MX2009000452A

MX2009000452A - Metodos para producir, mejorar y sostener respuestas inmunes contra epitopos restringidos mhc clase i para propositos profilacticos o terapeuticos.

Info

Publication number: MX2009000452A
Application number: MX2009000452A
Authority: MX
Inventors: Adrian Ion Bot; Kent Andrew Smith
Original assignee: Mannkind Corp
Priority date: 2006-07-14
Filing date: 2007-07-14
Publication date: 2011-11-07
Also published as: WO2008008541A3; US20080014211A1; AU2007272785A1; CA2657771A1; WO2008008541A2; WO2008008541A8; AU2007272785A8; EP2046344A2; JP2009544610A

Abstract

Las modalidades de la presente invención se refieren a métodos y composiciones para inducir, incorporar, y/o amplificar la respuesta inmune a los epítopos restringidos MHC clase I de antígenos de carcinoma para generar una respuesta inmune anti-cáncer efectiva. Los métodos y composiciones descritos en la presente, pueden utilizarse para propósitos profilácticos o terapéuticos. Las modalidades adicionales proporcionan métodos para tratar una enfermedad proliferativa celular, tal como cáncer al proporcionar a un sujeto en necesidad de la misma una estrategia terapéutica que comprende una composición inmunogénica en combinación con un agente quimioterapéutico.

Description

METODOS PARA PRODUCIR, MEJORAR Y SOSTENER RESPUESTAS INMUNES CONTRA EPÍTOPOS RESTRINGIDOS MHC CLASE I PARA PROPÓSITOS PROFILÁCTICOS O TERAPÉUTICOS REFERENCIA CRUZADA A SOLICITUDES RELACIONADAS La presente solicitud reclama el beneficio de la fecha de presentación de las Solicitudes de Patente Provisional de E.U. Nos. de Serie 60/831,256, presentada el 14 de Junio de 2006, y 60/863,332 presentada el 27 de Octubre de 2006, cada una ¦ de las cuales se incorpora en la presente mediante la referencia en su totalidad. Campo de la Invención Las modalidades de la invención descritas en la presente se refieren a métodos y composiciones para los regímenes inmunoterapéuticos y quimioterapéuticos en combinación para usos profilácticos o terapéuticos. Las modalidades particulares se refieren a agentes quimioterapéuticos, composiciones inmunogénicas , su naturaleza y el orden, temporización, y vía de administración mediante la cual se utilizan de manera efectiva. ANTECEDENTES La función de la célula T globalmente suprimida se ha descrito en muchos pacientes con cáncer por ser un obstáculo mayor para el desarrollo de inmunoterapia de cáncer clínicamente eficiente. La inhibición de las respuestas inmunes antitumor se ha relacionado principalmente con factores inhibidores presentes en pacientes con cáncer. Una barrera principal a la vacunación antitumor exitosa es la tolerancia de las células T de alta avidez, especificas para antigenos de tumor. SUMARIO DE LA INVENCIÓN Una modalidad de la invención incluye un método para la inmunización que incluye las etapas de: poner en contacto un tumor en un paciente con un agente quimioterapéutico, en donde el agente quimioterapéutico promueve la inflamación tumoral y/o interferencia con la función de la célula reguladora T; e inducir en el paciente una primera composición que incluye un inmunógeno, y el inmunógeno incluye o codifica al menos parte de un primer antigeno, e incluye además un inmunopotenciador ; y administrar una segunda composición, que incluye un péptido amplificador, directamente al sistema linfático del paciente, en donde el péptido corresponde a un epitopo de dicho primer antigeno. Preferentemente, las etapas de contacto e inducción dan como resultado la efectividad mejorada del tratamiento más allá de la efectividad de ya sea la etapa de contacto o la etapa de inducción solas. En algunas modalidades de la invención, la primera composición y la segunda composición son la misma. Alternativamente, la primera composición y la segunda composición no son la misma. En algunas modalidades, la primera composición incluye, por ejemplo, un ácido nucleico gue codifica el antigeno o un fragmento inmunogénico del mismo. En algunas modalidades la primera composición incluye un ácido nucleico capaz de expresar el antigeno o un fragmento inmunogénico del mismo en un pAPC . En algunas modalidades la primera composición incluye, por ejemplo un polipéptido inmunogénico y un inmunopotenciador, o lo similar. En algunas modalidades de la invención el polipéptido inmunogénico es el péptido amplificador. En algunas modalidades de la invención, el polipéptido inmunogénico es el primer antigeno. En algunas modalidades el inmunopotenciador es una citocina. En algunas modalidades el inmunopotenciador es un ligando receptor tipo peaje (toll-like) . En algunas modalidades la segunda composición incluye además un adyuvante. En algunas modalidades de la invención la segunda composición se encuentra libre de adyuvante y libre de inmunopotenciador. En algunas modalidades la subetapa de suministro incluye la administración a más de un sitio. En algunas modalidades la subetapa de suministro incluye, por ejemplo, la administración directa al sistema linfático del paciente. En algunas modalidades la administración directa al sistema linfático del paciente incluye, por ejemplo, la administración directa al nodo linfático o vaso linfático.

Modalidades aun adicionales incluyen, generar una respuesta inmune reguladora o tolerogénica especifica al antigeno. Los métodos pueden incluir administrar de manera periódica una composición, que incluye un péptido libre de adyuvante, de manera directa al sistema linfático de un paciente, en donde el péptido corresponde a un epitopo del antigeno, y en donde el paciente puede ser epitópicamente sin tratamiento, y administrar un agente quimioterapéutico de manera simultánea, o después de suministrar la primer o segunda composición. Los métodos además pueden incluir obtener, detectar y ensayar una respuesta inmune de célula T reguladora o tolerogénica. La respuesta inmune puede ayudar a tratar un trastorno inflamatorio o cáncer, por ejemplo. El trastorno inflamatorio puede ser, por ejemplo, de una respuesta inmune restringida MHC clase II. La respuesta inmune puede incluir la producción de una citocina inmunosupresora, por ejemplo, IL-5, IL-10 o TGB-ß, y lo similar. El cáncer puede ser un cáncer de mama, un cáncer ovárico, un cáncer pancreático, un cáncer prostético, un cáncer de colón, un cáncer de vejiga, un cáncer de pulmón, un cáncer de hígado, un cáncer estomacal, un cáncer testicular, un cáncer uterino, un cáncer cerebral, un cáncer linfático, un cáncer de piel, un cáncer de hueso, un cáncer de riñon, un cáncer rectal, un melanoma, un glioblastoma, o un sarcoma. En algunas modalidades de la invención la administración directa es en dos o más nodos linfáticos o vasos linfáticos. En algunas modalidades el nodo linfático se selecciona del grupo que consiste de, por ejemplo, nodos linfáticos inguinales, axilares, cervicales, y tonsilares, y lo similar. En algunas modalidades de la invención la respuesta CTL es especifica para el primer antigeno. En algunas modalidades el epitopo es un epítopo de mantenimiento. En algunas modalidades las composiciones, primera y segunda, incluyen una portador adecuado para la administración directa al sistema linfático o un nodo linfático o lo similar. En algunas modalidades de la invención el epitopo es un epitopo inmune. En algunas modalidades la subetapa de suministro o la subetapa de administración incluyen una inyección de bolo única. En algunas modalidades la subetapa de suministro o la subetapa de administración incluyen las inyecciones de bolo repetidas. En algunas modalidades la subetapa de suministro o la subetapa de administración incluyen una infusión continua . En algunas modalidades de la invención el agente quimioterapéutico subregula o reduce la actividad de la célula reguladora T que promueve o mejora asi la actividad de la célula T efectora dentro de, por ejemplo, una célula de cáncer o tumor o lo similar. En algunas modalidades, la interferencia con la función de la célula reguladora T incluye, por ejemplo, una reducción en el número de las células reguladoras T. En algunas modalidades, la reducción en número de células reguladoras T se mide utilizando citometria de flujo. En algunas modalidades la reducción en número de las células reguladoras T se mide utilizando marcadores tales como, por ejemplo CD4+, CD25+, FoxP3HI, o lo similar. En algunas modalidades de la invención, la interferencia con la función de la célula reguladora T incluye deteriorar la actividad de las células reguladoras T. En algunas modalidades, se mide la actividad de las células reguladoras T, por ejemplo, al aislar las células reguladoras T del paciente, incubar las células aisladas con células efectoras en un ensayo estándar de la función de la célula efectora, y medir la actividad de la célula efectora. En algunas modalidades, el ensayo estándar de la función de la célula efectora se selecciona del grupo que consiste de: un ensayo CTL, un ensayo elispot, y un ensayo de proliferación. En algunas modalidades, la respuesta de la célula T efectora puede detectarse por al menos un indicador, por ejemplo, un ensayo de citocina, un ensayo Elispot, un ensayo de citotoxicidad, un ensayo de tetrámero, una respuesta DTH, una respuesta clínica, encogimiento del tumor, despeje del tumor, inhibición del desarrollo de tumor, concentración de patógeno disminuida, despeje de patógeno, mejora de un síntoma de enfermedad, y lo similar. En algunas modalidades de la invención, el agente quimioterapéutico se selecciona del grupo que incluye, por ejemplo, ciclofosfamida , gemcitabina, fludarabina, doxorubicina, y lo similar. En algunas modalidades el agente quimioterapéutico es ciclofosfamida , la etapa de contacto se realiza en la observación de elevar la función de la célula reguladora T, o inducción de la proliferación celular anormal, o crecimiento de tumor. En algunas modalidades, las etapas de contacto e inducción se repiten en dos o más ciclos. En algunas modalidades las etapas de contacto e inducción se repiten hasta que se logra, por ejemplo, una reducción en la actividad de la célula reguladora T o una regresión de la proliferación celular anormal o crecimiento de tumor, o lo similar. En algunas modalidades de la invención, la etapa de contacto precede la etapa de inducción. En algunas modalidades la etapa de contacto se repite antes de la etapa de inducción. En algunas modalidades la etapa de contacto se completa aproximadamente una semana antes de la etapa de inducción. En algunas modalidades, la etapa de contacto se completa 6, 7, 8 o 9 días antes de la etapa de inducción. En algunas modalidades la etapa de contacto se repite antes de la subetapa de administración de la etapa de inducción. En algunas modalidades la subetapa de suministro y la subetapa de administración se llevan a cabo en diferentes días. En algunas modalidades la subetapa de suministro y la subetapa de administración se llevan a cabo al menos aproximadamente 2, 3, 4, 5, 6, o 7 días por separado. En algunas modalidades de la invención la subetapa de suministro de la etapa de inducción ocurre después de la etapa de contacto. En algunas modalidades la subetapa de suministro incluye administrar uno o más péptidos correspondientes a un epitopo del antigeno antes o después de administrar un agente quimioterapéutico. Algunas modalidades de la invención también incluyen administrar al menos un modo de tratamiento, por ejemplo terapia de radiación, terapia genética, bioquimioterapia, cirugía y lo similar, además del régimen quimioterapéutico/inmunoterapéutico en combinación. En algunas modalidades se proporciona el al menos un modo de tratamiento antes de o durante la etapa de contacto. En algunas modalidades se proporciona el al menos un modo de tratamiento antes de las etapas de contacto e inducción. En algunas modalidades, el al menos un modo de tratamiento se completa antes de comenzar las etapas de contacto e inducción del régimen quimioterapéutico/inmunoterapéutico . De esta manera, en algunas modalidades, la remisión completa se logra antes de comenzar las etapas de contacto e inducción. En otras modalidades, la remisión completa no se logra necesariamente antes de comenzar el régimen quimioterapéutico/inmunoterapéutico en combinación. En una modalidad, el al menos un modo de tratamiento se administra después de uno, dos o más ciclos completos de la etapa de contacto e inducción del régimen quimioterapéutico/inmunoterapéutico . En otra modalidad, el al menos un modo de tratamiento se administra junto con las etapas de contacto e inducción del régimen quimioterapéutico/inmunogénico . El antigeno puede ser un antigeno asociado a la enfermedad, y el antigeno asociado a la enfermedad puede ser un antigeno asociado a tumor, o un antigeno asociado a patógeno. Las modalidades incluyen métodos para tratar una enfermedad, tal como cáncer, utilizando el método de inmunización descrito. Un antigeno como se contempla en la presente puede ser un antigeno asociado al objetivo. El objetivo puede ser una célula neoplástica, una célula infectada por patógeno, y lo similar. Por ejemplo, cualquier célula neoplástica puede ser el objetivo. Las células infectadas por patógeno pueden incluir, por ejemplo, células infectadas por una bacteria, un virus, un protozoario, un hongo, y lo similar, o afectarse por un prión, por ejemplo. Algunas modalidades de la invención se dirigen hacia el uso de un agente quimioterapéutico y un medicamento de combinación que induce CTL en la elaboración de un medicamento de combinación inmunizante, donde el agente quimioterapéutico logra al menos uno de, por ejemplo, promover la inflamación tumoral e interferir con la función de la célula reguladora T; y donde el medicamento de combinación CTL incluye una primera composición para suministrar a un paciente, y la primera composición incluye un inmunógeno, y el inmunógeno incluye o codifica para, al menos, parte de un primer antigeno o un fragmento inmunogénico del mismo; y una segunda composición para administrar de manera directa a un sistema linfático del paciente, con la segunda composición que incluye un péptido, y el péptido corresponde a un epitopo del primer antigeno; y donde la combinación da como resultado la efectividad mejorada del tratamiento más allá de la efectividad de ya sea el agente quimioterapéutico o el medicamento de combinación que induce CTL solo. Las modalidades adicionales pueden incluir conjuntos de composición inmunogénicas para inducir una respuesta inmune restringida a MCH clase I en un paciente que incluye 1-6 dosis de incorporación y al menos una dosis de amplificación, donde las dosis de incorporación pueden incluir un inmunógeno o un ácido nucléico que codifica un inmunógeno, y donde la dosis de amplificación puede incluir un epitopo de péptido, y donde el epitopo puede presentarse por pAPC, y donde los conjuntos incluyen además, o son para utilizarse con, un agente quimioterapéutico. El ácido nucleico que codifica el inmunógeno puede incluir además una secuencia inmunoestimuladora que puede ser capaz de funcionar como el agente de inmunopotenciación . El inmunógeno puede ser un virus o vector competente de réplica que puede incluir o puede inducir un agente de inmunopotenciación. El inmunógeno puede ser una bacteria, lisato bacterial, o componente de la pared celular purificada. También, el componente de la pared celular bacterial puede ser capaz de funcionar como el agente de inmunopotenciación. El agente de inmunopotenciación puede ser, por ejemplo, un ligando TLR, una secuencia inmunoestimuladora, un ADN que contiene CpG, un dsARN, un ligando Receptor de Reconocimiento de Patrón (PRR) endocitico, un LPS, una quillaja saponaria, tucaresol, una citocina pro-inflamatoria, y lo similar. En algunas modalidades preferidas para promover las respuestas multivalentes los conjuntos pueden incluir múltiples dosis de incorporación y/o múltiples dosis de amplificación correspondientes a varios antigenos individuales, o combinaciones de antigenos, para cada administración. Las múltiples dosis de incorporación pueden administrarse como parte de una composición única o como parte de más de una composición. Los conjuntos pueden incluir opcionalmente al menos un agente quimioterapéutico. Las dosis de amplificación pueden administrarse en tiempos disparados y/o a más de un sitio, por ejemplo. El agente quimioterapéutico puede administrarse antes, durante, o después de cualquiera de las dosis de incorporación y/o las dosis de amplificación. En algunas modalidades, el agente quimioterapéutico se administra después del inicio del protocolo inmunoterapéutico . Un péptido de amplificación utilizado en las diversas modalidades corresponde a un epitopo del antigeno inmunizante. En algunas modalidades, la correspondencia puede incluir la repetición fiel de la secuencia nativa del epitopo. En algunas modalidades, la correspondencia puede incluir la secuencia correspondiente que puede ser un análogo de la secuencia nativa en la cual uno o más de los aminoácidos se han modificado o reemplazado, o la longitud del epitopo se ha alterado. Tales análogos pueden retener la función inmunológica del epitopo (i.e., son funcionalmente similares). En modalidades particulares el análogo tiene unión similar o mejorada con una o más moléculas MHC clase I en comparación con la secuencia nativa. En otras modalidades el análogo tiene inmunogenicidad mejorada o similar en comparación con la secuencia nativa. Las estrategias para hacer análogos se conocen ampliamente en la materia. Las discusiones ej emplificativas de tales estrategias pueden encontrarse en las Solicitudes de Patente de E.U. Nos. 10/117,937 (Pub. No. 2003-0220239 Al), presentada el 4 de Abril de 2002; y 10/657,022 (Publicación No. 20040180354), presentada el 5 de Septiembre de 2003, ambas tituladas "SECUENCIAS DE EPÍTOPOS" ("EPITOPE SEQUENCES") ; y la Solicitud de Patente Provisional de E.U. No. 60/581,001, presentada el 17 de Junio de 2004 y la Solicitud de Patente de E.U. No. 11/156,253 (Pub. No. 2006-0063913), presentada el 17 de Junio de 2005, ambas tituladas "ANÁLOGOS DE PÉPTIDO SSX-2" ("SSX-2 PEPTIDE ANALOGS" ) ; y Solicitud de Patente Provisional de E.U. No. 60/580,962 y Solicitud de Patente de E.U. No. 11/155,929 (Pub. No. 20060094661), presentada el 17 de Junio de 2005, ambas tituladas "ANÁLOGOS DE PÉPTIDO NY-ESO" ("NY-ESO PEPTIDE ANALOGS"); cada una de las cuales se incorpora en la presente mediante la referencia en su totalidad. Algunas modalidades se refieren a los usos de un péptido en la elaboración de un medicamento libre de adyuvante para utilizarse en un protocolo de combinación de inmunoterapia/quimioterapéutico de incorporación y amplificación. Las composiciones, equipos, inmunógenos y compuestos pueden utilizarse en medicamentos para el tratamiento de varias enfermedades tal como pero no limitándose a cáncer, para amplificar las respuestas inmunes, para generar perfiles de citocina particulares, y lo similar, como se describe en la presente. Las modalidades se refiere al uso de péptido libre de adyuvante en un método para amplificar una respuesta inmune. En algunas modalidades, las estrategias inmunoterapéuticas/quimioterapéuticas en combinación descritas en la presente incluyen métodos, usos, terapias y composiciones relacionadas con epitopos con especificidad para MHC, que incluyen, por ejemplo, como se describe en la Solicitud Provisional de E.U. No. 60/640,402, presentada el 29 de Diciembre de 2004 y la Solicitud de E.U. No. 11/323,572 (Pub. No. 20060165711), presentada el 29 de Diciembre de 2005, titulándose MÉTODOS PARA PRODUCIR, MEJORAR Y SOSTENER RESPUESTAS INMUNES CONTRA EPÍTOPOS RESTRINGIDOS MHC CLASE I PARA PROPÓSITOS PROFILÁCTICOS O TERAPÉUTICOS (METHODS TO ELICIT, ENHANCE AND SUSTAIN IMMUNE RESPONSES AGAINST MHC CLASS I-RESTRICTED EPITOPES, FOR PROPHYLACTIC OR THERAPEUTIC PURPOSES) . Otras modalidades incluyen uno o más de los MHCs como se describe en la Solicitud Provisional de E.U. No. 60/640,402, presentada el 29 de Diciembre de 2004, y Solicitud de E.U. No. 11/323,572 (Pub. No. 20060165711), presentada el 29 de Diciembre de 2005, titulándose MÉTODOS PARA PRODUCIR, MEJORAR Y SOSTENER RESPUESTAS INMUNES CONTRA EPÍTOPOS RESTRINGIDOS MHC CLASE I PARA PROPÓSITOS PROFILÁCTICOS O TERAPÉUTICOS (METHODS TO ELICIT, ENHANCE AND SUSTAIN IMMUNE RESPONSES AGAINST MHC CLASS I-RESTRICTED EPITOPES, FOR PROPHYLACTIC OR THERAPEUTIC PURPOSES), incluyendo las combinaciones de los mismos, mientras otras modalidades específicamente excluyen cualquiera o más de los MHCs o combinaciones de los mismos. Solicitud Provisional de E.U. No. 60/640,402, presentada el 29 de Diciembre de 2004, y Solicitud de E.U. No. 11/323,572 (Pub. No. 20060165711), presentada el 29 de Diciembre de 2005, titulándose MÉTODOS PARA PRODUCIR, MEJORAR Y SOSTENER RESPUESTAS INMUNES CONTRA EPÍTOPOS RESTRINGIDOS MHC CLASE I PARA PROPÓSITOS PROFILÁCTICOS O TERAPÉUTICOS (METHODS TO ELICIT, ENHANCE AND SUSTAIN IMMUNE RESPONSES AGAINST MHC CLASS I-RESTRICTED EPITOPES, FOR PROPHYLACTIC OR THERAPEUTIC PURPOSES), (cada una de las cuales se incorpora en la presente mediante la referencia en su totalidad) incluyen frecuencias para los antígenos HLA listados. Varias combinaciones de antígeno se proporcionan en la Solicitud de E.U. No. 10/871, 708 (Pub. No. 20050118186), presentada el 17 de Junio de 2004, titulada "COMBINACIONES DE ANTÍGENOS ASOCIADOS A TUMOR EN COMPOSICIONES PARA VARIOS TIPOS DE CÁNCER" ("COMBINATIONS OF TUMOR-ASSOCIATED ANTIGENS IN COMPOSITIONS FOR VARIOUS TYPES OF CANCERS") ; y la Solicitud Provisional de E.U. No. 60/640,598, presentada el 29 de Diciembre de 2004, y en la Solicitud de E.U. No. 11/323049 (Pub. No. 20060159694), presentada el 29 de Diciembre de 2005, ambas también tituladas "COMBINACIONES DE ANTÍGENOS ASOCIADOS A TUMOR EN COMPOSICIONES PARA VARIOS TIPOS DE CÁNCER" ("COMBINATIONS OF TUMOR-ASSOCIATED ANTIGENS IN COMPOSITIONS FOR VARIOUS TYPES OF CANCERS" ) , cada una de las cuales se incorpora en la presente mediante la referencia en su totalidad. Preferentemente el antigeno, que incluye antigeno A o B puede ser SSX-2, Melan-A, Tirosinasa, PSMA, PRAME, NY-ESO-1 o lo similar. Muchos otros antigenos se conocen por aquellos de experiencia ordinaria en la materia. Debe entenderse que en esta y otras modalidades, pueden utilizarse más de dos composiciones, inmunógenos, antigenos, epitopos y/o péptidos. Por ejemplo, tres, cuatro, cinco o más de cualquiera o más de lo anterior puede utilizarse. En combinación con la estrategia inmunoterapéutica/quimioterapéutica descrita en la presente, también pueden emplearse otras estrategias terapéuticas. Por ejemplo, la estrategia inmunoterapéutica/quimioterapéutica en combinación puede utilizarse en combinación con, por ejemplo, pero no limitándose a, radioterapia, bioterapia, terapia genética, terapia hormonal, o cirugía, y lo similar. Por lo tanto, la presente invención proporciona un método para tratar un sujeto que tiene un cáncer o tumor que comprende proporcionar un régimen inmunoterapéutico en combinación con una composición quimioterapéutica combinada además con al menos un modo de tratamiento seleccionado del grupo de terapia de radiación, quimioterapia, terapia genética, bioquimioterapia, y cirugía. La combinación de las estrategias inmunoterapéuticas/quimioterapéuticas, como se describe en la presente, con modalidades de tratamiento adicionales puede incrementar la susceptibilidad de procesos tumorales a la respuesta inmune producida y asi resultar en beneficio terapéutico incrementado. En algunas modalidades, el beneficio terapéutico se mejora de manera sinérgica. El retiro quirúrgico del tumor antes de o durante la inmunoterapia/quimioterapia incrementa el potencial para que cualquier nivel particular de respuesta inmune disminuya o detenga el desarrollo de enfermedad u origine la regresión de tumor o eliminación. Adicionalmente, el daño de tejido, necrosis o apoptosis inició con terapia de anticuerpo, radioterapia, bioterapia, quimioterapia, inmunoterapia pasiva (que incluye el tratamiento con anticuerpos mono- y/o policlonales , TCR recombinante , y/o transferencia adoptiva de CTL u otras células del sistema inmune, o activadores del sistema inmune innato tales como oligonucleótidos CpG y otros ligandos TLR) o cirugía, puede facilitar el planteamiento inmunoterapéutico/quimioterapéutico a través de la inflamación general que da como resultado el reclutamiento de células efectoras inmunes que incluyen efectores específicos de antígeno. En general, cualquier método para inducir una inflamación transitoria o más permanente general dentro de uno o múltiples tumores/lesiones metastáticas puede facilitar la inmunoterapia activa. Alternativamente o además de permitir el reclutamiento de efectores, la inflamación general también puede incrementar la susceptibilidad de células objetivo a ataque mediado inmune (e.g., ya que los interferones incrementan la expresión de moléculas objetivo en células cancerígenas y estroma subyacente) . En modalidades preferidas, el suministro del inmunoterapéutico puede incluir la administración directa al sistema linfático del paciente. La administración directa al sistema linfático del paciente puede incluir la administración directa a un nodo linfático o vaso linfático. La administración directa puede ser dos o más nodos linfáticos o vasos linfáticos. El nodo linfático puede ser, por ejemplo, nodos linfáticos inguinales, axilares, cervicales y tonsilares. En algunas modalidades, el suministro o administración del inmunoterapéutico puede incluir el suministro como una inyección de bolo única o inyecciones de bolo repetidas, por ejemplo. En algunas modalidades, el suministro o administración del inmunoterapéutico puede incluir una infusión continua, que por ejemplo, puede tener duración de entre aproximadamente 8 a aproximadamente 7 días. El método puede incluir un intervalo entre la terminación de la etapa de suministro y el inicio de la etapa de administración, en donde el intervalo puede ser al menos de aproximadamente siete días También, el intervalo puede ser entre aproximadamente 7 y aproximadamente 14 días, aproximadamente 17 días, aproximadamente 20 días, aproximadamente 25 días, aproximadamente 30 días, aproximadamente 40 días, aproximadamente 50 días, o aproximadamente 60 días, por ejemplo. El intervalo puede ser arriba de aproximadamente 75 días, aproximadamente 80 días, aproximadamente 90 días, aproximadamente 100 días o más. BREVE DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS Aquellos de experiencia en la materia entenderán que los dibujos, descritos abajo, son para propósitos ilustrativos solamente. Los dibujos no se proponen limitar el alcance de las presentes enseñanzas en ninguna manera. La Figura 1 representa protección de tumor en ratones profilácticamente inmunizados con péptido E749-.57 de HPV16. La Figura 2 ilustra regresión substancial de tumores en ratones terapéuticamente inmunizados con péptido E749-.57 de HPV16 los días 7, 10, 21, y 24 después de la prueba del tumor en comparación con el grupo control (p<0.0001) . La Figura 3 muestra una correlación de la respuesta inmune con aquella de la erradicación del tumor en ratones curados contra los ratones que recaen inmunizados con péptido E74 9-57 de HPV16 (p=0.04). La Figura 4 muestra que los ratones que recaen inmunizados con un refuerzo adicional de péptido E74g-57 mostró una respuesta inmune significativa pero no incremento medible en la eficacia de tumor. La Figura 5 muestra un gran porcentaje de linfocitos que infiltran el tumor (TILs) específicos de antígeno en ratones inmunizados con péptido E749-57 de HPV16 en comparación con el grupo de ratones control. La Figura 6 representa un incremento en el número de células reguladoras T CD4+CD25+FoxP3+ en ratones que llevan tumor (Panel B) en comparación con los ratones sin tratamiento (Panel A), curados (Panel D) e inyectados con ciclofosfamida (100 mg/kg) (Paneles C) . El Panel E muestra el porcentaje promedio de células reguladoras T en el bazo de ratones de Paneles A-D. La Figura 7 representa los efectos inmuno-moduladores de combinar el régimen inmunoterapéutico de péptido E7 9_57 y ciclofosfamida . La Figura 8 representa la protección inmunológica de enfermedad diseminada en ratones inyectados con péptido HPV-16 o péptido HPV-16 y dsARN (polilC) . El Panel A muestra la coloración de Tetrámero el día 25 de la sangre periférica. El Panel B muestra el porcentaje de supervivencia para cada grupo de ratones. La Figura 9 representa la eficacia anti-tumor de dosificación intranodal contra convencional de HPV-16. El Panel A muestra el tamaño de tumor para cada grupo. El Panel B muestra la coloración de Tetrámero el día 31 de la sangre periférica . La Figura 10 representa la reducción en el nivel de regiones T en ratones que llevan tumores transformados HPV-16 en la presencia de ciclofosfamida . El Panel A y Panel B muestran la reducción de regiones T en bazo. El Panel C muestra la reducción de las regiones T en tumor. La Figura 11 representa la eficacia de terapia adyuvante en cáncer en última etapa. El Panel A muestra el desarrollo de tumor en la presencia de ciclofosfamida o inmunoterapia de E749_57, o la combinación de ciclofosfamida e inmunoterapia de E749-57. El Panel B muestra la respuesta inmune en ratones tratados con ciclofosfamida o inmunoterapia de E749-57 , o la combinación de ciclofosfamida o inmunoterapia La Figura 12 representa el efecto de terapia adyuvante en la supervivencia en ratones tratados con quimioterapia e inmunoterapia. La Figura 13 representa el brazo de dosificación de inmunoterapia subcutánea y eficacia de tumor que resulta de la inmunoterapia subcutánea contra intra-linfática . La Figura 14 representa la eficacia adyuvante, que muestra que la inmunoterapia activa mejora la supervivencia libre de desarrollo y tiempo para recaer después del retiro primario del tumor, mediante quimioterapia o cirugía.

La Figura 15 representa eficacia neoadyuvante , que muestra que la inmunoterapia activa mejora la velocidad de respuesta y que muestra el beneficio clínico cuando se aplica antes del tratamiento primario de tumor, mediante quimioterapia o cirugía. La Figura 16 representa la terapia de consolidación, que muestra que la inmunoterapia activa mejora la supervivencia libre de desarrollo y tiempo de desarrollo después de la quimioterapia. La Figura 17 representa la terapia adyuvante, que muestra que la inmunoterapia activa mejora la velocidad de respuesta cuando acompaña la cirugía o quimioterapia. DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN Los protocolos de inmunización previos han mostrado una producción reducida de células reguladoras T. Sin embargo, previamente, no se conoce si sería posible mejorar la efectividad de una respuesta inmune por la eliminación adicional de las células reguladoras T. Por ejemplo, no se conoce si la eliminación adicional tendría cualquier efecto adicional en la respuesta inmune. Del mismo modo, no se conoce si el uso de un agente quimioterapéutico tendría un impacto negativo en la activación del linfocito T citotóxico (CTL) y función, que desviaría cualquier beneficio potencial de la eliminación de la célula reguladora T. Aquí se reporta que el resultado no esperado de que los agentes quimioterapéuticos que subregulan o eliminación las células reguladoras T puede utilizarse junto con protocolos inmunoterapéuticos de "incorporación y amplificación" con resultados mejorados. Se ha descrito previamente un protocolo de inmunización de dos etapas para la generación de una respuesta CTL robusta. Ver la Solicitud Provisional de E.U. No. 60/479,393, presentada el 17 de Junio de 2003, titulada "MÉTODOS PARA CONTROLAR LA RESPUESTA INMUNE RESTRINGIDA MHC CLASE I" ( "METHODS TO CONTROL MHC CLASS I-RESTRICTED IMMUNE RESPONDE"); Solicitud de E.U. No. 10/871,707 presentada el 17 de Junio de 2004 (Pub. No. 20050079152), Solicitud Provisional de E.U. No. 60/640,402, presentada el 29 de Diciembre de 2004 y Solicitud de E.U. No. 11/323,572 (Pub. No. 20060165711), presentada el 29 de Diciembre de 2005, titulándose "MÉTODOS PARA PRODUCIR, MEJORAR Y SOSTENER RESPUESTAS INMUNES CONTRA EPÍTOPOS RESTRINGIDOS MHC CLASE I PARA PROPÓSITOS PROFILÁCTICOS O TERAPÉUTICOS" ("METHODS TO ELICIT, ENHANCE AND SUSTAIN IMMUNE RESPONSES AGAINST MHC CLASS I-RESTRICTED EPITOPES, FOR PROPHYLACTIC OR THERAPEUTIC PURPOSES") . Cada una de las solicitudes, que incluyen todos los métodos, figuras, y composiciones, se incorpora en la presente mediante la referencia en su totalidad. La etapa de inicio, referida como la inducción o incorporación, incluye la inmunización contra un antigeno objetivo para inducir al menos una respuesta mínima a al menos un epitopo CTL. En modalidades preferidas incluye un agente de inmunoprecipitación para incorporar una respuesta efectora. En una modalidad preferida, que se realiza mediante administración intranodal de 1) un plásmido que causa la expresión del epitopo CTL y que tiene una secuencia inmunoestimuladora CpG, o 2) un péptido epitópico y un inmunopotenciador tal como dsARN o un oligonucleótido CpG. Sin embargo en otras modalidades es posible utilizar composiciones más tradicionales y vías de administración. La etapa de inicio puede incluir una inyección de bolo única, múltiples inyecciones dentro de unos pocos días entre sí, o infusión continúa por varios (e.g. 3-7) días. Tal curso puede repetirse en intervalos, típicamente de 1 a 3 semanas, típicamente por un total de 2 o 3 cursos, pero más cursos, o solo un curso único, también son posibles. En la segunda etapa del protocolo de inmunización, referida como amplificación, un péptido epitópico que corresponde al epitopo CTL contra el cual se induce una respuesta en la primera etapa se administra al sistema linfático, preferentemente intranodalmente . No es necesario incluir un inmunopotenciador u otro adyuvante, aunque puede estar presente en algunas modalidades. Por ejemplo, el péptido epitópico más dsARN puede utilizarse tanto como una composición de incorporación como de amplificación. El programa y modo de administración puede ser similar a aquel descrito arriba para la etapa de inicio, sin embargo, típicamente de alguna manera más cursos (2 a 4 o más preferentemente 1 a 3 o más) se administran y el intervalo entre cursos, así como entre las etapas, puede ser 1 a 3 o más semanas que se extienden a varios meses. Un curso para inducir dosis seguido por un curso para amplificar dosis se refiere como un ciclo terapéutico. El tratamiento generalmente incluirá múltiples ciclos terapéuticos. Se encuentra que al utilizar estas composiciones particulares en el orden arriba descrito (el protocolo de inmunización de incorporación y amplificación) es posible generar grandes números de células T CD8+ específicas de antígeno con fenotipo efector estable (e.g., CTL) . Esto fue en contraste a los protocolos alternativos. Por ejemplo, la administración intranodal de péptido epitópico puede generar una respuesta de célula T (CTL) citotóxica/citolítica, los intentos para amplificar más esta respuesta con inyecciones adicionales pueden conducir a la expansión de una población de la célula T reguladora y una disminución de actividad CTL observable. El diseño, práctica y efectos en tales protocolos de inmunización se describen completamente en la Solicitud Provisional de E.U. No. 60/479,393, presentada el 17 de Junio de 2003, titulada "MÉTODOS PARA CONTROLAR RESPUESTA INMUNE RESTRINGIDA MHC CLASE I" ( "METHODS TO CONTROL MHC CLASS I-RESTRICTED IMMUNE RESPONSE"); la Solicitud de E.U. No. 10/871,707 presentada el 17 de Junio de 2004 (Pub. No. 20050079152), la Solicitud Provisional de E.U. No. 60/640,402, presentada el 29 de Diciembre de 2004, y la Solicitud de E.U. No 11/323,572 (Pub. No. 20060165711), presentada el 29 de Diciembre de 2005, todas de las cuales se titulan "MÉTODOS PARA PRODUCIR, MEJORAR Y SOSTENER RESPUESTAS INMUNES CONTRA EPÍTOPOS RESTRINGIDOS MHC CLASE I PARA PROPÓSITOS PROFILÁCTICOS O TERAPÉUTICOS" ( "METHODS TO ELICIT, ENHANCE AND SUSTAIN IMMUNE RESPONSES AGAINST MHC CLASS I-RESTRICTED EPITOPES, FOR PROPHYLACTIC OR THERAPEUTIC PURPOSES") , cada una de las cuales se incorpora por referencia en su totalidad. El ambiente de tumor con frecuencia es refractario a ataque inmunológico . Es deseable en inmunoterapia de cáncer hacer al ambiente de tumor menos refractario para incrementar la actividad de CTL u otras células T efectoras dentro del tumor y mejorar la eficacia total de tratamiento. Como se utiliza en la presente, "eficacia" se refiere a la habilidad de una composición quimioterapéutica y/o inmunogénica o de un tratamiento de combinación para lograr un resultado o acción deseada. Un planteamiento posible es combinar inmunoterapia con el uso de agentes quimioterapéuticos que eliminan o subregulan las células T reguladoras (Treg) o que incrementan la naturaleza pro- inflamatoria del ambiente de tumor. Tradicionalmente, la inmunoterapia activa y quimioterapia se han separado en tiempo para evitar el deterioro o prevenir la respuesta inmune. Además, como el protocolo de inmunización arriba genera números reducidos de células Treg no está claro que podría mejorarse por eliminación adicional de esta población. Ahora se ha encontrado que, en realidad, es posible combinar un protocolo de inmunización de incorporación y amplificación con el uso de un agente quimioterapéutico de manera que la efectividad total del tratamiento combinado es mayor que la efectividad del quimioterapéutico o el protocolo de inmunización de incorporación y amplificación solo. En realidad, la combinación fue sinergística ya que la regresión del tumor cerebral se obtiene bajo condiciones en las cuales cualquier tratamiento solo no tuvo efecto en el crecimiento del tumor. En otras modalidades de la invención el protocolo de inmunoterapia/quimioterapia en combinación puede incorporarse en paradigmas de terapia de oncología estándar tales como Terapia de Consolidación o Adyuvante, que incluye cirugía, radiación o dosis más altas de quimioterapia, y lo similar . En otras modalidades de la invención el protocolo de inmunoterapia/quimioterapia en combinación puede incorporarse en terapia de oncología estándar tal como Terapia de Consolidación o Adyuvante, que incluye cirugía, radiación, o dosis más altas de quimioterapia, y lo similar. En quimioterapia e inmunoterapia en combinación, la dosis de agente quimioterapéutico elegido por el practicante puede ser generalmente menor a aquella utilizada para citotoxicidad directa contra las células de tumor, pero suficientemente mayor para ser linfocitotóxica . En algunas modalidades, el agente quimioterapéutico puede deteriorar la función de células Treg sin eliminarlas necesariamente. Tal tratamiento puede deteriorar, ya sea por eliminación o desactivación, la funcionalidad de las células Treg residentes en el tumor, haciendo así al ambiente de tumor menos refractario a las células T efectoras, tales como CTL. Adicionalmente , aunque la dosificación de agente quimioterapéutico utilizado es insuficiente para encoger tumores o detener su crecimiento, aún puede haber daño celular que contribuye a un ambiente más pro-inflamatorio dentro del tumor, promoviendo así el reclutamiento y actividad de las células T efectoras. En algunas modalidades, el agente quimioterapéutico se administra en la semana antes de iniciar la inmunización. A medida que Treg residentes en el tumor se eliminan y el protocolo de inmunización se desvía contra la generación de Treg, se obtiene una respuesta efectora robusta y se observa la erradicación o encogimiento del tumor. En otras modalidades de la invención, el agente quimioterapéutico se administra en el intervalo entre la etapa de inducción y la etapa de amplificación, entre cursos de la composición de amplificación, o entre ciclos terapéuticos. En modalidades preferidas de cada uno de estos casos, se inicia la quimioterapia aproximadamente una semana (6, 7, 8 o 9 días) antes de comenzar el siguiente curso de inmunización. Si múltiples dosis del agente quimioterapéutico están por darse generalmente se prefiere que la última dosis sea dada 0, 1 0 2 días antes del inicio del siguiente curso de inmunización. En varias modalidades la terapia de combinación de arriba se lleva a cabo en varias relaciones con otras terapias de cáncer. Puede utilizarse en un establecimiento adyuvante para incrementar la probabilidad de una cura. Es decir, el cáncer puede colocarse en la remisión completa por un tratamiento ablativo de tumor tal como, por ejemplo, pero no limitándose a, retiro quirúrgico, irradiación, o quimioterapia con dosis que son directamente citotóxicas a las células cancerígenas, y lo similar. La terapia de combinación se toma subsiguientemente, resultando en una velocidad de disminución de recaída e intervalo incrementado de supervivencia libre de enfermedad. En varias modalidades se prefiere que el protocolo de combinación inicie con cuatro días, una semana, o dos semanas de la terminación del tratamiento inicial. En algunas pero no todas las modalidades que incluyen quimioterapia directa como el tratamiento inicial, ninguna administración adicional del agente quimioterapéutico se requiere y es la porción de inmunización de la terapia de combinación que comienza dentro del intervalo establecido. En otras modalidades, generalmente con menos enfermedad voluminosa, la terapia de combinación puede utilizarse en un establecimiento neoadyuvante . Es decir, al menos un ciclo terapéutico de la terapia de combinación se completa antes de un tratamiento ablativo de tumor tal como, por ejemplo, pero no limitándose a, cirugía, radiación, o quimioterapia directa. En varias modalidades, el tratamiento ablativo de tumor se comienza dentro de cuatro días, una semana, o dos semanas de la terminación del ciclo terapéutico. Estos pacientes despliegan una velocidad incrementada de remisión completa y parcial y una velocidad disminuida de recaída en el mismo sitio o un sitio remoto, más una supervivencia libre de enfermedad media incrementada. En todavía otras modalidades la terapia de combinación se utiliza como terapia de consolidación. Esto parece al establecimiento adyuvante de arriba excepto que la remisión completa no se logra necesariamente. La terapia de combinación produce un tiempo incrementado al desarrollo, y supervivencia libre de desarrollo (en el caso de remisión parcial) y tiempo incrementado para recaer (en el caso de remisión completa) . En todavía otras modalidades la terapia de combinación puede utilizarse como terapia adyuvante, es decir, en combinación adicional con un tratamiento ablativo de tumor para incrementar la eficacia del tratamiento. En contraste a la terapia adyuvante como se describe arriba, en la terapia de combinación no se inicia hasta que el tratamiento primario se completa, aquí dos tratamientos se utilizan juntos para incrementar la velocidad de respuesta (es decir de remisión parcial o completa) . El programa actual de dos tratamientos puede ser similar a aquellos anteriores, pero los ciclos terapéuticos de la terapia de combinación pueden alternarse con vueltas del tratamiento primario tal como quimioterapia o radiación. En modalidades alternativas, la cirugía puede llevarse a cabo durante el intervalo de tiempo de un ciclo terapéutico de la terapia de combinación, preferentemente en el intervalo entre las etapas de inducción y amplificación o en un intervalo entre cursos de la composición de amplificación. Las modalidades de la invención descritas en la presente proporcionan un nuevo planteamiento para superar las deficiencias en la materia al tener como objetivo APC in situ a través de la administración intra-linfática de plásmidos diseñados para cebar una respuesta CTL anti-tumor, seguido por el refuerzo con epítopos para expandir de manera dramática y activar el grupo de células T especificas de antigeno, en donde un agente quimioterapéutico se administra antes de, durante, o después de las etapas de refuerzo u objetivo. En una modalidad particular, el agente quimioterapéutico es ciclofosfamida . Algunas modalidades proporcionan métodos y composiciones, por ejemplo, para generar células inmunes especificas a una célula objetivo, para dirigir una respuesta inmune efectiva contra una célula objetivo, o para afectar/tratar trastornos celulares proliferativos . Los trastornos celulares proliferativos incluyen por ejemplo, cánceres o tumores tales como, pero no limitándose a, aquellos de la próstata, ovario, mama, piel, pulmón o riñon. Los métodos y composiciones pueden incluir, por ejemplo, composiciones inmunogénicas tales como vacunas y terapéuticos, y también métodos terapéuticos y profilácticos. Al seleccionar la forma de antigeno, la secuencia y temporización con las cuales se administra, y suministrar el antigeno directamente en órganos linfoides secundarios, no solamente la magnitud, pero la naturaleza cualitativa de la respuesta inmune puede manejarse, y que el combinar este planteamiento con estrategias terapéuticas adicionales tal como quimioterapia, mejora la eficacia de tratamiento. Algunas modalidades preferidas se refieren a las composiciones y métodos para incorporar y amplificar una respuesta de célula T para utilizarse en combinación con un agente quimioterapéutico . Por ejemplo tales métodos pueden incluir una etapa de incorporación donde una composición que contiene un inmunógeno codificado por ácido nucléico se suministra a un animal. La composición puede suministrarse a varias ubicaciones en el animal, pero preferentemente se suministra al sistema linfático, por ejemplo, un nodo linfático o un área de drenaje linfático. La etapa de incorporación puede incluir uno o más suministros de la composición, por ejemplo, difundirse durante un periodo de tiempo o en una manera continua durante un periodo de tiempo. Preferentemente, los métodos pueden incluir además una etapa de amplificación que comprende administrar una composición que contiene un inmunógeno de péptido epitópico. La etapa de amplificación puede realizarse una o más veces, por ejemplo, en intervalos durante un periodo de tiempo, en un bolo, o continuamente dentro de un periodo de tiempo. Aunque no se requiere en todas modalidades, algunas modalidades de la etapa de amplificación pueden incluir el uso de composiciones que incluyen un inmunopotenciador o adyuvante. El agente quimioterapéutico puede administrarse antes, o durante, o después de ya sea una dosis de incorporación o amplificación en una modalidad, antes o después de una dosis de incorporación . Cada una de las descripciones de las siguientes solicitudes, que incluyen todos los métodos, figuras y composiciones, se incorporan en la presente por referencia en su totalidad: Solicitud Provisional de E.U. No. 60/479,393, presentada el 17 de Junio de 2003, titulada "MÉTODOS PARA CONTROLAR LA RESPUESTA INMUNE RESTRINGIDA MHC CLASE I" ( "METHODS TO CONTROL MHC CLASS I -RESTRICTED IMMUNE RESPONSE"); Solicitud de E.U. No. 10/871,707 presentada el 17 de Junio de 2004 (Pub. No. 20050079152), Solicitud Provisional de E.U. No. 60/640,402, presentada el 29 de Diciembre de 2004, y Solicitud de E.U. No. 11/323, 572 (Pub. No. 20060165711), presentada el 29 de Diciembre de 2005, titulándose "MÉTODOS PARA PRODUCIR, MEJORAR Y SOSTENER RESPUESTAS INMUNES CONTRA EPÍTOPOS RESTRINGIDOS MHC CLASE I PARA PROPÓSITOS PROFILÁCTICOS O TERAPÉUTICOS" ("METHODS TO ELICIT, ENHANCE AND SUSTAIN IMMUNE RESPONSES AGAINST MHC CLASS I- RESTRICTED EPITOPES, FOR PROPHYLACTIC OR THERAPEUTIC PURPOSES"); Solicitud de E.U. No. 10/871,708 (Pub. No. 20050118186), presentada el 17 de Junio de 2004, titulada "COMBINACIONES DE ANTÍGENOS ASOCIADOS A TUMOR EN COMPOSICIONES PARA VARIOS TIPOS DE CÁNCERES" ( "COMBINATIONS OF TUMOR-ASSOCIATED ANTIGENS IN COMPOSITIONS FOR VARIOUS TYPES OF CANCERS") ; y Solicitud Provisional No. 60/640,598, presentada el 29 de Diciembre de 2004, y Solicitud de Patente de E.U. No. 11/323,049 (Pub. No. 20060159694), presentada el 29 de Diciembre de 2005, titulándose "COMBINACIONES DE ANTÍGENOS ASOCIADOS A TUMOR EN COMPOSICIONES PARA VARIOS TIPOS DE CÁNCERES" ( "COMBINATIONS OF TUMOR-ASSOCIATED ANTIGENS IN COMPOSITIONS FOR VARIOUS TYPES OF CANCERS") y cada una de las cuales se incorpora por referencia en su totalidad. También, las siguientes solicitudes incluyen métodos y composiciones que pueden utilizarse con los métodos y composiciones presentes. El plásmido y principios de diseño del plásmido se describen en la Solicitud de Patente de E.U. No. 10/292,413 (Pub. No. 20030228634 Al), titulada "VECTORES DE EXPRESIÓN QUE CODIFICAN EPÍTOPOS DE ANTÍGENOS ASOCIADOS OBJETIVO Y MÉTODOS PARA SU DISEÑO" ("EXPRESSION VECTORS ENCODING EPITOPES OF TARGET ASSOCIATED ANTIGENS AND METHODS FOR THEIR DESIGN" ) que se incorpora en la presente mediante la referencia en su totalidad; metodología adicional, composiciones, péptidos, y análogos de péptidos se describen en la Solicitud Provisional de E.U. No 60/581,001, presentada el 17 de Junio de 2004, Solicitud de E.U. No. 11/156,253 (Pub. No. 20060063913), titulada "ANÁLOGOS DE PÉPTIDO SSX-2" ("SSX-2 PEPTIDE ANALOGS"); cada una de las cuales se incorpora en la presente mediante la referencia en su totalidad; Solicitud Provisional de E.U. No. 60/580,962, presentada el 17 de Junio de 2004, Solicitud de E.U. No. 11/155,929 (Pub. No. 20060094661), presentada el 17 de Junio de 2005, titulada "ANÁLOGOS DE PÉPTIDO NY-ESO" ("NY-ESO PEPTIDE ANALOGS") ; cada una de las cuales se incorpora en la presente mediante la referencia en su totalidad; y Solicitudes de E.U. Nos. 10/117,937 (Pub. No. 20030220239), presentadas el 4 de Abril de 2002, y 10/657,022 (Pub. No. 20040180354), presentada el 5 de Septiembre de 2003, titulándose "SECUENCIAS DE EPÍTOPOS" ("EPITOPE SEQUENCES" ) y cada una se incorpora en la presente mediante la referencia en su totalidad. En algunas modalidades, dependiendo de la naturaleza del inmunógeno y el contexto en el cual se encuentra, la respuesta inmune producida puede diferir en su actividad particular y elaboración. En particular, aunque la inmunización con péptido puede generar una respuesta de célula T (CTL) citotóxica/citolitica, en su lugar pueden conducirse intentos para amplificar además esta respuesta con inyecciones adicionales a la expansión de una población de célula T reguladora, y una disminución de actividad CTL observable. De esta manera, las composiciones que confieren altas concentraciones de MHC/péptidos en la superficie celular dentro del nodo linfático, sin actividad de inmunopotenciación adicional, pueden utilizarse para promover con propósito una respuesta tolerogénica o reguladora. En contraste, las composiciones inmunogénicas que proporcionan señales de inmunomodulación amplias (e.g., ligandos receptores tipo peaje, o los factores de citocina/autocrina que tales ligandos pueden inducir) aún si se proporciona solamente antígeno limitante, no solamente induce una respuesta, sino que la incorpora también, de manera que los encuentros subsiguientes con antigeno amplio (e.g. péptido inyectado) amplifica la respuesta sin cambiar la naturaleza de la actividad observada. Por lo tanto, algunas modalidades se relacionan con el control del perfil de respuesta inmune, por ejemplo, la clase de respuesta obtenida y las clases de citocinas producidas. Algunas modalidades se refieren a métodos y composiciones para promover la expansión o expansión adicional de CTL. Los métodos descritos son ventajosos sobre muchos procedimientos que utilizan solamente péptido o que no siguen la metodología de incorporación y amplificación. Como se establece arriba, muchos protocolos de inmunización a base de péptido y protocolos a base de vector tienen desventajas de potenciación de la respuesta CTL por la supra-regulación de la respuesta Treg. Sin embargo, si es exitosa, una inmunización a base de péptido o estrategia de amplificación inmune tiene ventajas sobre otros métodos, particularmente ciertos vectores microbiales, por ejemplo. Esto se debe al hecho de que vectores más complejos, tales como vectores bacteriales o virales atenuados vivos, pueden inducir efectos secundarios dañinos, por ejemplo, recombinación o réplica in vivo; o se vuelven inefectivos en la administración repetida debido a la generación de anticuerpos neutralizantes contra el vector por si mismo. Adicionalmente , cuando se utilizan en tal manera para volverse inmunogenos fuertes, los péptidos pueden sortear la necesidad de procesamiento mediado por proteasoma (como con proteina o antigenos más complejos, en contexto de "procesamiento cruzado" o subsiguiente a infección celular) . Es decir, debido a que los péptidos que resultan de procesamiento celular de antigenos complejos para presentación restringida MHC CLASE I es un fenómeno que selecciona de manera inherente epitopos (favorecidos) dominantes sobre epitopos subdominantes, potencialmente interfieren con la inmunogenicidad de epitopos correspondientes a objetivos válidos. Finalmente, la inmunización a base de péptido efectivo simplifica y acorta el proceso de desarrollo de inmunoterapéuticas . DEFINICIONES Al menos que se aclare a partir del contexto del uso de un término en la presente, los siguientes términos enlistados generalmente tienen los significados indicados para propósitos de esta descripción. CÉLULA PRESENTADORA DE ANTÍGENO PROFESIONAL (pAPC) una célula que posee las moléculas coestimuladoras de célula T y es capaz de inducir una respuesta de célula T. Los pAPCs bien caracterizados incluyen células dendriticas, células B, y macrófagos . CÉLULA PERIFÉRICA - una célula que no es una pAPC.

PROTEASOMA DE MANTENIMIENTO - un proteasoma normalmente activo en células periféricas, y generalmente no presente o fuertemente activa en pAPCs . INMUNOPROTEASOMA - un proteasoma normalmente activo en pAPCs; el inmunoproteasoma también es activo en algunas células periféricas en tejidos infectados o exposición siguiente a interferón. EPÍTOPO - un sitio en un antigeno reconocido por un anticuerpo o un receptor de antigeno. Un epitopo de célula T es un péptido corto derivado de un antigeno de proteina. Los epitopos se unen a moléculas MHC y se reconocen por una célula T particular. En modalidades preferidas, los epitopos de acuerdo a esta definición incluyen, pero no necesariamente se limitan a, un polipéptido y un ácido nucléico que codifica un polipéptido, en donde el polipéptido es capaz de estimular una respuesta inmune. En otras modalidades preferidas, los epitopos de acuerdo a esta definición incluyen pero no necesariamente se limitan a péptidos presentados en la superficie de células, los péptidos uniéndose de manera no covalente a la ranura de unión de MHC clase I, de manera que pueden interactuar con receptores de célula T (TCR) . Los epitopos presentados por MHC clase I pueden ser de forma madura o inmadura. "Madura" se refiere a un epitopo MHC en distinción a cualquier precursor ("inmaduro") que puede incluir o consistir esencialmente de un epitopo de mantenimiento, pero también incluye otras secuencias en un producto de traducción primario que se remueven mediante procesamiento, incluyendo sin limitación, solas o en cualquier combinación, digestión proteasómica, recorte N-terminal, o la acción de actividades enzimáticas exógenas. De esta manera, un epítopo maduro puede proporcionarse incrustado en un polipéptido de alguna manera más largo, el potencial inmunológico del cual se debe, al menos en parte, al epitopo incrustado; del mismo modo, el epitopo maduro puede proporcionarse en su forma final que puede unirse en la ranura de unión MHC para reconocerse por TCR. EPÍTOPO MHC - un polipéptido que tiene una afinidad de unión predicha o conocida a una molécula del complejo mayor de histocompatibilidad (MHC) clase I o clase II. Algunas moléculas MHC clase I bien caracterizadas se presentan en la Solicitud Provisional de E.U. No. 60/640,402, presentada el 29 de Diciembre de 2004, y la Solicitud de E.U. No. 11/323,572 (Pub. No. 20060165711), presentada el 29 de Diciembre de 2005, titulándose "MÉTODOS PARA PRODUCIR, MEJORAR Y SOSTENER RESPUESTAS INMUNES CONTRA EPÍTOPOS RESTRINGIDOS MHC CLASE I PARA PROPÓSITOS PROFILÁCTICOS O TERAPÉUTICOS" ("METHODS TO ELICIT, ENHANCE AND SUSTAIN IMMUNE RESPONSES AGAINST MHC CLASS I-RESTRICTED EPITOPES, FOR PROPHYLACTIC OR THERAPEUTIC PURPOSES") . EPITOPO DE MANTENIMIENTO - En una modalidad preferida, un epitopo de mantenimiento se define como un fragmento de polipéptido que es un epitopo MHC, y que se despliega en una célula en la cual los proteasomas de mantenimiento son predominantemente activos. En otra modalidad preferida, un epitopo de mantenimiento se define como un polipéptido que contiene un epitopo de mantenimiento de acuerdo a la definición anterior, que se flanquea por uno a varios aminoácidos adicionales. En otra modalidad preferida, un epitopo de mantenimiento se define como un ácido nucléico que codifica un epitopo de mantenimiento de acuerdo a las definiciones anteriores. Se proporcionan epitopos de mantenimiento ejemplificativos en las Solicitudes de Patente de E.U. Nos. 10/117,937, presentada el 4 de Abril de 2002 (Pub. No. 20030220239 Al), 11/067,159 (Pub. No. 20050221440 Al), presentada el 25 de Febrero de 2005, 11/067,064 (Pub. No. 20050142144 Al), presentada el 25 de Febrero de 2005, y 10/657,022 (Pub. No. 20040180354 Al), presentada el 5 de Septiembre de 2003, y en la Solicitud PCT No. PCT/US2003/027706 (Pub. No. O 2004/022709 A2 ) , presentada el 5 de Septiembre de 2003; y Solicitudes Provisionales de E.U. Nos. 60/282,211, presentada el 6 de Abril de 2001; 60/337,017, presentada el 7 de Noviembre de 2001; 60/363,210 presentada el 7 de Marzo de 2002; y 60/409,123 6 de Septiembre de 2002. Cada una de las solicitudes enlistadas se titula "SECUENCIAS DE EPÍTOPOS" ("EPITOPE SEQUENCES" ) . Cada una de las aplicaciones mencionadas en este párrafo se incorpora en la presente mediante la referencia en su totalidad. EPÍTOPO INMUNE - En una modalidad preferida, un epitopo inmune se define como un fragmento de polipéptido que es un epitopo MHC, y que se despliega en una célula en la cual los inmunoproteasomas son predominantemente activos. En otra modalidad preferida, un epitopo inmune se define como un polipéptido que contiene un epitopo inmune de acuerdo a la definición anterior que se flanquea por uno a varios aminoácidos adicionales. En otra modalidad preferida, un epitopo inmune se define como un polipéptido que incluye una secuencia grupal de epitopos, teniendo al menos dos secuencias de polipéptidos teniendo una afinidad predicha o conocida para un MHC clase I. En todavía otra modalidad preferida, un epitopo inmune se define como un ácido nucléico que codifica un epitopo inmune de acuerdo a cualquiera de las definiciones anteriores. CÉLULA OBJETIVO - En una modalidad preferida, una célula objetivo es una célula asociada con una condición patogénica que puede accionarse por los componentes del sistema inmune, por ejemplo, una célula infectada con un virus u otro parásito intracelular, o una célula neoplástica. En otra modalidad, una célula objetivo es una célula a tenerse como objetivo por las vacunas y métodos de la invención. Ejemplos de células objetivo de acuerdo a esta definición incluyen pero no se limitan necesariamente: una célula neoplástica y una célula que aloja un parásito intracelular, tal como, por ejemplo, un virus, una bacteria, o un protozoario. Las células objetivo también pueden incluir células que se tienen como objetivo por CTL como una parte de un ensayo para determinar o confirmar la liberación de epitopo apropiada y procesamiento por un inmunoproteasoma que expresa la célula, para determinar la especificidad de la célula T o inmunogenicidad para un epitopo deseado. Tales células pueden transformarse para expresar la secuencia de liberación, o las células que simplemente pueden impulsarse con péptido/epitopo . ANTÍGENO ASOCIADO A OBJETIVO (TAA) - una proteína o polipéptido presente en una célula objetivo. ANTÍGENOS ASOCIADOS A TUMOR (TuAA) - un TAA, donde la célula objetivo es una célula neoplástica. EPÍTOPO HLA - un polipéptido que tiene una afinidad de unión predicha o conocida para una molécula complejo HLA clase I o clase II. Los HLAs clase I particularmente bien caracterizados se presentan en la Solicitud Provisional de E.U. No. 60/640,402, presentada el 29 de Diciembre de 2004, y Solicitud de E.U. No. 11/323,572 (Pub. No. 20060155711), presentada el 29 de Diciembre de 2005, tituladas "MÉTODOS PARA PRODUCIR, MEJORAR Y SOSTENER RESPUESTAS INMUNES CONTRA EPÍTOPOS RESTRINGIDOS MHC CLASE I PARA PROPÓSITOS PROFILÁCTICOS O TERAPÉUTICOS" ("METHODS TO ELICIT, ENHANCE AND SUSTAIN IMMUNE RESPONSES AGAINST MHC CLASS I-RESTRICTED EPITOPES, FOR PROPHYLACTIC OR THERAPEUTIC PURPOSES") . ANTICUERPO - una inmunoglobulina natural (Ig), poli o monoclonal, o cualquier molécula compuesta en su totalidad o en parte de un dominio de unión Ig, ya sea derivado bioquímicamente, o por uso de ADN recombinante, o por otros medios. Los ejemplos incluyen inter alia, F(ab), Fv de cadena única, y fusiones de proteína de revestimiento de fago de región variable de Ig. SIMILITUD SUBSTANCIAL - este término se utiliza para referirse a secuencias que difieren de una secuencia de referencia en una manera inconsecuencia como se juzga por la examinación de la secuencia. Las secuencias de ácidos nucléicos que codifican la misma secuencia de ácidos nucléicos son substancialmente similares a pesar de las diferencias en posiciones degeneradas o diferencias menores en longitud o composición de cualquier región sin codificación. Las secuencias de aminoácidos que difieren solamente por la substitución conservadora o variaciones menores de longitud son substancialmente similares. Adicionalmente, las secuencias de aminoácidos que comprenden epítopos de mantenimiento que difieren en el número de residuos de flanqueo N-terminal, o epítopos inmunes y grupos de epítopos que difieren en el número de residuos de flanqueo en cualquier término, son substancialmente similares. Los ácidos nucléicos que codifican secuencias de aminoácidos substancialmente similares por ellos mismos son substancialmente similares. SIMILITUD FUNCIONAL - este término se utiliza para referirse a secuencias que difieren de una secuencia de referencia en una manera incosecuencial como se juzga por la examinación de una propiedad bioquímica o biológica, aunque las secuencias no pueden ser substancialmente similares. Por ejemplo, dos ácidos nucléicos pueden ser útiles como sondas de hibridización para la misma secuencia pero codifican diferentes secuencias de aminoácidos. Dos péptidos que inducen respuestas CTL reactivas son substancialmente similares aún si difieren por substituciones de aminoácido no conservadoras (y de esta manera pueden no estar dentro de la definición de similitud substancial). Los pares de anticuerpos, o TCRs, que reconocen el mismo epítopo pueden ser funcionalmente similares entre sí a pesar de cualquier diferencial estructural que exista. La prueba para similitud funcional de inmunogenicidad puede conducirse al inmunizar con el antígeno "alterado" y probar la habilidad de una respuesta producida, incluyendo pero no limitándose a una respuesta de anticuerpo, una respuesta CTL, producción de citocina, y lo similar, para reconocer el antígeno objetivo.

De acuerdo con lo anterior, pueden diseñarse dos secuencias para diferir en ciertos aspectos mientras mantienen la misma función. Tales variantes de secuencia diseñadas de secuencias reivindicadas o descritas están entre las modalidades de la presente invención. CASSETTE DE EXPRESIÓN - una secuencia de polinucleótidos que codifica un polipéptido, operablemente enlazada a un promotor y otros elementos de control de traducción y transcripción, que incluyen pero no se limitan a mejoradores, codones de terminación, sitios de entrada de ribosoma interno, y sitios de poliadenilación . El cassette también puede incluir secuencias que facilitan su movimiento de una molécula huésped a otra. EPÍTOPO INCRUSTADO - en algunas modalidades, un epitopo incrustado es un epitopo que se contiene completamente dentro de un polipéptido más largo; en otras modalidades, el término también puede incluir un epitopo en el cual solamente el N-término o el C-término se incrusta de manera que el epitopo no está completamente en una posición interior con respecto al polipéptido más largo. EPÍTOPO MADURO - un péptido sin secuencia adicional más allá de la presente cuando el epitopo se une en la ranura de unión a péptido MHC. GRUPO DE EPÍTOPOS - un polipéptido, o una secuencia de ácidos nucléicos que lo codifica, que es un segmento de una secuencia de proteínas, que incluye una secuencia de proteína nativa, que comprende dos o más epítopos predichos o conocidos con afinidad de unión para un elemento de restricción MCH compartido. En modalidades preferidas, la densidad de epítopos dentro del grupo es mayor que la densidad de todos los epítopos conocidos o predichos con afinidad de unión al elemento de restricción MHC compartido dentro de la secuencia de proteínas completa. Los grupos de epítopos se describen y se definen de manera más completa en la Solicitud de Patente de E.U. No. 09/561,571 presentada el 28 de Abril de 2000, titulada "GRUPOS DE EPÍTOPOS" ("EPITOPE CLUSTERS") que se incorpora en la presente mediante la referencia en su totalidad. SECUENCIA DE LIBERACIÓN - una secuencia manipulada o diseñada que comprende o codifica un epítopo de mantenimiento incrustado en una secuencia más larga que proporciona un contexto que permite que el epítopo de mantenimiento se libere al procesar actividades que incluyen, por ejemplo, actividad de inmunoproteasoma recorte N-terminal, y/u otros procesos o actividades, solas o en cualquier combinación. CTLp - los precursores CTL son células T que pueden inducirse para mostrar actividad citolítica. La actividad lítica in vitro secundaria, mediante la cual CTLp se observan de manera general, puede originarse de cualquier combinación de CTL de memoria, efectora o sin tratamiento in vivo. CÉLULA T DE MEMORIA - Una célula T, sin considerar su ubicación en el cuerpo, que se ha activado previamente por el antigeno, pero está en un estado fisiológico quiescente que requiere la re-exposición a antigeno para obtener función efectora. Fenotipicamente son generalmente CD26L-CD44hi y está en G0 del ciclo celular. CÉLULA T EFECTORA - Una célula T que, al encontrar el antigeno, muestra fácilmente la función efectora. Las células T efectoras generalmente son capaces de salir del sistema linfático y entrar a la periferia inmunológica . Fenotipicamente son generalmente CD26L-CD44hi CD107a+IFN-Y+LT +TNF-a+ y se ciclan activamente. FUNCIÓN EFECTORA - Generalmente, la activación de la célula T que incluye la adquisición de actividad citolítica y/o secreción de citocina. INDUCIR una respuesta de célula T - Incluye en muchas modalidades el proceso para generar una respuesta de la célula T a partir de células sin tratamiento, o en algunos contextos, quiescentes ; que activan las células T. AMPLIFICAR UNA RESPUESTA DE CÉLULA T - Incluye en muchas modalidades un proceso para incrementar el número de células, el número de células activadas, el nivel de actividad, velocidad de proliferación, o parámetro similar de las células T incluidas en una respuesta especifica.

INCORPORACIÓN - Incluye en muchas modalidades una inducción que confiere estabilidad particular en el perfil inmune del linaje inducido de células T. En varias modalidades, el término "incorporar" puede corresponder a "inducir" y/o "iniciar". RECEPTOR TIPO PEAJE (TLR) - Receptores tipo peaje (TLRs) son una familia de receptores de reconocimiento de patrón que se activan por componentes específicos de microbios y ciertas moléculas huésped. Como parte del sistema inmune innato, contribuyen a la primer línea de defensa contra muchos patógenos, pero también juegan un papel en inmunidad adaptativa. LIGANDO RECEPTOR TIPO PEAJE (TLR) - Cualquier molécula capaz de unir y activar un receptor tipo peaje. Los ejemplos incluyen, sin limitación: poli IC - un ARN de doble filamento, sintético conocido por incluir interferón. El polímero se hace de un filamento cada uno de ácido poliinosínico y ácido policitidílico, ARN de doble filamento, oligodeoxiribonucleótido CpG sin metilar u otras secuencias inmunoestimuladoras (ISSs), lipopolisacárido (LPS) , ß-glucanos, e imidazoquinolinas, así como derivados y análogos de los mismos. ADYUVANTES DE INMUNOPOTENCIACIÓN - Adyuvantes que activan las células T o pAPC que incluyen, por ejemplo: ligandos TLR, ligandos del Receptor de Reconocimiento del Patrón (PRR) endocitico, quillaja saponaria, tucaresol, citocinas y lo similar. Algunos adyuvantes preferidos se describen en Marciani, D.J. Drug Discovery Today 8:934-943, 2003, que se incorpora en la presente mediante la referencia en su totalidad. SECUENCIA INMUNOES IMULADORA (ISS) - Generalmente un oligodeoxiribonucleótido que contiene una secuencia CpG no metilada. CpG también puede incrustarse en ADN bacterialmente producido, particularmente plásmidos. Las modalidades adicionales incluyen varios análogos; entre las modalidades preferidas se encuentran las moléculas con uno o más enlaces de fosforotioato o bases no fisiológicas. VACUNA - En modalidades preferidas una vacuna puede ser una composición inmunogénica que proporciona o ayuda en la prevención de la enfermedad. En otras modalidades, una vacuna es una composición que puede proporcionar o ayudar en una cura de una enfermedad. En todavía otras modalidades, una composición de vacuna puede proporcionar o ayudar en la mejora de una enfermedad. Las modalidades adicionales de una composición inmunogénica de vacuna pueden utilizarse como agentes terapéuticos y/o profilácticos. INMUNIZACIÓN - un proceso para inducir protección completa o parcial contra una enfermedad. Alternativamente, un proceso para inducir o amplificar una respuesta del sistema inmune a un antígeno. En la segunda definición puede connotar una respuesta inmune protectora, particularmente inmunidad activa o proinflamatoria, pero también puede incluir una respuesta reguladora. De esta manera, en algunas modalidades la inmunización se distingue de tolerización (un proceso por el cual el sistema inmune evita producir la inmunidad activa o proinflamatoria) mientras en otras modalidades este término incluye tolerancia. El complejo mayor de histocompatibilidad y reconocimiento objetivo de célula T, así como moléculas MHC Clase I y Clase II, estimaron las frecuencias genéticas de antígenos HLA-B y HLA-A, y los genes CT se describen en la Solicitud de Patente de E.U. No. 11/323572 (Pub. No. 20060165711), presentada el 29 de Diciembre de 2005, que se incorpora en la presente mediante la referencia en su totalidad. Antigenos Objetivo para Uso en la Presente Invención Las modalidades de la presente invención proporcionan un protocolo inmunoterapéutico en combinación con una estrategia quimioterapéutica en la cual el protocolo inmunoterapéutico incluye un inmunógneo para inducir una respuesta de célula T en un sujeto. Tal inmunógeno contiene o codifica un antígeno. Los antígenos para utilizarse en modalidades de la invención pueden incluir, en una manera no limitante, proteínas, péptidos, polipéptidos y derivados de los mismos, y también pueden incluir macromoléculas sin péptido. Los antigenos, en algunos casos, pueden acoplarse a la enfermedad especifica encontrada en el sujeto que se trata para inducir una respuesta CTL (también referida como una respuesta inmune mediada por célula), i.e., una reacción citotóxica por el sistema inmune que da como resultado lisis de las células objetivo (e.g., las células tumorales malignas o células infectadas por patógeno) . La presente invención también contempla los antigenos asociados a objetivo. Por ejemplo, el objetivo puede ser cualquier célula neoplástica y células de tumor estromal de un cáncer, una célula infectada por patógeno, y lo similar. Las células infectadas por patógeno pueden incluir, por ejemplo, las células infectadas por una bacteria, un virus, un protozoario, un hongo, y lo similar, o afectarse por un prión, por ejemplo. En algunas modalidades, los antigenos pueden incluir antigenos de tumor, tales como, que incluyen antigenos específicos de tumor (TSAs) o antígenos asociados a tumor (TAAs) como se conocen bien por un experto en la materia. Los antígenos adicionales incluyen antígenos de diferenciación, antígenos embriónicos, antígenos de cáncer testicular, antígenos de oncógenos y genes supresores de tumor mutados, antígenos de tumor único que resultan de transubicación cromosómicas , antígenos virales, y otros que pueden estar aparentemente presentes o en el futuro para un experto en la materia. Todavía otros antígenos incluyen aquellos encontrados en organismos con enfermedad infecciosa, tales como proteínas virales estructurales y no estructurales. Los microbios objetivo potenciales contemplados en la presente invención, incluyen sin limitación, virus de hepatitis (e.g., C, B y delta), virus de herpes, HIV, HTLV, HPV, EBV, y lo similar. En algunas modalidades, el antígeno E749-57 HPV, que es tanto un antígeno de tumor como un antígeno viral, se emplea. En otras modalidades de la invención, pueden emplearse los antígenos a base de proteína grande. Tales antígenos incluyen: antígenos de diferenciación tales como MART-l/MelanA (MART-I), gplOO (Pmel 17), tirosinasa, TRP-1, TRP-2 y antígenos de multilinaje específicos de tumor tales como MAGE-1, MAGE-3 , BAGE, GAGE-1, GAGE-2, pl5; antígenos embriónicos sobreexpresados tal como CEA; genes supresores de tumor mutados y oncógenos sobreexpresados tales como p53, Ras, HER-2/neu; antígenos de tumor únicos que resultan de transubicaciones cromosomales tales como BCR-ABL, E2A-PRL, H4-RET, IGH-IGK, MYL-RAR; y antígenos virales, tales como los antígenos del virus Epstein Barr EBVA y los antígenos del virus de papiloma humano (HPV) E6 y E7. Otros antígenos a base de proteína grande incluyen: TSP-180, MAGE-4, MAGE-5, AGE-6, RAGE, NY-ESO, pl85erbB2, pl80erbB-3, c-met, nm-23HI, PSA, TAG-72, CA 19-9, CA 72-4, CAM 17.1, NuMa, K-ras, ß- Catenin, CDK4 , um-1, pl5, ??ß, 43-9F, 5T4, 791Tgp72, alfa-fetoproteina, ß-HCG, BCA225, BTAA, CA 125, CA 15-3\CA 27.29XBCAA, CA 195, CA 242, CA-50, CAM43, CD68\KP1, CO-029, FGF-5, G250, Ga733\EpCAM, HTgp-175, M344, MA-50, MG7-Ag, M0V18, NB/70K, NY-CO-1, RCAS1, SDCCAG16, PLA2, TA-90 \proteina de unión Mac-2\proteina asociada a ciclofilina C, TAAL6, TAG72, TLP, y TPS. Los antigenos a base de proteina se conocen generalmente bien por un experto ordinario en la materia . En otras modalidades de la invención, los antigenos de péptido de 8-15 aminoácidos en longitud pueden emplearse. Tal un péptido puede ser un epitopo de un antigeno más grande, i.e., es un péptido que tiene una secuencia de aminoácidos correspondiente al sitio en la molécula más grande que se presenta por moléculas MHC/HLA y puede reconocerse mediante, por ejemplo, un receptor de antigeno o receptor de célula T. Estos péptidos más pequeños están disponibles para un experto en la materia y pueden obtenerse al seguir las enseñanzas de las Patentes de E.U. Nos. 5,747,269 y 5,698,396; y Solicitud PCT Números PCT/EP95/02593 presentada el 4 de Julio de 1995 y PCT/DE96/00351 presentada el 26 de Febrero de 1996, todas de las cuales se incorporan en la presente por referencia. Los planteamientos adicionales al descubrimiento de epitopo se describen en las Patentes de E.U. Nos. 6,037,135 y 6,861,234, cada una de las cuales se incorpora en la presente mediante la referencia en su totalidad. Generalmente, el antígeno reconocido al último por una célula T es un péptido, sin embargo, la forma de antigeno actualmente administrado como la preparación inmunogénica no necesita ser un péptido per se. Cuando se administra, el (los) péptido (s) epitópico (s) pueden residir dentro de un polipéptido más largo, ya sea el antigeno de proteina completa, algún segmento de él, o alguna secuencia manipulada. Las secuencias manipuladas pueden incluir poliepitopos y epitopos incorporados en alguna secuencia portadora tal como un anticuerpo o proteina de cápsido viral. Tales polipéptidos más largos pueden incluir grupos de epitopos como se describen en la Solicitud de Patente de E.U. No. 09/561,571 titulada "GRUPOS DE EPITOPOS" ("EPITOPE CLUSTERS") que se incorpora en la presente para referencia en su totalidad. El péptido epitópico, o el polipéptido más largo en el cual se contiene, puede ser un componente de un microorganismo (e.g., un virus, bacteria, protozoario, etc) , o una célula de mamífero (e.g., una célula tumoral o célula que presenta antígeno) , o lisatos, completa o parcialmente purificados, de cualquiera de lo anterior. Pueden utilizarse como complejos con otras proteínas, por ejemplo proteínas de ataque cardiaco. El péptido epitópico también puede modificarse covalentemente , tal como por lipidación, o hacer un componente de un compuesto sintético, tales como dendrimeros, 'múltiples sistemas de péptidos de antigeno (MAPS) , y polioximas, o puede incorporarse en liposomas o microesferas , etc. La siguiente discusión establece el presente entendimiento o creencia de la operación de aspectos de la invención. Sin embargo, no se propone que esta discusión limite la patente a cualquier teoría particular de operación no establecida en las reivindicaciones. El control inmune-mediado efectivo de procesos tumorales o infecciones microbiales generalmente incluye la inducción y expansión de células T específicas de antígeno dotadas con múltiples capacidades tales como migración, funciones efectoras, y diferenciación en las células de memoria. La inducción de respuestas inmunes puede intentarse por varios métodos e incluye la administración de antígenos en formas diferentes, con efecto variable en la magnitud y calidad de la respuesta inmune. Un factor limitante para lograr un control de la respuesta inmune es pAPC objetivo capaz de procesar y presentar de manera efectiva los epítopos resultantes a las células T específicas. Una solución a este problema es suministro de antígeno directo a órganos linfoides secundarios, un microambiente abundante en pAPC y células T. El antígeno puede suministrarse, por ejemplo, ya sea como polipéptido o como un antígeno expresado por cualquiera de una variedad de vectores. El resultado en los términos de magnitud y calidad de inmunidad puede controlarse por factores que incluyen, por ejemplo, la dosificación, la formulación, la naturaleza del vector, y el ambiente molecular. Las modalidades de la presente invención pueden mejorar el control de la respuesta inmune. El control de la respuesta inmune incluye la capacidad para inducir diferentes tipos de respuestas inmunes según sea necesario, por ejemplo, de respuestas reguladoras a pro-inflamatorias. Las modalidades preferidas proporcionan control mejorado de la magnitud y calidad de respuestas a epitopos restringidos MHC clase I que son de mayor interés para inmunoterapia activa. Los métodos de inmunización previos desplegaron ciertas limitaciones importantes. Primero, con frecuencia, las conclusiones que consideran la potencia de vacunas se extrapolan de datos de inmunogenicidad generados de uno de un panel muy limitado de ensayos de lectura ultrasensible. Frecuentemente, a pesar de la potencia inferida de un régimen de vacunación, la respuesta clínica no fue significativa o fue a lo mucho modesta. Segundo, subsiguiente a la inmunización, las células reguladoras T junto con células efectoras T más convencionales, pueden generarse y/o expandirse, y tales células pueden interferir con la función de la respuesta inmune deseada. La importancia de tales mecanismos en inmunoterapia activa se ha reconocido solamente de manera reciente. La administración intranodal de inmunógenos proporciona una base para el control de la magnitud y perfil de respuestas inmunes. El efectivo la carga in vivo de pAPC realizado como un resultado de tal administración, permite una magnitud substancial de inmunidad, aún al utilizar un antigeno en su forma más simple-un epitopo de péptido-de otra manera generalmente asociado con deficientes farmacocinéticas . La calidad de respuesta puede controlarse además a través de la naturaleza de inmunógenos, vectores, y protocolos de inmunización. Tales protocolos pueden aplicarse para mejorar/modificar la respuesta en procesos tumorales . La inmunización se ha basado tradicionalmente en administración repetida de antigeno para aumentar la magnitud de la respuesta inmune. El uso de vacunas de ADN ha resultado en respuestas de alta calidad, pero ha sido difícil obtener respuestas de alta magnitud utilizando tales vacunas, aún con dosis de refuerzo repetidas. Ambas características de la respuesta, alta calidad y baja magnitud, probablemente se deben a los niveles relativamente bajos de carga de epitopo sobre MHC logrado con estos vectores. En su lugar, se ha vuelto más común reforzar tales vacunas utilizando el antígeno codificado en un vector de virus vivo para lograr la alta magnitud de respuesta necesaria para utilidad clínica. Sin embargo, el uso de vectores vivos puede comprender varias desventajas que incluyen los campos de seguridad potenciales, disminuyendo la efectividad de los últimos refuerzos debido a una respuesta humoral al vector inducido por las administraciones anteriores, y los costos de creación y producción. De esta manera, el uso de vectores vivos o ADN solo, aunque produce respuestas de alta calidad, puede resultar en una magnitud limitada o mantenimiento de respuesta. Se describen en la presente las modalidades que se relacionan con los protocolos y a métodos que, cuando se aplican a péptidos, se vuelven efectivos como herramientas terapéuticas inmunes. Tales métodos sortean la deficiente PK de péptidos, y si se aplican en contexto de regímenes específicos, y con frecuencia más complejos, dan como resultado amplificación robusta y/o control de respuesta inmune. En modalidades preferidas, la administración directa de péptido en órganos linfoide da como resultado amplificación inesperadamente fuerte de respuestas inmunes, siguiendo un agente cebador que induce una respuesta inmune fuerte, moderada o aún suave (en o por debajo de los niveles de detección por técnicas convencionales) que consiste de células Tel. Aunque las modalidades preferidas de la invención pueden emplear la administración intralinfática o perilinfática de antigeno en todas las etapas de inmunización, la administración intralinfática es el modo más preferido de administración para péptido libre de adyuvante. La amplificación de péptido utilizando la administración intralinfática puede aplicarse a respuestas inmunes existentes que pudieron haberse inducido previamente. La inducción previa puede ocurrir por medio de exposición natural al antigeno o por medio de las vías de administración comúnmente utilizadas, que incluyen sin limitación subcutánea, intradérmica, intraperitoneal , intramuscular y mucosal . También como se muestra en la presente, el inicio óptimo, que da como resultado la expansión subsiguiente de células T especificas, puede lograrse mejor al exponer las células T sin tratamiento a cantidades limitadas de antigeno (como puede resultar de la expresión con frecuencia limitada de antigeno codificado por plásmido) en un contexto co-estimulador rico (tal como en un nodo linfático) . Esto puede resultar en la activación de células T que llevan los receptores de célula T que reconocen, con alta afinidad, los complejos MHC-péptido en células que presentan antigeno y puede resultar en la generación de células de memoria que son más reactivas a la estimulación subsiguiente. El ambiente co-estimulador benéfico puede aumentarse o asegurarse a través del uso de agentes de inmunopotenciación y de esta manera la administración intralinfática, aunque ventajosa, no está en todas las modalidades requeridas para el inicio de la respuesta inmune. En modalidades que incluyen el uso de péptido epitópico para inducción/incorporación se prefiere que una dosificación relativamente baja de péptido (en comparación con una dosis de amplificación o a una concentración de saturación MHC) se utilice de manera que la presentación se limita, especialmente si se utiliza la administración intralinfática directa. Tales modalidades generalmente incluyen la inclusión de un inmunopotenciador para lograr la incorporación. Aunque los farmacocinéticos deficientes de péptidos libres han prevenido su uso en la mayoría de las vías de administración, la administración directa en órganos linfoide secundarios, particularmente nodos linfáticos, ha probado ser efectiva cuando el nivel de antígeno se mantiene más o menos de manera continúa mediante infusión continua o inyección frecuente (por ejemplo, diaria). Tal administración intranodal para la generación de CTL se enseña en las Solicitudes de Patente de E.U. Nos. 09/380,534, 09/776,232 (Pub. No. 20020007173 Al), ahora Patente de E.U. No. 6,977,074, y 11/313,152 (Pub. No. 20060153858), presentada el 19 de Diciembre de 2005), y en la Solicitud PCT No. PCTUS98/14289 (Pub. No. WO9902183A2) , cada una titulada "MÉTODO PARA INDUCIR UNA RESPUESTA CTL" ("METHOD OF INDUCING A CTL RESPONSE") cada una de las cuales se incorpora en la presente mediante la referencia en su totalidad. En algunas modalidades de la presente invención, la administración intranodal de péptido fue efectiva para amplificar una respuesta inicialmente inducida con una vacuna de ADN de plásmido. Además, el perfil de citocina fue distinto, con inducción de ADN de plásmido/amplificación de péptido generalmente da como resultado mayor quimoquina (citocina quimioatrayente) y menos producción de citocina inmunosupresora que cualquiera de los protocolos ADN/AND o péptido/péptido . De esta manera, tales protocolos de inducción de ADN/amplificación de péptido pueden mejorar la efectividad de las composiciones, incluyendo las vacunas terapéuticas para cáncer e infecciones crónicas. Los principios de selección del epitopo benéfico para tales inmunoterapéuticos se describen en las Solicitudes de Patente de E.U. Nos. 09/560,465, 10/026,066 (Pub. No. 20030215425 Al) , 10/005,905, presentada el 7 de Noviembre de 2001, 10/895,523 (Pub. No. 20050130920 Al), presentada el 20 de Julio de 2004, y /896,325 (Pub No. ), presentada el 20 de Julio de 2004, todas titulándose SINCRONIZACIÓN DE EPÍTOPO EN CELULAS QUE PRESENTAN ANTÍGENO (EPITOPE SYNCHRONIZATION IN ANTIGEN PRESENTING CELLS); 09/561,074, ahora Patente de E.U. No. 6,861,234, y 10/956,401 (Pub. No. 20050069982 Al), presentada el 1 de Octubre 2004, ambas tituladas "MÉTODO PARA DESCUBRIMIENTO DE EPÍTOPO" ( "METHOD OF EPITOPE DISCOVERY" ) ; 09/561,571, presentada el 28 de Abril de 2000, titulada "GRUPOS DE EPÍTOPOS" ("EPITOPE CLUSTERS"); 10/094,699 (Pub. No. 20030046714 Al), presentada el 7 de Marzo de 2002, 11/073,347, (Pub. No. 20050260234), presentada el 30 de Junio de 2005, cada una titulada "PREPARACIONES ANTI-NEOVASCULATURA PARA CÁNCER" ( "ANTI-NEOVASCULATURE PREPARATIONS FOR CANCER"); y 10/117,937 (Pub. No. 20030220239 Al), presentada el 4 de Abril de 2002, 11/067,159 (Pub. No. 20050221440A1) , presentada el 25 de Febrero de 2005, 10/067,064 (Pub. No. 20050142114 Al), presentada el 25 de Febrero de 2005, y 10/657,022 (Publicación No. 20040180354 Al), y Solicitud PCT No. PCT/US2003/027706 (Pub. No. WO 04/022709 A2 ) , cada una titulada "SECUENCIAS DE EPÍTOPOS" ("EPITOPE SEQUENCES"), y cada una de las cuales se incorpora en la presente mediante la referencia en su totalidad. Los aspectos del diseño total de plásmidos de vacuna se describen en Solicitudes de Patente de E.U. Nos. 09/561,572, presentada el 28 de Abril de 2000, y 10/225,568 (Pub. No. 20030138808 Al), presentada el 20 de Agosto de 2002, ambas tituladas "VECTORES DE EXPRESIÓN QUE CODIFICAN EPÍTOPOS DE ANTÍGENOS ASOCIADOS A OBJETIVO" ("EXPRESSION, VECTORS ENCODING EPITOPES OF TARGE -ASSOCIATED ANTIGENS") y Solicitudes de Patente de E.U. Nos. 10/292,413 (Pub. No.20030228634 Al), 10/777,053 (Pub. No. 20040132088 Al), presentada el 10 de Febrero de 2004, y 10/837,217 (Pub. No. 20040203051), presentada el 30 de Abril de 2004, titulándose "VECTORES DE EXPRESIÓN QUE CODIFICAN EPÍTOPOS DE ANTÍGENOS ASOCIADOS A OJETIVO Y MÉTODOS PARA SU DISEÑO" ("EXPRESSION VECTORS ENCODING EPITOPES OF TARGET-ASSOCIATED ANTIGENS AND METHODS FOR THEIR DESIGN" ) ; 10/225,568 (Pub No. 20030138808 Al), Solicitud PCT No. PCT/US2003/026231 (Pub. No. WO 2004/018666) y Patente de E.U. No. 6,709,844 y Solicitud de Patente de E.U. No. 10/437,830 (Pub. No. 20030180949 Al), presentada el 13 de Mayo de 2003, cada una titulada "ELUCIÓN DE COMPUESTOS INTERMEDIOS DE RÉPLICA INDESEABLES EN PROPAGACIÓN DE PLÁSMIDO" ( "AVOIDANCE OF UNDESIRABLE REPLICATION INTERMEDIATES IN PLASMID PROPAGATION") , cada una de las cuales se incorpora en la presente mediante la referencia en su totalidad. Las combinaciones antigénicas especificas de beneficio particular para dirigir una respuesta inmune contra cánceres particulares se describes en la Solicitud Provisional de E.U. No. 60/479,554, presentada el 17 de Junio de 2003, Solicitud de Patente de E.U. No. 10/871,708 (Pub. No. 20050118186 Al), presentada el 17 de Junio de 2004, Solicitud de Patente PCT No. PCT/US2004/019571 (Pub. No. WO 2004/112825), Solicitud Provisional de E.U. No. 60/640,598, presentada el 29 de Diciembre de 2005, y Solicitud de Patente de E.U. No 11/323,049 (Pub. No. 20060159694), presentada el 29 de Diciembre de 2005, titulándose "COMBINACIONES DE ANTÍGENOS ASOCIADOS A TUMOR EN VACUNAS PARA VARIOS TIPOS DE CÁNCERES" ("COMBINATIONS OF TUMOR-ASSOCIATED ANTIGENS IN VACCINES FOR VARIOUS TYPES OF CANCERS"), cada una de las cuales también se incorpora por referencia en su totalidad. El uso y ventajas de la administración intralinfática de BRMs se describen en Solicitud de Patente Provisional de E.U. No. 60/640,727, presentada el 29 de Diciembre de 2005 y Solicitud de Patente de E.U. No. 11/321,967 (Pub. No. 20060153844), presentada el 29 de Diciembre de 2005, ambas tituladas "MÉTODOS PARA ACTIVAR, MANTENER Y MANIPULAR LAS RESPUSTAS INMUNES POR LA ADMINISTRACIÓN OBJETIVO DE MODIFICADORES DE RESPUESTA BIOLÓGICA EN ÓRGANOS LINFOIDE" ( "METHODS TO TRIGGER, MAINTAIN Y MANIPULATE IMMUNE RESPONSES BY TARGETED ADMINISTRATION OF BIOLOGICAL RESPONSE MODIFIERS INTO LYMPHOID ORGANS"), cada una de las cuales se incorpora por referencia en su totalidad. La metodología adicional, composiciones, péptidos y análogos de péptido se describen en la Solicitud de Patente de E.U. No. 09/999,186, presentada el 7 de Noviembre de 2001, titulada "MÉTODOS PARA COMERCIALIZAR UN ANTÍGENO" ("METHODS OF COMMERCIALIZING AN ANTIGEN" ) ; y Solicitud de Patente Provisional de E.U. No. 60/640,821, presentada el 29 de Diciembre de 2005 y Solicitud No. 11/323,520 (Pub. No. ), presentada el 29 de Diciembre de 2005, ambas tituladas "MÉTODOS PARA DESVIAR LAS CÉLULAS CD4+ EN LA INDUCCIÓN DE UNA RESPUESTA INMUNE" ( "METHODS TO BYPASS CD4+ CELLS IN THE INDUCTION OF AN IMMUNE RESPONSE"), cada una de las cuales se incorpora en la presente mediante la referencia en su totalidad . Otras descripciones relevantes están presentes en la Solicitud de Patente de E.U. No. 11/156, 369 (Pub. No. 20060057673), y Solicitud de Patente Provisional de E.U. No. 60/691,889, ambas presentadas el 17 de Junio de 2005, ambas tituladas "ANÁLOGOS DE EPÍTOPO" ("EPITOPE ANALOGS" ) , y cada una de las cuales se incorpora en la presente mediante la referencia en su totalidad. También son relevantes, las Solicitudes de Patente Provisional de E.U. Nos. 60/691,579, presentada el 17 de Junio de 2005, titulada "MÉTODOS Y COMPOSICIONES PARA PRODUCIR RESPUESTAS INMUNES MULTIVALENTES CONTRA EPÍTOPOS DOMINANTES Y SUBDOMINANTES EXPRESADOS EN CÉLULAS CANCERÍGENAS Y ESTROMA DE TUMOR" ("METHODS AND COMPOSITIONS TO ELICIT MULTIVALENT IMMUNE RESPONSES AGAINST DOMINANT AND SUBDOMINANT EPITOPES, EXPRESSED ON CANCER CELLS AND TUMOR STROMA"), y 60/691,581, presentada el 17 de Junio de 2005, titulada "INMUNOTERAPEUTICA DE INCORPORACIÓN Y AMPLIFICACIÓN MULTIVALENTE PARA CARCINOMA" ("MULTIVALENT ENTRAIN-AND-AMPLIFY IMMUNOTHERAPEUTICS FOR CARCINOMA"), cada una de las cuales se incorpora en la presente mediante la referencia en su totalidad. Los protocolos que incluyen secuencias especificas de dosis de incorporación de ADN recombinante , seguidos por refuerzos de péptido administrados a órganos linfoide, son útiles para el propósito de inducción, amplificación y mantenimiento de fuertes respuestas de célula T, por ejemplo, para profilaxis o terapia de enfermedades neoplásticas o infecciosas. Tales enfermedades pueden ser carcinomas (e.g., renal, ovárico, mama, pulmón, colorectal, prostático, cabeza y cuello, vejiga, uterino, piel), melanoma, tumores de origen diverso y en general tumores que expresan los antigenos asociados a tumor que se pueden definir o definidos, tal como oncofetal (e.g., CEA, CA 19-9, CA 125, CRD-BP, Das-1, 5T4, TAG-72, y lo similar), la diferenciación de tejido (e.g., Melan-A, tirosinasa, gplOO, PSA, PSMA, y lo similar), o antigenos de cáncer testicular (e.g., PRAME, MAGE, LAGE, SSX2, NY-ESO-1, y lo similar). Los genes de cáncer testicular y su relevancia para el tratamiento para el cáncer se revisan en Scanlon et al., (ver Cáncer Immunity 4:1-15, 2004, que se incorpora en la presente para referencia en su totalidad) . Los antigenos asociados con neovasculatura de tumor (e.g., PSMA, VEG FR2, Tie-2) también son útiles en conexión con enfermedades cancerosas, como se describe en Solicitudes de Patente de E.U. Nos. 10/094,699 (Pub. No. 20030046714 Al) y 11/073,347 (Pub. No. 20050260234), presentada el 30 de Junio de 2005, titulada "PREPARACIONES ANTI-NEOVASCULATURA PARA CÁNCER" ( "ANTI-NEOVASCULATURE PREPARATIONS FOR CANCER" ) , cada una de las cuales se incorpora en la presente mediante la referencia en su totalidad . Las aplicaciones preferidas de métodos de incorporación y amplificación incluyen inyección o infusión en uno o más nodos linfáticos, iniciando con un número (e.g., 1 a 10, o más, 2 a 8, 3 a 6, de preferencia aproximadamente 4 o 5) de administraciones de ADN recombinante (rango de dosis de 0.001-10 mg/kg, preferentemente 0.005-5 mg/kg) seguido por una o más administraciones (de preferencia aproximadamente 2) administraciones de péptido, preferentemente en un vehículo inmunológicamente inerte o formulación (rango de dosis de 1 ng/kg - 10 mg/kg, preferentemente 0.005-5 mg/kg). Debido a que la dosis no aumenta necesariamente de manera lineal con el tamaño del sujeto, las dosis para humanos pueden tender hacia las porciones inferiores, y las dosis para ratones pueden tender hacia las superiores, de estos rangos. La concentración preferida de plásmido y péptido en la inyección en general es de aproximadamente 0. lpg/ml-10mg/ml, y la concentración más preferida es aproximadamente lmg/ml, generalmente irrespectiva del tamaño o especies del sujeto. Sin embargo, los péptidos particularmente potentes pueden tener concentraciones óptimas hacia el extremo inferior de este rango, por ejemplo entre 1 y 100yg/ml. Cuando solamente se utilizan protocolos de péptido para promover la tolerancia, las dosis hacia el extremo más alto de estos rangos se prefieren generalmente (e.g., 0.5-10 mg/ml) . Esta secuencia puede repetirse siempre que sea necesario para mantener una respuesta inmune fuerte in vivo. Además, el tiempo entre la última dosis de incorporación de ADN y la primer dosis de amplificación de péptido no es critico. Preferentemente, es aproximadamente 7 días o más, y puede exceder varios meses. La multiplicidad de inyecciones del ADN y/o el péptido puede reducirse al substituir las infusiones que duran varios días (preferentemente 2-7 días) . Puede ser ventajoso iniciar la infusión con un bolo de material similar a aquel que puede darse como una inyección, seguido por una lenta infusión (24-12000 µ?/dia para suministrar aproximadamente 25-2500 g/dia para ADN, 0.1-10, 000pg/dia para péptido) . Esto puede realizarse manualmente o a través del uso de una bomba programable, tal como una bomba de insulina. Tales bombas se conocen en la materia y permiten saltos periódicos y otros perfiles de dosificación, que pueden ser deseables en algunas modalidades. En modalidades preferidas el método llama a la administración directa al sistema linfático. En modalidades preferidas, es decir, a un nodo linfático. Los vasos linfáticos anferentes similarmente se prefieren. La elección de nodo linfático no es critica. Se prefieren los nodos linfáticos inguinales por su tamaño y accesibilidad, pero los nodos axilares y cervicales y amígdalas pueden ser similarmente ventajosos. La administración a un nodo linfático único puede ser suficiente para inducir o amplificar una respuesta inmune. La administración a múltiples nodos puede incrementar la conflabilidad y magnitud de la respuesta. Para modalidades que promueven una respuesta multivalente y en las cuales los múltiples péptidos de amplificación, por lo tanto, se utilizan, puede ser preferible que solamente un péptido único se administre a cualquier nodo linfático particular en cualquier ocasión particular. De esta manera, un péptido puede administrarse al nodo linfático inguinal derecho y un segundo péptido al nodo linfático inguinal izquierdo al mismo tiempo, por ejemplo. Los péptidos adicionales pueden administrarse a otros nodos linfáticos aún si no hay sitios de inducción, ya que no es esencial que las dosis de inicio y amplificación se administren al mismo sitio, debido a la migración del linfocito T. Alternativamente cualquier péptido adicional puede administrarse unos pocos días después, por ejemplo, a los mismos nodos linfáticos utilizados para los péptidos de amplificación previamente administrados ya que el intervalo de tiempo entre inducción y amplificación generalmente no es un parámetro crucial, aunque en modalidades preferidas el intervalo de tiempo puede ser mayor que aproximadamente una semana. La segregación de administración de péptidos de amplificación es generalmente de menos importancia si sus afinidades de unión a MHC son similares, pero puede desarrollarse en importancia a medida que las afinidades se vuelven más disparadas. Las formulaciones incompatibles de varios péptidos también pueden hacer preferible la administración segregada. Los pacientes que pueden beneficiarse de tales métodos de inmunización pueden reclutarse utilizando los métodos para definir su perfil de expresión de proteina MHC y nivel general de capacidad de respuesta inmune. Además, su nivel de inmunidad puede monitorearse utilizando técnicas estándar junto con el acceso a sangre periférica. Finalmente, los protocolos de tratamiento pueden ajustarse en base a la capacidad de respuesta a las fases de inducción o amplificación y variación en expresión de antigeno. Por ejemplo, las dosis de incorporación repetidas preferentemente pueden administrarse hasta que se obtiene una respuesta detectable, y después se administra (n) la(s) dosis de péptido de amplificación, en lugar de amplificación después de algún número de conjunto de dosis de incorporación. De manera similar, las dosis de mantenimiento y amplificación programadas de péptido pueden discontinuarse en sus disminuciones de efectividad, elevación de los números de la célula T reguladora especifica de antigeno, o alguna otra evidencia de tolerancia se observa, y la incorporación adicional puede administrarse antes de resumir la amplificación con el péptido. La integración de las técnicas de diagnóstico para valorar y monitorear la respuesta inmune con métodos de inmunización se trata más completamente en la Solicitud de Patente de E.U. Provisional No. 60/580,964, que se presenta el 17 de Junio de 2004 y la Solicitud de Patente de E.U. No. 11/155,928 (Pub. No. 20050287068), presentada el 17 de Junio de 2005, ambas tituladas "EFICACIA MEJORADA DE INMUNOTERAPIA ACTIVA AL INTEGRAR EL DIAGNÓSTICO CON MÉTODOS TERAPÉUTICOS" ("IMPROVED EFFICACY OF ACTIVE IMMUNOTHERAPY BY INTEGRATING DIAGNOSTIC WITH THERAPEUTIC METHODS" ) , cada una de las cuales se incorpora en la presente mediante la referencia en su totalidad. La práctica de muchas modalidades metodológicas de la invención incluye el uso de al menos dos composiciones diferentes y al menos un agente quimioterapéutico . En modalidades donde existe más de un antigeno único objetivo, los métodos pueden incluir varias composiciones inmunogénicas y agente (s) quimioterapéutico (s) a administrarse juntos y/o en diferentes tiempos. De esta manera, las modalidades de la invención incluyen conjuntos y subconjuntos de agente (s) quimioterapéutico ( s ) y composición (es) inmunogénica ( s ) y dosis individuales de los mismos. La multivalencia puede lograrse utilizando composiciones que comprende inmunógenos multivalentes , combinaciones de inmunogenos monovalentes, uso coordinado de composiciones que comprende uno o más inmunogenos monovalentes o varias combinaciones de los mismos. Múltiples composiciones, fabricados para utilizarse en un régimen de tratamiento particular o protocolo de acuerdo a tales métodos, definen un producto inmunoterapéutico. En algunas modalidades, todo o un subconjunto de las composiciones del producto se empacan juntos en un kit junto con o separado del (los) agente (s) quimioterapéutico ( s ) . En algunos casos las composiciones de amplificación e inducción que tienen como objetivo un epitopo único, o conjunto de epítopos, pueden empacarse juntas. En otros casos múltiples composiciones de inducción pueden ensamblarse en un kit y las composiciones de amplificación correspondientes ensambladas en otro kit. Alternativamente las composiciones pueden empacarse y venderse de manera individual junto con las instrucciones, en forma impresa o en medio legible por máquina, que describen como pueden utilizarse conjuntamente entre si para lograr los resultados benéficos de los métodos de la invención. Las variaciones individuales serán aparentes para un experto en la materia. El uso de varios esquemas de empaque comprendiendo menos de todos los agentes y/o composiciones que pueden emplearse en un protocolo particular o régimen facilita la personalización del tratamiento, por ejemplo, en base a la expresión de antigeno de tumor, o respuesta observada al inmunoterapéutica o sus diversos componentes, como se describe en Solicitud Provisional de E.U. No. 60/580,969, presentada el 17 de Junio de 2004, Solicitud de Patente de E.U. No. 11/155,288 (Pub. No. 20060008468) presentada el 17 de Junio de 2005, y Solicitud de Patente de E.U. No. 11/323,964, presentada el 29 de Diciembre de 2005, tituladas "COMBINACIONES DE ANTÍGENOS ASOCIADOS A TUMOR EN DIAGNÓSTICOS PARA VARIOS TIPOS DE CÁNCERES" ("COMBINATIONS OF TUMOR-ASSOCIATED ANTIGENS IN DIAGNOSTICS FOR VARIOUS TYPES OF CANCERS"); y Solicitud de Patente de E.U. Provisional No. 60/580,964, y Solicitud de Patente de E.U. No. 11/155,928 (Pub. No. 20050287068, ambas tituladas "EFICACIA MEJORADA DE INMUNOTERAPIA ACTIVA AL INTEGRAR EL DIAGNÓSTICO CON MÉTODOS TERAPÉUTICOS" ("IMPROVED EFFICACY OF ACTIVE IMMUNOTHERAPY BY INTEGRATING DIAGNOSTIC ITH THERAPEUTIC METHODS"), cada una de las cuales se incorpora por referencia en su totalidad arriba. TERAPIAS DE COMBINACIÓN Y SUMINISTRO En modalidades particulares de la invención se proporciona un planteamiento terapéutico que comprende un régimen inmunoterapéutico en combinación con un agente quimioterapéutico que elimina células reguladoras T permitiendo asi la actividad de la célula T dentro de un tumor. Preferentemente, el agente quimioterapéutico es ciclofosfamida .

En combinación con las estrategias inmunoterapéuticas/quimioterapéuticas descritas en la presente, otras estrategias terapéuticas también pueden emplearse. Otras terapias de cáncer contempladas incluyen, en una manera no limitante, radioterapia, bioterapia, terapia genética, terapia hormonal, o cirugía. Otras terapias que pueden emplearse en combinación con la estrategia inmunoterapéutica/quimioterapéutica descrita en la presente incluyen, pero no se limitan a: adyuvantes inmunes (e.g., Mycobacterium bovis, Plasmodium falciparum, dinitroclorobenceno y compuestos aromáticos) ; terapia de citocina (e.g., interferones alta, beta y gamma; IL-1, GM-CSF y TNF) ; y anticuerpos monoclonales (e.g., GM2 anti-gangliósido, anti-HER-2, anti-pl85) . Otros agentes quimioterapéuticos bien conocidos por aquellos de experiencia ordinaria en la materia, también pueden emplearse en los métodos y estrategias de combinación descritas en la presente. Estas incluyen, en una manera no limitante, por ejemplo, gemcitabina, fludarabina, cisplatina (CDDP) , carboplatina , procarbazina, mecloretamina, camptotecina, ifosfamida, melfalan, clorambucil, bisulfan, nitrosurea, dactinomicina, daunorubicina , doxorubicina, bleomicina, plicomicina, mitomicina, etopósido (VP16) , tamoxifen, taxol, transplatino, 5-fluorouracil, vincristina, vinblastina y metotrexate o cualquier análogo o variante derivado de los mismos. En todavía otras modalidades, la cirugía, tal como cirugía curativa puede emplearse en combinación con la estrategia inmunoterapéutica/quimioterapéutica descrita en la presente. La cirugía curativa para cáncer incluye resección en la cual todo o parte del tejido canceroso se remueve, corta y/o destruye físicamente. Los diversos parámetros pueden tomarse en cuenta en el suministro o administración de una composición inmunoterapéutica y/o quimioterapéutica a un sujeto. Además, puede emplearse un régimen de dosificación y programa de inmunización. Generalmente, la cantidad de los componentes en la composición terapéutica variará de paciente a paciente y de antígeno a antígeno, dependiendo de tales factores como: la actividad del antígeno en una respuesta; la velocidad de flujo del linfático a través del sistema del paciente; el peso y edad del sujeto; el tipo de enfermedad y/o condición que se trata; la severidad de la enfermedad o condición; intervenciones terapéuticas previas o concurrentes; la capacidad del sistema inmune individual para sintetizar anticuerpos; el grado de protección deseado; la manera de administración y lo similar, los cuales pueden determinarse fácilmente por el practicante. En general la composición terapéutica puede suministrarse a una velocidad de desde aproximadamente 1 a aproximadamente 500 microlitros/hora o aproximadamente 24 a aproximadamente 12000 microlitros/dia . La concentración del antigeno es tal que aproximadamente 0.1 microgramos a aproximadamente 10,000 microgramos del antigeno se suministrarán durante 24 horas. La velocidad de flujo se basa en el conocimiento de que cada minuto aproximadamente 100 a aproximadamente 1000 microlitros de fluido linfático fluye a través de un nodo linfático inguinal adulto. El objetivo es maximizar la concentración local de formulación de vacuna en el sistema linfático. Una cierta cantidad de investigación empírica en pacientes será necesaria para determina el nivel más eficaz de infusión para una preparación de vacuna dada en humanos. Las composiciones inmunoterapéuticas y/o quimioterapéuticas pueden incluir varias "dosis unitarias". La dosis unitaria se define como conteniendo una cantidad predeterminada de la composición terapéutica calculada para producir las respuestas deseadas en asociación con su administración, i.e., el régimen de tratamiento y vía apropiada. La cantidad a administrarse, y la vía particular y formulación, están dentro de la experiencia de aquellos en las artes clínicas. También de importancia es el sujeto a tratarse, en particular, el estado del sujeto y la protección deseada. Una dosis unitaria no necesita administrarse como una inyección única pero puede comprender la infusión continua durante un periodo fijo de tiempo. En modalidades particulares, la composición inmunoterapéutica y/o quimioterapéutica puede administrarse como una pluralidad de dosis secuenciales . Tal pluralidad de dosis puede ser 2, 3, 4, 5, 6 o más dosis según sea necesario. En modalidades adicionales de la presente invención, se contempla que las dosis de la composición inmunoterapéutica y/o quimioterapéutica puede administrarse dentro de aproximadamente segundos o minutos entre si hacia los nodos linfáticos inguinales derechos e izquierdo. Por ejemplo, el plásmido (cebador) puede inyectarse primero en el nodo linfático derecho seguido dentro de segundos o minutos por un segundo plásmido hacia el nodo linfático inguinal izquierdo. En otros casos la combinación de uno o más plásmidos que expresan uno o más inmunógenos puede administrarse. Se prefiere que la inyección subsiguiente después de la primer inyección hacia el nodo linfático estará dentro de aproximadamente 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 o más minutos pero no mayor que aproximadamente 30, 40, 50 0 60 minutos de la primer inyección. Las consideraciones similares se aplican a la administración de dos péptidos de manera individual a los nodos linfáticos derechos e izquierdos. Puede ser deseable administrar la pluralidad de dosis de la composición inmunoterapéutica y/o quimioterapéutica de la invención a un intervalo de días, donde varios días (1, 2, 3, 4, 5, 6, o 7 o más días) transcurren entre administraciones subsiguientes. En otros casos puede ser deseable que las administración (es) subsiguiente ( s ) de las composiciones terapéuticas de la invención se administren a través de la inyección de nodo linfático inguinal bilateral dentro de aproximadamente 1, 2, 3 o más semanas o dentro de aproximadamente 1, 2, 3 o más meses después de la administración de la dosis inicial. La administración puede ser en cualquier manera compatible con la formulación de dosificación y en tal cantidad como será terapéuticamente efectiva. Una cantidad efectiva o dosis de una composición inmunoterapéutica y/o quimioterapéutica de la presente invención es la cantidad necesaria para proporcionar una respuesta deseada en el sujeto a tratarse. Se describe una cantidad efectiva, generalmente, como aquella cantidad suficiente para mejorar, reducir, minimizar o limitar de manera detectable y repetida, el grado de la enfermedad o sus síntomas. Las definiciones más rigurosas pueden aplicar, incluyendo eliminación, erradicación o cura de la enfermedad. Preferentemente, las dosis inmunomoduladoras (usualmente dosis bajas) de quimioterapia diseñadas para eliminar de manera selectiva las células reguladoras T para mejorar la respuesta inmune antes de la inmunoterapia pueden proporcionarse de acuerdo a los estándares médicos actualmente aprobados tomando en cuenta la toxicidad. En algunas modalidades, los números que expresan cantidades de ingredientes, propiedades tales como peso molecular, condiciones de reacción, y asi sucesivamente utilizadas para describir y reclamar ciertas modalidades de la invención están por entenderse como modificándose en algunos casos por el término "aproximadamente". De acuerdo con lo anterior, en algunas modalidades, los parámetros numéricos establecidos en la descripción escrita y reivindicaciones anexas son aproximaciones que pueden variar dependiendo de las propiedades deseadas que se buscan obtener por una modalidad particular. En algunas modalidades, los parámetros numéricos deben construirse en vista del número de dígitos significativos reportados y al aplicar técnicas de redondeo ordinarias. Sin importar que los rangos números y parámetros que establecen el alcance amplio de algunas modalidades de la invención son aproximaciones, los valores numéricos establecidos en los ejemplos específicos se reportan de manera tan precisa como sea posible. Los valores numéricos presentados en algunas modalidades de la invención pueden contener ciertos errores que resultan necesariamente de la desviación estándar encontrada en sus mediciones de prueba respectivas. En algunas modalidades, los términos "un" y "una" y "el" o "la" y referencias similares utilizadas en el contexto de describir una modalidad particular de la invención (especialmente en el contexto de ciertas reivindicaciones siguientes) pueden construirse para cubrir tanto el singular como el plural. La cita de rangos de valores en la presente meramente se propone para servir como un método corto para referirse de manera individual a cada valor separado que cae dentro del rango. Al menos que se indique de otra manera en la presente, cada valor individual se incorpora en la especificación como si se citará individualmente en la presente. Todos los métodos descritos en la presente pueden realizarse en cualquier orden adecuado al menos que se indique de otra manera en la presente o de otra manera se contradice claramente por contexto. El uso de cualquiera y todos los ejemplos, o lenguaje ej emplificativo (e.g. "tal como") proporcionado con respecto a ciertas modalidades en la presente se propone meramente para iluminar mejor la invención y no posee una limitación en el alcance de la invención de otra manera reclamada. Los agrupamientos de elementos alternativos o modalidades de la invención descritos en la presente no se construyen como limitaciones. Cada miembro del grupo puede referirse como y reclamarse de manera individual o en cualquier combinación con otros miembros del grupo y otros elementos encontrados en la presente. Se anticipa que uno o más miembros de un grupo pueden incluirse en, o eliminarse de, un grupo por razones de conveniencia y/o patentabilidad . Cuando cualquier tal inclusión o eliminación ocurre, la especificación en la presente parece contener el grupo según se modifica, cumpliendo de esta manera la descripción escrita de todos los grupos Markush utilizados en las reivindicaciones anexas. Las modalidades preferidas de esta invención se describen en la presente, incluyendo el mejor modo conocido por los inventores para llevar a cabo la invención. Las variaciones de aquellas modalidades preferidas serán aparentes para aquellos de experiencia ordinaria en la materia en la lectura de la descripción anterior. Se contempla que los expertos pueden emplear tales variaciones como apropiadas, y la invención puede practicarse de otra manera que la descrita específicamente en la presente. De acuerdo con lo anterior, muchas modalidades de esta invención incluyen todas las modificaciones y equivalentes de la materia sujeto citada en las reivindicaciones anexas a la misma según se permite por la ley aplicable. Además, cualquier combinación de los elementos arriba descritos en todas las variaciones posibles de los mismos se comprende por la invención al menos que se indique de otra manera en la presente o de otra manera se contradice claramente por el contexto . Además, se han hecho numerosas referencias a las patentes y publicaciones impresas por toda esta especificación. Cada una de las referencias arriba citadas y publicaciones impresas se incorporan en la presente de manera individual por referencia en su totalidad. Debe entenderse que las modalidades de la invención descritas en la presente son ilustrativas de los principios de la presente invención. Otras modificaciones que pueden emplearse pueden estar dentro del alcance de la invención. De esta manera, a manera de ejemplo, pero sin limitación, las configuraciones alternativas de la presente invención pueden utilizarse de acuerdo con las enseñanzas en la presente. De acuerdo con lo anterior, la presente invención no se limita a lo mostrado y descrito de manera precisa. Habiendo descrito la invención en detalle, será aparente que las modificaciones, variaciones y modalidades equivalentes son posibles sin apartarse del alcance de la invención definido en las reivindicaciones anexas. Además, debe apreciarse que todos los ejemplos en la presente descripción se proporcionan como ejemplos no limitantes. EJEMPLOS Los siguientes ejemplos no limitantes se proporcionan para ilustrar además la presente invención. Debe apreciarse por aquellos de experiencia en la materia que las técnicas descritas en los siguientes ejemplos representan planteamientos que los inventores han encontrado que funcionan bien en la práctica de la invención, y de esta manera pueden constituir ejemplos de modos para su práctica. Sin embargo, aquellos de experiencia en la materia, en vista de la presente descripción, deben apreciar que muchos cambios pueden hacerse en las modalidades especificas que se describen y aún obtienen un resultado similar o parecido sin apartarse del espíritu y alcance de la invención. EJEMPLO 1: REGRESIÓN DE TUMOR PRODUCIDA POR LA INMUNOTERAPIA DE NODO LINFÁTICO OBJETIVO CON UN PÉPTIDO (E7) HPV-16 La regresión del tumor producida por la inmunoterapia de nodo linfático objetivo se valora en un modelo de tumor HPV-16, mediante la carga in vivo APCs del nodo linfático con el péptido E749-57 en combinación con un accionamiento adyuvante a través de TLRs (dsARN sintético) , para producir una inmunidad restringida MHC clase I potente. Los ratones que llevan tumores transformados del virus de papiloma humano tipo 16 recibieron inyecciones intranodales de un péptido £7,59.57 HPV-16 MHC clase I coinyectado con ARN de doble filamento (polilC) como un adyuvante el día siete después de la prueba del tumor subsiguiente (células 105) (Figura 1). La mayoría de los ratones inmunizados (60%) se curan completamente con 7 de 20 que muestran protección completa (CP) y 5 de 20 que forman un tumor medible que responde completamente (CR) después de la inmunoterapia los días 7, 10, 21 y 24 (Figura 2; Tabla 1).

Un animal demostró una respuesta parcial (PR) que da como resultado un tumor que fue 32% más pequeño al final del régimen de tratamiento (Tabla 1). Las mediciones de calibre y técnicas de formación de imágenes por ultrasonido se utilizan para monitorear el desarrollo de tumor y valorar la supervivencia libre de tumor. El desarrollo del tumor (PD) en los animales restantes se retrasa significativamente (Figura 3) y se correlaciona con las respuestas CTL especificas del antigeno inicial inferior, como se muestra por el análisis de tetrámero. Una vuelta adicional (refuerzo) de inmunoterapia los días 35 y 38 aumentó de manera significativa la respuesta inmune para llevar a los ratones de un promedio de 5 a 30%, como se muestra por el análisis de tetrámero (Figura 3 y 4, paneles derechos) sin embargo, no se observa mejora en la eficacia del tumor (Figuras 3 y 4) . Como se muestra en la Figura 5, el aislamiento de TILs de los tumores confirmó la presencia de las células CD8+ especificas de HPV (83.7%) en la población de ratones inmunizados en comparación con aquella del control (2.2%). Estos datos indican que la función de TILs se deteriora y la falta de mejora en la eficacia de tumor puede deberse a otros factores tales como, por ejemplo, el micro-ambiente de tumor. Tabla 1: Protección de los tumores transformados HPV tipo 16 en ratones Parcial, Enfermedad Progresiva EJEMPLO 2: FRECUENCIA INCREMENTADA DE CELULAS REGULADORAS T EN ENFERMEDAD PROGRESIVA Para valorar el papel de las células reguladoras T en animales que fallan en responder a inmunoterapia , los ratones que llevan los tumores transformados del virus de papiloma humano tipo 16 recibieron inyecciones intranodales de un péptido E749_57 HPV-16 MHC clase I co-inyectado con ARN de doble filamento (polilC) como un adyuvante los días 21, 25, 35 y 39 después de la prueba del tumor subsiguiente (células 105) . Los ratones control recibieron ya sea polilC o salina. Adicionalmente, para determinar la tolerancia potencial de linfocitos que infiltran el tumor (TILs) específicos de HPV para los efectos inmunomoduladores de ciclofosfamida , ciclofosfamida se emplea en combinación con la estrategia inmunoterapéutica del péptido E749_57 HPV-16 descrita en el Ejemplo 1. La ciclofosfamida es un agente quimioterapéutico de alquilación que se ha mostrado tener efectos citotóxicos asi como inmunomoduladores, tal como la eliminación de células T reguladoras CD4+CD25+ y mejora de respuestas CTL especificas de antigeno que han resultado en la eficacia incrementada del tumor (Ercolini AM, et al., J Exp Med., 16,201 (10): 1591-602, 2005; Lutsiak ME, et al., Blood. Apr 1 ; 105 ( 7 ) : 2862-8 , 2005; Hermans IF, et al., Cáncer Research 63, 8408-8413, 2003; Loeffler M, et al., Cáncer Res, 65: 12, 2005) . Los ratones recibieron una inyección de ciclofosfamida (CTX, 100 mg/kg) los días 46 y 50. El día 49, los bazos se remueven de 3 ratones en cada grupo y el porcentaje de células CD25+ y Fox P3+ se calcula dentro de la población total CD4+ (Figura 6). Los datos muestran que los ratones con tumores en desarrollo (Panel B) tuvieron aproximadamente 3 veces más células reguladoras T en comparación con los ratones sin tratamiento (Paneles A y E) o curados (Panel D) . Los ratones con tumores que recibieron inyección de ciclofosfamida (CTX, 100 mg/kg) el día 46 tuvieron niveles significativamente reducidos de células reguladoras T (prueba Students T, valor p = 0.02) (Figura 6, Paneles C y E) . Además, la terapia de combinación que emplea tanto la estrategia inmunoterapéutica de péptido E749-57 HPV-16 con ciclofosfamida (Figura 7) resultó en la actividad antitumor que se mejora de manera dramática (p < 0.02) durante cualquier tratamiento administrado solo. Estos resultados indican que los planteamientos terapéuticos combinatorios (como se describe en cualquier parte en la presente) potencian la eficacia de inmunoterapia de cáncer activa. Estos descubrimientos proporcionan un nuevo pensamiento racional para la combinación de quimioterapia e inmunoterapia en tratamiento para el cáncer. EJEMPLO 3: ADMINISTRACIÓN DE UN AGENTE QUIMIOTERAPÉUTICO ANTES DEL REGIMEN INMUNOTERAPÉUTICO Se conducen los estudios adicionales en donde los agentes quimioterapéuticos no limitantes tales como, por ejemplo, pero limitándose a, ciclofosfamida , gemcitabina, fludarabina y doxorubicina se emplean para eliminar de manera selectiva las células reguladoras T para mejorar la respuesta inmune antes de inmunoterapia. Utilizando una estrategia similar como se describe en el Ejemplo 1 de arriba, los ratones que llevan tumores transformados del virus de papiloma humano tipo 16 primero recibieron las dosis inmunomoduladoras (dosis bajas) de un agente quimioterapéutico seguidas en varios intervalos por inyecciones intranodales de un péptido E749-57 HPV-16 MHC clase I co-inyectado con ARN de doble filamento (polilC) como un adyuvante. Los ratones se valoran entonces para regresión del tumor. La dosificación es de acuerdo a los estándares médicos actualmente aprobados como se conoce por alguien de experiencia ordinaria en la materia. El régimen terapéutico, la quimioterapia seguida por la inmunoterapia objetivo de nodo linfático, se repite opcionalmente varias veces para mejorar la eficacia del tumor. EJEMPLO 4: CEBADO DE PLÁSMIDO COMBINADO CON ESTRATEGIA DE REFUERZO DE PÉPTIDO Para valorar si el cebado de plásmido combinado con estrategia de refuerzo de péptido produce resultados similares a aquellos observados en los Ejemplos 1-3 de arriba, un quimioterapéutico se administra por una semana seguido por cebado de plásmido (pROC, pBPL, pSEM como se describe en cualquier parte en la presente) en varios días, por ejemplo, en los dias 8, 11, 22, y 25. La respuesta inmune se refuerza entonces con péptido ( PRAME425-433, PSMA288-297, NY-ESO Ii57-i65 SSX-24i- 9, Melan-A2e-35 · Tirosinasa36g-377 y análogos de los mismos, como se describe en cualquier parte en la presente) en los dias 36 y 40, por ejemplo. Una semana después del primer ciclo terapéutico, un segundo ciclo terapéutico se repite opcionalmente. EJEMPLO 5: CARGA DE PÉPTIDO EX VIVO DE ESTRATEGIA DCs Para valorar si la carga de péptido ex vivo de estrategia DCs produce resultados similares a aquellos observados en los Ejemplos 1-3 de arriba, la sangre periférica se aisla de sujetos para el cultivo de DCs, antes de quimioterapia. Un agente quimioterapéutico se administra y después DCs se cargan con péptido ( PRAME425-433 , PSMA288-297 / NY-ESO-li57-i65r SSX-24i-49 , Melan A26-35 , Tirosinasa3 69-377 y análogos de los mismos) se inyectan en el nodo linfático. Una semana después del primer procedimiento, puede repetirse un segundo procedimiento. EJEMPLO 6: ADMINISTRATION UTILIZANDO PLANTEAMIENTO DE ANTÍGENOS SOLOS CONTRA MÚLTIPLES EN COMBINACIÓN CON QUIMIOTERAPIA En otros estudios, las dosis metronómicas inmunomoduladoras de quimioterapia se proporcionan por todo el ciclo terapéutico de inmunoterapia para valorar el efecto en la regresión del tumor. En este estudio, se administra un agente quimioterapéutico el primer día de cada semana por todo el ciclo de inmunización con cebado de plásmido (pROC, pBPL, pSEM) que ocurre en los días 8, 11, 22, y 25, por ejemplo, y refuerzo de péptido ( PRAME425-433 / PSMA288-297, NY-ESO-I157-165 , SSX-24i- 4 9 , Melan 26-35 , Tirosinasa3 69-377 y análogos de los mismos) en los días 36 y 40, por ejemplo. Una semana después del primer ciclo terapéutico, puede repetirse un segundo ciclo terapéutico Los estudios se conducen además para valorar la eficacia de tumor cuando el agente quimioterapéutico se proporciona después del plásmido (cebador ) /péptido (refuerzo) . Esta estrategia es ventajosa en el caso de enfermedades voluminosas o metastáticas (tumores) en que el sujeto se inmuniza primero con plásmido en los días 1, 4, 15, 18 y se refuerza con péptido en los días 29 y 32. La inmunoterapia se sigue con quimioterapia después de una semana de descanso para eliminar las células reguladoras T, lo que da como resultado una reducción de la tolerancia de la célula T y separación del efector potencial del CTL especifico de tumor en el microambiente del tumor. EJEMPLO 7: PROTECCIÓN DE ENFERMEDAD DISEMINADA DESPUÉS DE LA PRUEBA DEL TUMOR HPV-16 INRAVENOSO Para evaluar la protección inmunológica de la enfermedad diseminada, los ratones C57BL/6 (n=10) se inyectan de manera intravenosa con 5xl05 células de tumor transformadas HPV-16 (C3.43) y después se inmunizan en los nodos linfáticos inguinales bilaterales con 12.5 g péptido HPV E749_57 y 12.5yg dsARN (polilC) como adyuvante por el nodo los días 1, 4, 15, y 18 después de la prueba del tumor. La respuesta inmune se mide por Tetrámero E749-57 el día 25 de la sangre periférica (Figura 8, Panel ?) y se calcula el por ciento de supervivencia para cada grupo (Figura 8, Panel B) y se compara con los ratones de control sin prueba del tumor sin tratar (n=10) . Los ratones inmunizados generaron respuestas inmunes especificas HPV-16 con un promedio de .5% y se protegen completamente del de la prueba IV de células tumorales HPV-16 fuera del día 65. Como se espera, los ratones no tratados desplegaron los niveles anteriores de coloración de Tetrámero E7 con solamente el 40% de los animales vivos el día 65. Se encuentra que la muerte en los animales no tratados se debe a micro-metástasis de tumor en los pulmones como se confirma por ultrasonido y necropsia postmortem. EJEMPLO 8: ADMINISTRACIÓN DEL NODO LINFÁTICO OBJETIVO DE ANTÍGENO MEJORA DE MANERA SIGNIFICATIVA LA EFICACIA ANTI-TUMOR DE INMÜNOTERAPIA DE CÁNCER HPV En un modelo terapéutico de HPV-16, se compara la eficacia anti-tumor de la dosificación intranodal con la convencional. Los ratones C57BL/6 se prueban subcutáneamente con 105 células tumorales HPV el día 0 y después se inmunizan con 2.5pg antigeno HPV E749_57 y 25pg dsARN (polilC) en nodos linfáticos inguinales bilaterales (n=19) o de manera subcutánea (n=19) en los días 7, 10, 21, y 24. La respuesta inmune se mide por coloración de tetrámero E749_57 el día 31 de sangre periférica (Figura 9, Panel B) y se calcula el tamaño del tumor para cada grupo (Figura 9, Panel A) y se compara con ratones control con prueba del tumor sin tratar (n=19) . Los ratones inmunizados en el nodo linfático generaron respuestas inmunes especificas HPV-16 estadísticamente significativas con un promedio de 14.5% en comparación con ratones subcutáneamente dosificados (p < 0.0001). Además, los tumores en ratones inmunizados en el nodo linfático comienzan la regresión el día 15 lo que da como resultado 84% de animales en remisión el día 40. Esta respuesta fue significativamente superior a animales dosificados de manera subcutánea (p < 0.003) cuyo desarrollo de tumor solamente se retrasa en comparación con solamente el 16% de animales que dan como resultado la remisión de la enfermedad. Los ratones control con tumor sin tratar dieron como resultado la remisión de la enfermedad. Los ratones control con tumor sin tratar desplegaron niveles antecedente de coloración de Tetrámero E7 (Panel B) y sus tumores progresaron de manera exponencial sin regresión como se esperaba (Panel A) . EJEMPLO 9: RATONES CON TUMORES REFRACTARIOS/EN DESARROLLO MOSTRARON NIVELES INCREMENTADOS DE CÉLULAS REGULADORAS T CD4+/CD25+/FoxP3HI Los ratones C57BL/6 que llevan tumores transformados HPV-16 desplegaron aproximadamente 3 veces números más altos de células reguladoras T CD4+/CD25+/FoxP3+ en el bazo en comparación con ratones sin tratamiento o ratones cuyos tumores completamente están en regresión (Figura 10) . El nivel de regs T puede reducirse en el bazo (Panel A y Panel B) o en el tumor (Panel C) mediante el tratamiento intraperitoneal con ciclofosfamida (100 mg/kg) proporcionando un pensamiento racional para combinar quimioterapia con inmunoterapia para el tratamiento de tumores en última etapa. EJEMPLO 10: TERAPIA ADYUVANTE MEJORO SIGNIFICATIVAMENTE LA EFICACIA ANTI-TUMOR Para probar la eficacia de la terapia adyuvante en cáncer en última etapa, los ratones C57BL/6 se inoculan con 105 células tumorales transformadas HPV-16 el día 0, tratan con CTX (30 mg/kg) el día 14 y 18 (n=20), inmunizan con péptido HPV E749_57 y dsARN (25µg/dia) en nodos linfáticos inguinales bilaterales el día 20, 24, 34, y 38 (n=20), o se tratan con una combinación de CTX e inmunoterapia (n=20) . El desarrollo del tumor (Figura 11, Panel A) y respuesta inmune (Figura 11, Panel B) fue en comparación con ratones control con tumor sin tratar (n=20). La respuesta inmune se mide por coloración de Tetrámero E749-5 el día 45 de sangre periférica y el grupo solamente inmunizado desplegó las respuestas inmunes especificas en el rango de 20% sin inhibición observada de respuesta inmune en animales tratados con la combinación de CTX e inmunoterapia lo que generó una respuesta similar. Además, la combinación de CTX e inmunoterapia (Panel A) indujo la regresión significativa del tumor (p < 0.001) en comparación con inmunoterapia y quimioterapia solas las cuales no inducen significativamente la regresión del tumor en comparación con controles de tumor sin tratar.

EJEMPLO 11: LA COMBINACION DE QUIMIOTERAPIA E INMUNOTERAPIA MEJORÓ SIGNIFICATIVAMENTE LA SUPERVIVENCIA El efecto de la terapia adyuvante en la supervivencia también se evalúa en ratones C57BL/6 inoculados con 105 células tumorales transformadas HPV-16 como se describe en el Ejemplo 10. Se administra un segundo ciclo terapéutico en el cual los animales recibieron CTX (30 mg/kg) el día 46 y 50 (n=20), inmunización con péptido HPV E749-57 y dsARN (25 pg/dia) en nodos linfáticos inguinales bilaterales el día 52, 56, 65, y 69 (n=20), o se tratan con una combinación de CTX e inmunoterapia (n=20) . Los estimados Kaplan-Meier (limite del producto) de la función de supervivencia se obtienen para cada una de las cuatro condiciones (Control, Solamente CTX, Solamente Inmunoterapia y CTX/Inmunoterapia Combinada) , como se muestra en la Figura 12. Las pruebas Log-Rank se utilizan para comparar las cuatro curvas de supervivencia. Se rechaza la hipótesis ómnibus de que las cuatro curvas son iguales (X2(3) = 18.2, p = 0.0004) . Las comparaciones separadas confirmaron que la supervivencia en el grupo CTX/Inmunoterapia Combinada fue significativamente más larga que la supervivencia en el grupo Control (p < 0.0001), el grupo Solamente CTX (p = 0.0188) y el grupo Solamente Inmunoterapia (p = 0.0033) . El tiempo de supervivencia medio en el grupo CTX/Inmunoterapia Combinada también fue significativamente más largo (80 días) en comparación con el grupo Control (52 días) , el grupo solamente CTX (68 días) y el grupo Solamente Inmunoterapia (54 días) . Por lo tanto, la combinación de CTX e inmunoterapia HPV mejoró de manera significativa el resultado de la enfermedad en el cáncer en última etapa en comparación con cualquier tratamiento solo. EJEMPLO 12: COMBINACIÓN DE QUIMIOTERAPIA E INMUNOTERAPIA SUBCUTÁNEA El experimento descrito en el Ejemplo 10 se repite con un brazo de dosificación de inmunoterapia subcutáneo adicional y la eficacia de tumor que resulta de inmunoterapia subcutánea contra intra-linfática se compara en un establecimiento de terapia de combinación con CTX. Los ratones C57BL/6 se inoculan con 105 células tumorales transformadas HPV-16 el día 0, tratan con CTX (30 mg/kg) el día 14 y 18 (n=20), inmunizan de manera subcutánea o en nodos linfáticos inguinales bilaterales con péptido HPV E749_57 y dsARN (25 pg/día) el día 20, 24, 34, y 38 (n=20 por grupo), o se tratan con una combinación de CTX e inmunoterapia intra-linfática o subcutánea (n=20 por grupo) . Ver Figura 13 para protocolo de terapia adyuvante. El desarrollo del tumor y respuesta inmune se comparan con los ratones control con tumor sin tratar (n=20) . Los resultados enfatizan un requerimiento de CTX seguido por inmunoterapia intra-linfática para producir regresión del tumor significativamente superior y un beneficio de supervivencia en comparación con la inmunoterapia subcutánea aún en combinación similar con CTX. EJEMPLO 13: EFICACIA ADYUVANTE: INMUNOTERAPIA ACTIVA MEJORA LA SUPERVIVENCIA LIBRE DE DESARROLLO Y TIEMPO PARA RECAER DESPUÉS DEL RETIRO PRIMARIO DEL TUMOR, MEDIANTE QUIMIOTERAPIA O CIRUGÍA Los ratones C57BL/6 se inoculan de manera subcutánea con 105 células tumorales transformadas HPV-16 el día 0, y se tratan con CTX (100 mg/kg) iniciando el día 14, cada dia hasta que alcanzan completa remisión (Figura 14) . Un cohorte separado se deja sin tratar y los tumores se remueven el dia 20 utilizando cirugía o se irradian utilizando radioterapia convencional. Entonces todos los animales se inmunizan con péptido HPV E749-57 y dsARN (25 yg/día) en nodos linfáticos inguinales bilaterales el día 24, 27, 37, y 40 (n=20) y después se observan por recaída del tumor. Los grupos control adicionales se tratan con CTX, radioterapia o cirugía pero no se inmunizan. En comparación con un cohorte control (sin tratar, que llevan tumor) que muestra 100% formación y desarrollo de tumor, todos los animales tratados con CTX, radioterapia o mediante cirugía logran completa remisión (sin enfermedad clínica). Sin embargo, sin seguimiento de inmunoterapia, estos animales recaen en un número significativo. En contraste, los animales que se tratan por inmunoterapia despliegan una velocidad disminuida de recaída en el sitio de tumor primario en un sitio remoto, durante el mismo intervalo y la supervivencia libre de enfermedad media aumenta. Las observaciones similares se hacen con un rango más amplio de quimioterapias además de CTX . EJEMPLO 14: EFICACIA NEOADYUVANTE : INMUNOTERAPIA ACTIVA MEJORA LA VELOCIDAD DE RESPUESTA Y MUESTRA BENEFICIO CLÍNICO CUANDO SE APLICA ANTES DEL TRATAMIENTO PRIMARIO DEL TUMOR, POR QUIMIOTERAPIA O CIRUGÍA Los ratones C57BL/6 se inoculan de manera subcutánea con 105 células tumorales transformadas HPV-16 el día 0 después se inmunizan con péptido HPV E749-57 y dsARN (25 g/día) en nodos linfáticos inguinales bilaterales el día 14, 17, 24, y 27 (n=20) . Después los ratones se tratan con CTX (100 mg/kg) iniciando el día 30 o por radioterapia, cada día hasta que los animales alcanzan completa remisión (Figura 15) . Un cohorte separado tiene el tumor removido el día 30 pero sin tratamiento con CTX. Los animales se observan entonces por recaída de tumor. En comparación con un cohorte control (que lleva tumor y sin tratar) que muestra 100% de formación y desarrollo de tumor, los animales no inmunizados tratados con CTX, por radioterapia o mediante cirugía logran remisión parcial o completa. Estos animales recaen en un número significativo. En contraste, los animales que se tratan por inmunoterapia antes de remover el volumen del tumor mediante cirugía, radioterapia o quimioterapia, despliegan una velocidad incrementada de remisión completa y parcial y una velocidad disminuida de recaída durante el mismo intervalo, en el mismo sitio o un sitio remoto, más una supervivencia libre de enfermedad media incrementada. Las observaciones similares se hacen con un rango más amplio de quimioterapias además de CTX. EJEMPLO 15: TERAPIA DE CONSOLIDACIÓN: INMUNOTERAPIA ACTIVA MEJORA LA SUPERVIVENCIA LIBRE DE DESARROLLO Y TIEMPO DE DESARROLLO DESPUÉS DE LA QUIMIOTERAPIA Los ratones C57BL/6 se inoculan de manera subcutánea con 105 células tumorales transformadas HPV-16 el día 0, y se tratan con CTX (100 o 30 mg/kg) los días 14 y 16 o se tratan por radioterapia (Figura 16) . Los animales descansan por 7 días hasta que el número de linfocitos en la sangre alcanza niveles normales. En ese punto, todos los animales muestran enfermedad reducida o remisión completa relativa a la etapa de pre-tratamiento. Después todos los animales se inmunizan con péptido HPV E749-57 y dsARN (25 g/día) en nodos linfáticos inguinales bilaterales el día 24, 27, 37, y 40 (n=20) y después se observan para reducción y recaída del tumor. Los grupos control adicionales se tratan con CTX o radioterapia pero no se inmunizan. En comparación con un cohorte control (sin tratar, que lleva tumor) que muestra 100% de formación y desarrollo de tumor, todos los animales tratados con CTX o por radioterapia logran remisión parcial o remisión completa dentro de 10 días después de tratamiento. Los ratones inmunizados muestran un tiempo incrementado al desarrollo, supervivencia libre de desarrollo (si están en remisión parcial) y tiempo incrementado para recaída (si están en remisión completa) en comparación con animales que no se inmunizan. Las observaciones similares se hacen con un rango más amplio de quimioterapias además de CTX. EJEMPLO 16: TERAPIA ADYUVANTE: INMUNOTERAPIA ACTIVA MEJORA LA VELOCIDAD DE RESPUESTA CUANDO ACOMPAÑA LA CIRUGÍA O QUIMIOTERAPIA Los ratones C57BL/6 se inoculan de manera subcutánea con 105 células tumorales transformadas HPV-16 el día 0, y se tratan con CTX (100 o 30 mg/kg) los días 14 y 16 o se tratan por radioterapia. Los animales se inmunizan entonces con péptido HPV E749_57 y dsARN (25 pg/día) en nodos linfáticos inguinales bilaterales el día 18, 21, 28, y 31 (n=20) y después se observan por reducción de tumor (Figura 17) . Los grupos control adicionales se tratan con CTX pero no se inmunizan. En comparación con un cohorte control (sin tratar, que llevan tumor) que muestra 100% de formación y desarrollo de tumor, todos los animales tratados con CTX logran remisión parcial o remisión completa dentro de 20 días después del tratamiento CTX. Los ratones inmunizados junto con tratamiento CTX muestran una velocidad de respuesta incrementada (traducida en respuesta completa o parcial) relativa a aquellos que se tratan con CTX o solamente se inmunizan. Las observaciones similares se hacen con un rango más amplio de quimioterapias además de CTX. Cualquiera de los métodos descritos en los ejemplos y en cualquier parte en la presente pueden ser y se modifican para incluir composiciones diferentes, antigenos, epitopos, análogos, etc. Por ejemplo, cualquier otro antigeno cancerígeno puede utilizarse. También, muchos epitopos pueden intercambiarse, y pueden utilizarse los análogos de epítopo, incluyendo aquellos descritos, explicados, o incorporados en la presente por referencia. Los métodos pueden utilizarse para generar respuestas inmunes, incluyendo respuestas inmunes multivalentes contra varias enfermedades o trastornos . Se han descrito muchas variaciones y elementos alternativos de la invención. Aún las variaciones adicionales y elementos alternos serán aparentes para un experto en la materia. Varias modalidades de la invención pueden incluir de manera específica o excluir cualquiera de esta variación o elementos.

Claims

REIVINDICACIONES 1. Un método de inmunización (o tratamiento de cáncer) que comprende en combinación: poner en contacto un tumor en un paciente con un agente quimioterapéutico, en donde el agente quimioterapéutico logra al menos uno de promover la inflamación tumoral e interferir con la función de la célula reguladora T; inducir una respuesta CTL especifica para un primer antigeno, en donde la inducción comprende las subetapas de: suministrar al paciente una primera composición que comprende un inmunógeno, comprendiendo o codificando el inmunógeno al menos una porción de dicho primer antigeno, y comprendindo además un inmunopotenciador ; y administrar una segunda composición, que comprende un péptido de amplificación, directamente al sistema linfático del paciente, en donde el péptido corresponde a un epitopo de dicho primer antigeno, en donde el contacto e inducción dan como resultado la efectividad mejorada del tratamiento más allá de la efectividad de cualquiera de la etapa de contacto o la etapa de inducción sola .
2. El método de la reivindicación 1, en donde la primera composición y la segunda composición no son la misma.
3. El método de la reivindicación 1, en donde la primera composición comprende un ácido nucléico que codifica el antigeno o un fragmento inmunogénico del mismo.
4. El método de la reivindicación 1, en donde la primera composición comprende un ácido nucléico capaz de expresar el antigeno o un fragmento inmunogénico del mismo en un pAPC.
5. El método de la reivindicación 1, en donde la primera composición comprende un polipéptido inmunogénico y un inmunopotenciador .
6. El método de la reivindicación 5, en donde el polipéptido inmunogénico es dicho péptido de amplificación .
7. El método de la reivindicación 5, en donde el polipéptido inmunogénico es dicho primer antigeno
8. El método de la reivindicación 1, en donde el inmunopotenciador es una citoquina .
9. El método de la reivindicación 1, en donde el inmunopotenciador es un ligando receptor tipo peaje.
10. El método de la reivindicación 1, en donde la segunda composición comprende además un adyuvante
11. El método de la reivindicación 1, en donde la segunda composición se encuentra libre de adyuvante y libre de inmunopotenciador.
12. El método de la reivindicación 1, en donde dicha subetapa de suministro comprende la administración en más de un sitio.
13. El método de la reivindicación 1, en donde dicha subetapa de suministro comprende la administración directa al sistema linfático del paciente.
14. El método de la reivindicación 1 u 11, en donde la administración directa al sistema linfático del paciente comprende la administración directa a un nodo linfático o vaso linfático.
15. El método de la reivindicación 12, en donde la administración directa es a dos o más nodos linfáticos o vasos linfáticos.
16. El método de la reivindicación 12, en donde el nodo linfático se selecciona del grupo que consiste de nodos linfáticos inguinales, axilares, cervicales y tonsilares.
17. El método de la reivindicación 1, en donde la respuesta CTL es especifica para dicho primer antigeno.
18. El método de la reivindicación 1, en donde el epitopo es un epitopo de matenimiento.
19. El método de la reivindicación 1, en donde las composiciones, primera y segunda, comprenden además un portador adecuado para la administración directa al sistema linfático o un nodo linfático.
20. El método de la reivindicación 1, en donde el epitopo es un epitopo inmune.
21. El método de la reivindicación 1, en donde la subetapa de suministro o la subetapa de administración comprende una inyección de bolo única.
22. El método de la reivindicación 1, en donde la subetapa de suministro o la subetapa de administración comprende inyecciones de bolo repetidas.
23. El método de la reivindicación 1, en donde la subetapa de suministro o la subetapa de administración comprende una infusión continúa.
24. El método de la reivindicación 1, en donde el agente quimioterapéutico subregula o disminuye la actividad de la célula reguladora T promoviendo o mejorando asi la actividad de la célula T efectora dentro de un tumor o célula cancerígena .
25. El método de la reivindicación 1, en donde la interferencia con la función de la célula reguladora T comprende una reducción en el número de células reguladoras T.
26. El método de la reivindicación 25, en donde la reducción en número de células reguladoras T se mide utilizado citometria de flujo.
27. El método de la reivindicación 25, en donde la reducción en número de células reguladoras T se mide utilizado un marcador seleccionado del grupo que consiste de CD4+, CD25+, y FoxP3H1.
28. El método de la reivindicación 1, en donde la interferencia con la función de la célula reguladora T comprende deteriorar la actividad de las células reguladoras T.
29. El método de la reivindicación 28, en donde la actividad de las células reguladoras T se mide al aislar células reguladoras T del paciente, incubar las células aisladas con células efectoras en un ensayo estándar de la función de la célula efectora, y medir la actividad de la célula efectora.
30. El método de la reivindicación 29, en donde el ensayo estándar de la función de la célula efectora se selecciona del grupo que consiste de: un ensayo CTL, un ensayo elispot, y un ensayo de proliferación.
31. El método de la reivindicación 1, en donde el agente quimioterapéutico se selecciona del grupo que consiste de ciclofosfamida, gemcitabina, fludarabina y doxorubicina .
32. El método de la reivindicación 1, en donde el agente quimioterapéutico es ciclofosfamida .
33. El método de la reivindicación 1 en donde la etapa de contacto se realiza a la observación del aumento de la función de la célula reguladora T, o la inducción de la proliferación de celular anormal, o crecimiento del tumor.
34. El método de la reivindicación 1, en donde las etapas de contacto e inducción se repiten en dos o más ciclos.
35. El método de la reivindicación 34, en donde las etapas de contacto e inducción se repiten hasta que se logra una reducción en actividad de la célula reguladora T o una regresión de la proliferación celular anormal o crecimiento del tumor.
36. El método de la reivindicación 1, en donde la etapa de contacto precede la etapa de inducción.
37. El método de la reivindicación 1, en donde la etapa de contacto se repite antes de la etapa de inducción.
38. El método de la reivindicación 1, en donde la etapa de contacto se completa aproximadamente una semana antes de la etapa de inducción.
39. El método de la reivindicación 1, en donde la etapa de contacto se completa 6, 7, 8, o 9 días antes de la etapa de inducción.
40. El método de la reivindicación 1, en donde la etapa de contacto se repite antes de la subetapa de administración de la etapa de inducción.
41. El método de la reivindicación 1, en donde la subetapa de suministro y la subetapa de administración se llevan a cabo en diferentes días.
42. El método de la reivindicación 1, en donde la subetapa de suministro y la subetapa de administración se llevan a cabo al menos aproximadamente 2, 3, 4, 5, 6, o 7 días por separado.
43. El método de la reivindicación 1, en donde la subetapa de suministro de la etapa de inducción ocurre después de la etapa de contacto.
44. El método de la reivindicación 1, en donde la subetapa de suministro incluye administrar uno o más péptidos correspondientes a un epitopo del antigeno antes o después de administrar un agente quimioterapéutico .
45. El método de la reivindicación 1, que comprende además administrar al menos un modo de tratamiento seleccionado del grupo de terapia de radiación, terapia genética, bioquimioterapia, y cirugía.
46. El método de la reivindicación 45, en donde el al menos un modo de tratamiento se proporciona antes de o durante la etapa de contacto.
47. El método de la reivindicación 45, en donde el al menos un modo de tratamiento se proporciona antes de la administración de las etapas de contacto e inducción.
48. El uso de un agente quimioterapéutico y un medicamento de combinación que induce CTL en la elaboración de un medicamento de combinación inmunizante, en donde el agente quimioterapéutico logra al menos uno de promover la inflamación tumoral e interferir con la función de la célula reguladora T; y en donde el medicamento de combinación CTL comprende una primera composición para suministrar a un paciente, dicha primera composición que comprende un inmunógeno, comprendiendo o codificando el inmunógeno al menos una porción de un primer antigeno o un fragmento inmunogénico del mismo; y una segunda composición para administrarse directamente al sistema linfático del paciente, comprendiendo dicha segunda composición un péptido, en donde el péptido corresponde a un epitopo de dicho primer antigeno; y en donde la combinación da como resultado la efectividad mejorada del tratamiento más allá de la efectividad de cualquiera del agente quimioterapéutico o el medicamento de combinación que induce CTL solo.