmente . Una curva característica de operación del receptor (ROC) fue generada para cada marcador y el área debajo de cada curva de ROC (AUC) fue determinada. Los pacientes en el Cohorte 2 fueron también separados de acuerdo con la razón para adjudicación a etapa R, I o F al estar basada en las mediciones de creatinina en el suero (sCr) , estar basada en la salida de orina (UO) , o estar basada ya sea en mediciones de creatinina en suero o salida de orina. Esto es, para aquellos pacientes adjudicados a la etapa R, I o F en base a las mediciones de creatinina en el suero sola, el cohorte de etapa 0 puede haber incluido - pacientes adjudicados a la etapa R, I o F en base a la salida de orina; para aquellos pacientes adjudicados a la etapa R, I o F en base a la salida de orina sola, el cohorte de etapa 0 puede haber incluido pacientes adjudicados a la etapa R, I o F en base a las mediciones de creatinina en el suero; y para aquellos pacientes adjudicados a la etapa R, I o F en base a las mediciones de creatinina en suero o salida de orina, el cohorte de etapa 0 contiene solamente pacientes en la etapa 0 tanto para mediciones de creatinina en suero y salida de orina. También, para aquellos pacientes adjudicados a la etapa R, I o F en base a las mediciones de creatinina en suero o salida de orina, se usó el ¦ método de .adjudicación que produjo la etapa de RIFLE más sever .

La habilidad para distinguir el cohorte 1 (sujetos que permanecen en la etapa 0 de RIFLE) del Cohorte 2 (sujetos que avanzan a la etapa R, I o F de RIFLE) fue determinada utilizando análisis de ROC. SE es el error estándar del AUC, n es el número de muestra o pacientes individuales ("pts", como se indica) . Los errores estándar fueron calculados como se describe en Hanley, J. A., y McNeil, B.J., The meaning and use of the área under a receiver operating characteristic (ROC) curve. Radiology (1982) 143: 29-36; los valores p fueron calculados con una prueba Z de dos colas . Una AUC < 0.5 es indicadora de un marcador que va a negativo para la comparación, y una AUC > 0.5 es indicadora de un marcador que va a positivo para la comparación.

Varias concentraciones de umbral (o "corte") fueron seleccionadas y la sensibilidad y especificidad asociadas para distinguir el cohorte 1 del cohorte 2 fueron determinadas. OR es la proporción de probabilidades calculadas para la concentración de corte particular, y el 95% de CI es el intervalo de confianza para la proporción de probabilidades .

Los resultados de estos tres análisis para varios marcadores de la presente invención son presentados en la Figura 5.

Ejemplo 11. Marcadores de lesión de riñon para evaluar el estatus renal en pacientes en las Etapas 0 y R de RIFLE Los pacientes fueron clasificados y analizados como se describe en el Ejemplo 10. Sin embargo, los pacientes que llegaron a la Etapa R pero no avanzaron a la Etapa I o F fueron agrupados con pacientes de la Etapa 0 sin lesión en la Cohorte 1. La Cohorte 2 en este Ejemplo incluía solamente pacientes que avanzaron a Etapa I o F. Las concentraciones de marcador en el componente de plasma de las muestras de sangre fueron incluidas para la Cohorte 1. Las concentraciones de marcador en el componente de plasma de muestras de sangre recolectadas en 0, 24 y 48 horas de cada Etapa I o F fueron incluidas para la Cohorte 2.

La habilidad para distinguir la Cohorte 1 (sujetos que permanecen en la Etapa 0 o R de RIFLE) de la Cohorte 2 (sujetos que avanzan a la Etapa I o F de RIFLE) fue determinada utilizando el análisis de ROC.

Varias concentraciones de umbral (o "corte") fueron seleccionadas y la sensibilidad y especificidad asociadas para distinguir la Cohorte 1 de la Cohorte 2 fueron determinadas . OR es ' la proporción de probabilidades calculadas para la concentración de corte particular y 95% de CI es el intervalo de confianza para la proporción de probabilidades .

Los resultados de estos tres análisis para estos marcadores de la presente invención son presentados en la Figura 6.

Ejemplo 12. Marcadores de lesión de riñon para evaluar estatus renal en pacientes que avanzan de la Etapa R a Etapas I y F.

Los pacientes fueron clasificados y analizados como se describe en el Ejemplo 10, pero solamente aquellos pacientes que llegaron a la Etapa R fueron incluidos en este Ejemplo. La Cohorte 1 conten a pacientes que llegaron a la Etapa R pero no avanzaron a la Etapa I o F dentro de diez días y la Cohorte 2 incluía solamente pacientes que avanzaron a la Etapa I o F. Concentraciones de marcador en el componente de plasma de las, muestras de sangre recolectadas dentro de 12 horas de llegar a la Etapa R fueron incluidas en el análisis tanto para la Cohorte 1 como para la Cohorte 2.

La habilidad para distinguir la Cohorte 1 (sujetos que permanecen en la Etapa R de RIFLE) de la Cohorte 2 (sujetos que avanzan a la Etapa I o F de RIFLE) fue determinada utilizando análisis de ROC.

Varias concentraciones de umbral (o "corte") fueron seleccionadas y la sensibilidad y especificidad asociadas para distinguir la Cohorte 1 de la Cohorte 2 fueron determinadas. OR es la proporción de probabilidades calculada para la concentración de corte particular y 95% de CI es el intervalo de confianza para la proporción de probabilidades.

Los resultados de estos tres análisis para varios marcadores de la presente invención son presentados en la Figura 7.

Ejemplo 13. Marcadores de lesión de riñon para evaluar el estatus renal en pacientes en Etapa 0 de RIFLE Los pacientes fueron clasificados y analizados como se describe en el Ejemplo 10. Sin embargo, los pacientes que llegaron a la Etapa R o l que no avanzaron a la Etapa F fueron eliminados del análisis. Los pacientes de la Etapa 0 sin lesión están incluidos en la Cohorte 1. La Cohorte 2 en este Ejemplo incluía solamente pacientes que avanzaron a la Etapa F. Las concentraciones de marcador máximas en el componente de plasma de las muestras de sangre fueron incluidas de cada paciente en el Cohorte 1. Las concentraciones de marcador máximas en el componente de plasma de muestra de sangre recolectada en 0, 24 y 48 horas de llegar a la Etapa F fueron incluidas de cada paciente en la Cohorte 2.

La habilidad para distinguir la Cohorte 1 (sujetos que permanecen en la Etapa 0 o R de RIFLE) de la Cohorte 2 (sujetos que avanzan a la Etapa I o F de RIFLE) fue determinada utilizando análisis de ROC.

Varias concentraciones de umbral (o "corte") fueron seleccionadas y la sensibilidad y especificidad asociadas para distinguir la Cohorte 1 de la Cohorte 2 fueron determinadas. OR es la proporción de probabilidades calculada para la concentración de corte particular y 95% de CI es el intervalo de confianza para la proporción de probabilidades.

Los resultados de estos tres análisis para varios marcadores de la presente invención son presentados en la Figura 8.

En tanto que la invención ha sido descrita y ejemplificada en detalle suficiente para aquellos experimentados en el arte la fabriquen y la usen, varias alternativas, modificaciones y mejoras deben ser evidentes sin desviarse del alcance y el espíritu de la invención. Los ejemplos provistos en la presente son representativos de modalidades preferidas, son ejemplares y no pretenden ser limitaciones en cuanto al alcance de la invención. Modificaciones en las mismas y otros usos se representarán a aquellos experimentados en el arte. Estas modificaciones están abarcadas en el espíritu de la invención y son definidas por el alcance de las reivindicaciones .

Será fácilmente evidente para la persona experimentada en el arte que se pueden efectuar varias sustituciones y modificaciones a la invención revelada en la presente sin desviarse del espíritu y alcance de la invención.

Todas las patentes y publicaciones mencionadas en esa especificación son indicadoras de los niveles de aquellos de habilidad ordinaria en el arte con el cual la invención es concerniente. Todas las patentes y publicaciones son incorporadas en la presente por referencia a- la misma extensión como si cada publicación fuera indicada específica e individualmente para ser incorporada por referencia.

La invención descrita de manera ilustrativa en la presente se puede llevar a la práctica apropiadamente en ausencia de cualquier elemento o elementos, limitación o limitaciones que no son reveladas específicamente en la presente. Así, por ejemplo, en cada instancia en la presente cualquiera de los términos "que comprende", "que consiste esencialmente de" y "que consiste de" pueden ser reemplazados ya sea con unos u otros de los otros dos términos. Los términos y expresiones que han sido empleados son usados como términos de descripción y no como limitación y no hay ninguna intención que en el uso de tales términos y expresiones excluir cualesquier diferentes de los elementos mostrados y descritos o porciones de los mismos, si no que se reconoce que varias modificaciones son posibles dentro del alcance de la invención reivindicada. Así, se dan a entender que aunque la presente invención ha sido revelada específicamente por modalidades preferidas y elementos opcionales, se puede recurrir a modificaciones y variaciones de conceptos revelados en la presente por aquellos experimentados en el arte y que se considera que tales modificaciones y variaciones están dentro del alcance de la invención como se define por las reivindicaciones adjuntas.

Otras modalidades son resumidas por las siguientes reivindicaciones.

Claims (28)

REIVINDICACIONES

1. Un método para evaluar el estatus renal en un sujeto, caracterizado porque comprende: efectuar uno o más análisis configurados para detectar un marcador de lesión de riñon seleccionado del grupo que consiste de factor de crecimiento epidérmico, complemento C3 , lnterleucina-4 , Interleucina-1 alfa, antígeno de nefritis tubulointersticial , factor beta-1 de crecimiento transformante, proteína 7 morfogenética del hueso, Osteopontina, Netrina-1 y proteína alfa de crecimiento regulado en una muestra de fluido corporal obtenida del sujeto para proveer uno o más resultados de análisis; y correlacionar el (los) resultado (s) de análisis con uno o más de estratificación de riesgos, escalamiento, prognosis, clasificación y monitoreo del estatus renal del sujeto .

2. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque dicha etapa de correlación comprende asignar una probabilidad de uno o más cambios futuros en estatus renal al sujeto en base al (los) resultado (s) de análisis .

3. El método de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque el uno o más cambios futuros en estatus renal comprenden uno o más de una lesión futura a función renal, función renal reducida futura, mejora futura en función renal, y falla renal aguda futura (ARF) .

. El método de conformidad con la reivindicación 3 , caracterizado porque el (los) resultado (s) de análisis comprende (n) uno o más de: (i) una concentración medida de factor del crecimiento epidérmico, (ii) una concentración medida de complemento C3, (iii) una concentración medida de Interleucina-4, (iv) una concentración medida de Interleucina-1 alfa, (v) una concentración medida de antígeno de nefritis tubulointersticial , (vi) una concentración medida de factor beta-1 de crecimiento transformante, (vii) una concentración medida de proteína 7 morfogenética de hueso, (viii) una concentración medida de Osteopontina, (ix) una concentración medida de Netrina-1, o (x) una concentración medida de proteína alfa de crecimiento regulado, y dicha etapa de correlación comprende, para cada resultado de análisis, comparar dicha concentración medida con una concentración de umbral, y para un marcador que va a positivo, asignar una probabilidad incrementada de sufrir una lesión futura a la función renal, función renal reducida futura, ARF futura, o una mejora futura en función renal al sujeto cuando la concentración medida está por encima del umbral, en relación con una probabilidad asignada cuando la concentración medida está por debajo del umbral o asignar una probabilidad disminuida de sufrir una lesión futura a la función renal, función renal reducida futura, ARF futura, o una mejora futura en función renal al sujeto, cuando la concentración medida está por debajo del umbral, en relación con una probabilidad asignada cuando la concentración medida está por encima del umbral, o para un marcador que va a negativo, asignar una probabilidad incrementada de sufrir una lesión futura a función renal, función renal reducida futura, ARF futura, o una mejora futura en función renal al sujeto cuando la concentración medida está por debajo del umbral, en relación con una probabilidad asignada cuando la concentración medida está por encima del umbral o asignar una probabilidad disminuida de sufrir una lesión futura a la función renal, función renal reducida futura, ARF futura, o una mejora futura en la función renal al sujeto, cuando la concentración medida está por encima del umbral, en relación con una probabilidad asignada cuando la concentración medida está por debajo del umbral.

5. El método de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque el uno o más cambios futuros en estatus renal comprenden un resultado clínico relacionado con una lesión renal sufrida por el sujeto.

6. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el (los) resultado (s) de análisis comprende (n) uno o más de: (i) una concentración medida del factor de crecimiento epidérmico, (ii) una concentración medida de complemento C3 , (iii) una concentración medida de Interleucina-4 , (iv) una concentración medida de Interleucina-1 alfa, (v) una concentración medida de antígeno de nefritis tubulointersticial , (vi) una concentración medida de factor beta-1 de crecimiento transformante, (vii) una concentración medida de proteína 7 morfogenética del hueso, (viii) una concentración medida de Osteopontina, etrina-1, o (ix) una concentración medida de Netrina-1, o (x) una concentración medida de proteína alfa de crecimiento regulado, y dicha etapa de correlación comprende, para cada resultado de análisis, comparar dicha concentración medida con una concentración de umbral, y para un marcador que va a positivo, asignar una probabilidad incrementada de lesión de riñon aguda subsecuente, etapa de empeoramiento de AKI, mortalidad, necesidad de terapia de reemplazo renal, necesidad de abandono de toxinas renales, enfermedad renal de etapa final, insuficiencia cardiaca, accidente cerebrovascular, infarto al miocardio, o enfermedad del riñon crónica al sujeto, cuando la concentración medida está por encima del umbral, en relación con una probabilidad asignada cuando la concentración medida está por debajo del umbral, o asignar una probabilidad disminuida de lesión de riñon aguda subsecuente, etapa de empeoramiento de AKI, mortalidad, necesidad de terapia de reemplazo renal, necesidad de abandono de toxinas renales , enfermedad renal de etapa final, insuficiencia cardiaca, accidente cerebrovascular, infarto al miocardio, o enfermedad del riñon crónica al sujeto cuando la concentración medida está por debajo del umbral, en relación con una probabilidad asignada cuando la concentración medida está por encima del umbral, o para un marcador que va a negativo, asignar una probabilidad incrementada de lesión de riñon aguda subsecuente, etapa de empeoramiento de AKI, mortalidad, necesidad de terapia de reemplazo renal, necesidad de abandono de toxinas renales, enfermedad renal de etapa final, insuficiencia cardiaca, accidente cerebrovascular, infarto al miocardio, o enfermedad del riñon crónica al sujeto cuando la concentración medida está por debajo del umbral, en relación con una probabilidad asignada cuando la concentración medida está por encima del umbral, o asignar una probabilidad disminuida de lesión de riñon aguda subsecuente, etapa de empeoramiento de AKI, mortalidad, necesidad de terapia de reemplazo renal, necesidad de abandono de toxinas renales, enfermedad renal de etapa final, insuficiencia cardiaca, accidente cerebrovascular, infarto al miocardio, o enfermedad del riñon crónica al sujeto cuando la concentración medida está por encima del umbral, en relación con una probabilidad asignada cuando la concentración medida está por debajo del umbral.

7. El método de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque la probabilidad de uno o más cambios futuros en estatus renal es que un evento de interés es más o menos probable que ocurra dentro de 30 días del tiempo al cual la muestra de fluido corporal es obtenida del sujeto.

8. El método de conformidad con la reivindicación 7, caracterizado porque la probabilidad de uno o más cambios futuros en estatus renal es que un evento de interés es más o menos probable que ocurra dentro de un período seleccionado del grupo que consiste de 21 días, 14 días, 7 días, 5 días, 96 horas, 72 horas, 48 horas, 36 horas, 24 horas y 12 horas.

9. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el sujeto es seleccionado para evaluación de estatus renal en base a la pre-existencia en el sujeto de uno o más factores de riesgo conocidos por ARF prerenal, renal intrínseca o postrenal.

10. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el sujeto es seleccionado para evaluación de estatus renal en base a una diagnosis existente de uno o más de insuficiencia cardiaca congestiva, preeclampsia, eclampsia, diabetes mellitus, hipertensión, enfermedad de arteria coronaria, proteinuria, insuficiencia renal, filtración glomerular por debajo del intervalo normal, cirrosis, creatinina de suero por encima del intervalo normal, sepsis, lesión a la función renal, función renal reducida o ARF, en base a sufrir o haber sufrido cirugía vascular mayor, desviación o bypass de arteria coronaria, u otra cirugía cardíaca, o en base a exposición a NSAID, ciclosporinas , tacrolimus, aminoglicósidos , foscarnet, etilenglicol, hemoglobina, mioglobina, ifosfamida, metales pesados, metotrexato, agentes de contraste radiopacos o estreptozotocina .

11. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque dicha etapa de correlación comprende asignar una diagnosis de la presencia o no presencia de uno o más de una lesión a la función renal, función renal reducida, o ARF al sujeto en base al (los) resultado (s) de análisis.

12. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque dicha etapa de correlación comprende determinar si una función renal está o no mejorando o empeorando en un sujeto que ha sufrido de una lesión a la función renal, función renal reducida o ARF en base al (los) resultado (s) de análisis.

13. El método de conformidad con la reivindicación 12, caracterizado porque el (los) resultado (s) de análisis comprende (n) uno o más de: (i) una concentración medida de factor del crecimiento epidérmico, (ii) una concentración medida de complemento C3 , (iii) una concentración medida de Interleucina-4, (iv) una concentración medida de Interleucina-1 alfa, (v) una concentración medida de antigeno de nefritis tubulointersticial , (vi) una concentración medida de factor beta-1 de crecimiento transformante, (vii) una concentración medida de prote na 7 morfogenética del hueso, (viii) una concentración medida de Osteopontina, Netrina-1, o (ix) una concentración medida de Netrina-1, o (x) una concentración medida de proteína alfa de crecimiento regulado, dicha etapa de correlación comprende, para cada resultado de análisis, comparar dicha concentración medida con ' una concentración de umbral, y para un marcador que va a positivo, asignar un empeoramiento de la función renal al sujeto cuando la concentración medida está por encima del -umbral, o asignar una mejora de la función renal cuando la concentración medida está por debajo del umbral, o para un marcador que va a negativo, asignar un empeoramiento de la función renal al sujeto cuando la concentración medida está por debajo del umbral, o asignar una mejora de la función renal cuando la concentración medida está por encima del umbral .

14. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque dicho método es un método de asignar un riesgo de la presencia o no presencia futura de una lesión a la función renal en el sujeto.

15. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque dicho método es un método de asignar un riesgo de la presencia o no presencia futura de función renal reducida en dicho sujeto.

16. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque dicho método es un método para asignar un riesgo de la presencia o no presencia futura de falla renal aguda en dicho sujeto.

17. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque dicho método es un método para asignar un riesgo de la presencia o no presencia futura de necesidad de terapia de reemplazo renal en dicho sujeto.

18. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque dicho método es un método para asignar un riesgo de la presencia o no presencia futura de necesidad de transplante renal en dicho sujeto.

19. El método de conformidad con la reivindicación 4, caracterizado porque el uno o más cambios futuros en estatus renal comprenden uno o más de una lesión futura a la función renal, función renal reducida futura, mejora futura en función renal, y falla renal aguda futura (A F) dentro de 72 horas del tiempo al cual la muestra de fluido corporal es obtenida.

20. El método de conformidad con la reivindicación 4, caracterizado porque . el uno o más cambios futuros en estatus renal comprende uno o más de una lesión futura a la función renal, función renal reducida futura, mejora futura en función renal, y falla renal aguda futura (ARF) dentro de 48 horas del tiempo al cual la muestra de fluido corporal es obtenida.

21. El método de conformidad con la reivindicación 4, caracterizado porque el uno o más cambios futuros en estatus renal comprende uno o más de una lesión futura a la función renal, .función renal reducida futura, mejora futura en función renal, y falla renal aguda futura (ARF) dentro de 72 horas del tiempo al cual la muestra de fluido corporal es obtenida.

22. El método de conformidad con la reivindicación 4, caracterizado porque el uno o más cambios futuros en estatus renal comprende uno o más de una lesión futura a la función renal, función renal reducida futura, mejora futura en función renal, y falla renal aguda futura (ARF) dentro de 48 horas del tiempo al cual la muestra de fluido corporal es obtenida.

23. El método de conformidad con la reivindicación 4, caracterizado porgue el uno o más cambios futuros en estatus renal comprende uno o más de una lesión futura a la función renal, función renal reducida futura, mejora futura en función renal, y falla renal aguda futura (ARF) dentro de 24 horas del tiempo al cual la muestra de fluido corporal es obtenida.

24. El uso de uno o más marcadores de lesión de riñon caracterizados porque son seleccionados del grupo que consiste de factor de crecimiento epidérmico, complemento C3 , lnterleucina-4 , lnterleucina-1 alfa, antígeno de nefritis tubulointersticial, factor beta-1 de crecimiento transformante, proteína 7 morfogenética del hueso, Osteopontina, Netrina-1, y proteína alfa de crecimiento regulado por uno o más de estratificación de riesgos, escalamiento, prognosis, clasificación y monitoreo del estatus renal de un sujeto..

25. El uso de uno o más marcadores de lesión de riñon caracterizados porque son seleccionados del grupo que consiste de factor de crecimiento epidérmico, complemento C3, Interleucina-4 , Interleucina-1 alfa, antígeno de nefritis tubulointersticial, factor beta-1 de crecimiento transformante, proteína 7 morfogenética del hueso, Osteopontina, Netrina-1, y proteína alfa de crecimiento regulado en cuanto a uno o más de estratificación de riesgos, escalamiento, prognosis, clasificación y monitoreo del estatus renal de un sujeto que sufre de una lesión renal aguda.

26. El método de conformidad con la reivindicación 6, caracterizado porque la probabilidad incrementada o disminuida de lesión de riñon aguda subsecuente, etapa de empeoramiento de A I, mortalidad, necesidad de terapia de reemplazo renal, necesidad de abandono de toxinas renales, enfermedad renal de etapa final, insuficiencia cardiaca, accidente cerebrovascular , infarto al miocardio, o enfermedad del riñon crónica asignada al sujeto una probabilidad de que un evento de interés es más o menos probable que ocurra dentro de 30 días del tiempo al cual la muestra de fluido corporal es obtenida del sujeto.

27. El método de conformidad con la reivindicación 6, caracterizado porque la probabilidad incrementada o disminuida de lesión de riñon aguda subsecuente, etapa de empeoramiento de AKI, mortalidad, necesidad de terapia de reemplazo renal, necesidad de abandono de toxinas renales, enfermedad renal de etapa final, insuficiencia cardiaca, accidente cerebrovascular, infarto al miocardio, o enfermedad del riñon crónica asignada al sujeto es una probabilidad de que un evento de interés es más o menos probable que ocurra dentro de 72 horas del tiempo al cual la muestra de fluido corporal es obtenida del sujeto.

28. El método de conformidad con la reivindicación 6, caracterizado porque la probabilidad incrementada o disminuida de lesión de riñon aguda subsecuente, etapa de empeoramiento de AKI , mortalidad, necesidad de terapia de reemplazo renal, necesidad de abandono de toxinas renales, enfermedad renal de etapa final, insuficiencia cardiaca, accidente cerebrovascular, infarto al miocardio, o enfermedad del riñon crónica asignada al sujeto es una probabilidad de que un evento de interés es más o menos probable que ocurra dentro de 24 horas del tiempo al cual la muestra de fluido corporal es obtenida del sujeto.