MX2008011364A - Dispositivo de suministro de muestras de alta velocidad. - Google Patents

Abstract

Se revela en la presente un dispositivo de suministro de muestras que alterna entre el suministro de muestras de una línea de toma de muestras en tanto que limpia una segunda línea de toma de muestras y luego suministra una segunda muestra de la segunda línea de suministro de muestras en tanto que limpia la primera línea de muestras. Esto es repetido en posición rápida para permitir mayor velocidad en el análisis de una pluralidad de muestras en una cantidad de tiempo más corta.

Description

DISPOSITIVO DE SUMINISTRO DE MUESTRAS DE ALTA VELOCIDAD CAMPO DE LA INVENCION La presente invención es concerniente con un dispositivo de suministro de muestras para suministrar un instrumento de inspección, tal como un citómetro de flujo, con una pluralidad de muestras a alta velocidad.

ANTECEDENTES DE LA INVENCION Tradicionalmente , el suministro de muestras a una curva de inspección de un citómetro de flujo se ha llevado a cabo al presurizar un tubo que contiene una muestra a ser analizada, causando que la muestra fluya a la linea de suministre de muestras. La automatización de este método de suministro tradicional es difícil debido a cuestiones mecánicas con la comunicación y sellado automático de los recipientes de muestras. Tal método de suministro es también propicio a crear aerosoles de materiales biopeligrosos . Otro método de suministro de muestras, que es algunas veces implementado en citómetros de flujo, es aspiración de la muestra en la bomba de jeringa del citómetro de flujo y luego expulsión de la muestra a la curva del citómetro de flujo. Una desventaja de este método es que las pulsaciones creadas en el flujo de muestra pueden amplificar externamente el ruido en la señal medida. Adicionalmente , la cantidad de tiempo requerido para el lavado entre las muestras es grande y hace lento el proceso para analizar muestras. El proceso de lavado no puede empezar hasta que la muestra ha sido dispuesta previamente a la curva del citómetro de flujo, dando como resultado rendimiento reducido . Otro método de suministro de muestras es descrito en la presente en la Patente Estadounidense No. 5,182,617, que es incorporado en la presente por referencia en su totalidad. La patente ?617 revela que se puede obtener un rendimiento más alto al crear dos ramas idénticas que pueden efectuar la introducción y lavado de muestras simultáneos. Cuando es utilizado, las muestras analizadas se pegan a los canales del sistema, a los que se incluyen los canales de inferíase, causando estructuras de arrastre mayores en el análisis de muestra subsecuente. El arte previo no proporciona ninguna contemplación de lavado de un canal de inferíase entre el dispositivo de suministro muestras y el citómetro de flujo. Además, el arte previo no proporciona ninguna provisión para lavar rápidamente el sistema con un método limpiador.

BREVE DESCRIPCION DE LA INVENCION Se proporciona un método para análisis de muestras multiplexados que comprende las etapas de: (a) obtener robóticamente una primera muestra de liquido de la primera de una pluralidad de fuentes de muestra; (b) administrar la primera muestra de liquido a través de una primera linea a un instrumento para el análisis de la muestra; (c) obtener robóticamente una segunda muestra de liquido de la segunda de una pluralidad de fuentes de muestras; (d) administrarla segunda muestra de liquido a través de una segunda linea a un instrumento para análisis; (e) limpiar la segunda linea en tanto que la primera linea está alimentando la muestra al instrumento y (f) limpiar la primera linea en tanto que la segunda linea está alimentando la muestra al instrumento. En una modalidad, el método comprende además la etapa (g) repetir las etapas (a) -(f) para obtener y alimentar múltiples muestras al instrumento de todas de las pluralidad de fuentes de muestras. Preferiblemente, el instrumento es un citómetro de flujo. En otra modalidad, el instrumento es seleccionado del grupo que consiste de un espectrofluorómetro, un fluorómetro, un medidor de absorbancia y un microscopio. En una modalidad, las primeras y segundas muestras de liquido que son analizadas por el instrumento de inspección pueden ser seleccionadas independientemente del grupo que consiste de compuestos químicos, anticuerpos, perlas, células vivas o células fijas. Cualquier muestra analizada comúnmente en un citómetro de flujo, HPLC, espectrofluorómetro, fluorómetro, medidor de absorbancia, microscopio u otro instrumento de alto rendimiento que recibe muestras líquidas puede ser usada. En otra modalidad, el método comprende además las etapas de alimentar un primer reactivo a la primera muestra de liquido antes de que la muestra sea alimentada al instrumento y agregada al segundo reactivo en la segunda muestra de liquido antes de que la muestra sea alimentada al instrumento. Los primeros y segundos reactivos pueden ser seleccionados independientemente del grupo que consiste de compuestos químicos, anticuerpos, perlas, células vivas o células jas. En todavía otra modalidad, múltiples reactivos pueden ser agregados a la muestra antes de que la muestra sea inyectada al instrumento. En otra modalidad, una válvula de control alterna la alimentación de fluido limpiador con la administración de muestra líquida en cada una de las primeras y segundas líneas. La válvula de control puede ser conectada a líneas adicionales. Tales líneas pueden proporcionar además la administración de presión de aire o presión de líquido del sistema. Adicionalmente , tales líneas pueden proporcionar además un canal de desperdicios. Se proporciona un aparato para administrar muestras a un instrumento para análisis que comprende una primera y una segunda línea de alimentación de muestras, en donde la primera línea de alimentación de muestras comprende una primera rama de carga e inyección de muestras y la segunda^ línea de alimentación de muestras comprende una segunda rama de carga o inyección de muestra; un mecanismo de administración de flujo de fluidos para conectar alternativamente las primeras y segundas lineas de alimentación de muestras al experimento; por lo menos una linea de alimentación de fluido limpiador al suministrar fluido limpiador al mecanismo de manejo de flujo, la primera de alimentación de muestras y la segunda linea de alimentación de muestras; por lo menos un canal de entrada de muestra; por lo menos una válvula de control para alimentar alternativamente fluido limpiador a las primeras y segundas lineas de alimentación de muestras, de tal manera que la muestra y el fluido limpiador fluyen alternativamente a través de las primeras y segundas lineas de alimentación de muestras. En una modalidad, la por lo menos una linea de alimentación de fluido limpiador suministra fluido limpiador hacia el sistema, incluyendo el instrumento de inspección. En otra modalidad, el mecanismo de manejo de flujo de fluidos comprende una válvula de comunicación de posición. La válvula de comunicación de posición puede comprender una válvula de comunicación de dos posiciones cuadridireccional . La válvula de comunicación de dos posiciones puede comprender dos modos. En una modalidad, el primer modo de la válvula de comunicación de posición acopla de manera fluida la primera linea de administración de muestras al instrumento y acopla de manera fluida la segunda linea de alimentación de muestra al canal de entrada de muestras. En otra modalidad, el segundo modo de la válvula de comunicación de posición acopla de manera fluida la primera linea de alimentación de muestras al canal de entrada de muestras y acopla de manera fluida la segunda linea de alimentación de muestras al instrumento. En una modalidad, las ramas de carga e inyección de muestras de la primera y segunda lineas de alimentación de muestras comprenden ramas de carga e inyección de muestras simétricas. En otra modalidad, la primera linea de alimentación de muestras comprende un primer bucle de retención de muestra y la segunda linea de alimentación de muestras comprende un segundo bucle de retención de muestras. En otra modalidad, una primera válvula de control está ubicada dentro de la primera linea de alimentación de muestras y una segunda válvula de control está ubicada dentro de la segunda linea de alimentación de muestras. En algunas, modalidades, cada una de las primeras y segundas válvulas de control comprenden cuatro canales fluidos capaces de acoplar los primeros y segundos bucles de retención de muestras a uno de los cuatro canales fluidos. Estos canales fluidos adicionales pueden ser conectados a compuertas de salida de válvulas de control de flujo de bomba, por lo menos una linea de alimentación de fluido limpiador, de sitios de desperdicio o una fuente de presión de aire controlada.

BREVE DESCRIPCION DE LAS FIGURAS La Figura 1 es un diagrama que muestra una configuración de una modalidad de la presente invención.

Las Figuras 2A y 2 B muestran un diagrama de nivel superior que muestra una modalidad de una operación de la unidad de control. La Figura 3 es un diagrama que muestra una modalidad de una secuencia de comandos de unidad de control para lavar ambas ramas del sistema. La figura 4 es un diagrama que muestra una modalidad de una secuencia de comando de unidad de control para agregar un reactivo a recipientes de muestra en ambas ramas del sistema. La Figura 5 es un diagrama que muestra una modalidad de una secuencia de comandos de unidad de control para mezclar y cargas muestras en ambas ramas del sistema y Las Figuras 6A y 6B muestran un diagrama que muestra una modalidad de la secuencia de comandos de unidad de control para inyectar muestras y lavado de linea de interfase en ambas ramas del sistema.

DESCRIPCION DETALLADA DE LA MODALIDAD PREFERIDA El término "medios de presurización", como se usa en la presente, se refiere a una variedad de métodos para proporcionar presión a los canales del dispositivo. Ejemplos no limitantes de medios de presurización incluyen aire comprimido regulado de un tanque, un compresor de aire regulado o una bomba de aire.

El término "medios de almacenamiento" como se usa en la presente, se refiere a una variedad de recipientes de muestras de los cuales la mezcla es aspirada al canal de suministro de muestra. Ejemplos no limitantes de medios de almacenamiento incluyen una placa de 96, 384 o 1536 cavidades o un soporte que comprende cualquier número de tubos de ensayo. El término "medios de comunicación de canal", como se usa en la presente, se refiere a una válvula de comunicación que dirige el fluido en los canales a sitios deseados en el dispositivo de cualquier modalidad revelada en la presente. La Figura 1 muestra una modalidad de la presente invención y está diseñada para ser no limitante en su alcance. En la Figura 1, un instrumento de inspección (en este caso, un citómetro de flujo) 1 está en comunicación fluida con una válvula de comunicación de dos posiciones cuadridireccional 3 vía un canal de inferíase fluido flexible 2. El canal de inferíase puede ser construido de cualquier material de tubería conocido apropiado para uso con un instrumento de inspección. Ejemplos no limitantes de material de tubería para el' canal de inferíase y todos otros materiales de tubería involucrados en la presente invención incluyen tubería fabricada de silicón flexible, cloruro de polivinilo (PVC) , poliéter éter cetona (PEEK), politetrafluoroetileno (PTFE) y cualesquier otros materiales poliméricos útiles, tales como poliésteres, poliolefinas o poliamidas. El canal de inferíase 2 puede tener un diámetro interno de aproximadamente 0.127 mm (0.005 pulgadas) a aproximadamente 1.016 mm (0.040 pulgadas), aunque otros tamaños de diámetro interno pueden ser apropiados dependiendo del instrumento de inspección usado. La válvula 3 coloca el canal de entrada de muestra ("canal de entrada") 4 y el canal de interfase 2 entre dos ramas de carga e inyección de muestras simétricas del sistema 5 y 6. En una primera posición de la válvula de comunicación 3, la rama 5 es acoplada de manera fluida al canal de entrada 4 o al canal de interfase 2 (y asi, el instrumento de inspección 1) está acoplado de manera fluida a la rama 6. Cuando la válvula 3 es cambiada a una segunda posición (no mostrada) , la rama 5 seria acoplada de manera fluida al canal de interfase 2 (y asi, el instrumento de inspección 1) y el canal de entrada 4 seria acoplado de manera fluida a la rama 6. El otro extremo del canal de entrada 4 es acoplado a una sonda 7, que es acoplada mecánicamente a un dispositivo de colocación 8. En una modalidad, el canal de entrada comprende la sonda y el dispositivo de colocación. La sonda 7 proporciona al canal de entrada 4 con una muestra apropiada. Cualquier tipo de muestra que es analizada mediante el instrumento de inspección puede ser usada en la presente invención, en las que se incluyen muestras liquidas, gaseosas o sólidas. Ejemplos no limitantes de muestras útiles incluyen compuestos químicos y compuestos biológicos. Algunos ejemplos no limitantes de compuestos químicos incluyen reactivos químicos. Solventes, microesferas , perlas y tintes. Preferiblemente, los compuestos químicos comprenden compuestos que son conocidos y usados en un instrumento de inspección de HPLC o un instrumento de inspección de citómetro de flujo. Algunos ejemplos no limitantes de compuestos biológicos incluyen sangre, orina, anticuerpos, células vivas, células muertas y microorganismos. Las células pueden ser de humanos, animales, insectos, bacterias, levaduras o virus. Preferiblemente, los compuestos biológicos comprenden compuestos que son conocidos y usados en un instrumento de inspección de citómetro de flujo. El dispositivo de colocación 8 puede ser cualquier dispositivo para aquel de habilidad ordinaria en el arte. El dispositivo de colocación 8 puede ser ordenado para hacer mover la sonda 7. Ejemplos no limitantes de dispositivos de colocación incluyen un programador de muestras robótico cartesiano y un tomador de muestras giratorio. Otro ejemplo de un dispositivo de colocación 8 incluye un dispositivo de colocación XYZ, tal como un tomador de muestras robótico Tecan MSP9250 con un intervalo de viaje de 39 cm (15.4 pulgadas) en el eje X, 30 cm (11.8 pulgadas) en el eje Y y 16.5 cm (6.5 pulgadas) en el eje Z. La exactitud de colocación de este dispositivo difiere 0.102 mm (0.004 pulgadas) en todos los ejes. El eje Z del dispositivo de colocación 8 es capaz de montar sondas de diámetros de hasta 1.98 mm (0.078 pulgadas) vía un tornillo de ajuste. En otra modalidad, el tomador de muestras robótico comprende brazos separados para alimentar la variedad de reactivos a las muestras. En otra modalidad, el tomador de muestras robótico comprende un brazo separado, por ejemplo, uno, dos, tres o cuatro brazos para administrar una variedad de muestras al instrumento de inspección. En otra modalidad, en por lo menos un canal de entrada de muestras es acoplado a un dispositivo de colocación del tomador de muestras robótico. En otra modalidad, el tomador de muestras robótico comprende dos brazos y el segundo brazo comprende una bomba de jeringa de transferencia de reactivos. En otra modalidad, el segundo brazo alimenta una variedad de reactivos, por ejemplo, primeros y segundos reactivos. En otra modalidad, la bomba de transferencia de reactivos comprende una bomba de jeringa, una bomba peristáltica o de una bomba de diafragma. La sonda 7 puede ser de cualesquier sistemas de tubería conocidos útiles en la transportación de muestras en el sistema. En una modalidad, la sonda 7 comprende un tubo de acero inoxidable de aproximadamente 1.83 mm (0.072 pulgadas) de diámetro externo (OD) y aproximadamente 1.60 mm (0.063 pulgadas) de diámetro interno (ID) . Aunque otras dimensiones de tubería son contempladas. Por ejemplo, el OD de la sonda puede fluctuar entre aproximadamente 1.27 mm (0.050 pulgadas) y 0.25 mm (0.010 pulgadas) e ID de la sonda puede fluctuar entre aproximadamente 1.14 mm (0.045) pulgadas y aproximadamente 2.43 mm (0.095 pulgadas). La longitud de tubería de sonda típica es de aproximadamente 10.2 cm (4 pulgadas) pero podría ser más larga o más corta dependiendo del tipo de recipientes de muestra 9 y frascos de reactivo 11 que son usados. Preferiblemente, la sonda 7 es suficientemente larga para ser capaz de alcanzar el fondo de los recipientes de muestra 9 y frascos de reactivo 11 sin que el extremo del eje Z hace impacto con la parte superior del recipiente. Se puede agregar una pulgada adicional a una longitud de sonda mínima para permitir el impacto de la sonda 7 en el extremo del eje Z del dispositivo de colocación 8. En una modalidad, la sonda 7 tiene una abertura rectangular maquinada en su flanco, que comienza a aproximadamente una pulgada del extremo de la sonda 7, en donde el es montada en el eje Z del dispositivo de colocación 8 y se extiende de aproximadamente 1.27 cm (0.5 pulgadas) desde aquel punto. La profundidad de esta abertura puede ser aproximadamente la mitad del diámetro externo de la sonda 7. El canal de entrada 4 puede asar a través de esta abertura y hacia fuera de la punta de la sonda 7. El diámetro externo del canal de entrada 4 puede ser dimensionado de tal manera que su ventaja presión cae dentro del diámetro interno de la sonda 7. Por ejemplo, el OD del canal de entrada 4 puede ser de aproximadamente 1.59 mm (0.0625 pulgadas), cuando el ID de la sonda es de 1.60 mm (0.063 pulgadas) y el canal de entrada 4 puede opcionalmente ser ajustado por fricción a la sonda 7. El canal de entrada 4 se puede extender de la punta de la sonda 7 por aproximadamente 1.27 cm (0.5 pulgadas) para evitar el contacto entre la pared externa de la sonda 7 y el contenido de los recipientes 9 de muestra, en donde los recipientes de muestra son relativamente planos, por ejemplo, una placa de 96 cavidades, una placa de 385 cavidades o una placa de 1536 cavidades . El dispositivo de colocación 8 puede ser ordenado para mover la sonda 7 entre varios dispositivos, en los que se incluyen recipientes de muestras 9, una estación de lavado 10 y cualesquiera de los frascos de reactivos 11 localizados en el soporte de reactivos 12. Muchos recipientes de muestras diferentes 9 pueden ser utilizados para las modalidades descritas en la presente. Ejemplos no limitantes de recipientes herméticos incluyen soportes de tubos que comprenden cantidades variables de tubos de muestras y placas de cavidades de 96, 384 o 1536 cavidades. En una modalidad, la estación de lavado 10 es acoplada a un depósito de desperdicios 13 vía un canal de drenaje de perforación grande 14. En otra modalidad, el depósito de desperdicios 13 está ubicado físicamente debajo de la estación de lavado 10 para permitir que cualesquier líquidos expulsados a la estación de lavado 10 fluyan al depósito de desperdicios 13 bajo la gravedad. El canal de drenaje de la estación de desperdicios debe tener un diámetro interno suficientemente grande para impedir el bloqueo de aire en la linea después del drenaje de cualquier material de desperdicio. El diámetro interno típico de un canal de drenaje de estación de desperdicios 14 no es menor de aproximadamente 9.52 mm (3/8 de pulgada) . En una modalidad, ambas ramas de carga y de inyección de la muestra 5 y 6 del sistema son idénticas en configuración y cada una son controladas independientemente. En una modalidad, cada rama 5 y 6 consiste de un bucle de retención de muestras 15 y 16, respectivamente, dándoles el control 17 y 18, respectivamente, canales 19 a 22 y 23 a 26, respectivamente, válvulas de control de flujo de la bomba 27 y 28, respectivamente y bombas 29 y 30, respectivamente. En una modalidad, los bucles de retención de muestras 15 y 16 están acoplados fluidamente a la válvula de comunicación 3. En una modalidad, los bucles de retención de muestras 15 y 16 15 y 16 son construidos de una longitud de tubería que tiene un volumen interno mayor que el volumen básico de muestras que pueden ser cargadas e inyectadas por el sistema. Esto asegura que los bucles de retención de muestras 15 y 16 tengan volumen suficiente para contener cualquier muestra que puede ser inyectada a los mismos. El otro extremo de cada bucle de retención 15 y 16 está acoplado fluidamente a las válvulas de control 17 y 18, respectivamente. Comúnmente, los bucles de retención 15 y 16 tendrían un volumen interno de 1½ veces mayor que el volumen máximo de muestra para impedir que la muestra sea aspirada a las válvulas de control 17 y 18. En una modalidad, ambas válvulas de control 17 y 18 son válvulas de selección que comprenden cuatro canales capaces de acoplar los bucles de retención de muestras 15 y 16 a uno de los cuatro canales de fluido. Para modalidades que no requieren tantos canales fluidos, las válvulas de selección pueden comprender tan pocos como dos canales. En otras modalidades, válvulas de selección con más de cuatro canales pueden ser usadas con el fin de proporcionar capacidades de lavado adicionales del sistema. Las válvulas de control 17 y 18 que tiene múltiples canales proporcionan muchos elementos ventajosos para la invención descrito en la presente. En la Figura 1, las válvulas de control 17 y 18 conectan selectivamente los bucles de retención de muestras 15 y 16 a uno de cuatro canales posibles. El bucle de retención 15 es conectado a los canales 19, 20, 21 y 22 y el bucle de retención 16 es conectado a los canales 23, 24, 25 y 26. En una modalidad, las válvulas de control 17 y 18 comprenden canales para bombas. Los canales para bomba 19 y 23 son conectados a compuertas de salida de las válvulas de control de flujo de bomba 27 y 28 respectivamente. Las válvulas de control de flujo de bomba 27 y 28 son válvulas direccionales normales con una compuerta común, una compuerta normalmente abierta y una compuerta normalmente cerrada. Las compuertas comunes de las válvulas de control de flujo de bomba 27 y 28 son conectadas a las bombas 29 y 30, que son capaces de aspirar y surtir líquidos. En una modalidad, las bombas 29 y 30 son cada una independientemente una bomba de jeringa. Sin embargo, otros tipos de bombas pueden ser usadas. Ejemplos no limitantes incluyen bombas peristálticas y bombas de diafragma. En una modalidad, las compuertas de entrada de las válvulas de control de flujo de bomba 27 y 28 son conectadas a un depósito de líquido del sistema 31. Cualquier líquido del sistema útil para permitir o ayudar en el desempeño del instrumento de inspección puede ser usado. Ejemplos no limitantes incluyen agua, solución salina o solución salina de pH regulado de fosfato. En una modalidad, las válvulas de control 17 y 18 comprenden canales para retener fluido limpiador para lavar y limpiar el sistema. Los canales de lavado 20 y 24 son ambos acoplados de manera fluida entre sí y una bomba de lavado 32 en la unión en forma de T 33. LA bomba de lavado 32 es acoplada de manera fluida a una compuerta común de una válvula de selección de líquidos de lavado tridireccional 34 que comprende una compuerta común, una compuerta normalmente abierta y una compuerta normalmente cerrada. La compuerta normalmente abierta de la válvula 34 es conectada al depósito 31 del líquido del sistema vía el canal 35 y la compuerta normalmente cerrada de la válvula 34 es conectada al depósito de líquido limpiador 37 vía el canal 36. La bomba de lavado 32 en esta modalidad es una bomba de diafragma capaz de bombear rápidamente líquidos limpiadores a las válvulas de control 17 y 18. Otros ejemplos no limitantes de bombas apropiadas que pueden ser usadas para bombear líquidos a través del sistema incluyen peristáltica, de jeringa y un depósito presurizado. En una modalidad, las válvulas de control 17 y 18 comprenden canales para desperdicio. Los canales de desperdicio 21 y 25 son ambos acoplados fluidamente entre sí y un depósito de desperdicios 13 en una unión en forma de T 38. En una modalidad, las válvulas de control 17 y 18 comprenden canales para controlar la presión en los canales. Los canales presurizados 22 y 26 son ambos acoplados fluidamente entre sí y un depósito de líquido del sistema presurizado 39 en una unión en forma de T 40. El depósito 39 de líquido del sistema presurizado es presurizado vía una fuente de presurización de aire controlada cuidadosamente 41. Fuentes de presión de aire controladas útiles en la presente invención incluyen un tanque de aire comprimido regulado o un compresor de aire regulado. Alternativamente, la fuente de presión puede venir del instrumento de inspección 1 si tal fuente está disponible. Sin embargo, los canales presurizados 22 y 26 son preferidos cuando se van a tomar mediciones muy precisas en inyectar muestras con las bombas 29 y 30 incrementaría la proporción de señal a ruido. Una mejora proporcionada por las válvulas de control 17 y 18 es la capacidad de lavar rápidamente las lineas 15 y 16 con un liquido limpiador 37. Un compuesto pegajoso es cualquier compuesto que permanece en las lineas del sistema que tiene el potencial de contaminar muestras futuras. Frecuentemente, los compuestos pegajosos, por ejemplo, compuestos tales como esfingosina-l-fosfato (S1P) , endotelina-1 (ET-1) y rodamina, están involucrados cuando se usan instrumentos de inspección, tales como citómetros de flujo. Por consiguiente, es esencial limpiar las lineas del sistema entre inspecciones de muestras con una solución limpiadora con el fin de eliminar cualquier arrastre que pueda existir de muestras previas. Los líquidos de sistema típicos tales como solución salina, en comparación con líquidos limpiadores, son propensos a dejar atrás compuestos pegajosos en las líneas del sistema. Esto provoca contaminación para cientos de muestras que son analizadas después de eso. Otro elemento de las válvulas de control 17 y 18 es que permiten que el instrumento de inspección 1 retrolave la muestra restante en la línea de inferíase 2 de regreso a través del aparato al desperdicio. A medida que la muestra viaja a través de la línea de inferíase 2 y las líneas 15 y 16, se vuelve más largo debido a que la muestra en el centro del tubo viaja más rápido que en la superficie. Esto frecuentemente conduce a una situación en donde toda la muestra nunca es plenamente inyectada al instrumento de inspección. Esto se puede llevar a cabo al conectar la linea 2 a una de las lineas 15 y 16 y también conectar las válvulas de control 17 y 18 a canales de desperdicio 21 y 25. En donde se usa un citómetro de flujo como el instrumento de inspección, puede profundizar la linea de entrada 2, haciendo la conexión a una linea de desperdicios que está abierta a la presión atmosférica. Esto frecuentemente provoca un flujo rápido de liquido de limpieza del instrumento de inspección 1 a través de la linea de inferíase 2. Este aspecto hace posible llevar a cabo la inspección de muestras a alta velocidad debido a que * supera el problema de esperar periodos de tiempo extensos para que la muestra se despeje de la tubería. Otro aspecto de las válvulas de control 17 y 18 es que permiten la capacidad de cargar volúmenes de muestra grandes utilizando las jeringas 29 y 30. Los volúmenes de muestra grandes pueden luego ser inyectados con alta precisión utilizando el líquido 39 del sistema presurizado. Esto es particularmente importante a medida que el tamaño de la jeringa se incrementa. A medida que el tamaño de la jeringa se incrementa, la velocidad de flujo mínimo que una bomba de jeringa puede sostener sin fluctuaciones también se incrementa. A medida que la velocidad de flujo se incrementa, el instrumento de inspección (particularmente un citómetro de flujo) pierde precisión en la medición de las muestras. La presente invención descrita permite a aquel experimentado en el arte cargar una muestra grande, tal como 1 mi, 2 mi o aún mayor y luego inyectarla muy lentamente permitiendo la misma precisión encontrada en la inyección de tubo manual, pero con la ventaja adicional de plena automatización. En otra modalidad, el recipiente de liquido de sistema presurizado 39 puede ser reemplazado con una bomba de jeringa de alta resolución. Bombas de jeringa de alta resolución son capaces de suministrar volúmenes más grandes de liquido a una velocidad de flujo muy baja. La inserción de una bomba de jeringa de alta resolución puede ser llevada a cabo mediante el reemplazo del recipiente de liquido del sistema presurizado 39. La invención descrita en la presente proporciona la capacidad de alimentar uno o más reactivos al recipientes de muestras antes de que sean administradas al sistema al utilizar un brazo-toma de muestras separado que comprende su propia jeringa para aspirar o surtir. Tal elemento impediría el acarreo o arrastre de recipientes de muestras de regreso al reactivo si el brazo de auto-toma de muestras que lleva un reactivo surte aquel reactivo a las cavidades por encima de la superficie del líquido de la muestra. En una modalidad, el auto-tomador de muestras comprende múltiples brazos, tal como un auto-tomador de muestras que comprende 2, 3 o 4 brazos. En otra modalidad, el auto-tomador de muestras comprende 2 brazos.

En donde se utilizan células como el reactivo y se usa un solo brazo de auto-tomador de muestras para tomar células a la vuelta, mezclar e inyectar y luego ir de regreso a la célula, es posible que el acarreo o arrastre de partes no lavadas de la muestra de regreso a las células pueda ocurrir. Un ejemplo en donde múltiples reactivos pueden ser agregados a la muestra antes de la inyección en el instrumento comprende tener compuestos agonistas sobre una cavidad de placa y agregar células a la cavidad antes de que sean inyectadas al instrumento de inspección. Otras combinaciones de reactivos y muestras, como se describe en la presente, pueden ser sustituidos por agonistas y células. Otro ejemplo comprende colocar un modulador alostérico u otros compuestos antagonistas en una cavidad de plata, agregar células de un frasco de reactivos y luego finalmente agregar otro compuesto agonista a la cavidad. Luego la mezcla puede ser inyectada al citómetro de flujo. Cada muestra puede tener diferentes tipos y números variados de reactivos agregados a la misma. En una modalidad, la alimentación de primeros y segundos reactivos' y opcionalmente reactivos adicionales se lleva a cabo con brazos auto-tomadores de muestras separados. En algunas modalidades, los canales que comprenden el sistema son fabricados con tubería de polímero que tiene un diámetro interno de aproximadamente 0.51 mm (0.02 pulgadas) . En otra modalidad, se utiliza material de PSA ( Per fluoroalcoxi ) para minimizar cualesquier cuestiones asociadas con la permeabilidad del gas. Los canales conectados al depósito 31 del liquido del sistema son fabricados comúnmente con tubería que tiene diámetro interno más grande, tal como de aproximadamente 1.59 mm (1/16 pulgadas) o aproximadamente 2.39 mm (0.094 pulgadas) . En otra modalidad, los bucles de retención 15 y 16 son fabricados de tubería de diámetro interno más grande si la válvula de comunicación 3 y válvula de control 17 y 18 están en proximidad física con el fin de reducir la longitud requerida de tubería. En una modalidad, una unidad de control 42 es conectada eléctricamente a la válvula de comunicación 3, dispositivo de colocación 8, bomba de lavado 32, válvula de flexión del líquido de lavado 34, válvulas de control 17 y 18, válvulas de control de flujo de la bomba 27 y 28 y bombas 19 y 30. La unidad de control 42 es implementada como una computadora capaz del control dependiente de todos los dispositivos anexados. La unidad de control 22 puede también ajusfar la presión 41 de suministro de aire vía un regulador ajustable. La presión de suministro de aire puede también ser controlada vía un regulador de presión manual. En una modalidad, la presión de suministros de aire 41 es ajustada a un valor ligeramente más alto que la contrapresión generada por el instrumento de inspección 1. Por ejemplo, la presión de suministro de aire puede ser ajustada a entre aproximadamente 0.5 y aproximadamente 2.0 psi sobre la contrapresión. La operación del aparato anterior que tiene la configuración descrita anteriormente será ahora explicada en algunas modalidades no limitantes. El control de la operación es efectuado preferiblemente de acuerdo con comandos en la unidad de control 42. Inicialmente, se efectúa una operación para llenar todos los canales del sistema (excepto para los canales de superficie 21 y 25) con liquido del sistema. Se ordena que el dispositivo de colocación 8 haga mover la sonda 7 a la estación de lavado 10. La válvula 27 de control de flujo de la bomba es conmutada para comunicar el liquido del sistema del depósito 31 a la bomba 29. Después de esto, la bomba 29 es llenada con liquido del sistema por orden de la unidad de control 42. Luego la válvula 27 de control de flujo de la bomba es conmutada para comunicar el liquido del sistema de la bomba 29 al canal 19 de la bomba. La válvula 3 es conmutada en posición para comunicar líquido entre el canal de entrada 4 y el bucle de retención 15. Enseguida, la válvula de control 17 es conmutada para comunicar el líquido entre el bucle de retención 15 y el canal de la bomba 19. Se ordena que la bomba 29 expulse completamente el líquido del sistema al canal 19 de la bomba y el bucle de retención 15 purga efectivamente el aire y llena ambos con el líquido del sistema. Luego la válvula 17 es conmutada para comunicar el líquido entre el bucle de retención 15 y el canal de lavado 20, que se conecta a la bomba de lavado 32. La válvula 34 de selección de líquidos de lavado es conmutada para acoplarse fluidamente a la bomba de lavado 32 y el depósito de líquido limpiador 37 vía el canal de líquido limpiador 36. La bomba de lavado 32 es luego encendida para llenar el canal 36 de líquido limpiador con un líquido limpiador. Luego la bomba de lavado 32 es encendida para llenar el canal 36 de líquido limpiador con un líquido limpiador. Cualquier líquido limpiador capaz de remover residuos de muestras y proporcionar una superficie sin contaminar por los canales puede ser seleccionado. Algunos ejemplos no limitantes de líquidos limpiadores incluyen solventes tales como etanol, dimetilsulfóxido (DMSO) o un detergente. La válvula 34 de selección de líquidos de lavado es luego conmutada para acoplar fluidamente la bomba de lavado 32 y el depósito 31 del depósito del sistema vía el canal 35. El líquido del sistema viene a la bomba de lavado 32, el canal de lavado 20, válvula de control 17, bucle de retención 15, válvula de conmutación 3, canal de entrada 4 y sonda 7 con líquido del sistema. Luego la bomba de lavado 32 es apagada después de un retardo fijo suficiente para llenar de componentes mencionados anteriormente con el líquido del sistema. Si el depósito 39 del líquido del sistema presurizado es conectado a la válvula de control 17, entonces la válvula 17 es conmutada para comunicar el líquido del sistema presurizado del depósito 39 al bucle de retención 15 vía el canal presurizado 22. Después de un retardo para llenar el canal presurizado 22 con líquido del sistema, la válvula de control 17 es conmutada para comunicar el líquido en el bucle de retención 15 al canal de desperdicio 21. Con el fin de llenar la segunda rama del sistema con líquido del sistema, la válvula 3 es conmutada en posición para comunicar el líquido entre el canal de entrada 4 y el bucle de retención 16. La secuencia de eventos descrita anteriormente para la primera rampa del sistema es luego repetida para las partes equivalentes de la segunda rama del sistema. El estado resultante del sistema es con la sonda 7 y la estación de lavado 10 y todos los canales del sistema (excepto los canales de desperdicios 21 y 25) llenos con líquidos del sistema. En otra modalidad, el proceso de llenado de líneas con líquidos del sistema puede además ser practicado con ramas adicionales. Las Figuras 2A y 2B muestran otra modalidad de la presente invención y pretenden ser no limitantes en su alcance. Las Figuras 2A y 2B muestran una secuencia de etapas para evaluar una o más muestras de recipientes de muestra 9. En la etapa 43, que es el punto de partida de la Figura 2A, un ciclo de lavado 68 (descrito adicionalmente en la Figura 3) es ejecutado en la rama 5. El ciclo de lavado 68 asegura que la rama 5 ha sido lavada y está llena con líquido del sistema. En algunas modalidades, puede ser benéfico agregar un reactivo a los recipientes de muestra 9 antes de que la muestra sea alisada. Ejemplos de reactivos no limitantes incluyen agonistas, antagonistas, moduladores, tintes, manchas, células y perlas. En donde un usuario selecciona agregar un reactivo a la muestra en la etapa 44, un ciclo de adición de reactivo 94 es ejecutado en la rama 5 en la etapa 45. En la etapa 46, la primera muestra es cargada al bucle de retención 15 al ejecutar la mezcla y carga del siguiente ciclo de muestra 110 (descrito adicionalmente en la Figura 5) en la rama 5. En la etapa 47, la válvula de comunicación 3 es conmutada para acoplar fluidamente el bucle de retención 15 y el canal de interfase 2. Dos procesos concurrentes e independientes son luego ejecutados. El primer proceso comprende la etapa 48 y el segundo proceso comprende las etapas 49 a 53. En el primer proceso, una muestra es inyectada al instrumento de inspección 1 y el canal de interfase 2 es lavado en la etapa 48 al hacer correr el ciclo 128 de línea de interfase de muestra y lavado (descrito adicionalmente en la Figura 6A) en la rama 5. El segundo proceso determina primero si hay más muestras dejadas a ser procesadas en la etapa 49. Si todas las muestras han sido procesadas, el segundo proceso termina al avanzar a la etapa 54. De otra manera, la rama 6 es lavada en la etapa 50 al ejecutar un ciclo de lavado 81 (descrito adicionalmente en la Figura 3) . Si el usuario selecciona agregar un reactivo a la muestra en la etapa 51, se ejecuta un ciclo 102 de adición de reactivo (descrito adicionalmente en la Figura 4) en la rama 6 de la etapa 52. En la etapa 53, la siguiente muestra es cargada al bucle de retención 16 al ejecutar el siguiente ciclo de muestra de mezcla y carga 119 (descrito adicionalmente en la Figura 5) en la rama 6. Después de la consumación de ambos procesos, en la etapa 54, se hace una verificación en la etapa 55, mostrado en la Figura 2B, para determinar si todas las muestras han sido procesadas. Si no permanecen más muestras, entonces la ejecución continua en la etapa 65. Si todavía hay muestras a ser procesadas, la válvula de comunicación 3 es conmutada para acoplar fluidamente el bucle de retención 16 y el canal de interfase 2 en la etapa 56. Luego, dos procesos concurrentes e independientes son ejecutados. El primer proceso comprende la etapa 87 y el segundo proceso comprende las etapas 58 a 62. El primer proceso inyecta muestra al instrumento de inspección 1 y lava el canal de interfase 2 en la etapa 57 al ejecutar el ciclo 137 de línea de interfase de inyección de muestra y lavado (descrito adicionalmente en la Figura 6B) en la rama 6. El segundo proceso determina primero si hay cualesquier más muestras dejadas a ser procesadas en la etapa 58. Si todas las muestras han sido procesadas, entonces el segundo proceso termina al avanzar a la etapa 63. De otra manera, la rama 5 es lavada en la etapa 59 al ejecutar un ciclo de lavado 68. Si el usuario seleccionó agregar un reactivo a la muestra en la etapa 60, un ciclo 94 de adición de reactivo es ejecutado en la rama 5 en la etapa 61. En la etapa 62, la siguiente muestra es cargada al bucle de retención 15 al ejecutar el siguiente ciclo de mezcla y carga de muestras 110 (descrito adicionalmente en la Figura 5) en la rama 5. Después de la consumación de ambos procesos en la etapa 63 se efectúa una verificación en la etapa 64 para determinar si todas las muestras han sido procesadas. Si no permanecen más muestras, la ejecución continua en la etapa 65, de otra manera, la ejecución continua en la etapa 47 descrita anteriormente. En la etapa 65, la rama 5 es lavada al ejecutar el ciclo de lavado 68. Luego, la rama 6 es lavada al ejecutar el ciclo de lavado 81 en la etapa 66. El procesamiento de muestra se consuma en la etapa 67 con el sistema en estado estable para iniciar el procesamiento de otro conjunto de muestras con el reemplazo de los recipientes de muestras 9. La Figura 3 muestra otra modalidad de la presente invención y se propone no ser limitante en su alcance. La Figura 3 muestra una secuencia de etapas en donde ambas ramas del sistema descritos en la presente son lavadas. El ciclo de lavado inicial 68 comienza al hacer mover la sonda 7 a la estación de lavado 10 en la etapa 69. En la etapa 70, la válvula de control 17 es conmutada para conectar el canal de lavado 20 al bucle de retención 15. En algunas modalidades, las muestras a ser introducidas al instrumento de inspección 1 pueden ser hidrofóbicas y propensas a pegarse a las paredes del canal. Frecuentemente es necesario lavar los canales con un liquido limpiador para reducir probabilidad de contaminación cruzada de una muestra a la siguiente. Cualquier liquido limpiador capaz de remover residuos de muestras y proporcionar una superficie no contaminada por los canales puede ser seleccionado. Algunos ejemplos no limitantes de líquidos limpiadores incluyen solventes tales como etanol, dimetilsulfóxido (DMSO) o un detergente. En la etapa 71, la válvula 34 de selección de líquidos de lavado es conmutada para conectar el canal 36 de líquido limpiador y bomba de lavado 32. La bomba de lavado 32 es encendida en la etapa 72 para bombear fluidos limpiadores a las válvulas de control. Un retardo identificado por el usuario de XI segundos es introducido en la etapa 73 para permitir que el líquido limpiador sea ondeado a través de la válvula 17, bucle de retención 15, válvula de conmutación 3, canal de entrada 4 y sonda 7 a la estación de lavado 10. La cantidad de tiempo real necesaria puede variar dependiendo del sistema que es usado y la longitud de los canales. Aquel de habilidad ordinaria en el arte, guiado por la revelación proporcionada en la presente, puede determinar cuánto tiempo será requerido para que los líquidos limpiadores sean bombeados en todo el sistema. Con la bomba de lavado 32 todavía en operación, la válvula de selección de liquido de lavado 34 es conectada para conectar el canal 35 a la bomba de lavado 32, como se muestra en la etapa 74. Esta acción establece un flujo de liquido del sistema del depósito 31 del liquido del sistema a través de la bomba de lavado 32. Un retardo especificado por el usuario de Un retardo especificado por el usuario de Y 1 segundos es introducido en la etapa 75 para permitir que el liquido del sistema sea bombeado completamente a través de la válvula 17, bucle de retención 15, válvula de comunicación 3, canal de entrada 4 y sonda 7 a la estación de lavado 10, lavando asi todo el liquido limpiador restante. La cantidad de tiempo real necesaria puede variar dependiendo del sistema que es usado y la longitud de los canales. Aquel de habilidad ordinaria en el arte, guiado por la revelación proporcionada en la presente, puede determinar cuánto tiempo será requerido para lavar los líquidos limpiadores. La bomba de lavado 32 es apagada en la etapa 76 y la válvula de control 17 es conmutada para conectar el canal de la bomba 19 y bucle de retención 15 en la etapa 77. En la etapa 78, la válvula 17 de control del tubo de la bomba es conmutada para conectar el canal de la bomba 19 y la bomba 29. Luego todo el fluido es expulsado de la bomba 29 en la etapa 79. La etapa 80 muestra la consumación del ciclo de lavado 68. El ciclo de lavado 81 de la rama 6 del sistema es el mismo como el ciclo de lavado 78 para la rama 5 con todos los elementos de la rama 5 reemplazados con elementos correspondientes de la rama 6. El ciclo de lavado 81 es ilustrado en las etapas 82 a 93. El ciclo de lavado iniciado 81 comienza al hacer mover la sonda 7 a la habitación de lavado 10 en la etapa 82. En la etapa 83, la válvula de control 18 es conmutada para conectar el canal de lavado 24 al bucle de retención 16. Como se afirma previamente con respecto al ciclo de lavado 68, algunas modalidades involucran muestras introducidas al instrumento de inspección 1 que son hidrofóbicas y propensas a pegarse a las paredes del canal. Líquidos limpiadores similares pueden ser usados con respecto al ciclo de lavado 81 que son útiles con respecto a, ciclo de lavado 68. En la etapa 84, la válvula 34 de selección de líquidos de lavado es conmutada para conectar el canal de líquidos limpiador 36 y la bomba de lavado 32. La bomba de lavado 32 es luego encendida en la etapa 85 para bombear fluidos limpiadores a las válvulas de control. Un retardo especificado por el usuario de C 2 segundos es introducido en la etapa 86 para permitir que el líquido limpiador sea bombeado completamente a través de la válvula 18, bucle de retención 16, válvula de comunicación 3, canal de entrada 4 y sonda 7 a la estación de lavado 10. La cantidad de X 2 segundos usada en la etapa 86 puede ser la misma o diferente de la cantidad y tiempo usada en la etapa 73 para el ciclo de lavado 68 en la rama 5.

Aquel de habilidad ordinaria en el arte, guiado por la revelación proporcionada en la presente, puede determinar cuánto tiempo será requerido para que los líquidos limpiadores sean bombeados a través del sistema. Con la bomba de lavado 32 todavía en operación, la válvula 34 de selección de líquido de lavado es conectada para conectar el canal 35 a la bomba de lavado 32, como se muestra en la etapa 87. Esta acción establece un flujo de líquido del sistema del depósito de líquido del sistema 31 a través de la bomba de lavado 32. Un retardo especificado para el usuario de Y 2 segundos es introducido en la etapa 88 para permitir que el líquido del sistema sea bombeado completamente a través de la válvula 18, bucle de retención 16, válvula de comunicación 3, canal de entrada 4 y sonda 7 a la estación de lavado 10, removiendo todo el líquido limpiador restante. La cantidad de tiempo real necesaria puede variar dependiendo del sistema usado y la longitud de los canales. La cantidad de Y 2 segundos usados en la etapa 88 puede ser la misma o diferente de la cantidad de tiempo usada en la etapa 75 para el ciclo de lavado 68 en la rama 5. Aquel de habilidad ordinaria en el arte, guiado por la revelación proporcionada en la presente, puede determinar cuánto tiempo será requerido para lavar los líquidos limpiadores . La bomba de lavado 32 es apagada en la etapa 89 y la válvula de control 18 es conmutada para conectar el canal 23 de la bomba y bucle de retención 16 en la etapa 90. En la etapa 91, la válvula 28 de control de flujo de la bomba es conmutado para conectar el canal 23 de la bomba y la bomba 30. Luego todo el fluido es expulsado de la bomba 30 en la etapa 92. La etapa 93 muestra la consumación del ciclo de lavado 81. La Figura 4 muestra otra modalidad de la presente invención y pretende ser no limitante en su alcance. En la Figura 4, una secuencia de etapas para agregar reactivos en ambas ramas del sistema es descrita. El ciclo 94 de adición del reactivo inicia al conmutar la válvula 17 de control para conectar el bucle de retención 15 y canal 19 de la bomba en la etapa 95. Luego, en la etapa 96, la válvula 27 de control de flujo de la bomba es conmutada para conectar el canal 19 de la bomba y la bomba 29. Luego la sonda 7 es movida a un frasco 11 de reactivo seleccionado por el usuario en la etapa 97. Un volumen de reactivo es aspirado a la sonda 7 y el canal de entrada 4 al emitir un comando de aspirar a la bomba 29 en la etapa 98. El volumen de reactivo aspirado a la sonda y la sonda 7 y canal de entrada 4 es seleccionado por el usuario del sistema y puede ser cualquier cantidad necesaria para completar las pruebas relevantes. Luego la sonda 7 es movida del frasco de reactivos al excipiente de muestra de la siguiente muestra a ser cargada en la etapa 99. Luego el reactivo es surtido a la muestra del canal de entrada 4 al emitir un comando de surtido a la bomba 29 en la etapa 100. El ciclo 94 de adición de reactivo es mostrado completo en la etapa 101. El ciclo 102 de adición de reactivo para la rama 6 del sistema es el mismo como el ciclo 94 de adición de reactivo para la rama 5 con todos los elementos de la rama 5 reemplazados con elementos correspondientes de la rama 6. El ciclo 102 de adición de reactivo es mostrado en las etapas 103 a 109. El ciclo 102 de adición de reactivo comienza al conmutar la válvula de control 18 para conectar el bucle de retención 16 y el canal 23 de la bomba en la etapa 103. Luego, en la etapa 104, la válvula 28 de control de flujo de bomba es conmutada para conectar el canal 23 de la bomba y la bomba 30. Luego la sonda 7 es movida a un frasco 11 de reactivo seleccionado por el usuario en la etapa 105. Un volumen de reactivo es aspirado a la sonda 7 y el canal de entrada 4 al emitir un comando de aspirar a la bomba 30 en la etapa 106. El volumen de reactivo aspirado a la sonda y la sonda 7 y el canal de entrada 4 es seleccionado por el usuario del sistema y puede ser cualquier cantidad necesaria para consumar las pruebas relevantes. La sonda 7 es luego movida en el frasco de reactivos al recipiente de muestras de la siguiente muestra a ser cargada en la etapa 107. Luego, el reactivo es surtido a la muestra del canal de entrada 4 al emitir un comando de surtir a la bomba 30 en la etapa 108. El ciclo 102 de adición de reactivo es mostrado completo en la etapa 109.

La Figura 5 muestra otra modalidad de la presente invención y pretende ser no limitante en su alcance. En la Figura 5, se describe una secuencia de etapas para mezclar y cargar la siguiente muestra sobre ambas ramas en el sistema. Para algunos tipos de muestras, tales como células vivas o perlas que se pueden asentar en el fondo de los recipientes de muestra 9, puede ser deseable mezclar la muestra varias veces antes de aspirarla al bucle de retención 70. El ciclo 110 de mezcla y carga de la siguiente muestra comienza al conmutar la válvula de control 17 para conectar el bucle de retención 15 y el canal 19 de la bomba en la etapa 111. En la etapa 112, la válvula 27 de control de flujo de bomba es conmutada para conectar el canal 19 de la bomba y la bomba 29. La sonda 7 es luego movida a un recipiente de muestras 9 de la siguiente muestra a ser cargada en la etapa 113. Un volumen de mezcla de muestra definida por el usuario es aspirado en la sonda 7 y el canal de entrada 4 al emitir un comando de aspirar a la bomba 29 en la etapa 114. Luego la muestra es surtida de regreso al recipiente de muestras 9 al emitir un comando de surtir a la bomba 19 en la etapa 115. El usuario del sistema es apto de definir cualquier número de ciclos de mezcla necesarios para consumar las pruebas deseadas. Si el número definido por el usuario de los ciclos de mezcla no ha sido consumado en la etapa 116, entonces la ejecución se repite de la etapa 114. De otra manera, un volumen de muestra definido por el usuario y volumen muerto de canal de entrada es aspirado al bucle de retención 15 con la bomba 29 en la etapa 117. El ciclo 110 de mezcla y carga de la siguiente '¦ muestra es mostrado como completo en la etapa 118. El ciclo 119 de mezcla y carga de la siguiente muestra para la rama 6 del sistema es el mismo como el ciclo 110 de la siguiente muestra para la rama 5 con todos los elementos de la rama 5 reemplazados con elementos correspondientes de la rama 6. El ciclo 119 de mezcla y carga de la siguiente muestra es registrado en las etapas 120 a 127. El ciclo 119 de mezcla y carga de la siguiente muestra comienza al conmutar la válvula de control 18 para conectar el bucle de retención 116 y el canal 23 de bomba en la etapa 120. En la etapa 121, la válvula 28 de control de flujo de la bomba es conmutada para conectar el canal 23 de la bomba y la bomba 30. Luego, la sonda 7 es movida a un recipiente 9 de muestra de la siguiente muestra a ser cargada en la etapa 122. Un volumen de mezcla de muestra definido por el usuario es aspirado a la sonda 7 y canal de entrada 4 al emitir un comando de aspirar a la bomba 30 en la etapa 123. Luego la muestra es surtida de regreso al recipiente de muestras 9 al emitir un comando de surtir a la bomba 30 en la etapa 124. El usuario del sistema es apto de definir cualquier número de ciclos de mezcla necesarios para consumar las pruebas deseadas. Si el número definido por el usuario del ciclo de mezclas no ha sido consumado en la etapa 125, entonces la ejecución se repite desde la etapa 123. De otra manera, un volumen de muestra definido por el usuario y volumen muerto de canal de entrada es aspirado al bucle de retención 16 con la bomba 30 en la etapa 126. El ciclo 129 de mezcla y carga de la siguiente muestra es mostrado completo en la etapa 127. Las Figuras 6A y 6B muestran otra modalidad de la presente invención y no pretende ser limitante en su alcance. En la Figura 6A, se describe una secuencia de etapas para inyectar la muestra y lavar la linea de interfase 2 en ambas ramas del sistema. El ciclo de inyectar muestra y lavar linea de interfase comienza en la etapa 128. Después que una muestra es inyectada al instrumento de inspección 1, el tiempo en el cual toma a la muestra recorrer el canal de interfase 2 puede ser significativo. Esto es especialmente cierto si el instrumento de inspección 1 es un citómetro de flujo, en donde las velocidades pueden ser tan lentas como de aproximadamente 1 µ?/s. Para reducir el tiempo para inyección de muestra, un volumen de refuerzo definido por el usuario correspondiente al volumen interno del canal 2 de interfase es expulsado del bucle de retención 15 al instrumento de inspección 1 a alta velocidad en la etapa 129. Por ejemplo, la velocidad a la cual la muestra es inyectada al instrumento de inspección puede ser tan alta como de aproximadamente 10 µ?/s o mayor. En otra modalidad, la velocidad a la cual la muestra es inyectada al instrumento de inspección puede ser tan alta como de aproximadamente 50 µ?/s o mayor. En todavía otra modalidad, la velocidad a la cual la muestra es inyectada al instrumento de inspección puede ser tan alta como de aproximadamente 100 µ?/s o mayor. Esto trae efectivamente el frente del tapón de muestra al instrumento de inspección 1 en una cantidad de tiempo corta. La inyección puede ser realizada ya sea con presión o sin presión. En la etapa 130, si el usuario no selecciona usar una administración de muestra reutilizada, entonces la muestra es inyectada al instrumento de inspección 1 al surtir un volumen de muestra definido por el usuario a la bomba 29 a velocidad normal en la etapa 131. De otra manera, las etapas 132 y 133 son ejecutadas. En la etapa 132, la válvula de control 17 es conectada para conectar el bucle de retención 15 y canal presurizado 22. El usuario puede especificar un retardo suficiente para inyectar la muestra al instrumento de inspección en la etapa 133. En la etapa 134, la válvula de control 27 es conectada para conectar el bucle de retención 15 y canal de referencia 21. El usuario puede especificar un retardo de limpieza en la etapa 135 para permitir la contrapresión del instrumento de inspección 1 para retrolavar el canal de inferíase 2 al depósito de desperdicio 13. El ciclo 128 de inyectar muestra y lavar línea de interfase es consumado como se muestra en la etapa 136. La Figura 6B muestra el ciclo 137 de inyectar muestra y lavar linea de interfase para la rama 6 del sistema y es el mismo como el ciclo 128 de inyectar muestra y lavar linea de interfase para la rama 5 con todos los elementos de la rama 5 reemplazados con elementos correspondientes de la rama 6. E ciclo 137 de inyectar muestra y lavar linea de interfase es ilustrado en las etapas 138 a 145. Un volumen de refuerzo definido por el usuario correspondiente al volumen interno del canal de interfase 2 es expulsado del bucle de retención 16 al instrumento de inspección 1 a alta velocidad en la etapa 138. Por ejemplo, la velocidad a la cual la muestra es inyectada al instrumento de inspección puede ser tan alta como de aproximadamente 10 µ?/s o mayor. En otra modalidad, la velocidad a la cual la muestra es inyectada al instrumento de inspección puede ser tal alta como de aproximadamente 50 µ?/s o mayor. En todavía otra modalidad, la velocidad a la cual la muestra es inyectada al instrumento de inspección puede ser tan alta como de aproximadamente 100 µ?/s o mayor. Esto trae efectivamente el frente de tapón de muestra al instrumento de inspección 1 en una cantidad corta de tiempo. La inyección puede ser realizada ya sea con presión o sin presión. En la etapa 139, si el usuario no seleccionó usar una administración de muestra presurizada, entonces la muestra es inyectada al instrumento de inspección 1 al surtir un volumen de muestra definido por el usuario con la bomba 30 a velocidad normal en la etapa 140. De otra manera, las etapas 141y 142 son ejecutadas. En la etapa 141, la válvula de control 18 es conmutada para conectar el bucle de retención 16 y canal presurizado 26. El usuario puede especificar un retardo suficiente para inyectar la muestra al instrumento de inspección en la etapa 142. En la etapa 143, la válvula 18 de control es conmutada para conectar el bucle de retención 16 y el canal de desperdicio 25. El usuario puede especificar un retardo de limpieza en la etapa 144 para permitir la contrapresión del instrumento de inspección 1 para retrolavar el canal de interfase 2 al depósito de desperdicio 13. El ciclo 137 de inyectar muestra y lavar la linea de interfase es consumado como se muestra en la etapa 145. El dispositivo de suministro de muestras de alta velocidad regulado en la presente es útil para alimentar muestras a cualquier tipo de instrumento de inspección. Preferiblemente, el dispositivo revelado en la presente es usado para alimentar muestras a un citómetro de flujo. Los citómetros de flujo son herramientas analíticas bien conocidas que son aptas de analizar varias miles de partículas cada segundo y pueden separar y aislar activamente partículas y tienen propiedades especificadas. Por ejemplo, el dispositivo de suministro de muestras de alta velocidad puede ser usado en citómetros de flujo descritos en las Patentes Estadounidenses Nos. 6,713,019; 5,824,269; 5,367,474; 5,135,502 y 4,702,598; todas las cuales son incorporadas en la presente por referencia en su totalidad. Todas las patentes incorporadas por referencia en la presente son incorporadas por referencia solamente con respecto a las modalidades particulares, materiales, procesos de manufactura y métodos de uso descritos en la presente. Estas patentes no serán consideradas incorporadas por referencia a la extensión de que cualquiera de estas patentes expresa una opinión o presenta cualquier representación, caracterización o definición (ya sea expresamente o por implicación) que sea inconsistente con las opiniones, representaciones, caracterizaciones o definiciones hechas expresamente en la presente . En tanto que lo que se ha descrito en la presente será considerado como modalidades ejemplares y preferidas de la presente invención, otras modificaciones de la invención se harán evidentes para aquellos experimentados en el arte a partir de las enseñanzas en la presente. Por consiguiente, se desea separar en las reivindicaciones adjuntas todas de tales modificaciones a medida que caigan dentro del verdadero espíritu y alcance de la invención. Así, lo que se desea asegurar por el documento de patente es la invención como se define y es diferenciada en las siguientes reivindicaciones.

Claims (30)

1. REIVINDICACIONES 1. Un método para el análisis de muestras multiplexado, caracterizado porque comprende: (a) obtener roboticamente una primera muestra de liquido de la primera de una pluralidad de fuentes de muestras; (b) alimentar la primera muestra de liquido a través de una primera linea a un instrumento para análisis de la muestra; (c) obtener robóticamente una segunda muestra de liquido de la segunda de una pluralidad de fuentes de muestras; (d) alimentar la segunda muestra de liquido a través de una segunda linea a un instrumento para su análisis. (e) limpiar la segunda linea en tanto que la primera linea está alimentando muestra al instrumento y (f) limpiar la primera linea en tanto que la segunda linea está alimentando muestras al instrumento.
2. 2. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque comprende además: (g) repetir las etapas (a) -(f) para obtener y alimentar múltiples muestras al instrumento de todas de la pluralidad de fuentes de muestras.
3. 3. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el instrumento es un citómetro de flujo.
4. 4. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque las primeras y segundas muestras de líquido son seleccionadas independientemente del grupo que consiste de compuestos químicos, anticuerpos, perlas, células vivas o células fijas.
5. 5. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque comprende además las etapas de: alimentar un primer reactivo a la primera muestra de líquido antes de que la muestra sea alimentada al instrumento y alimentar un segundo reactivo a la segunda muestra de líquido antes de que la muestra sea alimentada al instrumento.
6. 6. El método de conformidad con la reivindicación 5, caracterizado porque la administración de los primeros y segundos reactivos es efectuada con un brazo auto-tomador de muestras separado.
7. 7. El método de conformidad con la reivindicación 5, caracterizado porque los primeros y segundos reactivos son seleccionados independientemente del grupo que consiste de compuestos químicos, anticuerpos, perlas, células vivas o células fijas.
8. 8. El método de conformidad con la reivindicación 5, caracterizado porque múltiples reactivos son agregados a la muestra antes de que la muestra sea inyectada al instrumento.
9. 9. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque una válvula de control alterna la administración de fluidos de limpieza con la administración de muestra líquida en cada una de las primeras y segundas líneas.
10. 10. El método de conformidad con la reivindicación 9, caracterizado porque la válvula de control proporciona además la administración de presión de aire o presión de líquidos del sistema.
11. 11. El método de conformidad con la reivindicación 9, caracterizado porque la válvula de control proporciona además un canal de desperdicio.
12. 12. Un aparato para la administración de muestras a un instrumento para su análisis, caracterizado porque comprende : una primera y una segunda línea de alimentación de muestra, en donde la primera línea de alimentación de muestra comprende una primera rama de carga e inyección de muestras y la segunda línea de alimentación de muestras comprende una segunda rama de carga e inyección de muestras; un mecanismo de manejo de flujo de fluido que comprende una válvula de conmutación de posición para conectar alternativamente las primeras y segundas líneas de alimentación de muestras al instrumento; por lo menos una línea de suministro de fluido de limpieza para suministrar fluido de limpieza a la primera línea de alimentación de muestras y la segunda línea de alimentación de muestras; por lo menos un canal de entrada de muestras acoplado fluidamente a la primera línea de alimentación de muestras o a la segunda linea de alimentación de muestras mediante la válvula de conmutación de posición y una válvula de selección de líquidos de lavado para alimentar fluidos de limpieza a las primeras y segundas líneas de alimentación de muestras, de tal manera que las muestras y el fluido de limpieza fluyen alternativamente a través de las primeras y segundas líneas de alimentación de muestras.
13. 13. El aparato de conformidad con la reivindicación 12, caracterizado porque la válvula de comunicación de presión comprende una válvula de conmutación de dos posiciones cuadridireccional .
14. 14. El aparato de conformidad con la reivindicación 14, caracterizado porque la válvula de comunicación de posición cambia entre un primer modo y un segundo modo.
15. 15. El aparato de conformidad con la reivindicación 14, caracterizado porque el primer modo de la válvula de comunicación de posición acopla fluidamente la primera línea de alimentación de muestras al instrumento y acopla fluidamente la segunda línea de alimentación de muestras al canal de entrada de muestras.
16. 16. El aparato de conformidad con la reivindicación 14, caracterizado porque el segundo modo de la válvula de conmutación de posición acopla primeramente la primera línea de alimentación de muestras al canal de entrada de muestras y acopla fluidamente la segunda línea de alimentación de muestras al instrumento.
17. 17. El aparato de conformidad con la reivindicación 12, caracterizado porque las ramas de carga e inyección de muestras en las primeras y segundas lineas de alimentación de muestras comprenden ramas de carga e inyección de muestras simétricas .
18. 18. El aparato de conformidad con la reivindicación 12, caracterizado porque la primera linea de alimentación de muestras comprende un primer bucle de retención de muestras y la segunda linea de alimentación de muestras comprende un segundo bucle de retención de muestras.
19. 19. El aparato de conformidad con la reivindicación 18, caracterizado porque comprende una primera válvula de control ubicada dentro de la primera linea de alimentación de muestras y una segunda válvula de control ubicada dentro de la segunda linea de alimentación de muestras.
20. 20. El aparato de conformidad con la reivindicación 19, caracterizado porque cada una de las primeras y segundas válvulas de control comprenden cuatro canales fluidos capaces de acoplar los primeros y segundos bucles de retención de muestras a uno de los cuatro canales de fluidos.
21. 21. El aparato de conformidad con la reivindicación 20, caracterizado porque el aparato comprende una válvula de control de flujo de bomba que comprende una compuerta de salida y en donde uno de los cuatro canales de fluido es conectado a la compuerta preferida de la válvula de control de flujo de la bomba .
22. 22. El aparato de conformidad con la reivindicación 20, caracterizado porque uno de los cuatro canales de fluido es conectado a por lo menos una linea de alimentación de fluido de limpieza .
23. 23. El aparato de conformidad con la reivindicación 20, caracterizado porque el aparato comprende un desecho de desperdicios y en donde uno de los cuatro canales de fluido es conectado al desecho de desperdicios.
24. 24. El aparato de conformidad con la reivindicación 20, caracterizado porque el aparato comprende una fuente de presión de aire controlada y en donde uno de los cuatro canales de fluido es suministrado a la fuente de presión de aire controlado .
25. 25. El aparato de conformidad con la reivindicación 12, caracterizado porque en por lo menos un canal de entrada de muestras comprende un dispositivo de colocación de toma de muestras robótico.
26. 26. El aparato de conformidad con la reivindicación 25, caracterizado porque el dispositivo de colocación comprende uno o dos brazos.
27. 27. El aparato de conformidad con la reivindicación 26, caracterizado porque el dispositivo de colocación comprende dos brazos y el segundo brazo comprende una bomba de transferencia de reactivos.
28. 28. El aparato de conformidad con la reivindicación 27, caracterizado porque la bomba de transferencia de reactivos comprende una bomba de jeringa, una bomba peristáltica o una bomba de diafragma.
29. 29. El aparato de conformidad con la reivindicación 12, caracterizado porque el aparato comprende además un instrumento acoplado fluidamente al mecanismo de maneo de flujo de fluidos por un canal de interfase.
30. 30. El aparato de conformidad con la reivindicación 29, caracterizado porque el instrumento comprende un citómetro de flujo.