MX2010010853A - Pentamicina altamente pura. - Google Patents

Abstract

Se describe pentamicina con una pureza mayor del 95%, algunos polimorfos y solvatos de pentamicina, procedimientos para su fabricación, y un método para reducir la velocidad de degradación de pentamicina.

Description

PENTA ICINA ALTAMENTE PURA CAMPO DE LA INVENCION La presente invención se refiere a pent nte pura, algunos polimorfos y solvatos de penta cedimientos para su fabricación, y a un méto r la velocidad de degradación de pentamicina con de 95%.

ANTECEDENTES DE LA INVENCION La pentamicina, al igual que la anfotericina ina Al, pertenece a la clase de antibióticos mac lieno que tienen actividad antifúngica. La pent ede obtener a partir de fuentes naturales, por e se puede aislar a partir de algunas ce tomyces , tal como el micelio del actin co a fungicromina y cogomicina. En dicha ica, página 2, columna de la derecha, líneas 4 que lagosina, tanto en forma sólida como en so sible a la luz.

La configuración absoluta de pentamic romina) fue determinada mediante comparación es s productos de degradación y síntesis parcial , Puré & Appl. Chem. , vol . 61, no. 3, pp . ) . De conformidad con un análisis de rayos X pu . Igarashi et al. en J. Antibiot. vol. 58, no. 5 (2005) la pentamicina tiene la siguiente fórmu OH OH OH OH OH OH a. Los políenos típicamente poseen uno o varios nales estructurales potencialmente ines endo ásteres, acétales, y hemiacetales hidroli omo sistemas de polieno conjugados vulnerable ión (19) . Por lo tanto, todos los antifúng o, hasta un cierto grado, están sujetos a inact anea degradación por las condiciones norm radas durante su producción y en la recuper del cultivo en masa. Las más notables de iones potencialmente degradantes incluyen h atura elevada, oxígeno atmosférico, lentes, y exposición a la luz (19, 20) ncías 19 y 20 mencionadas en dicho artículo son eresin, Polyene Antibiotics — Present and sity of Tokyo Press: Tokio, 1976; 122-123, ser deseable para uso clínico" .

En vista de lo anterior, no es sorpresivo q icina se le haya dado otros tres nombres, e na, fungicromina, y cogomicina debido lmente se pensó que éstas eran sustancias dife o indica R . C. Pandey et al., J. Antibiotics vo , páginas 988-996 (1982) en el extracto "L óticos de macrólido de polieno, fungicromina, la omicina, de los cuales previamente se descri algunas diferencias estereoquímicas en uno S, han demostrado ... ser idénticos en tod os, incluyendo los aspectos estereoquímico ncías observadas anteriormente en sus prop mente han sido atribuidas a cantidades varia zas las cuales se pueden separar mediante crómat El tema del artículo de Pandey es la comp química y biológica de dichos tres antibióti ido, y no la provisión de pentamicina con más reza. Como se afirma en la página 995 del m de la sección "Discusión" no es posible elimina componentes menores incluso después de purif te CCD (distribución a contracorriente) repeti de fusión de la fungicromina, lagosina, y cog icados de esta manera, suministrados en la Tabla 990, varían desde 157 a 165 °C. En ninguna part lo de Pandey se indica que la pentamicina ha a o cristalizada. Los únicos puntos de fusi de 157 hasta 240°C!) dados en el artículo de aquellos que se obtienen a partir de fuen tura en la tabla 1 y aquellos que surgen eoisómero correcto de los 4096 posibles estereoi a tomar años, ser una invención por derecho pro una perspectiva económica, podría ser mucho más mparación con la biosíntesis mediante las c tomyces mencionadas anteriormente, sin olvidar ilidad de la pentamicina es muy delicada.

La estabilidad delicada de la pentamic te, por ejemplo, a partir de R. W. Rickards et iotics vol . XXIII, no. 12, p ginas 603-611, que d to-oxidación por aire de lagosina en solución de te un proceso de adición de radicales el cual pu ido mediante antioxidantes. De conformidad con R ., los productos primarios principales de l ción de la lagosina son ciertos epóxidos, mient to-oxidación prolongada conduce a productos de ox no, crea problemas en el almacenamiento antes co" .

La patente británica 884711 antes mencionada ejemplo 1 en la página 8, línea 41, que se sina pura". Dicho ejemplo 1 describe la recupera ina a partir del caldo de fermentación que compre de extraer los cortes del caldo de fermentac ol, concentrar el extracto, agregar agua, lavar c lico, filtrar, extraer con metanol en un So r después de lo cual de conformidad con la p S 33 y 35, de la patente británica se obtiene 1 na pureza de "aproximadamente 75%". Con el stamente eliminar las impurezas, la lagosina con a, como se describe la página 8, líneas 34 a e en un Soxhlet con cloroformo, se seca al a efectuado antes sin que se incremente la purez na por encima de 75%. Por lo tanto, porqué debe ción de dicho tratamiento incrementar sustanci eza? . Además, se podría esperar que los pasos de gosina al aire conduzcan a oxidación como lo d ds et al. (Véase párrafo anterior). Por últ lización de pentamicina cruda con metanol no icina con más de 95% de pureza { lizaciones que se repiten tres veces) como rado por el ejemplo 8 de la presente solicitud. a que, como fue descubierto por los inventore te invención, ciertas impurezas cristalizan ju I ntamicina y, por lo tanto, no se pueden e te cristalización, sino solamente utilizando s como se describe en la presente invención. olicitantes de la presente invención solicitar uto externo repetir el procedimiento descrito e lo tan cercanamente como fuera posible. El resul ibe en el ejemplo 10 de la presente solicitud. ba, aunque la pureza de "aproximadamente 75%" ial intermediario pudo ser escasamente con trado: 67.3%), los pasos de purificación adicion en pentamicina "pura" , sino sólo pentamicina de 70.1%.

La pentamicina es el ingrediente activo mento registrado en la década de 1980 bajo el ial Pentacin® en Suiza, pero, debido a las dific satisfacer las especificaciones del producto reg to a pureza y estabilidad (aún cuando la forn ializada contenía un antioxidante) , se réti . parte muy hidrofílica y por lo tanto se comp similar a un agente tensoactivo. Asimis ivamente insoluble en agua y tiende a formar gel S son casi infiltrables .

A pesar de los esfuerzos exhaustivo tores de la presente no pudieron incrementar la ntamicina más allá de 93% durante mucho tie , el umbral de pureza de 93% parecía ser insu la presente invención.

El problema a ser resuelto por los inventore te invención es incrementar la pureza de pent cima de 93%, especialmente por encima de 95%, y ntamicina a una forma lo suficientemente estab tir su reintroducción en el mercado farmacéu y su registro como un medicamento en otros paíse La figura 4 muestra un espectro de difrac X de polvo de solvato de pentamicina-morfolin rma de hojuela.

La figura 5 muestra un diagrama de difrac X de polvo del polimorfo A de pentamicina.

La figura 6 muestra una foto del polimorf icina .

La figura 7 muestra el diagrama de calorime o diferencial (DSC) del polimorfo A de pentamici La figura 8 muestra el DSC de pentamicina am La figura 9 muestra un diagrama de difrac X de polvo de pentamicina amorfa.

La figura 10 muestra el DSC (anterior) y lo adelante) del polimorfo C de pentamicina.

La figura 11 muestra un diagrama de difrac rado después de tres cristalizaciones con metan scribe en J. Antibiotics, ser. A, vol. XI, no.l 58, pp. 26-29.

DESCRIPCION DETALLADA DE LA INVENCION Después de esfuerzos largos e inici tuosos, actualmente los inventores de la itud de patente han descubierto en forma sorpresi ede fabricar pentamicina con una pureza mayor d pecial mayor del 95%, y satisfactoriamente estab la degradación.

Los inventores de la presente i rieron que ciertas impurezas parecen cristaliza a pentamicina en la misma red cristalina de modo rificación adicional mediante cristalización d upo metoxi, derivados de pentamicina en los cu doble está reducido a un enlace sencillo, deriv icina que contienen un anillo de tetrahidropi otencialmente , estereoisómeros de pentamicina.

Actualmente se ha descubierto que la pent ciertos solvatos con heterociclos polares pequef rfolina (proporción molar 1:1), N-metilpirrolidon ción molar 1:1), N-etilpirrolidona (N nidrofurano (THF) , de preferencia en so licos como metanol o etanol, y que algunos de os, por ejemplo los solvatos con NMP y especi lina, tienen propiedades útiles, es decir, é utilizar de manera sorpresiva para pu icina por encima del valor umbral de 93% cuando a en metanol o etanol, pero, de conformidad química mayor a 93%, de preferencia 95%, más pr de manera más preferida 97% en peso y a os y polimorfos de pentamicina y su uso p icación y o estabilización de pentamicina.

Los presentes inventores efectuaron un o de experimentos de cristalización en los cu icina se disuelve, por ejemplo, en sulfóx ilo (DMSO) , dimetilformamida (DMF) , y N-metilpirr A la solución obtenida de esta manera se s anti- solventes hasta que se presen lización, significando anti-solventes , solventes s la pentamicina es considerablemente menos s el metanol, etanol, isopropanol, acetona, ace , o acetonitrilo . También se analizan cristaliz tamicina disuelta en un volumen alto de anti-sol ivamente un solvato de pentamicina con morfolina liza primero en forma de agujas (véase fig és transformar el solvato de morfolina polimórf acicular en un solvato de morfolina que crista de hojuelas (véase figura 2) , y después elim lina. En comparación con el solvato de mor icina con forma de hojuela, el solvato co lar es menos apropiado para purificación. De conf a experiencia experimental (aún limitada) obtenid ena ésta no se puede purificar por encima de u 1 muy por encima de 93% mediante recristalizacion nto, el solvato con forma acicular se transfo o como sea posible en el solvato con forma de h jemplo, mediante adición de cristales semilla de orma de hojuela. La fabricación sucesiva de los s o de manera muy preferida metanol . Con alco ntes no polares más largos, por ejemplo, tolueno casi no se obtiene un efecto de purificac lina como único solvente tampoco es conveniente, la solubilidad de la pentamicina es muy lina. La purificación mediante formación del sol lina con forma de hojuela se repite tantas vec ecesario hasta obtener la pureza deseada.

El incrementar la cantidad de morfoli ión a la pentamicina en el sistema de solventes ansformación del polimorfo con forma acicular orfo con forma de hojuela. Como se indicó anteri transformación también se puede acelerar a ales semilla del polimorfo con forma de hojuela.

La invención se refiere a un procedimien nitrógeno, hasta que cristaliza el solv icina-morfolina con forma de hojuela, aislamien lo mediante filtración y lavando con un ior, tal como metanol, y, si se desea, puri nalmente el solvato de pentamicina-morfolina co juela obtenido mediante repetición del proced ior una o más veces utilizando el solv icina-morfolina con forma de hojuela en lugar icina cruda.

La invención se refiere también a un proced purificar pentamicina cruda a través de la forma lvato con NMP agitando una mezcla de pentamicina cohol apropiado, en especial un alcanol inferi etanol o, de preferencia metanol, N-metilpirr , y un antioxidante apropiado, tal como BHT, o de NMP se pueden eliminar una de dos impure stalizan con pentamicina, es decir, la impureza empo de retención relativo (rrt) de 1.54 (en el LC descrito en la presente solicitud) mientras impureza a rrt de 0.83 solamente se puede reduci el de 3.3%.

La morfolina y NMP se eliminan de los solv icina respectivos agitando los solvatos durante en metanol o de preferencia etanol, por ejemplo atura entre 0°C y +50 °C, de preferencia a temp te, filtrando los cristales obtenidos, lavándo I o de preferencia etanol, y, si se desea, rep ocedimiento hasta que el producto obtenido co de 0.1% de morfolina o NMP.

La morfolina o NMP residuales se pueden e rfo B da origen a las líneas en 9.54, 21.28 y 22 rfo C tiene una línea característica en 7. rfo D tiene una línea característica en 2. rfo E tiene una línea característica, aunque a, en 3.32, y la pentamicina cruda (véase figu 12) muestra líneas características en 8.84 y se comparan los ángulos 2theta antes menc imadamente ± 0.2o): 2.28, 7.38 y 20.16 p rfo A con los valores correspondientes en el eje ir 2.22, 7.29 y 20.17, la pequeña discrepa te. Esto se debe al hecho que las cifras resp de mediciones diferentes. Sin embargo, las dife bien dentro del error experimental internacion do para ángulos 2theta de ±0.2°.

El polimorfo A cristaliza por ejemplo a pa formamida a 60 °C, agregando metanol y enfriand El polimorfo E cristaliza a partir de sulfó lo/acetonitrilo .

El polimorfo A parece ser el po inámicamente más estable. Su diagrama de calor rrido diferencial (DSC) (mostrado en la fig ta una sola señal. En contraste con el mi mas de DSC de los otros polimorfos cristalinos t e una señal (véase por ejemplo, el DSC del poli . figura 10) , indicando de esta manera transici otras formas polimórficas cuando se inc lmente la temperatura. La cualidad más sorpr tamente impredecible del polimorfo A puro ilidad al ser expuesto al aire (véase ejemplo 9) infecciones vaginales y de las mucosas ocasiona a, en especial Candida albicans, y Tric lis .

Dichas formulaciones farmacéuticas para uso jemplo, supositorios vaginales, comprenden por icina en una concentración de 0.1 a 5% en pes xcipientes farmacéuticos apropiados y contienen sta 150 mg de pentamicina por dosis unitaria, e torios. Los supositorios vaginales se suminist o a un humano de género femenino de aproximadam peso corporal 1-2 veces diariamente.

En resumen, la presente invención se re icina con una pureza química mayor de 9 encia con una pureza química mayor de ialmente en forma de polimorfo A, de manera más e o Intensidad Angulo Intensidad Angulo intensidad Angulo a relativa 2theta relativa 2theta relativa 2theta 100 7.29 33 9.25 15 19.78 7 52 20.62 ¦ 25 21.24 17 La presente invención se refiere tam icina en la forma de un solvato, especialment de un solvato que es apropiado para purifica icina, tal como un solvato con un co ociclilo, de preferencia con un compuesto heter jo peso molecular, por ejemplo N-metilpirrolido rencia morfolina, tal como el solvato de morfol acicular, o de preferencia el solvato de morfol de hojuelas, especialmente a dicho solvato a química mayor de 95%, 96%, o de preferenc uio Intensidad Angulo Intensidad Angulo Int eta relativa 2theta relativa 2theta r 73 41.5 21.49 68.5 28.95 29 17.1 22.08 16.5 29.33 .99 14.0 22.47 26.9 30.32 .04 24.7 23.02 24.5 34.02 . oí 15.1 24.06 13.4 35.24 .29 19.3 25.21 10.7 35.81 .29 18.2 25.91 16.0 36.37 .26 28.0 26.55 18.5 37.42 .03 92.3 27.79 12.7 37.91 .67 100.00 28.09 12.7 39.39 La presente invención se refiere también al solvatos de pentamicina antes mencionados p icación química de pentamicina.

La presente invención se refiere tambié La presente invención se refiere también . para reducir en forma significativa la veloc ación de pentamicina con una pureza química m ediante transformación de la misma en la forma rfo A, especialmente a dicho método en el ormación en el polimorfo A se efectúa m lización de la misma a partir de una soluc icina con pureza mayor a 95% en sulfóxido de d s de agregar acetato de etilo. cripción detallada de los experimentos Los espectros de rayos X de polvo se regis fractómetro Rigaku Miniflex (radiación Ka de de registro 2-40° [2Theta] , anchura del pas a], intervalo de -registro 0.0083° [2Theta] , con a de Alto Rendimiento) . El término "rrt d zada en los ejemplos significa el tiempo de reten mpureza con relación a pentamicina, es decir, el icina es 1.00. Tiempos de retención relativos 00 significan que la impureza se eluye más tempra pentamicina, tiempos de retención relativos may significan que la impureza se eluye después icina. Por ejemplo "rrt de imp = 0.83: 8.0%" si xiste una impureza en cantidad de 8% a un ti ión relativo de 0.83. Como se acostumbra en HP tajes de los compuestos detectados se expresan c de área que refleja el área de la señal respect en el ejemplo anterior el 8.0% es por ciento d matografía de HPLC descrito en la presente solic a utilizando un sistema Agilent (marca comercia a HPLC se efectúa en una columna Waters Atlantis ial) cICis RP 250 x 4.6 mm, 5 ym. Las columnas is son una línea basada en sílice de columnas d inversa unidas en forma difuncional. Se utili ntes parámetros: adíente : Tiempo Solución A Solución [minutos] [% en volumen] [% en volu 0 100 0 6 100 0 10 77 23 16 77 23 17 40 60 22 40 60 23 100 0 30 100 0 EJEMPLOS EJEMPLO 1 Solvato de pentamicina-morfolina con forma acicul A una mezcla de metanol (1.75 g) y morfolin agregan hidroxitolueno butilado (BHT; 2, 6 -di -te -fenol) (4 tng) y pentamicina cruda (500 mg; a: 80.6%) ; contenido de pentamicina: 80%; rrt d 8.0%; rrt de imp =1.54: 7.0%) . El cromatograma pentamicina cruda muestra 2 picos importantes c as impurezas. El primero tiene un tiempo de re ivo (rrt) de 0.83. Este pico consiste de (por lo urezas diferentes con el mismo tiempo de retenc ad total de estas 2 impurezas juntas es 8%. La za importante tiene un rrt de 1.54 y la cant ad de ambas impurezas a rrt 0.83 y rrt 1. da en el solvato de pentamicina-morfolina co lar en comparación con la pentamicina cruda ut aterial de partida.

EJEMPLO 2 olvato de pentamicina-morfolina con forma de hoju (proporción molar 1:1) A una mezcla de metanol (1.5 g) y morfolin regan BHT (4 mg) y pentamicina cruda (500 mg; a: 80.6%; contenido de pentamicina: 80%; rrt d 8.0%; rrt de imp = 1.54: 7.0%). La mezcla se atura ambiente durante 3 d as . Los crista n, se lavan con metanol (2 veces 1 mi) y se n reducida para proporcionar el solvato de penta Como es evidente a partir de lo anteri ad de ambas impurezas a rrt 0.83 y rrt 1.54 reducida en el solvatío de pentamicina-morfol de hojuela en comparación tanto con la pent utilizada como material de partida como rfo con forma acicular descrito en el ejemplo 1.

El espectro de difracción de rayos X de po rfo con forma acicular del solvato de penta lina (proporción molar 1:1) se muestra en la figu EJEMPLO 3 cación del solvato de pentamicina-morfolina con f hojuela utilizando cristales semilla A una mezcla de metanol (11.52 g) y morfolin agregan BHT (10 mg) y pentamicina cruda (4.0 g; a: 89.2%; contenido de pentamicina : 82%; rrt d 4.9%; rrt de imp = 1.54: 4.0%; contenido de pro ida: 78%; proporción teórica: 87%) .

EJEMPLO 4 ficación del solvato de pentamicina-morfolina con de hojuela A una mezcla de metanol (20.6 g) y morfolin agregan BHT (4 mg) y solvato de pentamicina-mo forma de hojuela (4.75 g; pureza química: ido de pentamicina: 81%; rrt de imp = 0.83: 4. p = 1.54: 4.0%). La mezcla se agita a temp te durante 16 horas. Los cristales se filtran, s tanol (2 veces 2 mi) y se secan a presión reduci cionar solvato de pentamicina-morfolina con f EJEMPLO 5 ristalizaciones sucesivas del solvato de pentami morfolina con forma de hojuela A una mezcla de metanol (1.5 g) y morfolina regan BHT (5 mg) y solvato de pentamicina-morfol de hojuela (385 mg; pureza química: 87.7%; conte icina: 80%; rrt de imp = 0.83: 5.4%; rrt de imp . La mezcla se agita a temperatura ambiente dur . Los cristales se filtran, se lavan con met 0.5 mi) y se secan a presión reducida para propo to de pentamicina-morfolina con forma de hojue ureza química: 94.5%; rrt de imp = 0.83: 3.0%; 1.54: 1.5%) .

A una mezcla de metanol (0.84 g) y morfolin regan BHT (2 mg) y solvato de pentamicina-morfol de hojuela (244 mg; pureza química: 96%; rrt d 2.3%; rrt de imp = 1.54: 1.0%). La mezcla se atura ambiente durante 18 horas. Los crist n, se lavan con metanol (3 veces 0.5 mi) y se ón reducida para proporcionar solvato de penta ina con forma de hojuela (162 mg; pureza ; rrt de imp = 0.83: 1.9%; rrt de imp = 1.54: 0.7 A una mezcla de metanol (0.42 g) y morfolin agregan BHT (2 mg) y solvato de pentamicina-mo orma de hojuela (140 mg; pureza química: 96.6%; 0.83: 1.9%; rrt de imp = 1.54: 0.7%). La me a temperatura ambiente durante 18 horas . Los cr ltran, se lavan con metanol (3 veces 0.5 mi) y s sión reducida para proporcionar solvato de penta uio Intensidad Angulo Intensidad Ang lo In eta relativa 2theta relativa 2theta r .73 41.5 21.49 68.5 28.95 .29 17.1 22.08 16.5 29.33 .99 14.0 22.47 26.9 30.32 .04 24.7 23.02 24.5 34.02 .01 15.1 24.06 13.4 35.24 .29 19.3 25.21 10.7 35.81 .29 18.2 25.91 16.0 36.37 .26 28.0 26.55 18.5 37,42 .03 92.3 27.79 12.7 37.91 .67 100.00 28.09 12.7 39.39 Como es evidente a partir de lo anteri dad de ambas impurezas a rrt 0.83 y rrt 1.54 reducidas en el solvato de pentamicina-morfol de hojuela purificado en comparación tanto o antes mencionado y su purificación m lización repetida. Como es evidente a partir del con rrt = 1.54 es eliminada en forma eficient ra impureza importante con rrt = 0.83 sólo s ir hasta un nivel de 3.3%. o 6.1 Fabricación del solvato de pentamicina-N A una mezcla de metanol (65 g) irrolidona (NMP; 65 g) se agregan BHT (100 icina cruda (20 g pureza química: 80.6%; conte icina: 80%; rrt de imp = 0.83: 8.0%; rrt de 7.0%) . La mezcla se agita a temperatura a te 5 horas. Los cristales se filtran, se la OI (2 veces 10 mi) y se secan a presión reduci rcionar solvato de pentamicina-NMP (17.3 g; . La mezcla se agita a temperatura ambiente dur . Los cristales se filtran, se lavan con met 10 mi) y se secan a presión reducida para propo o de pentamicina-NMP (9.7 g; pureza química: ido de pentamicina: 81%; rrt de imp = 0.83: 4. = 1.54: 2.9%) . o 6.3 Segunda recristalización del solva pentamicina-NMP A una mezcla de metanol (30 g) y NMP (30 n BHT (100 mg) y solvato de pentamicina-NMP prov aso 6.2 (9.65 g) . La mezcla se agita a temp te durante 5 horas. Los cristales se filtran, s etanol (2 veces 10 mi) y se secan a presión r proporcionar solvato de pentamicina-NMP (7.5 g; n, se lavan con metanol (2 veces 10 mi) y se n reducida para proporcionar solvato de penta .0 g; pureza química: 94.9%; contenido de penta rt de imp = 0.83: 3.5%; rrt de imp = 1.54: 1.2%) o 6.5 Cuarta recristalización del solva pentamicina-NMP A una mezcla de metanol (12 g) y NMP (12 n BHT (50 mg) y solvato de pentamicina-NMP prov aso 6.4 (3.6 g) . La mezcla se agita a temp te durante 3 días. Los cristales se filtran, s tanol (2 veces 5 mi) y se secan a presión reduci cionar solvato de pentamiciña-NMP (2.78 g; a: 95.8%; contenido de pentamicina: 86%; rrt d 3.3%; rrt de imp = 1.54: 0.5%) . a: 95.8%; contenido de pentamicina: 71% (de te residual); rrt de imp = 0.83: 3.3%; rrt d 0.4%) . o 6.7 Sexta recristalización del solva pentamicina-NMP A una mezcla de metanol (6 g) y NMP (6 n BHT (50 mg) y solvato de pentamicina-NMP prov aso 6.6 (2.3 g) . La mezcla se agita a temp te durante 18 horas. Los cristales se filtran, s tanol (2 veces 3 mi) y se secan a presión reduci cionar solvato de pentamicina-NMP (1.6 g; a: 96.0%; contenido de pentamicina: 88%; rrt d 3.3%; rrt de imp = 1.54: 0.3%).

Como es evidente a partir de los pasos 6.5 a ) se agregan etanol (13 g) y BHT (5 mg) y la a temperatura ambiente durante 2 horas . Los cr ltran y se lavan con etanol (3 veces 2 mi) . les se agregan de nuevo etanol (13 g) y BHT (5 m se agita a temperatura ambiente durante 2 hor les se filtran, se lavan con etanol (3 veces 2 m a presión reducida para proporcionar pentamici tenido de morfolina: <0.1%; pureza química: 97.3 El producto obtenido se disuelve en DMSO nitrógeno y se cristaliza mediante adición l I o etanol, enfriando hasta 0°C, filtran les obtenidos y lavándolos con metanol o etanol cual se obtiene el polimorfo A de pentamicina. 6 se muestra una foto de los cristales.

El DSC del polimorfo A de pentamicina se mué Intensidad Angulo Intensidad Angulo intensidad Angulo relativa 2theta relativa 2theta relativa 2theta 100 7.29 33 9.25 15 19.78 52 20.62 25 21.24 17 EJEMPLO 8 talizaciones repetidas de pentamicina cruda con m La pentamicina cruda que tiene el espectro d C, y HPLC mostrados en la figura 11 y en la fi tivamente se cristaliza tres veces con metanol be en J. Antibiotics, Ser. A, vol . XI, no.l, E pp . 26-29: Se agitan 10 g de pentamicina cruda en 60 I hirviendo durante aproximadamente 15 minut on de metanol caliente se filtra y el filt lización con metanol se resuelven en 400 mi de ndo. La solución clara se calienta adicionalmen ión para reducir el volumen de metanol hasta s de enfriar a temperatura ambiente y almacen e 30 minutos el material sólido se aisla m ción y se lava con 30 mi de metanol helado (4 de filtro se seca mediante evaporación al vacío ñutos después de llegar a 16 mbar a la tempera e agua de 40°. No se investiga la recuperación.

Dos de tres partes provenientes de la lización con metanol se resuelven en 300 mi de ndo. La solución clara se calienta adicionalmen ión para reducir el volumen de metanol madamente 75 mi. Después de enfriar a temp te y almacenamiento durante 30 minutos el m 5°C) del producto obtenido se muestran en la fig co de DSC a 243.55°C se compara con el punto de omposición) de 236-237°C reportado en J. Anti A, vol. XI, no.l, Enero de 1958, pp. 26-29 y cí or que el pico de 254.42°C mostrado en la figura limorfo A de pentamicina de conformidad con la ción .

EJEMPLO 9 Estabilidad del polimorfo A de pentamicina Se compara la estabilidad del polimorfo a mayor de 95% al exponerlo al aire y calor ilidad de pentamicina amorfa (que contiene pent ureza mayor de 95%) de la siguiente manera: La pentamicina amorfa se prepara manera y una muestra del polimorfo A obtenido se incuban en un recipiente abierto aproxima días a 60°C y adicionalmente 2 ¿emanas a 40 o de degradación se monitorea mediante HPLC, m cremento de la pureza con relación al estado ini cero (tO) ajustado en 100%. Después de la inc tidad de degradación de pentamicina amorfa es as que la cantidad de degradación del polimorfo nte 1%.

EJEMPLO 10 sión del ejemplo 1 de la patente británica no. 8 De manera análoga a la descrita en el ejemp gina 8 de la patente británica no. 884,711, se g de cortes del caldo de fermentación con 16 li ° patente británica. Se lavan 1.9 g de los crist xhlet con 100 mi de cloroformo durante 2 h s se extraen en un Soxhlet durante 2 horas c lico. El sólido obtenido se vuelve a extraer t con metanol durante 4 horas. Los cristales ob te enfriamiento hasta 4°C durante 40 horas y se contienen de conformidad con HPLC pentamicina co reza. Esto se compara con la página 8, líneas 4 e británica 884,711, de conformidad con la e lagosina (pentamicina) supuestamente "pura" .

Claims (1)

1. NOVEDAD DE LA INVENCION Habiendo descrito el presente invento se co novedad y por lo tanto se reclama como propi ido en las siguientes REIVINDICACIONES 1. Pentamicina con una pureza química m 2. La pentamicina de conformidad c dicación 1 en forma del polimorfo A con una a mayor de 95%, caracterizada por los sig s 2theta, aproximadamente ± 0.2°, de las lín sas en el espectro de difracción de rayos X de intensidades relativas se proveen solament ción aproximada: Intensidad Angulo Intensidad Angulo Intensidad Angulo I relativa 2theta relativa 2theta relativa 2theta sto heterocíclico para la purificación quím icina . 6. Un procedimiento para la purificac icina mediante transformación de pentamicina química menor de 93% en un solvato apropiado sto heterocíclico, purificación de dicho te cristalización, y liberación de pentamicina a lvato . 7. El procedimiento de conformidad dicación 6, caracterizado porque el solvato o de morfolina. 8. El procedimiento de conformidad dicación 6 ó 7, caracterizado porque la pentami del solvato mediante agitación prolongada 9. El rocedimiento de conformidad con cua ntamicina con pureza mayor de 95% en sulfó ilo después de agregar acetato de etilo.