MX2008014418A

MX2008014418A - Administracion pulmonar de la 1 alfa, 25-dihidroxivitamina d3 y co-administracion de la homona paratiroidea o calcitonina.

Info

Publication number: MX2008014418A
Application number: MX2008014418A
Authority: MX
Inventors: Margaret Clagett-Dame; Hector F Deluca; Lora A Plum; Moises A Rivera-Bermudez
Original assignee: Wisconsin Alumni Res Found
Priority date: 2006-05-15
Filing date: 2007-05-15
Publication date: 2008-11-27
Also published as: EP2020989A2; WO2007133747A3; WO2007133747A2; US20080031957A1; CA2651283A1; JP2009537530A; AU2007249736A1

Abstract

Se describen las composiciones farmacéuticas pulmonares, los métodos de distribución a los pulmones de un humano, y los métodos de tratamiento de los mismos. También se describen las Formulaciones farmacéuticas que incluyen la 1a,25-dihidroxivitamin a D3, un alcohol tal como etanol, y un poliol tal como propilenglicol. Otra Formulación farmacéutica pulmonar incluye la 1a,25-dihidroxivitamina D3 y polvo seco a granel, el cual es utilizado en un inhalador de polvo seco. Otra Formulación farmacéutica incluye 1a,25-dihidroxivitamina D3 y un propelente en aerosol, el cual es utilizado en un inhalador de dosis medida. Las Formulaciones pulmonares farmacéuticas pueden incluir un segundo ingrediente farmacéutico activo tal como la calcitonina o un fragmento peptídico N-terminal de la hormona paratiroidea que consiste de los primeros (34) a (38) aminoácidos de la SEQ ID No.: 1. La distribución pulmonar de las formulaciones incrementa de manera eficaz los niveles de calcio en suero en mamíferos, maneja la hipocalcemia, trata el trastorno metabólico del calcio y reduce los niveles elevados de hormona paratiroidea.

Description

ADMINISTRACION PULMONAR DE LA 1 ALFA, 25-DIHIDROXIVITAMINA D3 Y CO-ADMINISTRACION DE LA HORMONA PARATIROIDEA O CALCITONINA CAMPO DE LA INVENCION La presente invención se refiere al campo de las composiciones y métodos para la distribución pulmonar de la la, 25-dihidroxivitamina D3 (la cual es también denominada como 3H-1 , 25 (OH) 2D3 ) y la co-administración de una hormona paratiroidea o la calcitonina.

ANTECEDENTES DE LA INVENCION Los metabolitos ?a-hidroxilados de la vitamina D son reguladores altamente potentes de la homeostasis de calcio en mamíferos, tales como humanos. Se ha reportado también que algunos de estos metabolitos tienen actividad en términos de la diferenciación celular, Ostrem et al., Proc .

Nati. Acad. Sci . Estados Unidos, 84, 2610 (1987). Los ejemplos de tales metabolitos incluyen la la, 25-dihidroxivitamina D3 la cual es la hormona natural y la la, 25-dihidroxivitamina D2 la cual es el análogo en la serie del ergosterol. Los análogos estructurales de estos metabolitos incluyen compuestos que tienen cadenas laterales diferentes, diferentes patrones de hidroxilación, diferente estereoquímica, u otras diferencias adecuadas. Otros análogos incluyen la ?a-hidroxivitamina D3, la- REF. : 197651 hidroxivitamina D2, derivados de cadena lateral fluorada de la la, 25-dihidroxivitamina D3, y análogos de cadena lateral homologada. Tales compuestos muestran una actividad altamente potente in vivo e in vitro. Tales compuestos también poseen perfiles ventajosos de actividad terapéutica que tiene uso en el tratamiento de una variedad de enfermedades que incluye la osteodistrofia renal, raquitismo resistente a la vitamina D, osteoporosis , psoriasis y otras malignidades . Los derivados terapéuticos de la vitamina D son convencionalmente distribuidos en formas de dosis oral e inyectables. No obstante, las formas de dosis oral pueden ser indeseables en donde un paciente tiene una condición de perturbación gastrointestinal tal como la enfermedad de Crohn, enfermedad inflamatoria del intestino, diarrea u otra enfermedad o condición gastrointestinal . Tales condiciones GI pueden reducir la adsorción del fármaco e impedir el efecto terapéutico. Algunos pacientes pueden también tener aversión a las formas de dosis oral y/o prefieren otras formas de dosis o dispositivos médicos. Las formas de dosis oral pueden ser también indeseables para administrar la la, 25-dihidroxivitamina D3 debido a que el compuesto activa el calcio intestinal y la absorción del fósforo mientras que es absorbido en el intestino. El compuesto la, 25-dihidroxivitamina D3 es también susceptible de ser degradado de las enzimas CYP-24 presentes en el intestino. De manera interesante, el metabolismo de la la, 25-dihidroxivitamina D3 induces las enzimas CYP- 24 . Las enzimas CYP-24 degradan la la, 25 -dihidroxivitamina D3 a un ácido carboxílico de 23 átomos de carbono (también denominado como el ácido calcitroico) . Además, las formas de dosis transdérmicas pueden no ser muy bien adecuadas para la administración de análogos de vitamina D debido a que, entre otras razones, la piel humana es insuficientemente permeable para permitir la dosificación terapéutica. De este modo, existe una necesidad para una forma de dosis farmacéutica efectiva para la distribución de análogos de vitamina D, (tales como la la, 25 -dihidroxivitamina D3) a pacientes humanos en necesidad de los mismos. Existe también una necesidad para una forma de dosis farmacéutica efectiva que combine los análogos de vitamina D (tales como la la, 25-dihidroxivitamina D3) con otros ingredientes farmacéuticos activos para mejorar y expandir las terapias disponibles, y las indicaciones para pacientes humanos en necesidad de las mismas .

BREVE DESCRIPCION DE LA INVENCION Un aspecto de la invención es un método para incrementar el calcio en suero en un humano, que comprende los pasos o actos de distribuir una dosis atomizada de una solución farmacéutica que comprende agua, uno o más alcoholes, uno o más polioles y, un primer ingrediente farmacéutico activo que comprende la, 25-dihidroxivitamina D3, o los ésteres o solutos del mismo a los pulmones del humano. En una modalidad ejemplar del método, el alcohol es etanol . En otra modalidad ejemplar del método, el poliol es propilenglicol . En otra modalidad ejemplar del método, la solución farmacéutica comprende además uno o más excipientes. En otra modalidad ejemplar del método, el excipiente es un surfactante no iónico, cloruro de sodio, ascorbato de sodio, fosfato dibásico de sodio, fosfato monobásico de sodio, edeteato disódico o combinaciones de los mismos. En otra modalidad ejemplar del método, la dosis atomizada de la solución farmacéutica comprende una dosis del primer ingrediente farmacéutico activo que es la, 25-dihidroxivitamina D3 o los ésteres o solutos del mismo en el intervalo de 0.2-10 yg. El régimen de dosificación para un humano está en el intervalo de 0.2-10 yg por día, y más preferentemente 0.2-2 µg por día. El número de dosis administradas cada día y la cantidad de la, 25-dihidroxivitamina D3 o los ésteres o solutos del mismo en cada dosis pueden ser variados para lograr el régimen de dosificación diaria. En otra modalidad ejemplar del método, la solución comprende además un segundo ingrediente farmacéutico activo que es la calcitonina o el fragmento peptídico N-terminal de la hormona paratiroidea que consiste de los primeros 34 a 38 aminoácidos de la SEQ ID No. : 1. Como se utiliza en la presente, "la calcitonina" se refiere a la calcitonina sintética, a péptidos similares a la calcitonina o miméticos de calcitonina, que se describe con detalle en las Solicitudes de Patente de los Estados Unidos Nos. de Serie 10/235,244 presentada el 5 de Septiembre del 2002, y 11/352,717 presentada el 13 de Febrero del 2006, las cuales son incorporadas por referencia en la presente en su totalidad. En otra modalidad ejemplar del método, la dosis atomizada de la solución farmacéutica comprende una dosis en el intervalo de 100-2000 pg del segundo ingrediente farmacéutico activo, que es el fragmento peptídico N-terminal de la hormona paratiroidea que consiste de los primeros 34 a 38 aminoácidos de la SEQ ID No.: 1. En otra modalidad ejemplar del método, la dosis atomizada de la solución farmacéutica comprende una dosis en el intervalo de 100-1000 g del segundo ingrediente farmacéutico activo que es la calcitonina. Otro aspecto más de la invención es una composición pulmonar farmacéutica que comprende agua, uno o más alcoholes, uno o más polioles, y, un primer ingrediente farmacéutico activo que comprende la, 25-dihidroxivitamina D3 o los ésteres o solutos del mismo. En una modalidad ejemplar de la composición, el alcohol es etanol . En otra modalidad ejemplar de la composición, el poliol es propilenglicol . En otra modalidad ejemplar de la composición, la composición comprende además uno o más excipientes. En otra modalidad ejemplar de la composición, el excipiente es un surfactante no iónico, cloruro de sodio, ascorbato de sodio, fosfato dibásico de sodio, fosfato monobásico de sodio, edeteato disódico o combinaciones de los mismos. En otra modalidad ejemplar de la composición, la composición comprende además una dosis del primer ingrediente farmacéutico activo que es la la, 25-dihidroxivitamina D3 o los ésteres o solutos del mismo en el intervalo de 0.2-10 pg, y más preferentemente en el intervalo de 0.2-2 g. En otra modalidad ejemplar de la composición, la composición comprende además un segundo ingrediente farmacéutico activo que es la calcitonina o un fragmento peptídico N-terminal de la hormona paratiroidea de los primeros 34 a 38 aminoácidos de la SEQ ID No . : 1.

En otra modalidad ejemplar de la composición, la composición comprende una dosis del segundo ingrediente farmacéutico activo que es el fragmento peptidico N-terminal de la hormona paratiroidea que consiste de los primeros 34 a 38 aminoácidos de la SEQ ID No . : 1 en el intervalo de 100-2000 g/dosis . En otra modalidad ejemplar de la composición, la composición comprende una dosis del segundo ingrediente farmacéutico activo que es la calcitonina en el intervalo de 100-1000 pg/dosis. Otro aspecto más de la invención es un método para incrementar el calcio en suero en un humano, que comprende los pasos o actos de distribuir una dosis farmacéutica de un primer ingrediente farmacéutico activo que comprende la la, 25-dihidroxivitamina D3, o los ásteres o solutos del mismo a los pulmones del humano. Otro aspecto más de la invención es un método para manejar la hipocalcemia en un humano que sufre de hemodiálisis crónica, que comprende los pasos o actos de distribuir una dosis farmacéutica de un primer ingrediente farmacéutico activo que comprende la, 25-dihidroxivitamina D3, o los ésteres o solutos del mismo a los pulmones del humano. Otro aspecto más de la invención es un método de tratamiento de un trastorno metabólico del calcio en un humano, que comprende los pasos o actos de distribuir una dosis farmacéutica de un primer ingrediente farmacéutico activo que comprende la, 25-dihidroxivitamina D3, o los ésteres o solutos del mismo a los pulmones del humano. Otro aspecto más de la invención es un método para reducir los niveles elevados de hormona paratiroidea en un humano, que comprende los pasos o actos de distribuir una dosis farmacéutica de un primer ingrediente farmacéutico activo que comprende la, 25-dihidroxivitamina D3, o los ésteres o solutos del mismo a los pulmones del humano. En una modalidad ejemplar de cualquiera de los métodos anteriores, el método comprende además el paso o acto de co-distribuir una dosis farmacéutica de un segundo ingrediente farmacéutico activo seleccionado del grupo que consiste de calcitonina y un fragmento peptídico N-terminal de la hormona paratiroidea que consiste de los primeros 34 a 38 aminoácidos de la SEQ ID No. : 1. En otra modalidad ejemplar de cualquiera de los métodos anteriores, el método comprende la distribución de una dosis en el intervalo de 100-2000 µg del segundo ingrediente farmacéutico activo que es el fragmento peptídico N-terminal de la hormona paratiroidea, que consiste de los primeros.34 a 38 aminoácidos de la SEQ ID No. : 1. En otra modalidad ejemplar de cualquiera de los métodos anteriores, el método comprende la distribución de una dosis en el intervalo de 100-1000 µg del segundo ingrediente farmacéutico activo que es la calcitonina. En otra modalidad ejemplar de cualquiera de los métodos anteriores, el método comprende la distribución de una dosis del primer ingrediente farmacéutico activo que es la, 25-di idroxivitamina D3 o los ésteres o solutos del mismo en el intervalo de 0.2-10 vg, y más preferentemente en el intervalo de 0.2-2 µg . Otro aspecto más de la invención es un método para incrementar el calcio en suero en un humano que comprende los pasos o actos de la distribución de una dosis de una composición farmacéutica de polvo seco que comprende el polvo seco a granel y un primer ingrediente farmacéutico activo que comprende la, 25-dihidroxivitamina D3, o los ésteres o solutos del mismo a los pulmones del humano. Otro aspecto más de la invención es una composición pulmonar farmacéutica que comprende un polvo seco a granel y, un primer ingrediente farmacéutico activo que comprende la, 25-dihidroxivitamina D3, o los ésteres o solutos del mismo. Otro aspecto más de la invención es un método para incrementar el calcio en suero en un humano, que comprende los pasos o actos de la distribución de una dosis de una composición farmacéutica en aerosol que comprende un propelente y un primer ingrediente farmacéutico activo, que incluye la, 25-dihidroxivitamina D3, o los ésteres o solutos del mismo a los pulmones del humano.

Otro aspecto más de la invención es una composición pulmonar farmacéutica que comprende un propelente en aerosol, y un primer ingrediente farmacéutico activo que comprende la, 25-dihidroxivitamina D3, o los ásteres o solutos del mismo. En una modalidad ejemplar de la composición pulmonar farmacéutica, la composición comprende además un surfactante . Otro aspecto más de la invención es un inhalador de polvo seco que contiene la composición pulmonar farmacéutica que comprende un polvo seco a granel y un primer ingrediente farmacéutico activo que comprende la, 25-dihidroxivitamina D3, o los ésteres o solutos del mismo. Otro aspecto más de la invención es un inhalador de dosis medida que contiene la composición pulmonar farmacéutica que comprende un propelente y un primer ingrediente farmacéutico activo que incluye la, 25-dihidroxivitamina D3, o los ésteres o solutos del mismo a los pulmones del humano .

BREVE DESCRIPCION DE LAS FIGURAS La Figura 1 muestra la distribución tisular de la la, 25-dihidroxivitamina D3 en ratas Sprague Dawley después de 10 minutos (n = 4) y 4 horas (n = 3) después de la distribución pulmonar de la la, 25-dihidroxivitamina D3 de acuerdo con la administración de 100 µ? de la Formulación A, con lo cual los datos muestran que a los 10 minutos la la, 25 -dihidroxivitamina D3 fue detectada principalmente en los pulmones, en la traquea y en suero, y que a las 4 horas la la, 25-dihidroxivitamina D3 fue detectada principalmente en el suero y en el estómago. La Figura 2 muestra la distribución tisular de la la, 25-dihidroxivitamina D3 en ratas Sprague Dawley después de 10 minutos (n = 4 ) y 4 horas (n = 3 ) después de la distribución pulmonar de la la, 25-dihidroxivitamina D3 de acuerdo con la administración de 100 µ? de la Formulación A, con lo cual los datos muestran que a los 10 minutos la la, 25 -dihidroxivitamina D3 fue detectada principalmente en el suero y en segundo lugar en la traquea y en los pulmones, y que a las 4 horas la la, 25-dihidroxivitamina D3 fue detectada principalmente en el suero y en el estómago. La Figura 3 muestra el efecto de la la, 25 -dihidroxivitamina D3 sobre los niveles de calcio en suero en ratas Brown Norway de acuerdo con la administración de la Formulación A (n = 6 ) en una dosis que contiene 1 µg/KgBw la, 25-dihidroxivitamina D3 (n = 8 ) , en donde BW es el peso corporal (o, kgBw) . La Figura 4 muestra el efecto de la la, 25 -dihidroxivitamina D3 sobre los niveles de calcio en suero en ratas Brown Norway de acuerdo con la administración de la Formulación A (n = 9 ) en una dosis que contiene 10 pg/KgBW la, 25-dihidroxivitamina D3 (n = 9), DESCRIPCION DETALLADA DE LA INVENCION La invención se refiere a las composiciones pulmonares farmacéuticas, a los métodos de distribución a los pulmones de un humano y los métodos de tratamiento del mismo. Las formulaciones farmacéuticas que incluyen un primer API que es la la, 25-dihidroxivitamina D3 o un éster o la sal de la misma, un alcohol tal como etanol, y un poliol tal como propilenglicol . Otra formulación pulmonar farmacéutica incluye la la, 25-dihidroxivitamina D3 y el polvo seco a granel, el cual es utilizado en un inhalador de polvo seco. Otra formulación farmacéutica incluye la la, 25-dihidroxivitamina D3 y un propelente en aerosol, el cual es utilizado en un inhalador de dosis medida. Las formulaciones pulmonares farmacéuticas pueden incluir un segundo API tal como la calcitonina o un fragmento peptídico N-terminal de la hormona paratiroidea, que consiste de los primeros 34 a 38 aminoácidos de la SEQ ID No. : 1. La distribución pulmonar de las formulaciones incrementa eficazmente los niveles de calcio en suero en mamíferos, maneja la hipocalcemia, trata el trastorno metabólico del calcio y reduce los niveles elevados de hormona paratiroidea. La distribución pulmonar es también denominada como la ruta de administración. Como se utiliza en la presente, el término "farmacéutico (a) " se refiere a las composiciones, formulaciones, soluciones, métodos, etc., que son adecuados y aceptables para el uso farmacéutico, con lo cual todos los componentes (tales como excipientes, solventes, aditivos, surfactantes , polvos, y similares) son preferentemente materiales grado USP (Farmacopea de los Estados Unidos) y con lo cual el API (o los APls) están presentes en una cantidad suficiente para impartir un efecto terapéutico, tratamiento (profiláctico, tratamiento de una condición o similar) y/o el beneficio para el ser humano. Como se utiliza en la presente, la frase "sistema pulmonar" incluye el tracto respiratorio superior, el tracto respiratorio inferior, la traquea, el árbol bronquial y los pulmones, que son comúnmente entendidos. Como se utiliza en la presente, "pulmones" incluyen el área bronquial, los bronquiolos respiratorios, los conductos alveolares, y alvéolos. La distribución pulmonar sistémica de la la, 25-dihidroxivitamina D3 es ventajosa por varias razones. La distribución pulmonar sistémica distribuye ventajosamente el fármaco directamente a la. sangre del paciente, la cual hace circular el fármaco a todo lo largo del cuerpo, evitando la degradación o inactivación del estómago/intestino y/o el tracto gastrointestinal. La distribución pulmonar también evita el metabolismo del primer paso en órganos tales como el hígado y el riñon. La distribución pulmonar también distribuye el fármaco al paciente más rápido que las formas de dosis oral. El calcitriol es bien conocido en la técnica como un compuesto que estimula el transporte de calcio intestinal. (Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 21st Ed., p. 1698 (2006)). Se sabe que el calcitriol es eficaz para el manejo de la hipocalcemia en pacientes que sufren de hemodiálisis crónica, para el tratamiento del trastorno metabólico del calcio, y para reducir los niveles elevados de hormona paratiroidea . La presente composición pulmonar farmacéuticA puede incluir además un segundo ingrediente farmacéutico activo ("API") que va a ser co-administrado con la la, 25-dihidroxivitamina D3. El o los segundos API ' s adecuados incluyen calcitonina y la hormona paratiroidea (por ejemplo, hPTH) . La calcitonina (también denominada como calcimar y miacalcina) es una hormona polipeptídica de 32 aminoácidos secretada por las células parafoliculares de la glándula tiroides en mamíferos. La fórmula química para la calcitonina es C145H2 0O48S2 y tiene un peso molecular de 3431.88. La SEQ . ID. para la calcitonina y una descripción de la misma es descrita en Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 21st Ed. , p. 1456-1457 (2006), la cual se incorpora por referencia en la presente.

Se sabe que la calcitonina participa en el metabolismo del calcio y del fósforo. En particular, se sabe que la calcitonina disminuye los niveles de calcio en la sangre al menos en parte por los efectos sobre dos órganos objetivo bien estudiados. En el hueso, la calcitonina suprime la resorción del hueso al inhibir la actividad de los osteoclastos que liberan calcio y fósforo hacia la sangre. En el riñon, evita que el calcio y el fósforo se pierdan en la orina por la reabsorción en los túbulos renales . La calcitonina inhibe la re-absorción de los iones de calcio y fósforo conduciendo a velocidades incrementadas de pérdida en la orina. Se sabe que la calcitonina es eficaz en el tratamiento de hipercalcemia y la enfermedad de Pager. Se sabe también que la calcitonina es un auxiliar valioso en el manejo de algunas formas de osteoporosis . La hormona paratiroidea humana ("hPTH") es una cadena polipeptídica lineal que tiene 84 aminoácidos. Cuando funciona adecuadamente, se sabe que hPTH mantiene los iones calcio extracelular a una concentración constante en el cuerpo humano. (Ver Remington en la página 558) . Se sabe que los aminoácidos 1 al 27 de la porción N-terminal del péptido están asociados con la actividad biológica en el cuerpo humano. A un tiempo, las inyecciones de hPTH eran utilizadas extensamente en humanos para elevar los niveles plasmáticos de calcio en pacientes hipocalcémicos . No obstante, la inyección de hPTH ya no está disponible para el uso clínico y ha sido reemplazada por la administración de calcio o vitamina D. La hPTH está también involucrada en la regulación de la homeostasis del fósforo. La PTH está también involucrada en el control y regulación del crecimiento óseo y la densidad ósea. Algunos fragmentos N-terminales de hPTH tienen la misma o una actividad biológica similar como la proteína intacta, completa. En particular, los segmentos N-terminales de hPTH que comprenden los aminoácidos 1-34 ("hPTH34") y 1-38 (whPTH38") son preferidos. La hPTH-(l-84) nativa, que contiene los aminoácidos 1-84, puede también ser co-administrada como un segundo API. hPTH(l-84) es un agente terapéutico conocido para el tratamiento de la osteoporosis postmenopaúsica . La hPTH(l-84) puede ser el compuesto ALXl-11 que está siendo probado por NPS, Allelix Biopharmaceuticals (Ontario, Canadá) y GlaxoSmithKline . La producción y distribución de hPTH es conocida en la técnica. (Ver, Morley P, et al, Parathyroid Hormone: An Anabolic Treatment for Osteoporosis, Current Pharmaceutical Design, 2001, Vol . 7, No. 8, p. 671-687, la cual se incorpora por referencia en la presente) . Otras diversas formas de hPTH(l-84) y los niveles de dosificación terapéutica de las mismas se describen en la Patente de los Estados Unidos No. 5,496,801, la cual se incorpora por referencia en la presente en su totalidad. La secuencia de aminoácidos para hPTH(l-84) es reportada en Kimura et al, Biochem Biophys Res Comm, 114 (2) : 493, la cual también es incorporada en la presente en sus totalidad, por referencia. Los polipéptidos recombinantemente producidos que tienen la misma secuencia de hPTH pueden ser también utilizados. Los fragmentos de hPTH que tienen extensiones de aminoácidos carboxilo más allá de la posición 34, pueden ser también utilizados. Las extensiones amino-terminales de una sustitución de a-carboxil-amida en el extremo carboxilo, pueden ser también empleadas. Las sales y ásteres terapéuticamente adecuados del fragmento PTH pueden ser también utilizados. hPTH34 y hPTH38 cada uno tienen la secuencia de aminoácidos [SEQ. ID No. : 1] mostrada en la Tabla 1.

TABLA 1 1 5 H.sub.2 N-Ser-Val-Ser-Glu-lle-GLn-Leu-Met-His- 10 15 Asn-Leu-Gly-Lys-His-Leu-Asn-Ser-Met-Glu- 20 25 Arg-Val-Glu-Trp-Leu-Arg-Lys-Lys-Leu-Gln- 30 35 Asp-Val-His-Asn-Phe-Val-Ala-Leu-Gly-COOH Los fragmentos hPTH3 y hPTH38 son comercialmente disponibles de Península Laboratories, Inc., Belmont, CA; Sigma Chemical, St. Louis, MO; y, Bachem California, Torrance, CA. Los fragmentos de PTH pueden también ser producidos recombinantemente por la expresión en células cultivadas de moléculas de AND recombinante que codifican para el fragmento deseado de la molécula de PTH. Los sistemas de expresión recombinantes adecuados y los métodos son descritos en la literatura. (Ver, Manniatis, Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor, NY 1982). La hPTH34 puede ser también la rhPTH-(l-34) recombinante de Eli Lilly (también denominada como FORTEOMR o Teriparatide) . Las moléculas de ADN que son expresadas por si mismas pueden ser sintéticas o derivadas de una fuente natural. Los polinucleótidos sintéticos pueden ser sintetizados mediante técnicas bien conocidas. Por ejemplo, los fragmentos de ADN de una sola hebra pueden ser preparados mediante un método de fosforamidita descrito por Beaucage y Carruthers (1981) Tett. Lett. 22:1859-1862. Un fragmento de doble hebra puede ser luego obtenido ya sea mediante (1) la síntesis de la hebra complementaria y el recocido de las hebras entre si bajo condiciones apropiadas o (2) mediante la adición de la hebra complementaria utilizando el ADN-polimerasa con una secuencia cebadora apropiada. Las secuencias de ADN sintéticas pueden ser separadas utilizando equipo automatizado disponible de Applied Biosystems, Inc., Foster City, CA. La distribución pulmonar de las moléculas que contienen fragmentos de PTH34 y PTH38 es descrita en la Patente de los Estados Unidos No. 5,814,607, la cual es incorporada por referencia en la presente en su totalidad. Las formulaciones y dispositivos farmacéuticos de inhalación de polvo seco son conocidos en la técnica. El primero y segundo API's de la invención pueden ser formulados en una formulación farmacéutica de polvo seco para el uso con un inhalador de polvo seco (DPI) para administrar y distribuir los API's dentro del sistema pulmonar de un humano. El DPI puede ser un DPI de dosis múltiple (MDPI o MDDPI) . Los polvos respirables de diversos tamaños de partícula pueden ser producidos utilizando una variedad de procesos convencionales, tales como molienda por chorro, secado por rocío, precipitación con solvente, y similares. Los polvos secos pueden ser luego formulados en una masa en polvo utilizando polvos secos a granel, tales como sucrosa, lactosa, trehalosa, albúmina sérica humana, glicina, celobiosa, dextranos, maltotriosa, pectina, citrato de sodio, ascorbato de sodio, manitol y similares. Las composiciones formuladas de polvo seco pueden ser empaquetadas en un DPI, tal como un Aerolizer® disponible de Novartis Pharma AG y Schering-Plough Corporation, Turbohaler® disponible de AstraZeneca, Diskus® disponible de GlaxoSmithKline, ActispireMR disponible de Brittannia Pharmaceuticals , Twisthaler® disponible de Schering-Plough, Novolizer® disponible de Meda Pharma BV, AcuBreatheMR disponible de Respirics Inc., CertihalerMR disponible de Skye Pharma, y similares. Las formulaciones farmacéuticas de inhalación de aerosol y los dispositivos de las mismas son también conocidos en la técnica. El primero y segundo API's de la invención pueden ser formulados en una formulación farmacéutica de aerosol para el uso con un inhalador de dosis medida (MDI) para administrar y distribuir los API's dentro de un sistema pulmonar de un humano. Los API's pueden ser disueltos o suspendidos (como un sólido) en un propelente de aerosol farmacéuticamente adecuado tal como un hidrofluorocarburo (HFC) , preferentemente un hidrofluoroalcano (HFA) . Los HFA's ejemplares incluyen, pero non están limitados a, tetrafluoroetano (HFA-134a) y heptafluoropropano (HFA-227) . Preferentemente, los API's son suspendidos en el propelente de aerosol en la forma de partículas respirables similares a aquellas utilizadas en los DPI ' s descritos en la presente. Preferentemente, la composición de aerosol contiene además un surfactante farmacéuticamente adecuado para mejorar la dispersión, tal como el ácido oleico, trioleato de sorbitan, y diglicéridos de cadena larga o fosfolípidos . La composición de aerosol puede contener además un alcohol inferior (hasta de 30% en peso) , otros aditivos o excipientes para impartir estabilidad química y aceptabilidad fisiológica. La formulación de aerosol puede ser envasada en un MDI, el cual es bien conocido en la técnica (Ver por ejemplo, Stein SW et al., "Reinventing Metered Dose Inhalers : From Poorly Efficient CFC MDIs to Highly Efficient HFA MDIs, " Drug Delivery Technology 2003, 3 :46-51) .

EJEMPLOS Formulaciones Acuosas Ratas macho Sprague Dawley y Brown Norway de edades de 6-7 semanas fueron obtenidas de Harían Sprague-Dawley (Madison, WI) y alojadas en jaulas tipo caja de zapatos. A los animales se les proporcionó una dieta purificada para roedores, preparada domésticamente que contenía 0.47% de calcio y 0.3% de fósforo, y agua ad libitum. La dieta fue suplementada con 1.6 IU de vitamina D3/g de dieta. Las ratas son la especie preferida para el análisis in vivo de la la, 25-dihidroxivi tamina D3 y análogos de la vitamina D debido a que las ratas y los humanos metabolizan estos compuestos de manera similar. Preparación de las soluciones de dosificación de la, 25-dihidroxivitamina D3. La la, 25-dihidroxivitamina D3 fue preparada en dos formulaciones diferentes. La Formulación A fue una solución acuosa que contenía 30% de propilenglicol y 5% de etanol a H -7.0. La Formulación B fue también una solución acuosa que contenía además 0.4% de TWEEN polisorbato 20 [1 mi de solución que contiene: 4 mg de Tween Polisorbato 20, 1.5 mg de cloruro de sodio, 10 mg de ascorbato de sodio, 7.6 mg de fosfato de sodio (dibásico) , 1.8 mg de fosfato de sodio (monodibásico) y 1.1 mg de edeteato disódico] , pH -7.0. Distribución intratraqueal de la, 25-dihidroxivitamina D3. 5 \iCi de la, 25-dihidroxivitamina D3 se distribuyeron intratraquealmente a ratas Sprague Dawley anestesiadas (isoflurano) mediante el uso del MicroSprayerMR Modelo 1C siguiendo el protocolo del fabricante (PennCentury, Filadelfia, PA) . El dispositivo incluyó un tubo de acero inoxidable que media 0.64 mm de diámetro acoplado a una jeringa de alta presión (Modelo FMJ-250, PennCentury). Un atomizador en la punta del tubo generó la niebla de aerosol. El MicroSprayerMR fue insertado profundamente en la traquea permitiendo la distribución de los compuestos aerosolizados hacia los pulmones. La la, 25-dihidroxivitamina D3 fue administrada ya sea en volúmenes de dosis de 100 µL (Formulación A y Formulación B) ó 200 pL (Formulación A) . Como un control, un grupo de animales fue dosificado ya sea con la Formulación A o la Formulación B. Análisis de Tejido. Utilizando una duración de 4 horas y una duración de 10 minutos después de la administración de la dosis, los animales fueron anestesiados con isoflurano y la sangre fue recolectada del corazón. La traguea, los pulmones y el estómago fueron retirados, deshidratados en alcohol y pulverizados. Las muestras que pesaban 20-100 mg fueron colocadas en 1 mi de Solvable (Packard BioScience B. V., Holanda) e incubadas a 602C toda la noche. En seguida, se agregaron 10 mi de Optima Gold (Perkin Elmer, Boston, MA) a la muestras, y la radioactividad fue medida utilizando un analizador de cintilación liquida (TRI-CARB 2100 TR, Packard) . Para determinar la presencia de la, 25-dihidroxivitamina D3 en la sangre, se utilizaron 200-300 pL de suero en 10 mi de Optima Gold para el conteo de cintilación . Efectividad de la distribución por aerosol de la Vitamina D al Árbol Pulmonar. Se determinó el efecto de un la, 25-dihidroxivitamina D3 sobre los niveles de calcio en suero en ratas Brown Norway. La distribución de la, 25 -dihidroxivitamina D3 (por ejemplo, la actividad in vivo) fue medida para determinar el efecto con la, 25-dihidroxivitamina D3 aerosolizado sobre los niveles de calcio en suero. La Formulación A que contenía la, 25-dihidroxivitamina D3 fue distribuida intra-traquealmente en dosis de 200 yL en el Día 0 (el Día 0 fue el primer día de tratamiento) y el Día 2 . Dos dosis diferentes, de 1 yg/kgBw y 10 yg/kgBW/ fueron probadas en dos experimentos independientes . Veinticuatro horas después de la última administración de la dosis (por ejemplo., Día 2) , los animales fueron anestesiados con isoflurano y la sangre fue recolectada mediante punción pulmonar. La sangre se dejó coagular a temperatura ambiente por al menos 30 minutos. La sangre fue centrifugada a 3000 x g (base granulada) por 15 minutos, y el sobrenadante (suero) fue recolectado. Los niveles de calcio fueron determinados mediante espectroscopia de absorción atómica del suero diluida con 0.1% de cloruro de lantano utilizando un Perkin Elmer Modelo 3110. Distribución tisular de la la, 25-dihidroxivitamina D3 distribuida por la Formulación A. Como se muestra en la Figura 1, después de 10 minutos, 46% de la la, 25-dihidroxivitamina D3 detectada (100 L dosis) fueron encontradas en la traquea y los pulmones, mientras que 53% fue detectado en el suero. La cuenta de la la, 25-dihidroxivitamina D3 detectada en el estómago fue muy baja (~ 1%) . Se obtuvieron resultados similares cuando la la, 25-dihidroxivitamina D3 fue distribuida por una dosis de 200 L. Después de 4 horas, la mayor parte de la la, 25-dihidroxivitamina D3 detectada fue encontrada en el suero (60%) y en el estómago (36%) . Menos del 5% se detectó en la traquea y los pulmones . Distribución tisular de la la, 25-dihidroxivitamina D3 distribuida en la Formulación B. Como se muestra en la Figura 2, después de 10 minutos, 51% de la la, 25-dihidroxivitamina D3 detectada fue encontrada en el suero. La traquea y los pulmones contenían 33 % de la la, 25-dihidroxivitamina D3, y menos de 4% se detectó en el estómago. Después de 4 horas, se detectó la la, 25-dihidroxivitamina D3 en suero ( 56% del total) y en el estómago ( 35% del total) . Efecto de la la, 25-dihidroxivitamina D3 aerosolizada/atomizada sobre los niveles de calcio en suero. Como se muestra en las Figuras 3 y 4 , 1 ug/kgBw y 10 g/kgBW de la la, 25-dihidroxivitamina D3 distribuida pulmonarmente, incrementó los niveles de calcio séricos por 2 . 8 mg/dL y 4 mg/dL. respectivamente. Los datos anteriores demuestran que el la, 25 -dihidroxivitamina D3 contenida en las Formulaciones A y B fue exitosamente distribuida sistémicamente a través del sistema pulmonar. No se observó ninguna diferencia significativa o material en la distribución tisular por la administración de las Formulaciones A ó B. La presencia de la, 25-dihidroxivitamina D3 en la sangre, 10 minutos después de la distribución pulmonar, indica que la la, 25-dihidroxivitamina D3 fue rápidamente disponible. La detección del la, 25 -dihidroxivitamina D3 en el estómago 4 horas después de la dosificación, indica que algo del compuesto se refluyó probablemente hacia el esófago. Los ejemplos anteriores demuestran que la la, 25-dihidroxivitamina D3 distribuida al sistema pulmonar incrementó eficazmente los niveles de calcio en el suero en sujetos animales. Se hace constar que con relación a esta fecha mejor método conocido por la solicitante para llevar a práctica la citada invención, es el que resulta claro de presente descripción de la invención.

Claims

REIVINDICACIONES Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes reivindicaciones: 1. Un método para incrementar el calcio en suero en un humano, caracterizado porque comprende la distribución de una dosis atomizada de una solución farmacéutica que comprende agua, uno o más alcoholes, uno o más polioles y, un primer ingrediente farmacéutico activo que comprende la, 25-dihidroxivitamina D3, o los ésteres o solutos del mismo a los pulmones del humano . 2. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el alcohol es etanol . 3. El método de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque el poliol es propilenglicol . 4. El método de conformidad con la reivindicación 3, caracterizado porque la solución farmacéutica comprende además uno o más excipientes . 5. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el excipiente es un miembro seleccionado del grupo que consiste de un surfactante no iónico, cloruro de sodio, ascorbato de sodio, fosfato dibásico de sodio, fosfato monobásico de sodio, edeteato disódico y combinaciones de los mismos. 6. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque la dosis atomizada de la solución farmacéutica comprende una dosis del primer ingrediente farmacéutico activo que es la, 25-dihidroxivitamina D3 o los ásteres o solutos del mismo en el intervalo de 0.2-10 . 7. El método de conformidad con la reivindicación 6, caracterizado porque la solución comprende además un segundo ingrediente farmacéutico activo seleccionado del grupo que consiste de calcitonina y el fragmento peptídico N-terminal de la hormona paratiroidea que consiste de los primeros 34 a 38 aminoácidos de la SEQ ID No.: 1. 8. El método de conformidad con la reivindicación 7, caracterizado porque la dosis atomizada de la solución farmacéutica comprende una dosis en el intervalo de 100-2000 g del segundo ingrediente farmacéutico activo que es el fragmento peptídico N-terminal de la hormona paratiroidea, que consiste de los primeros 34 a 38 aminoácidos de la SEQ ID No . : 1. 9. El método de conformidad con la reivindicación 7, caracterizado porque la dosis atomizada de la solución farmacéutica comprende una dosis en el intervalo de 100-1000 ig del segundo ingrediente farmacéutico activo que es la calcitonina . 10. Una composición pulmonar farmacéutica, caracterizada porque comprende: agua, uno o más alcoholes, uno o más polioles, y, un primer ingrediente farmacéutico activo que comprende la, 2 5-dihidroxivitamina D3 o los ásteres o solutos de la misma. 11 . La composición de conformidad con la reivindicación 10 , caracterizada porque el alcohol es etanol. 12 . La composición de conformidad con la reivindicación 10 , caracterizada porque el poliol es propilenglicol . 13 . La composición de conformidad con la reivindicación 10 , caracterizada porque comprende además uno o más excipientes . 14 . La composición de conformidad con la reivindicación 13 , caracterizada porque el excipiente es un miembro seleccionado del grupo que consiste de un surfactante no iónico, cloruro de sodio, ascorbato de sodio, fosfato dibásico de sodio, fosfato monobásico de sodio, edeteato disódico y combinaciones de los mismos . 15 . La composición de conformidad con la reivindicación 10 , caracterizada porque comprende una dosis del primer ingrediente farmacéutico activo que es la, 25 -dihidroxivitamina D3 o los ásteres o solutos de la misma en el intervalo de 0 . 2 - 10 ig. 16 . La composición de conformidad con la reivindicación 10 , caracterizada porque comprende además un segundo ingrediente farmacéutico activo seleccionado del grupo que consiste de calcitonina y un fragmento peptídico N-terminal de la hormona paratiroidea que consiste de los primeros 34 a 38 aminoácidos de la SEQ ID No.: 1 . 17 . La composición de conformidad con la reivindicación 16 , caracterizada porque comprende una dosis del segundo ingrediente farmacéutico activo que es el fragmento peptídico N-terminal de la hormona paratiroidea que consiste de los primeros 34 a 38 aminoácidos de la SEQ ED No. 1 en el intervalo de 100 - 2000 g/dosis. 18 . La composición de conformidad con la reivindicación 16 , caracterizada porque comprende una dosis del segundo ingrediente farmacéutico activo que es la calcitonina en el intervalo de 100- 1000 g/dosis . 1 . Un método para incrementar el calcio en suero en un humano, caracterizado porque comprende la distribución de una dosis farmacéutica de un primer ingrediente farmacéutico activo que comprende la, 25-dihidroxivitamina D3 , o los ésteres o solutos de la misma a los pulmones del humano. 20 . Un método para manejar la hipocalcemia en un humano que sufre de hemodiálisis crónica, caracterizado porque comprende la distribución de una dosis farmacéutica de un primer ingrediente farmacéutico activo que comprende 1 , 25-dihidroxivitamina D3 , o los ésteres o solutos de la misma a los pulmones del humano. 21 . Un método para tratar un trastorno metabólico del calcio en un humano, caracterizado porque comprende la distribución de una dosis farmacéutica de un primer ingrediente farmacéutico activo, que comprende la, 25-dihidroxivitamina D3, o los ésteres o solutos de la misma, a los pulmones del humano. 22 . Un método para reducir los niveles elevados de la hormona paratiroidea en un humano, caracterizado porque comprende la distribución de una dosis farmacéutica de un primer ingrediente farmacéutico activo que comprende la, 25-dihidroxivitamina D3, o los ésteres o solutos de la misma a los pulmones del humano. 23 . El método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 19 -22 , caracterizado porque comprende además la co-distribución de una dosis farmacéutica de un segundo ingrediente farmacéutico activo seleccionado del grupo que consiste de calcitonina y un fragmento peptídico N-terminal de la hormona paratiroidea, que consiste de los primeros 34 a 38 aminoácidos de la SEQ ID No.: 1 . 24 . El método de conformidad con la reivindicación 23 , caracterizado porque comprende una dosis en el intervalo de 100-2000 g del segundo ingrediente farmacéutico activo que es el fragmento peptídico N-terminal de la hormona paratiroidea que consiste de los primeros 34 a 3 8 aminoácidos de la SEQ ID No. : 1 . 25 . El método de conformidad con la reivindicación 23 , caracterizado porque comprende una dosis en el intervalo de 100- 1000 del segundo ingrediente farmacéutico activo que es la calcitonina. 26 . El método de conformidad con la reivindicación 23 , caracterizado porque comprende una dosis del primer ingrediente farmacéutico activo que es la la, 25 -dihidroxivitamina D3 o los ésteres o solutos de la misma en el intervalo de 0 . 2 -10 yg. 27 . Un método para incrementar el calcio en suero en un humano, caracterizado porque comprende la distribución de una dosis de una composición farmacéutica de polvo seco que comprende el polvo seco a granel y un primer ingrediente farmacéutico activo que comprende 1a , 25-dihidroxivitamina D3 , o los ésteres o solutos de la misma a los pulmones del humano. 28 . Una composición farmacéutica pulmonar, caracterizada porque comprende: un polvo seco a granel, y un primer ingrediente farmacéutico activo que comprende la, 25-dihidroxivitamina D3, o los ésteres o solutos de la misma. 29 . Un método para incrementar el calcio en suero en un humano, caracterizado porque comprende la distribución de una dosis de una composición farmacéutica de aerosol que comprende un propelente y un primer ingrediente farmacéutico activo, que comprende la, 25-dihidroxivitamina D3, o los ésteres o solutos de la misma a los pulmones del humano. 30 . Una composición farmacéutica pulmonar, caracterizada porque comprende: un propelente de aerosol, y un primer ingrediente farmacéutico activo que comprende la, 25-dihidroxivitamina D3, o los ésteres o solutos de la misma. 31 . la composición farmacéutica pulmonar de conformidad con la reivindicación 30 , caracterizada porque comprende además un surfactante. 32 . Un inhalador de polvo seco, caracterizado porque comprende la composición farmacéutica pulmonar de conformidad con la reivindicación 28 . 33 . Un inhalador de dosis medida, caracterizado porque contiene la composición farmacéutica pulmonar de conformidad con las reivindicaciones 30 ó 31 . 34 . El método de conformidad con la reivindicación 6 , caracterizado porque la dosis atomizada de la solución farmacéutica comprende una dosis del primer ingrediente farmacéutico activo que es la la, 25-dihidroxivitamina D3 o los ésteres o solutos de la misma, en el intervalo de 0 . 2 - 2 g - 35. La composición de conformidad con la reivindicación 15, caracterizada porque comprende una dosis del primer ingrediente farmacéutico activo que es la la, 25-dihidroxivitamina D3 o los ásteres o solutos de la misma en el intervalo de 0.2-2 µg. 36. El método de conformidad con la reivindicación 26, caracterizado porque comprende una dosis del primer ingrediente farmacéutico activo que es la la, 25-dihidroxivitamina D3 o los esteres o solutos de la misma en el intervalo de 0.2-2 g.