MX2011003961A - Tieno[2,3-d]pirimidinas sustituidas con fenilo y heteroarilo y su uso como antagonistas de receptores de adenosina a2a. - Google Patents

Abstract

La presente invención se refiere a una novedosa tieno[2,3-d]pirimidina, fórmula (Z), y a sus usos terapéuticos y profilácticos, en donde X, R1 y R2 se definen en la especificación; los trastornos que se tratan y/o previenen incluyen la enfermedad de Parkinson. (Ver fórmula (Z)).

Description

TIENOr2.3-D1PIRIMIDlNAS SUSTITUIDAS CON FENILO Y HETEROARILO Y SU USO COMO ANTAGONISTAS DE RECEPTORES PE ADENOSINA A2A CAMPO DE LA INVENCIÓN La presente invención se refiere a una arilindeno pirimidina novedosa y a sus usos terapéuticos y profilácticos. Los trastornos que se tratan y/o previenen incluyen trastornos neurodegenerativos y motores que se mejoras por la antagonización de los receptores de adenosina A2a.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN Receptores de adenosina A2a. La adenosina es un nucleótido de purina producido por todas las células metabólicamente activas del organismo. La adenosina ejerce sus efectos por medio de cuatro subtipos de receptores superficiales de las células (A1 , A2a, A2b y A3) que pertenecen a la superfamilia de receptores acoplados a la proteína G (Stiles, G.L. Journal of Biological Chemistry, 1992, 267, 6451). Los subtipos A1 y A3 se acoplan a la proteína G inhibidora, en tanto que A2a y A2b se acoplan a la proteína G estimuladora. Los receptores A2a se encuentran principalmente en el cerebro, tanto en las neuronas como en las células gliales (la mayor concentración se encuentra en el cuerpo estriado y en el núcleo accumbens; una concentración de moderada a alta en las regiones del tubérculo olfatorio, hipotálamo e hipocampo, etc.) (Rosin, D. L; Robeva, A.; Woodard, R. L; Guyenet, P. G.¡ Linden, J. Journal of Comparative Neurology, 1998, 401 , 163).

En los tejidos periféricos, los receptores A2a se encuentran en plaquetas, neutrófilos, músculo liso vascular y endotelio (Gessi, S.; Varani, K.; Merighi, S.; Ongini, E.¡ Bores, P. a. British Journal of Pharmacology, 2000, 129, 2). El cuerpo estriado es la región principal del cerebro para regular la actividad motora, especialmente a través de su inervación por parte de neuronas dopaminérgicas que se originan en la sustancia negra. El cuerpo estriado es el objetivo principal de degeneración de neuronas dopaminérgicas en pacientes con la enfermedad de Parkinson (PD, por sus siglas en inglés). Dentro del cuerpo estriado, los receptores A2a se localizan junto con los receptores de dopamina D2, y sugieren un sitio importante para la integración de la señalización de la adenosina y dopamina en el cerebro (Fink, J. S.; Weaver, D. Ri; Rivkees, S. A.; Peterfreund, R. A.; Pollack, A. E.; Adler, E. M.; Reppert, S. M. Brain Research Molecular Brain Research, 1992,14,186).

Los estudios neuroquímicos han demostrado que la activación de los receptores A2a reduce la afinidad de unión del agonista D2 a sus receptores. La interacción de los receptores D2R y A2aR se ha demostrado en preparaciones de membrana de estriado de ratas (Ferré, S.; con Euler, G.; Johansson, B.; Fredholm, B. B.; Fuxe, K. Proceedings of the National Academy of Sciences I of the United States of America, 1991 , 88, 7238) y también en líneas celulares de fibroblastos después de la transfección con ADNc de los receptores A2aR y D2R (Salim, H.; Ferré, S.; Dalal, A.; Peterfreund, R. A.; Fuxe, K.; Vincent, J. D.; Lledo, P. M. Journal of Neurochemistry, 2000, 74, 432). In vivo, la obstrucción farmacológica de los receptores A2a mediante el uso de un antagonista A2a genera efectos benéficos en la neurotoxina dopaminérgica MPTP (PC inducida por 1-metil-4-fenil-1 ,2,3,6 tetrahidropiridina) en diversas especies que incluyen ratones, ratas y monos (Ikeda, K.; Kurokawa, M.¡ Aoyana, S.; Kuwana, Y. Journal of Neurochemistry, 2002, 80, 262).

Además, se ha encontrado que los ratones carentes de A2a con bloqueo genético de la función del A2a son menos sensibles al deterioro motor y a los cambios neuroquímicos cuando se exponen a la neurotoxina MPTP (Chen, J. F.; Xu, K.; I Petzer, J. P.; Steal, R.; Xu, Y. H.; Beilstein, M.; Sonsalla, P. K.; Castagnoli, K.¡ Castagnoli, N., Jr.; Schwarsschild, M. a. Journal of Neuroscience, 2001 , 1 21 , RC1 43).

Se ha descubierto que en humanos la teofilina antagonista del receptor de adenosina produce efectos benéficos en pacientes con PD (Mally, J.; Stone, T. W. Journal of the Neurological Sciences, 1995, 132, 129). En concordancia con ello, un estudio epidemiológico reciente ha demostrado que el alto consumo de cafeína hace que las personas sean menos propensas a desarrollar PD (Ascherio, A.; Zhang, S. M.; Hernán, M. A.; Kawachi, I.; Colditz, G. A.; Speizer, F. E.; Willett, W. C. Annals of Neurology, 2001 , 50, 56). En síntesis, los bloqueadores de los receptores de adenosina A2a pueden proporcionar una nueva clase de agentes antiparkinsonianos (Impagnatiello, F.; Bastía, E.; Ongini, E.; Monopolí, A. Emerging Therapeutic Targets, 2000, 4, 635).

Los antagonistas del receptor A2A constituyen terapias potencialmente útiles para el tratamiento de adicciones. Los principales fármacos de abuso (opiáceos, cocaína, etanol, y similares) modulan directa o indirectamente los mecanismos de señal de la dopamina en neuronas, especialmente las que se encuentran en el núcleo accumbens, que contienen altos niveles de receptores de adenosina A?A- Se ha demostrado que la dependencia aumenta con la vía de señalización de la adenosina y que la administración de un antagonista del receptor A2A reduce el deseo de consumir sustancias adictivas ("The Critical Role of Adenosine A2A Receptors and Gi ß? Subunits ¡n Alcoholism and Addiction: From Cell Biology to Behavior", por Ivan Diamond and Lina Yao, (The Cell Biology of Addiction, 2006, págs. 291-316) y "Adaptations in Adenosine Signaling in Drug Dependence: Therapeutic Implications", por Stephen P. Hack and Macdonald J. Christie, Critical Review in Neurobiology, Vol. 15, 235-274 (2003)). Véase también Alcoholism: Clinical and Experimental Research (2007), 31 (8), 1302-1307.

Se podría usar un antagonista del receptor A2A para tratar el trastorno de hiperactividad y déficit de atención (ADHD, por sus siglas en inglés), puesto que la cafeína (un antagonista no selectivo de la adenosina) puede ser útil para tratar el ADHD, y existen muchas interacciones entre la dopamina y la adenosina a nivel neuronal. "Clinical Genetics" (2000), 58(1), 31-40 y las referencias incluidas allí.

Los antagonistas del receptor A2A constituyen terapias potencialmente útiles para el tratamiento de la depresión. Los antagonistas A2A son conocidos por inducir actividad en diversos modelos de depresión, incluidas las pruebas de natación forzada y de suspensión por la cola. La respuesta positiva es mediada por la transmisión dopaminérgica y se causa por una prolongación de la conducta orientada al escape más que por un efecto estimulante motor. Neurology (2003), 61 (supl. 6) S82-S87.

Los antagonistas del receptor A2A constituyen terapias potencialmente útiles para el tratamiento de la ansiedad. Se ha demostrado que los antagonistas A2A previenen respuestas emocionales/ansiosas in vivo. Neurobiology of Disease (2007), 28(2) 197-205.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN La presente invención incluye compuestos de la Fórmula Z Z en donde: X se selecciona del grupo que consiste de: R1 es heteroarilo sustituido opcionalmente con un sustituyante seleccionado del grupo que consiste de: -OH, CF3l OCF3, Cl, Br, -CN, F, CHF2, C(1-4)alquilo y ciclopropilo; R2 es fenilo, en donde ese fenilo está sustituido opcionalmente con hasta tres sustituyentes seleccionados independientemente del grupo que consiste de F, Cl, Br y OCH3 o con un solo sustituyente seleccionado del grupo que consiste de: OH, OCH2CF3, OC^alquilo, C(1-4)alquilo, CHF2) OCF3, CF3 y CN; en donde ese C(1-4)alquilo está sustituido opcionalmente con un anillo seleccionado del grupo que consiste de: en donde Ra, Rb y Rc son, independientemente, H o C(i. 4)alquilo; Rd es H, -C(i- )alquilo, -CH2CH2OCH2CH2OCH3, - CH2CO2H, -C(O)C(1.4)alquilo o -CH2C(0)C(1-4)alquilo; y solvatos, hidratos, tautómeros y sales farmacéuticamente aceptables de éstos.

DESCRIPCION DETALLADA DE LA INVENCION La presente invención incluye compuestos de la Fórmula Z X se selecciona del grupo que consiste de: R1 es heteroarilo sustituido opcionalmente con un sustituyente seleccionado del grupo que consiste de: -OH, OCf-i-^alquilo, CF3, OCF3, Cl, Br, -CN, F, CHF2, C(1-4)alquilo y ciclopropilo; R2 es fenilo, en donde ese fenilo está sustituido opcionalmente con hasta tres sustituyentes seleccionados independientemente del grupo que consiste de F, Cl, Br y OCH3 o con un solo sustituyente seleccionado del grupo que consiste de: OH, OCH2CF3, OC^alquilo, C(i.4)alquilo, CHF2, OCF3, CF3 y CN¡ en donde ese C(i-4)alquilo está sustituido opcionalmente con un anillo seleccionado del grupo que consiste de: en donde Ra, R y Rc son, independientemente, H o C(i. 4)alquilo; Rd es H, -C(1-4)alquilo, -CHzCHaOCHzCHzOCHs, - CH2C02H, -C(0)C(1-4)alquilo o -CH2C(0)C(i-4)alquilo; y solvatos, hidratos, tautomeros y sales farmacéuticamente aceptables de éstos.

En otra modalidad de la invención: X se selecciona del grupo que consiste de: R1 es heteroarilo sustituido opcionalmente con un sustituyente seleccionado del grupo que consiste de: -OH, OC(1-4)alquilo, OCF3, Cl, Br, -CN, F, CHF2) C(M)alquilo y ciclopropilo; R2 es fenilo sustituido con un sustituyente seleccionado del grupo que consiste de: H, -OH, OC(i-4)alquilo, OCF3, CHF2, CF3, Cl, Br, -CN, F y C(i.4)alquilo, en donde ese C(i-4)alquilo está sustituido opcionalmente con morfolinilo, piperidinilo o piperazinilo; y solvatos, hidratos, tautomeros y sales farmacéuticamente aceptables de éstos.

En otra modalidad de la invención: X se selecciona del grupo que consiste de: R1 es heteroarilo seleccionado del grupo que consiste de: furilo, tiazolilo, piridilo, oxazolilo, imidazolilo, pirimidilo, tiofenilo y piridazilo, en donde ese heteroarilo está sustituido opcionalmente con un sustituyente seleccionado del grupo que consiste de: OC(1-4)alqu¡lo, OCF3, -CN, F, CHF2, C(1-4)alquilo y ciclopropilo; R2 es fenilo sustituido con un sustituyente seleccionado del grupo que consiste de: H, -OH, OCF3, CHF2, CF3, F, Cl y C(i-4)alquilo, en donde ese C(i-4)alquilo está sustituido opcionalmente con morfolinilo, piperidinilo o piperazinilo; y solvatos, hidratos, tautómeros y sales farmacéuticamente aceptables de éstos.

En otra modalidad de la invención: X se selecciona del grupo que consiste de: R es heteroarilo seleccionado del grupo que consiste de: furilo, tiazolilo, piridilo, oxazolilo, ¡midazolilo, pirimidilo, tiofenilo y piridazilo, en donde ese heteroarilo está sustituido opcionalmente con un sustituyente seleccionado del grupo que consiste de: C(1-4)alquilo, OCH3, -CN, CHF2 y ciclopropilo; R2 es fenilo sustituido con un sustituyente seleccionado del grupo que consiste de: H, -OH, OCH3, OCF3, CHF2, CF3, F, Cl y C(i-4)alquilo, en donde ese C(i-4)alquilo está sustituido opcionalmente con morfolinilo; y solvatos, hidratos, tautomeros y sales farmacéuticamente aceptables de éstos.

En otra modalidad de la invención: X se selecciona del grupo que consiste de: R2 es fenilo sustituido con un sustituyente seleccionado del grupo que consiste de: H, -Chb-rnorfolinilo, OCH3, F y Cl; y solvatos, hidratos, tautomeros y sales farmacéuticamente aceptables de éstos.

Otra modalidad de la invención comprende un compuesto seleccionado del grupo que consiste de: ?? ?? ?? ?? y solvatos, hidratos, tautómeros y sales farmacéuticamente aceptables de éstos.

Esta invención proporciona, además, un método para tratar a un sujeto que tiene una enfermedad que se mejora por la antagonización de los receptores de adenosina A2a; el método comprende administrar al sujeto una dosis terapéuticamente eficaz de un compuesto de la Fórmula Z.

Esta invención proporciona, además, un método para prevenir un trastorno mejorado por la antagonización de los receptores de adenosina A2a en un sujeto; el método comprende administrar al sujeto una dosis profilácticamente eficaz del compuesto de la reivindicación 1 , ya sea antes o después de un evento que se piensa causará un trastorno que se mejora por la antagonización de los receptores de adenosina A2a en el sujeto.

Los compuestos de la Fórmula Z pueden aislarse y usarse como bases libres. También pueden estar aislados y usarse como sales farmacéuticamente aceptables.

Algunos ejemplos de estas sales incluyen sales de los ácidos hidrobrómico, hidroiódico, hidroclorhídrico, perclorhídrico, sulfúrico, maleico, fumárico, málico, tartárico, cítrico, adípico, benzoico, mandélico, metanosulfónico, hidroetanosulfónico, bencenosulfónico, oxálico, palmoico, 2 naftalensulfónico, p-toluensulfónico, ciclohexanosulfámico y sacárico.

Esta invención proporciona, además, una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la Fórmula Z y un portador farmacéuticamente aceptable.

Los portadores farmacéuticamente aceptables son del conocimiento de aquellos con experiencia en la materia e incluyen, pero no se limitan a, de aproximadamente 0.01 a aproximadamente 0.1 M y, preferentemente, 0.05 M de fosfato o 0.8 % de suero salino. Estos portadores farmacéuticamente aceptables pueden ser soluciones acuosas o no acuosas, suspensiones y emulsiones. Algunos ejemplos de solventes no acuosos son propilenglicol, polietilenglicol, aceites vegetales, tales como aceite de oliva y ésteres orgánicos inyectables, tales como oleato de etilo. Los portadores acuosos incluyen agua, etanol, soluciones alcohólicas/acuosas, glicerol, emulsiones o suspensiones, lo que incluye medios salinos y tampones. Los portadores por vía oral pueden ser elixires, jarabes, cápsulas, tabletas, y similares. El portador sólido típico es una sustancia inerte, tal como lactosa, almidón, glucosa, metilcelulosa, estearato de magnesio, fosfato dicalció, manitol, y similares. Los portadores por vía parenteral incluyen solución de cloruro de sodio, dextrosa en solución de Ringer, dextrosa y cloruro de sodio, lactato de Ringer y aceites fijos. Los portadores por vía intravenosa incluyen reabastecedores de nutrientes y fluidos, reabastecedores de electrolitos, tales como los basados en la dextrosa en solución de Ringer, y similares.

También pueden estar presentes conservantes y otros aditivos, tales como, por ejemplo, antimicrobianos, antioxidantes, agentes quelantes, gases inertes, y similares. Todos los portadores se pueden mezclar según sea necesario con desintegrantes, diluyentes, agentes de granulación, lubricantes, aglutinantes, y similares por medio del uso de técnicas convencionales conocidas en la materia.

Esta invención proporciona, además, un método para tratar a un sujeto que tiene una enfermedad que se mejora por la antagonización de los receptores de adenosina A2a; el método comprende administrar al sujeto una dosis terapéuticamente eficaz de un compuesto de la Fórmula Z.

En una modalidad el trastorno es un trastorno neurodegenerativo o motor. Algunos ejemplos de trastornos que se pueden tratar con la composición farmacéutica de la presente incluyen, sin limitarse a, enfermedad de Parkinson, enfermedad de Huntington, atrofia sistémica múltiple, degeneración corticobasal, enfermedad de Alzheimer y demencia senil.

En una modalidad preferida el trastorno es la enfermedad de Parkinson.

Como se usa en la presente descripción, el término "sujeto" incluye, sin limitarse a, cualquier animal o animal modificado artificialmente que sufra un trastorno que se mejora por la antagonización de los receptores de adenosina A2a. En una modalidad preferida el sujeto es un ser humano.

La administración de la composición farmacéutica de la presente descripción puede efectuarse o llevarse a cabo por medio del uso de cualquiera de los diversos métodos conocidos por aquellos con conocimiento en la materia. Los compuestos de la Fórmula Z se pueden administrar, por ejemplo, por vía intravenosa, intramuscular, oral y subcutánea. En la modalidad preferida la composición farmacéutica de la presente se administra por vía oral. Además, la administración puede comprender suministrar al sujeto una pluralidad de dosis durante un período adecuado de tiempo. Estos regímenes de administración se pueden determinar de acuerdo con los métodos de rutina.

Como se usa en la presente descripción una "dosis terapéuticamente eficaz" de una composición farmacéutica es una cantidad suficiente para detener, revertir o reducir el avance de un trastorno. Una "dosis profilácticamente eficaz" de una composición farmacéutica es una cantidad suficiente para prevenir un trastorno, es decir, eliminar, mejorar o demorar el inicio del trastorno. En la materia se conocen los métodos para determinar las dosis terapéutica y profilácticamente eficaces para la composición farmacéutica de la invención. Por ejemplo, la dosis eficaz para administrar la composición farmacéutica a un ser humano se puede determinar matemáticamente a partir de los resultados de estudios practicados en animales.

En una modalidad la dosis terapéutica y/o profilácticamente eficaz es una dosis suficiente para suministrar de aproximadamente 0.001 mg por kilo (mg/kg) de peso corporal a aproximadamente 200 mg/kg de peso corporal de un compuesto de la Fórmula Z. En otra modalidad la dosis terapéutica o profilácticamente eficaz es una dosis suficiente para suministrar de aproximadamente 0.05 mg/kg de peso corporal a aproximadamente 50 mg/kg de peso corporal. Más específicamente, en una modalidad, las dosis por vía oral varían de aproximadamente 0.05 mg/kg a aproximadamente 100 mg/kg por día. En otra modalidad las dosis por vía oral varían de aproximadamente 0.05 mg/kg a aproximadamente 50 mg/kg por día y, en otra modalidad, de aproximadamente 0.05 mg/kg a aproximadamente 20 mg/kg por día. En todavía otra modalidad las dosis en infusión varían de aproximadamente 1.0 ug/kg/min a aproximadamente 10 mg/kg/min de inhibidor, mezclado con un portador farmacéutico durante un período que varía desde aproximadamente varios minutos a aproximadamente varios días. En otra modalidad para administrarse tópicamente, el compuesto de la invención se puede combinar con un portador farmacéutico en una relación fármaco-portador de aproximadamente 0.001 a aproximadamente 0.1.

La invención proporciona, además, un método para tratar adicciones en mamíferos; el método comprende administrar una dosis terapéuticamente eficaz de un compuesto de la Fórmula Z.

La invención proporciona, además, un método para tratar el ADHD en mamíferos; el método comprende administrar una dosis terapéuticamente eficaz de un compuesto de la Fórmula Z.

La invención proporciona, además, un método para tratar la depresión en mamíferos; el método comprende administrar una dosis terapéuticamente eficaz de un compuesto de la Fórmula Z.

La invención proporciona, además, un método para tratar la ansiedad en mamíferos; el método comprende administrar una dosis terapéuticamente eficaz de un compuesto de la Fórmula Z.

Definiciones: El término "Ca-i)" (en donde a y b son enteros que se refieren a un número designado de átomos de carbono) se refiere a un radical alquilo, alquenilo, alquinilo, alcoxi o cicloalquilo o a la porción alquilo de un radical en donde el alquilo aparece como la raíz del prefijo que contiene de a a b átomos de carbono, inclusive. Por ejemplo, d-4 representa un radical que contiene 1 , 2, 3 o 4 átomos de carbono.

El término "alquilo", usado solo o como parte de un grupo sustituyente, se refiere a un radical hidrocarburo monovalente de cadena recta o ramificada saturado, en donde el radical se deriva por la eliminación de un átomo de hidrógeno de un solo átomo de carbono. A menos que se indique específicamente (por ejemplo, por el uso de un término limitante tal como "átomo de carbono terminal"), las variables de sustituyentes pueden colocarse en cualquier átomo de la cadena de carbonos. Los radicales alquilo típicos incluyen, pero no se limitan a, metilo, etilo, propilo, isopropilo y similares. Los ejemplos incluyen grupos alquilo de C e. alquilo de C1.6 y alquilo de C- .

El término "cicloalquilo" se refiere a un radical derivado por la eliminación de un átomo de hidrógeno de un átomo de carbono de anillo de un sistema anular de alquilo saturado. Los radicales cicloalquilo típicos incluyen ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, cicloheptilo y ciclooctilo.

El término "heteroarilo" se refiere a un radical derivado por la eliminación de un átomo de hidrógeno de un átomo de carbono de anillo de un sistema anular heteroaromático. Los radicales heteroarilo típicos incluyen furilo, pirrolilo, oxazolilo, tiofenilo, tiazolilo, imidazolilo, pirazolilo, isoxazolilo, isotiazolilo, oxadiazolilo, triazolilo, tiadiazolilo, piridinilo, piridazinilo, pirimidinilo, pirazinilo, indolizinilo, indolilo, isoindolilo, indazolilo, benzimidazolilo, benzotiazolilo, purinilo, 4/-/-quinolizinilo, quinolinilo, isoquinolinilo, cinnolinilo, ftalzinilo, quinazolinilo, quinoxalinilo, 1 ,8-naftiridinilo y pteridinilo.

El término "heterociclilo" se refiere a un radical derivado por la eliminación de un átomo de hidrógeno de un átomo de carbono de anillo o de nitrógeno de anillo de un sistema anular heteroaromático saturado o parcialmente saturado. Los radicales heterociclilo típicos incluyen morfolinilo, piperidinilo, piperazinilo, pirrolidinilo y tetrahidrofuranilo.

Abreviaturas: En la presente descripción y en toda esta solicitud pueden usarse las siguientes abreviaturas.

BOC Butiloxicarbonilo n-BuLi n-butil-litio í-BuOK 7erc-butóx¡do de potasio Cy Ciclopropilo DMF Dimetilformamida DMAP Dimelilaminopiridina D SO Dimetilsulfóxido Et Etilo LDA Diisopropilamina de litio Me Metilo NBS N-bromosuccinimida OAc Acetato Pd(dppf)CI2 [1 ,1'-Bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaladio (II) py Piridina TFA Ácido trifluoroacético THF Tetrahidrofurano La presente invención incluye dentro de su alcance profármacos de los compuestos de esta invención. Generalmente, dichos profármacos serán derivados funcionales de los compuestos, que son fácilmente convertibles in vivo en el compuesto requerido. De esta manera, en los métodos de tratamiento de la presente invención, el término "administrar" abarca el tratamiento de los diversos trastornos indicados con el compuesto descrito específicamente o con un compuesto que puede no estar descrito específicamente, pero que se convierte in vivo en el compuesto especificado después de la administración al paciente. Los procedimientos convencionales para seleccionar y preparar derivados de profármacos adecuados se describen, por ejemplo, en "Design of Prodrugs", ed. H. Bundgaard, Elsevier, 1985.

Cuando los compuestos de acuerdo con esta invención tienen por lo menos un centro quiral, pueden existir por consiguiente como enantiómeros. Cuando los compuestos poseen dos o varios centros quirales, también pueden existir como diastereómeros. Se debe comprender que tales isómeros y mezclas de éstos se encuentran dentro del alcance de la presente invención.

En donde los procesos para la preparación de compuestos de acuerdo con la invención dan como resultado una mezcla de estereoisómeros, estos isómeros pueden separarse con técnicas convencionales tales como cromatografía. Los compuestos se pueden preparar de forma racémica, o se pueden preparar enantiómeros individuales mediante síntesis enantioespecífica o mediante resolución. Los compuestos pueden, por ejemplo, resolverse en sus ' componentes enantiómeros mediante técnicas estándar, tales como la formación de pares diastereoméricos mediante la formación de sal con un ácido ópticamente activo tal como ácido tartárico (-)-dip-toluoil-D- y/o ácido tartárico (+)-díp-toluoil-L- seguido de cristalización fraccional y regeneración de la base libre. Los compuestos también se pueden resolver mediante la formación de ésteres o amidas diastereoméricos, seguidos por separación cromatográfica y eliminación del auxiliar de helicidad. Alternativamente, los compuestos se pueden resolver usando una columna de HPLC helicoidal.

Durante cualquiera de los procedimientos de preparación de los compuestos de la presente invención puede ser necesario o deseable proteger los grupos sensibles o reactivos en cualquiera de las moléculas involucradas. Esto puede lograrse con grupos protectores convencionales, tales como los descritos en Protective Groups in Organic Chemistrv, ed. J.F.W. McOmie, Plenum Press, 1973; y T.W. Greene & P.G.M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley & Sons, 1991. Los grupos protectores se pueden eliminar en una etapa posterior conveniente con métodos conocidos en la materia.

Esquemas generales: Los compuestos de la Fórmula Z pueden prepararse por métodos conocidos por aquellos con experiencia en la materia. Los siguientes esquemas de reacción se proporcionan solamente como ejemplos de la invención y de ningún modo limitan la invención.

Esquema 1 El Esquema 1 ¡lustra las rutas sintéticas (Vías 1 , 2 y 3) para obtener los compuestos de la Fórmula Z (A, B, C y D). Comenzando con el 2-amino-3-cianotiofeno I y siguiendo la vía indicada por las flechas, la condensación en condiciones básicas con R1-CN, en donde R1 es tal como se define en la Fórmula Z, produce la aminopirimidina II. La aminopirimidina II se hace reaccionar con N-bromosuccinimida (NBS) para obtener el bromotiofeno III. Siguiendo la vía 1 , el bromotiofeno III se hace reaccionar con R2XZnCI o R2XZnBr, en donde R2 es tal como se define en la Fórmula Z, en presencia de un catalizador de paladio para producir los compuestos de la Fórmula Z, en donde X es CH2 o CH2CH2 (A). Alternativamente, los compuestos de la Fórmula B se pueden reducir por medio de hidrogenación para producir los compuestos de la Fórmula Z, en donde X es (A).

Siguiendo la vía 2, el bromotiofeno III se hace reaccionar con R2CHCHB(OH)2, en donde R2 es tal como se define en la Fórmula Z, en presencia de un catalizador de paladio para producir los compuestos de la Fórmula Z, en donde X es Siguiendo la vía 3, el bromotiofeno III se hace reaccionar con R2C(CH2)B(OH)2, en donde R2 es tal como se define en la Fórmula Z, en presencia de paladio para producir los compuestos de la Fórmula Z, en donde X es Los compuestos de la Fórmula C se hacen reaccionar con yoduro de trimetiisulfoxonio en condiciones básicas para producir los compuestos de la Fórmula Z, en donde X es (D).

Esquema 2 1. LDA, R2CHO 2. TFA Comenzando con el 2-amino-3-cianotiofeno I y siguiendo la vía indicada por las flechas, la condensación en condiciones básicas con R1-CN, en donde R es tal como se define en la Fórmula Z, produce la aminopirimidina II. La aminopirimidina II se hace reaccionar con di-íerc-butildicarbonato [(Boc)20] en presencia de 4-dimetilaminopiridina (DMAP) para producir la amina IV protegida correspondiente. El tiofeno IV se desprotona con diisopropilamida de litio (LDA) y se hace reaccionar con R2CHO, en donde R2 es tal como se define en la Fórmula Z, para producir un alcohol intermedio que se desprotege con TFA para producir los compuestos de la Fórmula E.

Esquema 3 RUTA 2 Pd(OAc)2 R2-l El Esquema 3 ¡lustra un método alternativo para sintetizar los compuestos de la Fórmula A, además de un método para acceder a los compuestos de la Fórmula Z en donde X es Comenzando con R2CH2CH2CHO (V), en donde R2 es tal como se define en la Fórmula A, la reacción con malononitrilo y azufre elemental en condiciones básicas produce el tiofeno VI. El tiofeno VI se condensa en condiciones básicas con R -CN, en donde R es tal como se define en la Fórmula Z, para producir los compuestos de la Fórmula Z en donde X es CH2 (A).

Alternativamente, se puede sintetizar aldehidos que no están comercialmente disponibles siguiendo la vía 2 en donde R2-l (VII), en donde R2, que es tal como se define en la Fórmula Z, se hace reaccionar con alcohol alilico en presencia de un catalizador de paladio para producir aldehidos V que después siguen las flechas en la vía 1. Siguiendo la vía 3, los aldehidos sustituidos con metilo VIII reaccionan de manera similar a los aldehidos en la vía 1 para producir los compuestos sustituidos con metilo de la Fórmula F.

Esquema 4 El Esquema 4 ilustra la ruta sintética para obtener los compuestos de las Fórmulas E y G. Comenzando con la condensación del 2- amino-5-metil-tiofeno-3-carbonitrilo X en condiciones básicas con R1-CN, en donde R1 es tal como se define en la Fórmula Z, se obtiene la aminopirimidina XI. La oxidación de XI con Se02 produce el aldehido XII correspondiente. El aldehido XII se hace reaccionar con R2MgX, en donde R2 es tal como se define en la Fórmula Z, para producir los compuestos de la Fórmula E que se pueden oxidar hasta la cetona correspondiente.

Esquema 5 Pd(dppf)CI2 R2MgX El Esquema 5 ilustra una ruta sintética alternativa para los compuestos de las Fórmulas E y G. Comenzando con 2-amino-3-cianotiofeno I y siguiendo la vía indicada por las flechas, la condensación en condiciones básicas con R1-CN, en donde R es tal como se define en la Fórmula Z, produce la aminopirimidina II. La aminopirimidina II se hace reaccionar con N-bromosuccinimida (NBS) para obtener el bromotiofeno III. El acoplamiento catalizado por paladio con éster dibutílico del ácido vinilborónico produce el aducto de vinilo XIII correspondiente. La olefina presente en XIII se puede dihidrolizar con una mezcla AD para producir el diol XIV que después se oxida con ácido periódico para producir el aldehido XII. El aldehido XII se hace reaccionar con R2MgX, en donde R2 es tal como se define en la Fórmula Z, para producir los compuestos de la Fórmula E que se oxidan hasta la cetona correspondiente para producir los compuestos de la Fórmula G.

Esquema 6 XVI xvil El Esquema 6 ilustra la ruta sintética para obtener los compuestos de la Fórmula R -CN, en donde R es furano sustituido con Cc^alquilo. El Esquema 6 además ilustra cómo cualquier R1-C02CH3 puede convertirse en R1-CN. El bromofurano XV puede reaccionar con reactivos de alquilzinc en presencia de un catalizador de paladio para producir XVI. El éster XVI (o cualquier R -C02CH3) se hace reaccionar con hidróxido amónico para producir la amida XVII correspondiente. La deshidratación de la amida se realiza con POCI3 en piridina para producir el nitrito heterociclico R1-CN deseado.

Ejemplos: Ejemplo 1 : 6-bencil-2-(5-metil-furan-2-il)-tieno[2,3-dlpirimidin-4-ilamina Ejemplo 1: etapa a 2-(5-metil-furan-2-il)-tieno[2.3-dlp¡rimidin-4-ilamina Se añadió f-BuOK sólido (904 mg, 8.1 mmol) en una suspensión de dioxano (20 mi) de 2-amino-tiofen-3-carbonitrilo (5.0 g, 40.3 mmol) y 5-metil- furan-2-carbonitrilo (4.5 g, 40.3 mmol) y la mezcla se sumergió en un baño de aceite a 130 °C. Después de 10 min, el matraz se extrajo del baño de aceite, se diluyó con THF, se filtró y se envasó seco sobre gel de sílice. La cromatografía en columna produjo 5.8 g de 2-(5-metil-furan-2-il)-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ilamina.

Ejemplo 1 : etapa b 6-bromo-2-(5-metil-furan-2-il)-tienof2,3-d1pirimidin-4-ilamina Se añadió NBS sólido (4.7 g, 26.4 mmol) en una solución de THF (100 mi) de 2-(5-metil-furan-2-¡l)-t¡eno[2,3-d]pirim¡din-4-ilamina (5.8 g, 25.1 mmol). Después de 2 h la mezcla se diluyó con EtOAc y se lavó consecutivamente con NaHC03 acuoso saturado, Na2S203 1 M acuoso y salmuera. La capa orgánica se secó (Na2S04) y se envasó seca sobre gel de sílice. La cromatografía en columna produjo 6.3 g de 6-bromo-2-(5-metil-furan-2-il)-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ilamina.

Ejemplo 1: etapa c 6-benc¡l-2-(5-metil-furan-2-il)-tieno[2.3-dlpirimid¡n-4-ilamina Se añadió una solución de THF 0.5 M de bromuro de bencilzinc (30 mi, 5 mmol) en una solución de THF (30 mi) de 6-bromo-2-(5-metiI-furan- 2-¡l)-t¡eno[2,3-d]pir¡midin-4-¡lam¡na (1.3 g, 4.3 mmol) y Pd(dppf)CI2 (351 mg, 0.4 mmol) y la mezcla se calentó hasta reflujo. Después de 6 h la mezcla se diluyó con EtOAc, se lavó con agua y después con salmuera, se secó (Na2S04) y se envasó seca sobre gel de sílice. La cromatografía en columna produjo 912 mg de 6-bencil-2-(5-metil-furan-2-il)-tieno[2,3-d]pirimidin-4- ilamina. 1H NMR (acetona, 400 MHz): d = 7.31 - 7.37 (m, 4 H), 7.22 - 7.31 (m, 1 H), 7.20 (d, J=1.3 Hz, 1 H), 7.02 (d, J=3.0 Hz, 1 H), 6.72 (br. s., 2 H), 6.15 - 6.20 (m, 1 H), 4.23 (s, 2 H), 2.36 ppm (s, 3 H); MS m/e 322 (M+H).

Ejemplo 2: f4-amino-2-(5-metil-furan-2-il)-tienor2,3-dlpirim¡din-6-ill-fenil-metanol Ejemplo 2: etapa a 2-(5-metil-furan-2-il)-6-vinil-t¡eno[2,3-d1pirimid¡n-4-¡lamina Se añadió éster dibutílico del ácido vinilborónico puro (1 .2 mi, 5.3 mmol) en una solución de dioxano (24 ml)/agua (6 mi) de 6-bromo-2-(5- metil-furan-2-il)-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ilamina (825 mg, 2.7 mmol, un intermedio del Ejemplo 1), Pd(dppf)CI2 (217 mg, 0.3 mmol) y K2C03 (735 mg, 5.3 mmol) y la mezcla se calentó hasta 80 °C. Después de 5 h la mezcla se enfrió y se diluyó con EtOAc. La fase orgánica se lavó con agua y después con salmuera, se secó (Na2S04) y se envasó seca sobre gel de sílice. La cromatografía en columna produjo 550 mg del compuesto del título.

Ejemplo 2: etapa b 1-[4-amino-2-(5-metil-furan-2-il)-tieno[2,3-dlpirimidin-6-¡l1-etano-1 ,2-d¡ol Se añadió MeS02NH2 sólido (204 mg, 2.1 mmol) en una solución de í-BuOH (10 ml)/agua (10 mi) de mezcla AD-a (3.0 g). Después de 15 min la mezcla resultante se añadió en 2-(5-metil-furan-2-il)-6-vinil-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ilamina sólida (550 mg, 2.1 mmol) y la mezcla se agitó vigorosamente. Después de 17 h se añadió sulfito sódico sólido (3.7 g) y la mezcla se agitó por otros 30 minutos. La mezcla se extrajo con EtOAc y los extractos combinados se lavaron con agua y salmuera, se secaron (Na2SO4), se concentraron y se purificaron a través de cromatografía en columna para producir 565 mg del compuesto del título.

Ejemplo 2: etapa c 4-amino-2-(5-metil-furan-2-il)-t¡enof2,3-dlpirim¡dina-6-carbaldehído Se añadió HI04 sólido (877 mg, 3.9 mmol) en una solución de THF (20 mi) de 1-[4-amino-2-(5-metil-furan-2-il)-tieno[2,3-d]pirimidin-6-il]-etano-1 ,2-diol (560 mg, 1.9 mmol). Después de 1 h se añadió NaHC03 acuoso saturado y la fase acuosa se extrajo con EtOAc. Los extractos combinados se lavaron con agua y salmuera, se secaron (Na2SO4), se concentraron y se purificaron a través de cromatografía en columna para producir 460 mg del compuesto del título.

Ejemplo 2: etapa d r4-amino-2-(5-metil-furan-2-il)-tienoí2,3-dlp¡rimid¡n-6-in-fen¡l-metanol Se añadió una solución de THF 1.0 de bromuro de fenilmagnesio (0.97 mi, 0.97 mmol) en una solución de THF a 0 °C (4 mi) de 4-amino-2-(5-metil-furan-2-il)-tieno[2,3-d]pirimidina-6-carbaldehído (100 mg, 0.39 mmol). Después de 15 min se añadió agua y la mezcla se extrajo con EtOAc. Los extractos combinados se lavaron con agua y salmuera, se secaron (Na2S04), se concentraron y se purificaron a través de cromatografía en columna para producir 81 mg del compuesto del título. 1H NMR (CLOROFORMO-d, 400 MHz): d = 7.43 - 7.47 (m, 2 H), 7.30 - 7.41 (m, 5 H), 7.15 (d, J=3.3 Hz, 1 H), 6.78 (d, J=1 .0 Hz, 1 H), 6.13 (d, J=3.3 Hz, 1 H), 6.01 (s, 1 H), 5.28 (s, 2 H), 2.42 (s, 3 H); MS m/e 338 (M+H).

Ejemplo 3: [4-amino-2-(5-metil-furan-2-il)-tieno[2,3-d1pirimidin-6-il1-fenil-metanona Se añadió Mn02 sólido (286 mg, 3.30 mmol) en una solución de CH2CI2 (2 mi) de [4-amino-2-(5-metil-furan-2-il)-tieno[2,3-d]p¡rimidin-6-il]-fenil-metanol (37 mg, 0.1 1 mmol, preparada tal como se describió en el Ejemplo 2) y la suspensión se agitó vigorosamente. Después de 18 h la mezcla se filtró a través de un filtro Celite y el filtrado se concentró para producir 33 mg del compuesto del título que era analíticamente puro. 1H NMR (DMSO-d6,400 MHz): d = 8.34 (s, 1 H), 8.15 (br. s., 2 H), 7.88 (d, J=7.1 Hz, 2 H), 7.73 (t, J=7.3 Hz, 1 H), 7.63 (t, J=7.7 Hz, 2 H), 7.22 (d, =3.0 Hz, 1 H), 6.34 (d, J=3.3 Hz, 1 H), 2.40 ppm (s, 3 H); MS m/e 336 (M+H).

Ejemplo 4: r4-amino-2-(5-metil-furan-2-il)-tieno[2,3-d1pirimidin-6-ilH3-morfolin-4-ilmetil-fenil)-metanol El compuesto del titulo se preparó con bromuro (3-(4-morfolinilmetil)fenil) magnésico en lugar de bromuro de fenilmagnesio tal como se describió en el Ejemplo 2. 1H NMR (CLOROFORMO-d, 400 MHz): d = 7.44 (s, 1 H), 7.28 - 7.37 (m, 3 H), 7.15 (d, J=3.3 Hz, 1 H), 6.84 (d, J=1.0 Hz, 1 H), 6.10 - 6.17 (m, 1 H), 6.01 (s, 1 H), 5.28 (s, 2 H), 3.64 - 3.70 (m, 4 H), 3.49 (s, 2 H), 2.38 - 2.45 ppm (m, 7 H); MS m/e 437 (M+H).

Ejemplo 5: f4-amino-2-(5-metil-furan-2-il)-tieno[2,3-dlpirimidin-6-ill-(3-morfolin-4-ilmetil-fenil)-metanona El compuesto del título se preparó con [4-amino-2-(5-metil-furan-2-il)-tieno[2,3-d]pirimidin-6-il]-(3-morfolin-4-ilmetil-fenil)-metanol (preparado tal como se describió en el Ejemplo 4) en lugar de [4-amino-2-(5-metil-furan-2-il)-tieno[2,3-d]pirimidin-6-il]-fenil-metanol tal como se describió en el Ejemplo 3. H NMR (CLOROFORMO-d, 400 MHz): d = 7.85 (s, 1 H), 7.77 (d, J=7.8 Hz, 1 H), 7.74 (s, 1 H), 7.60 (d, J=7.6 Hz, 1 H), 7.48 (t, J=7.7 Hz, 1 H), 7.29 (d, J=3.3 Hz, 1 H), 6.20 (d, J=3.3 Hz, 1 H), 5.58 (br. s., 2 H), 3.69 - 3.76 (m, 4 H), 3.59 (s, 2 H), 2.49 (t, J=4.3 Hz, 4 H), 2.47 ppm (s, 3 H); MS m/e 435 (M+H).

Ejemplo 6: f4-am¡no-2-(5-metil-furan-2-il)-tienoí2,3-d1pirimidin-6-il1-(2-morfolin-4-ilmetil-fenil)-metanol El compuesto del título se preparó con bromuro de 2-[(4-morfolin)met¡l] fenilmagnesio en lugar de bromuro de fenilmagnesio tal como se describió en el Ejemplo 2. 1H NMR (CLOROFORMO-d, 400 MHz): d = 7.37 - 7.45 (m, 2 H), 7.30 - 7.37 (m, 1 H), 7.24 (d, J=7.3 Hz, 1 H), 7.16 (d, J=3.3 Hz, 1 H), 6.61 (d, J=1.8 Hz, 1 H), 6.14 (dd, J=3.3, 1.0 Hz, 1 H), 5.94 (s, 1 H), 5.18 (s, 2 H), 3.67 - 3.77 (m, 4 H), 3.65 (d, J=12.4 Hz, 2 H), 3.17 (d, J=12.6 Hz, 2 H), 2.43 - 2.50 ppm (m, 7 H); MS m/e 437 (M+H).

Ejemplo 7: [4-amino-2-(5-met¡l-furan-2-il)-tieno[2,3-d1pir¡midin-6-¡n-(2-morfolin-4-¡lmetil-fenil)-metanona El compuesto del título se preparó con [4-amino-2-(5-metil-furan-2-il)-t¡eno[2,3-d]p¡rim¡d¡n-6-¡l]-(2-morfol¡n-4-¡lmet¡l-fen¡l)-metanol (preparado tal como se describió en el Ejemplo 6) en lugar de [4-amino-2-(5-metil-furan-2-il)-tieno[2,3-d]pirimidin-6-il]-fenil-metanol tal como se describió en el Ejemplo 3. H NMR (CLOROFORMO-d, 300 MHz): d = 7.31 - 7.48 (m, 4 H), 7.28 (d, J=ZA Hz, 1 H), 7.22 (br. s., 1 H), 6.20 (dd, J=3.3, 0.8 Hz, 1 H), 5.55 (br. s., 2 H), 3.46 (br. s., 2 H), 2.85 -3.30 (m, 4 H), 2.46 (s, 3 H), 1.80 - 2.30 (m, 4 H); MS m/e 435 (M+H).

Ejemplo 8: 6-benc¡l-2-(5-etil-furan-2-il)-tienoí2.3-d1p¡rim¡din-4-ilamina Ejemplo 8: etapa a Éster metílico del ácido 5-etil-furan-2-carboxílico Se añadió una solución de heptano 1.0 de Et2Zn (73 mi, 73.0 mmol) en una solución de THF (100 mi) de éster metílico del ácido 5- bromo-furan-2-carboxílico (5.0 g, 24.4 mmol) y Pd(dppf)Cl2 (2.0 g, 2.4 mmol) y la mezcla se calentó hasta reflujo. Después de 16 h la mezcla se enfrió hasta temperatura ambiente y se añadieron gotas de agua para eliminar el exceso de Et2Zn. La mezcla se extrajo con EtOAc y los elementos orgánicos combinados se lavaron con agua y después con salmuera, se secaron (Na2S04) y se concentraron para producir 2.8 g de éster metílico del ácido 5-etil-furan-2-carboxílico que se usó sin purificación adicional.

Ejemplo 8: etapa b Amida del ácido 5-etil-furan-2-carboxílico Se suspendió éster metílico del ácido 5-etil-furan-2-carboxílico (2.8 g, 18.2 mmol) en NH4OH concentrado (80 mi) y se agitó vigorosamente. Después de 24 h la suspensión acuosa blanca se diluyó con agua.-se filtró y el sólido recolectado se lavó con agua y se secó al vacío para producir 1.5 g de amida del ácido 5-etil-furan-2-carboxílico.

Ejemplo 8: etapa c 5-etil-furan-2-carbonitrilo Se añadió POCI3 puro (0.56 mi, 6.0 mmol) en una solución de piridina (11 mi) de amida del ácido 5-et¡l-furan-2-carboxílico (600 mg, 4.3 mmol). Después de 2 h la mezcla se enfrió hasta 0 °C, se diluyó con agua y se ajustó hasta pH 4.5 con HCI concentrado. La mezcla oscura se extrajo con E.2O, se secó ( a2S04) y se concentró para producir 520 mg de 5-etil-furan-2-carbonitrilo que se usó inmediatamente sin purificación adicional.

Ejemplo 8: etapa d 2-(5-etil-furan-2-il)-tieno[2,3-d1pir¡mid¡n-4-ilamina Se añadió f-BuOK sólido (121 mg, 1.1 mmol) en una solución de dioxano (1 mi) de 5-etil-furan-2-carbonitrilo (520 mg, 4.3 mmol) y 2-amino-tiofen-3-carbonitrilo (533 mg, 4.3 mmol) y la mezcla se sumergió en un baño de aceite a 130 °C. Después de 15 min la mezcla se extrajo del baño de aceite, se diluyó con THF y se envasó seca sobre gel de sílice. La cromatografía en columna produjo 490 mg de 2-(5-etil-furan-2-il)-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ilamina.

Ejemplo 8: etapa e 6-bromo-2-(5-etil-furan-2-il)-tienor2,3-dlpirim¡d¡n-4-ilamina Se añadió NBS sólido (330 mg, 1.9 mmol) en una solución de THF (15 mi) de 2-(5-etil-furan-2-il)-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ilamina (433 mg, 1.8 mmol). Después de 3 h la mezcla se diluyó con EtOAc, se lavó con agua y después con salmuera, se secó (Na2S04) y se envasó seca sobre gel de sílice. La cromatografía en columna produjo 464 mg de 6-bromo-2-(5-etil-furan-2-il)-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ilamina.

Ejemplo 8: etapa f 6-bencil-2-(5-etil-furan-2-il)-tieno[2,3-cnpirimiclin-4-ilamina Se añadió una solución de THF 0.5 M de BnZnBr (0.91 mi, 0.46 mmol) en una solución de THF de 6-bromo-2-(5-etil-furan-2-il)-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ilamina (37 mg, 0.11 mmol) y Pd(dppf)CI2 (9 mg, 0.01 mmol) y la mezcla se calentó hasta reflujo. Después de 3 h la mezcla se diluyó con EtOAc, se lavó con agua y después con salmuera, se secó (Na2S04) y se envasó seca sobre gel de sílice. La cromatografía en columna produjo 22 mg de 6-bencil-2-(5-etil-furan-2-il)-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ilamina. 1H NMR (CLOROFORMO-d, 300 MHz): d = 7.32 - 7.39 (m, 2 H), 7.27 - 7.31 (m, 3 H), 7.16 (d, v7=3.0 Hz, 1 H), 6.68 (s, 1 H), 6.15 (d, J=3.4 Hz, 1 H), 5.17 (br. s., 2 H), 4.18 (s, 2 H), 2.81 (q, J=7.4 Hz, 2 H), 1.29 ppm (t, J=7.5 Hz, 3 H); MS m/e 336 (M+H).

Ejemplo 9: 2-(4-met¡l-tiazol-2-il)-6-(1-fenil-vinil)-t¡enoí2l3-d1pirimidin-4-ilamin Ejemplo 9: etapa a 2-(4-metil-tiazol-2-il)-tienof2,3-d1pirimidin-4-ilamina Se preparó el compuesto del título con 4-metiltiazol-2-carbonitr¡lo en lugar de 5-metil-furan-2-carbonitrilo tal como se describió en el Ejemplo 1.

Ejemplo 9: etapa b 6-bromo-2-(4-metil-tiazol-2-il)-tieno[2,3-dlpirimidin-4-ilamina Se preparó el compuesto del título con 2-(4-metil-tiazol-2-il)-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ilam¡na en lugar de 2-(5-metil-furan-2-il)-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ilamina tal como se describió en el Ejemplo 1.

Ejemplo 9: etapa c 2-(4-met¡l-t¡azol-2-il)-6-(1-fenil-v¡nil)-tienof2,3-dlpirimidin-4-ilamina Se calentó una solución de dioxano (8.0 ml)/agua (2.0 mi) de 6-bromo-2-(4-metil-tiazol-2-il)-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ilamina (252 mg, 0.77 mmol), ácido 1-fenilvinilborónico (171 mg, 1.20 mmol), Pd(dppf)CI2 (63 mg, 0.08 mmol) y K2C03 (213 mg, 1.54 mmol) hasta 80 °C. Después de 18 h la mezcla se diluyó con EtOAc y la solución se lavó con agua y salmuera, se secó (Na2S04), se concentró y se purificó a través de cromatografía en columna para producir 131 mg del compuesto del título. 1H N R (acetona, 400 MHz): d = 7.55 - 7.60 (m, 2 H), 7.50 - 7.55 (m, 3 H), 7.40 (s, 1 H), 7.35 (d, J=1.0 Hz. 1 H), 7.15 (br. s., 1 H), 5.80 (s, 1 H), 5.70 (s, 1 H), 2.55 ppm (d, =1.0 Hz, 3 H); MS m/e 351 (M+H).

Ejemplo 10: 2-(4-metil-tiazol-2-il)-6-(1-fenil-cicto^ ¡lamina Se añadió f-BuOK sólido (67 mg, 0.60 mmol) en una solución de DMSO (0.7 mi) de (CH3)3SOI (121 mg, 0.55 mmol). Después de 30 min se añadió una solución de THF (2 mi) de 2-(4-metil-tiazol-2-il)-6-(1 -fenil-vinil)-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ilamina (85 mg, 0.24 mmol, preparada tal como se describió en el Ejemplo 9). Después de 16 h la mezcla se diluyó con EtOAc y la capa orgánica se lavó con agua y salmuera, se secó (Na2SO4) y se envasó seca sobre gel de sílice. La cromatografía en columna produjo 19 mg del compuesto del título. 1H NMR (CLOROFORMO-d, 300 MHz): d = 7.28 -7.44 (m, 5 H), 7.00 (s, 1 H), 6.61 (s, 1 H), 5.31 (br. s., 2 H), 2.55 (s, 3 H), 1 .48 ppm (d, J=5.3 Hz, 4 H); MS m/e 365 (M+H).

Ejemplo 11 : f4-amino-2-(5-metil-furan-2-il)-tieno[2,3-d1pirimidin-6-il1-(2- metoxi-feniO-metanol El compuesto del título se preparó con bromuro de 2- metoxifenilmagnesio en lugar de bromuro de fenilmagnesio tal como se describió en el Ejemplo 3. 1H NMR (CLOROFORMO-d, 400 MHz): d = 7.30 - 7.40 (m, 2 H), 7.14 (d, J=3.0 Hz, 1 H), 6.97 - 7.04 (m, 1 H), 6.91 - 6.96 (m, 1 H), 6.78 (d, J=1.3 Hz, 1 H), 6.17 (d, J=6.6 Hz, 1 H), 6.13 (dd, J=3.3, 1.0 Hz, 1 H), 5.22 (br. s., 2 H), 3.84 (s, 3 H), 3.60 (d, J=7.1 Hz, 1 H), 2.43 ppm (s, 3 H); MS m/e 368 (M+H).

Ejemplo 12: 6-(2-metoxi-bencil)-2-(5-met¡l-furan-2-ih-tienof2,3-d1pirimidin-4- ilamina El compuesto del título se preparó con bromuro de 2- metoxibencilzinc en lugar de bromuro de bencilzinc tal como se describió en el Ejemplo 1. H NMR (CLOROFORMO-d, 300 MHz): d = 7.19 - 7.30 (m, 2 H), 7.13 (d, J=3.4 Hz, 1 H), 6.86 - 6.97 (m, 2 H), 6.70 (s, 1 H), 6.13 (d, J=2.6 Hz, 1 H), 5.14 (br. s., 2 H), 4.17 (s, 2 H), 3.85 (s, 3 H), 2.44 ppm (s, 3 H); MS m/e 352 (M+H).

Ejemplo 13: 6-bencil-2-piridin-3-il-tienof2,3-d1pirimidin-4-ilam¡na El compuesto del titulo se preparó con piridina-3-carbonitrilo en lugar de 5-metil-furan-2-carbonitrilo tal como se describió en el Ejemplo 1. 1H NMR (acetona, 300 MHz): d = 9.43 (s, 1 H), 8.32 - 8.63 (m, 2 H), 7.31 (dd, J=7.9, 4.9 Hz, 1 H), 7.23 (d, J=4.5 Hz, 4 H), 7.10 - 7.20 (m, 2 H), 6.80 (br. s., 2 H), 4.14 ppm (s, 2 H); MS m/e 319 (M+H).

Ejemplo 14: 6-benc¡l-2-(4-metil-t¡azol-2-il)-tieno[2,3-dlpirimidin-4-ilamina El compuesto del título se preparó con 6-bromo-2-(4-metil-tiazol-2- il)-tieno[2,3-d]pirim¡din-4-ilamina (un intermedio preparado en el Ejemplo 9) en lugar de 6-bromo-2-(5-metil-furan-2-il)-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ilamina tal como se describió en el Ejemplo 1. 1H NMR (DMSO-d6,300 MHz): d = 7.67 (s, 1 H), 7.40 (s, 1 H), 7.24 - 7.37 (m, 5 H), 4.23 (s, 2 H), 3.30 ppm (s, 3 H); MS m/e 339 (M+H).

Ejemplo 15: 6-(2-metoxi-bencil)-2-(4-metil-tiazol-2-il)-tienoí2,3-dlpir¡mid¡n-4- ¡lamina El compuesto del título se preparó con bromuro de 2-metoxibencilzinc y 6-bromo-2-(4-metil-tiazol-2-il)-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ilamina (un intermedio preparado en el Ejemplo 9) en lugar de bromuro de bencilzinc y 6-bromo-2-(5-metil-furan-2-il)-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ilamina, respectivamente, tal como se describió en el Ejemplo 1. H NMR (CLOROFORMO-d, 400 MHz): d = 7.22 (dd, J=7.3, 1.5 Hz, 2 H), 6.97 - 7.04 (m, 1 H), 6.87 - 6.97 (m, 2 H), 6.76 (s, 1 H), 5.29 (br. s., 2 H), 4.19 (s, 2 H), 3.86 (s, 3 H), 2.57 ppm (s, 3 H); MS m/e 369 (M+H).

Ejemplo 16: (±)-2-(5-metil-furan-2-il)-6-(1-fenil-etil)-tienof2,3-d1pirimidin-4- Eiemplo 16: etapa a (±)-2-amino-5-(1-fenil-etil)-tiofen-3-carbonitr¡lo Se añadió trietilamina (7.07 mi, 50.8 mmol, 0.6 equiv) en gotas por medio de un embudo de adición en una mezcla de azufre (2.71 g, 84.5 mmol, 1 equiv) y 3-fenilbutiraldehído racémico (15.1 mi, 101.5 mmol, 1.2 equiv) enfriada con hielo en DMF (17 mi). La suspensión resultante se agitó a temperatura ambiente por 50 min. Después de enfriar hasta 0 °C se añadió una solución de malononitñlo (5.59 g, 84.5 mmol, 1 equiv) en DMF (11 mi). La suspensión resultante se agitó a temperatura ambiente por 40 min, después se vertió en 200 mi de agua helada agitada y se obtuvo una suspensión alquitranada. Se añadió metanol (100 mi) y la suspensión se calentó hasta que hirvió, se filtró en caliente y se dejó enfriar. El precipitado marrón resultante se recolectó por medio de filtración al vacío y se lavó con agua. La cromatografía en columna produjo 579 mg del compuesto del título.

Ejemplo 16: etapa b (±)-2-(5-metil-furan-2-il)-6-(1-fenil-etil)-tieno[2,3-d1pirimidin-4-ilamina El compuesto del título se preparó con (±)-2-amino-5-(1 -fenil-etil)-tiofen-3-carbonitr¡lo en lugar de 2-amino-t¡ofen-3-carbon¡trilo tal como se describió en el Ejemplo 1. 1 H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-D) d ppm 7.24 - 7.37 (m, 5 H), 7.14 (d, J=3.4 Hz, 1 H), 6.70 (d, J=1.5 Hz, 1 H), 6.14 (dd, J=3.4, 0.8 Hz, 1 H), 5.22 (s, 2 H), 4.35 (q, J=7.0 Hz, 1 H), 2.44 (s, 3 H), 1.75 (d, J=7.2 Hz, 3 H); MS m/e 336 (M+H).

Ejemplo 17: (±)-2-(4-metil-tiazol-2-il)-6-(1-fenil-etil)-tienor2.3-dlpirimidin-4-ilamina El compuesto del título se preparó con (±)-2-amino-5-(1-fenil-etil)-tiofen-3-carbonitrilo (un intermedio preparado en el Ejemplo 16) y 4-metiltiazol-2-carbonitrilo en lugar de 2-amino-tiofen-3-carbonitrilo y 5-metil-furan-2-carbon¡trilo, respectivamente, tal como se describió en el Ejemplo 1. 1 H NMR (300 MHz, DMSO-D6) d ppm 7.67 (br s, 2 H), 7.45 (d, J=0.8 Hz, 1 H), 7.23 - 7.39 (m, 6 H), 4.44 (q, J=6.9 Hz, 1 H), 2.42 (s, 3 H), 1.68 (d, J=7.2 Hz, 3 H); MS m/e 353 (M+H). Ejemplo 18: 5-(4-amino-6-bencil-tienof2.3-d1pirimidin-2-il)-furan-2-carbonitrilo Eiemplo 18: etapa a 2-am¡no-5-bencil-tiofen-3-carbonitrilo El compuesto del título se preparó con 3-fenil-propionaldehído en lugar de 3-fenilbutiraldehído tal como se describió en el Ejemplo 16.

Ejemplo 18: etapa b 5-(4-amino-6-bencil-tieno[2,3-dlpirimidin-2-il)-furan-2-carbonitrilo El compuesto del título se preparó con 2-amino-5-bencil-tiofen-3-carbonitrilo y 2,5-dicianofurano en lugar de 2-amino-tiofen-3-carbonitrilo y 5-met¡l-furan-2-carbonitrilo, respectivamente, tal como se describió en el Ejemplo 1 . 1 H NMR (400 MHz, CLOROFORMO-D) d ppm 7.34 - 7.39 (m, 2 H), 7.25 - 7.32 (m, 4 H), 7.20 (d, J=3.7 Hz, 1 H), 6.76 (s, 1 H), 5.34 (br s, 2 H), 4.22 (s, 2 H); MS m/e 333 (M+H).

Ejemplo 19: 6-bencil-2-oxazol-5-il-tienof2,3-d1pir¡midin-4-ilam¡na El compuesto del título se preparó con 2-amino-5-bencil-tiofen-3-carbonitrilo (un intermedio preparado en el Ejemplo 18) y 5-oxazolcarbonitrilo en lugar de 2-amino-tiofen-3-carbonitrilo y 5-metil-furan-2-carbonitrilo, respectivamente, tal como se describió en el Ejemplo 1 . 1H NMR (400 MHz, CLOROFORMO-D) d ppm 8.00 (s, 1 H), 7.83 (s, 1 H), 7.27 - 7.38 (m, 5 H), 6.74 (s, 1 H), 5.24 (br s, 2 H), 4.21 (s, 2 H); MS m/e 309 (M+H).

Ejemplo 20: 6-bencil-2-(1-metil-1 H-imidazol-4-ilVtieno[2,3-dlpirimidin-4-ilam El compuesto del título se preparó con 2-amino-5-bencil-tiofen-3-carbonitrilo (un intermedio preparado en el Ejemplo 18) y 1-metil-1 H-imidazol-4-carbonitrilo en lugar de 2-amino-tiofen-3-carbonitrilo y 5-metil-furan-2-carbonitrilo, respectivamente, tal como se describió en el Ejemplo 1. 1 H NMR (300 MHz, DMSO-D6) d ppm 7.68 (d, J=1.5 Hz, 1 H), 7.60 (d, J=1.1 Hz, 1 H), 7.22 - 7.36 (m, 8 H), 4.18 (s, 2 H), 3.69 (s, 3 H); MS m/e 322 (M+H) Ejemplo 21 : (±)-2-oxazol-2-¡l-6-(1-fenil-etil)-tieno[2,3-dlpirimidin-4-ilamina Ejemplo 21 : etapa a Amida del ácido oxazol-2-carboxílico Se suspendió éster etílico del ácido oxazol-2-carboxílico (1 .6 g, 1 1.4 mmol) en NH4OH concentrado (32 mi) y se agitó vigorosamente.

Después de 26 h se recolectó el precipitado por medio de filtración al vacío y se obtuvo 1.1 g del compuesto del título que se usó sin purificación adicional.

Ejemplo 21 : etapa b Oxazol-2-carbonitrilo Se anadió POCb puro (1.12 mi, 12.3 mmol) en una solución de piridina (17 mi) de amida del ácido oxazol-2-carboxílico (982 mg, 8.8 mmol). Después de 4 h la mezcla se enfrió hasta 0 °C y se añadió HCI acuoso concentrado hasta obtener un pH3. La mezcla acuosa se extrajo con Et20 y los extractos combinados se lavaron con agua y después con salmuera, se secaron (Mg2S04), se concentraron y se usaron sin purificación adicional para producir 478 mg de 5-ciclopropil-furan-2-carbonitrilo. El residuo contenía agua y, por lo tanto, se disolvió en CH2CI2, se secó (Na2S04) y se concentró para producir 573 mg (70 % puro, 30 % piridina) que se usó sin purificación adicional.

Ejemplo 21 : etapa c Ejemplo 21 : (±)-2-oxazol-2-¡l-6-(1-fenil-et¡l)-tienoí2,3-dlpirimidin-4-ilam¡na El compuesto del título se preparó con (±)-2-amino-5-(1 -fenil-etil)-tiofen-3-carbonitrilo (un intermedio preparado en el Ejemplo 16) y 2-oxazolcarbonitrilo en lugar de 2-amino-tiofen-3-carbonitrilo y 5-metil-furan-2-carbonitrilo, respectivamente, tal como se describió en el Ejemplo 1 . 1 H NMR (300 MHz, CD3OD) d ppm 8.08 (d, J=0.8 Hz, 1 H), 7.39 (s, 1 H), 7.30 - 7.34 (m, 5 H), 7.21 - 7.28 (m, 1 H), 4.43 (q, J=6.9 Hz, 1 H), 1.76 (d, J=7.2 Hz, 3 H)¡ MS m/e 323 (M+H).

Ejemplo 22: 2-(5-metil-furan-2-il)-6-fenetil-tieno[2,3-dlpirimidin-4-ilamina El compuesto del título se preparó con bromuro de fenetilzinc en lugar de bromuro de bencilzinc tal como se describió en el Ejemplo 1. 1H NMR (CLOROFORMO-d, 300 MHz): d = 7.27 - 7.33 (m, 2 H), 7.18 - 7.25 (m, 3 H), 7.15 (d, J=3.0 Hz, 1 H), 6.73 (s, 1 H), 6.15 (d, J=2.6 Hz, 1 H), 5.17 (br. s.f 2 H), 3.12 - 3.26 (m, 2 H), 2.93 - 3.10 (m, 2 H), 2.45 ppm (s, 3 H); MS m/e 336 (M+H).

Ejemplo 23: 6-bencil-2-(5-ciclopropil-furan-2-il)-tieno[2,3-d1pirirnidin-4-ilamina Ejemplo 23: etapa a Éster metílico del ácido 5-ciclopropil-furan-2-carboxílico Se añadió ácido ciclopropilborónico sólido (575 mg, 6.7 mmol) en una solución de tolueno (22 ml)/agua (1.1 mi) de éster metílico del ácido 5-bromo-furan-2-carboxílico (980 mg, 4.8 mmol), Pd(OAc)2 (54 mg, 0.2 mmol), P(Cy)3 (135 mg, 0.5 mmol) y K3P04 (3.6 g, 16.8 mmol). La mezcla resultante se calentó hasta 90 °C. Después de 5 h la mezcla se enfrió, filtró y se extrajo con EtOAc. Los extractos orgánicos combinados se lavaron con agua y salmuera, se secaron (Na2S04), se concentraron y se purificaron a través de cromatografía en columna para producir 650 mg de éster metílico del ácido 5-c ¡clopropil-furan-2-carboxílico.

Ejemplo 23: etapa b Amida del ácido 5-ciclopropil-furan-2-carboxílico Se suspendió éster metílico del ácido 5-ciclopropil-furan-2-carboxílico (650 mg, 3.9 mmol) en NH4OH concentrado (20 mi) y se agitó vigorosamente. Después de 16 h la mezcla se diluyó con agua y la fase acuosa se extrajo con EtOAc. Los extractos orgánicos combinados se lavaron con agua y salmuera, se secaron (Na2S04), se concentraron y se usaron sin purificación adicional para producir 550 mg de amida del ácido 5-ciclopropil-furan-2-carboxílico.

Ejemplo 23: etapa c 5-ciclopropil-furan-2-carbonitrilo Se añadió POC puro (0.48 mi, 5.1 mmol) en una solución de piridina (9 mi) de amida del ácido 5-cícloprop¡l-furan-2-carboxílico (550 mg, 3.6 mmol). Después de 2 h la mezcla se enfrió hasta O °C y se añadió HCI acuoso concentrado hasta obtener un pH 4.5. La mezcla acuosa se extrajo con Et2Ü y los extractos combinados se lavaron con salmuera, se secaron (Na2S04), se concentraron y se usaron sin purificación adicional para producir 478 mg de 5-ciclopropil-furan-2-carbonitrilo.

Ejemplo 23: etapa d 6-bencil-2-(5-ciclopropil-furan-2-il)-tienof2,3-d1pirimidin-4-ilamina El compuesto del título se preparó con 2-amino-5-bencil-tiofen-3-carbonitrilo (un intermedio preparado en el Ejemplo 18) y 5-ciclopropil-furan-2-carbonitrilo en lugar de 2-amino-tiofen-3-carbonitrilo y 5-metil-furan-2-carbonitrilo, respectivamente, tal como se describió en el Ejemplo 1. H NMR (CLOROFORMO-d, 300 MHz): d = 7.27 - 7.37 (m, 5 H), 7.13 (d, J=3.4 Hz, 1 H), 6.68 (s, 1 H), 6.02 (d, J=2.6 Hz, 1 H), 5.23 (br. s., 2 H), 4.18 (s, 2 H), 2.05 (t, J=5.1 Hz, 1 H), 0.90 - 0.96 (m, 2 H), 0.79 - 0.84 ppm (m, 2 H); MS m/e 348 (M+H) Ejemplo 24: 6-(4-amino-6-bencil-tieno[2,3-dlpirimidin-2-il)-piridina-2-carbonitrilo El compuesto del título se preparó con 2-amino-5-bencil-tiofen-3-carbonitrilo (un intermedio preparado en el Ejemplo 18) y piridina-2,6-dicarbonitrilo en lugar de 2-amino-tiofen-3-carbon¡trilo y 5-met¡l-furan-2-carbonitrilo, respectivamente, tal como se describió en el Ejemplo 1. 1H NMR (DMSO-d6, 300 MHz): d = 8.55 - 8.64 (m, 1 H), 8.07 - 8.22 (m, 2 H), 7.76 (br. s., 2 H), 7.30 - 7.41 (m, 5 H), 6.77 (s, 1 H), 4.26 ppm (s, 2 H); MS m/e 344 (M+H) Ejemplo 25: Clorhidrato de 6-bencil-2-p¡rimidin-2-il-tienor2,3-dlpirimidin-4-ilamina El compuesto del título se preparó con 2-amino-5-bencil-tiofen- 3-carbonitrilo (un intermedio preparado en el Ejemplo 18) y pirimidina-2-carbonitrilo en lugar de 2-amino-tiofen-3-carbonitrilo y 5-metil-furan-2-carbonitrilo, respectivamente, tal como se describió en el Ejemplo 1 . 1 H NMR (DMSO-de, 300 MHz): d = 9.01 (d, J=4.9 Hz, 2 H), 7.66 (t, J=4.7 Hz, 1 H), 7.47 (s, 1 H), 7.23 - 7.42 (m, 5 H), 4.29 ppm (s, 2 H); MS m/e 320 (M+H) Ejemplo 26: 6-bencil-2-(5-terc-butil-tiofen-2-il)-tienof2,3-d1pirimidin-4-ilamina El compuesto del título se preparó con 2-amino-5-bencil-tiofen- 3-carbonitrilo (un intermedio preparado en el Ejemplo 18) y 5-terc-butil-tiofen-2-carbonitrilo en lugar de 2-amino-tiofen-3-carbonitrilo y 5-metil-furan-2-carbonitrilo, respectivamente, tal como se describió en el Ejemplo 1 . 1H NMR (CLOROFORMO-d, 300 MHz): d = 7.28 - 7.36 (m, 5 H), 6.85 (d, J=3.8 Hz, 1 H), 6.70 (s, 1 H), 6.41 (s, 1 H), 4.17 (s, 2 H), 3.91 (s, 2 H), 1.41 ppm (s, 9 H); MS m/e 380 (M+H) Ejemplo 27: 6-bencil-2-(5-isopropil-furan-2-il)-tienof2,3-d1pirimidin-4-ilamina Ejemplo 27: etapa a Ester metílico del ácido 5-isopropil-furan-2-carboxílico Se añadió una solución de THF 0.5 M (7.3 mi, 3.6 mmol) de bromuro de isopropilzinc en una solución de THF (2 mi) de éster metílico del ácido 5-bromo-furan-2-carboxílico (250 mg, 1.2 mmol) y Pd(dppf)CI2 (98 mg, 0.1 mmol) y la mezcla resultante se calentó hasta 70 °C. Después de 15 h la mezcla se enfrió, se añadió agua y la fase acuosa se extrajo con EtOAc. Los extractos orgánicos combinados se lavaron con agua y salmuera, se secaron (Na2S04), se concentraron y se purificaron a través de cromatografía en columna para producir 150 mg de éster metílico del ácido 5-isopropil-furan-2-carboxílico.

Ejemplo 27: etapa b Amida del ácido 5-isopropil-furan-2-carboxílico Se prepararon los compuestos del título con éster metílico del ácido 5-isopropil-furan-2-carboxílico en lugar de éster metílico del ácido 5- ciclopropil-furan-2-carboxílico tal como se describió én el Ejemplo 23.

Ejemplo 27: etapa c 5-isopropil-furan-2-carbonitrilo El compuesto del título se preparó con amida del ácido 5- isopropil-furan-2-carboxílico en lugar de 5-ciclopropil-furan-2-carbonitrilo tal como se describió en el Ejemplo 23.

Ejemplo 27: etapa d 6-bencil-2-(5-isopropil-furan-2-il)-tienor2,3-dlpirimidin-4-ilamina El compuesto del título se preparó con 2-amino-5-bencil-tiofen-3-carbonitrilo (un intermedio preparado en el Ejemplo 18) y 5-isopropil-furan-2-carbonitrilo en lugar de 2-amino-tiofen-3-carbonitrilo y 5-metil-furan-2-carbonitrilo, respectivamente, tal como se describió en el Ejemplo 1 . 1H NMR (CLOROFORMO-d, 400 MHz): d = 7.26 - 7.38 (m, 5 H), 7.15 (d, J=3.4 Hz, 1 H), 6.68 (s, 1 H), 6.13 (dd, J=3.4, 1 .0 Hz, 1 H), 5.21 (br. s., 2 H), 4.20 (s, 2 H), 3.04 - 3.18 (m, 1 H), 1.24 - 1 .36 ppm (m, 6 H); MS m/e 350 ( +H) Ejemplo 28: 6-bencil-2-(2-metil-tiazol-4-il)-tieno[2,3-dlp¡rimidin-4-ilamina El compuesto del título se preparó con 2-amino-5-bencil-tiofen-3-carbonitrilo (un intermedio preparado en el Ejemplo 18) y 2-metil-tiazol-4- carbonitrilo en lugar de 2-amino-tiofen-3-carbonitrilo y 5-metil-furan-2-carbonitrilo, respectivamente, tal como se describió en el Ejemplo 1. 1H NMR (CLOROFORMO-d, 300 MHz): d = 8.08 (s, 1 H), 7.27 - 7.39 (m, 5 H), 6.72 (s, 1 H), 5.25 (br. s., 2 H), 4.20 (s, 2 H), 2.82 ppm (s, 3 H); MS m/e 339 (M+H).

Ejemplo 29: 6-r2-(4-fluoro-fenil)-etil1-2-(5-metil-furan-2-il)-t¡enor2,3-dlpirimidin-4-ilamina El compuesto del título se preparó con bromuro de 4-fluorofenetilzinc en lugar de bromuro de bencilzinc tal como se describió en el Ejemplo 1. 1H NMR (CLOROFORMO-d, 300 MHz): d = 7.08 - 7.19 (m, 3 H), 6.90 - 7.02 (m, 2 H), 6.70 (s, 1 H), 6.15 (d, J=2.3 Hz, 1 H), 5.17 (br. s., 2 H), 3.11 - 3.21 (m, 2 H), 2.93 - 3.06 (m, 2 H), 2.45 ppm (s, 3 H); MS m/e 354 (M+H).

Ejemplo 30: 6-r2-(4-fluoro-fenil)-vinill-2-(5-metil-furan-2-in-tienor2.3-dlpirimidin-4-ilamina compuesto del título se preparó con ácido fluorofenil)vin¡lborónico en lugar de éster dibutílico del ácido vinilborónico tal como se describió en el Ejemplo 2. 1H NMR (CLOROFORMO-d, 300 MHz): d = 7.47 (dd, J=8.7, 5.3 Hz, 2 H), 7.19 (d, J=3.0 Hz, 1 H), 6.88 - 7.18 (m, 6 H), 6.17 (d, J=2.3 Hz, 1 H), 5.25 (br. s., 2 H), 2.46 ppm (s, 3 H); MS m/e 352 (M+H).

Ejemplo 3 : 5-(4-amino-6-bencil-tieno[2,3-dlpirimidin-2-il)-nicotinonitrilo El compuesto del título se preparó con 2-amino-5-bencil-tiofen- 3-carbonitrilo (un intermedio preparado en el Ejemplo 18) y piridina-3,5-dicarbonitrilo en lugar de 2-amino-tiofen-3-carbonitrilo y 5-metil-furan-2-carbonitrilo, respectivamente, tal como se describió en el Ejemplo 1 . 1H NMR (DMSO-de, 300 MHz): d = 9.64 (d, J=1 .9 Hz, 1 H), 9.09 (d, J=2.3 Hz, 1 H), 8.87 - 8.95 (m, 1 H), 7.70 (br. s., 2 H), 7.21 - 7.43 (m, 6 H), 4.25 ppm (s, 2 H); MS m/e 344 (M+H).

Ejemplo 32: 6-bencil-2-pirazin-2-il-tieno[2,3-dlpirimidin-4-ilamina El compuesto del título se preparó con 2-amino-5-bencil-tiofen-3-carbonitrilo (un intermedio preparado en el Ejemplo 18) y pirazina-2-carbonitrilo en lugar de 2-amino-tiofen-3-carbonithlo y 5-metil-furan-2-carbonitrilo, respectivamente, tal como se describió en el Ejemplo 1 . 1H NMR (DMSO-de, 300 MHz): d = 9.48 (s, 1 H), 8.71 - 8.84 (m, 2 H), 8.04 (br. s., 2 H), 7.43 (s, 1 H), 7.24 - 7.41 (m, 5 H), 4.28 ppm (s, 2 H); MS m/e 320 (M+H).

Ejemplo 33: 2-(5-metil-furan-2-il)-6-estiril-tienof2,3-dlpirimidin-4-ilam¡na El compuesto del título se preparó con ácido 2-fenilvinilborónico en lugar de éster dibutílico del ácido vinilborónico tal como se describió en el Ejemplo 2. 1H NMR (DMSO-d6, 300 MHz): d = 7.59 - 7.72 (m, 4 H), 7.45 -7.57 (m, 2 H), 7.39 (t, J=7.7 Hz, 2 H), 7.30 (d, J=7.2 Hz, 1 H), 7.06 (d, J=3.4 Hz, 1 H), 6.95 (d, J=16.2 Hz, 1 H), 6.28 (d, J=3.4 Hz, 1 H), 2.38 ppm (s, 3 H); MS m/e 334 (M+H).

Ejemplo 34: 6-(2-cloro-benc¡l)-2-pirimidin-2-il-tieno[2.3-dlpirimidin-4-ilamina Ejemplo 34: etapa a 3-(2-cloro-fenil)-propionaldehido Se añadió cloruro de tetrabutilamonio sólido (1 .2 g, 4.2 mmol) en una solución de DMF (5.5 mi) de Pd(OAc)2 (57 mg, 0.1 mmol), NaHC03 (880 mg, 10.5 mmol), 1-cloro-2-iodo-benceno (1.0 g, 4.2 mmol) y alcohol alílico (370 mg, 6.29 mmol) en un tubo sellado y la mezcla se calentó hasta 45 °C. Después de 22 h a 45 °C, la solución se enfrió hasta temperatura ambiente, se añadió agua y la fase acuosa se extrajo con éter, se secó (Na2S04) y se concentró para producir 0.66 g del compuesto del titulo que se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional.

Ejemplo 34: etapa b 2-am¡no-5-(2-cloro-bencil)-tiofen-3-carbonitrilo El compuesto del título se preparó con 3-(2-cloro-fenil) propionaldehído en lugar de 3-fenilbutiraldehído tal como se describió en el Ejemplo 16.

Ejemplo 34: etapa c 6-(2-cloro-bencil)-2-pirimidin-2-il-tieno[2,3-dlpirimidin-4-ilamina El compuesto del título se preparó con 2-amino-5-(2-cloro- bencil)-tiofen-3-carbonitr¡lo y pirimidina-2-carbonithlo en lugar de 2-amino- tiofen-3-carbonitrilo y 5-metil-furan-2-carbonitrilo, respectivamente, tal como se describió en el Ejemplo 1 . 1H NMR (300 MHz, CD3OD) d 9.02 (d, J = 4.90 Hz, 2H), 7.64 (t, J = 4.90 Hz, 1 H), 7.41 - 7.54 (m, 2H), 7.24 - 7.41 (m, 3H), 4.45 (s, 2H); MS m/e 354 (M+H).

Ejemplo 35: 6-[4-amino-6-(2-cloro-bencil)-t¡enof2,3-d1pirimidin-2-il1-pirid¡na-2- carbonitrilo El compuesto del título se preparó con 2-amino-5-(2-cloro- bencil)-tiofen-3-carbonitrilo (un intermedio preparado en el Ejemplo 34) y piridina-2,6-dicarbonitrilo en lugar de 2-amino-tiofen-3-carbonitrilo y 5-metil-furan-2-carbonitrilo, respectivamente, tal como se describió en el Ejemplo 1. 1H NMR (300 MHz, CD3OD) d 8.72 (d, J = 7.16 Hz, 1 H), 8.10 (t, J = 7.91 Hz, 1 H), 7.91 (d, J = 7.54 Hz, 1 H), 7.37 - 7.52 (m, 2H), 7.24 - 7.37 (m, 2H), 7.20 (s, 1 H), 4.39 (s, 2H); MS m/e 378 (M+H).

Ejemplo 36: 6-í2-cloro-bencil)-2-(4-metil-tiazol-2-¡l)-t¡eno[2.3-d1pirimidin-4-ilamina El compuesto del título se preparó con 2-amino-5-(2-cloro-bencil)-tiofen-3-carbonitrilo (un intermedio preparado en el Ejemplo 34) y 2-metil-tiazol-4-carbonitrilo en lugar de 2-amino-tiofen-3-carbonitrilo y 5-metil-furan-2-carbonitrilo, respectivamente, tal como se describió en el Ejemplo 1. 1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d, CD3OD) d 7.33 - 7.48 (m, 2H), 7.19 - 7.34 (m, 2H), 7.15 (d, J = 6.03 Hz, 2H), 4.36 (s, 2H), 2.53 (s, 3H); MS m/e 373 (M+H).

Ejemplo 37: 6-(2-cloro-bencil)-2-pirazin-2-il-tieno[2,3-dlpirimidin-4-ilamina El compuesto del titulo se preparó con 2-amino-5-(2-cloro-bencil)-tiofen-3-carbonitrilo (un intermedio preparado en el Ejemplo 34) y pirazina-2-carbonitrilo en lugar de 2-amino-tiofen-3-carbonitrilo y 5-metil-furan-2-carbonitrilo, respectivamente, tal como se describió en el Ejemplo 1. 1H NMR (300 MHz, DMSO-de) d 9.45 (d, J = 1.51 Hz, 1H), 8.61 - 8.80 (m, 2H), 7.68 (s, 2H), 7.51 (dd, J = 2.45, 6.22 Hz, 2H), 7.24 - 7.43 (m, 3H), 4.35 (s, 2H); MS m/e 354 (M+H).

Ejemplo 38: 6-(2-cloro-bencil)-2-(5-metil-furan-2-in-tienor2.3-d1pirim¡din-4-ilamina El compuesto del título se preparó con 2-amino-5-(2-cloro-bencil)-tiofen-3-carbonitrilo (un intermedio preparado en el Ejemplo 34) en lugar de 2-amino-tiofen-3-carbonitrilo tal como se describió en el Ejemplo 1. H NMR (300 MHz, DMSO-d6) d 7.41 - 7.58 (m, 4H), 7.27 - 7.42 (m, 2H), 7.21 (s, 1 H), 6.99 (d, J = 3.39 Hz, 1 H), 6.24 (d, J = 2.26 Hz, 1 H), 4.29 (s, 2H), 2.35 (s, 3H); MS m/e 356 (M+H).

Ejemplo 39: 2-(5-difluorometil-furan-2-il)-6-(2-metoxi-bencil)-tienor2,3-d]pirimidin-4-ilamina Ejemplo 39: etapa a 5-difluorometil-furan-2-carbonitrjlo En una solución de Et2NSF3 (2.8 mi, 21.4 mmol) y CH2CI2 (10 mi) a 4 °C se añadió una solución de 5-formil-furan-2-carbonitrilo (2.44 g, 20.2 mmol; W. Hoyle and G. P. Roberts, J. Med. Chem. 1973, 16, 709) en CH2CI2 (10 mi). Después de 30 min a 4 °C, se añadió NaHC03 acuoso saturado, las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con CH2CI2. Los elementos orgánicos combinados se secaron (Na2S04) y se concentraron para producir 2.15 g de 5-difluorometil-furan-2-carbonitrilo que se usó sin purificación adicional.

Ejemplo 39: etapa b 2-(5-difluorometil-furan-2-il)-6-(2-metoxi-bencil)-tienof2,3-d1pirimidin-4-ilamina El compuesto del título se preparó con bromuro de 2-metoxibencilzinc y 5-difluorometil-furan-2-carbonitrilo en lugar de bromuro de bencilzinc y 5-metil-furan-2-carbonitrilo, respectivamente, tal como se describió en el Ejemplo 1. 1H NMR (400 MHz, CDCI3) d = 7.20 - 7.31 (m, 3 H), 6.88 - 6.95 (m, 2 H), 6.79 - 6.82 (m, 1 H), 6.78 (s, 1 H), 6.76 (t, J = 54.4 Hz, 1 H), 5.86 (br. s., 2 H), 4.20 (s, 2 H), 3.86 (s, 3 H); MS m/e 388 (M+H).

Ejemplo 40: [4-am¡no-2-(2-metoxi-piridin-4-il)-t¡enor2,3-dlpirimidin-6-ill-fenil-metanol Ejemplo 40: etapa a 2-(2-metoxi-piridin-4-il)-tieno[2,3-dlpirimidin-4-ilamina El compuesto del título se preparó con 2-metoxi-isonicotinonitrilo en lugar de 5-metil-furan-2-carbonitrilo tal como se describió en el Ejemplo 1.

Ejemplo 40: etapa b Éster terc-butílico del ácido f2-(2-metoxi-piridin-4-il)-tieno[2,3-dlpirimidin-4-in-bis-carbámico Se añadió DMAP sólido (100 mg, 0.82 mmol) en una solución de THF (20 mi) de 2-(2-metoxi-piridin-4-il)-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ilamina (2.0 g, 8.0 mmol) y (Boc)20 (4.4 g, 20.2 mmol). Después de 2 h la mezcla se concentró al vacío y el sólido resultante se diluyó con CH2CI2, se filtró y el filtrado se concentró y purificó a través de cromatografía en columna para producir 3.0 g del compuesto del título.

Ejemplo 40: etapa c [4-amino-2-(2-metoxí-piridin-4-il)-t¡eno[2,3-d1pirimidin-6-il1-fenil-metanol Se añadió una solución de LDA 1.8 M (0.30 mi, 0.54 mmol) en una solución de THF a -78 °C (2.5 mi) de éster terc-butílico del ácido [2-(2-metoxi-piridin-4-il)-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-bis-carbámico (223 mg, 0.49 mmol).

Después de 8 min se añadió benzaldehído puro (77 mg, 0.73 mmol) y la mezcla se dejó calentar hasta -20 °C durante 40 min. Se añadió NH4CI acuoso saturado y las capas se separaron. Se extrajo la capa acuosa con CH2CI2 y los elementos orgánicos combinados se secaron (Na2S04), se concentraron y se purificaron a través de cromatografía en columna para producir 110 mg de éster terc-butílico del ácido [6-(h¡droxi-fenil-metil)-2-(2-metoxi-piridin-4-il)-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-bis-carbámico. Se añadió TFA (0.3 mi) puro en una solución de CH2CI2 (0.8 mi) de éster terc-butílico del ácido [6-(hidroxi-fenil-metil)-2-(2-metoxi-pirid¡n-4-il)-tieno[2,3-d]pirimid¡n-4-il]-bis-carbámico (27 mg). Después de 1 h la mezcla se concentró y el sólido resultante se dividió entre CH2CI2 y aHC03 acuoso saturado. La fase orgánica se separó, se secó (Na2S04) y se concentró para proporcionar 8 mg de [4-amino-2-(2-metoxi-piridin-4-il)-tieno[2,3-d]pirimidin-6-il]-fenil-metanol. H NMR (300 MHz, acetona-d6) d = 8.22 (d, J = 5.3 Hz, 1 H), 7.87 (d, J = 5.7 Hz, 1 H), 7.69 (s, 1 H), 7.53 (d, J = 7.5 Hz, 2 H), 7.32 - 7.44 (m, 3 H), 7.30 (s, 1 H), 6.95 (br. s., 2 H), 6.12 (d, J = 4.1 Hz, 1 H), 5,55 (d, J = 4.5 Hz, 1 H), 3.92 (s, 3 H); MS m/e 365 (M+H).

Ejemplo 41 : [4-amino-2-(5-difluorometil-furan-2-il)-tienor2,3-d1pirimidin-6-il1-fenil-metanol Ejemplo 41 : etapa a 2-(5-difluorometil-furan-2-il)-6-metil-tienof2,3-dlp¡r¡midin-4-ilamina El compuesto del título se preparó con 2-amino-5-metil-tiofen-3-carbonitrilo y 5-d¡fluorometil-furan-2-carbonitrilo (un intermedio preparado en el Ejemplo 40) en lugar de 2-amino-tiofen-3-carbonitr¡lo y 5-metil-furan-2-carbonitrilo, respectivamente, tal como se describió en el Ejemplo 1.

Ejemplo 41 : etapa b 4-amino-2-(5-difluorometil-furan-2-¡l)-tienoí2,3-d1pirimidina-6-carbaldehído Se añadió Se02 sólido (2.10 g, 18.9 mmol) en una suspensión acuosa de dioxano (20 mi) de 2-(5-difluorometil-furan-2-il)-6-metil-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ilamina (1 .77 g, 6.30 mmol) y Celite (0.75 g) y la mezcla se calentó hasta 110 °C. Después de 21 h la suspensión acuosa se envasó seca sobre gel de sílice. La cromatografía en columna produjo 900 mg de 4-amino^-ÍS-difluorometil-furan^-i -tieno^.S-dlpirimidina-S-carbaldehído.

Ejemplo 41 : etapa c [4-amino-2-(5-difluorometil-furan-2-il)-tieno[2,3-dlpirimidin-6-in-fenil-metanol El compuesto del título se preparó con 4-amino-2-(5-difluorometil-furan-2-il)-tieno[2,3-d]pirimidina-6-carbaldehído en lugar de 4-amino-2-(5-metil-furan-2-il)-tieno[2,3-d]pirimidina-6-carbaldehído tal como se describió en el Ejemplo 2. 1H NMR (300 MHz, acetona-d6) d = 7.44 - 7.60 (m, 2 H), 7.11 - 7.44 (m, 6 H), 6.99 (t, J = 53.7 Hz, 1 H), 6.87 - 7.07 (m, 2 H), 6.10 (br. s., 1 H), 5.54 (br. s., 1 H); MS m/e: 374 (M+H).

Ejemplo 42: 4-{4-amino-6-[hidroxi-(2-metoxi-fenil)-metil1-tieno[2,3-d1pirimidi 2-il}-piridina-2-carbonitrilo El compuesto del título se preparó con p¡rid¡na-2,4-dicarbon¡tr¡lo y 2-metox¡benzaldehído en lugar de 2-metoxi-isonicotinonitrilo y benzaldehido, respectivamente, tal como se describió en el Ejemplo 40. 1H NMR (300 MHz, acetona-de) d = 8.83 (d, J = 4.9 Hz, 1 H), 8.69 (s, 1 H), 8.54 (dd, J = 1.7, 5.1 Hz, 1 H), 7.62 (dd, J = 1.5, 7.5 Hz, 1 H), 7.24 - 7.39 (m, 2 H), 6.95 - 7.18 (m, 4 H), 6.42 (d, J = 4.9 Hz, 1 H), 5.35 (d, J = 4.9 Hz, 1 H), 3.88 (s, 3 H); MS m/e: 390 (M+H).

Ejemplo 43: 6-bencil-2-(5-difluorometil-furan-2-il)-tienor2,3-dlpirimidin-4-ilamina El compuesto del título se preparó con 5-difluorometil-furan-2-carbonitrilo en lugar de 5-metil-furan-2-carbonitrilo tal como se describió en el Ejemplo 1. H NMR (400 MHz, CDCI3) d = 7.12 - 7.42 (m, 6 H), 6.77 - 6.82 (m, 2 H), 6.76 (t, J = 54.4 Hz, 1 H), 6.08 (br. s., 2 H), 4.19 (s, 2 H); MS m/e 358 (M+H).

Ejemplo 44: 6-bencil-2-(2-metoxi-piridin-4-il)-tienor2.3-dlpirimidin-4-ilamina El compuesto del titulo se preparó con 2-metox¡-isonicotinonitrilo en lugar de 5-metil-furan-2-carbon¡tr¡lo tal como se describió en el Ejemplo 1 . 1 H NMR (300 MHz, acetona-d6) d = 8.22 (d, J = 5.3 Hz, 1 H), 7.86 (d, J = 5.3 Hz, 1 H), 7.69 (s, 1 H), 7.35 (d, J = 4.5 Hz, 4 H), 7.28 (s, 2 H), 6.94 (br. s., 2 H), 4.27 (s, 2 H), 3.93 (s, 3 H); MS m/e 349 (M+H).

Ejemplo 45: [4-amino-2-(5-difluorometil-furan-2-¡l)-tieno[2,3-dlpirimidin-6-il1- (2-metox¡-fenil)-metanol El compuesto del título se preparó con 4-amino-2-(5-difluorometil-furan-2-il)-tieno[2,3-d]pirimidina-6-carbaldehído (un intermedio preparado en el Ejemplo 41) y bromuro de 2-metoxifenilmagnesio en lugar de 4-amino-2-(5-metil-furan-2-il)-tieno[2,3-d]pirimidina-6-carbaldehido y bromuro de fenilmagnesio, respectivamente, tal como se describió en el Ejemplo 2. 1H NMR (300 MHz, acetona-de) d = 7.61 (d, J = 7.5 Hz, 1 H), 7.23 - 7.37 (m, 2 H), 7.18 (br. s., 1 H), 6.99 (t, J = 53.1 Hz, 1 H), 6.85 - 7.07 (m, 5 H), 6.39 (d, J = 4.5 Hz, 1 H), 5.29 (br. s., 1 H), 3.85 (s, 3 H)¡ MS m/e 404 (M+H).

Ensayos y actividad biológica Ensayo de unión de liqandos para el receptor de adenosina A2a El ensayo de unión de ligandos del receptor de adenosina A2a se realizó con membrana plasmática de células HEK293 que contenían el receptor de adenosina A2a (PerkinElmer, RB-HA2a) y el radioligando [3H]CGS21680 (PerkinElmer, NET1021). El ensayo se realizó en una placa de polipropileno de 96 pocilios en un volumen total de 200 pL por la adición en secuencia de 20 pide membrana diluida 1 :20, 130 µ?_ de amortiguador de ensayo (Tris HCI 50 mM, pH 7.4, MgCI2 10 mM, EDTA 1 mM) que contenía [3H] CGS21680, 50 µ?_ del compuesto diluido (4X) o vehículo de control en el amortiguador de ensayo. Se determinó la unión no específica con 80 mM de ÑECA. La reacción se realizó a temperatura ambiente por 2 horas antes del filtrado a través de una placa de filtro GF/C de 96 pocilios remojada previamente en Tris HCI 50 mM, pH 7.4 que contenía 0.3 % de polietilenimina. Después, las placas se lavaron 5 veces con Tris HCI 50 mM frío, pH 7.4, se secaron y sellaron en el fondo. Se añadieron 30 µ?_ de fluido de centelleo en cada pocilio y la parte superior se selló. Las placas se contaron en un Packard Topcount para [3H]. Los datos se analizaron en los programas Microsoft Excel y GraphPad Prism. (Varani, K.; Gessi, S.; Dalpiaz, A.; Borea, P.A. British Journal of Pharmacology, 1996, 117, 1693) Ensayo funcional del receptor de adenosina A2a (A2AGAL2) Para comenzar el ensayo funcional se descongelaron células CHO-K1 criopreservadas que sobreexpresaban el receptor de adenosina A2a humana y contenían un gen reportero de la beta-galactosidasa inducible por cAMP, se centrifugaron, se eliminó el medio que contenía DMSO y después se sembraron con medio de cultivo fresco en placas tratadas con cultivo de tejido de 384 pocilios transparentes (BD núm. 353961) a una concentración de 10 K células/pocilio. Antes del ensayo, estas placas se cultivaron por dos días a 37 °C, 5 % de CO2, 90 % de humedad relativa. El día del ensayo funcional, el medio de cultivo se eliminó y se reemplazó con 45 uL del medio de ensayo (Hams/F-12 modificado (Mediatech núm. 10-080 CV) suplementado con 0.1 % de BSA). Los compuestos de prueba se diluyeron y se crearon curvas de 11 puntos a una concentración de 1000x en 100 % de DMSO. Inmediatamente después de la adición del medio de ensayo en las placas de células, se añadieron 50 nL de las curvas de control del antagonista o agonista del compuesto de prueba adecuado en las placas de células con un instrumento Cartesian Hummingbird. Las curvas del compuesto se dejaron incubar a temperatura ambiente en placas de células por aproximadamente 15 minutos antes de la adición del agonista ÑECA 15 nM (Sigma E2387) (volumen de 5 uL). Además, en cada placa se incluyó una curva de control de ÑECA, un control DMSO/medio y una sola dosis de Forskolin (Sigma F3917). Después de las adiciones, las placas de células se dejaron incubar a 37 °C, 5 % de C02, 90 % de humedad relativa por 5.5 - 6 horas. Después de la incubación, el medio se eliminó y las placas se lavaron con 1x 50 uL de DPBS sin Ca & Mg (Mediatech 21-031-CV). En pocilios secos se añadieron 20 uL de 1x amortiguador de lisis Repórter Lysis Buffer (Promega E3971 (diluido en dh^O de solución matriz 5x)) en cada pocilio y las placas se congelaron a -20 °C de un día para el otro. Para el ensayo colorimétrico de la enzima ß-galactosidasa, las placas se descongelaron a temperatura ambiente y se añadieron 20 pL de amortiguador de ensayo 2X (Promega) en cada pocilio. Se dejó que el color se desarrollara a 37 °C, 5 % de C02, 90 % de humedad relativa por 1 - 1.5 h o hasta que apareciera una señal razonable. La reacción colorimétrica se detuvo con la adición de 60 pUpocillo de carbonato sódico 1 M. Las placas se contaron a 405 nm en un Lector de microplaca SpectraMax (Molecular Devices). Los datos se analizaron en Microsoft Excel y las curvas de IC/EC50 se ajustaron con una macro estándar.

Ensayo funcional del receptor de adenosina A1 (A1GAL2) Para comenzar el ensayo funcional se descongelaron células CHO-K1 criopreservadas que sobreexpresaban el receptor de adenosina A1 humana y contenían un gen reportero de la beta-galactosidasa inducible por cAMP, se centrifugaron, se eliminó el medio que contenía DMSO y después se sembraron con medio de cultivo fresco en placas tratadas con cultivo de tejido de 384 pocilios transparentes (BD núm. 353961) a una concentración de 10 K células/pocilio. Antes del ensayo, estas placas se cultivaron por dos días a 37 °C, 5 % de C02, 90 % de humedad relativa. El día del ensayo funcional, el medio de cultivo se eliminó y se reemplazó con 45 uL del medio de ensayo (Hams/F-12 modificado (Mediatech núm. 10-080 CV) suplementado con 0.1 % de BSA). Los compuestos de prueba se diluyeron y se crearon curvas de 11 puntos a una concentración de 1000x en 100 % de DIVISO. Inmediatamente después de la adición del medio de ensayo en las placas de células se añadieron 50 nl_ de las curvas de control del antagonista o agonista del compuesto de prueba adecuado en las placas de células con un instrumento Cartesian Hummingbird. Las curvas del compuesto se dejaron incubar a temperatura ambiente en placas de células por aproximadamente 15 minutos antes de la adición del agonista 4 nM r-PIA (Sigma P4532)/1 uM Forskolin (Sigma F3917) (volumen de 5 uL). Además, en cada placa se incluyó una curva de control de r-PIA en 1 uM Forskolin, un control DMSO/medio y una sola dosis de Forskolin. Después de las adiciones las placas de células se dejaron incubar a 37 °C, 5 % de CO2, 90 % de humedad relativa por 5.5 - 6 horas. Después de la incubación el medio se eliminó y las placas se lavaron con 1x 50 uL de DPBS sin Ca & Mg (Mediatech 21-031-CV). En pocilios secos se añadieron 20 uL de 1x amortiguador de lisis Repórter Lysis Buffer (Promega E3971 (diluido en dH2O de solución matriz 5x)) en cada pocilio y las placas se congelaron a -20 °C de un día para el otro. Para el ensayo colorimétrico de la enzima ß-galactosidasa, las placas se descongelaron a temperatura ambiente y se añadieron 20 pL de amortiguador de ensayo 2X (Promega) en cada pocilio. Se dejó que el color se desarrollara a 37 °C, 5 % de CO2, 90 % de humedad relativa por 1 - 1.5 h o hasta que apareciera una señal razonable. La reacción colorimétrica se detuvo con la adición de 60 pL/pocillo de carbonato sódico 1 M. Las placas se contaron a 405 nm en un Lector de microplaca SpectraMax (Molecular Devices). Los datos se analizaron en Microsoft Excel y las curvas de IC/EC50 se ajustaron con una macro estándar.

Datos del ensayo de A2A Ejemplo A2AGAL2 Ki µ? A2A-B Ki µ? A1GAL2 Ki µ? 1 0.0109926 0.0119399 0.27919 2 0.00227667 ND 0.0208161 3 ND ND ND 4 ND ND ND 5 0.230091 0.100092 0.50501 6 ND ND ND 7 ND 0.328322 ND 8 0.0487641 ND 0.222741 9 0.0309528 ND >0.593882 10 0.106758 ND >0.610098 11 0.0019829 0.00671583 0.0102117 12 0.0101251 0.0509918 0.115319 13 0.215328 0.192221 1.41775 14 0.0160731 0.0462914 1.49108 15 0.0132251 ND 0.185695 16 0.0478189 ND 0.909704 17 0.100161 ND 1.41579 18 0.304158 ND 3.16301 19 0.00248485 ND 0.100161 20 0.538766 ND 2.33185 21 0.0193776 0.0726775 1.17679 22 0.188539 0.0500034 2.7574 23 0.26339 ND 0.861391 24 0.0264302 ND >1.03825 25 0.0174944 ND 0.618301 26 ND ND ND 27 ND ND ND 28 0.0572268 ND 0.262603 29 0.0611646 0.00660998 1.57073 30 0.937994 0.172982 20.1511 31 ND ND ND 32 0.00241546 ND 0.0909494 33 0.235831 0.0260016 3.3381 34 ND ND ND 35 ND ND ND 36 ND ND ND 37 ND ND ND 38 ND ND ND 39 0.0130497 ND 0.515822 40 ND ND ND 41 0.0112538 0.0179019 0.223203 42 ND ND ND 43 0.0252348 0.0375059 2.99778 44 ND ND ND 45 0.00437019 ND 0.0343637 ND indica que no habia datos disponibles.

Aunque la especificación anterior enseña los principios de la presente invención con ejemplos provistos para fines de ilustración, se entenderá que la práctica de la invención abarca todas las variaciones, adaptaciones o modificaciones usuales que entran dentro del alcance de las siguientes reivindicaciones y sus equivalentes.

Todas las publicaciones descritas en la especificación anterior se incorporan en su totalidad como referencia en la presente invención.

Claims (20)

1. NOVEDAD DE LA INVENCION REIVINDICACIONES . Un compuesto de la Fórmula Z Z en donde: X se selecciona del grupo que consiste de: I 0H II 0 7 R1 es heteroarilo sustituido opcionalmente con un sustituyente seleccionado del grupo que consiste de: -OH, OC^alquilo, CF3, OCF3l Cl, Br, -CN, F, CHF2, C(i-4)alquilo y ciclopropilo; R2 es fenilo, en " donde el fenilo está sustituido opcionalmente con hasta tres sustituyentes seleccionados independientemente del grupo que consiste de F, Cl, Br y OCH3 o con un solo sustituyente seleccionado del grupo que consiste de: OH, OCH2CF3, OC(i-4)alquilo, C(i-4)alquilo, CHF2, OCF3, CF3 y CN; en donde el C(i-4)alquilo está sustituido opcionalmente con un anillo seleccionado del grupo que consiste de: en donde Ra, Rb y Rc son, independientemente, H o C( -4)alquilo; Rd es H, - Cc jalquilo, -CH2CH2OCH2CH2OCH3, -CH2C02H, -C(O)C(i-4)alquilo o - CH2C(0)C(i-4)alquilo; y solvatos, hidratos, tautómeros y sales farmacéuticamente aceptables de éstos.
2. 2. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque: R1 es heteroarilo sustituido opcionalmente con un sustituyente seleccionado del grupo que consiste de: -OH, OCF3, Cl, Br, -CN, F, CHF2> C(i_4)alquilo y ciclopropilo; R2 es fenilo sustituido con un sustituyente seleccionado del grupo que consiste de: H, -OH, OC(i. 4)alquilo, OCF3, CHF2, CF3, Cl, Br, -CN, F y C(i- )alquilo, en donde el C0- 4)alquilo está sustituido opcionalmente con morfolinilo, piperidinilo o piperazinilo; y solvatos, hidratos, tautómeros y sales farmacéuticamente aceptables de éstos.
3. 3. El compuesto de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado además porque: R1 es heteroarilo seleccionado del grupo que consiste de: furilo, tiazolilo, piridilo, oxazolilo, imidazolilo, pirimidilo, tiofenilo y piridazilo, en donde el heteroarilo está sustituido opcionalmente con un sustituyente seleccionado del grupo que consiste de: OC^alquilo, OCF3, -CN, F, CHF2, C(i-4)alquilo y ciclopropilo; R2 es fenilo sustituido con un sustituyente seleccionado del grupo que consiste de: H, -OH, OC^alquilo, OCF3, CHF2, CF3, F, Cl y C(-i-4)alquilo, en donde el C(i-4)aIquilo está sustituido opcionalmente con morfolinilo, piperidinilo o piperazinilo; y solvatos, hidratos, tautómeros y sales farmacéuticamente aceptables de éstos.
4. 4. El compuesto de conformidad con la reivindicación 3, caracterizado además porque: R1 es heteroarilo seleccionado del grupo que consiste de: furilo, tiazolilo, piridilo, oxazolilo, imidazolilo, pirimidilo, tiofenilo y piridazilo, en donde el heteroarilo está sustituido opcionalmente con un sustituyente seleccionado del grupo que consiste de: C^alquilo, OCH3, -CN, CHF2 y ciclopropilo; R2 es fenilo sustituido con un sustituyente seleccionado del grupo que consiste de: H, -OH, OCH3, OCF3, CHF2, CF3, F, Cl y C(1- 4)alquilo, en donde el C^alquilo está sustituido opcionalmente con morfolinilo; y solvatos, hidratos, tautómeros y sales farmacéuticamente aceptables de éstos.
5. 5. El compuesto de conformidad con la reivindicación 4, caracterizado además porque: R se selecciona del grupo que consiste de: R2 es fenilo sustituido con un sustituyente seleccionado del grupo que consiste de: H, -Chb-morfolinilo, OCH3, F y Cl; y solvatos, hidratos, tautómeros y sales farmacéuticamente aceptables de éstos.
6. 6. Un compuesto seleccionado del grupo que consiste de: 96 97 98 100 y solvatos, hidratos, tautómeros y sales farmacéuticamente aceptables de éstos.
7. 7. Una composición farmacéutica que comprende el compuesto de la reivindicación 1 , y un portador farmacéuticamente aceptable.
8. 8. El uso del compuesto de la reivindicación 1 , para preparar un medicamento para tratar un trastorno que se mejora por la antagonizacion de los receptores de adenosina A2a en células adecuadas en un sujeto.
9. 9. El uso del compuesto de la reivindicación 1 , para preparar un medicamento para prevenir un trastorno que se mejora por la antagonizacion de los receptores de adenosina A2a en células adecuadas en un sujeto; en donde dicho medicamento está adaptado para ser administrable ya sea antes o después de un evento que se piensa causará un trastorno que se mejora por la antagonizacion de los receptores de adenosina A2a en las células adecuadas en el sujeto.
10. 10. El uso de la composición farmacéutica de la reivindicación 7, para preparar un medicamento para tratar un trastorno que se mejora por la antagonizacion de los receptores de adenosina A2a en células adecuadas en un sujeto.
11. 11. El uso de la composición farmacéutica de la reivindicación 7, para preparar un medicamento para prevenir un trastorno que se mejora por la antagonización de los receptores de adenosina A2a en células adecuadas en un sujeto; en donde dicho medicamento está adaptado para ser administrable ya sea antes o después de un evento que se piensa causará un trastorno que se mejora por la antagonización de los receptores de adenosina A2a en las células adecuadas en el sujeto.
12. 12. El uso como el que se reclama en la reivindicación 8, en donde el trastorno es un trastorno neurodegenerativo o un trastorno motor.
13. 13. El uso como el que se reclama en la reivindicación 8, en donde el trastorno se selecciona del grupo que consiste de enfermedad de Parkinson, enfermedad de Huntington, atrofia sistémica múltiple, degeneración corticobasal, enfermedad de Alzheimer y demencia senil.
14. 14. El uso como el que se reclama en la reivindicación 9, en donde el trastorno es un trastorno neurodegenerativo o un trastorno motor.
15. 15. El uso como el que se reclama en la reivindicación 9, en donde el trastorno se selecciona del grupo que consiste de enfermedad de Parkinson, enfermedad de Huntington, atrofia sistémica múltiple, degeneración corticobasal, enfermedad de Alzheimer y demencia senil.
16. 16. El uso como el que se reclama en la reivindicación 8, en donde el trastorno es la enfermedad de Parkinson.
17. 17. El uso como el que se reclama en la reivindicación 8, en donde el trastorno es la adicción.
18. 18. El uso como el que se reclama en la reivindicación 8, en donde el trastorno es la hiperactividad y el déficit de atención (ADHD).
19. 19. El uso como el que se reclama en la reivindicación 8, en donde el trastorno es la depresión.
20. 20. El uso como el que se reclama en la reivindicación 8, en donde el trastorno es la ansiedad.