MX2011001985A - Preparacion de la proteina de canola islada a partir de semillas de aciete de canola ("blendertein"). - Google Patents

Preparacion de la proteina de canola islada a partir de semillas de aciete de canola ("blendertein").

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MX2011001985A
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Brent E Green
Martin Schweizer
Kevin I Segall
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Burcon Nutrascience Mb Corp
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Abstract

La proteína canola aislada es recuperada de las semillas de aceite de canola y extraídas de las semillas de aceite de canola aplastadas. Grasa co-extraída de semillas de aceite de canola aplastadas son removidas de la solución de la proteína de canola acuosa la caul posteriormente es procesada por la ruta de obtención del aislado de proteína canola.

Description

PREPARACIÓN DE LA PROTEÍNA DE CAÑOLA AISLADA A PARTIR DE SEMILLAS DE ACEITE DE CA OLA ( "BLENDERTEIN" ) REFERENCIA A SOLICITUD RELACIONADA Esta solicitud reclama propiedad dentro del marco de 35 USC 119(e) de la solicitud de patente provisional norteamericana No. 61/136,192 presentada el dia 18 de agosto de 2008.
CAMPO DE LA INVENCIÓN La presente invención se refiere a la preparación de aislado de proteina de cañóla.
ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN En el procesamiento de semillas de aceite de cañóla, las semillas son trituradas para remover la mayor parte del componente de aceite de cañóla de las semillas. Las semillas trituradas residuales son extraídas con solvente, habitualmente mediante la utilizando de hexano, con el objeto de recuperar el resto del aceite. El solvente es entonces recuperado para reutilización para producir una harina de semilla de aceite de cañóla .
Los aislados de proteína de semilla de aceite de cañóla que tienen contenidos de proteína de por lo menos 100 por ciento en peso (N x 6.25) pueden formarse a partir de harina de semilla de aceite a través de un proceso descrito en la Solicitud de Patente Norteamericana copendiente No. 10/137,391 presentada el 3 de mayo de 2002 (Publicación de Solicitud de Patente Norteamericana No. 2003-0125526 Al y WO 02/089597) y la Solicitud de Patente Norteamericana No. 10 / 476 , 2 30 presentada el 9 de junio de 2 004 (Publicación de Solicitud de Patente Norteamericana No. 2 004- 0254353 Al), asignadas al cesionario del presente y cuyas divulgaciones se incorporan aquí por referencia. El procedimiento incluye un proceso de pasos múltiples que comprende los pasos siguientes: extraer harina de semilla de aceite de cañóla mediante la utilización de una solución de sal acuosa, separar la solución de proteina acuosa resultante de la harina de semilla de aceite residual, incrementar la concentración de proteína de la solución acuosa a por lo menos aproximadamente 200 g/L mientras se mantiene la fuerza iónica sustancialmente constante mediante la utilización de una técnica de membrana selectiva, diluir la solución de proteína concentrada resultante en agua enfriada para provocar la formación de micelas de proteína, asentar las micelas de proteína para formar una masa micelar de proteína (P M) de tipo gluten, gelatinosa, pegajosa, amorfa, y recuperar la masa micelar de proteína del sobrenadante que tiene un contenido de proteína de por lo menos aproximadamente 100 por ciento en peso (N x 6 . 25 ) . Como se utiliza aquí, el contenido de proteína es determinado en base a peso seco. La masa micelar de proteína (PMM) recuperada puede ser secada.
En una modalidad del proceso, el sobrenadante de proteína de cañóla del paso de asentamiento de masa micelar de proteína (PMM) es procesado para recuperar aislado del sobrenadante.
Este procedimiento puede ser efectuado concentrando inicialmente el sobrenadante de proteína de cañóla mediante la utilización de una membrana de ultrafiltración y secando el concentrado. El aislado de proteína de cañóla resultante tiene un contenido de proteína de por lo menos aproximadamente 90 por ciento en peso, preferentemente por lo menos aproximadamente 100 por ciento en peso (N x 6 . 25 ) .
Los procedimientos descritos en la Solicitud de Patente Norteamericana No. 10 / 137 , 39 1 son esencialmente procedimientos en lotes. En la Solicitud de patente norteamericana copendiente No. 10 / 298 , 678 presentada el 19 de noviembre de 2 002 (WO 03 / 043439 ) asignada al cesionario de la presente y cuyas divulgaciones se incorporan aquí por referencia, se describe un proceso continuo para preparar aislados de proteína de cañóla. De conformidad con esto, la harina de semilla de aceite de cañóla es mezclada continuamente con una solución de sal acuosa, la mezcla es transportada a través de una tubería mientras se extrae proteína de la harina de semilla de aceite de cañóla para formar una solución de proteína acuosa, la solución de proteína acuosa es continuamente transportada a través de una operación de membrana selectiva con el objeto de incrementar el contenido de proteina de la solución de proteína acuosa a por lo menos aproximadamente 50 g/L, mientras se mantiene la fuerza iónica sustancialmente constante, la solución de proteína concentrada resultante es continuamente mezclada con agua enfriada para provocar la formación de micelas de proteína, y se dejan asentar continuamente las micelas de protelna mientras el sobrenadante es continuamente desbordado hasta que se haya acumulado en el recipiente de asentamiento la cantidad deseada de PMM. La PMM es recuperada a partir del recipiente de asentamiento y puede ser secada. La PMM tiene un contenido de proteina de por lo menos aproximadamente 90 por ciento en peso (N x 6.25), preferentemente por lo menos aproximadamente 100 por ciento en peso. El sobrenadante desbordado puede ser procesado para recuperar aislado de proteína de cañóla de ahí, de conformidad con lo descrito arriba.
Los solicitantes están conscientes de procedimientos utilizados para recuperar varias proteínas a partir de semillas de aceite en donde las semillas de aceite son molidas y después procesadas para recuperar la proteína. Ejemplos representativos son las patentes norteamericanas Nos. 2,762,820 y 4,151,310. La cañóla no es una de las semillas de aceite procesadas en estos procedimientos de la técnica anterior.
La cañóla se conoce también como colza o colza para semilla de aceite .
COMPENDIO DE LA INVENCIÓN En el proceso de la presente invención, se omite el paso inicial de remoción de aceite que se efectúa generalmente en semillas de aceite de cañóla. De conformidad con un aspecto de la presente invención, se proporciona un proceso para la preparación de un aislado de proteina de cañóla a partir de semillas de aceite de cañóla, que comprende: moler las semillas de aceite de cañóla, extraer las semillas de aceite de cañóla molida con un medio de extracción acuoso para solubilizar la proteina de cañóla en las semillas de aceite de cañóla molidas para formar una solución de proteina de cañóla acuosa, separar la solución de proteina de cañóla acuosa de las semillas de aceite de cañóla molidas residuales, desengrasar la solución de proteina de cañóla acuosa, clarificar la solución de proteina de cañóla acuosa desengrasada, concentrar la solución de proteina de cañóla acuosa clarificada mientras se conserva la fuerza iónica sustancialmente constante para formar una solución de proteina de cañóla concentrada, opcionalmente , diafiltrar la solución de proteina de cañóla concentrada , opcionalmente pasteurizar la solución de proteina de cañóla concentrada y opcionalmente diafiltrada, diluir la solución de proteina de cañóla concentrada en agua fría para provocar la formación de micelas de proteina de cañóla, recoger las micelas de proteina de cañóla como una masa micelar de proteina, secar la masa micelar de protelna para formar un aislado de proteina de cañóla que tiene un contenido de proteina de por lo menos aproximadamente 90% en peso (N x 6.25) con base en peso seco, preferentemente por lo menos aproximadamente 100% en peso con base en peso seco, y opcionalmente , procesar el sobrenadante proveniente de la recolección de la masa micelar de proteina para formar un aislado de proteina de cañóla adicional que tiene un contenido de proteina de por lo menos aproximadamente 90% en peso (N x 6.25) con base en peso seco, preferentemente por lo menos aproximadamente 100% en peso con base en peso seco.
El procedimiento utilizado aquí para recuperar un aislado de proteina de cañóla a partir de semillas de aceite de cañóla es superior al proceso de recuperación de aislado de proteina de cañóla de conformidad con los procesos descritos arriba, en donde el material inicial es la harina residual proveniente del procesamiento de las semillas de aceite de cañóla para el propósito primario de recuperar el aceite de las semillas, en la medida en que se obtiene un producto de calidad más elevada aqui en términos de color del aislado, es decir, con menor pigmentación .
El aislado de proteina de cañóla producido de conformidad con el proceso de la presente invención puede utilizarse en aplicaciones convencionales de aislado de proteina, como por ejemplo fortificación con proteina de alimentos procesados y bebidas, emulsificación de aceites, formadores de cuerpo en productos horneados y agentes espumantes en producto que atrapan gases. Además, el aislado de proteína de cañóla puede formarse en fibras de proteína, útiles en análogos de carne, pueden utilizarse como sustituto de albúmina de huevo o extendedor en productos alimenticios en donde se utiliza la albúmina de huevo como aglomerante. El aislado de proteína de cañóla puede utilizarse como suplemento nutricional. Otros usos del aislado de proteína de cañóla son alimentos para mascotas, alimentos para animales y aplicaciones industriales y cosméticas así como en productos de cuidado personal.
DESCRIPCIÓN GENERAL DE LA INVENCIÓN En la presente invención, semillas de aceite de cañóla intactas son molidas para proporcionar una masa molida de semillas de aceite de cañóla. El paso inicial del proceso de proporcionar un aislado de proteína de cañóla a partir de la masa molida de semillas de aceite de cañóla incluye la solubilización de material proteináceo a partir de las semillas de aceite de cañóla molidas. Alternativamente, las semillas pueden ser molidas en húmedo, utilizando cualquier equipo conveniente, como por ejemplo una bomba de alto corte, para moler las semillas y simultáneamente solubilizar la proteína. El material proteináceo recuperado de la semilla de cañóla puede ser la proteína que ocurre naturalmente en la semilla de cañóla o bien el material proteináceo puede ser una proteína modificada por manipulación genética pero que posee propiedades hidrofóbicas y polares características de la proteína natural.
La solubilización de proteína se efectúa más eficientemente mediante la utilización de una solución de sal de grado de alimento puesto que la presencia de sal incrementa la remoción de proteína soluble de la harina de semilla de aceite. Cuando el aislado de proteína de cañóla se contempla para usos no alimenticios, se pueden utilizar químicos de grado no alimenticio. La sal habitualmente es cloruro de sodio, aun cuando otras sales como, por ejemplo, cloruro de potasio, pueden utilizarse. La solución de sal tiene una fuerza iónica de por lo menos aproximadamente 0.05 M, preferentemente por lo menos aproximadamente 0.10 M, para permitir la solubilización de cantidades significativas de proteína a efectuar. Conforme se incrementa la fuerza iónica de la solución de sal, el grado de solubilización de proteína en la harina de semilla de aceite se eleva inicialmente hasta alcanzar un valor máximo. Cualquier incremento subsecuente de la fuerza iónica no eleva la proteína total solubilizada . La fuerza iónica de la solución salina de grado de alimento que provoca la solubilización máxima de proteína varía según la sal en cuestión.
Tomando en cuenta el mayor grado de dilución requerido para precipitación de proteína con fuerzas iónicas crecientes, se prefiere habitualmente utilizar un valor de fuerza iónica inferior a aproximadamente 0.8, con mayor preferencia un valor de fuerza iónica comprendido entre aproximadamente 0.1 y aproximadamente 0.15.
En un proceso en lotes, la solubilización de sal de la proteina se efectúa a una temperatura de aproximadamente 5°C hasta aproximadamente 15° C, preferentemente acompañada por agitación para reducir el tiempo de solubilización, que es habitualmente de aproximadamente 10 minutos hasta aproximadamente 60 minutos. Se prefiere efectuar la solubilización para extraer sustancialmente la mayor cantidad posible de proteina de la harina de semilla de aceite con el objeto de proporcionar un rendimiento global de producto elevado.
El limite de temperatura inferior de aproximadamente 5°C se elige puesto que la solubilización es imprácticamente lenta debajo de esta temperatura mientras que el limite de temperatura preferido superior de aproximadamente 75 °C se elige debido a la temperatura de desnaturalización de las proteínas. En un proceso continuo, la extracción de la proteina a partir de la harina de semilla de aceite de cañóla se efectúa de una manera consistente con la realización de una extracción continua de proteina a partir de la harina de semilla de aceite de cañóla. En una modalidad, la harina de semilla de aceite de cañóla es mezclada continuamente con la solución de grado de alimento y la mezcla es transportada a través de una tubería o conducto que tiene una longitud y un caudal apropiados para lograr un tiempo de residencia suficiente para efectuar la extracción deseada de conformidad con los parámetros descritos en el presente. En dicho procedimiento continuo, el paso de solubilización por salado se efectúa rápidamente, en un lapso de hasta aproximadamente 10 minutos, preferentemente para efectuar la solubilización para extraer sustancialmente la mayor cantidad posible de proteína de la harina de semilla de aceite de cañóla. La solubilización en el procedimiento continuo se efectúa a temperaturas comprendidas entre aproximadamente 5°C y aproximadamente 75°C, preferentemente entre aproximadamente 15°C y aproximadamente 35°C.
La solución acuosa de sal de grado de alimento tiene generalmente un pH de aproximadamente 5 a aproximadamente 6.8, preferentemente de aproximadamente 5.3 a aproximadamente 6.2, el pH de la solución de sal puede ser ajustado a cualquier valor deseado dentro del rango de aproximadamente 5 a aproximadamente 6.8 para uso en el paso de extracción mediante la utilización de cualquier ácido conveniente, habitualmente ácido clorhídrico, o álcali, habitualmente hidróxido de sodio, según lo requerido.
La concentración de harina de semilla de aceite en la solución de sal de grado de alimento durante el paso de solubilización puede variar ampliamente. Valores típicos de concentración son de aproximadamente 5% peso/volumen hasta aproximadamente 25% peso/volumen .
El paso de extracción de proteína con la solución de sal acuosa tiene el efecto adicional de solubilizar grasas que pueden estar presentes en la harina de cañóla, que entonces resulta en grasas presentes en la fase acuosa.
La solución de proteína que resulta del paso de extracción tiene generalmente una concentración de proteína de aproximadamente 5 g/L hasta aproximadamente 40 g/L, preferentemente de aproximadamente 10 g/L hasta aproximadamente 30 g/L.
La solución de sal acuosa puede contener un antioxidante. El antioxidante puede ser cualquier antioxidante conveniente, como por ejemplo sulfito de sodio o ácido ascórbico. La cantidad de antioxidante que se emplea puede variar de aproximadamente 0.01 por ciento en peso a aproximadamente 1 por ciento en peso de la solución, preferentemente aproximadamente 0.05 por ciento en peso. El antioxidante sirve para inhibir la oxidación de fenólicos en la solución de proteína.
La fase acuosa resultante del paso de extracción puede entonces ser separada del material de semilla de cañóla residual, de cualquier manera conveniente, como por ejemplo mediante el empleo de un decantador centrifugadora, seguido por centrifugación de disco para remover el material de semilla residual. El material de semilla residual separado puede ser secado para desecharlo o bien para procesarlo adicionalmente . La grasa presente en la solución acuosa de proteína de cañóla puede ser removida a través de un procedimiento descrito en las patentes norteamericanas Nos. 5,844,086 y 6,005,076, asignadas al cesionario de la presente y cuyas divulgaciones se incorporan aquí por referencia.
De conformidad con lo descrito aquí, la solución acuosa de proteina de cañóla puede ser enfriada a una temperatura de aproximadamente 3°C hasta aproximadamente 7°C, para provocar la separación de la grasa de la fase acuosa para remoción a través de cualquier procedimiento conveniente, como por ejemplo mediante decantación. Alternativamente, la grasa puede ser removida a temperaturas más altas mediante centrifugación utilizando un separador de crema. Una vez removida la grasa, la solución acuosa de proteina de cañóla puede ser clarificada adicionalmente por filtración.
El aceite de cañóla recuperado a partir de la solución acuosa de proteina de cañóla puede ser procesado para su uso en aplicaciones comerciales de aceite de cañóla.
Alternativamente, la solución acuosa de proteina de cañóla puede ser simultáneamente separada de la fase de aceite y el material residual de semilla de cañóla mediante cualquier procedimiento conveniente, como por ejemplo a través de la utilización de un decantador de tres fases. La solución acuosa de proteina de cañóla puede ser entonces clarificada adicionalmente mediante filtración.
El color del aislado final de proteina de cañóla puede ser mejorado en términos de color claro y amarillo menos intenso mediante el hecho de mezclar carbón activado en polvo u otro agente de adsorción de pigmento con la solución de proteina acuosa separada y removiendo subsecuentemente el adsorbente, convenientemente por filtración, para proporcionar una solución de proteina. Se puede utilizar también diafiltración para remoción de pigmento.
Dicho paso de remoción de pigmento puede efectuarse en cualquier condición conveniente, generalmente a temperatura ambiente de la solución de proteina acuosa separada, empleando cualquier agente de adsorción de pigmento adecuado. Para carbón activado en polvo, se emplea una cantidad de aproximadamente 0.025% a aproximadamente 5% peso/volumen, preferentemente de aproximadamente 0.05% a aproximadamente 2% peso/volumen.
Como alternativa a la extracción de la semilla de aceite de cañóla molida con una solución de sal acuosa, dicha extracción puede efectuarse utilizando agua solamente, aún cuando la utilización de agua sola tiende a extraer menos proteina de la harina de semilla de aceite que la solución de sal acuosa. Cuando dicha alternativa se emplea, entonces la sal, en las concentraciones comentadas arriba, puede ser agregada a la solución de proteina después de la separación de la harina de semilla de aceite residual con el objeto de mantener la proteina en solución durante el paso de concentración descrito abajo. Cuando se efectúa un primer paso de desengrasado, la grasa generalmente es agregada después de terminar dichas operaciones .
Otro procedimiento alternativo es extraer la harina de semilla de aceite con la solución de sal de grado de alimento a un valor de pH relativamente elevado arriba de aproximadamente 6.8, generalmente hasta aproximadamente 9.9. El pH de la solución de sal de grado de alimento puede ser ajustado al valor alcalino deseado mediante la utilización de cualquier álcali de grado de alimento conveniente como, por ejemplo, una solución acuosa de hidróxido de sodio. Alternativamente, la semilla de aceite molida puede ser extraída con la solución de sal a un pH relativamente bajo inferior a aproximadamente pH 5, generalmente hasta aproximadamente pH 3. Cuando se emplea dicha alternativa, la fase acuosa que resulta del paso de extracción de semilla de aceite molida es separada después de la harina de cañóla residual, de cualquier forma conveniente como previamente comentado. El material de semilla de aceite residual separado puede ser secado para ser desechado o para procesamiento adiciional.
La solución de proteína acuosa que resulta del paso de extracción a pH elevado o pH bajo es entonces ajustada en cuanto a pH dentro del rango de aproximadamente 5 a aproximadamente 6.8, preferentemente de aproximadamente 5.3 a aproximadamente 6.2, como se comentó arriba, antes de un procesamiento adicional como se comenta abajo. Dicho ajuste de pH puede ser efectuado utilizando cualquier ácido conveniente, como, por ejemplo, ácido clorhídrico, o álcali, por ejemplo hidróxido de sodio, según lo apropiado. ^ - La solución de proteína acuosa es concentrada con el objeto de incrementar su concentración de proteína mientras se mantiene la fuerza iónica sustancialmente constante. Dicha concentración se efectúa generalmente para proporcionar una solución de proteína concentrada que tiene una concentración de proteína de aproximadamente 50 g/L a aproximadamente 250 g/L, preferentemente a aproximadamente 2 00 g/L.
El paso de concentración puede ser efectuado de cualquier forma conveniente consistente con operación en lotes o bien operación continua como, por ejemplo, mediante el empleo de cualquier técnica de membrana selectiva conveniente, por ejemplo ultrafiltración o diafiltración, utilizando membranas, por ejemplo membranas de fibras huecas o membranas enrolladas en espirales, con un corte de pesos moleculares adecuado, por ejemplo de aproximadamente 3 , 000 daltons a aproximadamente 100 , 000 daltons, preferentemente de aproximadamente 5 , 000 daltons a aproximadamente 10 , 000 daltons, con relación a diferentes materiales de membrana y configuraciones, y, para operación continua, dimensionadas para permitir el grado deseado de concentración conforme la solución de proteína acuosa pasa a través de las membranas.
Como se sabe, la ultrafiltración y técnicas de membrana selectiva similares permiten que especies de bajo peso molecular pasen mientras que impiden el pasaje de especies de pesos moleculares más elevados. Las especies de bajo peso molecular incluyen no solamente especies iónicas de la sal de grado de alimento, si no también materiales de bajos pesos moleculares extraídos del material fuente, como por ejemplo carbohidratos, pigmentos y factores anti-nutricionales , así como cualquier forma de proteína de bajo peso molecular. El corte de pesos moleculares de la membrana se selecciona habitualmente para asegurar la retención de una proporción significativa de la proteína en la solución mientras permite el pasaje de contaminantes con relación a los diferentes materiales y configuraciones de membrana.
La solución de proteína concentrada puede entonces ser sometida a un paso de diafiltración utilizando una solución de sal acuosa de la misma molaridad y pH que la solución de extracción. Dicha diafiltración puede ser efectuada utilizando de aproximadamente 2 a aproximadamente 20 volúmenes de solución de diafiltración, preferentemente de aproximadamente 5 a aproximadamente 10 volúmenes de solución de diafiltración . En la operación de diafiltración , cantidades adicionales de contaminantes son removidas de la solución de proteína acuosa mediante pasaje a través de la membrana con el permeado. La operación de diafiltración puede ser efectuada hasta que ninguna cantidad adicionalmente significativa de contaminantes y color visible esté presente en el permeado. Dicha diafiltración puede ser efectuada utilizando la misma membrana que en el caso del paso de concentración. Sin embargo, si se desea, el paso de diafiltración puede ser efectuado utilizando una membrana separada con un corte de pesos molecular diferente, por ejemplo una membrana que tiene un corte de pesos moleculares dentro de un rango de aproximadamente 3,000 daltons a aproximadamente 100,000 daltons, preferentemente de aproximadamente 5,000 daltons a aproximadamente 10,000 daltons, con relación a diferentes materiales de membrana y configuración.
Un antioxidante puede estar presente en el medio de diafiltración durante por lo menos una parte del paso de diafiltración . El antioxidante puede ser cualquier antioxidante conveniente, como por ejemplo sulfito de sodio o ácido ascórbico. La cantidad de antioxidante empleado en el medio de diafiltración depende de los materiales empleados y puede variar de aproximadamente 0.01 por ciento en peso a aproximadamente 1 por ciento en peso, preferentemente de aproximadamente 0.05 por ciento en peso. El antioxidante sirve para inhibir la oxidación de fenólicos presentes en la solución concentrada de aislado de proteína de cañóla.
El paso de concentración y el paso de diafiltración pueden ser efectuados a cualquier temperatura conveniente, generalmente de aproximadamente 20°C a aproximadamente 60°C, preferentemente de aproximadamente 20 °C a aproximadamente 30 °C, y durante el período de tiempo para efectuar el grado deseado de concentración. La temperatura y otras condiciones utilizadas dependen hasta cierto grado de equipo de membrana utilizado para efectuar la concentración y de la concentración de proteína deseada de la solución.
La solución de proteína concentrada y opcionalmente diafiltrada puede ser sometida a una operación de desengrasado adicional, si se requiere, de conformidad con lo descrito en las Patentes Norteamericanas Nos. 5,844,086 y 6,005,076.
La solución de proteína concentrada y opcionalmente diafiltrada puede ser sometida a una operación de remoción de color como alternativa a la operación de remoción de color descrita arriba. Se puede utilizar aquí carbón activado en polvo así como carbón activado en gránulos (GAC). Otro material que puede ser usado como agente de adsorción de color es polivinilpirrolidona.
El paso de tratamiento con agente de adsorción de color puede efectuarse en cualquier condición conveniente, generalmente a temperatura ambiente de la solución de proteína de cañóla. Para carbón activado en polvo, una cantidad de aproximadamente 0.025% a aproximadamente 5% peso/volumen, preferentemente de aproximadamente 0.05% a aproximadamente 2% peso/volumen, puede utilizarse. Cuando se utiliza polivinilpirrolidona como agente de adsorción de color, una cantidad de aproximadamente 0.5% a aproximadamente 5% peso/volumen, preferentemente de aproximadamente 2% a aproximadamente 3% peso/volumen, puede utilizarse. El agente de adsorción de color puede ser removido de la solución de proteina de cañóla a través de cualquier medio conveniente, como por ejemplo mediante filtración.
La solución de proteina de cañóla concentrada y opcionalmente diafiltrada que resulta del paso opcional de remoción de color puede ser sometida a pasteurización para matar cualquier bacteria que pudiera haber estado presente en la harina original como resultado del almacenamiento o de otra forma y extraída de la harina en la solución de proteina de cañóla en el paso de extracción. Dicha pasteurización puede ser efectuada en cualquier condición de pasteurización deseada. En general, la solución de proteina concentrada y opcionalmente diafiltrada es calentada a una temperatura de aproximadamente 55 °C hasta aproximadamente 70 °C, preferentemente de aproximadamente 60 °C hasta aproximadamente 65 °C, durante aproximadamente 10 minutos a aproximadamente 15 minutos, preferentemente aproximadamente 10 minutos. La solución de proteina concentrada pasteurizada puede ser entonces enfriada para procesamiento adicional de conformidad con lo descrito abajo, preferentemente a una temperatura de aproximadamente 25°C hasta aproximadamente 40 °C. Según la temperatura empleada en el paso de concentración y paso de diafiltración opcional, y dependiendo de si se efectúa el paso de pasteurización o no, la solución de proteina concentrada puede ser calentada a una temperatura de por lo menos aproximadamente 20 °C, y hasta aproximadamente 60 °C, preferentemente de aproximadamente 25°C hasta aproximadamente 40°C, con el objeto de reducir la viscosidad de la solución de proteina concentrada para facilitar la realización del paso de dilución subsecuente y formación de micela. La solución de proteina concentrada no debe ser calentada más allá de una temperatura arriba de la cual no ocurre formación de micela al efectuarse una dilución por agua fría.
La solución de proteina concentrada que resulta del paso de concentración, y paso de diafiltración opcional, paso de remoción de color opcional, paso de pasteurización opcional, y paso de desengrasado opcional, es entonces diluida para efectuar la formación de micela mediante el mezclado de la solución de proteina concentrada con agua fría que tiene el volumen requerido para lograr el grado de dilución deseado. Según la proporción de proteina de cañóla que se desea obtener por via de micela y según la proporción de sobrenadante, se puede variar el grado de dilución de la solución de proteina concentrada. Con niveles de dilución más bajos, en general, una mayor proporción de proteina de cañóla permanece en la fase acuosa .
Cuando se desea proporcionar la mayor proporción de proteina a través de la via de micela, la solución de proteina concentrada es diluida aproximadamente 5 veces hasta aproximadamente 25 veces, preferentemente de aproximadamente 10 veces a aproximadamente 20 veces.
El cuerpo de agua en el cual la solución de proteina concentrada es alimentada tiene una temperatura inferior a aproximadamente 15°C, generalmente de aproximadamente 3°C hasta aproximadamente 15 °C, preferentemente inferior a aproximadamente 10 °C, puesto que se logran rendimientos mejorados de aislado de proteina en forma de masa micelar de proteina con estas temperaturas más frías en los factores de dilución utilizados.
La dilución de la solución de proteína concentrada y reducción consiguiente de la fuerza iónica provoca la formación de una masa de tipo nube de moléculas de proteína altamente asociadas en forma de pequeñas gotas de proteína discretas en forma micelar. Las micelas de proteína se asientan para formar una masa micelar de proteína de tipo gluten, pegajosa, amorfa, densa, aglomerada, agregada. El asentamiento puede ser ayudado, como por ejemplo mediante centrifugación. Dicho asentamiento inducido reduce el contenido de líquido de la masa micelar de proteína reduciendo por consiguiente el contenido de humedad generalmente de aproximadamente 70% en peso hasta aproximadamente 95% en peso a un valor generalmente alrededor del 50% en peso a alrededor de 80% en peso de la masa micelar total. La reducción del contenido de humedad de la masa micelar de esta manera reduce también el contenido de sal ocluida de la masa micelar y por consiguiente el contenido de sal del aislado secado .
En una operación en lotes, el lote de solución de proteina concentrada se agrega a un cuerpo estático de agua enfriada que tiene el volumen deseado, de conformidad con lo comentado arriba. La dilución de la solución de proteina concentrada y reducción consecuente de la fuerza iónica provoca la formación de una masa de tipo nube de moléculas de proteina altamente asociadas en forma de pequeñas gotas de proteina discretas en forma micelar. En el procedimiento en lotes, se dejan asentar las micelas de proteina en el cuerpo de agua fría con el objeto de formar una masa micelar de proteína (PMM, por sus siglas en inglés) de tipo gluten, pegajosa, amorfa, densa, aglutinada, agregada. El asentamiento puede ser ayudado, como por ejemplo mediante centrifugación. Dicho asentamiento inducido reduce el contenido de líquido de la masa micelar de proteína, reduciendo por consiguiente el contenido de humedad generalmente de aproximadamente 70% en peso a aproximadamente 95% en peso a un valor generalmente de aproximadamente 50% en peso hasta aproximadamente 80% en peso de la masa micelar total. La reducción del contenido de humedad de la masa micelar de esta manera reduce también el contenido de sal ocluido de la masa micelar y por consiguiente el contenido de sal del aislado secado .
Alternativamente, la operación de dilución puede efectuarse continuamente mediante el pasaje continuo de la solución de proteína concentrada hacia una entrada de una tubería en forma de T mientras se alimenta agua de dilución a la otra entrada de la tubería en forma de T, permitiendo el mezclado en la tubería. El agua de dilución es alimentada a la tubería en forma de T a un régimen suficiente para lograr el grado deseado de dilución de la solución de proteína concentrada.
El mezclado de la solución de proteína concentrada y el agua de dilución en la tubería inicia la formación de micelas de proteína y la mezcla es alimentada continuamente desde la salida de la tubería en forma de T hacia un recipiente de asentamiento a partir del cual se permite el desbordamiento del sobrenadante cuando dicho recipiente está lleno. La mezcla se alimenta preferentemente en el cuerpo de líquido en el recipiente de asentamiento de una manera apropiada para reducir la turbulencia dentro del cuerpo de líquido.
En el procedimiento continuo, se dejan asentar las micelas de proteína en el recipiente de asentamiento para formar una masa micelar de proteína (PMM, por sus siglas en inglés) de tipo gluten, pegajosa, amorfa, densa, aglutinada, agregada y el procedimiento continúa hasta la acumulación de una cantidad deseada de la PMM en el fondo del recipiente de asentamiento, y la PMM acumulada es removida del recipiente de asentamiento. En lugar del asentamiento por sedimentación, la PMM puede ser separada continuamente mediante centrifugación.
La combinación de los parámetros de proceso de concentración de la solución de proteína a un contenido de proteína preferido inferior a aproximadamente 200 g/L y el uso de una factor de dilución de aproximadamente 10 a aproximadamente 20, resulta en rendimientos más elevados, frecuentemente rendimientos significativamente más elevados, en términos de recuperación de proteína en forma de masa micelar de proteína a partir del extracto de harina original, y aislados mucho más puros en términos de contenido de proteína que lo que se alcanza mediante la utilización de cualquiera de los procedimientos de formación de aislado de proteína de la técnica anterior conocidos comentados en las patentes norteamericanas mencionadas arriba.
Mediante la utilización de un proceso continuo para la recuperación de aislado de proteína de cañóla en comparación con el proceso en lotes, el paso de extracción de proteína inicial puede ser significativamente reducido en cuanto a tiempo para alcanzar el mismo nivel de extracción de proteína y temperaturas significativamente más elevadas pueden emplearse en el paso de extracción. Además, en una operación continua, hay menos oportunidad de contaminación que en el caso de un procedimiento en lotes, lo que lleva a una mayor calidad de producto y el proceso puede efectuarse en un equipo más compacto .
El aislado asentado en forma de masa de proteína de de tipo gluten, pegajosa, amorfa, densa, aglutinada, agregada que se conoce como "masa micelar de proteína", o PMM, por sus siglas en inglés, es separado de la fase acuosa residual o sobrenadante por ejemplo mediante decantación de la fase acuosa residual de la masa asentada o bien a través de centrifugación. La PMM puede ser utilizada en forma húmeda o bien puede ser secada, a través de cualquier técnica conveniente, como por ejemplo secado por rociado, o bien liofilización , hasta obtener una forma seca. La PMM seca tiene un alto contenido de proteina, superior a aproximadamente 90% en peso de proteína, preferentemente por lo menos aproximadamente 100% en peso de proteína (calculada como N x 6.25), y es sustancialmente no desnaturalizada (según lo determinad por calorimetría de escaneo diferencial). La PMM seca tiene un bajo contenido de grasa residual que puede ser inferior a aproximadamente 1% en peso.
El sobrenadante proveniente de del paso de formación de PMM y asentamiento contiene cantidades significativas de proteína de cañóla, no precipitada en el paso de dilución.
El sobrenadante proveniente del paso de dilución, después de la remoción de la PMM, puede ser concentrado para incrementar su concentración de proteína. Dicha concentración se efectúa mediante la utilización de cualquier técnica de membrana selectiva conveniente, como por ejemplo mediante ultrafiltración, utilizando membranas con un corte de pesos moleculares adecuado que permite que especies de bajos pesos moleculares, incluyendo sal, carbohidratos, pigmentos y otros materiales de bajos pesos moleculares extraídos del material fuente pasen a través de la membrana mientras se conserva una proporción significativa de la proteína de cañóla en la solución. Se pueden utilizar membranas de ultrafiltración que tienen un corte de pesos moleculares de aproximadamente 3 , 000 a aproximadamente 100 , 000 Daltons, preferentemente de aproximadamente 5 , 000 a aproximadamente 10 , 000 Daltons, con relación a diferentes materiales de membrana y configuraciones. La concentración del sobrenadante de esta manera reduce también el volumen de líquido que debe ser secado para recuperar la proteína, y por consiguiente la energía requerida para el secado. El sobrenadante generalmente es concentrado hasta un contenido de proteína de aproximadamente 100 a 400 g/L, preferentemente de aproximadamente 200 a aproximadamente 300 g/L, antes del secado.
El sobrenadante concentrado puede ser secado a través de cualquier técnica conveniente, como por ejemplo secado por rociado, liofilización o secado en tambor de vacío, hasta lograr una forma seca para proporcionar un aislado de proteína de cañóla adicional. Dicho aislado de proteína de cañóla adicional tiene un alto contenido de proteína, habitualmente mayor que aproximadamente 90 % en peso proteína (calculado como Kjeldahl N x 6 . 25 ) y es sustancialmente no desnaturalizado (según lo determinad por calorimetría de escaneo diferencial).
Si se desea, la PMM húmeda puede ser combinada con el sobrenadante concentrado antes de secar las corrientes de proteina combinadas por cualquier técnica conveniente para proporcionar un aislado de proteina de cañóla combinado. El aislado de proteina de cañóla combinado tiene un alto contenido de proteína, mayor que aproximadamente 90 % en peso (calculado como Kjeldahl N x 6 . 25 ) y es sustancialmente no desnaturalizado (según lo determinado por calorimetría de escaneo diferencial). Alternativamente, el sobrenadante proveniente de la separación de la PMM puede ser procesado por procesamiento alternativo para recuperar aislado de proteína de cañóla adicional de ahí. Por ejemplo, de conformidad con lo descrito en la Solicitud de Patente Norteamericana copendiente No. 12 / 2 13 , 500 presentada el 20 de junio de 2008 , asignada al cesionario de la presente y cuyas divulgaciones se incorporan aquí por referencia, el sobrenadante que primero, puede ser parcialmente concentrado o bien concentrado, puede ser tratado térmicamente para precipitar proteína 7S de ahí antes de recuperar el aislado de proteína de cañóla de la solución tratada térmicamente. Como se describe también en la Solicitud de Patente Norteamericana Copendiente No. 12 / 2 13 , 500 , el sobrenadante puede ser sometido a precipitación isoeléctrica para depositar proteína 7S, antes de recuperar el aislado de proteína de cañóla de la solución resultante .
En otra alternativa de conformidad con lo descrito en la solicitud de patente provisional norteamericana No. 61/136,193 presentada el dia 18 de agosto de 2008, asignada al cesionario de la presente y cuyas divulgaciones se incorporan aquí por referencia (Solicitud de Patente Norteamericana No. presentada el , WO ), el sobrenadante, que puede ser primero concentrado o parcialmente concentrado, es sometido a tratamiento por sal de calcio, preferentemente cloruro de calcio, antes de recuperar el aislado de proteina de cañóla .
Además, de conformidad con lo descrito en la Solicitud de Patente Provisional Norteamericana No. 61/136,208 presentada el 19 de agosto de 2008, cedida al cesionario de la presente y cuyas divulgaciones se incorporan aquí por referencia (Solicitud de Patente Norteamericana No. presentada el , WO ) , la PMM puede ser procesada para proporcionar un aislado de proteina de cañóla soluble.
En otro procedimiento alternativo, solamente una porción del sobrenadante concentrado puede mezclarse con por lo menos una parte de la PMM y la mezcla resultante es secada. El resto del sobrenadante concentrado puede ser secado como cualquiera del resto de la PMM. Además, la PMM secada y el sobrenadante secado pueden también ser mezclados en seco en cualquier proporción relativa deseada.
Mediante la operación de esta manera, numerosos aislados de proteina de cañóla pueden ser recuperados en forma de PMM secada, sobrenadante secado y mezclas secadas de varias proporciones en peso de PMM y sobrenadante, generalmente de aproximadamente 5:95 a aproximadamente 95:5 en peso, lo que puede ser deseable para lograr propiedades funcionales y nutricionales diferentes.
EJEMPLOS Ejemplo 1: Este ejemplo describe la producción de un aislado de proteína de cañóla novedoso de conformidad con una modalidad de la presente invención. "a" kg de semilla de cañóla fue pasado a través de un molino para moler completamente la semilla. Se agregaron "b" kg de semilla molida a "c" L de una solución de NaCl "d" M a temperatura ambiente y se agitó durante 30 minutos para proporcionar una solución de proteína acuosa. El material de semilla de cañóla residual fue removido y la solución de proteína resultante fue parcialmente clarificada por centrifugación para producir "e" L de solución de proteína parcialmente clarificada que tiene un contenido de proteína de entre "f" % en peso. La solución de proteína parcialmente clarificada fue desengrasada con un separador de crema y después filtrada para clarificación adicional lo que resultó en una solución de volumen "g" L con un contenido de proteína de "h" % en peso.
Una alícuota de "i" L de la solución de extracto de proteína fue reducida en volumen a "j" L por concentración en una membrana de polietersulfona (PES) que tenia un corte de pesos moleculares de "k" Daltons y después fue diafiltrada con "1" volúmenes de una solución de NaCl "m" M en la misma membrana. El retentado diafiltrado fue entonces pasteurizado a una temperatura de 60 °C durante 1 minuto, "n" kg de solución de proteina concentrada pasteurizada resultante presentaba un contenido de proteina de "o" % en peso.
La solución concentrada a "p" °C fue diluida "q" en agua purificada por osmosis inversa (RO, por sus siglas en inglés) fría que tenia una temperatura de "r" °C. Se formó inmediatamente una nube blanca y se dejó asentar. El agua de dilución superior fue removida y la masa pegajosa, viscosa, precipitada (PMM) fue recuperada por centrifugación con un rendimiento de "s" % en peso de la solución de proteina filtrada. La proteina derivada de PMM secada tenia un contenido de proteina de "t" % (N x 6.25) con base en peso seco. El producto recibió la designación "u" C300.
Los parámetros "a" hasta "u" para dos experimentos se presentan a continuación en la siguiente Tabla I: Tabla I u BW-CC089-B19-08A BW-EC091-B21-08A a 22.5 22.5 b 21.4 21.82 c 150 150 d 0.15 0.15 e 145.7 136.6 f 1.30 1.12 g 148 108 h 0.92 0.76 u 148 108 j 5 5 k 100,000 100,000 1 5 5 m 0.15 0.15 n 6 5.16 0 18.46 14.81 P 30 30 q 1:10 1:10 r 2.7 3 s 52.2 42.7 t 101.52 97.00 "v" L de sobrenadante fueron calentados a una temperatura de 80°C durante 10 minutos y después sometidos a centrifugación con el objeto de remover la proteína precipitada. El sobrenadante tratado térmicamente, centrifugado fue después reducido en volumen de "w" L a "x" L or ultrafiltración utilizando una membrana de polietersulfona (PES) que tenía un corte de pesos moleculares de y" Daltons y después el concentrado fue diafiltrado en la misma membrana con "z" volúmenes de agua RO pH 3. El concentrado diafiltrado contenía "aa" % de proteína en peso. Con la proteína adicional recuperada del sobrenadante, la recuperación global de proteína de la solución de proteína filtrada fue "ab" % en peso. El concentrado fue secado por rociado para formar un producto final que recibió la designación "u" C200HS y tenia un contenido de proteina de "ac" % (N x 6.25) con base en peso seco. Los parámetros "u" a "ac" para los dos experimentos se presentan en la siguiente Tabla II: Tabla II Ejemplo 2; Este ejemplo describe la producción de un aislado de proteína novedoso de conformidad con una modalidad de la presente invención . "a" kg de semilla de cañóla desactivada con mirosinasa fueron pasados a través de un molino para moler totalmente la semilla. Se agregaron "b" kg de semilla molida a "c" L de una solución de NaCl "d" M a temperatura ambiente y se agitó durante 30 minutos para proporcionar una solución de proteína acuosa. El material de semilla de cañóla residual fue removido y la solución de proteína resultante fue parcialmente clarificada por centrifugación para proporcionar una solución de proteína parcialmente clarificada con un contenido de proteína "e" % en peso. La solución de proteína parcialmente clarificada fue desengrasada con un separador de crema y después filtrada para clarificar adicionalmente lo que resultó en una solución de volumen "f" L con un contenido de proteína de "g" % en peso.
Una alícuota de "h" L de solución de extracto de proteína fue reducida a "i" kg por concentración en una membrana de fluoruro de polivinilideno (PVDF) con un corte de pesos moleculares de "j" daltons. El retentado fue después pasteurizado a una temperatura de aproximadamente 62 °C durante 10 minutos, "k" kg de solución de proteína concentrada pasteurizada resultante presentaba un contenido de proteína de "1" % en peso.
La solución concentrada a "m" °C fue diluida "n" en agua RO fría que tiene una temperatura de "o" °C. Se formó inmediatamente una nube blanca la cual se dejó asentar. El agua de dilución superior fue removida y la masa pegajosa, viscosa, precipitada (PMM) fue recuperada ya sea por centrifugación con un rendimiento de "p" % en peso de la solución de proteína filtrada. La proteína derivada de PMM secada presentó un contenido de proteína de "q" % (N x 6.25) con base en peso seco. El producto recibió una designación "r" C300.
Los parámetros "a" hasta "r" se presentan en la siguiente Tabla III : Tabla III r BW-EH066-H09-06A a 22.5 b 18 c 120 d 0.15 e 0.88 f 106 g 0.80 h 106 i 3.69 j 30,000 k 3.52 1 14.03 m 30 n 1:15 0 2.0 P 31.8 q 99.29 Se calentaron "s" L de sobrenadante a aproximadamente 87 °C durante 5 minutos y después se sometieron a centrifugación con el objeto de remover la proteina precipitada. El sobrenadante tratado térmicamente centrifugado fue entonces reducido de "t" L a "u" kg por ultrafiltración utilizando una membrana de polietersulfona (PES) gue tenia un corte de pesos moleculares de "v" Daltons. El retentado contenia "w" % en peso de proteina. Con la proteina adicional recuperada del sobrenadante, la recuperación de proteina global de solución de proteina filtrada fue "x" % en peso. El retentado fue secado por rociado para formar un producto final con un contenido de proteina de "y" % (N x 6.25) con base en peso seco y recibió la designación "r" C200HS.
Los parámetros "r" a "y" se presentan en la siguiente Tabla IV: Tabla IV Ejemplo 3 ; Este ejemplo describe la producción de un aislado de proteina de cañóla mediante la utilización de harina preparada a partir de la semilla de cañóla desactivada con mirosinasa utilizada en el Ejemplo 2 .
Se agregaron "a" kg de harina de cañóla desactivada con mirosinasa a "b" L de una solución NaCl "c" M a temperatura ambiente y se agitó durante 30 minutos con el objeto de proporcionar una solución de proteina acuosa. La harina de cañóla residual fue removida y la solución de proteina resultante fue parcialmente clarificada por centrifugación para producir "d" L de una solución de proteína parcialmente clarificada con un contenido de proteína de "e" % en peso. Esta solución fue entonces filtrada para clarificar adicionalmente lo que resultó en una solución de volumen "f" L con un contenido de proteína de "g" % en peso Una alícuota de "h" L de la solución de extracto de proteína fue reducida a "i" kg por concentración en una membrana de PVDF (fluoruro de polivinilideno ) con un corte de pesos moleculares de "j" Daltons . El retentado fue después pasteurizado a aproximadamente 63 ° C durante 10 minutos. La "k" kg de solución de proteína concentrada pasteurizada resultante tenía un contenido de proteína de " 1 " % en peso.
La solución concentrada a "m" °C fue diluida "n" en agua RO fría a una temperatura "o" °C. Se formó inmediatamente una nube blanca la cual se dejó asentar. El agua de dilución superior fue removida y la masa pegajosa, viscosa, precipitada (PMM) fue recuperada mediante centrifugación en un rendimiento de "p" % en peso de la solución de proteína filtrada. La proteína derivada de PMM secada presentó un contenido de proteína de "q" % (N x 6.25) con base en peso seco. El producto recibió una designación "r" C300 .
Los parámetros de "a" hasta "r" para tres experimentos se indican en la siguiente Tabla V: Tabla V r BW-SD062-G19-06A a 15 b 150 c 0.15 d 115.1 e 1.99 f 110 g 1.47 h 110 i 4.89 j 30,000 k 4.8 1 23.9 m 26 1 f n 1:20 o 2 P 40.7 q 101.87 "s" L de sobrenadante fue calentado a aproximadamente 85 °C durante 8 minutos y después centrifugado para remover la proteina precipitada. "t" L de sobrenadante tratado térmicamente centrifugado fue entonces reducido a "u" kg por ultrafiltración utilizando una membrana de polietersulfona (PES) con un corte de pesos moleculares de "v" Daltons . El retentado contenia "w" % proteina en peso. Con la proteina adicional recuperada del sobrenadante, la recuperación de proteina global de la solución de proteina filtrada fue "x" % en peso. El retentado fue secado por rociado para formar un producto final con un contenido de proteina de "y" % (N x 6.25) con base en peso seco y recibió la designación "r" C200HS.
Los parámetros "r" a "y" para dos experimentos se presentan en la siguiente Tabla VI: Tc±r Lct VI BW-SD062-G19-08A S 112 t 92 u 4.1 V 10,000 w 5.91 X 55.6 y 96.68 Los colores de los productos secados producidos en los ejemplos antes mencionados fueron analizados utilizando un instrumento HunterLab ColorQuest XE operado en modo de reflectancia . Los resultados se presentan en la Tabla VII.
Tabla VII: Resultados de color para producto secado de los Ejemplos 2 y 3 : Los aislados de proteina de cañóla preparados a partir de semilla molida fueron más claros (valor L* más elevado) que los productos equivalentes producidos a partir de harina de cañóla preparada a partir de la misma semilla. El C2 00HS preparado a partir de semilla fue un poco más verde que el producto preparado a partir de harina, mientras que los productos C300 presentaban valores a* muy similares, independientemente del material inicial. El C200 HS preparado a partir de semilla molida fue menos amarillo que el C2 00HS preparado a partir de harina, pero la tendencia fue invertida en el caso de los productos C300. Muestras con valores L* más elevados se consideran generalmente más aceptables puesto que el valor "L*" es una indicación de blancura. Un valor máximo de 100 indica una muestra blanca mientras que un valor mínimo de 0 indicaría una muestra negra.
SUMARIO DE LA INVENCIÓN De manera resumida, la presente invención se refiere a la producción de un aislado de proteína de cañóla a partir de semillas de aceite de cañóla en donde no hay remoción inicial de aceite a partir de las semillas. Modificaciones son posibles dentro del alcance de la presente invención.

Claims (12)

REIVINDICACIONES
1. Un proceso para la preparación de un aislado de proteína de cañóla, dicho proceso se caracteriza porque comprende: moler semillas de aceite de cañóla, extraer las semillas de aceite de cañóla molidas con un medio de extracción acuoso para solubilizar proteína de cañóla y grasas en las semillas de aceite de cañóla molidas para formar una solución de proteína de cañóla acuosa, separar la solución acuosa de proteína de cañóla de las semillas de aceite de cañóla molidas residual, desengrasar la solución acuosa de proteína de cañóla, clarificar la solución acuosa de proteína de cañóla desengrasada , concentrar la solución acuosa clarificada de proteína de cañóla mientras se conserva la fuerza iónica sustancialmente constante para formar un solución de proteína de cañóla concentrada, diluir la solución de proteína concentrada en agua fría para provocar la formación de micelas de proteína de cañóla, recoger las micelas de proteína de cañóla en forma de masa micelar de proteína, y secar la masa micelar de proteína para formar un aislado de proteína de cañóla que tiene un contenido de proteína de por lo menos 90% en peso (N x 6.25) con base en peso seco.
2. El proceso de conformidad con la reivindicación 1, que se caracteriza porque dicho medio de extracción acuoso es una solución de sal acuosa que tiene una fuerza iónica de por lo menos 0.05 M con un pH de 5 a 6.8 para formar una solución de proteina de cañóla que tiene una concentración de 3 a 40 g/L.
3. El proceso de conformidad con la reivindicación 1 ó 2, que se caracteriza porque dicho un antioxidante está presente en el medio de extracción acuoso.
4. El proceso de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, que se caracteriza porque dicho paso de desengrasado se efectúa enfriando la solución de proteina de cañóla a una temperatura de 3°C a 7°C y removiendo la grasa que se separa de la solución de proteina de cañóla.
5. El proceso de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, que se caracteriza porque, después del paso de desengrasado, la solución de proteína de cañóla acuosa separada es sometida a un paso de remoción de color.
6. El proceso de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, que se caracteriza porque dicha solución de proteína de cañóla acuosa es concentrada a una concentración de proteína de 50 a 250 g/L.
7. El proceso de conformidad con la reivindicación 6, que se caracteriza porque la solución de proteína de cañóla concentrada es sometida a un paso de diafiltración para proporcionar una solución de proteína de cañóla concentrada y diafiltrada.
8. El proceso de conformidad con la reivindicación 7, que se caracteriza porque un antioxidante está presente durante por lo menos una parte de la operación de diafiltración .
9. El proceso de conformidad con la reivindicación 7 u 8, que se caracteriza porque la solución de proteina de cañóla concentrada y diafiltrada es sometida a una operación de remoción de color.
10. El proceso de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 7 a 9, que se caracteriza porque la solución de proteina de cañóla concentrada y diafiltrada es sometida a un paso de pasteurización.
11. El proceso de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, que se caracteriza porque dicho paso de dilución es efectuado mediante la dilución de la solución de proteina concentrada en 5 veces hasta 25 veces a una temperatura inferior a 15 °C.
12. El proceso de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11, que se caracteriza porque el sobrenadante proveniente de la recolección de la masa micelar de proteina es procesado para formar aislado de proteina de cañóla adicional que tiene un contenido de proteina de por lo menos 90% en peso (N x 6.25) con base en peso seco.
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