MX2008001401A

MX2008001401A - Inhibidores macrociclicos del virus de la hepatitis c

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Publication number: MX2008001401A
Application number: MXMX/A/2008/001401A
Authority: MX
Inventors: Kock Herman Augustinus De; Kenneth Alan Simmen; Karl Magnus Nilsson; Bengt Bertil Samuelsson; Annica Kristina Rosenquistasa; Hans Kristian Wallberg; Bjorn Olof Classon; Carl Erik Daniel Jonsson; Alvarez Susana Ayesa
Original assignee: Alvarez Susana Ayesa; Classon Bjoern Olof; Kock Herman Augustinus De; Joensson Carl Erik Daniel; Medivir Ab; Karl Magnus Nilsson; Rosenquist Aasa Annica Kristina; Bengt Bertil Samuelsson; Kenneth Alan Simmen; Tibotec Pharmaceuticals Ltd; Hans Kristian Wallberg
Priority date: 2005-07-29
Filing date: 2008-01-28
Publication date: 2008-09-26

Abstract

Inhibidores de la replicación del de fórmula (I) (ver fórmula (I)) y los N-óxidos, sales, o estereoisómeros de los anteriores, en los cuales cada línea punteada representa un doble enlace opcional;X es N, CH y cuando X lleva un doble enlace es C;R1 es -OR6, -NH-SO2R7;R2 es hidrógeno, y cuando X es C o CH, R2 también puede ser alquilo de C1-6;R3 es hidrógeno, alquilo de C1-6, alcoxi C1-6alquilo C1-6 o cicloalquilo de C3-7;n es 3, 4, 5, o 6;R4 y R5 tomados junto con elátomo de nitrógeno al cual están unidos forman un sistema anular bicíclico seleccionado de (ver fórmulas) donde dicho sistema anular puede estar sustituido en forma opcional con 1-3 sustituyentes, R6 es hidrógeno;arilo;Het, cicloalquilo de C3-7 sustituido en forma opcional con alquilo de C1-6;o alquilo de C1-6 sustituido en forma opcional con cicloalquilo de C3-7, arilo o con Het;R7 es arilo;Het;cicloalquilo de C3-7 sustituido en forma opcional con alquilo de C1-6;o alquilo de C1-6 sustituido en forma opcional con cicloalquilo de C3-7, arilo o con Het;arilo es fenilo o naftilo, cada uno de los cuales puede estar sustituido en forma opcional con 1-3 sustituyentes;Het es un anillo heterocíclico saturado, parcialmente insaturado o completamente insaturado de 5 o 6 miembros que contiene 1 a 4 heteroátomos seleccionado cada uno en forma independiente de N, O o S, y sustituido en forma opcional con 1-3 sustituyentes;composiciones farmacéuticas que contienen compuesto (I) y procesos para preparar los compuestos (I). También se proporcionan combinaciones biodisponibles de los inhibidores del VHC de fórmula (I) con ritonavir.

Description

INHIBIDORES MACROCICLICOS DEL VIRUS DE LA HEPATITIS C MEMORIA DESCRIPTIVA La presente invención se refiere a compuestos macrocíclicos que poseen actividad inhibidora sobre la replicación del virus de la hepatitis C (VHC). Además se refiere a composiciones que comprenden estos compuestos como componentes activos, al igual que procedimientos para preparar estos compuestos y composiciones. El virus de la hepatitis C es la causa principal de la enfermedad hepática crónica a nivel mundial y se ha convertido en un foco de considerable investigación médica. El VHC es un miembro de la familia Flavivirídae de virus del género hepacivirus, y está estrechamente relacionado con el género flavivirus, que incluye una cantidad de virus implicados en enfermedades humanas, tales como el virus del dengue y el virus de la fiebre amarilla y con la familia de pestevirus animales, que incluye el virus bovino de la diarrea viral (VBDV). El VHC es un virus de sentido positivo, de ARN de cadena única, con un genoma de alrededor de 9600 bases. El genoma comprende las dos regiones no traducidas 5' y 3' que adoptan estructuras secundarias de ARN y un marco de lectura abierto central que codifica una poliproteína única de alrededor de 3,010-3,030 aminoácidos. La poliproteina codifica diez productos génicos que se generan a partir de la poliproteina precursora mediante una serie organizada de rupturas endoproteolíticas co- y post-traduccionales mediadas por proteasas del huésped y virales. Las proteínas estructurales virales incluyen la proteína de nucleocápside central y dos glicoproteínas de envoltura E1 y E2. Las proteínas no estructurales (NS) codifican algunas funciones enzimáticas virales esenciales (helicasa, polimerasa, proteasa), al igual que proteínas de función desconocida. La replicación del genoma viral es mediada por una ARN polimerasa ARN-dependiente, codificada por la proteína no estructural 5b (NS5B). Además de las funciones de polimerasa, se demostró que las funciones de helicasa y proteasa virales, ambas codificadas en la proteína NS3 bifuncional, son esenciales para la replicación del ARN de VHC. Además de la serina proteasa NS3, el VHC también codifica una metaloproteinasa en la región NS2. Luego de la infección aguda inicial, una mayoría de individuos infectados desarrollaron la hepatitis crónica debido a que el VHC se replica preferentemente en hepatocitos, pero no es directamente citopático. En especial, la falta de una respuesta vigorosa de los linfocitos T y la elevada tendencia del virus a mutar parecen promover un grado elevado de infección crónica. La hepatitis crónica puede progresar a la fibrosis hepática produciendo cirrosis, enfermedad hepática terminal y HCC (carcinoma hepatocelular), convirtiéndola en la principal causa de transplante de hígado. Existen 6 genotipos principales del VHC y más de 50 subtipos, que se distribuyen geográficamente de manera diferente. El VHC de tipo 1 es el genotipo predominante en Europa y en Estados Unidos. La heterogeneidad genética extensiva del VHC posee un diagnóstico importante e implicaciones clínicas, que posiblemente expliquen las dificultades para el desarrollo de vacunas y la falta de respuesta a la terapia. La transmisión del VHC se puede producir a través del contacto con sangre contaminada o productos sanguíneos, por ejemplo a continuación de la transfusión de sangre o uso de fármacos intravenosos. La introducción de pruebas diagnósticas usadas en la evaluación de sangre produjo una tendencia descendente en la incidencia del VHC en la post-transfusión. Sin embargo, dado el lento avance a la enfermedad hepática terminal, las infecciones existentes continuarán presentando una carga médica y económica seria durante décadas. Las terapias actuales contra el VHC se basan en interferón-alfa (IFN-a) (pegilado) en combinación con ribavirina. Esta terapia de combinación produce una respuesta virológica sostenida en más del 40% de los pacientes infectados por virus del genotipo 1 y alrededor del 80% de aquellos infectados con los genotipos 2 y 3. Además de la eficacia limitada sobre el VHC de tipo 1 , esta terapia de combinación posee efectos secundarios y es escasamente tolerada en muchos pacientes. La mayoría de los efectos secundarios incluyen síntomas similares a la influenza, anormalidades hematológicas y síntomas neuropsiquíatricos. Por lo tanto, existe la necesidad de tratamientos más efectivos, convenientes y mejor tolerados. Recientemente, dos inhibidores de proteasa del VHC péptidomiméticos ganaron la atención como candidatos clínicos, a saber, BILN-2061 revelado en WO00/59929 y VX-950 revelado en WO03/87092. Una cantidad de inhibidores de proteasa del VHC similares también han sido revelados en la literatura académica y de patentes. Ya es evidente que la administración prolongada de BILN-2061 o VX-950 selecciona mutantes del VHC que son resistentes al respectivo fármaco, denominados mutantes de escape del fármaco. Estos mutantes de escape del fármaco poseen mutaciones características en el genoma de la proteasa del VHC, notablemente D168V, D168A y/o A156S. Por consiguiente, se requieren fármacos adicionales con diferentes patrones de resistencia para proporcionar a los pacientes que no mejoran opciones de tratamiento y es probable que la terapia de combinación con múltiples fármacos sea la norma en el futuro, aun para el tratamiento de primera línea. La experiencia con fármacos contra el VIH e inhibidores de proteasa del VIH en particular, ha enfatizado que la farmacocinética sub-óptima y los regímenes de dosificación compleja rápidamente tienen como consecuencia fracasos involuntarios de cumplimiento. Esto a su vez significa que la concentración mínima de 24 horas (concentración plasmática mínima) para los respectivos fármacos en un régimen para VIH con frecuencia disminuye por debajo del umbral de IC90 o ED90 durante gran parte del día. Se considera que un nivel mínimo de 24 horas de al menos la IC5u, y de manera más realista, la IC90 o ED90, es esencial para disminuir el desarrollo de los mutantes de escape del fármaco. Alcanzar la farmacocinética y el metabolismo del fármaco necesarios para permitir tales niveles mínimos proporciona un desafío riguroso para el diseño de los fármacos. La fuerte naturaleza péptidomimética de los inhibidores de proteasa de VHC de la técnica anterior, con múltiples enlaces peptídicos, representa obstáculos farmacocinéticas para regímenes de dosificación efectivos. Existe la necesidad de inhibidores de VHC que puedan superar las desventajas de la terapia del VHC actual, tales como efectos secundarios, eficacia limitada, el surgimiento de resistencia y fallas de cumplimiento. La WO05/037214 se refiere a ácidos carboxilico macrocíclicos y acilsulfonamidas como inhibidores de la replicación del VHC, como también composiciones farmacéuticas, métodos de tratamiento de una infección por el virus de la Hepatitis C y métodos de tratamiento de la fibrosis hepática. La presente invención se refiere a inhibidores del VHC que son superiores en una o más de las siguientes propiedades farmacológicas relacionadas, es decir potencia, reducida citotoxicidad, mejorada farmacocinética, mejorado perfil de resistencia, dosificación aceptable y carga de la pildora. Además, los compuestos de la presente invención tienen peso molecular relativamente bajo y son fáciles de sintetizar, comenzando con materiales iniciales que se encuentran disponibles en el mercado o pueden obtenerse fácilmente a través de procedimientos de síntesis conocidos. La presente invención se refiere a inhibidores de replicación del VHC, que pueden estar representados por la fórmula (I): y sus N-óxidos, sales y estereoisómeros de éstos, en los cuales cada línea de puntos (representada por ) representa un doble enlace opcional; X es N, CH y donde X lleva un doble enlace es C; R es -OR6, -NH-SO2R7; R2 es hidrógeno, y donde X es C o CH, R2 también puede ser alquilo de C-?.6; R3 es hidrógeno, alquilo de C1-6, alcoxi C?-6alquilo C-?-6, o cicloalquilo de C3- ; n es 3, 4, 5, o 6; R4 y R5 tomados junto con el átomo de nitrógeno al cual están unidos forman un sistema anular bicíclico seleccionado de donde dicho sistema anular puede estar sustituido en forma opcional con uno, dos o tres sustituyentes seleccionados en forma independiente de halo, hidroxi, oxo, nitro, ciano, carboxilo, alquilo de C?-6, alcoxi de C-?-6, alcoxi d. ßalquilo C-?-6, alquilcarbonilo de C?.6, alcoxicarbonilo de amino, azido, mercapto, polihaloalquilo de C1-6; R6 es hidrógeno; arilo; Het; cicloalquilo de C3-7 sustituido en forma opcional con alquilo de C1-6; o alquilo de C?-6 sustituido en forma opcional con cicloalquilo de C3_ 7, arilo o con Het; R7 es arilo; Het; cicloalquilo de C3.7 sustituido en forma opcional con alquilo de C?-6; o alquilo de C?-6 sustituido en forma opcional con cicloalquilo de C3-7, arilo o con Het; arilo como grupo o parte de un grupo es fenilo o naftilo, cada uno de los cuales puede estar sustituido en forma opcional con uno, dos o tres sustituyentes seleccionados de halo, hidroxi, nitro, ciano, carboxilo, alquilo de C?-6, alcoxi de C?-6, alcoxi C1-6alquilo C-?-6, alquilcarbonilo de C-?-6, amino, mono- o dialquilamino de C?-6, azido, mercapto, polihaloalquilo de C1-6, polihaloalcoxi de C-?-6, cicloalquilo de C3.7, pirrolidinilo, piperidinilo, piperazinilo, 4-C1-6alquil-piperazinilo, 4-alquilcarbonil C-?-6-piperazinilo, y morfolinilo; donde los grupos morfolinilo y piperidinilo pueden estar sustituidos en forma opcional con uno o dos radicales alquilo de C -6; Het como grupo o parte de un grupo es un anillo heterocíclico saturado, parcialmente insaturado o completamente insaturado de 5 o 6 miembros que contiene 1 a 4 heteroátomos seleccionado cada uno en forma independiente de nitrógeno, oxígeno y azufre, y sustituido en forma opcional con uno, dos o tres sustituyentes seleccionados, cada uno en forma independiente, del grupo que consiste en halo, hidroxi, nitro, ciano, carboxilo, alquilo de C?-6, alcoxi de C1-6, alcoxi C1-6alquilo C?-6, alquilcarbonilo de C-?-6, amino, mono- o di-alquilamino de C1-6, azido, mercapto, polihaloalquilo de C-i. 6, polihaloalcoxi de C-?-6, cicloalquilo de C3-7, pirrolidinilo, piperidinilo, piperazinilo, 4-alquil C1-6-piperazinilo, 4-alquilcarbonil C?-6-piperazinilo, y morfolinilo; donde los grupos morfolinilo y piperidinilo pueden estar sustituidos en forma opcional con uno o dos radicales alquilo de C?_6. La invención se refiere, además, a métodos para la preparación de los compuestos de fórmula (I), los N-óxidos, sales de adición, aminas cuaternarias, complejos metálicos, y formas éstereoquímicamente isoméricas de los anteriores, sus intermediarios, y el uso de los intermediarios en la preparación de los compuestos de fórmula (I). La invención se refiere a los compuestos de fórmula (I) per se, los N-óxidos, sales de adición, aminas cuaternarias, complejos metálicos, y formas éstereoquímicamente isoméricas de los anteriores, para usar como medicamento. La invención se refiere, además, a composiciones farmacéuticas que comprenden los compuestos antes mencionados para administración a un sujeto que sufre infección por VHC. Las composiciones farmacéuticas pueden comprender combinaciones de los compuestos antes mencionados con otros agentes anti-VHC. La invención se refiere, además, al uso de un compuesto de fórmula (I), o un N-óxido, sal de adición, amina cuaternaria, complejo metálico, o formas éstereoquímicamente isoméricas de los anteriores, para la fabricación de un medicamento para inhibir la replicación del VHC. O la invención se refiere a un método para inhibir la replicación del VHC en un animal de sangre caliente dicho método comprende la administración de una cantidad efectiva de un compuesto de fórmula (I), o un N-óxido, sal de adición, amina cuaternaria, complejo metálico, o formas éstereoquímicamente isoméricas de los anteriores. Según se utiliza en lo sucesivo y anteriormente en la presente, las siguientes definiciones se aplican salvo que se especifique de otra manera. El término halo es genérico para fluoro, cloro, bromo y yodo. El término "polihalo-alquilo de C?-6" como un grupo o parte de un grupo, por ejemplo en polihalo-alcoxi de C1-6, se define como mono- o polihalo alquilo de C?_6 sustituido, en especial alquilo de C-?-6 sustituido por hasta uno, dos, tres, cuatro, cinco, seis o más halo átomos, tales como metilo o etilo por uno o más átomos fluoro, por ejemplo, difluorometilo, trifluorometilo, trifluoroetilo. Se prefiere trifluorometilo. También se incluyen los grupos perfluoro-alquilo de C1-6, que son grupos alquilo de C-?-6 donde todos los átomos de hidrógeno se reemplazan por átomos fluoro, por ejemplo pentafluoroetilo. En el caso que se una más de un átomo halógeno a un grupo alquilo en la definición de polihalo-alquilo de C?.6, los átomos de halógeno pueden ser iguales o diferentes. Según se usa en la presente, "alquilo de C1-4" como un grupo o parte de un grupo define radicales hidrocarburo saturados de cadena recta o ramificada que poseen de 1 a 4 átomos de carbono, tales como por ejemplo metilo, etilo, 1-propilo, 2-propilo, 1-butilo, 2-butilo, 2-metil-1-propilo; "alquilo de C?.ß" comprende radicales alquilo de C-?-4 y los homólogos superiores de los mismos que poseen 5 o 6 átomos de carbono tales como, por ejemplo, 1-pentilo, 2-pentilo, 3-pentilo, 1-hexilo, 2-hexilo, 2-metil-1-butilo, 2-metil-1-pentilo, 2-etil-1 -butilo, 3-metil-2-pentilo y los similares. Es de interés entre los alquilo de C-?-6 el alquilo de C1-4. El término "alquenilo de C2-6" como un grupo o parte de un grupo define radicales hidrocarburo de cadena recta y ramificada que poseen enlaces saturados de carbono-carbono y al menos un doble enlace y que poseen de 2 a 6 átomos de carbono, tales como, por ejemplo, etenilo (o vinilo), 1-propenilo, 2-propenilo (o alilo), 1-butenilo, 2-butenilo, 3-butenilo, 2-metil-2-propenilo, 2-pentenilo, 3-pentenilo, 2-hexenilo, 3-hexenilo, 4-hexenilo, 2-metil-2-butenilo, 2-metil-2-pentenilo y los similares. Es de interés entre los alquenilos de C2-6 el alquenilo de C2- El término "alquinilo de C2-6" como un grupo o parte de un grupo define radicales hidrocarburo de cadena recta y ramificada que poseen enlaces saturados de carbono-carbono y al menos un enlace triple y que poseen de 2 a 6 átomos de carbono, tales como, por ejemplo, etinilo, 1-propinilo, 2-propinilo, 1-butinilo, 2-butinilo, 3-butinilo, 2-pentinilo, 3-pentinilo, 2-hexinilo, 3-hexinilo y los similares. Es de interés entre los alquinilos de C2-6 el alquinilo de C2-4. El cicloalquilo de C3-7 es genérico para ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo y cicloheptilo. Alcandiilo de C,_6 define radicales hidrocarburo de cadena bivalente recta y ramificada que poseen de 1 a 6 átomos de carbono tales como, por ejemplo, metileno, etileno, 1 ,3-propanodiilo, 1 ,4-butanodiilo, 1 ,2-propanodiilo, 2,3-butanodiilo, 1 ,5-pentandiilo, 1 ,6-hexanodiilo y los similares. Es de interés entre los alcandiilos de C.,.6 el alcandiilo de C,^. Alcoxi de C-?-6 significa alquiloxi de C?_6 donde alquilo de C-?-6 es según se definió anteriormente. Según se usa en la presente, anteriormente, el término (=O) o oxo forma una porción carbonilo cuando se une a un átomo de carbono, una porción sulfóxido cuando se une a un átomo de azufre y una porción sulfonilo cuando dos de dichos términos se unen a un átomo de azufre. Siempre que un anillo o un sistema anular se sustituye por un grupo oxo, el átomo de carbono al cual el oxo se encuentra unido es un carbono saturado.

El radical Het es un heterociclo como se especifica en esta memoria descriptiva y sus reivindicaciones. Algunos ejemplos de Het comprenden, por ejemplo, pirrolidinilo, piperidinilo, morfolinilo, tiomorfolinilo, piperazinilo, pirrolilo, imidazolilo, oxazolilo, isoxazolilo, tiazinolilo, isotiazinolilo, tiazolilo, isotiazolilo, oxadiazolilo, tiadiazolilo, triazolilo (incluyendo 1 ,2,3-triazolilo, 1 ,2,4-triazolilo), tetrazolilo, furanilo, tienilo, piridilo, pirimidilo, piridazinilo, pirazolilo, triazinilo, y similares. Son de interés entre los radicales Het aquellos que no son saturados, en particular aquellos que tienen un carácter aromático. Son de mayor interés aquellos radicales Het que tienen uno o dos nitrógenos. Cada uno de los radicales Het mencionados en este párrafo y en los que siguen puede estar sustituido en forma opcional con el número y la clase de sustituyentes mencionados en las definiciones de los compuestos de fórmula (I) o cualquiera de los sub-grupos de los compuestos de fórmula (I). Algunos de los radicales Het mencionados en este párrafo y en los que siguen pueden estar sustituidos con uno, dos o tres sustituyentes hidroxi. Dichos anillos sustituidos con hidroxi pueden ocurrir como su forma tautomérica que lleva grupos ceto. Por ejemplo una porción 3-hidroxipiridazina puede ocurrir en su forma tautomérica 2/-/-piridazin-3-ona. Donde Het es piperazinilo, con preferencia está sustituido en su posición 4 por un sustituyente ligado al 4-nitrógeno con un átomo de carbono, por ej. 4-alquilo de C-?-6, 4-polihaloalquilo de C1-6, alcoxi C?-6alquilo C?-6, alquilcarbonilo de cicloalquilo de C3.7.

Los radicales Het de interés comprenden, por ejemplo pirrolidinilo, piperidinilo, morfolinilo, tiomorfolinilo, piperazinilo, pirrolilo, pirazolilo, imidazolilo, oxazolilo, isoxazolilo, tiazolilo, isotiazolilo, oxadiazolilo, tiadiazolilo, triazolilo (incluyendo 1 ,2,3-triazolilo, 1 ,2,4-triazolilo), tetrazolilo, furanilo, tienilo, piridilo, pirimidilo, piridazinilo, pirazolilo, triazinilo, o cualquiera de dichos heterociclos condensados con un anillo bencénico, tales como indolilo, indazolilo (en particular 1 H-indazolilo), indolinilo, quinolinilo, tetrahidroquinolinilo (en particular 1 ,2,3,4-tetrahidroquinolinilo), isoquinolinilo, tetrahidroisoquinolinilo (en particular 1 ,2,3,4-tetrahidroisoquinolinilo), quinazolinilo, ftalazinilo, bencimidazolilo, benzoxazolilo, bencisoxazolilo, benzotiazolilo, benzoxadiazolilo, benzotiadiazolilo, benzofuranilo, benzotienilo. Los radicales Het pirrolidinilo, piperidinilo, morfolinilo, tiomorfolinilo, piperazinilo, piperazinilo 4-sustituido con preferencia están ligados a través de su átomo de nitrógeno (es decir 1 -pirrolidinilo, 1-piperidinilo, 4-tiomorfolinilo, 4-morfolinilo, 1 -piperazinilo, 1-piperazinilo 4-sustituido). Se debe observar que las ubicaciones de los radicales en cualquier porción molecular usado en las definiciones pueden encontrarse en cualquier lugar sobre dicho porción, siempre que sea químicamente estable. Los radicales usados en las definiciones de las variables incluyen todos los isómeros posibles, salvo que se indique de otra manera.

Por ejemplo, piridilo incluye 2-piridilo, 3-piridilo y 4-piridilo; pentilo incluye 1-pentilo, 2-pentilo y 3-pentilo. Cuando se produce cualquier variable más de una vez en cualquier constituyente, cada definición es independiente. Siempre que se usa en la presente en lo sucesivo, el término "compuestos de fórmula (I)", o "los presentes compuestos" o términos similares, se pretende incluir los compuestos de fórmula (I), cada uno de sus sub-grupos, sus pro-fármacos, ?/-óxidos, sales de adición, aminas cuaternarias, complejos metálicos y formas isoméricas estereoquímicas. Una modalidad comprende los compuestos de fórmula (I) o cualquier subgrupo de compuestos de fórmula (I) que se especifica en la presente, al igual que los N-óxidos, sales, como las posibles formas estereoisoméricas de los mismos. Otra modalidad comprende los compuestos de fórmula (I) o cualquier subgrupo de compuestos de fórmula (I) que se especifica en la presente, al igual que las sales como sus posibles formas estereoisoméricas. Los compuestos de fórmula (I) poseen varios centros de quiralidad y existen como formas isoméricas estereoquímicas. El término "formas isoméricas estereoquímicas" según se usa en la presente, define todos los posibles compuestos preparados de los mismos átomos unidos mediante la misma secuencia de enlaces, pero que poseen diferentes estructures tridimensionales que no son intercambiables, que pueden poseer los compuestos de fórmula (I).

En referencia a las instancias en las cuales (R) o (S) se usa para designar la configuración absoluta de un átomo quiral en un sustituyente, la designación se lleva a cabo considerado el compuesto completo y no el sustituyente aislado. Salvo que se mencione o indique de otra manera, la designación química de un compuesto comprende la mezcla de todas las formas isoméricas estereoquímicas posibles, que dicho compuesto puede poseer. Dicha mezcla puede contener todos los diastereómeros y/o enantiómeros de la estructura molecular básica de dicho compuesto. Se pretende que todas las formas isoméricas estereoquímicas de los compuestos de la presente invención que requieren ambas, la forma pura o combinada entre sí, se encuentren comprendidas dentro del alcance de la presente invención. Las formas puras estereoisoméricas de los compuestos e intermediarios según se mencionan en la presente se definen como isómeros esencialmente libres de otras formas enantioméricas o diastereoméricas de la misma estructura molecular básica de dichos compuestos o intermediarios. En especial, el término "estereoisoméricamente puro" se refiere a compuestos o intermediarios que poseen un exceso estereoisomérico de al menos 80% (es decir 90% de mínimo de un isómero y un máximo del 10% de otros posibles isómeros) hasta un exceso estereoisomérico del 100% (es decir 100% de un isómero y ninguno de los otros), más en especial, los compuestos e intermediarios que poseen un exceso estereoisomérico del 90% hasta 100%, aún más especialmente que poseen un exceso estereoisomérico del 94% hasta 100% y aún más especialmente que poseen un exceso estereoisomérico del 97% hasta 100%. Se deberían entender los términos "enantioméricamente puro" y "diastereoméricamente puro" de manera similar, pero considerando el exceso enantiomérico y el exceso diastereomérico, respectivamente, de la mezcla en cuestión. Las formas estereoisoméricas puras de los compuestos y de los intermediarios de la presente invención se pueden obtener mediante la aplicación de procedimientos conocidos en la técnica. Por ejemplo, los enantiómeros se pueden separar entre si mediante la cristalización selectiva de sus sales diastereoméricas con ácidos o bases óptimamente activos. Ejemplos de los mismos son ácido tartárico, ácido dibenzoiltartárico, ácido ditoluoiltartárico y ácido alcanforsulfónico. De manera alternativa, los enantiómeros se pueden separar mediante técnicas cromatográficas usando fases estacionarias quirales. Dichas formas puras isoméricas estereoquímicas también pueden derivar de las formas puras isoméricas estereoquímicas correspondientes de los materiales de partida apropiados, siempre que la reacción se produzca de manera estereoespecífica. Preferentemente, si se desea un estereoisómero específico, dicho compuesto se sintetiza mediante métodos específicos de preparación. Estos métodos utilizarán de manera ventajosa los materiales de partida enantioméricamente puros. Los racematos diastereoméricos de los compuestos de fórmula (I) se pueden obtener por separado mediante métodos convencionales. Los métodos físicos de separación apropiados que se pueden emplear de manera ventajosa son, por ejemplo, cristalización selectiva y cromatografía, por ejemplo cromatografía en columna. Para algunos de los compuestos de fórmula (I), sus ?/-óxidos, sales, solvatos, aminas cuaternarias, o complejos metálicos y los intermediarios usados en la preparación de los mismos, la configuración estereoquímica absoluta no se determinó de manera experimental. Una persona idónea en la técnica es capaz de determinar la configuración absoluta de tales compuestos usando métodos conocidos en la técnica, tales como, por ejemplo, difracción de rayos X. También se pretende que la presente invención incluya todos los isótopos de átomos que se producen en los presentes compuestos. Los isótopos incluyen aquellos átomos que poseen la misma cantidad atómica pero diferentes números másicos. A modo de ejemplo general y sin limitación, los isótopos de hidrógeno incluyen tritio y deuterio. Los isótopos del carbono incluyen C-13 y C-14. La presente invención también pretende incluir los profármacos de los compuestos de fórmula (I). El término "pro-fármaco", según se usa a lo largo del presente texto, significa los derivados aceptables para uso farmacéutico tales como esteres, amidas y fosfatos, de manera que el producto resultante de biotransformación en vivo del derivado es el fármaco activo, según lo definido en los compuestos de fórmula (I). Mediante la presente, se incorpora la referencia de Goodman y Gilman (The Pharmacological Basis of Therapeutics, 8th ed, McGraw-Hill, Int. Ed. 1992, "Biotransformation of Drugs", p 13-15) que en general describe profármacos. Los pro-fármacos preferentemente poseen excelente solubilidad acuosa, incremento de biodisponibilidad y se metabolizan con facilidad en los inhibidores activos en vivo. Los pro-fármacos de un compuesto de la presente invención se pueden preparar por medio de la modificación de grupos funcionales presentes en el compuesto, de manera que se escindan las modificaciones, ya sea mediante manipulación de rutina o en vivo, para el compuesto progenitor. Se prefieren los profármacos de éster aceptables para uso farmacéutico que son hidrolizables en vivo y que derivan de aquellos compuestos de fórmula (I) que poseen un hidroxi o un grupo carboxilo. Un éster hidrolizable en vivo es un éster, que se hidroliza en el cuerpo humano o animal para producir el ácido o alcohol original. Los esteres adecuados aceptables para uso farmacéutico para carboxi incluyen esteres de alcoximetilo de C-?-6, por ejemplo metoximetilo, esteres de alcanoíloximetilo de C?_6 por ejemplo pivaloiloximetilo, ftalidil esteres, esteres de cicloalcoxicarboniloxi C3.8-alquilo C-?-6 por ejemplo 1-ciclohexilcarboniloxietilo; 1 ,3-dioxolen-2-onilmetil esteres, por ejemplo 5-metil-1 ,3-dioxolen-2-onilmetilo; y esteres de alcoxicarboniloxietilo de d-ß por ejemplo 1-metoxicarboniloxietilo, que se pueden formar en cualquier grupo carboxi en los compuestos de esta invención. Un éster hidrolizable en vivo de un compuesto de la fórmula (I) que contiene un grupo hidroxi incluye esteres orgánicos tales como esteres de fosfato y a-aciloxialquil éteres y compuestos relacionados que como resultado de la hidrólisis en vivo de la ruptura del éster se quiebran para dar el grupo hidroxi progenitor. Ejemplos de a-aciloxialquil éteres incluyen acetoximetoxi y 2,2-dimetilpropioniloxi-metoxi. Una selección de éster hidrolizable en vivo que forma grupos para hidroxi incluye alcanoilo, benzoilo, fenilacetilo y benzoilo y fenilacetilo sustituidos, alcoxicarbonilo (para dar esteres de carbonato alquilo), dialquilcarbamoilo y N-(dialquilaminoetil)-N-alquilcarbamoilo (para dar carbamatos), dialquilaminoacetilo y carboxiacetilo. Ejemplos de sustituyentes en el benzoilo incluyen morfolino y piperazino unidos a partir de un átomo de nitrógeno anular mediante un grupo metileno a la posición 3 o 4 del anillo benzoilo. Para uso terapéutico, las sales de los compuestos de fórmula (I) son aquellas en las cuales el contra-ión es aceptable para uso farmacéutico. Sin embargo, las sales de ácidos y bases que no son aceptables para uso farmacéutico también se pueden usar, por ejemplo, en la preparación o purificación de un compuesto aceptable para uso farmacéutico. Todas las sales, ya sean aceptables para uso farmacéutico o no se incluyen en el ámbito de la presente invención. Las sales de adición con ácidos y bases son aceptables para uso farmacéutico según se mencionaron anteriormente en la presente pretenden comprender las formas de sales de adición con ácidos y bases no tóxicas terapéuticamente activas que los compuestos de fórmula (I) son capaces de formar. Las sales de adición acidas aceptables para uso farmacéutico se pueden obtener de manera conveniente tratando la forma de base con dicho ácido apropiado. Los ácidos apropiados comprenden, por ejemplo, ácidos inorgánicos tales como hidrácidos, por ejemplo ácido clorhídrico o bromhídrico, sulfúrico, nítrico, fosfórico y los ácidos similares; o ácidos orgánicos tales como, por ejemplo, ácidos acético, propanoico, hidroxiacético, láctico, pirúvico, oxálico (es decir etanodioico), malónico, succinico (es decir ácido butanodioico), maleico, fumárico, málico (es decir ácido hidroxibutanodioico), tartárico, cítrico, metansulfónico, etansulfónico, bencensulfónico, p-toluensulfónico, ciclámico, salicílico, p-aminosalicílico, pamoico y ácidos similares. A la inversa, tales formas salinas se pueden transformar mediante tratamiento con una base apropiada en la forma de base libre. Los compuestos de fórmula (I) que contienen un protón ácido también se puede transformar en sus formas de sal de adición de metal o amina no tóxicas mediante el tratamiento con bases apropiadas orgánicas e inorgánicas. Las formas salinas con bases comprenden, por ejemplo, las sales de amonio, las sales de metal alcalino y alcalino-térreo, por ejemplo, sales de litio, sodio, potasio, magnesio, calcio y similares, sales con bases orgánicas, por ejemplo benzatina, ?/-metil-D-glucamina, sales de hidrabamina y sales con aminoácidos tales como, por ejemplo, arginina, lisina y similares. El término sal de adición, según se usó anteriormente en la presente, también comprende los solvatos que los compuestos de la fórmula (I) son capaces de formar, al igual que las sales de los mismos. Tales solvatos son, por ejemplo hidratos, alcoholatos y similares. El término "amina cuaternaria" según se utilizó anteriormente en la presente, define las sales de amonio cuaternario que los compuestos de fórmula (I) son capaces de formar mediante la reacción entre un nitrógeno básico de un compuesto de fórmula (I) y un agente de cuaternización apropiado, tal como, por ejemplo, un haluro de alquilo, haluro de arilo o haluro arilalquilo opcionalmente sustituido, por ejemplo, yoduro de metilo o yoduro de bencilo. También se pueden usar otros reactivos con buenos grupos salientes, tales como trifluorometansulfonatos de alquilo, metansulfonatos de alquilo y p-toluensulfonatos de alquilo. Una amina cuaternaria posee un nitrógeno cargado positivamente. Los contra-iones aceptables para uso farmacéutico incluyen cloro, bromo, yodo, trifluoroacetato y acetato. El contraión de elección se puede introducir usando resinas de intercambio iónico. Las formas de ?/-óxido de los presentes compuestos pretender comprender los compuestos de fórmula (I) donde uno o varios átomos de nitrógeno se oxidan para el denominado ?/-óxido. Se apreciará que los compuestos de fórmula (I) pueden poseer propiedades de formación de unión metálica, quelante, compleja y, por lo tanto, pueden existir como complejos metálicos o quelatos metálicos. Se pretende que tales derivados metálicos de los compuestos de fórmula (I) se incluyan dentro del alcance de la presente invención.

Algunos de los compuestos de fórmula (I) también pueden existir en su forma tautomérica. Se pretende que tales formas, aunque no se indican de manera explícita en la fórmula anterior, se incluyan dentro del alcance de la presente invención. Según se mencionó anteriormente, los compuestos de fórmula (I) poseen varios centros asimétricos. Para hacer referencia de modo más eficiente a cada uno de estos centros asimétricos, se usará el sistema de numeración, según se indica en la siguiente fórmula estructural.

Los centros asimétricos están presentes en las posiciones 1 , 4 y 6 del monociclo como también en el átomo de carbono 3' en el anillo de 5 miembros, átomo de carbono 2' cuando el sustituyente R2 es alquilo de C-?-6, y un átomo de carbono 1' cuando X es CH. Cada uno de estos centros asimétricos puede ocurrir en su configuración R o S. La estereoquímica en la posición 1 con preferencia corresponde a la de una configuración de L-aminoácido, es decir la de L-prolina.

Cuando X es CH, los 2 grupos carbonilo sustituidos en las posiciones 1' y 5' del anillo ciclopentano con preferencia se encuentran en una configuración trans. El carbonilo sustituido en la posición 5' con preferencia se encuentra en esa configuración que corresponde a una configuración de L-prolina. Los grupos carbonilo sustituidos en las posiciones 1' y 5' con preferencia son como se muestra a continuación en la estructura de la siguiente fórmula Los compuestos de fórmula (I) incluyen un grupo ciclopropilo según se representa en el fragmento estructural que sigue: donde C7 representa el carbono en la posición 7 y los carbonos en la posición 4 y 6 son átomos de carbono asimétricos del anillo ciclopropano. No obstante otros posibles centros asimétricos en otros segmentos de los compuestos de fórmula (I), la presencia de estos dos centros asimétricos significa que los compuestos pueden existir como mezclas de diasterómeros, tales como los diasterómeros de los compuestos de fórmula (I) donde el carbono en la posición 7 está configurado tanto como syn para el carbonilo o syn para la amida como se muestra a continuación.

C7 syn a carbonilo C7 syn a amida C7 syn a carbonilo C7 syn a amida Una modalidad se refiere a los compuestos de fórmula (I) donde el carbono en la posición 7 está configurado syn para el carbonilo. Otra modalidad se refiere a los compuestos de fórmula (I) donde la configuración en el carbono en la posición 4 es R. Un sub-grupo específico de los compuestos de fórmula (I) son aquellos donde el carbono en la posición 7 está configurado syn para el carbonilo y donde la configuración en el carbono en la posición 4 es R. Los compuestos de fórmula (I) pueden incluir un residuo de prolina (cuando X es N) o un residuo de ciclopentilo o ciclopentenilo (cuando X es CH o C). Se prefieren los compuestos de fórmula (I) donde el sustituyente en la posición 1 (o 5') y el sustituyente carbamato en la posición 3' se encuentran en una configuración trans. Son de particular interés los compuestos de fórmula (I) en los cuales la posición 1 tiene la configuración correspondiente a L-prolina y el sustituyente carbamato en la posición 3' se encuentra en una configuración trans con respecto a la posición 1. Con preferencia los compuestos de fórmula (I) tienen la estereoquímica como se indica en la estructuras de fórmulas (I-a) y (l-b) a continuación: (I-a) (l-b) Una modalidad de la presente invención se refiere a los compuestos de fórmula (I) o de fórmula (I-a) o de cualquier sub-grupo de los compuestos de fórmula (I), donde se aplican una o más de las siguientes condiciones: (a) R2 es hidrógeno; (b) X es nitrógeno; (c) un doble enlace está presente entre los átomos de carbono 7 y 8.

Una modalidad de la presente invención se refiere a los compuestos de fórmula (I) o de fórmulas (I-a), (l-b), o de cualquier sub-grupo de los compuestos de fórmula (I), donde se aplican una o más de las siguientes condiciones: (a) R2 es hidrógeno; (b) X es CH; (c) un doble enlace está presente entre los átomos de carbono 7 y 8. Los sub-grupos particulares de los compuestos de fórmula (I) son aquellos representados por las siguientes fórmulas estructurales: (l-c) (l-d) Entre los compuestos de fórmula (l-c) y (l-d), aquellos que tienen la configuración estereoquímica de los compuestos de fórmulas (I-a), y (l-b), respectivamente, son de particular interés.

El doble enlace entre los átomos de carbono 7 y 8 en los compuestos de fórmula (I), o en cualquier sub-grupo de los compuestos de fórmula (I), puede encontrarse en una configuración cis o trans. Con preferencia el doble enlace entre los átomos de carbono 7 y 8 se encuentra en una configuración cis, como se muestra en las fórmulas (l-c) y (l-d). Un doble enlace entre los átomos de carbono 1' y 2' puede estar presente en los compuestos de fórmula (I), o en cualquier sub-grupo de los compuestos de fórmula (I), como se muestra en la fórmula (I-e) a continuación.

Incluso otro sub-grupo particular de los compuestos de fórmula (I) son aquellos representados por las siguientes fórmulas estructurales: Entre los compuestos de fórmulas (l-f), (l-g) o (l-h), aquellos que tienen la configuración estereoquímica de los compuestos de fórmulas (I-a) y (l-b) son de particular interés. En (I-a), (l-b), (l-c), (l-d), (I-e), (l-f), (l-g) y (l-h), donde corresponda, X, n, R1, R2, R3, R4 y R5 son como se los especificó en las definiciones de los compuestos de fórmula (I) o en cualquiera de los sub-grupos de los compuestos de fórmula (I) especificados aquí. Se debe entender que los sub-grupos definidos con anterioridad de los compuestos de fórmulas (I-a), (l-b), (l-c), (l-d), (I-e), (l-f), (l-g) o (l-h), como también cualquier otro sub-grupo definido aqui, también pretenden comprender cualquiera de los profármacos, ?/-óxidos, sales de adición, aminas cuaternarias, complejos metálicos y formas éstereoquimicamente isoméricas de dichos compuestos. Donde n es 2, la porción -CH2- entre paréntesis con "n" corresponde a etandiilo en los compuestos de fórmula (I) o en cualquier subgrupo de los compuestos de fórmula (I). Cuando n es 3, la porción -CH2-entre paréntesis con "n" corresponde a propandiilo en los compuestos de fórmula (I) o en cualquier sub-grupo de los compuestos de fórmula (I). Donde n es 4, la porción -CH2- entre paréntesis con "n" corresponde a butandiilo en los compuestos de fórmula (I) o en cualquier sub-grupo de los compuestos de fórmula (I). Donde n es 5, la porción -CH2- entre paréntesis con "n" corresponde a pentandiilo en los compuestos de fórmula (I) o en cualquier sub-grupo de los compuestos de fórmula (I). Donde n es 6, la porción -CH2-entre paréntesis con "n" corresponde a hexandiilo en los compuestos de fórmula (I) o en cualquier sub-grupo de los compuestos de fórmula (I). Los sub-grupos particulares de los compuestos de fórmula (I) son aquellos compuestos donde n es 4 o 5.

Representan modalidades de la invención los compuestos de fórmula (I) o cualquiera de los sub-grupos de los compuestos de fórmula (I) en los cuales (a) R1 es -OR6, en particular donde R6 es alquilo de C-?-6, tales como metilo, etilo, o /er-butilo y con mayor preferencia donde R6 es hidrógeno; o (b) R1 es -NHS(=O)2R7, en particular donde R7 es alquilo de C1-6, cicloalquilo de C3-C7, o arilo, por ej. donde R7 es metilo, ciclopropilo, o fenilo; o (c) R1 es -NHS(=O)2R7, en particular donde R7 es cicloalquilo de C3.7 sustituido con alquilo de C-?-6, con preferencia donde R7 es ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, o ciciohexilo, cualquiera de los cuales está sustituido con alquilo de C?-4, es decir con metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, ter-butilo, o isobutilo. Representan modalidades adicionales de la invención los compuestos de fórmula (I) o cualquiera de los sub-grupos de los compuestos de fórmula (I) en los cuales R1 es -NHS(=O)2R7, en particular donde R7 es ciclopropilo sustituido con alquilo de C- , es decir con metilo, etilo, propilo, o isopropilo. Representan modalidades adicionales de la invención los compuestos de fórmula (I) o cualquiera de los sub-grupos de los compuestos de fórmula (I) en los cuales R1 es -NHS(=O)2R7, en particular donde R7 es 1-metilciclopropilo.

Representan modalidades adicionales de la invención los compuestos de fórmula (I) o cualquiera de los sub-grupos de los compuestos de fórmula (I) en los cuales (a) R2 es hidrógeno; (b) R2 es alquilo de C?-6, con preferencia metilo. Representan modalidades de la invención los compuestos de fórmula (I) o cualquiera de los sub-grupos de los compuestos de fórmula (I) en los cuales (a) X es N, C (X está ligado a través de un doble enlace) o CH (X está ligado a través de un enlace simple) y R2 es hidrógeno; (b) X es C (X está ligado a través de un doble enlace) y R2 es alquilo de C?-6> con preferencia metilo. Representan modalidades adicionales de la invención los compuestos de fórmula (I) o cualquiera de los sub-grupos de los compuestos de fórmula (I) en los cuales (a) R3 es hidrógeno; (b)R3 es alquilo de C-?-6; (d) R3 es alcoxi C?-6 alquilo C1-6 o cicloalquilo de C3.7. Representan modalidades preferidas de la invención los compuestos de fórmula (I) o cualquiera de los sub-grupos de los compuestos de fórmula (I) en los cuales R3 es hidrógeno, o alquilo de d-6, con mayor preferencia hidrógeno o metilo.

Representan modalidades de la invención los compuestos de fórmula (I) o cualquiera de los sub-grupos de los compuestos de fórmula (I) en los cuales R4 y R5 tomados junto con el átomo de nitrógeno al cual están unidos forman un sistema anular bicíclico seleccionado de donde dicho sistema anular puede estar sustituido en forma opcional con uno o dos sustituyentes seleccionados en forma independiente de halo, hidroxi, oxo, ciano, carboxilo, alquilo de d-6, alcoxi de d-6, alcoxi d-ßalquilo d-6, alcoxicarbonilo de d-6, amino, y polihaloalquilo de d-ß. Otros sub-grupos de los compuestos de fórmula (I) son aquellos compuestos de fórmula (I), o cualquier sub-grupo de los compuestos de fórmula (I) especificados aqui, en los cuales R4 y R5 tomados junto con el átomo de nitrógeno al cual están unidos forman un sistema anular bicíclico seleccionado de donde dicho sistema anular puede estar sustituido en forma opcional con uno o dos sustituyentes seleccionados en forma independiente de fluoro, cloro, hidroxi, oxo, ciano, carboxilo, metilo, etilo, isopropilo, t-butilo, metoxi, etoxi, isopropoxi, ter-butoxi, metoxietilo, etoximetilo, metoxicarbonilo, etoxicarbonilo, amino, y trifluorometilo. Representan modalidades de la invención los compuestos de fórmula (I) o cualquiera de los sub-grupos de los compuestos de fórmula (I) en los cuales R4 y R5 tomados junto con el átomo de nitrógeno al cual están unidos forman un sistema anular bicíclico seleccionado de donde el fenilo de dicho sistema anular bicíclico está sustituido en forma opcional con uno o dos sustituyentes seleccionados en forma independiente de halo, hidroxi, ciano, carboxilo, alquilo de d-6, alcoxi de d-6, alcoxi d-6-carbonilo, amino, y polihaloalquilo de d-6- Representan modalidades de la invención los compuestos de fórmula (I) o cualquiera de los sub-grupos de los compuestos de fórmula (I) en los cuales R4 y R5 tomados junto con el átomo de nitrógeno al cual están unidos forman un sistema anular biciclico seleccionado de donde dicho sistema anular biciclico está sustituido en forma opcional en la parte fenilo, con preferencia en las posiciones indicadas anteriormente con líneas punteadas con uno o dos sustituyentes seleccionados en forma independiente de halo, hidroxi, ciano, carboxilo, alquilo de d-ß, alcoxi de d-6, alcoxi d-6-carbonilo, amino, y polihalo-alquilo de d.6.

Representan modalidades de la invención los compuestos de fórmula (I) o cualquiera de los sub-grupos de los compuestos de fórmula (I) en los cuales R4 y R5 tomados junto con el átomo de nitrógeno al cual están unidos forman un sistema anular bicíclico seleccionado de donde los anillos pirrolidina, piperidina, o morfolina de dicho sistema anular bicíclico están sustituidos en forma opcional con uno o dos sustituyentes seleccionados en forma independiente de alquilo de d-ß, alcoxi de d-6, y alcoxi C?-6 alquilo d-6. Representan modalidades de la invención los compuestos de fórmula (I) o cualquiera de los sub-grupos de los compuestos de fórmula (I) en los cuales R4 y R5 tomados junto con el átomo de nitrógeno al cual están unidos forman un sistema anular bicíclico seleccionado de donde el fenilo de dicho sistema anular biciclico está sustituido en forma opcional con un sustituyente seleccionado en forma independiente de halo, hidroxi, ciano, carboxilo, alquilo de d-6, alcoxi de d-6, alcoxi d.6-carbon¡lo, amino, y polihaloalquilo de C-?-6; y donde los anillos pirrolidina, piperidina, o morfolina de dicho sistema anular bicíclico están sustituidos en forma opcional con un sustituyente seleccionado en forma independiente de alquilo de d-6, alcoxi de d-6, y alcoxi C?-6 alquilo d-6. Representan modalidades de la invención los compuestos de fórmula (I) o cualquiera de los sub-grupos de los compuestos de fórmula (I) en los cuales R4 y R5 tomados junto con el átomo de nitrógeno al cual están unidos forman un sistema anular bicíclico seleccionado de donde dicho sistema anular bicíclico está sustituido en forma opcional en las posiciones antes indicadas con uno o dos sustituyentes seleccionados en forma independiente de alquilo de d-6, alcoxi de d-6, y alcoxi d-6 alquilo d-6 Representan modalidades preferidas de la invención los compuestos de fórmula (I) o cualquiera de los sub-grupos de los compuestos de fórmula (I) en los cuales R4 y R5 tomados junto con el átomo de nitrógeno al cual están unidos forman un sistema anular bicíclico seleccionado de Los compuestos de fórmula (I) consisten en tres bloques de construcción P1 , P2, P3. Bloque de construcción P1 contiene, además, una cola P1 \ El grupo carbonilo marcado con un asterisco en el compuesto (l-c) que sigue puede ser parte del bloque de construcción P2 o del bloque de construcción P3. Por razones de química, el bloque de construcción P2 de los compuestos de fórmula (I) en los cuales X es C incorpora el grupo carbonilo unido a la posición 1'. El enlace de los bloques de construcción P1 con P2, P2 con P3, y P1 con P1 ' (cuando R1 es -NH-S02R7) implica la formación de un enlace amida. La ligadura de los bloques P1 y P3 implica formación de un doble enlace. El enlace de los bloques de construcción P1 , P2 y P3 para preparar los compuestos (l-i) o (l-j) puede realizarse en cualquier secuencia determinada. Uno de los pasos implica una ciclación por la cual se forma el macrociclo. Se representan a continuación los compuestos (l-i) que son los compuestos de fórmula (I) donde los átomos de carbono C7 y C8 están ligados por un doble enlace, y compuestos (l-j) que son los compuestos de fórmula (I) donde los átomos de carbono C7 y C8 están ligados por un enlace simple. Los compuestos de fórmula (l-j) pueden prepararse a partir de los correspondientes compuestos de fórmula (I-I) reduciendo el doble enlace en el macrociclo. (l-i) (i-j) Los procedimientos de síntesis descritos con anterioridad pretenden aplicarse también para los racematos, intermediarios éstereoquímicamente puros o productos terminados, como cualquier mezcla estereoisomérica. Los racematos o mezclas estereoquímicas pueden separarse en forma estereoisomérica en cualquier etapa de los procedimientos de síntesis. En una modalidad, los intermediarios y productos terminados tienen la estereoquímica especificada con anterioridad en los compuestos de fórmula (I-a) y (l-b).

En los procedimientos de síntesis descritos a continuación, R8 representa un radical R4 R^N^° donde la línea de puntos representa el enlace por el cual el radical está ligado al porción de la molécula. En una modalidad preferida, los compuestos (I) donde el enlace entre C7 y C8 es un doble enlace, que son los compuestos de fórmula (l-i), como se definió con anterioridad, pueden prepararse como se define en el siguiente esquema de reacción: La formación del monociclo puede llevarse a cabo a través de una reacción de metátesis de olefina en presencia de un catalizador metálico apropiado tal como por ej. el catalizador basado en Ru informado por Miller, S.J., Blackwell, H.E., Grubbs, R.H. J. Am. Chem. Soc. 118, (1996), 9606-9614; Kingsbury, J. S., Harrity, J. P. A., Bonitatebus, P. J., Hoveyda, A. H., J. Am. Chem. Soc. 121 , (1999), 791-799; y Huang et al., J. Am. Chem. Soc. 121 , (1999), 2674-2678; por ejemplo un catalizador de Hoveyda-Grubbs. Los catalizadores de rutenio estables al aire tales como cloruro de bis(triciclohexilfosfin)-3-fenil-1 H-inden-1 -iliden rutenio (Neolyst M1®) o dicloruro de bis(triciclohexilfosfin)-[(feniltio)metilen]rutenio (IV) pueden usarse. Otros catalizadores que pueden usarse son catalizadores de Grubbs de primera y segunda generación, es decir Benciliden-bis(triciclohexilfosfin)diclororutenio y (1 ,3-bis-(2,4,6-trimetilfenil)- 2-imidazolidiniliden)dicloro(fenilmetilen)-(triciclohexilfosfin)rutenio, respectivamente. Son de particular interés los catalizadores de Hoveyda-Grubbs de primera y segunda generación, que son dicloro(o-isopropoxifenilmetilen)(triciclohexilfosfin)-rutenio(ll) y 1 ,3-bis-(2,4,6-trimetilfenil)-2-imidazolidiniliden)dicloro(o-isopropoxifenilmetilen)rutenio respectivamente. Además, pueden usarse para esta reacción otros catalizadores que contienen otros metales de transición tales como Mo. Las reacciones de metátesis pueden conducirse en un solvente apropiado tal como por ejemplo éteres, por ej. THF, dioxano; hidrocarburos halogenados, por ej. diclorometano, CHCI3, 1 ,2-dicloroetano y similares, hidrocarburos, por ej. tolueno. En una modalidad preferida, la reacción de metátesis se conduce en tolueno. Estas reacciones se conducen a temperaturas crecientes bajo atmósfera de nitrógeno. Los compuestos de fórmula (I) en los cuales el enlace entre C7 y C8 en el macrociclo es un enlace simple, es decir compuestos de fórmula (l-j), pueden prepararse a partir los compuestos de fórmula (l-i) por una reducción del doble enlace C7-C8 en los compuestos de fórmula (l-i). Esta reducción puede conducirse por hidrogenación catalítica con hidrógeno en presencia de un catalizador de metal noble tal como, por ejemplo, Pt, Pd, Rh, Ru o níquel de Raney. Resulta de interés el Rh sobre alúmina. La reacción de hidrogenación con preferencia se conduce en un solvente como, por ej. un alcohol tal como metanol, etanol, o un éter tal como THF, o mezclas de los anteriores. También puede agregarse agua a estos solventes o mezclas de solventes. El grupo R1 puede conectarse al bloque de construcción P1 en cualquier etapa de la síntesis, es decir antes o después de la delación, o antes o después de la ciclación y reducción como se describió aqui con anterioridad. Los compuestos de fórmula (I) en los cuales R1 representa -NHSO2R7, dichos compuestos representados por la fórmula (l-k-1), pueden prepararse enlazando el grupo R1 a P1 mediante la formación de un enlace amida entre ambos porcións. En forma similar, los compuestos de fórmula (I) en los cuales R1 representa -OR6, es decir los compuestos (l-k-2), pueden prepararse enlazando el grupo R1 a P1 mediante formación de un enlace éster. En una modalidad, the -OR6 grupos se introducen en el último paso de la síntesis de los compuestos (I) como se define en el siguiente esquema de reacción donde G representa un grupo: O G-COOH + H2N-S02R7 - HN- -S02R7 (2a) (2b) (l-k-1 ) o G-COOH + HOR - -< OR6 (2a) (2c) (l-k-2) El intermediario (2a) puede acoplarse con la amina (2b) por una reacción de la formación de amida tal como cualquiera de los procedimientos para la formación de un enlace amida describo más adelante. En particular, (2a) puede tratarse con un agente de acoplamiento, por ejemplo N,N'-carbonildiimidazol (CDI), EEDQ, IIDQ, EDCI o hexafluorofosfato de benzotriazol-1-il-oxi-tris-pirrolidin-fosfonio (disponible en el mercado como PyBOP®), en un solvente como un éter, por ej. THF, o un hidrocarburo halogenado, por ej. diclorometano, cloroformo, dicloroetano, y se hace reaccionar con la sulfonamida deseada (2b), con preferencia luego de hacer reaccionar (2a) con el agente de acoplamiento. Las reacciones de (2a) con (2b) con preferencia se conducen en presencia de una base, por ejemplo una trialquilamina tal como trietilamina o diisopropiletilamina, o 1 ,8-diazabiciclo[5,4,0]undec-7-eno (DBU). El intermediario (2a) también puede convertirse en una forma activada, por ej. una forma activada de fórmula general G-CO-Z, donde Z representa halo, o la porción de un éster activo, por ej. Z es un grupo ariloxi tal como fenoxi, p.nitrofenoxi, pentafluorofenoxi, triclorofenoxi, pentaclorofenoxi y similares; o Z puede ser la porción de un anhídrido mixto. En una modalidad, G-CO-Z es un cloruro ácido (G-CO-CI) o un anhídrido ácido mixto (G-CO-O-CO-R o G-CO-O-CO-OR, R en el último caso es por ej. alquilo de C- , tal como metilo, etilo, propilo, i. propilo, butilo, t. butilo, ¡.butilo, o bencilo). La forma activada de G-CO-Z se hace reaccionar con la sulfonamida (2b). La activación del ácido carboxílico en (2a) como se describe en las reacciones anteriores puede conducir a una reacción de ciclación interna a un intermediario azalactona de fórmula donde X, R j2 , D R3 , D R4 , R , n son como se los especificó con anterioridad y donde los centros estereogénicos pueden tener la configuración estereoquímica como se especificó con anterioridad, por ejemplo como en (I-a) o (l-b). Los intermediarios (2a-1) pueden aislarse de la mezcla de reacción, usando metodología convencional, y el intermediario aislado (2a-1) se hace reaccionar luego con (2b), o la mezcla de reacción que contiene (2a-1) puede hacerse reaccionar en forma adicional con (2b) sin el aislamiento de (2a-1). En una modalidad, donde la reacción con el agente de acoplamiento se conduce en un solvente no miscible en agua, la mezcla de reacción que contiene (2a-1 ) puede lavarse con agua o con agua levemente alcalina para eliminar todos los productos secundarios solubles en agua. La solución lavada obtenida de este modo puede hacerse reaccionar entonces con (2b) sin pasos adicionales de purificación. El aislamiento de los intermediarios (2a-1) por otro lado puede proporcionar ciertas ventajas en el sentido que el producto aislado, luego de la purificación opcional adicional, puede hacerse reaccionar con (2b), dando lugar a menos productos secundarios y un procesamiento más simple la reacción. El intermediario (2a) puede acoplarse con el alcohol (2c) una reacción formadora de éster. Por ejemplo, (2a) y (2c) se hacen reaccionar juntos con la eliminación de agua ya sea por medios físicos, por ej. por eliminación azeotrópica del agua, o por medios químicos usando un agente deshidratante. El intermediario (2a) también puede convertirse en una forma activada G-CO-Z, tal como la forma activada mencionada con anterioridad, y posteriormente se hace reaccionar con el alcohol (2c). Las reacciones formadoras de éster con preferencia se conducen en presencia de una base tal como un carbonato de metal alcalino o carbonato ácido, por ej. carbonato ácido de sodio o potásico, o una amina terciaria tales como las aminas mencionadas aquí con relación a las reacciones formadoras de amida, en particular a trialquilamina, por ej. trietilamina. Los solventes que pueden usarse en las reacciones formadoras de éster comprenden éteres tales como THF; hidrocarburos halogenados tales como diclorometano, CH2CI2; hidrocarburos tales como tolueno; solventes apróticos polares tales como DMF, DMSO, DMA; y solventes similares. Los compuestos de fórmula (I) en los cuales R3 es hidrógeno, dichos compuestos representados por (I-I), también pueden prepararse por eliminación de un grupo protector PG, a partir de un correspondiente intermediario protegido con nitrógeno (3a), como en el siguiente esquema de reacción. El grupo protector PG en particular es cualquiera de los grupos protectores de nitrógeno mencionado con anterioridad y puede eliminarse usando procedimientos también mencionados con anterioridad: (3a) (I-I) Los materiales de partida (3a) en la reacción anterior pueden prepararse siguiendo los procedimientos para la preparación de los compuestos de fórmula (I), pero usando intermediarios donde el grupo R3 es PG. Los compuestos de fórmula (I) también pueden prepararse haciendo reaccionar un intermediario (4a) con una amina (4b) en presencia de un reactivo formador de carbamato como se define en el siguiente esquema de reacción donde los diferentes radicales tienen los significados especificados con anterioridad: (4a) (I) La reacción de los intermediarios (4a) con el reactivo formador de carbamato se conduce en los mismos solventes y bases como aquellos usados para la formación del enlace amida como se describe a continuación. Las reacciones de formación de carbamato pueden conducirse usando una variedad de métodos, en particular por reacción de aminas con cloroformiatos de alquilo; por reacción de alcoholes con carbamoilo cloruros o isocianatos; a través de reacciones que implican complejos metálicos o agentes de transferencia de acilo. Ver por ejemplo, Greene, T. W. y Wuts, P. G. M., "Protective Groups in Organic Synthesis"; 1999; Wiley and Sons, p. 309-348. Pueden usarse monóxido de carbono y ciertos catalizadores metálicos para sintetizar carbamatos a partir de varios compuestos de partida, incluyendo aminas. Pueden usarse como catalizadores metales tales como paladio, iridio, uranio y platino. Se han informado métodos que usan dióxido de carbono para la síntesis de carbamato que también pueden usarse (ver por ejemplo, Yoshida, Y., et al., Bull. Chem. Soc . Japan 1989, 62, 1534; y Aresta, M., et al., Tetrahedron, 1991 , 47, 9489). Un enfoque para la preparación de carbamatos implica el uso de intermediarios donde Q es un grupo saliente tal como halo, en particular cloro y bromo, o un grupo usado en los esteres activos para la formación del enlace amida, tales como aquellos mencionados con anterioridad, por ejemplo fenoxi o fenoxi sustituido tales como p. cloro y p.nitrofenoxi, triclorofenoxi, pentaclorofenoxi, N-hidroxi-succinimidilo, y similares. Los intermediarios (4b) pueden derivar de alcoholes (4a) y fosgeno, de este modo formando un cloroformiato, o transfiriendo el cloro en el último a los intermediarios (5a) que son intermediarios de fórmula (5) donde Q es Q1. En este y los siguientes procedimientos de reacción, Q1 representa cualquiera de las porciones éster activos tales como aquellos mencionados con anterioridad. Los intermediarios (4b) se hacen reaccionar con (4a), obteniendo compuestos (I).

Los intermediarios (4b-1), que son los intermediarios (4b) donde Q es Q1, también pueden prepararse haciendo reaccionar el alcohol (4a) con carbonatos Q1-CO-Q1 tales como por ej. bisfenol, bis-( fenol sustituido) o bis N-hidroxi-succinimidilo carbonatos: Los reactivos (5a) también pueden prepararse a partir de cloroformiatos CI-CO-Q1 de la siguiente manera: Las reacciones anteriores para preparar reactivos (4b-1) pueden conducirse en presencia de las bases y los solventes mencionado con anterioridad para la síntesis de enlaces amida, en particular trietilamina y diclorometano. En forma alternativa, para preparar los compuestos de fórmula (I), primero se forma un enlace amida entre los bloques de construcción P2 y P1 , seguido del acoplamiento al bloque de construcción P3 a la porción P1 en P1-P2, y una posterior formación de enlace carbamato o éster entre P3 y la porción P2 en P2-P1 -P3 con cierre concomitante del anillo. Incluso otra metodología de síntesis alternativa es la formación de un enlace amida entre los bloques de construcción P2 y P3, seguido por el acoplamiento del bloque de construcción P1 en la porción P3 en P3-P2, y una última formación de enlace amida entre P1 y P2 en P1-P3-P2 con cierre concomitante del anillo. Los bloques de construcción P1 y P3 pueden ligarse a una secuencia P1 -P3. Si se desea, el doble enlace que liga P1 y P3 puede reducirse. La secuencia P1-P3 formada de este modo, ya sea reducida o no, puede acoplarse al bloque de construcción P2 y la secuencia formada de este modo P1-P3-P2 posteriormente ciclarse, por la formación de un enlace amida. Los bloques de construcción P1 y P3 en cualquiera de las metodologías previas pueden ligarse a través de la formación de doble enlace, por ej. por la reacción de metátesis con olefina descrita más adelante, o una reacción del tipo de Wittig. Si se desea, en doble enlace formado de este modo puede reducirse, en forma similar como se describió con anterioridad para la conversión de (l-i) en (l-j). El doble enlace también puede reducirse en una etapa posterior, es decir luego del agregado de un tercer bloque de construcción, o luego de la formación del monociclo. Los bloques de construcción P2 y P1 están ligados por formación del enlace amida y P3 y P2 están ligados por formación de carbamato o éster.

Puede unirse la cola PV al bloque de construcción P1 en cualquier etapa de la síntesis de los compuestos de fórmula (I), por ejemplo antes o después de acoplar los bloques de construcción P2 y P1 ; antes o después de acoplar el bloque de construcción P3 en P1 ; o antes o después del cierre del anillo. Los bloques de construcción individuales pueden primero prepararse y posteriormente acoplarse o en forma alternativa, los precursores de los bloques de construcción pueden acoplarse y modificarse en una etapa posterior para obtener la composición molecular deseada. La formación de enlaces amida puede llevarse a cabo usando procedimientos estándar tales como aquellos usados para acoplamiento de aminoácidos en la síntesis de péptidos. Esta última implica el acoplamiento por deshidratación de un grupo carboxilo de un reactivo con un grupo amino del otro reactivo para formar un enlace de amida de ligación. La formación del enlace amida puede realizarse haciendo reaccionar los materiales de partida en presencia de un agente de acoplamiento o convirtiendo el grupo funcional carboxilo en una forma activa tal como un éster activo, anhídrido mixto o un cloruro o bromuro de ácido carboxílico. Las descripciones generales de dichas reacciones de acoplamiento y los reactivos usados en ellas pueden encontrarse en libros de texto generales sobre química de péptidos, por ejemplo, M. Bodanszky, "Peptide Chemistry", 2nd rev. ed., Springer-Verlag, Berlín, Germany, (1993).

Algunos ejemplos de reacciones de acoplamiento con formación del enlace amida incluyen el método de azida, método de anhídrido mixto de ácido carbónico-carboxílico (cloroformiato de isobutilo), el método de carbodiimida (ciclohexilarbodiimida, diisopropilcarbodiimida, o carbodiimida soluble en agua tal como ?/-etil-?/-[(3-dimetilamino)propil]carbodiimida), el método de éster activo (por ej. p-nitrofenilo, p-clorofenilo, triclorofenilo, pentaclorofenilo, pentafluorofenilo, ¡mido ?/-hidroxisuccínico y similares esteres), el método K de reactivo de Woodward, el método de 1 ,1-carbonildiimidazol (CDI o ?/,?/'-carbonildiimidazol), los métodos de reactivos de fósforo o reducción-oxidación. Algunos de estos pueden potenciarse con el agregado de catalizadores apropiados, por ej. en el método de carbodiimida agregando 1-hidroxibenzotriazol, DBU (1 ,8-diazabiciclo[5,4,0]undec-7-eno), o 4-DMAP. Otros agentes de acoplamiento son hexafluorofosfato de (benzotriazol-l-iloxi)-tris-(dimetilamino) fosfonio, ya sea solo o en presencia de 1-hidroxibenzotriazol o 4-DMAP; o tetrafluoroborato de 2-(1 H-benzotriazol-1-il)-/V,?/,?/',?/'-tetra-metiluronio, o hexafluorofosfato de 0-(7-azabenzotriazol-1-¡l)-?/,/V,?/',?/-tetrametiluronio. Estas reacciones de acoplamiento pueden realizarse tanto en fase de solución (fase líquida) o en fase sólida. Una formación preferida del enlace amida se realiza empleando N-etiloxicarbonil-2-etiloxi-1 ,2-dihidroquinolina (EEDQ) o N-isobutiloxi-carbonil-2-isobutiloxi-1 ,2-dihidroquinolina (IIDQ). A diferencia del procedimiento clásico con anhídrido, EEDQ y IIDQ no requieren base ni temperaturas de reacción bajas. Normalmente, el procedimiento implica hacer reaccionar cantidades equimolares de los componentes carboxi y amina en un solvente orgánico (puede usarse una amplia variedad de solventes). Entonces EEDQ o IIDQ se agregan en exceso y la mezcla se deja agitar a temperatura ambiente. Las reacciones de acoplamiento con preferencia se conducen en un solvente inerte, tal como hidrocarburos halogenados, por ej. diclorometano, cloroformo, disolventes apróticos polares tales como acetonitrilo, dimetilformamida, dimetilacetamida, DMSO, HMPT, éteres tales como tetrahidrofurano (THF). En muchos casos las reacciones de acoplamiento se realizan en presencia de una base apropiada tal como una amina terciaria, por ej. trietilamina, diisopropiletilamina (DIPEA), ?/-metil-morfolina, ?/-metilpirrolidina, 4-DMAP o 1 ,8-diazabiciclo-[5,4,0]undec-7-eno (DBU). La temperatura de la reacción puede oscilar entre 0°C y 50°C y el tiempo de la reacción puede oscilar entre 15 min y 24 h. Los grupos funcionales en los bloques de construcción que están ligados pueden protegerse para evitar la formación de enlaces no deseados. Los grupos protectores apropiados que pueden usarse se mencionan, por ejemplo, en Greene, "Protective Groups in Organic Chemistry", John Wiley & Sons, New York (1999) y "The Peptides: Analysis, Synthesis, Biology", Vol. 3, Academic Press, New York (1987). Los grupos carboxilo pueden protegerse como un éster que puede disociarse para dar el ácido carboxílico. Los grupos protectores que pueden usarse incluyen 1) esteres de alquilo tales como metilo, trimetilsililo y ter-butilo; 2) esteres de arilalquilo tales como bencilo y bencilo sustituido; o 3) esteres que pueden disociarse por una base suave o medios reductores suaves tales como tricloroetilo y esteres de fenacilo. Los grupos amino pueden protegerse por una variedad de grupos protectores de N, tales como: grupos acilo tales como formilo, trifluoroacetilo, ftalilo, y p-toluensulfonilo; 1) grupos carbamato aromáticos tales como benciloxicarbonilo (Cbz o Z) y benciloxicarbonilos sustituidos, y 9- fluorenilmetiloxicarbonilo (Fmoc); 2) grupos carbamato alifáticos tales como ter-butiloxicarbonilo (Boc), etoxicarbonilo, diisopropilmetoxi-carbonilo, y aliloxicarbonilo; 4) grupos carbamato alquilo cíclicos tales como ciclopentiloxicarbonilo y adamantiloxicarbonilo; 5) grupos de alquilo tales como trifenilmetilo, bencilo o bencilo sustituido tales como 4-metoxibencilo; 6) trialquilsililo tales como trimetilsililo o t.Bu dimetilsililo; y 7) grupos que contienen tiol tales como feniltiocarbonilo y ditiasuccinoilo. Los grupos protectores de amino interesantes son Boc y Fmoc. Con preferencia el grupo protector de amino se separa antes del paso siguiente del acoplamiento. La eliminación de los grupos protectores de N puede realizarse siguiendo procedimientos conocidos en el arte. Cuando se usa el grupo Boc, los métodos de elección son ácido trifluoroacético, puro o en diclorometano, o HCl en dioxano o en acetato de etilo. Luego se neutraliza la sal de amonio resultante ya sea antes del acoplamiento o in situ con soluciones alcalinas tales como reguladores de pH acuosos, o aminas terciarias en diclorometano o acetonitrilo o dimetil-formamida. Cuando se usa el grupo Fmoc, los reactivos de elección son piperidina o piperidina sustituida en dimetilformamida, aunque puede usarse cualquier amina secundaria. La desprotección se lleva a cabo a una temperatura entre 0°C y temperatura ambiente, usualmente alrededor de 15-25X, o 20-22°C. Otros grupos funcionales que pueden interferir en las reacciones de acoplamiento of los bloques de construcción también pueden protegerse. Por ejemplo los grupos hidroxilo pueden protegerse como los esteres de bencilo o bencilo sustituido, por ej. 4-metoxibencil éter, esteres de benzoilo o benzoilo sustituido, por ej. 4-nitrobenzoil éster, o con grupos trialquilsililo (por ej. trimetilsililo o ter-butildimetilsililo). Los grupos amino adicionales pueden protegerse por los grupos protectores que pueden disociarse en forma selectiva. Por ejemplo, cuando se usa Boc como grupo protector de a-amino, los siguientes grupos protectores de cadena lateral son apropiados: pueden usarse porciones p-toluensulfonilo (tosilo) para proteger grupos amino adicionales; pueden usarse esteres de bencilo (Bn) usarse para proteger grupos hidroxi; y pueden usarse esteres de bencilo para proteger grupos carboxilo adicionales. O cuando se elige Fmoc para la protección de a-amino, usualmente son aceptables grupos protectores basados en /er-butilo. Por ejemplo, puede usarse Boc para grupos amino adicionales; esteres de /er-butilo para grupos hidroxilo; y esteres de /er-butilo para grupos carboxilo adicionales. Cualquiera de los grupos protectores puede eliminares en cualquier etapa del procedimiento de síntesis pero con preferencia, los grupos protectores de cualquiera de los grupos funcionales no involucrados en los pasos de la reacción se eliminan luego de finalizar la formación del monociclo. La eliminación de los grupos protectores puede realizarse en cualquier modo que se indique por elección de los grupos protectores, modos que resultan conocidos para aquellos expertos en el arte. Los intermediarios de fórmula (1a) donde X es N, dichos intermediarios están representados por la fórmula (1a-1), pueden prepararse usando una reacción formadora de urea, comenzando con los intermediarios (5a) que se hacen reaccionar con una alquenamina (5b) en presencia de un agente introductorio de carbonilo como se define en el siguiente esquema de reacción. (5a) (1a-1) Los agentes introductorios de carbonilo (CO) incluyen fosgeno, o derivados de fosgeno tales como carbonil diimidazol (CDI), y similares. En una modalidad (5a) se hace reaccionar con el agente introductorio de CO en presencia de una base apropiada y un solvente, que pueden ser las bases y los solventes usados en las reacciones formadoras de amida como se describió con anterioridad. A partir de entonces, la amina (5b) se agrega obteniendo así los intermediarios (1 a-1) como en el esquema anterior. En una modalidad particular, la base es un hidrogencarbonato, por ej. NaHC?3, o una amina terciaria tales como trietilamina y similares, y el solvente es un éter o hidrocarburo halogenado, por ej. THF, CH2CI2, CHCI3, y similares. Una vía alternativa que usa condiciones de reacción similares implica primero hacer reaccionar el agente introductorio de CO con la amina (5b) y luego hacer reaccionar el intermediario formado de este modo con (5a). Los intermediarios (1 a-1 ) pueden prepararse, en forma alternativa, de la siguiente manera: desproteccion PG1 es un grupo protector de O, que puede ser cualquiera de los grupos mencionados aquí y en particular es un grupo benzoilo o benzoilo sustituido tal como 4-nitrobenzoilo. En el último caso este grupo puede eliminarse por reacción con un hidróxido de metal alcalino (LiOH, NaOH, KOH), en particular donde PG1 es 4 nitrobenzoilo, con LiOH, en un medio acuoso que comprende agua y un solvente orgánico soluble en agua tal como un alcanol (metanol, etanol) y THF. Los intermediarios (6a) se hacen reaccionar con (5b) en presencia de un agente introductorio de carbonilo, similar como se describió con anterioridad, y esta reacción produce los intermediarios (6c). Estos están desprotegidos, en particular usando las condiciones de reacción mencionadas con anterioridad. El alcohol resultante (6d) se hace reaccionar con los intermediarios (4b) en una reacción de formación de carbamato, como se describió con anterioridad para la reacción de (4a) con (4b), y esta reacción produce los intermediarios (1 a-1 ). Los intermediarios de fórmula (1 a) donde X es C, dichos intermediarios están representados por la fórmula (1 a-2), pueden prepararse por una reacción de formación de amida comenzando con los intermediarios (7a) que se hacen reaccionar con una alquenamina (5b) como se muestra en el siguiente esquema de reacción, usando las condiciones de reacción para preparar amidas tales como aquellos descritos con anterioridad.

Los intermediarios (1a-1) pueden prepararse, en forma alternativa, de la siguiente manera: PG1 es un grupo protector de O como se describió con anterioridad. Pueden usarse las mismas condiciones de reacción como se describió con anterioridad: formación de amida como se describió con anterioridad, eliminación de PG1 como en la descripción de los grupos protectores e introducción de R8 como en las reacciones de (4a) con la amina s (4b). Los intermediarios de fórmula (2a) pueden prepararse primero ciclando una amida abierta (9a) a un éster macrocíclico (9b), que a su vez se convierte en un intermediario (2a) de la siguiente manera: PG2 es un grupo protector de carboxilos, por ej. uno de los grupos protectores de carboxilos mencionados con anterioridad, en particular un alquil C- O bencil éster, por ej. un metil, etil o t.butil éster. La reacción de (9a) en (9b) es una reacción de metátesis y se conduce como se describió con anterioridad. La eliminación de PG2 como se describió con anterioridad, produce los intermediarios (2a). Donde PG1 es un alquil C?-4 éster, se elimina por hidrólisis alcalina, por ej. con NaOH o con preferencia LiOH, en un solvente acuoso, por ej. una mezcla de alcanol d-4/agua, tales como metanol/agua o etanol/agua. Un grupo bencilo puede eliminarse por hidrogenación catalítica. En una síntesis alternativa, los intermediarios (2a) pueden prepararse de la siguiente manera: (10c) El grupo PG1 se selecciona de manera tal que se disocie de manera selectiva hacia PG2. PG2 puede ser por ej. metil o etil esteres, que pueden eliminarse por tratamiento con un hidróxido de metal alcalino en un medio acuoso, en cuyo caso PG1 por ej. es t. butilo o bencilo. o en forma alternativa, PG2 pueden ser t.butil esteres que pueden eliminarse en condiciones débilmente acidas o PG1 puede ser bencil esteres que pueden eliminarse con ácido fuerte o por hidrogenación catalítica, en los últimos dos casos PG1 por ej. es un éster benzoico tales como un éster 4-nitrobenzoico.

Primero, los intermediarios (10a) se ciclan a los esteres macrocíclicos (10b), los últimos se desprotegen por eliminación de los intermediarios del grupo PG1 (10c), que se hacen reaccionar con amina s (4b), seguido por eliminación del grupo protector de carboxilos PG2. La ciclación, la desprotección de PG1 y PG2, y el acoplamiento con (4b) son como se describió con anterioridad. Los grupos R1 pueden introducirse en cualquier etapa de la síntesis, ya sea en el último paso como se describió con anterioridad, o en una etapa anterior, antes de la formación del macrociclo, como se ilustra en el siguiente esquema: En el esquema anterior, R , R6, R7, R , X y PG2 son como se los definió con anterioridad y L1 es un grupo P3 o I, (b), donde n y R3 son como se los definió con anterioridad y donde X es N, L1 puede ser un grupo protector de nitrógenos (PG, como se definió con anterioridad) y donde X es C, L1 puede ser también un grupo -COOPG a, donde el grupo PG2a es un grupo protector de carboxilos similar como PG2, pero donde PG2a se disocia en forma selectiva hacia PG2. En una modalidad PG2a es t. butilo y PG2 es metilo o etilo. Los intermediarios (11c) y (11d) donde L1 representa un grupo (b) corresponden a los intermediarios (1a) y pueden procesarse en forma adicional como se especificó con anterioridad.

Acoplamiento de bloques de construcción P1 y P2 Los bloques de construcción P1 y P2 están ligados usando una reacción de formación de amida siguiendo los procedimientos descritos con anterioridad. El bloque de construcción P1 puede tener un grupo protector de carboxilo PG2 (como en (12b)) o puede estar ya ligado a un grupo P1' (como en (12c)). L2 es un grupo protector N (PG), o un grupo (b), como se especificó con anterioridad. L3 es hidroxi, -OPG1 o un grupo -O-R8 como se especificó con anterioridad. Donde en cualquiera de los siguientes esquemas de reacción L3 es hidroxi, antes de cada paso de la reacción, puede protegerse como un grupo -OPG1 y, si se desea, posteriormente desprotegerse nuevamente para obtener una función de hidroxilo libre. En forma similar como se describió con anterioridad, la función hidroxi pueden convertirse en un grupo -O-R8.

En el procedimiento del esquema anterior, un aminoácido de ciclopropilo (12b) o (12c) se acopla a la función de ácido del bloque de construcción P2 (12a) con la formación de una ligadura amida, siguiendo los procedimientos descritos con anterioridad. Se obtienen los intermediarios (12d) o (12e). Donde en el último L2 es un grupo (b), los productos resultantes son secuencias P3-P2-P1 que abarcan algunos de los intermediarios (11c) o (11d) en el esquema de reacción anterior. La eliminación del grupo protector de ácido en (12d), usando las condiciones apropiadas para el grupo protector usado, seguido por acoplamiento con una amina H2N-S02R7 (2b) o con HOR6 (2c) como se describió con anterioridad, nuevamente produce los intermediarios (12e), donde -COR1 son grupos amida o éster. Donde L2 es un grupo protector N, puede eliminarse produciendo los intermediarios (5a) o (6a). En una modalidad, PG en esta reacción es un grupo BOC y PG2 es metilo o etilo. Donde en forma adicional L3 es hidroxi, el material de partida (12a) es Boc-L-hidroprolina. En una modalidad particular, PG es Boc, PG2 es metilo o etilo y L3 es -O-R8. En una modalidad, L2 es un grupo (b) y estas reacciones incluyen el acoplamiento de P1 a P2-P3, que produce los intermediarios (1 a-1) o (1a) mencionados con anterioridad. En otra modalidad, L2 es un grupo protector N PG, que es como se especificó con anterioridad, y el acoplamiento reacción produce los intermediarios (12d-1) o (12e-1), a partir del cual el grupo PG puede eliminarse, usando las condiciones de reacción mencionados con anterioridad, obteniendo los intermediarios (12-f) o respectivamente (12g), que abarca los intermediarios (5a) y (6a) como se especificó con anterioridad: En una modalidad, el grupo L en el esquema anterior representa un grupo -O-PG que pUßdß introducirse en un material de partida (i2a> donde L3 es hidroxi. En este caso PG1 se elige de manera tal que pueda separarse en forma selectiva hacia el grupo L2 que es PG.

En un modo similar, bloques de construcción P2 donde X es C, que son ciclopentano o derivados de ciclopentano, pueden ligarse a los bloques de construcción P1 como se definió en el siguiente esquema donde R1, R2, L3, PG2 y PG2a son grupos protectores de carboxilo PG2a normalmente se elige de manera tal que pueda separarse en forma selectiva hacia el grupo PG2 La eliminación del grupo PG2a en (13c) produce los intermediarios (7a) o (8a), que pueden hacerse reaccionar con (5b) como se describió con anterioridad En una modalidad particular, donde X es C, R2 es H, y donde X y el carbono que lleva R2 están ligados por un enlace simple (P2 es una porción ciclopentano), PG2a y L3 tomados junto forman un enlace y el bloque de construcción P2 está representado por la fórmula Se hace reaccionar el ácido biciclico (14a) con (12b) o (12c) similar como se describió con anterioridad con (14b) y (14c) respectivamente, donde la lactona se abre para dar los intermediarios (14c) y (14e). La lactona puede abrirse usando procedimientos de éster de hidrólisis, por ejemplo usando la las condiciones de reacción descritas con anterioridad para la eliminación alcalina de un grupo PG1 en (9b), en particular usando condiciones alcalinas tales como un hidróxido de metal alcalino, por ej. NaOH, KOH, en particular LiOH.

Los intermediarios (14c) y (14e) pueden procesarse en forma adicional como se describe a continuación.

Síntesis de bloques de construcción P2 Los bloques de construcción P2 contienen tanto una pirrolidina, ciclopentano o una porción ciclopentano sustituido con un grupo -O-R8. Los bloques de construcción P2 que contienen una porción pirrolidina pueden derivarse de la hidroxi prolina disponible en el mercado. La preparación de bloques de construcción P2 que contienen un anillo ciclopentano puede realizarse como se muestra en el esquema que sigue.

El ácido biciclico (17b) puede prepararse, por ejemplo, a partir de 3,4-bis(metoxicarbonil)ciclopentanona (17a), como se describe en el texto escrito por Rosenquist et al. in Acta Chem. Scand. 46 (1992) 1127-1129. Un primer paso en este procedimiento implica la reducción del grupo ceto con un agente reductor como borohidruro de sodio en un solvente como metanol, seguido por hidrólisis de los esteres y finalmente cierre del anillo de la lactona biciclica (17b) usando procedimientos formadores de lactona, en particular usando anhídrido acético en presencia de una base débil tal como piridina. El grupo funcional ácido carboxílico en (17b) puede protegerse con la introducción de un grupo protector de carboxilos apropiado, tales como un grupo PG2, que es como se especificó con anterioridad, proporcionando de este modo el éster bicíclico (17c). El grupo PG2 en particular es lábil a los ácidos tales como un grupo t. butilo y se introduce por ej. por tratamiento con isobuteno en presencia de un ácido de Lewis o con dicarbonato de di-ter-butilo en presencia de una base tal como una amina terciaria como dimetilamino-piridina o trietilamina en un solvente como diclorometano. La abertura de la lactona de (17c) usando las condiciones de reacción descritas con anterioridad, en particular con hidróxido de litio, produce el ácido (17d), que puede usarse en forma adicional en reacciones de acoplamiento con bloques de construcción P1. El ácido libre en (17d) también puede protegerse, con preferencia con un grupo protector de ácido PG2a que se disocia en forma selectiva hacia PG2, y la función hidroxi pueden convertirse en un grupo -OPG1 o en un grupo -O-R8. Los productos obtenidos luego de la eliminación del grupo PG2 son los intermediarios (17g) y (17i) que corresponden a los intermediarios (13a) o (16a) especificados con anterioridad. Los intermediarios con estereoquímica específica pueden prepararse resolviendo los intermediarios en la secuencia de reacción anterior. Por ejemplo, (17b) pueden resolverse siguiendo procedimientos conocidos en el arte, por ej. por acción de la forma de sal con una base ópticamente activa o por cromatografía quiral, y los estereoisómeros resultantes pueden procesarse en forma adicional como se describió con anterioridad. Los grupos OH y COOH en (17d) están en la posición cis. Los análogos trans pueden prepararse invirtiendo la estereoquímica del carbono que lleva la función OH usando reactivos específicos en las reacciones introduciendo OPG1 o O-R8 que invierte la estereoquímica, tales como, por ej. aplicando una reacción de Mitsunobu. En una modalidad, los intermediarios (17d) se acoplan a los bloques P1 (12b) o (12c), cuyas reacciones de acoplamiento corresponden al acoplamiento de (13a) o (16a) con los mismos bloques P1 , usando las mismas condiciones. La posterior introducción de un sustituyente -O-R8- como se describió con anterioridad seguido por eliminación del grupo de protección acida PG2 produce los intermediarios (8a-1), que son una sub-clase de los intermediarios (7a), o parte de los intermediarios (16a). Los productos de reacción de la eliminación de PG2 pueden acoplarse en forma adicional a un bloque de construcción P3. En una modalidad PG2 en (17d) es t. butilo que pueden eliminarse en condiciones acidas, por ej. con ácido trifluoroacético. < 17 ) Un bloque de construcción P2 insaturado, es decir un anillo ciclopenteno, puede prepararse como se ilustra en el esquema que sigue. (17a) (19a) (19b) Una reacción de bromación-eliminación de la 3,4-bis(metoxicarbonil)ciclopentanona (17a) como se describe en el texto escrito por Dolby et al. in J. Org. Chem. 36 (1971) 1277-1285 seguido por reducción del grupo funcional ceto con un agente reductor como borohidruro de sodio proporciona el ciclopentenol (19a). La hidrólisis de éster selectiva usando por ejemplo hidróxido de litio en un solvente como una mezcla de dioxano y agua, proporciona el ciclopentenol monoéster sustituido con hidroxi (19b). Un bloque de construcción P2 insaturado donde R2 también puede ser distinto de hidrógeno, puede prepararse como se muestra en el esquema que sigue. (20g) (20h) (20i) La oxidación del 3-metil-3-1-ol disponible en el mercado (20a), en particular por un agente oxidante como clorocromato de piridinio, produce (20b), que se convierte en el correspondiente metil éster, por ej. por tratamiento con cloruro de acetilo en metanol, seguido por una reacción de bromación con bromo produciendo el a-bromo éster (20c). El último puede luego condensarse con el alquenil éster (20e), obtenido de (20d) una reacción formadora de éster. El éster en (20e) con preferencia es un t.butil éster que puede prepararse a partir del correspondiente ácido disponible en el mercado (20d), por ej. por tratamiento con dicarbonato de di-ter-butilo en presencia de una base como dimetilaminopiridina. El intermediario (20e) se trata con una base tal como diisopropilamida de litio en un solvente como tetrahidrofurano, y se hace reaccionar con (20c) para dar el diéster de alquenilo (20f). La ciclación de (20f) por una reacción de metátesis de olefma, realizada como se describió con anterioridad, proporciona el derivado ciclopenteno (20g). La epoxidación estereoselectiva de (20g) puede llevarse a cabo usando el método de epoxidación asimétrica de Jacobsen para obtener el epóxido (20h). Finalmente, una reacción de apertura del epóxido en condiciones alcalinas, por ej. con el agregado de una base, en particular DBN (1 ,5-diazabiciclo-[4,3,0]non-5-eno), produce el alcohol (20i). En forma opcional, en doble enlace en el intermediario (20i) puede reducirse, por ejemplo por hidrogenación catalítica usando un catalizador como paladio sobre carbón, produciendo el correspondiente compuesto ciclopentano. El t.butil éster puede eliminarse al correspondiente ácido, que posteriormente se acopla a un bloque de construcción P1. El grupo -O-R8 puede introducirse sobre los anillos de pirrolidina, ciclopentano o ciclopenteno en cualquier etapa conveniente de la síntesis de los compuestos de acuerdo con la presente invención. Un método es primero introducir el grupo -O-R8 para los mencionados anillos y posteriormente agregar los otros bloques de construcción deseados, es decir P1 (en forma opcional con la cola P1 ') y P3, seguido por la formación del macrociclo. Otro método es acoplar los bloques de construcción P2, que no lleva sustituyente -O-R8, con cada uno de P1 y P3, y agregar el -O-R8 ya sea antes o después de la formación del macrociclo. En el último procedimiento, las porciones P2 tienen un grupo hidroxi, que puede protegerse por un grupo protector de hidroxi PG1. R8 grupos pueden introducirse en bloques de construcción P2 haciendo reaccionar los intermediarios sustituidos con hidroxi (21a) o (21 b) con los intermediarios (4b) similar como se describió con anterioridad para la síntesis de (I) comenzando con (4a). Estas reacciones se representan en los esquemas que siguen, donde L2 es como se especificó con anterioridad y L5 y L5a en forma independiente entre sí, representan hidroxi, un grupo protector de carboxilo -OPG2 o -OPG2a, o L5 pueden representar también un grupo P1 tal como un grupo (d) o (e) como se especificó con anterioridad, o L5a pueden representar también un grupo P3 tal como un grupo (b) como se especificó con anterioridad Los grupos PG2 y PG2a son como se los especificó con anterioridad. Donde los grupos L5 y L5a son PG2 o PG2a, estos se eligen de manera tal que cada grupo se disocia en forma selectiva hacia el otro Por ejemplo, uno de L5 y L5a puede ser un grupo metilo o etilo, y el otro un grupo bencilo o t. butilo. En una modalidad en (21a), L2 es PG y L5 es -OPG2, o en (21d), L5a es -OPG2 y L5 es -OPG2 y los grupos PG2 se eliminan como se describió con anterioridad. (21 a) (21b) (21b-1) (21c) En otra modalidad el grupo L2 es Boc, L5 es hidroxi y el material de partida (21a) es BOC-hidroxiprolina disponible en el mercado, o cualquier otra de sus formas estereoisméricas, por ej. BOC-L-hidroxiprolina, en particular el isómero trans de la anterior. Donde L5 en (21 b) es un grupo protector de carboxilo, puede eliminarse siguiendo los procedimientos descritos con anterioridad para (21c). Incluso en otra modalidad PG en (21b-1) es Boc y PG2 es un éster de alquilo inferior, en particular un metil o etil éster.

La hidrólisis del último éster al el ácido puede realizarse por procedimientos estándar, por ej. hidrólisis acida con ácido clorhídrico en metanol o con un hidróxido de metal alcalino tal como NaOH, en particular con LiOH. En otra modalidad, los análogos ciclopenteno o ciclopentano sustituidos con hidroxi (21d) se convierten en (21e), que, donde L5 y L5a son -OPG2 o -OPG2a, pueden convertirse en los correspondientes ácidos (21f) por eliminación del grupo PG2. La eliminación de PG2a en (21e-1 ) conduce a intermediarios similares. Los intermediarios (4b), que son derivados de amino, son compuestos conocidos o pueden prepararse fácilmente usando procedimientos conocidos en el arte.

Síntesis de bloques de construcción P1 El aminoácido de ciclopropano usado en la preparación del fragmento P1 se encuentra disponible en el mercado o puede prepararse usando procedimientos conocidos en el arte. En particular el amino-vinil-ciclopropil etil éster (12b) puede obtenerse de acuerdo con el procedimiento descrito en WO 00/09543 o como se ilustra en el siguiente esquema, donde PG2 es un grupo protector de carboxilos como se especificó con anterioridad: H2N. COOPG2 H2N .COOPG2 ? (12b-1 ) (12b) El tratamiento de la imina disponible en el mercado o de fácil obtención (31a) con 1 ,4-dihalobuteno en presencia de una base produce (31b), que luego de la hidrólisis produce aminoácido de ciclopropilo (12b), que tiene el sustituyente alilo syn en el grupo carboxilo. La resolución de la mezcla enantiomérica (12b) produce (12b-1). La resolución se realiza usando procedimientos conocidos en el arte tales como separación enzimática; cristalización con un ácido quiral, o derivación química; o por cromatografía quiral en columna. Los intermediarios (12b) o (12b-1) pueden acoplarse a los derivados P2 apropiados como se describió con anterioridad. Los bloques de construcción P1 para la preparación de los compuestos de acuerdo con general formula (I) donde R1 es -OR6 o -NH-SO2R7 pueden prepararse haciendo reaccionar amino ácidos (32a) con el alcohol o la amina apropiados respectivamente en condiciones estándar para la formación de éster o amida. Aminoácidos de ciclopropilo (32a) se preparan introduciendo un grupo protector N PG, y eliminación de PG2 y los aminoácidos (32a) se convierten en las amidas (12c-1) o esteres (12c-2), que son subgrupos de los intermediarios (12c), como se define en el siguiente esquema de reacción, donde PG es como se especificó con anterioridad.

La reacción de (32a) con amina (2b) es un procedimiento formador de amida. La reacción similar con (2c) es una reacción de formación de éster. Ambas pueden realizarse siguiendo los procedimientos descritos con anterioridad. Esta reacción produce los intermediarios (32b) o (32c) a partir del cual el grupo protector de amino se elimina con la aplicación de métodos estándar tales como aquellos descritos con anterioridad. Esto a su vez produce el intermediario deseado (12c-1). Los materiales iniciales (32a) pueden prepararse a partir de los intermediarios antes mencionados (12b) primero introduciendo un grupo protector N PG y la posterior eliminación del grupo PG2. En una modalidad la reacción de (32a) con (2b) se realiza por tratamiento del aminoácido con un agente de acoplamiento, por ejemplo N,N'-carbonil-diimidazol (CDI) o similares, en un solvente como THF seguido por reacción con (2b) en presencia de una base tal como 1 ,8-diazabiciclo[5,4,0]- undec-7-eno (DBU). En forma alternativa el aminoácido puede tratarse con (2b) en presencia de una base como diisopropiletilamina seguido por tratamiento con un agente de acoplamiento tal como hexafluorofosfato de benzotriazol-1-il-oxi-tris-pirrolidin-fosfonio (disponible en el mercado como PyBOP®) para efectuar la introducción del grupo sulfonamida. Los intermediarios (12c-1) o (12c-2) a su vez pueden acoplarse a la prolina apropiada, ciclopentano o derivados de ciclopentano como se describió con anterioridad.

Síntesis de los bloques de construcción P3 Los bloques de construcción P3 se encuentran disponibles en el mercado o pueden prepararse de acuerdo con metodologías conocidas para aquellas personas con experiencia en el arte. Una de estas metodologías se muestra en el esquema que sigue y usa aminas monoaciladas, tales como trifluoroacetamida o una amina protegida con Boc.

En el esquema anterior, R junto con el grupo CO forma un grupo protector N, en particular R es f-butox¡, trifluorometilo; R3 y n son como se los definió con anterioridad y LG es un grupo saliente, en particular halógeno, por ej. cloro o bromo.

Las aminas monoaciladas (33a) se tratan con una base fuerte tal como hidruro de sodio y posteriormente se hacen reaccionar con un reactivo LG-alquenilo Cs-ß (33b), en particular haloalquenilo Cs-e, para formar las correspondientes aminas protegidas (33c). La desprotección de (33c) produce (5b), que sen bloques de construcción P3. La desprotección dependerá del grupo funcional R, así si R es f-butoxi, la desprotección de la correspondiente amina protegida con Boc puede lograrse con tratamiento con un ácido, por ej. ácido trifluoroacético. En forma alternativa, cuando R es por ejemplo trifluorometilo, la eliminación del grupo R se logra con una base, por ej. hidróxido de sodio. El siguiente esquema ilustra incluso otro método para preparar un bloque de construcción P3, es decir una síntesis de Gabriel de las alquenilaminas C5_8 primarias, que puede llevarse a cabo por tratamiento de una ftalimida (34a) con una base, tales como NaOH o KOH, y con (33b), que es como se especificó con anterioridad, seguido por hidrólisis de la N-alquenilimida intermediaria para generar una alquenilamina Cs-ß primaria (5b- 1 ).

En el esquema anterior, n es como se definió con anterioridad. Los compuestos de fórmula (I) pueden convertirse entre sí siguiendo reacciones de transformación de grupos funcionales conocidas en el arte. Por ejemplo, los grupos amino pueden N-alquilarse, los grupos nitro reducirse a grupos amino, un átomo de halo puede cambiarse por otro halo. Los compuestos de fórmula (I) pueden convertirse en la correspondiente forma de ?/-óxido siguiendo procedimientos conocidos en el arte para convertir un nitrógeno trivalente en su forma de ?/-óxido. Dicha reacción de ?/-oxidación puede llevarse a cabo en general haciendo reaccionar el material de partida de fórmula (I) con un peróxido orgánico o inorgánico apropiado. Los peróxidos inorgánicos apropiados comprenden, por ejemplo, peróxido de hidrógeno, peróxidos de metales alcalinos o metales alcalino-térreos, por ej. peróxido de sodio, peróxido de potasio; los peróxidos orgánicos apropiados pueden comprender peroxiácidos tales como, por ejemplo, ácido bencencarboperoxoico o ácido bencencarboperoxoico sustituido con halo, por ej. ácido 3-clorobencencarboperoxoico, ácidos peroxoalcanoicos, por ej. ácido peroxoacético, alquilhidroperóxidos, por ej. hidro-peróxido de fer-butilo. Los solventes apropiados son, por ejemplo, agua, alcoholes inferiores, por ej. etanol y similares, hidrocarburos, por ej. tolueno, cetonas, por ej. 2-butanona, hidrocarburos halogenados, por ej. diclorometano, y mezclas de dichos solventes. La forma éstereoquímicamente pura de los compuestos de fórmula (I) pueden obtenerse mediante la aplicación de procedimientos conocidos en el arte. Los diasterómeros pueden separarse por métodos físicos tales como técnicas cromatográficas y cristalización selectiva, por ej., distribución a contra-corriente, cromatografía líquida y similares. Los compuestos de fórmula (I) pueden obtenerse como mezclas racémicas de enantiómeros que pueden separarse de otros siguiendo procedimientos de resolución conocidos en el arte. Los compuestos racémicos de fórmula (I), que son lo suficientemente alcalinos o ácidos pueden convertirse en la correspondiente forma de sal diasteromérica por reacción con un ácido quiral apropiado, respectivamente base quiral. Dichas formas de sal diasteromérica se separan posteriormente, por ejemplo, por cristalización selectiva o fraccionada y se liberan de éstas los enantiómeros por álcali o ácido. Una forma alternativa de separar la forma enantiomérica de los compuestos de fórmula (I) implica cromatografía líquida, en particular cromatografía líquida usando una fase fija quiral. Dicha forma isomérica éstereoquímicamente pura también puede derivarse de la correspondiente forma éstereoquímicamente pura de los materiales de partida apropiados, siempre que la reacción ocurra de manera estereoespecífica. Con preferencia si se desea un estereoisómero específico, dicho compuesto puede sintetizarse por métodos de preparación estereoespecíficos. Estos métodos pueden emplear en forma ventajosa materiales de partida enantioméricamente puros. En un aspecto adicional, la presente invención se refiere a una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de fórmula (I) como se especifica aquí, o un compuesto de cualquiera de los sub-grupos de los compuestos de fórmula (I) como se especifica aquí, y un vehículo aceptable desde el punto de vista farmacéutico. Una cantidad terapéuticamente efectiva en este contexto es una cantidad suficiente para actuar en forma profiláctica, para estabilizar o reducir la infección viral, y en particular la infección viral por VHC, en sujetos infectados o sujetos que presentan riesgo de infección. Incluso en un aspecto adicional, esta invención se refiere a un proceso para preparar una composición farmacéutica como se especifica aquí, que comprende mezclar minuciosamente un vehículo aceptable desde el punto de vista farmacéutico con una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de fórmula (I), como se especifica aquí, o de un compuesto de cualquiera de los sub-grupos de los compuestos de fórmula (I) como se especifica aquí. Por lo tanto, los compuestos de la presente invención o cualquier sub-grupo de éstos pueden formularse en varias formas farmacéuticas para fines de administración. Como composiciones apropiadas pueden citarse todas las composiciones empleadas normalmente para la administración sistémica de fármacos. Para preparar las composiciones farmacéuticas de esta invención, una cantidad efectiva del compuesto particular, de manera opcional en forma de sal de adición o complejo metálico, como componente activo se combina en íntima mezcla con un vehículo aceptable desde el punto de vista farmacéutico, cuyo vehículo puede tomar una amplia variedad de formas dependiendo de la forma de preparación deseada para administración. Estas composiciones farmacéuticas se desean en forma de dosificación unitaria apropiada, en particular, para administración por vía oral, rectal, percutánea o por inyección parenteral. Por ejemplo, en la preparación de las composiciones en forma de dosificación oral, puede emplearse cualquiera de los medios farmacéuticos usuales tales como, por ejemplo, agua, glicoles, aceites, alcoholes y similares en el caso de preparaciones líquidas orales tales como suspensiones, jarabes, elixires, emulsiones y soluciones; o vehículos sólidos tales como almidones, azúcares, caolín, lubricantes, aglutinantes, agentes desintegrantes y similares en el caso de polvos, pildoras, cápsulas y comprimidos. Debido a su facilidad de administración, los comprimidos y las cápsulas representan la forma unitaria de dosificación oral más ventajosa, en cuyo caso obviamente se emplean vehículos farmacéuticos sólidos. Para composiciones parenterales, el vehículo usualmente comprenderá agua estéril, por lo menos en gran parte, aunque pueden incluirse otros componentes, por ejemplo, para ayudar en la solubilidad. Pueden prepararse soluciones inyectables, por ejemplo, en las cuales el vehículo comprende solución salina, solución de glucosa o una mezcla de solución salina y solución de glucosa. Pueden preparase también suspensiones inyectables en cuyo caso pueden emplearse vehículos líquidos apropiados, agentes de suspensión y similares. También se incluyen las preparaciones de forma sólida que pretenden convertirse, inmediatamente antes de su uso, en preparaciones de forma liquida. En las composiciones apropiadas para administración percutánea, el vehículo comprende, en forma opcional, un agente potenciador de la penetración y/o un agente humectante apropiado, combinado en forma opcional con aditivos apropiados de cualquier naturaleza en menores proporciones, cuyos aditivos no introducen un efecto perjudicial significativo en la piel. Los compuestos de la presente invención también pueden administrarse por inhalación o insuflación oral por medio de métodos y formulaciones empleados en el arte para administración por esta vía. De este modo, en general los compuestos de la presente invención pueden administrarse a los pulmones en forma de una solución, una suspensión o un polvo seco, prefiriéndose una solución. Cualquier sistema desarrollado para la administración de soluciones, suspensiones o polvos secos por inhalación o insuflación oral son apropiados para la administración de los presentes compuestos. De este modo, la presente invención proporciona, además, una composición farmacéutica adaptada para administración por inhalación o insuflación a través de la boca que comprende un compuesto de fórmula (I) y un vehículo aceptable desde el punto de vista farmacéutico. Con preferencia, los compuestos de la presente invención se administran a través de inhalación de una solución en dosis nebulizadas o en aerosoles. Resulta especialmente ventajoso formular las composiciones farmacéuticas mencionadas con anterioridad en forma de dosificación individual para facilidad de administración y uniformidad de dosificación. Forma de dosificación individual como se usa aquí se refiere a unidades físicamente individuales apropiadas como dosificaciones unitarias, cada unidad contiene una cantidad predeterminada de componente activo calculada para producir el efecto terapéutico deseado en asociación con el vehículo farmacéutico requerido. Algunos ejemplos de dichas formas de dosificación unitaria son los comprimidos (incluyendo comprimidos ranurados o recubiertos), cápsulas, pildoras, supositorios, paquetes de polvo, obleas, las soluciones inyectables o suspensiones y similares, y sus múltiples adicionales. Los compuestos de fórmula (I) muestran propiedades antivirales. Las infecciones virales y sus enfermedades asociadas que pueden tratarse usando los compuestos y métodos de la presente invención incluyen aquellas infecciones generadas por el VHC y otros flavivirus patogénicos tales como Fiebre amarilla, Fiebre del dengue (tipos 1-4), Encefalitis de St. Louis, Encefalitis japonesa, Encefalitis del valle de Murray, Virus del Nilo Occidental y Virus de Kunjin. Las enfermedades asociadas con el VHC incluyen fibrosis hepática progresiva, inflamación y necrosis conducente a la cirrosis, enfermedad hepática terminal, y HCC; y para los otros flavivirus patogénicos las enfermedades incluyen fiebre amarilla, fiebre del dengue, fiebre hemorrágica y encefalitis. Una cantidad de los compuestos de esta invención incluso son activos contra cepas mutadas de VHC. En forma adicional, muchos de los compuestos de esta invención muestran un favorable perfil de farmacocinética y tienen propiedades atractivas en lo que respecta a la biodisponibilidad, incluyendo una vida media, ABC (área bajo la curva) y valores pico aceptables y carecen de fenómenos desfavorables tales como inicio rápido insuficiente y retención de tejidos.

La actividad antiviral in vitro contra el VHC de los compuestos de fórmula (I) se evaluó en un sistema de replicón del VHC celular basado en Lohmann et al. (1999) Science 285:110-113, con las modificaciones adicionales descritas por Krieger et al. (2001) Journal of Virology 75: 4614-4624, que además se ejemplifica en la sección de ejemplos. Este modelo, mientras que no es un modelo de infección completo para VHC, es ampliamente aceptado como el modelo más robusto y eficiente de replicación de ARN de VHC autónomo actualmente disponible. Los compuestos que exhiben actividad anti-VHC en este modelo celular se consideran candidatos para desarrollo adicional en el tratamiento de infecciones producidas por el VHC en mamíferos. Se apreciará que es importante distinguir entre compuestos que interfieren específicamente con las funciones del VHC de aquellos que ejercen efectos citotóxicos o citostáticos en el modelo de replicón del VHC, y como consecuencia provocan una reducción en el ARN del VHC o concentración de enzimas informantes relacionadas. Se conocen en el campo ensayos para la evaluación de la citotoxicidad celular basada, por ejemplo, en la actividad de enzimas mitocondriales usando colorantes redox fluorogénicos tales como la resazurina. Además, existen pantallas contra-celulares para la evaluación de la inhibición no selectiva de la actividad de los genes informantes relacionados, tales como luciferasa de la mosca del fuego. Los tipos de células apropiadas pueden equiparse por transfección estable con un gen informante de luciferasa cuya expresión depende de un promotor constitutivamente activo, y dichas células pueden usarse como contra-pantalla para eliminar inhibidores no selectivos. Debido a sus propiedades antivirales, en particular sus propiedades anti-VHC, los compuestos de fórmula (I) o cualquier sub-grupo de éstos, sus profármacos, ?/-óxidos, sales de adición, aminas cuaternarias, complejos metálicos y formas éstereoquímicamente isoméricas, son útiles en el tratamiento de individuos que experimentan una infección viral, en particular una infección por VHC, y para la profilaxis de estas infecciones. En general, los compuestos de la presente invención pueden ser útiles en el tratamiento de animales de sangre caliente infectados con virus, en particular flaviviruses tales como VHC. Los compuestos de la presente invención o cualquier sub-grupo de éstos pueden usarse por lo tanto como medicamentos. Dicho uso como medicamento o método de tratamiento comprende la administración sistémica a sujetos infectados con el virus o a sujetos susceptibles de contraer infecciones virales de una cantidad efectiva para combatir las afecciones asociadas con la infección viral, en particular la infección por VHC. La presente invención se refiere, además, al uso de los presentes compuestos o cualquier sub-grupo de éstos en la fabricación de un medicamento para el tratamiento o la prevención de infecciones virales, en particular la infección por VHC. La presente invención además se refiere a un método de tratamiento de un animal de sangre caliente infectado por un virus, o que presenta riesgo de infección por un virus, en particular por VHC, dicho método comprende la administración de una cantidad efectiva desde el punto de vista antiviral de un compuesto de fórmula (I), como se especifica aquí, o de un compuesto de cualquiera de los sub-grupos de los compuestos de fórmula (I), como se especifica aquí. Además, la combinación del compuesto anti-VHC conocido con anterioridad, tal como, por ejemplo, interferón-a (IFN-a), interferón-a pegilado y/o ribavirina, y un compuesto de fórmula (I) puede usarse como medicamento en un tratamiento combinado. El término "tratamiento combinado" se refiere a un producto que contiene obligatoriamente (a) un compuesto de fórmula (I), y (b) en forma opcional otro compuesto anti-VHC, como preparación combinada para uso simultáneo, separado o consecutivo en el tratamiento de infecciones producidas por el VHC, en particular, en el tratamiento de infecciones con VHC. Los compuestos anti-VHC abarcan agents seleccionados de un inhibidor de polimerasa del VHC, un inhibidor de proteasa del VHC, un inhibidor de otro objetivo en el ciclo de vida del VHC, y un agente inmunomodulador, un agente antiviral y sus combinaciones. Los inhibidores de polimerasa del VHC incluyen, sin carácter limitativo, NM283 (valopicitabina), R803, JTK-109, JTK-003, VHC-371 , VHC-086, VHC-796 y R-1479. Los inhibidores de proteasas del VHC (Inhibidores de NS2-NS3 e inhibidores de NS3-NS4A) incluyen, sin carácter limitativo, los compuestos de WO02/18369 (ver, por ej., página 273, líneas 9-22 y página 274, línea 4 hasta la página 276, línea 11); BILN-2061 , VX-950, GS-9132 (ACH-806), SCH-503034, y SCH-6. Otros agents adicionales que pueden usarse son aquellos revelados en W098/17679, WO00/056331 (Vértex); WO 98/22496 (Roche); WO 99/07734, (Boehringer Ingelheim), WO 2005/073216, WO 2005073195 (Medivir) y agentes con estructuras similares. Los inhibidores de otros objetivos en el ciclo de vida del VHC, incluyendo helicasa NS3; inhibidores de metaloproteasa; inhibidores de oligonucleótidos antisentido, tales como ISIS-14803, AVI-4065 y similares; siARN tales como SIRPLEX-140-N y similares; ARN de bulbos capilares cortos codificados por vectores (shRNA); DNAzimas; ribozimas específicas del VHC tales como heptazima, RPI.13919 y similares; inhibidores de entrada tales como HepeX-C, HuMax-HepC y similares; inhibidores de alfa glucosidasa tales como celgosivir, UT-231 B y similares; KPE-02003002; y BIVN 401. Los agentes inmunomoduladores incluyen, sin carácter limitativo; compuestos con isoforma de interferón natural y recombinante, incluyendo a-interferón, ß-interferón, ?-interferón, ?-interferón y similares, tales como Intron A®, Roferon-A®, Canferon-A300®, Advaferon®, Infergen®, Humoferon®, Sumiferón MP®, Alfaferone®, IFN-beta®, Feron® y similares; compuestos con estructura de interferón derivado (pegilado) de polietilenglicol, tales como interferón-a-2a PEG (Pegasys®), interferón-a-2b PEG (PEG-Intron®), IFN-a-conl pegilado y similares; formulaciones y derivaciones de acción prolongada de los compuestos con estructura de interferón tales como el interferón fusionado con albúmina albuferón a y similares; compuestos que estimulan la síntesis de interferón en las células, tales como resiquimod y similares; interleucinas; compuestos que potencian el desarrollo de la respuesta de células T ayudantes del tipo 1 , tales como SCV-07 y similares; agonistas del receptor símil TOLL tales como CpG-10101 (actilon), isatoribina y similares; timosina a-1 ; ANA-245; ANA-246; diclorhidrato de histamina; propagermanio; tetraclorodecaóxido; ampligen; IMP-321 ; KRN-7000; anticuerpos, tales como civacir, XTL-6865 y similares; y vacunas profilácticas y terapéuticas tales como InnoVac C, VHC E1 E2/MF59 y similares. Otros agentes antivirales incluyen, sin carácter limitativo, ribavirina, amantadina, viramidina, nitazoxanida; telbivudine; NOV-205; taribavirina; inhibidores del ingreso de ribosoma interno; inhibidores virales de amplio espectro, tales como inhibidores de IMPDH (por ej., los compuestos de US5,807,876, US6,498,178, US6, 344,465, US6,054,472, WO97/40028, WO98/40381 , WO00/56331 , y ácido micofenólico y sus derivados, y incluyendo, sin carácter limitativo VX-950, merimepodib (VX-497), VX-148, y/o VX-944); o combinaciones de cualquiera de los anteriores. De este modo, para combatir o tratar las infecciones por VHC, los compuestos de fórmula (I) pueden administrarse en forma concomitante en combinación con por ejemplo, interferón-a (IFN-a), interferón-a pegilado y/o ribavirina, como también productos terapéuticos basados en anticuerpos dirigidos contra epítopes de VHC, ARN de interferencia pequeña (Si RNA), ribozimas, DNAzimas, ARN antisentido, antagonistas de moléculas pequeñas de por ejemplo proteasa NS3, helicasa NS3 y polimerasa NS5B. En consecuencia, la presente invención se refiere al uso de un compuesto de fórmula (I) o cualquier sub-grupo de éstos como se definió con anterioridad para la fabricación de un medicamento útil para inhibir la actividad del VHC en un mamífero infectado con virus del VHC, donde dicho medicamento se usa en un tratamiento combinado, dicho tratamiento combinado con preferencia comprende un compuesto de fórmula (I) y otro compuesto inhibidor de VHC, por ej. IFN-a (pegilado) y/o ribavirina. Incluso en otro aspecto se proporcionan combinaciones de un compuesto de fórmula (I) como se especifica aquí y un compuesto anti-VIH. Los últimos son con preferencia aquellos inhibidores del VIH que tienen un efecto positivo sobre el metabolismo de los fármacos y/o sobre su farmacocinética que mejora la biodisponibilidad. Un ejemplo de dicho inhibidor de VIH es ritonavir. Como tal, la presente invención proporciona, además, una combinación que comprende (a) un inhibidor de proteasa NS3/4a del VHC de fórmula (I) o una de sus sales aceptables desde el punto de vista farmacéutico; y (b) ritonavir o una de sus sales aceptables desde el punto de vista farmacéutico. El compuesto ritonavir, y sus sales aceptables desde el punto de vista farmacéutico, y los métodos para su preparación se describen en WO 94/14436. Para obtener una forma de dosificación preferida de ritonavir, ver US 6,037,157, y los documentos citados allí: US 5,484,801 , US 08/402,690, y WO 95/07696 y WO 95/09614. Ritonavir tiene la siguiente fórmula: En una modalidad adicional, la combinación comprende (a) un inhibidor de proteasa NS3/4a del VHC de fórmula (I) o una de sus sales aceptables desde el punto de vista farmacéutico; y (b) ritonavir o una de sus sales aceptables desde el punto de vista farmacéutico; además comprende un compuesto anti-VHC adicional seleccionado de los compuestos como se describe aqui. En una modalidad de la presente invención se proporciona un proceso para preparar una combinación como se describe aqui, que comprende el paso de combinar un inhibidor de proteasa NS3/4a del VHC de fórmula (I) o una de sus sales aceptables desde el punto de vista farmacéutico, y ritonavir o una de sus sales aceptables desde el punto de vista farmacéutico. Una modalidad alternativa de esta invención proporciona un proceso en el cual la combinación comprende uno o más agentes adicionales como se describe aquí.

Las combinaciones de la presente invención pueden usarse como medicamentos. Dicho uso como medicamento o método de tratamiento comprende la administración sistémica a sujetos infectados con VHC de una cantidad efectiva para combatir las afecciones asociadas con VHC y otros flavi- y pestivirus patogénicos. En consecuencia, las combinaciones de la presente invención pueden usarse en la fabricación de un medicamento útil para tratar, prevenir o combatir la infección o enfermedad asociada con la infección por VHC en un mamífero, en particular para tratar afecciones asociadas con VHC y otros flavi- y pestivirus patogénicos. En una modalidad de la presente invención se proporciona una composición farmacéutica que comprende una combinación de acuerdo con cualquiera de las modalidades descritas aqui y un excipiente aceptable desde el punto de vista farmacéutico. En particular, la presente invención proporciona una composición farmacéutica que comprende (a) una cantidad terapéuticamente efectiva of un inhibidor de proteasa NS3/4a del VHC de fórmula (I) o una de sus sales aceptables desde el punto de vista farmacéutico, (b) una cantidad terapéuticamente efectiva de ritonavir o una de sus sales aceptables desde el punto de vista farmacéutico, y (c) un excipiente aceptable desde el punto de vista farmacéutico. En forma opcional, la composición farmacéutica además comprende un agente adicional seleccionado de un inhibidor de polimerasa del VHC, un inhibidor de proteasa del VHC, un inhibidor de otro objetivo en el ciclo de vida del VHC, y un agente inmunomodulador, un agente antiviral y sus combinaciones.

Las composiciones pueden formularse en formas de dosificación farmacéutica apropiadas tales como la forma de dosificación descrita con anterioridad. Cada uno de los componentes activos puede formularse por separado y las formulaciones pueden administrarse en forma concomitante o una formulación que contiene ambos y si se desea pueden proporcionarse componentes activos adicionales. Como se usa aqui, el término "composición" pretende abarcar un producto que comprende los componentes especificados, como también cualquier producto que se obtiene, directamente o indirectamente, de la combinación de los componentes especificados. En una modalidad las combinaciones provistas aquí también pueden formularse como preparación combinada para uso simultáneo, separado o consecutivo en la terapia contra el VIH. En tal caso, el compuesto de fórmula general (I) o cualquier sub-grupo de éstos, se formula en una composición farmacéutica que contiene otros excipientes aceptables desde el punto de vista farmacéutico, y ritonavir se formula por separado en una composición farmacéutica que contiene otros excipientes aceptables desde el punto de vista farmacéutico. De manera conveniente, estas dos composiciones farmacéuticas separadas pueden ser parte de un equipo para uso simultáneo, separado o consecutivo. De este modo, los componentes individuales de la combinación de la presente invención pueden administrarse por separado en diferentes momentos durante el transcurso del tratamiento o en forma concurrente en forma de combinación individual o dividida. Se debe entender que la presente invención, por lo tanto, abarca todos dichos regímenes de tratamiento alternativo o simultáneo y el término "administrar" debe interpretarse en consecuencia. En una modalidad preferida, las formas de dosificación separadas se administran aproximadamente en forma simultánea. En una modalidad, la combinación de la presente invención contiene una cantidad de ritonavir, o una de sus sales aceptables desde el punto de vista farmacéutico, que es suficiente para mejorar a nivel clínico la biodisponibilidad del inhibidor de proteasa NS3/4a del VHC de fórmula (I) con relación a la biodisponibilidad cuando dicho inhibidor de proteasa NS3/4a del VHC de fórmula (I) se administra solo. En otra modalidad, la combinación de la presente invención contiene una cantidad de ritonavir, o una de sus sales aceptables desde el punto de vista farmacéutico, que es suficiente para aumentar por lo menos una de las variables de farmacocinética del inhibidor de proteasa NS3/4a del VHC de fórmula (I) seleccionadas de t-? 2, Cm¡n, Cmax, Css, ABC a las 12 horas, o ABC a las 24 horas, con relación a dicha por lo menos una variable de farmacocinética cuando el inhibidor de proteasa NS3/4a del VHC de fórmula (I) se administra solo. Una modalidad adicional se refiere a un método para mejorar la biodisponibilidad de un inhibidor de proteasa NS3/4a del VHC que comprende administrar a un individuo que necesita dicha mejoría una combinación como se define aqui, que comprende una cantidad terapéuticamente efectiva de cada componente de dicha combinación. En una modalidad adicional, la invención se refiere al uso de ritonavir o una de sus sales aceptables desde el punto de vista farmacéutico, como mejorador de por lo menos una de las variables de farmacocinética de un inhibidor de proteasa NS3/4a del VHC de fórmula (I) seleccionada de t-? 2, Cmin, Cmax, Css, ABC a las 12 horas, o ABC a las 24 horas; con la salvedad de que dicho uso no se practique en el cuerpo humano o de un animal. El término "individuo" como se usa aquí se refiere a un animal, con preferencia un mamífero, con la mayor preferencia un humano, que ha sido objeto de tratamiento, observación o experimentación. Biodisponibilidad se define como la fracción de dosis administrada que alcanza la circulación sistémica. t?/2 representa la vida media o el tiempo transcurrido para que la concentración plasmática vuelva a la mitad de su valor original. Css es la concentración en estado estacionario, es decir la concentración a la cual la velocidad de entrada del fármaco es igual a la velocidad de eliminación. Cm¡n se define como la concentración más baja (mínima) medida durante el intervalo de dosificación. Cmax, representa la concentración más alta (máxima) durante el intervalo de dosificación. ABC se define como el área bajo la curva de concentración plasmática-tiempo para un período de tiempo definido. Las combinaciones de esta invención pueden administrarse a los humanos en rangos de dosificación específicos para cada componente incluido en dichas combinaciones. Los componentes comprendidos en dichas combinaciones pueden administrarse juntos o por separado. Los inhibidores de proteasa NS3/4a de fórmula (I) o cualquier sub-grupo de éstos, y ritonavir o una de sus sales o esteres aceptables desde el punto de vista farmacéutico, pueden tener niveles de dosificación en el orden de 0.02 a 5.0 gramos por día. Cuando el inhibidor de proteasa NS3/4a del VHC de fórmula (I) y ritonavir se administran en combinación, la relación en peso del inhibidor de proteasa NS3/4a del VHC de fórmula (I) a ritonavir se encuentra de manera apropiada en el rango de desde aproximadamente 40:1 hasta aproximadamente 1:15, o desde aproximadamente 30:1 hasta aproximadamente 1 :15, o desde aproximadamente 15: 1 hasta aproximadamente 1 : 15, normalmente desde aproximadamente 10: 1 hasta aproximadamente 1 :10, y más normalmente desde aproximadamente 8:1 hasta aproximadamente 1 :8. También son útiles las relaciones en peso de los inhibidores de proteasa NS3/4a del VHC de fórmula (I) a ritonavir que oscilan desde aproximadamente 6:1 hasta aproximadamente 1 :6, o desde aproximadamente 4:1 hasta aproximadamente 1 :4, o desde aproximadamente 3:1 hasta aproximadamente 1 :3, o desde aproximadamente 2:1 hasta aproximadamente 1 :2, o desde aproximadamente 1.5:1 hasta aproximadamente 1 :1.5. En un aspecto, la cantidad en peso de los inhibidores de proteasa NS3/4a del VHC de fórmula (I) es igual a o mayor que la de ritonavir, donde la relación en peso del inhibidor de proteasa NS3/4a del VHC de fórmula (I) a ritonavir se encuentra de manera apropiada en el rango de desde aproximadamente 1 : 1 hasta aproximadamente 15: 1 , normalmente desde aproximadamente 1 : 1 hasta aproximadamente 10: 1 , y más normalmente desde aproximadamente 1 : 1 hasta aproximadamente 8: 1. También son útiles las relaciones en peso del inhibidor de proteasa NS3/4a del VHC de fórmula (I) a ritonavir que oscilan desde aproximadamente 1 : 1 hasta aproximadamente 6: 1 , o desde aproximadamente 1 : 1 hasta aproximadamente 5: 1 , o desde aproximadamente 1 : 1 hasta aproximadamente 4:1 , o desde aproximadamente 3:2 hasta aproximadamente 3:1 , o desde aproximadamente 1 :1 hasta aproximadamente 2:1 o desde aproximadamente 1 :1 hasta aproximadamente 1.5:1. El término "cantidad terapéuticamente efectiva" como se usa aquí se refiere a aquella cantidad de compuesto activo o componente o agente farmacéutico que produce la respuesta biológica o medicinal que se busca en un tejido, sistema, animal o humano, en vista de la presente invención, por un investigador, veterinario, médico u otro clínico, que incluye el alivio de los síntomas de la enfermedad tratada. Dado que la presente invención se refiere a combinaciones que comprenden dos o más agentes, la "cantidad terapéuticamente efectiva" es esa cantidad de agentes tomados juntos de modo tal que el efecto combinado produzca la respuesta biológica o medicinal deseada. Por ejemplo, la cantidad terapéuticamente efectiva de una composición que comprende (a) el compuesto de fórmula (I) y (b) ritonavir, sería la cantidad del compuesto de fórmula (I) y la cantidad de ritonavir que cuando se toman juntos tienen un efecto combinado que es terapéuticamente efectivo. En general se contempla que una cantidad diaria antiviral efectiva sería desde 0.01 mg/kg hasta 500 mg/kg de peso corporal, con mayor preferencia desde 0.1 mg/kg hasta 50 mg/kg de peso corporal. Puede resultar apropiado administrar la dosis requerida como una, dos, tres, cuatro o más (sub-)dosis a intervalos apropiados durante el día. Dichas (sub-) dosis pueden formularse como forma de dosificación unitaria, por ejemplo, que contiene 1 a 1000 mg, y en particular 5 a 200 mg de componente activo por forma de dosificación unitaria. La dosis y la frecuencia de administración exactas depende del compuesto particular de fórmula (I) usado, la condición tratada en particular, la gravedad de la condición tratada, la edad, el peso, el sexo, el grado de trastorno y la condición física general del paciente particular como también otro medicamento que el individuo pudiera estar tomando, como resulta conocido para aquellos con experiencia en el arte. Además, es evidente que dicha cantidad diaria efectiva puede reducirse o aumentarse dependiendo de la respuesta del sujeto tratado y/o dependiendo de la evaluación del médico que prescribe los compuestos de la presente invención. Los intervalos de cantidad diaria efectiva mencionados con anterioridad son, por lo tanto, solo guías. De acuerdo con una modalidad, el inhibidor de proteasa NS3/4a del VHC de fórmula (I) y ritonavir pueden administrarse en forma concomitante una o dos veces por día, con preferencia por via oral, donde la cantidad de los compuestos de fórmula (I) por dosis es desde aproximadamente 1 hasta aproximadamente 2500 mg, y la cantidad de ritonavir por dosis es desde 1 hasta aproximadamente 2500 mg. En otra modalidad, las cantidades por dosis para administración concomitante una o dos veces por dia son desde aproximadamente 50 hasta aproximadamente 1500 mg del compuesto de fórmula (I) y desde aproximadamente 50 hasta aproximadamente 1500 mg de ritonavir. Incluso en otra modalidad, las cantidades por dosis para administración concomitante una o dos veces por dia son desde aproximadamente 100 hasta aproximadamente 1000 mg del compuesto de fórmula (I) y desde aproximadamente 100 hasta aproximadamente 800 mg de ritonavir. Incluso en otra modalidad, las cantidades por dosis para administración concomitante una o dos veces por día son desde aproximadamente 150 hasta aproximadamente 800 mg del compuesto de fórmula (I) y desde aproximadamente 100 hasta aproximadamente 600 mg de ritonavir. Incluso en otra modalidad, las cantidades por dosis para administración concomitante una o dos veces por día son desde aproximadamente 200 hasta aproximadamente 600 mg del compuesto de fórmula (I) y desde aproximadamente 100 hasta aproximadamente 400 mg de ritonavir. Incluso en otra modalidad, las cantidades por dosis para administración concomitante una o dos veces por día son desde aproximadamente 200 hasta aproximadamente 600 mg del compuesto de fórmula (I) y desde aproximadamente 20 hasta aproximadamente 300 mg de ritonavir. Incluso en otra modalidad, las cantidades por dosis para administración concomitante una o dos veces por día son desde aproximadamente 100 hasta aproximadamente 400 mg del compuesto de fórmula (I) y desde aproximadamente 40 hasta aproximadamente 100 mg de ritonavir. Las combinaciones ejemplares del compuesto de fórmula (I) (mg)/ritonavir (mg) para una dosificación de una o dos veces por día 50/100, 100/100, 150/100, 200/100, 250/100, 300/100, 350/100, 400/100, 450/100, 50/133, 100/133, 150/133, 200/133, 250/133, 300/133, 50/150, 100/150, 150/150, 200/150, 250/150, 50/200, 100/200, 150/200, 200/200, 250/200, 300/200, 50/300, 80/300, 150/300, 200/300, 250/300, 300/300, 200/600, 400/600, 600/600, 800/600, 1000/600, 200/666, 400/666, 600/666, 800/666, 1000/666, 1200/666, 200/800, 400/800, 600/800, 800/800, 1000/800, 1200/800, 200/1200, 400/1200, 600/1200, 800/1200, 1000/1200, y 1200/1200. Otras combinaciones ejemplares del compuesto de fórmula (I) (mg)/ritonavir (mg) para una dosificación de una o dos veces por día 1200/400, 800/400, 600/400, 400/200, 600/200, 600/100, 500/100, 400/50, 300/50, y 200/50. En una modalidad de la presente invención se proporciona un artículo de fabricación que comprende una composición efectiva para tratar una infección por VHC o inhibir la proteasa NS3 del VHC; y material de envasado que comprende una etiqueta que indica que la composición puede usarse para tratar la infección causada por el virus de la hepatitis C; donde la composición comprende un compuesto de fórmula (I) o cualquier sub-grupo de éstos, o la combinación como se describe aquí. Otra modalidad de la presente invención se refiere a un equipo o recipiente que comprende un compuesto de fórmula (I) o cualquier sub-grupo de éstos, o una combinación de acuerdo con la invención que combina un inhibidor de proteasa NS3/4a del VHC de fórmula (I) o una de sus sales aceptables desde el punto de vista farmacéutico, y ritonavir o una de sus sales aceptables desde el punto de vista farmacéutico, en una cantidad efectiva para usar como estándar o reactivo en una prueba o un ensayo para determinar la capacidad de potenciales productos farmacéuticos para inhibir la proteasa NS3/4a del VHC, el crecimiento del VHC, o ambos. Este aspecto de la invención puede encontrar su uso en programas de investigación farmacéutica. Los compuestos y combinaciones de la presente invención pueden usarse en análisis de analitos objetivo de alta resolución tales como aquellos para medir la eficacia de dicha combinación en el tratamiento del VHC.

EJEMPLOS Los siguientes ejemplos pretenden ilustrar la presente invención y no limitarla. General: Se realizan análisis de CL/EM en un Waters Alliance 2795 HT unido a un espectrómetro de masa Micromass ZMD usando ionización por electroaspersión en modo positivo. Eluyente: A: agua, 0.1 % TFA, B: acetonitrilo, 0.1 % TFA. Detección: UV (ordenamiento de diodos: 210-300 nm). Gradientes: Método A: 20 a 70% B en A (1.5 ml min"1) durante 5 min. Método B: 30 a 80% B en A (1.5 ml min"1) durante 5 min. Método C: 40 a 80% B en A (1.5 ml min"1) durante 5 min. Método D: 50 a 90% B en A (1.5 ml min"1) durante 5 min. Método E: 20 a 70% B en A (0.9 ml min"1) durante 2.5 min. Método F: 30 a 80% B en A (0.9 ml min"1) durante 2.5 min. Método G: 40 a 80% B en A (0.9 ml min"1) durante 2.5 min. Método H: 50 a 90% B en A (0.9 ml min"1) durante 2.5 min. Columna: Métodos A-D: Fenomonex, columna Synergi MAX RP-80A (5.0 cm, 4.6 mm f, 4 µm). Métodos E-H: Fenomonex, columna Synergi MAX RP-80A (3.0 cm, 3.0 mm f, 4 µm).

EJEMPLO 1 Síntesis de etil éster del ácido 1-[(3-Oxo-2-oxa-biciclor2,2,1]heptano-5- carbonil)-amino]-2-vinil-ciclopropan carboxílico (3) A una solución de 1 (857 mg, 5 5 mmol), en DMF (14 ml) y DCM (25 ml) a temperatura ambiente, se agregó 2 (1 15 g, 6.0 mmol), HATU (2 29 g, 6 0 mmol) y DIPEA (3 82 ml, 22 mmol) La reacción se agitó bajo atmósfera de N2 a temperatura ambiente durante 1 h El análisis por CL/EM mostró conversión completa y la mezcla de reacción se concentró al vacío El residuo se disolvió nuevamente en DCM (100 ml) y 0 1 M HCl (ac) y las fases se separaron La fase orgánica se lavó con NaHCO3 (aq) y salmuera, se secó (MgSO4) y se filtró La eliminación del solvente al vacio produjo el compuesto buscado 3 (1 6 g, 99%) LC/MS (Método A) tR=2 46 min, >95%, m/z (ESI+) = 294(MH+) EJEMPLO 2 Síntesis de ácido 2-(1-Etoxicarbonil-2-vinilciclopropilcarbamoil)- 4-hidroxi-ciclopentan carboxílico, sal de diisopropiletilamina (4) OH A una solución de 3 (800 mg, 2.73 mmol) en agua (15 ml) en un recipiente de reacción para microondas 20 ml se agregó DIPEA (1.2 ml, 6.8 mmol) y una barra de agitación. El recipiente de reacción se selló y se agitó vigorosamente la emulsión no miscible antes de la inserción en la cavidad del horno de microondas. Luego de 1 min de pre-agitación, la reacción se irradió durante 40 min a una temperatura fija de 100°C. Luego de enfriar hasta 40°C, la solución transparente se concentró al vacío, y el aceite marrón residual se co-evaporó 3 veces con MeCN para eliminar cualquier agua residual. El producto en bruto 4, en la forma de una sal de DIPEA, se llevó inmediatamente al paso siguiente. CL/EM (Método A): tR=1.29 min, >95%, m/z (ESI+)= 312(MH+).

EJEMPLO 3 Síntesis de etil éster del ácido 1-(r2-(Hex-5-enilmetilcarbamoil)-4- hidroxiciclopentano carboniHamino)-2-vinilciclopropan carboxílico (6) El compuesto en bruto 4 (5.5 mmol) se disolvió en DCM (50 ml) y DMF (14 ml) seguido por el agregado de HATU (2.09 g, 5.5 mmol), 5 (678 mg, 6.0 mmol) y DIPEA (3.08 ml, 17.5 mmol) a temperatura ambiente. La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. El análisis por CL/EM mostró conversión completa y la mezcla de reacción se concentró al vacio. El residuo se disolvió nuevamente en EtOAc (100 ml) y la fase orgánica se lavó con HCl 0.1 M (ac), K2CO3 (ac) y salmuera, se secó (MgSO4) y se filtró. La evaporación del solvente al vacío dio un aceite que se purificó por cromatografía instantánea (Sílice, EtOAc:MeOH) para obtener el compuesto buscado 6 (1.65 g, 74%). TLC (Sílice): MeOH:EtOAc 5:95, R, =0.5; CL/EM (Método A): tR=3.44 min, >95%, m/z (ESI 407(MH+).

EJEMPLO 4 Síntesis de ácido 1- [2-(Hex-5-enilmetilcarbamoil)-4-hidroxiciclopentano- carboninamino)-2-vinilciclopropancarboxílico (7) El compuesto 6 (493 mg, 1.21 mmol) se disolvió en DMF (1 ml) y se transfirió a un recipiente de reacción para microondas de 20 ml. Luego, se agregaron LiOH acuoso (2 M, 10.5 ml) y una barra de agitación. El recipiente de reacción se selló y se agitó vigorosamente la emulsión no miscible antes de la inserción en la cavidad del microondas. La reacción se irradió durante min a 130°C. La mezcla de reacción se enfrió hasta 40°C y la solución translúcida se acidificó hasta pH 2 con HCl acuoso (1 M, 24 ml) y se extrajo 3 veces con EtOAc (20 ml). Las fases orgánicas reunidas se lavaron con salmuera, se secaron (MgSO4) y se filtraron. Se evaporó el solvente al vacío para obtener compuesto 7 (410 mg, 90%). CL/EM (Método A): tR= 2.46 min, >95%, m/z (ESI+)= 379(MH+).

EJEMPLO 5 Síntesis de 1-[(1-ciclopropanesulfonilamino carbonil-2-vinil-ciclopropil)- amidal 2-(hex-5-enil-metil-amida) del ácido 4-Hidroxi-ciclopentano-1 ,2- dicarboxílico (8) El ácido en bruto 7 (410 mg, 1.09 mmol) se disolvió en DMF (1.5 ml) y DCM (4.5 ml) seguido por el agregado de EDAC (417 mg, 2.18 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla se dejó incubar con agitación a temperatura ambiente. Luego de 10 min, DMAP (133 mg, 1.09 mmol) se agregó seguido por otros 20 min de incubación a temperatura ambiente. Posteriormente, una solución premezclada de amida del ácido ciclopropansulfónico (527 mg, 4.36 mmol) y DBU (663 mg, 4.36 mmol) en DMF (2 ml) y DCM (2 ml) se agregó seguido por calentamiento en el horno de microondas a 100X durante 30 min. La solución roja resultante se concentró al vacío y se re-disolvió en EtOAc (20 ml). La fase orgánica se lavó con 1 M HCl (ac) (3x 10 ml) y salmuera (10 ml), se secó (MgSO ) y se filtró. Se evaporó el solvente al vacío para obtener la sulfonamida en bruto que se purificó en forma adicional por cromatografía (Sílice, EtOAc:MeOH, 97.5:2.5) para obtener el compuesto buscado 8 (403 mg, 77%); CL/EM (Método A): tR= 3.31 min, >95%, m/z (ESI> 482(MH+).

EJEMPLO 6-1 Síntesis de 3-(1-ciclopropan-sulfonilaminocarbonil-2- vin¡lciclopropilcarbamoil)-4-(hex-5-enilmetil-carbamoil)ciclopentil éster del ácido 2,3-Dihidroindol-1 -carboxílico (11) El compuesto 8 (19.4 mg, 40 µmol) se disolvió en DCM (1.8 ml) seguido por el agregado de NaHCO3 sólido (14 mg, 160 µmol) y una barra de agitación. A esta emulsión luego se agregó fosgeno en tolueno (1.93 M, 430 µl, 0.8 mmol) y la mezcla se agitó vigorosamente durante 2 h para obtener el cloroformiato 9. CL/EM (Método G): tR= 2.65 min, >95%, m/z (ESf)= 544(MH+). Se evaporó el solvente al vacío y el residuo se co-evaporó 3 veces con DCM para eliminar cualquier fosgeno residual. El cloroformiato producido 9 se re-disolvió posteriormente en DCM (1 ml) y se agregó 2,3 dihidroindol (68 µmol). La mezcla se dejó agitar a temperatura ambiente durante 2 h tiempo después del cual, la CL/EM mostró conversión completa. Luego, se agregó DCM (1 ml) a la mezcla y la solución se lavó 2 veces con HCl 1 M (ac), NaHCO3 (ac) y salmuera. La fase orgánica se secó (MgSO4) y se filtró. La evaporación del solvente al vacío dio un producto bruto que se purificó en forma adicional por CL/EM preparativa para obtener el compuesto 10: CL/EM (Método H): tR= 1.58 min, >95%, m/z (ESI+)= 627(MH+).

EJEMPLO 6-2 3-(1-ciclopropansulfonilo aminocarbonil-2-vinilciclopropilcarbamoil)-4- (hex-5-enilmetilcarbamoil) ciclopentil éster del ácido 3.4-Dihidro-2H- quinolin-1 -carboxílico (11) El compuesto del título se sintetizó de 1 ,2,3,4-tetrahidroquinolina de acuerdo con el procedimiento descrito en el Ejemplo 6-1. CL/EM (Método H): tR= 1.74 min, >95%, m/z (ESI 641 (MH+).

EJEMPLO 6-3 3-(1-ciclopropansulfonilaminocarbonil-2-vinilciclopropilcarbamoil)-4- (hex-5-enilmetilcarbamoil) ciclopentil éster del ácido 2,3- Dihidrobenzof 1 ,4]oxazina-4-carboxílico (12) El compuesto del título se sintetizó a partir de 3,4-dihidro-2H-benzo[1 ,4]oxazina de acuerdo con el procedimiento descrito en el Ejemplo 6-1. CL/EM (Método H): tR= 1.56 min, >95%, m/z (ESI 643(MH+).

EJEMPLO 6-4 3-(1-ciclopropansulfonilo aminocarbonil-2-vinilciclopropilcarbamoil)-4- (hex-5-enilmetilcarbamoil) ciclopentil éster del ácido 1,3-Dihidroisoindol- 2-carboxílico (13) El compuesto del título se sintetizó a partir de 2,3-dihidro-1 H-isoindol de acuerdo con el procedimiento descrito en el Ejemplo 6-1. CL/EM (Método H): tR= 1.37 min, >95%, m/z (ESI+)= 627(MH+).

EJEMPLO 7 3-(1-ciclopropansulfonilaminocarbonil-2-vinilciclopropilcarbamoil)-4- (hex-5-enilmetilo carbamoiQciclopentil éster del ácido 3,4-Dihidro-1H- isoquinolin-2-carboxilico (16) 16 Se disolvió cloroformiato de p-nitrofenilo (25 9 mg, 0 129 mmol) en MeCN (1 ml) A esta solución se agrego NaHCO3 sólido (15 7 mg, 0 19 mmol) y la suspensión se enfrió en un baño de hielo/agua A la solución enfriada luego se agregó una solución de 1 ,2,3,4-tetrah?dro-?soqu?nol?na (0 123 mmol) en MeCN (0 5 ml) y la reacción se dejó incubar a temperatura ambiente durante 2 h El análisis por CL/EM mostró conversión completa del compuesto 15 Esta solución luego se agregó a una mezcla de 8 (49 2 mg, 102 µmol) y NaH (60% en aceite) (4 5 mg, 112 µmol) seguido por calentamiento de la reacción a 50°C durante 1 h La reacción se desactivó con NH CI (ac) (5 ml) y se agregó EtOAc (5 ml) Se lavó la fase orgánica con 1 M HCl (ac) y salmuera, se secó (MgSO4) y se filtró La evaporación del solvente dio un aceite que se purificó en forma adicional usando CL/EM preparativa para obtener el producto buscado 16: CL/EM (Método X ): tR= 5.13 min, >90%, m/z (ESI+)= 641 (MH+).

EJEMPLO 8-1 4-ciclopropanesulfonilamino carbonil-13-metil-2,14-dioxo-3,13- diazatriciclori3,3,0,0 ,61octadec-7-en-17-il éster del ácido 2.3- Dihidroindol-1 -carboxílico, (17) El compuesto 10 (14.6 µmol) se disolvió en DCE (se secó sobre tamices mol, se gasificó con N2) (10 ml) en un recipiente de reacción para microondas de 20 ml con una barra de agitación. A esta solución se agregó catalizador de Hoveyda-Grubb de 2da generación (2.3 mg, 3.6 µmol) y se purgó el recipiente de reacción con N2(g) y se selló. La reacción se irradió durante 15 min con una temperatura fija de 150°C. El solvente se eliminó al vacío y el residuo se purificó por cromatografía instantánea (Sílice; DCM, luego 10% MeOH en DCM). El producto se purificó posteriormente CUEM preparativa para obtener el compuesto buscado 17: CL EM (Método H): tR= 1.13 min, >95%, m/z (ESI 599(MH+).

EJEMPLO 8-2 4-ciclopropansulfonilo amino carbonil-13-metil-2,14-dioxo-3,13-diaza- triciclori3,3,0,04,61octadec-7-en-17-il éster del ácido 3,4-Dihidro-1 /Y- isoquinolin-2-carboxilico (18) El compuesto del título se preparó a partir de 3-(1-ciclopropan sulfonilaminocarbonil-2-vinilciclopropilcarbamoil)-4-(hex-5-enilmetilcarbamoil)ciclopentil éster del ácido 3,4-Dihidro-1H-isoquinolin-2-carboxílico (16) siguiendo el procedimiento descrito en el Ejemplo 8-1. CL/EM (Método A): tR= 4.51 min, >95%, m/z (ESI+)= 613(MH+).

EJEMPLO 8-3 4-ciclopropan sulfonilamino carbonil-13-metil-2,14-dioxo-3,13- diazatriciclori3,3,0,04 61octadec-7-en-17-il éster del ácido 2.3- Dihidrobenzo[1,4loxazina-4-carboxílico (19) El compuesto del título se preparó a partir de 3-(1-ciclopropansulfonilaminocarbonil-2-vinilciclopropilcarbamoil)-4-(hex-5-enilmetilo carbamoil) ciclopentil éster del ácido 2,3-Dihidrobenzo[1 ,4]oxazina-4-carboxilico (12) siguiendo el procedimiento descrito en el Ejemplo 8-1 : CL/EM (Método H): tR= 1.11 min, >95%, m/z (ESf) = 615(MH+).

EJEMPLO 8-4 4-ciclopropanesulfonilamino carbonil-13-metil-2,14-dioxo-3,13-diaza-tricicloH 3,3,0, 0 ,6]octadec-7-en-17-il éster del ácido 1.3-Dihidro-isoindol- 2 -carboxílico, (20) El compuesto del título se preparó a partir de 3-(1-ciclopropanesulfonilo aminocarbonil-2-vinilciclopropilcarbamoil)-4-(hex-5-enilmetilo carbamoil) ciclopentil éster del ácido 1 ,3-Dihidroisoindol-2-carboxílico (13) siguiendo el procedimiento descrito en el Ejemplo 8-1 : CL/EM (Método F): tR= 2.33 min, >95%, m/z (ESI+)= 599(MH+).

EJEMPLO 8-5 4-ciclopropansulfonilaminocarbonil-13-metil-2,14-dioxo-3,13-diaza- triciclori3,3.0.04,61octadec-7-en-17-il éster del ácido 3,4-Dihidro-2AY- quinolin-1-carboxílico, (21) El compuesto del título se preparó a partir de 3-(1-ciclopropansulfonilo aminocarbonil-2-vinilciclopropilcarbamoil)-4-(hex- 5-enilmetilo carbamoil) ciclopentil éster del ácido 3,4-Dihidro-2/-/-quinolin-1-carboxílico (11) siguiendo el procedimiento descrito en el Ejemplo 8-1 : CL/EM (Método H): tR= 1.25 min, >95%, m/z (ESI+)= 613(MH+).

EJEMPLO 9 Ter-butil éster del ácido 2-(1-Etoxicarbonil-2-vinil-ciclopropilcarbamoil)-4-hidroxi-pirrolidin-1 -carboxílico (22) La 4-hidroxi prolina Boc-protegida (4 g, 17.3 mmol), HATU (6.9 g, 18.2 mmol) y etil éster del ácido 1-amino-2-vinil-ciclopropancarboxílico preparado como se describe en WO03/099274, (3.5 g, 18.3 mmol) se disolvieron en DMF (60 ml) y enfriado hasta 0°C en un baño de hielo. Se agregó diisopropiletilamina (DIPEA) (6ml). El baño de hielo se eliminó y la mezcla se dejó a temperatura ambiente hasta la mañana siguiente. Luego se agregó diclorometano (-80 ml) y la fase orgánica se lavó con hidrógeno carbonato de sodio acuoso, ácido cítrico, agua, salmuera y se secó sobre sulfato de sodio. La purificación por cromatografía instantánea (éter ? 7% metanol en éter) dio el compuesto del título puro (6.13 g, 96%) EJEMPLO 10 Ter-butil éster del ácido 2-(1-Etoxicarbonil-2-vinil-ciclopropilcarbamoil)-4-(4-nitro-benzoiloxi)-pirrolidin-1-carboxilico (23) El compuesto 22 (del ejemplo 9) (11.8 g, 32.0 mmol) y piridina (27 ml, 305 mmol) se disolvió en DCM (200 ml) y enfriado hasta 0°C, cloruro de 4-nitrobenzoilo (6.6 g, 35.6 mmol) se agregó y la solución se agitó a temperatura ambiente hasta la mañana siguiente. La mezcla de reacción se lavó con NaHCO3 (ac), acuoso ácido cítrico y salmuera, se secó sobre MgSO4 y se evaporó sobre sílice. El producto en bruto se purificó por cromatografía en columna sobre sílice (EtOAc/n-Heptano: 50/50) para dar 11.84 g, 72% del compuesto del título 5.

EJEMPLO 11 -(1-etoxicarbonil-2-vinil-ciclopropilcarbamoil)-pirrolidin-3-il éster del ácido 4-nitro-benzoico (24) El compuesto 23 (11.84 g, 22.9 mmol) se desprotegió en TFA (30 ml) disuelto en DCM (100 ml) y luego se procesó por métodos conocidos en el arte de la química para dar el compuesto del título (9.37 g, 98%).

EJEMPLO 12 -(1-etox¡carbonil-2-vinil-ciclopropilcarbamoil)-1-[hept-6-enil-(4-metoxi-bencil)-carbamoip-pirrolidin-3-il éster del ácido 4-nitro-benzoico (25) El compuesto 24 (4.68 g, 11.2 mmol) se disolvió en THF (100 ml), se agregó NaHCO3 (s) (apr. 5 ml) seguido por solución de fosgeno (20% en tolueno, 11.6 ml, 22.5 mmol). La mezcla de reacción se agitó vigorosamente durante 1 h y luego se filtró, se evaporó y se re-disolvió en DCM (100ml). Se agregó NaHCO3 (s) (apr. 5 ml) seguido por hept-6-enil-(4-metoxi-bencil)-amin (3.92 g, 16.8 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente hasta la mañana siguiente, se filtró y se evaporó sobre sílice. El producto en bruto se purificó por cromatografía en columna sobre sílice (EtOAc/ n-Heptano: 25/75) para dar el compuesto del título (6.9 g, 91 %).

EJEMPLO 13 Etil éster del ácido 14-(4-Metoxi-bencil)-18-(4-nitro-benzoiloxi)-2,15-dioxo-3,14,16-triaza-tric¡clo[14,3,0,0*4,6*1nonadec-7-eno-4-carboxilico Í26 El compuesto 25 (406 mg, 0.6 mmol) se disolvió en DCE (250 ml) y se desgasificó. Se agregó catalizador de Hoveyda-Grubbs de 2da generación (26 mg, 0.042 mmol) y la solución se calentó hasta el reflujo. Luego de 3 h la solución se evaporó y se usó directamente en el paso siguiente.

EJEMPLO 14 Etil éster del ácido 18-Hidroxi-14-(4-metoxi-bencil)-2,15-dioxo-3,14.16-triaza-tric¡clo[14,3,0,0 ,6*lnonadec-7-eno-4-carboxilico (27) El compuesto en bruto 26 (445 mg) se disolvió en THF (20 ml), MeOH (10 ml) y agua (10 ml). Luego de enfriar hasta 0X se agregó LiOH 1 M (2 ml). Luego de 1.5 h se completó la hidrólisis y se agregó HOAc (1ml) y la solución se evaporó hasta aproximadamente 10 ml. Se agregó agua y la mezcla se extrajo con DCM (2 x 30 ml). La fase orgánica reunida se lavó con NaHCO3 (ac), agua, salmuera y se secó sobre MgSO4. El producto en bruto se purificó por cromatografía en columna sobre sílice (DCM/ MeOH: 100/0 -80/20) para dar el compuesto del título (201 mg, 67%).

EJEMPLO 15 Etil éster del ácido 18-Etoximetoxi-14-(4-metoxi-bencil)-2,15-dioxo-3,14,16-triaza-triciclo[14,3,0,0*4,6*1nonadec-7-eno-4-carboxilico (28) A una solución agitada del alcohol 27 (1.35 g, 2.70 mmol, 75% pureza) y N-etildiisopropilamina (1.42 ml, 8.1 mmol) en diclorometano (15 ml) a 0°C se agregó clorometil etil éter (0.5 ml, 5.4 mmol). Luego de agitar a TA en la mezcla de reacción se enfrió hasta 0°C y se agregó más N-etildiisopropilamina (1 ml, 5.7 mmol) y clorometil etil éter (0.3 ml, 3.2 mmol), luego se agitó un adicional de 16 h a ta. La mezcla de reacción se aplicó luego directamente sobre una columna de gel de sílice y se eluyó usando elución con gradiente en etapas (acetato de etilo en hexano 50-80%). La concentración de las fracciones apropiadas dio el compuesto del título como un jarabe marrón claro que se cristalizó luego de reposar (0.8 g, 53%). LR-EM: Cálculo analítico para C3oH4 N3O7: 558. Experimental: 558 [M+H].

EJEMPL0 16 Acido 18-Etoximetoxi-14-(4-metoxi-bencil)-2, 15-dioxo-3, 14, 6-triaza-triciclo[14,3,0,0*4,6*1nonadec-7-eno-4-carboxílico (29) Una solución del éster 28 (0.775 g, 1.39 mmol) en 1 :1 :1 THF-Metanol-ac. 1 M LiOH (36 ml) se agitó a TA durante 3.5 h luego de lo cual TLC (95:5 y 9:1 diclorometano-metanol) y LC-EM indicaron la conversión completa en el carboxilico ácido. La mezcla de reacción se concentró luego en aproximadamente 1/3 del volumen, luego se diluyó con agua (10 ml) y se acidificó hasta aproximadamente pH 4 usando 10% ácido cítrico ac. (60 ml) luego de lo cual se formó un precipitado. La mezcla se lavó con acetato de etilo (3 x 25 ml) y las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (2 x 50 ml), luego se secaron (Na2SO4), se filtraron y se concentraron. El residuo se concentró a partir de tolueno (3 x 10 ml) que dio el compuesto del título en bruto como una espuma blancuzca (0.75 g, cuantitativo). LR-EM: Cálculo analítico para C28H40N3O7: 530. Experimental: 530 [M-H].

EJEMPLO 17 Compuesto 30 A una solución del ácido carboxílico 29 (aprox. 1.39 mmol) en diclorometano (10 ml) a TA se agregó N-Etil-N'-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida x HCl (0.32 g, 1.67 mmol), luego se agitó hasta la mañana siguiente luego de lo cual la CL-EM indicó la conversión completa del ácido en el producto. La mezcla de reacción luego se diluyó con diclorometano (10 ml), se lavó con agua (3 x 10 ml), luego se secó (Na2SO4) se filtró y se concentró en un sólido incoloro (rendimiento en bruto: 0.7 g) que se usó inmediatamente en el paso siguiente. LR-EM: Cálculo analítico para C28H38N3?6: 512. Experimental: 512 [M+H].

EJEMPLO 18 \ 18-etox¡metoxi-14-(4-metoxi-bencil)-2, 15-dioxo-3, 14,16-triaza-triciclof 14,3,0,0*4,6*lnonadec-7-eno-4-carbon¡H-amida del ácido ciclopropanesulfónico (31) A una solución agitada de la oxazolinona en bruto 30 (0.328 g, 0.64 mmol) en diclorometano (4 ml) se agregó ciclopropilsulfonamida (0.1 17 g, 0.96 mmol) y 1 ,8-diazabiciclo[5,4,0]-undec-7-eno (0.19 ml, 1.3 mmol), luego se agitó a TA hasta la mañana siguiente. La mezcla de reacción se monitoreó por CL-EM luego se diluyó con diclorometano (20 ml), se lavó en forma secuencial con 10% ácido cítrico ac. (3 x 15 ml) y salmuera (1 x 15 ml), luego se secó (Na2SO4), se filtró y se concentró en una espuma blancuzca. Cromatografía en columna del residuo usando elución con gradiente en etapas (acetato de etilo en tolueno 60-100%) seguido por concentración y secado de las fracciones apropiadas dio el compuesto del título como espuma incolora (0.27 g, 66% en 3 pasos). Datos de RMN (500 MHz, DMSO-d6): 1H, d 0.9-1.6 (m, 14H), 1.80 (m, 1 H), 1.90 (m, 1 H), 2.0-2.2 (m, 3H), 2.25 (m, 1 H), 2.95 (m, 1 H), 3.05 (m, 1 H), 3.3-3.4 (m, 2H), 3.50 (q, 2H), 3.7-3.8 (m, 4H), 3.97 (d, 1 H), 4.3-4.4 (m, 2H), 4.55 (d, 1 H), 4.63 (m, 2H), 5.12 (m, 1 H), 5.70 (m, 1 H), 6.88 (d, 2H), 7.19 (d, 2H), 8.12 (s, 1 H). LR-EM: Cálculo analítico para C3iH45N4O8S: 633. Experimental: 633 [M+H].

EJEMPLO 19 (18-hidrox¡-2, 15-dioxo-3, 14, 16-triaza-tr¡ciclo[14,3,0,0*4,6*1nonadec-7-eno-4-carbonil)-amida de] ácido ciclopropansulfónico (32) Una solución del acetal 31 (0.038 g, 0.06 mmol) en 1 :1 :1 THF-metanol- ácido clorhídrico 2 M ac. (1.5 ml) se agitó a TA durante 30 min, luego se agregó ácido clorhídrico adicional conc. (0.1 ml) y luego se agitó a TA hasta la mañana siguiente. La mezcla de reacción se neutralizó luego usando hidrógeno carbonato de sodio ac. saturado, luego se concentró sobre sílice.

Cromatografía instantánea del residuo usando 9:1 acetato de etilo-metanol dio una espuma incolora (0.020 g, 73%). LR-EM: Cálculo analítico para C20H29N4O6S: 453. Experimental: 453 [M-H].

EJEMPLO 20-1 4-ciclopropanesulfonilaminocarbonil-2, 15-dioxo-3, 14, 16-triaza-triciclo[14,3,0,0*4,6*lnonadec-7-en-18-il éster del ácido 1 ,3-Dihidro-isoindol-2-carboxilico (33) El alcohol 32 (25 mg, 55 umol) se disolvió en DCM anhidro (2 ml). A esta solución se agregó NaHCO3 sólido (14 mg, 165 umol) y fosgeno (1.9 M en tolueno, 868 µL, 1.65 mmol). La mezcla se agitó durante 48 h para obtener el intermediario cloroformiato. CUEM (Método F): tR= 2.32 min, m/z (ESI+)= 516 (MH+). El solvente se eliminó al vacío y el residuo se co-evaporó con DCM para eliminar cualquier fosgeno residual. El cloroformiato producido posteriormente re-disuelto en DCE anhidro (2 ml) y se agregó isoindolina (83 µmol) seguido por K2CO3 sólido (110 µmol) y tamices moleculares 4A en polvo (1 espátula). La mezcla se calentó hasta 100°C durante 45 min, tiempo después del cual, el análisis por CL/EM no mostró cloroformiato remanente. La reacción se filtró y el filtrado se concentró al vacío para obtener un producto en bruto que se purificó por CL/EM preparativa para producir el compuesto del título. CL/EM (Método H): tR= 1.55 min, >95%, m/z (ESI+)= 600 (MH+).

EJEMPLO 20-2 4-ciclopropanesulfonilaminocarbonil-2,15-dioxo-3,14,16-triaza-triciclori4,3,0,0*4,6*lnonadec-7-en-18-il éster del ácido 2.3-Dihidro-indol-1-carboxílico (34) El compuesto del título se preparó de acuerdo con el procedimiento descrito en el Ejemplo 20-1 , excepto que se usó indolina en lugar de isoindolina. CL/EM (Método H): tR= 1.68 min, 95%, m/z (ESI+)= 600 (MH+).

EJEMPLO 20-3 4-ciclopropanesuífonilamino carbonil-2,15-dioxo-3,14,16-triaza-triciclof14,3,0,0 ,6*1nonadec-7-en-18-il éster del ácido 3,4-Dihidro-1 H-isoquinolin-2-carboxilico (35) El compuesto del título se preparó de acuerdo con el procedimiento descrito en el Ejemplo 20-1 , excepto que 1 ,2,3,4-tetrahidro-isoquinolina se usó en lugar de isoindolina. CL/EM (Método H): tR= 1.60 min, 95%, m/z (ESI+)= 614 (MH+).

EJEMPLO 20-4 4-ciclopropanesulfonilaminocarbonil-2,15-dioxo-3,14,16-triaza-triciclo[14,3,0,0*4.6*1nonadec-7-en-18-il éster del ácido 3,4-Dihidro-2H-quinolin-1-carboxilico (36) El compuesto del título se preparó de acuerdo con el procedimiento descrito en el Ejemplo 20-1 , excepto que 1 ,2,3,4-tetrahidro-quinolina se usó en lugar de isoindolina. CL/EM (Método H): tR= 1.77 min, 95%, m/z (ESI 614 (MH+).

EJEMPLO 20-5 4-ciclopropanesulfonilamino-carbonil-2, 15-dioxo-3, 14 , 16-triaza-triciclof14,3,0,0*4,6*1nonadec-7-en-18-il éster del ácido 5-Metil-2,3-dihidro-indol-1 -carboxílico (37) El compuesto del título se preparó de acuerdo con el procedimiento descrito en el Ejemplo 20-1 , excepto que 5-metil-2,3-dihidro-1 H-indol se usó en lugar de isoindolina. CL/EM (Método H): tR= 1.91 min, 95%, m/z (ESI 614 (MH+).

EJEMPLO 20-6 4-ciclopropansulfonilo aminocarbonil-2,15-dioxo-3,14,16-triaza-triciclo[14,3,0,0*4,6*1nonadec-7-en-18-il éster del ácido 5-Dimetilsulfamoil-2,3-dihidro-indol-1-carboxilico (38) El compuesto del título se preparó de acuerdo con el procedimiento descrito en el Ejemplo 20-1 , excepto que dimetilamida del ácido 2,3-dihidro-1 H-indol-5-sulfónico se usó en lugar de isoindolina. CL/EM (Método H): tR= 1.53 min, 95%, m/z (ESI+)= 707 (MH+).

EJEMPLO 21 Síntesis de ciclopentano cristalino Síntesis de /er-butil éster del ácido 3-oxo-2-oxa-biciclo[2,2,11heptano-5-carboxílico (40) Se agregó DMAP (14 mg, 0.115 mmol) y Boc2O (252 mg, 1.44 mmol) a una solución agitada de 39 (180 mg, 1.15 mmol) en 2 ml CH2CI2 bajo atmósfera inerte de argón a 0 °C. La reacción se dejó entibiar hasta la temperatura ambiente y se agitó durante la noche. La mezcla de reacción se concentró y el producto en bruto se purificó por cromatografía instantánea en columna (tolueno/acetato de etilo gradiente 15:1 , 9:1 , 6:1 , 4:1 , 2:1) que dio el compuesto del título (124 mg, 51 %) como cristales blancos.

H-NMR (300 MHz, CD3OD) d 1.45 (s, 9H), 1.90 (d, J = 11.0 Hz, 1 H), 2.10-2.19 (m, 3H), 2.76-2.83 (m, 1 H), 3.10 (s, 1 H), 4.99 (s, 1 H); 13C-NMR (75.5 MHz, CD3OD) d 27.1 , 33.0, 37.7, 40.8, 46.1 , 81.1 , 81.6, 172.0, 177.7.

Método alternativo para la preparación de compuesto 40 39 El compuesto 39 (13.9 g, 89 mmol) se disolvió en diclorometano (200 ml) y luego se enfrió hasta aproximadamente -10°C bajo nitrógeno. Luego se burbujeó isobutileno en la solución hasta que el volumen total había disminuido hasta aproximadamente 250 ml que dio una solución turbia. Se agregó BF3.Et2O (5.6 ml, 44.5 mmol, 0.5 eq.) y la mezcla de reacción se mantuvo a aproximadamente -10°C bajo nitrógeno. Luego de 10 min, se obtuvo una solución translúcida. La reacción se monitoreó por TLC (EtOAc-Tolueno 3:2 acidificado con algunas gotas de ácido acético y hexano-EtOAc 4:1 , manchando con solución alcalina de permanganato). A los 70 minutos solo había trazas del compuesto 39 y se agregó NaHCO3 ac. saturado (200 ml) a la mezcla de reacción, que luego se agitó vigorosamente durante 10 min. Se lavó la fase orgánica con NaHC?3 saturado (3 x 200 ml) y salmuera (1 x 150 ml), luego se secó con sulfito de sodio, se filtró y el residuo se evaporó hasta obtener un residuo oleoso. Luego del agregado de hexano al residuo, el producto se precipitó. El agregado de más hexano y calentamiento hasta el reflujo dio una solución translúcida a partir de la cual el producto se cristalizó. Los cristales se recolectaron por filtración y se lavaron con hexano (ta), luego se secó al aire 72 h dando agujas incoloras (12.45 g, 58.7 mmol, 66%).

EJEMPLO 22 Actividad de los compuestos de fórmula (I) Ensayo de replicón Los compuestos de fórmula (I) se examinaron para determinar la actividad en la inhibición de replicación del ARN del VHC en un ensayo celular. El ensayo demostró que los compuestos de fórmula (I) exhibieron actividad contra VHC replicones funcionales en un cultivo celular. El ensayo celular se basó en una construcción de expresión bicistrónica, como se describe en el texto escrito por Lohmann et al. (1999) Science vol. 285 pp. 110-113 con las modificaciones descritas por Krieger et al. (2001) Journal of Virology 75: 4614-4624, en una estrategia de selección de múltiples objetivos. En esencia, el método fue el siguiente. El ensayo utilizó la línea celular transfectada de manera estable Huh-7 luc/neo (denominada de aquí en adelante Huh-Luc). Esta línea celular alberga una construcción de expresión bicistrónica que codifica un ARN que comprende las regiones de tipo salvaje de NS3-NS5B de VHC tipo 1b traducido a partir de un Sitio de Entrada al Ribosoma Interno (Infernal Ribosome Entry Site (IRES)) del virus de encefalomiocarditis (EMCV), precedido por una porción reportero (FfL-luciferasa), y una porción de marcador seleccionaba (neoR, neomicina fosfotransferasa). La construcción está delimitada por 5' y 3' NTRs (regiones no traducidas) del VHC tipo 1 b. El cultivo continuo de las células de replicón en presencia de G418 (neoR) depende de la replicación del ARN del VHC. Las células de replicón transfectadas de manera estable que expresan ARN del VHC, cuyas copias, de manera autónoma y hasta niveles elevados, codifican, entre otras, la luciferasa, se usan para evaluación los compuestos antivirales. Se colocaron células de replicón en placas de 384 pozos en presencia de compuestos de prueba y de control que se agregan en varias concentraciones. Luego de una incubación de tres días, se midió la replicación del VHC por ensayo de la actividad de luciferasa (usando substratos para ensayos de luciferasa estándar y reactivos y un dispositivo de diagnóstico por imágenes en microplaca Perkin Elmer ViewLuxTm ultraHTS). Las células de replicón en los cultivos de control tienen alta expresión de luciferasa en ausencia de un inhibidor. La actividad inhibidora del compuesto sobre la actividad de luciferasa se monitoreó sobre las células Huh-Luc, permitiendo una curva dosis-respuesta para cada compuesto de prueba. Luego se calcularon los valores de EC50, cuyo representa la cantidad requerida del compuesto para reducir en un 50% el nivel de actividad de luciferasa detectada, o más específicamente, la capacidad que tiene el ARN del replicón del VHC ligado genéticamente para replicarse.

Ensayo de inhibición El objetivo de este ensayo in vitro fue medir la inhibición de complejos de proteasa NS3/4a del VHC por los compuestos de la presente invención. Este ensayo proporciona una indicación de la efectividad que tendrían los compuestos de la presente invención en la inhibición la actividad proteolítica de NS3/4a del VHC. La inhibición de la enzima de proteasa NS3 de hepatitis C de longitud completa se midió en esencia como se describe en Poliakov, 2002 Prot Expression & Purification 25 363 371. En síntesis, la hidrólisis de un substrato dipsipéptido, Ac-DED(Edans)EEAbu?[COO]ASK(Dabcil)-NH2 (AnaSpec, San José, USA), se midió por espectrofluorometría en presencia de un cofactor peptídico, KKGSWIVGRIVLSGK (Ake Engstróm, Departamento de Bioquímica y Microbiología Médica, Universidad de Uppsala, Suecia). [Landro, 1997 #Biochem 36 9340-9348]. La enzima (1 nM) se incubó en HEPES 50 mM, pH 7.5, DTT 10 mM, 40% de glicerol, 0.1 % de n-octil-D-glucósido, con 25 µM cofactor NS4A e inhibidor a 30°C durante 10 min, luego de lo cual se inició la reacción con el agregado de 0.5 µM de substrato. Los inhibidores se disolvieron en DMSO, se sonicaron durante 30 sec. y se agitaron con vórtex. Se conservaron las soluciones a - 20°C entre mediciones.

La concentración final de DMSO en la muestra de ensayo se ajustó hasta 3.3%. La velocidad de hidrólisis se corrigió para los efectos de filtro interno de acuerdo con los procedimientos publicados. [Liu, 1999 Analytical Biochemistry 267 331-335]. Se estimaron los valores de Ki por análisis de regresión no lineal (GraFit, Erithacus Software, Staines, MX, UK), usando un modelo para inhibición competitiva y un valor fijo para Km (0.15 µM). Se realizó un mínimo de dos replicaciones para todas las mediciones. El siguiente cuadro 1 enumera compuestos que se prepararon de acuerdo con cualquiera de los ejemplos anteriores. También se muestran las actividades de los compuestos evaluados en el cuadro 1.

CUADRO 1

Claims

NOVEDAD DE LA INVENCIÓN REIVINDICACIONES

1.- Un compuesto que tiene la fórmula un N-óxido, sal, o estereoisómero de éste, donde cada línea de puntos (representada por ) representa un doble enlace opcional; X es N, CH y cuando X lleva un doble enlace es C; R1 es -OR6, -NH-SO2R7; R2 es hidrógeno, y cuando X es C o CH, R2 también puede ser alquilo de C?-6; R3 es hidrógeno, alquilo de C?-6, alcoxi C1-6alquilo C1-6, o cicloalquilo de C3-7; n es 3, 4, 5, o 6; R4 y R5 tomados junto con el átomo de nitrógeno al cual están unidos forman un sistema anular bicíclico seleccionado de donde dicho sistema anular puede estar sustituido en forma opcional con uno, dos o tres sustituyentes seleccionados en forma independiente de halo, hidroxi, oxo, nitro, ciano, carboxilo, alquilo de C?-6, alcoxi de C-?.6, alcoxi C-i. 6alquilo C-?-6, alquilcarbonilo de C1-6, alcoxicarbonilo de C1-6, amino, azido, mercapto, polihaloalquilo de C?-6; R6 es hidrógeno; arilo; Het; cicloalquilo de C3-7 sustituido en forma opcional con alquilo de Ci^; o alquilo de C1-6 sustituido en forma opcional con cicloalquilo de C3.7, arilo o con Het; R7 es arilo; Het; cicloalquilo de C3-7 sustituido en forma opcional con alquilo de C-?-6; o alquilo de C-?-6 sustituido en forma opcional con cicloalquilo de C3- , arilo o con Het; arilo como grupo o parte de un grupo es fenilo o naftilo, cada uno de los cuales puede estar sustituido en forma opcional con uno, dos o tres sustituyentes seleccionados de halo, hidroxi, nitro, ciano, carboxilo, alquilo de C?-6, alcoxi de C?-6, alcoxi C-?-6-alqu¡lo C?-6, alquilcarbonilo de C?-6, amino, mono- o dialquilamino de C?-6, azido, mercapto, polihaloalquilo de C-?-6, polihaloalcoxi de C?_6, cicloalquilo de C3_7, pirrolidinilo, piperidinilo, piperazinilo, 4-alquil C1-6-piperazinilo, 4-alquilcarbonil C1-6-piperazinilo, y morfolinilo; donde los grupos morfolinilo y piperidinilo pueden estar sustituidos en forma opcional con uno o dos radicales alquilo de C-?-6; Het como grupo o parte de un grupo es un anillo heterocíclico saturado, parcialmente insaturado o completamente insaturado de 5 o 6 miembros que contiene 1 a 4 heteroátomos seleccionados cada uno en forma independiente de nitrógeno, oxigeno y azufre, y sustituido en forma opcional con uno, dos o tres sustituyentes seleccionados, cada uno en forma independiente, del grupo que consiste en halo, hidroxi, nitro, ciano, carboxilo, alquilo de C?-6, alcoxi de C-?-6, alcoxi

C-?-6, alquilcarbonilo de C-?-6, amino, mono- o di-alquilamino de C-?-6, azido, mercapto, polihaloalquilo de C-?-6, polihaloalcoxi de C?-6, cicloalquilo de C3-7, pirrolidinilo, piperidinilo, piperazinilo, 4-alquil C-?-6-p¡perazin¡lo, 4-alquilcarbonil d-6-piperazinilo, y morfolinilo; donde los grupos morfolinilo y piperidinilo pueden estar sustituidos en forma opcional con uno o dos radicales alquilo de C?-6. 2 - El compuesto de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque el compuesto tiene la fórmula (l-c), (l-d) o (l-e): (l-c)

3.- El compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-2, caracterizado además porque R4 y R5 tomados junto con el átomo de nitrógeno al cual están unidos forman un sistema anular bicíclico seleccionado de donde el fenilo de dicho sistema anular biciclico está sustituido en forma opcional con uno o dos sustituyentes seleccionados en forma independiente de halo, hidroxi, ciano, carboxilo, alquilo de C-?.6, alcoxi de C-?.6, alcoxi C-?.6-carbonilo, amino, y polihaloalquilo de C?-6.

4.- El compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-2, caracterizado además porque R4 y R5 tomados junto con el átomo de nitrógeno al cual están unidos forman un sistema anular bicíclico seleccionado de donde los anillos pirrolidina, piperidina o morfolina de dicho sistema anular bicíclico están sustituidos en forma opcional con uno o dos sustituyentes seleccionados en forma independiente de alquilo de C?-6, alcoxi de C-?-6, y alcoxi C-?-6 alquilo C-uß.

5.- El compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-4, caracterizado además porque (a) R1 es -OR6, donde R6 es alquilo de C?-6 o hidrógeno; o (b) R es -NHS(=O)2R7, donde R7 es metilo, ciclopropilo, o fenilo.

6.- El compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-5, caracterizado además porque es distinto a un N-óxido, o una sal.

7.- Una combinación que comprende a) un compuesto como se definió en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6 o una de sus sales aceptables desde el punto de vista farmacéutico; y b) ritonavir, o una de sus sales aceptables desde el punto de vista farmacéutico.

8.- Una composición farmacéutica que comprende un vehículo, y como componente activo una cantidad efectiva desde el punto de vista antiviral de un compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1-6 o una combinación de la reivindicación 7.

9.- Un compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1-6 o una combinación de la reivindicación 7, para usar como medicamento.

10.- Uso de un compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1-6 o una combinación de la reivindicación 7, para la fabricación de un medicamento útil para inhibir la replicación del VHC.

11.- Un proceso para preparar un compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1-6, en el cual dicho proceso comprende: (a) preparar un compuesto de fórmula (I) donde el enlace entre C7 y C8 es un doble enlace, que es un compuesto de fórmula (l-i), formando un doble enlace entre C7 y C8, en particular a través de una reacción de metátesis olefínica, con la ciclación concomitante al macrociclo como se define en el siguiente esquema de reacción: (1a) O"') donde en el anterior y en los siguientes esquemas de reacción, R8 representa un radical R4 I / , N• O R ^^ (b) convertir un compuesto de fórmula (l-i) en un compuesto de fórmula (I) donde el enlace entre C7 y C8 en el macrociclo es un enlace simple, es decir un compuesto de fórmula (l-j): (l-j) por una reducción del doble enlace C7-C8 en los compuestos de fórmula (l-j); (c) preparar un compuesto de fórmula (I) donde R1 representa -NHSO2R7, estando dichos compuestos representados por la fórmula (l-k-1), por formación de un enlace amida entre un intermediario (2a) y una sulfonilamina (2b), o preparar un compuesto de fórmula (I) donde R1 representa -OR6, es decir un compuesto (l-k-2), por formación de un enlace éster entre un intermediario (2a) y un alcohol (2c) como se define en el siguiente esquema, donde G representa un grupo: (l-k-1) (d) preparar un compuesto de fórmula (I) donde R3 es hidrógeno, estando dicho compuesto representado por (l-l), a partir de un correspondiente intermediario con nitrógeno protegido (3a), donde PG representa un grupo protector de nitrógeno: (e) hacer reaccionar un intermediario (4a) con una amina (4b) en presencia de un reactivo formador de carbamato como se define en el siguiente esquema de r (f) convertir compuestos de fórmula (I) entre sí una reacción de (4a) (|) transformación de grupos funcionales; o (g) preparar una forma salina haciendo reaccionar la forma libre de un compuesto de fórmula (I) con un ácido o una base. RESUMEN DE LA INVENCIÓN Inhibidores de la replicación del de fórmula (I) y los N-óxidos, sales, o estereoisómeros de los anteriores, en los cuales cada línea punteada representa un doble enlace opcional; X es N, CH y cuando X lleva un doble enlace es C; R1 es -OR6, -NH-SO2R7; R2 es hidrógeno, y cuando X es C o CH, R2 también puede ser alquilo de C?-6; R3 es hidrógeno, alquilo de C1-6, alcoxi C1-6alquilo C-?-6, o cicloalquilo de C3-7; n es 3, 4, 5, o 6; R4 y R5 tomados junto con el átomo de nitrógeno al cual están unidos forman un sistema anular bicíclico seleccionado de donde dicho sistema anular puede estar sustituido en forma opcional con 1-3 sustituyentes; R6 es hidrógeno; arilo; Het; cicloalquilo de C3-7 sustituido en forma opcional con alquilo de C-i-ß; o alquilo de C-?-6 sustituido en forma opcional con cicloalquilo de C3- , arilo o con Het; R7 es arilo; Het; cicloalquilo de C3-7 sustituido en forma opcional con alquilo de C1-6; o alquilo de C?-6 sustituido en forma opcional con cicloalquilo de C3- , arilo o con Het; arilo es fenilo o naftilo, cada uno de los cuales puede estar sustituido en forma opcional con 1-3 sustituyentes; Het es un anillo heterocíclico saturado, parcialmente insaturado o completamente insaturado de 5 o 6 miembros que contiene 1 a 4 heteroátomos seleccionado cada uno en forma independiente de N, O o S, y sustituido en forma opcional con 1-3 sustituyentes; composiciones farmacéuticas que contienen compuestos (I) y procesos para preparar los compuestos (I). También se proporcionan combinaciones biodisponibles de los inhibidores del VHC de fórmula (I) con ritonavir. TIBOTEC P08/26F