SALES DE CINAMATO DE UN AGONISTA BETA-2 ADRENERGICO
Descripción de la Invención La presente invención se refiere a sales de novedad de un agonista ß2-adrenérgico. En particular la invención se refiere a sales cristalinas de novedad del compuesto (A) definidas más adelante. Además la invención proporciona un proceso para preparar las sales cristalinas del compuesto (A) y a composiciones farmacéuticas que las contienen y a su uso en medicina. Los agonistas receptores ß2. adrenérgicos son reconocidos como fármacos efectivos para el tratamiento de enfermedades pulmonares tal como asma y enfermedad pulmonar obstructiva crónica (incluyendo bronquitis crónica y enfisema). Los agonistas receptores ß2-adrenérgicos son también útiles para tratar el trabajo prematuro, y son potencialmente útiles para tratar trastornos neurológicos y trastornos cardiacos. La Solicitud de Patente Norteamericana No. 60/535.784, y documento US 2005/0159448A1 (Attorney Docket No. P-1 77-US1 ) describe compuestos de fórmula:
en donde: cada uno de R1 , R2, R3 y R4 se selecciona independientemente
del grupo que consiste de hidrógeno, hidroxi, amino, halo, -CH2OH y -NHCHO o R1 y R2 tomados juntos se seleccionan del grupo que consiste de -NHC(=O)CH = CH-, -CH=CHC(=O)NH-, -NHC(=O)S; y -SC(=O)NH-; uno de R5 y R6 es -[X-alquilenilo C1-6]n-NR10R11 o alquilenilo C?- 6-NR12R13, y el otro de R5 y R6 se selecciona del grupo que consiste de hidrógeno, hidroxi, alcoxi C1-4, y alquilo C?-4, en donde alquilo C1-4 es opcionalmente sustituido con halo, en donde cada X es seleccionada independientemente del grupo que consiste de -O-, -NH-, -S-, -NHSO2-, -SO2NH-, -NHC(=O)- y -C(=O)NH-; cada uno de R10, R11, R12 y R13 es independientemente hidrógeno o alquilo C?-4; o R10 y R11, junto con el átomo de nitrógeno al cual están unidos, o R 0, junto con el átomo de nitrógeno al cual está unido y un átomo de carbono de alquilenilo C1-6 adyacente, o R12 y R13, junto con el átomo de nitrógeno al cual están unidos, o R 2, junto con el átomo de nitrógeno al cual está unido y un átomo de carbono del alquilenilo C1-6 adyacente, forman un anillo heterocíclico o heteroarilo que tiene de 5 a 7 átomos del anillo, en donde el anillo opcionalmente contiene un heteroátomo adicional seleccionado de oxígeno, nitrógeno y azufre, en donde el nitrógeno es opcionalmente sustituido con -S(O)2-alquilo C1- ; y
n es 1 , 2 ó 3; y cada uno de R7, R8 y R9 es independientemente hidrógeno o alquilo C1 -6; y sales, solvatos y estereoisómeros farmacéuticamente aceptables del mismo. Los compuestos de las solicitudes norteamericanas anteriormente mencionados son para ser agonistas del receptor ß2- adrenérgico. Ejemplo 1 de las solicitudes norteamericanas anteriormente mencionadas es el compuesto: 5-[(R)-2-(2-{4-[4-(2-amino-2-metil-propoxi)-fenilamino]-fenil}-etilamin o)- 1 -hid roxi-etil]-8-hid roxi-1 H-q uinolin-2-ona (en adelante referido como Compuesto A) , que puede representarse por la fórmula estructural ( I ) :
Ahora hemos encontrado ciertas sales de novedad del
Compuesto A, viz. del cinamato, 4-metoxicinamato, 4-fenilcinamato y las sales de 4-metilcinamato en adelante conocidas como "sales de la ¡nvención" . Por lo tanto , en u n primer aspecto la presente invención proporciona u na sal de
5-[(R)-2-(2-{4-[4-(2-amino-2-metil-propoxi)-fenilamino]-fenil}-etilamino)-1-hidroxi-etil]-8-hidroxi-1 H-quinolin-2-ona, seleccionado de un cinamato, 4-metoxicinamato, di-(4-fenilcinamato) y sal 4-metil cinamato. La invención también proporciona una sal del compuesto de fórmula (I) más adelante, en donde la sal es seleccionada de una sal de cinamato, 4-metoxicinamato, di-(4-fenilcinamato) y 4-metilcinamato. En una modalidad la presente invención proporciona una sal de cinamato de 5-[(R)-2-(2-{4-[4-(2-amino-2-metil-propoxi)-fenilamino]-fenil}-etilamino)-1-hidroxi-etil]-8-hidroxi-1 H-quinolin-2-ona. En otra modalidad la presente invención proporciona una sal de 4-metoxicinamato de 5-[(R)-2-(2-{4-[4-(2-amino-2-metil-propoxi)-fenilamino]-fenil}-etilamino)-1-hidroxi-etil]-8-hidroxi-1 H-quinolin-2-ona. En una modalidad adicional la presente invención proporciona una sal de di-(4-fenilcinamato) de 5-[(R)-2-(2-{4-[4-(2-amino-2-metil-propoxi)-fenilamino]-fenil}-etilamino)-1-hidroxi-etil]-8-hidroxi-1H-quinolin-2-ona. En una modalidad adicional la invención proporciona una sal de
4-metilcinamato de 5-[(R)-2-(2-{4-[4-(2-amino-2-metil-propoxi)-fenilamino]-fenil}-etilamino)-1-hidroxi-etil]-8-hidroxi-1 H-quinolin-2-ona. En una modalidad particular la invención proporciona una sal de 4-metilcinamato cristalina de 5-[(R)-2-(2-{4-[4-(2-amino-2-metil-
propoxi)-fenilamino]-fenil}-etilamino)-1-hidroxi-etil]-8-hidroxi-1 H-quinolin-2-ona. En una modalidad particular la invención proporciona una sal de cinamato cristalina de 5-[(R)-2-(2-{4-[4-(2-amino-2-metil-propoxi)-fenilamino]-fenil}-etilamino)-1-hidroxi-etil]-8-hidroxi-1 H-quinolin-2-ona. En otra modalidad la invención proporciona una sal de 4-metoxicinamato cristalina de 5-[(R)-2-(2-{4-[4-(2-amino-2-metil-propoxi)-fenilamino]-fenil}-etilamino)-1-hidroxi-etil]-8-hidroxi-1 H-quinolin-2-ona. En una modalidad particular la invención proporciona una sal de di-(4-fenilcinamato) cristalina de 5-[(R)-2-(2-{4-[4-(2-amino-2-metil-propoxi)-fenilamino]-fenil}-etilamino)-1-hidroxi-etil]-8-hidro?i-1 H-quinolin-2-ona. Hemos encontrado que las sales de la invención pueden tener diversos estados de hidratación. En una modalidad adicional la presente invención comprende hidratos de sales de la invención. Así, por ejemplo la sal de 4-meticinamato puede obtenerse como un dihidrato, o como un hidrato asociado con 3.5 moles de agua. La presente invención también comprende solvatos de sales de la invención. Las sales de la invención también pueden existir en diferentes estoiquiometrías. Así por ejemplo, la sal con ácido 4-fenilcinámico es formada con 2 moles de ácido por cada mol del Compuesto A. Se apreciará que el compuesto de fórmula (I), que es descrito y
nombrado como el isómero R con respecto al gru po O H , puede estar en mezcla con el isómero S correspondiente y por lo tanto las sales de la invención también pueden existir como mezclas de los isómeros. Así por ejemplo, la mezcla puede contener por lo menos 90% , por ejemplo por lo menos 95% del isómero R. Las sales de la invención pueden prepa rarse poniendo en contacto u na solución del compuesto A con u n ácido seleccionado de ácido cinámico, ácido 4-metoxicinámico, ácido 4-fenilcinámico o ácido 4-metilcinámico. El compuesto A puede por ejemplo ser disuelto en una solución orgánica acuosa , por ejemplo en una mezcla de tetrahidrofu rano y agua , o u n alcohol acuoso tal como espíritu metilado ind ustrial acuoso. La reacción puede efectuarse con agitación . La temperatura de reacción puede estar en el intervalo de 0°C a 50°C , por ejemplo de 1 5°C a 30°C . La cristalización puede ocurrir espontáneamente o puede inducirse, por ejemplo mediante raspadu ra o sembrando. En un aspecto la presente la invención proporciona un método para prepa rar u na sal de 4-metoxicinamato del compuesto A que comprende poner en contacto en solución el ácido 4-metoxicinámico y el compuesto A. En otro aspecto la presente invención proporciona un método para preparar u na sal de cinamato del Compuesto A que comprende poner en contacto en solución el compuesto A y ácido cinámico. En un aspecto ad icional la presente invención proporciona u n método para preparar u na sal de di-4-fen ilcinamato del Compuesto A
que comprende poner en contacto en solución el ácido 4-fenilcinámico y Compuesto A. En aún otro aspecto la presente invención proporciona un método para preparar una sal de 4-metilcinamato del compuesto A que comprende poner en contacto en solución el Compuesto A y ácido 4-metilcinámico. El Compuesto A puede por sí mismo prepararse usando uno de los métodos generales descritos en la Solicitud de Patente
Norteamericana No. 60/535,784, y documento US 2005/0159448A1 como es descrito más adelante. El Compuesto A también puede prepararse por el método específico descrito por el Ejemplo de
Referencia más adelante. Las Solicitudes de Patente Norteamericana antes mencionadas, describen inter alia los siguientes métodos generales para la preparación de compuestos definidos en las mismas: Procedimientos Sintéticos Generales Los compuestos de la Solicitud de Patente Norteamericana No.
60/535,784, y documento US 2005/0159448A1 pueden prepararse a partir de materiales de inicio fácilmente disponibles usando los siguientes métodos y procedimientos generales. Como será aparente para los expertos en la técnica, los grupos protectores convencionales pueden ser necesarios para prevenir ciertos g rupos funcionales de las reacciones indeseadas precedentes. La elección de un grupo protector adecuado para un grupo funcional particular, así como las condiciones adecuadas para
protección y desprotección , son bien conocidas en la técnica. Por ejemplo, numerosos grupos protectores, y su introducción y eliminación , se describen en T. W. Greene ans G. M . Wuts, Protecting Groups in Organic Synthesis, Tercera Edición, Wiley, New York, 1999 y referencias citadas en la misma. En un método de síntesis, los compuestos son preparados como se ilustra en el Esquema de Reacción A. (Los sustituyentes y variables mostradas en los siguientes Esquemas de Reacción tienen las definiciones proporcionadas antes a menos que se indique lo contrario.)
Esquema de Reacción A
donde P1 representa un grupo protector hidroxi , P2 representa un grupo protector hidroxi, y L representa un grupo saliente, tal como bromo. Como se muestra en el Esquema de Reacción A, un compuesto de fórmula 1 primero se hace reaccionar con una arilamina (2) para proporcionar un intermediario de fórmula 3. Normalmente, esta reacción es conducida en un solvente orgánico en presencia de la base y un catalizador metálico de transición y arilfosfina ligada por calentamiento. Un catalizador útil para el acoplamiento de un grupo arilo a una arilamina es tris(dibencildenacetona)dipaladio(0) junto
con rac-2 ,2'-bis(d ifenilfosfina)- 1 , 1 '-binaftilo. La reacción es normalmente calentada a u na tem peratura de entre aproximadamente 50°C y aproximadamente 1 20CC por entre aproximadamente 0.25 y aproximadamente 1 2 horas. El grupo protector P1 es no rmalmente un g rupo protector sililo, que es normalmente eliminado del intermediario de fórmu la 3 usando un fluoru ro o reactivo ácido, para proporcionar u n intermediario de fórmu la 4. El g rupo protector P2 es normalmente un grupo protector bencilo, que es normalmente eliminado del intermediario de fórmula 4 por hidrogenación usando un catalizador de paladio sobre carbono, para proporcionar el producto. Un método alternativo pa ra preparar el intermediario 3 es ilustrado en el Esquema de Reacción B.
Esquema de Reacción B
5 § Las condiciones para el acoplamiento de los intermediarios 5 y
6 en el Esquema de Reacción B para producir el intermediario 3 son normalmente las mismas como las usadas para acoplar los intermediarios 1 y 2 en el Esq uema de Reacción A. Aún otro método alternativo para preparar el intermediario 3 es ilustrado en el Esquema de Reacción C .
Esquema de Reacción C
La reacción del Esquema de Reacción C es normalmente conducida en u n solvente aprótico polar en presencia de la base. Los solventes adecuados normales incluyen dimetilsulfoxido, dimetilformamida , dimetilacetamida y similares. La reacción es calentada normalmente a una temperatura de entre aproximadamente 60°C y aproximadamente 140°C por entre aproximadamente 0.25 y aproximadamente 4 horas. Los compuestos de fórmula 1 y 7 utilizados en las reacciones descritas en esta solicitud son fácilmente preparados por procedimientos conocidos en la técnica, y descritos, por ejemplo, en las Patentes N orteamericanas 6, 653,323 B2 y 6,670,376 B 1 , q ue se incorporan en la presente por referencia , y referencias de las mismas. El intermediario 5 puede prepararse mediante la reacción del intermed iario 7 con 2-(4-aminofenil)etilamina en un solvente aprótico con calentamiento. Los intermed iarios 2 y 6 están disponibles comercialmente o se preparan de los materiales de inicio fácilmente disponibles. Por ejemplo , cuando R5 es -[O-alq uilenilo C1 -6]n-NR10R1 1 y R6 es hid rógeno , el intermediario 2' , de fórmula general 2 , puede prepa ra rse med iante el proceso del Esq uema de Reacción D
Esquema de Reacción D
donde R5a es definido de modo que -OR5a es -[O-alquilenilo C1-6]n-NR10R11. Como un ejemplo de las condiciones de reacción adecuadas para el Esquema de Reacción D, la reacción es conducida en dimetiisulfóxido en presencia de hidruro de sodio. Alternativamente, la reacción del intermediario 9 con el compuesto HO-R5a puede conducirse en un solvente tal como tetrahidrofuran, en presencia de una base tal como ferc-butóxido de potasio. El intermediario 10 puede convertirse en el intermediario 2' mediante hidrogenación, por ejemplo usando paladio en carbono, en un solvente tal como espíritus metilados industriales. Otros detalles con respecto a condiciones de reacción específicas y otros procedimientos para preparar el compuesto A se describen en los Ejemplos y Ejemplo de Referencia más adelante. Como se indica antes, los compuestos de la Solicitud de Patente Norteamericana No. 60/535,784 y documento US 2005/0159448A, que incluyen el Compuesto A, son agonistas del receptor ß2-adrenérgico selectivos y potentes. Por lo tanto, la presente invención también proporciona un método para la profilaxis
o tratamiento de una condición clínica en un mamífero, tal como un humano, para el cual se indica un agonista de ß2-adrenoreceptor selectivo, que comprende la administración de una cantidad terapéuticamente efectiva de una sal de esta invención. En particular, la presente invención proporciona un método para la profilaxis o tratamiento de u na enfermedad asociada con la obstrucción reversible de las vías respiratorias tal como asma, enfermedad pulmonar obstructiva crónica (COPD), infección del tracto respiratorio o enfermedad del tracto respiratorio superior. En un aspecto adicional la presente invención proporciona tal método para la profilaxis o tratamiento de una condición clínica seleccionada de labor prematura, depresión , paro card íaco congestivo, enfermedades de la piel (por ejemplo, enfermedades de la piel inflamatorias, alérgicas, psoriásicas y proliferativas) , condiciones donde es deseable que disminuya la acidez péptica (por ejemplo ulceración péptica y gástrica) o enfermedad de debilitamiento del músculo. En alternativa, también se proporciona una sal de la invención para uso en terapia médica, particularmente, para uso en la profilaxis o tratamiento de una condición clínica en un mam ífero, tal como un humano, para el cual es indicado un agonista de ß2-adrenoreceptor selectivo. En particular, se proporciona una sal de la invención para la profilaxis o tratamiento de una enfermedad asociada con obstrucción reversible de las vías respiratorias tal como asma, enfermedad pulmonar obstructiva crónica (COPD), infección del
tracto respiratorio o enfermedad del tracto respiratorio superior. En un aspecto adicional , se proporciona una sal de la invención para la profilaxis o tratamiento de u na condición clín ica seleccionada de labor prematu ra , depresión , paro card íaco congestivo, enfermedades de la piel (por ejemplo enfermedades de la piel proliferativas, psoriásicas, alérgicas e inflamatorias) , condiciones donde es deseable q ue dismi n uya la acidez péptica (por ejemplo ulceración péptica y gástrica) o enfermedad de debilitamiento del múscu lo. La presente invención también proporciona el uso de una sal de la invención en la fabricación de un medicamento para la profilaxis o tratamiento de una condición clín ica para la cual es indica u n agonista de ß2. adrenoreceptor selectivo, por ejemplo una enfermedad asociada con la obstrucción reversible de las vías respiratorias tal como asma, enfermedad pulmonar obstructiva crónica (COPD) , infección del tracto respi ratorio o enfermedad del tracto respiratorio superior. En u n aspecto adicional , se proporciona una sal de la invención en la fabricación de un medicamento para la profilaxis o tratamiento de una condición clínica seleccionada de labor prematu ra , depresión , paro card íaco congestivo, enfermedades de la piel (por ejemplo enfermedades de la piel proliferativas, psoriásicas, alérgicas e inflamatorias), condiciones donde es deseable q ue dism in uya la acidez péptica (por ejemplo ulceración péptica y gástrica) o enfermedad de debilitamiento del músculo. La cantidad de u na sal de la invención q ue es requerida para llevar a cabo un efecto terapéutico, por supuesto , va ria rá con la ruta
de administración , el sujeto bajo tratamiento, y el trastorno o enfermedad particular a tratarse. Las sales de la invención pueden administrarse por inhalación en u na dosis de 0.0005 mg a 1 0 mg , preferiblemente de 0.005 mg a 0.5 mg , por ejemplo, de 0.05 mg a 0.5 mg El intervalo de dosis para hu manos adultos es generalmente de
0.0005 mg a 1 0 mg por d ía y preferiblemente de 0.01 mg . a 1 mg por d ía, más preferiblemente de 0.05 mg a 0.5 mg . M ientras q ue es posible para u na sal de la presente invención , seleccionada de cinamato del Compuesto A, 4-metoxicinamato del Compuesto A, d i-(4-fenilcinamato) del Compuesto A y 4-metilcinamato del Compuesto A, a administrarse sola, es preferible presentarse como u na formulación fa rmacéutica . Por consigu iente , la presente invención proporciona una formulación farmacéutica que comprende el cinamato del Compuesto A, y u n portador o excipiente farmacéuticamente aceptable, y opcionalmente u no o más de otros ingredientes terapéuticos. La presente invención proporciona una formu lación farmacéutica que comprende el 4-metoxicinamato del Compuesto A, y un portador o excipiente farmacéuticamente aceptable, y opcionalmente uno o más de otros ing redientes terapéuticos. La presente invención además proporciona una formulación farmacéutica que comprende el di-(4-fen ilcinamato) del Compuesto A, y u n portador o excipiente farmacéuticamente aceptable, y opcionalmente uno o más de otros ing redientes terapéuticos. La presente invención proporciona además una form ulación
farmacéutica q ue comprende el 4-metilcinamato del Compuesto A, y un portador o excipiente farmacéuticamente aceptable, y opcionalmente u no o más de otros ing redientes terapéuticos. Las formulaciones incluyen las adecuadas para la administración oral , parenteral (incluyendo subcutánea , i ntradérmica , intramuscu lar, intravenosa e intraarticu lar), inhalación (incluyendo polvo de partículas finas o vaporizaciones que pueden generarse por med io de varios tipos de aerosoles presurizados, nebu lizadores o insufladores de dosis medida), rectal y tópica (incluyendo dérmica , bucal, subling ual e intraocular) a unq ue la ruta más adecuada puede depender de por ejemplo la cond ición y trastorno del recipiente. Las formu laciones pueden presenta rse adecuadamente en forma de dosificación unitaria y pueden prepararse por cualquiera de los métodos bien conocidos en la técnica de farmacia. Todos los métodos incluyen la etapa de llevar una sal de la invención (en adelante también referida como "ingrediente activo") en asociación con el portador que constituye uno o más ingredientes accesorios. En general las formulaciones se preparan llevando u niforme e íntimamente en asociación el ing rediente activo con los portadores l íquidos o portadores sólidos divididos finamente o ambos y después, si es necesa rio, formar el producto en la formulación deseada. Las composiciones en polvo seco para el suministro tópico para el pulmón por inhalación p ueden , por ejemplo, presentarse en cápsulas y cartuchos de por ejemplo gelati na, o ampolletas de por ejemplo papel de aluminio lam inado , pa ra uso en u n inhalador o
insuflador. Las formulaciones de mezcla en polvo contienen generalmente una mezcla de polvo para inhalación del ingrediente activo y u na base de polvo adecuada (sustancia del portador/d iluyente/excipiente) tal como mono-, di- o poli-sacáridos (por ejemplo lactosa o almidón). El uso de lactosa es preferido. Las composiciones en polvo seco pueden también inclu ir, en adición al fármaco y portador, u n excipiente adicional tal como un éster de azúcar por ejemplo , octaacetato de celobiosa , estearato de calcio o estearato de mag nesio. Cada cápsula o cartucho puede contener generalmente entre
20 µg a 1 0 mg de una sal de la invención opcionalmente en combinación con otro ingrediente terapéuticamente activo. Alternativamente, el compuesto de la invención puede presentarse sin excipientes. El empaquetamiento de la formulación puede ser adecuado para una dosis u nitaria o suministro de dosis múltiples. En el caso del sumin istro por dosis múltiples, la formulación puede pre-med irse (por ejemplo como en Diskus, ver G B 22421 34, Patentes Norteamericanas Nos. 6 ,632 ,666, 5,860,41 9, 5,873 , 360 y 5,590,645 o Diskhaler, ver documentos GB 21 78965, 21 29691 y 2169265, Patentes Norteamericanas Nos. 4,778 ,054, 4 ,81 1 ,731 , 5,035,237, cuyas descripciones se incorporan en la presente por referencia) o medi rse en uso (por ejemplo en Turbu haler, ver documento EP 6971 5 o en los dispositivos descritos en la Patente Norteamericana No. 6, 321 ,747 cuyas descripciones se incorporan en la presente por referencia). U n ejemplo de un d ispositivo de dosis unitaria es
Rotahaler (ver documento GB 2064336 y Patente Norteamericana No. 4,353,656 cuyas descripciones se incorporan en la presente por referencia) . El d ispositivo de inh alación Diskus comprende u na tira alargada formada de una hoja base que tiene una pluralidad de hendidu ras espaciadas a lo largo de su longitud y una lámina de cubierta hermética pero desprend iblemente sellada de la misma para defin ir u na plu ralidad de envases, cada envase tiene en el mismo una formulación i nhalable que contiene u na sal de la invención preferiblemente combinada con lactosa. Preferiblemente, la tira es suficientemente flexible para en rollase en u n rollo. La lámina de cubierta y hoja base, preferiblemente tienen porciones extremas principales q ue no están selladas entre sí y por lo menos una de las porciones extremas principales es construida para unirse a un medio de enrollado. También , preferiblemente el sello hermético entre las láminas base y cubierta se extienden en su ancho total . La lámina de cubierta puede preferiblemente desprenderse desde la base de la lámina en u na di rección longitud inal desde u n primer extremo de la lámina base . Alternativamente, la formulación puede presentarse si se desea ju nto con uno o más de otros agentes terapéuticos en un dispositivo de inhalación en donde los agentes terapéuticos individuales son administrables simultáneamente pero son almacenados por separado (o se almacenan total o parcialmente por separado para combinaciones triples) , por ejemplo en composiciones farmacéuticas separadas , por ejemplo como es descrito en el documento WO 03/061 743.
Las composiciones en spray para suministro tópico al pulmón por in halación pueden por ejemplo formularse como soluciones acuosas o suspensiones o como aerosoles sumin istrados de empaques presurizados, tal como u n inhalador de dosis med ida , con el uso de un propulsor licuado adecuado . Las composiciones en aerosol adecuadas para inhalación pueden ser ya sea una suspensión o una solución y generalmente contener una sal de. la invención opcionalmente en combinación con otro ing rediente terapéuticamente activo y un propulsor adecuado tal como un fluorocarbono o clorofluorocarbono que contiene hidrógeno o mezclas de los mismos, particularmente hid rofluoroalcanos, por ejemplo diclorod ifluorometano, triclorofluorometano, diclorotetrafluoroetano, especialmente 1 , 1 , 1 ,2-tetrafluoroetano, 1 , 1 , 1 ,2 ,3 , 3,3-heptafluoro-n-propano o una mezcla de los mismos. El bióxido de carbono u otro gas adecuado también puede utilizarse como propulsor. La composición en aerosol puede ser libre de excipiente u opcionalmente puede contener excipientes de formulación adicionales bien conocidos en la técnica tal como agentes tensoactivos por ejemplo ácido oleico o lecitina y cosolventes por ejemplo etanol. Las formulaciones presurizadas serán conservadas generalmente en u na lata (por ejemplo una lata de aluminio) cerrada con u na válvula (por ejemplo una válvula de medición) y ajustada en un accionador provisto con una boq uilla. Los med icamentos para la administración por inhalación deseablemente tienen un tamaño de partícula controlado. El tamaño
de partícula óptimo para inhalación en el sistema bronquial es usualmente 1-10 µm, preferiblemente 2-5 µm. Las partículas que tienen un tamaño arriba de 20 µm son generalmente demasiado grandes cuando son inhaladas para llegar a las vías respiratorias pequeñas. Para alcanzar estos tamaños de partícula, las partículas del ingrediente activo cuando se producen pueden ser reducidas de tamaño por medios convencionales por ejemplo por micronización. La fracción deseada puede separarse mediante clasificación o cribado por aire. Preferiblemente, las partículas serán cristalinas. Cuando un excipiente tal como lactosa se utiliza, generalmente, el tamaño de partícula del excipiente será mucho más grande que el medicamento inhalado dentro de la presente invención. Cuando el excipiente es lactosa este estará normalmente presente como lactosa molida, en donde no más del 85% de las partículas de lactosa tendrán un MMD de 60-90 µm y no más de un 15% tendrá un MMD de menos de 15 µm. Los atomizadores intranasales pueden formularse con portadores acuosos o no acuosos con la adición de agentes tal como agentes espesantes, sales amortiguadas o ácido o álcali para ajustar el pH, agentes de ajuste de isotonicidad o antioxidantes. Las soluciones para inhalación mediante nebulación pueden formularse con un vehículo acuoso con la adición de agentes tal como ácido o álcali, sales amortiguadas, agentes de ajuste de isotonicidad o antimicrobianos. Pueden ser esterilizadas por filtración o calentamiento en una autoclave, o presentarse como un
producto no estéril. Las formulaciones de la presente invención adecuadas para la administración oral pueden presentarse como unidades discretas tal como cápsulas, sellos o tabletas cada una conteniendo una cantidad predeterminada del ingrediente activo; como un polvo o granulos; como una solución o una suspensión en un líquido acuoso o un líquido no acuoso; o como una emulsión líquida aceite en agua o emulsión líquida agua en aceite. Las sales de la invención también pueden presentarse como un bolo, electuario o pasta. Una tableta puede hacerse mediante compresión o moldeado, opcionalmente con uno o más ingredientes accesorios. Las tabletas comprimidas pueden prepararse comprimiendo en una máquina adecuada el ingrediente activo en una forma de flujo libre tal como un polvo o granulos, opcionalmente mezclados con un agente aglutinante, lubricante, diluyente inerte, lubricante, tensoactivo o de dispersión. Las tabletas moldeadas pueden hacerse moldeando en una máquina adecuada una mezcla del compuesto pulverizado humedecido con un diluyente líquido inerte. Las tabletas opcionalmente pueden revestirse o marcarse y pueden formularse para proporcionar liberación controlada o retardada del ingrediente activo en las mismas. Las formulaciones para la administración parenteral incluyen soluciones de inyección estéril acuosas y no acuosas que pueden contener antioxidantes, amortiguadores, bacterioestáticos y soluciones derretidas que dan la formulación isotónica con la sangre
del recipiente deseado; y suspensiones estériles acuosas y no acuosas que pueden incluir agentes de suspensión y agentes espesantes . Las formulaciones pu eden presentarse en recipientes de dosis unitaria o mu ltidosis, por ejemplo ampolletas y viales sellados, y pueden almacenarse en u na condición deshidratada por congelación (liofilizada) que requiere únicamente la adición del portador l íq uido estéril , por ejemplo salina o ag ua para inyección , inmed iatamente antes de uso. Las soluciones y suspensiones de inyección improvisadas pueden prepararse de polvos, granulos y tabletas estériles de la clase descrita previamente . Las formulaciones para la administración rectal pueden presentarse como un supositorio con los portadores usuales tal como manteca de cacao o polietilenglicol. Las form u laciones para administración tópica en la boca, por ejemplo bucal o sublingualmente incluyen pastillas q ue comprenden el ingrediente activo en una base saborizada tal como sucrosa y acacia o tragacanto, y pastillas que comprenden el ingrediente activo en una base tal como gelatina y g iicerina o sucrosa y acacia. Las formulaciones de dosificación unitaria preferidas son las que contienen u na dosis efectiva , como se cita más adelante , o una fracción apropiada de la misma, del ingrediente activo. Deberá entenderse que además de los ing redientes mencionados particularmente antes, las formulaciones de esta invención pueden inclu ir otros agentes convencionales en la técnica que tienen relación al tipo de formulación en cuestión , por ejemplo los
adecuados para la administración oral pueden incluir agentes saborizantes. Los compuestos y formulaciones farmacéuticas de acuerdo a la invención pueden utilizarse en combinación con o incluir uno o más de otros agentes terapéuticos, por ejemplo seleccionados de agentes anti-inflamatorios, agentes anticolinérgicos (particularmente un antagonista del receptor (l M2, M-|/M2 o M3), otros agonistas de ß2-adrenoreceptor, agentes antiinfecciosos (por ejemplo antibióticos, antivirales), o antihistamínicos. La invención así proporciona, un aspecto adicional, una combinación que comprende una sal de la invención junto con uno o más de otros agentes terapéuticamente activos, por ejemplo seleccionados de un agente antiinflamatorio (por ejemplo un corticoesteroide o un NSAID), de un agente anticolinérgico, otro agonista de ß2-adrenoreceptor, un agente antinfeccioso (por ejemplo un antibiótico o un antiviral), o un antihistamínico. Los ejemplos de combinaciones son los que comprenden una sal de la invención junto con un corticoesteroide, y/o un anticolinérgico, y/o un inhibidor de PDE-4. Las combinaciones adecuadas son las que comprenden uno o dos de otros agentes terapéuticos. Será claro para un experto en la técnica que, cuando es apropiado, el otro ingrediente(s) terapéutico puede utilizarse en forma de sales, (por ejemplo como sales de metales alcalinos o amina o como sales de adición acida), o profármacos, o como esteres (por ejemplo alquilésteres inferiores), o como solvatos (por
ejemplo hidratos) para optimizar la actividad y/o estabilidad y/o características físicas (por ejemplo solubilidad) del ingrediente terapéutico. También será claro que cuando sea apropiado, los ingredientes terapéuticos pueden utilizarse en forma ópticamente pura. Los ejemplos de agentes antiinflamatorios incluyen corticoesteroides y NSAIDs. Los corticoesteroides que pueden utilizarse en combinación con los compuestos de la invención, son los corticoesteroides orales e inhalados y sus profármacos que tienen actividad antiinflamatoria. Los ejemplos incluyen prednisolona de metilo, prednisolona, dexametasona, propionato de fluticasona, S-flurometiléster del ácido 6a,9o-difluoro-17a-[(2-furanilcarbonil)oxi]-1 ß-hidroxi-16a-metil-3-oxo-androsta-1 ,4-dieno-17ß-carbotioico, S-(2-oxo-tetrahidro-furano-3S-il)éster del ácido 6a,9a-difluoro-11 ß-hid roxi- 16o-metil-3-oxo-17a-propio ni loxi-and rosta- 1 ,4-dieno-17ß-carbotioico, esteres de beclometasona (por ejemplo el éster de 17-propionato o el éster de 17,21-dipropionato), budesonida, flunisolida, esteres de mometasona (por ejemplo éster de furoato), acetonida de triamcinolona, rofleponida, ciclesonida, propionato de butixocort, RPR-106541, y ST-126. Los corticoesteroides preferidos incluyen propionato de fluticasona, S-flourometiléster del ácido 6a,9a-difluoro-11 ß-hidroxi- 16a-meti 1-17a-[(4-metil-1,3-tiazol-5-ca rbon i l)oxi]-3-oxo-androsta-1 ,4-dieno-17ß-carbotioico y S-fluorometiléster del ácido 6a,9a-difluoro-17a-[(2-furanilcarbonil)oxi]-11 ß-hidroxi-16o-metil-3-oxo-androsta-1 ,4-dieno-17ß4-carbotioico, más
preferiblemente S-fluorometiléster del ácido 6a,9a-difluoro-17a-[(2-furanilcarbonil)oxi]-11 ß-hidorxi-16 a-metil-3-oxo-androsta-1 ,4-dieno-17ß-carbotioico. Los ejemplos de NSAIDs incluyen cromoglicato de sodio, nedocromilo-sodio, inhibidores de fosfodiesterasa (PDE) (por ejemplo teofilina, inhibidores PDE4 o inhibidores de PDE3/PDE4 mezclados), antagonistas de leucotrieno, inhibidores de síntesis de leucotrieno, inhibidores de ¡NOS, inhibidores de triptasa y elastasa, antagonistas de integrina beta-2 y agonistas del receptor de adenosina o antagonistas (por ejemplo agonistas de adenosina 2a), antagonistas de citoquina (por ejemplo antagonistas de quemocina) o inhibidores de síntesis de citoquina. Otros agonistas de ß2-adrenoreceptor incluyen salmeterol (por ejemplo como el xinafoato), salbutamol (por ejemplo como el sulfato o la base libre), formoterol (por ejemplo como el fumarato), fenoterol o terbutalina y sales de los mismos. Puede utilizarse una sal de la invención en combinación con un inhibidor de fosfodiesterasa 4 (PDE4) o mezclado el inhibidor de PDE3/PDE4. El inhibidor de PDE4 específico útil en este aspecto de la invención puede ser cualquier compuesto que es conocido para inhibir la enzima PDE4 o que es descubierta para actuar como un inhibidor de PDE4, y que son únicamente inhibidores de PDE4, no compuestos que inhiben a otros miembros de la familia de PDE así como PDE4. Generalmente se prefiere utilizar un inhibidor de PDE4 que tenga una relación Cl50 de aproximadamente 0.1 o mayor como
se considera a Cl50 para la forma catalítica de PDE4 que une el rolipram con una afinidad alta dividida por Cl50 para la forma que une el rolipram con una afinidad baja. Para los propósitos de esta descripción, el sitio catalítico cAMP que une el rolipram R y S con una afinidad baja es denominado el sitio de unión de "afinidad baja"
(LPDE 4) y la otra forma de este sitio catalítico que une el rolipram con una afinidad alta es denominado el sitio de unión de "afinidad alta" (HPDE 4). Este término "HPDE4" no deberá confundirse con el término "hPDE4" que es utilizado para designar el PDE4 humano. Un método para determinar las relaciones Cl50 es establecido en la Patente Norteamericana 5,998,428 que se incorpora en la presente por completo por referencia como se indica en la presente. Ver también la Solicitud PCT WO 00/51599 para otra descripción de este ensayo. Los inhibidores de PDE4 particulares son los que tienen una relación Cl50 mayor de 0.5, y particularmente los compuestos que tienen una relación mayor de 1.0. Los ejemplos de compuestos incluyen ácido cis-4-ciano-4-(3-ciclopentiloxi-4-metoxifen i l)ciclohexa no- 1 -carboxílico, 2-carbometoxi-4-ciano-4-(3-ciclopropilmetoxi-4-difluorometoxifenil) ciclohexan-1-ona y cis-[4-ciano-4-(3-ciclopropilmetoxi-4-difluorometoxifenil)ciclohexano-1-ol]; éstos son ejemplos de compuestos que unen preferiblemente a los sitios de unión de afinidad baja y que tienen una relación Cl50 de 0.1 o mayor. Otros compuestos de interés incluyen:
Compuestos establecidos en la Patente Norteamericana 5,552,438 publicada el 03 de septiembre de 1996; esta patente y los compuestos que se describen se incorporan por completo en la presente por referencia. El compuesto de particular interés, que es descrito en la Patente Norteamericana 5,552,438, es ácido cis-4-ciano-4-[3-(ciclopenti loxi)-4-metoxifen i l]ciclohexan-1 -carboxílico (también conocido como cilomalast) y sus sales, esteres, profármacos o formas físicas. Otros compuestos de interés incluyen AWD-12-281 de elbion (Hofgen , N . y colaboradores 15th EFMC Int Symp Med Chem (Sept.
6-10, Edinburgh) 1998, Abst P.98 ; CAS referencia No. 247584020-9); una 9-benciladenina derivada nominada NCS-613 (INSERM); D-4418 de Chiroscience y Schering-Plough; un inhibidor de PDE4 benzodiazepina identificada como CI-1018 (PD-168787) y atribuido a Pfizer; un derivado de benzodioxol descrito por Kyowa Hakko en el documento WO99/16766; K-34 de Kyowa Hakko; V-1 1294A de Napp (Landells, L.J . y colaboradores Eur Resp J [Annu Cong Eur Resp Soc (Sept. 19-23, Geneve) 1998] 1998, 12 (Suppl. 28): Abst P2393); roflumilast (CAS referencia No. 162401 -32-3) y una ftalazinona (WO99/47505, la descripción de la cual se incorpora en la presente por referencia) de Byk-Gulden; Pumafentrina , (-)-p-[(4aR*, 10bS*)-9-etoxi-1 ,2,3,4,4a, 10b-hexah id ro-8-metoxi-2-metilbenzo[c][1 ,6]naftiridin-6-il]-N , N-diisopropilbenzamida que es un inhibidor de PDE3/PDE4 mezclado que ha sido preparado y publicado por Byk-Gulden , ahora Altana; arofilina bajo desarrollo por
Almiral-Prodesfarma; VM554/UM565 de Vernalis; o T-440 (Tanabe Seiyaku; Fuji, K. y colaboradores J Pharmacol Exp Ther, 1998, 284(1): 162), y T2585. Otros posibles inhibidores de PDE-4 y PDE3/PDE4 mezclados incluyen los listados en el documento WO01/13953, la descripción del cual se incorpora en la presente por referencia. Los ejemplos de agentes anticolinérgicos son los compuestos que actúan como antagonistas en el receptor muscarínico, en particular los compuestos que son antagonistas de los receptores M y M2. Los compuestos ejemplares incluyen los alcaloides de las plantas de belladona como se ilustra por los similares de atropina, escopolamina, homatropina, hiosciamina; estos compuestos son administrados normalmente como una sal, siendo aminas terciarias. Estos fármacos, particularmente las formas de sal, están fácilmente disponibles de un número de fuentes comerciales o pueden hacerse o prepararse vía datos de literatura, a saber: Atropina -CAS-51-55-8 o CAS-51-48-1 (forma anhidra), sulfato de atropina - CAS-5908-99-6; óxido de atropina - CAS-4438-22-6 o su sal de HCl - CAS-4574-60-1 y nitrato de metilatropina - CAS-52-88-0. Homatropina - CAS-87-00-3, sal de hidrobromida - CAS-51-56-9, sal de metilbromida - CAS-80-49-9. Hiosciamina (cf, /) - CAS-101-31-5, sal de hidrobromida - CAS-306-03-6 y sal de sulfato - CAS-6835-16-1. Escopolamina - CAS-51-34-3, sal de hidrobromida - CAS-6533-
68-2, sal de metilbromida - CAS-155-41-9. Los anticolinérgicos particulares incluyen ipratropio (por ejemplo como bromuro), vendido bajo el nombre Atrovent, o?itropio (por ejemplo como bromuro) y tiotropio (por ejemplo como bromuro) (CAS-139404-48-1). También de interés son: metantelina (CAS-53- 46-3), bromuro de propantelina (CAS-50-34-9), metilbromuro de anisotropina o Valpin 50 (CAS-80-50-2), bromuro de clidinio (Quarzan, CAS-3485-62-9), copirrolato (Robinul), yoduro de isopropamida (CAS-71-81-8), bromuro de mepenzolato (Patente Norteamericana 2,918,408), cloruro de tridihexetilo (Patilona, CAS- 4310-35-4), y metiisulfato de hexociclio (Tral, CAS-115-63-9). Ver también clorhidrato de ciclopentolato (CAS-5870-29-1), tropicamida (CAS-1508-75-4), clorhidrato de trihexifenidilo (CAS-144-11-6), pirenzepina (CAS-29868-97-1), telenzepina (CAS-80880-90-9), AF-DX 116, o metoctramina, y los compuestos descritos en el documento
WO01/04118, la descripción del cual se incorpora en la presente por referencia. Ejemplos de antihistamínicos (también referidos como antagonistas receptores H^ incluyen cualquiera de uno o más de los numerosos antagonistas conocidos que inhiben los receptores Hi, y son seguros para uso humano. Todos son inhibidores reversibles, competitivos de la interacción de histamina con receptores H^ La mayoría de estos inhibidores, principalmente los antagonistas de primera generación, tiene una estructura principal, que puede representarse por la siguiente fórmula:
Esta estructura generalizada representa tres tipos de antihistamínicos generalmente disponibles: etanolaminas, etilendiaminas, y alquilaminas. Además, otros antihistamínicos de primera generación incluyen los que puedan caracterizarse como basados en piperizina y fenotiazinas. Los antagonistas de segunda generación, que son anti sedantes, tienen una relación de actividad-estructura similar en que retienen el grupo etileno principal (alquilaminas) o igual al grupo amina terciaria con piperizina o piperidina. Los antagonistas ejemplares son como sigue: Etanolaminas: maleato de carbinoxamina, fumarato de clemastina, clorhidrato de difenilhidramina, y dimenhidrinato. Etilendiaminas: amleato de pirilamina, HCl de tripelenamina, y citrato de tripelenamina. Alquilaminas: clorofeniramina y sus sales tales como sal de maleato, y acrivastina. Piperazinas: HCl de hidroxizina, pamoate de hidroxizina, HCl de ciclizina, lactato de ciclizina, HCl de meclizina, y HCl de cetirizina. Piperidinas: Astemizol, HCl de levocabastina, loratadina o su análogo de descarboetoxi, y clorhidrato de terfenadina y fexofenadina u otra sal farmacéuticamente aceptable. Clorhidrato de azelastina es aún otro antagonista receptor H-i
que puede utilizarse en combinación con un inhibidor de PDE4. Ejemplos de antihistamínicos preferidos incluyen metapirilina y loratadina. La invención así proporciona, en un aspecto adicional, una combinación que comprende una sal de la invención junto con un inhibidor de PDE4. La invención así proporciona, en un aspecto adicional, una combinación que comprende una sal de la invención junto con un corticoesteroide, por ejemplo propionato de fluticasona, S-fluorometiléster del ácido 6a9a-difluoro-11 ß-hidroxi-16a-metil-17a-[(4-metil-1 ,3-tiazol-5-ca rbon i l)oxi]-3-oxo-and rosta- 1 ,4-dieno-17ß-carbotioico o S-fluorometiléster del ácido 6a9a-difluoro-17a-[(2-furanilcarbonil)oxi]-11ß-h id roxi- 16a-metil-3-oxo-and rosta -1 ,4-dieno-17ß-carbotioico. La invención proporciona, en un aspecto adicional, una combinación que comprende una sal de la invención junto con un anticolinérgico, por ejemplo ipratropio, oxitropio o tiotropio. La invención proporciona, en un aspecto adicional, una combinación que comprende una sal de la invención junto con un antihistamínico. La invención proporciona, en un aspecto adicional, una combinación que comprende una sal de la invención junto con un inhibidor de PDE4 y un corticoesteroide, por ejemplo con un antihistamínico y un corticoesteroide como se describe antes. La invención proporciona, en un aspecto adicional, una
combinación que comprende una sal de la invención junto con un anticolinérgico e inhibidor de PDE-4, por ejemplo con un inhibidor de PDE4 y un anticolinérgico como se describe antes. Las combinaciones referidas antes pueden presentarse adecuadamente para uso en la forma de una formulación farmacéutica y así de formulaciones farmacéuticas que comprenden una combinación como se define antes junto con un diluyente o portador fisiológicamente aceptable representa un aspecto adicional de la invención. Los compuestos individuales de tales combinaciones pueden administrarse ya sea secuencial o simultáneamente en formulaciones farmacéuticas combinadas o separadas. Las dosis apropiadas de agentes terapéuticos conocidos serán apreciadas fácilmente por los expertos en la técnica. Breve Descripción de los Dibujos La figura 1 muestra un patrón de difracción de polvo por rayos x de cinamato de 5-[(R)-2-(2-{4-[4-(2-amino-2-metil-propoxi)-fenilamino]-fenil}-etilamino)-1-hidroxi-etil]-8-hidroxi-1 H-quinolin-2-ona. La figura 2 muestra un patrón de difracción de polvo por rayos x de 4-metoxicinamato de 5-[(R)-2-(2-{4-[4-(2-amino-2-metil-propoxi)-fenilamino]-fenil}-etilamino)-1-hidroxi-etil]-8-hidroxi-1H-quinolin-2-ona. La figura 3 muestra un patrón de difracción de polvo por rayos x de di-(4-fenilcinamato) de 5-[(R)-2-(2-{4-[4-(2-amino-2-metil-
propoxi)-fenilamino]-fenil}-etilamino)-1-hidroxi-etil]-8-hidroxi-1 H-quinolin-2-ona. La figura 4 muestra un patrón de difracción de polvo por rayos x de 4-metilcinamato de 5-[(R)-2-(2-{4-[4-(2-amino-2-metil-propoxi)-fenilamino]-fenil}-etilamino)-1-hidroxi-etil]-8-hidroxi-1 H-quinolin-2-ona (preparado de acuerdo al método del ejemplo 4, Método 1) La figura 5 muestra un patrón de difracción de polvo por rayos x de 4-metilcinamato de 5-[(R)-2-(2-{4-[4-(2-amino-2-metil-propox¡)-fenilamino]-fenil}-etilamino)-1-hidroxi-etil]-8-hidroxi-1 H-quinolin-2-ona (preparado de acuerdo al método del ejemplo 4, Método 2). Para una comprensión mejor de la invención, los siguientes ejemplos son dados por medio de ilustración. Abreviaciones DMSO Dimetiisulfóxido DSC Calorimetría de exploración diferencial H2O Agua HPLC Cromatografía líquida de presión alta TGA Análisis termogravimétrico THF Tetrahidrofurano TLC Cromatografía en capa fina TMS Trimetilsilano XRPD Difracción de polvo por rayos x IMS Espíritus metilados industriales Los siguientes métodos analíticos se utilizaron con respecto a los ejemplos 1 - 6:
El análisis de XRPD se llevo a cabo en un difractómetro de polvo por raxo X Panalytical, modelo X'Pert Pro PW3040/60, número de serie DY1850. El método se condujo de 2 a 40 grados 2-Teta con tamaño de etapa 2-Teta 0.0167 grados y un segundo tiempo de recolección de 31.75 en cada etapa usando un detector de X'celerator. Los espectros de 1H-RMN se adquirieron en un espectrómetro de 400 MHz Bruker DPX400. La muestra fue disuelta en dmso-d6 y los cambios químicas se reportaron en ppm con relación a la señal TMS en 0 ppm. Cuando sea necesario las mezclas de reacción se purificaron usando columnas de sílice empaquetadas de Biotage. Para el Ejemplo 1, el análisis de calorimetría de exploración diferencial fue obtenido usando un Perkin Elmer Pyris 1, número de serie 537N9062304. Las muestras fueron pesadas en una batea de aluminio, una tapa de aluminio colocada encima de la muestra y comprimida con una barra de cobre. Una cacerola y una tapa vacías sirvieron como referencia. Las muestras fueron equilibradas a 30°C y calentadas a 10°C / min a 300°C. El instrumento fue calibrado usando indio, estaño y conductores estándar. Para los ejemplos 2, 3 y 4, el análisis de calorimetría de exploración diferencial fue obtenido usando instrumentos TA 2920 MDSC, número de serie M2920-234. Las muestras fueron pesadas en una batea de aluminio, una tapa de aluminio ventilada encima de la muestra y comprimida con una barra de cobre. Una batea y una tapa
vacías sirvieron como referencia. Las muestras fueron equilibradas a 30 °C y calentadas a 10°C / min a una temperatura entre 250 y 350°C. El instrumento fue calibrado usando indio y conductores estándar. Para el ejemplo 1, el análisis termogravimétrico fue obtenido usando un Perkin Elmer Pyris 1 número de serie 537N9031106. Las muestras fueron colocadas en una batea de aluminio tarada y después entonces colocada en un crisol de platino. Las muestras fueron calentadas de 30°C a 10°C / min a 300°C. El instrumento fue calibrado por temperatura usando el punto Curie de níquel y aluminio. Para los ejemplos 2, 3 y 4, el análisis termogravimétrico fue obtenido usando un TA Instruments 2950 TGA, número de serie HA2950-226. Las muestras fueron colocadas en una batea de aluminio tarada y entonces colocadas en un crisol de platino. Las muestras fueron calentadas a temperatura ambiente a 10°C / min a una temperatura entre 250 y 350°C. El instrumento fue calibrado por temperatura usando el punto Curie de níquel y aluminio. Ejemplo de Referencia A menos que se indique de otra forma, en esta referencia de ejemplos de reactivos, material de inicio y solventes fueron adquiridos de proveedores comerciales, por ejemplo Sigma-Aldrich (St. Louis, MES), J. T. Baker (Phillipsburg, NJ), y Honeywell Burdick and Jackson (Muskegon, Ml), y utilizados sin purificación adicional; las reacciones se produjeron bajo una atmósfera de nitrógeno; las
mezclas de reacción fueron supervisadas por cromatografía de capa fina (TLC de sílice), la cromatografía líquida analítica de alto desempeño analítico (HPLC anal.), o espectrometría de masa; las mezclas de reacción fueron purificadas comúnmente por cromatografía de columna instantánea en gel de sílice, o por CLAR preparatorio usando el protocolo general descrito abajo; las muestras de RMN fueron disueltas en el solvente deuteratado (CD3OD, CDCI3,
0 DMSO-d6), y los espectros fueron adquiridos con un instrumento Varian Gemini 2000 (300 MHz) bajo parámetros estándares; e identificación espectrométrica de masa fue realizado por un método de ionización de electroaspersión (ESMS) con un instrumento Perkin Elmer (PE SCIEX API 150 EX). Síntesis de 5-f(R)-2-(2-(4-f4-(2-amino-2-metil-propoxi)-fenilaminol-fenil)-etilamino)-1-hidroxi-etil1-8-hidroxi-1 H-quinolin-2-ona a. Preparación de clorhidrato de 4-(2-amino-2-metil-propoxi)-f e n i I a m i n a Una suspensión agitada vigorosamente de hidruro de sodio (dispersión 60% en aceite mineral, 11.32 g, 0.28 mol) en dimetiisulfóxido (400 mL) se calentó a 45°C por 1 h. A esta suspensión entonces se le agregó (25.3 g, 1 equiv) 2-amino-2-metil- 1-propanol caliente. La mezcla de reacción fue calentada a 75°C por
1 h entonces enfriada a 20° C en un baño de hielo. (40 g, 1 equiv) de 1-fluoro-4-nitrobenceno fue agregado lentamente, manteniendo la temperatura abajo de 30°C, y la solución rojo oscuro resultante fue agitada a temperatura ambiente por 1 h. La reacción fue enfriada
rápidamente con agua (1000 mL), extraída con diclorometano (500 mL), y la capa orgánica lavada (1:1 cloruro de sodio acuoso saturado: 1000 mL de agua). El producto fue precipitado por adición de (400 mL) de ácido clorhídrico 3M a la capa orgánica. El sólido anaranjado resultante fue entonces filtrado y lavado con diclorometano hasta que el filtrado fue sin color. El material sólido fue transferido inmediatamente a un recipiente de hidrogenación. Fue agregado (en carbono 10% p/p, 50% p/p agua) paladio, seguido por (500 mL) de metanol. La mezcla fue agitada vigorosamente bajo 3 atmósferas de gas de hidrógeno por 16 h. El catalizador entonces fue filtrado, el solvente eliminado bajo presión reducida, y el sólido resultante secado por azeotropinación con tolueno (3 x 150 mL) para producir el título intermediario como un sólido blanco (4 Og, 0.18 mol, 65%) b. Preparación de 5-r(R)-2-(2-(4-r4-(2-amino-2-metil-propoxi)-feni lami nol-fe ni l-eti lami no)-1 -(terc-butil-d imetil-silan iloxi)-etil-8-benciloxi-1 H-quinolin-2-ona Una mezcla del producto de la etapa a (23.2 g, 1.1 equiv), clorhidrato de 8-be nci I oxi-5-{(R)-2-[2-(4-b romo-fe ni l)-eti lam ino- 1-(terc-butil-dimetil-silaniloxi)-etil}-1 H-quinolin-2-ona (66.0 g, 0.1 mol), y terc-butóxido de sodio (54.0 g, 5.5 equiv) en tolueno (600 mL) fue agitada a 90°C hasta que una solución homogénea fue obtenida. Fue agregado tris(dibencilidenacetona) de paladio (1.4 g, 0.015 equiv), seguido por de rac-2,2'-bis(difenilfosfino)-1 , 1 '-binaftilo (2.87 g, 0.045 equiv). La mezcla de reacción fue agitada a 90°C por 3h, entonces
dejados para enfriarse. La solución fue lavada con agua (100 mL), 1:1 de cloruro de sodio acuoso saturado:agua (100 mL), entonces secada en sulfato de sodio. El solvente fue eliminado bajo presión reducida para producir el título intermediario como sólido marrón oscuro (40 g de crudo), que fue utilizado sin purificación adicional. c. Preparación de 5-(R)-2-(2-(4-4-(2-amino-2-metil-propoxi)-fenilaminol-fenil)-etilamino)-1-hidroxi-etil-8-benciloxi-1 H-quinolin-2-ona El producto de la etapa anterior fue tratado con el trihidrofluorida de trietilamina (36 g) en (100 mL) 2-propanol(500 mL)/etanol a temperatura ambiente por 16 h. La mezcla fue concentrada bajo presión reducida a un tercio de su volumen original. Fue agregado (500 mL) de 1M hidróxido de sodio acuoso, seguido por (500 mL) de acetonitrilo y (500 mL) de acetato de isopropilo. La capa acuosa fue retirada y la fase orgánica lavada con
1:1 cloruro de sodio acuoso saturado: (400 mL) de agua entonces
(400 mL) de cloruro de sodio acuoso saturado. Los orgánicos fueron secados en sulfato de sodio y el solvente eliminado en vacío para producir (50 g de crudo) del título del intermediario como sólido marrón, que fue utilizado sin la purificación adicional. d. Síntesis de 5-(R)-2-(2-(4-[4-(2-amino-2-metil-propoxi)-fenilamino1-fenilamino)-fenil-etilamino)-1-hidroxi-et¡n-8-hidroxi-1 H-ouinolin-2-ona Fue agregado (10 g, 20% p/p en carbono, 50% p/p agua) de hidróxido de paladio al producto de la reacción anterior, seguido por
(500 mL) de etanol. La mezcla fue agitada vigorosamente bajo una atmósfera de gas de hidrógeno por 8 h. El catalizador fue filtrado y el filtrado concentrado bajo presión reducida para producir (40 g) del compuesto de título, que fueron purificados por la fase reversiva CLAR y aislada como su sal de trifluoroacetato por liofilización. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) &(ppm): 10.4 (s, 1H), 9.3 (br s, 1H), 8.7 (Br s, 1H), 8.15 (m, 2h), 7.8 (br s, 1H), 7.03 (d, 1H, J = 8.2), 6.76-7.01 (m, 10H), 6.42 (d, 1H, J = 9.6), 6.1 (br s, 1H), 5.33 (d, 1H, J = 9.1), 3.8 (s,2h), 2.7-3.1 (m, 6H), 1.21 (s, 6H); m/z: [M + H+] calculado para C29H34N4O4, 503.3; encontrado 503.5. Ejemplo 1 Cinamato de 5-[(R)-2-(2-{4-[4-(2-amino-2-metil-propoxi)-fenilamino]-fenil}-etilamino)-1-hidroxi-etil]-8-hidroxi-1 H-quitmolin-2-ona (hidrato no cuantificado) 5-[(R)-2-(2-{4-[4-(2-amino-2-metil-propoxi)-fenilamino]-fenil}-etilamino)-1-hidroxi-etil]-8-hidroxi-1 H-quinolin-2-ona (0.11 g) fue agitada en tetrahidrofurano acuoso (6:4 THF:H2O vol/vol, 1.0 mL). (0.03 g) de Ácido trans-cinámico en THF acuoso (6:4 THF:H2O vol/vol, 0.1 mL) fue compuesto, la mayoría ácido disuelto. Una porción de la mezcla acida fue agregada a la solución de base libre que fue sembrada con una suspensión de la sal en THF acuoso (6:4 THF:H2O vol/vol). La solución de la semilla había sido hecha por un método similar a esta cristalización. Ya que no resultó una mezcla gruesa, la mezcla acida trans cinámica restante y más suspensiones
de semilla fueron agregadas. Habiendo agitado a temperatura ambiente durante la noche, la suspensión fue filtrada. El sólido filtrado fue lavado con THF acuoso (2:1 THF:H2O vol/vol, 2 x 0.2 mL) y secado en vacío a 45°C durante la noche para dar el compuesto de título. Rendimiento (no cuenta para el contenido de agua) 63% th 400MHz RMN en d6-DMSO. TMS como referencia a 0 ppm. & (ppm): 1.20 (6H)s; 2.62 (2H) t J = 7.3Hz; 2.70-2.85 (4H)m; 3.72
(2H)s; 5.07(1H)m; 6.50 (1H) d J=15.9Hz; 6.50 (1H) d J=9.8 Hz; 6.85 (2H) d J=8.6 Hz; 6.87 (2H) d J = 9.1 Hz; 6.94 (1H) d J=8.1 Hz; 6.99
(2H) d J = 8.8 Hz; 7.00 (2H) d J = 8.3 Hz; 7.06 (1H) d J=8.1 Hz; 7.31-7.42 (4H)m; 7.57-7.61 (2H)m; 7.76 (1H)s; 8.18 (1H) d J = 10.0 Hz DSC: La muestra exhibe un endotérmico con un inicio de aproximadamente 60°C. Esto es seguido por un segundo endotérmico con un inicio de 106°C y una descomposición posterior. TGA: La muestra exhibe una pérdida de peso de 2.8% p/p de ambiente a aproximadamente 63°C. Esto es seguida por una segunda pérdida de peso de 5.4% p/p desde 63°C a aproximadamente 108°C. La posterior pérdida de peso es debido a la descomposición. Análisis XRPD del producto se muestra en la figura 1 Ejemplo 2 Cinamato de 5-[(R)-2-(2-{4-[4-(2-amino-2-metil-propoxi)-fenilamino]-fenilo}-etilamino)-1 -h id roxi -etil] -8-h id roxi -1H-quinolin-2-ona 4-metoxi (hidrato no cuantificado) 5-[(R)-2-(2-{4-[4-(2-amino-2-metil-propoxi)-fenilamino]-fenil}-
etilamino)-1-hidroxi-etil]-8-hidroxi-1 H-quinolin-2-ona (0.101 g) fue agitado en tetrahidrofurano (1:1 THF:H2O vol/vol, 1.2 mL). (0.036 g, de trans predominante) fue agregado a la mezcla. Una solución formada antes de que ocurriera la cristalización espontáneamente. La suspensión resultante fue agitada durante la noche a temperatura ambiente y entonces filtrada. El sólido filtrado fue lavado con tetrahidrofurano acuoso (1:1 THF:H2O vol/vol, 3 x 0.2 mL) y secado a 45°C en vacío durante la noche para dar el compuesto de título. Rendimiento (no cuenta para el contenido de agua) 69% th, 95% p/p 400MHz RMN en d6-DMSO. TMS como referencia en 0 ppm. &(ppm): 1.17 (6H)s; 2.61 (2H) t J=7.09Hz; 2.69-2.83 (4H)m; 3.69 (2H) s; 3.78 (3H) s; 5.05 (1H)m; 6.36 (1H) d J = 15.9 Hz; 6.49 (1H) d J = 10.0 Hz; 6.85 (2H) d J=8.1 Hz; 6.87 (2H) d J=7.8 Hz; 6.91-7.02 (7H)m; 7.06 (1H) d J = 8.1 Hz; 7.41 (1H) d J = 15.9 Hz; 7.56 (2H) d
J=8.6 Hz; 7.72 (1H) s; 8.18 (1H) d J = 10.0Hz. DSC: La muestra, muestra un evento endotérmico con un inicio de aproximadamente 112°C seguidos por la descomposición. TGA: La muestra exhibe una pérdida de peso de 5.7% p/p de ambiente a aproximadamente 125°C. Esto es seguido por una segunda pérdida de peso de 2.3% p/p desde 125°C a aproximadamente 170°C debido a la descomposición. Análisis XRPD del producto se muestra en la figura 2 Ejemplo 3 Di-(4-fenilcinamato) de 5-[(R)-2-(2-{4-[4-(2-amino-2-metil-
propoxi ) -fen i lami no)f eni l}-eti lami no)-1 -hid roxi -etil] -8-h id roxi-HH-quinolin-2-ona (hidrato no cuantificado) 5-[(R)-2-(2-{4-[4-(2-amino-2-metil-propoxi)-fenilamino]-fenil}-etilamino)-1-hidroxi-etil]-8-hidroxi-1 H-quinolin-2-ona (0.108g) fue agitada en tetrahidrofurano acuoso (1:1 THF:H2O, 1.2 mL). (0.049g) de ácido 4-Fenilcinámico fue agregado a la mezcla agitada a temperatura ambiente y la cristalización espontánea ocurrió. La mezcla fue agitada por más de 1 hora y entonces filtrada. El sólido filtrado fue lavado con tetrahidrofurano acuoso (1:1 THF:H2O, 2 x 0.2 mL). Habiendo sido dejada para asentar en condiciones ambiente por varias horas, el sólido mojado fue secado durante la noche a 60CC en vacío para dar el compuesto de título. Rendimiento (basada en entrada de base libre, no cuantificada por el contenido de agua) = 33%, 62% Rendimiento (basada en ácido, no cuantificado por el contenido de agua) = 66% th 400MHz RMN en d6-DMSO. TMS como referencia en Oppm. &(ppm): 1.23 (6H) s; 2.65 (2H) t J = 7.3 Hz; 2.75-2.88 (4H)m; 3.76 (2H) s; 5.10 (1H) m; 6.50 (1H) d J = 9.8 Hz; 6.56 (2H) d J = 15.9Hz; 6.86 (2H) d J = 8.6 Hz; 6.88 (2H) d J = 9.1 Hz; 6.96 (1H) d J=8.1 Hz;
6.99 (2H) d J = 8.8 Hz; 7.00 (2H) d J = 8.8 Hz; 7.07 (1H) d J = 8.1 Hz; 7.38 (2H) t J = 7.3 Hz; 7.45-7.49 (4H) m; 7.51 (2H) d J = 10.3 Hz; 7.67-7.77 (13H) m; 8.19 (1H) d J = 10.0Hz. DSC: La muestra, muestra un acontecimiento endotérmico con un inicio de aproximadamente 60°C. Esto es seguido por un segundo
endotérmico con un inicio de 145°C y de la descomposición posterior. Análisis XRPD del producto se muestra en la figura 3 Ejemplo 4 4-metil-cinamato de 5-[(R)-2-(2-{4-[4-(2-a ino-2-metil-propoxi)-fenilamino]-fenil}-etilamino)-1-hidroxi-etil]-8-hidrox?-1H-quinolin-2-ona Método 1 (0,21 g) 5-[(R)-2-(2-{4-[4-(2-amino-2-metil-propoxi)-fenilamino]-fenil}-etilamino)-1-hidroxi-etil]-8-hidroxi-1 H-quinolin-2-ona fueron disueltas en una mezcla del tetrahidrofurano (1.2 mL) y agua (1.2 mL). (0.07 g, trans predominante) ácido cinámico 4-metil fue agregado a la solución agitada a temperatura ambiente y disuelta. Después de aproximadamente 10 minutos, la cristalización ocurrió. La mezcla fue agitada durante la noche y filtrada. La torta fue lavada con tetrahidrofurano acuoso (1:1 THF: agura, 2 x 0.4 mL, 1 x 0.2 mL) para producir el compuesto de título que fue secado durante la noche bajo vacío a 45°C. 400MHz RMN en D6-DMSO. D5-DMSO como referencia en 2.5 ppm. & (ppm): 1.22 (6H) s; 2.30 (3H) s; 2.64 (2H) t J=6.6 Hz; 2.72-2.86 (4H) m; 3.74 (2H) s; 5.09 (1H) m; 6.43 (1H) d J = 15.9 Hz; 6.49 (1 H) d J = 10.0 Hz; 6.86 (4H) m; 6.93-7.03 (5H) m; 7.06 (1H) d J = 7.8 Hz; 7.17 (2H) d J = 7.8 Hz; 7.34 (1H) d J=15.9 Hz; 7.45 (2h) d J = 7.8 Hz; 7.75 (1H) s; 8.19 (1H) d J = 10.0 Hz
Rendimiento esperado 75%th, 100%p/p DSC: La muestra, muestra un acontecimiento endotérmico con un inicio de aproximadamente 106°C. Esto es seguido por la descomposición. TGA: La muestra exhibe una pérdida de peso de 6.1% p/p de ambiente a aproximadamente 120°C. Esto es seguido por una segunda pérdida de peso de 2.0% de p/p y descomposición. Patrón XRPD de este producto se muestra en la figura 4. Método 2 (17.77g) de 5-[(R)-2-(2-{4-[4-(2-amino-2-metil-propoxi)-fenilamino]-fenil}-etilamino)-1-hidroxi-etil]-8-hidroxi-1 H-quinolin-2-ona fue disuelto en una mezcla de (89 mL) tetrahidrofurano y (89 mL) agua. (6.02 g, trans predominante) ácido cinámico 4-metil fue pesado y en% fue agregado a la solución de base libre seguida por algunos cristales de semilla. La mezcla fue agitada y el ácido restante fue agregado en excedentes de porciones la siguiente 1 14 horas. Después de 4 horas más de agitación, la suspensión fue filtrada. La torta fue lavada con tetrahidrofurano acuoso (1:1 THF:agua, 36 mL) y entonces el tetrahidrofurano (2 x 18 mL) para producir el compuesto de título que fue secado durante la noche a 40-50°C bajo vacío. 400Mhz RMN en CD3OD. TMS como referencia 0 ppm. &(ppm): 1.39 (6H) s; 2.32 (3H) s; 2.79 (2H) t J = 7.2 Hz; 2.92-3.03 (4H) m; 3.87 (2H)s; 5.25 (1H) d de d J = 3.9 y 8.8 Hz; 6.44 (1H) d J = 15.9 Hz; 6.63 (1H) d J = 9.8Hz; 6.86-6.93 (4H) m; 6.96 (1H) d J = 8.3Hz; 6.99-7.05 (4H)m; 7.15 (2H) d J = 7.8 Hz; 7.19 (1H) d J = 8.3
Hz; 7.36 (1H) d J = 15.9 Hz; 7.38 (2H) d J=7.6 Hz; 8.34 (1H) d J = 9.8
Hz Rendimiento esperado: 67%th, 95% p/p DSC: La muestra, muestra un acontecimiento endotérmico con un inicio de aproximadamente 67°C. Esto es seguido por el segundo endotérmico con un inicio de aproximadamente 113°C y entonces de la descomposición. TGA: La muestra exhibe una pérdida de peso de 3.7% p/p de ambiente a aproximadamente 75°C. Esto es seguido por una segunda pérdida de peso 5.1% p/p de 75 a aproximadamente 125°C, una tercera pérdida de peso de 211% de p/p y descomposición. Patrón XRPD de este producto se muestra en la figura 5. Ejemplo 5 (a) Formación de hidrato 3.5 de sal de cinamato 4-metilo (33.7 g, 0.85 eq) de ácido cinámico 4-Metilo de base libre fue agregado a una solución de 5-(R)-2-(2-{4-[4-(2-amino-2-metil-propoxi)-fenilamino]-fenil}-etilamino)-1-hidroxi-etil]-8-hidroxi-1 H-quinolin-2-ona (que puede prepararse de acuerdo al método de Ex 6(d) en IMS acuoso. La mezcla fue sembrada pero la semilla disuelta. (3 x 50 mL, 3 x 0.34 vols) de agua fue agregada hasta que la sembradura dio una cristalización lenta. Después de 1.5 horas de agua adicional (50 mL, 0.34 vols) fue agregado y la mezcla fue agitada a temperatura ambiente durante la noche. Más agua (50 ml, 0.34 vols) fue agregada a la mezcla. Después de 4 horas la mezcla fue filtrada. La torta fue lavada con 15% de IMS acuoso vol/vol (3 x
150 mL, 3 x 1 vol), tomando la primera lavada para 'tierra seca' (ningún líquido visible en la torta) pero desalseando la torta significativamente después de las dos lavadas restantes. La torta fue secada en un horno al vacío a -100 mbar a 43°C por aproximadamente 24 horas para producir el compuesto de título (127 g), rendimiento 71%th, 88% p/p El XRPD del producto empata lo mostrado previamente en la figura 5. (b) Dihidrato de cinamato 4-Metilo (134.9 g) de cinamato 4-metilo hidrato 3.5, preparado por el método anterior, fue secado además en un horno de vacío 40°C con una bomba de vacío para reducir significativamente abajo de I00 mbar. La mayoría del sólido resultante (67.7 g) fue suspendido en 5% IMS acuoso vol/vol (500 mL, 7.4 vols) por 7 horas. La suspensión fue filtrada y la torta lavada con 5% IMS acuoso vol/vol (70 mL x 2, 2 x 1 vol). La torta fue secada en un horno al vacío (42°C, ~100 mbar) durante la noche para producir (61.8 g) el compuesto de título de título. Rendimiento de 3.5 de hidrato 90%th, 86% p/p XRPD del producto empatado mostrado previamente en la figura 4. Ejemplo 6 Síntesis alternativa de 5-(R)-2-(2-{4-[4-(2-amino-2-metil-propoxi)-fenilamino]-fenil}-etilamino)-1-hidroxi-etil]-8-hidroxi-1 H-quinolin-2-ona a. {1.1-dimetil-2-[(4-nitrofenil)oxi]etil}amina
Una solución de (488 g, 5.47 mol) de 2-amino-2-metil-1-propanol en tetrahidrofurano (1.46 L) fue agregado por 35 minutos a una solución de terc-butóxido de potasio (634 g, 5.65 mol) en tetrahidrofurano (2.95 L) en 2±3°C. La mezcla fue mantenida en esta temperatura por 55 minutos más antes de 4-fluoronitrobenzeno (551 mL, 3.90 mol) fue agregada por 1 hora 25 minutos manteniendo la temperatura bajo 10°C. La mezcla fue calentada a 20±3°C y agitada por 2 horas. (1.95 L) de agua y (1.95 L) de acetato de isopropilo fueron cargados a la mezcla que fue agitada, colocada y separada. La fase orgánica fue lavada otra vez con (1.95 L) de agua antes de que(1.95 L) de ácido clorhídrico 5M fuera cargado, manteniendo la temperatura abajo de 25°C. (1.95 L) de isooctano fue agregado y las capas separaron. (322 mL) de ácido clorhídrico 5M fue agregado a la fase acuosa que fue entonces reducida a aproximadamente 3.9 L por destilación de vacío, causando cristalización espontánea, y agitada a temperatura ambiente durante la noche. La filtración, lavado con agua (2 x 488 mL) y secando en vacío a aproximadamente 48°C produjeron (972.1 g, 72%). del título intermediario como un sólido blanco. b. {4-(2-amino-2-metilpropil)oxilfenil)amina diclorhidrato (752.5 g, 3.05 mol) de {1 ,1-dimetil-2-[(4-nitrofenil)oxi]etil}amina, 5% de Pd/C (Escat 160, 30.1 g, 53.6% p/p agua, 6.6 mmol Pd) y IMS (6.0 L) fueron agitados bajo hidrógeno a presión atmosférica hasta que lo exotérmico cesó. El catalizador fue filtrado a través de un filtro de celite CUNO que fue lavado con IMS (3.0 L). (300 mL) de ácido
clorhídrico concentrado fue agregado a la solución orgánica combinada por 45 minutos que daban lugar a una suspensión que fue agitada a temperatura ambiente durante la noche. La filtración, lavado de la torta con (2 x 1.12 L) de IMS y secado en vacío a 37°C produjeron (646 g, 84%th) el título intermediario como sólido rosado.
C 5-(R)-2-(2-{4-f4-(2-amino-2-metil-propoxi)-fenilamino1-fenil)-etilamino)-1-(terc-butil-dimetil-silaniloxi)-et¡n-8-bencilox¡-1 H-quinolin-2-ona (4.33 L) de 1,4-Dioxano fue agregado a una mezcla de (406.7 g, 1.61 mol) {4-[(2-amino-2-metilpropil}oxi]fenil}amina diclorhidrato
(865.4 g, 1.34 mol) 8-benciloxi-5-{(R)-2-[2-4-bromo-fenil)-etilamino-1-(terc-butil-silaniloxi)-etil}-1 H-quinolin-2-ona clorhidrato (900 g, 9.36 mol), de erct butóxido (9.4 g) de paladio bis(dibenzilideneacetona) y 15.58 g BINAP (rac-2,2'-bis(difenilfosfino)-1 ,1'-binaptil). La mezcla fue agitada y calentada a 87±3°C por 4 horas. La mezcla fue refrescada a temperatura ambiente, templada con (2.60 L) de agua y pasada a través de un filtro zetacarbono CUNO. (2.60 L) de acetato de metilo y solución de cloruro de sodio saturada (hecha con agua 1.66 L) fueron agregados, la solución mezclada y las fases precipitadas y separadas. La fase orgánica fue lavada con la solución de (623 g en 2.84 L de agua) de cloruro de sodio. (3.46 L) de metanol y (735.6 mL) de ácido clorhídrico concentrado, fueron agregados a la mezcla de reacción que fue calentada a 50±3°C por 17 horas antes de volver a 20±3°C. (3.46 L) de la solución de hidróxido de sodio (3.46 L) de acetato de metilo y salmuera saturada
(hecha con 1 .1 L de agua) fue agregada, la mezcla agitada y las capas separadas. La fase orgánica fue lavada con solución de cloruro de sodio (622.8 g en 2.84 L de agua) y evaporada en una espuma oscura en un evaporador giratorio (851 .2 g , rendimiento crudo 107%th, 98% p/p). La espuma fue vuelta a disolver en (1 .2 L) metanol. Una porción de la solución (1069 g) que contenía 500 g del material crudo fue inyectada en una columna en un sistema instantáneo biotage 150 y enjuagada isocraticalmente (99 partes de metanol, 1 parte de amoníaco 2M en metanol). El producto que contiene fracciones fue agrupado por pureza, fracciones limpias y aquellos con impurezas de bajo nivel fueron combinados y evaporados para dar el compuesto de título como 2 espumas amarillas (masa combinada 305.6 g, 0.51 mol, rendimiento de 8-benci loxi-5-{(R) -2-[2-(4-b romo-fe ni l)-eti lam ino- 1 -(terc-butil-dimetil-silaniloxi)-etil}-1 H-quinolin-2-ona clorhidrato,
65%th) d. Síntesis de 5-(R)-2-(2-(4-4-(2-amino-2-metil-propoxi)-fenilaminol-fenil)-etilamino)-1 -hidroxi-etill-8-hidroxi-1 H-quinolin-2-ona (145 g 0.24 mol) de 5-[(R)-2-(2-{4-[4-(2-amino-2-metil-propoxi)-fenilamino]-fenil}-etilamino)-1 -(terc-butil-dimetil-silaniloxi)-etil]-8-benciloxi-1 H-quinolin-2-ona, hecho y purificado de una manera similar a la descrita en la sección c arriba, hidróxido de paladio en carbono (29g, 20 p/p Pd en base seca, húmeda) y (1 .075 L) de I MS fueron agitados bajo hidrógeno a presión atmosférica y calentados con un baño de agua a 45°C por un total de 1 1 .5 horas (por 2 días) .
El catalizador fue filtrado en un lecho de celite que fue doble (300 mL y 150 mL) de IMS y entonces con IMS acuoso (2:1 IMS: agua, 150 mL). Esta solución de base libre de alcohol acuosa podría entonces utilizarse directamente para formación de sal, o secada y evaporada para dar un sólido que se puede volver a disolver para la formación de sal.